TWI239243B

TWI239243B - Pharmaceutical compositions for treating or preventing ocular neovascular diseases

Info

Publication number: TWI239243B
Application number: TW088113778A
Authority: TW
Inventors: Romulus Kimbro Brazzell; Jeanette Marjorie Wood; Peter Anthony Campochiaro; Frances Elizabeth Kane
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1998-08-13
Filing date: 1999-08-12
Publication date: 2005-09-11
Also published as: JP2002522475A; DE69936994T2; WO2000009098A2; DK1105136T3; EP1105136A2; AU5733099A; ATE371453T1; WO2000009098A3; PT1105136E; CY1107780T1; EP1105136B1; AR028802A1; ES2291041T3; DE69936994D1

Description

1239243 A7 B7 五、發明說明（I ) 發明領域本發明是有關於新的酞嗪（phthalazine)衍生物，用於製造藥學製劑以用於眼部新生血管性疾病之治療及預防。本發明更有關於酞嗪衍生物用於這類的眼部疾病之治療及預防。發明背景兩種過程牽涉到動物器官及組織之血管系統的發育，即從分化的內皮細胞或在發育的胚胎中血管母細胞之血管的重新形成（血管發生），以及從存在的血管中新的微血管之生長（血管生成）。最近的發現顯示，調控在胚胎的發育和正常的生長期間血管系統及其成份的生長及分化之網狀組織的中心，以及許多病理學上的異常現象和疾病，存在有生成因子，已知爲“血管內皮生長因子” （=VEGF)之血管，以及其細胞的受體。相較之下，VEGF受體是穿透膜的受體酪氨酸激酶。它們是以具有7個類似免疫球蛋白之功能部位的細胞外功能部位，和一細胞內的酪氨酸激酶功能部位爲特徵。已知有各種不同種類的VEGF受體，例如，VEGFR-1，VEGFR-2，以及 VEGFR_3 〇發明摘1 目前已發現，說明如下之式（I)的酞嗪衍生物具有有 3 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） . (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 一裝--------訂---------線| 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 A7 B7 五、發明說明（> ) 利的藥理學性質，並且抑制眼部新生血管形成，包括視網膜的新生血管形成，以及脈絡膜的新生血管形成。發明詳述本發明是有關於式（I)化合物的用途，

其中 η是0到2 ; R是Η或低院基； X是亞胺，卩惡（〇xa)，或噻（thia); Y是芳基；以及 Z是未取代的或取代的吡啶基，或定義的式（I)化合物之N-氧化物，其中一個或多個N原子攜帶一個氧原子；其用於製造一種用於眼部新生血管性疾病的治療之組成物，包括局部缺血的視網膜病，視網膜的新生血管形成，以及脈絡膜的新生血管形成。本發明更有關於一種治療眼部新生血管性疾病的方法，並且特別地，在個體中，特別是在人類，脈絡膜的及視網膜的新生血管形成，該方法包括將如以上所定義的式（I )之化合物給藥於需要如此治療的該個體。 4 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) |裝--------訂---------線| 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 A7 B7 五、發明說明（$ ) 如以上及以下所指出的，所稱的化合物是特別有助益於局部缺血的視網膜病，視網膜的新生血管形成，以及脈絡膜的新生血管形成之治療。較佳的是視網膜的新生血管形成，以及脈絡膜的新生血管形成之治療。更佳的是視網膜的新生血管形成之治療。更佳的也是脈絡膜的新生血管形成之治療。已發現上述式（I)之化合物一般比先前技藝的化合物有5-100倍更高的活性，先前技藝的化合物是有關於失調的血管生成之抑制。特別地，本發明之化合物一般比先前技藝的化合物有10-50倍更高的活性。這個測量是分別關於作用的效力及/或持續時間。較佳的是關於效力。在此之前及之後所使用的一般名詞，除非有其他不同的指示，較佳地具有在本案揭露的上下文內之下列的意義〇字首“低的”代表具有至多達7並包括最大値7的基，特別地是至多達4並包括最大値4個碳原子的基，所談到的基是直鏈的，或具有單一或多個分支的支鏈。當複數形式被使用於化合物、鹽類、及其類似物時，這也意味著單一的化合物、鹽類、及其類似物。任何不對稱的碳原子（例如，在式（ϊ)之化合物[或其Ν-氧化物]中，其中n=1，並且r是低烷基），可以(R)_ ，⑻-，或(R，S)-構形存在，較佳地是以⑻_，或⑻_構形存在。在雙鍵或環上的取代基，可以順式_(=Z-)或反式(=E_) 形式存在。化合物可因此以異構物的混合物或以純異構物 5 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 X 297公髮） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -裝--------訂---------線| 1239243 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 B7 五、發明說明（介）存在，較佳地是以純鏡相物的非鏡相立體異構物存在標記η較佳地是0或1，特別地是〇。低院基特別地是C1-C4-院基’例如，正_丁其〜丁基，第三-丁基，正-丙基，異丙基，或特別地一或也是乙基。在較佳具體實施例中，芳基是具有6到U個碳芳香族分子部份，特別地是苯基，荼基基（fluorenyl )，或菲基（phenanthrenyl )，以上5 〜勿的分子部份是未取代的，或是以一個或多個，較佳地^義多達3個，特別地是1個或2個取代基所取代，取代別地係選擇自氨基，單或雙取代的氨基，鹵素，烧基，特代的烷基，羥基，醚化或酯化的羥基，硝基，氰基t竣3 ，酯化的羧基，烷醯基，氨基甲醯，N-單-或N，N-雙的氨基甲醯，胖基（amidino)，胍基（guanidino)，1荒其 (mercapto)，磺基（sulfo)，苯基硫基，苯基-低院基硫基，烷基苯基硫基，苯基亞硫醯基，苯基-低烷基亞硫酿基，烷基苯基亞硫醯基，苯基硫醯基，苯基-低烷基硫醯基，以及烷基苯基硫醯基，或（如另外的或除了以上的取代基之外的）選擇自低烯基，例如，乙烯基’苯基，低烷基硫基，例如，甲基硫基，低烷醯基，例如，乙醯基，低烷基锍基，例如，甲基锍基（-S-CH3)，國素-低烷基锍基，例如，三氟甲基锍基（-S-CF3)，低烷基硫醯基，鹵素-低烷基硫酿基，例如，特別地是三氟甲院硫釀基’一經基砸（_ B(OH) 2)，雜環基，以及在環的鄰接碳原子上連結的低亞本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -----------— --------訂---------線^- rtt先閱讀背面之>i音？事項再填寫本頁) 1239243 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（<) 烴二氧基，例如，甲撐二氧基；芳基較佳地是苯基，其是未取代的或獨地以一個或兩個取代基取代，取代基係選擇自包括下列的族群：氨基；低垸醯基胺基，特別地是乙醯胺基；鹵素，特別地是氟，氯，或溴；低烷基，特別地是甲基，或也是乙基或丙基；鹵素-低烷基，特別地是三氟甲基，經基，低院氧基，特別地是甲氧基，或也是乙氧基，本基-低院氧基，特別地是节氧基；以及氰基，或（如另外的或除了先則的取代基之外的）Cs-C!2院氧基，特別地是正-癸氧基，氨基甲醯，低烷基氨基甲醯，例如，正-甲基-或正_第三-丁基氨基甲醯，低烷醯基，例如，乙醯基，本氧基，鹵素-低院氧基，例如三氟甲氧基或，-四氟乙氧基，低院氧基幾基，例如，乙氧基幾基，低垸基疏基，例如，甲基锍基，鹵素-低烷基锍基，例如，三氟甲基锍基，羥基-低烷基，例如，羥甲基或1-羥甲基，低烷基硫醯基，例如，甲烷硫醯基，鹵素-低烷基硫醯基，例如，三氟甲院硫醯基’苯基硫醯基，二羥基硼（-Β(〇Η)2)，2_甲基嘴陡-4-基，卩惡卩坐·5_基，2·甲基-1，3-二噁茂烷（di〇x〇lane) 、2_基，1H-卩比唑基，1-甲基-卩比唑_3·基，以及連結到兩個鄰接碳原子的低亞烴二氧基，例如甲撐二氧基。昆在此之則及之後提及的分子部份或取代基爲“另外的或除了先前的分子部份或取代基之外，，時，這些分子部份或取代基以及那些先前基團的分子部份或取代基，被一起視爲一群取代基，其個別的分子部份可由該群取代基中選擇，或特別地被視爲分開的基團。這種表示並不代表在 ------------裝--------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 7

五、發明說明（經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 此表示之後的其中之一個基，可藉由結合而加到許多先前的基團中。即使這種“另外的或除此之外的”表示，不再被提到，這也適用如此處所定義的分子部份或取代基，在以下所定義的較佳式（1)之化合物中。單或雙取代的氨基，特別地是以一個或兩個分子部份所取代的氨基，此分子部份互相獨立地選擇自低院基，例如，甲基；羥基-低烷基，例如，2-羥乙基；苯基_低院基 ;低烷醯基，例如，乙醯基；苯甲醯基；取代的苯甲釀基，其中苯基分子部份是未取代的，或特別地以一個或多個，較佳地以一個或兩個取代基所取代，取代基係選擇自硝基或氨基，或也選擇自鹵素，氨基，N-低烷基胺基，n，n_ 二-低院基胺，羥基，氰基，竣基，低院氧基幾基，低院酿基，及氨基甲醯；以及苯基-低烷氧羰基，其中，苯基分子部份是未取代的’或特別地以一個或多個，較佳地以一個或兩個取代基所取代，取代基係選擇自硝基或氨基，或也選擇自鹵素，氨基，N-低烷基胺，N，N-二-低烷基胺基，經基，氰基，竣基，低院氧基簾基，低院醯基，及氨基甲酿 •，並且較佳地是N-低烷基胺，例如，N—甲胺，羥基_低院基胺，例如，2-經基乙胺，苯基-低院基胺，例如，〒胺基 ’ N，N-_^低丨兀基fee ’ 本基-低院基-N-低院基胺，n，N-二 -低烷基苯基胺，低烷醯基胺，例如，乙醯胺，或選擇自包括苯甲醯胺，及苯基-低烷氧基羰基胺之族群中的取代基，其中，在每個實例中，苯基分子部份是未取代的，或特別地以硝基或氨基，或也是以鹵素，氨基，N-低烷基胺， 8 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規袼（21〇 x 297公董） ---------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 1239243 A7 B7 五、發明說明（f| ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) N，N-二-低院基胺，經基，氰基，竣基，低院氧基羯基，低烷醯基或氨基甲醯所取代，或如_另外的或除了先前的分子部份的基團之外，以氨基羯基氨基取代。鹵素較佳地是氟，氯，溴，或碘，吏佳地是氟，氯，或溴。在較佳具體實施例中，烷基具有至多達最大値12個碳原子，並且較佳地是低烷基，更佳地是，甲基，乙基，正_ 丙基，異丙基，或第三-丁基。取代的烷基是如最後定義的烷基，特別地是低烷基，較佳地是甲基；其中可存在一個或多個，特別地至多達3 個的取代基，主要地是選擇自鹵素的族群，特別地是氟，並且也選擇自氨基，N-低烷基胺基，N，N-二-低烷基胺基， N-低烷醯基胺基，羥基，氰基，羧基，低烷氧基羰基，以及苯基-低烷氧基羰基的族群。特別較佳地是三氟甲基。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製酉迷化的經基特別地是C8-C2〇院氧基，例如，正-癸氧基 ’低烷氧基，例如，甲氧基，乙氧基，異丙氧基，或正-戊氧基，苯基-低烷氧基，例如，苄氧基或苯氧基，或如一另外的或除了先前的C8-C2〇烷氧基，例如，正-癸氧基，鹵素 -低烷氧基，例如，三氟甲氧基或1，1，2,2-四氟乙氧基之外〇酯化的羥基特別地是低烷醯氧基，苯醯氧基，低烷氧基羰氧基，例如，第三-丁氧基羰氧基，或苯基_低烷氧基羰氧基，例如，苄氧基羰氧基。酯化的羧基特別地是低烷氧基羰基，例如，第三-丁氧 9 本紙張尺®適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐) 一 A7 1239243 _____B7 __ 五、發明說明（彡）基羰基或乙氧基羰基，苯基-低烷氧基羰基，或苯氧基羰基 Ο 烷醯基主要地是烷基羰基，特別地是低烷醯基，例如，乙醯基。 N-單-或N，N-雙取代的氨基甲醯特別地，在末端的氮原子上，以一個或兩個取代基，低烷基，苯基-低烷基，或羥基-低烷基取代。太兀基本基硫基^特別地是低院基本基硫基。烷基苯基亞硫醯基，特別地是低烷基苯基亞硫醯基。烷基苯基硫醯基，特別地是低烷基苯基硫醯基。未取代的吡啶基，較佳地是3-或4-吡啶基。特別較佳地是4-吡啶基。取代的吡啶基，較佳地是3_或4_吡啶基，其以一個或兩個取代基取代’特別地是選擇自低院基’較佳地是甲基，乙基；鹵素，較佳地是氯基，氟基，溴基；低烷基鹵化物，較佳地是三氟甲基；低烷氧基，較佳地是甲氧基，乙氧基；羥基；氰基；氨基，N-低烷基胺基，N，N-：l-低院基胺基。特別較佳地是以甲基，氯基，氟基，Η氟甲基或甲氧基取代的4-吡啶基。雜環基，特別地是一具有1或2個選擇自包括氮，氧，及硫的族群之雜原子的五或六-員雜環基的系統，其可以是未飽和的，或全部或部份飽和的，並且是未取代的，特別地是以低烷基所取代，例如甲基；較佳地是選擇自S 甲基嘧啶-4-基，噁唑基，2_甲基-I，3-二噁茂院_2 5 10 E張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公1 ) ^------_ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂---------線赢經濟部智慧財產局員工消費合作社印製經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 Δ7 Α7 Β7 五、發明說明（/ ) 1H-吡唑-3-基，1-甲基-吡唑-3_基的分子部份。苯基形式的芳基，其以連結到兩個鄰接碳原子的低亞烴二氧基所取代，例如甲撐二氧基，較佳地是3,4-甲撐二氧基苯基。式（I)之化合物的N-氧化物，較佳地是一 N-氧化物，其中酞嗪環的氮或在毗啶環中的氮，攜帶一氧原子，或數個該氮原子攜帶一氧原子。鹽類，特別地是式（I)之化合物（或其N-氧化物）的藥學上可接受的鹽類。當一鹼基及一酸基出現在相同的分子中時，式（Ο之化合物（或其N-氧化物）也可形成內部的鹽類。有鑑於自由形式的新穎化合物及其鹽類的形式的化合物之間密切的關係，包括那些可使用作爲中間產物的鹽類，例如，在新穎化合物之純化或鑑定中，任何在此之前及之後所涉及的自由形式之化合物’也應被適當地及權宜地了解爲其所對應的鹽類。試驗之背景視網膜是一具有非常高代謝活性的組織’其從視網膜及脈絡膜的循環中被氧合，其每一個循環是起源自眼動脈的分支。脈絡膜的循環是衍生自長的及短的後睫狀動脈，其穿過鞏膜，並形成供應脈絡膜血管層之連續較小的分支，其爲一個以視網膜色素表皮（RPE)與視網膜分開之血管融合細胞層。視網膜的光受體層不具有血管，並且藉由 11 本^張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 1239243 ____B7____ 五、發明說明（β) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 從脈絡膜血管層的擴散而接受氧氣。視網膜的循環是衍生自中央視網膜動脈，其經由視神經進入眼睛’分叉以形成視網膜的內側小動脈，其沿著視網膜的表面流動’使穿透的分支通過視網膜內部的三分之二，終結於表面的及深處的視網膜微血管床。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製視網膜的循環首先在視神經發展，並延伸至視網膜的周圍，是一種發生在發育晚期的過程，並且在人類是在足月前很快地完成。在許多的物種，包括大白鼠及老鼠，視網膜血管的發育是在出生後完成。雖然，並不是徹底地淸楚是否這個過程代表生理的血管生成，進入無血管組織之血管的生長，或血管發生，血管從預先存在的前驅細胞中的發育，但卻明顯地是沿著空間的梯度，從後面到前面而發生。在無血管的周圍視網膜中的組織缺氧，導致血管內皮生長因子（VEGF)的向上調控（增多）。氧氣過多抑制視網膜血管的發育，並且事實上因爲血管內皮細胞的細胞脫噬作用（apoptosis)，造成它們退化。此退化是伴隨著 VEGF的向下調控（減少），並且藉由外源性VEGF的給藥而預防。這些數據顯示VEGF在視網膜血管的發育上，扮演重要的角色。具有氧氣過多誘導的視網膜血管退化之新生動物，被放置在房間空氣中，形成嚴重的視網膜組織缺氧，VEGF 顯著的向上調控，以及視網膜的新生血管形成。這個情況塑造了在人類中早產兒視網膜病（ROP)的模型，並且也與在成年人中一些疾病的過程共享特徵，其中視網膜血管 12 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） 1239243 A7 B7 五、發明說明（丨ί) 變得受損及封閉，導致視網膜的局部缺血。這些疾病集合性地所指爲局部缺血的視網膜病，並且包括分支視網膜血管閉塞以及增生性糖尿病的視網膜病，這是已開發國家中 60歲以下人口嚴重視覺喪失的最常見原因。具有局部缺rfn的視網膜病的老鼠之藥物治療局部缺血的視網膜病是在C57/BL6J老鼠中，藉由下列的方法產生： 7天大的老鼠與其母鼠，被放置在一密閉不透氣的保育器內，並曝露在75±3%的氧氣氣氛中5天。保育器的溫度維持在23±2°C，並且每隔8小時以氧氣分析儀測量氧氣。5天之後，老鼠從保育器中移出，放置在房間空氣中，並開始藥物治療。藥物根據其溶解度特性被稀釋在磷酸鹽-緩衝的鹽水（PBS)或1%的二甲基亞楓中，接著以 PBS稀釋至其最終濃度。賦型劑（控制組）或包含不同濃度藥物的賦型劑（體積=50微升（//L)在新生鼠中，以及 100微升在成鼠中），藉由灌食法放置到胃中。治療5天之後，在P17時犧牲老鼠迅速地移除眼睛，並冷凍在包埋化合物之最適的切割溫度（OCT : Miles Diagnostics， Elkhart，IN)，或固定在10%的磷酸鹽-緩衝的福馬林，並包埋在石蠟中。成年的C57/BL6J老鼠也藉由灌食法，以藥物或賦型劑治療，並且5天之後，它們被犧牲，並且它們的眼睛被處理，用以作爲冷凍或石蠟切片。 13 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) ---------訂---------線表經濟部智慧財產局員工消費合作社印製經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 A7 B7 五、發明說明（ Μ膣新牛rfn管形成的定量從藥物處理組及控制組老鼠眼部的冷凍切片（10微米 (//m))，以生物素標記的griffonia simplicifolia外源凝集素B4 (載體實驗室，Burlingame，加州）組織化學地染色，其選擇性地結合到內皮細胞。玻片置於甲醇/過氧化氫中於VC培養30分鐘，以0.05莫耳濃度的TBS淸洗，並在 10%正常豬血淸中培養30分鐘。玻片以〇_〇5莫耳濃度的三羥甲基氨基甲烷緩衝的鹽水（酸鹼値7.6 (TBS))潤溼，並且以生物素標記的外源凝集素，在室溫培養2小時。在以0.05莫耳濃度的TBS潤溼之後，玻片以與過氧化酶偶聯的抗生物素蛋白（載體實驗室），在室溫培養45分鐘。以0.05莫耳濃度的TBS淸洗10分鐘之後，玻片以二胺基聯苯胺培養，以得到一棕色的反應產物。一些玻片以蘇木素對比染色，並且所有的玻片以Cytoseal固定。爲了實施定量的評估，經由每個眼睛之完整的範圍被切割10微米的系列切片。完整的眼睛藉由大約50-60微米間距的染色切片而取樣，每個眼睛提供13個切片用於分析。外源凝集素染色的切片以Axioskop顯微鏡（Zeiss， Thornwood，紐約州）檢驗，並且影像藉由使用3 CCD彩色電視攝影機（IK-TU40A，東芝，東京，日本）及畫面捕捉器而數位化。影像-Pro Plus軟體（Media Cybernetics， Silver Spring，馬里蘭州）被使用以描繪在視網膜表面上的外源凝集素染色的細胞，並且測量其面積。從每一個眼睛的13組測量的平均値，被使用作爲單一次的實驗値。 14 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -----------------—訂·--------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1239243 a7 B7 五、發明說明（I》）在視網膜血管發育期間老鼠的藥物治療一胎新生的C57/BL6J老鼠區分成治療組及控制組，其每天以皮下注射，分別接受1〇毫克/公斤的藥物或賦型劑。在P7或P10時，老鼠以乙醚麻醉，並以含有50毫克/ 毫升營光素標記的葡聚糖（2xl06平均分子量，Sigma，St. Louis，密蘇里州）之1毫升的磷酸鹽-緩衝的鹽水灌流。移除眼睛，並固定在10%的磷酸鹽-緩衝的福馬林中1小時。移除鞏膜及水晶體，並且小心地從洗眼杯中切開完整的視網膜，放射狀地從視網膜邊緣到眼球中緯線，以所有 4個象限切割，並且在Aquamount中以光受體面向上而扁平固定。扁平固定物藉由螢光顯微鏡檢驗，並且影像藉由使用3 CCD彩色電視攝影機（IK-TU40A，東芝，東京，曰本）及畫面捕捉器而數位化。影像-Pro Plus軟體（ Media Cybernetics，Silver Spring，馬里蘭）被使用於測量從視神經中心，到每一個象限中發育的視網膜血管最前面之距離，並且平均値被使用作爲單一次的實驗値。具有脈絡膜新生血管形成之老鼠的藥物治療脈絡膜新生血管形成是藉由先前說明的技術之修飾而產生。簡言之，4到5週大的雄性C57BL/6J老鼠，以酮胺 (ketamine)氫氯化物（100毫克/公斤體重）麻醉，並且瞳孔以1%的托品醯胺（tropicamide)使擴張。氪雷射光凝固的3次燒灼（100微米的斑點大小，〇.1秒持續期間， 15 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) ---------訂---------線一經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 A7 B7 五、發明說明（νγ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 150毫瓦特）係藉由使用Coherent Model 920光凝固儀的裂縫燈（slit lamp)傳遞系統，以及一種手握著蓋玻片，如隱形眼鏡一般，而傳遞到每一個視網膜上。燒灼在視網膜後極的9，12，及3點鐘位置被實施。在雷射時泡狀物的產生，其顯示布魯赫氏膜（Bruch’s membrane)的破壞 ’是獲得CNV (脈絡膜新生血管形成）的重要因素，所以只有在3次燒灼都產生泡狀物的老鼠，才包括於本硏究中。隨機地分配10隻老鼠以單獨的賦型劑治療，以及1〇隻老鼠以口腔灌食，接受含有120微莫耳/公斤/天的試驗藥物之一的賦型劑。14天之後，老鼠以過量的戊巴比妥鈉（ pentobarbital sodium)殺死，並且迅速地移除它們的眼睛，並冷凍在包埋化合物之最適的切割溫度（0CT)。脈絡膜新牛rfn管形成的定量經濟部智慧財產局員工消費合作社印製冷凍的系列切片（1〇微米），經由每個燒灼之完整的範圍被切割，並以生物素標記的griffonia simplicifolia外源凝集素B4 (載體實驗室，Burlingame，加州）組織化學地染色，其選擇性地結合到內皮細胞。玻片在甲醇/過氧化氫中，以4°C培養30分鐘，以〇·〇5莫耳濃度的TBS淸洗，並在10%正常豬血淸中培養30分鐘。玻片以0·05莫耳濃度的TBS潤溼，並且以生物素標記的外源凝集素’在37 16 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 A7 B7 五、發明說明（d ) °C培養2小時。以0.05莫耳濃度的TBS潤溼之後，玻片以鏈黴菌抗生物素蛋白（Streptavidin)-磷酸酶（Kirkegaard and Perry實驗室，Cabin John，馬里蘭州），在室溫培養 30分鐘。以〇·〇5莫耳濃度的三羥甲基氨基甲烷緩衝液，酸鹼値7.6，淸洗10分鐘之後，玻片在組織標記紅（ Histomark Red) ( Kirkegaard and Perry)中顯影，以得到一紅色的反應產物，並以 Cytoseal ( Stephens Scientific， Riverdale，新澤西州）固定。一些玻片以對比藍（Contrast Blue ) ( Kirkegaard and Perry )對比染色。爲了實施定量的評估，外源凝集素染色的切片以 Axioskop顯微鏡（Zeiss，Thornwood，紐約）檢驗，並且影像藉由使用3 CCD彩色電視攝影機（IK-TU40A，東芝，東京，日本）及畫面捕捉器而數位化。影像-Pro Plus軟體（Media Cybernetics，Silver Spring，馬里蘭州）被使用於描繪並測量在視網膜下空間的外源凝集素染色的血管之面積。對每一個損傷，測量所有切片上出現的損傷部份的面積，並且加在一起以得到總和的面積測量値。數値被平均以得到每隻老鼠的一次實驗値。實施對不同的變異性之兩樣品的t-試驗，以比較治療組與控制組老鼠之間的對數平均總和面積。 17 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

CGP 79787D

CGP 57Ί48 1239243 A7 B7

五、發明說明（\ U 化學結構的定義（CGP 79787D，CGP 57 148B及CGP 53 716 )

CGP 53716 〇、相對選擇性的酪氨酸激酶抑制劑的鑑定表1顯示使用標準的酪氨酸激酶分析，不同的藥物對於抑制聚(麩氨酸酪氨酸）（poly(GhiTyr))被一些酪氨酸激酶受體的激酶功能部位之穀胱甘肽硫移轉酶（GST)-融合蛋白質的磷酸化之能力。CGP 79787D對於被人類VEGF 受體1和2，以及PDGF受體的激酶功能部位之磷酸化， 18 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 1239243 A7 B7 五、發明說明（vl) 是一個好的抑制劑；它對於作爲老鼠VEGF受體2的抑制劑是比對於人類受體的抑制劑之效果大約低1〇倍，但仍然在一個合理的濃度抑制（半數抑制濃度IC5〇= 290奈莫耳濃度(nM)) 〇CGP 79787D對於被所有其他酪氨酸激酶及所測試的絲氨酸/蘇氨酸激酶的激酶功能部位之磷酸化，是一個差的抑制劑（半數抑制濃度IC5Q大於1微莫耳濃度 M)，表 1 )。CGP 57 148B 及 CGP 53 716 對於被 PDGF 受體，BCR ABL，以及v-ABL的激酶功能部位之磷酸化，是有效的抑制劑，並且對於其他RTKs，包括VEGF受體，提供很少的或沒有抑制活性。表1 激酶抑制的數據半數抑制濃度IC5Q ( //M) 酪氨酸激醃 CGP 79787D CGP 53716 CGP 57148 KDR 0.13 >1 一 Flt-1 0.34 >1 Flk-1 0.49 >1 一 PDGF-Ra 0.2 6 0.83 c-Kit 0.413 - 麵 FGF-1 >50 - • Tie-2 >1 >1 嚇 C-Met >1 >10 一 EGF-R 34 >100 >100 C-Scr >10 >100 >100 V-Abl >10 0.4 0.038 19 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 X 297公釐） (請先閱讀背面之注咅P事項再填寫本頁) ΐ I L I I Li I n n — — — — — — — — — — — - — — — III— « — I — — — — — — * 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 1239243 B7___ 五、發明說明（θ) 活體內的活性需要藥物進入細胞，並因此作用劑在細胞的自體磷酸化分析中被測試，使用轉染一些RTK基因之一的中國倉鼠卵巢細胞。CGP 79787D抑制VEGF受體， PDGF受體，及c-Kit的自體磷酸化作用，但卻是c-erbB2 或胰島素受體之差的抑制劑。CGP 57 148B及CGP 53 716 是PDGF受體之有效的抑制劑，但卻是其他測試受體，包括VEGF受體之差的抑制劑。因此，CGP 79787D抑制屬於相同家族（第ΠΙ級）的生長因子受體之酪氨酸激酶的活性，但是CGP 57 148B及CGP 53 716是更有選擇性的，並且只阻斷PDGF受體。 CGP 79787D抑制在具有居部缺[fn的視網病之老鼠中，視網膜的新生血管形成（結里之說明，包括比較）非局部缺血的P17老鼠之griffonia simplicifolia外源凝集素染色的視網膜，在外表的及深處的微血管床，顯示正常的血管伴隨一些連接的血管。具有局部缺血的視網膜病之P17老鼠，顯示有顯著增加的染色之內皮細胞面積，遍及視網膜並伴隨在視網膜上的一大團細胞，而卻不見於非局部缺血的視網膜。具有局部缺血的視網膜病之P17老鼠，以25毫克/公斤，一天兩次的CGP 79787D治療，在視網膜中染色的內皮細胞，具有引人注目的減少，其顯著地少於以賦型劑治療的老鼠，並且也少於非局部缺血的 P17老鼠。高放大倍數顯示，在視網膜表面上，並沒有可鑑別的內皮細胞，顯示新生血管形成之完全的抑制。在內 20 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 A7 B7 五、發明說明（J) 部的核層及外部叢狀層中，染色的內皮細胞也是明顯的缺乏，其中深處的微血管床是位於正常的位置。具有局部缺血的視網膜病之P17老鼠，以2.5毫克/公斤，一天兩次的 CGP 79787D治療，顯示在視網膜中染色的內皮細胞之減少，其顯著地少於以賦型劑治療的控制組。在內部的核層中，內皮的染色也有一些減少。具有局部缺血的視網膜病之P17老鼠，以0.25毫克/公斤治療，顯示在視網膜中，整體內皮的染色之減少，其並不具有統計上的意義，並且在內部核層的染色中，並沒有可鑑別的減少。在比較於所使用之CGP 79787D的最高劑量的劑量上，2個選擇的 PDGF RTK 抑制劑，CGP 57 148B 及 CGP 53 716，在具有局部缺血視網膜病的老鼠之視網膜中，沒有造成內皮的染色之顯著的減少。染料木因（genistein) (4’，5,7-三羥基異黃酮）是一個相對弱的，非專一性的RTKs的抑制劑。在比較於CGP 79787D的最高劑量的劑量上，其在具有局部缺血視網膜病的老鼠之視網膜中，沒有造成內皮的染色之顯著的減少。 CGP 79787D抑制視網膜的_管發育新生鼠以注射10毫克/公斤的CGP 79787D或單獨的賦型劑來治療，開始於P0，及P7或P10時，它們以螢光素標記的葡聚糖灌流，並且製備視網膜完整的固定物。在 P7時，以賦型劑治療的老鼠之視網膜血管，幾乎已到達視網膜的周圍邊緣，但以CGP 79787D治療的老鼠，它們只 21 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------ΦΜ.--------訂---------線· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 1239243 ____B7__ 五、發明說明（〆〇) 延伸到周圍的一半。在P10時，表面的微血管床是完整的 ’並延伸至視網膜所有的周圍邊緣，並且深處的微血管床是部份地發育。但是，以CGP 79787D治療的老鼠，表面的微血管床尙未到達視網膜的邊緣。這些差異是高度顯著的，並證明CGP 79787D抑制視網膜的血管發育，以及病理學上的視網膜新生血管形成。 CGP 79787D對成鼠的視網膜血管不具有可鑑別的效果成鼠以50毫克/公斤/天的CGP 79787D來治療，此劑量完全地抑制在氧氣誘導的局部缺血視網膜病之視網膜新生血管形成，並也抑制深處的微血管床之發育。以CGP 79787D治療的老鼠與以賦型劑治療的老鼠比較，在視網膜內皮的染色之全部面積上，或視網膜血管的外觀上，並沒有差異。這暗示CGP 79787D對於成熟血管的內皮細胞是無毒的。 CGP 79787D抑制脈絡膜的新牛血管形成雷射後的兩週，在兩組老鼠中的所有損傷，顯示在布魯赫氏膜（Bruch’s membrane)中的裂痕’伴隨與重疊的視網膜大略相等的損害。所有單獨以賦型劑治療的老鼠，在每個雷射誘導的布魯赫氏膜之破裂處，顯示大面積的脈絡膜新生血管形成。沿著新血管的邊緣，有RPE細胞的增殖。以外源凝集素染色的視網膜血管，在重疊的視網膜中被發現。相對地，所有藉由灌食法而給予50毫克/公斤/天 22 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（>/) 的CGP 797S7D之老鼠，在每個雷射誘導的布魯赫氏膜之破裂處，幾乎沒有任何脈絡膜的新生血管形成。在大部分的例子，遍及完整的燒灼中，沒有可鑑別的外源凝集素染色之新生血管組織，但是，一些燒灼包含有外源凝集素染色的組織之薄圓盤區域。RPE細胞有溫和的增殖。除了在治療的老鼠的眼睛中，脈絡膜新生血管形成的顯著減少之外，重疊的視網膜血管顯示正常。其最佳地見於無對比染色的切片中。每個損傷之外源凝集素染色的總和面積之定量，顯示與單獨以賦型劑治療的老鼠之損傷（〇.〇713812±0·0066723 平方公釐）做比較，以CGP 79787D治療的老鼠’有引人注目的降低（0.011243 土 0.0014829平方公釐）。此差異是高度統計上地顯著的（Ρ=〇·〇〇5;η=5)。以上的數據證明，在氧氣誘導的局部缺血視網膜病之老鼠模式中，藉由以CGP 79787D 口服治療，要達成視網膜新生血管形成的完全抑制是可能的。根據酪氨酸激酶選擇性數據，可預期的是，此化合物將至少是在哺乳動物中，特別是人類，是像在老鼠中一樣的有效。以上的數據證明，VEGF訊息的阻礙，並不會損害成熟的視網膜或脈絡膜的血管。以上的數據也證明，VEGF訊息的阻礙會抑制視網膜血管的發育。以上的數據證明，VEGF訊息的阻礙會抑制脈絡膜的新生血管形成。 23 玉紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 x 297公爱Γ --------会！丨訂---------線·—i (請先閱讀背面之注音3事項再填寫本頁) A7 1239243 B7____ 五、發明說明（#) CGP 79787D是特別地有助益於增生性糖尿病的視網膜病之治療及預防，以及在成年人中，其他視網膜新生血管形成的原因。這是一大群的病患，因爲在已開發國家的年輕病患中，糖尿病的視網膜病是失明最常見的原因。 CGP 79787D也是有助益於由於與年齢有關之滲出的斑點變性（degeneration)及其他疾病，所造成的脈絡膜新生血管形成之治療及預防。這是一非常大群的病患，因爲在超過60歲的美國人中，與年齡有關之斑點變性是法定失明（legal blindness)最常見的原因。CGP 79787D是有助益於眼部新生血管性疾病的治療及預防。較佳化今牛勿在此之後所提及的較佳式（I)化合物之族群，從在此之則所提及的一般定義中的取代基之定義，可合理地被使用，例如，以較特殊的定義，或特別地以較佳特徵之定義來取代較一般的定義。較佳式（I)之化合物，其中 n是〇或1， R是Η或低烷基，特別地是甲基，亞胺基，噁（〇xa)，或噻（thia)， Y是苯基，其是未取代的或是以一個或兩個取代基所，取代基是互相獨立地來自包括下列的族群：氨基；亦兀_胺’特別地是乙酿胺；鹵素，特別地是氟，氯， B溴，低烷基，特別地是甲基，或也是乙基或丙基；鹵素- --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 24 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 A7 B7 五、發明說明（>弓）低烷基’特別地是三氟甲基；羥基；低烷氧基，特別地是甲氧基，或也是乙氧基；苯基-低烷氧基，特別地是苄氧基 :以及氰基，或（如另外的或除了先前的取代基之外的）低烴烯基，例如，乙烯基c8-c12烷氧基，特別地是正-癸氧基，低烷氧基羰基，例如，第三-丁氧基羰基，氨基甲醯，低烷基氨基甲醯，例如，N-甲基-或N-第三-丁基氨基甲醯，低烷醯基，例如，乙醯基，苯氧基，鹵素-低烷氧基，例如三氟甲氧基或1，1，2,2，-四氟乙氧基，低烷氧基羰基，例如，乙氧基羰基，低烷基锍基，例如，甲基硫基，鹵素-低烷基锍基，例如，三氟甲基毓基，羥基低烷基，例如，羥甲基，低烷基硫醯基，例如，甲烷硫醯基，鹵素-低烷基硫醯基，例如，三氟甲烷硫醯基，苯基硫醯基，二羥基硼（-B(OH) 2)，2_甲基嘧啶-4-基，噁唑-5-基，2-甲基-1，3-二噁茂烷基，1H-吡唑_3_基，1-甲基-吡唑-3-基，以及連結到兩個鄰接碳原子的低亞烴二氧基，例如甲二氧基，或也是吡啶基，特別地是3-毗啶基；特別地是苯基，2-，3-或4-氨基苯基，2-，3-或4-乙醯胺苯基，2-，3-或4-氟苯基，2-，3-或 4-氯苯基，2-，3-或 4-溴苯基，2,3-，2,4-，2,5_或 3,4-二氯苯基，氯氟苯基，例如，3-氯-4-氟苯基，或也是 4-氯-2-氣苯胺基’ 2- ’ 3_或4-甲基苯基’ 2- ’ 3-或4-乙基苯基，2-，3-或4-丙基苯基，甲基氟苯基，例如，3-氟-4-甲基苯基，2-，3-或4-三氟甲基苯基，2-，3-或4-羥基苯基，2-，3-或4-甲氧基苯基，2-，3-或4-乙氧基苯基，甲氧基氯苯基，例如，3-氯-4-甲氧基簾基，2-，3-或4-节氧 25 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線# (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

1239243 "^----— 五、發明說明（>lt) 基本基’ 2-’ 3-或‘氰基苯基，或也是2_，3_或乒毗啶基 ;以及 Z是3-或‘吡啶基，其是未取代的或是以一個或兩個取代基所取代’取代基是互相獨立地來自包括下列的族群 •鹵素，彳寸別地是氟，氯，或溴；低烷基，特別地是甲基 ’或另外是乙基或丙基；鹵素-低烷基，特別地是三氟甲基，羥基；低烷氧基，特別地是甲氧基，或另外是乙氧基。特別的較佳式（D化合物， η是0或1， R是Η， X是亞胺基， γ是苯基，其是未取代的，或是以一個或兩個取代基所取代，取代基是互相獨立地來自包括下列的族群：氨基 ;低烷醯基胺，特別地是乙醯胺；鹵素，特別地是氟，氯，或溴；低烷基，特別地是甲基；鹵素-低烷棊，特別地是一氟甲基；經基；低院氧基，特別地是甲氣基，本基-低院氧基，特別地是苄氧基；以及氰基；特別地是苯基，2_，或4-氨基苯基，2-，3-或4_乙醯胺苯基，2-，或4_氟苯基，2-，3-或4-氯苯基，2-，3_或4-溴苯棊，2>，2,4· ’ 2,5-或3,4-二氯苯基，氯氟苯基，例如，3-氯氟苯基，2·，3_或4_甲基苯基，2_，3_或4_三氟申基苯基，2_，3_ 或‘羥基苯基，2_，3_或4-甲氧基羰基，甲氣基氯苯基，例如，3_氯甲氧基羰基，1，3_或4_苄氧棊苯基，或2_ ’ 3_或4-氰基苯基；以及 26 本紙張尺度適iri國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐 --------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 、發明說明（〆） Z是4_毗啶基，其是未取代的或是以一取代基所 ’取代基是來自鹵素’特別地是氟，氯，或溴：低产其特別地是甲基，或也是乙基或丙基；鹵素-低烷基地是三氟甲基；羥基；低烷氧基，特別地是甲氧基所組成族群。 ’ 、也是特別的較佳式（I)化合物， η是0或1， R是Η， Χ是亞胺基， Υ是苯基，其是未取代的或是以一個或兩個取代基所取代，取代基是互相獨立地來自包括下列的族群：鹵素，特別地是氟，氯，或溴；低烷基，特別地是甲基；_素_低烷基，特別地是三氟甲基；羥基；低烷氧基，特別地是甲氧基；氰基；以及、Ζ疋4-卩ttn疋基，其是未取代的，或是以一取代基所取代取代基是來自鹵素’特別地是氟，或氯；低院基，特別地疋甲基；鹵素_低院基，特別地是三氟甲基；趨基；低院氧基’特別地是甲氧基所組成的族群。 $ 也是特別的較佳式（I)化合物， η是〇， χ是亞胺基， I是苯基，其是未取代的或是以一選擇自氟，氯；甲基；三氟甲基；羥基；氰基及甲氧基所組成的族群中之取代基所取代；以及 27

減張尺度顧巾—⑽χ 2gfi：iT ---------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 a7 B7 五、發明說明（乃） H3·氨基苯胺基)-4-(心吡啶基甲基)酞嗪； ι-(3,4·二氯苯胺基)-4-(4_D比啶基甲基嫩η秦； 1_(4_溴苯胺基)-4-(4屬啶基甲基贩嗪； 1-0-氯甲氧基苯胺基)-4_(4_吡啶基甲基)酞嗪； 1-(4氰基苯胺基)-4-(4_吡啶基甲基)酞嗪； 1_(4·甲基苯胺基)-4-(4_吡啶基甲基)肽嗪；卜(3_氯_4_氟苯胺基)-4_(4.啶基甲基)狀嗪；以及 1-(3_甲基苯胺基)-4-(心毗啶基甲基)肽嗪本發明之化合物，可藉由就其本身而言已知的方法來製備，例如，說明在以下可行的實施例之方法。藥學上的製備，方法，以及使里本發明也關於醫藥組成物，其包括作爲活性的成份之式（I)之化合物（或其N-氧化物），並且可特別地用於一開始所提及的疾病之治療。組成物用於腸的給藥，例如，鼻的，頰的，直腸的，局部眼部的，或，特別地，口服給藥，以及用於非腸胃道的給藥，例如，靜脈內的，肌肉內的，玻璃狀體內的，結膜下的，或皮下的給藥，對於溫血動物，特別是人類，是特別地較佳。組成物包括單獨的活性成份，或較佳地，與藥學上可接受的載體在一起。活性成份的劑量是根據要治療的疾病，以及根據物種，其年齢，體重，和個體的狀況，個體的藥物動力學的數據，及給藥的模式而定。醫藥組成物包括大約1%到大約95%的活性成份，包 29 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線Φ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 1239243 Δ7 Α7 Β7 五、發明說明（一）括在較佳具體實施例中之單一劑量給藥的形式，從大約20 %到大約9〇%的活性成份，以及包括在較佳具體實施例中之非單一劑量類型的形式，從大約5%到大約20%的活性成份。單位劑量形式是，例如，包膜或未包膜的錠劑，安瓿，小瓶，栓劑，或膠囊。更進一步的劑量形式是，例如，軟膏，乳劑，糊劑，泡沬，酊劑，唇棒，滴劑，噴霧劑，分散劑等。實施例是含有從大約0.05克到大約1.0克的活性成份之膠囊。本發明之醫藥組成物，是以就其本身而言已知的方式而製備，例如，藉由習知的混合，粒化，包膜，溶解，或冷凍乾燥的方法。較佳的是使用活性成份的溶液，並也是懸浮液或分散液，特別地是等張的水溶液，分散液或懸浮液，其例如在冷凍乾燥的組成物的實例中，包括單獨的活性成份，或與載體在一起，載體例如甘露糖醇，可在使用前被組成。醫藥組成物可被滅菌，及/或可包括賦型劑，例如，防腐劑，穩定劑，溼潤劑，及/或乳化劑，溶解劑，用以調整滲透壓的鹽類，及/或緩衝液，並且以就其本身而言已知的方式而製備，例如，藉由習知的溶解及冷凍乾燥的方法。該溶液或懸浮液可包括增加黏度的作用劑，典型地是羧基甲基纖維素鈉，羧基甲基纖維素，葡聚糖，聚乙烯吡咯烷酮，或動物明膠，或也是溶解劑，例如，Tween 80 [聚氧化乙烯 (20)山梨聚糖單油酸鹽；ICI Americans，Inc，USA的商標] 〇 30 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------MW--------訂---------線# (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1239243 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（乂）適合的載體特別地是塡充劑，例如糖類，例如，乳糖，蔗糖，甘露糖醇，山梨糖醇，纖維素製劑，及/或磷酸銘，例如，磷酸三銘或磷酸氫與，並也是黏結劑，例如澱粉類，例如，玉米，小麥，米或馬鈴薯澱粉，甲基纖維素，羥基丙基甲基纖維素，羧基甲基纖維素鈉，及/或聚乙烯|]比咯烷酮，及/或，需要的話，分解劑，例如以上所提及的澱粉，也是羧基甲基澱粉，交聯的聚乙烯吡咯烷酮，藻朊酸 (alginic acid)或其鹽類，例如，藻朊酸鈉。額外的賦型劑特別地是流動調節劑及潤滑劑，例如，矽酸，滑石，硬脂酸或其鹽類，例如，硬脂酸鎂或硬脂酸鈣，及/或聚乙二醇，或其衍生物。用於口服給藥的醫藥組成物，也包括由動物明膠組成的硬膠囊，及由動物明膠和一塑化劑，例如甘油或山梨糖醇所組成的軟的、密封的膠囊。硬膠囊可包含顆粒形式的活性成份，例如，與塡充劑，例如玉米澱粉，黏結劑，及/ 或滑動劑，例如滑石或硬脂酸鎂，以及可視需要地穩定劑混合的混合物。在軟膠囊中，活性成份較佳地是溶解或懸浮在適合的液體賦型劑中，例如，脂肪油類，石蠟油，或液體的聚乙二醇，或乙二醇或丙二醇的脂肪酸酯，其例如，聚氧化乙烯山梨聚糖脂肪酸酯類型的穩定劑及淸潔劑，也可被添加。本發明也關於用於在此之前所提及的病理症狀之一的治療之步驟或方法，特別是眼部新生血管性疾病，包括局部缺血的視網膜病，視網膜的新生血管形成，以及脈絡膜 31 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） -------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1239243 A7 B7 五、發明說明u°) 的新生血管形成。式（I)之化合物（或其N-氧化物）可被預防性地或治療性地以其本身或特別地以醫藥組成物的形式，較佳地以對該疾病有效的量，對一需要這樣治療的溫血動物，例如人類來給藥。在一個具有體重約70公斤的個體的實例中，每日的給藥劑量是從大約0」克到大約5 克，較佳地從大約0.5克到大約2克的本發明之化合物。本發明特別地也關於式（I)之化合物（或其N-氧化物），或其藥學上可接受的鹽類之使用，特別地是，該較佳的式（I)之化合物，或其藥學上可接受的鹽類，以其本身，或以伴隨至少一種藥學上可接受的載體之藥學上賦型的形式，用於在此之前所提及的一種或多種疾病之治療的，並也是預防的處理，特別是眼部新生血管性疾病，包括局部缺血的視網膜病，視網膜的新生血管形成，以及脈絡膜的新生血管形成。本發明特別地也關於式（I)之化合物（或其N-氧化物），或其藥學上可接受的鹽類之使用，特別地是，該較佳的式（I)之化合物，或其藥學上可接受的鹽類，以其本身，或以伴隨至少一種藥學上可接受的載體之藥學上賦型的形式，用於在此之前所提及的一種或多種疾病之治療的，並也是預防的處理，特別是眼部新生血管性疾病’包括局部缺血的視網膜病，視網膜的新生血管形成，以及脈絡膜的新生血管形成。本發明特別地也關於式（I)之化合物（或其N-氧化物），或其藥學上可接受的鹽類之使用，特別地是’該較 32 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) ---- 訂---------線· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1239243 A7 B7 五、發明說明（》l) 佳的式（I)之化合物’或其藥學上可接受的鹽類，用於藥學上賦型的製備’用於在此之前所提及的一種或多種疾病之治療的，並也是預防的處理，特別是眼部新生血管性疾病，包括局部缺血的視網膜病，視網膜的新生血管形成，以及脈絡膜的新生血管形成。將用於每一實例中的藥學（藥）之較佳的劑量、組成物、及製劑係說明如上。下列的實施例是用於舉例說明本發明，而非用以限制本發明之範疇。溫度是以攝氏（c)測量。除非有其他不同的指示，反應是在室溫下發生。所使用的簡短形式及縮寫，具有下列的定義： DMSO 二甲基亞楓 ESI-MS 電噴霧離子化， Ether 二乙醚 h 小時 HV 高真空 RE 旋轉式蒸發儀 RT 室溫 m.p 熔點 THF 四氫呋喃眚施例1 ·· H4-氯苯胺某V4-(4-Dt:h啶某甲某、脸廋^二氤氯化物_ I5·22克（59·52笔莫耳）的1-氯_4_(4_|]比卩定基甲基)缺 33 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1239243 A7 B7 五、發明說明㈠>) η秦（製備參見德國公開文件（如士#%舲垆）第1 061 788 號[1959年7月23日出版])，7.73克（ 60.59毫莫耳）的4-氯苯胺，和200毫升的1-丁醇的混合物，在迴流下加熱2小時。當混合物緩慢地冷卻到5°C時所得到的結晶物，接著被濾除，並以1-丁醇及二乙醚淸洗。過濾的殘留物溶解在大約2〇0毫升熱的甲醇，此溶液以0.75克的活性碳處理，並藉由Hyflo Super Cel過濾，並且濾液的酸鹼値以 7毫升的3 N甲醇的鹽酸調整到大約2.5。濾液蒸發至大約原始體積的一半，並且加入二乙醚直到出現輕微的混濁；冷卻，接著導致結晶體的沈澱。結晶物被濾除，以甲醇/二乙醚（2 : 1 )的混合物及二乙醚淸洗，在高真空下，以 110°C乾燥8小時，並且在房間大氣內，以20°C平衡72小時。以此方式，獲得含水量8.6%的標題化合物；熔點大於 270 °C ； !H NMR (DMS0-d6 ) 1 1.05-12.20 ( br ) ，9.18- 9.23 (m，1H) ，8.88 (d，2H) ，8.35-8.40 ( m，1H)， 8.18-8.29 (m，2H) ，8.02 (d，2H) ，7.73 (d，2H) ，7.61 (d，2H) ，5.02 ( s，2H) ; ESI-MS : (M+H)+=347。實施例2 : 1-(4-氯苯胺基)-4-(4-Di：hD定基甲基)社_氫氯化物 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂---------線· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

•HCI 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1239243 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（β) 0.972克（3·8毫莫耳）的1·氯_4_(4_吡啶基甲基)駄嗪，0_656克（4毫莫耳）的4-氯苯胺氫氯化物（Research Organics, Inc·，Cleveland，俄亥俄，美國），和 20 毫升的乙醇的混合物’在迴流下加熱2小時。反應混合物在冰浴中冷卻，過濾，並且結晶物以少量的乙醇及二乙醚淸洗。在高真空下，以11〇Ό乾燥8小時，並以150°C乾燥10小時之後，在HC1熱移除後’獲得標題化合物，如HC1的熱移除的結果；熔點大於 270°C;1HNMR(DMSO·d6)9_80-11.40 (br) ，8.89-8.94 (m，1H) ’ 8.67 (d，2H) ，8.25-8_30 (m，1H) ’ 8·06-8·17 (m，2H) ’ 7.87 ( d，2H)，7.69 (d, 2H) ，7.49 (d，2H) ，4·81 (s，2H) ； ESI-MS ： (M+H)+=347。

實施例3 : 1J4-氯苯胺某M-(4-Dhh啶基甲某)li唪氤氲化物 1.28克（5毫莫耳）的1-氯_4_(4_吡啶基甲基)肽嗪， 0.67克（5.25毫莫耳）的4-氯苯胺，和15毫升的1-丁醇的混合物，在氮氣下攪拌，以l〇〇°C加熱0.5小時。混合物接著冷卻至室溫，過濾，並濾液以1-丁醇及二乙醚淸洗。對於純化，結晶物溶解在40毫升熱的甲醇，此溶液以活性碳處理，藉由Hyflo Super Cel過濾，並且蒸發至大約其原始體積的一半，導致結晶沈澱的形成。在冷卻至VC之後，過濾，過濾的殘留物以二乙醚淸洗，並且在高真空下，以130°C乾燥8小時，獲得標題化合物；熔點大於270°C ; JH NMR (DMSO-d6) 9.80-1 1.40 (br)，8·89-8·94 ( m，1H 35 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線Φ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1239243 A7 五發明說明（>中> )’ 8_67 (d，2H)，8.25-8.30 ( m，1H)，8.06-8.17 ( m 2H)，7.87 (d，2H)，7.69 (d，2H)，7.49 (d，2H)， 4.81 ( s，2H) ; ESI-MS : (M+H)+=347。亶施例4」J：L4-氯苯胺基)-4-(4-Df;h啶某甲某唪 14.19克（〇」莫耳）的五氧化二磷，13·77克（(U奠耳）的三乙基胺氫氯化物，和12.76克（0.1莫耳）的4_ 氯苯胺的混合物，在氮氣下以200°C加熱及攪拌，直到形成一均勻的熔化物（大約2〇分鐘）。5.93克（ 0.025奠耳 )的4-(4_吡啶基甲基)-1(2Η)-肽嗪酮（製備參見德國公開文件（jw/egesc/zrz/i)第 1 061 788 號[1959 年 7 月 23 臼出版])加入到此熔化物，並且反應混合物在200°C攪拌3 小時。在反應混合物已冷卻至大約100°C之後，加入200 毫升的水。持續攪拌直到溫度到達大約30°C，接著連續地加入20毫升的濃氨水（30%氫氧化銨水溶液），及900毫升的氯仿。當兩相的混合物一形成，有機相就被分離，在無水流酸鈉上乾燥，過濾，並且濾液在RE上蒸發至大約 50毫升的體積，其接著加入1〇〇毫升的醋酸，並且混合物在冰浴中冷卻。濾除得到的結晶物，並以醋酸及二乙醚淸洗。在從甲醇中再結晶，及在高真空下，以120°C乾燥8 小時之後，獲得標題化合物；熔點194-195°C ; ESI_MS : (M+H)+=347 ° 36 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐）閱讀背面之注

I 寫本頁 I I 訂線

Claims

1239243 蓮 C8 D8 六、申請專利範圍 ;三氟甲基；羥基；氰基及甲氧基所組成之族群中之取代基所取代；以及 z是4-毗啶基，其是未取代的或經一選自氟’或氯；甲基；三氟甲基；羥基；及甲氧基所組成之族群中之取代基所取代。 3.如申請專利範圍第1項之醫藥組成物，其中 η是0， X是亞胺基， .γ是苯基，其係未取代的或經一個選自氟；氯；甲基，甲氧基，氰基及三氟甲基所組成之族群中之取代基所取代；以及 ζ是4-吡啶基，其是未取代的或經一選自氟，或氯及甲基所組成之族群中之取代基所取代。 4·如申請專利範圍第1項之醫藥組成物，其中該化合物是1-(4_氯苯胺基)-心(4-吡啶基甲基)肽嗪以及其藥學上可接受的鹽類。 5.如申請專利範圍第1項之醫藥組成物，其中該眼部新生血管性疾病係爲由於與年齡有關之滲出性斑點變性所致之脈絡膜的新生血管形成。 6·如申請專利範圍第1項之醫藥組成物，其中該眼部新生血管性疾病係爲由於增生性糖尿病的視網膜病及局部缺血的視網膜病所致之視網膜的新生血管形成。 2 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格(210 χ 297公釐) ------------------------0^.............丨丨訂——……------線· (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 B7 1239243 五、發明說明（4 Z是4-毗啶基，其是未取代的，或是以一選擇自氟，或氯；甲基；三氟甲基；羥基；及甲氧基所組成的族群中之取代基所取代。也是特別的較佳式（I)化合物， η是0， X是亞胺基， γ是苯基，其是未取代的，或是以一選擇自氟，氯；甲基；甲氧基；氰基及三氟甲基所組成的族群中之取代基所取代；以及 ζ是4-毗啶基，其是未取代的或是以一選擇自氟，或氯；及甲基所組成的族群中之取代基所取代。主要的較佳化合物，係選擇自下列所組成的族群： 1-(4_甲基苯胺基)-4-(4_吡啶基甲基)酞嗪； 1-(3-氯苯胺基)-4-(4•毗啶基甲基)肽嗪； 1-苯胺基_4_(4-毗啶基甲基)肽嗪； 1·卞胺基比陡基甲基)狀卩秦； 1-(4-甲氧基苯胺基)-4-(4-吡啶基甲基)肽嗪； 1-(3-苄氧基苯胺基)-4-(4-毗啶基甲基)肽嗪； 1-(3-甲氧基苯胺基)-4-(4-吡啶基甲基)肽嗪； 1-(2-甲氧基苯胺基)-4-(4-吡啶基甲基)酞嗪； 1-(4-三氟甲基苯胺基)-4-(4-吡啶基甲基)酞嗪； 1-(4-氟苯胺基)-4-(4-吡啶基甲基)酞嗪； 1-(3-羥基苯胺基)-4-(4-毗啶基甲基)酞嗪； 1-(4-羥基苯胺基)-4-(4-吡啶基甲基)酞嗪； 28 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) «.