TW321640B

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Publication number: TW321640B
Application number: TW084109669A
Authority: TW
Original assignee: Novo Nordisk As
Priority date: 1994-08-17
Filing date: 1995-09-15
Publication date: 1997-12-01
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Description

321640 ΑΊ Β7 五、發明説明（/ ) 發明之領域本發明係有翮具有之新穎N—取代的蔡稠合内醣胺及其塩，其製備方法，包含其之醫藥組成物，該等化合物作為藥物之用途及其於因缺乏生長激素所造成之内科疾病的治療之用途。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 袈訂經濟部中央樣準局男工消費合作杜印裝本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS〉A4規格（210X297公董〉經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 32丄64〇_^_ 五、發明説明（i) 發明；> 背軎生長激素為一種剌激所有組纗生長能力之激素。此外，生長内泌素已知於代謝作用具有數種影響，例如蛋白質合成和自由脂肪酸活動的剌瀲及產生從碳水化合物至脂肪酸代謝的能量代謝之開關。因此，生長瀲素之缺乏造成數種嚴重的内科病，例如侏僑症。生長激素由腦下腺釋放。該釋放在·數種激素和神經傅導物質直接或間接嚴密的控制。生長激素釋放可Μ生長激素釋放激素（GHRH)激剌和以生長激素釋放因子抑制。在此二種狀況中該激素皆由丘腦下部釋放但其作用主要是經位於腦下腺特定接受器作為媒介。亦已揭示其他來自腦下腺激剌生長激素釋放的化合物。例如，精胺酸，L-3,4二羥苯丙胺酸（L-多巴），髙血糖原質分解因子，血管加壓素· PACAP (腦下腺的腺苷酸環化酶活化肽），蕈毒鹼接受器作用劑和合成六肽，藉由在腦下腺上之直接影響或藉由影響 GHRH及/或來自丘腦下部之生長激素釋放因子的GHRP (生長激素釋放肽）釋放内生性肽。在内科病中，期望增加生長激素之含量，生長激素之蛋白質性質使得非經腸道給藥是非可行的。再者，迄今其他作用促泌素已知，例如GHRH，GHRP和PACAP亦為較長肽類，為此原因口服給藥是不可行的。然而數種間接作用化合物可口服給藥，例如L-多巴和蕈毒鍮接受器作用劑，雖然該等化合物之用途因其引起之副作用而受阻礙。本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4规格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意Ϋ項再填寫本頁) 袈

、1T 經濟部中央橾準局貝工消費合作社印裂五、發明説明（〜）發明夕説明本發明係有關·非肽（non-peptidylic)性質可增加内生性生長激素之化合物。該等新穎化合物可Μ非經腸道，經鼻或口服給藥。於 W0 92/16542， W0 94/07483 * W0 92/07486， W0 94 /05634， US 5,310,737， W0 95/09633， US 5,283,241 ， GB 2,273,046* US 5,284,841- W0 95/12598· W0 95/032 89，US 5,374,721和W0 95/03290中，Ν-取代之苯稠合内醢胺|其中Ν-取代基的取代之苯基或聯苯基形式部分被揭示為促進人類和勡物中生長激素之釋放。其他不同雜環的 Ν-取代之苯稠合内醢胺係包括於W0 9 4 /0 7 48 6，W0 9 4 /0 8 5 83和US 5,2 6 4,84 1中揭示Ν-取代基中。於US 4,2 2 8 , 1 5 6和 W0 9 4/ 1 1 0 1 2係揭示於合成二肽和W0 9 4 / 1 3 6 9 6中，連接至笨稠内醢胺之螺一六氫吡啶被揭示為生長激素釋放化合物。本發明之化合物不同於該等揭示於上述舉例之參考資料的化合物，其中該内醢胺稠合於萘環。除了上述舉例之參考資料外，US 5, 124,328和5,077, 290揭示Ν -取代-2-雜環嗎啉衍生物作為在動物中之動物生長抑制促劑。再者，美國專利第5,G30, 640，4,906,645 和5,013,578號中肢乙酵衍生物被揭示作為在動物中之動物生長抑制促劑。本發明係關於新穎具有通式I的N-取代之蔡稠合内醢胺本紙張尺度逍用中國國家標率（CNS ) A4蟓格（210X297公釐） (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁)

*1T i 321640 A7 ___B7 五、發明説明（φ ) R1

(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局—工消費合作社印策式中R1 ，R2和R3分別為氫，鹵素，三氟甲基，

Ci _6 _烷基，Ci _6烷氧基或 C: _6烷硫基；η為 0 或 1 ; Ρ 為 0，1 或 2;q 為 0，1 ，2，3，或 4; w 為 0 ，1 或 2 ; X 為-0-，>S(0)ffl 或〉N-R4 ，其中 R4 為氫或Ci _6烷基；m為0，1或2 ; A為

其每一個可經一個或K上選自鹵素，胺基，Ci _6烷胺基，Ci _6烷基，Ci _6烷氧基或Ci _6烷硫基之取代基取代；及其中Y為= N-，及z為-0-，-S -或〉N-R5 ，其中R5為氫或Ci _6烷基； —1 0 _ 本紙張尺度適用中國國家梂準（CNS ) A4规格（210X297公釐） A7 B7 五、發明说明（^ B為氫或

或

Ν 其每一個可能經一個或Μ上選自鹵素，胺基，Ci -s烷胺基，Cl _6烧基* Cl _6燒氧基或Cl _6燒硫基之取代基取代；及其中Y和z如上定義； M 為一 CO〇Ri2 - - C 0 N R 1 2 R 1 3 , -NHCONR12 R13 或- SOz NR12 R13 ，其中R1 2和R1 3分別為氫，Ci _e烷基或C4 _8環焼基，或Μ為可经一個或Μ上選自鹵素，胺基，C i _6 烷胺基’Ci-6烷基’ （：1_6烷氧基或（：1-6烷碇基取代之四唑，三唑，皞二唑和噻重氮（噻二唑）之任何異構物；D為 R8 R9 — i-------《装------訂------1 i (請先W讀背面之注意Ϋ項再填寫本頁) 經濟部中央揉準局員工消费合作社印裂 (0¾ R7

N R1 其中r和s分別為0，1 ，2或3 ; R7和R8分別為氫 -11 - 本紙張適用中國國家揉準（CNS ) 210X297公釐）

經濟部中央揉準局貝工消费合作社印製 A7 ___B7_ 五、發明説明（έ ) 或Ci -1 〇烷基；或R7和R8可連接在一起形成烷基橋，其中該橋包含2 — 6個碳原子；或每一R7和R8可分別為連接至R9和Ri。之一形成烷基橋，其中該橋包含2 — 5個碳原子；R9和ri 〇分別為氫，苯基，經取代苯基’支鍵或非支鍵Ct 。-烷基或支鐽或非支鐽 Ci—10-羥烷基；或其藥學上可接受塩。本文中所有式中之η，p，q ，w，m，r和s為整數或0。該等具有通式I之化合物可藉由下列方法製備：方法A : S.1 R3 1 ~

N / Η Π

一種式II之化合物，其中R1 » R 2 · R 3 ，X，D ，η和p如上定義，與式III化合物，其中A，B，w和 Q如上定義和L為適合之離去基如鹵素，對-甲苯磺酸塩或甲磺酸塩進行反應。該烷化反應可在溶劑如N，N-二甲基 -1 2- 本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS ) A4规格（2丨〇><297公釐） (請先Μ讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T

U 經濟部中央標準局只工消费合作社印製 A7 B7 五、發明説明（7 ) 甲醸胺或二甲基亞碾中鹼如氫化納存在下於髙至所使用之溶劑回流溫度進行例如1至120小時。式II之化合物可藉由與揭示於W0 92/16524之相同方法製備及式III之化合物可藉由與該技藝習知之方法（例如揭示於 C 〇 a p r e h e n s i v e H e t e r 〇 c y c 1 i c C h e m i s t r y，第 5 和 6 卷，Pergamon Press ,1 984 ; Heterocyclic Compounds 第7卷，Wiley，1961)相同方法製備。在某些狀況下必須保護使用於上述方法中的中間物例如使用適合保謖基保護式II和III化合物。若一级或三級胺基存在式II中，該胺基可，例如藉由甲氧磺酸基或苄氧羰基保護。於式III化合物中存在酸性基，該等酸性基可例如被酯化。再者，於式III化合物中存在四唑，其可例如被三苯甲基化。此保護基之引入和除去揭示於〃有機合成中的保護基團（'Protective Grpups iiTOrganic Synthesis)” T.W. Green 及 P.G.M. Wilts 第二版。（John Wiley &Sons.Inc.)。本發明包括該等式I化合物可以幾何異構物及旋光異構物和所有異構物及其混合物存在。該等異構物可藉由標準方法如層析技術或適合塩之分结晶分離。式I化合物之實施例為 3-胺基-3-甲基- N-(4-氧基-5-(2’-四唑-5-基）-聪苯-4-基甲基）-2,3,4,5-四氫_111-萘并[2，1-1)]氮雜箪-3-基）丁豳胺。 -1 3- 本紙張尺度逍用中國國家橾準（CNS ) A4规格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 經濟部中央揉準局月工消費合作杜印製 A7 B7_____ 五、發明说明（？） 3-胺基-3-甲基- N-(4-氧基- 5- (4-(4-(5-甲基-[1，3，4]聘二唑-2-基）睡吩-3-基）苄基）-2,3,4,5_四氫-1H-萘并[2，1 -b]氮雜革-3-基）丁醱胺。 3- ((2R)-羥丙胺基）-3-甲基- N-(5-(4-(4-(5-甲基-[1，3,4 ]聘二唑-2-基）噻吩-3-基）苄基）-4-氧基-2, 3,4,5-四氫-1H-萘并[2,1-b]氮雜革-3-基）丁藤胺。 1-胺基環丙烷羧酸（4-氧基-5-[2’-(111-四唑-5-基）-聪苯- 4- 基甲基]-2,3,4,5-四氫-1H-萘并[2, Ι-b]氮雜蓽-3-基）醢胺。 3-胺基-3-甲基- N-(5-苄基-4-氧基-2,3,4,5-四氫-111-萘并 [2 , ：L-b]氮雑輦-3-基）丁醸胺。根據本發明之化合物可視要選用以藥學上可接受酸加成塩或酷存在。式I化合物之槩學上可接受酸加成塩或酯包括該等衍生自如氫氯酸，氫溴酸，硫酸，乙酸，磷酸* 乳酸，順丁烯二酸，苯二甲酸，擰樣酸，戊二酸，葡萄糖酸，甲磺酸，水楊酸，丁二酸，二羥丁二酸，甲苯磺酸，胺基磺酸和反丁烯二酸之無機酸或有機酸。令人驚訝地，頃發現該等式I化合物具有有趣之槩理性質，及該等通式I化合物被証明具有激剌内生性生長激素之能力。因此，該等化合物可使用於需要剌激生長激素產生或分泌的情形如於生長激素缺乏或期望增加生長激素電漿含量之人類的治療，例如於老年人病患或家畜中。式I之生長激素釋放化合物在研究生長激素釋放之調 -1 4 - 本紙浪尺度逍用中國國家梂準（CNS ) A4洗格（210X297公釐） " : (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T A7 321640 ___B7 五、發明説明（3 ) 節中，在活體外工具中是有效的。式I化合物之腦下腺的生長激素釋能力評估中在活體内工具中亦是有效的。可分析例如該等化合物施藥前或後取出之血清樣品的生長激素。比較每一血清中的生長激素可直接測量患者之腦下腺釋放生長激素之能力。式I化合物可施藥至商業上重要動物中以增加其生長速率和範圃及增加牛奶生產。因此，本發明進一步有翮於包括，作為活性成分之至少一種式I化合物和藥劑載體或釋稀劑之藥學組成物。視需要選用地，該藥學组成物包括至少一種與一個或以上呈現不同活性，例如抗生或其他藥理活性物質之化合物组合的式I化合物。式I之生長激素促泌素化合物另一個用途為於與其他促泌素如GHRP(2或6)，GHRH和其類似物，生長激素和其類似物或包括IGF-1和IGF-2之somatomedins組合。對於熟諸此藝者，已知生長激素於人類之現在和可能用途是變化的和眾多的。因此，式I化合物可為了剌激來自腦下腺生長激素之釋放而施藥及然後可具有如生長激素本身相同效果或用途。該等生長激素之用途可缌结如下：老年人生長激素釋放之剌激作用；類皮質糖和諧生活，骨疏鬆病之治療，免疫系统之剌激作用，遲延之治療，創傷治愈之加速作用，加速骨折修復，生長遲延之治療，治療因生長遲延所造成醫衰竭或缺乏，生理矮身材包括生長激 -1 5 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4#格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝·

、-IT 經濟部中央標準局—工消費合作杜印製經濟部中央標準局貝工消費合作杜印製 A7 B7 五、發明説明（，。）素缺乏之小孩和與慢性病有翮之矮身材，肥胖和與生長遲延有關之肥胖的治療，治療與Prader-Willi徵候簇和Tu-rnerK激候簇有關之生長遲延的副作用之預防；加速燒傷患者之恢復和減少住院期；子宮內之生長遲延，骨骼發育不良，皮質酵亢進（hypercortisloisia)和Cushing氏徴候簇的治療；搏動生長激素釋放之誘發；壓抑患者中生長激素之回復；骨軟骨發育異常（osteochondrodysplasias)， Noonan氏徴候簇，精神分裂症，抑鬱*阿耳滋海墨氐病延遲創傷治愈和神志喪失（psychosocial deprivation)之治療；肺官能不良和換氣筒依賴，於重大手術後，減少惡質病和由於慢性病如癌症或AIDS之蛋白質損失之蛋白質和諧生活反應減弱之治療；包括胰島细胞增殖，排卵誘發之幫助治療的胰島素過多的治療；剌激胸腺發育和預防年龄有關之胸腺功能衰頹，免疫抑制患者之治療，肌肉強度，可動性之改菩，皮虜厚度新陳代謝的常性，脆弱老年人之賢常性，成骨细胞之剌激作用，骨再塑和軟骨生長，伴侶動物中免疫糸統之剌激作用的保持和伴侶動物中老化病之治療，家畜之生長促進和羊的羊毛生長剌激作用。藥理學之方法式I化合物於活體外評估其於主要鼠親體體细胞中之釋放生長激素的效力和效價。鼠主要親體體细胞基本上如前述（Chen等人Endocri-η ο 1 〇 g y 1 9 9 1，1 2 9 , 3 3 3 7 - 3 3 2，C li e η 等人 E n d 〇 c r i η ο 1 〇 g y -16- 本紙張尺渡適用中國國家樣準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 λ 經濟部中央揉準局負工消費合作社印製 A7 B7__ 五、發明説明（l!) 1989,12,2791-2798)製備。簡述之，藉由斷頭術將鼠殺死。迅速移去腦下腺。以於Hanks平衡塩溶液中之0·2%膠原酵素和0.2 %玻尿酸酵素浸漬該等腦下腺。將該等细胞再懸浮於包含〇.37%NaHC03 ，10%馬血清，2.5%胎牛血清，1%不必須胺基酸，1%麩醯胺酸和1% pen/ strep之 Dulbecco氏修飾之eagles培養基中且調整至1.5 X 105细胞/¾升。將1奄升之此懸浮液置於2 4井孔盤之每一井孔中及於完成釋放實驗之前留置2- 3天。於實驗當天，以上述包含25 mM HEPES* PH7.4之培養基洗滌該等细胞2天。藉由加入包含25 bM HEPES和試驗化合物之培養基起始生長激素釋放。於37£〇進行孵育15分鐘。藉由摞準RIA分析測量孵育後釋放至培養基之生長激素。如前所述測量式I化合物在戊基巴比特魯麻醉之雌鼠中活通內生長激素釋放效果（Bercu等人Endocr.inology + 1 9 9 1 , 1 2 9,2 5 9 2 - 2 5 9 8 )製備。簡述之，成雄 Sprague-Dawley 鼠以戊基巴比特魯7 0牽克/公斤腹膜麻醉。完全麻醉之後該鼠使用氣器套管和導管於頸動脈和頸靜脈移植。於15分鐘恢復後，於時間0取出血液樣品。Μ靜脈注射施藥腦下腺促泌素及將動脈血液樣品置於冰上15分结，然後於 12，QQQxg離心2分鐘。傾析該血清及使用標準UA分析測量GH之量。上述指示中該劑量視使使用之式I化合物，施槩棋式 -1 7- 本紙張尺度適用中國國家揉牟（CNS ) A4规格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

A7 _B7_ _ 五、發明説明（^) 和所要之治療而定。然而，一般Μ劑量含量介於d.GQtll和 10 〇奄克/每公斤體重每天之間施藥於患者和動物以獲得內生性生長激素之有效釋放。通常，適合於口服施藥之劑量形式包括約0 . 0 0 0 1毫克至约5 0 0奄克，較佳約0 . 0 0 1牵克至約100奄克之與藥學載體或稀釋劑混合的式I化合物。式I化合物可施藥於藥學上接受酸加成塩形式或，其適合為《(金雇或鐮土金雇或低級烷銨塩。該塩形式大概顯示與游離鹼形式相同程度之活性。包含本發明化合物之藥學姐成物可藉由習知技術製備及呈現習知之型式，例如膠囊*錠劑，溶液或懸浮液。所使用之藥學載體可為習知固體或液體。固體載劑之實施例為乳糖，白土，蔗糖，滑石粉，明膠，洋菜，果膠，阿拉伯膠，硬脂酸鎂和硬脂酸。液體載體之實施例為糖漿，花生油，橄攬油和水。同樣地，該載通或稀釋劑可包括任何該技藝已知之持鑛釋放物質，例如單硬脂酸甘油酯或二.硬脂酸甘油酯，單獨或與臘混合。經濟部中央標準局只工消费合作社印裝 1.1-------《裝-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 若使用口服施藥之固體載體時，該製劑可被製錠，置於硬膠囊中之粉末或丸劑型式或其可於糖錠或片型式。該固體載體之量可廣泛地改變但通常為約25毫克至約1克。若使用疲體載體，該製劑可於糖漿，乳劑，軟明膠膠囊或無菌可注射液體如水性或非水性液體懸浮液或溶液型式。一般，本發明化合物分散於每單位劑量包括5Q-2G0奄克 -1 8 _ 本紙張尺度逋用中國國家搮準（CNS ) A4規格（210X297公釐）經濟部中央標準局爲工消费合作社印製 3^164〇 A7 B7 五、發明説明（θ) 活性物質或與藥學上可接受載體一起的軍位劑量型式根據本發明化合物之劑量適合為1-500奄克/夭，例如當Μ槩物施藥於患者，例如人類時每劑量約1()()毫克。可Κ習知製錠技術製得之錠劑可包含：核心：活性化合物（游離化合物或其塩） 100毫克膠體二氧化矽（Areosil) 1·5毫克编維素，微晶’（Α ν i c e 1 ) 7 0 毫克經修飾之纖維素膠（Ac-Di-Sol ) 7.5牽克硬脂酸鎂塗層： Η P M C大約 9 毫克 * Mywacett 9-40 T approx 大約 0.9 毫克 *醢化之單酸甘油酯作為薄膜塗層之塑化劑。施藥途徑可為任何有效運輪活性化合物至適合或所要之作用位置的途徑，例如口服，經皮，經鼻，經肺或非經腸道，較佳為口服途徑。實施例製備式I化合物和包含它們的製劑之方法進一步說明於下列實施例中，然而該等實施例並不被解為本發明之限制。該等化合物之结構藉由元素分析或NMR確認。NMR位移（δ )K每百萬份（PPB)表示。mp為溶點且以C表示。管本紙張尺度逍用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐） (請先W讀背面之注意Ϋ項再填寫本頁)

、1T i: 經濟部中央標準局®:工消費合作社印製 ^^1640 a7 __ B7 五、發明説明（A ) 柱層析術係使用W.c. Still等人所揭示於J· 〇rg. Chem 1978,43， 2 9 2 3 - 2 9 2 5之技術進行於莫克矽凝膠6〇(Marck silica gei 60)(Art· 9385)上。作為起始物的所使用之化合物為已知化合物或可藉由本身已知方法迅速製備之化合物。縮寫： TLC :薄層曆析術 TFA :三氟乙酸 DMSO ：二甲基亞® DMF :二甲基甲醢胺 EDAC:卜乙基- 3-(3-二甲基胺丙基）碳化二亞胺-塩酸塩 HOAt :羥基氮雜苯并三唑 HOBt :羥基苯并三唑 THF :四氫呋喃 AIBN :偶氮異丁腈 NBS : N-溴丁二醢亞胺 Η P L C -分析：方法A : 使用 UV檢測於 214 nm及 Vydac 218TP5 4.6mm X 250aiin 5u C-18矽凝膠管柱（分離基，Hesperia)，其於42CK 1毫升 /分鐘溶析而完成RP-HPLC分析。使用於包括由0.1M (NH4 )S04所組成之媛衝液之5%CH3 CN平衡該管柱，其使用4M H2 S04調節至pH 2.5中及於50分鐘期間以5%至 -2 0 - 本紙決尺度遑用中國國家搮準（CNS )人4味格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T 1五、發明説明（ A7 B7 60% CH3 CN於相同鑀衝液中之梯度溶析。方法B : 使用與法A中相同管柱，使用0%CH3 CN/0.1% TFA/H2 〇至90% CHs CN/0.1% TFA/H2 0溶析於（Ο分鐘期間方法C : 5um C-18 4x250 to 管柱使用 0.1TFA/乙睛和 0.1TFA/水之 20-80%梯度經25分鐘熔析及卜35它。窗淪例1 3-胺基-3 -甲基- N- (4-氧基- 5- (2(四唑-5-基）聯苯-4-基甲基）-2,3,4,5-四氫-111-萘并[2，卜1)]氮雜蓽-3-基）丁醢胺三氟乙酸塩 ,4-二氫-2H-菲-1-酮-肟 (請先W讀背面之注意事項再填寫本頁) 、-='β 經濟部中央梯準局負工消费合作社印製將經胺塩酸塩（3·61克’ 52毫莫耳）加至乙酸納三水合物（7.07克’ 52毫莫耳）於水（30毫升）之溶液中。加入乙酵 (75毫升）和3,4 -二M-2H -菲-1-萌（5_Q克，26毫莫耳）及該懸浮液於回流加熱2小時。於冰浴中冷却該反應混合物及藉由過濾單離該沈澱固體，用冷水洗滌及於真空中乾燥而得4 · 8克3，4-二氫-2H-菲-卜_ -肟。 mp: 174-175¾ 〇 H NMR (CDCI3 )δ 2.05 ( Ρ,2 Η , J = 8Ηζ ) ； 2.91 (t,2H,J = 8Hz)； 3.20 (t,2H, J = 8Hz) ; 7.52 (m , 2 Η) ； 7.67 (d,lH, -2 1- 本紙張尺度適用中國國家梂準（CNS )八4规格（2丨〇父297公釐）經濟部中央揉準局貝工消費合作社印製 _ 五、發明説明（） .,： Γ;,：ί J = 9Hz)； 7.82 (d,lH,J = 9Hz); 8.05 (t,2H , j = gHz ) ; 8.22 (b i* s , 1 H )。 4-氧基- 2,3,4，5 -四氫-1H-萘并[2, 1-b]氮雜罩於901將甲磺酸（2 5毫升）和五氧化二鱗（5.2克，37· 毫莫耳）之溶液加熱3.5小時。將該溶液冷却至5()1〇及加入 3,4-二氫-211-菲-卜萌-肟（4.8克，23莫耳）。於6(^將該溶液加熱1Q分鐘，然後於加熱3.5小時。將該熱反應混合物加至冰（3〇〇毫升）和水（1〇〇毫升）之混合物中。藉由過逋簞離沈澱之固體，再溶解於二氯甲烷（50毫升）中，乾燥（MgS〇4 )和於真空下蒸發而得白色產物。使用具有砂凝膠（2QQ克）和庚烷及乙酸酷之混合物（1:2)之管柱層析逹成纯化而產生4.8克4 -氧基- 2,3,4, 5 -四氫-蔡并[2,1- b]氮雜蓽。 • nip: 18 6 - 1 8 7 1C ° 1 H NMR (CDC13 )δ 2.16 (t,2 Η ,J = 8 Ηζ) ； 2.21-2.30 (η ,2Η ); 3.14 (t,2H,J=8Hz)； 7.19 (d,lH,J=9Hz); 7.46 (t,lH, J = 9Hz); 7.55 (t,1 Η ,J = 9 Ηζ) ; 7.80 (d,lH,J = 9Hz );7.90 ( d, 1 Η , J = 9 Η ζ) ; 8.13 (d,1 Η,J = 9 Η ζ) ; 9.71 ( s , 1 Η) 〇 3，3-二氯-4-氧基-2,3,4,5-四氫-1Η-萘并[2,1-.b]氮雜蓽將五氯化磷（14.2克，6 8毫莫耳）加至4-氧基-2,3 ,4,5-四氫-1H-萘并[2,卜b]氮雑革（4 . 8克，23毫莫耳）於甲苯（125毫升）之懸浮液中且該反應混合物於90P加熱1 -22- 本紙铁尺度逍用中國國家棣準（CNS ) A4*L·格（210X297公漦） --·-------------訂------^ I (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央揉準局貞工消費合作社印«- A7 _B7__ 五、發明説明（小時。冷却至室溫之後於真空中蒸發溶劑且將殘留物懸浮於冰醋酸（50毫升）中。該懸浮液於70"C中加熱0.5小時及冷却至8 t：。加入水（100毫升）和冰（1〇〇克）及Μ過漶單離該沈澱固雔，用水洗滌和於真空中乾燥。此得6.3克3, 3-二氮-4-氧基-2,3,4,5-四氫-111-萘并[2，1-1)】氮雜箪。 mp: 187-191Ό ° 1 H NMR (CDC13 ) δ 3_36 (t，2 Η , J = 9 Ηζ) ; 3·45 (t，2 Η , J = 9Hz); 7.14 (d , 1Η,J = 9Hz) ; 7.50 (t , 1 Η , J = 9 Ηζ) ; 7.59 (t , 1 Η , J = 9 Η ζ) ; 7.77 ( d , 1 Η , J = 9 Η Ζ)； 7.85 ( d, 1 Η , J = 9 Η 2 );7.91 (brs’lH); 8.0 (d,lH，J=9Hz)。 3-氛-4-氧基-2,3,4,5-四氫-1Η-萘并[2,1-b]氮雜箪將3,3-二氯-4-氧基-2,3,4,5-四氫-111-萘并[2,1-13] 氮雜箪（6.2克，22奄莫耳）於冰醋酸（200毫升）之溶液置於氮氣壓下。加入乙酸鈉三水合物（3.8克’ 28奄莫耳）。 5分鐘之後加入支撐於碳上之鈀（1 〇%，〇· 6克）及於大氣壓和室溫下使用450奄升之氫氣氫化該反應混合物。經由塞力特矽藻土（Celite)過滤該混合物且於真空中蒸發溶劑。使用甲笨（25Q毫升）再蒸發之後，將殘留.物懸浮於水（ 100笔升）中，攪拌5分鐘及Μ過滹單離該固體和於真空中蒸發而得1.7克之3-氯-4-氧基- 2,3,4,5-四氫-1Η-萘并[ 2 , Ι-b]氮雜箪。 1 H NMR (CDCI3 )δ 2.6 4 - 2 . 7 4 (m, 1Η) ; 2 . 8 5 - 2.9 5 (m, -2 3 - 本紙張尺度逍用中國國家橾率（CNS ) Α4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ,4 訂 3, A7 B7 經濟部中夬梂準局工消费合作社印製

五、發明説明（J 1Η ); 3.5 0 - 3.5 5 (m,lH);4.49 (dd.lH); 7.15 ( d , 1 Η , J = 9Hz); 7.50 (t,lH, J = 9Hz); 7.60 (t,1H,J = 9Hz) ; 7 . 78 (d,lH,J=9Hz); 7.80 (brs.lH ); 7.87 (d,lH,J=9Hz)； 8.04 (d , 1H , J = 9Hz) 〇 3-叠氮基-4-氧基-2,3 ,4,5-四氫-1H-萘并[2, 1-b]氮雜蓽將 3-氯-4-氧基-2,3, 4,5-四氫-1H-萘并[2, 1-b]氮雜箪（1.6克，6.7牽莫耳）加至叠氮化納（0.55克，8.4奄莫耳）於DMSCU17奄升）中之懸浮液及該懸浮液於80¾加熱2.5 小時。將該熱反應混合物加至冰（3D克）上及過«該沈澱且藉由使用最初K庚烷溶析及接著以庚烷和乙酸乙酷之混合物（1:1)層析於矽凝膠（ 2 0 0克）上而得1.1克3-叠氮基-4 -氧基-2,3,4,5-四氫-18-萘并[2，1-1)]氮雜蓽。 BP: 190-192Ό ° 1 H NMR (CDCls )δ 2.44-2.53 (ΐ,ΙΗ); 2.64-2.75 (m, 1H ); 3.03-3.10 (b,1H); 3 . 5 3 - 3 . 6 0 (m, 1H) ; 3.89 (dd ,1H); 7.15 (d,1H,J=9Hz); 7.50 (t.lH, J=9Hz); 7.60 (t, 1H,J = 9Hz) ; 7.78 (d,lH,J = 9Hz ); 7.83 (brs.lH); 7.87 (d，lH，J=9Hz); 8.04 (d,lH,J=9Hz)。 3-胺基-4-氧基-2 ,3, 4,5-四氫-1H-萘并[2,1-b]氮雜輦將 3-叠氮基-4-氧基-2,3, 4,5-四氫-1H-萘并[2,卜b] 氮雜箪（1.Q克，4.Q毫冥耳）於無水THF(20毫升）之溶液置於氮氣壓下及K冰浴冷却。於10分鐘期間逐滴加入硼氫化納（0.17克，4.4毫奠耳）於乙酵（20奄升）之溶液及該反 -24- 本紙張尺度適用中困國家標準（CNS ) Α4%格（210Χ297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本X )

A

、1T 經濟部中央梂準局工消费合作社印裝 A7 _B7 _ 五、發明説明（θ ) 應混合物於回流溫度加熱20小時。於真空中蒸發揮物且殘留物藉由使用二氯甲烷和乙酵及25%NH3 (水溶液）之混合物（9:1)(梯度0 %至10%)作為溶析液層析於矽凝膠（2〇〇克）上纯化而得Q.3D克之3 -胺基-4-氧基-2,3, 4,5 -四氫-1H -萘并[2, Ι-b】氮雜箪。 1 H NMR (CDCU ) δ 2.05-2.15 (m.lH); 2.64-2.75 ( m,lH ); 2.95-3.05 (ιι,ΙΗ); 3.44 (dd,lH); 3.48-3.52 (in,1H); 7.13 (d，lH，J = 9Hz); 7.49 (t，lH，J = 9Hz); 7.56 (t, 1H , J = 9Hz) ; 7.60 (brs.lH); 7,75 (d,1H,J = 9Bz ); 7.85 (d,lH,J=9Hz); 8.07 (d,lH,J=9Hz)° (1，1-二甲基- 2-(4-氧基- 2,3,4, 5-四氫-1H-萘并[2,卜b]氮雜箪-3-基胺甲醢基）乙基）胺甲酸第三-丁酯。將E D A C ( D .24克，1·2奄其耳）加至3-第三-丁氧羰胺基 -3-甲基丁酸（0.26克，1.2奄奠耳）於DMF(15牽升）之溶液中。於室溫15分鐘後，加入3-胺基-4-氧基-2, 3, 4,5-四氫 -1Η-萘并[2,1-b]氮雜萆（Q.25克，1.1毫莫耳）及將該反應混合物攪拌6小時。加入水（80毫升）且以乙酸乙酯（30奄升）萃取該溶液。以碳酸氫納（20毫升），水（20笔升）洗滌該有機相及乾煉（MgS04 )。於真空中蒸發溶劑且殘留物藉由使用庚烷和乙酸乙酯（1:3)作為溶析液層析於矽凝膠（ 50克）上纯化。此得0.49克之（1，卜二甲基- 2- (4 -氧基-2 ，3,4,5-四氫-111-萘并[2，1-1»]氮雜箪-3-基胺甲醸基）乙基 )胺甲酸第三-丁酷。本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4规格（2丨0><297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

五、發明説明（％醢 4 3 I 甲苯.胺二基基 7)-基基基乙甲甲丨基氧 A7 B7 氫四三第酸甲基胺基 I 5 - 唑四基甲笨三并。萘醋聯基經濟部中央揉準局員工消費合作社印裝將乾煉粉末化氫氧化鉀（0.23克，4.0毫莫耳）和（1,1-二甲基- 2-(4-氧基-2, 3,4,5-四氫-1H-萘并[2, Ι-b]氮雜蓽 -3-基胺甲醯基）乙基）胺甲酸第三-丁酯（0_49克，1.0毫莫耳）於DMS0(15毫升）之溶液在氮氣壓下攪拌0.5小時。加入5-(4溴甲基-聯苯-2-基）-N-(三笨甲基）四唑（0.59克，1.1毫莫耳）及將該混合物攪拌1小時。加入氛化銨之10 %水溶液（30毫升），水（100毫升）和乙酸乙酷（60毫升），然後分離相。乾煉該有機相（MgS04 )，及於真空中蒸發溶劑。藉由使用庚烷和乙酸乙酯（2 : 3)作為溶析液層析於矽凝膠（100克）上純化而得0.45克之（1,1-二甲基- 2- (4 -氧基 -5-(2’-(N-三苯甲基四唑-5-基）聯苯-4-基甲基）-2,3,4,5 -四氫-1H-萘并[2, Ι-b]氮雜革-3-基胺甲醢基）乙基）胺甲酸第三-丁酯。 1 H NMR (CDC13 ) δ 1.26 (s,2 Η) ; 1.34 ( s , 6 Η ) ; 1.42 (s,9H); 2.46 (dd,2H); 3.16 (dd,2H); 4.45 (m.lH); 4.74 (d,lH); 5.26 (s,lH); 5.31 (s,lH); 6.70 (d,lH) ;6.93 (d,lH); 7.00 (s,4H); 7.21-7.35 (m,8H) -,7.39- 7 5 3 ( m，5 H ) ; 7 . 7 1 ( d , 1 H ) ; 7 . 8 0 - 7 . 9 2 (in，3 H )。將三氟乙酸（2奄升）加至（1，卜二甲基-2-(4-氧基-5 -(2’-(N-三苯甲基-1H-四唑-5-基）聯苯-4-基甲基）-2,3,4 -26- 本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 321640 五、發明説明（ -H- 氫四并案三第酸酯克陵中基溶乙之 *)㈣甲氯0 ^ 基於僅 \)/ -3耳 ¾莫雜毫氮 6 。將反應混合物攪拌4.5小時且加入水（5毫升）。於真空中蒸發溶劑且該殘留物藉由使用甲醇，水和THF(60:40 : 0.5 )作為溶析液以層析管柱（Waters RP18矽石75u，4fl克）純化。於真空中蒸發溶劑且該殘留物再溶解於甲醇（3(1毫升）中及於真空中蒸發而得0.3 1克之標題化合物。 1 H NMR (d6 -DMS0) δ 1.19 (s,3Η) ; 1.25 (s , 3Η) ; 2.13 -2.46 (m,3H); 2.40 (s,lH); 2.41 (s,lH); 3.40 (dd,!H );4.20-4.28 (m,lH): 4.90 (d,lH); 5.33 (d,lH); 6.98 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 (d,2H) ; 7.16 (d,2H);7.47-7.67(m,8H); 7.75 (brs,2H) ;7 . 8 9 - 7 . 9 8 (in，2 H ) ; 8 · 1 4 ( d，1 H ) ; 8 . 6 9 ( d，1 H )。 HPLC : Rt = 30 · 5分鐘（方法 A ) c 3 3 ih 3 N s 0 2 ，1 1 / 2 T F A，1 1 / 2 H 2 〇之計算值： C. 5 7.2 3% ; H，4.99% ; Ν，12·98% ;實驗值： C.57.35% ; H.4.81% ; N.12.60% ；窖_例2 3 -胺基-3-甲基- N- (4 -氧基- 5- (4-(4-(5 -甲基- [1,3, 4]聘二唑-2-基）噻吩-3-基）苄基）-2,3,4,5-四氫-1H-萘并[2， Ι-b]氮雜箪-3-基）丁醢胺 . 3, 3-二氯-4-氧基-2,3,4,5-四氫-1H-萘并[2,卜b]氮雜蓽將五氯化磷Π1. 3克，3 4 2牽莫耳）加至4-氧基-2,3,4 -21- 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） A7 B7 五、發明説明（a) ,5-四氫-1H-系并[2, l-b]氮雜罩（24.1克，114奄莫耳，與實施例1相同方法中製傅）於甲苯（750毫升）之懸浮液中。該反應混合物鑀慢加熱至901，然後於9〇·〇加熱1小時。加入活化碳且將該混合物冷却至室溫。過滤該混合物且漶液於真空中蒸發。將油狀殘留物溶解於冰醋酸（ 3 0 0奄升）中，於70D加熱30分鐘冷却至10¾。加入水（1200奄升）及冰浴上連缜攪拌15分鐘。K遇漶單離該沈澱固體，用水洗滌和於真空中乾煉。此得28. 5克3,3-二氛-4-氧基-2,3,4, 5-四氫-1H-萘并[2,1-b]氮雜蓽之固雔。 1 H NMR (CDC13 )δ 3.36 (dt,2H); 3.45 (dt,2H); 7.15 (d,lH); 7.48 (t,lH); 7.58 7.75 (d,lH); 7.86 (d,lH); 8.QQ (d，lH); 8.08 (brs,lH)。 3-氛-4-氧基-2,3,4,5-四氫-1H-萘并[2,1-b]氮雜蓽經濟部中央揉準局系工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 將 3, 3-二氛-4-氧基- 2,3,4,5-四氫-1H-蔡并[2, 1-b] 氮雜革（28.0克，10 0毫莫耳）於冰醋酸（25D毫升）之溶液置於氮氣壓下。加入乙酸納（22.6克，2 7 5奄莫耳），過磷酸納水合物（24.6克，2 8 0毫莫耳）和支撐於碳上之支撐於碳上之鈀（1 0%，1.5克）。該反應混合物在56¾於氮氣壓下授拌2G小時。將該混合物冷却至室溫，然後過濾。該固體與THF(3x700毫升）一起沸騰及過漶同時仍保持溫熱。於真空下蒸發合併之THF相而得19.1克之3-氛-4-氧基-2, 3, 4,5 -四艇-1 Η -萘并[2 , 1 - b ]氮雜革。 1 H NMR (CDC13 ) δ 2.65-2.73 (ΐ,ΙΗ); 2.85-2.95 (ffl, -28- 本紙張尺度逋用中國國家搮準（CNS ) A4%格（2丨0X297公釐）「， .r A7] !^〇aVVbh_ ：；/, t ,._7 ( 五、發明説明（）— .,...^ 1H ); 3.11-3.19 (πι,ΙΗ); 3.50-3.56 (hi.IH); 4.49 (dd ,1H); 7.18 (d,lH); 7.50 (t,lH); 7.60 (t,lH); 7.78 (d , 1 H ) ; 7 · 8 8 ( d，1 H ) ; 8 . 0 1 ( b r s , 1 H ) ; 8 · 0 4 ( d , 1 H )。 3-叠氮基-4-氧基-2 ,3,4,5-四氫-1H-蔡并[2,：L-b]氮雜箪將叠氮化納（8.8克，135毫莫耳）加至3-氯-4-氧基-2， 3,4,5-四氫-111-萘并[2，1-1)]氮雜罩（16.6克，67.7毫莫耳 )於D M S 0 ( 8 0毫升）之懸浮液中及該懸浮液於6 0 Ό加熱5小時。將該熱反應混合物注入至水（1升）中。藉由過漶單離該沈澱及以水洗滌。於真空乾燥之後得1 6 . 3克3 -叠氮基-4 -氧基-2,3,4,5-四氫-111-蔡并[2,1-1}]氮雜罩。 1 H NMR (CDC13 )δ 2.4 4 - 2 . 5 3 (m,1Η) ; 2.6 2 - 2.7 5 (m, 1Η ); 3.06-3.13 (ιη,ΙΗ); 3.58 (dd.lH); 3.90 (dd ,1H); 7.18 (d,lH); 7.52 (t,lH); 7.60 (t,lH); 7.80 (d，lH); 7.87 (d，lH); 8.00 (brs，lH); 8.06 (d,lH)。 3-胺基-4-氧基-2 ,3,4,5-四氫-1H-萘并[2,卜b]氮雜箪將支撐於碳上之支撐於碳上之鈀（10%，2克）加至3-" 叠氮基-4-氧基-2,3,4,5-0氫-111-萘并[2,：1-1)]氮雜蓽（經濟部中央標準局員工消費合作社印裂 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 16.Q克，63.4牽奠耳）於乾燥二聘烷（150毫升）和乙酵（150 毫升）之混合物的溶液中。該混合物在5巴（氫氣）壓力及使用有效攪拌下氫化。過濾該反應混合物及加入過量於乙酵中之氯化氫。單離該沈澱固體* K乙醇洗滌及乾燥而得14.4克 3-胺基-4-氧基-2,3,4,5-四氫-111-萘并[2，1-1)]氮雜箪塩酸塩。藉由溫熱將上述塩酸塩（14.4克）溶解於水（8GQ毫升 -29- 本紙張尺度逍用中國國家揉率（CNS ) A4规格（210X297公釐） ^ ' 經濟部中央橾準局員工消费合作社印製 321640 A7 B.7 五、發明説明（外） )中。加入25%氨水溶液及形成沈澱。藉由遇漶單離該固體，Μ水洗滌及於真空乾煉之後得11.9克之3-胺基-4-氧基-2,3,4,5-,四氫-111-萘并[2，1-1)]氮雜蓽。 1 H NMR (CDC13 )δ 2.05-2.15 (b,1H); 2 . 6 5 - 2 . 7 5 (in, 1H ); 2.9 5- 3 . 0 5 (a,1H); 3.45 (dd,lH); 3.50 (dd,lH) ；7.15 (d,lH); 7.50 7.58 (t,lH); 7.75 (d, 1 H ) ; 7 · 7 9 ( b r s，1 H ) ; 7 · 8 6 ( d , 1 H ) ; 8 . 0 8 ( d . 1 H )。於將3-胺基-4-氧基-2 ,3,4, 5-四氫-1H-萘并[2, 1 -b]氮雜箪（4.5克）溶解於熱乙酵（50毫升）和L( + )-酒石酸溶解於熱乙酵（50毫升）中。將所得懸浮液冷却至室溫同時攪拌。藉由過濾單離該固髖及K乙酵洗滌。然後將其溶解於以活化碳處理之沸賸水（250毫升）中且熱過漶。該漶液冷却至室溫，然後於室溫攪拌3小時。藉由過漶單離該固體及乾煉而得3.3克溶於熱水（200毫升）中。於40-50'0加入過量之2 5%銨水溶液及藉由過瀘軍離該固體。此固體於乾煉後得2.1克未再溶解之3-胺基-4-氧基- 2,3, 4, 5-四氫 -1H-萘并[2 , Ι-b]氮雜薙。 (1,1-二甲基- 2-(4-氧基-2,3,4,5-四氫-1H-萘并[2,卜b]氮雜革-3-基胺甲醮基）乙基）胺基甲酸第三-丁酯。十1 將 3-第三-丁氧羰胺基-3-甲基丁酸（2.43克，11.2毫莫耳）和卜羥基苯並三唑（1.52克，11·3奄莫耳）於 DMF(30 毫升）之溶液置於氮氣下。加入£0&(：(2.19克，11.4奄莫耳 )及該反應混合物於室溫拌10分鐘。加入未再溶解之3-胺 -3 0 - 本紙張尺度逍用中國國家梂準（CNS ) A4%格（210X297公嫠） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) ,4.

、1T

五、發明説明（A 1.43 (s , 9H ) ; 2.05 2.90-3.08 (m,2H); 5.22 (brs.lH); 6.75 經濟部中央標準局—工消费合作社印製 A7 B7 基-4-氧基-2,3,4,5-四氫-11!-察并[2,1-1)]氮雜革（2.3克 * 10.2毫莫耳）及該反應混合物於室溫授拌過夜。將該反應混合物注入至水（200奄升）中且以二氯甲烷（2x250毫升）萃取該溶液。以1Q%碳酸氫納（2x150毫升）洗滌合併之有機相及乾煉（MgS04 )。於真空中蒸發溶劑而一固體殘留物，其懸浮於乙醚中，通滹及乾煉而得4. 5克之（1,1-二甲基- 2-(4-氧基- 2,3,4, 5-四氫-1H-萘并[2, ；l-b]氮雜蓽-3-基胺甲醸基）乙基）胺甲酸第三-丁酯。 1 H NMR (CDC13 ) δ 1·35 (s，6Η) -2.13 (ffl.lH); 2.45-2.60 (β,2Η) 3.50 (dd,1H) ; 4 . 5 0 - 4.5 6 (m, 1H) (d,1H) ; 7.1Z (d,1H) ; 7.49 (t, 1 H ) ; 7.57 (t , 1 H) ; 7.73 (d，lH); 7.85 (d，lH); 7.88 (brs，lH); 8.03 (d，lH)。 5-甲基- 2-(4-(4 -甲苯基）-3-¾吩基）-[1，3,4】腭二唑 5- (4- (4-甲苯基）-3-噬吩基）-四唑（3 . 3克，γ <·»· — Ν 13·2毫其耳）和乙酸酐（50¾升）之混合物於回流溫度下加熱1小時。於真空中蒸發所得溶液而得一油狀殘留物，其溶解於乙酸乙酯（100奄升）中。Μ碳酸氫納（100奄升）洗滌有機溶液，以活化碳處理及乾燥（MgS04 )。過濾及於真空中蒸發而得3.4克之5-甲基- 2-(4-(4-甲苯基）-3-睡吩基）-[1,3, 4]暍二唑之油狀物。 1 H NMR (CDCI3 ) δ 2.38 (s,3H); 2.45 (s,2H )； 7.18 (d,2H); 7.25 (d，lH); 7.29 (d,lH); 8·03 (d，lH)。 -31- 本紙張Λ度逍用中國國家揉準（CNS ) A4规格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

ο4- 6 1 2 3 五、發明説明（ 5 -甲基- 2- (4-(4-溴甲苯基）-3 -噻吩基）-[1,3,4]聘二唑將5 -甲基- 2- (4-(4 -甲基苯基）-3-噻吩基）-[1, 3 ,4]聘二唑（3.4克，13.3毫莫耳）溶解於四氯化碳（60毫升）中。加入 ΑΙΒΝ(0·21克），乙酸納（0.52克），NBS (2.6克 * 14·6 毫莫耳）和冰醋酸（Q . 52克）。該反應混合物於回流溫度下加熱8小時，然後冷却至室溫。經過矽凝膠過濾該反應混合物及於真空蒸發該滅液。於真空中氫氧化納上乾燥該油狀殘留物而得2. 6克之粗5-甲基- 2-(4-(4-溴甲苯基）-3-噻吩基）-[1 , 3 , 4 ]聘二.唑。 1 H NMR (CDC13 ) δ 2.47 (s,3H); 4.55 (s,2H )ι Ί.32 -7.35 (m,3H); 7.40 (d,2H); 8.08 (d,lH)。 (1,1-二甲基- 2-(4-氧基- 5-(4-(4-5-甲基-[1,3 ,4]聘二唑- 2 -基）-3 -噻吩基）-苄基）-2,3,4,5 -四氫-1H -萘并[2, 1-b] 氮雜蓽-3-基胺甲醯基）乙基）胺甲酸第三-丁酯。經濟部中央梯準局貝工消費合作社印装 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 將乾燥粉末化氫氧化鉀（2.D克，29.8毫莫耳）和（1，1 -二甲基- 2-(4-氧基-2 ,3,4,5-四氫-1H-萘并[2,Ι-b]氮雜罩 -3-基胺甲醢基）乙基）胺基甲酸第三-丁酯（3.2克，7.6毫莫耳）於DMSO (30毫升）之溶液於氮氣壓下搜拌3Q分鐘。加入5-甲基- 2- (4-(4 -溴甲苯基）-3-(噻吩基）-[1 ,3,4]聘二唑（2.5 克’ 7.46毫莫耳）於DMS0(1Q毫升）之溶液及將該反應混合物於室溫攪拌1小時。將該混合物注入至水（500毫升）中及以二氯甲烷（6QQ毫升）萃取。以水（1QQ毫升），5%酒石酸溶液（2QQ奄升），食塩水洗滌該有機萃取液及乾烽（MgS〇4 )。 -32- 本紙張尺度逍用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐） A7 B7 321640 五、發明説明（d) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 於真空中蒸發而得一殘留物，其藉由管柱層析於矽凝膠（200 克）上使用乙酸乙酿作為溶析液而純化。此得2·1克之（i,1 -二甲基- 2-(4-氧基- 5-(4-(4-(5-甲基-[1,3, 4]腭二唑- 2-基）-3-_吩基）_苄基卜2,3,4,5-四氫-1^-萘并[2,1-1)]-氮雜革-3-基胺甲豳基）乙基）胺甲酸第三-丁酯。 1 H NMR (CDC13 )δ 1.33 (s,6H); 1.40 (s,9H); 1.48-2.05 (m.lH)； 2.28 (s,3H); 2.42 (d,lH); 2.54 (d,lH) ;2.60-2.70 (m.lH); 2.75-2.85 (m,lH); 3.29 (dd,lH) ;4.46-4.54 (b,1H); 4.88 (d,lH); 5.30 (brs,2H); 5.50 (d,lH);6.72 (brs.lH); 7.20-7.26 (b,5H); 7.40 (d.lH); 7.48-7.56 (ffi,2H); 7.80 (d,lH); 7.86 (d,lH );7 . 9 8 ( d , 1H ) ; 8 · 0 1 ( d , 1H)。將三氟乙酸（10毫升）加至（1,1-二甲基- 2-(4-氧基- 5-(4-(4-5-甲基-[1,3，]聘二唑-2-基）-3-噬吩基）-苄基）-2，經濟部中央標準局負工消费合作社印裝 3, 4,5-四氫-1H-萘并[2,1-b]氮雜箪-3-基胺甲醢基）乙基）胺甲酸第三-丁酯（2.1克，3.43奄冥耳）於二氯甲烷（100毫升）之溶液中。將反應混合物於室溫攪拌3小時。加入1N 氫氧化納溶液（100毫升）及相分離。有機相Μ活化碳處理及乾燥（MgS04 )。於真空中蒸發溶劑而得1.6克之標題化合物。1 H NMR (CDC13 ) δ 1.22 (s , 3Η) ; 1.25 (s,3Η); 2.10-2.18 (ffi.lH); 2.26 (d,lH); 2.29 (s,3H); 2.32 (d,lH) ; 2 . 6 0 - 2 . 7 5 (m,5H); 3.2 7 - 3 . 3 3 (a, 1H) ; 4.53-4.60 (m,lH); 4.90 (d,lH); 5.47 (d,lH); 7.20-7.25 -33- 本紙張尺度逍用中國國家揉準（CNS ) A4規格（210X297公釐）經濟部中央揉準局貝工消費合作社印製 _^____ ·* ••'.«"―— 一·〜-——T-f 五、發明説明（） (in,5H)； 7.43 (d,lH); 7.4 9 - 7.5 6 (in, 2 Η) ; 7.79 (d,lH) ；7.85 (d,lH) ; 7.98 (d,lH) ; 8.00 (d.lfl) ； 8.40 (d, 1H) 〇 HPLC: Rt = 22.8分鐘（方法 C)。 C3 3 H3 3 NS 〇3 S, 1 1/2 Hz 〇之計算值： C，65.3% ; H，6.0% ; N,11.5% ;實驗值： C , 65 . 2% ； H, 6 . 0% ； N , 10 . 9%

If施俐3 3-((2R)-羥丙胺基）-3-甲基- N-(5-(4-(4-(5-甲基-[i，3,4 ]聘二唑-2-基）_吩-3-基）苄基）-4-氧基-2,3,4, 5-四氫 -1H-萘并[2，l-b]氮雜蓽-3-基）丁醯胺將（2R)-(四氫哌喃-2-基氧基）丙醛（107毫克，0.675 奄其耳）溶解於甲醇（1〇奄升）中及加至3-胺基-3-甲基-N-(5-(4-(4-(5 -甲基-[1，3,4]聘二唑-2-基）睡吩-3-基）苄基 )-4-氧基- 2,3,4,5-四氫-1H-萘并[2,1-b]氮雜蓽-3-基）丁醢胺（261毫克，G.45毫莫耳）於甲醇（1〇毫升）和冰醋酸（ο」毫升）之溶液中。加入氰晒氫化納（57毫克，0·9毫莫耳）於 D M F ( 3毫升）之溶液及該溶液於室溫攪拌3 . 5小時。於真空中除去溶劑及將該殘留物溶解於乙酸乙酯/水.（10毫升/ 10毫升）中。分離該等相且乾燥有機相（MgS04 )及於真空中除去溶劑。將殘留物溶解於甲醇（10毫升）中及加入於乙酸乙酯中的3 Μ氯化氫溶疲（1毫升，3毫莫耳）。該溶液於室 -34- 本紙張尺度逍用中國國家橾準（CNS ) Α4规格（210Χ297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央揉準局負工消费合作社印製 A7 # B7 五、發明説明（4) 溫攪拌1小時及於真空中除去溶劑。將殘留物溶解於二氯甲烷（10¾升）中且M1N氫氧化納溶液（2x10牽升）洗滌。合併之水相K二氛甲烷（2x150毫升）萃取。合併有機相及乾煉（MgS04 )且於真空中蒸發該溶劑。藉由使用二氣甲烷/ 乙醇/25%氨水溶液（85:15:1)作為溶析液急驟層析於矽凝膠（100毫升），接著K製備TLC板（矽石 2 0cih X 2 0cbx 0.2〇〇，該1^(；跑三次）使用二氯甲烷/乙酵/2 5%氨水溶液（85:15:1)作為溶析液纯化而得8奄克之3-((2R)-羥丙胺基）-3-甲基-{1-(5-(4-(4-(5-甲基-[1，3,4]暍二唑-2-基 )唾吩-3-基）苄基）-4-氧基-2,3, 4,5-四氫-1H-萘并[2,1-b ]氮雜箪-3-基）丁豳胺。 1 H NMR (CDC13 )δ 1.10-1.40 (m,9 Η) ; 2.15-2.40 (m , 5H); 2.55-2.75 (a,4H); 3.40 (b,1H); 3.35 (m,lH);

4 · 1 0 ( B，1 Η ) ; 4 · 5 0 ( a，1 Η ) ; 4 _ 3 5 和 4 . 4 5 (皆為 d ,— 起 1 Η );5.40和 5.50 (皆為 d，一起 1Η);7.15-7.35 (b,5H); 7·40 (πι,ΙΗ); 7.4 5 - 7.6 0 (m, 2 Η) ; 7.80 (dd.lH); 7.85 (d,lH );7.95 (dd,lH); 8.05(d,lH); 9.10 (β,ΙΗ)。 HPLC ： Rt = 27 _ 8分鐘（方法 B )。啻旃例4· 1-胺基環丙梭酸（4-氧基- 5-(2，-(1Η-四唑-5-基）聯苯- 4-基甲基）-2,3,4,5-四氬-1H-萘並[2, ：l-b]氮雜革-3-基）藤胺三氟乙酸塩 -35- 本纸張尺度適用中困囷家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ^ . +Λ-., - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

321640 _iisw

X 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（ (1-(4-氧基- 2,3,4,5-四氫-1H-萘並[2,卜b]氮雜箪-3-基）胺甲豳基）環丙基）胺甲酸第三酯將H0At(50毫克’ Q.37毫莫耳）和EDAC (71毫克，0.37 毫莫耳）加至（1-第三-丁氧基羰基胺基）環丙羧酸（74毫克，〇_37毫莫耳）於DMF(6毫升）之溶液中。搜拌1〇分鐘後，加入3-胺基-4-氧基-2,3,4,5-四氫-111-萘並[2，：1-1)]氮雜箪（8 4毫克，0.3 7毫冥耳）和二異丙基乙胺（36毫克，（].74 毫莫耳）及該混合物於40勺留置過夜。加入水（60毫升）和乙酸乙酯（60毫升）。分離相及以iMHClUO毫升），飽和 NaHC〇3 (60毫升）洗滌及乾燥（KgS〇4 )。於真空中蒸發溶劑而得148克之固體。從二氯甲烷和乙酸乙酯之混合物再结晶而得62毫克（1-(4-氧基-2,3,4,5-四氫-18-蔡並[2 1-b]氮雜箪-3-基）胺甲醢基）環丙基）胺甲酸第三酯 H NMR (CDC13 ) δ 0.99 (s,2H); 1.45 (i,2H); 1,51 (s,9H); 2.12 (m.lH); 3.05 (m,2H) ； 3.48 (m.lH)； 4.49 U，1H); 5.10 (brs，lH); 7.05-8.05 (in，8H)。 (1-(4-氧基- (5-(2’-(N-三苯甲基四唑_5_基）_聯苯-4__甲基）-2, 3，4, 5-四氬-1H-萘并[2, l-b]氮雜籩-3·基胺甲酿基 )環丙基）胺甲酸第三-丁酯於氮氣壓下將U-(4-氧基-(5-(2，_(Ν_三苯甲基四哩 -5-基）-聯苯-4-基甲基）-2,3,4,5-四氫_1Η—蔡并[n _b] 氮雜罩-3-基胺甲醢基）環丙基）胺甲酸第三_ 丁醋（62毫克〇.16毫莫耳）和乾燥粉末化之]^11(34笔克，（).62毫莫耳）懸 -36- 本紙張尺度遑用中國國家橾準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁〕

、1T (！五、發明説明（）浮於無水DMS0(2毫升）中且攪拌10分鐘。加入5-(4 ’ 溴甲基聯苯-2-基）-N-三苯甲基四唑（92毫克，Q.65毫莫耳）及將該混合物授拌30分鐘。加入水（10毫升）和乙酸乙酯（30 毫升）及分離.相。乾燥（MgS04 )有機相且蒸至1毫升殘留物，其藉由使用庚烷/乙酸乙酷（1:1) 作為溶析液層析於莫克（Merck) 矽石60製備之板上。此得29毫克之（1-(4-氧基 -(5-(2’-(N-三苯甲基四唑-5-基）-聯苯-4-基甲基）-2,3, 4,5-四氫-1H-萘并[2,卜b]氮雜簞-3-基胺甲醯基）環丙基）胺甲酸第三-丁酯。 1 H NMR (CDC13 )δ 0.99 (s (br),2H); 1.49 (s,9H); 1.66 (s (br),2H); 1.99 (i,1H); 2.62 (i,2H); 3.20 (ni.lH); 4.48 (m , 1H , J = 1 4Hz) ; 4.80 ( d , 1 H , J = 1 4 H z ); 5.09 (s (br),lH); 5.25 (d,lH,J=14Hz); 6.87-7.90 (ra , 29H) ° 經濟部中央標準局負工消费合作社印装 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 於氮氣壓下將（1-(4 -氧基- (5-(2’-(N -三苯甲基四哩-5 -基）-聯笨-4-基甲基）-2 ,3, 4, 5-四氫-1H-萘并[2,1-b]氮雜箪-3-基胺甲醯基）環丙基）胺甲酸第三-丁酯（29毫克）和TFA (1毫升）之混合物攪拌2小時。加入水（1滴）及於真空中除去溶劑。以甲醇（0.1毫升）和乙醚（2毫升）處理該殘留物，過漶和以乙醚（2x1毫升）洗滌而得16毫克之 . 卜胺基環丙羧酸（4-氧基- 5-(2’-(1H-四唑-5-基）聯苯- 4-基甲基）-2,3,4,5-四氫-111-萘並[2，：1-1)]氮雜罩-3-基）

醯胺三氟乙酸塩S -37- 本紙張尺度適用中a國家棣準（CNS ) A4规格（210X297公釐）

3-胺基-3-甲基- N-(5-苄基-4-氧基_2,3,4,5-四氫-1H-萘並[2,卜b]氮雑箪-3-基）丁醯胺塩酸塩 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央橾準局員工消費合作社印製 (1,1-二甲基- 2-(4-氧基-5-苄基_2,3,4, 5-四氫-1H-萘并[ 2,1-b]氮雜蓽-3-基胺甲醢基）乙基）胺甲酸第三-丁酯。將（1，卜二甲基- 2-(4-氧基- 2,3,4,5-四氫-1H-萘并[2 ,Ι-b]氮雜蓽-3-基胺甲醢基）乙基）胺甲酸第三-丁酯（250 毫克，0.586毫莫耳，如實施例1所製備）溶解於MSO(5毫升）中及於氮氣壓下加入無水粉末化之KOH且將該混合物攪拌30分鐘。加入溴化苄基（10 5毫克，G . 62牽莫耳）且將該混合物攪拌7 5分鐘。加入水（2 5毫升）及乙酸乙酯（2 5毫升）和相分離。乾燥有機相（MgS04 )及於真空中除去溶劑。藉由使用乙酸乙酯和庚烷（2:1)之混合物作為溶析液層析於莫克（Merck)矽石60板上純化而得142毫克之（1,4-二甲基- 2-(4-氧基-5-苄基-2,3,4,5-四氫-111-萘并[2,1-13]氮雜蓽-3 -基胺甲醢基）乙基）胲甲酸第三-丁酯。 1 H NMR (CDC13 ) δ 1.34 (s,6Η) ; 1.40 (s , 9H) ; 1.99 ~ 3 8 - 本纸張尺度適用中國國家棣準（CNS ) A4规格（210X297公嫠）經濟部中央揉準局貝工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（u) (m.lH); 2.55 ( m , 1 Η ) ; 2.75 ( m , 1 Η ) ; 3.25 (dd.lH)； 4.47 (ιβ,ΙΗ); 4.83 ( d , 1 Η , J = 1 7 Η ζ ) ; 5.30 (brs.lH); 5.45 (d,1Η,J = 17Hz) ; 6.71 ( d, 1 Η , J = 1 0 Ηζ) ; 7.21 (s, 5H); 7.25-7.98 (m,6H)° 將（1,卜二甲基- 2-(4-氧基-5-苄基-2,3 ,4,5-四氫-1Η-萘并[2, Ι-b]氮雑箪-3-基胺甲醯基）乙基）胺甲酸第三-丁酯（ 13 3毫克，0.26牽冥耳）溶解於3«11(：1於乙酸乙酯（1.5毫升 )中且授拌過夜。加入乙醚（5毫升）及過濾掉沈澱囿體並K 乙醚（2x1毫升）洗滌。此得98毫克之 3-胺基-3-甲基- N-(5 -苄基-4-氧基-2,3,4,5-四氫-111-萘並[2,1-1)]氮雜蓽-3-基）丁醯胺塩酸塩。 1 H NMR (CDC13 ) δ 1.20 (s,3Η) ; 1.25 (s , 3H) ; 2.50-1.15 (m,3H); 3.40 (ι,ΙΗ); 4.25 (m, 1H) ; 4.85 (d,lH, J = 17Hz); 5.45 (d, 1H, J = 17Hz) ; 7.15-7.25 (at, 6 H ) ; 7.50 -7.97 U，4H); 8.10 (d，lH); 8.72 (d，lH)。 HPLC ·· Rt = 32 · 7分鐘（方法 A )。

Cz e 9 N3 〇z ， HC1， 1 1/2 0 之計算值： C,65. 19% ; Η,6.98% ; N,8.77% ;賁驗值： C , 6 4 . 9 7% ； Η , 6 . 80% ； Ν , 8 . 55% 〇 -39- 本紙張尺度速用中國國家揉準（CNS ) A4g ( 210Χ297公釐） (請先聞讀背面之注意事項再填寫本育)

A

、1T -丨你明灿' 321640 附件㈠

1.概述鼠生長激素（GH)評估已經被發展成為測定血清和培養基樣品中之鼠GH之高容量篩選法，此評估法條閃爍近端評估（Scintination Proximity Assay), SPA是一種不需要分離步驟以及添加液醱閃爍之適用於放射配位结合之評估法。在該項技術中，第一抗體配位基錯合物與SPA試劑反應，該試劑含結合於氟微球體（flucaicrosphere)之第二捕捉抗體。任何結合於第一抗體的放射標記配位基因此將被固定於氟微球體。因為弱；9放射劑（例如1 2 5 I)需接近閃爍分子以産生光，才可能不蒲要分離步驟而使配位基濃度定量。此評估法係於徹力價盤上進行，以々閃爍計數器測定。評估法中之第一抗體為兔之抗鼠GH,放射標記追琮劑為鼠GH,其偵測限制（定義為Q + 2SD)為4ng/al。此評估法在内（inter)和間（intra)評估變化，血清樣本回復和稀釋期間呈線性等方面有效，緦評估變化（結合内評估變化和間評估變化）分別為低對照組之18.1%(17ng/Bl).中對照組之12.6%(20〇1^/1»1)以及高對照組之5.0%(130〇1^/181) 。鼠GH回復（從11到850ng/nil)到血清介於109和130%之間 ,在培養基和血清中之稀釋基本上呈線性。 2.鼠G Η評估之材料和試劑 2 . 1抗鼠GH抗體兔子之起始免疫僳以lQQw g純化鼠GH於（Freuds)完全 1 佐劑中進行，接著每月以同量抗原於弗氏不完全佐劑中進行免疫接種。免疫接種後1C天施行放血，混合高價 (1^81^^8^(1)之放血，貯存於4 1〇,抗體稀釋400〜7()0倍後使用。 2 . 2追综劑放射標記鼠生長激素釋出依S0P-S436-072-JBKr( chlcramin-T)加以放射標記，1 z s 1鼠（}11之純度僳以 RP-HPLC (方法rGHOl)加以測定。 2. 3校正劑由鼠腦下腺之純化GH溶於PBS，1XBSA, 0.02 Tween 20 製成校正劑，PH為7.6。使用量為0 - 8.2 - 2 4 . 7 - 7 4 . 1 - 2 2 2 -S 6 6 - 2 0 0 0 ng/Bl,貯存在-80¾，解凍5次，穩定期可逹2年以上。 2 . 4對照組在稀釋缓衝液中之生物鼠GH:高、中、低和血清對照组，水平約3 0 0 ng/Hl。 2.5稀釋缓衝液 PBS, 1%PBS, 0.02¾ Tween 20, pH7.6 2 . 6 SPA試劑 S P A - P V T 抗體結合珠，A b e r s h a b R Ρ Η (3 - 〇〇 16 2 . 7微力價盤在Optiplates 進行評估。 2.8 計數器召計數器為 Packar'd Topconut 。 ^21640 3.評估吸取40/^1稀釋缓衝液到撤力價盤之井中，吸取1QW1 校正劑或樣品到井中，對校正劑測定二次，樣品測定一次。吸取以下溶液到井中：1 2 s I鼠G Η ( 1 0 0 , 0 0 c ρ π )兔一抗鼠 GH和 SPA試劑。用密封物（Topseal Packard no 6Q05161) 蓋住微力價盤，置於盤搖晃機（Titertek),以中等速度搖晃30分鐘，取出，繼缠在10t：培養10小時，該盤在Packard Topcounter中計數，用RiaSmart程式進行樣品之曲線修整和計算。 4 .評估之有效化 4 . 1偵測限制以RiaSmart程式進行偵測限制之計算。 4.2校正曲線準碓性

校正曲線，内評估（η=7) 濃度ng/B 1 B/B〇 SDX CU 0 100 - - 8.2 95.2 1.76 1.68 24.7 86.9 1.88 2.16 ^^1640 74.1 70.1 3.34 4.76 222 47.1 2.22 4.71 666 22.6 1.00 3.63 2 0 0 0 14.3 1.50 10.50 4 . 3評估變化對照組，3天内每天10個樣品濃度 ng/il 内評估間評估總評估 SD ng/ial CV % SD ng/isl CV % SD ng/al CV % 17.1 2.9 17.0 2.6 15.6 3.1 18.1 197 12.2 6.2 18.8 9.5 24.8 12.6 1300 53.6 4.1 57.1 4.4 64.9 · 5.0 -4- 4 . 4血清之回復添加鼠GH 回復率％ η 850 120 2 200 109 2 72 130 3 11 129 3 4.5培養基樣品中之稀釋線性樣品稀釋濃度ng/ml 1 5 18 培養基1 1 + 1 493 1 + 3 532 1 243 培養基2 1 + 1 224 -5- 1 + 4 244 4 . 6血清樣品中之稀釋線性樣品稀釋濃度ng/m 1 1 238 血清1 1 + 1 2 12 1 + 3 2 16 1 3 10 血清2 1 + 1 282 1 + 3 264 1 4 1.3 血清3 1 + 1 39.6 1 + 9 44.7 1 11.1 血清4 1 + 1 9,2 ^21640 腦下腺細胞培養基試驗評估。動物從丹麥購買雄Sprague-Dawley鼠（250 + /- 25g)，毎4隻 1組關於籠内，置於室内，光周期為12小時，室溫為19-24 t：,濕度為 3 0 - 6 0 %。細胞製備藉斷頭術殺死鼠，移去腦下腺，取出神經中葉立刻將其餘組織置於冰冷分離缓衝液（蓋氏培養基（Gibco 041-04030),補充1.253：D-®萄糖，2¾不必須胺基酸（Gibco 0 4 3 - 0 1 1 4 0 )和 1¾ 胎牛血清蛋白（BSA)(Signa A- 4 5 0 3 )。將組雜切成小片，轉移到補充3.8Dg/nil胰蛋白酵素 (Worthington # 3 7 0 7 TRL-3)fP (330^ g/nl DNas e (S igna D-4527)之分離緩衝液。此混合物在37C之95χ/5 3：之氣氣/ 二氣化碩中以70轉/分鐘培養35分鐘，然後將組纗在上述缓衝液中沖洗三次。用標準巴斯德吸管將組織吸到單一細胞，分散後，以尼龍（160« π)過濾細胞，除去未消化組纗。細胞懸浮液被補充胰蛋白酵素抑制劑之分離後衝液（ 0.75ng/Bl, Worthington # 2 8 2 9 ),最後再懸浮於培養基，培養基為補充 25bM HEPES(Sigiaa H- 3 3 7 5 )之 DHEM (Gibco 041-010965), 4nM麩胺酸（Gibco 043-05030H),0.0752碩酸氫鈉（3181113 3- 887 5 ), 1 0.1!!；不必須胺基酸，2.53；胎牛血清 (FCS, Gibco 0 1 1 - 0 6 2 9 0 ), 3 3：馬血清（Gibco 0 3 4 - 0 6 0 5 0 ), 10 2；新鮮鼠血清，lnMT3 (Signa T-2752)和 40/ig/l類脂醇 (dexaBethasone)(Signa D-4902) PH7.3到 2X105 細胞 / -7- 麗1之密度。將細胞種入榭力價盤（H U n e , D e n a a r k )，2 Ο 0 ju 1 /井，在8¾二氣化碩及37C培養3天。仆会物薄（試培養期間之後，以缓衝液（Hanks Balanced Salt Solution(Gibco 0 4 1 - 0 4 0 2 0 ),補充 UBSA(Signa A- 4 5 0 3 ) 0.255； D -葡萄糖（Signa G-5250)和 25mM HEPES(Signa H- 3 3 7 5 )pH7.3),在37t：預培養1小時。以90//1缓衝液取代上述缓衝液。添加1G « 1測試化合物溶液，盤於371C及53：二氣化碩培養15分鐘，倒掉培養基，在rGH SPA測試条統中分析GH含置。所有化合物濟I試劑量為ΙΟρΜ到lOOwH,利用Hill程式 (Fig P. BiosDft)建立劑量一反應之關傜。以S： Enax (GHRP-6)代表藥效（最大GH釋出，Emax, ECs。為誘導半數最大GH釋出之濃度。

^^1640 實例結構

EC50 (nM) E-Max (%) 7.5 110 75 15 350 8500 100 110 95 ~1-

Claims

年月曰修正 9, 27補充六、申請專利範圍一種通式I之化合物 Ra_ R1 0 R3

-HH -D

〇 X N (CH,) ㈧ B (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 式中R1 ，：R2和R3為氫，η為0;P為2;q為1 2，3，或 4 ;w 為 0，1 或 2 ;A 為、1T

Μ

經濟部中央標準局負工消費合作社印製 B為氫或或 Μ. 其中Ζ為—S —，Μ為可經一個或以上選自Ci 烷基 1- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐）申請專利範圍取代之四唑物；D為 ABCD 腭二唑和噬重氮（噻二唑）之任何異構 R8 R? (CH2)x (CS2), Η R7 、RiO '其宁r為Ο ，1 ，2或3 ，s為Ο ; R 7和R s分別為氫或 Ci _s烷基；或R7 %R3可連接在一起形成環丙基 ;R9和R1 σ分別為氫，支鏈或非支鏈（：1 -羥烷基 :或其藥學上可接受塩。 2 ·如申請專利範圍第1項乏化合物，其中R1 ，R2和 R3 為氫，η 為 0;p 為 2;q 為 1 ，2，3，或 4;w 為0，1或2 ; A為

^—-------「*裝-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、1Τ .-ft Μ 或. Β為氫或

經濟部中央梯隼局男工消費合作社印製其中Ζ為一S Μ為四唑基，可經一個或Μ上選自C ^ 烷基取代之三本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS ) A4規格（210X29?公釐） 3^1640 ABCD 六、申請專利範圍唑，聘 (噬二唑）之任何異構物；D為 R8 R9 (〇Κ,)τ R7 (CH2)s N R 10 經濟部中央梯準局貝工消費合作社印製其中r為0 ，1 ，2或3 ，s為0 ; R7和R8分別為氫或 Ci 烷基；或R7和R8可連接在一起形成環两基；Rg和R1 ◦分別為氫，支鍵或非支鏈Ci _s -羥烷基；或其藥學上可接受塩。 3 ·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R7和RS 可連接為環丙基。 4 ·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中w為1 。 5 ·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R1 - R 2 和R 3為氫。 6 ·根據申請專利範圍第4項之化合物，其中R1 > R 2 和R 3為氫。 * 7 ·根據申請專利範圍第1項之化合物，其中q為1 *及A為 -〇 8，根據申請專利範圍第4項之化合物，其中Q為1 ，及 Δ為 f丨 ^ 。

9 ·根據申請專利範圍第5項之化合物，其中q為1 ，及本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 321640 ab8s C8 D8 T7、申請專利祀圍 I—< 為 α 中其物合化之項 6 第圍範利專請甲據根〇為 A 及

為 B 中其物合化之項 IX 第圍範利專請申據根 1X TX

或

及 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) —. τ 之代取基甲經和基唑四之代取未。請由群申自族據選之根係成 . Μ 組 2 所基唑訂物合 fb 之項 3 第圍範利專為 B 中其 Μ 或

及經濟部中央標準局負工消費合作社印製所基唑為二 Β 聘中之其代 ’ 取物基合甲化經之和項基 4 唑第四圍之範代利取專未。請由群申自族據選之根係成 · Μ組 3

或

所基 0Φ 二聘之代取基甲經和基. 唑四之代取未由自選係 Μ 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） Α8 Β8 C8 D8 六、申請專利範圍組成之族群。 1 4 *根據申請專利範圍第6項之化合物，其中B為

Μ係選自由未取代之四唑基和經甲基取代之聘二唑基所組成之族群。 1 5 ·根據申請專利範圍第7項之化合物，其中Β為 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 装·

、νβ .Μ係選自由未取代之四唑基和經甲基取代之聘二唑基所組成之族群。 1 6 ·根據申請專利範圍第8項‘之化合物，其中Β為

經濟部中央標準局負工消費合作社印製 Μ係選自由未取代之四唑基和經甲基取代之聘二唑基所組成之族群。 1 7 ·根據申請專利範圍第1 1項之化合物，其中該聘二唑為1 ，3，4 一聘二唑。 1 8 *根據申請專利範圍第1 2項之化合物，其中該聘二唑為1 ，3，4 —暍二唑。本紙張尺度逍用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐〉 321640 韶 C8 D8 六、申請專利範圍 1 9 ·根據申請專利範圍第1 6項之化合物，其中該聘二唑為1 ，3，4 一聘二唑。 2 0 >根據申請專利範圍第1項之化合物，其中r為1 ， s為0，R7和R3各表ct_5垸基，及R3和 R1Q 各表氫或R3和R1 Q之一為C2 _羥烷基且另一個為氫 0 21 ，根據申請專利範圍第4項之化合物，其中r為1 ， s為0 * R7和R8各表Ci 烷基，及R9和R1 ° 各表氫或R9和R1 °之一為Cz —羥烷基且另一個為氫〇 22·根據申請專利範圍第5項之化合物，其中r為1 ， s為0，R7和RS各表Cl _s烷基，及R9和R1 ° 各表氫或R3和R1 °之一為C2 —羥烷基且另一個為氫 0 2 3 ·根據申請專利範圍第6項之化合物，其中r為1 ， s為0 ，R 7和R 8各表C 1 烷基，及R 9.和R 1 ° 各表氫或R9和R1 °之一為C2 _羥烷基且另一個為氫經濟部中央梯準局貝工消費合作社印装 J--------1裝— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 4 0 2 4 ·根據申請專利範圍第7項之化合物，其中r為1 ， S為0，R7和R8各表Ci _5烷基，及R3和〇各表氫或R3和R1 °之一為C2 —羥烷基且另一個為S 0 25 ·根據申請專利範圍第8項之化合物，其中r為1 ， -6- 本紙張尺度速用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） ο 4 6 2 2 3 ABCD 六、申請專利範圍 S為〇，R7和R3各表Ci.s 烷基，及R3和R1C 各表氫或R3和R1 °之一為C2 _羥烷基且另一個為氫 0 2 6 ·根據申請專利範圍第1 1項之化合物，其中r為1 ，3為0，R7和R8各表Ct _s烷基，及R9和 R1 °各表氫或R9和R1 Q之一為C2 -羥烷基且另一個為氫。 27 ·根據申請專利範圍第1 2項之化合物，其中r為1 ，sSO，R7和R8各表Ci 烷基，及R9和R1 0 各表氫或R3和R1 °之一為C2 —羥烷基且另一個為氫 0 28 ·根據申請專利範圍第1 6項之化合物，其中r為1 ，3為0 ，R7和R8各表Ci _5烷基，及R9和 R1 °各表氫或R9和R1 °之一為C2 —羥烷基且另一個為氫。 29 ·根據申請專利範圍第17項之化合物，其中r為1 經濟部中央棣準局属工消費合作社印製 *--------「裝-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .41 ，3為0，R7和R8各表Ct _s烷基，及R3和 R1 °各表氫或R3和R1 °之一為C2 —羥烷基且另一個為氫。 30 ·根據申請專利範圃第1 8項之化合物，其中r為1 ，s為0，R7和R3各表Ct _.5烷基，及R9和 R1 °各表氫或Rg和R1 °之一為Cz _羥烷基且另一個為氫。 -7- 本紙张尺度逋用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ^1640 邰 C8 D8 六、申請專利範圍 3 1 ·根據申請專利範圍第1 9項之化合物，其中r為1 ，sSO ，R7和R8各表Ci _5烷基，及R_3和 R1 °各表氫或Rg和R1 °之一為C2 _羥烷基且另一個為氫。 3 2 ·根據申請專利範園第2 0項之化合物，其中R 7和 R 8為各表甲基。 33 ·根據申請專利範圔第2 1項之化合物，其中R7和 R 8為各表甲基。 3 4 ·根據申請專利範圍第2 5項之化合物，其中R 7和 R 8為各表甲基。 35 ·根據申請專利範圍第26項之化合物，其中R7和 R 8為各表甲基。 36 ·根據申請專利範圍第27項之化合物，其中R7和 R 8為各表甲基。. 37 ·根據申請專利範圍第28項之化合物，其中R7和 R 8為各表甲基。 3 8 ·根據申請專利範圍第1項之化合物，其係選自：經濟部中央標準局男工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 3-胺基-3-甲基- N-(4-氧基-5-(2’-四唑-5-基）-聯苯- 4-基甲基）-2,3,4,5-四氫-1!^-蔡并[2,卜^氮雜»-3-基）-丁醯胺； 3-胺基-3-甲基- N-(4-氧基- 5-(4-(4-(5 -甲基-[1,3,4] 皞二唑-2-基）磚吩-3-基）苄基）- 2., 3 , 4 , 5-四氫-1H-萘并 [2,卜b]氮雜S-3 -基）丁醯胺； -8 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 321640 ?8 D8 六、申請專利範圍 3 - ( ( 2 R )-羥丙胺基）-3 -甲基-N - ( 5 - U - (4 - ( 5 -甲基-[1 , 3 ,4]聘二唑-2-基）_吩-3-基）苄基）-4-氧基-2 ,3,4,5-四氣-萘并[2,卜b]氮雜罩-3-基）丁醯胺； 1-胺基環丙烷羧酸（4 -氧基- 5- [2’-(1Η -四唑-5-基）-聯苯-4-基甲基]-2,3,4, 5 -四氫-1H -萘并[2,卜b]氮雜堇-3 -基）醯胺； 3-胺基-3-甲基- N-(5-苄基-4-氧基- 2,3,4,5-四氫-lH-萘并[2,；L-b】氮雜¾-3-基）丁醯胺。 39 ’ 一種剌激從腦下腺釋放生長激素之藥學組成物，其包括根據申請專利範圍第1至3 8項中任一項的化合物或其藥學上可接受塩K及藥學上可接受載體或稀釋劑。 40 · —種刺激從腦下腺釋放生長激素之藥學組成物，其係為劑量形式，包括0·0001至500毫克之根據申請專利範圍第1至3 8項中任一項之化合物或其藥學上可接受塩K及藥學上可接受載體或稀釋劑。 4 1 ·根據申請專利範圍第3 9項之藥學組成物，其係用於口服，經皮，經肺，或非經腸道投與。 42 ·根據申請專利範圍第40項之藥學組成物，其係用於口服，經皮，經肺，或非經腸道投與。 4 3 ·根據申請專利範圍第3 9項之藥學組成物，其係用於製備治療因生長激素不足所造成的功能失調或紊亂。 44 .根據申請專利範圍第3 9項之藥學組成物’其係用於製備用於剌激腦下腺釋出生長激素的藥劑° -9- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝· 訂