TW521996B

TW521996B - Process for making granular L-lysine feed supplement

Info

Publication number: TW521996B
Application number: TW087120222A
Authority: TW
Inventors: Joseph Michael Stevens; Thomas P Binder
Original assignee: Archer Daniels Midland Co
Priority date: 1997-12-16
Filing date: 1999-01-11
Publication date: 2003-03-01
Also published as: US6756510B1; HK1018680A1; ES2224340T3; ID22079A; HUP9802901A1; BR9805349A; PL194210B1; JPH11253110A; DE69825024T2; NO985883D0; CN1269980A; TR199802628A3; DE69825024D1; CZ414398A3; CZ300262B6; HU9802901D0; EP0923878A3; EP0923878B1; NO985883L; PL330344A1

Description

521996 _ 案號 87120222 修正三、發明說明（1) ；本發明所敘述的方法乃指從L型離胺酸發酵液生產粒 I 狀L型離胺酸飼料添加物，特別是在生產L型離胺酸飼料添| 加物時，L型離胺酸含量並非只決定在L型離胺酸發酵液中’：最初的L型離胺酸濃度3 離胺酸是一種被廣泛應用在動物飼料工業的巷基酸：主要型式是L蜜離麽酸鹽酸化物。歷經多年，固體L型離胺酸鹽酸化物乃經由發酵、純化、結晶化及乾燥步驟生產出來；發酵後，發酵液會因為過濾或離心而除去細胞。過濾後，L型離胺酸可經離子交換步驟從發酵液中回收，如此所產生的液體是一種L型離胺酸游離鹼基，然後此溶液以蒸發作用來濃縮。鹽酸通常會加到濃縮的L型離埯酸終離蜂基中而形成L型離骇酸鹽酸化物。濃縮的[型離胺酸鹽酸化物經·過結晶化可產生帶二個水的L型離胺酸鹽酸化物產物，這種結晶固形物隨後可再乾燥後使其濕度低於1%。一傳統的產物有許多缺點，例如為粉狀。在產物利用上，粉狀物會導致有效物質的流失，有時會造成配方不— 全，也會使人員在這種環境中失去健康而且更不易工作凡這都導因於粉狀L型離胺酸鹽酸化物。另外，儲放時，有町產物會形成塊狀，而在最後要使用時卻很難搗碎。再 ^，大量應用離子交換方法會使得整個生產方法過於昂

仏t制貝務乾"I…土哪牧醪發酵液可避免L·型離胺酸趟酸化裎時大量應用純化方法尤其是大量地應用：： Ή一。然而’在最後的乾燥步驟時，要達成濃度_; 3々L· gL 女酸並不容易酵液中的L.型離胺鳆濃; III 鎺__________-~~—— si

521996 年月修正曰案號 87120222 彡、，説明⑵ ^ 變化很大]也f此乾燥產物會呈粉祆而互：:艮難利用。離廢酸產物時所必須的操作輸入物量而可防止昂貴的、-4r 〇 .1-U /?L · 一养國寸i!第;3，4 3丨，9 3 3號中提到—種含發酵液大量固衫物的2酸飼，添加物生產方法。就工業生產規模而 f，欲，逆作f式達成發酵液產物中含有40¾〜5 0%L型離胺馥是很斿的^小良的發酵槽體、污染、停電以及操作員的旅失疼展3< 些都會導致發酵物中L·型離胺酸低於 4〇%。造成這種難題的原因與培養基成份的不純有關，因為资多的培蚕基都是精煉製品而且在固體含量及營養價值媳f上會有。為避免培養基的變化，發酵便受限於使一而且卬貝的培養基。這種考量會增加生產4 0 %〜5 0 % ，落忿太丄^ ^士 a/ 一製造角，響。成本^。此外，發酵液乾燥後所生產的粉狀物不易利而對操作員則會因粉塵吸入之故造成健康上的負面影製造無粉狀的粒狀動物飼料產物已被陳述於美國專利第5，6 2 2，Π 0號中。此種粒狀作用需要二個步驟完成。第發酵液噴霧乾燥後產生含生物量的粒子；第二，將此粒子藉由成本昂貴的剪混合設備轉換成丸狀物。

第6頁歐洲專利第9 1 4 6 0 0 5 1· 5號中提及一個方法：經由喷霧造粒作用可從溶液或泥狀物中製成粒狀L型離胺^，無粉 =、非流動態之粒狀L型離胺酸鹽酸化物。於一發明實施二中’從含有L型離啤酸發酵液的成份中，可經:離^交生產較純的L型離胺酸溶液。將鹽酸加：較純：。谷液中可形成L型離胺酸鹽酸化物，然後嘖霧在L型粒狀物的攪拌乾燥床上。L型離锒缓鹽酸化物暫子 521996 _案號 87120222 ^^年 y 月 v 曰_^______ 五…發明«⑶ ! 可因此回收並達到預定的顆粒大小。國際專利WO/ 9 5 / 2 3 1 2 9號中提及粒狀型式L型離胺酸非化學計量鹽類的生產方法。這項專利指明L型離胺酸的非丨化學計量鹽類的生產方法，其中最終產物L型離胺酸含量丨是可調整的。當鹽酸需求量減少，就需要其他物質，諸：如：氫氧化鈣、硫酸或磷酸。另外，含有L型離胺酸的發酵液需要大量應用到離子交換法。美國專利第3，0 8 9，8 2 4號中提及醫用製藥錠片流動床的使用一事。方法包括：（1 )於空氣中形成懸浮粒子；（2 :) 使粒子能夠拌入造粒物質；（3 )以潤滑油包裹最後之粒狀 4 物。本發明的觀點之一是：造粒的物質被霧化並喷至像蔗糖此種惰性粒子流動床的氣流中。惰性粒子扮演造粒過程中的晶核，最後的粒狀物用潤滑油包裹。本發明提供一個非常有用的方法來製造非粉狀之粒狀 L型離遐酸產物，最終產物中L型離胺酸的濃度可以添加含 L型離狴酸的物質來控制；添加時機是在團集步驟（如：喷霧造粒步驟）之前。然而，以經濟立場來看，有一些需求：非粒狀L型離胺酸飼料添加物中可調控量的L型離胺酸純度是符合需要的。超過濾步驟未提供滲透型式和留存型式的無細胞L型 Μ 離胺酸養液和富含細胞的L型離胺酸養液。如果富含細胞的L型離胺酸養液被捨棄，這是一種浪費：也因此，需用心來利用或是適當的處理富含細胞的L型離胺酸養液。而超過濾步驟也會增加相當大的工廠成本。如果富含細胞的L型離胺酸養液被當成無用的副產

521996 ^!LJil2〇222 發明說明（4)

物，那就需要進广d 4雖a—缺、’ 丁初級和二級廢水處理。如果兮八， L逛離胺蜓蚕液以i τ田含細胞的對環境造成毒害= 的4^地下水道廢物排放掉，那麼將為求衣達係ί ,, 何適用的乾燥方1乾燥機"這個名詞以後將用於描述任隧道式乾燥機、二· T如：噴霧乾燥•、滾筒式乾燥機、機。此外，"A +疋&式乾燥機、淺盤式乾燥機和噴霧造粒〆，。貝務造粒機” 一詞以後將用於描述”粒子流動床。貝務造粒機”、”喷霧造粒步驟”和”團集作用"這坻名詞以後將視為相等的名詞。一 π 留在你” Τ1 „ ^ ^ 富含細胞的L型離胺酸液ff這些名詞以後將視為相等的名詞。 /分離’’ 一詞以後用於描述將L型離胺酸發酵液分成二部份：一是富含細胞的L型離胺酸養液；一是無細胞的L型離胺酸蚕液3任何適用於單一或組合分離方法皆可應用。經由過濾（例如：超和微過濾）、機械式方法，諸如：離心和傾析’皆可達成分離目的。 M超過濾π —詞以後將用於描述從L型離胺酸發酵液中過;慮細皰的超過濾方法，並提供無細胞的L型離胺酸養液和富含細胞的L型離胺酸養液。超過濾可將分子量介於1 〇， 000〜500，〇〇〇道耳吞的細胞除去，而以5〇〇，〇〇〇道耳吞最佳。 Μ中和態的L型離胺酸游離鹼基π —詞以後將用於描述含L型離胺酸的游離鹼基，係以相反的離子如··氯離子和硫酸恨離子中和後的物質。中和熊的L型離胺酸游離验基

521996 修正案號 87120222 五、發明說明（5) 是以一非化學計量的酸，諸如：鹽酸或硫酸，和L型離胺酸私雖验基相互作用後生產得到。 π含L型離胺酸的物質” 一詞以後將用於描述至少一種含此物質並且可簟獨使用的L型離胺酸，或是至少與另一種含此物質並且可以結合使用的L型離胺酸。含此物質適用的L型離胺酸例子有L型離胺酸鹽酸化物、L型離胺酸硫馥鹽及中和的L型離胺酸。 ”最終L型離胺酸飼料添加物” 一詞以後將用於描述含 3 5 %〜8 0 %L型離胺酸純度的最終產品添加物，以每公斤含游離驗基的百分比計算。此外，”最終L型離綠酸飼料添加物 M 一詞以後將示意為最終產物，此最終產物含中和態的L 型離胺酸。如上述，本發明的目的在於提供更容易操控的方法來生產L型離胺酸，而最終產物中L型離胺酸的濃度是可調控的。本發明的另一目的是得到改良過的方法，從發酵液中生產無粉狀、非流動態的粒狀L型離胺酸。特別是可以提供更簡易、更節省的方法來生產粒狀L型離鞋酸。事實上’目的疋不需要南成本的切割混摔工薇來生座無粉狀產物。更進一步的目的是要一次完成乾燥及造粒步驟並生產 L型離胺酸產物，這個方法在此示意為”團集步驟π。

另一目的是從發酵液中生產粒狀L型離胺酸，發酵液中L型離胺酸的濃度可以添加L型離胺酸游離鹼基或L型離按酸鹽酸化物來調控。還有一特別目的是可以避免發酵液大量使用離子交換；更進一步的目的則是要提供可調控L

521996 修正案號 87120222 五、發明說明（6) 型離胺酸含量的非粒狀L型離胺酸飼料添加物，其中喷荔造粒步驟可用不同方法來替換，諸如·· σ貧霧式乾燥、滚筒式乾燥、旋轉式乾燥、淺盤式乾燥和隧道式乾燥。本發明上述所提及者和其他要點與獲取的方法將籍以下列各種相關附圖，清楚示意而更易瞭解。第一圖為流程圖，說明生產非粉狀、非流動態粒狀L 型離胺酸的操作步驟。第二圖為流程圖，說明生產L型離胺酸飼料添加物的操作步驟，超過濾步驟是可選擇的和去水步驟已經排除。

第二Α圖為流程圖，說明生產L型離與酸飼料添加物的操作步驟可應用在不同的乾燥方法。第三圖為流程圖，說明生產L型離鞋酸飼料添加物的操作步驟中，有二處可以添加含L型離胺酸的物質。第三A圖為流程圖，說明生產L型離胺酸飼料添加物的操作步驟中，富含濃縮細胞的發酵液可因添加含L型離胺酸之物質而再次利用。弟四圖為流程圖，說明生產L型離胺酸飼料添加物的操作步驟中，將含L型離胺酸之物質添加至L型離胺酸發酵

液中。第五圖為流程圖，說明生產L型離胺酸飼料添加物的操作步驟中，將含L型離胺酸之物質添加至濃縮L型離胺酸發酵液中。在一實施例中的操作步驟為生產非粉狀、非流動態粒狀L型離胺酸（第一圖）的方法，可調控的L型離胺酸純度範

第丨0頁 521996

五、發明說明（7) 些步驟包括：（a) L型離联酸發酵_液經由超過慮後’可化到無細胞L型離胺酸滲透物2 8 ; ( b )從步驟（a )的L型離胺酸 ;逢物中除水，可得到無細胞濃縮的L型離胺酸養；夜4 〇 · ! U )加入含L型離胺酸之物質至步驟（b )的L型離胺酸養液 1 中，可得到無細胞富含L 4型離胺酸養液（” s c F E L B ”）5 4 ; Q 圑集步驟（c)的L型離胺酸養液可得到飼料添加物，此物為在9 6處的無粉狀、非流動態粒狀L型離胺_酸產物。本發明方法（第二圖）所述的操作步驟可用於生產L髮離||酸飼料添加物，最終的L型離胺酸純度範圍理論上介於3 5 %〜8 0 %，以每公斤含游離验基的百分比計算，較佳者籲為5 0 %〜& 〇 %。超過濾步驟可用離心取代，本方法中除水步驟可被摒除，包括（a)可使用任一適合的方法，諸如··離心’分離L型離联酸發酵液為二；一為富含細胞的L塑離胺酸養液（”CRLB")32，一為無細胞的L型離胺酸養液 (” SCFLB,f ) 2 8 ; (b)在48處將含l型離胺酸物質，諸如· L型離胺酸鹽酸化物或L型離胺酸游離鹼基，添加至步驟（a) 混合槽5 2内的L型離胺酸養液中，可得到無細胞富含L型離胺酸養液SCFELB”）；此添加物質的用量含有最终[型^離胺酸飼料添加物’其L型離胺酸純度介於3 5 %〜80 % ’以每公· 斤含游離鹼基的百分比計算；（c)利用喷霧造粒機6 0來團集步驟（b )之L型離胺酸養液，可得到l型離胺酸粒|子·’（篩濾步驟（c)中的粒子，可得到最終l型離胺酸㈣料"〖、加^勿 96 〇步驟(1 i )中黑細胞富含[型離胺酸的養浪7、二多、務乾燥（第二A圖之60)得到L型離胺酸飼料添加L型_離胺

第11頁 521996 修正 87120222 三、發明說明（3) 馥飼斜添加物9 6也可以隧道式乾燥、滾茼式乾燥、旋轉式丨 j 乾燥或淺盤式乾燥來生產無細胞富含L型離胺酸養液（第二 i A圖之6 2 ) 3多餘的水份可除去（第二A圖之6 :3),以蒸發方；式來除去較诖。 ! 本發明方法（第三圖）觀點的操作步騍可生產L型離胺酸飼料添加物，而最終之L型離胺酸純度範圍理論上可介於3 5 %〜8 0 %，以每公斤含游離鹼基之百分比來計算，更好牙介於5 0 %〜8 0 %。操作步驟包括： (a) L型離狴酸發酵液分成二部份：一是無細胞富含L型離胺酸養液（nSCFLB")28 ; —是富含細胞的L型離胺酸養液 H (” CRLB”）32 ; (b)調控步驟（a)中富含細胞的L型離跨酸養液的L型離胺酸純度可得到大量富含細胞的養液52 ; (c )從步驟（b )中將大量富含細胞的養液除水後，可得到富含細胞濃縮的養液3 6 ;( d )將步驟（c )中富含細胞的濃縮養液乾燥後，可得到L型飼料添加物（9 6 );或將1 0 4處更多含 L型離胺酸物質與步驟（c)中富含細胞的濃縮養液混拌後，再經乾燥即可得到9 6處的L型離胺酸飼料添加物3富含細孢的濃縮養液可與更多含L型離胺酸物質，以第三a圖中所敘述的批式或半批式原理來混拌。為求生產出可調控L型離胺酸純度含量的L型離胺酸飼0 料添加物，另一種發明方法（第四圖）的操作步驟包括： ·: a )調控L型離胺酸發酵液中的L型離胺酸純度可得到富含L 型離胺酸發酵液··（ b )將步驟（a )中富含L型離胺酸發酵液迢甴噴霧造粒、喷霧式乾燥、隧道式乾燥、淺盤式乾燥、凌轉式乾澡或滾筒式乾澡任一方式，轉變成L型離按酸飼

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五、發明說明（9) 料添力σ物。- 另一發明方第五圖）的操作步驟可從％之匕型離胺酸發酵液生產L裂離胺酸飼料添加物，相似於第四圖所教述的方法，其中α水步私，以蒸發方法較佳；從3 6處L型離胺酸發酵液中得到濃縮的L型離释酸養液.，其固形物^ 量介於30%〜70% ° ~ 含物質的L逛離胺I添加至4 8處的濃縮L型離胺酸養、夜後可得到富含L裂離胺酸的發酵液·富含L型離胺酸的發酵液可在60處喷霧造粒\在61處噴霧乾燥，在62處以噴霧乾燥、噴霧造粒、隧道式乾燥、淺盤式乾燥或滾筒式乾燥入型離胺酸飼料添加物，其最終L型離胺酸純度範圍 =;::3,8〇% ’以每公斤含游離驗基的百分比計 ^ 枚佳地介於50%〜80%。本發明觀點之一是從菸鹼基。發酲汸从丄 x酵液中收獲及製造L型離胺酸桿菌屬和短+曰# 、9有’史化’舉例而言，在棒狀禮，皆可用於接綠$八# σ生產大5L型離咹酸的ii 按酸菌之前，、α二 5 •用培養基中。在接種產生L型離物質，發酵用培養基的成份如下述：

II 大豆水解物含量（公克/公升）硫酸銨 2 0 · 〇尿素 2〇· 〇

磷酸鉀硫酸鎂〔硫酸缝七個水）

521996 案號 87120222 修正五、發明說明（.10) 生物素 0.0001 鹽酸硫銨素 0.0 0 0 1 葡萄糖 3 0.0 酸驗值用氨水調控並維持在大約7. 2。溫度維持在約3 2 C。飼料為葡萄糖濃度保持在約1 〇克/公升之葡萄糖：琉酸銨。發酵用培養基可依照微生物參考書中所列之標準微生物實例接種至發酵槽體中。發酵槽體裝配有攪拌器、通氣系統和溫度控制裝置來維持發酵作用的溫度在3 (TC左右，以3 2 °C較佳。發酵作用一直要到L型離胺酸鹼基濃度為9 2 · 公克/公升而總固形物乾重21 8公克/公升才完成。無菌技術可從整個發酵過程觀察，避免發酵液受到非L型離胺酸菌的污染。參閱第一圖可清楚明白與本發明觀點一致的是本方法從下面略述的發酵液中生產出無粉狀、非流動態粒狀L型離胺酸： (i ) 2 0處發酵槽中含發酵液的L -型離胺酸可藉由2 4處的超過濾方法分離成二部份：一為除去細胞後所生產出無細胞的L型離胺酸養液（如附圖上2 8處所示之π參透π ); — 為富含細胞的L型離胺酸養液（於此視為留存廢物）於3 2處棑乾。用於除去細胞的超過濾器可過濾分子量大小1 0，0 0 0 〜5 0 0，0 0 0道耳吞，以5 0 0，0 0 0道耳吞較佳。 (11) 無細胞的L型離胺酸養液於3 6處經蒸發除去水份後可生產無細胞濃縮的L型離胺酸養液2 8 ;無細胞濃縮的L 型離胺酸養液（如4 0處所示之”濃縮固形物乾重介於

mmm mm

521996 37120222 羊？月二曰五、發明說明αι) 3 0 °ί〜7 0 %。廢水於4 4處棑乾。蒸發作用於1 4 〇 Τ〜2丨4 Τ完一成’以1 4 5 F〜1 5 5 F較诖；堅力介於2 · 9 p s i a〜1 1 p s丨a (真，空），以2 . 9 p s i a〜4 p s 1 a較佳。 (i Η ) 無細孢濃縮的L型離胺酸奏液4^型離胺酸純度可於混拌槽5 2處調控，此調控是以添加4 8處含物質的L型離胺酸至混拌槽5 2處，生產出5 4處無細胞富含L型離胺酸的養液SCFELB。含物質的L型離胺酸添加量可使得最終L型離爸31飼料添加物的L型離胺酸純度範圍，理論上介於

3 5%〜8 0¾，以每公斤含游絶鹼基的百分比計算，以50¾〜80% 的L型離胺酸最佳。 (IV) 無細胞富含L型離胺酸的養液於5 6處喷氣管處霧化提供一無細胞富含L型離释酸養液的霧化喷霧條件，如此可做為6 0處噴霧造粒機中L型離胺酸粒子的過濾床；L型離狡酸粒子大小小於1 77微米（即··粒子可通過80篩目），以1 0 0〜1 7 7微米大小較佳。喷霧造粒機床以L型離胺酸粒子流勤床較佳而且可在3 0 3C〜1 0 0 °C溫度下操作。 (v ) 噴氣管5 6的位置經調整直到剛好高於L型離胺酸粒子流動床時即可調整。 (Vi:) 無細胞富含L型離胺酸的養液可噴在L型離胺酸粒子流動床上並啟動團集過程。 (v 1 i )團集過程可以繼續生產無粉狀、非流動態粒狀 L型離胺酸產物，大小範圍約為1 7 7〜1 1 9 0微米，而以 1 i i〜4 2 0微老較佳。 ^ v 1 i 1 ) 產物可從64處的噴霧造粒機除去，廢水在乾逢機廢物排放口處以水蒸氣形式從6 8處排掉。

^ : 百 -T7 、r\ 521996 _案號87120222_产年2月乙日_^

五、發明說明（12:) (丄X )然後將產物過篩並以7 2篩目挑選出大小（以8 0筛目較佳）。 (X ) _了 6處過大（例如：大小範圍大於丨1 9 0微来）的粒狀物用8 0處的研磨機研磨成較小的粒子（例如：大小範圍小 | 於1 7 7微米），再與8 4處過小（例如··大小範·圍小於1 7 7微米）的物質混合得到再循環的L型離胺酸粒子（如第一圖8 8 處所示之”再利用”），然後回到噴霧造粒機6 0處當成啟始物質，並視為團集過程中的種源。 (xi) 大小範圍約177〜11 90微来（如92處所示之” 177〜 1 1 9 0微米粒子π )的無粉狀、非流動態粒狀L型離胺酸產物 4 通過篩濾過程後，在9 6處生成可接受的終產物；然而，較佳的範圍是從1 7 7〜4 2 0微米，如此一來更好包裝並且可以降低運輸成本。

在L型離胺酸發酵液的啟始飼料流出處，L型離胺酸較 1圭的濃度約為9 0公克/公升，以每公斤含游離岭基的百分比計算；然而，L型離胺酸濃度可因不同批次的發酵作用而產生變化。因此，利用含9 0公克/公升L型離胺的發酵液意謂著：在發酵液中任一適用的L型離胺酸濃度皆可被接受；然而，在發酵液中L型離胺酸的濃度不應低於3 0公克/ 公升。如上面步驟（i i i )所述，最終欲得到的L型離胺酸濃度可藉由添加含物質的L型離胺酸而達成。雖然要獲取無細胞的L型離胺酸養液時’以超過〉慮方法較佳，但是這並不意謂著其他方法是不能用的；細胞亦可藉由機械式分離技術來除去，諸如：離心。其他適用的

第16頁 521996 — 案號87120222 车f月-> ^ -" '----- 1 ζ...α 修正五、發明說明“3) 一 -- 本發明構設從含發酵液的L型離胺酸_，以蒗笋里他方法土除去細胞。例如：發酵液2〇對等平分後Ί“離心，剩下的50%從養液中經超過濾除去細胞後，再將^混合生成無細胞的L型離胺酸養液。此種易操控的特性辦: 了本發明在工業裝置上的實用性。 9 雖然本發明構設添加含L型離·胺酸物質至混拌槽52處的無細胞濃縮L型離胺酸養液中，但是如果存在於^細月^ ;農縮的L型離胺酸養液中，欲得到的[型離胺酸（以游離鹼基測疋）；辰度是添加含L型離胺酸的物質，那麼此種添加至濃縮L型離胺酸養液中的物質是可以被省略的；如步驟 (1 1 1)所述是不需要的；例如··如果無細胞濃縮L型離胺酸養液中’L型離胺酸的濃度超過35¾，以每公斤含游離鹼基的百分比計算，添加含L型離胺酸的物質此步驟是可以省略的。如果無細胞濃縮L型離胺酸養液中，l型離联酸含量超過3 5 %，以每公斤含游離驗基的百分比計算，[型離释酸養液為無細胞富含L型離胺酸的養液。、經驗痛示· 5 6處°貧氣官口的大小、流速和壓力之間仔有關聯性。較佳的喷氣管大小為0 · 0 6 1 5 π ，其他不同種的噴氣管亦可用於支援喷霧作用。特別的是··喷氣管的設計〇是由製造優良喷霧器的Spraying System Co.， PO Box 7 9 0 0，Wheaton，IL 6 0 1 89 -7 9 0 0，美國（電話： 6 3 0〜6 6 5 - 5 0 0 0 )提供。喷霧造粒機可逕向G 1 a 11 A i r Techniques，20 Spear 路，Ramsey，NJ 0744 6- 1 28 8，吴國（電話：2 0 1 - 8 2 5 - 8 700)購買。

521996 87120222 a 疼- 五、發明說明（:14) 為3rr 1需要在多哨氣宫將富含L型離按酸的養液霧化並續· η务在农fcc 1列加八的L型離释酸爷透 >位卞床上。粒子；參透床應包括夠小的L型離按酸粒子，它的功能是當成團集過程的種源。最好是L型離巷酸粒子之大/卜能小於1 了了微呆，以介於1 〇〇〜1 了了微老較佳3 在團集作闬過程t，當將和富含L型離胺酸；參透物一起嘻霧，種源粒子之大小增加並且同時乾燥。團集過程可藉富含L型離胺酸養液中，原本就存有的钻合劑來協助，即：L型離胺酸發酵液、L型離胺酸鹽酸化物、L型離骑酸

硫酸鹽和水。粘合劑定義為一種可提供黏性成份並使得團集作用中，種源得以增加大小的物質。用於生產和在喷霧造粒機中，接種至L型離胺酸流動床的L型離胺酸粒子來源並不具有決定性，雖然較佳的來源如步驟（i v ) 所述是從霧化的無細胞富含L型離胺酸養液中獲得，或者如第一圖8 8處所示：是從步驟（X )中的再循環L型離胺酸粒子得到。 L型離胺酸粒子的流動床可由下列任一個經霧化或喷霧乾燥生產得到：步驟（1 )中含發酵液的L型離胺酸；步，驟 (1 )中無細胞的L型離胺酸滲透物；步驟（〇中將含發酵液的L型離胺酸離心，可獲得無細胞L型離胺酸養液：步驟馨 (1 i )或任一種結合後所得到無細胞濃縮的L型離胺酸養. 液。此外，純化的L型離胺酸鹽酸化物和L塑離胺酸游離鹼基可當成L型離胺酸粒子的來源，用以製造出L型離胺酸粒 +的流動床並當成團集過程中的種源。用於製造L型離胺酸粒子流動床並當成S集過程中種

第18 I 521996 案號 87120222 年p月丨曰修正五、發明說明（15)

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源的L型離胺酸粒子正確種源並不具有決定性，較佳的是：L型離胺酸粒子大小能小於1 了 7微米，但以1 〇〇〜1 了了微米更好。、邊之’適合用於製造L型離胺酸粒子的種源包括··步驟（1 )中將含發酵液的L型離胺酸離心後獲得的無細胞L型离隹胺酸養液；步驟（i)中無細胞的L型離胺酸滲透物；步驟 (1)中無細胞濃縮的L型離胺酸養液；步驟（i i i )中無細胞富含L型離胺酸的養液。每一個種源或這些種源之組合，可於噴霧造粒機6 0中的喷氣管5 6處霧化而生成L型離脖酸粒子。L型離胺酸粒子的製造可藉由分離的噴霧乾燥並儲放備用；下述任一個從步驟（i )含發酵液的L型離胺酸中，經離心得到的無細胞L型離联酸養液；步驟（i )中無細胞的 L型離胺酸滲透物；步驟（i i )中無細胞濃縮的L型離胺酸養液；步驟（i i i )中無細胞富含L型離胺酸的養液。在當成L 型離胺酸粒子使用之前，喷霧乾燥產物可過篩除去塊狀物而得到小於1 7 7微米範圍的粒子（以1 0 0〜1 7 7微米較佳）。舉例而言，步驟（i i )中的無細胞濃縮的L型離胺酸養液可用於生產6 0處的滲透種源粒子床。無細胞濃縮的L型離胺酸養液可於喷霧造粒機6 0中5 6處的喷氣管霧化，生成種源粒子的滲透床。無細胞濃縮的L型離胺酸養液可以分開來喷霧乾燥。在當成L型離胺酸粒子使用之前，噴霧乾燥濃縮的L型離胺酸養液可過篩除去塊狀物而得到小於1 7 7 微米範圍的粒子（以1 0 0〜1 7 7微米較佳）。另一個適用於L型離胺酸粒子種源的例子是依照參考書詳述的方法來製造乾燥純化的L型離胺酸鹽酸化物粉狀

第19頁 521996 案號 87120222_Θ 年 p 月〕曰_^__ 五、發明說明（16) ' 物。此乾燥粉狀物用於當成L型離胺酸粒子的種源，或是經過篩乾燥除去塊狀物而得到小於1 7 7微呆的粒子（以 100〜17了微米較佳）。經驗顯示：一旦團集過程變成自我供給時，用於60處 | 流動床的粒子將來自於：從8 8處再循環的检子至6 0處的流 I 動喷霧造粒床。此乃使用8 4處過小的粒子或是在8 0處經研磨變小的過大粒狀物。經驗亦顯示：團集過程可以批次式或半繼續式為基礎來操作，而以批次式方法較佳。在啟始飼料流，發酵液中較佳的L型離胺酸濃度，以每公斤含游離鹼基的百分比計算，約為9 0公克/公升；從參考書中的這些技術可得知：L型離胺酸濃度可因為不同批次的發酵作用而有所變化。因此，使用含9 0公克/公升的發酵液並不意謂著在發酵液中，其它適用濃度的L型離遐酸是要被摒除的。最終欲得到的L型離肢酸濃度可因添加含物質的L型離胺酸來達成，諸如·· 4 8處的L型離胺酸鹽酸化物、L型離联酸游離驗基，如上面步驟（i i i )所述。然而，發酵液中的L型離胺酸濃度不應低於3 0公克/公升。本發明第二實施例如第二圖所示用於生產L型離胺酸

(i) 於2 0處發酵槽内含發酵液的L型離胺酸可在2 4處分離生成二部份：一為無細胞的L型離胺酸養液（n S C F L B ”） 28，一為富含細胞的L型離胺酸養液Γ CRLBn ) 32。富含細胞的L型離胺酸養液（如第二圖E 2所示）可依第三圖第三實施例中所述來製造。任'一種適合的方法，諸如：超過；慮或離心，在2 4處可做為分離胺基酸發酵液之用。

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曰五、發明說明（17) u')無細胞士型離胺酸養液中L型離咹峻的純产可於 48處，添加有效置、含物質的L型離胺酸至混拌=益細胞L型離胺酸養夜中，可得$丨益彡输言入日 ν—ππϊ ^J件二丨1蛛邱胞田含L型離胺酸的基液1 SCFEU )。4加至48處含物質的L型離胺於' 無細胞L型籬胺酸養液中L型離胺酸的濃度，以二/、^、離鹼基的曰分比什昇。然而，L型離联酸的含旦： ^ 保證最終產物中，L型離胺酸的最終濃度範圍二:〜° 3 5%〜8 0%，以每公斤含游離鹼基的百分比計算。 (i i 1)無細胞富含L型離胺酸的養液於5 6噴氣管處霧化，得到的無細胞富含L型離胺酸養液經霧化噴霧，可以製成6 0處噴霧造粒機中的l型離胺酸粒子滲透床。L型離胺酸粒子需小於1 77微米（即··粒子可通過8〇篩目），較佳的八小範圍的在1 0 0〜1 7 7微米。較佳的噴霧造粒床為L型離胺竣粒子流動床，可於3 〇〜1 〇〇。〔之間操控。於第二圖步驟（〗i)中無細胞富含L型離胺酸的養液可歲務乾燥製成L型離胺酸飼料添加物。將無細胞富含[型離 ^酸的養液以隧道式乾燥、滾筒式乾燥、旋轉式乾燥或淺 ^式乾無（第二A圖之6 2 )亦可生產L型離胺酸飼料添加物。多餘的水份可除去（第二A圖之6 3 )，以蒸發方法較佳。士（ 1 v)噴氣管5 6處（第二圖）的位置經調整直至剛好高於噴霧造粒機的L型離胺酸粒子流動床。 ,(v )無細胞富含L型離胺酸的養液被喷至喷霧造粒機的L型知胺酸粒子流動床以啟動團集過程。 (v 1 )團集過程可以繼續生產备拾肋、北流動態鈕妝Γ 521996 案號 87120222_Μ年Γ月 l曰_魅_ 五、發明說明（18) 型離胺酸產物，大小範圍約在1 7 7〜1 1 9 〇微米，以1 7 7〜4 2 0 微呆較佳。 (、v 1 i )產物可從6 4處之噴霧造粒機除去，廢水則於6 8 噴霧造粒機棑放處以水蒸氣的形式流掉。 (v i i i ) 然後再將產物過篩成7 2篩目的‘大小（較佳者為 8 0篩目）。 (i X ) 7 6處過大的粒狀物（例如：大小範圍大於約1 1 9 0 微米）於8 0處以研磨機研磨成較小的粒子（例如：大小範圍小於約1 77微米）並與84處過小的物質（例如：大小範圍小於約1 7 7微米）結合得到8 8處（第二圖）再循環的L型離胺酸_ 粒子，然後回到6 0處的喷霧造粒機當成啟動物質並做為團集過程中的種源。 (X) 無粉狀、非流動態，π 1 7 7 - 1 1 9 0微米粒狀物”，粒狀L型離胺酸產物中L型離胺酸的純度範圍介於約 3 5 %〜8 0 %，以每公斤含游離鹼基的百分比計算，大小範圍約在1 7 7〜1 1 9 0微米，在9 2處通過篩濾過程，在9 6處即為可接受的終產物。然而，從密度的觀點來看，較佳的產物大小範圍介於約1 了 7〜4 2 0微米。本發明第三實施例（第三圖）用於生產L型離胺酸飼料添加 _丨物。 (i )在2 0處發酵槽體中的L型離胺酸發酵液可在2 4處分離成二部份生成：一為無細胞的L型離胺酸養液（n SCFLB”） 2 8，一為富含細胞的L型離胺酸養液（n C R L ΒΜ ) 3 2。無細胞的L型離胺酸養液（如Ε 1所示）可依第二圖第二實施洌所述來製造。任一適合分離L型離胺酸發酵液的方法皆可被應

第22頁 521996 _案號87120222 0年Γ月L日_^_ 五、發明說明U9) 用，诸如.超過；慮或離心。在分離L型離胺酸發酵液之前，含L型離胺酸物質可選擇性地被直接添加至L型離胺酸發酵作用t。攪拌作用可由適合的攪拌槽反應器（n STRn )發酵槽提供所需的混拌程度，以確保L型離胺酸發酵液中有相同濃度的L型離胺酸。 (i i ) 富含細胞L型離胺酸養液中L型離胺酸的純度可以添加含有效量的L型離胺酸物質至富含細胞之L型離胺酸發酵液的混择槽5 2内，以生產富含細胞的養液 (” ECRB”）55。添加至48處含物質的L型離胺酸量決定於富、含細胞L型離胺酸養液中L型離胺酸的濃度，以每公斤含游φ 離鹼基的百分比計算。然而，此含量應該足夠確保最終產物中L型離胺酸的最終濃度可介於約3 5 %〜8 0 %，以每公斤含游離鹼基的百分比計算。 (i i i) 於3 6處可藉由蒸發作用，將水從富含細胞的養液中除去而得到富含濃縮細胞的養液（” CCRB”）。富含濃縮細胞的養液，其較佳的固形物重量約介於20%〜70%。 (1 v ) 富含濃縮細胞的養液於6 2處乾燥後可得到L型離胺酸飼料添加物9 6，其L型離胺酸純度範圍約介於 3 5 %〜8 0 %，以每公斤含游離蟑基的百分比計算。富含濃縮細胞的養液在1 0 4第二混拌槽中與更多含物質的L鄱型離胺酸混拌，然後於6 2處乾燥。如果本實施例被應用在批次式或半批次式基礎上時，會更想只用一個5 2混拌槽即：將1 0 8處富含濃縮細胞的養液，如第三a圖所示再循環回到5 2混拌槽中。本發明（第四圖）第四實施例包括生產L型離胺酸飼料添加

第23頁 521996 修正案號 87120222 五、發明說明（20) 以每公斤含游物，其L型離胺酸純度範圍約介於3 5%〜80% 離鹼基的百分比計算。 (1 ) 2 0處發酵槽體内L型離胺酸發酵液的L型離胺酸純度，可添加4 8處有效量的含L型離胺酸物質至5 2混拌槽中而得到富含L型離胺酸發酵液（n ELFB”）。添加至48處含物質的L型離胺酸用量，決定於L型離胺酸發酵液中L型離賤酸的濃度，以每公斤含游離蜂基的百分比計算。然而，此用量應足以保證最終產物之最終L型離胺酸濃度範圍介於 3 5 %〜8 0 %，以每公斤含游離鹼基的百分比計算。理論上，於48處添加L型離骑酸游離蟓基是較有利的，優點是有天然的液體陰離子存在於L型離胺酸發酵液中。L型離胺酸發酵液中的硫酸、氣和氫氧陰離子理論上可以中和L型離鞋酸游離鹼基。 (i i) 依賴流動閥11 2的位置，富含L型離胺酸發酵液可藉由6 0處（即··團集作用的）喷霧造粒機轉變成粒狀L型離胺酸飼料添加物，或是藉由6 1處的噴霧乾燥轉變成L型離胺酸飼料添加物。水份在6 3處除去，以蒸發法較佳。本發明構設將含有L型離胺酸的物質添加至例如：含發酵液的L型離胺酸或是濃縮的L型離胺酸養液中。然而，因為當L型離胺酸濃度超過3 5 %時，如果在發酵液或濃縮L 型離胺酸養液中，欲得到的L型離胺酸濃度（以游離鹼基測定）根本不需要添加含有L型離胺酸物質的話，以每公斤含游^離鹼基的百分比計算，添加含有L型離胺酸的物質是可以省略的。如果含發酵液的L型離胺酸或是濃縮的L型離胺酸養液中，L型離胺酸濃度超過3 5 %時，以每公斤含游離鹼

第24頁 521996 -------案號 87120222 —〆年、p 月 I g__修正_ —__ 1、發明說明（:21) 基的百分比計异’養；夜和）農縮物二者可視為富含L型離胺酸的養液。本發明（第五圖）第五實施例包括生產L型離胺酸飼料添加物的方法，基本上除水步驟與第四實施例所述相同’ 以洛發法較佳’·從3 6處L型離胺酸發酵液可.得到濃縮的l型離胺酸養液，固形物重量範圍介於3 0 %〜7 0 %。含物質的L型離胺酸添加至4 8處濃縮的L型離胺酸液後，可得到富含L型離胺酸發酵液。富含L型離胺酸發酵液於6 〇處經喷霧造被、於6 1處經嗔霧乾無以及6 2處的嗔霧乾燥、喷霧造粒、隧道式乾燥、'淺盤式乾燥或滾筒式乾燥後可得到l型離務 ώ 酸飼料添加物，L型離胺酸純度介於3 5 %〜8 0 %，以每公斤含游離鹼基的百分比計算。下述範例代表本.發明特定但非限制性的實施例：範例---比較範例可從L型離胺酸發酵作用運轉中獲得含9 2公克/公升的 L型離胺酸游離鹼基和2 1 8公克/公升乾重的4 0 0公升發酵液。此物質經超過濾及蒸發後，形成濃度2 3 5公克/公升的 L型離胺酸硫酸（以游離鹼基測定）和4 9 3公克/公升的乾重物。 5150毫升的濃縮物以G1 at t WSG5噴霧造粒機乾燥。❿ G 1 a 11機器入口處的溫度維持在9 3〜1 2 4 °C，高於1 2 0乞較佳。出口處的溫度則維持在4 〇〜8 Q t，以6 0〜6 5 °C較佳。床的溫度則維持在7 0〜9 2 °C，以了 1〜7 4 °C較佳。氣流維待在1， 3 0 0〜4, 00〇英呎/分，以1，3 0 0〜1，5 0 0英呎/分較佳°噴氣管霧化氣體約介於5 〇〜7 〇磅/平方英吋。為了要形成團集作用

第25頁 521996 案號 87120222 五、發明說明（22) 所需之物質床而設置於最高處的喷氣管，可將大約2，5 0 0 毫升的漠縮物藉此喷霧至乾燥機内。噴氣管降低於剛好在床上滲透物質的位置之上，而團集作兩可於濃縮物維持在 2，6 5 0毫升時完成。由此所生產的粒狀產物成份如表一所示。表一樣品+16篩目 +40篩目 +80篩目-80篩目％純度* > 1 1 9 0 微米 4 2 0 〜1 1 9 0 1 了 7 〜4 2 0 < 1 7 7 微米微米微米養液 16.1% 58.3% 25. 5% 0% 46.5¾ *濃度測定：每公斤含L型離释酸游離鹼基百分比。離联酸發酵液，如範例一所述經超過濾和濃縮後，用純化的L型離胺酸硫酸以4比1 (離胺酸主要成份）混合，此混合物如範例一所述嗔霧造粒。這個過程用未稀釋的L型離胺酸硫酸以3比2混合，2比3混合，1比4混合；此粒狀產物的成份如表二所示。表二樣品 + 1 6篩目 + 4 0篩目+ 8 0篩目- 8 0篩目％純度* >119 0 微米 4 2 0 〜1 1 9 0 1 7 7 〜4 2 0 < 1 了了微罘微米微米

第26頁 521996 案號 87120222 七『年，f 月^曰修正 5 0.9¾ 2 6.1¾ 11.4¾ 4 9.0¾ 17.1 % 4 9· 1% 5.7% 5 2.2 % 40. 3% 5 2.5% 6. 30/〇 57. 4¾ 35.0¾ 4 1 . 8 0/〇 17. 10/〇 6 2.5¾ 2 7.8 % 2 2.0 0/〇 2.6% 6 8.5¾ 五、發明說明U3) 11.6¾ 28. 1% (Y) 0/ 6. L型離胺酸47. 8% 硫酸 *濃度測定：每公斤含L型離胺酸游離_驗基百分比範例三離胺酸發酵液，如範例一所述經超過濾和濃縮後，以4 比1與純化的L型離胺酸鹽酸（離胺酸主要成份）混合，此混合物如範例一所述喷霧造粒。這個過程用未稀釋的L型離胺酸鹽酸化物以3比2混合，2比3混合，4比1混合；此粒狀產物的成份如表三所示。表三樣品 + 1 6篩目 + 4 0篩目 + 8 0篩目-8 0蒒目％純度* > 1 1 9 0 微米 4 2 0 〜1 1 9 0 1 7 7 〜4 2 0 < 1 了 7 微米 L型離胺酸1 鹽酸化物微米微呆 7. 4¾ 33, 0¾ 5 9.6¾ 00/〇 49.40¾ 7.6% 32. 9% 44.2% 1 5. 2% 51.50¾ 4.8¾ 48. 4% 46. 8% 0% 5,7· 0 0¾ 5.1¾ 45. 3% 49.40% 0% 66.60¾ 7.2% 4 4.5 % 29% 9.3% 76.80¾ 每公斤/ 型離胺酸游離鹼基百分比。 4

521996 三、發明説明 (24) 修正絶例一中濃縮和超過;慮的L裂離胺酸發酵液，將個別與苑例二和三中所述之L型離胺酸硫酸及[型離胺酸鹽酸化物混合，生產出可增加L型離胺酸含量的粒狀產物。本發明所述的較佳實施例，可以使得L型離胺酸發酵液中L塑離胺酸的含量’在進入團集作用之前易於調控。因此’從〆 L型離胺酸發酵作用到下一個L型離胺酸發酵作用中，經常自然發生L型離骇酸濃度的變化，不需要利用大量離子交換法來得到使用時（例如：當飼料添加物）所需純度的最終產物。最終粒狀L型離胺酸產物中較佳的純度範圍介於 3 5 %〜8 0 %，以每公斤含游愈鹼基的百分比計算。範例四 L型離胺酸發酵液，固形物含量為1 9 3 · 8公克/公斤而離胺酸含量為了 4 · 3公克/公斤，與中和態的L型離胺酸混合，此中和態的L型離胺酸為瘦離驗基且可產生5 〇 8公克’/ 公斤的離胺酸和9 7 7 · 1公克/公斤的固形物。大約3100毫升的混合物以以以1：1505喷霧乾燥機乾澡。入口處的溫度維持在1 3 6〜1 4 6 °C，出口處的溫度維持在42〜74 °C，以60〜65 t：較佳。床溫則維持在63〜79。(： ’以〖1〜7 4 °C較佳。氣流的溫度維持在1 5 了〜2 〇 9立方英呎/分（實際值），以1 3 0 0〜1 5 0 0立方英吸/分較佳。喷氣管霧化氣體介於5 0〜70磅/平方英吋。為了要形成團集作用所需之物質木mj ΰ又丘於敢南處的嘴氣答，將大約？，2 5 〇意升藉此^矛务至革t燥偏。噴氣管降低於床上參透物質的位置之i @

第28頁 521996 _案號 87120222 年 f 月；曰_^_ 五、發明說明（25) 圑集作用可於飼料維持在8 5 0宅升時完成，如此可產生乾 4勿3 L . 0死度的；▲座物，此祖狀座物的欣份如表四所示。表四樣品Η 6篩目+ 4 0篩目+ 8 0篩目 - 8 0篩目％純度* 養液 8.4¾ 3 8.9% 43. 9% 8.7% 52. 0% *濃度測定：每公斤含L型離胺酸游離鹼基百分比。範例五從離胺酸液經超過濾得到5公斤的滲透物，其乾物純度44. 9%而固形物總重為69. 9公克/公斤，再與乾物純度 56. 3%而固形物總重為71 6公克/公斤的182公克中和態L型離狴酸混合，以裝配有霧化盤式噴氣管的N i ro霧化噴霧乾燥機進行喷霧乾燥。入口處的溫度為2 3 0 °C，出口處溫度為80 °C，霧化盤的壓力為3. 3kp/平方公分，飼料流速為34 毫升/公釐；如此可產生純度5 1. 2 %的L型離胺酸乾物。範例六

從離胺酸液經超過濾得到5公斤的滲透物，其乾物純度4 4 . 9 %而固形物總重為6 9 . 9公克/公斤，與乾物純度 5 6 · 3 %而固形物總重為7 1 6公克/公斤的1 8 2公克中和態L型離胺酸混合，蒸發成2 5 . 4%的固形物；此蒸發混合物是以滾筒式乾燥。滾筒式乾燥機有二個相反的旋轉式滾筒，8. 了5”長，直徑5Π ，轉速為2. 5RPM.。蒸氣以40psi供應至滾

第29頁 521996 修正案號 87120222 五 '發明說明（26) 筒，飼料流速為2 0〜4 0毫升/公釐；如此可產生純的L型離胺酸乾物。當上述本發明與較佳的或有圖解的實施洌结些實施例不能如預期的涵蓋全部，或者會變成本制；相反地，本發明預期可涵蓋發明附件申請專義中所包括的宗旨和範圍内全部可選擇者、修改者0 度 4 3 · 9 % 合時，這發明的限利範圍定者和相等

Claims

521996 _案號8^20222_年月曰修正_ 六、申請專利範圍 7 .根據申請專利範圍第6項的方法，其中該步驟（a)含濃縮L型離胺酸培養液的固形物重量介於3 0 %〜7 0 %。 8. 根據申請專利範圍第6項的方法，其中該步驟（b)含L型離胺酸的物質選自從L型離胺酸鹽酸化物、L型離胺酸硫酸鹽及中和態L型離胺酸所組成的族群中。 9. 根據申請專利範圍第6項的方法，其中該步驟（a)包括蒸發L型離胺酸發酵液來除去水份，以提供該濃縮的L 型離胺酸培養液。 1 0 .根據申請專利範圍第7項的方法，其中該步驟（a)的蒸發作用係於1 40 °F〜2 1 4 °F進行。 11. 根據申請專利範圍第7項的方法，其中該步驟（a)的蒸發作用係於1 4 5 °F〜1 5 5 °F進行。 12. 根據申請專利範圍第7項的方法，其中該步驟（a)的蒸發作用係於2. 9psi〜1 lpsi真空狀態下進行。 13. 根據申請專利範圍第7項的方法，其中該步驟（a)的蒸發作用係於2 . 9 p s i〜4 p s i真空狀態下的進行。 14. 根據申請專利範圍第6項的方法，以每公斤含游離鹼基的百分比計算，其中該步驟（b)富含L型離胺酸發酵液的L型離胺酸介於50%〜80%。 15. 根據申請專利範圍第6項的方法，其中該步驟（c )乾燥作用選自由滾筒式乾燥、喷霧式乾燥、旋轉式乾燥、淺盤式乾燥、隧道式乾燥和喷霧乾燥組成的族群中的乾燥機來進行。 16. 根據申請專利範圍第1項的方法，其中該方法更於

第32頁 2003.01.02.034 521996 _案號87120222_年月曰修正_ 六、申請專利範圍該步驟（a)之前包含一額外步驟，即，分離L型離胺酸發酵液成為無細胞之L型離胺酸培養液和富含細胞之L型離胺酸培養液，此外，該方法更於該步驟（b)之前包含一額外步驟，即，從步驟（a )中富含細胞的培養液中除去水份以提供濃縮的富含細胞培養液，其中該步驟（a )與該步驟 (b)中的L型離胺酸發酵液均為富含細胞L型離胺酸培養液。 17. 根據申請專利範圍第1 6項的方法，其中該步驟（c )更進一步包括添加額外量的含L型離胺酸物質至該濃縮的富含細胞培養液中。 18. 根據申請專利範圍第1 6項的方法，其中該步驟（d )的乾燥方法，係選自由隧道式乾燥機、滾筒式乾燥機、旋轉式乾燥機和淺盤式乾燥機組成的族群中。 19. 根據申請專利範圍第1項的方法，其中該方法更於該步驟（a)之前包含一額外步驟，即，分離L型離胺酸發酵液成為無細胞之L型離胺酸培養液和富含細胞之L型離胺酸培養液，其中該步驟（a)與該步驟（b)中的L型離胺酸發酵液均為富含細胞L型離胺酸培養液。 2 0. 根據申請專利範圍第1 9項的方法，其中該步驟（c )的乾燥方法，選自由喷霧造粒機、喷霧式乾燥機、隧道式乾燥機、滾筒式乾燥機、旋轉式乾燥機和淺盤式乾燥機組成的族群中。 2 1. 根據申請專利範圍第1 9項的方法，其中該步驟（c ) 更進一步包括以篩濾、步驟來挑選出大小範圍介於

2003.02.10.035 521996 _案號87120222_年月曰修正_ 六、申請專利範圍 1 7 7〜1 1 9 0微米的粒子。 2 2. 根據申請專利範圍第1項的方法，其中該方法更於該步驟（a )之前包含一額外步驟，即，以在濃縮的L型離胺酸培養液中計算每公斤含游離鹼基的百分比，決定L型離胺酸的濃度。 2 3. 根據申請專利範圍第2 2項的方法，其中該方法更於該步驟（a)之前包含一額外步驟，即，從含發酵液的L型離胺酸中除去水份是以1 4 0 °F〜2 1 4 °F的溫度， 2 · 9 p s i〜1 1 p s i真空狀態的條件進行含發酵液之L·型離胺酸的蒸發，可生產固形物重量介於30%〜70%濃縮的L型離胺酸培養液。 2 4. 根據申請專利範圍第2 2項的方法，其中該步驟（b )中該含L型離胺酸的物質係選自從L型離胺酸鹽酸化合物、L 型離胺酸硫酸鹽及中和態L型離胺酸所組成的族群中。 25. 根據申請專利範圍第2 2項的方法，其中該方法更於該步驟（a )之前包含一額外步驟，即，從含發酵液的L型離胺酸中除去水份以提供濃縮的L型離胺酸培養液，其中該步驟（a )中，以每公斤含游離鹼基的百分比計算，如果濃縮的L型離胺酸培養液中L型離胺酸的濃度低於3 5 %，該含L型離胺酸的物質被添加至該濃縮的L型離胺酸培養液中，以提供富含L型離胺酸的培養液。 2 6. 根據申請專利範圍第2 2項的方法，其中該步驟（a ) 中，以每公斤含游離鹼基的百分比計算，如果濃縮的L型離胺酸培養液中L型離胺酸的濃度低於35 %，該含L型離胺

2003. 02.10.036 521996 案號87120222 年月日修正六、申請專利範圍酸的物質被添加至該濃縮的L型離胺酸培養液中，以提供富含L型離胺酸的培養液，而該含L型離胺酸的物質係選自從L型離胺酸鹽酸化合物、L型離胺酸硫酸鹽及中和態L 型離胺酸所組成的族群中，其中，以每公斤含游離鹼基的百分比計算，該步驟（b )中添加物的量可使得最終L型離胺酸飼料添加物中L型離胺酸的純度範圍介於 35%〜80% 〇

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