TW202214261A

TW202214261A - 硼酸類化合物

Info

Publication number: TW202214261A
Application number: TW110130943A
Authority: TW
Inventors: 東輝秦
Original assignee: 大陸商輝諾生物醫藥科技（杭州）有限公司
Priority date: 2020-08-20
Filing date: 2021-08-20
Publication date: 2022-04-16
Also published as: KR20230104117A; CN116615431A; WO2022037680A1; JP2023538645A; EP4201942A1

Abstract

本發明公開了一類新的硼酸類化合物，具體公開了式 (Ⅱ) 或 (Ⅱ’) 所示化合物、其醫藥上可接受的鹽或其立體異構物，及其在製備治療細菌感染相關疾病的藥物中的應用。

Description

硼酸類化合物

本發明涉及一類新的硼酸類化合物，具體涉及式 (Ⅱ) 或 (Ⅱ’) 所示化合物、其醫藥上可接受的鹽或其立體異構物，以及其在製備治療細菌感染相關疾病的藥物中的應用。

自1928年英國科學家弗萊明首先發現青黴素以來，β-內醯胺類抗生素挽救了不計其數的生命。隨著各種β-內醯胺酶的湧現，β-內醯胺抗生素日益失去其應有的活性，如絲胺酸水解酶ESBLs，KPCs，金屬β-內醯胺酶(MBLs) 在各種細菌中分佈的比例越來越高，細菌給人類的安全風險也日益加劇。以苯硼酸為代表的一類化合物對金屬β-內醯胺酶 (MBLs) 有顯著的抑制作用。

以美羅培南/vaborbactam為代表的抗生素與硼酸β-內醯胺酶抑制劑組合藥物的上市，為硼酸β-內醯胺酶抑制劑開發點燃了希望，Rempex Pharmaceuticals公司（WO2018/005662A1）報導了通過修飾苯硼酸獲得的一類硼酸β-內醯胺酶抑制劑，通過對該系列化合物的優化，得到了臨床一期開發階段的化合物QPX7728，目前該化合物由Qpex Biopharma公司在推進臨床。另外，硼酸β-內醯胺酶抑制劑目前在開發階段的化合物還有VenatoRx Pharmaceuticals公司開發的VNRX-5133（WO2014/089365），目前處於臨床三期。

基於嚴峻的耐藥形勢，開發出新一代的廣譜β-內醯胺酶抑制劑，解決目前的耐藥問題是當務之急，本發明中的硼酸分子具有相應的潛質。

本發明提供了式 (Ⅱ) 或 (Ⅱ’) 所示化合物或其醫藥上可接受的鹽，

(Ⅱ) 或

(Ⅱ’)，其中，B為硼； T為-O-、-S-或-Se-；各R ₁獨立地為-OH或C _1-3烷氧基； R ₂和R ₃各自獨立地為H或C _1-3烷基，其中所述C _1-3烷基任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代； R ₄為H、F、Cl、Br、I、C _1-3烷基或C _1-3烷氧基，其中所述C _1-3烷基和C _1-3烷氧基各自獨立地任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代； R ₅為H、F、Cl、Br、I或C _1-3烷氧基； R ₆為H、F、Cl、Br、I、-OR _a或C _1-3烷基，其中所述C _1-3烷基任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代；或R ₅和R ₆與它們所連接的碳原子一起形成5-6元含氧非芳基雜環，其中所述5-6元含氧非芳基雜環任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代； R ₇為H、C _1-3烷基、-C(R _b) ₂OC(=O)R _c或-C(R _b) ₂OC(=O)OR _c，其中所述C _1-3烷基任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代； R _a為H、C _1-6烷基、

、

、

或

，其中所述C _1-6烷基、

、

、

和

各自獨立地任選被1、2或3個R _a1所取代；各R _b獨立地為H或C _1-3烷基； R _c為H、C _1-3烷基、

或

，其中所述C _1-3烷基、

和

各自獨立地任選被1、2或3個R _c1所取代；各R _a1獨立地為F、Cl、Br、I、C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、

、

、

或

，其中所述C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、

、

、

和

各自獨立地任選被1、2或3個R所取代；各R _c1獨立地為F、Cl、Br、I、-OH、C _1-3烷基或C _1-3烷氧基；各R獨立地為F、Cl、Br、I、-OH或C _1-3烷基，其中所述C _1-3烷基任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I和

的取代基所取代。

在本發明的一些方案中，上述化合物具有式 (Ⅱ-1)、(Ⅱ’-1)、(Ⅱ-2) 或 (Ⅱ’-2) 所示結構：

(Ⅱ-1)、

(Ⅱ’-1)、

(Ⅱ-2) 或

(Ⅱ’-2)，其中，R ₁、R ₂、R ₃、R ₄、R ₅、R ₆和R ₇如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述化合物具有式 (I) 或 (I’) 所示結構：

(I) 或

(I’)，其中，T、R ₁、R ₂、R ₃、R ₄、R ₅和R ₆如本發明所定義。

本發明提供了式 (I) 所示化合物或其醫藥上可接受的鹽，

(I)，其中，B為硼； T為-O-、-S-或-Se-； R ₁為-OH或C _1-3烷氧基； R ₂和R ₃各自獨立地為H或C _1-3烷基，其中所述C _1-3烷基任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代； R ₄為H、F、Cl、Br或I； R ₅為H、F、Cl、Br、I或C _1-3烷氧基； R ₆為H、F、Cl、Br、I、-OR _a或C _1-3烷基，其中所述C _1-3烷基任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代； R _a為H或C _1-3烷基，其中所述C _1-3烷基任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I和

的取代基所取代。

在本發明的一些方案中，上述化合物具有式 (I-1)、(I’-1)、(I-2) 或 (I’-2) 所示結構：

(I-1)、

(I’-1)、

(I-2) 或

(I’-2)，其中，R ₁、R ₂、R ₃、R ₄、R ₅和R ₆如本發明所定義。在本發明的一些方案中，上述化合物具有式 (I-1) 或 (I-2) 所示結構：

(I-1) 或

(I-2)，其中，R ₁、R ₂、R ₃、R ₄、R ₅和R ₆如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述醫藥上可接受的鹽具有式 (I-3)、(I-4)、(I-5) 或 (I-6) 所示結構：

(I-3)、

(I-4)、

(I-5) 或

(I-6)，其中，R ₂、R ₃、R ₄、R ₅和R ₆如本發明所定義。在本發明的一些方案中，上述醫藥上可接受的鹽具有式 (I-3) 或 (I-4) 所示結構：

(I-3) 或

(I-4)，其中，R ₂、R ₃、R ₄、R ₅和R ₆如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述各R ₁獨立地為-OH或-OCH ₃，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R ₁為-OH或-OCH ₃，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R ₂和R ₃各自獨立地為H或-CH ₃，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R ₄為H、F、Cl、-CH ₃或-OCH ₂CH ₃，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R ₅為H、F、Cl或-OCH ₃，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述各R獨立地為F、Cl、Br、I、-CH ₃或

，其中所述-CH ₃或

各自獨立地任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I和

的取代基所取代，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述各R獨立地為F、Cl、Br、I、-CH ₃、

或

，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述各R _a1獨立地為F、Cl、Br、I、-OCH ₃、

、

或

，其中所述-OCH ₃、

、

和

各自獨立地任選被1、2或3個R所取代，R及其他變數如本發明所定義。

、

或

，R及其他變數如本發明所定義。

、

、

、

或

。

在本發明的一些方案中，上述R _a為H、-CH ₃、-CH ₂CH ₃、

、

、

或

，其中所述-CH ₃、-CH ₂CH ₃、

、

和

各自獨立地任選被1、2或3個R _a1所取代，R _a1及其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R _a為H、-CH ₃、

、

、

、-CH ₂CH ₃、

、

、

、

、

、

、

或

，R _a1及其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R _a為H、-CH ₃、

、

、

、

、

、

、

、

、

、-CH ₂CH ₃、

、

、

、

、

、

、

、

、

或

，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R _a為H、-CH ₃或-CH ₂CH ₃，其中所述-CH ₃和-CH ₂CH ₃任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I和

的取代基所取代，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R _a為H、-CH ₃、-CF ₃、-CH ₂CH ₃或

，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R ₆為H、F、Cl、Br、I、-OR _a或-CH ₃，其中所述-CH ₃任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代，R _a及其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R ₆為H、F、Cl、Br、I、-OH、-OCH ₃、-OCH ₂CH ₃、-CH ₃、-CH ₂OH、-CH ₂OCH ₃、

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或

，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R ₆為H、F、Cl、Br、I、-OH、-OCH ₃、-OCF ₃、-OCH ₂CH ₃、

、-CH ₃或-CH ₂OH，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述結構單元

為

，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述各R _b獨立地為H，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述各R _c1獨立地為-OCH ₃，其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R _c為H、-CH ₃、-CH ₂CH ₃、

、

或

，其中所述-CH ₃、-CH ₂CH ₃、

、

和

各自獨立地任選被1、2或3個R _c1所取代，R _c1及其他變數如本發明所定義。

在本發明的一些方案中，上述R ₇為H、

、

、

、

、

、

、

或

，其他變數如本發明所定義。

本發明還有一些方案是由上述變數任意組合而來。

本發明還提供了下式化合物或其醫藥上可接受的鹽，

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或

。

本發明還提供了下式化合物，

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或

。

在本發明的一些方案中，上述醫藥上可接受的鹽為鈉鹽。

本發明還提供了一種醫藥組合物，其包含治療有效量的上述化合物或其醫藥上可接受的鹽、β-內醯胺抗菌劑以及醫藥上可接受的載劑。

在本發明的一些方案中，上述β-內醯胺抗菌劑為青黴素類、頭孢菌素類、頭黴素類、氧頭孢烯類、碳青黴烯類或單環內醯胺類。

在本發明的一些方案中，上述β-內醯胺抗菌劑為阿莫西林、哌拉西林、替凱西林、阿洛西林、美洛西林、頭孢唑啉、頭孢拉定、頭孢噻吩、頭孢呋辛、頭孢克羅、頭孢替安、頭孢丙烯、頭孢噻肟、頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢哌酮、頭孢唑肟、頭孢甲肟、頭孢地嗪、頭孢泊肟酯、頭孢克肟、頭孢布烯、頭孢匹羅、頭孢吡肟、頭孢西丁、頭孢美唑、、帕尼培南、胺曲南、卡蘆莫南、頭孢西丁、頭孢美唑、拉氧頭孢、氟氧頭孢、亞胺培南、美羅培南、頭孢洛紮或頭孢地爾。在本發明的一些方案中，上述β-內醯胺抗菌劑為美羅培南。

本發明還提供了上述化合物、其醫藥上可接受的鹽或上述醫藥組合物在製備β-內醯胺酶抑制劑藥物中的應用。

本發明還提供了上述化合物、其醫藥上可接受的鹽或上述醫藥組合物在製備治療細菌感染相關疾病的藥物中的應用。在一些實施例中，所述細菌感染相關疾病是由表現β-內醯胺酶的細菌引起的。在一些實施例中，所述細菌感染相關疾病是由肺炎克雷伯菌或大腸埃希菌引起的。

技術效果

本發明公開了一類新的硼酸β-內醯胺酶抑制劑，與抗生素聯用具有較強的抗菌活性，尤其對各種表現β-內醯胺酶的細菌，水溶性好；無論口服還是靜脈投予均具有良好的暴露量，藥動學性質優異；安全性好；與抗生素聯用，能顯著恢復抗生素的活力，具有良好的藥效，將用於治療與細菌感染相關的疾病。

定義和說明

除非另有說明，本文所用的下列術語和短語旨在具有下列含義。一個特定的術語或短語在沒有特別定義的情況下不應該被認為是不確定的或不清楚的，而應該按照普通的含義去理解。當本文中出現商品名時，意在指代其對應的商品或其活性成分。

這裡所採用的術語“醫藥上可接受的”，是針對那些化合物、材料、組合物和/或劑型而言，它們在可靠的醫學判斷的範圍之內，適用於與人類和動物的組織接觸使用，而沒有過多的毒性、刺激性、過敏性反應或其它問題或併發症，與合理的利益/風險比相稱。

術語“醫藥上可接受的鹽”是指本發明化合物的鹽，由本發明發現的具有特定取代基的化合物與相對無毒的酸或鹼製備。當本發明的化合物中含有相對酸性的功能團時，可以通過在純的溶液或合適的惰性溶劑中用足夠量的鹼與這類化合物接觸的方式獲得鹼加成鹽。醫藥上可接受的鹼加成鹽包括鈉、鉀、鈣、銨、有機胺或鎂鹽或類似的鹽。當本發明的化合物中含有相對鹼性的官能團時，可以通過在純的溶液或合適的惰性溶劑中用足夠量的酸與這類化合物接觸的方式獲得酸加成鹽。醫藥上可接受的酸加成鹽的實例包括無機酸鹽，所述無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硝酸、碳酸，碳酸氫根，磷酸、磷酸一氫根、磷酸二氫根、硫酸、硫酸氫根、氫碘酸、亞磷酸等；以及有機酸鹽，所述有機酸包括如乙酸、丙酸、異丁酸、馬來酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、鄰苯二甲酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、檸檬酸、酒石酸和甲磺酸等類似的酸；還包括胺基酸（如精胺酸等）的鹽，以及如葡糖醛酸等有機酸的鹽。本發明的某些特定的化合物含有鹼性和酸性的官能團，從而可以被轉換成任一鹼或酸加成鹽。

本發明的醫藥上可接受的鹽可由含有酸根或鹼基的母體化合物通過常規化學方法合成。一般情況下，這樣的鹽的製備方法是：在水或有機溶劑或兩者的混合物中，經由游離酸或鹼形式的這些化合物與化學計量的適當的鹼或酸反應來製備。

本發明的化合物可以存在特定的幾何或立體異構物形式。本發明設想所有的這類化合物，包括順式和反式異構物、(-)- 和 (+)-對映體、( R)- 和 ( S)-對映體、非對映異構物、( D)-異構物、( L)-異構物，及其外消旋混合物和其他混合物，例如對映異構物或非對映體富集的混合物，所有這些混合物都屬於本發明的範圍之內。烷基等取代基中可存在另外的不對稱碳原子。所有這些異構物以及它們的混合物，均包括在本發明的範圍之內。

除非另有說明，術語“對映異構物”或者“旋光異構物”是指互為鏡像關係的立體異構物。

除非另有說明，術語“順反異構物”或者“幾何異構物”系由因雙鍵或者成環碳原子單鍵不能自由旋轉而引起。

除非另有說明，術語“非對映異構物”是指分子具有兩個或多個對掌性中心，並且分子間為非鏡像的關係的立體異構物。

除非另有說明，“(+)”表示右旋，“(-) ”表示左旋，“(±)”表示外消旋。

除非另有說明，用楔形實線鍵（

）和楔形虛線鍵（

）表示一個立體中心的絕對組態，用直形實線鍵（

）和直形虛線鍵（

）表示立體中心的相對組態，用波浪線（

）表示楔形實線鍵（

）或楔形虛線鍵（

），或用波浪線（

）表示直形實線鍵（

）和直形虛線鍵（

）。

除非另有說明，術語“互變異構物”或“互變異構物形式”是指在室溫下，不同官能團異構物處於動態平衡，並能很快的相互轉化。若互變異構物是可能的 (如在溶液中)，則可以達到互變異構物的化學平衡。例如，質子互變異構物 (proton tautomer) (也稱質子轉移互變異構物 (prototropic tautomer)) 包括通過質子遷移來進行的互相轉化，如酮-烯醇異構化和亞胺-烯胺異構化。價鍵異構物 (valence tautomer) 包括一些成鍵電子的重組來進行的相互轉化。其中酮-烯醇互變異構化的具體實例是戊烷-2,4-二酮與4-羥基戊-3-烯-2-酮兩個互變異構物之間的互變。

除非另有說明，術語“富含一種異構物”、“異構物富集”、“富含一種對映體”或者“對映體富集”指其中一種異構物或對映體的含量小於100%，並且，該異構物或對映體的含量大於等於60%，或者大於等於70%，或者大於等於80%，或者大於等於90%，或者大於等於95%，或者大於等於96%，或者大於等於97%，或者大於等於98%，或者大於等於99%，或者大於等於99.5%，或者大於等於99.6%，或者大於等於99.7%，或者大於等於99.8%，或者大於等於99.9%。

除非另有說明，術語“異構物過量”或“對映體過量”指兩種異構物或兩種對映體相對百分數之間的差值。例如，其中一種異構物或對映體的含量為90%，另一種異構物或對映體的含量為10%，則異構物或對映體過量（ee值）為80%。

可以通過的對掌性合成或對掌性試劑或者其他常規技術製備光學活性的( R)-和( S)-異構物以及 D和 L異構物。如果想得到本發明某化合物的一種對映體，可以通過不對稱合成或者具有對掌性助劑的衍生作用來製備，其中將所得非對映體混合物分離，並且輔助基團裂開以提供純的所需對映異構物。或者，當分子中含有鹼性官能團（如胺基）或酸性官能團（如羧基）時，與適當的光學活性的酸或鹼形成非對映異構物的鹽，然後通過本領域所公知的常規方法進行非對映異構物拆分，然後回收得到純的對映體。此外，對映異構物和非對映異構物的分離通常是通過使用層析法完成的，所述層析法採用對掌性固定相，並任選地與化學衍生法相結合（例如由胺生成胺基甲酸鹽）。

本發明的化合物可以在一個或多個構成該化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素標記化合物，比如氚（ ³H），碘-125（ ¹²⁵I）或C-14（ ¹⁴C）。又例如，可用重氫取代氫形成氘代藥物，氘與碳構成的鍵比普通氫與碳構成的鍵更堅固，相比於未氘化藥物，氘代藥物有降低毒副作用、增加藥物穩定性、增強療效、延長藥物生物半衰期等優勢。本發明的化合物的所有同位素組成的變換，無論放射性與否，都包括在本發明的範圍之內。

術語“任選”或“任選地”指的是隨後描述的事件或狀況可能但不是必需出現的，並且該描述包括其中所述事件或狀況發生的情況以及所述事件或狀況不發生的情況。

針對藥物或藥理學活性劑而言，術語“有效量”或“治療有效量”是指無毒的但能達到預期效果的藥物或藥劑的足夠用量。對於本發明中的口服劑型，組合物中一種活性物質的“有效量”是指與該組合物中另一種活性物質聯用時為了達到預期效果所需要的用量。有效量的確定因人而異，取決於受體的年齡和一般情況，也取決於具體的活性物質，個案中合適的有效量可以由熟習此項技術者根據常規試驗確定。

術語“被取代的”是指特定原子上的任意一個或多個氫原子被取代基取代，取代基可以包括重氫和氫的變體，只要特定原子的價態是正常的並且取代後的化合物是穩定的。當取代基為氧（即=O）時，意味著兩個氫原子被取代。氧取代不會發生在芳香基上。術語“任選被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有規定，取代基的種類和數目在化學上可以實現的基礎上可以是任意的。

當任何變數（例如R）在化合物的組成或結構中出現一次以上時，其在每一種情況下的定義都是獨立的。因此，例如，如果一個基團被0-2個R所取代，則所述基團可以任選地至多被兩個R所取代，並且每種情況下的R都有獨立的選項。此外，取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。

當一個連接基團的數量為0時，比如-(CRR) ₀-，表示該連接基團為單鍵。

當其中一個變數選自單鍵時，表示其連接的兩個基團直接相連，比如A-L-Z中L代表單鍵時表示該結構實際上是A-Z。

當一個取代基為空缺時，表示該取代基是不存在的，比如A-X中X為空缺時表示該結構實際上是A。當所列舉的取代基中沒有指明其通過哪一個原子連接到被取代的基團上時，這種取代基可以通過其任何原子相鍵合，例如，吡啶基作為取代基可以通過吡啶環上任意一個碳原子連接到被取代的基團上。

當所列舉的連接基團沒有指明其連接方向，其連接方向是任意的，例如，

中連接基團L為-M-W-，此時-M-W-既可以按與從左往右的讀取順序相同的方向連接環A和環B構成

，也可以按照與從左往右的讀取順序相反的方向連接環A和環B構成

。所述連接基團、取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。

除非另有規定，當某一基團具有一個或多個可連接位點時，該基團的任意一個或多個位點可以通過化學鍵與其他基團相連。當該化學鍵的連接方式是不定位的，且可連接位點存在H原子時，則連接化學鍵時，該位點的H原子的個數會隨所連接化學鍵的個數而對應減少變成相應價數的基團。所述位點與其他基團連接的化學鍵可以用直形實線鍵（

）、直形虛線鍵（

）、或波浪線（

）表示。例如-OCH ₃中的直形實線鍵表示通過該基團中的氧原子與其他基團相連；

中的直形虛線鍵表示通過該基團中的氮原子的兩端與其他基團相連；

中的波浪線表示通過該苯基基團中的1和2位碳原子與其他基團相連；

表示該哌啶基上的任意可連接位點可以通過1個化學鍵與其他基團相連，至少包括

、

、

、

這4種連接方式，即使-N-上畫出了H原子，但是

仍包括

這種連接方式的基團，只是在連接1個化學鍵時，該位點的H會對應減少1個變成相應的一價哌啶基。

除非另有規定，本發明中的“B”表示硼。

除非另有規定，術語“C _1-3烷基”用於表示直鏈或支鏈的由1至3個碳原子組成的飽和碳氫基團。所述C _1-3烷基包括C _1-2和C _2-3烷基等；其可以是一價（如甲基）、二價（如亞甲基）或者多價（如次甲基）。C _1-3烷基的實例包括但不限於甲基 (Me)、乙基 (Et)、丙基 (包括 n-丙基和異丙基) 等。除非另有規定，“C _2-8烯基”用於表示直鏈或支鏈的包含至少一個碳-碳雙鍵的由2至8個碳原子組成的碳氫基團，碳-碳雙鍵可以位於該基團的任何位置上。所述C _2-8烯基包括C _2-6、C _2-4、C _2-3、C ₄、C ₃和C ₂烯基等；其可以是一價、二價或者多價。C _2-8烯基的實例包括但不限於乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、丁間二烯基、戊間二烯基、己間二烯基等。

除非另有規定，術語“C _1-6烷基”用於表示直鏈或支鏈的由1至6個碳原子組成的飽和碳氫基團。所述C _1-6烷基包括C _1-5、C _1-4、C _1-3、C _1-2、C _2-6、C _2-4、C ₆和C ₅烷基等；其可以是一價（如甲基）、二價（如亞甲基）或者多價（如次甲基）。C _1-6烷基的實例包括但不限於甲基 (Me)、乙基 (Et)、丙基 (包括 n-丙基和異丙基)、丁基 (包括 n-丁基，異丁基， s-丁基和 t-丁基)、戊基 (包括 n-戊基，異戊基和新戊基)、己基等。

除非另有規定，術語“C _1-3烷氧基”表示通過一個氧原子連接到分子的其餘部分的那些包含1至3個碳原子的烷基基團。所述C _1-3烷氧基包括C _1-2、C _2-3、C ₃和C ₂烷氧基等。C _1-3烷氧基的實例包括但不限於甲氧基、乙氧基、丙氧基 (包括正丙氧基和異丙氧基) 等。

除非另有規定，術語“5-6元含氧非芳基雜環”是指除1個O外包含選自O、N和S的雜原子中的相同或者不同的0~3個雜原子的由5-6個原子組成的單環的非芳基雜環，其中N任選地被四級銨化，C和S雜原子可任選被氧化 (即C(=O)和S(=O) _p，p是1或2)，包括具有部分不飽和的環狀基團和具有部分交聯的結構的基團，非芳基雜環可與芳基或者雜芳基形成稠和環。所述5-6元含氧非芳基雜環包括5元和6元含氧非芳基雜環等。5-6元含氧非芳基雜環包括5-6元雜環烯基。5-6元雜環烯基的實例包括但不限於

、

、

、

、

、

或

。

除非另有規定，C _n-n+m或C _n-C _n+m包括n至n+m個碳的任何一種具體情況，例如C _1-12包括C ₁、C ₂、C ₃、C ₄、C ₅、C ₆、C ₇、C ₈、C ₉、C ₁₀、C ₁₁、和C ₁₂，也包括n至n+m中的任何一個範圍，例如C _1-12包括C _1-3、C _1-6、C _1-9、C _3-6、C _3-9、C _3-12、C _6-9、C _6-12、和C _9-12等；同理，n元至n+m元表示環上原子數為n至n+m個，例如3-12元環包括3元環、4元環、5元環、6元環、7元環、8元環、9元環、10元環、11元環、和12元環，也包括n至n+m中的任何一個範圍，例如3-12元環包括3-6元環、3-9元環、5-6元環、5-7元環、6-7元環、6-8元環、和6-10元環等。

術語“離去基團”是指可以被另一種官能團或原子通過取代反應（例如親核取代反應）所取代的官能團或原子。例如，代表性的離去基團包括三氟甲磺酸酯；氯、溴、碘；磺酸酯基，如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、對溴苯磺酸酯、對甲苯磺酸酯等；醯氧基，如乙醯氧基、三氟乙醯氧基等等。

術語“保護基”包括但不限於“胺基保護基”、“羥基保護基”或“巰基保護基”。術語“胺基保護基”是指適合用於阻止胺基氮位上副反應的保護基團。代表性的胺基保護基包括但不限於：甲醯基；醯基，例如鏈烷醯基（如乙醯基、三氯乙醯基或三氟乙醯基）；烷氧基羰基，如叔丁氧基羰基(Boc)；芳基甲氧羰基，如苄氧羰基(Cbz)和9-茀甲氧羰基(Fmoc)；芳基甲基，如苄基（Bn）、三苯甲基(Tr)、1,1-二-（4'-甲氧基苯基）甲基；甲矽烷基，如三甲基甲矽烷基（TMS）和叔丁基二甲基甲矽烷基（TBS）等等。術語“羥基保護基”是指適合用於阻止羥基副反應的保護基。代表性羥基保護基包括但不限於：烷基，如甲基、乙基和叔丁基；醯基，例如鏈烷醯基（如乙醯基）；芳基甲基，如苄基（Bn），對甲氧基苄基（PMB）、9-茀基甲基(Fm)和二苯基甲基（二苯甲基，DPM）；甲矽烷基，如三甲基甲矽烷基（TMS）和叔丁基二甲基甲矽烷基（TBS）等等。

本發明的化合物可以通過熟習此項技術者所熟知的多種合成方法來製備，包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及熟習此項技術者所熟知的等同替換方式，較佳的實施方式包括但不限於本發明的實例。

本發明的化合物可以通過熟習此項技術者所熟知的常規方法來確認結構，如果本發明涉及化合物的絕對組態，則該絕對組態可以通過本領域常規技術手段予以確證。例如單晶X射線衍射法（SXRD），把培養出的單晶用Bruker D8 venture衍射儀收集衍射強度資料，光源為CuKα輻射，掃描方式：φ/ω掃描，收集相關資料後，進一步採用直接法 (Shelxs97) 解析晶體結構，便可以確證絕對組態。

本發明採用下述縮略詞：aq代表水；eq代表當量；DCM代表二氯甲烷；DMF代表N, N-二甲基甲醯胺；DIPEA代表二異丙基乙基胺；EA代表乙酸乙酯；EtOAc代表乙酸乙酯；THF代表四氫呋喃；MeCN代表乙腈；NCS代表N-氯代丁二醯亞胺；NBS代表N-溴代丁二醯亞胺；PE代表石油醚；TFA代表三氟乙酸；TFAA代表三氟乙酸酐；TEA代表三乙胺；HPLC代表高效液相層析法；Boc ₂O代表二碳酸二叔丁酯；DMAP代表4-二甲胺基吡啶；LDA代表二異丙基胺基鋰；DIAD代表偶氮二甲酸二異丙酯；SEM-Cl代表2-(三甲矽烷基)乙氧甲基氯；CD ₃OD代表氘代甲醇；CDCl ₃代表氘代氯仿；D ₂O代表氘代水；CFU代表菌落形成單位；i.v代表靜脈注射投予；i.p代表腹腔注射投予；PPh ₃代表三苯基膦；Pd(Pph3) ₂Cl ₂.CH ₂Cl ₂代表1,1-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物；Pd(Pph3) ₂Cl ₂代表[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀；LiHMDS代表六甲基二矽基胺基鋰；LiAlH ₄代表四氫鋁鋰。

具體實施方式

下面通過實例對本發明進行詳細描述，但並不意味著對本發明任何不利限制。本發明的化合物可以通過熟習此項技術者所熟知的多種合成方法來製備，包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及熟習此項技術者所熟知的等同替換方式，較佳的實施方式包括但不限於本發明的實例。對熟習此項技術者而言，在不脫離本發明精神和範圍的情況下針對本發明具體實施方式進行各種變化和改進將是顯而易見的。

實例 1

步驟一：化合物1-2的製備

向化合物1-1（100 g，523.57 mmol，1eq）的DCM（1000 mL）溶液中添加DMAP（3.20 g，26.18 mmol，0.05eq）和Boc ₂O（137.12 g，628.28 mmol，144.34 mL，1.2 eq）。將混合溶液在25℃下攪拌1小時。將混合溶液用100 mL的稀HCl水溶液 (0.5 mol/L) 洗滌；有機層經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到化合物1-2。

步驟二：化合物1-3的製備

在-70℃下，向化合物1-2的THF (1500 mL) 溶液中滴加LDA (2 M, 329.77 mL, 1.2 eq)，並攪拌2個小時。這個混合溶液用HCl水溶液 (2 mol/L，500 mL) 洗滌，並用EtOAc (100 mL × 1) 萃取。有機相用鹽水 (300 mL × 1) 洗滌後，用無水Na ₂SO ₄乾燥後，過濾，濾液減壓濃縮後得到粗產品。這個粗產品用石油醚/乙酸乙酯=3/1 (100 mL) 洗滌，過濾，濾餅乾燥得到產品1-3。

步驟三：化合物1-4的製備

向化合物1-3（31 g，106.49 mmol，1eq）的DCM（50 mL）溶液中滴加TFA（79.57 g，697.81 mmol，51.67 mL，6.55 eq）。然後將混合溶液在20℃下攪拌12小時。將反應混合物減壓濃縮以除去溶劑。將殘餘物用DCM ( 50mL) 洗滌，在減壓下過濾並乾燥濾餅，得到化合物1-4。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 7.74 (dd, J= 5.5, 9.0 Hz, 1H), 6.67 (dd, J= 8.9, 10.5 Hz, 1H)。

步驟四：化合物1-5的製備

將化合物1-4（25 g，106.38 mmol，1 eq）溶解在DMF（1.5 mL）和丙酮（63.20 g，1.09 mol，80 mL，10.23 eq）的混合溶液中。在0℃下，向混合溶液中滴加TFAA（151.00 g，718.94 mmol，100 mL，6.76 eq）和TFA（10 mL）。將混合溶液升溫至100℃攪拌12小時。將混合溶液倒入飽和的Na ₂CO ₃（500 mL）中並攪拌10分鐘。再用乙酸乙酯（150 mL × 2）萃取。合併的有機相用鹽水（15 mL × 2）洗滌，無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至20/1）後的粗產物用PE（40 mL）洗滌，過濾並減壓乾燥濾餅，得到化合物1-5。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.72 - 7.63 (m, 1H), 6.78 - 6.65 (m, 1H), 1.77 - 1.64 (m, 6H)。

步驟五：化合物1-6的製備

在氮氣保護下，將化合物1-5（8.8 g，31.99 mmol，1 eq），雙聯頻哪醇硼酸酯（12.19 g，47.99 mmol，1.5 eq），1,1-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物 (5.23 g, 6.40 mmol, 0.2 eq) 和乙酸鉀（9.42 g，95.98 mmol，3 eq）溶解在二氧六環 (100 mL) 中，並用N ₂置換3次，然後將混合溶液在65℃下攪拌5小時。減壓濃縮反應混合物以除去溶劑。殘餘物通過矽膠柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝1/0至10/1）得到化合物1-6。

步驟六：化合物1-7的製備

將化合物1-6（4.24 g, 13.16 mmol, 1 eq）溶於四氫呋喃（40 mL）和水（20 mL）的混合溶劑中，在0℃下加入高硼酸鈉四水合物（5.06 g, 32.91 mmol, 2.5 eq），然後將混合物在氮氣保護下於25℃攪拌1個小時。向反應混合物中加入20 mL水，並用乙酸乙酯（20 mL × 2）萃取，用鹽水（40 mL × 1）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗產物用石油醚（10 mL）洗滌純化，過濾，濾餅真空乾燥，得化合物1-7。

步驟七：化合物1-8的製備

將化合物1-7 (457 mg, 1.84 mmol, 1 eq) 和化合物2-(2-溴丙烷-2-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷 (389.49 mg, 1.84 mmol, 1 eq) 溶於DMF (5 mL)，在25℃下向該混合物中加入碳酸鉀 (279.08 mg, 2.02 mmol, 1.1 eq)，然後將該混合物於25℃下攪拌12小時。向混合物中加入15 mL水，並用乙酸乙酯（20 mL × 3）萃取，用鹽水（20 mL × 2）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 0/1至1/1），得化合物1-8。LCMS (ESI) m/z: 381.2 (M+1)。

步驟八：化合物1的製備

將化合物1-8 (37 mg, 97.31 μmol, 1 eq) 溶於異丙醇（1 mL）中，在0℃下加入NaOH (3 M, 64.88 μL, 2 eq)。然後將混合物在25℃下攪拌2小時。將反應液過濾，通過製備型HPLC純化(層析柱: Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 μm；移動相: 10 mmol/L碳酸氫銨水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%-10%，8min）得化合物1。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.75 (dd, J= 5.4, 8.8 Hz, 1H), 6.41 (dd, J= 8.9, 10.5 Hz, 1H), 1.14 (s, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 223.1 (M-18+1)。

實例 2

步驟一：化合物2的製備

將化合物1-8 (100 mg, 263.01 μmol, 1 eq) 溶於MeOH (2 mL)中，於0℃下向該混合物物中加入氫氧化鈉水溶液 (3 mol/L, 175.34 μL, 2 eq)，然後於25℃下攪拌2小時。將該反應混合物通過製備型高效液相層析法（層析柱: Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 μm；移動相: 10 mmol/L碳酸氫銨水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%-31%，9min）分離純化得化合物2。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.66 (dd, J= 5.8, 8.9 Hz, 1H), 6.33 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 1.13 (s, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 255.1 (M+1)。

實例 3

步驟一：化合物3-2的製備

將化合物3-1 (5 g, 27.45 mmol, 1 eq) 溶於氯仿 (100 mL)中，在0℃下向該混合物中加入液溴 (4.39 g, 27.45 mmol, 1.41 mL, 1 eq)，然後將該混合物在25℃下攪拌30小時。將該混合物直接真空濃縮，殘留物通過（石油醚/乙酸乙酯 = 5/1，40 mL）洗滌純化得化合物3-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 12.87 (s, 1H), 7.62 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 6.40 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H)。

步驟二：化合物3-3的製備

將化合物3-2 (5.44 g, 22.02 mmol, 1 eq) 溶於DMF (0.2 mL) 和丙酮 (13.43 g, 231.24 mmol, 17 mL, 10.50 eq)，在0℃向該混合物中加入三氟乙酸酐 (31.71 g, 150.98 mmol, 21 mL, 6.86 eq) 和三氟乙酸 (2 mL)，然後在100℃下攪拌12小時。將該反應液倒入飽和碳酸鈉水溶液 (100 mL) 中攪拌十分鐘，並用乙酸乙酯（50 mL × 2）萃取，用鹽水（15 mL × 2）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚 /乙酸乙酯 = 0/1至3/1），得化合物3-3。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.60 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.51 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 1.68 (s, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 286.9 (M+1)。

步驟三：化合物3-4的製備

將化合物3-3 (1.52 g, 5.29 mmol, 1 eq) 與雙聯頻哪醇硼酸酯 (3.36 g, 13.24 mmol, 2.5 eq) 混合，溶於二氧六環(15 mL)，向該混合物中加入乙酸鉀 (1.56 g, 15.88 mmol, 3 eq) 和1,1-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物，然後將混合物在氮氣保護下於65℃攪拌5小時。向該混合液中加入乙酸乙酯 (20 mL)，過濾並真空濃縮。向濃縮液中加入水50 mL，並用乙酸乙酯（20 mL × 2）萃取，有機相用鹽水（50 mL × 1）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 0/1至5/1），得化合物3-4。LCMS (ESI) m/z: 335.1 (M+1)。

步驟四：化合物3-5的製備

將化合物3-4 (1.45 g, 4.34 mmol, 1 eq) 溶於四氫呋喃 (20 mL) 和水 (10 mL) 中，在0℃下向該混合物中加入高硼酸鈉四水合物 (1.67 g, 10.85 mmol, 2.09 mL, 2.5 eq)。將該混合物在25℃下攪拌1小時。向混合物中加入20 mL水，並用乙酸乙酯（20mL × 2）萃取，有機相用鹽水（40 mL × 1）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 20/1至0/1），得化合物3-5。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.08 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.48 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 1.68 (s, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 225.0 (M+1)。

步驟五：化合物3-6的製備

將2-碘甲基-硼酸頻那醇酯 (1.00 g, 3.75 mmol, 3 eq) 和化合物3-5 (280 mg, 1.25 mmol, 1 eq) 溶於乙腈 (5 mL) 中，在25℃下向該混合物中加入K ₂CO ₃(258.90 mg, 1.87 mmol, 1.5 eq)。然後將該混合物在氮氣保護下於65℃攪拌4小時。向混合物中加入10 mL水，並用乙酸乙酯（10mL × 3）萃取，有機相用鹽水（20mL × 2）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮，得化合物3-6。LCMS (ESI) m/z: 283.1(M+1)。

步驟六：化合物3的製備

將化合物3-6 (355 mg, 1.26 mmol, 1 eq) 溶於異丙醇 (2 mL)，於0℃下加入氫氧化鈉水溶液 (1 M, 3.78 mL, 3 eq)，然後將該混合物於25℃下攪拌2小時。過濾後，濾液通過製備型HPLC分離（層析柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 μm；移動相：10 mmol/L碳酸氫銨水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%-6%，5 min）得化合物3。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.50 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.19 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.39 (s, 2H)；LCMS (ESI) m/z: 207.0 (M-18+1)。

實例 4

步驟一：化合物4-2的製備

將化合物1-7 (1 g, 4.71 mmol, 1 eq) 溶在乙酸 (15 mL) 中，加入NCS (755.21 mg, 5.66 mmol, 1.2 eq)，然後將反應液在氮氣保護下於105℃攪拌12小時。向混合物中加入20 mL水，並用乙酸乙酯（20 mL × 1）萃取，合併的有機相用鹽水（10 mL × 1）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮，殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 10/0 至 8/1），得化合物4-2。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 7.06 - 6.97 (m, 1H), 1.79 (s, 6H)。

步驟二：化合物4-3的製備

將化合物4-2 (250 mg, 1.01 mmol, 1 eq) 溶在乙腈 (5 mL) 中，加入2-碘甲基-硼酸頻那醇酯 (543.14 mg, 2.03 mmol, 2 eq)，碳酸鉀 (210.16 mg, 1.52 mmol, 1.5 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下於60℃攪拌3小時。向混合物中加入水 ( 20 mL) 並用乙酸乙酯 ( 20 mL × 1) 萃取，合併的有機相用鹽水 (20 mL × 1) 洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥, 過濾並真空濃縮。通過製備型高效液相層析法分離（層析柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；移動相：含0.1% TFA的純水溶液和乙腈：移動相中乙腈的比例從25 %-55 %，10 min），得化合物4-3。

步驟三：化合物4的製備

將化合物4-3 (200 mg, 656.89 μmol, 1 eq) 溶在異丙醇 (2 mL)中，慢慢在氮氣保護下，0℃加入NaOH水溶液 (1 mol/L, 1.31 mL, 2 eq)，然後將反應液在氮氣保護下于升溫至25℃攪拌1小時。通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 μm；移動相：10 mmol/L碳酸氫銨水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%-6%，4 min）得化合物4。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.39 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 3.46 (s, 2H)；LCMS (ESI) m/z: 246.9 (M+1)。

實例 5

步驟一：化合物5-2的製備

將化合物5-1 (3.7 g, 17.84 mmol, 1 eq) 溶在DCM (40 mL)中，分別加入Boc ₂O (4.67 g, 21.40 mmol, 4.92 mL, 1.2 eq)，DMAP (108.95 mg, 891.77 μmol, 0.05 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下於25℃攪拌16小時。向混合物中加入20 mL水，用0.5 mol/L的鹽酸水溶液調pH=3-4，並用二氯甲烷（50 mL × 2）萃取，合併的有機相用鹽水（100 mL × 2）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得化合物5-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.45 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.16 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 2.3, 8.6 Hz, 1H), 1.49 (s, 9H)。

步驟二：化合物5-3的製備

將化合物5-2 (5.4 g, 17.56 mmol, 1 eq) 溶在THF (60 mL)中，慢慢在氮氣保護下，-78℃加入LDA (2 M, 10.53 mL, 1.2 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下於-78℃攪拌2小時，向混合物中加入NH ₄Cl (50 mL) 淬滅反應，並用乙酸乙酯 (40 mL × 3) 萃取，用鹽水 (100 mL × 2) 洗滌，合併的有機相經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮，殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至20/1），得化合物5-3。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 11.61 (s, 1H), 7.44 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 6.78 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 1.57 (s, 9H)。

步驟三：化合物5-4的製備

將化合物5-3 (1 g, 3.25 mmol, 1 eq) 溶在DCM (4 mL)中，慢慢在氮氣保護下，0℃加入三氟乙酸 (6.16 g, 54.02 mmol, 4 mL, 16.62 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下于升溫至25℃攪拌12小時，真空濃縮，再用二氯甲烷 (5 mL) 在室溫下攪拌，過濾，用二氯甲烷洗滌濾餅，收集濾餅得化合物5-4。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 7.59 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 6.93 (d, J= 8.6 Hz, 1H)。

步驟四：化合物5-5的製備

將化合物5-4 (3.3 g, 13.12 mmol, 1 eq) 溶在TFA (20 mL)中，加入丙酮 (2.29 g, 39.37 mmol, 2.89 mL, 3 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下於0℃加入TFAA (8.27 g, 39.37 mmol, 5.48 mL, 3 eq) 和DMF (191.85 mg, 2.62 mmol, 201.94 μL, 0.2 eq)，升溫到105℃，攪拌32小時。真空濃縮，加入飽和NaHCO ₃(20 mL) 並用乙酸乙酯 (20 mL × 3)萃取，用鹽水（50 mL× 2) 洗滌，有機相用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮，殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 20/1至0/1）得化合物5-5。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.59 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.02 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 1.71 (s, 6H)；LCMS (ESI) m/z:292.8 (M+1)。

步驟五：化合物5-6的製備

將化合物5-5 (1.4 g, 4.80 mmol, 1 eq)，雙聯頻哪醇硼酸酯 (1.83 g, 7.20 mmol, 1.5 eq), 1,1-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物 (784.35 mg, 960.47 μmol, 0.2 eq)，乙酸鉀 (1.41 g, 14.41 mmol, 3 eq)，溶于無水二氧六環 (20 mL)。氮氣置換三次，升溫到65℃攪拌5小時，真空濃縮。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 10/0至0/1），得化合物5-6。LCMS (ESI) m/z: 339 (M+1)。

步驟六：化合物5-7的製備

將化合物5-6 (2.9 g, 8.56 mmol, 1 eq) 溶在THF (18 mL)和H ₂O (9 mL)中，加入四水合高硼酸鈉(2.64 g, 17.13 mmol, 3.29 mL, 2 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下於25℃攪拌2小時。向混合物中加入 H ₂O (10 mL)，並用乙酸乙酯 (20 mL ×3)萃取，有機相用鹽水 (50 mL × 2) 洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥, 過濾並真空濃縮, 通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 10/1至5/1），得化合物5-7。LCMS (ESI) m/z: 229 (M+1)。

步驟七：化合物5-8的製備

將化合物5-7 (840 mg, 3.67 mmol, 1 eq) 溶在乙腈 (10 mL)中，加入2-碘甲基-硼酸頻哪醇酯 (1.97 g, 7.35 mmol, 2 eq)，K ₂CO ₃(761.69 mg, 5.51 mmol, 1.5 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下於60℃攪拌3小時。向混合物中加入水 (10 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL × 3) 萃取，用鹽水 (30 mL × 2) 洗滌有機相, 經無水Na ₂SO ₄乾燥, 過濾並真空濃縮。通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 10/1至0/1）得化合物5-8。LCMS (ESI) m/z: 287 (M+1)。

步驟八：化合物5的製備

將化合物5-8 (200 mg, 698.15 μmol, 1 eq) 溶在異丙醇 (1 mL)中，慢慢在氮氣保護下，0℃加入NaOH水溶液 (1 mol/L, 1.40 mL, 2 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下於0-25℃攪拌1小時。通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 μm；移動相：10 mmol/L 碳酸氫銨水溶液和乙腈：移動相中乙腈的比例從1%-6%，4 min）得化合物5。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.48 (s, 2H), 3.41 (s, 2H)；LCMS (ESI)m/z: 229 (M+1)；211 (M-18+1)。

實例 6

步驟一：化合物6-2的製備

將化合物6-1 (10 g, 47.85 mmol, 1 eq) 溶在DCM (100 mL)中，分別加入Boc ₂O (12.53 g, 57.42 mmol, 13.19 mL, 1.2 eq)，DMAP (292.28 mg, 2.39 mmol, 0.05 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下於25℃攪拌16小時。向混合物中加入50 mL水，並用二氯甲烷（50 mL × 2）萃取，合併的有機相用鹽水（100 mL × 2）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮，得化合物6-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.37 (dd, J= 8.0, 9.3 Hz, 1H), 7.04 (dd, J= 7.3, 10.1 Hz, 1H), 1.50 (s, 9H)。

步驟二：化合物6-3的製備

將化合物6-2 (8.1 g, 26.20 mmol, 1 eq) 溶在THF (90 mL)中，慢慢在氮氣保護下，-78℃加入LDA (2 M, 19.65 mL, 1.5 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下於-78℃攪拌2小時，向混合物中加入飽和NH ₄Cl水溶液 (50 mL)，並用乙酸乙酯 (40 mL × 3) 萃取，合併的有機相用鹽水 (100 mL × 2) 洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮，殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至20/1），得化合物6-3。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 11.77 (s, 1H), 7.59 - 7.41 (m, 1H), 1.56 (s, 9H)。

步驟三：化合物6-4的製備

將化合物6-3 (5.1 g, 16.50 mmol, 1 eq) 溶在DCM (15 mL)中，慢慢在氮氣保護下，0℃加入三氟乙酸 (23.10 g, 202.59 mmol, 15.00 mL, 12.28 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下于升溫至25℃攪拌2小時，混合物真空濃縮，再用二氯甲烷 (25 mL) 在室溫下洗滌，過濾，收集濾餅得到6-4。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 7.77 (dd, J= 8.1, 9.9 Hz, 1H)。

步驟四：化合物6-5的製備

將化合物6-4 (2.5 g, 9.88 mmol, 1 eq) 溶在TFA (30 mL)中，加入丙酮 (1.72 g, 29.64 mmol, 2.18 mL, 3 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下於0℃加入TFAA (6.23 g, 29.64 mmol, 4.12 mL, 3 eq) 和DMF (144.46 mg, 1.98 mmol, 152.06 μL, 0.2 eq)，升溫到105℃，攪拌32小時。真空濃縮，加入飽和NaHCO ₃水溶液 (50 mL) 並用乙酸乙酯 (20 mL × 3) 萃取，有機相用鹽水 (50 mL × 2) 洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮，殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 20/1至0/1），得化合物6-5。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.60 (dd, J= 7.7, 9.3 Hz, 1H), 1.71 (s, 6H)；LCMS (ESI)m/z: 294 (M+1)。

步驟五：化合物6-6的製備

將化合物6-5 (900 mg, 3.07 mmol, 1 eq)，雙聯頻哪醇硼酸酯 (1.17 g, 4.61 mmol, 1.5 eq)，1,1-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物 (501.58 mg, 614.21 μmol, 0.2 eq)，乙酸鉀 (904.19 mg, 9.21 mmol, 3 eq)溶于無水二氧六環(10 mL)。氮氣置換三次，升溫到65℃攪拌5小時，真空濃縮。通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 10/0至0/1），得化合物6-6。LCMS (ESI)m/z: 341 (M+1)。

步驟六：化合物6-7的製備

將化合物6-6 (680 mg, 2.00 mmol, 1 eq) 溶在THF (6 mL) 和H ₂O (3 mL)中，加入高硼酸鈉四水合物 (922.82 mg, 6.00 mmol, 1.15 mL, 3 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下於25℃攪拌2小時。向混合物中加入H ₂O (10 mL)，並用乙酸乙酯 (30 mL × 3)萃取，有機相用鹽水 (80 mL × 2) 洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮，殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 10/1至5/1）得化合物6-7。LCMS (ESI)m/z: 231.4 (M+1)。

步驟七：化合物6-8的製備

將化合物6-7 (320 mg, 1.39 mmol, 1 eq) 溶在乙腈 (5 mL)中，加入2-碘甲基-硼酸頻哪醇酯 (744.93 mg, 2.78 mmol, 2 eq) 和K ₂CO ₃(384.30 mg, 2.78 mmol, 2 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下於60℃攪拌3小時。向混合物中加入水 (10 mL)，並用乙酸乙酯 (30 mL × 3) 萃取，有機相用鹽水（80 mL ×2) 洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾，濾液真空濃縮。殘留物通過製備型HPLC純化（柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15μm；移動相：含0.1%TFA的水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從20%-50%，10min）得化合物6-8。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.01 (dd, J= 7.1, 11.5 Hz, 1H), 3.71 (s, 2H), 1.70 (s, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 288.9 (M+1)。

步驟八：化合物6的製備

將化合物6-8 (100 mg, 347.21 μmol, 1 eq) 溶在異丙醇 (2 mL)中，慢慢在氮氣保護下，0℃加入NaOH (1 M, 694.42 μL, 2 eq)，然後將反應混合物在氮氣保護下逐漸升溫至25℃，繼續攪拌1小時。粗品通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 μm；移動相：10 mmol/L 碳酸氫銨水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%-6%，4 min）得化合物6。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.40 (br dd, J= 8.3, 11.8 Hz, 1H), 3.40 (s, 2H)；LCMS (ESI) m/z: 230.9 (M+1)；213 (M-18+1)。

實例 7

步驟一：化合物7-2的製備

向化合物7-1（10 g，48.20 mmol，1 eq）的DCM（100 mL）溶液中加入Boc ₂O（12.62 g，57.84 mmol，13.29 mL，1.2 eq）和DMAP（294.45 mg，2.41mmol，0.05 eq），混合溶液在25℃下攪拌1小時。向混合溶液中加入H ₂O（50 mL），並用乙酸乙酯（50 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（100 mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾，濾液真空濃縮，得化合物7-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.39 (dd, J= 1.5, 8.0 Hz, 1H), 7.33 - 7.29 (m, 1H), 7.14 (dd, J= 1.5, 8.2 Hz, 1H), 7.17 - 7.12 (m, 1H), 1.59 (s, 9H)。

步驟二：化合物7-3的製備

向化合物7-2（7 g，22.76 mmol，1eq）的THF（100 mL）溶液中加入LDA（2 M，13.66 mL，1.2eq）。並在-70℃下攪拌2小時。將混合溶液用H ₂O（20 mL）淬滅完全，並用EtOAc（40mL × 3）萃取。合併的有機相用NaCl水溶液（100 mL× 2）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並在減壓下濃縮。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝1/0，20/1）得到化合物7-3。

步驟三：化合物7-4的製備

在0℃，氮氣保護下，向化合物7-3（5.1 g，16.58 mmol，1 eq）的DCM（25 mL）溶液中添加TFA（38.50 g，337.66 mmol，25 mL，20.36eq），然後在25℃攪拌12小時。將該化合物真空濃縮。將粗產物在25℃下用DCM（25mL）洗滌。得到化合物7-4。

步驟四：化合物7-5的製備

在0℃下，將化合物7-4（3.0 g，11.93 mmol，1 eq）溶解在TFA（40 mL）中，並添加丙酮（2.08 g，35.79 mmol，2.63 mL，3 eq）、TFAA（7.52 g，35.79 mmol，4.98 mL，3 eq）和DMF（174.40 mg，2.39 mmol，183.58 μL，0.2 eq）。將混合溶液在20℃下攪拌0.5小時。然後加熱至105℃並再攪拌32小時。將溶液真空濃縮，然後加入NaHCO ₃溶液（20 mL），並用乙酸乙酯（30 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（50mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝ 1 / 0至50 / 1），然後將化合物在25℃下用石油醚（40 mL）洗滌。得到化合物7-5。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.68 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.11 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 1.80 (s, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 292.8 (M+1)。

步驟五：化合物7-6的製備

在氮氣保護下，將化合物7-5（770 mg，2.64 mmol，1 eq），雙聯頻哪醇硼酸酯（1.01 g，3.96 mmol，1.5 eq），1,1-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物（431.39 mg，528.26 μmol，0.2 eq），乙酸鉀（777.66 mg，7.92 mmol，3 eq）加入到1，4二氧六環（3 mL）中，並在25℃下用氮氣置換3次，然後將混合溶液在N ₂氣氛下於65℃攪拌5小時。將反應混合物在減壓下濃縮以除去溶劑。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝100/1，10/1）得到化合物7-6。LCMS (ESI) m/z: 339 (M+1)。

步驟六：化合物7-7的製備

向化合物7-6 (1.3 g, 3.84 mmol, 1 eq) 的THF（20 mL）和H ₂O（10 mL）的混合溶液中加入高硼酸鈉四水合物（1.77 g，11.52 mmol，2.22 mL，3 eq），這個混合溶液在25℃攪拌16小時。向溶液中加入H ₂O（10 mL），水相用乙酸乙酯（30 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（80mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝ 10/1，5/1）獲得化合物7-7。LCMS (ESI) m/z: 229 (M+1)。

步驟七：化合物7-8的製備

在25℃下，向化合物7-7（100 mg，437.39 μmol，1 eq）的乙腈（3 mL）溶液中加入2-碘甲基-硼酸頻那醇酯（234.35 mg，874.78 μmol，2 eq）和K ₂CO ₃（120.90 mg，874.78 μmol，2 eq），然後在60℃攪拌 3小時。向溶液中加入H ₂O（5 mL），水相用0.5 mol/L的HCl調整pH = 3-4，並用乙酸乙酯（10 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（30mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。獲得化合物7-8。LCMS (ESI) m/z: 287 (M+1)。

步驟八：化合物7的製備

在0℃，向化合物7-8（140 mg，488.70 μmol，1 eq）的異丙醇（1 mL）溶液中加入NaOH水溶液（1 M，977.40 μL，2 eq），然後在25℃下攪拌1小時。該溶液直接用製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150×25 mm×5 μm；移動相：10 mmol/L 碳酸氫銨水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%-6%，4min）得化合物7。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6. 49 (s, 2H), 3.41 (s, 2H)；LCMS (ESI) m/z: 229 (M+1)；211 (M-18+1)。

實例 8

步驟一：化合物8-2的製備

向（1S，2S，6R，8S）-4-（溴甲基）-2,9,9-三甲基-3,5-二氧雜-4-硼雜三環[6.1.1.0 ^2,6]癸烷 (1.85 g, 6.79 mmol, 1.2 eq) 的DMF（15 mL）溶液加入K ₂CO ₃（1.02 g，7.35 mmol，1.3 eq）和化合物1-7（1.2 g，5.66 mmol，1eq）。將混合溶液在20℃攪拌12小時。將反應混合物用50 mL H ₂O稀釋並用EtOAc（100 mL × 2）萃取。合併的有機層用NaCl水溶液（20 mL × 2）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過矽膠柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝1/0至20/1）得到化合物8-2。

步驟二：化合物8-3的製備

向化合物8-2 (900 mg, 2.23 mmol, 1 eq) 的DMF（10 mL）溶液中加入K ₂CO ₃（769.26 mg，5.57 mmol，2.5eq）和CH ₃I（948.04 mg，6.68 mmol，415.81 μL，3 eq）。將混合溶液在20℃攪拌12小時，向反應混合溶液中加入H ₂O（30 mL），減壓過濾，濾餅減壓乾燥得到一部分化合物8-3，濾液用EtOAc（30 mL × 2）萃取，合併的有機層經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到剩餘的化合物8-3。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ) δ = 8.21 - 7.93 (m, 2H), 7.29 - 7.17 (m, 1H), 7.03 - 6.91 (m, 1H), 3.77 - 3.61 (m, 2H), 1.71 (s, 6H)。

步驟三：化合物8的製備

在0℃下，向化合物8-3（220 mg，814.76 μmol，1 eq）的 i-PrOH（即異丙醇，2.5 mL）溶液中加入NaOH（2 M，814.76 μL，2 eq）並攪拌1小時，減壓濃縮反應混合物以除去溶劑。殘餘物通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 μm；移動相：10 mmol/L碳酸氫銨水溶液和乙腈；乙腈的比例從1%至6%，4 min）得到化合物8。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.49 (dd, J= 5.8, 8.7 Hz, 1H), 6.29 - 6.18 (m, 1H), 3.43 - 3.38 (m, 2H)；LCMS (ESI) m/z: 213.1 (M+1)。

實例 9

步驟一：化合物9的製備

在0℃下，向化合物8-3（300 mg，1.11 mmol，1eq）的MeOH（2.5 mL）溶液中滴加NaOH水溶液（2 M，1.11 mL，2 eq）並攪拌1小時。減壓濃縮反應混合物以除去溶劑。殘餘物通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 μm；移動相：10 mol/L的碳酸氫銨水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%- 26%，9min）得到化合物9。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.69 - 6.58 (m, 1H), 6.31 - 6.20 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.38 (s, 2H)；LCMS (ESI) m/z: 227.1 (M+1)。

實例 10

步驟一：化合物10-2的製備

在25℃下，將化合物10-1（10 g，64.06 mmol，1eq）和NBS（12.54 g，70.46 mmol，1.1eq）加入到AcOH (50 mL)中，混合溶液在80℃下攪拌24小時。在0℃下，將混合溶液倒入水（115 mL）中。然後過濾，濾餅乾燥得到化合物10-2。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 7.61 (ddd, J= 3.1, 8.1, 11.2 Hz, 2H)；LCMS (ESI) m/z: 234.9 (M+1)。

步驟二：化合物10-3的製備

在0℃下，將化合物10-2（12.74 g，54.21 mmol，1 eq）溶解在TFA（100 mL）中，並加入丙酮（9.45 g，162.63 mmol，11.96 mL，3 eq），TFAA（34.16 g，162.63 mmol，22.62 mL，3 eq）和DMF（792.50 mg，10.84 mmol，834.21 μL，0.2 eq）。然後在25℃攪拌1小時。然後升溫到100℃並再攪拌35小時。將混合溶液在減壓下濃縮，得到殘餘物，然後在0℃下，向殘餘物中加入NaHCO ₃水溶液（500mL），然後用EA (200 mL) 萃取。有機層用100 mL鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。將殘餘物通過矽膠柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝0/1至10/1）純化，得到化合物10-3。LCMS (ESI) m/z: 274.8 (M+1)。

步驟三：化合物10-4的製備

在氮氣保護下，將化合物10-3（1.78 g，6.47 mmol，1 eq），雙聯頻哪醇硼酸酯（2.46 g，9.71 mmol，1.5 eq），雙三苯基膦二氯化鈀（454.20 mg，647.11 μmol，0.1 eq），二叔丁基-[2-（2,4,6-三異丙基苯基）苯基]膦（549.58 mg，1.29 mmol，0.2 eq）和乙酸鉀（1.91 g，19.41 mmol，3 eq）加入到二氧六環（40 mL)中，並用N ₂置換3次，然後將混合溶液在氮氣保護下在55℃下攪拌5小時。向混合溶液中加入EA（20 mL），過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。向殘餘物中加入50mL H ₂O淬滅反應混合物，然後用EA（20 mL×2）萃取。有機層用50 mL鹽水洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到的殘餘物通過矽膠柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝1/0至0/1），得到化合物10-4。

步驟四:化合物10-5的製備

0℃下，將化合物10-4 (2.03 g, 6.30 mmol, 1 eq) 溶解在THF（20 mL）和水（10 mL）的混合溶液中，再加入高硼酸鈉四水合物（2.91 g，18.91 mmol，3.64 mL，3eq）。混合溶液在25℃下攪拌1小時。向反應混合溶液中加入水（20 mL），並用EA（20 mL × 2）萃取，合併的有機層用鹽水（40 mL × 1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到的殘餘物通過矽膠柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝20/1至0/1）純化，得到化合物10-5。LCMS (ESI) m/z: 213.1 (M+1)。

步驟五：化合物10-6的製備

在25℃下，將2-碘甲基-硼酸頻哪醇酯（631.32 mg，2.36 mmol，2 eq）和化合物10-5（250 mg，1.18 mmol，1 eq）溶解在乙腈（5 mL）中，並向該溶液中加入K ₂CO ₃（244.27 mg，1.77 mmol，1.5 eq）。然後在65℃下，攪拌4小時。向混合溶液中加入水（10mL），並用EA（10 mL × 3）萃取，合併的有機層用鹽水（20 mL × 2）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。粗產物通過製備型HPLC純化（柱：3-Phenomenex Luna C18 75 × 30 mm × 3 μm；移動相：含0.1%TFA的水溶液和乙腈，移動相中乙腈的含量從26%-56%，10 min），得到化合物10-6。LCMS (ESI) m/z: 270.9 (M+1)。

步驟六：化合物10的製備

在0℃下，向化合物10-6（100 mg，370.35 μmol，1 eq）的異丙醇（1 mL）溶液中滴加NaOH（1 M，740.69 μL，2 eq）。然後將混合溶液在25℃攪拌2小時。粗產物通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 μm；移動相：10 mmol/L碳酸氫銨水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%- 6%，4 min）得到化合物10。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.63 (dd, J= 3.3, 8.8 Hz, 1H), 6.56 (dd, J= 3.1, 9.9 Hz, 1H), 3.34 (s, 2H)；LCMS (ESI) m/z: 212.8(M+1)。

實例 11

步驟一：化合物11-2的製備

在0℃下，將化合物11-1（10 g, 54.89 mmol, 1 eq）溶在氯仿（200 mL）中，然後添加液溴（8.77 g，54.89 mmol，2.83 mL，1 eq）。在25℃下攪拌30小時。減壓濃縮混合物，得到殘餘物。將粗產物在25℃下用石油醚 /乙酸乙酯（150 mL，5/1）洗滌30分鐘。過濾得到化合物11-2。LCMS (ESI) m/z: 247.0 (M+1)。

步驟二：化合物11-3的製備

向化合物11-2（12.39 g，50.15 mmol，1eq）的三氟乙酸（100 mL）的溶液中添加丙酮（8.74 g，150.46 mmol，11.06 mL，3eq），於0℃加入三氟乙酸酐（31.60 g，150.46 mmol，20.93 mL，3 eq）和DMF（733.14 mg，10.03 mmol，771.73 μL，0.2eq），然後將混合物在25℃攪拌1小時，然後加熱到100℃並再攪拌47小時。將反應混合物在減壓下濃縮，得到殘餘物，並通過在0℃下添加到碳酸氫鈉水溶液（500 mL）中來淬滅，然後用乙酸乙酯 (200 mL × 1) 萃取。有機層用鹽水(100 mL × 1)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝1/0至5/1）純化粗產物。得到11-3。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.60 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.51 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 1.68 (s, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 288.9 (M+1)。

步驟三：化合物11-4的製備

將化合物11-3（3 g，10.45 mmol，1eq），雙聯頻哪醇硼酸酯（3.98 g，15.67 mmol，1.5 eq），1,1-雙(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(II)二氯甲烷複合物（1.71 g, 2.09 mmol, 0.2 eq），醋酸鉀（3.08 g，31.35 mmol，3 eq）混合於二氧六環 (40 mL)，並用氮氣置換3次，然後將混合物在氮氣氣氛下，65℃攪拌12小時。向混合物添加乙酸乙酯（50 mL），過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。混合物中添加水（50 mL），然後用乙酸乙酯（20 mL × 2）萃取。有機層用50 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝0/1至5/1）純化得到11-4的粗產物。LCMS (ESI) m/z: 335.1 (M+1)。

步驟四：化合物11-5的製備

將化合物11-4（1.23 g, 3.68 mmol, 1 eq）加入四氫呋喃（12 mL）和水（6 mL）中，在0℃下，加入高硼酸鈉四水合物（1.70 g，11.04 mmol，2.12 mL，3eq）。然後混合物在25℃下攪拌1小時。向反應混合物中加入水（20 mL），並用乙酸乙酯（20 mL × 2）萃取，合併的有機層用鹽水（40 mL × 1）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝20/1至0/1）純化得到11-5的粗產物。LCMS (ESI) m/z: 225.0 (M+1)。

步驟五：化合物11-6的製備

將化合物11-5（365 mg，1.63 mmol，1eq）和NCS（416.96mg，2.12mmol，1.3eq）混於四氫呋喃（10 mL）中，在50℃下攪拌5小時。向混合物中加入水（20 mL），並用乙酸乙酯（20 mL × 2）萃取，然後將合併的有機層用鹽水（50 mL × 1）洗滌，並用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物11-6和12-1的混合物，直接用於下一步反應。LCMS (ESI) m/z: 258.9 (M+1)。

步驟六：化合物11-7的製備

將2-碘甲基-硼酸頻那醇酯（1.69 g，6.32 mmol，2 eq）和化合物11-6和12-1的粗品（818 mg，3.16 mmol，1eq）混合於乙腈（10 mL），在25℃下，加入碳酸鉀（655.64 mg，4.74 mmol，1.5eq）。然後將混合物在65℃下攪拌4小時。向混合物中加入水（10 mL），並用乙酸乙酯（10 mL × 3）萃取，合併的有機層用鹽水（20 mL × 2）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到的殘餘物通過製備型HPLC純化（柱：Phenomenex luna C18 150 × 40 mm × 15 μm；移動相：含0.1%TFA的水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從23%-53%，8min）得到化合物11-7，LCMS (ESI) m/z: 317.0 (M+1)；和化合物12-2，LCMS (ESI) m/z: 351.1 (M+1)。

步驟七：化合物11的製備

化合物11-7（100 mg，315.96 μmol，1 eq）溶於異丙醇（1 mL）中，在0℃下加入氫氧化鈉水溶液（1 M，631.91 μL，2 eq），然後將混合物在25℃下攪拌2小時。粗產物通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 μm；移動相：10 mmol/L的碳酸氫銨水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%-6%，4min）得到化合物11。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.64 (s, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.22 (s, 2H)；LCMS (ESI) m/z: 240.9 (M-18+1)。

實例 12

步驟一：化合物12的製備

化合物12-2（100 mg，284.95 μmol，1 eq）溶於異丙醇（1 mL）中，在0℃下加入氫氧化鈉水溶液（1 M，569.89 μL，2 eq）。然後將混合物在25℃下攪拌2小時。粗產物通過製備型HPLC純化（層析柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 μm；移動相：10 mmol/L的碳酸氫銨水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%-6%，4 min）得到化合物12。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 3.71 (s, 3H), 3.31 (s, 2H)；LCMS (ESI) m/z: 274.9 (M-18+1)。

實例 13

步驟一：化合物13-2的製備

將化合物13-1（10 g，70.36 mmol，1eq）溶在二氯甲烷（100 mL）中，加入Boc ₂O（16.89 g，77.40 mmol，17.78 mL，1.1eq）和DMAP（429.79 mg，3.52mmol，0.05 eq），將混合物在25℃下攪拌16小時。反應液中加入水（50 mL），水相用乙酸乙酯（50 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（100 mL × 2）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮得到化合物13-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.98 (dd, J= 8.9, 10.8 Hz, 1H), 6.73 (dd, J= 2.8, 7.2 Hz, 1H), 6.67 - 6.60 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 1.49 (s, 9H)。

步驟二：化合物13-3的製備

將化合物13-2（16.9 g，69.76 mmol，1 eq）溶於四氫呋喃（170 mL）溶液中，在氮氣下於-70℃下滴加二異丙基胺基鋰（2 M，41.86 mL，1.2 eq），在-70℃下攪拌2小時。將反應混合物用1N稀鹽酸（20 mL）稀釋，並用乙酸乙酯（40 mL × 3）萃取。合併的有機層用食鹽水溶液（100 mL × 2）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝1 / 0至20 / 1）。得到化合物13-3。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.17 (dd, J= 9.2, 10.5 Hz, 1H), 6.67 (dd, J= 4.1, 9.3 Hz, 1H), 3.91 (d, J= 1.0 Hz, 3H), 1.66 (s, 9H)。

步驟三：化合物13-4的製備

在0℃向化合物13-3（12.25 g，50.57 mmol，1 eq）的二氯甲烷（35 mL）溶液中添加三氟乙酸（53.90 g，472.71 mmol，35 mL，9.35 eq），在25℃攪拌16小時。將該溶液減壓濃縮，得到的粗產物在25℃下用石油醚（70 mL）攪拌，過濾，濾餅乾燥得到化合物13-4。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 11.67 (s, 1H), 11.63 - 11.49 (m, 1H), 7.30 - 7.28 (m, 1H), 6.79 (dd, J= 3.9, 9.4 Hz, 1H), 4.26 (d, J= 2.9 Hz, 3H)。

步驟四：化合物13-5的製備

在0℃下，向化合物13-4（9.25 g，49.69 mmol，1 eq）的二氯甲烷（100 mL）溶液中分批加入NBS（9.29 g，52.18 mmol，1.05eq），然後在25℃下攪拌12小時。將該溶液真空濃縮。將粗產物與水（100 mL）混合在室溫下攪拌30分鐘。過濾得到化合物13-5。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 7.63 (d, J= 10.6 Hz, 1H), 3.95 (d, J= 1.3 Hz, 3H)；LCMS (ESI) m/z: 265 (M+1)。

步驟五：化合物13-6的製備

在0℃，向化合物13-5（12.38 g，46.71 mmol，1 eq）的三氟乙酸（130 mL）溶液中添加丙酮（8.14 g，140.13 mmol，10.30 mL，3 eq），三氟乙酸酐（29.43 g，140.13 mmol，19.49 mL，3 eq）和DMF（682.82 mg，9.34 mmol，718.76 μL，0.2 eq）。將混合物在105℃下攪拌48小時。將該溶液真空濃縮，然後加入碳酸氫鈉溶液（20 mL），用乙酸乙酯（30 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（50mL × 2）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝500/1至50/1），然後將化合物在0℃下用石油醚（100 mL）攪拌1小時。過濾得到化合物13-6。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.57 (d, J= 10.6 Hz, 1H), 4.08 (d, J= 2.2 Hz, 3H), 1.77 (s, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 305 (M+1)。

步驟六：化合物13-7的製備

在25℃下，將化合物13-6（2.7 g，8.85 mmol，1eq），雙聯頻哪醇硼酸酯（8.99 g，35.40 mmol，4 eq），雙三苯基膦二氯化鈀（621.15 mg，884.97 μmol，0.1 eq），醋酸鉀（3.47 g，35.40 mmol，4 eq），二叔丁基-[2-（2,4,6-三異丙基苯基）苯基]膦（751.58 mg，1.77 mmol，0.2 eq）混合於二氧六環（30 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在氮氣氣氛下在65℃下攪拌5小時。減壓濃縮反應混合物以除去溶劑。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯= 50/1至0/1），得粗品13-7。LCMS (ESI) m/z: 353 (M+1)。

步驟七：化合物13-8的製備

將化合物13-7（1 g，2.84 mmol，1eq）溶於四氫呋喃（10 mL）和水（5 mL）中，加入四水合高硼酸鈉（1.31 g，8.52 mmol，1.64 mL，3eq），在25℃下攪拌16小時。向溶液中加入水（30 mL），水相用乙酸乙酯（50mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（150mL × 2）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯= 20/1至5/1）得到化合物13-8。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.02 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 3.98 (d, J= 0.9 Hz, 3H), 1.77 (s, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 242.9 (M+1)。

步驟八：化合物13-9的製備

將化合物13-8（1.7 g，1.75 mmol，25%純度，1eq）溶在乙腈（20 mL）中，在20℃下加入2-碘甲基-硼酸頻哪醇酯（470.10 mg，1.75 mmol，1eq）和碳酸鉀（363.79 mg，2.63 mmol，1.5eq），然後在60℃攪拌3小時。向溶液中加入水（5 mL），用0.5 N稀鹽酸將水相調節pH＝3-4，用乙酸乙酯（10 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（30 mL × 2）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並真空濃縮。粗產物通過製備型HPLC純化（柱：Zhongpu RD-C18 150 × 25 mm × 3 μm；移動相：含0.1%TFA的水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從17%-47%，10min）得化合物13-9。LCMS (ESI) m/z: 300.9 (M+1)。

步驟九：化合物13的製備

將化合物13-9（60 mg，199.97 μmol，1 eq）溶在異丙醇（0.5 mL）中，在0°C下加入氫氧化鈉水溶液（1 M，399.94 μL，2 eq），然後在25℃下攪拌1小時。向溶液中加入丙酮，過濾並真空乾燥。得到化合物13。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.30 (d, J= 12.4 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.39 (s, 2H)；LCMS (ESI) m/z: 242.9 (M+1)；224.9 (M-18+1)。

實例 14

步驟一：化合物14-2的製備

在20℃下向化合物14-1 (30 g, 197.18 mmol, 25.42 mL, 1 eq) 和原甲酸三乙酯 (160.72 g, 1.08 mol, 180.38 mL, 5.5 eq) 的混合物中滴加HClO ₄(23.67 g, 164.93 mmol, 14.26 mL, 70% 純度, 8.36e-1 eq)，控制溫度不超過40℃，將混合物在20℃下攪拌1.5小時。然後加入甲基叔丁基醚 (600 mL) 後，過濾, 收集濾餅，溶於H ₂O (200 mL)，在80℃下攪拌2小時，用乙酸乙酯400mL（200 mL×2）萃取，用300 mL飽和食鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物14-2。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ = 10.78 (s, 1 H), 8.15 (d, J= 6.00 Hz, 1 H), 7.87 (s, 1 H), 6.92 (dd, J=8.76, 2.25 Hz, 1 H), 6.85 (d, J=2.13 Hz, 1 H), 6.22 (d, J=6.00 Hz, 1 H)。

步驟二：化合物14-3的製備

將化合物14-2(23.89 g, 147.34 mmol, 1 eq) 溶於EtOH (240 mL)，在N ₂下於20℃加入Pd/C (4.78 g, 10% 純度)。用氫氣置換數次後，反應物在H ₂(50 psi)下於55℃攪拌24小時。過濾除去Pd/C，濾液減壓蒸餾得到粗產物。通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至8/1）得到14-3。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ = 9.16 - 9.10 (m, 1 H), 6.89 - 6.81 (m, 1 H), 6.32 - 6.27 (m, 1 H), 6.20 - 6.15 (m, 1 H), 4.13 - 4.06 (m, 2 H), 2.70 - 2.61 (m, 2 H), 1.95 - 1.85 (m, 2 H)。

步驟三：化合物14-4的製備

將化合物14-3 (14.23 g, 94.76 mmol, 1 eq) 溶於DCM (150 mL) 中，在室溫下加入DMAP (578.82 mg, 4.74 mmol, 0.05 eq)，然後緩慢加入 Boc ₂O (24.82 g, 113.71 mmol, 26.12 mL, 1.2 eq)。該混合物於20℃下攪拌4小時。反應混合物在20℃下用HCl (0.2 M, 50 mL) 進行淬滅，並用DCM (150 mL) 萃取，用飽和食鹽水 (100 mL) 洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮得到化合物14-4，直接用於下一步。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.92 (d, J=8.25 Hz, 1 H), 6.56 (s, 1 H), 6.59 - 6.55 (m, 1 H), 4.11 - 4.06 (m, 2 H), 2.68 (t, J=6.50 Hz, 2 H), 1.95 - 1.86 (m, 2 H), 1.47 (s, 9 H)。

步驟四：化合物14-5的製備

將化合物14-4 (24.47 g, 97.77 mmol, 1 eq) 溶於THF (240 mL) 中，在N ₂下緩慢滴加LDA (2 M, 58.66 mL, 1.2 eq)，該混合物於-20℃下攪拌1.5小時。反應混合物在-78℃下用NH ₄Cl (300 mL) 進行淬滅，並用乙酸乙酯400 mL萃取，用飽和食鹽水 (200 mL) 洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮得到粗產物，通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝1/0）得到化合物14-5。LCMS (ESI) m/z: 195.2 (M-55)。

步驟五：化合物14-6的製備

將化合物14-5 (16.55 g, 66.12 mmol, 1 eq) 溶於DCM (50 mL)，在室溫下加入TFA (76.46 g, 670.59 mmol, 49.65 mL, 10.14 eq)。該混合物於20℃下攪拌1小時。減壓濃縮得到粗產物，粗產物在室溫下用PE:EA=20:1(126 mL) 攪拌10 min，過濾，濾餅乾燥得到化合物14-6。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.16 (d, J= 8.56 Hz, 1 H), 6.63 (d, J= 8.56 Hz, 1 H), 4.51 - 4.41 (m, 2 H), 2.78 (t, J= 6.48 Hz, 2 H), 2.16 - 2.07 (m, 2 H)。

步驟六：化合物14-7的製備

將化合物14-6（15.22 g, 78.38 mmol, 1 eq）溶於DCM (150 mL) 中，然後在室溫下加NBS（12.55 g, 70.54 mmol, 0.9 eq）。將混合物在0℃下攪拌1小時。反應混合物用100 mL H ₂O稀釋，並用DCM 100 mL萃取，用200 mL鹽水（100 mL×2）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。將粗產物在20℃下用石油醚:乙酸乙酯=20:1（126 mL）攪拌30分鐘，過濾，濾餅乾燥得到化合物14-7。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 12.77 - 12.69 (m, 1 H), 11.53 - 11.36 (m, 1 H), 7.51 - 7.42 (m, 1 H), 4.51 - 4.45 (m, 2 H), 2.82- 2.76 (m, 2 H), 2.19 - 2.08 (m, 2 H)。

步驟七：化合物14-8的製備

將化合物14-7(13.82 g, 50.61 mmol, 1 eq) 溶於TFA (56 mL)中，0℃下加入丙酮 (29.39 g, 506.08 mmol, 37.21 mL, 10 eq)，滴加TFAA (31.89 g, 151.82 mmol, 21.12 mL, 3 eq)，用氮氣置換數次後，反應物在N ₂下於100℃攪拌48小時。減壓濃縮除去溶劑，用NaHCO ₃飽和溶液200 mL稀釋並用EA300 mL (100 mL × 3)萃取。用飽和食鹽水（150 mL×1）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物，通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至5/1）得到化合物14-8。LCMS (ESI) m/z: 315.0 (M+3)。

步驟八：化合物14-9的製備

將化合物14-8（1 g, 1.60 mmol, 50% 純度, 1 eq）溶於二氧六環（20 mL）中，然後在氮氣流下加入頻哪醇硼酸酯（1.01 g, 3.99 mmol, 2.5 eq），乙酸鉀（470.10 mg, 4.79 mmol, 3 eq）和Pd（dppf）Cl ₂（233.67 mg, 319.34 µmol, 0.2 eq）。將混合物在氮氣保護下於70℃下攪拌12小時。將反應混合物過濾，然後用40 mL水稀釋，並用乙酸乙酯60 mL（30 mL × 2）萃取，用飽和食鹽水（60 mL×1）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1）得到化合物14-9。LCMS (ESI) m/z: 361.2 (M+1)。

步驟九：化合物14-10的製備

將化合物14-9（1.74 g, 4.82 mmol, 1 eq）溶於THF（10 mL）和H ₂O（10 mL）的混合溶液中。在20℃下加入四水合過硼酸鈉（1.48 g, 9.64 mmol, 2 eq），將混合物在20℃攪拌1小時。反應液用水20 mL稀釋，然後用乙酸乙酯80 mL（40 mL × 2）萃取，用飽和食鹽水（40 mL）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 10/1至4/1）得到化合物14-10。LCMS (ESI) m/z: 251.1 (M+1)。

步驟十：化合物14-11的製備

將化合物14-10（214 mg, 855.16 µmol, 1 eq）溶於乙腈（2 mL），在室溫下依次加入2-碘甲基頻哪醇硼酸酯（274.91 mg, 1.03 mmol, 1.2 eq），K ₂CO ₃（141.83 mg, 1.03 mmol, 1.2 eq)），加畢後用氮氣置換3次，然後將混合物在N ₂下於60℃攪拌6小時。將反應混合物減壓濃縮除去溶劑乙腈。將殘餘物用20 mL H ₂O稀釋，並用100 mL乙酸乙酯萃取（20 mL×5）。合併的有機層用30 mL鹽水（30mL×1）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物14-11。LCMS (ESI) m/z: 309.1 (M+1)。

步驟十一：化合物14的製備

將化合物14-11 (318 mg, 1.03 mmol, 1 eq) 溶於i-PrOH (1 mL)，室溫滴加 NaOH (2 M, 1.03 mL, 2 eq)。混合物20℃下攪拌反應2小時。反應混合物用H ₂O 1 mL稀釋，通過製備型HPLC純化(層析柱: Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相:含10 mM NH ₄HCO ₃的水和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%至6%，4 min)得到化合物14。LCMS (ESI) m/z: 251.0 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.34 (s, 1 H), 4.02 - 3.95 (m, 2 H), 3.20 (s, 2 H), 2.55 (t, J= 6.48 Hz, 2 H), 1.88 - 1.79 (m, 2 H)。

實例 15

步驟一：化合物15-2的製備

將LiHMDS（1 M的THF溶液，363.82 mL，3 eq）溶解在甲苯（150 mL）溶液中，冷卻至-70℃，在3分鐘內加入化合物15-1 (17 g, 121.27 mmol, 17.65 mL, 1 eq)的甲苯（20 mL）溶液，攪拌0.5小時，然後於0.5小時內加入4-甲基苯磺醯溴（59.87 g，254.67 mmol，2.1 eq）的四氫呋喃（50 mL）溶液，加入LiHMDS（1M，121.27mL，1 eq），加畢，緩慢升溫至20℃，攪拌0.5小時。向溶液中加入THF（50 mL），並在25℃下再攪拌0.5小時。將反應液倒入NH ₄Cl（100 mL）中並攪拌10分鐘。水相用乙酸乙酯（100 mL × 2）萃取。合併的有機相用鹽水（200 mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗品通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝1/0至100/1）。得到化合物15-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.32 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 6.64 - 6.59 (m, 1H), 6.43 (dd, J= 2.8, 8.9 Hz, 1H), 5.53 (s, 1H), 4.00 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 1.42 (t, J= 7.0 Hz, 3H)。

步驟二：化合物15-3的製備

將化合物15-2 (6.4 g, 29.48 mmol, 1 eq) 溶解在二氯甲烷 (70 mL)中，添加Boc ₂O（7.08 g，32.43 mmol，7.45 mL，1.1 eq）和DMAP（180.11 mg，1.47mmol，0.05 eq），將混合物在25℃下攪拌16小時。向反應液中加入H ₂O（50 mL），水相用乙酸乙酯（50 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（100mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮，無需純化得到化合物15-3。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.37 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 6.69 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 6.61 (dd, J= 2.9, 8.9 Hz, 1H), 3.93 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 1.50 (s, 9H), 1.33 (t, J= 7.0 Hz, 3H)。

步驟三：化合物15-4的製備

將化合物15-3（9 g，28.38 mmol，1 eq）溶解在四氫呋喃（90 mL）溶液中，加入LDA（1 M，34.05 mL，1.2 eq）在氮氣下於-70℃下，在-70℃下攪拌2小時。將反應混合物用NH ₄Cl（50 mL）稀釋，並用乙酸乙酯（50mL × 2）萃取。合併的有機層用NaCl水溶液（100 mL×2）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並在減壓下濃縮。將粗產物在25℃下用石油醚攪拌1小時，過濾，濾餅乾燥得到化合物15-4。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 12.29 (br s, 1H), 7.44 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 6.24 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 3.94 (q, J= 6.9 Hz, 2H), 1.53 (s, 9H), 1.38 (t, J= 7.0 Hz, 3H)。

步驟四：化合物15-5的製備

將化合物15-4 (5.15 g，16.24 mmol，1 eq）溶解在二氯甲烷（20 mL）溶液中，加入三氟乙酸(31.41 g, 275.47 mmol, 20.40 mL, 16.97 eq) 在氮氣下於0℃。升溫至25℃下攪拌2小時。將該化合物真空濃縮。將粗產物在25℃下用石油醚（20 mL）攪拌2小時，過濾，濾餅乾燥得到化合物15-5。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 12.87 (s, 1H), 7.60 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.37 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 4.26 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 1.51 (s, 3H)。

步驟五：化合物15-6的製備

將化合物15-5（4.2 g，16.09 mmol，1 eq）溶解在TFA（10 mL）溶液中，添加丙酮（2.80 g，48.26 mmol，3.55 mL，3 eq），在0℃下加入三氟乙酸酐（10.14 g，48.26 mmol，6.71 mL，3e q）和二甲基甲醯胺（235.17mg，3.22 mmol，247.55 μL，0.2 eq）。將混合物在20℃下攪拌0.5小時。然後加熱至105℃，再攪拌32小時。將溶液真空濃縮，然後添加NaHCO ₃溶液（30 mL），用乙酸乙酯（30 mL × 3）萃取。合併的有機相用飽和食鹽水（50mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗品通過矽膠柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝100/0，10/1），得到15-6。LCMS: 302.9 (M+3)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.56 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 6.48 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 4.09 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 1.68 (s, 6H), 1.45 (t, J= 7.0 Hz, 3H)。

步驟六：化合物15-7的製備

將化合物15-6（2.1 g，6.97 mmol，1 eq），4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（2.66 g，10.46 mmol，1.5 eq），Pd(dppf)Cl ₂.CH ₂Cl ₂（1.14）g，1.39 mmol，0.2 eq），乙酸鉀（2.05 g，20.92 mmol，3 eq）溶解於二氧六環（20 mL），置換氮氣三次，然後將混合物在氮氣保護下在65℃下攪拌5小時。將反應混合物過濾並減壓濃縮以除去溶劑。粗品通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 500/1至10/1），得到化合物15-7。LCMS: 349.0 (M+1)。

步驟七：化合物15-8的製備

將化合物15-7（3.6g，10.34mmol，1 eq）溶解在四氫呋喃（30 mL）和水（15 mL）溶液中，加入四水合高硼酸鈉（4.77g，31.02mmol，5.97mL，3 eq）在25℃下攪拌2小時。向溶液中加入水（10 mL），用0.5N的HCl調節pH＝3-4，水相用乙酸乙酯（30 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（80 mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗品通過矽膠柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 40/1至5/1）純化得到化合物15-8。LCMS: 239.0 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.04 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.47 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 4.04 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 1.68 (s, 6H), 1.42 (t, J= 7.0 Hz, 3H)。

步驟八：化合物15-9的製備

將化合物15-8（1.2 g，5.04 mmol，1 eq）溶解在乙腈（3 mL）溶液中，添加2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（2.70 g，10.07 mmol，2 eq），K ₂CO ₃（1.39 g，10.07 mmol，2eq）在25℃，然後在60℃攪拌3小時。向溶液中加入H ₂O（5 mL），將水相用0.5 N HCl調節pH = 3-4，用乙酸乙酯（10 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（30 mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗產物通過製備型HPLC純化（層析柱：Phenomenex luna C18（250×70 mm×15 µm）；移動相：水（含0.1%TFA）和乙腈；移動相中乙腈的含量從15%至45%，12 min）得到化合物15-9。LCMS (ESI) m/z: 297.1 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.07 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 6.47 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 4.08 - 4.03 (m, 2H), 3.70 (s, 2H), 1.67 (s, 6H), 1.43 (t, J= 6.9 Hz, 3H)。

步驟九：化合物15的製備

將化合物15-9 (100 mg, 337.75 µmol, 1 eq) 溶解在異丙醇（1.5 mL），在0℃下加入NaOH (1 M, 675.49 μL, 2 eq)，然後在25℃下攪拌1小時。向溶液中加入丙酮，過濾並真空濃縮，得到化合物15。LCMS (ESI) m/z: 239.1 (M+1), 221 (M-18+1)； ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.46 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 6.16 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 3.96 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 3.38 (s, 2H), 1.33 (t, J= 7.0 Hz, 3H)。

實例 16

步驟一：化合物16-2的製備

將化合物16-1（15 g，105.54 mmol，1 eq）溶於二氯甲烷（300 mL）中，加入液溴（18.55 g，116.09 mmol，5.98 mL，1.1 eq），在-15℃下攪拌1小時。然後將混合物在10℃下攪拌1小時。在0-5℃加入亞硫酸鈉（5 mL）淬滅反應混合物。用乙酸乙酯（10 mL）萃取。有機層用鹽水（10 mL）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物16-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.98 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.76 (d, J= 11.9 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H)。

步驟二：化合物16-3的製備

向化合物16-2（23.2 g，104.97 mmol，1 eq）的二氯甲烷（200 mL）溶液中加入DMAP（641.18 mg，5.25 mmol，0.05 eq）和Boc ₂O（25.20 g，115.46mmol，26.53mL，1.1 eq）。將混合物在25℃下攪拌12小時。在0-5℃下加入鹽酸水溶液（1mL，0.5 N）淬滅反應混合物。分離的有機層用30 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物16-3。

步驟三：化合物16-4的製備

在-78℃時，向16-3（27 g，84.08 mmol，1 eq）的四氫呋喃（200 mL）溶液中添加二異丙基胺基鋰（1 M，100.89 mL，1.2 eq）。將混合物在-78℃下攪拌2小時。在-78℃下添加100 mL氯化銨水溶液淬滅反應混合物，然後用250mL 乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水150 mL洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 100/1至50/1）純化殘餘物，得到化合物16-4。

步驟四：化合物16-5的製備

在0-5℃下，向化合物16-4（23 g，71.62 mmol，1 eq）在二氯甲烷（100 mL）中的溶液中添加三氟乙酸（154.00 g，1.35 mol，100 mL，18.86 eq），將混合物在20℃下攪拌1小時。減壓濃縮反應混合物，得到殘餘物。將粗產物用二氯甲烷（20 mL）攪拌，過濾，濾餅乾燥得到化合物16-5。LCMS (ESI) m/z: 265.1/266.9 (M+1/M+3)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.38 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H)。

步驟五：化合物16-6的製備

在0-5℃下，向化合物16-5（8g，30.18 mmol，1 eq）的三氟乙酸（190mL）溶液中，加入三氟乙酸酐（25.36g，120.74mmol，16.79mL 4 eq），丙酮（7.01 g，120.74 mmol，8.88 mL，4 eq）和N,N-二甲基甲醯胺（441.27 mg，6.04 mmol，464.49 μL，0.2 eq），混合物在105℃下攪拌 32小時。將反應混合物濃縮，將殘餘物用水（100 mL）稀釋，用乙酸乙酯（50mL × 2）萃取。合併的有機層用鹽水（20 mL×2）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過矽膠柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯=50/1至5/1），得到化合物16-6。LCMS (ESI) m/z: 304.9(M+1)。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.34 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 1.69 (s, 6H)。

步驟六：化合物16-7的製備

將化合物16-6（1.1 g，3.61 mmol，1eq），雙聯頻那醇硼酸酯（2.75 g，10.82 mmol，3 eq），醋酸鉀（1.06 g，10.82 mmol，3 eq），四三苯基膦鈀（208.31 mg，180.27 µmol，0.05 eq）混合於二氧六環（30 mL）中，用N ₂置換3次，然後將混合物在65℃在氮氣氣氛下攪拌17 h。將反應混合物在減壓下濃縮以除去溶劑。將殘餘物用50 mL水稀釋，並用乙酸乙酯50 mL萃取。將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝20/1至5/1）純化，得化合物16-7。LCMS (ESI) m/z: 270.9 (M+1)。

步驟七：化合物16-8的製備

將化合物16-7（1 g，3.70 mmol，1 eq）溶於四氫呋喃（10 mL）和水（10 mL）中，加入四水合高硼酸鈉（1.71 g，11.11 mmol，2.14 mL，3 eq）。將混合物在20℃下攪拌5小時。將反應混合物用20 mL水稀釋，並用20 mL乙酸乙酯萃取。有機層用20mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝20/1至2/1）純化得化合物16-8。LCMS (ESI) m/z: 243.0 (M+1)。

步驟八：化合物16-9的製備

將化合物16-8（340 mg，1.40 mmol，1 eq），2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（564.11 mg，2.11 mmol，1.5 eq），碳酸鉀（291.03 mg，2.11 mmol，1.5 eq）混合在乙腈（5 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，將混合物在60℃攪拌1 h。添加20 mL水淬滅反應混合物，然後用20 mL乙酸乙酯萃取。有機層用5 mL飽和食鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，殘餘物通過薄層層析法（乙酸乙酯）純化。獲得化合物16-9。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.85 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 1.69(s, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 300.8 (M+1)。

步驟九：化合物16的製備

在20℃下，向化合物16-9（140 mg，466.60 µmol，1 eq）的異丙醇（1.6 mL）溶液中加入氫氧化鈉溶液（2 M，466.60 μL，2 eq）。將混合物在20℃下攪拌0.5h，過濾，濾餅通過製備型HPLC純化（層析柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 µm；移動相：10 mmol/L碳酸氫銨水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從1%至6%，4min）得到化合物16。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.43 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.24 (s, 2H)。LCMS (ESI) m/z: 243.0 (M+1)。

實例 17

步驟一：化合物17-2的製備

將化合物17-1 (40 g, 546.92 mmol, 57.47 mL, 1 eq) 和4Å分子篩 (40 g) 溶於戊烷 (400 mL)，然後在25℃下向該混合物中加丁-2-烯 (38.33 g, 546.92 mmol, 5.66 mL, 1 eq)，將該混合物在25℃下攪拌12小時。過濾並減壓濃縮，得到化合物17-2。

步驟二：化合物17-3的製備

將化合物17-2 (63.26 g, 505.23 mmol, 1 eq) 和3-氧代丁酸甲酯溶於甲苯 (500 mL)，然後在25℃下加一水合對甲苯磺酸 (1.92 g, 10.10 mmol, 0.02 eq)，然後將該混合物在25℃下攪拌72小時。向混合物中加入水（500 mL），有機層用鹽水（200 mL）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。將殘餘物在80-95℃蒸餾得化合物17-3。LCMS (ESI) m/z: 169.1 (M+1)。

步驟三：化合物17-4的製備

將化合物17-3 (20.87 g, 124.09 mmol, 1 eq) 溶於乙酸 (150 mL) 中，然後在25℃下向該混合物加液溴 (39.66 g, 248.17 mmol, 12.79 mL, 2 eq)，然後將該混合物在100℃下攪拌24小時。將該混合物倒入水 (300 mL) 中並在25℃下攪拌15分鐘，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至1/1），得化合物17-4。LCMS (ESI) m/z: 245.0/247.0(M+1/M+3)。

步驟四：化合物17-5的製備

將化合物17-4 (10.52 g, 42.93 mmol, 1 eq) 溶於乙醇（80 mL）和水（38 mL）的混合溶劑中，然後在0℃下向該混合物中加氫氧化鈉 (5.15 g, 128.78 mmol, 710.00 μL, 3 eq)，然後將該混合物在80℃下攪拌12小時。減壓濃縮混合物，向混合物中加入HCl（0.5 N）調節pH = 2-3，用乙酸乙酯（100mL × 3）萃取，合併的有機層用鹽水（100 mL）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物17-5。LCMS (ESI) m/z: 213.0 (M-18+1)。

步驟五：化合物17-6的製備

將化合物17-5 (12.22 g, 52.89 mmol, 1 eq) 溶於三氟乙酸 (120 mL) 中，然後在0℃下向該混合物加丙酮(18.43 g, 317.34 mmol, 23.33 mL, 6 eq)，三氟乙酸酐 (33.33 g, 158.67 mmol, 22.07 mL, 3 eq) 和DMF (773.19 mg, 10.58 mmol, 813.89 μL, 0.2 eq)，然後將該混合物加熱到105℃攪拌48小時。減壓濃縮反應混合物，得到殘餘物，並在0℃下加入碳酸氫鈉水溶液（300mL），用乙酸乙酯（200 mL）萃取，合併的有機層用鹽水（200 mL）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至0/1），得化合物17-6。LCMS (ESI) m/z: 271.0 (M+1)。

步驟六：化合物17-7的製備

將化合物17-6 (1.23 g, 4.54 mmol, 1 eq)，4,4,5,5-四甲基-2-（4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基）-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷 (1.73 g, 6.81 mmol, 1.5 eq)，雙三苯基磷二氯化鈀 (318.45 mg, 453.70 µmol, 0.1 eq) 和乙酸鉀 (1.34 g, 13.61 mmol, 3 eq) 溶于無水二氧六環 (20 mL)，該混合物用氮氣置換三次，然後將該混合物在65℃下攪拌5小時。將該混合物過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至0/1），得化合物17-7。LCMS (ESI) m/z: 319.1 (M+1)。

步驟七：化合物17-8的製備

將化合物17-7(1.02 g, 3.21 mmol, 1 eq)溶於四氫呋喃（14 mL）和水（7 mL）的混合溶劑中，在0℃下加入高硼酸鈉四水合物 (1.48 g, 9.62 mmol, 1.85 mL, 3 eq)，然後將混合物在氮氣保護下於15℃攪拌1個小時。向反應混合物中加入10 mL水，並用乙酸乙酯（20 mL × 3）萃取，用鹽水（30 mL × 1）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 20/1至0/1），得化合物17-8。LCMS (ESI) m/z: 209.2(M+1)。

步驟八：化合物17-9的製備

將化合物2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷 (468.35 mg, 1.75 mmol, 2 eq) 和化合物17-8 (182 mg, 874.12 µmol, 1 eq) 溶於乙腈 (5 mL)，在25℃下向該混合物中加入碳酸鉀 (181.21 mg, 1.31 mmol, 1.5 eq)，然後將該混合物於65℃下攪拌4小時。向混合物中加入10 mL水，並用乙酸乙酯（20 mL × 3）萃取，用鹽水（30 mL × 2）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮得化合物17-9。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 7.19 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.92 (dd, J= 0.7, 8.4 Hz, 1H), 3.88 (br s, 2H), 2.55 (s, 3H), 1.72 (s, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 267.1(M+1)。

步驟九：化合物17的製備

將化合物17-9 (64 mg, 240.55 µmol, 1 eq) 溶於異丙醇 (0.5 mL)，在0℃下加入氫氧化鈉(1 M, 601.38 μL, 2.5 eq)，然後將該混合物在25℃下攪拌3小時。粗產物用丙酮（2 mL）洗滌純化，過濾，濾餅真空乾燥，得化合物17。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.51 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.41 (dd, J= 0.6, 8.1 Hz, 1H), 3.24 (s, 2H), 2.06 (s, 3H)；LCMS (ESI) m/z: 209.1 (M+1), 191.1 (M-18+1)。

實例 18

步驟一: 化合物18-2的製備

將化合物18-1（3 g，8.40 mmol，1 eq）溶於二氯甲烷（5 mL），再加入三氟乙酸（957.85 mg，8.40 m mol，621.98 μL，1 eq）在0-5℃下。將混合物在25℃下攪拌16小時。將反應混合物減壓濃縮，得到殘餘物。將粗產物用二氯甲烷（10mL）攪拌，過濾，濾餅經乾燥得到產物18-2。

步驟二：化合物18-3的製備

將化合物18-2（5.6 g，18.60 mmol，1 eq）溶於三氟乙酸（60 mL），再加入丙酮（3.24 g，55.81 mmol，4.10mL，3 eq）。冷卻至0-5℃，加入三氟乙酸酐（11.72g，55.81mmol，7.76mL，3eq）和N,N-二甲基甲醯胺（271.95mg，3.72mmol，286.26μL，0.2 eq）。將混合物在105℃下攪拌16小時。將反應混合物濃縮。將殘餘物用碳酸氫鈉（30mL）稀釋，用乙酸乙酯（20mL × 2）萃取。合併的有機層用鹽水（20mL×2）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 100/1至50/1）。得到化合物18-3。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.82 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.16 - 6.79 (m, 1H), 1.86 - 1.75 (m, 6H)。

步驟三：化合物18-4的製備

向化合物18-3（3.4 g，9.97mmol，1 eq），雙聯頻那醇硼酸酯（10.13 g，39.87mmol，4 eq），乙酸鉀(2.93 g, 29.91mmol, 2 eq)的混合物中加入二氧六環（40mL），再加入Pd(dppf)Cl ₂（575.95 mg，498.42µmol，0.05 eq），脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在氮氣氣氛下于升溫至40℃攪拌16小時。將反應混合物在減壓下濃縮以除去溶劑。將殘餘物用40mL 水稀釋，並用30 mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水30mL洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到18-4。LCMS (ESI) m/z: 389.1(M+1)。

步驟四：化合物18-5的製備

向四氫呋喃（30mL）和水（30mL）的混合溶液中先加入化合物18-4（3 g，7.73mmol，1 eq），再加入四水合高硼酸酸鈉（3.57 g，23.19mmol，4.46mL，3 eq）。將混合物在20℃攪拌1小時。將反應混合物用20mL 水稀釋，並用20mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至5/1）純化殘餘物。獲得18-5。LCMS (ESI) m/z: 279.0(M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.19 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 7.02 - 6.89 (m, 1H), 5.26 (br s, 1H), 1.86 - 1.75 (m, 6H)。

步驟五：化合物18-6的製備

將化合物18-5（800 mg，2.88mmol，1 eq）溶入乙腈（10 mL），再將2-碘甲基硼酸頻那醇酯（1.54 g，5.75mmol，2 eq）加入溶液中，再加碳酸鉀（596.18 mg，4.31mmol，1.5 eq）。將混合物在65℃攪拌持續4小時。將反應混合物用15 mL水稀釋，並用15 mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水15mL洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物通過製備型HPLC（層析柱：Phenomenex luna C18 250×50mm×10μm；移動相：含0.1%TFA的水和乙腈；乙腈的含量從30%至55%，17min）純化得化合物18-6。LCMS (ESI) m/z: 337.0(M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.99 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 6.86 (dd, J= 1.3, 9.0 Hz, 1H), 5.19 (br s, 1H), 3.94 - 3.88 (m, 2H), 1.70 (s, 6H)。

步驟六：化合物18的製備

將化合物18-6（100 mg，297.60 µmol，1 eq）溶於異丙醇（1 mL）中，再加入氫氧化鈉（1M，595.19 μL，2 eq）。將混合物在0℃下攪拌1小時。將溶液過濾並用丙酮洗滌，真空濃縮。未經純化。得化合物18（30 mg）。LCMS (ESI) m/z: 279.0(M+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.65 - 6.59 (m, 1H), 6.55 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 3.27 (s, 2H)。

實例 19

步驟一：化合物19-2的製備

將化合物19-1（1 g，4.08 mmol，1 eq）溶解在二甲基甲醯胺（10 mL）溶液中，添加磷酸鉀（866.30 mg，4.08 mmol，1 eq），1-溴-2-氟乙烷（777.19 mg，6.12 mmol，1.5 eq）在25℃，然後在65℃攪拌16小時。將殘餘物倒入水（10 mL）中。用乙酸乙酯（10 mL × 2）萃取水相。合併的有機相用鹽水（30mL×1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯= 20/1至3/1）。得到化合物19-2。LCMS: 291 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.64 - 7.59 (m, 1H), 6.58 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 5.58 (s, 2H), 4.85 - 4.81 (m, 1H), 4.72 - 4.70 (m, 1H), 4.33 - 4.30 (m, 1H), 4.27 - 4.23 (m, 1H)。

步驟二：化合物19-3的製備

將化合物19-2（500 mg，1.72 mmol，1 eq），4,4,5,5-四甲基-2-（4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基）-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（1.74 g，6.87 mmol，4 eq），二三苯基膦二氯化鈀（120.57 mg，171.78 µmol，0.1 eq），乙酸鉀（674.34 mg，6.87 mmol，4 eq）溶解在二氧六環（10mL）中，置換氮氣，然後將混合物在N ₂氣氛下在65℃下攪拌16小時。減壓濃縮反應混合物以除去溶劑。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝10 / 1至0 / 1），得到化合物19-3。LCMS: 339.1 (M+1)。

步驟三：化合物19-4的製備

將化合物19-3（600 mg，1.77 mmol，1 eq）溶解在四氫呋喃（10 mL）和H ₂O（5 mL）溶液中，加入四水合高硼酸鈉（273.02 mg，1.77 mmol，341.27 μL，1 eq），將混合物在25℃攪拌0.5 h。向溶液中加入水（10 mL），用0.5N HCl調節pH＝3-4，水相用乙酸乙酯（30 mL×3）萃取。合併的有機相用鹽水（80mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝ 10 / 1至0 / 1）。得到化合物19-4。LCMS: 229.1 (M+1)。

步驟四：化合物19-5的製備

將化合物19-4（20 mg，87.65 µmol，1 eq）溶解乙腈（2 mL）的溶液中，添加2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（46.96 mg，175.30 µmol，2 eq），K ₂CO ₃（24.23 mg，175.30 µmol，2 eq）在25℃下，然後在65℃攪拌2小時。向溶液中加入H ₂O（5 mL），用0.5N HCl將水相調節至pH ＝ 3-4，用乙酸乙酯（10 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（30 mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。獲得化合物19-5。LCMS (ESI) m/z: 287.1 (M+1)。

步驟五：化合物19的製備

將化合物19-5（30 mg，104.89 µmol，1 eq）溶解在異丙醇（0.5 mL）的溶液中，添加NaOH（2 M，104.89 μL，2 eq）在0℃下，然後在25℃攪拌1小時。將溶液過濾，並將過濾粗產物通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150×25mm×5µm；移動相：10 mmol/L碳酸氫銨水溶液和乙腈；乙腈的含量從1%至6%，4min）。得到化合物19。LCMS (ESI) m/z: 257/239 (M+1 /M-18+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.55 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.28 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 4.66 - 4.59 (m, 2H), 4.20 - 4.15 (m, 1H), 4.13 - 4.07 (m, 1H), 3.22 (s, 2H)。

實例 20

步驟一：化合物20-2的合成

將化合物19-1（600 mg，2.45 mmol，1 eq）溶於DMF（6 mL）中，添加磷酸鉀（1.30 g，6.12 mmol，2.5 eq）和溴甲基環丙烷（495.87 mg，3.67 mmol，351.68 μL，1.5 eq）。將混合物在25℃下攪拌8小時。將殘餘物用EA 10 mL稀釋，並用H ₂O（4mL × 2）萃取。有機層用鹽水8 mL洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到的殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 1/0至10/1）。獲得化合物20-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.66 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.62 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 5.66 (s, 2H), 3.99 (d, J= 6.7 Hz, 2H), 1.37 (dddd, J= 1.4, 3.3, 4.9, 6.5 Hz, 1H), 0.73 - 0.66 (m, 2H), 0.49 - 0.43 (m, 2H)。

步驟二：化合物20-3的合成

向化合物20-2（150 mg，501.48µmol，1 eq），雙聯頻那醇硼酸酯（509.37 mg，2.01mmol，2.5 eq），乙酸鉀（147.65 mg，1.50mmol，3 eq）的混合物中加入二氧六環（4mL），再加入Pd(dppf)Cl ₂（81.90 mg，100.30µmol，0.2 eq），脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在65℃下於氮氣氣氛下攪拌8小時。將粗產物20-3用於下一步無需進一步純化。LCMS (ESI) m/z: 347.1 (M+1)。

步驟三：化合物20-4的合成

將化合物20-3（250 mg，722.16 µmol，1 eq）加入THF（4mL）和H ₂O（4mL）的混合溶液中，再加入四水合高硼酸鈉（222.22 mg，1.44mmol，277.78μL，2 eq）。將混合物在0-5℃攪拌1小時。將反應混合物用20mL水稀釋，並用20mL 乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至5/1）。得到化合物20-4。LCMS (ESI) m/z: 237.0 (M+1)。

步驟四：化合物20-5的合成

將化合物20-4（20 mg，84.67µmol，1eq）溶於乙腈（1mL），加入2-碘甲基硼酸頻那醇酯（45.36 mg，169.33µmol，2 eq），然後加入碳酸鉀（17.55 mg，127.00µmol，1.5 eq）。將混合物在65℃攪拌4小時。將反應混合物用15mL水稀釋，並用15mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水15mL洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。無需純化，得到20-5。

步驟五：化合物20的合成

將化合物20-5（24 mg，81.61µmol，1 eq）溶在異丙醇（0.5mL）中，加入氫氧化鈉（2 M，81.61μL，2 eq）。將混合物在0℃下攪拌1小時。將溶液過濾並用丙酮洗滌，真空濃縮。粗產物通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150×25mm×5µm；移動相：10 mmol/L碳酸氫銨水溶液和乙腈；乙腈的含量從1%至6%，4min）。獲得化合物20。LCMS (ESI) m/z: 265(M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.50 (br dd, J= 2.4, 6.9 Hz, 1H), 6.18 (br d, J= 8.3 Hz, 1H), 3.76 (d, J= 6.6 Hz, 2H), 3.39 (br s, 2H), 1.97 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 1.29 - 1.15 (m, 2H), 0.53 (br d, J= 6.7 Hz, 2H), 0.33 (br d, J= 4.5 Hz, 2H)。

實例 21

步驟一：化合物21-2的合成

將化合物21-1 (600 mg，2.45mmol，1 eq）溶在N,N-二甲基甲醯胺（6mL）中，再加入磷酸鉀（1.30 g，6.12mmol，2.5 eq）和1 -碘代丁烷（675.91 mg，3.67mmol，417.23μL，1.5eq）。將混合物在25℃下攪拌8小時。將殘餘物用水10mL稀釋，並用20mL 乙酸乙酯萃取（10mL × 2）。合併的有機層用10mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。無需純化。獲得化合物21-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.66 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.63 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 5.65 (s, 2H), 4.10 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 1.93 - 1.82 (m, 2H), 1.62 - 1.56 (m, 2H), 1.00 (t, J= 7.4 Hz, 3H)。

步驟二：化合物21-3的合成

化合物21-2（490 mg，1.63mmol，1eq），雙聯頻那醇硼酸酯（1.65 g，6.51mmol，4 eq），乙酸鉀（479.08 mg，4.88mmol，3 eq）的混合物中加入二氧六環（2 mL），再加入Pd（dppf）Cl ₂（265.76 mg，325.44µmol，0.2 eq），然後脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在氮氣氣氛下於65℃攪拌8小時。將殘餘物用水10mL稀釋，並用20mL 乙酸乙酯萃取（10mL × 2）。合併的有機層用10 mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 50/1至 5/1）純化殘餘物。得到化合物21-3。LCMS (ESI) m/z: 349.1 (M+1)。

步驟三：化合物21-4的合成

將化合物21-3（1.4 g，4.02mmol，1 eq）溶於THF（4mL）和H ₂O（4mL）的混合溶液中，再加入四水合高硼酸鈉（1.24g，8.04mmol，1.55mL，2 eq）。將混合物在0-5℃攪拌1小時。將反應混合物用20mL水稀釋，並用20mL EA萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 1/0至5/1）。得化合物21-4。

步驟四：化合物21-5的合成

將化合物21-4（300 mg，1.26mmol，1 eq）溶於乙腈（1.5 mL）中，加入2-碘甲基硼酸頻那醇酯（674.71mg，2.52mmol，2 eq），再加入碳酸鉀（261.06mg，1.89mmol，1.5 eq）。將混合物在25℃攪拌4小時。將反應混合物用15mL 水稀釋，並用15mL 乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水15mL洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。將粗產物在25℃下在石油醚中攪拌，過濾，濾餅乾燥得到化合物21-5。

步驟五：化合物21的合成

將化合物21-5（80 mg，270.20µmol，1 eq）溶在異丙醇（1mL）中，加入氫氧化鈉（2 M，270.20 μL，2 eq）。將混合物在0-5℃下攪拌1小時。將溶液過濾並用丙酮洗滌，真空濃縮。得到化合物21。LCMS (ESI) m/z: 249.1(M-18+1)； ¹H NMR (400 MHz, CD3OD) δ = 6.45 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.15 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 3.90 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.38 (s, 2H), 1.71 (s, 2H), 1.57 - 1.45 (m, 2H), 0.96 (t, J= 7.4 Hz, 3H)。

實例 22

步驟一：化合物22-2的合成

將化合物22-1（3g，10.99mmol，1 eq）溶解在四氫呋喃（30mL）中，加入3-羥基氮雜環丁烷-1-羧酸叔丁酯（2.00 g，11.54mmol，1.05 eq），再加入三苯基磷（4.32g，16.48mmol，1.5 eq）。加完後，在20℃下滴加DIAD（3.33g，16.48mmol，3.20ml，1.5 eq）。將所得混合物在50℃下攪拌12小時。通過柱層析（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯= 10/1至4/1）純化殘餘物得到化合物22-2。

步驟二：化合物22-3的合成

將化合物22-2（4.5g，10.51mmol，1 eq），雙聯頻那醇硼酸酯（4.00g，15.76 摩爾，1.5 eq），乙酸鉀（4.12g，42.03mmol，4 eq）的混合物溶解在二氧六環（50mL）中，最後加入Pd（dppf）Cl ₂（858.07mg，1.05mmol，0.1 eq），脫氣並用氮氣置換3次，然後在氮氣氣氛下在80℃下攪拌12小時。過濾反應混合物並減壓濃縮，得到殘餘物。通過柱層析（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯=10/1至4/1）純化殘餘物。得到化合物22-3。LCMS (ESI) m/z: 420.1 (M-56+1)。

步驟三：化合物22-4的合成

將化合物22-3（7g，5.89mmol，40％純度，1 eq）溶解在四氫呋喃（20mL）和水（10mL）的混合溶劑中，加入四水合高硼酸鈉（2.27g，14.73mmol，2.5 eq）。將混合物在20℃下攪拌1小時。過濾混合物並減壓濃縮，得到殘餘物。通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯= 4/1至1/1）純化殘餘物。得到化合物22-4。LCMS (ESI) m/z: 310.0(M-56+1)。

步驟四：化合物22-5的合成

將化合物22-4（650mg，1.78mmol，1 eq）溶在乙腈（5毫升）中，加入碳酸鉀（368.80 mg，2.67mmol，1.5 eq）和2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（953.18 mg，3.56 mmol，2 eq）。將混合物在60℃攪拌3小時。將反應混合物用20 mL水稀釋並用20 mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20 mL飽和食鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物通過製備型HPLC純化（柱：Phenomenex luna C18 150×40 mm×15 µm；移動相：含0.1%TFA的水和乙腈；乙腈的含量從26%至56%，10min）。得到化合物22-5。LCMS (ESI) m/z: 368.1 (M-56+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.12 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 6.31 - 6.14 (m, 1H), 4.99 - 4.87 (m, 1H), 4.37 - 4.31 (m, 2H), 4.15 (br dd, J= 3.9, 9.7 Hz, 2H), 3.81 - 3.77 (m, 2H), 1.77 (s, 6H), 1.50 - 1.44 (m, 9H)。

步驟五：化合物22的合成

將化合物22-5（50 mg，118.14 µmol，1 eq）溶在異丙醇（1mL）中，再加入氫氧化鈉（2 M，118.14μL，2 eq）。將混合物在0-5℃攪拌1小時。將溶液過濾得到化合物22。LCMS (ESI) m/z: 310.1 (M-56+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.51 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.02 - 5.84 (m, 1H), 4.84 - 4.79 (m, 1H), 4.27 - 4.14 (m, 2H), 4.02 - 3.84 (m, 3H), 1.44 - 1.27 (m, 10H)。

實例 23

步驟一：化合物23-2的製備

將化合物22-1（1 g，3.66 mmol，1 eq）溶解在二甲基甲醯胺（10 mL）溶液中，添加K ₂CO ₃（1.01 g，7.32 mmol，2 eq），3-碘氧雜環丁烷（1.01 g，5.49 mmol，1.5 eq），在25℃下攪拌，然後在100℃攪拌36小時。將混合物倒入冰水（15 mL）中並攪拌10分鐘。水相用乙酸乙酯（20 mL × 2）萃取。用鹽水（30mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝ 30/1，10/1）。得到化合物23-2。LCMS: 329 /331(M+1/M+3)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.54 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 5.99 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 5.19 (quin, J= 5.8 Hz, 1H), 4.96 - 4.89 (m, 2H), 4.85 - 4.77 (m, 2H), 1.70 (s, 6H)。

步驟二：化合物23-3的製備

將化合物23-2（600 mg，1.82 mmol，1 eq），4,4,5,5 -四甲基-2-（4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基）-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（1.39 g，5.47 mmol，3 eq），Pd（dppf）Cl ₂.CH ₂Cl ₂（297.73 mg，364.58 µmol，0.2 eq），乙酸鉀（536.70 mg，5.47 mmol，3 eq）溶解在二氧六環(3 mL)中，置換氮氣三次在25℃下，然後將混合物在N ₂下升溫至65℃攪拌16小時。將反應混合物在減壓下濃縮以除去溶劑。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯= 30/1至10/1）。得到化合物23-3。

步驟三：化合物23-4的製備

將化合物23-3 (500 mg, 1.33 mmol, 1 eq) 溶解在四氫呋喃（10 mL）和H ₂O（5 mL）中，加入四水合高硼酸鈉（408.98 mg，2.66 mmol，511.22 μL，2 eq）。將混合物在25℃下攪拌0.5小時。向溶液中加入H ₂O（5mL），用0.5N HCl調節pH＝3-4，水相用乙酸乙酯（10 mL×3）萃取。合併的有機相用鹽水（30 mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗品通過矽膠柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝ 10 / 1至0 / 1）。得到化合物23-4。LCMS: 267 (M+1)。

步驟四：化合物23-5的製備

將化合物23-4（30 mg，1.24 mmol，1 eq）溶解在乙腈（5 mL）溶液中，在25℃下加入2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（664.10 mg，2.48 mmol，2 eq），碳酸鉀（342.61 mg，2.48 mmol，2 eq），然後在65℃下攪拌5小時。向溶液中加入H ₂O（5 mL），用0.5 N HCl將水相調節為pH=3-4，用乙酸乙酯（10 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（30mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗產物通過製備型HPLC純化（柱：Phenomenex luna C18 150 × 40mm × 15µm；移動相：含0.1%TFA的水和乙腈；乙腈的含量從9%至39%，10min）。得到化合物23-5。LCMS (ESI) m/z: 325 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.11 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.10 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 5.27 - 5.21 (m, 1H), 5.02 - 4.96 (m, 2H), 4.93 - 4.87 (m, 2H), 3.79 (s, 2H), 1.78 (s, 6H)。

步驟五：化合物23的製備

將化合物23-5（110 mg，339.41 µmol，1eq）溶解在異丙醇（1mL）溶液中，在0℃下加入NaOH（2M，339.41μL，2eq），然後在25℃下攪拌1小時。向混合物中加入丙酮（10mL）並攪拌30分鐘，過濾得到化合物23。LCMS (ESI) m/z: 267.2 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.49 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 5.87 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 5.17 - 5.01 (m, 1H), 4.98 - 4.81 (m, 4H), 3.22 (s, 2H)。

實例 24

步驟一：化合物24-2的合成

將化合物22-1（500 mg，1.83 mmol，1 eq）溶在N，N-二甲基甲醯胺（4mL）中，再加入磷酸鉀（971.63 mg，4.58 mmol），2.5 eq）和2-碘丙烷（466.87mg，2.75mmol，274.63μL，1.5 eq）。將混合物在50℃下攪拌8小時。將殘餘物用水10mL稀釋，並用乙酸乙酯（4 mL × 2）萃取。合併的有機層用鹽水8mL洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 50/1至10/1）純化殘餘物。得到化合物24-2。LCMS (ESI) m/z: 315.1 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.54 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 6.54 - 6.46 (m, 1H), 4.62 - 4.49 (m, 1H), 1.67 (s, 6H), 1.39 - 1.33 (m, 6H)。

步驟二：化合物24-3的合成

向化合物24-2（790 mg，2.51 mmol，1 eq），乙酸鉀（738.03 mg，7.52 mmol），3 eq）和雙聯頻那醇硼酸酯（2.55 g，10.03 mmol，4 eq）的混合物中加入二氧六環（4 mL),再加入Pd(dppf)Cl ₂（409.41 mg，501.33 µmol，0.2 eq），用氮氣置換三次。將混合物在65℃下攪拌8小時。將殘餘物用15mL水稀釋，並用20mL 乙酸乙酯萃取（10mL × 2）。合併的有機層用10mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 10/1至5/1），得到化合物24-3。LCMS (ESI) m/z: 363.1 (M+1)。

步驟三：化合物24-4的合成

將化合物24-3（1.6 g，4.42mmol，1 eq）溶解在四氫呋喃（2mL）和水（2mL）的混合溶劑中，加入四水合高硼酸鈉（1.36 g，8.83mmol，2 eq）。將混合物在20℃攪拌1 hr。將反應混合物用20mL水稀釋，並用20mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至5/1）純化得到化合物24-4。LCMS (ESI) m/z: 253.1 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.11 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.61 - 6.51 (m, 1H), 4.61 - 4.45 (m, 1H), 1.42 - 1.38 (m, 6H), 1.28 (s, 7H), 1.25 (s, 12H)。

步驟四：化合物24-5的合成

將化合物24-4（400 mg，1.59 mmol，1eq）溶解在乙腈（1mL）中，加入2-碘甲基硼酸頻那醇酯（849.59 mg，3.17mmol，2 eq）和碳酸鉀（328.73 mg，2.38mmol，1.5 eq）。將混合物在65℃攪拌4小時。將反應混合物用15mL 水稀釋，並用15mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水15mL洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物通過製備型HPLC純化（層析柱：Phenomenex luna C18 150×40mm×15µm；移動相：含0.1%TFA的水和乙腈；乙腈的含量從20%至50%，10min）。得化合物24-5。LCMS (ESI) m/z: 311.1(M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.15 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 6.67 - 6.48 (m, 1H), 4.65 - 4.45 (m, 1H), 3.85 - 3.76 (m, 2H), 1.75 (s, 6H), 1.46 - 1.38 (m, 6H)。

步驟五：化合物24的合成

將化合物24-5（180 mg，580.45 µmol，1 eq）溶解在異丙醇（1 mL）中，加入氫氧化鈉（2 M，580.45μL，2 eq）。將混合物在0-5℃下攪拌1小時。將溶液過濾並用丙酮洗滌，真空濃縮。粗產物通過製備型HPLC純化（層析柱：Waters Xbridge 150×25mm×5µm；移動相：10 mmol/L碳酸氫銨水溶液和乙腈，乙腈的含量從1%至6%，5min）。得化合物24。LCMS (ESI) m/z: 253.1(M+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.49 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.25 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 4.26 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 3.18 (s, 2H), 1.13 (d, J= 6.1 Hz, 6H)。

實例 25

步驟一：化合物25-2的合成

將化合物22-1（800 mg，2.93 mmol，1 eq）溶在N,N-二甲基甲醯胺（7mL）中，添加磷酸鉀（1.55 g，7.32 mmol），2.5eq）和2-溴-1,1-二氟乙烷（636.94 mg，4.39 mmol，1.5 eq）。將混合物在100℃下攪拌8小時。用15mL水稀釋反應混合物，並用15mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水15 mL洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至5/1）。獲得化合物25-2。LCMS (ESI) m/z: 339.1 (M+3)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.62 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.51 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.33 - 5.94 (m, 1H), 4.21 (dt, J= 4.2, 12.7 Hz, 2H), 1.73 - 1.67 (m, 6H)。

步驟二：化合物25-3的合成

將化合物25-2（1 g，2.97 mmol，1 eq），乙酸鉀（873.36 mg，8.90 mmol，3 eq）和雙聯頻那醇硼酸酯（3.01 g，11.87 mmol，4 eq）的混合物溶於二氧六環（10mL），再加入Pd(dppf)Cl ₂（484.49 mg，593.27µmol，0.2 eq），用氮氣置換三次。將混合物在65℃攪拌8小時。將反應混合物用15mL 水稀釋，並用15 mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水15mL洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至5/1）。得到化合物25-3。LCMS (ESI) m/z: 385.1 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.77 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.55 - 6.52 (m, 1H), 6.37 - 5.99 (m, 1H), 4.29 - 4.17 (m, 2H), 1.64 (d, J= 0.9 Hz, 6H), 1.31 - 1.13 (m, 12H)。

步驟三：化合物25-4的合成

將化合物25-3（700 mg，1.82 mmol，1 eq）溶在THF（4 mL）和H ₂O（4 mL）的混合溶劑中，加入四水合高硼酸鈉（560.69 mg，3.64 mmol，700.86 μL，2 eq）。混合物在0-5℃下攪拌1小時。將反應混合物用20 mL水稀釋，並用20 mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至5/1）。得到化合物25-4。LCMS (ESI) m/z: 275.1 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.07 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.56 - 6.50 (m, 1H), 6.30 - 5.94 (m, 1H), 4.21 - 4.11 (m, 2H), 1.71 - 1.67 (m, 6H)。

步驟四：化合物25-5的合成

將化合物25-4（190 mg，692.88 µmol，1 eq）溶於乙腈（5 mL）中，加入2-碘甲基硼酸頻那醇酯（371.25 mg，1.39 mmol，2 eq），再加入碳酸鉀（143.64 mg，1.04 mmol，1.5 eq）。將混合物在65℃攪拌 4小時。將反應混合物用15mL 水稀釋，並用15 mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水15mL洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物通過製備型HPLC純化（層析柱：Phenomenex Luna C18 75 × 30 mm × 3 µm；移動相：含0.1%TFA的水和乙腈；乙腈的含量從24%-54%，7min）。得到化合物25-5。LCMS (ESI) m/z: 333.1(M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.16 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 6.63 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 6.44 - 6.02 (m, 1H), 4.26 (d, J= 4.3 Hz, 2H), 3.90 - 3.75 (m, 2H), 1.83 - 1.73 (m, 6H)。

步驟五：化合物25的合成

將化合物25-5（170 mg，511.95 µmol，1 eq）溶於異丙醇（1.5mL），加入氫氧化鈉（2 M，511.95 μL，2 eq）。將混合物在25℃下攪拌1小時。將溶液過濾得到化合物25。LCMS (ESI) m/z: 257.0(M-18+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.54 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.27 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.12 (d, J= 3.8 Hz, 2H), 3.21 (s, 2H)。

實例 26

步驟一：化合物26-2的製備

將化合物22-1（1 g，3.66 mmol，1 eq），三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙基酯(1.70 g, 7.32 mmol, 32.33 µL, 2 eq) 溶於N-N-二甲基甲醯胺（10 mL）中，加入碳酸鉀（759.15 mg，5.49 mmol，1.5 eq），脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在95℃下攪拌2小時。將反應混合物用20mL 水稀釋，並用20 mL乙酸乙酯萃取。有機層用10mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝100/1至30/1）純化殘餘物得到化合物26-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.63 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 6.57 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 4.39 (d, J= 8.1 Hz, 2H), 1.70 (s, 6H)。

步驟二：化合物26-3的製備

將化合物26-2（650 mg，1.83 mmol，1 eq），雙聯頻那醇硼酸酯（929.64 mg，3.66 mmol，2 eq），醋酸鉀（538.92 mg，5.49 mmol，3 eq），Pd（dppf）Cl ₂.CH ₂Cl ₂（149.48 mg，183.04 µmol，0.1 eq）溶於二氧六環（10 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後攪拌混合物，在氮氣氣氛下於70℃反應12h。將反應混合物在減壓下濃縮以除去溶劑。殘餘物用50 mL水稀釋並用乙酸乙酯50 mL萃取。有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝20/1至5/1）純化殘餘物，得到化合物26-3。

步驟三：化合物26-4的製備

將化合物26-3（900 mg，2.81 mmol，1 eq）溶於四氫呋喃（10 mL）和水（10 mL）中，加入四水合高硼酸鈉（865.39 mg，5.62 mmol，2 eq）。將混合物在20℃下攪拌0.5小時。將反應混合物用20 mL水稀釋，並用20 mL乙酸乙酯萃取。有機層用20mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝20/1至2/1）得化合物26-4。LCMS (ESI) m/z: 293.0 (M+1)。

步驟四：化合物26-5的製備

將化合物26-4（400 mg，1.37 mmol，1 eq），2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（733.45 mg，2.74 mmol，2 eq），碳酸鉀 (283.79 mg, 2.05 mmol, 1.5 eq) 混合於乙腈 (5 mL) 中，並用氮氣置換3次，然後在氮氣氣氛下在60℃下攪拌混合物3小時。通過加入水20 mL淬滅反應混合物，然後用乙酸乙酯 20mL萃取。將有機層用鹽水5mL洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。將殘餘物用石油醚（10 mL）攪拌，過濾，濾餅得到化合物26-5。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.10 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.69 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 4.43 (q, J= 8.4 Hz, 2H), 3.96 (s, 2H), 1.78 (s, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 351.0 (M+1)。

步驟五：化合物26的製備

將化合物26-5（100 mg，285.67 µmol，1 eq）溶於異丙醇（1 mL）中，加入氫氧化鈉溶液（2 M，285.67 μL，2 eq）。將混合物在20℃下攪拌1小時。加入丙酮（5 mL），攪拌1 h，然後減壓濃縮，得到的殘餘物通過製備型HPLC純化（層析柱：Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相：10 mmol/L碳酸氫銨水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從1％至6％，4min）得到化合物26。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.58 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.31 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 4.37 (q, J= 8.7 Hz, 2H), 3.24 (s, 2H)。LCMS (ESI) m/z: 292.9 (M+1)。

實例 27

步驟一：化合物27-2的製備

將化合物22-1(2 g, 7.32 mmol, 1 eq)，化合物27-1 (2.09 g, 10.99 mmol, 32.33 uL, 1.5 eq) 和碳酸鉀 (1.52 g, 10.99 mmol, 1.5 eq) 混合在N,N-二甲基甲醯胺（10 mL）中，用氮氣置換3次，反應液在75℃攪拌12小時。反應液用水（20 mL）稀釋，用乙酸乙酯（20 mL）萃取，有機相用飽和食鹽水（10 mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得到殘餘物。殘餘物通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 100/1至30/1）純化。得到27-2。LCMS (ESI) m/z: 312.9/314.9 (M+1/M+3)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.60 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.92 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 3.78 - 3.68 (m, 1H), 1.67 (s, 6H), 0.92 - 0.73 (m, 4H)。

步驟二：化合物27-3的製備

將化合物27-2（340 mg，1.09mmol，1 eq）溶在二氧六環（5 mL）中，添加乙酸鉀（319.67 mg，3.26 mol，3 eq）和雙聯頻那醇硼酸酯（1.10 g，4.34 mmol，4 eq），最後加入Pd(dppf)Cl ₂（177.34 mg，217.15µmol，0.2 eq）。將混合物在70℃下攪拌8小時。將反應混合物用20mL 水稀釋，並用20mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水20mL洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 10/1至5/1）純化，得化合物27-3，其無需進一步純化即可用於下一步。LCMS (ESI) m/z: 361.1 (M+1)。

步驟三：化合物27-4的製備

將化合物27-3（1 g，2.78 mmol，1 eq）溶解在THF（4mL）和H ₂O（4mL）的混合溶劑中，加入四水合高硼酸鈉（854.28 mg，5.55 mmol，1.07 mL，2 eq）。將混合物在0-5℃攪拌 1小時。將反應混合物用20 mL水稀釋，並用20mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至5/1）。得到化合物27-4。LCMS (ESI) m/z: 251.1 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.16 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 6.99 - 6.89 (m, 1H), 3.87 - 3.73 (m, 1H), 1.75 (s, 6H), 0.95 - 0.79 (m, 4H)。

步驟四：化合物27-5的製備

將化合物27-4（100 mg，399.61 µmol，1 eq）溶解在MeCN（3 mL）中，添加碳酸鉀（82.84 mg，599.41 µmol，1.5 eq）和2-碘甲基硼頻那醇酯（214.11 mg，799.21 µmol，2 eq）。將混合物在65℃攪拌4小時。將反應混合物用20 mL水稀釋，並用20 mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水20 mL洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物通過製備型HPLC純化（層析柱：Phenomenex Luna C18 75×30mm×3µm；移動相：含0.1%TFA的水和乙腈；乙腈的含量從24%-54%，7min）。得到化合物27-5。LCMS (ESI) m/z: 309.1 (M+1)。

步驟五：化合物27的製備

將化合物27-4（40 mg，129.83 µmol，1 eq）溶於異丙醇（1 mL），加入氫氧化鈉（2 M，129.83 μL，2 eq）。將混合物在0℃攪拌30分鐘。過濾得到化合物27。LCMS (ESI) m/z: 251.1(M+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.52 (d, J= 2.6 Hz, 2H), 3.73 - 3.60 (m, 1H), 3.18 (s, 2H), 0.61 - 0.52 (m, 4H)。

實例 28

步驟一：化合物28-2的合成

將化合物22-1（850 mg，3.11 mmol，1 eq）溶解在N,N-二甲基甲醯胺（5 mL）中，添加磷酸鉀（1.65 g，7.78 mmol），2.5 eq）和1-溴戊烷（705.22 mg，4.67 mmol，582.83 μL，1.5eq）。將混合物在70℃下攪拌4小時。將反應混合物用15 mL水稀釋，並用15mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水15 mL洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至5/1）純化殘餘物，得到化合物28-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.55 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 6.48 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 3.99 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 1.87 - 1.78 (m, 2H), 1.71 - 1.65 (m, 6H), 1.48 - 1.27 (m, 4H), 0.86 (t, J= 7.2 Hz, 3H)。

步驟二：化合物28-3的合成

將化合物28-2（950 mg，2.77 mmol，1 eq）溶解在二氧六環（7mL）中，添加乙酸鉀（814.94 mg，8.30 mmol，3 eq）和雙聯頻那醇硼酸酯（2.81 g，11.07 mmol，4 eq），最後加Pd（dppf）Cl ₂（452.08 mg，553.59 µmol，0.2 eq）。將混合物在80℃攪拌6小時。將反應混合物用15mL 水稀釋，並用15mL 乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水15mL洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 1/0至5/1），得產物28-3。LCMS (ESI) m/z: 391.1 (M+1)。

步驟三：化合物28-4的合成

將化合物28-3（1.5 g，3.84 mmol，1 eq）溶解在四氫呋喃（4 mL）和水（4 mL）中，加入四水合高硼酸鈉（1.18 g，7.69 mmol，1.48 mL，2 eq）。將混合物在20℃攪拌1 h。將反應混合物用20 mL水稀釋，並用20 mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至5/1）。得到化合物28-4。LCMS (ESI) m/z: 281.1 (M+1)。

步驟四：化合物28-5的合成

將化合物28-4（350 mg，1.25 mmol，1 eq）溶解在乙腈（2mL）中，加入2-碘甲基硼酸頻那醇酯（668.99 mg，2.50 mmol，2 eq）和碳酸鉀（258.85 mg，1.87 mmol，1.5 eq）。將混合物在65℃攪拌4小時。將反應混合物用20mL水稀釋，並用20mL 乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。將粗產物在25℃下於PE中攪拌20分鐘。得到28-5。LCMS (ESI) m/z: 339.1(M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.15 - 7.09 (m, 1H), 6.58 - 6.47 (m, 1H), 4.03 (s, 2H), 3.92 (s, 2H), 1.92 - 1.86 (m, 2H), 1.76 (s, 6H), 1.53 - 1.46 (m, 2H), 1.40 (br d, J= 6.9 Hz, 2H), 0.97 - 0.93 (m, 3H)。

步驟五：化合物28的合成

將化合物28-5（110 mg，325.29 µmol，1 eq）溶解在異丙醇（1.5mL）中，添加氫氧化鈉（2 M，325.29 μL，2 eq）。將混合物在0-5℃攪拌1小時。將溶液過濾得到化合物28。LCMS (ESI) m/z: 263.1(M-18+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.53 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.26 (br d, J= 8.8 Hz, 1H), 3.87 (br t, J= 6.6 Hz, 2H), 3.21 (s, 2H), 1.66 - 1.51 (m, 2H), 1.36 - 1.17 (m, 4H), 0.86 - 0.75 (m, 3H)。

實例 29

步驟一：化合物29-2的製備

將化合物22-1（1 g，3.66 mmol，1 eq）溶解在二甲基甲醯胺（10 mL）溶液中，添加K ₂CO ₃（1.01 g，7.32 mmol，2 eq），1-碘丙烷（933.75 mg，5.49 mmol，536.64 μL，1.5 eq），在25℃下攪拌，然後在50℃攪拌2小時。將殘餘物倒入水（10 mL）中。用乙酸乙酯（10 mL × 2）萃取水相。合併的有機相用鹽水（30 mL×1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗品通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝ 30/1至10/1）。得到化合物29-2。LCMS: 317 (M+3)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.55 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 6.48 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 3.96 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 1.84 (sxt, J= 7.1 Hz, 2H), 1.68 (s, 6H), 1.02 (t, J= 7.4 Hz, 3H)。

步驟二：化合物29-3的製備

將化合物29-2（1.1 g，3.49 mmol，1 eq），4,4,5,5-四甲基-2-（4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基）-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（1.33 g，5.24 mmol，1.5 eq），Pd（dppf）Cl ₂.CH ₂Cl ₂，乙酸鉀（1.03 g，10.47 mmol，3 eq）溶解在二氧六環（3 mL）中，並在25℃下置換氮氣三次，然後將混合物在N ₂下在75℃下攪拌16小時。將反應混合物減壓濃縮以除去溶劑。將殘餘物倒入冰水（15 mL）中並攪拌10分鐘。水相用乙酸乙酯（30mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（50mL × 2）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥。用無水Na ₂SO ₄過濾並真空濃縮。粗品通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯= 10/1，0/1）。得到化合物29-3。LCMS: 363.2 (M+1)。

步驟三：化合物29-4的製備

將化合物29-3溶解在四氫呋喃（20 mL）和H ₂O（10 mL）中，加入四水合高硼酸鈉（220.88 mg，1.44 mmol，276.10 μL，2 eq），攪拌混合物，在25℃下放置1小時。向溶液中加入H ₂O（10 mL），用0.5N HCl調節pH＝3-4，水相用乙酸乙酯（20 mL×3）萃取。合併的有機相用鹽水（50 mL×1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝ 10 / 1至5 / 1）。得到化合物29-4。LCMS (ESI) m/z: 253.1 (M+1)。

步驟四：化合物29-5的製備

將化合物29-4（300 mg，1.19 mmol，1 eq）溶解在乙腈（5 mL）溶液中，在25℃下添加2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（637.19 mg，2.38 mmol，2 eq），K ₂CO ₃（328.73 mg，2.38 mmol，2 eq），然後在65℃攪拌5小時。向溶液中加入H ₂O（5 mL），用0.5 N HCl將水相的pH值調節為pH = 3-4，用乙酸乙酯（10 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（30 mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。在25 ^oC下將粗產物用石油醚（10 mL）攪拌30分鐘，過濾，濾餅乾燥得到化合物29-5。LCMS (ESI) m/z: 311 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.12 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 6.51 (d, J= 9.3 Hz, 1H), 4.00 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 3.92 (s, 2H), 1.91 (s, J= 7.1 Hz, 2H), 1.77 (s, 6H), 1.09 (t, J= 7.4 Hz, 3H)。

步驟五：化合物29的製備

將化合物29-5（220 mg，709.43 µmol，1 eq）溶解在異丙醇（2 mL）溶液中，在0℃下向其中加入NaOH（2 M，709.43 μL，2 eq），然後在25℃下攪拌1小時。向混合物中加入丙酮（10 mL）並攪拌30分鐘，過濾，得到化合物29。LCMS (ESI) m/z: 253 (M+1)；235 (M-18+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.53 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 6.27 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 3.83 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 3.22 (s, 2H), 1.61 (qd, J= 7.2, 14.0 Hz, 2H), 0.87 (t, J= 7.4 Hz, 3H)。

實例 30

步驟一：化合物30-2的合成

將化合物22-1（2.24 g，8.20 mmol，1 eq）溶解在二氯甲烷（20 mL）中，攪拌，溶液中加入4Å分子篩（2.24 g），依次加入苯基硼酸（2 g，16.40 mmol，2 eq），醋酸銅（3.35 g，18.45 mmol，2.25 eq）和吡啶（2.59 g，32.81 mmol，2.65 mL，4 eq）。將混合物在25℃下攪拌72小時。將反應混合物用20 mL水稀釋，並用20 mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20 mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到的殘餘物通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 60/1至40/1）純化得化合物30-2。LCMS (ESI) m/z: 349.1 (M+1)。

步驟二：化合物30-3的合成

將化合物30-2（430 mg，1.23 mmol，1 eq）溶解在二氧六環（6 mL）中，加入乙酸鉀（362.57 mg，3.69 mmol，3 eq）和雙聯頻那醇硼酸酯（1.25 g，4.93 mmol，4 eq），最後加Pd(dppf)Cl ₂（201.13 mg，246.29 µmol，0.2 eq）。用氮氣置換三次，將混合物在70℃攪拌8小時。將反應混合物用20mL 水稀釋，並用20 mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20 mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5/1）純化得化合物30-3。LCMS (ESI) m/z: 397.1 (M+1)。

步驟三：化合物30-4的合成

將化合物30-3（800 mg，2.02 mmol，1 eq）溶解在THF（5 mL）和水（5 mL）中，加入四水合高硼酸鈉（621.28 mg，4.04 mol，776.60 μL，2 eq）。將混合物在0℃下攪拌1小時。將反應混合物用水 20 mL稀釋並用乙酸乙酯 20 mL萃取。將合併的有機層用鹽水20 mL洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到的殘餘物通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯= 50/1至3/1）純化得化合物30-4。

步驟四：化合物30-5的合成

將化合物30-4（100 mg，349.31 µmol，1 eq）溶解在乙腈（3 mL）中，加入碳酸鉀（72.42 mg，523.96 µmol），1.5 eq）和2-碘甲基硼酸頻那醇酯（187.16 mg，698.62 µmol，2 eq）。將混合物在65℃下攪拌4小時。將反應混合物用20mL水稀釋，並用20mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物通過製備型HPLC純化（層析柱：Phenomenex Synergi C18 150 × 25 mm × 10 µm；移動相：含0.1%TFA的水和乙腈；乙腈的含量從38%-68%，10min）。得到化合物30-5。LCMS (ESI) m/z: 345.1(M+1).

步驟五：化合物30的合成

將化合物30-5（30 mg，87.18 µmol，1 eq）溶解在異丙醇（1 mL）溶液中，加入氫氧化鈉（2 M，87.18 μL，2 eq）。將混合物在0-5℃攪拌30分鐘。將溶液過濾得到化合物30。LCMS (ESI) m/z: 287.1(M+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 7.33 - 7.21 (m, 2H), 7.05 - 6.87 (m, 3H), 6.59 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.21 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 3.27 (s, 2H)。

實例 31

步驟一：化合物31-2的製備

將化合物22-1（100 mg，366.19 µmol，1 eq）溶於DMF（2 mL）中，然後在室溫下依次加入苄溴（75.16 mg，439.43 µmol，52.19 µL，1.2 eq）和K ₂CO ₃（75.92 mg，549.29 µmol，1.5 eq）。將混合物在50℃下攪拌24小時。將反應混合物用5mL H ₂O稀釋，並用10mL EtOAc萃取，飽和NaCl水溶液（10mL×3）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物31-2。LCMS (ESI) m/z: 362.9 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.54 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.48 - 7.42 (m, 2H), 7.36 - 7.28 (m, 2H), 7.28 - 7.21 (m, 1H), 6.54 (s, 1H), 5.19 (s, 2H), 1.69 (s, 6H)。

步驟二：化合物31-3的製備

將化合物31-2（1.34 g，3.68 mmol，1 eq）、雙聯頻哪醇硼酸酯（1.87 g，7.37 mmol，2 eq）、乙酸鉀（1.08 g，11.05 mmol，3 eq）溶於二氧六環（12 mL）中，再加入Pd（dppf）Cl ₂（269.55 mg，368.39μmol，0.1 eq），脫氣並用N ₂吹掃3次，然後將混合物在N ₂保護下於70℃攪拌12小時。將反應混合物用30mL H ₂O稀釋並用EA 40mL（20mL × 2）萃取。合併的有機層用30mL鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝10/1）得到化合物31-3。LCMS (ESI) m/z: 411.3(M+1)

步驟三：化合物31-4的製備

將化合物31-3(1.57 g, 3.83 mmol, 1 eq) 溶於THF（7 mL）和H ₂O（7 mL）的混合溶劑中，然後加入過硼酸鈉四水合物(1.18 g, 7.65 mmol, 1.47 mL, 2 eq)。將混合物在20℃攪拌30 min。溶液用1N HCl調節pH = 7-8，然後用EA（20 mL × 2）萃取。合併的有機相用鹽水（20mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5/1）得到31-4。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.54 (d, J= 7.46 Hz, 2 H), 7.40 (t, J= 7.46 Hz, 2 H), 7.33 (d, J= 7.34 Hz, 1 H), 7.11 (d, J= 9.05 Hz, 1 H), 6.60 (d, J= 9.05 Hz, 1 H), 5.22 (s, 2 H), 1.78 (s, 6 H)。

步驟四：化合物31-5的製備

將化合物31-4（467 mg，1.56 mmol，1 eq）溶於乙腈（5 mL）中，依次加入2-碘甲基頻哪醇硼酸酯（833.21 mg，3.11 mmol，2 eq），K ₂CO ₃（322.39 mg，2.33 mmol，1.5 eq），然後將混合物在N ₂下於60℃攪拌3小時。將反應混合物用20mL H ₂O稀釋，並用60mL EA萃取（20mL × 3），用鹽水30mL洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。將粗產物在25 ℃下用石油醚攪拌30 min，過濾，濾餅乾燥得到31-5。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.60 - 7.51 (m, 2 H), 7.43 - 7.35 (m, 2 H), 7.32 (br d, J= 7.21 Hz, 1 H), 7.08 (d, J= 9.05 Hz, 1 H), 6.56 (d, J= 9.05 Hz, 1 H), 5.21 (s, 2 H), 3.92 (s, 2 H), 1.77 (s, 6 H)。

步驟五：化合物31的製備

將化合物31-5 (535 mg, 1.49 mmol, 1 eq) 溶於i-PrOH (2 mL) 中，在室溫下加入NaOH (2 M, 1.64 mL, 2.2 eq)。混合物在室溫下攪拌1小時。將溶液過濾得到化合物31。LCMS (ESI) m/z: 301.1 (M+1)， ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 7.44 - 7.40 (m, 1 H), 7.44 - 7.39 (m, 1 H), 7.41 - 7.39 (m, 1 H), 7.36 (t, J= 7.47 Hz, 2 H), 7.30 (br d, J= 7.03 Hz, 1 H), 6.49 (d, J= 8.78 Hz, 1 H), 6.26 (d, J= 8.78 Hz, 1 H), 4.99 (s, 2 H), 3.22 (s, 2 H)。

實例 32

步驟一：化合物32-2的製備

在-100至-90℃下，向二氯甲烷（4.49 g，52.82 mmol，3.40 mL，1.5 eq）的四氫呋喃（50 mL）溶液中滴加正丁基鋰（2.5 M，16.90 mL，1.2 eq），在-100至-90℃下攪拌30分鐘。然後在-100-至-90℃下，滴加2,4,4,5,5-五甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（5 g，35.21 mmol，1 eq）的四氫呋喃（10 mL）溶液，然後滴加二氯化鋅（1 M，28.17 mL，0.8 eq），然後將混合物加熱至25℃並再攪拌12 h。通過在0℃下添加50 mL氯化銨水溶液淬滅反應混合物，然後用50 mL鹽水稀釋並用100 mL乙酸乙酯萃取。有機層用50 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，獲得化合物32-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 3.44 (m, 1H), 1.56 - 1.41 (m, 3H), 1.33 - 1.14 (m, 12H)。

步驟二：化合物32-4的製備

向化合物15-8（200 mg，839.50 µmol，1 eq）的乙腈（2 mL）溶液中添加碳酸鉀（232.06 mg，1.68 mmol，2 eq），碘化鉀（278.72 mg，1.68 mmol，2 eq）和化合物32-2（319.81 mg，1.68 mmol，2 eq）。將混合物在65℃下攪拌3小時。將反應混合物在減壓下濃縮以除去溶劑。將殘餘物用10 mL水稀釋，並用乙酸乙酯 20 mL（10 mL × 2）萃取。合併的有機層用10 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物32-4。

步驟三：化合物32的製備

將化合物32-4（260 mg，838.42 µmol，1 eq）溶於異丙醇（2.6 mL）溶液中，加入氫氧化鈉（2 M，838.42 μL，2 eq）。將混合物在20℃下攪拌1 h，然後加入氫氧化鈉（2 M，838.42 μL，2 eq），並將混合物在20℃下再攪拌1h。將混合物過濾以得到濾液。殘餘物通過製備型HPLC純化（層析柱：Waters Xbridge C18 150×50 mm×10 µm；移動相：含10 mmol/L的碳酸氫銨的水和乙腈；移動相中乙腈的比例從1％-12％，10 min）。得到化合物32。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.52 (br d, J= 8.6 Hz, 1H), 6.27 (br d, J= 8.6 Hz, 1H), 3.92 (q, J= 6.7 Hz, 2H), 3.30 (br d, J= 7.1 Hz, 1H), 1.32 - 1.06 (m, 6H)。LCMS (ESI) m/z: 252.9 (M+1)。

實例 33

步驟一：化合物33-2的製備

在0-5℃溫度下，向化合物33-1（4.5 g，22.16 mmol，1 eq）的四氫呋喃（45 mL）溶液中添加氫化鈉（2.04 g，50.98 mmol，60%純度，2.3 eq），然後將混合物在0-5℃下攪拌0.5 h，然後加入碘甲烷（3.46 g，24.38 mmol，1.52 mL，1.1 eq）。將混合物在0-5℃下再攪拌0.5 h，然後加熱至25℃並在25℃下再攪拌11 h。通過在0-5℃下添加50 mL氯化銨水溶液淬滅反應混合物，然後用50 mL乙酸乙酯萃取。有機層用20mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 50/1至20/1）純化得化合物33-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.35 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 6.94 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.72 (dd, J= 2.0, 8.2 Hz, 1H), 5.43 (s, 1H), 4.32 (s, 2H), 3.31 (s, 3H)。

步驟二：化合物33-3的製備

將化合物33-2（4 g，18.43 mmol，1 eq）溶在二氯甲烷（40 mL）溶液中，加入DMAP（112.57 mg，921.41 µmol，0.05 eq），然後加入Boc ₂O（4.83 g，22.11 mmol，5.08 mL，1.2 eq）。將混合物在20℃下攪拌12小時。通過加入鹽酸水溶液（0.2 N，10 mL）淬滅反應混合物，然後將分離的有機層用10 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到化合物33-3。

步驟三：化合物33-4的製備

在-70至-60℃下，向二異丙胺（2.41 g，23.77 mmol，3.36 mL，1.3 eq）的四氫呋喃（10 mL）溶液中滴加正丁基鋰（2.5 M，9.51 mL，1.3 eq），然後將混合物在0℃下攪拌15分鐘，得到二異丙基胺基鋰溶液。向化合物33-3（5.8 g，18.29 mmol，1 eq）的四氫呋喃（58 mL）溶液中，在-70至-60℃下，緩慢加入上述二異丙基胺基鋰溶液。將混合物在-70至-60℃下攪拌1小時。通過在-78℃下加入氯化銨水溶液（50 mL）淬滅反應混合物，然後用乙酸乙酯 50 mL萃取，有機層用50 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物33-4。

步驟四：化合物33-5的製備

將化合物33-4（5.8 g，18.29 mmol，1 eq）溶在二氯甲烷（25 mL）溶液中，添加三氟乙酸（38.50 g，337.66 mmol，25 mL，18.47 eq）。將混合物在20℃下攪拌20分鐘。濃縮混合物，得到殘餘物。殘餘物通過製備型HPLC（柱：Phenomenex luna C18 250×50mm×10μm；移動相：含1%三氟乙酸的水和乙腈；移動相中乙腈的比例從30%-60%，20至22min）純化得化合物33-5。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.73 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.82 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 4.70 (s, 2H), 3.53 (s, 3H)。

步驟五：化合物33-6的製備

將化合物33-5（1.4 g，5.36 mmol，1 eq），二氯甲烷（6.60 g，77.71 mmol，5 mL，14.49 eq），磷酸鉀（2.50 g，11.80 mmol，2.2 eq）混合在N,N-二甲基甲醯胺（20 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在氮氣氣氛下在100℃下攪拌48小時。將反應混合物濃縮，然後通過加入30 mL水淬滅，然後用乙酸乙酯 30 mL萃取。有機層用20 mL鹽水（10 mL×2）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 50/1至20/1）純化得化合物33-6。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.71 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.61 (s, 2H), 4.79 (s, 2H), 3.44 (s, 3H)。

步驟六：化合物33-7的製備

將化合物33-6（800 mg，2.93 mmol，1 eq），4,4,5,5-四甲基-2-（4,4，5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基）-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（1.49 g，5.86 mmol，2 eq），醋酸鉀（862.52 mg，8.79 mmol，3 eq），Pd（dppf）Cl ₂.CH ₂Cl ₂（239.24 mg，292.95 µmol，0.1 eq）混合於二氧六環（10 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在氮氣氣氛下於70℃攪拌12 h。將反應混合物在減壓下濃縮以除去溶劑。將殘餘物用20 mL水稀釋，並用乙酸乙酯20 mL萃取。將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 20/1至10/1）純化殘餘物。獲得化合物33-7。LCMS (ESI) m/z: 239.2 (M+1)。

步驟七：化合物33-8的製備

將化合物33-7（1.1 g，4.62 mmol，1 eq）溶於四氫呋喃（10 mL）和水（10 mL）溶液中。加入四水合高硼酸鈉（1.42 g，9.24 mmol，1.78 mL，2 eq）。將混合物在20℃下攪拌0.5小時。將反應混合物用20 mL水稀釋，並用20 mL乙酸乙酯萃取。有機層用20 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝10/1至3/1）純化殘餘物。獲得化合物33-8。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.26 - 7.20 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.15 - 7.09 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 5.61 (s, 2H), 5.37 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.42 (s, 3H)；LCMS (ESI) m/z: 233.0 (M+23)。

步驟八：化合物33-9的製備

將化合物33-8（100 mg，475.78 μmol，1 eq），2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷 (165.70 mg，618.51 μmol，1.3 eq），碳酸鉀（85.48 mg，618.51μmol，1.3 eq）混合於乙腈(1 mL)中，脫氣並用氮氣置換3次，然後攪拌混合物，在氮氣氣氛下在60℃下進行4小時。將反應混合物用水 10 mL稀釋並用乙酸乙酯 10 mL萃取。將有機層用鹽水10 mL洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物33-9。粗產物未經純化用於下一步。

步驟九：化合物33的製備

將化合物33 -9 (127 mg, 473.83 µmol, 1 eq) 溶於異丙醇（1 mL），加入氫氧化鈉 (2 M, 521.22 μL, 2.2 eq)，將混合物在20℃下攪拌1小時。過濾混合物以得到濾液。通過製備型HPLC純化殘餘物（層析柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 µm；移動相：含10 mmol/L的碳酸氫銨的水和乙腈；移動相中乙腈的比例從1％-6％，4min）純化得到化合物33。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.64 - 6.52 (m, 2H), 4.29 (s, 2H), 3.26 (s, 2H), 3.23 (s, 3H)。

實例 34

步驟一：化合物34-2的製備

將化合物22-1（2 g，7.32 mmol，1 eq）和2-甲氧基乙醇（668.76 mg，8.79 mmol，1.2 eq）溶在四氫呋喃（20 mL）中，加入三苯基膦（2.31 g，8.79 mmol，1.2 eq）和偶氮二甲酸二異丙酯（1.78 g，8.79 mmol，1.71ml，1.2 eq）。將混合物在20℃下攪拌0.5小時。通過加入水 0.1 ml淬滅反應混合物，然後在減壓下濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯= 10/1至6/1）純化得到化合物34-2。

步驟二：化合物34-3的製備

將化合物34-2（4 g，7.25 mmol，60%純度，1eq），雙聯頻那醇硼酸酯（3.68 g，14.49 mmol，2 eq），醋酸鉀（2.13 g，21.74 mmol，3 eq），（Pd（dppf）Cl ₂.CH ₂Cl ₂（591.84 mg，724.73 µmol，0.1 eq）混合於二氧六環（50 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後攪拌混合物，在氮氣氣氛下於70℃反應12h。將反應混合物在減壓下濃縮以除去溶劑。將殘餘物用50 mL水稀釋，並用乙酸乙酯50 mL萃取。將有機層經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 5/1至1/1）純化得到化合物34-3。LCMS (ESI) m/z: 297.0 (M+1)。

步驟三：化合物34-4的製備

將化合物34-3（3.5 g，11.82 mmol，1 eq）溶於四氫呋喃（20 mL）和水（20 mL）中，加入高硼酸鈉四水合物（3.64 g，23.64 mmol，4.55 mL，2 eq）。將混合物在20℃下攪拌0.5小時。將反應混合物用50 mL 水稀釋，並用50 mL乙酸乙酯萃取。有機層用20 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝3/1至1/1）。獲得化合物34-4。LCMS (ESI) m/z: 269.0 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.14 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.61 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 4.24 - 4.17 (m, 2H), 3.90 - 3.79 (m, 2H), 3.55 - 3.47 (m, 3H), 1.77 (s, 6H)。

步驟四：化合物34-5的製備

將化合物34-4（300 mg，1.12 mmol，1 eq），2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（389.47 mg，1.45 mmol，1.3 eq），碳酸鉀（200.93 mg，1.45 mmol，1.3eq）混合於乙腈(3 mL)中，脫氣並用氮氣置換3次，然後將其在氮氣氣氛下在60℃下攪拌4小時。將反應混合物用10 mL水稀釋，並用10 mL乙酸乙酯萃取。然後將水層用鹽酸水溶液（1 N）調節至pH＜3，然後用乙酸乙酯10 mL萃取，將有機層用10 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物34-5。LCMS (ESI) m/z: 326.9 (M+1)。

步驟五：化合物34的製備

將化合物34-5（350 mg，1.07 mmol，1 eq）溶在異丙醇（3 mL）中，加入氫氧化鈉水溶液（3M，787.07μL，2.2 eq）。將混合物在20℃下攪拌1小時。將混合物過濾以得到濾液。殘餘物通過製備型HPLC（層析柱：Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相：10 mmol/L的碳酸氫銨水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從1%至6%，4min）純化得化合物34。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.55 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.25 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 4.05 - 3.96 (m, 2H), 3.75 - 3.65 (m, 2H), 3.35 (s, 3H), 3.22 (s, 2H)。LCMS (ESI) m/z: 269.0 (M+1)。

實例 35

步驟一：化合物35-2的製備

將化合物35-1（4 g，28.54 mmol，1 eq）溶解在四氫呋喃（40 mL）溶液中，在0℃下添加NaH（1.71 g，42.81 mmol，60%純度，1.5 eq）。然後攪拌30分鐘，緩慢添加SEM-Cl（7.14 g，42.81 mmol，7.58 mL，1.5 eq），並加熱至25℃攪拌3小時。將該溶液倒入水（60 mL）中，用乙酸乙酯（50 mL × 2）萃取。合併的有機相用鹽水（100 mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮得到化合物35-2。LCMS (ESI) m/z: 271.2 (M+1)。

步驟二：化合物35-3的製備

將LiAlH ₄（1.50 g，39.52 mmol，1.39 eq）懸浮於四氫呋喃（70 mL）溶液中，在10-20℃下攪拌下滴加1-（2-三甲基甲矽烷基乙氧基甲基）吡唑-4-羧酸乙酯（即化合物35-2，7.7 g，28.48 mmol，1 eq）的四氫呋喃（30 mL）溶液，並在20℃下攪拌13小時。將溶液在0℃下緩慢滴加H ₂O（1.5mL），加入15%NaOH（1.5mL）溶液，加入H ₂O（4.5mL），攪拌10分鐘，過濾，將濾液真空濃縮。殘餘物通過矽膠層析法（石油醚/乙酸乙酯＝10/1，0/1）純化得化合物35-3。LCMS (ESI) m/z: 229.2 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.56 (d, J= 13.8 Hz, 2H), 5.41 (s, 1H), 4.62 (s, 1H), 3.58 (dd, J= 7.7, 8.8 Hz, 2H), 2.28 (br s, 1H), 1.01 - 0.86 (m, 2H), 0.01 - 0.02 (m, 9H)。

步驟三：化合物35-5的製備

將化合物22-1（3 g，10.99 mmol，1 eq）溶解在THF（30 mL）溶液中，加入[1-（2-三甲基甲矽烷基乙氧基甲基）吡唑-4-基]甲醇（即化合物35-3，3.01 g，13.18 mmol，1.2 eq），PPh ₃（5.76 g，21.97 mmol，2 eq），在0℃下緩慢加入DIAD（4.44g，21.97 mmol，4.27 ml，2 eq），升溫至25℃下攪拌16小時。在溶液中加入H ₂O（30 mL），用乙酸乙酯（40 mL × 1）萃取。將合併的有機相用鹽水（40 mL × 1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗品通過矽膠層析法（石油醚/乙酸乙酯=20/1至10/1）純化得到化合物35-5。LCMS: 483.2 (M+1)。

步驟四：化合物35-6的製備

將化合物35-5（3.9 g，8.07 mmol，1 eq）加入4,4,5,5-四甲基-2-（4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基）-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（3.07 g，12.10 mmol，1.5 eq），Pd（dppf）Cl ₂.CH ₂Cl ₂（329.41 mg，403.37 µmol，0.05 eq），乙酸鉀（2.38 g，24.20 mmol，3 eq），溶解在二氧六環（40 mL）中在25℃下，然後在70℃攪拌12小時。向溶液中加入H ₂O（50 mL），用乙酸乙酯（50 mL × 2）萃取。合併的有機相用鹽水（100 mL × 1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗品通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝10/1至0/1）。得到化合物35-6。LCMS: 531.2 (M+1)。

步驟五：化合物35-7的製備

將化合物35-6溶解在四氫呋喃（30 mL），H ₂O（15 mL）中，加入四水合高硼酸鈉 (2.20 g, 14.33 mmol, 2.76 mL, 2 eq)，攪拌2小時。向溶液中加入H ₂O（40 mL），用乙酸乙酯（40 mL × 2）萃取。合併的有機相用鹽水（50 mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗品通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝5/1至0/1），得到化合物35-7。LCMS (ESI) m/z: 421.2 (M+1)。

步驟六：化合物35-8的製備

將化合物35-7（460.00 mg，1.09 mmol）溶解在乙腈（5 mL）中，在攪拌下於25℃，加入2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（351.65 mg，1.31 mmol，1.2 eq），K ₂CO ₃（196.54 mg，1.42 mmol，1.3 eq），然後在60℃下攪拌2小時。向溶液中加入H ₂O（5 mL），水相用乙酸乙酯（10 mL×3）萃取。合併的有機相用鹽水（30mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗產物通過製備型HPLC純化（柱：Phenomenex luna C18 150 × 40 mm × 15 µm；移動相：含0.225％甲酸的水和乙腈；乙腈的含量從37%至67%，10分鐘）。得到化合物35-8。LCMS (ESI) m/z: 479.2 (M+1)。

步驟七：化合物35的製備

將化合物35-8 (100 mg, 209.04 µmol, 1 eq) 溶解在異丙醇（1 mL）中，加入NaOH（3 M，139.36 μL，2 eq）在0℃，然後在25℃攪拌1小時。過濾混合物，得到化合物35-9。LCMS (ESI) m/z: 421 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 7.92 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 6.62 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.35 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 5.49 (s, 2H), 5.02 (s, 2H), 3.72 - 3.60 (m, 2H), 3.34 (s, 2H), 0.99 - 0.88 (m, 2H), 0.00 (s, 9H)。

實例 36

步驟一：化合物36-2的製備

將化合物35-1（3 g，21.41 mmol，1 eq）溶解在二甲基甲醯胺（75 mL）溶液中，添加Cs ₂CO ₃（17.44 g，53.53 mmol，2.5 eq），碘甲烷（3.04 g，21.41 mmol，1.33mL，1eq），在25℃下攪拌12小時。將該溶液真空濃縮，加入H ₂O（20 mL），用乙酸乙酯（30mL × 2）萃取。合併的有機相用鹽水（50mL × 1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮，得到化合物36-2。LCMS (ESI) m/z: 155.3 (M+1)。

步驟二：化合物36-3的製備

將LiAlH ₄（1.3 g，34.26 mmol，1.60 eq）溶解在THF（30 mL）溶液中，逐滴加入1-甲基吡唑-4-羧酸乙酯（即化合物36-2，3.3 g，21.41 mmol，1 eq）的THF（10 mL）溶液在10-20℃，並在20℃攪拌1小時。將溶液在0℃下緩慢滴加H ₂O（1.3 mL），加入15%NaOH（1.3 mL）溶液，加入H ₂O（3.9 mL），攪拌10分鐘，過濾，濾液真空濃縮，得化合物36-3。

步驟三：化合物36-5的製備

將化合物22-1（1.7 g，6.23 mmol，1 eq）溶解在四氫呋喃（30 mL）溶液中，加入化合物36-3（698.04 mg，6.23 mmol，1 eq）和PPh ₃（3.27 g，12.45 mmol，2 eq），在0°C下緩慢滴加DIAD（2.52 g，12.45 mmol，2.42 mL，2 eq），然後在20℃下攪拌1小時。向溶液中加入H ₂O（10 mL），用乙酸乙酯（20 mL × 1）萃取。合併的有機相用鹽水（20 mL × 1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。通過矽膠層析法（石油醚/乙酸乙酯= 5/1至0/1）純化，得到化合物36-5。LCMS: 367/369.0 (M+1/M+3)。

步驟四：化合物36-6的製備

將化合物36-5（1.3 g，4.27 mmol，1.0 eq），4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(1.63 g,，6.41 mmol，1.5 eq)、乙酸鉀（1.26 g，12.82 mmol，3 eq）和Pd（dppf）Cl ₂.CH ₂Cl ₂（348.88 mg，427.21 µmol，0.1 eq）在25℃下在二氧六環(15 mL)中混合，然後在75℃下攪拌12小時。向溶液中加入H ₂O（15 mL），水相用乙酸乙酯（20 mL × 3）萃取。合併的有機相用鹽水（50 mL×2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/2）。得到化合物36-6。LCMS: 415.3 (M+1)。

步驟五：化合物36-7的製備

將化合物36-6 (1.3 g, 3.14 mmol, 1 eq) 溶解在四氫呋喃（16 mL），H ₂O（8 mL）中, 加入四水合高硼酸鈉（482.83 mg, 3.14 mmol, 603.54 μL, 1 eq），攪拌2小時。向溶液中加入H ₂O（40 mL），用乙酸乙酯（40 mL × 2）萃取。合併的有機相用鹽水（50mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝ 5 / 1至0 / 1）。得到化合物36-7。LCMS (ESI) m/z: 305.1 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.52 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.05 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.55 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 1.67 (s, 6H)。

步驟六：化合物36-8的製備

將化合物36-7（250 mg，821.57 µmol，1 eq）溶解在乙腈（4mL）溶液中，加入2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（264.12 mg，985.88 µmol，1.2 eq），K ₂CO ₃（147.61 mg，1.07 mmol，1.3 eq）在25℃，然後在60℃攪拌7小時。向溶液中加入水（5mL），用1N HCl調節pH＝3-4，然後用乙酸乙酯（10 mL×3）萃取。合併的有機相用鹽水（30 mL × 2）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。得到化合物36-8。LCMS (ESI) m/z: 363.2 (M+1)。

步驟七：化合物36的製備

將化合物36-8（250 mg，690.34 µmol，1 eq）溶解於i-PrOH（2 mL）中，於0℃加入NaOH（3 M，460.23 μL，2 eq），然後於25℃攪拌1小時。將溶液過濾，將濾液直接純化。粗產物通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相：10mmol/L的碳酸氫銨水溶液和乙腈；乙腈的含量從1%至6%，4 min）。得到化合物36。LCMS (ESI) m/z: 305 (M+1), 327 (M+23)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 7.59 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.55 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.30 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 4.86 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.23 (s, 2H)。

實例 37

步驟一：化合物37-2的製備

將22-1（2 g，7.32 mmol，1 eq）與氧雜環丁烷-3-基甲醇（774.32 mg，8.79 mmol，1.2 eq）溶於四氫呋喃（30mL）溶液中，加入PPh ₃（2.88g，10.99mmol，1.5eq）和DIAD（2.22g，10.99mmol，2.14mL，1.5eq）。將混合物在20℃攪拌5小時。反應混合物用100 mL H ₂O稀釋，並用200 mL EA萃取（100mL × 2）。合併的有機層用100 mL鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 5/1至3/1）純化得37-2。

步驟二：化合物37-3的製備

將化合物37-2（1.39 g，4.05 mmol，1eq）、雙聯頻哪醇硼酸酯（2.57 g，10.12 mmol，2.5 eq）、Pd（dppf）Cl ₂（592.33 mg，809.51μmol，0.2 eq）、乙酸鉀（1.19 g，12.14 mmol，3 eq）溶於二氧六環（26 mL）中，然後將混合物在N ₂下於70℃下攪拌12小時。將反應混合物用20 mL H ₂O稀釋，並用60 mL EA萃取，用60mL鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝3/1至1/1）得到化合物37-3。LCMS (ESI) m/z: 391.2 (M+1)。

步驟三：化合物37-4的製備

將化合物37-3（3.8 g，9.74 mmol，1 eq）溶於THF（38 mL）和H ₂O（38 mL）的混合溶劑中，在室溫下加入過硼酸鈉四水合物（2.25 g，14.61 mmol，1.5 eq），脫氣並用N ₂置換3次，然後將混合物在N ₂下於20℃攪拌1.5小時。將反應混合物過濾，然後用20 mL H ₂O稀釋，並用40 mL EA萃取（20mL × 2）。合併的有機層用40 mL鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至2/1）純化得到化合物37-4。LCMS (ESI) m/z: 281.2(M+1)。

步驟四：化合物37-5的製備

將化合物37-4（140 mg，499.51 µmol，1 eq）溶於乙腈（2 mL）中，在室溫下加入2-碘甲基頻哪醇硼酸酯（200.73 mg，749.27μmol，1.5 eq），Na ₂CO ₃（79.42 mg，749.27 µmol，1.5 eq），脫氣並用N ₂置換3次，然後將混合物在N ₂下於60℃下攪拌6小時。將反應混合物用30 mL H ₂O稀釋，並通過檸檬酸調節pH＝4，然後用EA（20 mL×5）萃取，並用40 mL鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物37-5。LCMS (ESI) m/z: 339.2(M+1)。

步驟五：化合物37的製備

將化合物37-5（90 mg，266.18 µmol，1 eq）溶於i-PrOH（1 mL）中，加入NaOH（2 M，266.18 μL，2 eq）。將混合物在20℃攪拌1小時。反應混合物用1mL H ₂O稀釋。混合物通過製備型HPLC純化（層析柱：Waters Xbridge 150×25mm×5µm；移動相：含10 mM NH ₄HCO ₃的水與乙腈；移動相中乙腈的比例從1%至6%，4min）得到化合物37。LCMS (ESI) m/z: 281.1 (M+1)。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.55 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.29 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 4.79 (dd, J= 6.4, 8.1 Hz, 2H), 4.53 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 4.08 (d, J= 6.4 Hz, 2H), 3.32 (tt, J= 6.3, 8.0 Hz, 1H), 3.22 (s, 2H)。

實例 38

將化合物38-1(100 mg, 333.36 µmol, 1 eq)，化合物15 (72.35 mg, 666.71 µmol, 2 eq), K ₂CO ₃(92.15 mg, 666.71 µmol, 2 eq)，碘化鉀(110.67 mg, 666.71 µmol, 2 eq) 溶於DMF (2 mL)中，用氮氣置換3次，混合物在N ₂下於50℃攪拌12小時，反應混合物用H ₂O1 mL和乙腈1 mL稀釋，通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相：含10 mmol/L的碳酸氫銨的水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從13%至43%，10min）。獲得化合物38。LCMS (ESI) m/z: 620.1 (2M)； ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.66 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.25 (br d, J= 8.8 Hz, 1H), 5.90 (s, 2H), 3.95 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 3.41 (s, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.31 (t, J= 7.0 Hz, 3H)。

實例 39

步驟一：化合物142的製備

將化合物15（100 mg，333.36 µmol，1 eq)，2-甲基丙酸氯甲酯(91.06 mg, 666.71 µmol, 2 eq)，碘化鉀（166.01 mg，1.00 mmol，3 eq），碳酸鉀（46.07 mg，333.36 µmol，1eq）混合於N,N-二甲基甲醯胺（1 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後在氮氣氣氛下將混合物在50℃攪拌12 h。通過添加0.5mL水淬滅反應混合物，然後過濾以得到濾液。殘餘物通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150×25mm×5µm；移動相：10 mmol/L的碳酸氫銨水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從7％-40％，9min）。獲得化合物39。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.64 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.22 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 5.91 (s, 2H), 4.00 - 3.90 (m, 2H), 3.39 (s, 2H), 2.70 - 2.59 (m, 1H), 1.30 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 1.23 - 1.19 (m, 6H)。

實例 40

步驟一：化合物40-2的合成

將化合物13-6（2.6 g，8.52 mmol，1 eq）溶解在二氯甲烷（30 mL）中，加入三氯化硼（1M，17.04 mL，2 eq）。將混合物在-40℃下攪拌1小時。向混合物添加碳酸氫鈉（30 mL），然後將反應混合物用20 mL水稀釋並用20mL 乙酸乙酯萃取。有機層用10mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至20/1）純化得化合物40-2。LCMS (ESI) m/z: 291.0(M+1)。

步驟二：化合物40-3的合成

將化合物40-2（1.5 g，5.15 mmol，1 eq）溶解在N,N-二甲基甲醯胺（20 mL）中，加入碳酸鉀（1.07 g，7.73 mmol，1.5 eq）和三氟甲磺酸2，2，2-三氟乙基酯（2.39 g，10.31 mmol，2 eq）。將混合物在80℃攪拌2小時。將反應混合物用20 mL水稀釋，並用20mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20 mL鹽水（20mL × 1）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。將粗產物在25℃下用石油醚攪拌30分鐘，過濾，濾餅乾燥得化合物40-3。

步驟三：化合物40-4的合成

將化合物40-3（1 g，2.68 mmol，1 eq）溶解在二氧六環（30 mL）中，加入雙聯頻那醇硼酸酯（1.36 g，5.36 mmol，2 eq）和乙酸鉀（789.13 mg，8.04 mmol，3 eq），最後加入Pd(dppf)Cl ₂（437.76 mg，536.06 µmol，0.2 eq），將混合物在60℃下攪拌8小時。將反應混合物用20 mL水稀釋，並用20mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20 mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 10/1至0/1）。得到40-4。LCMS (ESI) m/z: 339.0(M+1)。

步驟四：化合物40-5的合成

將化合物40-4（1.5 g，4.44 mmol，1 eq）溶解在THF（5 mL）和H ₂O（5 mL）的混合溶液中，加入四水合高硼酸鈉（1.37 g，8.88 mmol，1.71 mL，2 eq）。將混合物在20℃攪拌1小時。將反應混合物用20mL水稀釋，並用20 mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用40mL鹽水（20 mL×2）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝3/1至1/1）。得到40-5。LCMS (ESI) m/z: 311.0(M+1)。

步驟五：化合物40-6的合成

將化合物40-5（200 mg，644.75 µmol，1 eq）溶解在乙腈（3 mL）中，加入碳酸鉀（133.67 mg，967.12 µmol，1.5 eq）和2-碘甲基硼酸頻那醇酯（345.46 mg，1.29 mmol，2 eq），將混合物在65℃下攪拌4小時。將反應混合物用20 mL水稀釋，並用30 mL乙酸乙酯萃取（15mL × 2）。合併的有機層用飽和食鹽水（20mL × 1）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物40-6。LCMS (ESI) m/z: 369.1(M+1)。

步驟六：化合物40的合成

將化合物40-6（130 mg，353.22 µmol，1 eq）溶解在異丙醇（2 mL）中，加入氫氧化鈉（2 M，353.22 μL，2 eq）。將混合物在25℃攪拌0.5小時。減壓濃縮反應混合物，得到殘餘物。粗產物通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相：含有10 mM NH ₄HCO ₃的水與乙腈；移動相中乙腈的比例從1%至20%，8 min）得到化合物40。LCMS (ESI) m/z: 311.0(M+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 8.35 (br d, J= 12.4 Hz, 1H), 8.06 - 7.93 (m, 1H), 5.93 - 5.65 (m, 2H), 4.86 - 4.82 (m, 1H), 4.67 - 4.59 (m, 1H), 4.51 (br d, J= 11.4 Hz, 1H)。

實例 41

步驟一：化合物41-2的製備

將化合物26-4（1 g，3.42 mmol，1 eq）溶於THF（10mL）中，在室溫下加入二氯海因（876.52 mg，4.45 mmol，1.3 eq）。混合物在50℃下攪拌4小時後減壓濃縮反應混合物以除去溶劑。將殘餘物用H ₂O 20mL稀釋，並用EA 40mL（20mL × 2）萃取，並用鹽水40mL洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯= 5/1至4/1）純化得到化合物41-2。LCMS（ESI）M / Z：327.1（M + 1）。

步驟二：化合物41-3的製備

將化合物41-2 (774 mg, 2.37 mmol, 1 eq), 2-碘甲基硼酸頻哪醇酯(952.18 mg, 3.55 mmol, 1.5 eq), K ₂CO ₃(392.98 mg, 2.84 mmol, 1.2 eq) 溶於乙腈(8 mL)，用氮氣置換3次。混合物在氮氣保護下60℃下攪拌3小時。將殘餘物用H ₂O 20mL稀釋，並用EA 100mL（50 mL × 2）萃取，並用鹽水100 mL洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮得到粗品，通過製備型HPLC純化(層析柱: Phenomenex Synergi Max-RP 250×50mm×10 µm；移動相: 含0.1%TFA的水和乙腈，移動相中乙腈的比例從25%-55%，23 min）得到化合物41-3。LCMS (ESI) m/z: 385.1 (M+1)。

步驟三：化合物41的製備

將化合物41-3(200 mg, 520.16 µmol, 1 eq) 溶於i-PrOH (2 mL)，室溫滴加NaOH水溶液 (2 M, 520.16 µL, 2 eq)。混合物20℃下攪拌1小時。反應混合物用H ₂O 1 mL稀釋，通過製備型HPLC純化 (層析柱: Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相: 含10 mM NH ₄HCO ₃的水和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%-12%，6 min)得到化合物41。LCMS (ESI) m/z: 327.0 (M+1)。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.50 (s, 1 H), 4.37 (q, J=8.59 Hz, 2 H), 3.31 (s, 2 H)。

實例 42

步驟一：化合物42-2的製備

將化合物26-4（1 g，3.42 mmol，1 eq）溶於THF（10mL）中，在室溫下加入二氯海因（876.52 mg，4.45 mmol，1.3 eq）。混合物在50℃下攪拌4小時後減壓濃縮反應混合物以除去溶劑。將殘餘物用H ₂O 20mL稀釋，並用EA 40mL（20mL × 2）萃取，並用鹽水40mL洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯= 5/1至4/1）純化得到化合物42-2。LCMS (ESI) m/z: 361.1 (M+1)。

步驟二：化合物42-3的製備

將化合物42-2 (774 mg, 2.37 mmol, 1 eq), 2-碘甲基硼酸頻哪醇酯(952.18 mg, 3.55 mmol, 1.5 eq), K ₂CO ₃(392.98 mg, 2.84 mmol, 1.2 eq) 溶於乙腈 (8 mL)，用氮氣置換3次。混合物在氮氣保護下60℃下攪拌3小時。將殘餘物用H ₂O 20mL稀釋，並用EA 100mL（50 mL × 2）萃取，並用鹽水100mL洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮得到粗品，通過製備型HPLC純化(層析柱: Phenomenex Synergi Max-RP 250×50mm×10 µm；移動相：含0.1%TFA的水和乙腈，移動相中乙腈的比例從25%至55%，23 min）得到化合物42-3。LCMS (ESI) m/z: 419.1(M+1)。

步驟三：化合物42的製備

將化合物42-3 (70 mg, 167.09 µmol, 1 eq)溶於i-PrOH (1 mL)，室溫滴加 NaOH水溶液 (2 M, 167.09 µL, 2 eq)。混合物20℃下攪拌1小時。反應混合物用H ₂O (1 mL) 稀釋，通過製備型HPLC純化(層析柱: Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相:含10 mM NH ₄HCO ₃的水和乙腈，移動相中乙腈的比例從2%至32%，9 min) 得到化合物42。LCMS (ESI) m/z: 361.0 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 4.41 (q, J= 8.63 Hz, 2 H)，3.39 (s, 2 H)。

實例 43

步驟一：化合物43-2的製備

將化合物15-8（1.6 g, 6.72 mmol, 1 eq）溶於THF（16mL）中，在室溫下加入二氯海因（1.32 g, 6.72 mmol, 1 eq）。混合物在50℃下攪拌4小時後減壓濃縮反應混合物以除去溶劑。將殘餘物用H ₂O 20mL稀釋，並用EA 100mL（50mL × 2）萃取，並用鹽水100mL洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮得到粗產物。粗產物通過製備型HPLC純化(層析柱: Phenomenex luna C18 (250×70mm,10 µm)；移動相：水 (含0.1%TFA) 和乙腈，移動相中乙腈的比例從30%-60%，25 min）得到43-2。LCMS (ESI) m/z: 273.1 (M+1)。

步驟二：化合物43-3的製備

將化合物43-2 (500 mg, 1.83 mmol, 1 eq), 2-碘甲基硼酸頻哪醇酯(589.48 mg, 2.20 mmol, 1.2 eq), K ₂CO ₃(304.11 mg, 2.20 mmol, 1.2 eq) 溶於乙腈(5 mL)，用氮氣置換3次。混合物在氮氣保護下60℃下攪拌4小時。將殘餘物用H ₂O 20mL稀釋並用2 M鹽酸調節pH = 4，並用EA 200mL（50 mL × 4）萃取，並用鹽水200mL洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮得到化合物43-3。LCMS (ESI) m/z: 331.1(M+1)。

步驟三：化合物43的製備

將化合物43-3 (739 mg, 2.24 mmol, 1 eq)溶於i-PrOH (7.5 mL)，室溫滴加 NaOH (89.43 mg, 2.24 mmol, 1 eq)。混合物20℃下攪拌1小時。反應混合物用H ₂O 4 mL稀釋，通過製備型HPLC純化(層析柱: Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相: 10 mM NH ₄HCO ₃的水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%-10%，5 min)得到化合物43。LCMS (ESI) m/z: 255.1 (M+1-18)。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.70 - 6.53 (m, 1 H), 3.86 (br d, J= 6.24 Hz, 2 H), 3.21 - 2.79 (m, 2 H), 1.15 (t, J= 7.03 Hz, 3 H)。

實例 44

步驟一：化合物44-2的合成

將化合物44-1（350 mg，1.14 mmol，1 eq）溶解在乙腈（5 mL）中，加入碳酸鉀（236.26 mg，1.71 mmol，1.5 eq）和2-碘甲基硼酸頻那醇酯（396.89 mg，1.48 mmol，1.3 eq）。在65 ⁰C下攪拌4小時。將反應混合物用20 mL水稀釋並用乙酸乙酯 30 mL（15 mL × 2）萃取，然後用鹽酸（0.5 N）將pH調節至5-7，用乙酸乙酯 15 mL（15 mL × 1）萃取，合併的有機層用20 mL鹽水（20 mL × 1）洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮得到殘留物。獲得化合物44-2。LCMS (ESI) m/z: 365.1 (M+1)。

步驟二：化合物44的合成

將化合物44-2（310 mg，849.38 µmol，1 eq）溶解在異丙醇（3 mL）中，加入氫氧化鈉（2 M，849.38 μL，2 eq）。將混合物在25℃攪拌1小時。減壓濃縮反應混合物，得到殘餘物。粗產物通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相: 10 mmol/L的碳酸氫銨水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%至12%，6min）。得到化合物44。LCMS (ESI) m/z: 289.0 (M-18+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 3.97 (d, J= 7.1 Hz, 2H), 3.35 (s, 2H), 1.26 (t, J= 7.1 Hz, 3H)。

實例 45

步驟一：化合物45-2的製備

向化合物35-1（4 g，28.54 mmol，1 eq）的N,N-二甲基甲醯胺（40 mL）溶液中加入碳酸銫（11.16 g，34.25 mmol，1.2 eq）和2-碘丙烷（5.82 g，34.25 mmol，3.42 mL，1.2 eq）。將混合物在40℃下攪拌1小時。通過添加50 mL 水淬滅反應混合物，然後用乙酸乙酯 100 mL（50 mL × 2）萃取。合併的有機層用鹽水100mL（50mL×2）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物45-2。

步驟二：化合物45-3的製備

於0 -5℃，將四氫鋁鋰（1.15 g，30.18 mmol，1.1 eq）加入四氫呋喃（50 mL）中，緩慢滴加化合物45-2（5 g，27.44 mmol，1 eq）的四氫呋喃（20 mL）溶液，將混合物在20℃下攪拌1小時。在0-10℃下依次加入水（1.15mL），氫氧化鈉溶液（品質含量為15％，1.15mL），水（3.45 mL）淬滅反應混合物，然後在20℃下攪拌約15min，然後加入2g硫酸鎂，然後過濾並在減壓下濃縮，得到化合物45-3。

步驟三：化合物45-5的製備

在0-5℃下，向化合物22-1（2 g，7.32 mmol，1 eq）和化合物45-3（1.23 g，8.79mmol，1.2 eq）的四氫呋喃（20mL）中加入三苯基膦（2.31 g，8.79 mmol，1.2eq）和DIAD（1.78g，8.79mmol，1.71mL，1.2eq）。將混合物在20℃下攪拌1小時。減壓濃縮反應混合物，殘餘物通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 5/1至3/1）純化。得到45-5。LCMS (ESI) m/z: 395.0/396.9 (M+1/M+3)。

步驟四：化合物45-6的製備

將化合物45-5（2.6 g，6.58 mmol，1 eq），4,4,5,5-四甲基-2-（4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基）-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（3.34 g，13.16 mmol，2 eq），Pd（dppf）Cl ₂（481.33 mg，657.82 µmol，0.1 eq），醋酸鉀（1.94 g，19.73 mmol，3 eq）混合於二氧六環（30 mL）溶液中，脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在氮氣氣氛下在70℃下攪拌12小時。通過添加50 mL 水淬滅反應混合物，然後用乙酸乙酯100 mL（50 mL × 2）萃取。合併的有機層用50 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 4/1至2/1）純化。獲得化合物45-6。LCMS (ESI) m/z: 443.2 (M+1)。

步驟五：化合物45-7的製備

將化合物45-6（1.4 g，3.17 mmol，1 eq），溶於四氫呋喃（10 mL）和水（10 mL）中，加入四水合高硼酸鈉（973.99 mg，6.33 mmol，1.22 mL，2 eq）。將混合物在20℃下攪拌0.5小時。將反應混合物用50mL 水稀釋，並用50mL 乙酸乙酯萃取。有機層用50mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝3/1至1/1）。獲得化合物45-7。LCMS (ESI) m/z: 333.0 (M+1)。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 7.69 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.14 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 6.65 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 5.16 (s, 1H), 5.07 (s, 2H), 4.57 - 4.45 (m, 1H), 1.77 (s, 6H), 1.52 (d, J= 6.7 Hz, 6H)。

步驟六：化合物45-8的製備

將化合物45-7（200 mg，601.78 µmol，1eq），2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（153.15 mg，571.69 µmol，0.95 eq），碳酸鉀（91.49 mg，661.95 µmol，1.1 eq）混合在乙腈（3 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在氮氣氣氛下在60℃下攪拌4小時。將反應混合物用10mL 水稀釋並用乙酸乙酯 10mL萃取，然後將有機層用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮以得到部分粗產物。然後將水層用鹽酸（1 N）調節pH ＜5，然後用乙酸乙酯 10 mL萃取，有機物經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。獲得化合物45-8。粗產物無需純化即可用於下一步。LCMS (ESI) m/z: 391.0 (M+1)。

步驟七：化合物45的製備

將化合物45-8（80 mg，205.03 µmol，1 eq）溶於異丙醇（1 mL）中，加入氫氧化鈉溶液（2 M，205.03 μL，2 eq）。將混合物在20℃下攪拌1小時。將混合物過濾以得到濾液。濾液通過製備型HPLC純化（層析柱：Waters Xbridge 150×25mm×5µm；移動相: 10 mmol/L的碳酸氫銨水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從0％至10％，7min）。獲得化合物45。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 7.69 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 6.49 (dd, J= 6.8, 8.5 Hz, 1H), 6.22 (dd, J= 8.7, 14.7 Hz, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.48 - 4.33 (m, 1H), 3.21 (d, J= 12.5 Hz, 2H), 1.34 (d, J= 6.8 Hz, 6H)；LCMS (ESI) m/z: 333.3 (M+1)。

實例 46

步驟一：化合物46-2的製備

向化合物45-7（440 mg，1.32 mmol，1 eq）的四氫呋喃（10mL）溶液中加入二氯海因（156.50 mg，794.34 µmol，0.6 eq）。將混合物在45℃下攪拌3小時。減壓濃縮反應混合物，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 5/1至4/1）純化得到化合物46-2。LCMS (ESI) m/z: 367.0 (M+1)。

步驟二：化合物46-3的製備

將化合物46-2（80.00 mg，218.11 µmol，1 eq），2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（58.43 mg，218.11 µmol，1 eq），碳酸鉀（33.16 mg，239.92 µmol，1.1 eq）混合於乙腈（2mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在氮氣氣氛下在60℃下攪拌3小時。將反應混合物用5mL 水稀釋，並用5mL 乙酸乙酯萃取。然後將水層用鹽酸水溶液（1N）調節至pH＜3，然後用乙酸乙酯 5mL萃取，將有機層用5mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得化合物46-3。LCMS (ESI) m/z: 425.0 (M +1)。

步驟三：化合物46的製備

將化合物46-3（92.00 mg，216.65 µmol，1 eq）溶於異丙醇（1 mL）中，加入氫氧化鈉溶液（3 M，158.88 μL，2.2 eq）。將混合物在20℃下攪拌1小時。將混合物過濾以得到濾液。殘餘物通過製備型HPLC（層析柱：Waters Xbridge 150×25mm×5µm；移動相：10 mmol/L的碳酸氫銨水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從1％至6％，4min）純化得到化合物46。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.20 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 3.87 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 3.23 (s, 2H), 1.18 (t, J= 7.0 Hz, 3H)；LCMS (ESI) m/z: 367.0 (M+1)。

實例 47

步驟一：化合物47-2的製備

將化合物47-1(2 g, 11.89 mmol, 1 eq)溶於DME(10 mL)，然後在0℃下向該混合物加丙酮(898.05 mg, 15.46 mmol, 1.14 mL, 1.3 eq)，DMAP (72.66 mg, 594.72 µmol, 0.05 eq) 和氯化亞碸(1.84 g, 15.46 mmol, 1.12 mL, 1.3 eq)，然後將該混合物在0-15℃攪拌16小時。向混合物中加入飽和NaHCO ₃水溶液20ml，用甲基叔丁基醚（20mL×3）萃取水溶液。將合併的有機溶液用飽和NaCl水溶液100mL洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，並在減壓下濃縮溶液。殘留物通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至80/1）純化，得化合物47-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 10.16 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 6.20 (s, 1H), 2.24 (s, 3H), 1.66 (s, 6H)。

步驟二：化合物47-3的製備

將化合物47-2(1.42 g, 6.82 mmol, 1 eq)和碘乙烷(1.28 g, 8.18 mmol, 654.57 μL, 1.2 eq)溶在DMF (10 mL)中，在15℃下向該混合物加碳酸鉀(1.13 g, 8.18 mmol, 1.2 eq)，然後將該混合物在50℃下攪拌16小時。將混合物倒入水（30mL）中並用乙酸乙酯（30mL × 3）萃取，將合併的有機層用鹽水（50 mL × 2）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至20/1），得化合物47-3。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.48 - 6.30 (m, 2H), 4.17 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.71 (s, 6H), 1.53 (t, J = 6.9 Hz, 3H)。

步驟三：化合物47-4的製備

將化合物47-3(3.38 g, 14.31 mmol, 1 eq) 和NBS (2.80 g, 15.74 mmol, 1.1 eq)溶於四氫呋喃(40 mL)中，然後將該混合物在40℃下攪拌4小時。將混合物加入水（50mL）並用乙酸乙酯（50mL × 3）萃取，將合併的有機層用鹽水（100mL）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。粗產物用石油醚（30 mL）洗滌純化，過濾，濾餅真空乾燥，得化合物47-4。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.58 (s, 1H), 4.17 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.76 (s, 6H), 1.53 (t, J= 7.0 Hz, 3H)。

步驟四：化合物47-5的製備

將化合物47-4(3.46 g, 10.98 mmol, 1 eq)，4,4,5,5-四甲基-2-（4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基）-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(5.58 g, 21.96 mmol, 2 eq)，乙酸鉀(3.23 g, 32.94 mmol, 3 eq)和Pd(dppf)Cl ₂.CH ₂Cl ₂(896.55 mg, 1.10 mmol, 0.1 eq)溶于無水二氧六環(80 mL)中，然後將該混合物用氮氣置換3次，最後將該混合物在75℃氮氣保護下攪拌16小時。將混合物加入水（100mL）並用乙酸乙酯（100mL × 3）萃取，將合併的有機層用鹽水（100mL）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至2/1），得化合物47-5。LCMS (ESI) m/z: 363.2 (M+1)。

步驟五：化合物47-6的製備

將化合物47-5(4.64 g, 12.81 mmol, 1 eq)溶於四氫呋喃（50 mL）和水（25 mL）的混合溶劑中，在0℃下加入高硼酸鈉四水合物(3.94 g, 25.62 mmol, 4.93 mL, 2 eq)，然後將混合物在氮氣保護下於15℃攪拌1個小時。向反應混合物中加入30 mL水，並用乙酸乙酯（50 mL × 3）萃取，用鹽水（100 mL × 1）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 20/1至0/1），得化合物47-6。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 6.43 (s, 1H), 5.19 - 4.82 (m, 1H), 4.12 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.76 (s, 6H), 1.50 (t, J = 7.0 Hz, 3H)；LCMS (ESI) m/z: 253.2 (M+1)。

步驟六：化合物47-7的製備

將化合物2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(190.52 mg, 711.16 µmol, 1.3 eq)和化合物47-6(138 mg, 547.05 µmol, 1 eq)溶於乙腈(2 mL)，在15℃下向該混合物中加入碳酸鉀(113.41 mg, 820.57 µmol, 1.5 eq)，然後將該混合物於60℃下攪拌2小時。向混合物中加入10 mL水，並用乙酸乙酯（20 mL × 3）萃取，用鹽水（30 mL × 2）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮得化合物47-7。LCMS (ESI) m/z: 311.1 (M+1)。

步驟七：化合物47的製備

將化合物47-7 (100 mg, 322.47 µmol, 1 eq)溶於異丙醇(0.5 mL)，在0℃下加入氫氧化鈉(2 M, 322.47 μL, 2 eq)，然後將該混合物在15℃下攪拌2小時。將反應液過濾，通過製備型HPLC純化(層析柱: Waters Xbridge 150×25mm× 5µm；移動相: 含10 mmol/L碳酸氫銨的水和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%至6%，4min）得化合物47。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.21 (s, 1H), 3.93 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 3.24 (s, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.21 (t, J= 7.0 Hz, 3H)；LCMS (ESI) m/z: 253.1 (M+1)。

實例 48

步驟一：化合物48-2的製備

將化合物47-2(2 g, 9.61 mmol, 1 eq)和1-溴丁烷(1.58 g, 11.53 mmol, 1.24 mL, 1.2 eq)溶於DMF (20 mL)中，然後在15℃下向該混合物加碳酸鉀(1.59 g, 11.53 mmol, 1.2 eq)，最後將該混合物在50℃下攪拌16小時。將混合物加入水（50mL）並用乙酸乙酯（50mL × 3）萃取，將合併的有機層用鹽水（100mL）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至5/1），得化合物48-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.45 - 6.31 (m, 2H), 4.08 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.94 - 1.83 (m, 2H), 1.70 (s, 6H), 1.57 (dd, J= 7.4, 15.1 Hz, 2H), 1.00 (t, J = 7.4 Hz, 3H)。

步驟二：化合物48-3的製備

將化合物48-2(1.87 g, 7.07 mmol, 1 eq)和NBS (1.39 g, 7.78 mmol, 1.1 eq)溶于無水四氫呋喃(30 mL)，然後將該混合物在40℃下攪拌4小時。將混合物加入水（50mL）並用乙酸乙酯（50mL × 3）萃取，將合併的有機層用鹽水（100mL）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。粗產物用石油醚（20 mL）洗滌純化，過濾，濾餅真空乾燥，得化合物48-3。

步驟三：化合物48-4的製備

將化合物48-3(2.61 g, 7.60 mmol, 1 eq)，4,4,5,5-四甲基-2-（4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基）-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(3.86 g, 15.21 mmol, 2 eq)，乙酸鉀(2.24 g, 22.81 mmol, 3 eq)和Pd(dppf)Cl ₂.CH ₂Cl ₂(621.02 mg, 760.46 µmol, 0.1 eq)溶于無水二氧六環(50 mL)中，然後將該混合物用氮氣置換三次，最後將該混合物在75℃下攪拌16小時。將混合物加入水（100mL）並用乙酸乙酯（100mL × 3）萃取，將合併的有機層用鹽水（100mL）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至2/1），得化合物48-4。LCMS (ESI) m/z: 391.1 (M+1)。

步驟四：化合物48-5的製備

將化合物48-4(576 mg, 1.48 mmol, 1 eq)溶於四氫呋喃（10 mL）和水（5 mL）的混合溶劑中，在0 ℃下加入四水合高硼酸鈉(454.16 mg, 2.95 mmol, 567.70 μL, 2 eq)，然後將混合物在氮氣保護下於15℃攪拌1個小時。向反應混合物中加入20 mL水，並用乙酸乙酯（20 mL × 3）萃取，用鹽水（50 mL × 1）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 20/1至0/1），得化合物48-5。LCMS (ESI) m/z: 281.2(M+1)。

步驟五：化合物48-6的製備

將化合物2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(152.44 mg, 569.00 µmol, 1.1 eq)和化合物48-5(145 mg, 517.27 µmol, 1 eq)溶於乙腈(5 mL)，在15℃下向該混合物中加入碳酸鉀(107.24 mg, 775.91 µmol, 1.5 eq)，然後將該混合物於60℃下攪拌2小時。向混合物中加入10 mL水，並用乙酸乙酯（20 mL × 3）萃取，用鹽水（30 mL × 2）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮得化合物48-6。LCMS (ESI) m/z: 339.0 (M+1)。

步驟六：化合物48的製備

將化合物48-6 (176 mg, 520.46 µmol, 1 eq)溶於異丙醇(1 mL)，在0℃下加入氫氧化鈉 (3 M, 346.98 μL, 2 eq)，然後將該混合物在15℃下攪拌2小時。將反應液過濾，得化合物48。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.19 (s, 1H), 3.85 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.28 - 3.18 (m, 2H), 2.11 - 1.97 (m, 3H), 1.63 - 1.52 (m, 2H), 1.38 - 1.26 (m, 2H), 0.82 (t, J= 7.4 Hz, 3H)；LCMS (ESI) m/z: 339.2(M+1)。

實例 49

步驟一：化合物49-2的合成

將化合物22-1（4 g，14.65 mmol，1 eq）溶解在N,N-二甲基甲醯胺（30 mL）中，加入磷酸鉀（7.77 g，36.62mmol，2.5 eq）和1-碘丁烷（4.04 g，21.97 mmol，2.50 mL，1.5 eq）。將混合物在25℃下攪拌8小時。將殘餘物用水10mL稀釋，並用20mL乙酸乙酯萃取（10mL × 2）。合併的有機層用鹽水10mL洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。未經純化。獲得49-2。LCMS (ESI) m/z: 329.1 (M+1)。

步驟二：化合物49-3的合成

將化合物49-2（4.3 g，13.06 mmol，1 eq）溶解在二氧六環（50mL）中，加入雙聯頻那醇硼酸酯（6.63 g，26.13 mmol，2 eq），乙酸鉀（3.85 g，39.19 mmol，3 eq），最後加入Pd(dppf)Cl _2.CH ₂Cl ₂（2.13 g，2.61 mmol，0.2 eq）。將混合物在65℃攪拌8小時，將反應混合物用20mL水稀釋，並用20mL 乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝ 5/1至0/1）。得到化合物49-3。LCMS (ESI) m/z: 377.2 (M+1)。

步驟三：化合物49-4的合成

將化合物49-3（6.3 g，16.74 mmol，1 eq）溶解於四氫呋喃（30 mL）和水（30 mL）中，加入四水合高硼酸鈉（5.15 g，33.49 mmol，6.44 mL，2 eq）。將混合物在20℃攪拌1小時。將反應混合物用20mL 水稀釋，並用20mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝ 20/1至4/1）。獲得化合物49-4。LCMS (ESI) m/z: 267.2 (M+1)。

步驟四：化合物49-5，49-6的合成

將化合物49-4（1.55 g，5.82 mmol，1 eq）溶解在四氫呋喃（20 mL）中，加入二氯海因（1.15 g，5.82 mmol，1 eq）。將混合物在50℃下攪拌4小時。將反應混合物用20mL水稀釋，並用20mL 乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，得到殘餘物。粗產物通過製備型HPLC純化（層析柱：Phenomenex luna C18 250×70 mm×10 μm；移動相：水 (含1%的三氟乙酸) 和乙腈，移動相中乙腈的比例從50%-80%，20min）。得到化合物49-5。LCMS (ESI) m/z: 301.1(M+1)。得到化合物49-6。LCMS (ESI) m/z: 335.1(M+1)。

步驟五：化合物49-7的合成

將49-5（380 mg，1.26 mmol，1 eq）溶解在乙腈（5 mL）中，加入碳酸鉀（261.96 mg，1.90 mmol，1.5 eq）和2-碘甲基硼酸頻那醇酯（440.06 mg，1.64 mmol，1.3 eq）。將混合物在65℃下攪拌4小時。將反應混合物用20 mL水稀釋，並用乙酸乙酯（20 mL×2）萃取。合併的有機層用飽和食鹽水（20mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物49-7。LCMS (ESI) m/z: 359.1(M+1)。

步驟六：化合物49的合成

將化合物49-7（400 mg，1.12 mmol，1 eq）溶解在異丙醇（3 mL）中，加入氫氧化鈉（2 M，1.12 mL，2eq），將混合物在25℃攪拌1小時。將反應混合物減壓濃縮得到殘留物，無需純化，得到化合物49。LCMS (ESI) m/z: 283.1(M-18+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.66 (s, 1H), 3.96 - 3.86 (m, 2H), 3.29 - 3.19 (m, 2H), 1.70 - 1.57 (m, 2H), 1.43 - 1.26 (m, 2H), 0.85 (t, J= 7.4 Hz, 3H)。

實例 50

步驟一：化合物50-2的合成

將化合物49-6（400 mg，1.19 mmol，1 eq）溶解在乙腈（5 mL）中，加入碳酸鉀（247.41 mg，1.79 mmol，1.5 eq）和2-碘甲基硼酸頻那醇酯（415.62 mg，1.55 mmol，1.3 eq）。在65℃下攪拌8小時。將反應混合物用20 mL水稀釋並用40 mL（20 mL × 2）乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水（20 mL×1）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。無需純化，得到化合物50-2。LCMS (ESI) m/z: 393.0(M+1)。

步驟二：化合物50的合成

將化合物50-2（500 mg，1.27 mmol，1 eq）溶解在異丙醇（3mL）中，加入氫氧化鈉（2M，1.27 mL，2 eq）。將混合物在25℃下攪拌1小時。減壓濃縮反應混合物，得到殘餘物。通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150 × 25mm × 5µm；移動相：10 mmol/L碳酸氫銨的水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%至30%，9min）。得到化合物50。LCMS (ESI) m/z: 317.0(M-18+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 3.93 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.39 (s, 2H), 1.71 - 1.56 (m, 2H), 1.44 - 1.32 (m, 2H), 0.90 - 0.80 (m, 3H)。

實例 51

步驟一：化合物51-2的製備

在0-5℃下，向51-1（10 g，95.66 mmol，8.70 mL，1 eq）和多聚甲醛（2.87 g，95.66 mmol，2.64 mL，1 eq）的混合物中，添加氯化鋅（1 M，1.91 mL，0.02 eq），然後將混合物在氮氣氣氛下於20℃攪拌12 h。然後加熱至90℃並再攪拌4小時。將反應混合物在減壓下濃縮以除去溶劑。粗產物減壓蒸餾（70℃，133 Pa壓力/油泵）。獲得化合物51-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 5.64 (s, 2H), 1.61 (qd, J= 4.1, 8.4 Hz, 1H), 1.08 - 0.99 (m, 2H), 0.96 - 0.86 (m, 2H)。

步驟二：化合物51的製備

將化合物15（100 mg，333.36 µmol，1 eq），化合物51-2（89.71 mg，666.72 µmol，2 eq），碘化鉀（166.01 mg，1.00 mmol，3 eq），碳酸鉀（92.15 mg，666.72 µmol，2 eq）混在N,N-二甲基甲醯胺（1 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在氮氣氣氛下在50℃攪拌12 h。通過添加0.5 mL水淬滅反應混合物，然後過濾以得到濾液。通過製備型HPLC（層析柱：Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相：含10 mmol/L的碳酸氫銨的水和乙腈；移動相中乙腈的比例從7%至37%，8 min）純化得化合物51。LCMS (ESI) m/z: 672.0 (2M)； ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD δ = 6.67 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.25 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 5.90 (s, 2H), 3.96 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 3.42 (s, 2H), 1.75 - 1.66 (m, 1H), 1.32 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 1.09 - 0.90 (m, 4H)。

實例 52

步驟一：化合物52-2的合成

將化合物22-1（2 g，7.32 mmol，1 eq）溶解在N,N-二甲基甲醯胺（20 mL）中，加入碳酸鉀（1.52 g，10.98 mmol，1.5 eq）和1-溴-4-氟丁烷（1.48 g，9.52 mmol，1.02 mL，1.3 eq）。將混合物在25℃下攪拌8小時。將殘餘物用水10 mL稀釋，並用乙酸乙酯萃取（10 mL × 2），合併的有機層用鹽水10 mL洗滌，用硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到化合物52-2。

步驟二：化合物52-3的合成

將化合物52-2（2.6 g，7.49 mmol，1 eq）溶解在二氧六環（50 mL）中，加入雙聯頻那醇硼酸酯（3.80 g，14.98 mmol，2 eq）和乙酸鉀（2.20 g，22.47 mmol，3 eq），最後加入Pd(dppf)Cl ₂（1.22 g，1.50 mmol，0.2 eq），用氮氣置換三次。將混合物在65℃攪拌8小時。將反應混合物用20mL 水稀釋，並用20mL乙酸乙酯萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到的殘餘物通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 5/1至0/1）純化，得到化合物52-3。LCMS (ESI) m/z: 313.0 (M+1)。

步驟三：化合物52-4的合成

將化合物52-3(3.4 g, 8.62 mmol, 1 eq) 溶解在四氫呋喃 (15 mL) 和水 (15 mL) 中，加入四水合高硼酸鈉 (2.65 g, 17.25 mmol, 3.32 mL, 2 eq)。將混合物在20℃下攪拌1小時。將反應混合物用20mL水稀釋並用20mL 乙酸乙酯萃取。合併的有機層用40mL鹽水（20mL×2）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 10 / 1至1/1）純化得化合物52-4。LCMS (ESI) m/z: 285.0 (M+1)。

步驟四：化合物52-5的合成

將化合物52-4（200 mg，703.53 µmol，1 eq）溶解在乙腈（3 mL）中，加入碳酸鉀（145.85 mg，1.06 mmol，1.5 eq）和2-碘甲基硼酸頻那醇酯（245.02 mg，914.59 µmol，1.3 eq）。將混合物在65℃下攪拌8小時。將反應混合物用20mL 水稀釋，並用乙酸乙酯40mL（20mL×2）萃取。合併的有機層用20mL鹽水（20mL×1）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物52-5。LCMS (ESI) m/z: 343.0 (M+1)。

步驟五：化合物52的合成

將化合物52-5（200 mg，584.58 µmol，1eq）溶解在異丙醇（2 mL）中，加入氫氧化鈉（2 M，584.58 μL，2 eq）。將混合物在25℃攪拌1小時。將反應混合物減壓濃縮得到殘留物。通過製備型HPLC（層析柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 µm；移動相：含10 mM NH ₄HCO ₃的水和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%至15%，9min）純化得到化合物52。LCMS (ESI) m/z: 267.0 (M-18+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.54 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.28 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 4.56 (t, J= 5.9 Hz, 1H), 4.44 (br t, J= 5.7 Hz, 1H), 3.92 (t, J= 6.1 Hz, 2H), 3.22 (s, 2H), 1.87 - 1.66 (m, 4H), 1.14 (s, 1H)。

實例 53

步驟一：化合物53-2的製備

將化合物22-1(2.63 g, 9.63 mmol, 1 eq)和4-溴丁氧基-叔丁基-二甲基矽烷(2.83 g, 10.59 mmol, 1.1 eq) 溶於DMF (30 mL)中，然後在15℃下向該混合物加碳酸鉀 (2.00 g, 14.44 mmol, 1.5 eq)，最後將該混合物在80℃下攪拌16小時。向混合物中加入水（50mL），並用乙酸乙酯（100mL × 3）萃取，合併的有機層用鹽水（100mL × 2）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並在減壓下濃縮，殘留物通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至0/1）純化得化合物53-2。LCMS (ESI) m/z: 460.9 (M+3)。

步驟二：化合物53-3的製備

將化合物53-2(1.85 g, 4.03 mmol, 1 eq)溶于無水二氯甲烷(20 mL)中，然後在0℃下向該混合物加N,N-二乙基乙胺.三氟化氫(6.49 g, 40.27 mmol, 6.56 mL, 10 eq)，然後將該混合物在25℃下攪拌2小時。向混合物中加入水（30mL），並用二氯甲烷（30mL × 2）萃取，將合併的有機層用鹽水（100mL）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到化合物53-3。

步驟三：化合物53-4的製備

將化合物53-3(1.5 g, 4.35 mmol, 1 eq)溶于無水二氯甲烷(20 mL)，在0℃下向該混合物加戴斯馬丁試劑 (2.40 g, 5.65 mmol, 1.75 mL, 1.3 eq)，然後將該混合物在15℃下攪拌16小時。通過加入飽和硫代硫酸鈉水溶液50mL淬滅反應混合物，並用二氯甲烷（50mL × 2）萃取。合併的有機層用飽和碳酸氫鈉（50mL）和鹽水（100mL）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物53-4。LCMS (ESI) m/z: 343.0(M+1).

步驟四：化合物53-5的製備

將化合物53-4(1.5 g, 4.37 mmol, 1 eq)溶于無水二氯甲烷(20 mL)中，在0℃下向該混合物加二乙胺基三氟化硫(1.41 g, 8.74 mmol, 1.16 mL, 2 eq)，然後將該混合物在25℃下攪拌3小時。將反應混合物倒入冷卻的飽和碳酸氫鈉（50mL）中，並用二氯甲烷（50mL × 2）萃取，將合併的有機層用鹽水（100mL）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到殘餘物。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 50/1至5/1），得化合物53-5。LCMS (ESI) m/z: 367.0(M+3)。

步驟五：化合物53-6的製備

將化合物53-5(774 mg, 2.12 mmol, 1 eq)，4,4,5,5-四甲基-2-（4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基）-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(1.08 g, 4.24 mmol, 2 eq)，乙酸鉀(624.05 mg, 6.36 mmol, 3 eq)和Pd(dppf)Cl ₂.CH ₂Cl ₂(346.19 mg, 423.92 µmol, 0.2 eq)溶于無水二氧六環(20 mL)中，然後將該混合物用氮氣置換3次，最後將該混合物在75℃氮氣保護下攪拌16小時。將混合物加入水（20mL）並用乙酸乙酯（30 mL×3）萃取，將合併的有機層用鹽水（50 mL）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，殘留物通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯 = 1/0至2/1）純化得化合物53-6。LCMS (ESI) m/z: 413.2(M+1)。

步驟六：化合物53-7的製備

將化合物53-6(1 g, 2.43 mmol, 1 eq)溶於四氫呋喃（10 mL）和水（5 mL）的混合溶劑中，在0℃下加入四水合高硼酸鈉(373.24 mg, 2.43 mmol, 466.55 μL, 1 eq)，然後將混合物在氮氣保護下於15℃攪拌1個小時。向反應混合物中加入20 mL水，並用乙酸乙酯（20 mL × 3）萃取，用鹽水（50 mL）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘留物通過矽膠快速柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯 = 20/1至0/1），得化合物53-7。LCMS (ESI) m/z: 303.1(M+1)。

步驟七：化合物53-8的製備

將化合物2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(105.29 mg, 393.03 µmol, 1.1 eq)和化合物53-7(108 mg, 357.30 µmol, 1 eq)溶於乙腈(5 mL)，在15℃下向該混合物中加入碳酸鉀(74.07 mg, 535.94 µmol, 1.5 eq)，然後將該混合物於60℃下攪拌2小時。向混合物中加入10 mL水，並用乙酸乙酯（20 mL × 3）萃取，用鹽水（30 mL × 2）洗滌，經無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮得化合物53-8。LCMS (ESI) m/z: 361.1(M+1)。

步驟八：化合物53的製備

將化合物53-8 (117 mg, 324.90 µmol, 1 eq) 溶於異丙醇 (0.5 mL)，在0℃下加入氫氧化鈉 (2 M, 324.90 μL, 2 eq)，然後將該混合物在20℃下攪拌2小時。將反應液過濾，通過製備型HPLC純化 (層析柱: Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相：10 mmol/L的碳酸氫銨水溶液和乙腈，移動相中乙腈的比例從1%至6%，4min）得化合物53。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.52 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.25 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.11 - 5.75 (m, 1H), 3.91 (t, J= 6.1 Hz, 2H), 3.21 (s, 2H), 2.03 - 1.82 (m, 2H), 1.81 - 1.69 (m, 2H)；LCMS (ESI) m/z: 285.1(M-18+1)。

實例 54

步驟一：化合物54-2的製備

向化合物54-1（28 g，159.01 mmol，1 eq）的N-甲基吡咯烷酮（280 mL）的溶液中，加入氫氧化鈉（25.44 g，636.03 mmol，4 eq）。將混合物在130℃攪拌2小時。在20℃下添加鹽酸水溶液（350mL，2N）淬滅反應混合物，然後用乙酸乙酯 500mL萃取。將有機層用鹽水900mL（300mL×3）洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，得到殘餘物。將殘餘物用石油醚 / 甲基叔丁基醚（5/1，100 mL）攪拌，過濾，得到濾餅，濃縮濾液，然後通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 10/1至0/1）純化，濾餅與柱層析法純化得到的產物合併獲得化合物54-2。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ = 6.84 - 6.71 (m, 1H), 6.65 (br d, J= 10.5 Hz, 1H)。

步驟二：化合物54-3的製備

將化合物54-2（7.5 g，43.08 mmol，1 eq），碘乙烷（20.16 g，129.23 mmol，10.34 mL，3 eq），碳酸鉀（14.88 g，107.70 mmol，2.5 eq）混合在N,N-二甲基甲醯胺（80 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在氮氣氣氛下於80℃攪拌12小時。向反應混合物中加入50 mL水，然後用50 mL乙酸乙酯萃取。有機層用飽和食鹽水（30 mL×3）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物54-3。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.46 (d, J= 10.2 Hz, 2H), 4.47 - 4.36 (m, 2H), 4.07 (d, J= 6.9 Hz, 2H), 1.41 (td, J= 7.1, 18.6 Hz, 6H)。

步驟三：化合物54-4的製備

在0-5℃下，向化合物54-3（8.8 g，38.23 mmol，1 eq）和2-甲基磺醯基乙醇（5.22 g，42.05 mmol，1.1 eq）的N,N-二甲基甲醯胺（90 mL）溶液中，分批加入氫化鈉（3.36 g，84.10 mmol，60%純度，2.2 eq）。將混合物在20℃下攪拌1小時。通過加入鹽酸水溶液（200 mL，0.5 N）淬滅反應混合物，然後用乙酸乙酯50 mL萃取。有機層用50 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，殘餘物通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 100/1至50/1）純化得54-4。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 12.01 (d, J= 1.4 Hz, 1H), 6.30 (dd, J= 2.4, 10.1 Hz, 1H), 6.13 (dd, J= 2.4, 11.2 Hz, 1H), 4.40 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 4.04 (q, J= 6.9 Hz, 2H), 1.52 - 1.36 (m, 6H)。LCMS (ESI) m/z: 229.0 (M+1)。

步驟四：化合物54-5的製備

向化合物54-4（6.3 g，27.61 mmol，1 eq）的乙醇（40 mL）溶液中，加入氫氧化鈉（4.42 g，110.42 mmol，4 eq）的水（20mL）溶液。將混合物在80℃下攪拌12小時。用鹽酸水溶液（200mL，1N）將反應混合物的pH調節至＜3，然後用100 mL乙酸乙酯萃取。有機層用100mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。得到化合物54-5。LCMS (ESI) m/z: 201.1 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 12.53 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 6.44 (dd, J= 2.4, 10.1 Hz, 1H), 6.24 (dd, J= 2.3, 10.3 Hz, 1H), 4.32 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 1.61 (t, J= 7.0 Hz, 3H)。

步驟五：化合物54-6的製備

0-5℃下，向化合物54-5（5.1 g，25.48 mmol，1 eq）的三氟乙酸（30 mL）溶液中，加入丙酮（23.70 g，408.06 mmol，30 mL，16.02 eq）和三氟乙酸酐（21.41g，101.92 mmol，14.18 mL，4 eq）。將混合物在100℃下攪拌16小時。將反應混合物在減壓下濃縮以除去溶劑。將殘餘物用碳酸氫鈉水溶液100mL稀釋，並用乙酸乙酯 100 mL萃取。有機層用30 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝20/1至10/1）純化殘餘物。將殘餘物用石油醚（20mL）攪拌，過濾，濾餅乾燥得到化合物54-6。LCMS (ESI) m/z: 241.0 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.25 (dd, J= 2.2, 11.3 Hz, 1H), 6.19 (dd, J= 2.3, 9.1 Hz, 1H), 4.07 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 1.63 (s, 6H), 1.50 - 1.40 (m, 3H)。

步驟六：化合物54-7的製備

向化合物54-6（2.5 g，10.41 mmol，1 eq）的四氫呋喃（25 mL）溶液中，加入N-溴代丁二醯亞胺（2.78 g，15.61 mmol，1.5 eq。），然後加入醋酸（2.50 g，41.63 mmol，2.38 mL，4 eq），並將混合物在80℃下攪拌1h，然後加入NBS（926.12 mg，5.20 mmol，0.5 eq），並在80℃下攪拌1小時。再過2小時。將反應混合物在減壓下濃縮以除去溶劑。將殘餘物用碳酸氫鈉水溶液50 mL稀釋，並用乙酸乙酯（50mL × 2）萃取。合併的有機層用20mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 20/1至10/1）純化殘餘物。獲得化合物54-7。LCMS (ESI) m/z: 318.8/320.8 (M+1/M+3)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.49 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 4.17 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 1.78 (s, 6H), 1.57 - 1.49 (m, 3H)。

步驟七：化合物54-8的製備

將化合物54-7（1.8 g，5.64 mmol，1 eq），4,4,5,5-四甲基-2-（4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基）-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（4.30 g，16.92 mmol，3 eq），醋酸鉀（1.94 g，19.74 mmol，3.5 eq），Pd(dppf)Cl ₂.CH ₂Cl ₂（460.62 mg，564.05 µmol，0.1 eq）混合於二氧六環（20 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在90℃攪拌，在氮氣氣氛下反應12小時。通過加入100mL 水淬滅反應混合物，並用乙酸乙酯 100mL萃取。有機層用50mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝ 10/1至6/1）純化殘餘物。獲得化合物54-8。LCMS (ESI) m/z: 367.0 (M+1)。

步驟八：化合物54-9的製備

將化合物54-8 (550 mg, 1.50 mmol, 1 eq)溶在四氫呋喃（5 mL）和水（5 mL）中，加入四水合高硼酸鈉（462.18 mg，3.00 mmol，577.73 μL，2 eq）。將混合物在20℃下攪拌1小時。將反應混合物用10mL 水稀釋，並用鹽酸水溶液（0.5 N）調節pH ＜7，然後用20 mL乙酸乙酯萃取。有機層用10mL鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。殘餘物通過矽膠快速柱層析法（石油醚/乙酸乙酯＝5/1至3/1）純化。得到化合物54-9。LCMS (ESI) m/z: 257.1 (M+1)。

步驟九：化合物54-10的製備

將化合物54-9（180 mg，702.50 µmol，1 eq），2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（263.48 mg，983.50 µmol，1.4 eq），碳酸鉀（145.64 mg，1.05 mmol，1.5 eq）混合於乙腈（2 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後將其在氮氣氣氛下在60℃下攪拌4小時。用鹽酸水溶液（1 N）將反應混合物調整至pH＜3，然後用乙酸乙酯10 mL萃取，將有機層用10 mL鹽水洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到化合物54-10。LCMS (ESI) m/z: 315.1 (M+1)。

步驟十：化合物54的製備

將化合物54-10（220 mg，700.48 µmol，1 eq）溶於異丙醇（2mL）,加入氫氧化鈉(（2 M，875.60 μL，2.5 eq）。將混合物在20℃下攪拌1小時。將混合物過濾以得到濾液。殘餘物通過製備型HPLC純化（層析柱：Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相：10 mmol/L的碳酸氫銨的水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從1％至6％，4min）。獲得化合物54。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.20 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 3.87 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 3.23 (s, 2H), 1.18 (t, J= 7.0 Hz, 3H)；LCMS (ESI) m/z: 257.0 (M+1)。

實例 55

步驟一：化合物55-2的製備

將化合物54-2（10 g，57.44 mmol，1 eq）溶解在二甲基甲醯胺（100 mL）溶液中，加入碳酸鉀（19.85 g，143.59 mmol，2.5 eq）和1-溴丁烷（19.68 g，143.59 mmol，15.49 mL，2.5 eq）在25℃，然後在80℃攪拌16小時。將殘餘物真空濃縮，加入水（50 mL），水相用乙酸乙酯（100 mL × 1）萃取。合併的有機相用鹽水（100 mL × 1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並濃縮在真空中。粗品通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝100/1，10/1）。得到55-2。LCMS: 287.1 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.52 - 6.40 (m, 2H), 4.35 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 3.99 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 1.86 - 1.68 (m, 4H), 1.48 (quind, J= 7.4, 14.9 Hz, 4H), 0.98 (t, J= 7.4 Hz, 6H)。

步驟二：化合物55-3的製備

將化合物55-2（14 g，48.90 mmol，1 eq）和2-甲基磺醯基乙醇（6.37 g，51.34 mmol，1.05 eq）溶解在二甲基甲醯胺（160 mL）溶液中，在0-5℃下分批加入NaH (4.11 g, 102.68 mmol, 60%純度, 2.1 eq)。將混合物在20℃下攪拌1小時。通過加入HCl水溶液（200 mL，0.5 N）淬滅反應混合物，然後用EA 300 mL萃取。將有機層用300 mL鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾，並在減壓下濃縮，粗品通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝ 300 / 1，10 / 1）。得到化合物55-3。LCMS:285.4 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 12.01 (d, J= 1.5 Hz, 1H), 6.20 (dd, J= 2.4, 10.0 Hz, 1H), 6.05 (dd, J= 2.4, 11.4 Hz, 1H), 4.26 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.87 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 1.81 - 1.59 (m, 4H), 1.54 - 1.32 (m, 4H), 0.91 (dt, J= 3.7, 7.4 Hz, 6H)。

步驟三：化合物55-4的製備

將化合物55-3（430 mg，1.51 mmol，1 eq）溶解在乙醇（5 mL）溶液中，在20℃下加入NaOH（241.96 mg，6.05 mmol，4 eq）的H ₂O（1mL）溶液。將混合物在85℃下攪拌16小時。用HCl水溶液（10 mL，1N）將反應混合物的pH調節至＜3，然後用10 mL EA萃取。有機層用10 mL鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物。得到55-4。LCMS (ESI) m/z: 229.1 (M+1)。

步驟四：化合物55-5的製備

將化合物55-5（500 mg，2.19 mmol，1 eq）溶解在二氯甲烷（5 mL）溶液中，在-30℃，添加液溴（350.12 mg，2.19 mmol，112.94 μL，1 eq）的二氯甲烷（0.5 mL）溶液，然後再緩慢升溫至20℃攪拌1小時。將粗品倒入Na ₂SO ₃（10 mL）中，並攪拌10分鐘。用二氯甲烷（10 mL × 2）萃取水相。合併的有機相用鹽水（20 mL × 1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮得到55-5。LCMS (ESI) m/z: 307.3(M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 13.31 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 11.34 (s, 1H), 6.40 (d, J= 10.0 Hz, 1H), 4.26 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 2.05 - 1.87 (m, 2H), 1.55 (s, J= 7.5 Hz, 2H), 1.05 (t, J= 7.3 Hz, 3H)。

步驟五：化合物55-6的製備

將化合物55-5（4.9 g，15.96 mmol，1 eq）溶解在三氟乙酸（30 mL）溶液中，添加丙酮（23.70 g，408.06 mmol，30 mL，25.58 eq），三氟乙酸酐（13.40 g，63.82 mmol，8.88 mL，4 eq）在0℃，然後在100℃攪拌16小時。將該溶液真空濃縮，然後加入H ₂O（50mL），用乙酸乙酯（50 mL × 2）萃取。合併的有機相用NaHCO ₃（100 mL × 1），鹽水（100 mL × 1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠柱層析法純化（石油醚/乙酸乙酯= 100 / 1，50/1）。得到化合物55-6。LCMS (ESI) m/z: 347 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.40 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 3.98 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 1.86 - 1.76 (m, 2H), 1.68 (s, 6H), 1.48 (qd, J= 7.4, 15.0 Hz, 2H), 0.92 (t, J= 7.4 Hz, 3H)。

步驟六：化合物55-7的製備

將化合物55-6（2.5 g，7.20 mmol，1 eq），4,4,5,5-四甲基-2-（4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基）-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（4.57 g，18.00 mmol，2.5 eq），乙酸鉀（2.12 g，21.60 mmol，3 eq）和Pd(dppf)Cl ₂.CH ₂Cl ₂（588.06 mg，720.10 µmol，0.1 eq）溶解在二氧六環（25 mL）溶液中，然後在82℃攪拌16 h。將反應混合物減壓濃縮以除去溶劑。在溶液中加入H ₂O（30 mL），用乙酸乙酯（50 mL × 2）萃取水相。合併的有機相用鹽水（100 mL）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝ 10 / 1至0 / 1）。得到化合物55-7。LCMS (ESI) m/z: 395.2 (M+1)。

步驟七：化合物55-8的製備

將化合物55-7 (3.7 g, 9.39 mmol, 1 eq)溶解在四氫呋喃（20 mL），H ₂O（20 mL）中，加入四水合高硼酸鈉（4.33 g，28.16 mmol，5.41 mL，3 eq）在25℃，攪拌2小時。向溶液中加入H ₂O（50 mL），用乙酸乙酯（50 mL × 2）萃取。合併的有機相用鹽水（100 mL × 1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。粗品通過矽膠層析法純化（石油醚/乙酸乙酯＝10 / 1至5 / 1）。得到化合物55-8。LCMS (ESI) m/z: 285.3 (M+1)； ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 6.42 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 4.01 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 1.88 (br d, J= 7.0 Hz, 2H), 1.77 (s, 6H), 1.60 - 1.52 (m, 2H), 1.00 (t, J= 7.4 Hz, 3H)。

步驟八：化合物55-9的製備

將化合物55-8（300 mg，1.06 mmol，1 eq）溶解在乙腈（5 mL）溶液中，添加 2-（碘甲基）-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷（424.07 mg，1.58 mmol，1.5 eq），K ₂CO ₃（218.78 mg，1.58 mmol，1.5 eq）在25℃下，然後在60℃下攪拌2小時。向溶液中加入H ₂O（5mL），水相用乙酸乙酯（10 mL × 2）萃取。合併的有機相用鹽水（30 mL）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。得到化合物55-9。LCMS (ESI) m/z: 343.3 (M+1)。

步驟九：化合物55的製備

將化合物55-9（200 mg，479.36 µmol，82％純度，1 eq）溶解在i-PrOH（2 mL）溶液中，添加NaOH（3 M，319.57 μL，2 eq），然後在25℃下攪拌2小時。過濾混合物，並將濾液用於製備型HPLC。通過製備型HPLC純化（層析柱：Waters Xbridge 150 × 25 mm × 5 µm；移動相：10 mmol/L的碳酸氫銨的水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從1%至20%，7 min）。得到化合物55。LCMS (ESI) m/z: 285 (M+1), 267.1 (M-18+1)； ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.19 (br d, J= 12.8 Hz, 1H), 3.81 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 3.32 - 3.18 (m, 2H), 1.59 - 1.50 (m, 2H), 1.34 - 1.25 (m, 2H), 0.79 (t, J= 7.4 Hz, 3H)。

實例 56

步驟一：化合物56-2的製備

將化合物56-1 (7.2 g, 39.31 mmol, 1 eq) 和2-甲磺醯基乙醇 (4.88 g, 39.31 mmol, 1 eq) 溶於DMF (72 mL)，在0℃下分批加入NaH (3.14 g, 78.62 mmol, 60% 純度, 2 eq)，混合物於20℃攪拌0.5小時。將反應混合物緩慢倒入冰水(100 mL)中，用乙酸乙酯（150 mL）萃取，水相用HCl調節pH=2，並用300mL乙酸乙酯400 mL（200 mL×2）萃取。合併有機相用鹽水（300 mL）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮得到化合物56-2。

步驟二：化合物56-3的製備

將化合物56-2 (6.2 g, 34.22 mmol, 1 eq)溶於乙醇 (20 mL)，在室溫下加入NaOH (8 M, 42.78 mL, 10 eq)，混合物於120℃攪拌48小時。減壓濃縮除去乙醇，然後用H ₂O 100 mL稀釋並用HCl調節pH=3後，用乙酸乙酯150 mL（150 mL×1）萃取，水相用HCl調節到pH=2，過濾後濾餅經減壓乾燥得到粗品，將粗產物在20℃下用石油醚/乙酸乙酯=10/1（55 mL）攪拌30分鐘，過濾，濾餅乾燥得到化合物56-3。LCMS (ESI) m/z: 201.1 (M+1)。

步驟三：化合物56-4的製備

將化合物56-3（3.12 g, 15.59 mmol, 1 eq）溶於DCM (30 mL) 中，在室溫下加入NBS (2.77 g, 15.59 mmol, 1 eq)。混合物在0℃下攪拌2小時，減壓濃縮反應混合物以除去溶劑。將殘餘物用H ₂O 60 mL稀釋，並用EA（30 mL × 2）萃取，並用鹽水（30mL × 2）洗滌，用Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮得到粗品，通過製備型HPLC純化(層析柱: Phenomenex Synergi Max-RP 250×50 mm×10 µm；移動相:水 (0.1% TFA) 和乙腈，移動相中乙腈的比例從30%至60%，20 min) 得到化合物56-4。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d ₆) δ = 6.73 - 6.64 (m, 1 H), 4.24 - 4.13 (m, 2 H), 1.41 - 1.31 (m, 3 H)。

步驟四：化合物56-5的製備

將化合物56-4 (637 mg, 2.28 mmol, 1 eq) 溶於TFA (6 mL)中，0℃下加入丙酮 (1.33 g, 22.83 mmol, 1.68 mL, 10 eq)，滴加TFAA (1.44 g, 6.85 mmol, 952.51 μL, 3 eq)，用氮氣置換數次後，反應物在N ₂下於100℃攪拌12小時。減壓濃縮除去溶劑，用H ₂O 20mL稀釋並用EA (30mL × 2)萃取。用30 mL鹽水（30 mL）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到殘餘物，通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝10/1）得到化合物56-5。LCMS (ESI) m/z: 321.0 (M+3)。

步驟五：化合物56-6的製備

將化合物56-5（484 mg, 758.33 µmol, 50% 純度, 1 eq）溶於二氧六環（10 mL）中，然後在氮氣流下加入頻哪醇硼酸酯（577.70 mg, 2.27 mmol, 3 eq），乙酸鉀（260.48 mg, 2.65 mmol, 3.5 eq）和Pd（dppf）Cl ₂（262.89 mg, 227.50 µmol, 0.3 eq）。將混合物在氮氣保護下於70℃下攪拌48小時。將反應混合物過濾，然後用30 mL水稀釋，並用乙酸乙酯（30 mL × 2）萃取，用鹽水30 mL（30 mL×1）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮得到殘餘物。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至2/1）得到化合物56-6。LCMS (ESI) m/z: 367.2 (M+1)。

步驟六：化合物56-7的製備

將化合物56-6（806 mg, 2.20 mmol, 1 eq）溶於THF（8 mL）和H ₂O（8 mL）的混合溶液中。在20℃下加入四水合過硼酸鈉（1.02 g, 6.60 mmol, 3 eq），將混合物在20℃攪拌1小時。反應液用水20 mL稀釋，然後用乙酸乙酯80 mL（40 mL × 2）萃取，用鹽水（40 mL）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。殘餘物通過柱層析法純化（SiO ₂，石油醚/乙酸乙酯＝ 10/1至4/1）得到化合物56-7。LCMS (ESI) m/z: 257.2 (M+1)。

步驟七：化合物56-8的製備

將化合物56-7（20 mg, 78.06 µmol, 1 eq）溶於CH ₃CN（1 mL），在室溫下依次加入2-碘甲基頻哪醇硼酸酯（25.09 mg, 93.67 µmol, 1.2 eq），K ₂CO ₃（12.95 mg, 93.67 µmol, 1.2 eq），加畢後用氮氣置換3次，然後將混合物在N ₂下於60℃攪拌6小時。將反應混合物減壓濃縮除去溶劑CH ₃CN。將殘餘物用20 mL H ₂O稀釋，用1M HCl調節pH=3，並用60 mL乙酸乙酯（30 mL×2）萃取。合併的有機層用20 mL鹽水（20mL×1）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮，得到黃色油狀化合物56-8。LCMS (ESI) m/z: 315.1 (M+1)。

步驟八：化合物56的製備

將化合物56-8 (24 mg, 76.42 µmol, 1 eq)溶於i-PrOH (1 mL)，室溫滴加 NaOH (2 M, 76.42 µL, 2 eq)。混合物20℃下攪拌2小時。反應混合物用H ₂O 1 mL稀釋，通過製備型HPLC純化 (層析柱: Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相: 10 mmol/L的碳酸氫銨的水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從0%至10%，10 min)得到化合物56。LCMS (ESI) m/z: 257.1 (M+1)。 ¹H NMR (400 MHz, D ₂O) δ = 6.33 (d, J= 12.72 Hz, 1 H), 4.03 (q, J= 6.97 Hz, 2 H), 3.27 (s, 2 H), 1.31 (t, J= 7.03 Hz, 3 H)。

實例 57

步驟一：化合物57-2的製備

將化合物57-1(5.12 g, 39.71 mmol, 3.53 mL, 1 eq) 溶於DCM (100 mL)中，在室溫下加入吡啶(3.20 g, 40.50 mmol, 3.27 mL, 1.02 eq)，0℃下加入4-羥基四氫吡喃(5 g, 48.96 mmol, 4.90 mL, 1.23 eq)。混合物於20℃攪拌4小時，於20℃下加入H ₂O 50 mL 淬滅, 用DCM 100 mL（50 mL×2）萃取，合併有機相用鹽水200 mL（100 mL×2）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾並減壓濃縮得到化合物57-2， ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 5.73 - 5.63 (s, 2 H), 4.90 - 4.77 (m, 1 H), 3.93 - 3.81 (m, 2 H), 3.53 - 3.40 (m, 2 H), 2.01 - 1.91 (m, 2 H), 1.77 - 1.63 (m, 2 H)。

步驟二：化合物57的製備

將化合物15(126.04 mg, 420.17 µmol, 1 eq)，化合物57-2(163.54 mg, 840.33 µmol, 2 eq), K ₂CO ₃(116.14 mg, 840.33 µmol, 2 eq)，碘化鉀(139.50 mg, 840.33 µmol, 2 eq) 溶於DMF (2 mL)中，用氮氣置換3次，混合物在N ₂下於50℃攪拌12小時，反應混合物用H ₂O 1 mL和乙腈1 mL稀釋，通過製備型HPLC純化(層析柱: Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相：10 mmol/L的碳酸氫銨的水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從10%-40%，10 min) 得到化合物57。LCMS (ESI) m/z: 792.1 (2M)； ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.69 (d, J= 8.78 Hz, 1 H), 6.29 (d, J= 8.78 Hz, 1 H), 5.92 (s, 2 H), 3.99 (s, 1 H), 3.99 - 3.93(m, 1 H), 3.93 - 3.88 (m, 2 H), 3.57 (ddd, J= 11.80, 8.78, 3.01 Hz, 2 H), 3.44 (s, 2 H), 2.07- 1.95 (m, 2 H), 1.72 (dtd, J= 13.05, 8.75, 8.75, 3.95 Hz, 2 H), 1.31 (t, J= 6.96 Hz, 3 H)。

實例 58

步驟一：化合物58-2的製備

將化合物57-1（5 g，38.78 mmol，3.45 mL，1 eq），吡啶（3.13 g，39.55 mmol，3.19 mL，1.02 eq）溶解在二氯甲烷溶液中，然後加入異丙醇 (2.33 g, 38.78 mmol, 2.97 mL, 1 eq) 於0℃下，然後緩慢升溫至20℃下攪拌5小時。向溶液中加入冰水（50 mL）並攪拌10分鐘。水相用DCM（50 mL × 2）萃取。合併的有機相用鹽水（200 mL × 1）洗滌，用無水Na ₂SO ₄乾燥，過濾並真空濃縮。得到化合物58-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 5.70 - 5.64 (m, 2H), 4.89 (s, J= 6.3 Hz, 1H), 1.27 (d, J= 6.3 Hz, 6H)。

步驟二：化合物58的製備

將化合物15（0.1 g，333.36 µmol，1eq），碳酸鉀（138.22 mg，1.00 mmol，3 eq），碘化鉀（166.01 mg，1.00 mmol，3 eq）在氮氣氛圍下加入DMF（2 mL）和碳酸氯甲基酯•異丙酯（即化合物58-2，101.72 mg，666.71 µmol，2 eq）在25℃下。加熱至50℃保持12小時。向溶液中加入H ₂O（2 mL），過濾，濾液通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相：10 mmol/L的碳酸氫銨的水溶液和乙腈；移動相中乙腈的比例從14%至44%，10min）。獲得化合物58。LCMS (ESI) m/z: 708 (2M)； ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.67 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.26 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 5.90 (s, 2H), 3.96 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 3.42 (s, 2H), 3.34 (br s, 1H), 1.32 (d, J= 6.4 Hz, 9H)。

實例 59

步驟一：化合物59-2的製備

在0-5℃下，向57-1（3 g，23.27 mmol，2.07 mL，1 eq）的二氯甲烷（50 mL）溶液中加入吡啶（1.93 g，24.43 mmol，1.97 mL，1.05 eq）和2-甲氧基乙醇（1.86 g，24.43 mmol，1.05eq）。將混合物在20℃下攪拌12小時。通過添加50mL水淬滅反應混合物，然後將有機層用20 mL鹽酸水溶液及水（20 mL × 2）洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並在減壓下濃縮，得到化合物59-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 5.76 (s, 2H), 4.39 (dd, J= 3.8, 5.4 Hz, 2H), 3.66 (dd, J= 3.9, 5.4 Hz, 2H), 3.42 (s, 3H)。

步驟二：化合物59的製備

將化合物15（100 mg，333.36 µmol，1 eq），化合物59-2（112.39 mg，666.72 µmol，2 eq），碘化鉀（166.01 mg，1.00 mmol，3 eq），碳酸鉀（92.15 mg，666.72 µmol，2 eq）混在N,N-二甲基甲醯胺（1 mL）中，脫氣並用氮氣置換3次，然後將混合物在氮氣氣氛下在50℃攪拌12 h。通過添加0.5mL 水淬滅反應混合物，然後過濾以得到濾液。通過製備型HPLC純化（柱：Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相：含10 mmol/L的碳酸氫銨的水和乙腈；移動相中乙腈的比例從5%至35%，8min）。獲得化合物59。LCMS (ESI) m/z: 739.9 (2M)； ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD) δ = 6.65 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 6.22 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 5.92 (s, 2H), 4.36 - 4.30 (m, 2H), 3.95 (q, J= 6.9 Hz, 2H), 3.68 - 3.60 (m, 2H), 3.38 (s, 5H), 1.30 (t, J= 7.0 Hz, 3H)。

實例 60

步驟一：化合物60-2的合成

在0-5℃下, 將57-1（3 g，23.27 mmol，2.07 mL，1 eq）溶解在二氯甲烷（100 mL）中，加入吡啶（1.88 g，23.73 mmol，1.92 mL，1.02 eq）和乙醇（1.07 g，23.27 mmol，1 eq）。再在25℃下攪拌8小時。反應混合物用20 mL 水稀釋, 並用二氯甲烷 60mL（30 mL × 2）萃取。合併的有機層用30mL鹽水（30mL×1）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮，得到化合物60-2。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl ₃) δ = 5.78 - 5.66 (m, 2H), 4.29 (q, J= 7.2 Hz, 2H), 1.41 - 1.30 (m, 3H)。

步驟二：化合物60的合成

化合物15（100 mg，333.36 µmol，1 eq），碳酸鉀（138.22 mg，1.00 mmol，3 eq），碘化鉀（166.01 mg，1.00 mmol，3 eq）混合於N,N-二甲基甲醯胺（2 mL）中，用氮氣吹掃3次，然後在25℃的氮氣氣氛下，添加化合物60-2（184.74 mg，1.33 mmol，4 eq）。然後將混合物在50℃下攪拌16小時。向混合物中加入10mL水。粗產物通過製備型HPLC純化（層析柱：Waters Xbridge 150×25 mm×5 µm；移動相：含10 mmol/L的碳酸氫銨的水和乙腈；移動相中乙腈的比例從11%至41%，10 min）。獲得化合物60。LCMS (ESI) m/z: 680.1 (2M)。 ¹H NMR (400 MHz, CD ₃OD δ = 6.70 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 6.30 (d, J= 8.9 Hz, 1H), 5.92 (s, 2H), 4.24 (q, J= 7.2 Hz, 2H), 4.04 - 3.90 (m, 2H), 3.44 (s, 2H), 1.31 (dt, J= 4.6, 7.0 Hz, 6H)。

生物活性測試

實驗例 1 ：化合物恢復抗生素抑菌作用檢測（ MIC shift ）

測試化合物對3株肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1705（KPC-2）、ATCC BAA-2470（NDM-1）、ARLG-1196（CTM-1組, SHV, NDM,TEM）、以及1株大腸埃希菌ARLG-2829（NDM-5, OXA-1）的最低抑菌濃度。按照臨床和實驗室標準協會（Institute of clinical and laboratory standard, CLSI）要求，通過微量液體稀釋法，固定美羅培南濃度為4μg/mL的前提下測定各藥物組合的最低抑菌濃度（Minimum Inhibitory Concentration，MIC）。

製備化合物主機板：實驗當天將待測試化合物（終濃度0.3125 μg/mL至20 μg/mL）和美羅培南（終濃度範圍1 μg/mL~64 μg/mL）用相應的溶劑（無菌ddH ₂O或DMSO）溶解成最高測試濃度的100×母液，然後將待測化合物和美羅培南在V底96-孔板中進行2倍系列梯度稀釋依次得到終濃度100×的工作液。

製備接種液：從過夜辛頓米勒瓊脂培養基Mueller Hinton II Agar（MHA, Cat. No. 211438，BD BBLTM）平板上挑取新鮮細菌單克隆，懸浮於滅菌生理鹽水，調節濃度為1×10 ⁸CFU/mL，再用陽離子調節的辛頓米勒培養基Cation-Adjusted Mueller Hinton II Broth（MHB, Catalog# 212332，BD BBLTM）稀釋到5×10 ⁵CFU/mL。

最低抑菌濃度（MIC）檢測：轉移1 μL待測化合物及美羅培南工作液至圓底96-孔板（Catalog# 3788，Corning）相應待測試孔中，取98 μL接種液加入到含有藥物的圓底96-孔板，此為MIC測試板，將平板倒置于37℃培養20-24 h後讀取MIC值，將抑制細菌生長的最低藥物濃度定為MIC。結果見表1。

實驗結果表明，本發明的系列化合物能恢復美羅培南對所測試菌株的抑制活性，與美羅培南單藥相比，聯合一定濃度各化合物後，可將美羅培南的最小抑菌濃度（MIC）恢復到耐藥折點（MIC=4 μg/mL）以下，有明顯的MIC躍遷，表明合成系列化合物對所測菌株表現的β-內醯胺酶（KPC-2、SHV、CTM-1及其亞型、NDM、TEM和OXA-1等）有很好的抑制作用。

表 1. 本發明化合物恢復抗生素的抑菌作用檢測 (MIC shift) 資料

化合物	菌株	MIC (μg/mL)
K.pneumoniae	E.coli
ATCC BAA-1705	ATCC BAA-2470	ARLG-1196	ARLG-2829 (尿液臨床分離株)
耐藥基因	KPC-2	NDM-1	CTM-1及其亞型, SHV, NDM,TEM	NDM-5, OXA-1
美羅培南	32	64	64	＞64
1+美羅培南 (4μg/mL)	0.0625	＞20	＞20	＞20
2+美羅培南 (4μg/mL)	20	＞20	＞20	＞20
3+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.3125	5	2.5	5
4+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.03	2.5	2.5	10
5+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.3125	20	10	＞20
6+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.03	10	10	20
7+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.03	20	20	＞20
8+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.3125	20	10	20
9+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.3125	＞20	＞20	＞20
10+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.03	5	2.5	10
11+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.03	2.5	2.5	10
12+美羅培南 (4μg/mL)	0.06	5	2.5	10
14+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.3125	5	2.5	10
15+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.3125	0.625	0.625	1.25
16+美羅培南 (4μg/mL)	0.625	5	5	10
17+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.3125	10	10	20
18+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.3125	2.5	1.25	5
19+美羅培南 (4μg/mL)	0.625	1.25	1.25	5
20+美羅培南 (4μg/mL)	1.25	2.5	2.5	2.5
21+美羅培南 (4μg/mL)	1.25	5	1.25	2.5
22+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.3125	＞20	20	＞20
23+美羅培南 (4μg/mL)	0.625	1.25	1.25	5
24+美羅培南 (4μg/mL)	0.625	2.5	2.5	5
25+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.3125	1.25	0.625	2.5
26+美羅培南 (4μg/mL)	0.625	0.625	0.625	2.5
27+美羅培南 (4μg/mL)	0.625	1.25	0.625	1.25
28+美羅培南 (4μg/mL)	1.25	5	10	10
29+美羅培南 (4μg/mL)	0.625	2.5	1.25	5
30+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.3125	10	2.5	2.5
31+美羅培南 (4μg/mL)	≤0.3125	5	1.25	2.5

實驗例 2 ：化合物恢復抗生素抑菌作用檢測（ MIC shift ）

測試化合物對5株肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1705（KPC-2）、ATCC BAA-2470（NDM-1）、ARLG-1196（CTM-1組, SHV, NDM,TEM）、NCTC 13440（VIM-1）、NCTC 13439（VIM），對1株大腸埃希菌 ARLG-2829（NDM-5, OXA-1）的最低抑菌濃度。按照臨床和實驗室標準協會（Institute of clinical and laboratory standard, CLSI）要求，通過微量液體稀釋法，固定待測化合物濃度為8 μg/mL的前提下測定各藥物組合的最低抑菌濃度（Minimum Inhibitory Concentration，MIC），測試方法同上，美羅培南的濃度範圍0.125 μg/mL至8 μg/mL。結果見表2。

實驗結果表明，本發明的系列化合物能恢復美羅培南對所測試菌株的抑制活性，與美羅培南單藥相比，聯合8 μg/mL各化合物後，可將美羅培南的最小抑菌濃度（MIC）顯著降低，有明顯的MIC躍遷，表明合成系列化合物對所測菌株表現的β-內醯胺酶（KPC-2、SHV、CTM-1及其亞型、NDM、NDM-1、NDM-5、TEM、VIM、VIM-1和OXA-1等）有很好的抑制作用。

表 2. 本發明化合物恢復抗生素的抑菌作用檢測 (MIC shift) 資料

化合物	菌株	MIC (μg/mL)
K.pneumoniae	E.coli
ATCC BAA-1705	ATCC BAA-2470	ARLG-1196	NCTC 13440	NCTC 13439	ARLG-2829 (尿液臨床分離株)
耐藥基因	KPC-2	NDM-1	CTM-1及其亞型, SHV, NDM,TEM	VIM-1	VIM	NDM-5, OXA-1
美羅培南	32	128	64	16	4	128
13(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	0.25	0.5	8	2	0.25
15(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	≤0.125	≤0.125	1	0.5	0.5
32(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	0.25	≤0.125	2	0.5	0.5
33(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	0.5	0.25	1	0.5	0.25
34(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	0.5	≤0.125	4	0.5	0.5
35(8μg/mL)+美羅培南	4	＞8	8	8	4	＞8
36(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	≤0.125	≤0.125	1	0.5	≤0.125
37(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	0.5	≤0.125	2	0.5	1
40(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	1	0.25	0.5	0.25	2
41(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	0.25	≤0.125	0.5	0.5	0.25
43(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	0.5	0.25	2	0.5	1
44(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	1	0.5	2	0.5	2
45(8μg/mL)+美羅培南	0.5	8	0.5	8	2	2
46(8μg/mL)+美羅培南	4	＞8	＞8	4	2	8
47(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	≤0.125	1	4	4	≤0.125
48(8μg/mL)+美羅培南	8	＞8	＞8	＞8	8	＞8
49(8μg/mL)+美羅培南	4	＞8	2	4	2	4
52(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	0.25	0.5	8	2	2
53(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	1	0.5	8	2	2
54(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	≤0.125	≤0.125	4	0.5	≤0.125
55(8μg/mL)+美羅培南	≤0.125	0.5	≤0.125	4	1	0.25

實驗例 3 ：化合物大鼠藥動學實驗

以標準方案測試化合物靜脈注射及口服投予後的齧齒類動物藥代特徵。具體來說，實驗中禁食的SD雄性大鼠靜脈注射及口服投予候選化合物。口服製劑和靜脈注射製劑均通過生理鹽水配置成10 mg/mL或30 mg/mL的澄清溶液，通過5分鐘靜脈推注或者灌胃投予。收集血漿樣品，以LC-MS/MS方法分析，並計算藥代參數。化合物15的藥代參數見表3，

實驗結果表明，本發明的系列化合物無論口服還是靜脈投予均具有良好的暴露量，在靜脈推注300毫克/千克時無明顯的毒副作用，安全性好，藥動學性質優異。

表 3. 本發明化合物的大鼠藥動學資料

大鼠藥動學參數	實例 15
靜脈推注(100mpk)	C ₀(μg/mL)	579.7
Cl(mL/min/kg)	3.02
Vd _ss(L/kg)	0.583
T _1/2(h)	3.9
AUC _0-last(h*μg/mL)	549.3
靜脈推注(300mpk)	C ₀(μg/mL)	1385.1
Cl(mL/min/kg)	4.29
Vd _ss(L/kg)	0.96
T _1/2(h)	4.56
AUC _0-last(h*μg/mL)	1155.2
口服 (100 mpk)	C _max(μg/mL)	35.2
T _max(h)	2.0
T _1/2(h)	4.99
AUC _0-last(h*μg/mL)	278.3
生物利用度（%） ^#	52.2

^#注：生物利用度計算公式為= AUC _0-inf(100mpk PO投予) / AUC _0-inf(100 mpk IV投予)

實驗例 4 ：化合物大腿肌肉及肺部藥力學實驗

1） 大腿肌肉模型

36只CD-1雌鼠分成12籠，每籠3只；計感染當天為第0天。

於第-4天腹腔注射免疫抑制劑環磷醯胺150 mg/kg，第-1天再次腹腔注射免疫抑制劑環磷醯胺100 mg/kg造成免疫缺陷小鼠。

於第-1天在MHA平板復蘇菌株 Klebsiella pneumoniaeATCC BAA-1705。挑取復蘇的菌落溶於無菌生理鹽水中，製備濃度為5.6E+07 CFU/mL的菌液用於小鼠大腿肌肉感染。計感染開始時間為0h，於0h通過大腿肌肉每只注射100 μL菌液，即接種量為5.6E+06 CFU/小鼠。感染後2h，根據實驗方案進行投予。具體實驗方案如下（見表4）：

（1）感染後2h：第1籠小鼠終點，取大腿肌肉組織置於10 mL無菌生理鹽水中，勻質機組織勻漿並將勻漿液進行梯度稀釋點板，每只小鼠兩個重複。

（2）感染後2h：第2至12籠按照小鼠體重10 mL/kg的體積分別給予治療。第2籠小鼠每2h靜脈注射給予媒劑，12h終點；第3籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的美羅培南，12h終點；第4籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的美羅培南以及20mg/kg的QPX7728，12h終點；第5籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的美羅培南以及100 mg/kg的化合物15，12h終點；第6籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的美羅培南以及20 mg/kg的化合物15，12h終點；第7籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的美羅培南以及4mg/kg的化合物15，12h終點；第8籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的頭孢吡肟，12h終點；第9籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的頭孢吡肟以及20mg/kg的QPX7728，12h終點；第10籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的頭孢吡肟以及100mg/kg的化合物15，12h終點；第11籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的頭孢吡肟以及20mg/kg的化合物15，12h終點；第12籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的頭孢吡肟以及4mg/kg的化合物15，12h終點。12h終點取大腿肌肉組織置於10 mL無菌生理鹽水中，勻質機組織勻漿並將勻漿液進行梯度稀釋點板，每只小鼠兩個重複。對小鼠大腿肌肉組織載菌量進行計數，整理實驗如下（見表5）：

表 4. 大腿肌肉模型實驗方案

實驗分組	動物只數	化合物	接種劑量	投予方式	實驗終點
1	3	2h對照組	Klebsiella pneumoniaeATCC-BAA 1705 5.60E+06 CFU/小鼠	-----------	2h
2	3	12h感染組	3%DMSO+1%吐溫80的鹽水 i.v.	12h
3	3	美羅培南	100mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
4	3	美羅培南+QPX7728	100mpk+20mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v..	12h
5	3	美羅培南+化合物15	100mpk+100mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
6	3	美羅培南+化合物15	100mpk+20mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
7	3	美羅培南+化合物15	100mpk+4mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
8	3	頭孢吡肟	100mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
9	3	頭孢吡肟+QPX7728	100mpk+20mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v..	12h
10	3	頭孢吡肟+化合物15	100mpk+100mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
11	3	頭孢吡肟+化合物15	100mpk+20mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
12	3	頭孢吡肟+化合物15	100mpk+4mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h

表 5. 小鼠大腿肌肉組織載菌量實驗結果

組別	小鼠平均 CFU
2h對照組	3.87E+07CFU/mouse
12h感染組	8.80E+08CFU/mouse
美羅培南（100mg/kg）	4.83E+08CFU/mouse
美羅培南（100mg/kg）+QPX7728（20mg/kg）	1.02E+07CFU/mouse
美羅培南（100mg/kg）+化合物15（100mg/kg）	2.02E+06CFU/mouse
美羅培南（100mg/kg）+化合物15（20mg/kg）	4.08E+06CFU/mouse
美羅培南（100mg/kg）+化合物15（4mg/kg）	1.65E+07CFU/mouse
頭孢吡肟（100mg/kg）	4.25E+07 CFU/mouse
頭孢吡肟（100mg/kg）+QPX7728（20mg/kg）	1.50E+07 CFU/mouse
頭孢吡肟（100mg/kg）+化合物15（100mg/kg）	1.24E+06 CFU/mouse
頭孢吡肟（100mg/kg）+化合物15（20mg/kg）	2.06E+06 CFU/mouse
頭孢吡肟（100mg/kg）+化合物15（4mg/kg）	5.68E+06CFU/mouse

2） 肺部感染模型

36只CD-1雌鼠分成12籠，每籠3只；計感染當天為第0天。

於第-1天在MHA平板復蘇菌株 Klebsiella pneumoniaeATCC BAA-1705。挑取復蘇的菌落溶於無菌生理鹽水中，製備濃度為2.75E+08 CFU/mL的菌液通過滴鼻進行肺部感染。計感染開始時間為0h，於0h通過鼻腔滴注的方式每只注射50 μL菌液，即接種量為1.38E+07 CFU/小鼠。感染後2h，根據實驗方案進行投予。具體實驗方案如下（見表6）：

（1）感染後2h：第1籠小鼠終點，取肺部組織置於10 mL無菌生理鹽水中，勻質機組織勻漿並將勻漿液進行梯度稀釋點板，每只小鼠兩個重複。

（2）感染後2h：第2至12籠按照小鼠體重10 mL/kg的體積分別給予治療。第2籠小鼠每2h靜脈注射給予媒劑，12h終點；第3籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的美羅培南，12h終點；第4籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的美羅培南以及20mg/kg的QPX7728，12h終點；第5籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的美羅培南以及100 mg/kg的化合物15，12h終點；第6籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的美羅培南以及20 mg/kg的化合物15，12h終點；第7籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的美羅培南以及4mg/kg的化合物15，12h終點；第8籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的頭孢吡肟，12h終點；第9籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的頭孢吡肟以及20mg/kg的QPX7728，12h終點；第10籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的頭孢吡肟以及100mg/kg的化合物15，12h終點；第11籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的頭孢吡肟以及20mg/kg的化合物15，12h終點；第12籠小鼠每2h通過靜脈注射給予100 mg/kg的頭孢吡肟以及4mg/kg的化合物15，12h終點。終點取肺部組織置於10 mL無菌生理鹽水中，勻質機組織勻漿並將勻漿液進行梯度稀釋點板，每只小鼠兩個重複。對小鼠肺部組織載菌量進行計數，整理實驗如下（見表7）：

表 6. 肺部感染模型實驗方案

實驗分組	動物只數	化合物	接種劑量	投予方式	實驗終點
1	3	2h對照組	Klebsiella pneumoniaeATCC-BAA 1705 1.38E+07 CFU/小鼠	-----------	2h
2	3	12h感染組	3%DMSO+1%吐溫80的鹽水 i.v.	12h
3	3	美羅培南	100mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
4	3	美羅培南+QPX7728	100mpk+20mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v..	12h
5	3	美羅培南+化合物15	100mpk+100mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
6	3	美羅培南+化合物15	100mpk+20mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
7	3	美羅培南+化合物15	100mpk+4mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
8	3	頭孢吡肟	100mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
9	3	頭孢吡肟+QPX7728	100mpk+20mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v..	12h
10	3	頭孢吡肟+化合物15	100mpk+100mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
11	3	頭孢吡肟+化合物15	100mpk+20mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h
12	3	頭孢吡肟+化合物15	100mpk+4mpk,q2h, 2,4,6,8,10h, i.v.	12h

表 7. 小鼠肺部感染模型組織載菌量實驗結果

組別	小鼠平均 CFU
2h對照組	1.53E+07CFU/mouse
12h感染組	4.70E+08CFU/mouse
美羅培南（100mg/kg）	2.73E+08CFU/mouse
美羅培南（100mg/kg）+QPX7728（20mg/kg）	8.42E+06CFU/mouse
美羅培南（100mg/kg）+化合物15（100mg/kg）	7.67E+05CFU/mouse
美羅培南（100mg/kg）+化合物15（20mg/kg）	6.04E+06CFU/mouse
美羅培南（100mg/kg）+化合物15（4mg/kg）	6.83E+07CFU/mouse
頭孢吡肟（100mg/kg）	1.90E+08 CFU/mouse
頭孢吡肟（100mg/kg）+QPX7728（20mg/kg）	2.68E+06CFU/mouse
頭孢吡肟（100mg/kg）+化合物15（100mg/kg）	1.84E+05CFU/mouse
頭孢吡肟（100mg/kg）+化合物15（20mg/kg）	3.73E+05CFU/mouse
頭孢吡肟（100mg/kg）+化合物15（4mg/kg）	2.38E+06CFU/mouse

結論：小鼠大腿肌肉感染模型和小鼠肺部感染模型說明本發明化合物聯合美羅培南或者頭孢吡肟後具有顯著體內抑制感染作用。

無。

Claims

式 (Ⅱ) 或 (Ⅱ’) 所示化合物或其醫藥上可接受的鹽，
(Ⅱ) 或
(Ⅱ’)，其中，B為硼； T為-O-、-S-或-Se-；各R ₁獨立地為-OH或C _1-3烷氧基； R ₂和R ₃各自獨立地為H或C _1-3烷基，其中所述C _1-3烷基任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代； R ₄為H、F、Cl、Br、I、C _1-3烷基或C _1-3烷氧基，其中所述C _1-3烷基和C _1-3烷氧基各自獨立地任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代； R ₅為H、F、Cl、Br、I或C _1-3烷氧基； R ₆為H、F、Cl、Br、I、-OR _a或C _1-3烷基，其中所述C _1-3烷基任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代；或R ₅和R ₆與它們所連接的碳原子一起形成5-6元含氧非芳基雜環，其中所述5-6元含氧非芳基雜環任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代； R ₇為H、C _1-3烷基、-C(R _b) ₂OC(=O)R _c或-C(R _b) ₂OC(=O)OR _c，其中所述C _1-3烷基任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代； R _a為H、C _1-6烷基、
、
、
或
，其中所述C _1-6烷基、
、
、
和
各自獨立地任選被1、2或3個R _a1所取代；各R _b獨立地為H或C _1-3烷基； R _c為H、C _1-3烷基、
或
，其中所述C _1-3烷基、
和
各自獨立地任選被1、2或3個R _c1所取代；各R _a1獨立地為F、Cl、Br、I、C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、
、
、
、
、
或
，其中所述C _1-3烷基、C _1-3烷氧基、
、
、
、
、
和
各自獨立地任選被1、2或3個R所取代；各R _c1獨立地為F、Cl、Br、I、-OH、C _1-3烷基或C _1-3烷氧基；各R獨立地為F、Cl、Br、I、-OH或C _1-3烷基，其中所述C _1-3烷基任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I和
的取代基所取代。
如請求項1所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其化合物具有式 (Ⅱ-1)、(Ⅱ’-1)、(Ⅱ-2) 或 (Ⅱ’-2) 所示結構：
(Ⅱ-1)、
(Ⅱ’-1)、
(Ⅱ-2) 或
(Ⅱ’-2)，其中，R ₁、R ₂、R ₃、R ₄、R ₅、R ₆和R ₇如請求項1所定義。
如請求項1或2所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中各R ₁獨立地為-OH或-OCH ₃。
如請求項1或2所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中R ₂和R ₃各自獨立地為H或-CH ₃。
如請求項1或2所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中R ₄為H、F、Cl、-CH ₃或-OCH ₂CH ₃。
如請求項1或2所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中R ₅為H、F、Cl或-OCH ₃。
如請求項1所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中各R獨立地為F、Cl、Br、I、-CH ₃或
，其中所述-CH ₃或
各自獨立地任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I和
的取代基所取代。
如請求項7所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中各R獨立地為F、Cl、Br、I、-CH ₃、
或
。
如請求項1所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中各R _a1獨立地為F、Cl、Br、I、-OCH ₃、
、
、
、
、
或
，其中所述-OCH ₃、
、
、
、
、
和
各自獨立地任選被1、2或3個R所取代。
如請求項9所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中各R _a1獨立地為F、Cl、Br、I、-OCH ₃、
、
、
、
、
、
或
。
如請求項8或10所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中各R _a1獨立地為F、Cl、Br、I、-OCH ₃、
、
、
、
、
、
、
、
或
。
如請求項1所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中R _a為H、-CH ₃、-CH ₂CH ₃、
、
、
、
、
、
、
或
，其中所述-CH ₃、-CH ₂CH ₃、
、
、
、
、
、
、
和
各自獨立地任選被1、2或3個R _a1所取代。
如請求項12所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中R _a為H、-CH ₃、
、
、
、-CH ₂CH ₃、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
或
。
如請求項13所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中R _a為H、-CH ₃、
、
、
、
、
、
、
、
、
、-CH ₂CH ₃、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
或
。
如請求項1或2所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中R ₆為H、F、Cl、Br、I、-OR _a或-CH ₃，其中所述-CH ₃任選被1、2或3個獨立選自F、Cl、Br、I、-OH和-OCH ₃的取代基所取代。
如請求項15所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中R ₆為H、F、Cl、Br、I、-OH、-OCH ₃、-OCH ₂CH ₃、-CH ₃、-CH ₂OH、-CH ₂OCH ₃、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
、
或
。
如請求項1或2所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中結構單元
為
。
如請求項1或2所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中各R _b獨立地為H。
如請求項1或2所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中各R _c1獨立地為-OCH ₃。
如請求項1或2所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中R _c為H、-CH ₃、-CH ₂CH ₃、
、
或
，其中所述-CH ₃、-CH ₂CH ₃、
、
和
各自獨立地任選被1、2或3個R _c1所取代。
如請求項20所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中R _c為H、-CH ₃、-CH ₂CH ₃、
、
、
或
。
如請求項1或2所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中R ₇為H、
、
、
、
、
、
、
或
。
如請求項1所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其化合物具有式 (I) 或 (I’) 所示結構：
(I) 或
(I’)，其中，T、R ₁、R ₂、R ₃、R ₄、R ₅和R ₆如請求項1所定義。
如請求項23所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其化合物具有式 (I-1)、(I’-1)、(I-2) 或 (I’-2) 所示結構：
(I-1)、
(I’-1)、
(I-2) 或
(I’-2)，其中，R ₁、R ₂、R ₃、R ₄、R ₅和R ₆如請求項23所定義。
如請求項24所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其醫藥上可接受的鹽具有式 (I-3)、(I-4)、(I-5) 或 (I-6) 所示結構：
(I-3)、
(I-4)、
(I-5) 或
(I-6)，其中，R ₂、R ₃、R ₄、R ₅和R ₆如請求項24所定義。
下式化合物或其醫藥上可接受的鹽，
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、
、
、
、
、
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、
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、
、
、
、
或
。
下式化合物，
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如請求項1~24或26任一項所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽，其中醫藥上可接受的鹽為鈉鹽。
一種醫藥組合物，包含治療有效量的如請求項1~28任一項所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽、β-內醯胺抗菌劑以及醫藥上可接受的載劑。
如請求項29所述的醫藥組合物，其中β-內醯胺抗菌劑為青黴素類、頭孢菌素類、頭黴素類、氧頭孢烯類、碳青黴烯類或單環內醯胺類。
如請求項30所述的醫藥組合物，其中β-內醯胺抗菌劑為阿莫西林、哌拉西林、替凱西林、阿洛西林、美洛西林、頭孢唑啉、頭孢拉定、頭孢噻吩、頭孢呋辛、頭孢克羅、頭孢替安、頭孢丙烯、頭孢噻肟、頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢哌酮、頭孢唑肟、頭孢甲肟、頭孢地嗪、頭孢泊肟酯、頭孢克肟、頭孢布烯、頭孢匹羅、頭孢吡肟、頭孢西丁、頭孢美唑、、帕尼培南、胺曲南、卡蘆莫南、頭孢西丁、頭孢美唑、拉氧頭孢、氟氧頭孢、亞胺培南、美羅培南、頭孢洛紮或頭孢地爾。
如請求項1~28任一項所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽或如請求項29~31任一項所述的醫藥組合物在製備β-內醯胺酶抑制劑藥物中的應用。
如請求項1~28任一項所述的化合物或其醫藥上可接受的鹽或如請求項29~31任一項所述的醫藥組合物在製備治療細菌感染相關疾病的藥物中的應用。