TW482768B - Cyclic azapeptides - Google Patents

Description

482768 A7 .一 __ B7 五、發明説明（1 ) 本發明關於式I化合物 環一（aArg - aGly — aAsp — aX— aY)

I 其中 a A r g 係 A r g 或 氮 雜- -A r g ， a G 1 y 係 G 1 y 或 氮 雜- - G 1 y a As P 係 As P 或 氮 雜- -A s P a X， a Y在各案 例 中 互 相獨立 地 爲 胺 基 酸 殘基 二 BB 迸 白 於A 1 a A s η A s Ρ A r g > C y s X G 1 η 、 • G 1 u G 1 y 、 Η i s Λ I 1 e 、 .L e u L y s ' Μ e t N 1 e 、 * 0 r n P h e 、 Ρ h g P r o 、 .S e r T h r 、 Τ i c T r P ’ ‘ T y r V a 1 ' Ν H — Q 一 C 〇- 或 對 應的 氮 雜 — 胺基酸 j Q 係 具有 1 — 6 個碳原 子 的 伸烷 基 ， 其 中在 式I 所 示的 胺基 酸 :之 至 少- 一個 中 ， c a 碳/ i系被 氮 所置 換， 上述的胺基酸亦可爲衍生的，且胺基酸殘基係以肽樣 式經由α—胺基或氮雜基和α-羧基而互相連結， 且若有光學活性胺基酸及胺基酸衍生物之基時，則包 (誚先閱讀背而之注&事項再填寫本石 _亀 經濟部中央標準局Θ工消费合竹杜印於 本紙?長尺度適用中國國家；(:!:隼（CNS ) A4ML格（210χ297/:Μί ) -4 482768 A7 五、發明説明（2 ) 含D和L的形式， 及關於它們的鹽類。 類似的環狀肽化合物例如揭示於 EP 0 6 3 2 053、DE 19 5 38 741 或 EP 〇 6 8 3 173 中。 本發明係基於發現具有價値特性的新穎化合物，尤其 是那些可用於製造藥物者。 已經發現式I化合物及它們的鹽具有非常有價値的藥 理特性以及良好的耐受性。它們特別充作爲英特格林（ 11^£1411)抑制劑，尤其是抑制〇；^-、0 3—或/3 5-英特 格林受體與配體的交互作用，例如，纖維蛋白原結合至/3 3 一英特格林受體。化合物在英特格林αν/3ι、αν03、 α v /3 5、α ! ! b /3 3以及α v々6和a v yS 8的情況係特別有 活性的，尤其是已經發現衛特柔丁（ vitronectin )受體 a v石3之有力的選擇性抑制劑。 經濟部中央疗i-^M工消费合竹杜印％ 此作用例如可由〗.W. Smith等人在生物化學雜誌26 I，12267 — 12271 (1990)中所述的方法 來證明。血管生成源對於血管英特格林與細胞外基~質蛋白 質之間的交互作用之依賴性係敘述於P.C. Brooks，R.A. Clark 和 D.A. Cheresh 於科學 2 6 4，5 6 9 - 7 1 (1 9 9 4 )中。 環狀肽抑制此交互作用的可能性及因此引發與血管生 成有關的血管細胞之脫噬作用（循序的死亡）係敘述於 p.C. Brooks, A.M. Montgomery, M. Rosenfeld, R.A. Reisfeld, 尺度適用中國國家標導（CNS ) ( 210x297.:,># ) .5. 經濟部中央標^-^UJ-消费合竹社卬於 -6- 482768 A7 hi 五、發明説明（3 ) Τ··Ηιι，G. Klier 和 D. A. Cheresh 於細胞 7 9 ’ 1 1 5 7 -6 4 ( 1 9 9 4 )。 式I化合物阻斷英特格林受體與配體的交互作用，例 如，（例如）血管生成原對於血管生成原受體（糖蛋白 Ilb/IIIa)，當作GPIIb/IIIa拮抗劑 ，阻止由於轉移所致的腫瘤擴散。此係由以下觀察所確認 〇 化合物可抑制金屬蛋白麟對於英特格林的結合，而因 此阻止細胞利用蛋白醭的酵促活性。 可發現環狀—RGD肽對於MMP - 2 (基質金屬蛋 白麟一 2 )與衛特柔丁受體α v々3結合的可抑制性，如於 P.C. Brooks 等人在細胞 85，683-6 9 3 (1996 )中所述者。 腫瘤細胞與血小板之交互作用形成微聚集物（微血栓 )而發生腫瘤細胞由局部腫瘤擴散入血管系統內。腫瘤細 胞在微聚集物中被保護遮蔽，而不被免疫系統的細胞所識 別。微聚集物能固定於血管壁，因此更進一步幫助腫瘤細 胞進入組織內。由於活化的血小板上纖維蛋白原上~纖維蛋 白原的形成而居間調解微血栓的形成，所以GP I I a/ I I I b被視爲有效的轉移抑制劑。 式I化合物可用在人類和獸醫學中當作藥學活性化合 物，尤其是用於預防及/或治療栓塞、心肌梗塞、動脈硬 化、炎症、中風、狹心症、腫瘤病、骨質溶解病如骨質疏 鬆病、病理性血管原疾病如炎症、眼科疾病、糖尿病性視 本紙張尺度適用中國國家棺準（CNS ) Λ4^ ( 210X2W公;ΓΪ (¾尤間请背而之注&f項办填g本Ή )

經漪部中央標^-.^H工消费合竹杜印災 482768 a — · — r™·™ .».« ------ ----—-------- ι ι ι ι· · -· - ------------- 五、發明説明（4 ) 網膜疾病、斑點變性、近視、眼組織漿菌病、風濕性關節 炎、骨關節炎、發紅性青光眼、潰瘍性結腸炎、克隆氏病 、動脈粥瘤硬化、牛皮廯、血管成形術後的再狹窄、多發 性硬化、病毒感染、細菌感染、黴菌感染、在急性腎臟衰 竭中及在用於支持和癒合過程中的創傷癒合中。 式I化合物可用當作具有抗微生物活性的物質，用於 使用生物材料、植入物、導管或心臟整律器的手術中。 它們具有抗菌作用。可由P· Valentin-Weigund等人在 傳染和免疫，285 1 — 2855中所述的程序來證明抗 微生物活性的功效。 因爲式I化合物係爲纖維蛋白原結合的抑制劑而因此 爲血小板上纖維蛋白原的配體之抑制劑，它們可用於活體 內當作診斷劑用於檢測及定位血管系統中的血栓，條件爲 它們（例如）經放射性或U V可檢測性殘基所取代。 式I化合物可用當作纖維蛋白原結合的抑制劑及當作 有效的輔助劑用於硏究不同活化態中的血小板之新陳代謝 或纖維蛋白原受體之細胞內訊息機轉。將倂入a標記〃的 可檢測單元，例如3 Η的放射同位素標記容許在結合至受體 後檢查所述的機轉。 式I化合物中，所存在的胺基酸可被改質以致於（：^^碳 被氮所置換，並保留側鏈。在此情況中，有所謂的氮雜-胺基酸。例如，在以下的氮雜-三肽中，其由胺基酸精胺 酸、甘胺酸及天冬胺酸所構成，甘胺酸的Ca碳係被氮所置 換。 本纸張尺度適用中國國家榡導(CNS ) Λ4^Γ(Τΐ〇χ29ΤΓ>'ί~) ΓΤΊ ^ (請1間讀背而之注*萝項办>/1巧本?]:)

482768 A / Η 7 五、發明説明（5

Arg-氮雜-Gly-Asp 魏 在依本發明的式I化合物中，至少一個胺基酸係總是 以氮雜一胺基酸存在。 以上及以下所列的胺基酸殘基之縮寫代表以下的胺基 酸之基： 經滴部中央桴搫历：只工消费合竹杜卬於 A 1 a 丙胺 酸 A s n 天冬 醯胺 A s P 天冬 胺酸 A r g 精胺 酸 C y s 半胱 胺酸 G 1 n 麩胺 醯胺 G 1 u 麩胺 酸 G 1 y 甘胺 酸 H i s 組織 胺酸 同 — P h e 同一 苯基苯胺 I 1 e 異白 胺酸 L e u 白胺 酸 L y s 離胺 酸 M e t 甲硫 胺酸 N 1 e 正白 胺酸 、1Τ 本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS ) /\4圯枯（210χ2Μ7ϋ -8- 482768 A7 H7 五、發明説明（6 ) 〇r η P h e P h g 鳥胺酸 苯基苯胺 苯基甘胺酸 4-Ha 1-Phe 4 —鹵苯基苯胺

Pro S a r S e r T i c T h r T r p T y r V a 1 脯胺酸 肌胺酸（N —甲基甘胺酸） 絲胺酸 四氫異喹啉一 3 —羧酸 蘇胺酸 色胺酸 酪胺酸 纈胺酸 舉例列出以下的氮雜-胺基酸 氮雜—A r g

Ησ '〇 經濟部中央標^^θ Η消费合竹杜印％ 氮雜—A s ρ 0 °Y〇H〇h 再者，以下者具有如下定義： Ac 乙醯基

本紙張尺度適用中國國家《導（CNS ) Λ4Α1格（210x297^# ) -9- 五、

發明説明（7 ) B 〇 c C B Z 或 Z D C C I D I P E A D M F E D C I » )碳化二亞胺 E t F m o c Η〇B t Me Μ B H A A7 B7 四丁氧羰基 苄氧羰基 二環己基碳化二亞胺 二異丙基乙胺 二甲基甲醯胺 經濟部中央橾:ί·而Μ工消费合竹社印於

M t r Ν Μ P Η 0 N S u 〇 B z 1 〇 t B u Oct 〇M e 〇E t P b f 呋喃一5一磺醯基 P 0 A 醯基 N —乙基一 N，N 乙基 9 —蕗甲氧羰基 1 一羥苯並三唑 甲基 4 —甲基二苯甲基胺 4 —甲氧基一2 ，3 N—甲基吡咯啶酮 N-羥基琥珀醯亞胺 苄酯 第三丁酯 辛醯基 甲酯 乙酯 一（二甲基胺基丙 ，6 —三甲基苯磺 、1Τ 2 2 ，4 ，7 —五甲基二氫苯並 苯氧乙醯基 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) /ΰ圯格（210χπ7 :,># ) -10 - 482768 Η7 1'發明説明（8 ) Sal T B T U ，Ν，Ν /，Ν Τ F A Τ r t 柳醯基 鄰一（1Η —苯並三唑一 1—基）一 Ν 一四甲基脲四氟硼酸酯 三氟乙酸 三苯甲基（三苯甲基）。 經消部中央標潭而Μ工消费合竹社印製 若上述胺基酸能以數種鏡像異構物出現， 下，例如作爲式I化合物的成分，所有這些形 的混合物（例如D L形式）係包含在內。再者 例如）本身已知的對應保護基給胺基酸以作爲 的成分。 所謂的前體藥物衍生物亦可包含在依本發 內，即是式I化合物經（例如）烷基或醯基、 所改質，它們在身體內快速裂解成依本發明的 。這些亦包括依本發明化合物的生物可降解性 物，例如敘述於國際藥物雜誌115，6 1 — (1 9 9 5 )中者。 未特別指明的胺基酸之組態係具有（S ) 態。 本發明更關於一種製備依申請專利範圍第 化合物和其鹽的方法，此方法特徵在於 a )式I化合物 Η — Z -〇 Η 本纸張尺度適用中國國家樣準（CNS ) /\4叱格（210Χ2π·:'># ) - 11 -

則以上和以 式以及它們 ，可提供（ 式I化合物 明的化合物 糖或低聚肽 活性化合物 聚合物衍生 6 7 或（L )組 1項之式I 訂 祁 2768 經濟部中央愫準局Κ工消費合竹杜印說 Α7 Η" 五、發明説明（9 ) 其中 Z 係一 aArg — aGly — aAsp — aX — a γ —, 一 aG 1 y — aAs p — aX— aY — aArg 一 aAsp — aX — aY — aArg — aGly —aX— aY— aArg — aG 1 y — aAsp 〜或

一 aY— aArg — aG 1 y — aAs p — aX 且 aArg、aGly、aAsp、aX 及 aY 具有 申請專利範圍第1項中所示之定義， 或式I I化合物的反應衍生物經環化劑所處理， 或 b)式I化合物經溶劑分解劑或氫解劑所處理以擺脫 其官能衍生物之一者， 及/或在於式I的鹼性或酸性化合物經酸或驗~所處理 而轉化成其鹽之一種。 以上和以下中，若未特別指明，則基a A r g、 aG 1 y、aAs p、aX及aY係具有式I中所示的定 義。 在上式中，烷基較佳爲甲基、乙基、丙基、異丙基、 丁基、異丁基、第二丁基或第三丁基，且亦更包括戊基、 本紙張尺度適用中國國家標導（CNS) Μ化格(210χ297λ>^ ) - 12 - (对先間讀背.而之注念^項再填寫本乃0

482768 Α7 ni 五、發明説明（10 ) 、2 —或 3 —甲基丁基、1，1 一、1，2 —或 2， 2 —二甲基丙基、1 一乙基丙基、己基、1 一、2 —、3 一或 4 一甲基戊基、1，1—、1，2 —、1，3 —、2 ’ 2 —、2，3 —或 3，3 —二甲基丁基、1 一或 2 —乙 基丁基、1 一乙基一1 一甲基丙基、1 一乙基一 2 —甲基 丙基、1，1，2 —或1，2，2 —三甲基丙基。 伸烷基較佳爲亞甲基、伸乙基、伸丙基、伸丁基、伸 戊基或伸己基。 、τ 所述的胺基酸和胺基酸殘基亦可爲衍生的，較佳N -甲基、N —乙基、N —丙基、N —苄基或（：01—甲基衍生物 。更佳爲A s p和G 1 u的衍生物，尤其是側鏈羧基的甲 基、乙基、丙基、丁基、第三丁基、新戊基或苄基酯，及 更亦爲A r g的衍生物，其在 一 NH - C ( = NH) - NH2基上可經乙醯基、苄醯基、甲氧羰基或乙氧羰基所取 代。 經濟部中央標^^Μ工消费合竹杜印象 胺基保護基較佳爲乙醯基、丙醯基、丁醯基、苯乙醯 基、苄醯基、甲苯甲醯基、POA、甲氧羰基、ζΓ氧羰基 、2，2，2 —三氯乙氧羰基、Boc、2 -碘乙氧羰基 、CBZ ( >苄氧羰基〃）、4 一甲氧基苄氧羰基、 Fmoc、Mtr或苄基。 式I化合物可具有一或多個對掌中心，而因此出現各 種不同的立體異構形式。式I包括所有這些形式。 因此，本發明尤其關於那些屬於式I的化合物，其中 本紙張尺度適用中國國家椋隼（CNS ) Λ4叱格（υοχπνΜί ) -13 - 482768

五、發明説明（11 ) 至 少 一 個 所述 基 具 有上 述 較 佳定 義 中 的 者。 可 以 由 以 下 副式 I a 至 I c ( 其 對 應 於式I ) 表 示 化合物的某些 較 佳 基 ， 其 中 未 較 詳 細 指 明 的 基 係具 有 式 I 下所示 的 定 義 ’ 但 是 其 中 在 I a ) 中 a A Γ g 係A Γ g > a G 1 y 係氮 雜 — G 1 y ， a A S Ρ 係A S P a X a Y 在各在各 案 例 中互 相 獨 地 爲 胺 基 酸 殘 基 選 商 於 A 1 a 、A S η A s ρ Λ A r g C y S G 1 η G 1 U G 1 y Η i s 、 I 1 e L e U L y s Μ e t P h e Ρ r 0 、 S e r Τ h r T r Ρ Τ y r V a 1 或 對 應 的 氮 雜 — 胺 基 酸 且 所 述 的 胺 基 酸 亦可 爲 衍生 的 > 在 I b ) 中 a A r g 係A r g a G 1 y 係氮雜一 Gly， 經濟部中央抒準而M工消费合竹社印裝 a A s ρ 係 A s p aX 係 Gly、Phe、D — Phe 或氮雜 -P h e，及 a Y 係 Gly、Val、Leu、Pro、 D — V a 1 、 D — Leu 或 D — Pro 或 本纸張尺度適用中國國家彳:f:準（CNS ) ( 210x297:M: ) -14- 482768 經滴部中央桴聲^’以^消费合竹社印裝 -15- Λ7 Η 7 五、發明説明（12 ) 對應的氮雜-胺基酸， 且所述的胺基酸亦可爲衍生的； 在 Ic)中 aArg 係 Arg， a G 1 y 係氮雜一 Gly， a A s p 係 A s p a X 係 Gly、Phe 或 D - Phe，及 a Y 係 Gly、N —苄基—Gly、Lys、 D — L y s 、 V a 1 、D — V a 1 、 或 對應的氮雜-胺基酸， 且所述的胺基酸亦可爲衍生的。 式I化合物以及製備它們所用的起始物質係由本身已 知的方法製備得，如敘述於文獻中者（例如，於標準作品 如 Houben-Weyl，Methoden der organischen Chemie 〔有機化 學的方法〕，Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart )，即是在已 知的且適合所述反應的條件下。於此情況中，亦可此使用 本身已知的變體，但是此處未更詳細說明。 · 若需要，亦可在現場形成起始物質以便它們不是由反 應混合物中分離出，但是立即更進一步反應以給予式I化 合物。

較宜上可在肽合成的條件下將式II化合物環化而獲 得式I化合物。於此情況中，亦可慣用的肽合成方法有利 地執行反應，例如敘述於Houben-Weyl，I.C.，第1 5 / I I 本纸張尺度適用中國國家挛（CNS ) ( 210χ：^λ>^ 7

482768

五、發明説明（13 ) 冊，第1至806頁（1974)。 反應較宜上發生在脫水劑的存在中，例如碳化二亞胺 如DCCI或EDCI，以及例如丙烷膦酸酐（參考：應 用化學92，129 (1980))、二苯基磷醯疊氮化 物或2 —乙氧基—N —乙氧基類基—1 ’ 2 —二氫喹啉’ 在惰性溶劑中，例如鹵代烴如二氯甲烷，醚如四氫呋喃或 二噁烷，醯胺如DMF或二甲基乙醯胺，腈如乙腈，在二 甲亞碾中或在這些溶劑的存在中，在溫度介於約一 1 〇和 4 0 °之間，較佳介於0和3 0 °之間。爲了促進分子內 的環化作用領先分子間的肽鍵結，有利上在稀溶液中進行 〇 視所用的條件而定，反應時間係介於幾分鐘和1 4天 之間。 經濟部中央標準而只工消費合竹社印裝 、-口 代替式I I化合物，亦可以採用式I I化合物的衍生 物，較宜上爲一種經預活化的羧酸或羧酸鹵化物、對稱的 或混合的酐或活性酯。在典型醯化反應中用於活化羧基的 此型基係敘述於文獻中（例如於標準作品如Houben-Weyl， Methoden der organischen Chemie〔有機化學的方法〕， Georg-Thieme-Verlag，Stuttgart )。有利上在現場形成活性 酯類，例如藉添加HOB t或N -羥基琥珀醯亞胺。 一般而言，當使用羧酸鹵化物於酸結合劑（較佳爲有 機鹼如三乙胺、二甲基苯胺、吡啶、喹啉）之存在時，反 應係在惰性溶劑中進行。亦有利上爲可添加鹼金屬或鹼土 金屬氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽或是鹼金屬或鹼土金屬 本紙張尺度適用中國國家椋導（CNS ) Λ4#ΜΜ 210χ^ϋ ) - 16 - 482768 ι________Η 7 五、發明説明（14 ) — < 的弱酸之另一種鹽，較佳爲鉀、鈉、鈣或鉋鹽。 一般而言，式I I化合物的起始物質係新穎的。它們 可由已知的肽合成方法製備得。可合成線型肽，例如依照 Merrifield (應用化學 9 7，801 — 812 1985) ，在固相上，即一可泡脹性的聚苯乙烯樹脂上。 可藉溶劑分解或尤其是水解或藉氫解而脫離其官能衍 生物以更進一步獲得式I化合物。 代替一或多種自由胺基及/或羥基，溶劑分解或氫解 所用的較佳起始物質係爲那些含有對應的經保護的之胺基 及/或羥基者，較佳爲（代替Η原子，其鍵結至N原子） 帶有胺基保護基，例如那些對於式I者但是不含ΝΗ2基而 含NHR 基（其中R /係胺基保護基，例如Β 〇 c或 C Β Ζ ) ° 起始物質更佳爲（其代替羥基的Η原子，帶有羥基保 護基，例如那些對應於式I者而非羥苯基）含有R 〃◦-苯基（其中R"係羥基保護基）。 數個相同或不同的經保護胺基及/或羥基亦可出現於 起始物質的分子中。若所出現的保護基係互相不同^，則在 許多情況中可選擇地移除它們。 措詞a胺基保護基"係一般已知的且關於那些適用於 保護（封阻）胺基防止化學反應的基，但是它們在所欲的 化學反應已經在分子中的其它位置完成後可被輕易地移除 。該基之代表尤其是未經取代的或經取代的醯基、芳基、 芳院氧甲基或芳院基。因爲胺基保護基係在所欲的反應（ 本纸張尺度適用中國®家標準（CNS ) /\4化格（210x29^# ) - 17- ^1間讀11)而之注*萝項再^朽本7]( 鬌. 經濟部中央標準工消费合竹杜印於 482768 五、發明説明（15 ) .峰 或反應順序）後被移除，所以不嚴苛要求它們的性質和大 小；然而，具有1 一 2 0個，尤其是1 一 8個碳原子者係 較宜的。措詞 >醯基〃係以本發明方法有關的最寬意義來 解釋。其包括衍生自脂族、芳脂族、芳族或雜環羧酸或磺 酸的醯基，且尤其是烷氧羰基、芳氧羰基及特別是芳烷氧 羰基。此型醯基的例子是烷醯基如乙烯基、丙烯基、丁烯 基；芳院醯基如苯乙醯基；芳酿基如卡醯基或甲苯甲醯基 ;芳氧烷醯基如P 0A ;烷氧羰基如甲氧羰基、乙氧羰基 、2，2，2 —三氯乙氧羰基、BOC、2 —碘乙氧羰基 ;芳烷氧羰基如CBZ (苄氧羰基）、4 一甲氧基苄氧羰 基、Fmo c ;芳磺醯基如Mt r。較佳的胺基保護基係

、1T

Bo c及Mt r，以及CBZ、Fmo c、苄基及乙醯基 〇 經濟部中央標^-^M工消费合作杜卬敕 措詞〜羥基保護基〃同樣地係爲一般已知的且關於那 些適用於保護羥基防止化學反應的基，但是它們在所欲的 化學反應已經在分子中的其它位置完成後可被輕易地移除 。該基之代表上述未經取代的或經取代的芳基、芳烷基或 醯基，以及烷基。因爲羥基保護基係在所欲的反應或反 應順序）後再度被移除，所以不嚴苛要求它們的性質和大 小；具有1 一 2 0個，尤其是1 一 1 0個碳原子的基係較 佳的。羥基保護基的例子尤其是苄基、對硝基苄醯基、對 甲苯磺醯基、第三丁基及乙醯基、苄基及第三丁基係特佳 的。天冬胺酸和麩胺酸中的C0〇Η基較佳係爲它們的第 三丁酯所保護的形式（例如A s p (〇B u t ))。 本纸張尺度適用中國國家椋準（CNS )八4規格(Tl0x29T：-> η ) - 18 - 經濟部中央忭準局負Μ消费合作杜印於 482768 }ί7 - -------- ------------- 五、發明説明（16 ) 式1化合物被脫除它們的官能衍生物-視保護基而定 -例如使用強酸，有利上使用T F Α或過氯酸，但是亦可 使用其它無機酸如鹽酸或硫酸，強有機竣酸如三氯乙酸或 擴酸如苯-或對甲苯擴酸。亦可以有附加的惰性溶劑存在 著’但非經常需要的。適合的惰性溶劑較佳係有機溶劑， 例如羧酸如醋酸，醚類如四氫呋喃或二噁烷，醯胺類如 D M F，鹵代烴類如二氯甲烷，以及醇類如甲醇、乙醇或 異丙醇，還有水。上述溶劑的混合物係更適合的。較宜使 用過量的T F Α而不需添加其它溶劑，過氯酸係爲醋酸與 7 0 %過氯酸以9 : 1之比的混合物形式。裂解的反應溫 度有利上係介於約0至約5 0°之間，較宜上裂解係在1 5 和3 0 °之間（室溫）執行。 較佳（例如）可使用TFA/二氯甲烷或約3至5N HC1/二噁烷於15 — 30°來移除Boc、 OBu t和Mt r基。Fmo c係使用二甲胺、二乙胺或 吡啶在DMF中的約5至50%溶液於15—30° 。 三苯甲·基用於保護胺基酸組織胺酸、天冬醯胺、麩胺 醯胺及半胱胺酸。視所欲的最後產品而定，使用F A / 1 0 %硫酚進行移除，所述的全部胺基酸被之三苯甲基被 移除，當使TFA/苯基甲基醚或TFA/硫苯基甲基醚 時，僅H i s、A s η及G 1 η的三苯甲基被移除，但是 其留在Cys側鏈上。 可移除氫解能移除之保護基（CBZ或苄基）’例如 ，藉氫於觸媒（例如貴金屬觸媒如鈀’有利上在撐體如碳 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) /\4圯格(2Ι0χ2Μ7λ>^ ) - 19- («71間讀背而之注&#項办^巧本7}0

482768 A? __ 1ί7 五、發明説明（17 ) .鬌 上）的存在下作處理。適合的溶劑如上述，尤其是例如醇 類如甲醇或乙醇或醯胺類如DMF。一般而言，在溫度介 於約0和100°之間及壓力介於約1和200巴之間， 較佳在20 — 30 °及1 一 10巴進行氫解。CBZ基的 氫解係容易進行的，例如，在5至1 0% P d/C上於 甲醇中或使用甲酸銨（代替氫）在P d/C上於甲醇/ DMF中在20—30°。 、11 經浐部中央標搫灼巧工消费合竹社卬裝 使用酸可將式I的鹼轉化成相關的酸加成鹽，例如等 量的鹼與酸在惰性溶劑如乙醇中反應，隨後蒸發。特別地 ，產生生理上可接受鹽的酸係適用於此反應。因此，可用 無機酸，例如硫酸、硝酸、氫鹵酸如鹽酸或氫溴酸、磷酸 如正磷酸、胺磺酸，以及有機酸，尤其是脂族、脂環族、 芳脂族、芳族或雜環單-或多元羧酸、磺酸或硫酸，例如 甲酸、乙酸、丙酸、三甲基乙酸、二乙基乙酸、丙二酸、 琥珀酸、庚二酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、乳酸、酒石 酸、蘋果酸、檸檬酸、葡萄糖酸、抗壞血酸、菸鹼酸、異 菸鹼酸、甲一或乙磺酸、乙二磺酸、2 —羥基乙磺酸、苯 磺酸、對甲苯磺酸、萘單一及二磺酸、月桂基硫酸生理 上不可接受酸之鹽類，例如苦味酸鹽可用於分離及/或純 化式I化合物。 另一方面，與鹼反應可將式I之酸轉化成其生理上可 接受之金屬或銨鹽中的一種。此情況中可用的鹽尤其是鈉 、鉀、鎂、鈣和銨鹽，以及經取代的銨鹽，例如二甲基-、二乙基一或二異丙基銨鹽，單乙醇一、二乙醇一或二異 本紙張尺度適用中國國家ft準（CNS ) Λ4㈣（210χΤϋ了 :2〇: 482768 A7 — 一 ----------------- .________ 五、發明説明（18 ) 丙基銨鹽，環己基一或二環己基銨鹽、二；基伸乙二錢鹽 ，以及例如與精胺酸或離胺酸的鹽。 本發明更關於使用式I化合物及/或它們的生理上可 接受鹽於製造藥學製劑，尤其是以非化學之方式。在本文 中，可將它們帶入適當的劑量形式，連同至少一種固體、 液體及/或半液體賦形劑或輔助劑，且若適當的話，合倂 一或多種其它活性化合物。 本發明又關於藥學製劑，其包括至少一種式I化合物 及/或一種其之生理上可接受鹽。 這些製劑可用於人類或獸醫學中當作藥物。適合的賦 形劑係有機或無機物質，它們適用於經腸（例如口服）或 非經腸給藥，局部施用或以吸入性噴霧形式來給藥，該賦 形劑不會與新穎化合物反應，其例如爲水、植物油、苄醇 、伸烷二醇、聚乙二醇、三醋酸甘油酯、明膠、碳水化合 物，如乳糖或澱粉、硬脂酸鎂、滑石、石油凝膠。特別地 ，錠片、九劑、包衣的錠片、膠囊、粉末、顆粒、糖漿、 汁或點滴係用於口服給藥，栓劑係用於直腸給藥，溶液， 較佳爲油性或水性溶液，以及懸浮液、乳液或植/片係用 於非經腸給藥，而軟膏、乳霜或粉末係用於局部應用。新 穎化合物亦可經過冷凍乾燥，而所獲得的冷凍乾燥物例如 可用於製造注射製劑。所示的製劑可能經滅菌的及/或可 含有輔助劑如潤滑劑、防腐劑、安定劑及/或潤濕劑、乳 化劑、影響滲透壓用的鹽、緩衝物質、色料、芳香劑及/ 或一或多種其它活性化合物，例如一或多種維生素。爲了 本纸张尺度適用中國國家標窣（CNS ) ( 210X 297A尨） -21 - (^1間讀背而之注*^-項洱^寫本负 9今 482768

五、發明説明（19 ) 當作吸入性噴霧給藥，可用的噴霧劑含有溶於或懸浮於推 進劑或推進劑混合物（例如C〇2或氯氟烴）中的活性化合 物。有利上，此情況中所用的活性化合物係微粒化形式， 可能有一或多種附加的生理上可容忍性溶劑如乙醇的存在 。吸入性溶液可藉慣用的吸入器來幫助給藥。 式I化合物及它們的生理上可接受鹽係可用當作英特 格林抑制劑於控制疾病，尤其是栓塞、心梗塞、冠狀動脈 心臟病、動脈硬化、腫瘤、骨質疏鬆病、炎症及感染。 依本發明的式I化合物及/或它們的生理上可接受鹽 係亦用於病理學病變中，其受血管生成之支持或傳播，尤 其是腫瘤中或風濕性關節炎中的血管生成。 、-口 在此情況中，依本發明的物質通常係以類似於其它已 知的市場上可取得的肽之方式來給藥，但是尤其是類似於 US— A - 4 4 7 2 305中所述的化合物，較佳之 經浐部中央桴^^消费合竹社印裝 單位劑量爲約介於0 · 0 5和5 0 0毫克之間，尤其是介 於0 · 5和1 0 0毫克之間。每日劑量較佳介於約 0 · 01和2毫克/公斤的體重之間。然而各病患的特殊 劑量係依賴於所有的因素種類，例如所用的特定化~合物之 功效、年齡、體重、健康的一般狀態、飮食、給藥的時間 和途徑、排泄速率、藥學組合及所要治療的個別病症之嚴 重性。較佳爲非經腸給藥。 式I化合物更可用當作英特格林配體以便用於製備親 和層析法用的管柱，供製備純形式的英特格林。配體，即 是式I化合物，在此案例中經由錨官能，例如A s p的羧 本紙張义度適用中國國家枚準（CNS ) Λ4ΚΜ 21〇x2^H—— -22- 經漪部中央標來而K工消费合竹社印％ 482768 A7 H7 五、發明説明（2〇 ) 基，偶合至的聚合撐體。 適合的聚合撐的是聚合固相，較佳具有親水性，係爲 肽化學中本身已知的，例如交聯的多糖如纖維素、瓊脂糖 或交聯葡聚糖（Sephadex®)、丙烯醯胺、基於聚乙二醇或 Tentakel 聚合物 ®。 於條件下如於胺基酸之縮合所慣用的或本身已知的條 件下製備英特格林純化用的親和層析法之材料。

式I化合物含有一或多個對掌中心而因此能以消旋或 光學活性形式存在。可藉本身已知的方法機械地或化學地 將所獲得消旋物分離成鏡像異構物。較宜上，藉與光學活 性分離劑反應而由消旋物形成非鏡像異構物。適合的分離 劑例如是光學活性酸，如D和L型的酒石酸、二乙醯酒石 酸、二苄醯酒石酸、苦杏仁酸、蘋果酸、乳酸、或各種不 问的光學活性棒腦礦酸如Θ -棒腦礦酸。亦有利的是藉一* 塡充有光學活性分離劑（例如二硝基苄醯苯基甘胺酸）的 管柱之助來達成鏡像異構物的分離；適合的溶析液例如是 己烷/異丙烷/乙芪以（例如）體積比82 : 15 : 3的 混合物。 I 當然，亦可以藉上述方法使用已經爲光學活性的起始 物質來獲得式I的光學活性化合物。 以上及以下的溫度皆以°C表示。在以下的實例中，以 下實例中，A慣用的處理A係意味：若需要，添加水，調 整混合物，右需要’至pH介於2和1 0之間，視最終產 品的組成而定，及用醋酸乙酯或二氯甲烷萃取，分離出有 本紙張尺度適用中國國家枕準（CNS ) Λ40ϋ( 210X297.:,>> ) -23: —~ (誚1間讀背而之注*¥項再^{巧本及)

經浐部中央栉洚^:)}工消费合竹杜印繁 482768 ΙΠ 一 五、發明説明（21 ) 機相，在硫酸鈉上乾燥及蒸區，及藉層析法在矽膠上及/ 或藉結晶作用來純化殘留物。矽膠上的R f値；溶析液：正 丁醇/醋酸/水3:1:1(A)，氯仿/甲醇9:1( B ) 〇 RT —以下系統中的HP L C上的滯留時間（分鐘） 管柱：Nucleosil — 5 — C18 管柱（250X4 ; 5 微 米）； 所用的溶析液爲梯度的含有〇·9%TFA的乙腈和 含有1 · 1%TFA的水（各情況中的數據係以乙腈的體 積百分率算） 在2 2 0和2 4 5 n m檢測。。 較佳於所示條件下執行非鏡像異構物的分離。 質譜法（MS) : FAB (快速原子轟擊）（M + Η ) + 實例1 將1當量D I Ρ ΕΑ和2 0 0毫克對硝苯基氯甲酸酯 (C 1 一 C ◦一 Ρη ρ) /1 〇毫升二氯甲烷加到2 80 毫克Fm 〇 c —胼/ 2 0毫升二氯甲烷的溶液中。 將2當量所產生的Fmo c — NHNH— C0 — Ρ η ρ /二氯甲烷及3當量D I Ρ EA加到當量H — A s p (〇t Bu) —樹脂中及搖動；[小時。在用二氯甲 烷洗後，用DMF及再度用二氯甲烷洗，獲得？111() c 一 本纸張尺度適用中國國家樘準（cns ) -------------------

經濟部中央標搫豹鈒J:消费合竹社印說 482768 H7 五、發明説明（22 ) NHNH — C〇 一 Asp (〇tBu)—樹脂。 用2 0%哌啶/ DMF來移除171110 c基。 在其次步驟中’使Fmo c — Ar g (Pd f ) — 〇H、Fmoc — Va 1 一 〇H&Fmoc— D-Phe 一〇H偶合在上，在隨後的偶合之前用哌D定移除各案例中 的F m 〇 c基。 獲得 Fmoc - D - Phe - Va 1 - Ar g ( Pdf) — NHNH — C〇一Asp (OtBu)—樹脂 ο 使用醋酸/三氟乙醇/二氯甲烷（1 : 1 : 3)以由 樹脂移除肽。 獲得 Fmoc - D - Phe— Va 1— Arg (Pd f) — NHNH — C〇 一 Asp (〇tBu) — 〇H。 將 0 · 1 毫莫耳 Fmoc-D - Phe-Va 1-A r g (Pdf) - NHNH-CO-A s p (0 t Bu )一OH醋酸酯/50毫升NMP之溶液徐徐逐滴加到3 當量TBTU、3當量HOBT和1 0當量D I PEA/ 5 0毫升Ν Μ P的溶液中。2小時後，移除溶劑及用慣用 的方式處理殘留物。獲得環一（Ar g —氮雜一 G 1 y — Asp — D — Phe - Val) ，RT12.8 分鐘（ 20 — 80，30 分鐘）；FAB576。 類似地獲得以下化合物： 環—（Ar g -氮雜—G 1 y— As p — Phe— D 一 Val)室溫 9.5 分鐘（20 — 80，30 分鐘）； 本紙張尺度適用中國國家掠4M CNS )又4此枯(210X 297公夂) -25 - (^1間讀背而之注态私項再填{巧本石)

經消部中央桴枣消费合竹杜印於 -26- 482768 Λ7 Η 7 五、發明説明（23 ) F A B 5 7 6 ; 環一(Ar g —氮雜一G 1 y — As p — D — Phe -NMe-Val) ，FAB590; 環一（Arg —氮雜一 Sa r - Asp — D — Phe -V a 1 ) ，FAS590; 環一（Ar g —氮雜—A1 a— Asp — D — Phe -Val) ，FA3590; 環—（Ar g —氮雜—G 1 y - As p— D_Ly s -Val)； 環一（Ar g —氮雑—G 1 y - As p — D — Phe -L y s ); 環—（Arg —氮雜 _Gly— Asp — D — Phe ~ G 1 y ); 環—（Arg —氮雜—Gly — Asp — D — Phe —Ala); 環—（Ar g —氮雜—G 1 y— As p — D-Phe — Phe); 環—（Ar g — 氮雜一 G 1 y - As p — D — P h e —Leu); 環一（Ar g —氮雜—G 1 y - As p — D — Phg -Val);

環—（Ar g — 氮雜一 G 1 y - As p — Phe—G 1 y );

環—（Ar g —氮雜—G 1 y - As p — Ph e— D 本紙張尺度適用中國國家柁率（CNS ) ( 21〇X2〇>% )

482768 —__ 1(7 五、發明説明（24 ) — Ala)。 以下實例關於藥學製劑： 實例A :注射小瓶 用2N鹽酸/3升雙重蒸餾之水將100克式I的活 性化合物調整至p Η 6 · 5，經滅菌過濾，分配入注射小 瓶內，於滅菌條件下經冷凍乾燥及無菌密封。各注射小瓶 含有5毫克活性化合物。 實例Β :栓劑 2 0克式I的活性化合物與1 〇 〇克大豆卵磷脂及 1 4 0 0克可可脂熔合，倒入模具內及讓其冷卻。各栓劑 含有2 0毫克活性化合物。 實例C :溶液 由1克式I的活性化合物、9 . 38克NaH2P〇4 • 2H2〇、28 · 48 克 Na2HP〇4· 12H2〇及 0 ·1克氯化苄烷銨/9 4 0毫升雙重蒸餾之水來製備溶 液。將其調整至ρΗ6 · 8，作成1升及藉照射滅菌。此 溶液可用爲滴眼劑形式。 實例D :軟膏 於無菌條件下使5 0 0毫克式I的活性化合物混合 99·5克石油凝膠。 本紙張尺度適用中國國家標嗥（CNS ) ( 210x 29; -27- (¾先間讀背而之注^卞項再^3本7]二

482768 五、發明説明（25 ) 實例Ε :錠片 依慣用方式將1公斤式I的活性化合物、4公斤乳糖 、1 · 2公斤馬鈴薯澱粉、0 · 2公斤滑石及0 · 1公斤 硬脂酸鎂之混合物壓縮以獲得錠片，俾各錠片含有1 〇毫 克活性化合物。 實例F :包衣的錠片 類似於實例Ε，壓製錠片，然後依慣用的方式用蔗糖 、馬鈴薯澱粉、滑石、黃蓍膠和色料的包衣料來塗覆它。 實例G :膠囊 依慣用方式將2公斤式I的活性化合物分配入硬的明 膠膠囊內，俾各膠囊含有2 0毫克活性化合物。 實例Η :安瓿 使1公斤式I的活性化合物在6 0升雙重蒸餾的水中 之溶液經過減菌過濾，分配入安瓿內，於滅菌條件下冷凍 乾燥及無菌地密封。各安瓿含有1 0毫克活性化合物。 實例I :吸入性噴霧劑 將1 4式I的活性化合物溶於1 0升等滲Na C 1溶 液，及將溶液分配入市場上可取得的具有泵機構之噴霧容 器內。溶液可噴入口內或鼻內。一次噴霧（約0 · 1毫升 )相當於約0 · 1 4毫克劑量。 紙张尺度適用中國國家梢:導（CNsYa4規格(210χ297.；λ^ ) . 28 - 482768 -------------------------------……...，… 卜7月、0::丨 mi 附件C:第87111008號專利申請案 中文補充藥理報告 民國9 0年9月修正 藥理報告 受體抑制分析 得自血小板之純化人類英特格林GPIIbllla (與a lib冷3 一致）與得自足孕胎盤之αν/33、αν05與αν/?6被吸附 至微滴定盤的孔中，然後以維生素Η基化互補配體-衛特柔 丁（ vitronectin，VN )來對抗 αν/?3、αν/?5 與 αν/36， 而以纖維蛋白原（FGN )來對抗α Π b 0 3，且其中均有數 量漸增之測試化合物存在。 方法：1 // g/mL維生素Η —配體與1 // g/mL塗覆 受體一同培養，且其中存在有連續稀釋之肽類。3 0°C 3小 時後，以抗-維生素Η -鹼金屬磷酸酯酶偵測法量出結合之 配體。 文獻：Charo, I.F., Nannizzi, L., Smith, J.W. and Cheresh, D.A., J. Cell. Biol. Ill, 2795-2800(1990). 表1 維生素H基化配體結合至人類胎盤αν々3、αν/35與a v /3 6以及血小板α Π b々3的1<：50値 氮雜化合物與非氮雜肽類相比較 序列’ . emS代碡:： IC5〇 fnMl !C5〇 fnM] IC5〇 [nM] IC5〇 [nMl / VN: ανβ3 VN: ανβ5 VN: ανβ6 FGN: al!b(33 ·： i -(Arg-fl^Gly-Asp-D-Phe-Val) 121977 2.6 540 6600 3200 4 環-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Val) 66203 4.3 720 10 1700 ·: .環.-(Arq-氣雜 Glv-Asp-Phe-D-Val) 121976 2.8 >10000 500 5 •.環-(Arg-Gly-Asp-Phe-D-Val〉 62187 |89 >10000 無數據 ..: 1700 1 ·環一（Arg —氮雜 Gly — Asp — D — Phe — Val)對 α V 沒 6 幾乎沒有抑制活性，相較於環一（Ar§ 一 Gly 一 Asp — D - Phe - Val)而言，所以表示該氮雜化合物的選擇性較 高。 2 ·環—（Arg -氮雜 Gly - Asp - Phe — D - Val)對 a v /3 3 的親和性較高，相較於環—（Ar§ 一 Gly — Asp — Phe — D —Val) 〇 3 ·環—（Arg - 氮雜 Gly — Asp - Phe - D - Val)顯不較筒 之α Π b /33纖維蛋白原交互作用，相較於環一（Arg 一 Gly — Asp - Phe - D - Val)而言，所以·表示環一（Arg —氮雜Gly - Asp - Phe — D— Val)爲混合抑制劑。

Claims (1)

1. 482768

   中文申請專利範圍修正本 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 民國91年2月修正 1 · 一種選自下列之化合物， a) 環一（Arg — 氮雜—Gly—Asp—D — P h e - V a 1 ); b) 環—（Ar g —氮雜—G 1 y— As p — Phe 一 D — V a 1 ); 及它們的鹽。 2 · ~種製備如申請專利範圍第1項之化合物及它們 的鹽之方法，其特徵在於 Ψ請專利範圍第1項之化合物經溶劑分解劑或氫解 劑所處理以擺脫其官能衍生物之一者， &/或在於如申請專利範圍第1項之化合物的鹼性或 酸性化合物經酸或鹼所處理而轉化成其鹽之一種。 3 · —種用作爲英特格林（mtegrin)抑制劑之醫藥組 成物’其特徵在於含有至少一種如申請專利範圍第1項之 化合物及/或一種其生理上可接受鹽。 4 ·如申請專利範圍第1項之化合物，及它們的藥理 上可接鹽，係當作英特格林（integdn)抑制劑，用於控制 栓塞、心梗塞、冠狀動脈心臟病、動脈硬化、腫瘤、骨質 疏鬆病、炎症及感染。 5 ·如申請專利範圍第1項之化合物，及/或它們的 藥理上可接鹽，係用於受血管生成之支持或傳播的病理學 本紙張尺度適用中國國家棣準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ΓΤΊ ' 482768 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 病變中。 6 ·如申請專利範圍第1項之化合物，及/或它們的 藥理上可接鹽，係用於製造藥物。 7 ·如申請專利範圍第1項之化合物，及/或它們的 藥理上可接鹽，係用於控制疾病。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印¾ -2- 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS ) A4洗格（210 X 297公釐）