TW539552B

TW539552B - Skin immunofunctional regulator

Info

Publication number: TW539552B
Application number: TW089120873A
Authority: TW
Inventors: Junichi Hosoi; Toru Tsuchiya
Original assignee: Shiseido Co Ltd
Priority date: 1999-10-08
Filing date: 2000-10-06
Publication date: 2003-07-01
Also published as: JP2003206237A; CN1378460A; EP1224944A1; KR100818139B1; WO2001026686A1; US20050287232A1; EP1224944A4; KR20020050230A; CN100384474C

Description

539552 A7 B7 五、發明說明（域領術技丄一一口而體具 ο 域領術技的學科慮皮及料粧化於屬為明發本劑節 3¾ 之響影部外自來於對膚皮護保於用於關為明。術發法枝本方景，及背心胞種細各膜成粘造覺體嗅身被及為臟子心分類發人揮於的對味油香精 C 其響及影物的植學香理芳生知及已學 mi 1 理条經神覺嗅和球嗅rd19 過na， ο 6 透 e 8 L 2 且 ί , 並方51 ，下2 容床2: 包視卩所和1. 質条 i 白緣Ob 蛋邊Ur 覺至Ne 感逹 · 的傳ev 上號卩毛訊t, 纖將In a

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1# 頁 I W I 訂線量此類有效量可根據受驗體之年齡、免疫狀態、香料之

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製可結使 \ 及的及，和 / 法動法且短£方變方更縮價有驗 C 眠 g 評量試定睡S之適的決述 k 應效最逑家上 ί 反有令後專令敏而照由，«過等參為時觸法為望應接 -方般期反 — 之 8 與一，敏if物-投但又過 2 動、，。觸型期定定接模時限決療述與法家治E後投無專或 I 用、故由防ΜΦ使量，，預 V 考與性等於CN參投能果用或可本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 539552 A7 B7 五、發明說明（其結果。請先閱讀背之注意事項再本發明之調節劑亦可含有香料製劑所通常使用的載體、稀釋劑或其他活性成分進行製劑化（或製品化）。其型態除了香水、古龍水、室内芳香劑等之香味製品外，只要可經氣道性地於體内吸收或投與即可，可為乳液、乳霜、肥皂、牙膏、氣溶膠製品等之化粧料、其他香料所一般使用之型態。更且，亦可為吸入藥等之恃定醫藥品型態。例如，於預防及治療皮膚接觸過敏症之製劑中，待定揮發性物質之配合量若為可由吸入而充分取得抑制接觸過敏症之量即可。雖根據使用型態及藥劑（香料）而異，但一般為配合0 . 0 1重量％以上。訂以上，雖主要考慮於人類使用並且説明其劑型等，但本發明之調節劑亦包含於人類以外之哺乳動物，例如，牛、豬、綿羊、兔、鼠等之應用，且於其應用上可視需要將上述劑型等予以若干變更。線衆根據以上之具體例，更具體説明本發明，並且同時意圖示出本發明所奏效之fF用效果的指標，但本發明並不意圖被限定於此些例。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製試驗例1 :香料對於接觸過敏反應等所造成之影響 (實驗動物）使用C 5 7 B L / 6母鼠（7〜9週齡）。動物為於2 1〜2 5 °C之溫度且維持於相對濕度4 0〜7 0 %之室内，於1籠（2 2 5 X 338Χ140ΙΒΙΠ)中各飼養5隻。以籠内設置直徑10公分金屬網所覆蓋之玻璃皿中放入吸收香料之濾紙，進行令動物 -9 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 539552 Α7 Β7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（) 吸入香料（尚，對照組為使用未吸收香料之濾紙）。尚，本動物實驗為根據日本學術審議會實驗動物操作基準 (National Research Council Guide L i n e s ) 〇 1 1 掊觸渦敏反應第1日，將鼠除毛背部塗佈2，4，6 -三硝基氯苯（T N C B ) (3 %丙酮溶液5 0微升）做為抗原，令鼠致敏。5日後（實驗第6日）將前述抗原之1 %丙酬溶液5微升於動物右耳的兩側分別塗佈，惹起接觸過敏反應。接觸過敏（以下，稱為C Η )反應為在第7日以微測計（M i c r 〇 m e t e r> )測定左耳和右耳的腫脹厚度，並行根據兩者測定值之差，進行評 1貝。於調查致敏時香料吸入之效果時，為將放入吸收上逑香料之濾紙之玻璃皿，於第0日至第2日設置於籠子内。於調查免疫惹起時香料吸入之效果時，為將前述玻璃皿於第5至第7日設置於籠子内。於調查香料直接塗佈皮慮之效果時，將0.1% Citralva或lyral/lilial或稀釋劑（丙酮+ 5 0 %玉米油）各5 0微升，於致敏6小時前塗佈前逑抗原之部位進行塗佈。長期效果為在第0日至第2曰應用每日1 %香料或稀釋劑5Q微升進行試驗。結果： (1)對於TNCB誘導或惹起CH反應時將鼠曝露於Citralva 2曰之結果示於第1圖。若根據第1圖，則可知CH反應之惹起經由C i t r> a 1 v a吸入而被抑制至對照的約5 0 %為止（A ) 。可知C Η反應之誘導亦被有意義地抑制至約2 0 % ( B )。 -1 0- 請先閱讀背 © 之注意事項再訂線

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 539552 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（9 ) 此些結果顯示嗅覺的剌激乃調節皮膚免疫反應。 (2 )調查關於香料對於C Η反應惹起效果之結果示於第2圖。此圖為比較顯示C i t r> a 1 ν a (縮短上逑睡眠時間之香料）與放入其他種類香料（L y r a 1 / 1 i 1 i a 1 )之效果。任何香料雖均抑制C H反應，但可知C i t r a 1 v a為更有意義的強力抑制。又，亦可知C H反應的抑制為受到香料種類所左右。尚，以上之實驗結果為將1群5隻鼠的測定結果，依據 t撿定予以統計處理之結果。 (3 )香料局部塗佈之效果示於第3圖。由此圖可知， C i t r a 1 v a和L y r a 1 / 1 i 1 i a 1任一者均不對於C Η反應造成影響。 1 - 2 _格罕十ffi細_的染色表皮蘭格罕士氏細胞之染色為依據公知方法。若簡要說明，則為於3 . 8 %硫代異氰酸銨水溶液中，3 7 °C培養 20分鐘，將鼠耳之表皮由真皮中分離採集。將表皮薄片使用丙酮予以固定，並於鼠融合瘤M5/114.15.2(American Tissue type Collection Rockville, M D , USA)之培養上清液中培養，令抗I-A TgA分泌，其次與螢光異硫氡酸酯（FITC)(Sigma，USA)標幟之抗鼠IgG抗體結合。將對於I - A抗原呈陽性之細胞使用共焦點雷射掃描顯微鏡 (MRC 600，Bio Rad，USA)予以觀察解析。試料為由一群 5隻之鼠中收集。將3個區域的各試料予以盲撿解析。結果：於Citralva曝露後採集各試料，並以Ι-A抗原染色，以 -1 1 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 539552 A7 B7_ 10 五、發明說明（）共焦點雷射掃描顯微鏡觀察，解析結果為示於表1中（表中，括號内之數值為標準偏差（SD))。表I LC 1之數目 Ι-A之強度每細胞之面積2 樹狀突起之數目對照 151·4(17·4)η 氺 96.7(4.5) 259·8(57·8)-| * 4.96(0.67) Citralva 119·8(15·0)」 89.9(2.9) 172.0(78.3)」 4.40(0.92) 1 )每1 n in 2之蘭格罕士氏細胞數 2 ) in 2 LC1之數目 Ι-A之強度每細胞之面積2 樹狀突起之數目對照 Citralva Lyral/lilial 141.0(17.2)π * 111.2(11.8)= * 127。4(8.8)」 91.7(4.6) 84.9(3.1) 88.0(2.6) 249.8(33.0)-| * 198.0(28.8)^ 氺 238·3 (6.4)」 2.71(0.15) 2.56(0.12) 2.78(0.16) ——！#-------1T--------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1)每Irani2之蘭格罕士氏細胞數 2 ) μ m 2 * P < 0 . 0 5 由上述表中可知，於Citralva中曝露後，LC的數目為有意義地減少。一 1 2 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 539552 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7_ 11 五、發明說明（）可知各I - A陽性細胞之面積亦經由曝露於C i 11* a 1 v a而有意義地減低，若比較香料之效果，則可知C i t r a 1 v a為比 L y r a 1 / 1 i 1 i a 1顯示更強的效果（表I I )。此些結果意指嗅覺的剌激為對於表皮蘭格罕士氏細胞造成影響。試驗例2 :香料對於壓力負荷所造成之皮慮免疫反應之抑制效果使用 C57 BL/6母鼠（7〜9週齡）[Charles River Japan 所購入〕。動物為於2 1〜2 5 °C之溫度且維持於相對濕度 4 0〜7 0之室内，於1籠（2 2 5 X 3 3 8 X 1 4 0 n m )中各飼養5隻。以籠内設置直徑1 〇公分金屬網所覆蓋之玻璃皿中放入吸收香料之濾紙，進行令動物吸入香料（尚，對照組為使用未吸收香料之濾紙）。將此些動物馴服後，以柔軟細孔全網令其瘋狂。尚，本動物實驗為根據日本學術審議會實驗動物操作基準（National Research Council Guide L i n e s )並且取得社内動物實驗委員會承認。 2-〗榕_渦敏砭應於鼠左耳的内外兩表面塗佈2，4，6 -三硝基氯苯（T N C B ) (塗佈3 %丙酮溶液1 G微升）令鼠致敏。5日後於鼠右耳的内外兩表面塗佈T N C B ( 1 %丙_溶液5微升）惹起C Η反應後，於第2 4小時以微測計（三豊製）測定兩耳的厚度，由右耳厚度減去左耳厚度，評價腫脹。動物於香料之曝露為在惹起之2 4小時前持續至測定腫脹時為止。拘束壓力為在惹起的2 4小時前負荷，並且於惹起立即再度負荷。 -1 3- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂---------線· 539552 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 12 五、發明說明（）尚，實驗為使用1群5隻之動物，旦香料為使用1，3 -二甲氧基-5-甲基苯（DMMB : Takasago International Inc. 所購入）。結果示於下逑表III及第4圖。表T T T Π )潮定值腫脹* ( X 0 . 0 1 ni ra ) 非拘束· 拘束· 非拘束· 拘束· 無香料無香料 D Μ Μ B DMMB 16 15 16 15 15 14 17 14 16 13 13 17 17 11 17 17 16 13 16 18 -14- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

539552 A7 B7 13五、發明說明（ (2 )分散分析元配置群體標本數合計平均分散非拘束*無香料 5 80 16 0 . 5 拘束*無香料 5 6 6 13.2 2.2 非拘束* DMMB 5 7 9 15.38 2.7 拘束· DMMB 5 8 1 16.2 2 . 7 請先閱言買背面之注意事項再填

I I I 訂表I I I : U )測定值中之數值為由各受驗動物所測定之右耳厚度減去左耳厚度之值，（2)為示出將上述數值分散分析之結果。由以上之表I I I及第4圖可知，於無香料之情形中，雖然抑制壓力負荷所造成的皮膚免疫反應，但於吸入D Μ Μ B 的動物群中，則未察見壓力所造成的皮膚免疫抑制。此意指待定的香料為可防止壓力所造成的皮膚免疫機能的降低。 2 - 2蘭格罕十g.細朐的染色以實施例1中「1-2,蘭格罕士氏細胞之染色」記載之同樣方法予以染色，並且同樣解析之結果為整理示於第 5圖。 -1 5- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）線金經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 539552 A7 B7 14 五、發明說明（由圖中可知，表皮中的蘭格罕士氏細胞數為經由壓力負荷而減少3 0 %。受驗動物若於壓力負荷時吸收D Μ Μ B，則蘭格罕士氏細胞數為比僅以壓力負荷有意義地增加，且與未負荷壓力之動物群之蘭格罕士氏細胞細胞數為同程度。産業h之可利用件若根據本發明，則為提供使用某一定的揮發性物質之用以調節皮膚免疫機能之製劑及方法。此些製劑及方法，例如可於各種各樣的化粧料及美容術中實現，故可利用於化粧品或化粧室製造業及美容業。請先閱讀背之注意事項再填寫

訂線經濟部智慧財產局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

Claims

539552 六、申請專利範圍 — 一 + 第89 1 20873號「皮膚免疫機能調節劑」專利案 (92年3月27日修1 六申請專利範圍： 1 . 一種皮膚免疫機能調節劑，其含有以可刺激嗅覺受體之揮發性物質做爲有效成分以抑制過多或過敏之皮膚免疫反應，該揮發性物質係選自西卓瓦 (C i t r a 1 v a )、檸檬油、茉莉花油、乙酸異冰片酯 (iso-bornyl acetate)、植醇、薄荷、羅勒油、丁子香及八角茴香。