TW202317097A - 戊二醯亞胺類化合物與其應用 - Google Patents
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Abstract
本發明公開了一種戊二醯亞胺類化合物與其應用。具體公開了式（VII-0）所示化合物及其藥學上可接受的鹽。
Description
本發明涉及一類戊二醯亞胺類化合物與其應用。具體涉及式（VII-0）所示化合物及其藥學上可接受的鹽。
本發明主張如下的優先權：
CN202111050400X，申請日：2021年9月8日；
CN2021113429975，申請日：2021年11月12日；
CN2021113508407，申請日：2021年11月15日；
CN2021113956259，申請日：2021年11月23日；
CN2021115450152，申請日：2021年12月16日；
CN2021116025367，申請日：2021年12月24日；
CN2022110348171，申請日：2022年8月26日。
白細胞介素-1受體相關激酶4 (Interleukin-1 Receptor-Associated Kinase 4，IRAK4) 是細胞內絲氨酸/蘇氨酸激酶IRAK家族的成員之一，在蛋白質磷酸化以及細胞信號傳導中發揮了重要作用。IRAK4是由Toll樣受體 (Toll-Like Receptor，TLR) 和白細胞介素-1受體 (IL-1 Receptor，IL-1R) 激活介導的炎症和免疫反應過程中的關鍵蛋白。IRAK4作為TLR與IL-1R的信號傳導通路下游的關鍵蛋白，接收上游信號從而激活其下游的NF-κB和JNK信號通路。因此，IRAK4被認為在炎症反應和免疫調節中發揮著重要作用，成為了一類重要治療靶點，吸引了廣泛的研發興趣。
IRAK4蛋白折疊後形成了一個「口袋狀」結構，可以與ATP結合，從而實現其蛋白質磷酸化的功能。當前的IRAK4小分子抑制劑大多是對該「口袋」區域進行競爭性結合，從而抑制其磷酸化功能進行藥物開發。然而，IRAK4的功能不僅僅是對蛋白質的磷酸化，也可以和髓樣分化因子 (MyD88) 形成複合物從而發揮功能。IRAK4對於JNK信號通路的激活需要其磷酸化功能，但對於NF-κB信號通路的激活則不需要其磷酸化功能，說明IRAK4不但具有激酶的功能，也具備支架蛋白功能在信號通路中發揮著作用。因此，傳統的靶向IRAK4的小分子激酶抑制劑無法完全阻斷IRAK4的所有生物學功能。
全新的研究方法是降解IRAK4，更徹底地阻斷IRAK4的所有生物學功能。蛋白降解靶向嵌合體 (Proteolysis Targeting Chimera, PROTAC) 是一種應用泛素–蛋白酶體系統靶向特定蛋白質並誘導其在細胞內降解的技術。泛素-蛋白酶體系統是細胞內蛋白質降解的主要途徑，其正常生理功能主要負責清除細胞內變性、突變或有害蛋白質，細胞內80%以上蛋白質的降解都依賴於泛素–蛋白酶體系統。PROTAC利用細胞自身的蛋白質破壞機制，清除細胞中的特異性靶向蛋白。迄今為止，PROTAC技術已日趨成熟，可用於靶向多種蛋白質，包括支架蛋白、轉錄因子、酶和調節蛋白等。因此，開發靶向IRAK4的PROTAC分子，通過降解IRAK4，去除IRAK4，更徹底地阻斷IRAK4的所有功能，進而從根本上對IRAK4信號通路進行全面抑制，從而更好地發揮抗炎、免疫調節效果。
本發明還提供式（VII-0）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
，
其中，
L
1選自
、
、-(CH
2)
3-和-O(CH
2)
3-；
L
2選自-CR
5R
6-和O；
R
1、R
2、R
3、R
4、R
5和R
6分別獨立地選自H和鹵素；
或者，R
1與R
2、R
3與R
4、R
5與R
6任選與它們相連的碳原子成環丙基；
R
7選自
、
和
；
R
8選自C
1-4烷基、C
1-4鹵代烷基、環丙基和鹵代環丙基；
環A選自
或
；
X
1選自CH和N；
X
2選自NH、O、S和Se；
環B選自C
5-8環烷基和5-8元雜環烷基，所述C
5-8環烷基和5-8元雜環烷基各自獨立地任選被1、2、3或4個R
a取代；
R
a選自鹵素、OH、NH
2、C
1-3烷基、C
1-3烷氧基、C
1-3鹵代烷基和C
1-3鹵代烷氧基；
環C選自C
5-8環烷基和5-8元雜環烷基，所述C
5-8環烷基和5-8元雜環烷基各自獨立地任選被1、2、3或4個R
b取代；
R
b選自鹵素、OH、NH
2、C
1-3烷基、C
1-3烷氧基、C
1-3鹵代烷基和C
1-3鹵代烷氧基。
本發明還提供式（VII）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
，
其中，
L
1選自
、
、-(CH
2)
3-和-O(CH
2)
3-；
L
2選自-CR
5R
6-和O；
R
1、R
2、R
3、R
4、R
5和R
6分別獨立地選自H和鹵素；
或者R
1與R
2、R
3與R
4、R
5與R
6任選與它們相連的碳原子成環丙基；
R
7選自
、
和
；
T
1選自CH和N；
T
2選自CH和N；
T
3選自CH和N；
環A選自
或
；
X
1選自CH和N；
X
2選自NH、O、S和Se。
本發明的一些方案中，上述R
1、R
2、R
3、R
4、R
5和R
6分別獨立地選自H和F，其他變量如本發明所定義。
本發明的一些方案中，上述L
1選自
、
、
、
和
，其他變量如本發明所定義。
本發明的一些方案中，上述L
2選自-CH
2-和O，其他變量如本發明所定義。
本發明的一些方案中，上述
選自
、
、
、
、
、
、
和
，其他變量如本發明所定義。
本發明的一些方案中，上述結構單元
選自
、
、
、
、
、
、
、和
，其他變量如本發明所定義。
本發明的一些方案中，上述R
7選自
、
、
和
，其他變量如本發明所定義。
本發明的一些方案中，上述環A選自
、
、
、
、
、
、
、
、
、
和
，其他變量如本發明所定義。
本發明的一些方案中，上述環A選自
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
和
，其他變量如本發明所定義。
本發明還提供了式（VII-1）、（VII-2）、（VII-3）、（VII-4）、（VII-5）和（VII-6）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
，
其中，X
1、X
2、R
3、R
4、T
1和L
1如本發明所定義。
本發明還提供了式（VII-1R）、（VII-1S）、（VII-2R）、（VII-2S）、（VII-3R）、（VII-3S）、（VII-4R）和（VII-4S）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
,
其中，X
1、X
2、R
3、R
4、T
1和L
1如本發明所定義。
本發明還提供了式（VII-1RT）、（VII-1ST）、（VII-2RT）、（VII-2ST）、（VII-3RT）、（VII-3ST）、（VII-5T）和（VII-6T）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
，
其中，X
1、X
2、R
3、R
4、T
1和L
1如本發明所定義。
本發明還提供了下式所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
，
，
其中，X
1、X
2、R
3、R
4、T
1和L
1如本發明所定義。
本發明還提供了式（IV）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
,
其中，
L
1選自
和
；
L
2選自-CR
5R
6-；
R
1、R
2、R
3、R
4、R
5和R
6分別獨立地選自H和鹵素；
或者R
1與R
2、R
3與R
4、R
5與R
6任選與它們相連的碳原子成環丙基；
T
1選自CH和N；
環A選自
和
；
X
1選自CH和N；
X
2選自NH、O、S和Se。
在本發明的一些方案中，式（IV）中所述R
1、R
2、R
3、R
4、R
5和R
6分別獨立地選自H和F，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（IV）中所述L
1選自
和
，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（IV）中所述L
2選自-CH
2-，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（IV）中所述結構單元
選自
和
，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（IV）中所述環A選自
、
、
、
、
、
、
、
和
，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（IV）中所述環A選自
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
和
，其他變量如本發明所定義。
在本發明還提供（IV-1）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
其中，
X
1選自CH和N；
X
2選自NH、O、S和Se。
本發明還提供式（III-2）和（IV-2）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
其中，X
1選自CH和N；
L
1、L
2和T
1如本發明所定義。
本發明還提供式（I-2）或（IV-2a）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
，
其中，T
2選自CH和N；
L
1、L
2和T
1如本發明所定義。
本發明提供了式（I）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
,
其中，
L
1選自
和
；
L
2選自-CR
5R
6-；
R
1、R
2、R
3、R
4、R
5和R
6分別獨立地選自H和鹵素；
或者R
1與R
2、R
3與R
4、R
5與R
6任選與它們相連的碳原子成環丙基；
T
1選自CH和N；
環A選自
和
；
X
1選自CH和N；
X
2選自CH
2、NH、O、S和Se。
在本發明的一些方案中，式（I）中所述R
1、R
2、R
3、R
4、R
5和R
6分別獨立地選自H和F，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（I）中所述L
1選自
和
，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（I）中所述L
2選自-CH
2-，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（I）中所述結構單元
選自
和
，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（I）中所述環A選自
、
、
和
，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（I）中所述環A選自
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
和
，其他變量如本發明所定義。
本發明還提供了式（I-1）和（I-2）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
，
其中，X
1選自CH和N；
L
1、L
2和T
1如本發明所定義。
本發明提供了式（II）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
其中，
L
1選自
和
；
L
2選自-CR
5R
6-；
R
1、R
2、R
3、R
4、R
5和R
6分別獨立地選自H和鹵素；
或者R
1與R
2、R
3與R
4、R
5與R
6任選與它們相連的碳原子成環丙基；
T
1選自CH和N；
ELM選自
。
在本發明的一些方案中，式（II）中所述R
1、R
2、R
3、R
4、R
5和R
6分別獨立地選自H和F，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（II）中所述L
1選自
和
，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（II）中所述L
2選自-CH
2-，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（II）中所述結構單元
選自
，其他變量如本發明所定義。
本發明提供了式（I）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
,
其中，
L
1選自
和
；
L
2選自-CR
5R
6-；
R
1、R
2、R
3、R
4、R
5和R
6分別獨立地選自H或鹵素；
或者R
1與R
2、R
3與R
4、R
5與R
6任選與它們相連的碳原子成環丙基；
T
1選自CH和N；
環A選自
或
；
X
1選自CH或N；
X
2選自CH
2、NH、O、S或Se。
在本發明的一些方案中，式（I）中所述R
1、R
2、R
3、R
4、R
5和R
6分別獨立地選自H和F，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（I）中所述L
1選自
或
，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（I）中所述L
2選自-CH
2-，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（I）中所述結構單元
選自
或
，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（I）中所述環A選自
、
、
或
，其他變量如本發明所定義。
在本發明的一些方案中，式（I）中所述環A選自
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
或
，其他變量如本發明所定義。
本發明還提供了式（III-1）、（III-2）或（III-3）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
其中，X
1選自CH和N；
L
1、L
2和T
1如本發明所定義。
本發明還提供了式（I-1）、（I-2）或（III-3a）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，
，
其中，X
1選自CH和N；
L
1、L
2和T
1如本發明所定義。
本發明還有一些方案由上述各變量任意組合而來。
本發明還提供下述化合物或其藥學上可接受的鹽：
.
。
本發明的一些方案中，上述化合物選自，
。
本發明的一些方案中，上述化合物選自:
。
本發明的一些方案中，上述化合物選自：
。
本發明還提供本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽在製備治療與白細胞介素-1受體相關激酶4蛋白降解靶向嵌合體相關疾病的藥物中的應用。
本發明還提供治療與白細胞介素-1受體相關激酶4蛋白降解靶向嵌合體相關疾病的方法，包括對需要該治療的哺乳動物（優選人類）給予治療有效量的本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽。
本發明的一些方案中，上述與白細胞介素-1受體相關激酶4蛋白降解靶向嵌合體相關疾病選自炎症或免疫類疾病。
本發明還提供如下的合成路線：
技術效果
本發明化合物在細胞K562 IRAK4-HiBiT中展現出優異的靶蛋白降解作用。本發明化合物的口服血漿系統暴露量較高。在齧齒動物小鼠和非齧齒類動物比格犬、食蟹猴中，本發明化合物的藥代動力學性質較優。本發明化合物對尿酸鈉致大鼠急性痛風性關節炎症的後足足容積、後足關節炎指數評分和後足承重差均具有治療效果，且呈劑量依賴。本發明化合物對咪喹莫特致小鼠銀屑病模型病理評分、耳厚度增加和脾臟重量均有改善作用，對病灶處皮膚中的炎症因子也有抑制作用，表明其對該銀屑病模型動物具有治療效果，且高劑量（300 mpk）的治療效果優於中低劑量（100 mpk、30 mpk）。
定義和說明
除非另有說明，本文所用的下列術語和短語旨在具有下列含義。一個特定的術語或短語在沒有特別定義的情況下不應該被認為是不確定的或不清楚的，而應該按照普通的含義去理解。當本文中出現商品名時，意在指代其對應的商品或其活性成分。
這裡所採用的術語「藥學上可接受的」，是針對那些化合物、材料、組合物和/或劑型而言，它們在可靠的醫學判斷的範圍之內，適用於與人類和動物的組織接觸使用，而沒有過多的毒性、刺激性、過敏性反應或其它問題或併發症，與合理的利益/風險比相稱。
術語「藥學上可接受的鹽」是指本發明化合物的鹽，由本發明發現的具有特定取代基的化合物與相對無毒的酸或鹼製備。當本發明的化合物中含有相對酸性的功能團時，可以通過在純的溶液或合適的惰性溶劑中用足夠量的鹼與這類化合物接觸的方式獲得鹼加成鹽。本發明的某些特定的化合物含有鹼性和酸性的官能團，從而可以被轉換成任一鹼或酸加成鹽。
本發明的藥學上可接受的鹽可由含有酸根或鹼基的母體化合物通過常規化學方法合成。一般情況下，這樣的鹽的製備方法是：在水或有機溶劑或兩者的混合物中，經由游離酸或鹼形式的這些化合物與化學計量的適當的鹼或酸反應來製備。
術語「泛素連接酶」指促進泛素至特定底物蛋白質的轉移的蛋白質家族，靶向底物蛋白質用於降解。例如，IAP，E3泛素連接酶蛋白，其單獨或與E2泛素綴合酶組合引起泛素與靶蛋白上的離胺酸的附著，並且隨後靶向特定蛋白質底物用於被蛋白酶體降解。因此，單獨或與E2泛素綴合酶複合的E3泛素連接酶負責泛素至靶蛋白的轉移。一般而言，泛素連接酶涉及多泛素化，使得第二泛素附著於第一泛素；第三泛素附著於第二泛素，如此等等。多泛素化將蛋白質標記用於被蛋白酶體降解。然而，存在一些泛素化事件，其限於單泛素化，其中僅單個泛素通過泛素連接酶加入底物分子。單泛素化蛋白質不被靶向蛋白酶體用於降解，而是可以在其細胞位置或功能中改變，例如，經由結合具有能夠結合泛素的結構域的其它蛋白質。更複雜的是，泛素的不同離胺酸可被E3靶向以製備鏈。最常見的離胺酸是泛素鏈上的Lys48。這是用於製備被蛋白酶體識別的聚泛素的離胺酸。
術語「靶向嵌合體」表示包含兩種小分子配體的雙官能分子，一種具有針對目的靶蛋白的高親和力，以及第二種用於募集E3連接酶，所述E3連接酶使蛋白質泛素化並靶向蛋白質以通過26S蛋白酶體進行蛋白水解。
本發明化合物的治療劑量可根據例如以下而定：治療的具體用途、給予化合物的方式、患者的健康和狀態，以及簽處方醫師的判斷。本發明化合物在藥用組合物中的比例或濃度可不固定，取決於多種因素，它們包括劑量、化學特性(例如疏水性)和給藥途徑。
術語「治療」意為將本發明所述化合物或製劑進行給藥以改善或消除疾病或與所述疾病相關的一個或多個症狀，且包括：
(i) 抑制疾病或疾病狀態，即遏制其發展；
(ii) 緩解疾病或疾病狀態，即使該疾病或疾病狀態消退。
術語「治療有效量」意指(i)治療特定疾病、病況或障礙，(ii)減輕、改善或消除特定疾病、病況或障礙的一種或多種症狀，或(iii)預防或延遲本文中所述的特定疾病、病況或障礙的一種或多種症狀發作的本發明化合物的用量。構成「治療有效量」的本發明化合物的量取決於該化合物、疾病狀態及其嚴重性、給藥方式以及待被治療的哺乳動物的年齡而改變，但可例行性地由本發明所屬技術領域具有通常知識者根據其自身的知識及本公開內容而確定。
除非本發明中另外要求，在整個說明書和其後的請求項書中，詞語「包括(comprise)」及其英文變體例如「包括(comprises)」和「包括(comprising)」應解釋為開放式的、含括式的意義，即「包括但不限於」。
在整個本說明書中提到的「一實施方案」或「實施方案」或「在另一實施方案中」或「在某些實施方案中」意指在至少一實施方案中包括與該實施方案所述的相關的具體參考要素、結構或特徵。因此，在整個說明書中不同位置出現的短語「在一實施方案中」或「在實施方案中」或「在另一實施方案中」或「在某些實施方案中」不必全部指同一實施方案。此外，具體要素、結構或特徵可以任何適當的方式在一個或多個實施方案中結合。
除非另有說明，術語「異構體」意在包括幾何異構體、順反異構體、立體異構體、對映異構體、旋光異構體、非對映異構體和互變異構體。
本發明的化合物可以存在特定的幾何或立體異構體形式。本發明設想所有的這類化合物，包括順式和反式異構體、(-)- 和(+)-對映體、(
R)- 和(
S)-對映體、非對映異構體、(
D)-異構體、(
L)-異構體，及其外消旋混合物和其他混合物，例如對映異構體或非對映體富集的混合物，所有這些混合物都屬於本發明的範圍之內。烷基等取代基中可存在另外的不對稱碳原子。所有這些異構體以及它們的混合物，均包括在本發明的範圍之內。
除非另有說明，術語「對映異構體」或者「旋光異構體」是指互為鏡像關係的立體異構體。
除非另有說明，術語「順反異構體」或者「幾何異構體」系由因雙鍵或者成環碳原子單鍵不能自由旋轉而引起。
除非另有說明，術語「非對映異構體」是指分子具有兩個或多個手性中心，並且分子間為非鏡像的關係的立體異構體。
除非另有說明，「(+)」表示右旋，「(-)」表示左旋，「(±)」表示外消旋。
除非另有說明，用楔形實線鍵（
）和楔形虛線鍵（
）表示一個立體中心的絕對構型，用直形實線鍵（
）和直形虛線鍵（
）表示相對構型，例如，用
或
表示反式1、4-二取代的環己烷，用
或
表示順式1、4-二取代的環己烷。
除非另有說明，術語「富含一種異構體」、「異構體富集」、「富含一種對映體」或者「對映體富集」指其中一種異構體或對映體的含量小於100%，並且，該異構體或對映體的含量大於等於60%，或者大於等於70%，或者大於等於80%，或者大於等於90%，或者大於等於95%，或者大於等於96%，或者大於等於97%，或者大於等於98%，或者大於等於99%，或者大於等於99.5%，或者大於等於99.6%，或者大於等於99.7%，或者大於等於99.8%，或者大於等於99.9%。
除非另有說明，術語「異構體過量」或「對映體過量」指兩種異構體或兩種對映體相對百分數之間的差值。例如，其中一種異構體或對映體的含量為90%，另一種異構體或對映體的含量為10%，則異構體或對映體過量（ee值）為80%。
可以通過的手性合成或手性試劑或者其他常規技術製備光學活性的(
R)-和(
S)-異構體以及
D和
L異構體。如果想得到本發明某化合物的一種對映體，可以通過不對稱合成或者具有手性助劑的衍生作用來製備，其中將所得非對映體混合物分離，並且輔助基團裂開以提供純的所需對映異構體。 或者，當分子中含有鹼性官能團（如氨基）或酸性官能團（如羧基）時，與適當的光學活性的酸或鹼形成非對映異構體的鹽，然後通過本領域所公知的常規方法進行非對映異構體拆分，然後回收得到純的對映體。此外，對映異構體和非對映異構體的分離通常是通過使用色譜法完成的，所述色譜法採用手性固定相，並任選地與化學衍生法相結合（例如由胺生成氨基甲酸鹽）。
本發明的化合物可以在一個或多個構成該化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素標記化合物，比如氚（
3H），碘-125（
125I）或C-14（
14C）。又例如，可用重氫取代氫形成氘代藥物，氘與碳構成的鍵比普通氫與碳構成的鍵更堅固，相比於未氘化藥物，氘代藥物有降低毒副作用、增加藥物穩定性、增強療效、延長藥物生物半衰期等優勢。本發明的化合物的所有同位素組成的變換，無論放射性與否，都包括在本發明的範圍之內。
當所列舉的連接基團沒有指明其連接方向，其連接方向是任意的，例如，
中連接基團L為-M-W-，此時-M-W-既可以按與從左往右的讀取順序相同的方向連接環A和環B構成
，也可以按照與從左往右的讀取順序相反的方向連接環A和環B構成
。所述連接基團、取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。
除非另有規定，當某一基團具有一個或多個可連接位點時，該基團的任意一個或多個位點可以通過化學鍵與其他基團相連。當該化學鍵的連接方式是不定位的，且可連接位點存在H原子時，則連接化學鍵時，該位點的H原子的個數會隨所連接化學鍵的個數而對應減少變成相應價數的基團。所述位點與其他基團連接的化學鍵可以用直形實線鍵（
）、直形虛線鍵（
）、或波浪線（
）表示。例如-OCH
3中的直形實線鍵表示通過該基團中的氧原子與其他基團相連；
中的直形虛線鍵表示通過該基團中的氮原子的兩端與其他基團相連；
中的波浪線表示通過該苯基基團中的1和2位碳原子與其他基團相連，
表示萘環上的任意可連接位點可以通過1個化學鍵與其他基團相連，至少包括
、
、
、
、
、
這6種連接方式。
「任選」或「任選地」指的是隨後描述的事件或狀況可能但不是必需出現的，並且該描述包括其中所述事件或狀況發生的情況以及所述事件或狀況不發生的情況。
術語「被取代的」是指特定原子上的任意一個或多個氫原子被取代基取代，取代基可以包括重氫和氫的變體，只要特定原子的價態是正常的並且取代後的化合物是穩定的。當取代基為氧（即=O）時，意味著兩個氫原子被取代。氧取代不會發生在芳香基上。術語「任選被取代的」是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有規定，取代基的種類和數目在化學上可以實現的基礎上可以是任意的。
當任何變量（例如R）在化合物的組成或結構中出現一次以上時，其在每一種情況下的定義都是獨立的。因此，例如，如果一個基團被0-2個R所取代，則所述基團可以任選地至多被兩個R所取代，並且每種情況下的R都有獨立的選項。此外，取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。
除非另有規定，術語「鹵代」或「鹵素」本身或作為另一取代基的一部分表示氟、氯、溴或碘原子。
除非另有規定，術語「C
1-4烷基」用於表示直鏈或支鏈的由1至4個碳原子組成的飽和碳氫基團。所述C
1-4烷基包括C
1-2、C
1-3和C
2-3烷基等；其可以是一價（如甲基）、二價（如亞甲基）或者多價（如次甲基）。C
1-4烷基的實例包括但不限於甲基 (Me)、乙基 (Et)、丙基 (包括
n-丙基和異丙基)、丁基 (包括
n-丁基，異丁基，
s-丁基和
t-丁基)等。
除非另有規定，術語「C
1-3烷基」用於表示直鏈或支鏈的由1至3個碳原子組成的飽和碳氫基團。所述C
1-3烷基包括C
1-2和C
2-3烷基等；其可以是一價（如甲基）、二價（如亞甲基）或者多價（如次甲基）。
除非另有規定，術語「C
1-3烷氧基」表示通過一個氧原子連接到分子的其餘部分的那些包含1至3個碳原子的烷基基團。所述C
1-3烷氧基包括C
1-2、C
2-3、C
3和C
2烷氧基等。C
1-3烷氧基的實例包括但不限於甲氧基、乙氧基、丙氧基 (包括正丙氧基和異丙氧基)等。
除非另有規定，術語「鹵代烷基」表示烷基基團的一個或多個氫被鹵素取代，確切地包括單鹵代烷基、雙鹵代烷基和多鹵代烷基。例如 「C
1-3鹵代烷基」表示包含1至3個碳原子的單鹵代烷基和多鹵代烷基。所述C
1-3鹵代烷基包括C
1-2、C
2-3、C
3、C
2和C
1鹵代烷基等。C
1-3鹵代烷基的實例包括但不限於氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、五氟乙基、七氟丙基、二氟氯甲基、二氯氟甲基、二氟乙基、二氟丙基、二氯乙基和二氯丙基等。
除非另有規定，術語「鹵代烷氧基」表示烷氧基基團的一個或多個氫被鹵素取代，確切地包括單鹵代烷氧基、雙鹵代烷氧基和多鹵代烷氧基。例如「C
1-3鹵代烷氧基」表示包含1至3個碳原子的單鹵代烷氧基和多鹵代烷氧基。所述C
1-3鹵代烷氧基包括C
1-2、C
2-3、C
3、C
2和C
1鹵代烷氧基等。C
1-3鹵代烷氧基的實例包括但不限於三氟甲氧基、三氯甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基、五氟乙氧基、五氯乙氧基、3-溴丙氧基等。
除非另有規定，「環」表示被取代或未被取代的環烷基、雜環烷基、環烯基、雜環烯基、環炔基、雜環炔基、芳基或雜芳基。所述的環包括單環，也包括螺環、並環和橋環等雙環或多環體系。環上原子的數目通常被定義為環的元數，例如，「5～7元環」是指環繞排列5～7個原子。除非另有規定，該環任選地包含1～3個雜原子。因此，「5～7元環」包括例如苯基、吡啶基和哌啶基；另一方面，術語「5～7元雜環烷基」包括吡啶基和哌啶基，但不包括苯基。術語「環」還包括含有至少一個環的環系，其中的每一個「環」均獨立地符合上述定義。
除非另有規定，「C
5-8環烷基」表示由5至8個碳原子組成的飽和環狀碳氫基團，其包括單環和雙環體系，其中雙環體系包括螺環、並環和橋環。所述C
5-8環烷基包括C
5-6、C
5-7、C
6-7、C
5、C
6 、C
7 、C
8環烷基等；其可以是一價、二價或者多價。C
5-7環烷基的實例包括，但不限於，環戊基、環己基、環庚基、
、
、
、
、
等。
除非另有規定，術語「5-8元雜環烷基」本身或者與其他術語聯合分別表示由5至8個環原子組成的飽和環狀基團，其1、2、3或4個環原子為獨立選自O、S、N、Si或Se的雜原子，其餘為碳原子，其中碳原子可以被氧代（即C(O)），氮原子任選地被季銨化，氮和硫雜原子可任選被氧化 (即NO和S(O)
p，p是1或2)。其包括單環和雙環體系，其中雙環體系包括螺環、並環和橋環。此外，就該「5-8元雜環烷基」而言，雜原子可以佔據雜環烷基與分子其餘部分的連接位置。5-8元雜環烷基的實例包括但不限於吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、四氫噻吩基 (包括四氫噻吩-2-基和四氫噻吩-3-基等)、四氫呋喃基 (包括四氫呋喃-2-基等)、四氫吡喃基、哌啶基 (包括1-哌啶基、2-哌啶基和3-哌啶基等)、哌𠯤基 (包括1-哌𠯤基和2-哌𠯤基等)、嗎福林基 (包括3-嗎福林基和4-嗎福林基等)、二㗁烷基、二噻烷基、異㗁唑烷基、異噻唑烷基、1,2-㗁𠯤基、1,2-噻𠯤基、六氫嗒𠯤基、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
等。
本發明的化合物可以通過本發明所屬技術領域具有通常知識者所熟知的常規方法來確認結構，如果本發明涉及化合物的絕對構型，則該絕對構型可以通過本領域常規技術手段予以確證。例如單晶X射線繞射法（SXRD），把培養出的單晶用Bruker D8 venture繞射儀收集繞射強度數據，光源為CuKα輻射，掃描方式：φ/ω掃描，收集相關數據後，進一步採用直接法(Shelxs97)解析晶體結構，便可以確證絕對構型。
本發明的化合物可以通過本發明所屬技術領域具有通常知識者所熟知的多種合成方法來製備，包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及本發明所屬技術領域具有通常知識者所熟知的等同替換方式，優選的實施方式包括但不限於本發明的實施例。
化合物依據本領域常規命名原則或者使用ChemDraw®軟體命名，市售化合物採用供應商目錄名稱。
本發明所使用的溶劑可經市售獲得。
本發明採用下述縮略詞：Ph代表苯基；Me代表甲基；Et代表乙基；M表示莫耳每升；Boc代表三級丁氧羰基，是一種氨基保護基；室溫代表20~25℃。
下面通過實施例對本發明進行詳細描述，但並不意味著對本發明任何不利限制。本文已經詳細地描述了本發明，其中也公開了其具體實施例方式，對本發明所屬技術領域具有通常知識者而言，在不脫離本發明精神和範圍的情況下針對本發明具體實施方式進行各種變化和改進將是顯而易見的。
參考例1
合成路線：
步驟1：中間體BB-1-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物BB-1-1 (40 g, 416.29 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (400 mL) 中，隨後依次加入苄溴 (74.76 g, 437.10 mmol, 51.92 mL) 和碳酸銫 (339.09 g, 1.04 mol)，反應混合物在室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，向反應液中加入水 (1500 mL)，用乙酸乙酯 (5×1000 mL) 萃取。合併有機相，用10%食鹽水 (1000 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/0-20/1，體積比)，得到中間體BB-1-2。MS-ESI
m/z: 187.2 [M+H]
+.
步驟2：中間體BB-1-3的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-1-2 (58 g, 311.48 mmol) 溶於二氯甲烷 (500 mL) 中，隨後冷卻至0℃，再加入二乙氨基三氟化硫 (150.62 g, 934.43 mmol)，反應混合物緩慢升溫至室溫，並在室溫下攪拌反應16小時。反應完畢後，冷卻至0℃，向反應液緩慢滴加甲醇 (200 mL)，然後加入水 (1000 mL)，用乙酸乙酯 (1000 mL×3) 萃取。合併有機相，分別用飽和碳酸氫鈉溶液 (1000 mL) 和飽和食鹽水 (1000 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/0-20/1，體積比)，得到粗品。向所得粗品中加入石油醚 (20 mL)，室溫下攪拌2小時，過濾，濾餅用石油醚 (10 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-1-3。MS-ESI
m/z: 209.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.40-7.32 (m, 4H), 7.24-7.22 (m, 2H), 6.73 (t,
J= 55.2 Hz, 1H), 6.51 (t,
J=1.0 Hz, 1H), 5.33 (s, 2H).
步驟3：中間體BB-1-4的合成
室溫下，將中間體BB-1-3 (26.5 g, 127.28 mmol) 溶於甲醇 (300 mL) 中，隨後依次加入氫氧化鈀/碳 (5 g, 純度: 20%)和鹽酸 (2 M, 25 mL)，反應混合物加熱至60℃，並在氫氣 (50 psi) 氛圍下攪拌反應30小時。反應完畢後，冷卻至室溫，過濾除去不溶物，濾餅用甲醇 (800 mL) 淋洗，濾液減壓出去溶劑，得到中間體BB-1-4。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.41 (br s, 1H), 7.84 (d,
J=2.0 Hz, 1H), 7.00 (t,
J= 54.8 Hz, 1H), 6.51 (
J=1.2 Hz, 1H).
步驟4：中間體BB-1-5的合成
0℃下，將中間體BB-1-4 (30 g, 254.06 mmol) 溶於濃硫酸 (300 mL, 純度: 98%) 中，然後滴加濃硝酸 (68.950 g, 711.24 mmol, 49.25 mL, 純度: 65~68%)，反應混合物在0℃下攪拌反應10分鐘，然後加熱至115℃並攪拌反應16小時。反應完畢後，冷卻至室溫，將反應液緩慢倒入到冰水 (1000 mL) 中，用乙酸乙酯 (500 mL×3) 萃取。合併有機相，分別用飽和碳酸氫鈉溶液 (500 mL) 和飽和食鹽水 (500 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，得到中間體BB-1-5。MS-ESI
m/z: 164.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 14.39 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 7.31 (t,
J= 53.0 Hz, 1H).
步驟5：中間體BB-1-6的合成
室溫和氮氣保護下，將順式4-羥基環己烷甲酸甲酯 (35 g, 221.25 mmol) 溶於二氯甲烷 (350 mL) 中，隨後加入三乙胺 (22.39 g, 221.25 mmol, 30.79 mL)，冷卻至0℃，再緩慢滴加甲烷磺醯氯 (31.99 g, 279.26 mmol, 21.61 mL)，滴加完畢後，反應混合物在0℃下攪拌反應0.5小時。反應完畢後，緩慢加入水 (300 mL)，用二氯甲烷 (300 mL) 萃取。有機相用飽和食鹽水 (300 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，得到粗品，直接用於下一步。
室溫下，將上述得到的粗品和中間體BB-1-5 (13.5 g, 82.78 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (300 mL) 中，隨後加入碳酸鉀 (24 g, 173.65 mmol)，反應混合物加熱至80℃並攪拌反應16小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (100 mL)，用乙酸乙酯（40 mL×2) 萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：乙酸乙酯/石油醚=1/3，體積比)，得到中間體BB-1-6。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.22 (s, 1H), 7.12 (t,
J=53.6 Hz, 1H), 4.25-4.16 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 2.46-2.36 (m, 1H), 2.36-2.28 (m, 2H), 2.28-2.20 (m, 2H), 1.89-1.77 (m, 2H), 1.72-1.60 (m, 2H).
步驟6：中間體BB-1-7的合成
室溫下，將濕鈀碳 (1.5 g, 純度: 10%) 加入到四氫呋喃 (200 mL) 中，隨後加入中間體BB-1-6 (7.5 g, 24.73 mmol)，反應混合物在室溫和氫氣 (15 psi) 氛圍下攪拌反應15小時。反應完畢後，過濾除去不溶物，濾餅用二氯甲烷 (50 mL×2) 淋洗，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：乙酸乙酯/石油醚=1/2，體積比)，得到中間體BB-1-7。MS–ESI
m/z: 274.1 [M+H]
+.
步驟7：中間體BB-1的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-1-7 (4 g, 14.64 mmol) 溶於四氫呋喃 (40 mL) 和甲醇 (5 mL) 的混合溶劑中，隨後緩慢滴加硼氫化鋰的四氫呋喃溶液 (2 M, 14.64 mL)，滴加完畢後，反應混合物加熱至60℃並攪拌反應1小時。反應完畢後，冷卻至室溫，緩慢加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (100 mL×5) 萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，得到中間體BB-1。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.03 (s, 1H), 6.69 (t,
J=54.8 Hz, 1H), 3.95 (tt,
J=4.0 Hz, 12.0 Hz, 1H), 3.51 (d,
J=6.4 Hz, 2H), 2.21-2.13 (m, 2H), 2.01-1.93 (m, 2H), 1.77-1.64 (m, 2H), 1.63-1.51 (m, 2H), 1.21-1.09 (m, 2H).
參考例2
合成路線：
步驟1：中間體BB-2-2的合成
室溫下，將中間體BB-2-1 (5.5 g, 24.38 mmol) 和 (1R,4R)-2-氧雜-5-氮雜雙環[2.2.1]庚烷鹽酸鹽 (4.96 g, 36.56 mmol) 溶於乙腈 (60 mL) 中，隨後加入N, N-二異丙基乙胺 (9.45 g, 73.13 mmol, 12.74 mL)，反應混合物加熱至60℃並攪拌反應3小時。反應完畢後，冷卻至室溫，直接減壓濃縮除去溶劑，所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：先採用二氯甲烷，然後採用乙酸乙酯)，得到中間體BB-2-2。MS–ESI
m/z: 289.2 [M+H]
+.
步驟2：中間體BB-2-3的合成
室溫下，將中間體BB-2-2 (7 g, 24.28 mmol) 和一水合氫氧化鋰 (5.09 g, 121.40 mmol) 溶於甲醇 (70 mL)和水 (14 mL) 混合溶劑中，反應混合物加熱至60℃並攪拌反應16小時。反應完畢後，冷卻至室溫，直接減壓濃縮除去溶劑，向所得殘餘物中加入水 (150 mL)，用1 M稀鹽酸調節pH至5~6，再用乙酸乙酯 (150 mL×6) 萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，得到中間體BB-2-3。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.62 (s, 1H), 8.70 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 6.85-6.30(m, 1H), 5.09 (d,
J=75.2 Hz, 1H), 4.73 (s, 1H), 3.76 (d,
J=42.4 Hz, 2H), 3.60-3.40 (m, 2H), 1.99-1.90 (m, 2H).
步驟3：中間體BB-2-4的合成
室溫下，將中間體BB-2-3 (3.5 g, 11.80 mmol) 溶於乙腈 (40 mL) 中，隨後依次加入N-甲基咪唑 (3.39 g, 41.29 mmol) 和四甲基氯代脲六氟磷酸酯 (3.97 g, 14.16 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應1小時，再加入中間體BB-1 (3.47 g, 14.16 mmol)，反應混合物繼續攪拌反應16小時。反應完畢後，將反應液過濾，濾餅用乙腈 (3 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-2-4。MS–ESI
m/z: 488.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 9.61 (s, 1H), 8.43 (d,
J=5.2 Hz, 2H), 8.32 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 6.78 (t,
J=54.4 Hz, 1H), 6.13 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 5.46 (s, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.07 (td,
J=4.0 Hz, 12.0 Hz, 1H), 4.02-3.95 (m, 2H), 3.61-3.47 (m, 4H), 2.28-2.20 (m, 2H), 2.13-2.08 (m, 1H), 2.05-1.96 (m, 3H), 1.88-1.75 (m, 2H), 1.67-1.55 (m, 2H), 1.25-1.13 (m, 2H).
步驟4：中間體BB-2的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2-4 (160 mg, 328.20 μmol) 溶於二氯甲烷 (5 mL) 中，隨後加入戴斯-馬丁氧化劑 (167.05 mg, 393.85 μmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應3小時。反應完畢後，將反應液過濾，濾餅用二氯甲烷 (2 ml) 淋洗，濾液用氮氣流吹乾，得到中間體BB-2，直接用於下一步。MS–ESI
m/z: 486.3 [M+H]
+.
參考例3
合成路線：
步驟1：中間體BB-3-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物BB-3-1 (200 g, 930.04 mmol) 溶於氯仿 (1000 mL) 和乙酸乙酯 (1000 mL) 中，隨後加入溴化銅 (415.45 g, 1.86 mol)，反應混合物加熱至90℃並攪拌反應16小時。反應完畢後，冷卻至室溫，過濾，濾餅用二氯甲烷 (1.5 L) 淋洗，得到中間體BB-3-2的溶液，直接用於下一步。
步驟2：中間體BB-3-3的合成
將上述得到的中間體BB-3-2 的溶液 (3.5 L) 降溫至0℃，隨後緩慢滴加三乙胺 (141.17 g, 1.40 mol, 194.18 mL)，滴加完畢後，反應混合物緩慢升溫至室溫並攪拌反應2小時。反應完畢後，加入水 (2 L)，分液，水相用二氯甲烷 (500 mL) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (1 L×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，得到中間體BB-3-3。
步驟3：中間體BB-3-4的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-3-3 (198.1 g, 929.93 mmol) 溶於甲苯 (1.5 L) 中，隨後加入乙氧甲醯基亞甲基三苯基膦 (388.76 g, 1.12 mol)，反應混合物加熱至130℃並攪拌反應36小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑，向所得殘餘物中加入甲基三級丁基醚 (700 mL×3)，室溫下攪拌20分鐘，過濾，濾餅用甲基三級丁基醚 (100 mL) 淋洗，收集濾液。濾液減壓除去溶劑，所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/0-70/1，體積比)，得到中間體BB-3-4。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.72 (d,
J= 2.0 Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.41 (dd,
J=2.0 Hz, 8.8 Hz, 1H), 7.36 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 4.21 (q,
J=7.0 Hz, 2H), 3.66 (d,
J=0.8 Hz, 2H), 1.30 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟4：中間體BB-3的合成
室溫下，將中間體BB-3-4 (5 g, 17.66 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (50 mL) 中，隨後依次加入丙烯醯胺(1.51 g, 21.19 mmol) 和三級丁醇鉀 (2.97 g, 26.49 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應1小時。反應完畢後，將反應液倒入1 M稀鹽酸 (200 mL) 中，用乙酸乙酯 (100 mL×2) 萃取。合併有機相，用10%食鹽水 (150 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。向所得殘餘物中加入乙酸乙酯 (30 mL)，攪拌10分鐘，過濾，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-3。MS-ESI m/z: 308.0 [M+H]
+, 310.1 [M+H+2]
+.
參考例4
合成路線：
步驟1：中間體BB-4-1的合成
室溫和氮氣保護下，向甲苯 (100 mL) 和水 (20 mL) 混合溶劑中依次加入中間體BB-3-4 (5 g, 17.66 mmol)、氨基甲酸三級丁酯 (2.48 g, 21.19 mmol)、磷酸鉀 (11.25 g, 52.98 mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀 (323.44 mg, 353.21 μmol) 和2-二三級丁基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯 (299.98 mg, 706.42 μmol)，反應混合物加熱至110℃並攪拌反應16小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (100 mL)，過濾，濾餅用乙酸乙酯 (100 mL) 淋洗，合併濾液，靜置分液，收集有機相。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：乙酸乙酯/石油醚=1/5，體積比)，得到中間體BB-4-1。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.71 (br s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.37 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.15 (dd,
J=2.0 Hz, 8.8 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.20 (q,
J=7.2 Hz, 2H), 3.67 (q,
J=1.2 Hz, 2H), 1.53 (s, 9H), 1.29 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟2：中間體BB-4-2的合成
室溫下，將中間體BB-4-1 (5.6 g, 17.54 mmol) 和丙烯醯胺 (1.50 g, 21.05 mmol) 溶於N, N–二甲基甲醯胺 (100 mL) 中，隨後加入三級丁醇鉀 (1.8 g, 16.04 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應2小時，再補加三級丁醇鉀 (0.6 g, 5.35 mmol)，反應混合物在室溫下繼續攪拌反應0.5小時。反應完畢後，將反應液倒入1 M稀鹽酸 (300 mL) 中，攪拌10分鐘，過濾，用水 (100 mL) 淋洗濾餅，收集濾餅。所得濾餅經過柱層析分離 (洗脫劑：乙酸乙酯/石油醚=1/1，體積比)，得到中間體BB-4-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.32 (br s, 1H), 7.72 (br s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.39 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.12 (dd,
J=2.0 Hz, 8.8 Hz, 1H), 6.71 (br s, 1H), 3.97 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 2.82-2.63 (m, 2H), 2.39-2.29 (m, 2H), 1.53 (s, 9H).
步驟3：中間體BB-4的鹽酸鹽合成
室溫下，將中間體BB-4-2 (2.3 g, 6.68 mmol) 溶於乙酸乙酯 (20 mL) 中，隨後加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 40 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應16小時。反應完畢後，將反應液過濾，濾餅用乙酸乙酯 (20 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-4的鹽酸鹽。
1H NMR (400 MHz, D
2O) δ: 7.85 (s, 1H), 7.67 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.56 (d,
J=1.6 Hz, 1H), 7.34 (dd,
J=2.0 Hz, 8.8 Hz, 1H), 4.24 (dd,
J=5.2 Hz, 12.4 Hz, 1H), 2.91-2.74 (m, 2H), 2.50-2.37 (m, 1H), 2.35-2.25 (m, 1H).
參考例5
合成路線：
步驟1：中間體BB-5-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物BB-5-1 (200 g, 930.04 mmol) 溶於氯仿 (1 L) 和乙酸乙酯 (1 L) 中，隨後加入溴化銅 (415.45 g, 1.86 mol)，反應混合物加熱至90℃並攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，過濾，濾餅用二氯甲烷 (300 mL×2) 淋洗，收集濾液，得到中間體BB-5-2的溶液，直接用於下一步。
步驟2：中間體BB-5-3的合成
將上述得到的中間體BB-5-2 (273 g, 928.76 mmol) 的溶液冷卻至0℃，隨後緩慢滴加三乙胺 (140.97 g, 1.39 mol, 193.91 mL)，滴加完畢後，反應混合物緩慢升溫至室溫，攪拌反應1小時。反應完畢後，加入水 (600 mL)，萃取分液，有機相用飽和食鹽水 (1 L) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去一半溶劑，加入甲苯 (500 mL)，繼續減壓濃縮除去殘留的低沸點溶劑，得到中間體BB-5-3的甲苯溶液。
步驟3：中間體BB-5-4的合成
室溫和氮氣保護下，向二分之一的上述中間體BB-5-3的甲苯溶液中加入甲苯 (2 L)，隨後加入乙氧甲醯基亞甲基三苯基膦 (161.90 g, 464.73 mmol)，反應混合物加熱至130℃並攪拌反應20小時。反應完畢後，冷卻至室溫，兩批次合併處理。減壓濃縮除去溶劑，向所得殘餘物中加入甲基三級丁基醚 (800 mL)，室溫下攪拌30分鐘，過濾，濾餅用甲基三級丁基醚 (100 mL×2) 淋洗，濾液減壓除去溶劑，所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=100/1-10/1，體積比)，得到中間體BB-5-4。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.94 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.56 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 7.44 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 4.11 (q,
J= 7.2 Hz, 2H), 3.79 (s, 2H), 1.19 (t,
J= 7.2 Hz, 3H).
步驟4：中間體BB-5的合成
室溫下，將中間體BB-5-4 (5.00 g, 17.66 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (50 mL) 中，隨後依次加入丙烯醯胺 (1.51 g, 21.19 mmol) 和三級丁醇鉀 (2.97 g, 26.49 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，倒入1 M稀鹽酸 (100 mL) 中，用乙酸乙酯 (30 mL×2) 萃取。合併有機相，用10%食鹽水 (100 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：乙酸乙酯/石油醚=1/1，體積比)，得到中間體BB-5。MS-ESI
m/z: 308.0 [M+H]
+, 310.0 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.91 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.89 (d,
J=1.6 Hz, 1H), 7.56 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.42 (dd,
J=1.6 Hz, 8.0 Hz, 1H), 4.15 (dd,
J=4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 2.80-2.68 (m, 1H), 2.58 (dt,
J=4.0 Hz, 17.2 Hz, 1H), 2.38-2.25 (m, 1H), 2.15-2.05 (m, 1H).
參考例6
合成路線：
步驟1：中間體BB-6-1的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-5-4 (10 g, 35.32 mmol)、氨基甲酸三級丁酯 (4.97 g, 42.39 mmol)、磷酸鉀 (22.49 g, 105.96 mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀 (646.88 mg, 706.42 μmol) 和2-二三級丁基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯 (599.95 mg, 1.41 mmol) 溶於甲苯 (100 mL) 和水 (20 mL) 中，反應混合物加熱至110℃並攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (100 mL)，用乙酸乙酯 (70 mL×3）萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (70 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。殘餘物中加入正庚烷 (70 mL)，室溫攪拌10分鐘，過濾，收集濾餅。向濾餅中再次加入正庚烷 (50 mL)，室溫攪拌10分鐘，過濾，濾餅用正庚烷 (10 mL×3) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-6-1。MS-ESI
m/z: 264.2 [M-55]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.77 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.44 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.06 (dd,
J=1.6 Hz, 8.4 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.19 (q,
J=7.0 Hz, 2H), 3.66 (s, 2H), 1.54 (s, 9H), 1.27 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟2：中間體BB-6-2的合成
室溫下，將中間體BB-6-1 (9.8 g, 30.69 mmol) 和丙烯醯胺 (2.62 g, 36.83 mmol) 溶於N, N–二甲基甲醯胺 (100 mL) 中，隨後加入三級丁醇鉀 (6.20 g, 55.24 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應1小時。反應完畢後，將反應液倒入0.5 M鹽酸 (120 mL) 中，然後加入水 (300 mL)，用乙酸乙酯 (150 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (150 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。向所得殘餘物中加入甲基三級丁基醚 (70 mL)，室溫攪拌0.5小時，過濾，用甲基三級丁基醚 (10 mL×3) 淋洗濾餅，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-6-2。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ: 10.88 (s, 1H), 9.47 (s, 1H), 7.78 (s, 2H), 7.43 (d,
J= 8.8 Hz, 1H), 7.23 (dd,
J= 1.4 Hz, 8.6 Hz, 1H), 4.07 (dd,
J= 4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 2.78-2.65 (m, 1H), 2.62-2.53 (m, 1H), 2.35-2.23 (m, 1H), 2.15-2.06 (m, 1H), 1.49 (s, 9H).
步驟3：中間體BB-6的鹽酸鹽的合成
室溫下，將中間體BB-6-2 (6.6 g, 19.17 mmol) 溶於二氯甲烷 (20 mL) 中，隨後加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 150 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應4小時。反應完畢後，減壓除去溶劑，得到中間體BB-6的鹽酸鹽。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ: 10.92 (s, 1H), 10.06 (s, 2H), 7.98 (s, 1H), 7.66 (d,
J= 8.4 Hz, 1H), 7.57 (d,
J= 1.6 Hz, 1H), 7.21 (dd,
J= 1.8 Hz, 8.2 Hz, 1H), 4.16 (dd,
J= 4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 2.81-2.69 (m, 1H), 2.63-2.54 (m, 1H), 2.39-2.26 (m, 1H), 2.16-2.07 (m, 1H).
參考例7
合成路線：
步驟1：中間體BB-7-2的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-7-1 (11.39 g, 52.97 mmol) 溶於氯仿 (100 mL) 和乙酸乙酯 (100 mL) 中，隨後加入溴化銅 (23.66 g, 105.93 mmol)，反應混合物加熱至110℃並攪拌反應16小時。反應完畢後，冷卻至室溫，過濾，濾液減壓除去溶劑，然後向殘餘物中加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (20 mL×3) 萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/0–100/1，體積比)，得到中間體BB-7-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 12.39 (s, 1H), 7.81 (dd,
J= 1.2 Hz, 8.0 Hz, 1H), 7.76 (dd,
J= 1.2 Hz, 8.0 Hz, 1H), 6.88 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H).
步驟2：中間體BB-7-3的合成
0℃下，將中間體BB-7-2 (6.86 g, 18.44 mmol) 溶於二氯甲烷 (80 mL) 中，隨後緩慢滴加三乙胺 (1.87 g, 18.44 mmol)，反應混合物緩慢升溫至室溫並攪拌反應1小時。反應完畢後，直接減壓濃縮除去溶劑，得到中間體BB-7-3的粗品，直接用於下一步。
步驟3：中間體BB-7-4的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-7-3的粗品 (3.93 g, 18.45 mmol) 溶於甲苯（80 mL）中，隨後加入乙氧甲醯基亞甲基三苯基膦 (9.64 g, 27.67 mmol)，反應混合物加熱至130℃並攪拌反應36小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑，然後向殘餘物中加入水 (100 mL)，用乙酸乙酯 (50 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (50 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/0–100/1，體積比)，得到中間體BB-7-4。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.72 (s, 1H), 7.52 (dd,
J=0.8 Hz, 7.6 Hz, 1H), 7.48 (dd,
J=0.8 Hz, 7.6 Hz, 1H), 7.15 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 4.20 (q,
J=7.2 Hz, 2H), 3.70 (d,
J=0.8 Hz, 2H), 1.28 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟4：中間體BB-7的合成
0℃和氮氣保護下，將中間體BB-7-4 (4.77 g, 16.85 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (30 mL) 中，隨後依次加入丙烯醯胺 (1.20 g, 16.85 mmol) 和三級丁醇鉀 (1.89 g, 16.85 mmol)，反應混合物在0℃下攪拌反應1小時。反應完畢後，倒入飽和氯化銨溶液 (50 mL) 中，有大量白色固體產生，過濾，收集固體。固體用甲醇 (20 mL×2) 室溫打漿，過濾，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-7。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ: 10.92 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.62 (dd,
J=0.8 Hz, 7.6 Hz, 1H), 7.56 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.21 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 4.17 (dd,
J=4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 2.79-2.70 (m, 1H), 2.63-2.55 (m, 1H), 2.40-2.27 (m, 1H), 2.16-2.08 (m, 1H).
參考例8
合成路線：
步驟1：中間體BB-8-1的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-7-4 (2 g, 7.06 mmol) 溶於甲苯 (50 mL) 和水 (5 mL) 中，隨後依次加入三(二亞苄基丙酮)二鈀 (647 mg, 706.42 μmol)、2-二-三級丁基膦-2’,4’,6’-三異丙基聯苯 (450 mg, 1.06 mmol)、磷酸鉀 (6 g, 28.26 mmol) 和氨基甲酸三級丁酯 (1.66 g, 14.13 mmol)，反應混合物加熱至100℃並攪拌反應16小時。反應完畢後，冷卻至室溫，將反應液倒入水 (20 mL) 中，用乙酸乙酯 (10 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=10/0–10/1，體積比)，得到中間體BB-8-1。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.93 (br s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.24-7.20 (m, 2H), 6.97 (s, 1H), 4.20 (q,
J=6.8 Hz, 2H), 3.69 (d,
J=0.8 Hz, 2H), 1.56 (s, 9H), 1.28 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟2：中間體BB-8的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物BB-8-1 (1.32 g, 4.13 mmol) 溶於乙酸乙酯 (3 mL) 中，隨後加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 15 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，直接減壓濃縮除去溶劑，得到中間體BB-8的鹽酸鹽。
參考例9
合成路線：
步驟1：中間體BB-9-2的合成
0℃下，將濃硫酸 (103.08 g, 1.03 mol, 56.02 mL, 純度：98%) 緩慢滴加到化合物BB-9-1 (25 g, 112.07mmol) 和4-氯乙醯乙酸乙酯 (18.45 g, 112.07 mmol) 的混合物中，控制內溫在0-5℃。滴加完畢後，反應混合物升溫至室溫，攪拌反應12小時。4個批次合併處理。反應完畢後，在攪拌下將反應液緩慢倒入冰水 (3 L) 中，室溫攪拌10分鐘，過濾，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-9-2。MS-ESI
m/z: 323.0 [M+H]
+, 325.0 [M+H+2]
+.
步驟2：中間體BB-9-3的合成
室溫下，將氫氧化鈉 (17.65 g, 441.36 mmol) 溶于水 (700 mL) 中，隨後加入中間體BB-9-2 (54.40 g, 110.34 mmol, 純度: 65.63%)，反應混合物升溫至80℃並攪拌反應12小時。3個批次合併處理。反應完畢後，冷卻至室溫，過濾，濾餅用水 (500 mL) 洗滌，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-9-3。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 8.50 (d,
J= 9.2 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=2.4 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.76 (d,
J=1.6 Hz, 2H), 7.63 (dd,
J=2.0 Hz, 8.8 Hz, 1H), 3.50 (s, 2H).
步驟3：中間體BB-9-4的合成
室溫下，將中間體BB-9-3 (33.16 g, 101.37 mmol) 溶於乙醇 (300 mL) 中，然後緩慢滴加濃硫酸 (27.19 g, 271.68 mmol, 14.78 mL, 純度: 98%)，反應混合物升溫至80℃，攪拌反應12小時。2個批次合併處理。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑。向所得殘餘物中加入水 (600 mL)，用乙酸乙酯 (200 mL×2) 萃取。合併有機相，依次用氫氧化鈉水溶液 (2 M, 300 mL) 和飽和食鹽水 (500 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，得到中間體BB-9-4。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ : 8.13-8.06 (m, 2H), 7.78 (s, 1H), 7.69-7.60 (m, 3H), 4.23 (q,
J=7.2 Hz, 2H), 4.03 (s, 2H), 1.27 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟4：中間體BB-9-5的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-9-4 (1 g, 3.00 mmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀 (275 mg, 300.14 μmol)，2-二-三級丁基膦-2’,4’,6’-三異丙基聯苯 (191.18 mg, 450.21 mmol)，磷酸鉀 (2.55 g, 12.01 mmol) 和氨基甲酸三級丁酯 (527.41 mg, 4.50 mmol) 溶於甲苯 (50 mL) 和水 (5 mL) 的混合溶劑中，反應混合物加熱至100℃，攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，反應液倒入水 (20 mL) 中，用乙酸乙酯 (10 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=10/0–10/1，體積比)，得到中間體BB-9-5。MS-ESI
m/z: 392.2 [M+Na]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.14 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.12 (br s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.67 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.62 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.45 (dd,
J=2.2 Hz, 9.0 Hz, 1H), 6.64 (br s, 1H), 4.22 (q,
J=7.0 Hz, 2H), 4.04 (s, 2H), 1.57 (s, 9H), 1.27 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟5：中間體BB-9-6的合成
0℃和氮氣保護下，將中間體BB-9-5 (1.13 g, 2.74 mmol, 純度: 89.57%) 和丙烯醯胺 (234 mg, 3.29 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (10 mL) 中，再加入三級丁醇鉀 (368.93 mg, 3.29 mmol)，反應混合物在0℃下攪拌反應1小時。反應完畢後，反應液慢慢倒入飽和氯化銨水溶液 (30 mL) 中，用乙酸乙酯 (15 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物中加入甲醇 (10 mL)，室溫下攪拌0.5小時，過濾，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-9-6。MS-ESI
m/z: 417.0 [M+Na-100]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.13 (br s, 1H), 8.08 (br s, 1H), 7.90 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.71 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.67-7.62 (m, 2H), 7.48 (dd,
J=2.4 Hz, 8.8 Hz, 1H), 6.67 (br s, 1H), 4.47 (dd,
J= 5.4 Hz, 8.6 Hz, 1H), 2.85-2.71 (m, 2H), 2.55-2.40 (m, 2H), 1.57 (s, 9H).
步驟6：中間體BB-9的鹽酸鹽的合成
室溫下，將中間體BB-9-6 (421 mg, 1.07 mmol) 溶於鹽酸/二㗁烷溶液 (4 M, 20 mL) 中，反應混合物在室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，將反應液冷卻後，倒入飽和氯化銨溶液 (100 mL) 中，用乙酸乙酯 (10 mL×3) 萃取，合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥後，過濾旋乾。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/1，體積比)，得到中間體BB-9的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 294.9 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.95 (br s, 1H), 8.23 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.88-7.81 (m, 3H), 7.48-7.42 (m, 1H), 4.66 (dd,
J=4.4 Hz, 12.4 Hz, 1H), 2.92-2.81 (m, 1H), 2.69-2.60 (m, 1H), 2.46-2.38 (m, 1H), 2.31-2.23 (m, 1H).
參考例10
合成路線：
中間體BB-10的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-9-4 (1 g, 3.00 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (10 mL) 中，再依次加入丙烯醯胺 (256 mg, 3.60 mmol) 和三級丁醇鉀 (404.15 mg, 3.60 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應1小時。反應完畢後，反應液慢慢倒入飽和氯化銨水溶液 (100 mL) 中，室溫下攪拌1小時，過濾，收集濾餅。所得濾餅中加入甲醇 (20 mL)，室溫下攪拌0.5小時，過濾，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-10。MS-ESI
m/z: 357.7 [M+H]
+, 359.7 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.15 (d,
J=2.0 Hz, 1H), 8.06 (br s, 1H), 7.87 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.72-7.65 (m, 4H), 4.47 (dd,
J=5.2 Hz, 9.6 Hz, 1H), 2.89-2.74 (m, 2H), 2.58-2.41 (m, 2H).
參考例11
合成路線：
步驟1：中間體BB-11-2的合成
室溫和氮氣保護下，將亞磷酸三苯酯 (149.14 g, 480.67 mmol) 溶於二氯甲烷 (1.3 L) 中，降溫至-70℃，逐滴滴加液溴 (83.80 g, 524.37 mmol, 27.03 mL)，滴加完畢後，再依次滴加三乙胺 (57.48 g, 568.07 mmol, 79.07 mL) 和化合物BB-11-1 (77 g, 436.98 mmol) 的二氯甲烷 (200 mL) 溶液，滴加完畢後，反應混合物緩慢升溫至室溫，攪拌反應15小時。反應完畢後，反應液緩慢倒入飽和亞硫酸鈉水溶液 (1.5 L) 中，攪拌10分鐘，用二氯甲烷 (1 L) 萃取。有機相用飽和食鹽水 (1 L) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚)，得到中間體BB-11-2。
步驟2：中間體BB-11-3的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-11-2 (87 g, 363.85 mmol) 溶於甲苯 (1 L) 中，降溫至0℃，分批緩慢加入2, 3-二氯-5, 6-二氰基苯醌 (90.86 g, 400.24 mmol)，反應混合物緩慢升溫至室溫，攪拌反應15小時。反應完畢後，滴加飽和亞硫酸鈉水溶液 (2 L)，攪拌10分鐘，再加入1 N氫氧化鈉水溶液 (1 L)，用乙酸乙酯 (500 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (1 L) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物加入石油醚 (500 ml)，攪拌10分鐘，過濾，濾餅用石油醚 (50 mL×2) 淋洗，收集濾液，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚)，得到中間體BB-11-3。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.12 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.68 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.60 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.26-7.20 (m, 2H), 7.11 (d,
J=2.4 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H).
步驟3：中間體BB-11-4的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-11-3 (21.4 g, 90.26 mmol) 溶於二氯甲烷 (250 mL) 中，降溫至0℃，緩慢滴加三溴化硼 (27.13 g, 108.31 mmol, 10.44 mL)，滴加完畢後，反應混合物升溫至室溫，攪拌反應3小時。反應完畢後，反應液倒入冰水 (500 mL) 中，用二氯甲烷 (200 mL) 萃取。有機相用飽和食鹽水 (500 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，得到中間體BB-11-4。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ：8.15 (d,
J=98.8 Hz, 1H), 7.65-7.59 (m, 2H), 7.25 (t,
J=7.8 Hz, 1H), 7.19 (dd,
J=2.4 Hz, 9.2 Hz, 1H), 7.14 (d,
J=2.4 Hz, 1H), 5.03 (s, 1H).
步驟4：中間體BB-11-5的合成
室溫下，將中間體BB-11-4 (20 g, 89.66 mmol) 溶於甲烷磺酸 (200 mL) 中，逐滴滴加4-氯乙醯乙酸乙酯 (22.14 g, 134.49 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應15小時。反應完畢後，反應液倒入冰水 (1 L) 中，室溫下攪拌10分鐘，過濾，濾餅用水 (200 mL×3) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-11-5。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 8.58 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.49 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.02 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 7.74 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.65 (dd,
J=7.6 Hz, 8.4 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 5.41 (s, 2H).
步驟5：中間體BB-11-6的合成
室溫下，將中間體BB-11-5 (29 g, 89.63 mmol) 加入到氫氧化鈉 (2 M, 300 mL) 的水溶液中，反應混合物加熱至80℃，攪拌反應3小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (200 mL)，用6 M鹽酸調節pH至4，用乙酸乙酯 (300 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (200 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物中加入甲基三級丁基醚 (50 mL)，室溫下攪拌10分鐘，過濾，濾餅用甲基三級丁基醚 (10 mL×2) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-11-6。MS-ESI
m/z: 305.0 [M+H]
+, 306.9 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ : 12.68 (br s, 1H), 8.24 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 8.12 (t,
J=4.6 Hz, 2H), 7.96 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.90 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.54 (t,
J=7.8 Hz, 1H), 4.09 (s, 2H).
步驟6：中間體BB-11-7的合成
室溫下，將中間體BB-11-6 (18 g, 58.99 mmol) 溶於乙醇 (180 mL) 中，加入濃硫酸 (5.31 g, 53.09 mmol, 2.89 mL, 純度：98%)，反應混合物升溫到80℃，攪拌反應15小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑，殘餘物中加入乙酸乙酯 (300 mL) 和飽和碳酸氫鈉水溶液 (500 mL)，萃取分液。有機相用飽和食鹽水 (300 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。殘餘物中加入石油醚 (50 mL)，室溫攪拌10分鐘，過濾，濾餅用石油醚 (20 mL×2) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-11-7。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.22 (t,
J=8.4 Hz, 2H), 7.84-7.78 (m, 2H), 7.75 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.41 (dd,
J=7.6 Hz, 8.4 Hz, 1H), 4.23 (q,
J=7.0 Hz, 2H), 4.06 (d,
J=0.8 Hz, 2H), 1.26 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟7：中間體BB-11-8的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-11-7 (5 g, 15.01 mmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀 (961.96 mg, 1.05 mmol)，2-二-三級丁基膦-2’,4’,6’-三異丙基聯苯 (892.16 mg, 2.10 mmol)，磷酸鉀 (12.74 g, 60.03 mmol) 和氨基甲酸三級丁酯 (2.64 g, 22.51 mmol) 溶於甲苯 (50 mL) 和水 (10 mL) 的混合溶劑中，反應混合物加熱至100℃，攪拌反應15小時。反應完畢後，冷卻至室溫，過濾，濾餅用乙酸乙酯 (30 mL×3) 淋洗，濾液用飽和食鹽水 (100 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。殘餘物中加入甲基三級丁基醚 (50 mL)，室溫攪拌10分鐘，過濾，濾餅用甲基三級丁基醚 (10 mL×2) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-11-8。
步驟8：中間體BB-11-9的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-11-8 (4.2 g, 11.37 mmol) 和丙烯醯胺 (888.93 mg, 12.51 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (40 mL) 中，降溫至0℃，滴加用N, N-二甲基甲醯胺 (10 mL) 溶解的三級丁醇鉀 (2.55 g, 22.74 mmol)，反應混合物升溫至室溫，攪拌反應2小時。反應完畢後，反應液倒入0.2 M鹽酸 (200 mL)中，用乙酸乙酯 (100 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (100 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物中加入二氯甲烷 (20 mL)，室溫下攪拌10分鐘，過濾，濾餅用二氯甲烷 (10 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-11-9。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.94 (s, 1H), 9.28 (s, 1H), 8.05-7.92 (m, 3H), 7.79 (d,
J=9.6 Hz, 1H), 7.58-7.47 (m, 2H), 4.68 (dd,
J=4.4 Hz, 12.0 Hz, 1H), 2.95-2.81 (m, 1H), 2.70-2.56 (m, 1H), 2.47-2.34 (m, 1H), 2.33-2.22 (m, 1H), 1.49 (s, 9H).
步驟9：中間體BB-11的鹽酸鹽的合成
室溫下，將中間體BB-11-9 (1.3 g, 3.30 mmol) 溶於乙酸乙酯 (5 mL) 中，隨後加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 50 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應3小時。反應完畢後，減壓濃縮除掉溶劑，得到中間體BB-11的鹽酸鹽。
參考例12
合成路線：
中間體BB-12的合成
室溫和氮氣保護下，將丙烯醯胺 (234.67 mg, 3.30 mmol) 和中間體BB-11-7 (1 g, 3.00 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (15 mL) 中，隨後加入三級丁醇鉀 (370.47 mg, 3.30 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應0.5小時。反應完畢後，反應液倒入0.1 M鹽酸 (10 mL) 中，用二氯甲烷 (5 mL×2) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (5 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物中加入二氯甲烷 (5 mL)，室溫下攪拌1小時，過濾，濾餅用二氯甲烷 (1 mL) 淋洗。收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-12。MS-ESI
m/z: 358.1 [M+H]
+, 360.1 [M+H+2]
+.
參考例13
合成路線：
步驟1：中間體BB-13-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物BB-13-1 (150 g, 632.67 mmol) 溶於二氯甲烷 (3 L) 中，隨後加入乙醯氯(49.66 g, 632.67 mmol, 45.15 mL)，反應混合物冷卻至5~15℃，分批加入三氯化鋁 (177.16 g, 1.33 mol)，反應混合物升溫至室溫，攪拌反應4小時。補加三氯化鋁 (29.53 g, 221.43 mmol)，室溫下繼續攪拌反應12小時。反應完畢後，反應液緩慢倒入冰水 (3 L) 中，萃取分液，水相再次用二氯甲烷 (2 L×2 ) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (6 L×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，得到中間體BB-13-2。MS-ESI
m/z: 265.1 [M+H]
+, 267.1 [M+H+2]
+.
步驟2：中間體BB-13-3的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-13-2 (200 g, 754.43 mmol) 和碳酸二甲酯 (271.83 g, 3.02 mol, 254.04 mL)溶於四氫呋喃 (2 L) 中，降溫至0℃，緩慢加入三級丁醇鉀 (507.93 g, 4.53 mol)，反應混合物升溫至70℃，攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑，殘餘物中加入冰水 (4 L)，用6M鹽酸調節pH=2~3，有大量固體析出，過濾，濾餅依次用水 (1 L) 和甲基三級丁基醚 (1 L) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-13-3。MS-ESI
m/z: 291.0 [M+H]
+, 293.0 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 9.18 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.30 (d,
J=1.2 Hz, 1H), 8.16 (d,
J=8.8Hz, 1H), 7.79 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.56 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 5.83 (s, 1H).
步驟3：中間體BB-13-4的合成
室溫下，將中間體BB-13-3 (200 g, 687.06 mmol)，乙酸鈉 (309.99 g, 3.78 mol) 和鹽酸羥胺 (262.59 g, 3.78 mol) 溶於乙醇 (2 L) 中，反應混合物升溫至至80℃，攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，倒入水 (2 L) 中，減壓濃縮除去溶劑，用2 M鹽酸調節pH=2~3，用乙酸乙酯/四氫呋喃=1/1 (2 L×3，體積比) 萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。殘餘物中加入甲基三級丁基醚 (600 mL)，室溫攪拌1小時，過濾，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-13-4。MS-ESI
m/z: 306.0 [M+H]
+, 308.0 [M+H+2]
+.
步驟4：中間體BB-13-5的合成
室溫下，將濃硫酸 (33.38 g, 333.49 mmol, 18.14 mL, 純度：98%) 溶於乙醇 (1.3 L) 中，加入中間體BB-13-4 (135 g, 373.32 mmol, 純度: 84.65%)，反應混合物升溫至75℃，攪拌反應16小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑。殘餘物中加入乙醇 (600 mL)，室溫下攪拌5分鐘，過濾，濾餅用乙醇 (100 mL×2) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-13-5。MS-ESI
m/z: 334.1 [M+H]
+, 336.0 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 8.47 (d,
J=1.6 Hz, 1H), 8.19 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.08 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 8.00 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.89 (dd,
J=2.0 Hz, 8.8 Hz, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.14 (q,
J=7.2 Hz, 2H), 1.16 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟5：中間體BB-13-6的合成
室溫和氮氣保護下，向甲苯 (150 mL) 和水 (30 mL) 混合溶劑中依次加入中間體BB-13-5 (15 g, 44.89 mmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀 (1.44 g, 1.57 mmol)，2-二-三級丁基膦-2’,4’,6’-三異丙基聯苯 (1.33 g, 3.14 mmol)，磷酸鉀 (38.11 g, 179.55 mmol) 和氨基甲酸三級丁酯 (7.89 g, 67.33 mmol)，反應混合物加熱至100℃，攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (100 mL) 和乙酸乙酯 (150 mL)，萃取分液，水相再次用乙酸乙酯 (200 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (200 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=20/1-1/1，體積比)，得到中間體BB-13-6。MS-ESI
m/z: 371.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.20 (br s, 1H), 8.03 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.90 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.67 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.53 (dd,
J=2.0 Hz, 8.8 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.31 (s, 2H), 4.21 (q,
J=7.2 Hz, 2H), 1.57 (s, 9H), 1.20 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟6：中間體BB-13-7的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-13-6 (7.3 g, 19.71 mmol) 和丙烯醯胺 (1.54 g, 21.68 mmol) 溶於四氫呋喃 (70 mL) 中，冷卻至0℃，加入三級丁醇鉀 (2.43 g, 21.68 mmol)，反應混合物升溫至室溫，攪拌反應1小時。反應完畢後，反應液倒入0.1 M鹽酸 (30 mL) 中，用乙酸乙酯 (80 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (50 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物中加入二氯甲烷 (5 mL)，室溫下攪拌5分鐘，過濾，濾餅用二氯甲烷 (3 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-13-7。MS-ESI
m/z: 396.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.12 (s, 1H), 9.66 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.13 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.85 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.68 (dd,
J=2.0 Hz, 8.8 Hz, 1H), 5.00 (dd,
J=4.8 Hz, 11.6 Hz, 1H), 2.89-2.76 (m, 1H), 2.68-2.60 (m, 1H), 2.59-2.53 (m, 1H), 2.42-2.30 (m, 1H), 1.52 (s, 9H).
步驟7：中間體BB-13的鹽酸鹽的合成
室溫下，將中間體BB-13-7 (1 g, 2.53 mmol) 溶於乙酸乙酯 (5 mL) 中，隨後加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 20 mL)，反應混合物室溫下攪拌反應1小時。反應完畢後，過濾，濾餅用乙酸乙酯 (3 mL×3) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-13的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 295.9 [M+H]
+.
參考例14
合成路線：
中間體BB-14的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-13-5 (3 g, 8.98 mmol) 和丙烯醯胺 (701.92 mg, 9.88 mmol) 溶於四氫呋喃 (70 mL) 中，冷卻至0℃，分批加入三級丁醇鉀 (1.21 g, 10.77 mmol)，反應混合物升溫至室溫，攪拌反應1小時。反應完畢後，反應液倒入1 M鹽酸 (20 mL) 中，用乙酸乙酯 (40 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (50 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物中加入甲基三級丁基醚 (20 mL)，室溫下攪拌10分鐘，過濾，濾餅用甲基三級丁基醚 (5 mL×2) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-14。MS-ESI
m/z: 359.0 [M+H]
+, 361.0 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.14 (s, 1H), 8.47 (d,
J=2.0 Hz, 1H), 8.24-8.17 (m, 2H), 8.01 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.85 (dd,
J=2.0 Hz, 8.8 Hz, 1H), 5.06 (dd,
J=4.8 Hz, 11.6 Hz, 1H), 2.89-2.78 (m, 1H), 2.70-2.56 (m, 2H), 2.44-2.34 (m, 1H).
參考例15
合成路線：
步驟1：中間體BB-15-2的合成
室溫和氮氣保護下，將亞磷酸三苯酯 (193.69 g, 624.25 mmol) 溶於二氯甲烷 (1 L) 中，冷卻至-70℃，逐滴滴加液溴 (108.83 g, 681.00 mmol, 35.11 mL)，滴加完畢後，再依次滴加三乙胺 (74.65 g, 737.75 mmol, 102.69 mL) 和用二氯甲烷 (500 mL) 溶解的化合物BB-15-1 (100 g, 567.50 mmol)，滴加完畢後，反應混合物緩慢升溫至室溫，攪拌反應15小時。反應完畢後，倒入飽和亞硫酸鈉水溶液 (700 mL) 中，攪拌10分鐘，用二氯甲烷 (800 mL) 萃取。有機相用飽和食鹽水 (800 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=20/1-7/1，體積比)，得到中間體BB-15-2。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 7.33 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 6.84-6.75 (m, 2H), 6.33 (t,
J=4.8 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.76 (t,
J=8.0 Hz, 2H), 2.32-2.25 (m, 2H).
步驟2：中間體BB-15-3的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-15-2 (39.5 g, 165.20 mmol) 溶於甲苯 (500 mL) 中，冷卻至0℃，分批加入2, 3-二氯-5, 6-二氰基苯醌 (41.25 g, 181.72 mmol)，反應混合物緩慢升溫至室溫，攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至0~10℃，滴加飽和亞硫酸鈉水溶液 (1 L) 和1 M氫氧化鈉水溶液 (1 L )，過濾，濾餅用乙酸乙酯 (300 mL×3) 淋洗，濾餅丟棄，濾液用乙酸乙酯 (500 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (500 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚)，得到中間體BB-15-3。MS-ESI
m/z: 237.1 [M+H]
+, 239.1 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.05 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.60 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.53 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 7.22-7.13 (m, 2H), 7.04 (s, 1H), 3.85 (s, 3H).
步驟3：中間體BB-15-4的合成
室溫和氮氣保護下，將乙酸酐 (21.53 g, 210.89 mmol, 19.75 mL) 置於二氯甲烷 (400 mL) 中，冷卻至-60℃，滴加三氟化硼乙醚溶液 (63.68 g, 210.89 mmol, 55.38 mL, 純度：47%)，-60℃下攪拌10分鐘，滴加二氯甲烷 (250 mL) 溶解的中間體BB-15-3 (25 g, 105.44 mmol) 溶液，反應混合物緩慢升溫至室溫，攪拌反應12小時。反應完成後，加入冰水 (200 mL），用二氯甲烷 (100 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (100 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=100/1-20/1)，得到中間體BB-15-4。MS-ESI
m/z: 279.0 [M+H]
+, 281.0 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.34 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.72 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.67 (dd,
J=0.8 Hz, 7.2 Hz, 1H), 7.38 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.31 (dd,
J=7.6 Hz, 8.8 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 2.65 (s, 3H).
步驟4：中間體BB-15-5的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-15-4 (18.8 g, 67.35 mmol) 溶於二氯甲烷 (200 mL) 中，冷卻至0℃，滴加三溴化硼 (20.25 g, 80.82 mmol, 7.79 mL)，0℃下攪拌反應1小時。反應完成後，反應液倒入冰水 (300 mL) 中，用二氯甲烷 (100 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (100 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，得到中間體BB-15-5。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 13.05 (s, 1H), 8.41 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.04 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.70 (dd,
J=0.8 Hz, 7.6 Hz, 1H), 7.40 (dd,
J=7.6 Hz, 8.4 Hz, 1H), 7.25 (d,
J=9.6 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H).
步驟5：中間體BB-15-6的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-15-5 (13 g, 49.04 mmol) 和碳酸二甲酯 (17.67 g, 196.15 mmol, 16.51 mL)溶於四氫呋喃 (130 mL) 中，冷卻至0~10℃，分批加入三級丁醇鉀 (33.02 g, 294.23 mmol)，反應混合物升溫至70℃，攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑，殘餘物中加入冰水 (200 mL)，用甲基三級丁基醚 (70 mL×2) 萃取。水相用6 M鹽酸調節pH=2，有大量固體析出，過濾，濾餅用水 (30 mL×2) 洗滌，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-15-6。MS-ESI
m/z: 291.0 [M+H]
+, 293.0 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 13.28 (br s, 1H), 9.38 (t,
J=7.2 Hz, 1H), 8.43 (dd,
J=6.8 Hz, 9.2 Hz, 1H), 7.96 (t,
J=7.2 Hz, 1H), 7.71-7.65 (m, 1H), 7.63-7.56 (m, 1H), 5.92-5.87 (m, 1H).
步驟6：中間體BB-15-7的合成
室溫下，將中間體BB-15-6 (22 g, 75.58 mmol)，乙酸鈉 (43.40 g, 529.03 mmol) 和鹽酸羥胺 (36.76 g,529.03 mmol) 溶於乙醇 (400 mL) 中，反應混合物升溫至80℃，攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑。殘餘物中加入水 (100 mL) 和甲基三級丁基醚 (50 mL)，室溫攪拌0.5小時，過濾，濾餅用甲基三級丁基醚 (20 mL×3) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-15-7。MS-ESI
m/z: 306.0 [M+H]
+, 308.0 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 8.40 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.27 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 8.05 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.96 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.62 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 4.25 (s, 2H).
步驟7：中間體BB-15-8的合成
室溫下，將中間體BB-15-7 (15 g, 49.00 mmol) 溶於乙醇 (300 mL) 中，加入濃硫酸 (1.29 g, 12.87 mmol, 0.7 mL, 純度：98%)，反應混合物升溫至80℃，攪拌反應12小時。冷卻至室溫，補加濃硫酸 (4 mL, 純度：98%)，反應混合物升溫至80℃，攪拌反應3小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑。殘餘物中加入0~10℃飽和碳酸氫鈉溶液 (100 mL)，用乙酸乙酯 (70 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (70 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，得到中間體BB-15-8。MS-ESI
m/z: 334.0 [M+H]
+, 336.0 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.50 (d,
J=9.6 Hz, 1H), 8.10 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.88 (dd,
J=0.8 Hz, 7.6 Hz, 1H), 7.81 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.52 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 4.34 (s, 2H), 4.22 (q,
J=7.2 Hz, 2H), 1.21 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟8：中間體BB-15-9的合成
室溫和氮氣保護下，向甲苯 (90 mL) 和水 (30 mL) 混合溶劑中依次加入中間體BB-15-8 (9.5 g, 28.43 mmol)，三(二亞苄基丙酮)二鈀 (1.30 g, 1.42 mmol)，2-二-三級丁基膦-2’,4’,6’-三異丙基聯苯 (1.21 g, 2.84 mmol)，磷酸鉀 (24.14 g, 113.72 mmol) 和氨基甲酸三級丁酯 (3.66 g, 31.27 mmol)，反應混合物加熱至100℃，攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (200 mL)，用乙酸乙酯 (150 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (200 mL×2) ）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=6/1-2/1，體積比)，得到中間體BB-15-9。MS-ESI
m/z: 371.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 8.48 (s, 1H), 8.28 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.95-7.87 (m, 2H), 7.75–7.60 (m, 2H), 4.50 (s, 2H), 4.14 (q,
J=7.2 Hz, 2H), 1.50 (s, 9H), 1.16 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟9：中間體BB-15-10的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-15-9 (2.5 g, 6.75 mmol) 溶於四氫呋喃 (35 mL) 中，隨後加入丙烯醯胺 (575.69 mg, 8.10 mmol) 和三級丁醇鉀 (1.14 g, 10.12 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應1小時。反應完畢後，反應液倒入1 M鹽酸 (30 mL) 中，用乙酸乙酯 (45 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (40 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=5/1-1/1，體積比)，得到中間體BB-15-10。MS-ESI
m/z: 396.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.14 (s, 1H), 9.46 (s, 1H), 8.29 (d,
J=9.6 Hz, 1H), 8.04 (br d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.93 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.75-7.59 (m, 2H), 5.07 (dd,
J=4.8 Hz, 11.2 Hz, 1H), 2.97-2.79 (m, 1H), 2.71-2.56 (m, 2H), 2.43-2.31 (m, 1H), 1.50 (s, 9H).
步驟10：中間體BB-15的鹽酸鹽的合成
室溫下，將中間體BB-15-10 (1.5 g, 3.79 mmol) 加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 15 mL) 中，反應混合物在室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，過濾，濾餅用乙酸乙酯 (30 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到中間體BB-15的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 296.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.14 (s, 1H), 8.34 (d,
J= 9.6 Hz, 1H), 8.04-7.94 (m, 2H), 7.65 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 7.46 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 5.06 (dd,
J=4.8 Hz, 11.6 Hz, 1H), 2.95-2.78 (m, 1H), 2.69-2.56 (m, 2H), 2.42-2.31 (m, 1H).
實施例1
合成路線：
步驟1：化合物WX001-2的合成
室溫下，將化合物WX001-1 (6 g, 32.21 mmol) 溶於四氫呋喃 (60 mL) 中，隨後依次加入溴乙酸乙酯 (6.46 g, 38.66 mmol, 4.28 mL) 和三乙胺 (3.91 g, 38.66 mmol, 5.38 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應4小時。反應完畢後，向反應液中加水 (200 mL)，用乙酸乙酯 (150 mL×2) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (300 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。向所得殘餘物中加入石油醚 (50 mL)，室溫下攪拌5分鐘，過濾，濾餅用石油醚 (30 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX001-2。
步驟2：化合物WX001-3的鹽酸鹽合成
室溫下，將化合物WX001-2 (5.5 g, 20.20 mmol) 溶於甲醇 (100 mL) 中，隨後依次加入水 (20 mL) 和一水合氫氧化鋰 (1.69 g, 40.39 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應1小時。反應完畢後，直接減壓除去溶劑，用1 M稀鹽酸調節pH至5~6，再減壓除去溶劑。所得殘餘物經反相柱分離 (色譜柱：800 g Agela C18；流動相：水(0.04%鹽酸)-甲醇；甲醇B%：10%-40%，15 min)，得到化合物WX001-3的鹽酸鹽。MS–ESI
m/z: 245.2 [M+H]
+.
步驟3：化合物WX001-4的合成
室溫下，將化合物WX001-3的鹽酸鹽 (612.43 mg, 1.85 mmol, 純度: 84.92%) 和三乙胺 (720.96 mg, 7.12 mmol) 溶於N, N–二甲基甲醯胺 (5 mL) 中，隨後加入2-(7-氮雜苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (880.46 mg, 2.32 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應1小時，加入化合物BB-4的鹽酸鹽 (0.5 g, 1.78 mmol)，反應混合物在室溫下繼續攪拌反應4小時。反應完畢後，加入甲基三級丁基醚 (20 mL)，攪拌5分鐘，過濾，濾餅用甲基三級丁基醚 (5 mL) 淋洗。合併濾液，加入水 (50 mL) 和二氯甲烷 (100 mL)，分液。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，真空乾燥，得到化合物WX001-4的粗品，未進一步純化，直接用於下一步。MS–ESI
m/z: 471.3 [M+H]
+.
步驟4：化合物WX001-5的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX001-4的粗品 (0.8 g, 1.70 mmol) 溶於二氯甲烷 (5 mL) 中，隨後加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 20 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，將反應液過濾，濾餅用乙酸乙酯 (20 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX001-5的鹽酸鹽。
1H NMR (400 MHz, D
2O) δ: 7.78 (s, 1H), 7.64 (d,
J=2.0 Hz, 1H), 7.57 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.30 (dd,
J=2.0 Hz, 8.8 Hz, 1H), 4.21 (dd,
J=5.2 Hz, 12.4 Hz, 1H), 4.06 (s, 2H), 3.62-3.50 (m, 8H), 2.90-2.75 (m, 2H), 2.51-2.38 (m, 1H), 2.33-2.24 (m, 1H).
步驟5：化合物WX001的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2 (75 mg, 154.48 μmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (2 mL) 中，隨後依次加入化合物WX001-5的鹽酸鹽 (62.85 mg, 154.48 μmol)、乙酸鉀 (45.48 mg, 463.45 μmol) 和醋酸 (0.1 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應2小時，然後再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (130.97 mg, 617.94 μmol)，反應混合物在室溫下繼續攪拌反應16小時。反應完畢後，向反應液中加入水 (5 mL) 和乙酸乙酯 (10 mL)，分液，水相用乙酸乙酯 (20 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (20 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex luna C18 80*40 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%：20%-38%，7 min) 分離，得到目標化合物WX001的鹽酸鹽。MS–ESI
m/z: 840.5 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.94 (s, 1H), 10.71 (br s, 1H), 9.51 (d,
J=6.4 Hz, 1H), 8.79 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.50–8.37 (m, 1H), 8.26 (d,
J=5.2 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.58 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.47 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.28–6.95 (m, 1H), 6.90–6.42 (m, 1H), 5.18 (d,
J=79.2 Hz, 1H), 4.77 (d,
J=20.0 Hz, 1H), 4.34–4.09 (m, 6H), 3.40–3.20 (m, 4H), 3.06 (s, 2H), 2.85–2.73 (m, 2H), 2.70–2.57 (m, 4H), 2.35–2.19 (m, 2H), 2.17–1.65 (m, 12H), 1.27–1.13 (m, 2H).
實施例2
合成路線：
步驟1：化合物WX002-1的合成
室溫下，將化合物WX001-3的鹽酸鹽 (0.5 g, 1.78 mmol) 和三乙胺 (632.58 mg, 6.25 mmol) 溶於N, N–二甲基甲醯胺 (10 mL)中，隨後加入2-(7-氮雜苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (812.61 mg, 2.14 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應1小時，然後加入中間體BB-6的鹽酸鹽 (522.08 mg, 1.33 mmol)，反應混合物在室溫下繼續攪拌反應16小時。反應完畢後，將反應液過濾，濾餅用N, N–二甲基甲醯胺 (5 mL) 淋洗，再用甲基三級丁基醚 (20 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX002-1。MS–ESI
m/z: 471.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.88 (s, 1H), 9.93 (s, 1H), 8.06 (d,
J=1.2 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.50 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.38 (dd,
J=1.2 Hz, 8.4 Hz, 1H), 4.10 (dd,
J=4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 3.43-3.36 (m, 4H), 3.35-3.33 (m, 4H), 3.19 (s, 2H), 2.79-2.64 (m, 1H), 2.62-2.54 (m, 1H), 2.37-2.24 (m, 1H), 2.16-2.06 (m, 1H), 1.40 (s, 9H).
步驟2：化合物WX002-2的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX002-1 (0.8 g, 1.70 mmol) 溶於乙酸乙酯 (10 mL) 中，隨後加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 40 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應16小時。反應完畢後，將反應液過濾，濾餅用乙酸乙酯 (5 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX002-2的鹽酸鹽。MS–ESI
m/z: 371.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, D
2O) δ: 7.75 (d,
J=1.6 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.43 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.19 (dd,
J=1.2 Hz, 8.4 Hz, 1H), 4.31 (s, 2H), 4.10-4.03 (m, 1H), 3.80-3.72 (m, 4H), 3.71-3.63 (m, 4H), 2.78-2.61 (m, 2H), 2.33-2.20 (m, 1H), 2.18-2.09 (m, 1H).
步驟3：化合物WX002的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2 (75 mg, 154.48 μmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (2 mL) 中，隨後依次加入化合物WX002-2的鹽酸鹽 (62.85 mg, 154.48 μmol)、乙酸鉀 (45.48 mg, 463.45 μmol) 和醋酸 (0.1 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應2小時，然後再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (172.88 mg, 815.68 μmol)，反應混合物在室溫下繼續攪拌反應16小時。反應完畢後，向反應液中加入水 (5 mL) 和乙酸乙酯 (10 mL)，分液，水相加入乙酸乙酯 (20 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (20 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex luna C18 80*40 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%：15%-35%，7 min)，得到目標化合物WX002的鹽酸鹽。MS–ESI
m/z: 840.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.96 (s, 1H), 10.90 (s, 1H), 9.51 (d,
J=6.0 Hz, 1H), 8.79 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.50–8.37 (m, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.56 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.38 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.28–6.95 (m, 1H), 6.90–6.41 (m, 1H), 5.18 (d,
J= 78.4 Hz, 1H), 4.77 (d,
J=19.6 Hz, 1H), 4.28–4.09 (m, 6H), 3.48–3.32 (m, 4H), 3.28–3.00 (m, 3H), 2.82–2.65 (m, 3H), 2.63–2.57 (m, 2H), 2.38–2.25 (m, 2H), 2.20–1.65 (m, 12H), 1.28–1.11 (m, 2H).
實施例3
合成路線：
步驟1：化合物WX003-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX003-1 (9 g, 44.72 mmol) 溶於四氫呋喃 (90 mL) 中，冷卻至0℃，緩慢加入氫化鈉 (2.15 g, 53.66 mmol, 純度: 60%)，反應混合物在0℃下攪拌反應30分鐘，再加入溴丙炔 (5.32 g, 44.72 mmol)，反應混合物緩慢升溫至室溫，攪拌反應16小時。反應完畢後，將反應液緩慢倒入冰水 (100 mL) 中，用乙酸乙酯 (100 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (100 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：乙酸乙酯/石油醚=0/1–1/1，體積比)，得到化合物WX003-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 4.20 (d,
J=2.4 Hz, 2H), 3.81-3.67 (m, 3H), 3.15-3.06 (m, 2H), 2.42 (t,
J=2.4 Hz, 1H), 1.90-1.81 (m, 2H), 1.59-1.49 (m, 2H), 1.46 (s, 9H).
步驟2：化合物WX003-3的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-7 (1 g, 3.25 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (20 mL) 中，隨後依次加入化合物WX003-2 (1.16 g, 4.87 mmol)、碳酸銫 (3.17 g, 9.74 mmol)、碘化亞銅 (124 mg, 694 μmol) 和二氯雙(三苯基膦)鈀 (456 mg, 649 μmol)，反應混合物加熱至80℃，攪拌反應5小時。反應完畢後，冷卻至室溫，倒入1 M鹽酸 (80 mL) 中，用乙酸乙酯 (10 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=5/1–1/1，體積比)，得到化合物WX003-3。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.98 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.49 (dd,
J=1.2 Hz, 7.6 Hz, 1H), 7.44 (dd,
J=0.8 Hz, 7.6 Hz, 1H), 7.24 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 4.53 (s, 2H), 4.00 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 3.88-3.77 (m, 3H), 3.19-3.10 (m, 2H), 2.88-2.69 (m, 2H), 2.43-2.34 (m, 2H), 1.97-1.88 (m, 2H), 1.67-1.59 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
步驟3：化合物WX003-4的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX003-3 (990 mg, 2.12 mmol) 溶於乙酸乙酯 (5 mL) 中，再加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 33 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應16小時。反應完畢後，將反應液減壓濃縮至體積剩餘1-2 mL，過濾，濾餅用乙酸乙酯 (12 mL×2) 洗滌，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX003-4的鹽酸鹽。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.92 (s, 1H), 8.89-8.80 (m, 2H), 8.00 (s, 1H), 7.65 (dd,
J=0.8 Hz, 7.6 Hz,
1H), 7.43 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.26 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 4.55 (s, 2H), 4.17 (dd,
J=4.8 Hz, 12.4 Hz, 1H), 3.90-3.83 (m, 1H), 3.22-3.11 (m, 2H), 3.05-2.94 (m, 2H), 2.81-2.70 (m, 1H), 2.63-2.54 (m, 1H), 2.39-2.27 (m, 1H), 2.17-2.00 (m, 1H), 2.07-2.02 (m, 2H), 1.84-1.73 (m, 2H).
步驟4：化合物WX003的鹽酸鹽的合成
室溫下，向四氫呋喃 (5 mL) 和N, N-二甲基甲醯胺 (1 mL) 混合溶劑中依次加入中間體BB-2 (149 mg, 307 μmol)，化合物WX003-4的鹽酸鹽 (123.6 mg, 307 μmol) 和醋酸鉀 (60 mg, 614 μmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應0.5小時，然後再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (130 mg, 614 μmol)，反應混合物在室溫下繼續攪拌反應16小時。反應完畢後，加入水 (1 mL)，減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱：Boston Green ODS 150*30 mm*5 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%：22%-42%，10 min)，得到目標化合物WX003的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 836.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ: 10.93 (s, 1H), 9.61-9.45 (m, 2H), 8.80 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.41 (d,
J=2.8 Hz, 1H), 8.27 (dd,
J=1.6 Hz, 5.6 Hz, 1H), 8.01 (d,
J=2.4 Hz, 1H), 7.67 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.44 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 7.32-6.96 (m, 2H), 6.92-6.43 (m, 1H), 5.18 (d,
J=78.4 Hz, 1H), 4.77 (d,
J=20.0 Hz, 1H), 4.58 (d,
J=2.8 Hz, 2H), 4.29-4.15 (m, 2H), 3.86-3.71 (m, 3H), 3.67-3.59 (m, 2H), 3.42-3.37 (m, 1H), 3.14-2.92 (m, 4H), 2.81-2.71 (m, 1H), 2.69-2.60 (m, 1H), 2.43-2.28 (m, 2H), 2.26-2.18 (m, 1H), 2.17-1.75 (m, 13H), 1.26-1.15 (m, 2H).
實施例4
合成路線：
步驟1：化合物WX004-1的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-5 (0.85 g, 2.76 mmol)、化合物WX003-2 (990.24 mg, 4.14 mmol)、碘化亞銅 (105.08 mg, 551.72 μmol)、雙(三苯基膦)二氯化鈀 (387.25 mg, 551.72 μmol) 和碳酸銫 (3.60 g, 11.03 mmol) 溶於N, N–二甲基甲醯胺 (15 mL) 中，反應混合物加熱至80℃並攪拌反應3小時。反應完畢後，冷卻至室溫，將反應液倒入水 (50 mL) 中，用乙酸乙酯 (30 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (30 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=2/1，體積比)，得到化合物WX004-1。MS-ESI
m/z: 367.2 [M+H-100]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.63 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.44 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.35 (dd,
J=1.2 Hz, 8.0 Hz, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.99 (dd,
J=6.8 Hz, 8.8 Hz, 1H), 3.87-3.70 (m, 3H), 3.18-3.09 (m, 2H), 2.87-2.68 (m, 2H), 2.43-2.32 (m, 2H), 1.98-1.86 (m, 2H), 1.67-1.54 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
步驟2：化合物WX004-2的三氟乙酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX004-1 (0.47 g, 1.01 mmol) 溶於二氯甲烷 (5 mL) 中，隨後緩慢滴加三氟乙酸 (1.54 g, 13.51 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應1小時。反應完畢後，直接減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex luna C18 100*40 mm*5 μm；流動相：水(0.05%三氟乙酸)-乙腈；乙腈%: 1%-45%，8 min)，得到化合物WX004-2的三氟乙酸鹽。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.91 (s, 1H), 8.76-8.44 (m, 2H), 8.00 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.59 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.32 (dd,
J=1.2 Hz, 8.4 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 4.16 (dd,
J=4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 3.89-3.79 (m, 1H), 3.25-3.14 (m, 2H), 3.09-2.96 (m, 2H), 2.81-2.70 (m, 1H), 2.58 (dt,
J=3.6 Hz, 17.2 Hz, 1H), 2.39-2.25 (m, 1H), 2.16-2.07 (m, 1H), 2.06-1.97 (m, 2H), 1.79-1.68 (m, 2H).
步驟3：化合物WX004的鹽酸鹽的合成
室溫下，将中間體BB-2 (70 mg, 144.19 μmol) 和化合物WX004-2的三氟乙酸鹽 (76.20 mg, 158.60 μmol) 溶于N, N–二甲基甲酰胺 (2 mL) 和冰乙酸 (0.1 mL) 的混合溶劑中，隨後加入乙酸鉀 (42.45 mg, 432.56 μmol)，反應混合物在室温下攪拌反應2小時後，再加入三乙醯基硼氫化鈉 (91.68 mg, 432.56 μmol)，反應混合物在室温下繼續攪拌反應16小時。反應完畢後，反應液過濾，濾液直接經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex Luna C18 80*40 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%：28%-48%，7 min)，得到目標化合物WX004的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 836.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.92 (s, 1H), 9.73 (br s, 1H),9.51 (d,
J=6.4 Hz, 1H), 8.81-8.77 (m, 1H), 8.40 (d,
J=4.0 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.61 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.33 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.27-6.95 (m 1H), 6.91-6.43 (m, 1H), 5.18 (d,
J=78.4 Hz, 1H), 4.76 (d,
J=19.6 Hz, 1H), 4.49 (s, 2H), 4.33-4.12 (m, 2H), 3.84-3.71 (m, 3H), 3.66-3.50 (m, 2H), 3.39-3.35 (m, 1H), 3.08-2.94 (m, 4H), 2.80-2.69 (m, 1H), 2.68-2.53 (m, 2H), 2.39-2.26 (m, 2H), 2.22-1.76 (m, 13H), 1.26-1.12 (m, 2H).
實施例5
合成路線：
步驟1：化合物WX005-1的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-3 (1 g, 2.23 mmol)、化合物WX003-2 (799.42 mg, 3.34 mmol)、碘化亞銅 (84.83 mg, 445.40 μmol)、雙(三苯基膦)二氯化鈀 (312.63 mg, 445.40 μmol) 和碳酸銫 (2.90 g, 8.91 mmol) 加入到N, N–二甲基甲醯胺 (20 mL) 中，反應混合物加熱至80℃並攪拌反應5小時。反應完畢後，冷卻至室溫，將反應液倒入水 (100 mL) 中，用乙酸乙酯 (50 mL×2) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (100 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=2/1，體積比)，得到化合物WX005-1。MS-ESI
m/z: 367.2 [M+H-100]
+.
步驟2：化合物WX005-2的三氟乙酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX005-1 (360.00 mg, 771.66 μmol) 溶於二氯甲烷 (5 mL) 中，隨後滴加三氟乙酸 (1.54 g, 13.51 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex Luna C18 100*40 mm*5 μm；流動相：水(0.05%三氟乙酸)-乙腈；乙腈%: 1%-45%，8 min)，得到化合物WX005-2的三氟乙酸鹽。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.90 (s, 1H), 8.59-8.20 (m, 2H), 7.98 (s, 1H), 7.73 (d,
J=1.2 Hz, 1H), 7.60 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.39 (dd,
J=1.6 Hz, 8.4 Hz, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.15 (dd,
J=4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 3.88-3.78 (m, 1H), 3.24-3.14 (m, 2H), 3.08-2.96 (m, 2H), 2.80-2.64 (m, 2H), 2.43-2.27 (m, 1H), 2.16-2.06 (m, 1H), 2.05-1.93 (m, 2H), 1.78-1.64 (m, 2H).
步驟3：化合物WX005的鹽酸鹽的合成
室溫下，將中間體BB-2 (70 mg, 144.19 μmol) 和化合物WX005-2的三氟乙酸鹽 (76.20 mg, 158.60 μmol) 溶於N, N–二甲基甲醯胺 (2 mL) 和冰乙酸 (0.1 mL) 的混合溶劑中，隨後加入乙酸鉀 (42.45 mg, 432.56 μmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應2小時後，再加入三乙醯基硼氫化鈉 (91.68 mg, 432.56 μmol)，反應混合物在室溫下繼續攪拌反應16小時。反應完畢後，直接減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%: 20%-35%，8 min)，得到目標化合物WX005的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 836.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.90 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 9.50 (d,
J=6.4 Hz, 1H), 8.78 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.39 (d,
J=4.0 Hz, 1H), 8.25 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.76-7.72 (m, 1H), 7.60 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.39 (dd,
J=1.6 Hz, 8.8 Hz, 1H), 7.27-6.95 (m, 1H), 6.90-6.43 (m, 1H), 5.17 (d,
J=79.6 Hz, 1H), 4.76 ( d,
J=20.0 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 4.33-4.12 (m, 2H), 3.98-3.71 (m, 3H), 3.67-3.57 (m, 2H), 3.40-3.33 (m, 1H), 3.16-2.92 (m, 4H), 2.79-2.66 (m, 1H), 2.62-2.55 (m, 1H), 2.38-2.31 (m, 1H), 2.22-1.65 (m, 15H), 1.26-1.10 (m, 2H).
實施例6
合成路線：
步驟1：化合物WX006-1的合成
室溫下，將化合物WX001-3的鹽酸鹽 (1.3 g, 5.31 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (15 mL) 中，隨後依次加入2-(7-氮雜苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (1.62 g, 4.25 mmol)、N, N-二異丙基乙胺 (1.37 g, 10.63 mmol) 和中間體BB-8的鹽酸鹽 (906 mg, 3.54 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應16小時。反應完畢後，將反應液倒入水 (150 mL) 中，用乙酸乙酯 (30 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (30 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=5/1–7/3，體積比)，得到化合物WX006-1。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 9.71 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.35-7.29 (m, 1H), 7.26-7.23 (m, 1H), 4.20 (q,
J=7.2 Hz, 2H), 3.71 (d,
J=1.2 Hz, 2H), 3.59 (m, 4H), 3.26 (m, 2H), 2.65 (m, 4H), 1.49 (s, 9H), 1.28 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟2：化合物WX006-2合成
0℃和氮氣保護下，將化合物WX006-1 (1.53 g, 3.43 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (20 mL) 中，再依次加入三級丁醇鉀 (462 mg, 4.12 mmol) 和丙烯醯胺 (293 mg, 4.12 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應1小時。反應完畢後，將反應液慢慢倒入飽和氯化銨水溶液 (30 mL) 中，用乙酸乙酯 (15 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=10/1–1/1，體積比)，得到化合物WX006-2。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 9.74 (s, 1H), 8.27-8.19 (m, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.26-7.14 (m, 2H), 4.02 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 3.58 (s, 4H), 3.26 (s, 2H), 2.86-2.73 (m, 2H), 2.64 (s, 4H), 2.45-2.35 (m, 2H), 1.49 (s, 9H).
步驟3：化合物WX006-3的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX006-2 (150 mg, 2.12 mmol) 溶於乙酸乙酯 (3 mL) 中，隨後加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 15 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，直接減壓濃縮除去溶劑，得到化合物WX006-3的鹽酸鹽，未進一步純化，直接用於下一步。
步驟4：化合物WX006的鹽酸鹽的合成
室溫下，將中間體BB-2 (149 mg, 307 μmol) 溶於四氫呋喃 (5 mL) 和N, N-二甲基甲醯胺 (1 mL) 混合溶劑中，隨後依次加入化合物WX006-3的鹽酸鹽 (125 mg, 307 μmol) 和醋酸鉀 (60 mg, 614 μmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應0.5小時，然後再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (130 mg, 614 μmol)，反應混合物在室溫下繼續攪拌反應16小時。反應完畢後，加入水 (1 mL) 淬滅，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱：Boston Green ODS 150*30 mm*5 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%: 15%-35%，10 min)，得到目標化合物WX006的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 840.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ: 10.93 (s, 1H), 10.42 (s, 1H), 9.52 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 8.78 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 8.41 (d,
J=4.4 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.73 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.41 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.32-6.96 (m, 3H), 6.90-6.44 (m, 1H), 5.17 (d,
J=81.2 Hz, 1H), 4.77 (d,
J=20.4 Hz, 1H), 4.29-4.13 (m, 2H), 4.03-3.91 (m, 1H), 3.85-3.79 (m, 2H), 3.77-3.58 (m, 5H), 3.08-2.99 (m, 1H), 2.82-2.71 (m, 2H), 2.70-2.66 (m, 1H), 2.64-2.57 (m, 2H), 2.41-2.27 (m, 2H), 2.17-1.74 (m, 12H),1.30-1.13 (m, 3H).
實施例7
合成路線：
步驟1：化合物WX007-1的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-10 (300 mg, 838 μmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (10 mL) 中，隨後依次加入化合物WX003-2 (301 mg,1.26 mmol)，碳酸銫 (819 mg, 2.51 mmol)，碘化亞銅 (32 mg, 168 umol) 和二氯雙(三苯基膦)鈀 (118 mg, 168 umol)，反應混合物升溫至80℃，攪拌反應3小時。反應完畢後，冷卻至室溫，倒入飽和氯化銨溶液 (100 mL) 中，用乙酸乙酯 (10 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=5/1-1/1，體積比)，得到化合物WX007-1。MS-ESI m/z: 539.3 [M+Na]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.11 (d,
J=1.2 Hz, 1H), 8.07 (br s, 1H), 7.93 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.76-7.67 (m, 3H), 7.61 (dd,
J=1.6 Hz, 8.8 Hz, 1H), 4.53- 4.46 (m, 3H), 3.88-3.77 (m, 3H), 3.20-3.10 (m, 2H), 2.89-2.77 (m, 2H), 2.60-2.42 (m, 2H), 1.98-1.88 (m, 2H), 1.68-1.60 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
步驟2：化合物WX007-2的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX007-1 (180 mg, 348 μmol) 溶解在乙酸乙酯 (10 mL) 中，再加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 10 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，減壓濃縮除掉溶劑，所得殘餘物加入乙酸乙酯 (10 mL)，再次濃縮至剩餘4-5 mL，過濾，濾餅用乙酸乙酯 (5 mL×2) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX007-2的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 417.0 [M+H]
+.
步驟3：化合物WX007的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2 (149 mg, 307 umol) 溶於四氫呋喃 (5 mL) 和N, N-二甲基甲醯胺 (1 mL)中，隨後加入化合物WX007-2的鹽酸鹽 (139 mg, 307 μmol) 和醋酸鉀 (90 mg, 921 μmol)，反應混合物室溫下攪拌反應0.5小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (130 mg, 614 umol)，反應混合物在室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，加入水 (1 mL)，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱：Boston Green ODS 150*30 mm*5 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%: 27%-42%，10 min)，得到目標化合物WX007的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 886.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ: 10.95 (s, 1H), 9.51 (d,
J=4.4 Hz, 1H), 9.45 (br s, 1H), 8.79 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 8.40 (d,
J=1.6 Hz, 1H), 8.30 - 8.16 (m, 3H), 8.06 (s, 1H), 7.93- 7.85 (m, 2H), 7.58 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.31 - 6.46 (m, 2H), 5.18 (d,
J=79.2 Hz, 1H), 4.83 - 4.64 (m, 2H), 4.53 (s, 2H), 4.23 (br s, 1H), 4.00-3.72 (m, 3H), 3.67 - 3.52 (m, 2H), 3.13 - 2.80 (m, 6H), 2.70 - 2.59 (m, 1H), 2.30 - 2.20 (m, 2H), 2.11 - 1.72 (m, 14H), 1.26–1.15 (m, 2H).
實施例8
合成路線：
步驟1：化合物WX008-1的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX001-3的鹽酸鹽 (387.74 mg, 1.59 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (10 mL) 中，隨後依次加入2-(7-氮雜苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (482.81 mg, 1.27 mmol)，N, N-二異丙基乙胺 (410.27 mg, 3.17 mmol) 和中間體BB-9的鹽酸鹽 (350 mg, 1.06 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，倒入水 (50 mL) 中，用乙酸乙酯 (10 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑，所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=5/1-1/1，體積比)，得到化合物WX008-1。MS-ESI
m/z: 521.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 9.25 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.10 (br s, 1H), 7.95 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.77-7.71 (m, 2H), 7.69-7.65 (m, 2H), 4.52-4.45 (m, 1H), 3.60-3.51 (m, 4H), 3.24 (s, 2H), 2.84-2.76 (m, 2H), 2.68-2.60 (m, 4H), 2.56-2.46 (m, 2H), 1.49 (s, 9H).
步驟2：化合物WX008-2的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX008-1 (160 mg, 288 μmol) 溶於鹽酸的1, 4-二㗁烷溶液 (4 M, 12 mL) 中，反應混合物在室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，減壓除去溶劑，殘餘物中加入乙酸乙酯 (20 mL)，再次減壓除去溶劑，得到化合物WX008-2的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 421.1 [M+H]
+.
步驟3：化合物WX008的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2 (140 mg, 288.37 μmol) 溶於四氫呋喃 (5 mL) 和N, N-二甲基甲醯胺 (1 mL) 中，隨後加入化合物WX008-2的鹽酸鹽 (124.03 mg, 271.44 μmol)，醋酸鉀 (84.90 mg, 865.11 μmol) 和醋酸 (8.66 mg, 144.19 μmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應0.5小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (183 mg, 865 μmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應4小時。反應完畢後，加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (15 mL×3)萃取，析出固體，捨棄水相和有機相，用N, N-二甲基甲醯胺 (5 mL) 將固體溶解，所得溶液經製備HPLC分離 (色譜柱：Boston Green ODS 150*30 mm*5 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%：28%-48%,10 min)，得到目標化合物WX008的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 890.5 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ: 10.95 (s, 1H), 10.68 (br s, 1H), 9.51 (d,
J=6.8 Hz, 1H), 8.78 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.40 (s, 2H), 8.25 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.17 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.80-7.73 (m, 3H), 7.34-6.95 (m, 1H), 6.90-6.42 (m, 1H), 5.17 (d,
J=81.2 Hz, 1H), 4.76 (d,
J=20.8 Hz, 1H), 4.66 (dd,
J=4.0 Hz, 11.6 Hz, 1H), 4.29-4.19 (m, 1H), 4.02-3.88 (m, 3H), 3.84-3.72 (m, 4H), 3.65-3.59 (m, 4H), 3.10-3.00 (m, 1H), 2.93-2.82 (m, 1H), 2.68-2.59 (m, 1H), 2.43-2.21 (m, 4H), 2.12-1.72 (m, 11H), 1.25-1.16 (m, 3H).
實施例9
合成路線：
步驟1：化合物WX009-1的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX003-2 (400.87 mg, 1.68 mmol)，中間體BB-12 (0.3 g, 837.55 μmol)，碘化亞銅 (31.90 mg, 167.51 μmol)，雙三苯基膦二氯化鈀 (117.58 mg, 167.51 μmol) 和N, N-二異丙基乙胺 (216.50 mg, 1.68 mmol) 加入二甲基亞碸 (4 mL) 中，反應混合物升溫至85℃，攪拌反應2.5小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (2 mL)，用乙酸乙酯 (5 mL×2) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (5 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過薄層層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷=1/1/1，體積比)，得到化合物WX009-1。MS-ESI
m/z: 417.1 [M+H-100]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.35 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.99 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.76 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.73-7.68 (m, 2H), 7.54 (dd,
J=7.2 Hz, 8.8 Hz, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.51 (dd,
J=5.2 Hz, 8.8 Hz, 1H), 3.92-3.79 (m, 4H), 3.20-3.12 (m, 2H), 2.87-2.77 (m, 1H), 2.56-2.46 (m, 1H), 2.01-1.92 (m, 2H), 1.91-1.83 (m, 1H), 1.71-1.62 (m, 2H),1.47 (s, 9H).
步驟2：化合物WX009-2的三氟乙酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX009-1 (0.1 g, 193.58 μmol) 溶於二氯甲烷 (2 mL) 中，加入三氟乙酸 (617.19 mg, 5.41 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，減壓濃縮除去溶劑，得到化合物WX009-2的三氟乙酸鹽。MS-ESI
m/z: 417.1 [M+H]
+.
步驟3：化合物WX009的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，向冰乙酸 (0.1 mL) 和N, N–二甲基甲醯胺 (2 mL) 的混合溶劑中加入中間體BB-2 (90 mg, 185.38 μmol)，化合物WX009-2的三氟乙酸鹽 (98.34 mg, 185.38 μmol) 和乙酸鉀 (54.58 mg, 556.14 μmol)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時，再加入三乙醯基硼氫化鈉 (117.87 mg, 556.14 μmol)，反應混合物室溫下攪拌反應15小時。反應完畢後，加入飽和氯化銨 (10 mL)，用乙酸乙酯 (5 mL×2) 萃取，有大量不溶物，將有機相和不溶物減壓濃縮除去溶劑，所得殘餘物經製備HPLC分離純化 (色譜柱：Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%: 25%-45%，8 min)，得到目標化合物WX009的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 886.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CD
3OD): 8.54-8.48 (m, 1H), 8.38-8.27 (m, 3H), 8.21 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.82-7.77 (m, 1H), 7.69 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 7.60-7.54 (m, 1H), 7.04-6.71 (m, 2H), 6.46-6.41 (m, 1H), 5.43 (s, 1H), 4.83-4.76 (m, 4H), 4.69-4.62 (m, 3H), 4.26-4.14 (m, 2H), 3.97-3.90 (m, 2H), 3.75-3.63 (m, 2H), 3.54-3.45 (m, 2H), 3.20-3.06 (m, 2H), 2.96-2.4 (m, 1H), 2.81-2.71 (m, 1H), 2.52-2.39 (m, 2H), 2.35-2.15 (m, 4H), 2.13-1.87 (m, 9H), 1.40-1.25 (m, 2H)
實施例10
合成路線：
步驟1：化合物WX010-1的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX001-3的鹽酸鹽 (186.73 mg, 665.12 μmol) 溶於N, N二甲基甲醯胺 (5 mL) 中，加入N, N-二異丙基乙胺 (390.73 mg, 3.02 mmol) 和2-(7-氧化苯並三氮唑)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦鹽 (344.86 mg, 906.99 μmol)，反應混合物室溫下攪拌反應0.5小時，加入中間體BB-11的鹽酸鹽 (0.2 g, 604.66 μmol)，反應混合物室溫下攪拌反應1.5小時。反應完畢後，加入水 (30 mL)，用乙酸乙酯 (20 mL×3) 萃取。合併有機相，用10%食鹽水 (30 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/2-0/1)，得到化合物WX010-1。MS-ESI
m/z: 521.3 [M+H]
+.
步驟2：化合物WX010-2的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX010-1 (290 mg, 557.08 μmol) 溶於二氯甲烷 (2 mL) 中，加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 5 mL)，反應混合物室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，過濾，濾餅用乙酸乙酯 (10 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX010-2的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 421.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.96 (s, 1H), 10.77 (s, 1H), 9.85 (s, 2H), 8.16-8.03 (m, 3H), 7.86 (d,
J=9.6 Hz, 1H), 7.67-7.57 (m, 2H), 4.71 (dd,
J=3.6 Hz, 12.0 Hz, 1H), 4.38 (s, 2H), 3.70-3.55 (m, 4H), 3.52-3.35 (m, 4H), 2.97-2.82 (m, 1H), 2.68-2.59 (m, 1H), 2.48-2.37 (m, 1H), 2.35-2.22 (m, 1H).
步驟3：化合物WX010的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2 (190 mg, 391.36μmol) 和化合物WX010-2的鹽酸鹽 (187.76 mg, 410.93 μmol) 溶於N, N二甲基甲醯胺 (1 mL) 中，加入醋酸鉀 (115.22 mg, 1.17 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (331.78 mg, 1.57 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應40分鐘。反應完畢後，加入1 M鹽酸 (4 mL)，減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經製備HPLC分離純化 (色譜柱：Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%：10%-30%，8 min)，得到目標化合物WX010的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 890.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.96 (s, 1H), 10.59 (s, 1H), 9.51 (d,
J=6.4 Hz, 1H), 8.79 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 8.41 (d,
J=4.0 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.15-8.08 (m, 1H), 8.08-8.00 (m, 2H), 7.87 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.68-7.57 (m, 2H), 7.26-6.96 (m, 1H), 6.90-6.40 (m, 1H), 5.18 (d,
J=80.0 Hz, 1H), 4.82-4.65 (m, 2H), 4.34-4.16 (m, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.75-3.59 (m, 8H), 3.13-3.01 (m, 2H), 2.95-2.85 (m, 1H), 2.70-2.59 (m, 2H), 2.44-2.38 (m, 1H), 2.36-2.20 (m, 2H), 2.13-1.69 (m, 10H), 1.28-1.12 (m, 2H).
實施例11
合成路線：
步驟1：化合物WX011-1的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-15-8 (0.5 g, 1.50 mmol) 和化合物WX003-2 (716.14 mg, 2.99 mmol) 溶於二甲基亞碸 (5 mL) 中，依次加入雙三苯基膦二氯化鈀 (210.05 mg, 299.25 μmol)，碘化亞銅 (56.99 mg, 299.25 μmol) 和N, N-二異丙基乙胺 (386.76 mg, 2.99 mmol)，反應混合物升溫至85℃，攪拌反應2小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (20 mL×3) 萃取。合併有機相，用10%食鹽水 (30 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/0-6/1)，得到化合物WX011-1。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.53 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.11 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.78 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.75 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.63 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 4.59 (s, 2H), 4.34 (s, 2H), 4.22 (q,
J=7.0 Hz, 2H), 3.89-3.76 (m, 3H), 3.22-3.12 (m, 2H), 2.00-1.91 (m, 2H), 1.72-1.62 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.21 (t,
J=7.2 Hz, 3H)
步驟2：化合物WX011-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX011-1 (0.3 g, 609.06 μmol) 溶於四氫呋喃 (5 mL) 中，冷卻至0℃，隨後加入丙烯醯胺 (47.62 mg, 669.97 μmol) 和三級丁醇鉀 (82.01 mg, 730.87 μmol)，反應混合物升溫至室溫，攪拌反應1.5小時。反應完畢後，倒入1 M鹽酸調節pH=3-4，加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (20 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (30 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=3/1-1/1，體積比)，得到化合物WX011-2。MS-ESI
m/z: 418.2 [M+H-100]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.58 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.03 (d,
J=8.4 Hz, 1H), 7.81 (d,
J=9.6 Hz, 1H), 7.77 (dd,
J=0.8 Hz, 7.2 Hz, 1H), 7.65 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 4.74 (dd,
J=4.8 Hz, 8.4 Hz, 1H), 4.60 (s, 2H), 3.90-3.76 (m, 3H), 3.23-3.11 (m, 2H), 3.01-2.87 (m, 1H), 2.85-2.67 (m, 2H), 2.65-2.52 (m, 1H), 2.01-1.89 (m, 2H), 1.70-1.62 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
步驟3：化合物WX011-3的三氟乙酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX011-2 (0.1 g, 193.21 μmol) 溶於二氯甲烷 (2 mL) 中，加入三氟乙酸 (61.72 mg, 541.29 μmol, 40.08 μL)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，減壓濃縮除去溶劑，得到化合物WX011-3的三氟乙酸鹽。
步驟4：化合物WX011的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，向冰乙酸 (0.1 mL) 和N, N–二甲基甲醯胺 (1 mL) 的混合溶劑中依次加入中間體BB-2 (90 mg, 185.38 μmol)，化合物WX011-3的三氟乙酸鹽 (98.53 mg, 185.38 μmol) 和乙酸鉀 (54.58 mg, 556.14 μmol)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時，再加入三乙醯基硼氫化鈉 (117.87 mg, 556.14 μmol)，反應混合物室溫下攪拌反應15小時。反應完畢後，加入飽和氯化銨 (10 mL)，用乙酸乙酯 (5 mL×2) 萃取，有大量不溶物，將有機相和不溶物減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經製備HPLC分離純化 (色譜柱：Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%：25%-45%，8 min)，得到目標化合物WX011的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 887.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, MeOD_
d
4 ) δ: 8.59 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.51 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 8.37 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.33-8.26 (m, 2H), 7.91 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.79 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.75-7.68 (m, 1H), 7.06-6.72 (m, 1H), 6.44 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 5.44 (s, 1H), 5.01 (d,
J=4.8 Hz, 10.4 Hz, 1H), 4.96-4.92 (m, 1H), 4.84-4.78 (m, 2H), 4.70 (s, 2H), 4.28-4.15 (m, 2H), 3.98-3.92 (m, 2H), 3.76-3.65 (m, 2H), 3.57-3.46 (m, 2H), 3.24-3.06 (m, 3H), 2.95-2.66 (m, 3H), 2.59-2.50 (m, 1H), 2.47-1.87 (m, 13H), 1.42-1.28 (m, 2H).
實施例12
合成路線：
步驟1：化合物WX012-1的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX001-3的鹽酸鹽 (93.09 mg, 331.57 μmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (2 mL) 中，隨後依次加入N, N-二異丙基乙胺 (194.78 mg, 1.51 mmol) 和2-(7-氮雜苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (171.92 mg, 452.14 μmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應0.5小時，然後再加入中間體BB-13的鹽酸鹽 (0.1 g, 301.43 μmol)，反應混合物在室溫下繼續攪拌反應2小時。反應完畢後，向反應液中加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (20 mL×3) 萃取。合併有機相，用10%食鹽水 (30 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，得到化合物WX012-1。MS-ESI
m/z: 522.3 [M+H]
+.
步驟2：化合物WX012-2的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX012-1 (150 mg, 287.60 μmol) 溶於乙酸乙酯 (1 mL) 中，隨後加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 2 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應16小時。反應完畢後，將反應液過濾，濾餅用乙酸乙酯 (10 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX012-2的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 422.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.25 (s, 1H), 11.14 (s, 1H), 9.85 (s, 2H), 8.52 (d,
J=2.0 Hz, 1H), 8.25 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 8.14 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.96-7.88 (m, 2H), 5.05 (dd,
J=4.4 Hz, 11.2 Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.60 (s, 4H), 3.45 (s, 4H), 2.90-2.78 (m, 1H), 2.70-2.65 (m, 1H), 2.64-2.56 (m, 1H), 2.45-2.33 (m, 1H).
步驟3：化合物WX012的鹽酸鹽合成
室溫下，將中間體BB-2 (95 mg, 195.68 μmol) 和化合物WX012-2的鹽酸鹽 (98.56 mg, 215.25 μmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (2 mL) 中，隨後依次加入醋酸鉀 (57.61 mg, 587.04 μmol) 和醋酸 (5.88 mg, 97.84 μmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應2小時，然後再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (165.89 mg, 782.72 μmol)，反應混合物在室溫下繼續攪拌反應10小時。反應完畢後，向反應液中加入飽和氯化銨溶液 (20 mL)，有固體析出，過濾，收集濾餅。所得濾餅經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex Luna 80*40 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%: 18%-38%，7 min)，得到目標化合物WX012的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 891.5 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.14 (s, 1H), 11.06 (s, 1H), 9.51 (d,
J=6.0 Hz, 1H), 8.78 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 8.51 (d,
J=1.6 Hz, 1H), 8.40 (d,
J=3.6 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 2H), 8.14 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.96-7.87 (m, 2H), 7.27-6.96 (m, 1H), 6.90-6.43 (m, 1H), 5.34-4.98 (m, 2H), 4.76 (d,
J=20.0 Hz, 1H), 4.36-4.08 (m, 4H), 3.83-3.71 (m, 5H), 3.15-3.00 (m, 2H), 2.91-2.77 (m, 2H), 2.71-2.58 (m, 4H), 2.43-2.31 (m, 2H), 2.14-1.72 (m, 10H), 1.30-1.10 (m, 2H).
實施例13
合成路線：
步驟1：化合物WX013-1的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX003-2 (399.77 mg, 1.67 mmol)，中間體BB-14 (0.3 g, 835.25 μmol)，碘化亞銅 (31.81 mg, 167.05 μmol)，雙三苯基膦二氯化鈀 (117.25 mg, 167.05 μmol) 和N, N-二異丙基乙胺 (215.90 mg, 1.67 mmol) 加入二甲基亞碸 (4 mL) 中，反應混合物升溫至85℃，攪拌反應2.5小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (2 mL)，用乙酸乙酯 (5 mL×2) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (5 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經薄層層析純化 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷=1/1/1，體積比)，得到化合物WX013-1。MS-ESI
m/z: 418.2 [M+H-100]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.13 (br s, 2H), 7.97 (t,
J=9.2 Hz, 2H), 7.73 (dd,
J=8.8 Hz, 15.2 Hz, 2H), 4.72 (dd,
J=4.8 Hz, 8.4 Hz, 1H), 4.49 (s, 2H), 3.91-3.68 (m, 3H), 3.19-3.11 (m, 2H), 3.00-2.89 (m, 1H), 2.85-2.68 (m, 2H), 2.64-2.54 (m, 1H), 1.99-1.88 (m, 2H), 1.68-1.61 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
步驟2：化合物WX013-2的三氟乙酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX013-1 (0.1 g, 193.21 μmol) 溶於二氯甲烷 (2 mL)中，加入三氟乙酸 (616.00 mg, 5.40 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應1小時。反應完畢後，減壓濃縮除去溶劑，得到化合物WX013-2的三氟乙酸鹽。MS-ESI
m/z: 418.2 [M+H]
+.
步驟3：化合物WX013的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，向N, N–二甲基甲醯胺 (1 mL) 和冰乙酸 (0.1 mL) 的混合溶劑中加入中間體BB-2 (90 mg, 185.38 μmol)，化合物WX013-2的三氟乙酸鹽 (98.53 mg, 185.38 μmol) 和乙酸鉀 (54.58 mg, 556.14 μmol)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時。再加入三乙醯基硼氫化鈉 (117.87 mg, 556.14 μmol)，反應混合物室溫下攪拌反應15小時。反應完畢後，加入1 M鹽酸 (1 mL)，所得溶液經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%：20%-40%，8 min)，得到目標化合物WX013的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 887.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CD
3OD) δ: 9.74 (s, 1H), 8.55-8.49 (m, 1H), 8.39-8.34 (m, 1H), 8.32-8.28 (m, 1H), 8.24-8.18 (m, 2H), 8.09 (d,
J=8.8 Hz, 1H), 7.84 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.75-7.70 (m, 1H), 7.04-6.72 (m, 1H), 6.44 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 5.44 (s, 1H), 4.96 (dd,
J= 4.8 Hz, 10.4 Hz, 1H), 4.82-4.78 (m, 2H), 4.58-4.55 (m, 2H), 4.28-4.17 (m, 1H), 4.14-4.09 (m, 1H), 3.99-3.84 (m, 2H), 3.75-3.65 (m, 2H), 3.54-3.46 (m, 2H), 3.36-3.33 (m, 1H), 3.20-3.11 (m, 1H), 3.09 (d,
J=6.0 Hz, 2H), 2.94-2.63 (m, 3H), 256-2.47 (m, 1H), 2.43-2.34 (m, 1H), 2.31-2.19 (m, 3H), 2.14-1.82 (m, 9H), 1.41-1.26 (m, 2H).
實施例14
合成路線：
步驟1：化合物WX014-1的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX001-3的鹽酸鹽 (465.44 mg, 1.66 mmol) 溶於N, N-二甲基甲醯胺 (10 mL) 中，隨後依次加入N, N-二異丙基乙胺 (973.92 mg, 7.54 mmol) 和2-(7-氮雜苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (859.59 mg, 2.26 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應0.5小時，然後再加入中間體BB-15的鹽酸鹽 (0.5 g, 1.51 mmol)，反應混合物在室溫下繼續攪拌反應11.5小時。反應完畢後，加入水 (80 mL)，用乙酸乙酯 (50 mL×3) 萃取。合併有機相，用10%食鹽水 (60 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/2-0/1，體積比)，得到化合物WX014-1。MS-ESI
m/z: 522.2 [M+H]
+.
步驟2：化合物WX014-2的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX014-1 (520 mg, 997.00 μmol) 溶於二氯甲烷 (5 mL) 中，加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 10 mL)，反應混合物室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，過濾，濾餅用乙酸乙酯 (15 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX014-2的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 422.2 [M+H]
+.
步驟3：化合物WX014的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2 (190 mg, 391.36 μmol) 和化合物WX014-2的鹽酸鹽 (179.21 mg, 391.36 μmol) 溶於N, N二甲基甲醯胺 (5 mL) 中，加入醋酸鉀 (115.22 mg, 1.17 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (331.78 mg, 1.57 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應40分鐘。反應完畢後，加入1 M鹽酸溶液 (4 mL)，減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%：10%-30%，8 min)，得到目標化合物WX014的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 891.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.15 (s, 1H), 10.71 (s, 1H), 9.51 (d,
J=6.4 Hz, 1H), 8.78 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.41 (d,
J=3.6 Hz, 1H), 8.36 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.17 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.00 (d,
J=9.2 Hz, 1H), 7.81-7.71 (m, 2H), 7.27-6.96 (m, 1H), 6.90-6.39 (m, 1H), 5.30-5.06 (m, 2H), 4.77 (d,
J=19.6 Hz, 1H), 4.39-4.03 (m, 3H), 3.86-3.78 (m, 2H), 3.76-3.57 (m, 8H), 3.14-2.98 (m, 2H), 2.92-2.80 (m, 1H), 2.71-2.53 (m, 3H), 2.46-2.34 (m, 2H), 2.13-2.00 (m, 5H), 1.99-1.73 (m, 5H), 1.29-1.13 (m, 2H).
實施例15
合成路線：
步驟1：化合物WX015-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX001-3的鹽酸鹽(9.7 g) 溶於N, N二甲基甲醯胺 (50 mL) 中，隨後依次加入N, N-二異丙基乙胺 (8.55 g, 66.15 mmol) 和2-(7-氮雜苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (16.35 g, 43.00 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應0.5小時，然後再加入化合物WX015-1 (5 g, 33.08 mmol)，反應混合物在室溫下繼續攪拌反應2小時。反應完畢後，加入水 (200 mL)，用乙酸乙酯 (50 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (100 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=2/1，體積比)，得到化合物WX015-2。MS-ESI
m/z: 378.3 [M+H]
+.
步驟2：化合物WX015-3的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX015-2 (4 g, 10.60 mmol) 和碳酸二甲酯 (3.82 g, 42.39 mmol, 3.57 mL)溶於四氫呋喃 (50 mL) 中，加入三級丁醇鉀 (7.14 g, 63.59 mmol)，反應混合物升溫至90℃，攪拌反應4小時。反應完畢後，減壓濃縮除去溶劑，加入冰水 (50 mL) 溶解，用甲基三級丁基醚 (50 mL×2) 萃取，收集水相，用6 M鹽酸調節pH=7，水相減壓濃縮得到化合物WX015-3。MS-ESI
m/z: 404.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, D
2O) δ: 7.78 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.60 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.19 (t,
J=7.8 Hz, 1H), 5.17 (s, 1H), 3.58-3.45 (m, 4H), 3.27 (s, 2H), 2.62-2.50 (m, 4H), 1.42 (s, 9H).
步驟3：化合物WX015-4的合成
室溫下，將化合物WX015-3 (4.2 g, 10.41 mmol) 溶於乙醇 (80 mL) 中，加入乙酸鈉 (3.42 g, 41.64 mmol) 和鹽酸羥胺 (2.53 g, 36.44 mmol)，反應混合物升溫至80℃，攪拌反應5小時。反應完畢後，反應液冷卻至室溫，過濾，濾餅用二氯甲烷 (50 mL×2) 淋洗，濾液濃縮除去大部分溶劑，加入水 (100 mL)，用二氯甲烷 (50 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (100 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到化合物WX015-4。MS-ESI
m/z: 419.1 [M+H]
+.
步驟4：化合物WX015-5的合成
30℃下，將化合物WX015-4 (2.5 g, 5.97 mmol) 溶於二氯甲烷 (40 mL) 中，加入4-二甲氨基吡啶 (1.09 g, 8.96 mmol) 和碳酸二三級丁酯 (2 g, 9.16 mmol, 2.11 mL)，反應混合物在30℃下攪拌反應1.5小時後，加入無水乙醇 (2.75 g, 59.75 mmol)，繼續反應1小時。反應完畢後，倒入水 (50 mL) 中，分液，水相再次用二氯甲烷 (30 mL) 萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到粗品。所得粗品經柱層析 (洗脫劑：乙酸乙酯/石油醚=1/5) 分離純化，得到化合物WX015-5。MS-ESI
m/z: 447.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 9.79 (s, 1H), 8.46 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.41 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.32 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 4.22 (q,
J=7.0 Hz, 2H), 4.04 (s, 2H), 3.63-3.54 (m, 4H), 3.26 (s, 2H), 2.69-2.58 (m, 4H), 1.48 (s, 9H), 1.26 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟5：化合物WX015-6的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX015-5 (0.92 g, 2.06 mmol) 和丙烯醯胺 (175.75 mg, 2.47 mmol) 溶於四氫呋喃 (20 mL) 中，冷卻至0℃，滴加三級丁醇鉀的四氫呋喃溶液 (1 M, 3.09 mL)，反應混合物在0℃下攪拌反應1.5小時。反應完畢後，向反應液中加入0.05 M鹽酸 (70 mL) 中，用乙酸乙酯 (40 mL×2) 萃取，合併有機相。用飽和食鹽水 (40 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到粗品。所得粗品經柱層析純化 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=5/1-1/1)，得到化合物WX015-6。MS-ESI
m/z: 472.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 9.83 (s, 1H), 8.49 (d,
J=6.4 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.42 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.35 (t,
J=7.8 Hz, 1H), 4.34 (dd,
J=5.0 Hz, 9.0 Hz, 1H), 3.66-3.52 (m, 4H), 3.27 (s, 2H), 3.06-2.95 (m, 1H), 2.83-2.73 (m, 1H), 2.71-2.56 (m, 5H), 2.53-2.43 (m, 1H), 1.49 (s, 9H).
步驟6：化合物WX015-7的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX015-6 (530 mg, 1.12 mmol) 溶於乙酸乙酯 (1 mL) 中，加入鹽酸/乙酸乙酯溶液 (4 M, 30 mL)，反應混合物室溫下攪拌反應3小時。反應完畢後，減壓濃縮除去溶劑得到化合物WX015-7的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 372.1 [M+H]
+.
步驟7：化合物WX015的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2 (654.51 mg, 1.35 mmol) 和化合物WX015-7的鹽酸鹽 (599 mg) 溶於1, 2-二氯乙烷 (18 mL) 和四氫呋喃 (9 mL) 中，加入醋酸鉀 (291.08 mg, 2.97 mmol) 和醋酸 (0.5 mL)，反應混合物室溫下攪拌反應1小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (857.19 mg, 4.04 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應1.5小時。反應完畢後，加入1 M鹽酸溶液 (10 mL)，減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex Luna 80*40 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%: 22%-37%，7 min)，得到目標化合物WX015的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 841.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.50 (s, 1H), 11.12 (s, 2H), 9.50 (d,
J=6.0 Hz, 1H), 8.78 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.40 (d,
J=3.6 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.02 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.68 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.40 (t,
J=7.8 Hz, 1H), 7.27-6.95 (m, 1H), 6.90-6.41 (m, 1H), 5.27 (s, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.76 (d,
J=18.8 Hz, 1H), 4.65 (dd,
J=4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 4.50-4.15 (m, 3H), 3.90-3.69 (m, 8H), 3.67-3.55 (m, 2H), 3.54-3.37 (m, 2H), 3.19-3.03 (m, 2H), 2.85-2.72 (m, 1H), 2.69-2.53 (m, 2H), 2.28-2.16 (m, 1H), 2.14-2.03 (m, 4H), 2.02-1.87 (m, 2H), 1.85-1.69 (m, 2H), 1.30-1.10 (m, 2H).
步驟8：化合物WX015-8的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2-4 (80 g, 164.10 mmol) 溶於二氯甲烷 (1.6 L) 中，加入三苯基膦 (51.65 g, 196.92 mmol) 和咪唑 (16.76 g, 246.15 mmol)，反應混合物冷卻至0℃，加入單質碘 (54.15 g, 213.33 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應14小時。反應完畢後，將反應液倒入飽和亞硫酸鈉水溶液 (600 mL)中，室溫下攪拌至溶液呈無色，過濾，濾餅用二氯甲烷 (500 mL×3) 淋洗，母液分液，收集有機相。有機相用飽和食鹽水 (500 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。向殘餘物中加入甲醇 (500 mL)，室溫下攪拌1小時，過濾，濾餅用甲醇 (500 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX015-8。MS-ESI
m/z: 598.0 [M+H]
+.
步驟9：化合物WX015的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX015-6 (3 g, 6.36 mmol) 溶於二氯甲烷 (30 mL) 中，加入三氟乙酸 (9.24 g, 81.04 mmol, 6 mL)，反應混合物室溫下攪拌反應4小時。反應完成後，減壓濃縮除去溶劑，得到化合物WX015-7的三氟乙酸鹽。MS-ESI
m/z: 372.0 [M+H]
+.
室溫和氮氣保護下，將化合物WX015-7的三氟乙酸鹽 (253.65 g, 310.81 mmol) 溶於乙腈 (3.4 L) 中，加入N,N–二異丙基乙胺 (281.19 g, 2.18 mol) 和化合物WX015-8 (168.8 g, 282.56 mmol)，反應混合物加熱至80℃並攪拌反應23小時。反應結束後，將反應液倒入丙酮 (4.3 L) 中，室溫攪拌12小時。過濾，濾餅用丙酮 (400 mLx4) 淋洗，收集濾餅。將濾餅溶於二氯甲烷 (1.5 L) 中，減壓濃縮除去溶劑，重複溶解濃縮操作兩次得到化合物WX015。MS-ESI
m/z: 841.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.12 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 9.50 (d,
J=6.0 Hz, 1H), 8.77 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.39 (d,
J=4.4 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.10 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.59 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.36 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 7.27-6.94 (m, 1H), 6.88-6.41 (m, 1H), 5.17 (d,
J=84.4 Hz, 1H), 4.76 (d,
J=15.6 Hz, 1H), 4.63 (dd,
J=4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 4.24-4.11 (m, 1H), 3.86-3.71 (m, 2H), 3.66-3.40 (m, 2H), 3.36-3.20 (m, 6H), 2.84-2.72 (m, 1H), 2.69-2.53 (m, 5H), 2.48-2.41 (m, 2H), 2.27-2.10 (m, 3H), 2.09-1.85 (m, 6H), 1.82-1.68 (m, 2H), 1.13-0.97 (m, 2H).
實施例16
合成路線：
步驟1：化合物WX016-2的合成
室溫和氮氣保護下，將二氯二茂鈦 (1.30 g, 5.02 mmol) 和鋅粉 (13.31 g, 203.55 mmol) 加入到乾燥的反應瓶中，加入四氫呋喃 (100 mL) 溶解，滴加二氟溴乙酸乙酯 (20.37 g, 100.38 mmol, 12.90 mL) 的四氫呋喃 (20 mL) 溶液 (先滴加1/10的溶液，引發反應後 (明顯升溫) 再滴加剩餘溶液)。滴加完畢後，繼續攪拌0.5小時，過濾，濾液加入到化合物WX016-1 (10 g, 50.19 mmol) 的四氫呋喃 (50 mL) 溶液中，攪拌反應12小時。反應完畢後，滴加1 M鹽酸調節pH=3，加入乙酸乙酯 (100 mL) 和水 (100 mL) 稀釋，分液，收集有機相，水相用乙酸乙酯 (50 mL×3) 萃取，合併有機相，用飽和食鹽水 (50 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=0/1-1/1，體積比)，得到化合物WX016-2。MS-ESI
m/z: 268.0 [M+H-56]
+.
步驟2：化合物WX016-3的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX016-2 (1 g, 3.09 mmol)，氯化亞碸 (2.21 g, 18.56 mmol) 和吡啶 (1.47 g, 18.56 mmol) 加入二㗁烷 (15 mL) 中，反應混合物攪拌1.5小時，然後加入4-二甲氨基吡啶 (37.78 mg, 309.28 μmol)，繼續攪拌反應12小時。反應完成後，向反應液中加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (30 mL×3) 萃取，有機相用飽和食鹽水 (20 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=20/1-9/1，體積比)，得到化合物WX016-3。MS-ESI
m/z: 206.2 [M+H-100]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 6.18 (s, 1H), 4.34 (q,
J=7.0 Hz, 2H), 4.02 (d,
J=2.0 Hz, 2H), 3.54 (t,
J=5.6 Hz, 2H), 2.25 (s, 2H), 1.48 (s, 9H), 1.36 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟3：化合物WX016-4的合成
室溫和氮氣保護下，將濕氫氧化鈀 (0.5 g, 712.07 μmol, 純度: 20%) 加入氫化瓶中，然後加入甲醇 (20 mL) 和化合物WX016-3 (1.5 g, 4.91 mmol)，氫氣置換三次，反應混合物在40 psi下攪拌反應12小時。反應完畢後，過濾，用甲醇 (50 mL×4) 淋洗濾餅，收集濾液，濾液減壓濃縮除去殘餘溶劑。所得殘餘物經過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=20/1-10/1，體積比)，得到化合物WX016-4。MS-ESI
m/z: 252.2 [M+H-56]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 4.35 (q,
J=7.0 Hz, 2H), 4.30-4.15 (m, 2H), 2.68 (t,
J=12.8 Hz, 2H), 2.32-2.14 (m, 1H), 1.73 (d,
J=12.8 Hz, 2H), 1.49 (d,
J=4.8 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.42 (d,
J=4.4 Hz, 1H), 1.37 (t,
J=7.0 Hz, 3H).
步驟4：化合物WX016-5的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX016-4 (0.26 g, 845.99 μmol) 溶於乙醇 (5 mL) 和水 (2 mL) 的混合溶劑中，加入一水合氫氧化鋰 (71.00 mg, 1.69 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，減壓濃縮，殘餘物用1 M鹽酸調節pH=2-3，有固體析出。過濾，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX016-5。MS-ESI
m/z: 224.0 [M+H-56]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 4.05-3.94 (m, 2H), 2.80-2.63 (m, 3H), 2.37-2.21 (m, 1H), 1.71-1.61 (m, 2H), 1.39 (s, 9H), 1.27-1.12 (m, 2H).
步驟5：化合物WX016-6的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX016-5 (0.12 g, 429.68 μmol) 溶於N,N-二甲基甲醯胺 (5 mL) 中，加入2-(7-氮雜苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (272.29 mg, 716.13 μmol) 和N,N-二異丙基乙胺 (277.66 mg, 2.15 mmol, 374.20 μL)，反應混合物攪拌反應0.5小時，然後加入化合物BB-8的鹽酸鹽 (91.56 mg)，繼續攪拌反應12小時。反應完畢後，向反應液中加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (30 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (20 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去殘餘溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=5/1-2/1，體積比)，得到化合物WX016-6。MS-ESI
m/z: 425.2 [M+H-56]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.45 (s, 1H), 8.16 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.41 (dd,
J=1.0, 7.8 Hz, 1H), 4.25-4.17 (m, 3H), 3.71 (d,
J=0.8 Hz, 2H), 2.72 (t,
J=12.2 Hz, 2H), 2.57-2.42 (m, 1H), 1.84 (d,
J=12.8 Hz, 2H), 1.59-1.49 (m, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.28 (t,
J=7.0 Hz, 3H).
步驟6：化合物WX016-7的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX016-6 (110 mg, 228.93 μmol) 溶於四氫呋喃 (3 mL) 中，加入丙烯醯胺 (19.53 mg, 274.71 μmol)，反應混合物冰浴降溫至0℃，滴加三級丁醇鉀的四氫呋喃溶液 (1 M, 503.64 μL)，滴加完畢後恢復室溫攪拌1小時。反應完畢後，將反應液倒入0.1 M鹽酸 (10 mL) 中，用乙酸乙酯 (20 mL×2) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (20 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。向殘餘物中加入乙酸乙酯 (2 mL)，室溫下攪拌5分鐘，過濾，濾餅用乙酸乙酯 (2 mL×2) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥得到化合物WX016-7。MS-ESI
m/z: 406.2 [M+H-100]
+.
步驟7：化合物WX016-8的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX016-7 (70 mg, 138.47 μmol) 溶於乙酸乙酯 (1 mL) 中，加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (3 mL，4 M)，反應混合物室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，過濾，用乙酸乙酯 (3 mL×3) 淋洗濾餅，收集濾餅，真空乾燥得到化合物WX016-8的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 406.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ: 10.92 (s, 1H), 10.80 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.53 (dd,
J=1.4, 7.0 Hz, 1H), 7.34-7.22 (m, 2H), 4.17 (dd,
J=5.0, 12.2 Hz, 1H), 3.38 (d,
J=12.8 Hz, 2H), 2.97 (t,
J=12.0 Hz, 2H), 2.82-2.70 (m, 1H), 2.69-2.55 (m, 3H), 2.41-2.27 (m, 1H), 2.18-2.07 (m, 1H), 2.03-1.92 (m, 2H), 1.80-1.61 (m, 2H).
步驟8：化合物WX016的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX016-8的鹽酸鹽 (50 mg) 溶於1,2-二氯乙烷 (3 mL) 中，加入中間體BB-2 (54.94 mg, 113.16 μmol)，乙酸鉀 (33.32 mg, 339.48 μmol) 和冰乙酸 (3.40 mg, 56.58 μmol, 3.24 μL)，反應混合物室溫下攪拌2小時，然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (95.93 mg, 452.64 μmol)，繼續攪拌反應12小時。反應完畢後，向反應液中加入1 M鹽酸 (2 mL) 並攪拌5分鐘，減壓濃縮除去溶劑。殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm;流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%: 15%-40%, 8min)，得到目標化合物WX016的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 875.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ:
10.92 (s, 1H), 10.84 (s, 1H), 9.50 (d,
J=6.4 Hz, 2H), 8.79 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 8.41 (d,
J=3.6 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.53 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.38-6.94 (m, 3H), 6.91-6.36 (m, 1H), 5.36-5.04 (m, 1H), 4.77 (d,
J=20.8 Hz, 1H), 4.25-4.12 (m, 2H), 3.85-3.77 (m, 1H), 3.76-3.42 (m, 4H), 3.12-2.90 (m, 4H), 2.82-2.56 (m, 5H), 2.39-2.27 (m, 1H), 2.18-1.89 (m, 11H), 1.88-1.73 (m, 2H), 1.31-1.11 (m, 2H).
實施例17
合成路線：
步驟1：化合物WX017-1的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX016-5 (0.7 g, 2.51 mmol) 溶於N,N-二甲基甲醯胺 (10 mL) 中，加入2-(7-氮雜苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (1.19 g, 3.13 mmol) 和N,N-二異丙基乙胺 (809.85 mg, 6.27 mmol, 1.09 mL)，反應混合物室溫下攪拌0.5小時，然後加入化合物WX015-1 (315.73 mg, 2.09 mmol)，繼續攪拌反應12小時。反應完畢後，向反應液中加入水 (60 mL)，用乙酸乙酯 (100 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (100 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=10/1-5/1，體積比)，得到化合物WX017-1。MS-ESI
m/z: 313.1 [M+H-100]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 12.94 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.59 (dd,
J=0.8, 8.0 Hz, 1H), 7.57 (dd,
J=1.4, 8.2 Hz, 1H), 6.98 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 4.29-4.17 (m, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.53-2.40 (m, 1H), 1.81 (d,
J=12.4 Hz, 2H), 1.59-1.55 (m, 2H), 1.53-1.48 (m, 2H), 1.46 (s, 9H).
步驟2：化合物WX017-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX017-1 (0.67 g, 1.62 mmol) 溶於四氫呋喃 (20 mL) 中，加入碳酸二甲酯 (585.34 mg, 6.50 mmol)，反應混合物冰浴降溫至0℃，緩慢加入三級丁醇鉀 (1.09 g, 9.75 mmol)，然後加熱至80℃攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑得到化合物WX017-2。MS-ESI
m/z: 339.2 [M+H-100]
+.
步驟3：化合物WX017-3的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX017-2 (0.72 g, 1.64 mmol) 溶於乙醇 (10 mL) 中，加入鹽酸羥胺 (399.43 mg, 5.75 mmol)，反應混合物加熱至80℃攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，過濾。濾液減壓濃縮除去大部分乙醇，加入水 (10 mL), 用碳酸氫鈉水溶液調節pH=6，用二氯甲烷/乙醇=10/1（30 mL×5）萃取，有機相用飽和食鹽水 (30 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到化合物WX017-3。MS-ESI
m/z: 354.1 [M+H-100]
+.
步驟4：化合物WX017-4的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX017-3 (0.78 g, 1.63 mmol) 溶於乙醇 (10 mL) 中，加入濃硫酸(326.66 mg, 3.26 mmol)，反應混合物加熱至90℃攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (30 mL)，用乙酸乙酯 (50 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (50 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去殘餘溶劑。將殘餘物溶於四氫呋喃 (5 mL) 和水 (5 mL) 中，加入碳酸鈉 (344.86 mg, 3.25 mmol) 和碳酸二三級丁酯 (355.06 mg, 1.63 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，加入水 (30 mL)，用乙酸乙酯 (50 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (50 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去殘餘溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=3/1-2/1，體積比)，得到化合物WX017-4。MS-ESI
m/z: 382.1 [M+H-100]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.47 (s, 1H), 8.42 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.53 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.37 (t,
J=7.8 Hz, 1H), 4.27-4.19 (m, 3H), 4.06 (s, 2H), 2.79-2.66 (m, 2H), 2.56-2.46 (m, 1H), 1.83 (d,
J=12.4 Hz, 2H), 1.59-1.50 (m, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.27 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟6：化合物WX017-5的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX017-4 (450 mg, 934.60 μmol) 和丙烯醯胺 (79.72 mg, 1.12 mmol) 溶於四氫呋喃 (5 mL) 中，反應混合物冰浴降溫至0℃，滴加三級丁醇鉀的四氫呋喃溶液 (1 M, 1.87 mL)，反應混合物在0℃下攪拌反應1小時。反應完畢後，將反應液倒入0.3 M鹽酸 (10 mL) 中，用乙酸乙酯 (20 mL×3) 萃取，有機相用飽和食鹽水 (20 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=5/1-1/1，體積比)，得到化合物WX017-5。MS-ESI
m/z: 407.1 [M+H-100]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ:
11.12 (s, 1H), 10.99 (s, 1H), 7.79 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.61 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.41 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 4.64 (dd,
J=4.8, 12.0 Hz, 1H), 4.11-4.06 (m, 1H), 2.86-2.71 (m, 3H), 2.68-2.53 (m, 3H), 2.27-2.15 (m, 1H), 1.81 (d,
J=12.4 Hz, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.38-1.32 (m, 2H).
步驟7：化合物WX017-6的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX017-5 (290 mg, 572.56 μmol) 溶於乙酸乙酯 (1 mL) 中，加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (3 mL，4 M)，反應混合物室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，過濾，用乙酸乙酯 (3 mL×3) 淋洗濾餅，收集濾餅，真空乾燥得到化合物WX017-6的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 407.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ: 11.13 (s, 1H), 11.09 (s, 1H), 8.74 (s, 2H), 7.80 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.62 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 7.42 (t,
J=7.8 Hz, 1H), 4.65 (dd,
J=4.8, 12.0 Hz, 1H), 3.38 (d,
J=11.6 Hz, 2H), 2.97 (t,
J=12.6 Hz, 2H), 2.85-2.71 (m, 2H), 2.70-2.53 (m, 3H), 2.26-2.16 (m, 1H), 1.96 (d,
J=14.0 Hz, 2H), 1.83-1.64 (m, 2H).
步驟8：化合物WX017的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX017-6的鹽酸鹽 (0.1 g) 溶於1,2-二氯乙烷 (3 mL) 和四氫呋喃 (2 mL) 中，加入中間體BB-2 (101.29 mg, 208.64 μmol)，乙酸鉀 (61.43 mg, 625.91 μmol) 和冰乙酸 (6.26 mg, 104.32 μmol, 5.97 μL)，反應混合物室溫下攪拌2小時，然後加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (176.87 mg, 834.54 μmol)，繼續攪拌1小時。反應完畢後，加入1 M鹽酸 (2 mL) 並攪拌5分鐘，減壓濃縮除去溶劑。殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱: Phenomenex C18 75*30 mm*3 μm; 流動相: 水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%: 12%-42%, 8 min)，得到目標化合物WX017的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 876.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ:
11.13 (s, 2H), 9.51 (d,
J=6.8 Hz, 1H), 9.32 (s, 1H), 8.79 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.43-8.20 (m, 1H), 7.81 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.64 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.43 (t,
J=7.8 Hz, 1H), 7.31-6.94 (m, 1H), 6.91-6.41 (m, 1H), 5.30-5.03 (m, 1H), 4.77 (d,
J=21.6 Hz, 1H), 4.65 (dd,
J=5.0, 12.2 Hz, 1H), 4.32-4.16 (m, 2H), 3.85-3.57 (m, 6H), 3.14-2.94 (m, 4H), 2.84-2.74 (m, 2H), 2.69-2.58 (m, 3H), 2.27-2.17 (m, 1H), 2.14-1.89 (m, 10H), 1.87-1.74 (m, 2H), 1.32-1.08 (m, 2H).
實施例18
合成路線：
步驟1：化合物WX018-1的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2-1 (1.10 g, 4.88 mmol) 溶於乙腈 (10 mL) 中，加入8-氧雜-3-氮雜二環[3.2.1]辛烷 (0.95 g, 6.35 mmol, 鹽酸鹽) 和N,N-二異丙基乙胺 (1.89 g, 14.65 mmol, 2.55 mL)，反應混合物加熱至60℃攪拌反應2小時。反應完畢後，減壓濃縮除去溶劑，向所得殘餘物中加入水 (20 mL)，混合物室溫下攪拌1小時，有固體析出，過濾，濾餅用水 (20 mL×4) 洗滌，收集濾餅，真空乾燥得到化合物WX018-1。MS-ESI
m/z: 303.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.35-8.25 (m, 2H), 6.36 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 4.53 (s, 2H), 4.35 (q,
J=7.4 Hz, 2H), 4.23-3.71 (m, 1H), 3.35 (d,
J=12.4 Hz, 2H), 2.00 (t,
J=4.6 Hz, 2H), 1.83 (d,
J=7.6 Hz, 2H), 1.70 (s, 1H), 1.39 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟2：化合物WX018-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX018-1 (1.4 g, 4.63 mmol) 溶於甲醇 (15 mL) 和水 (3 mL) 中，加入一水合氫氧化鋰 (388.61 mg, 9.26 mmol)，反應混合物加熱至60℃攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去甲醇，加入1M鹽酸調節pH=3~4，有大量白色固體析出，過濾，用水 (10 mL×2) 淋洗濾餅，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX018-2。MS-ESI
m/z: 275.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ:
11.70 (s, 1H), 8.73 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 6.76 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 4.47 (d,
J=2.0 Hz, 2H), 4.30-3.90 (m, 2H), 3.15 (d,
J=12.4 Hz, 2H), 1.89-1.80 (m, 2H), 1.73-1.65 (m, 2H).
步驟3：化合物WX018-3的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX018-2 (0.2 g, 729.20 μmol) 溶於乙腈 (4 mL) 中，加入N,N,N,N-四甲基氯甲脒六氟磷酸鹽 (245.52 mg, 875.04 μmol) 和N-甲基咪唑 (209.54 mg, 2.55 mmol, 203.44 μL)，攪拌0.5小時，加入化合物BB-1 (178.85 mg, 729.20 μmol)，反應混合物繼續攪拌2小時。反應完畢後，過濾，用乙腈 (3 mL×3) 淋洗濾餅，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX018-3。MS-ESI
m/z: 502.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ:
9.41 (s, 1H), 8.81 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.27-6.95 (m, 1H), 6.82 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 4.45 (s, 3H), 4.25-4.10 (m, 2H), 3.25 (d,
J=6.0 Hz, 2H), 3.23-3.10 (m, 2H), 2.10-1.99 (m, 2H), 1.93-1.81 (m, 4H), 1.80-1.65 (m, 4H), 1.52-1.35 (m, 1H), 1.16-1.10 (m, 2H).
步驟4：化合物WX018-4的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX018-3 (320 mg, 638.05 μmol) 溶於二氯甲烷 (6 mL) 中，加入三苯基膦 (200.82 mg, 765.66 μmol) 和咪唑 (65.16 mg, 957.08 μmol)，反應混合物冰浴降溫至0℃，加入單質碘 (210.52 mg, 829.47 μmol)，然後恢復室溫攪拌12小時。反應完畢後，將反應液倒入飽和亞硫酸鈉水溶液 (30 mL) 中，用二氯甲烷 (50 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (50 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=3/1-0/1，體積比)，得到化合物WX018-4。MS-ESI
m/z: 612.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 9.52 (s, 1H), 8.43 (d,
J=9.6 Hz, 2H), 8.34 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 6.77 (t,
J=54.2 Hz, 1H), 6.37 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 4.56 (d,
J=2.4 Hz, 2H), 4.11-4.00 (m, 1H), 3.45-3.32 (m, 2H), 3.17 (d,
J=6.0 Hz, 2H), 2.27-2.18 (m, 2H), 2.14-2.01 (m, 4H), 1.92-1.79 (m, 4H), 1.67-1.50 (m, 2H), 1.31-1.16 (m, 3H).
步驟5：化合物WX018的甲酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX015-7的三氟乙酸鹽 (268.38 mg) 溶於乙腈 (4 mL) 中，加入N,N–二異丙基乙胺 (340.32 mg, 2.63 mmol, 458.66 μL)，攪拌5分鐘，加入化合物WX018-4 (0.23 g, 376.17 μmol)，反應混合物加熱至90℃並攪拌反應12小時。反應結束後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去乙腈，加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (30 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (30 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱: Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm; 流動相: 水(0.2%甲酸)-乙腈; 乙腈%: 15%-40%, 8 min)，得到目標化合物WX018的甲酸鹽。MS-ESI
m/z: 855.5 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ:
11.12 (s, 1H), 10.02 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 8.81 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.10 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.59 (dd,
J=0.8, 8.0 Hz, 1H), 7.36 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 7.10 (t,
J=53.8 Hz, 1H), 6.82 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 4.62 (dd,
J=4.8, 11.6 Hz, 1H), 4.45 (s, 2H), 4.27-4.10 (m, 2H), 3.45-3.28 (m, 3H), 3.22-3.14 (m, 1H), 2.86-2.72 (m, 2H), 2.69-2.52 (m, 7H), 2.48-2.41 (m, 2H), 2.27-2.13 (m, 3H), 2.11-1.99 (m, 2H), 1.97-1.83 (m, 4H), 1.82-1.68 (m, 4H), 1.66-1.53 (m, 1H), 1.16-0.93 (m, 2H).
實施例19
合成路線：
步驟1：化合物WX019-1的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2-1 (1.06 g, 4.71 mmol) 溶於乙腈 (10 mL) 中，加入3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸三級丁酯 (1 g, 4.71 mmol) 和N,N-二異丙基乙胺 (1.83 g, 14.13 mmol, 2.46 mL)，反應混合物加熱至60℃並攪拌反應3小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑。向所得殘餘物中加入水 (20 mL)，室溫下攪拌1小時，有固體析出，過濾，濾餅用水 (20 mL×4) 洗滌，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX019-1。MS-ESI
m/z: 402.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.35-8.25 (m, 2H), 6.39 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 4.55-4.30 (m, 5H), 3.46-3.19 (m, 2H), 2.07-1.93 (m, 2H), 1.83-1.70 (m, 2H), 1.69-1.62 (m, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.40 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟2：化合物WX019-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX019-1 (1.35 g, 3.36 mmol) 溶於甲醇 (10 mL) 和水 (2 mL) 中，加入一水合氫氧化鋰 (282.23 mg, 6.73 mmol)，反應混合物加熱至60℃並攪拌反應2小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去甲醇，加入1M鹽酸調節pH=3~4，有大量白色固體析出，過濾，用水 (10 mL×2) 淋洗濾餅，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX019-2。MS-ESI
m/z: 374.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ:
11.72 (s, 1H), 8.74 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 6.79 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 4.35-4.18 (m, 3H), 3.41-3.25 (m, 3H), 1.93-1.79 (m, 2H), 1.68-1.57 (m, 2H), 1.43 (s, 9H).
步驟3：化合物WX019-3的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX019-2 (0.4 g, 1.07 mmol) 溶於乙腈 (4 mL) 中，加入N,N,N,N-四甲基氯甲脒六氟磷酸鹽 (360.67 mg, 1.29 mmol) 和N-甲基咪唑 (307.83 mg, 3.75 mmol, 298.86 μL)，攪拌0.5小時，加入化合物BB-1 (262.74 mg, 1.07 mmol)，繼續攪拌反應1小時。反應完畢後，過濾，用乙腈 (3 mL×3) 淋洗濾餅，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX019-3。MS-ESI
m/z: 601.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ: 9.41 (s, 1H), 8.83 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.14 (t,
J=53.8 Hz, 1H), 6.84 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 4.64-4.33 (m, 2H), 4.30-4.13 (m, 3H), 3.76 (s, 1H), 3.53-2.96 (m, 5H), 2.10-2.00 (m, 2H), 1.95-1.81 (m, 4H), 1.80-1.62 (m, 4H), 1.44 (s, 9H), 1.18-1.02 (m, 2H).
步驟4：化合物WX019-4的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX019-3 (590 mg, 982.26 μmol) 溶於二氯甲烷 (10 mL) 中，加入三苯基膦 (309.16 mg, 1.18 mmol) 和咪唑 (100.31 mg, 1.47 mmol)，反應混合物冷卻至0℃，加入單質碘 (324.10 mg, 1.28 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，將反應液倒入飽和亞硫酸鈉水溶液 (30 mL) 中，用二氯甲烷 (50 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (50 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=3/1-0/1，體積比)，得到化合物WX019-4。MS-ESI
m/z: 711.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 9.52 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.35 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 6.78 (t,
J=54.2 Hz, 1H), 6.40 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 4.53-4.36 (m, 2H), 4.11-4.01 (m, 1H), 3.45-3.23 (m, 2H), 3.17 (d,
J=6.0 Hz, 2H), 2.27-2.18 (m, 2H), 2.14-2.06 (m, 2H), 2.05-1.99 (m, 2H), 1.92-1.79 (m, 2H), 1.78-1.71 (m, 2H), 1.63-1.54 (m, 2H), 1.51 (s, 9H), 1.31-1.16 (m, 3H).
步驟5：化合物WX019-5的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX015-7的三氟乙酸鹽 (291.18 mg) 溶於乙腈 (3 mL) 中，加入N,N–二異丙基乙胺 (369.24 mg, 2.86 mmol)，反應混合物攪拌5分鐘，加入化合物WX019-4 (290 mg, 408.13 μmol)，反應混合物加熱至90℃並攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去乙腈，加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (30 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (30 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：二氯甲烷/甲醇=5/1-1/1，體積比)，得到化合物WX019-5。MS-ESI
m/z: 954.4 [M+H]
+.
步驟6：化合物WX019的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX019-5 (0.3 g, 314.45 μmol) 溶於乙酸乙酯 (2 mL) 中，加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (8 mL, 4 M)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，過濾，用乙酸乙酯 (3 mL×3) 淋洗濾餅，收集濾餅。濾餅經製備HPLC分離 (色譜柱: Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm; 流動相: 水(0.04%鹽酸)-乙腈]; 乙腈%: 1%-30%, 8 min)，得到目標化合物WX019的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 854.4 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ:
11.12 (s, 1H), 10.69 (s, 1H), 9.83 (d,
J=10.0 Hz, 1H), 9.64 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.92 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.01 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 7.66 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.39 (t,
J=7.8 Hz, 1H), 7.14 (t,
J=53.6 Hz, 1H), 6.91 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 4.64 (dd,
J=4.8, 12.0 Hz, 1H), 4.31-4.20 (m, 2H), 4.14 (s, 2H), 4.03-3.86 (m, 2H), 3.76-3.66 (m, 3H), 3.49-3.19 (m, 8H), 3.13-2.97 (m, 2H), 2.85-2.72 (m, 1H), 2.69-2.63 (m, 1H), 2.62-2.53 (m, 1H), 2.27-2.16 (m, 1H), 2.13-1.73 (m, 11H), 1.32-1.09 (m, 2H).
實施例20
合成路線：
步驟1：化合物WX020-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX020-1 (32.88 g, 176.53 mmol) 和N,N-二異丙基乙胺 (43.46 g, 336.25 mmol) 溶於乙腈 (250 mL) 中，滴加溴丙炔 (25 g, 168.12 mmol, 純度: 80%)，反應混合物室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，向反應液中加入飽和氯化銨 (500 mL)，用乙酸乙酯 (200 mL×3) 萃取。合併有機相，依次用飽和氯化銨 (200 mL×2) 和飽和食鹽水 (200 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑，得到化合物WX020-2。MS-ESI
m/z: 225.0 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 3.47 (t,
J=5.0 Hz, 4H), 3.32 (d,
J=2.4 Hz, 2H), 2.51 (t,
J=5.0 Hz, 4H), 2.26 (t,
J=2.4 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H).
步驟2：化合物WX020-5的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX020-4 (50 g, 232.51 mmol) 和碳酸二甲酯 (83.78 g, 930.04 mmol) 溶於四氫呋喃 (1.5 L) 中，加入三級丁醇鉀 (156.54 g, 1.40 mol)，反應混合物加熱至70℃並攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑，加入冰水 (1000 mL)，用6 M鹽酸調節pH=2~3，析出白色固體，過濾，濾餅用水 (100 mL×2) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX020-5。MS-ESI
m/z: 240.9 [M+H]
+, 243.7 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 12.80 (s, 1H), 7.92 (dd,
J=1.4, 7.8 Hz, 1H), 7.81 (dd,
J=1.4, 7.8 Hz, 1H), 7.27 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 5.65 (s, 1H).
步驟3：化合物WX020-6的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX020-5 (15 g, 62.23 mmol)，化合物WX020-2 (27.92 g, 124.46 mmol)，碘化亞銅 (1.19 g, 6.22 mmol)，二氯雙(三苯基膦)鈀(II) (4.37 g, 6.22 mmol) 和三乙胺 (25.19 g, 248.92 mmol) 溶於N,N-二甲基甲醯胺 (300 mL) 中，反應混合物加熱至80℃並攪拌反應3小時。反應完畢後，冷卻至0-10℃，倒入冰水 (1.2 L) 中，用1 M鹽酸調節pH=5~6，用乙酸乙酯 (300 mL×3) 萃取，收集水相，水相減壓濃縮得到化合物WX020-6。MS-ESI
m/z: 385.1 [M+H]
+.
步驟4：化合物WX020-7的合成
室溫和氬氣保護下，將氫氧化鈀/碳 (7 g, 24.92 mmol，純度: 20%) 和鈀/碳 (7 g, 13.01 mmol，純度: 10%) 懸浮於甲醇 (700 mL) 中，加入化合物WX020-6 (35 g, 91.05 mmol)，氫氣置換三次，控制氫氣壓力30 psi，反應混合物室溫下攪拌反應16小時。反應完畢後，過濾，用甲醇 (200 mL×5) 淋洗濾餅，濾液減壓濃縮除去溶劑。向所得粗品中加入二氯甲烷 (50 mL) 和水 (300 mL)，析出固體，過濾，濾餅用水 (30 mL×3) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX020-7。MS-ESI
m/z: 389.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 10.21 (s, 1H), 7.71 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.56 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 7.29 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 5.71 (s, 1H), 4.10-3.65 (m, 2H), 3.50-3.20 (m, 6H), 3.16-3.10 (m, 2H), 2.82 (t,
J=7.6 Hz, 2H), 2.13-1.99 (m, 2H), 1.40 (s, 9H).
步驟5：化合物WX020-8的合成
室溫和氬氣保護下，將化合物WX020-7 (4.40 g, 11.33 mmol) 溶於乙醇 (50 mL) 中，加入鹽酸羥胺 (2.75 g, 39.64 mmol) 和乙酸鈉 (3.25 g, 39.64 mmol)，反應混合物加熱至80℃並攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (350 mL)，用甲基三級丁基醚 (100 mL×4) 萃取，收集水相；有機相，用5%碳酸氫鈉水溶液 (50 mL×3) 洗滌，有機相丟棄，收集水相；合併兩次水相，用1 M鹽酸調節pH=6~7，用二氯甲烷和甲醇的混合溶劑 (體積比：10:1, 100 mL×4) 萃取，有機相用飽和食鹽水 (50 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到化合物WX020-8。MS-ESI
m/z: 404.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 7.66 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.47 (d,
J=6.8 Hz, 1H), 7.31 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 4.07 (s, 2H), 3.49-3.39 (m, 4H), 2.91 (t,
J=7.6 Hz, 2H), 2.42-2.26 (m, 6H), 1.95-1.79 (m, 2H), 1.39 (s, 9H).
步驟6：化合物WX020-9的合成
室溫下，將化合物WX020-8 (1.3 g, 3.22 mmol) 溶于無水乙醇 (20 mL) 中，加入濃硫酸 (632.03 mg, 6.44 mmol)，反應混合物加熱至80℃攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑。將殘餘物溶於四氫呋喃 (17 mL) 和水 (8 mL) 中，分批加入碳酸氫鈉 (1.08 g, 12.89 mmol)，再加入二碳酸二三級丁酯 (773.60 mg, 3.54 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，加入水 (70 mL)，用乙酸乙酯 (30 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (30 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到殘餘物。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=2/1-0/1，體積比) 得到化合物WX020-9。MS-ESI
m/z: 432.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.54 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.35 (d,
J=6.8 Hz, 1H), 7.24 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 4.22 (q,
J=7.2 Hz, 2H), 4.04 (s, 2H), 3.51-3.35 (m, 4H), 2.99 (t,
J=7.6 Hz, 2H), 2.52-2.30 (m, 6H), 2.03-1.91 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.27 (t,
J=7.0 Hz, 3H).
步驟7：化合物WX020-10的合成
室溫和氬氣保護下，將丙烯醯胺 (59.30 mg, 834.25 μmol) 和化合物WX020-9 (0.3 g, 695.21 μmol) 溶于無水四氫呋喃 (6 mL) 中，冰浴降溫至0-5℃，滴加三級丁醇鉀的四氫呋喃溶液 (1 M, 1.04 mL)，滴加完畢後保溫攪拌反應1小時。反應完畢後，將反應液倒入0.1 M鹽酸 (10.43 mL) 中，用乙酸乙酯 (3 mL×3)萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (3 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/四氫呋喃=1/1/0-0/1/0-0/1/1，體積比)，得到化合物WX020-10。MS-ESI
m/z: 457.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.00 (s, 1H), 7.54 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.38 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 7.30-7.25 (m, 1H), 4.34 (dd,
J=5.2, 8.8 Hz, 1H), 3.52-3.35 (m, 4H), 3.10-2.95 (m, 3H), 2.83-2.71 (m, 1H), 2.69-2.56 (m, 1H), 2.53-2.30 (m, 7H), 2.04-1.90 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
步驟8：化合物WX020-11的三氟乙酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX020-10 (107 mg, 234.37 μmol) 溶於二氯甲烷 (3 mL) 中，加入三氟乙酸 (924.00 mg, 8.10 mmol)，反應混合物在室溫下攪拌反應1小時。反應完畢後，減壓濃縮除去溶劑，得到化合物WX020-11的三氟乙酸鹽。MS-ESI
m/z: 357.1 [M+H]
+.
步驟9：化合物WX020的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX020-11的三氟乙酸鹽 (143.24 mg) 溶於乙腈 (2 mL) 中，加入N,N-二異丙基乙胺 (199.04 mg, 1.54 mmol)，攪拌5分鐘，加入化合物WX015-8 (115 mg, 192.50 μmol)，反應混合物加熱至80℃攪拌並反應16小時。反應完畢後，冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱: Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm; 流動相: 水(0.04%鹽酸)-乙腈; 乙腈%: 1%-35%, 8 min，得到目標化合物WX020的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 826.6 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 12.24-11.82 (m, 1H), 11.76-11.36 (m, 1H), 11.10 (s, 1H), 9.50 (d,
J=6.4 Hz, 1H), 8.78 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.39 (d,
J=4.0 Hz, 1H), 8.25 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 7.73 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.55 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 7.35 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 7.27-6.94 (m, 1H), 6.91-6.40 (m, 1H), 5.17 (d,
J=78.8 Hz, 1H), 4.76 (d,
J=17.6 Hz, 1H), 4.62 (dd,
J=4.8, 12.0 Hz, 1H), 4.43-4.05 (m, 6H), 3.91-3.40 (m, 8H), 3.32-3.15 (m, 2H), 3.11-2.94 (m, 3H), 2.86-2.72 (m, 1H), 2.68-2.58 (m, 1H), 2.57-2.44 (m, 1H), 2.27-2.15 (m, 3H), 2.13-1.87 (m, 6H), 1.68-1.85 (m, 2H), 1.85-1.67 (m, 2H).
實施例21
合成路線：
步驟1：化合物WX021-1的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX003-1 (10 g, 49.69 mmol) 溶於二氯甲烷 (100 mL) 中，加入三乙胺 (10.06 g, 99.37 mmol, 13.83 mL)，冰浴冷卻至0℃，滴加甲烷磺醯氯 (7.25 g, 63.29 mmol)，攪拌反應2小時。反應完畢後，加入水 (100 mL)，用二氯甲烷 (100 mL×2) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (100 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到化合物WX021-1。
步驟2：化合物WX021-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物BB-1-5 (6.2 g, 38.02 mmol) 和碳酸鉀 (10.51 g, 76.04 mmol) 溶於N,N-二甲基甲醯胺 (120 mL) 中，加入將化合物WX021-1 (14.87 g, 53.22 mmol)，反應混合物加熱至80℃並攪拌反應15小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (700 mL)，用乙酸乙酯 (300 mL×2) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (500 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：乙酸乙酯/石油醚=1/5-1/3，體積比)，得到化合物WX021-2。MS-ESI
m/z: 247.1 [M+H-100]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.23 (s, 1H), 7.12 (t,
J=53.4 Hz, 1H), 4.42-4.22 (m, 3H), 2.99-2.80 (m, 2H), 2.26-2.14 (m, 2H), 2.00-1.86 (m, 2H), 1.49 (s, 9H).
步驟3：化合物WX021-3的合成
室溫和氬氣保護下，將化合物WX021-2 (3.58 g, 10.34 mmol) 溶於四氫呋喃 (90 mL) 中，加入鈀碳 (1 g, 純度: 10%)，氫氣置換三次，維持壓力15 psi攪拌反應15小時。反應完畢後，過濾，濾餅用甲醇 (50 mL×4) 淋洗，濾液減壓濃縮得到化合物WX021-3。MS-ESI
m/z: 261.0 [M+H-56]
+.
步驟4：化合物WX021-4的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2-3 (0.97 g, 3.73 mmol) 溶於乙腈 (20 mL) 中，加入四甲基氯代脲六氟磷酸酯 (1.25 g, 4.47 mmol) 和N-甲基咪唑 (1.07 g, 13.05 mmol)，攪拌10分鐘，加入化合物WX021-3 (1.30 g, 4.10 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應15小時。反應完畢後，減壓濃縮除去溶劑，加入飽和食鹽水 (50 mL)，用二氯甲烷 (20 mL×3) 萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/1-0/1，體積比)，得到化合物WX021-4。MS-ESI
m/z: 559.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 9.61 (s, 1H), 8.43 (d,
J=10.0 Hz, 2H), 8.31 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 6.77 (t,
J=54.4 Hz, 1H), 6.12 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 5.45 (s, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.33-4.17 (m, 3H), 4.03-3.94 (m, 2H), 3.62-3.46 (m, 2H), 2.98-2.83 (m, 2H), 2.17-2.07 (m, 3H), 2.03-1.90 (m, 3H), 1.49 (s, 9H).
步驟5：化合物WX021-5的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX021-4 (0.51 g, 913.03 μmol) 溶於乙酸乙酯 (2 mL) 中，加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 20.40 mL)，反應混合物室溫下攪拌反應15小時。反應完畢後，減壓濃縮，得到化合物WX021-5的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 459.1 [M+H]
+.
步驟6：化合物WX021-7的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX021-6 (200 g, 1.32 mol) 溶於乙醇 (1.5 L) 中，分批加入二碳酸二三級丁酯 (346.51 g, 1.59 mol)，反應混合物升溫至60℃並攪拌反應16小時。反應完畢後，將反應液冷卻至室溫，減壓濃縮除去溶劑。向殘餘物中加入異丙醇 (500 mL)，冷卻至0℃，攪拌1小時，過濾，濾餅用異丙醇 (200 mL) 淋洗，收集濾液。濾液減壓濃縮，得到化合物WX021-7。MS-ESI
m/z: 196.1 [M+H-56]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 12.60 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.90 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.66 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 6.94 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 2.66 (s, 3H), 1.46 (s, 9H).
步驟7：化合物WX021-8的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX021-7 (200 g, 795.93 mmol)、醋酸鈉 (97.94 g, 1.19 mol) 和鹽酸羥胺 (60.84 g, 875.53 mmol) 溶於甲醇 (1.2 L) 中，反應混合物在室溫下攪拌反應16小時。然後升溫至50℃反應1小時，補加鹽酸羥胺 (11.06 g, 159.19 mmol)，繼續攪拌反應1小時。反應完畢後，將反應液冷卻至室溫，加入水 (1.5 L) 和甲基三級丁基醚 (1.5 L)，攪拌5分鐘，分液，水相用甲基三級丁基醚 (500 mL×2) 萃取。合併有機相，用10%食鹽水 (500 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑，得到化合物WX021-8。MS-ESI
m/z: 211.1 [M+H-56]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 12.27 (s, 1H), 11.67 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.69 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 7.23 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 6.86 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 2.27 (s, 3H), 1.46 (s, 9H).
步驟8：化合物WX021-9的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX021-8 (100 g, 375.53 mmol) 和三乙胺 (49.40 g, 488.19 mmol) 溶於四氫呋喃 (1 L) 中，緩慢加入N,N'-羰基二咪唑 (66.98 g, 413.08 mmol)，反應混合物升溫至70℃並攪拌反應1小時。反應完畢後，將反應液冷卻至室溫，加入水 (1 L)，用甲基三級丁基醚和石油醚混合溶劑 (體積比1/1，500 mL×2) 萃取，有機相用10%食鹽水 (500 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑，得到化合物WX021-9。MS-ESI
m/z: 249.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.16 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 2.59 (s, 3H), 1.57 (s, 9H).
步驟9：化合物WX021-10的合成
室溫和氮氣保護下，將二異丙基氨基鋰 (2 M, 741.11 mL) 的四氫呋喃溶液冷卻至-68℃，逐滴加入碳酸二甲酯 (36.72 g, 407.61 mmol, 34.31 mL) 和化合物WX021-9 (92 g, 370.55 mmol) 的四氫呋喃 (920 mL) 溶液，約30分鐘滴加完畢，控制溫度在-50℃~-68℃攪拌反應30分鐘。反應完畢後，將反應液緩慢倒入飽和氯化銨 (1.5 L) 中，用乙酸乙酯 (500 mL×3) 萃取，有機相用飽和食鹽水 (500 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑，得到化合物WX021-10。MS-ESI
m/z: 307.1 [M+H]
+.
步驟10：化合物WX021-11的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX021-10 (10 g, 32.65 mmol) 和丙烯醯胺 (2.78 g, 39.18 mmol) 溶於四氫呋喃 (100 mL) 中，冰浴降溫至0-5℃，滴加三級丁醇鉀四氫呋喃溶液 (1 M, 48.97 mL)，滴加完畢後，保溫攪拌2小時。反應完畢後，將反應液倒入1 M鹽酸 (150 mL) 中，用乙酸乙酯 (150 mL×2) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (150 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到粗品。向粗品中加入甲基三級丁基醚 (150 mL)，混合物室溫下攪拌30分鐘，過濾，濾餅用甲基三級丁基醚 (50 mL) 淋洗，收集濾餅，真空乾燥，得到化合物WX021-11。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.10 (s, 1H), 9.55 (s, 1H), 7.69 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.54 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.30 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 4.60 (dd,
J=5.0, 11.8 Hz, 1H), 2.84-2.72 (m, 1H), 2.66-2.57 (m, 1H), 2.57-2.43 (m, 1H), 2.25-2.15 (m, 1H), 1.49 (s, 9H).
步驟11：化合物WX021-12的鹽酸鹽的合成
室溫下，將化合物WX021-11 (9.4 g, 27.22 mmol) 溶於乙酸乙酯 (50 mL) 中，加入鹽酸的乙酸乙酯溶液 (4 M, 150 mL)，反應混合物在室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，過濾，濾餅用乙酸乙酯 (20 mL) 淋洗，收集濾餅，得到化合物WX021-12的鹽酸鹽。
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.09 (s, 1H), 8.32 (s, 2H), 7.31 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.26-7.16 (m, 2H), 4.59 (dd,
J=4.8, 12.0 Hz, 1H), 2.83-2.71 (m, 1H), 2.65-2.56 (m, 1H), 2.55-2.42 (m, 1H), 2.25-2.15 (m, 1H).
步驟12：化合物WX021-13的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX021-12的鹽酸鹽 (300 mg) 溶于無水二氯甲烷 (6 mL) 中，冰浴冷卻至0-5℃，依次滴加三乙胺 (323.30 mg, 3.19 mmol) 和氯乙醯氯 (144.34 mg, 1.28 mmol)，保溫攪拌2小時，緩慢恢復至室溫並攪拌反應2小時。反應完畢後，加入水 (20 mL)，用二氯甲烷 (7 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到殘餘物。所得殘餘物和4-(二甲氧基甲基)哌啶 (185.60 mg, 1.17 mmol) 溶於乙腈 (6 mL) 中，加入碘化鈉 (139.78 mg, 932.50 μmol) 和N,N-二異丙基乙胺 (301.30 mg, 2.33 mmol)，反應混合物升溫至80℃並攪拌2小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (30 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：乙酸乙酯/二氯甲烷/甲醇=1/0/0-0/20/1，體積比)，得到化合物WX021-13。MS-ESI
m/z: 445.1 [M+H]
+.
步驟13：化合物WX021-14的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX021-13 (247 mg, 555.71 μmol) 溶於四氫呋喃 (4 mL) 中，加入硫酸 (2 M, 1 mL)，反應混合物升溫至70℃並攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (7 mL×2) 萃取，有機相丟棄。水相用飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH=7~8，用乙酸乙酯 (15 mL×5) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到化合物WX021-14。MS-ESI
m/z: 399.1 [M+H]
+ .
步驟14：化合物WX021的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX021-5的鹽酸鹽 (80 mg) 和化合物WX021-14 (64.40 mg, 161.64 μmol) 溶於1,2-二氯乙烷 (3 mL) 和四氫呋喃 (1 mL) 的混合溶劑中，加入乙酸鉀 (47.59 mg, 484.92 μmol) 和冰乙酸 (0.1 mL)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時，加入醋酸硼氫化鈉 (102.77 mg, 484.92 μmol)，繼續攪拌反應15小時。反應完畢後，向反應液中加入1 M鹽酸 (1 mL)，減壓濃縮除去有機溶劑，所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱: Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm; 流動相: 水(0.04%鹽酸)-乙腈; 乙腈%: 1%-30%, 8 min)，得到目標化合物WX021的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 841.6 [M+H]
+ . 1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.13 (s, 2H), 10.44 (s, 1H), 10.12 (s, 1H), 9.54 (d,
J=6.4 Hz, 1H), 8.80 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.46 (d,
J=3.2 Hz, 1H), 8.27 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.01 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.69 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.41 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 7.32-7.00 (m, 1H), 6.91-6.41 (m, 1H), 5.31-5.02 (m, 1H), 4.77 (d,
J=20.8 Hz, 1H), 4.65 (dd,
J=5.0, 12.2 Hz, 1H), 4.60-4.52 (m, 1H), 4.41-4.23 (m, 2H), 3.83-3.80 (m, 1H), 3.76-3.62 (m, 4H), 3.48-3.36 (m, 2H), 3.29-2.98 (m, 6H), 2.85-2.73 (m, 1H), 2.68-2.52 (m, 2H), 2.48-2.32 (m, 3H), 2.31-1.77 (m, 7H), 1.70-1.54 (m, 2H).
實施例22
合成路線：
步驟1：化合物WX022-1的合成
氮氣保護下，將化合物WX020-5 (15 g, 62.23 mmol) 溶於N,N-二甲基甲醯胺 (250 mL) 中，加入碘化亞銅 (1.19 g, 6.22 mmol)，二氯雙(三苯基膦)鈀 (4.37 g, 6.22 mmol) 和N,N-二異丙基乙胺 (32.17 g, 248.92 mmol)，反應混合物升溫到85℃，滴加化合物WX003-2 (59.57 g, 248.92 mmol) 的N,N-二甲基甲醯胺 (50 mL) 溶液，滴加用時2小時，滴加完成後繼續攪拌反應1小時。反應完畢後，冷卻至室溫，倒入水 (1000 mL) 中，用乙酸乙酯 (300 mL×3) 萃取，有機相丟棄。收集水相，用1 M鹽酸調節pH=5~6，用乙酸乙酯 (300 mL×2) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (500 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到化合物WX022-1。MS-ESI
m/z: 300.0 [M+H-100]
+.
步驟2：化合物WX022-2的合成
室溫和氬氣保護下，將鈀/碳 (5 g, 純度: 10%) 和氫氧化鈀/碳 (5 g, 純度: 20%) 加入甲醇 (400 mL) 中，加入化合物WX022-1 (30 g, 75.11 mmol)，氫氣球置換三次，反應混合物室溫下攪拌反應24小時。將該反應體系過濾，濾液中加入鈀/碳 (5 g, 純度: 10%) 和氫氧化鈀/碳 (5 g, 純度: 20%)，設置氫氣壓力30 psi，室溫下繼續攪拌反應24小時。反應完畢後，過濾，濾餅用甲醇 (50 mL×3) 淋洗，濾液減壓濃縮。殘餘物經反相柱純化 (色譜柱：DAC-150 luna, 流速：650 mL/min, 流動相：純水)，餾分用飽和碳酸氫鈉水溶液調節pH=7~8，減壓濃縮除去大部分有機溶劑，用二氯甲烷 (100 mL) 萃取，丟棄有機相。水相用1 M鹽酸調節pH=5~6，用二氯甲烷 (100 mL×2) 萃取，有機相用飽和食鹽水 (100 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到化合物WX022-2。MS-ESI
m/z: 304.1 [M+H-100]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 11.06 (s, 1H), 7.78 (dd,
J=1.4, 7.8 Hz, 1H), 7.44 (dd,
J=1.2, 7.6 Hz, 1H), 7.22 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 5.88 (s, 1H), 3.72-3.62 (m, 2H), 3.47 (t,
J=6.2 Hz, 2H), 3.44-3.36 (m, 1H), 3.18-3.03 (m, 2H), 2.94 (t,
J=7.4 Hz, 2H), 2.03-1.91 (m, 2H), 1.82-1.71 (m, 2H), 1.54-1.41 (m, 11H).
步驟3：化合物WX022-3的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX022-2 (1.90 g, 4.71 mmol) 溶於乙醇 (20 mL) 中，加入鹽酸羥胺 (1.15 g, 16.48 mmol) 和乙酸鈉 (1.35 g, 16.48 mmol)，反應混合物升溫至85℃並攪拌反應15小時。補加鹽酸羥胺 (0.383 g, 5.5 mmol) 和乙酸鈉 (0.45 g, 5.5 mmol)，繼續攪拌反應15小時。反應完畢後，減壓濃縮除去大部分有機溶劑，用碳酸氫鈉水溶液調節pH=7~8，用甲基三級丁基醚 (50 mL×2) 萃取，捨棄有機相。水相用1 N鹽酸調節pH=5~6，用二氯甲烷 (50 mL×2) 萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到化合物WX022-3。MS-ESI
m/z: 319.1 [M+H-100]
+.
步驟4：化合物WX022-4的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX022-3 (0.87 g, 2.08 mmol) 溶於乙醇 (10 mL) 中，滴加濃硫酸 (407.80 mg, 4.16 mmol, 純度: 98%)，反應混合物升溫至85℃並攪拌反應15小時。反應完畢後，減壓濃縮得到粗品。室溫下，將粗品溶於四氫呋喃 (10 mL) 和水 (5 mL) 的混合溶劑中，加入碳酸氫鈉 (523.89 mg, 6.24 mmol) 和二碳酸二三級丁酯 (453.96 mg, 2.08 mmol)，攪拌反應3小時。反應完畢後，用乙酸乙酯 (10 mL×2) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (20 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。所得殘餘物通過柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=4/1，體積比)，得到化合物WX022-4。MS-ESI
m/z: 347.1 [M+H-100]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.54 (dd,
J=0.8, 8.0 Hz, 1H), 7.36 (d,
J=6.8 Hz, 1H), 7.24 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 4.22 (q,
J=7.2 Hz, 2H), 4.04 (s, 2H), 3.81-3.71 (m, 2H), 3.50 (t,
J=6.2 Hz, 2H), 3.46-3.37 (m, 1H), 3.15-2.98 (m, 4H), 2.13-1.99 (m, 2H), 1.87-1.74 (m, 2H), 1.57-1.39 (m, 11H), 1.27 (t,
J=7.2 Hz, 3H).
步驟5：化合物WX022-5的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX022-4 (310 mg, 694.23 μmol) 溶于無水四氫呋喃 (6 mL) 中，冰浴冷卻至0℃，滴加二異丙基氨基鋰的四氫呋喃溶液 (2 M, 520.68 μL)，保溫攪拌15分鐘，滴加丙烯醯胺 (59.21 mg, 833.08 μmol) 的無水四氫呋喃 (2 mL) 溶液，反應混合物室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，將反應液倒入1 M鹽酸 (10 mL) 中，用乙酸乙酯 (5 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (5 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。所得殘餘物經薄層層析板分離 (展開劑：石油醚/乙酸乙酯=1/2，體積比)，得到化合物WX022-5。
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.19 (s, 1H), 7.53 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.38 (d,
J=7.2 Hz, 1H), 7.31-7.23 (m, 1H), 4.34 (dd,
J=5.4, 8.6 Hz, 1H), 3.85-3.65 (m, 2H), 3.50 (t,
J=6.2 Hz, 2H), 3.46-3.38 (m, 1H), 3.15-2.97 (m, 5H), 2.83-2.72 (m, 1H), 2.68-2.56 (m, 1H), 2.52-2.40 (m, 1H), 2.13-2.00 (m, 2H), 1.87-1.74 (m, 2H), 1.57-1.41 (m, 11H).
步驟6：化合物WX022-6的三氟乙酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX022-5 (92 mg, 195.10 μmol) 溶于無水二氯甲烷中 (2 mL) 中，加入三氟乙酸 (616.00 mg, 5.40 mmol, 0.4 mL)，反應混合物室溫下攪拌反應12小時。反應完畢後，減壓濃縮得到化合物WX022-6的三氟乙酸鹽。MS–ESI
m/z: 372.0 [M+H]
+.
步驟7：化合物WX022的鹽酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX022-6的三氟乙酸鹽 (139.2 mg) 溶於乙腈 (2 mL) 中，加入N,N-二異丙基乙胺 (201.72 mg, 1.56 mmol)，攪拌10分鐘，加入化合物WX015-8 (139.86 mg, 234.11 μmol)，反應混合物升溫至80℃並攪拌反應12小時。反應完畢後，減壓濃縮除去乙腈。所得殘餘物經製備HPLC分離 (色譜柱: Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm; 流動相: 水(0.04%鹽酸)-乙腈; 乙腈%: 25%-55%, 8 min)，得到目標化合物WX022的鹽酸鹽。MS-ESI
m/z: 841.5 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.10 (s, 1H), 9.51 (br d,
J=6.4 Hz, 2H), 8.78 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.40 (d,
J=4.0 Hz, 1H), 8.25 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 7.69 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.49 (t,
J=7.2 Hz, 1H), 7.36-7.28 (m, 1H), 7.27-6.95 (m, 1H), 6.91-6.42 (m, 1H), 5.34-5.03 (m, 1H), 4.83-4.71 (m, 1H), 4.60 (dd,
J=4.8, 12.0 Hz, 1H), 4.32-4.15 (m, 1H), 3.94-3.57 (m, 3H), 3.55-3.25 (m, 5H), 3.07-2.85 (m, 6H), 2.84-2.71 (m, 1H), 2.70-2.55 (m, 2H), 2.25-2.14 (m, 1H), 2.13-1.65 (m, 16H), 1.27-1.07 (m, 2H).
實施例23
合成路線：
步驟1：化合物WX023-1的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX020-4 (10 g, 46.50 mmol) 溶於N,N-二甲基甲醯胺 (100 mL) 中，加入碳酸鉀 (12.85 g, 93.00 mmol)，冰浴冷卻至0℃，緩慢加入碘甲烷 (19.80 g, 139.50 mmol)，滴加完畢後，緩慢恢復至室溫並攪拌反應3小時。反應完畢後，將反應液冷卻至0°C，緩慢加入氨水 (10 mL)，攪拌15分鐘，向反應液中加入水 (100 mL)，用乙酸乙酯 (100 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (200 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到化合物WX023-1。MS-ESI
m/z: 229.1 [M+H]
+, 231.1 [M+H+2]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 7.83 (dd,
J=1.6, 8.0 Hz, 1H), 7.61 (dd,
J=1.6, 7.6 Hz, 1H), 7.18 (t,
J=7.8 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.58 (s, 3H).
步驟2：化合物WX023-2的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX023-1 (10 g, 43.65 mmol) 和烯丙基硼酸嚬哪醇酯 (14.67 g, 87.31 mmol) 溶於1,4-二㗁烷 (100 mL) 和水 (10 mL) 中，加入碳酸鉀 (12.07 g, 87.31 mmol) 和[1,1-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷 (3.57 g, 4.37 mmol)，反應混合物升溫至100℃，攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至室溫，向反應液中加入水 (100 mL)，用乙酸乙酯 (100 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (100 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到粗品。粗品經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/0-0/1，體積比)，得到化合物WX023-2。MS-ESI m
/z: 191.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 7.44 (dd,
J=1.6, 7.6 Hz, 1H), 7.38 (dd,
J=1.6, 7.6 Hz, 1H), 7.16 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 6.04-5.88 (m, 1H), 5.11-5.09 (m, 1H), 5.08-5.05 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.42 (d,
J=6.4 Hz, 2H), 2.56 (s, 3H).
步驟3：化合物WX023-3的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX023-2 (7.4 g, 38.90 mmol) 溶於乙酸乙酯 (150 mL)、乙腈 (150 mL) 和水 (225 mL) 的混合溶液中，冷卻至0°C，分批加入高碘酸鈉 (54.08 g, 252.84 mmol) 和三氯化釕(161.38 mg, 777.97 μmol)，緩慢恢復至室溫攪拌反應12小時。反應完畢後，冷卻至0°C，向反應液中緩慢加入飽和亞硫酸鈉水溶液 (100 mL)，室溫攪拌20分鐘，用2 M鹽酸調節溶液pH=5~6，用乙酸乙酯 (500 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (500 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到化合物WX023-3。MS-ESI
m/z: 207.1 [M-H]
-.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 10.04 (s, 1H), 7.55 (dd,
J=1.6, 7.6 Hz, 1H), 7.43 (dd,
J=1.2, 7.6 Hz, 1H), 7.16 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 3.94 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 2.64 (s, 3H).
步驟4：化合物WX023-4的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX023-3 (4.8 g, 23.05 mmol) 溶於N,N-二甲基甲醯胺 (50 mL) 中，加入N,N-二異丙基乙胺 (8.94 g, 69.16 mmol) 和2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯 (9.64 g, 25.36 mmol)，攪拌15分鐘，加入1-三級丁氧羰基-4-氨基哌啶 (4.62 g, 23.05 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應8小時。反應結完畢後，將反應液倒入水 (50 mL) 中，用乙酸乙酯 (50 mL×3) 萃取。合併有機相，用15%食鹽水 (100 mL) 洗滌，然後用飽和食鹽水 (100 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到粗品。粗品經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/0-0/1，體積比)，得到化合物WX023-4。MS-ESI
m/z: 389.3 [M-H]
-.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.52 (dd,
J=1.6, 7.6 Hz, 1H), 7.42 (dd,
J=1.6, 7.6 Hz, 1H), 7.15 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 5.78 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 4.05-3.88 (m, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.58 (s, 2H), 2.62 (s, 3H), 1.86-1.82 (m, 2H), 1.50-1.38 (m, 11H), 1.30-1.24 (m, 2H).
步驟5：化合物WX023-5的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX023-4 (2.1 g, 5.38 mmol) 溶於二氯甲烷 (42 mL) 中，冷卻至0~5°C，滴加三溴化硼 (1.62 g, 6.45 mmol)，反應混合物在0~5°C下攪拌反應2小時。反應完畢後，向反應液中滴加飽和碳酸鈉水溶液調節pH=7~8，加入二碳酸二三級丁酯 (1.41 g, 6.47 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，用1 M鹽酸調節pH=7，加入水 (70 mL) 和二氯甲烷 (20 mL)，萃取，水相用二氯甲烷 (50 mL×2) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (30 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到化合物WX023-5。MS-ESI
m/z: 321.2 [M+H-56]
+.
步驟6：化合物WX023-6的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX023-5 (2 g, 5.31 mmol) 溶於四氫呋喃 (40 mL) 中，加入碳酸二甲酯 (1.91 g, 21.25 mmol) 和三級丁醇鉀 (3.58 g, 31.88 mmol)，反應混合物升溫至75℃並攪拌反應2小時。反應完畢後，減壓濃縮得到化合物WX023-6。MS-ESI
m/z: 303.3 [M+H-100]
+.
步驟7：化合物WX023-7的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX023-6 (2 g, 4.97 mmol) 溶於乙醇 (60 mL) 中，用冰乙酸 (1.79 g, 29.82 mmol) 調節pH=6~7，加入鹽酸羥胺 (2.59 g, 37.27 mmol)，反應混合物升溫至80℃並攪拌反應8小時。反應完畢後，將反應液冷卻至室溫，過濾，濾餅用乙醇 (10 mL×2) 淋洗，向濾液中加入水 (15 mL)，濾液減壓濃縮除去大部分溶劑，然後用二氯甲烷 (30 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (30 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到化合物WX023-7。MS-ESI
m/z: 318.2 [M+H-100]
+.
步驟8：化合物WX023-8的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX023-7 (1.2 g, 2.87 mmol) 溶於乙醇 (10 mL) 中，加入濃硫酸 (563.87 mg, 5.75 mmol, 306.45 μL)，反應混合物升溫至70℃並攪拌反應6小時。反應完畢後，減壓濃縮除去溶劑，加入四氫呋喃 (5 mL)，用飽和碳酸鈉水溶液調節pH=7，然後加入二碳酸二三級丁酯 (750.68 mg, 3.44 mmol)，反應混合物室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，用1 M鹽酸調節pH=7，用二氯甲烷 (20 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (30 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得到粗品。粗品經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/0-0/1，體積比)，得到化合物WX023-8。MS-ESI
m/z: 346.2 [M+H-100]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 7.65 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.52 (d,
J=6.8 Hz, 1H), 7.33 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 5.64 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 4.23 (q,
J=7.12 Hz, 2H), 4.05 (s, 2H), 4.01-3.90 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 2.90-2.82 (m, 2H), 1.92-1.80 (m, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.30-1.26 (m, 4H).
步驟9：化合物WX023-9的三氟乙酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX023-8 (390 mg, 875.41 μmol) 溶於二氯甲烷 (4 mL) 中，加入三氟乙酸 (2.46 g, 21.61 mmol, 1.6 mL)，反應混合物室溫下攪拌反應1小時。反應完畢後，減壓濃縮得到化合物WX023-9的三氟乙酸鹽。MS-ESI
m/z: 346.2 [M+H]
+ .
步驟10：化合物WX023-10的合成
室溫和氮氣保護下，化合物WX023-9的三氟乙酸鹽 (450 mg) 溶於乙腈 (5 mL) 中，加入N,N-二異丙基乙胺 (619.39 mg, 4.79 mmol)，攪拌反應10分鐘，加入化合物WX015-8 (520.56 mg, 871.37 μmol)，反應混合物升溫至80℃並繼續反應8小時。反應完畢後，將反應液冷卻至室溫，將反應液倒入飽和氯化銨水溶液 (10 mL) 中，用二氯甲烷和乙醇的混合溶劑 (體積比：10:1, 10 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (15 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到粗品。粗品通過矽膠板分離 (展開劑：二氯甲烷/甲醇=8/1，體積比)，得到化合物WX023-10。MS-ESI
m/z: 815.2 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ : 9.50 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.78 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 8.39 (d,
J=4.4 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.19 (d,
J=6.8 Hz, 1H), 7.69 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.51 (d,
J=7.4 Hz, 1H), 7.34 (t,
J=7.6 Hz, 1H), 7.27-6.95 (m, 1H), 6.88- 6.40 (m, 1H), 5.17 (d,
J=82.8 Hz, 1H), 4.77 (d,
J=16.8 Hz, 1H), 4.19 (s, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.68-3.50 (m, 3H), 3.44 (d,
J=9.6 Hz, 1H), 2.90-2.75 (m, 2H), 2.25-2.08 (m, 2H), 2.07-1.85 (m, 8H), 1.83-1.67 (m, 4H), 1.65-1.37 (m, 3H), 1.27-1.16 (m, 4H), 1.12-0.97 (m, 2H).
步驟11：化合物WX023的甲酸鹽的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX023-10 (200 mg,245.44 μmol) 溶於四氫呋喃 (5 mL) 中，冷卻至0℃，依次加入丙烯醯胺 (19.19 mg, 269.98 μmol) 和三級丁醇鉀的四氫呋喃溶液 (1 M, 368.15 μL)，攪拌反應4小時，然後恢復至室溫攪拌反應4小時。反應完畢後，將反應液倒入甲酸水溶液 (0.1%, 5 mL) 中，攪拌2分鐘，減壓濃縮得到粗品。粗品先經製備HPLC分離 (色譜柱: Phenomenex C18 75*30 mm*3 μm; 流動相: 水(0.2%甲酸)-乙腈; 乙腈%: 1%-35%, 8 min))，再經製備HPLC分離 (色譜柱: Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm; 流動相: 水(0.2%甲酸)-乙腈; 乙腈%: 10%-30%, 8 min)，得到目標化合物WX023的甲酸鹽。MS-ESI
m/z: 840.3 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.09 (s, 1H), 9.50 (d,
J=6.4 Hz, 1H), 8.78 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.38 (d,
J=4.4 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=6.0 Hz, 1H), 8.21-8.12 (m, 2H), 7.74-7.65 (m, 1H), 7.55-7.46 (m, 1H), 7.37-7.29 (m, 1H), 7.26-6.94 (m, 1H), 6.90-6.40 (m, 1H), 5.18 (d,
J=82.8 Hz, 1H), 4.77 (d,
J=18.4 Hz, 1H), 4.60 (dd,
J=5.2, 12.0 Hz, 1H), 4.23-4.11 (m, 1H), 3.85-3.78 (m, 2H), 3.77-3.71 (m, 2H), 3.66-3.58 (m, 1H), 3.57-3.50 (m, 1H), 3.48-3.42 (m, 1H), 2.82-2.73 (m, 3H), 2.66-2.58 (m, 1H), 2.57-2.51 (m, 1H), 2.24-2.15 (m, 1H), 2.11 (d,
J=6.8 Hz, 2H), 2.07-2.00 (m, 3H), 1.99-1.93 (m, 3H), 1.92-1.83 (m, 2H), 1.79-1.69 (m, 4H), 1.62-1.50 (m, 1H), 1.48-1.38 (m, 2H), 1.10-0.97 (m, 2H).
實施例24
合成路線：
步驟1：化合物WX024-1的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX021-12的鹽酸鹽 (300 mg) 溶於二氯甲烷 (6 mL) 中，冷卻至0-5℃，依次滴加三乙胺 (323.30 mg, 3.19 mmol) 和氯乙醯氯 (144.34 mg, 1.28 mmol)，保溫攪拌反應2小時，然後緩慢恢復至室溫攪拌反應2小時。反應完畢後，向反應液中加入水 (20 mL)，用二氯甲烷 (7 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到化合物WX024-1，直接用於下一步。
步驟2：化合物WX024-3的合成
室溫和氮氣保護下，將4-羥基吡啶 (9 g, 94.64 mmol)，化合物WX024-2 (21.99 g, 189.28 mmol) 和三苯基膦 (24.82 g, 94.64 mmol) 溶于無水四氫呋喃 (200 mL) 中，冷卻至0-5℃，滴加偶氮二甲酸二異丙酯 (19.14 g, 94.64 mmol, 18.40 mL)，滴加完畢後，反應混合物緩慢恢復至室溫並攪拌反應12小時。反應完畢後，向反應液中加入水 (500 mL)，用乙酸乙酯 (200 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (200 mL×2) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：二氯甲烷/甲醇=50/1-30/1，體積比)，得到化合物WX024-3。MS-ESI
m/z: 194.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.41 (d,
J=6.0 Hz, 2H), 6.86-6.74 (m, 2H), 4.52-4.45 (m, 1H), 3.91-3.79 (m, 1H), 2.09-1.99 (m, 2H), 1.91-1.64 (m, 6H).
步驟3：化合物WX024-4的合成
室溫和氬氣保護下，將二氧化鉑 (660 mg, 2.91 mmol) 懸浮於冰乙酸 (33 mL) 中，加入化合物WX024-3 (3.3 g, 17.08 mmol) 和乙酸酐 (5.45 g, 53.38 mmol)，氫氣置換三次，維持氫氣壓力50 psi，反應混合物升溫至50℃並攪拌反應96小時。反應完畢後，過濾，濾餅用甲醇 (200 mL×7) 淋洗，收集母液，減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：二氯甲烷/甲醇=100/1-30/1，體積比)，得到化合物WX024-4。MS-ESI
m/z: 242.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 3.95-3.83 (m, 1H), 3.80-3.70 (m, 1H), 3.69-3.58 (m, 2H), 3.56-3.46 (m, 1H), 3.42-3.31 (m, 1H), 3.30-3.18 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.85-1.74 (m, 4H), 1.73-1.62 (m, 4H), 1.61-1.48 (m, 4H).
步驟4：化合物WX024-5的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX024-4 (1.25 g, 5.18 mmol) 和三乙胺 (1.05 g, 10.36 mmol, 1.44 mL) 溶於二氯甲烷 (12.5 mL) 中，冷卻至0-5℃，滴加甲烷磺醯氯 (1.04 g, 9.08 mmol)，滴加完畢後，保溫攪拌反應2小時。反應完畢後，向反應液中加入水 (70 mL)，用二氯甲烷 (20 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (20 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得到化合物WX024-5，直接用於下一步。
步驟5：化合物WX024-6的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物BB-1-5 (0.7 g, 4.29 mmol) 溶於N,N-二甲基甲醯胺 (14 mL) 中，依次加入碳酸鉀 (1.19 g, 8.58 mmol) 和化合物WX024-5 (1.65 g, 5.15 mmol)，反應混合物升溫至80℃並攪拌反應12小時。反應完畢後，反應液冷卻至室溫，加入水 (50 mL)，用乙酸乙酯 (20 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (20 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯=1/1-0/1，體積比)，得到化合物WX024-6。MS-ESI
m/z: 387.1 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, CDCl
3) δ: 8.22 (s, 1H), 7.10 (t,
J=53.6 Hz, 1H), 4.26-4.16 (m, 1H), 3.99-3.89 (m, 1H), 3.72-3.63 (m, 2H), 3.54-3.42 (m, 1H), 3.34-3.21 (m, 2H), 2.31-2.22 (m, 2H), 2.19-2.11 (m, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.89-1.74 (m, 4H), 1.68-1.46 (m, 4H).
步驟6：化合物WX024-7的合成
室溫和氮氣保護下，將鈀/碳 (0.1 g, 純度：10%) 懸浮於四氫呋喃 (10 mL) 中，加入化合物WX024-6 (478 mg, 1.24 mmol)，氫氣球置換三次，反應混合物室溫下攪拌反應2小時。反應完畢後，過濾，濾餅用甲醇 (50 mL×5) 淋洗，收集濾液減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物經柱層析分離 (洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯/乙醇=1/1/0~0/1/0-0/10/1，體積比)，得到化合物WX024-7。MS-ESI
m/z: 357.1 [M+H]
+.
步驟7：化合物WX024-8的合成
室溫和氮氣保護下，將中間體BB-2-3 (143.70 mg, 552.17 μmol) 溶於乙腈 (3 mL) 中，加入N,N,N,N-四甲基氯甲脒六氟磷酸 (154.93 mg, 552.17 μmol) 和N-甲基咪唑 (132.23 mg, 1.61 mmol)，攪拌10分鐘，加入化合物WX024-7 (164 mg, 460.14 μmol)，反應混合物繼續攪拌反應16小時。反應完畢後，將反應液倒入冰水 (30 mL) 中，用乙酸乙酯 (10 mL×3) 萃取。合併有機相，用飽和食鹽水 (10 mL×3) 洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。所得殘餘物經矽膠板分離 (洗脫劑：二氯甲烷/甲醇=10/1，體積比)，得到化合物WX024-8。MS-ESI
m/z: 599.4 [M+H]
+.
步驟8：化合物WX024-9的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX024-8 (181.5 mg, 303.19 μmol) 溶於乙醇 (7 mL) 中，加入氫氧化鈉溶液 (1 M, 7 mL)，反應混合物升溫至80℃並攪拌反應16小時。反應完畢後，冷卻至室溫，用1 M鹽酸調節pH=7，減壓濃縮除去溶劑，得到化合物WX024-9。MS-ESI
m/z: 557.3 [M+H]
+.
步驟9：化合物WX024的合成
室溫和氮氣保護下，將化合物WX024-9 (168.76 mg, 303.19 μmol)，化合物WX024-1 (126.81 mg, 394.15 μmol) 和碘化鈉 (59.08 mg, 394.15 μmol) 溶於乙腈 (3 mL) 中，加入N,N-二異丙基乙胺 (156.74 mg, 1.21 mmol, 211.24 μL)，反應混合物升溫至80℃並攪拌反應2小時。反應完畢後，減壓濃縮除去溶劑。所得殘餘物先經製備HPLC分離 (色譜柱: Phenomenex luna C18 80*40 mm*3 μm; 流動相: 水(0.04%鹽酸)-乙腈]; 乙腈%: 25%-50%, 7 min)，再經製備HPLC分離 (色譜柱: Phenomenex C18 75*30 mm*3 μm; 流動相: 水(10 mM碳酸氫銨)-乙腈; 乙腈%: 35%-55%, 8 min)，得到化合物WX024。MS-ESI
m/z: 842.5 [M+H]
+.
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.12 (s, 1H), 11.08 (d,
J=6.4 Hz, 1H), 10.02 (s, 1H), 9.50 (d,
J=6.4 Hz, 1H), 8.78 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.39 (d,
J=3.2 Hz, 1H), 8.25 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.02 (dd,
J=2.8, 7.2 Hz, 1H), 7.69 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.41 (t,
J=7.8 Hz, 1H), 7.27-6.95 (m, 1H), 6.90-6.40 (m, 1H), 5.17 (d,
J=78.4 Hz, 1H), 4.70 (d,
J=21.2 Hz, 1H), 4.64 (dd,
J=5.0,
J=12.2 Hz, 1H), 4.41-4.18 (m, 3H), 3.92-3.78 (m, 2H), 3.76-3.49 (m, 6H), 3.36-3.11 (m, 2H), 2.88-2.72 (m, 1H), 2.68-2.53 (m, 2H), 2.29-2.17 (m, 1H), 2.14-1.67 (m, 12H), 1.49-1.27 (m, 2H).
實施例25和實施例26
合成路線：
化合物WX025的鹽酸鹽和WX026的鹽酸鹽的合成
化合物WX006的鹽酸鹽(500 mg) 經過超臨界流體色譜 (分離條件：色譜柱：REGIS(S,S)WHELK-O1 (250mm*25mm,10 μm)；流動相：A:CO
2; B: EtOH/ACN；B%: 70%-70%，25 min。分析方法：色譜柱：(S,S)-WHELK-O1,50×4.6mm I.D., 3.5 μm; 流動相: A: CO
2; B: EtOH:ACN=1:1 (0.1%IPAm, v/v)，4 min) 分離。收集保留時間為2.631 min的樣品，再經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex Luna 80*40 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%：5%-35%，7 min)，得到化合物WX025的鹽酸鹽 (ee%: 99.10%)。收集保留時間為5.384 min的樣品，再經製備HPLC分離 (色譜柱：Phenomenex Luna 80*40 mm*3 μm；流動相：水(0.04%鹽酸)-乙腈；乙腈%：5%-35%，7 min)，得到化合物WX026的鹽酸鹽 (ee%: 98.94%)。
化合物WX025的鹽酸鹽：
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ: 11.18 (s, 1H), 10.92 (s, 1H), 10.58 (s, 1H), 9.50 (d,
J=6.4 Hz, 1H), 8.78 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.40 (d,
J=3.6 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.73 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.41 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.27-6.96 (m, 2H), 6.90-6.41 (m, 1H), 5.18 (d,
J=79.2 Hz, 1H), 4.76 (d,
J=18.8 Hz, 1H), 4.33-4.21 (m, 1H), 4.17 (dd,
J=4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 3.85-3.55 (m, 13H), 3.13-2.95 (m, 2H), 2.82-2.72 (m, 1H), 2.64-2.54 (m, 1H), 2.41-2.26 (m, 1H), 2.18-1.65 (m, 11H),1.32-1.08 (m, 2H).
化合物WX026的鹽酸鹽：
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d 6) δ: 10.92 (s, 1H), 10.44 (s, 1H), 9.51 (d,
J=6.0 Hz, 1H), 8.78 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.40 (d,
J=4.0 Hz, 1H), 8.25 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.73 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.41 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.24 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.22-6.95 (m, 1H), 6.90-6.43 (m, 1H), 5.17 (d,
J=79.2 Hz, 1H), 4.77 (d,
J=19.6 Hz, 1H), 4.32-4.20 (m, 1H), 4.17 (dd,
J=4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 3.85-3.54 (m, 13H), 3.14-2.95 (m, 2H), 2.82-2.69 (m, 1H), 2.64-2.55 (m, 1H), 2.41-2.27 (m, 1H), 2.19-1.65 (m, 11H), 1.28-1.11 (m, 2H).
實施例27和實施例28
合成路線：
化合物WX027的鹽酸鹽和WX028的鹽酸鹽的合成
化合物WX015的鹽酸鹽(500 mg) 經過超臨界流體色譜 (分離條件：色譜柱：REGIS(S,S)WHELK-O1(250mm*25mm,10 μm)；流動相：A:CO
2; B: EtOH/ACN(0.1%IPAm, v/v)；B%: 65%-65%，6 min。分析方法：色譜柱：(S,S)-WHELK-O1,50×4.6mm I.D., 3.5 μm; 流動相: A: CO
2; B: EtOH:ACN=1:1 (0.1%IPAm, v/v),4 min) 分離。收集保留時間為1.678 min的樣品，再經製備HPLC分離 (色譜柱: Phenomenex luna C18 80*40 mm*3 μm; 流動相: 水(0.04%鹽酸)-乙腈; 乙腈%: 23%-43%, 7 min)，得到化合物WX027的鹽酸鹽 (ee%: 96.68%)。收集保留時間為2.265 min的樣品，再經製備HPLC分離 (色譜柱: Phenomenex Luna 80*30 mm*3 μm; 流動相: 水(0.04%鹽酸)-乙腈; 乙腈%: 1%-30%, 8 min)，得到化合物WX028的鹽酸鹽 (ee%: 95.18%)。
化合物WX027的鹽酸鹽：
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.12 (s, 1H), 10.49 (s, 1H), 9.51 (d,
J=6.0 Hz, 1H), 8.79 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 8.41 (d,
J=4.4 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.01 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.65 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.38 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 7.27-6.95 (m, 1H), 6.90-6.44 (m, 1H), 5.18 (d,
J=78.0 Hz, 1H), 4.76 (d,
J=20.4 Hz, 1H), 4.64 (dd,
J=4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 4.29-4.18 (m, 1H), 3.85-3.58 (m, 14H), 3.47-3.42 (m, 1H), 3.10-2.96 (m, 2H), 2.84-2.73 (m, 1H), 2.68-2.53 (m, 2H), 2.26-2.16 (m, 1H), 2.12-1.73 (m, 8H), 1.28-1.11 (m, 2H).
化合物WX028的鹽酸鹽：
1H NMR (400 MHz, DMSO_
d
6 ) δ: 11.12 (s, 1H), 10.47 (s, 1H), 9.51 (d,
J=6.0 Hz, 1H), 8.79 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 8.40 (d,
J=4.0 Hz, 1H), 8.26 (d,
J=5.6 Hz, 1H), 8.01 (d,
J=7.6 Hz, 1H), 7.65 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.38 (t,
J=8.0 Hz, 1H), 7.28-6.95 (m, 1H), 6.90-6.43 (m, 1H), 5.18 (d,
J=79.2 Hz, 1H), 4.76 (d,
J=20.8 Hz, 1H), 4.64 (dd,
J=4.8 Hz, 12.0 Hz, 1H), 4.29-4.18 (m, 1H), 3.87-3.41 (m, 14H), 3.10-2.94 (m, 2H), 2.84-2.73 (m, 1H), 2.67-2.53 (m, 2H), 2.25-2.17 (m, 1H), 2.13-1.69 (m, 9H), 1.28-1.11 (m, 2H).
生物測試
實驗例1：在細胞K562 IRAK4-HiBiT中的靶蛋白降解作用評估
實驗目的：本實驗通過檢測受試化合物在細胞K562 IRAK4-HiBiT中對靶蛋白IRAK4的降解作用。
實驗材料：
1. 細胞和培養基
細胞：K562 IRAK4-HiBiT cells
培養基：RPMI 1640+10% FBS+2mM GlutaMax+1mM sodium pyruvate+penicillin/streptomycin
陽性對照：1000 nM; 陰性對照: 0.1 % DMSO
2. 試劑與耗材
3. 儀器
| 試劑與耗材 | 生產商 | 貨號 |
| RPMI 1640 | Gibco | Cat # 31800 |
| 血清 (FBS) | Biosera | #FB-1058/500 |
| P/S雙抗 | Biosera | #LM-A4118 |
| DPBS | Invitrogen | #14190 |
| 0.25% Trypsin-EDTA | Invitrogen | #25200 |
| 穀氨醯胺 | Invitrogen | Cat# 35050061 |
| 丙酮酸鈉 | Invitrogen | Cat# 11360070 |
| Nano-Glo® HiBiT檢測試劑盒 | Promega | promega# N3040 |
| 384-well白板, 平底 | Corning | Cat# 3570 |
| 384_LDV化合物板 | Labcyte | Cat# LP-0200 |
| 儀器名稱 | 生產商 | 儀器型號 |
| ECHO移液器 | Labcyte | Echo 550 |
| Bravo自動液體工作站 | Agilent | 16050-101 |
| Envision讀板器 | Perkin Elmer | 2104 |
| 自動加樣器 | Thermofisher | Multidrop Combi |
| 細胞計數器 | Thermo | Countess II FL |
實驗方案：
第1天
1. 化合物的準備
(1). 將待測化合物的粉末用DMSO溶解到10 mM作為儲存濃度，用移液器手動吸取9 µL 10 mM的待測化合物，至LDV板的第1列和第13列；
(2). 用multidrop Combi加6 µL DMSO至第2-12列以及14-24列；
(3). 用Bravo將待測化合物進行3倍稀釋化 (3 µL+6 µL)，從第1-11列及第13-23列；
(4). 按照板佈局，用Echo將25 nL化合物溶液 (LDV板第1-24列) 轉移到實驗板；
(5). 用Echo將25 nL的1 mM陽性對照的溶液轉移到測定板中作為100%降解對照 (即LC, HPE), 25 nLDMSO轉移到測定板作為0%對照 (即HC, ZPE)。
2. 細胞鋪板
(1). 棄去細胞培養基，DPBS清洗一次，胰酶消化細胞，細胞計數，製備細胞懸液2×10
-5cells/mL；
(2). 用MultiDrop Combi中速加入25 µL /孔的細胞懸液至含有待測化合物的實驗板；
(3). 將含有細胞的實驗板放回培養箱中37℃、5% CO
2培養16~18小時。
第2天
(1). 用MultiDrop Combi高速往實驗板中加入25 µL /孔檢測試劑 (NanoGlo裂解溶液+底物+LgBit蛋白) 至測定板，震盪10 min；
(2). 離心2000 rpm×1 min除去氣泡；
(3). Envision, US Luminescence檢測方法讀板。
3. 數據分析
用下列公式來計算檢測化合物的抑制率（Inhibition rate，IR）：IR (%)=(RLU溶媒對照–RLU化合物)/(RLU溶媒對照–RLU陽性對照)*100%, 溶媒對照即空白對照. 在Excel中計算不同濃度化合物的抑制率，然後用XLFit軟體作抑制曲線圖和計算相關參數，包括最小抑制率，最大抑制率及DC
50。
測試結果見表1。
表1 本發明化合物在細胞K562 IRAK4-HiBiT中的靶蛋白降解作用
| 化合物 | DC 50(nM) | 最大抑制率 (%) |
| WX002的鹽酸鹽 | 24.27 | 56.72 |
| WX003的鹽酸鹽 | 25.48 | 100.06 |
| WX006的鹽酸鹽 | 12.86 | 97.11 |
| WX010的鹽酸鹽 | 6.54 | 74.90 |
| WX014的鹽酸鹽 | 4.29 | 85.62 |
| WX015的鹽酸鹽 | 4.12 | 106.70 |
| WX016的鹽酸鹽 | 34.23 | 112.11 |
| WX017的鹽酸鹽 | 7.02 | 115.78 |
| WX018的甲酸鹽 | 9.11 | 97.79 |
| WX020的鹽酸鹽 | 5.43 | 100.80 |
| WX021的鹽酸鹽 | 2.59 | 102.77 |
| WX022的鹽酸鹽 | 7.14 | 103.04 |
| WX023的甲酸鹽 | 2.55 | 103.01 |
| WX024 | 1.37 | 109.35 |
| WX027的鹽酸鹽 | 8.86 | 107.58 |
| WX028的鹽酸鹽 | 10.46 | 106.67 |
結論：
本發明化合物在細胞K562 IRAK4-HiBiT中展現出優異的靶蛋白IRAK4降解作用。
實驗例2：化合物的小鼠藥代動力學評價
實驗目的：
本研究受試動物選用CD-1或C57BL/6N雄性小鼠，應用LC/MS/MS法定量測定小鼠靜脈注射或灌胃給予測試化合物不同時間點的血漿中的藥物濃度，以評價受試藥物在小鼠體內的藥代動力學特徵。
實驗材料：
CD-1小鼠 (雄性, 20-35g, 7~10周齡，北京維通利華) 或 C57BL/6N小鼠 (雄性, 20-30g, 7~10周齡，北京維通利華)
實驗操作A：
將測試化合物的澄清或懸浮溶液經尾靜脈注射到CD-1小鼠體內（過夜禁食）(溶媒：10% DMSO/10% Solutol/80% H
2O)，灌胃給予到CD-1小鼠體內（過夜禁食）。靜脈注射給藥於0 h（給藥前）和給藥後0.083，0.25，0.5，1，2，4，8，24 h從隱靜脈采血，置於EDTA-K2抗凝管中，將混合物充分渦旋混合並在4℃下3200 g離心10分鐘得血漿；口服灌胃給藥於給藥後0.25，0.5，1，2，4，8，24 h從隱靜脈采血，置於添加了EDTA-K2的抗凝管 (江蘇康健醫療用品有限公司) 中，將混合物充分渦旋混合並在4℃下3200g離心10分鐘得血漿。採用LC-MS/MS法測定血藥濃度，使用Phoenix WinNonlin™ Version 6.3 (Pharsight, Mountain View, CA)藥動學軟體，以非房室模型線性對數梯形法計算相關藥代動力學參數。
實驗操作B：
將測試化合物的澄清或懸浮溶液經尾靜脈注射到C57BL/6N小鼠體內（過夜禁食）(溶媒：5% DMSO/10% solutol/85% H
2O)，或灌胃給予到C57BL/6N小鼠體內（過夜禁食）。靜脈注射給藥於0 h（給藥前）和給藥後0.083，0.25，0.5，1，2，4，6，8，24 h從臉頰穿刺采血50 μL，置於添加了肝素鈉的抗凝管中，將混合物充分渦旋混合並在2~8℃下6000 g離心3分鐘；口服灌胃給藥於0 h（給藥前）和給藥後0.083，0.25，1，2，4，6，8，24 h從臉頰穿刺采血，置於添加了肝素鈉的抗凝管中，將混合物充分渦旋混合並在2~8℃下6000 g離心3分鐘。採用LC-MS/MS法測定血藥濃度，使用Phoenix WinNonlin8.2.0藥動學軟體，以非房室模型線性對數梯形法計算相關藥代動力學參數。
測試結果見表2。
表2 本發明化合物在小鼠中的藥代動力學參數
| 化合物編號 | 小鼠藥代參數 | ||||||||
| 實驗操作 | 靜脈注射 | 灌胃給藥 | |||||||
| 血漿清除率(mL/min/kg) | 消除半衰期(h) | 表觀分佈 容積 (L/kg) | 藥時曲線下面積(0-inf,µM.h) | 達峰濃度(µM) | 達峰時間(h) | 藥時曲線下面積(0-inf,µM.h) | 生物利用度F (%) | ||
| WX003的鹽酸鹽 (IV_1mg/kg; PO_10mg/kg) | A | 11.7 | 1.74 | 1.71 | 1.72 | 0.61 | 4.0 | 4.83 | 28.2 |
| WX006的鹽酸鹽 (IV_1mg/kg; PO_10mg/kg) | A | 16.8 | 1.03 | 1.47 | 1.18 | 1.73 | 1.0 | 7.73 | 65.6 |
| WX015的鹽酸鹽 (IV_2mg/kg; PO_10mg/kg) | B | 27.6 | 4.25 | 4.82 | 1.45 | 0.4 | 1.33 | 2.51 | 34.6 |
結論：本發明化合物的口服血漿系統暴露量（AUC
0-inf）較高。在齧齒動物小鼠中，其藥代動力學性質較優。
實驗例3：化合物的比格犬藥代動力學評價
實驗目的：
本研究受試動物選用雄性比格犬，應用LC/MS/MS法定量測定比格犬靜脈注射或灌胃給予測試化合物不同時間點的血漿中的藥物濃度，以評價受試藥物在比格犬體內的藥代動力學特徵。
實驗材料：
比格犬 (雄性, 9-11kg，江蘇亞東實驗動物研究院有限公司)。
實驗操作：
將測試化合物的澄清或懸浮溶液經尾靜脈注射到比格犬體內（給食）(溶媒：5% DMSO/10% Solutol/85% H
2O)或灌胃給予到比格犬體內（給食）。靜脈注射給藥於0 h（給藥前）和給藥後0.083，0.25，0.5，1，2，4，6，8，24 h從前肢靜脈采血1mL，EDTA-2K抗凝，將混合物充分渦旋混合並在2~8℃下6000g離心3分鐘；口服灌胃給藥於 0 h（給藥前）和給藥後0.083，0.25，0.5，1，2，4，6，8，24 h從前肢靜脈采血1mL，EDTA-2K抗凝，將混合物充分渦旋混合並在2~8℃下6000g離心3分鐘。採用LC-MS/MS法測定血藥濃度，使用Phoenix WinNonlin8.2.0藥動學軟體，以非房室模型線性對數梯形法計算相關藥代動力學參數。
測試結果見表3。
表3 本發明化合物在比格犬中的藥代動力學參數
| 化合物編號 | 比格犬藥代參數 | |||||||
| 靜脈注射 (0.5 mg/kg) | 灌胃給藥(3 mg/kg) | |||||||
| 血漿清除率(mL/min/kg) | 消除半衰期(h) | 表觀分佈 容積(L/kg) | 藥時曲線下面積(0-inf,µM.h) | 達峰濃度(µM) | 達峰時間(h) | 藥時曲線下面積(0-inf,µM.h) | 生物利用度F (%) | |
| WX015的鹽酸鹽 | 37.5 | 2.93 | 8.44 | 0.27 | 0.12 | 4.67 | 1.13 | 70.3 |
結論：本發明化合物的口服血漿系統暴露量（AUC
0-inf）較高。在非齧齒類動物比格犬中，其藥代動力學性質較優。
實驗例4：化合物的食蟹猴藥代動力學評價
實驗目的：
本研究受試動物選用雄性食蟹猴，應用LC/MS/MS法定量測定食蟹猴靜脈注射或灌胃給予測試化合物不同時間點的血漿中的藥物濃度，以評價受試藥物在食蟹猴體內的藥代動力學特徵。
實驗材料：
食蟹猴 (雄性，2-5 kg，海南金港生物技術股份有限公司)。
實驗操作：
將測試化合物的澄清溶液經外周靜脈緩慢注射到食蟹猴體內（給食）(溶媒：5% DMSO/10% Solutol /85% H
2O)，或灌胃給予到食蟹猴體內（給食）。靜脈注射給藥於0 h（給藥前）和給藥後0.083，0.25，0.5，1，2，4，6，8，24 h從外周靜脈采血0.5 mL，置於EDTA-2K抗凝管中，在2-8℃下3200 g離心10分鐘，分離上清液；口服灌胃給藥於0 h（給藥前）和給藥後0.083，0.25，0.5，1，2，4，6，8，24 h從外周靜脈采血0.5mL，置於EDTA-2K抗凝管中，在2-8℃下3200 g離心10分鐘，分離上清液。採用LC-MS/MS法測定血漿藥物濃度，使用Phoenix WinNonlin 6.3藥動學軟體，以非房室模型線性對數梯形法計算相關藥代動力學參數。
測試結果見表4。
表4 本發明化合物在食蟹猴中的藥代動力學參數
| 化合物編號 | 食蟹猴藥代參數 | |||||||
| 靜脈注射 (0.5 mg/kg) | 灌胃給藥(5 mg/kg) | |||||||
| 血漿清除率(mL/min/kg) | 消除半衰期(h) | 表觀分佈 容積(L/kg) | 藥時曲線下面積(0-inf,µM.h) | 達峰濃度(µM) | 達峰時間(h) | 藥時曲線下面積(0-inf,µM.h) | 生物利用度F (%) | |
| WX015的鹽酸鹽 | 48.5 | 2.33 | 8.83 | 0.21 | 0.14 | 4.0 | 1.14 | 55.5 |
結論：本發明化合物的口服血漿系統暴露量（AUC
0-inf）較高。在非齧齒類動物食蟹猴中，其藥代動力學性質較優。
實驗例5：化合物對尿酸鈉致大鼠急性痛風性關節炎症的防治作用研究
實驗目的：
評價化合物對尿酸鈉致大鼠急性痛風性關節炎的防治作用。
實驗材料：
動物：5周齡雄性SD大鼠；來源：浙江維通利華實驗動物技術有限公司。
實驗試劑：
尿酸鈉：Sigma；貨號：BCCB4889；
DMSO：GENERAL-REAGENT，貨號：P1908824；
滅菌注射用水：廣東艾希德藥業有限公司，貨號：200913203；
Solutol：BASF SE；貨號：35907288Q0；
溶媒：10%DMSO+10% Solutol+80%H
2O。
實驗儀器：
足趾腫脹測定儀：YLS-7B，濟南益延科技
雙足平衡測痛儀：Incapacitance Testers，Linton
實驗操作：
實驗分組：適應3天後，所有動物測量基礎後足足容積、關節炎指數評分和雙後足痛閾，選擇50只動物根據體重、後足足容積、關節炎指數和雙後足痛閾值平均分成5組，每組10只。
表5 實驗分組情況
開始給藥當天記為D-1，每天2次，連續6天經口灌胃給藥（D-1~D4）。在給藥1天后的D0，第一次給藥1小時後，除空白對照組外，其餘大鼠用異氟烷麻醉，於右踝關節外側後方為穿刺點向關節腔注入50微升（50 mg/mL）的尿酸鈉溶液造模。關節腫脹將於8~12小時達到高峰（持續至72小時左右）。在致炎前和致炎後2、5、8、11、24、48、72和96小時測定動物的足容積並進行關節炎指數（AI）評分；採用雙足平衡測痛儀測量致炎前、致炎後2、24、48、72和96小時的痛閾情況。在關節腫脹高峰（8~12小時）拍攝各組動物關鍵腫脹照片留存。
臨床觀察：每天1次觀察實驗動物的臨床症狀，有異常記錄。
足容積測量：測量前，用記號筆在大鼠踝關節處畫線標記位置，儀器內加入乾淨清水後儀器數值清零準備測量。將大鼠後肢放入水中使踝關節處的標記線位於液體表面，此時踩下腳踏讀數，為大鼠足容積。測量結束後再次踩下腳踏清零準備測量下一隻。
關節炎指數（AI）：測量足容積同時對造模足腫脹進行評分。關節炎指數（Arthritis Index）評分標準：
表6 關節炎臨床評分標準
| 組別 | 藥物 | 動物數量 | 給藥劑量 (mg/kg) | 給藥體積 (mL/kg) | 給藥濃度 (mg/mL) | 給藥途徑和週期 |
| 1 | 正常組 | 10 | NA | 10 | NA | 灌胃，每天2次，連續6天 |
| 2 | 模型組 | 10 | NA | 10 | NA | 灌胃，每天2次，連續6天 |
| 3 | 受試化合物 | 10 | 30 | 10 | 3 | 灌胃，每天2次，連續6天 |
| 4 | 受試化合物 | 10 | 100 | 10 | 10 | 灌胃，每天2次，連續6天 |
| 5 | 受試化合物 | 10 | 200 | 10 | 20 | 灌胃，每天2次，連續6天 |
| 分數 | 程度 |
| 0 | 無腫脹，外觀正常 |
| 1 | 踝關節輕度腫脹，骨性標誌可見 |
| 2 | 踝關節明顯紅腫，骨性標誌消失，但腫脹局限於關節部位 |
| 3 | 踝關節以外足趾腫脹 |
數據統計：
實驗數據以Mean±SD表示；數據運用IBM SPSS Statistics 21進行統計分析，兩組間數據
p＜0.05認為是有顯著性差異。
足容積、關節炎指數和後足承重差測試結果見表7、表8和表9。
表7受試物對尿酸鈉致大鼠急性痛風性關節炎後足足容積的影響（n=10,
±
s）
*p＜0.05, **
p＜0.01, ***
p＜0.001對比模型組
表8受試物對尿酸鈉致大鼠急性痛風性關節炎後足關節炎指數的影響（n=10,
±
s）
*p＜0.05, **
p＜0.01, ***
p＜0.001對比模型組
表9受試物對尿酸鈉致大鼠急性痛風性關節炎後足承重差的影響（n=10,
±s）
*p＜0.05, **
p＜0.01, ***
p＜0.001對比模型組
| 組別 | 足容積 (mL) / 時間 (h) | ||||||||
| 0 | 2 | 5 | 8 | 11 | 24 | 48 | 72 | 96 | |
| 正常組 | 3.62 ±0.2 | 3.77 ±0.2** | 3.79 ±0.2** | 3.8±0.2*** | 3.82 ±0.2** | 3.87±0.2 | 3.92±0.2 | 3.95±0.2 | 3.99±0.2 |
| 模型組 | 3.63 ±0.1 | 3.97 ±0.1 | 4.05 ±0.1 | 4.15±0.2 | 4.12 ±0.2 | 3.99±0.2 | 3.98±0.2 | 4.02±0.2 | 4.02±0.2 |
| WX015的鹽酸鹽(30 mg/kg) | 3.63 ±0.1 | 3.88 ±0.2 | 3.9 ±0.1* | 3.9±0.1** | 3.92 ±0.2* | 3.9±0.2 | 3.91±0.2 | 3.94±0.1 | 3.96±0.2 |
| WX015的鹽酸鹽(100 mg/kg) | 3.63 ±0.1 | 3.85 ±0.2 | 3.88 ±0.2* | 3.9±0.1** | 3.91 ±0.2** | 3.88±0.2 | 3.9±0.2 | 3.93±0.2 | 3.95±0.2 |
| WX015的鹽酸鹽(200 mg/kg) | 3.62 ±0.1 | 3.84 ±0.1* | 3.88 ±0.1* | 3.89±0.1** | 3.88 ±0.1** | 3.87±0.1 | 3.89±0.2 | 3.91±0.1 | 3.93±0.3 |
| 組別 | 關節炎指數 / 時間 (h) | ||||||||
| 0 | 2 | 5 | 8 | 11 | 24 | 48 | 72 | 96 | |
| 正常組 | 0±0 | 0±0*** | 0±0*** | 0±0*** | 0±0*** | 0±0*** | 0±0*** | 0±0** | 0±0 |
| 模型組 | 0±0 | 1.1±0.3 | 1.3±0.5 | 2±0.8 | 1.7±0.7 | 1.1±0.3 | 0.8±0.4 | 0.5±0.5 | 0.2±0.4 |
| WX015的鹽酸鹽 (30 mg/kg) | 0±0 | 1±0 | 1±0 | 1±0** | 1±0** | 0.9±0.3 | 0.5±0.5 | 0.3±0.5 | 0.1±0.3 |
| WX015的鹽酸鹽 (100 mg/kg) | 0±0 | 1±0 | 1±0 | 1±0** | 1±0** | 0.6±0.5* | 0.3±0.5* | 0.2±0.4 | 0±0 |
| WX015的鹽酸鹽 (200 mg/kg) | 0±0 | 1±0 | 1±0 | 1±0** | 1±0** | 0.5±0.5** | 0.2±0.4** | 0±0** | 0±0 |
| 組別 | 後足承重差 (g) / 時間 (h) | |||||
| 0 | 2 | 24 | 48 | 72 | 96 | |
| 正常組 | 0.22±0.7 | 0.49±0.3*** | -0.61±0.9*** | -0.2±0.6*** | -0.36±0.7*** | 0.07±0.4*** |
| 模型組 | 0.13±0.9 | 28.12±0.7 | 20.32±1.1 | 11.99±0.6 | 5.12±0.3 | 2.64±0.1 |
| WX015的鹽酸鹽 (30 mg/kg) | 0.69±0.9 | 19.09±0.6*** | 13.22±0.8*** | 6.6±0.4*** | 4.3±0.3* | 2.1±0.2* |
| WX015的鹽酸鹽 (100 mg/kg) | 0.12±0.6 | 16.38±0.6*** | 12.2±1*** | 5.72±0.6*** | 3±0.2*** | 2.01±0.1** |
| WX015的鹽酸鹽 (200 mg/kg) | -0.23±1 | 14.81±1*** | 11.32±0.9*** | 3.91±0.5*** | 2.1±0.2*** | 1.94±0.1* |
實驗結論：
本發明化合物對尿酸鈉致大鼠急性痛風性關節炎症的後足足容積、後足關節炎指數評分和後足承重差均具有治療效果，且呈劑量依賴。
實驗例6：化合物對咪喹莫特誘導的小鼠銀屑病模型的有效性評價
實驗目的：
評價化合物在咪喹莫特誘導BALB/c小鼠銀屑病模型中的有效性。
實驗材料：
動物：BALB/c小鼠，雄性，18-20 g；來源：浙江維通利華實驗動物技術有限公司。
實驗試劑：
咪喹莫特：3M Health Care Limited，藥品註冊證號：H20160079；
DMSO：Anergy Chemical，貨號：E081359；
Solutol：Sigma-Aldrich，貨號：42966；
MC：Sigma-Aldrich，貨號：M0202；
吐溫20：Sigma-Aldrich，貨號：9005-64-5；
溶媒：10%DMSO+10% Solutol+80%H
2O。
實驗儀器：
電子天平：Sartorius，貨號：QUINTIX124-1CN；
電子秤：上海越平儀器，貨號：YP10001；
超聲波清洗器：Kunshang，貨號：KQ3200E；
電子振盪器：Scientific Industries，貨號：SI-0256；
麻醉機：玉研儀器，貨號：ABS-4。
實驗操作：
實驗分組和給藥：適應後，50只雄性BALB/c小鼠按體重隨機分為5組（n=6或9）：正常（對照，G1）組，溶媒（模型，G2）組，受試化合物低劑量（30 mg/kg，BID，G3）組、受試化合物中劑量（100 mg/kg，BID，G4）組和受試化合物高劑量（300 mg/kg，BID，G5）組。
模型誘導：塗抹咪喹莫特前剃除實驗動物背部皮膚毛髮（表面積=2×3 cm）。除正常組外，將咪喹莫特乳膏以62 mg/小鼠，每天局部塗抹于剃毛的背部（47 mg）和左耳（15 mg），連續8天（從第0天至第7天）。給藥組（G2-G5）從第-1天至第6天，每天兩次給藥，灌胃給予溶媒或受試化合物，第7天僅給藥一次。各組給藥體積均為10 mL/kg。（注：規定首次塗抹咪喹莫特為第0天；因提前一天給藥，因此首次給藥為第-1天）。
表10 實驗分組情況
| 組別 | 模型誘導 | 藥物 | 動物數量 | 給藥劑量 (mg/kg) | 給藥體積 (mL/kg) | 給藥途徑 | 給藥途徑和週期 |
| 1 | -- | 正常組 | 6 | -- | -- | -- | -- |
| 2 | 咪喹莫特 | 模型組 | 9 | -- | 10 | 灌胃 | 第-1天至第6天，每天2次；第7天給藥1次 |
| 3 | 咪喹莫特 | 受試化合物 | 9 | 30 | 10 | 灌胃 | 第-1天至第6天，每天2次；第7天給藥1次 |
| 4 | 咪喹莫特 | 受試化合物 | 9 | 100 | 10 | 灌胃 | 第-1天至第6天，每天2次；第7天給藥1次 |
| 5 | 咪喹莫特 | 受試化合物 | 9 | 300 | 10 | 灌胃 | 第-1天至第6天，每天2次；第7天給藥1次 |
數據采集和分析：
臨床評分：根據分級系統，每天測量紅斑、鱗屑和厚度的臨床疾病評分，並計算累積評分。
表11 評分系統：紅斑、鱗屑、厚度
耳厚度：第0、3、5、7天測量左耳厚度，共4次，計算第7天相對第0天的耳厚度增加量。
脾臟重量：第7天處死動物後稱量脾臟重量。
炎症因子：第7天處死動物後取病灶部位皮膚，用熒光定量PCR的方法檢測白介素17、白介素6和腫瘤壞死因子α的相對含量。
| 分數 | 臨床症狀 |
| 0 | 正常 |
| 1 | 輕微 |
| 2 | 輕度 |
| 3 | 中度 |
| 4 | 顯著 |
實驗結果：
實驗數據以Mean±SEM表示；數據運用Graphpad prism軟體one-way ANOVA方法進行統計分析，兩組間數據
p＜0.05認為是有顯著性差異。
小鼠病理評分、耳厚度增加量、脾臟重量和炎症因子測試結果見表12和表13。
表12 受試物對咪喹莫特致小鼠銀屑病模型病理評分、耳厚度增加、脾臟重量的影響（n=6或9）
*p＜0.05, **
p＜0.01, ***
p＜0.001對比模型組
表13 受試物對咪喹莫特致小鼠銀屑病模型皮膚炎症因子相對含量的影響（n=3或9）
*p＜0.05, **
p＜0.01, ***
p＜0.001對比模型組
| 組別 | 正常組 | 模型組 | WX015 (30 mg/kg) | WX015 (100 mg/kg) | WX015 (300 mg/kg) |
| 病理評分 | 0±0*** | 22.2±0.38 | 20.2±0.89 | 20.5±1.18 | 19.0±0.55 |
| 耳厚度增加（μM） | 4.3±1.02*** | 228.8±4.62 | 208.4±6.00* | 217.1±5.67 | 185.1±2.68*** |
| 脾臟重量（mg） | 76.17±4.82*** | 188.89±13.83 | 175.78±13.01** | 153.78±11.67** | 132.78±3.94** |
| 組別 | 正常組 | 模型組 | WX015 (30 mg/kg) | WX015 (100 mg/kg) | WX015 (300 mg/kg) |
| 白介素17 | 1.00±0.98* | 142.4±55.7 | 102.4±36.9 | 113.1±49.4 | 97.3±35.3 |
| 白介素6 | 1.00±0.52* | 19.9±7.1 | 8.0±3.3* | 13.8±2.3* | 4.7±2.0* |
| 腫瘤壞死因子α | 1.00±0.33*** | 6.7±0.6 | 5.2±0.7** | 5.2±0.8** | 3.7±0.6** |
實驗結論：
本發明化合物對咪喹莫特致小鼠銀屑病模型病理評分、耳厚度增加和脾臟重量均有改善作用，對病灶處皮膚中的炎症因子也有抑制作用，表明其對該銀屑病模型動物具有治療效果，且高劑量（300 mpk）的治療效果優於中低劑量（100 mpk、30 mpk）。
無
無
Claims (19)
- 一種式（VII-0）所示化合物或其藥學上可接受的鹽，， 其中， L 1選自
、
、-(CH 2) 3-和-O(CH 2) 3-； L 2選自-CR 5R 6-和O； R 1、R 2、R 3、R 4、R 5和R 6分別獨立地選自H和鹵素； 或者，R 1與R 2、R 3與R 4、R 5與R 6任選與它們相連的碳原子成環丙基； R 7選自
、
和
； R 8選自C 1-4烷基、C 1-4鹵代烷基、環丙基和鹵代環丙基； 環A選自
或
； X 1選自CH和N； X 2選自NH、O、S和Se； 環B選自C 5-8環烷基和5-8元雜環烷基，所述C 5-8環烷基和5-8元雜環烷基各自獨立地任選被1、2、3或4個R a取代； R a選自鹵素、OH、NH 2、C 1-3烷基、C 1-3烷氧基、C 1-3鹵代烷基和C 1-3鹵代烷氧基； 環C選自C 5-8環烷基和5-8元雜環烷基，所述C 5-8環烷基和5-8元雜環烷基各自獨立地任選被1、2、3或4個R b取代； R b選自鹵素、OH、NH 2、C 1-3烷基、C 1-3烷氧基、C 1-3鹵代烷基和C 1-3鹵代烷氧基。
- 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其化合物選自（VII）所示的結構，， 其中， L 1選自
、、-(CH 2) 3-和-O(CH 2) 3-； L 2選自-CR 5R 6-和O； R 1、R 2、R 3、R 4、R 5和R 6分別獨立地選自H和鹵素； 或者，R 1與R 2、R 3與R 4、R 5與R 6任選與它們相連的碳原子成環丙基； R 7選自、和； T 1選自CH和N； T 2選自CH和N； T 3選自CH和N； 環A選自或； X 1選自CH和N； X 2選自NH、O、S和Se。 - 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，R 1、R 2、R 3、R 4、R 5和R 6分別獨立地選自H和F。
- 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，L 1選自、
、
、
和
。
- 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，L 2選自-CH 2-和O。
- 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，結構單元選自
、
、
、
、
、
、
和
。
- 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，結構單元選自
、
、
、
、
、
、
和
。
- 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，環A選自、
、
、
、
、
、
、
、
、
和
。
- 如請求項8所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中，環A選自、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
和
。
- 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其化合物選自式（VII-1）、（VII-2）、（VII-3）、（VII-4）、（VII-5）和（VII-6）所示的結構，
， 其中， X 1、X 2、R 3、R 4、T 1和L 1如請求項1所定義。
- 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其化合物選自式（VII-1R）、（VII-1S）、（VII-2R）、（VII-2S）、（VII-3R）、（VII-3S）、（VII-4R）和（VII-4S）所示的結構，
, 其中， X 1、X 2、R 3、R 4、T 1和L 1如請求項1所定義。
- 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其化合物選自式（VII-1RT）、（VII-1ST）、（VII-2RT）、（VII-2ST）、（VII-3RT）、（VII-3ST）、（VII-5T）和（VII-6T）所示的結構，
， 其中， X 1、X 2、R 3、R 4、T 1和L 1如請求項1所定義。
- 如請求項1所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其化合物選自下列所示的結構，
， 其中， X 1、X 2、R 3、R 4、T 1和L 1如請求項1所定義。
- 一種下列化合物或其藥學上可接受的鹽，
。
- 如請求項14所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其化合物選自，
。
- 如請求項14所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其化合物選自：
。
- 如請求項14所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，其化合物選自：
。
- 一種如請求項1~17任意一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽在製備治療與白細胞介素-1受體相關激酶4蛋白降解靶向嵌合體相關疾病的藥物中的應用。
- 如請求項18所述的應用，所述與白細胞介素-1受體相關激酶4蛋白降解靶向嵌合體相關疾病是炎症或免疫類疾病。
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