TW202102656A - 磷脂質濃縮物製造方法 - Google Patents

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Abstract

本發明提供一種以下手法：當將家畜或家禽組織之乙醇萃取液濃縮物供於脫膠步驟，並回收膠質而獲得磷脂質濃縮物時，該操作每次獲得之磷脂質量的變動受到抑制。 更具體來說，所提供的是從家畜或家禽肉生產磷脂質濃縮物的方法，其包含以下步驟：(A)將家畜或家禽組織之乙醇萃取液濃縮物與水混合，且相對於100質量份的前述濃縮物混合小於7質量份的水；及(B)將所得混合液在2℃以下離心分離。

Description

磷脂質濃縮物製造方法
發明領域 本發明係有關於磷脂質濃縮物的製造方法等。
發明背景 磷脂質是重要的生物體構成成分，其中又以例如縮醛磷脂等作為具有增強記憶能力等各種效果的機能性材料而受到關注。因此，盼有可有效率地製備磷脂質的方法。
至今，已經開發出透過乙醇萃取來從例如鳥胸肉萃取磷脂質等成分的方法。
先前技術文獻 專利文獻 專利文獻1：日本特開2006-232967號公報 專利文獻2：日本特開2010-63406號公報 專利文獻3：日本特開2010-65167號公報 專利文獻4：日本特開2016-210696號公報
發明欲解決之課題 嘗試在透過乙醇從家畜或家禽組織萃取有用成分之後濃縮磷脂質，其係一種被認為特別重要的成分。通常，在精製油時，將來自動植物之萃取物供於脫膠步驟，以去除主成分為磷脂質的膠質。由於如上所述磷脂質為主要包含於膠質中的成分，所以為了有效率地濃縮磷脂質，研究將家畜或家禽組織之乙醇萃取液濃縮之後供於脫膠步驟來回收膠質。
透過該手法，雖然可以濃縮磷脂質，但隨著研究的進展，則明顯可見每次進行濃縮所獲得之磷脂質量是波動的。在向市場供給磷脂質濃縮物時，品質的均一化很重要，因此有必要開發每次進行濃縮操作時品質(特別是磷脂質量)不會變動的方法。
本發明之課題為提供一種以下手法：當將家畜或家禽組織之乙醇萃取液濃縮物供於脫膠步驟，並回收膠質而獲得磷脂質濃縮物時，該操作每次獲得之磷脂質量的變動受到抑制。
用以解決課題之手段 本案發明人等發現關於脫膠步驟之處理規則及膠質回收步驟條件，進一步反覆改良而完成本發明。此外，如上所述，由於本發明之目的為磷脂質濃縮，故於脫膠步驟中回收膠質。因此認為比起稱為脫膠步驟，更應該稱為膠回收步驟。所以，在以下本說明書中，脫膠步驟以「膠回收步驟」來表述記載。
本發明包含例如以下項次所記載之主題。 項1. 一種從家畜或家禽組織生產磷脂質濃縮物之方法，或一種濃縮家畜或家禽組織中所含有的磷脂質之方法，其包含以下步驟： (A)將家畜或家禽組織之乙醇萃取液濃縮物與水混合，且相對於100質量份的前述濃縮物混合小於7質量份的水；及 (B)將所得混合液在2℃以下離心分離。 項2. 如項1所記載之方法，其中家畜或家禽組織之乙醇萃取液濃縮物的水分含量為1質量%以下。 項3. 一種從家畜或家禽組織生產磷脂質濃縮物之方法，或一種濃縮家畜或家禽組織中所含有的磷脂質之方法，其包含以下步驟： (a1)濃縮家畜或家禽組織之乙醇萃取液； (a2)將所得濃縮物與水混合，且相對於100質量份的前述濃縮物混合小於7質量份的水；及 (B)將所得混合液在2℃以下離心分離。 項4. 如項3所記載之方法，其中家畜或家禽組織之乙醇萃取液的濃縮係進行直到所得濃縮液的水分含量成為1質量%以下。 項5. 如項3或4所記載之方法，其進一步包含以下步驟： (a0)乙醇萃取家畜或家禽組織； 該步驟中若是產生析出，首先加熱以使析出溶解，或是 在不會產生析出的溫度下進行該步驟。 項6. 如項1至5中任一項所記載之方法，其進一步包含以下步驟： (C)回收經由前述離心分離所產生的沉澱。 項7. 一種濃縮家畜或家禽組織中所含有的磷脂質之方法，其包含以下步驟： (A)將家畜或家禽組織之乙醇萃取液的濃縮物與水混合，且相對於100質量份的前述濃縮物混合小於7質量份的水；及 (B)將所得混合液在2℃以下離心分離。 項8. 如項1至7中任一項所記載之方法，其中家畜或家禽組織為鳥類組織。
發明效果 藉由本發明之方法，當將家畜或家禽組織之乙醇萃取液濃縮物供於脫膠步驟，並回收膠質而獲得磷脂質濃縮物時，該濃縮每次獲得之磷脂質量的變動受到抑制。
用以實施發明之形態 以下，針對本發明之各實施形態，進一步詳細說明。
本發明所包含之從家畜或家禽組織生產磷脂質濃縮物之方法(以下稱之為「本發明之磷脂質濃縮物生產方法」)，其包含以下步驟：(A)將家畜或家禽組織之乙醇萃取液濃縮物與水混合，且相對於100質量份的前述濃縮物混合小於7質量份的水；及(B)將所得混合液在2℃以下離心分離。
家畜或家禽例如可舉牛、豬、馬、羊、山羊、鳥類等。以哺乳類而言，含有磷脂質的組織主要可舉皮膚、腦、腸、心臟、生殖器、肉(特別是肌肉)等，可從該等組織萃取磷脂質。又，鳥類可舉雞、家鴨、鵪鶉、鴨、雉、火雞等。考慮到取得容易度、成本方面及對於入口的抗拒感等，尤以雞為佳。又，鳥組織並沒有特別地限制，例如宜為鳥肉(特別是鳥胸肉)、鳥皮、鳥的內臟等。此外，亦可混合2種以上1或多種生物之不同組織。就家畜或家禽組織要舉出特別理想的例子則為鳥胸肉，其中又以雞胸肉為佳。
此外，可將家畜或家禽組織切成適當大小。又，經乾燥(特別是冷凍乾燥)者亦可。
家畜或家禽組織的乙醇萃取方法並沒有特別限制，可使用公知的方法或可從公知的方法輕易思及的方法。例如，可藉由加入相對於家畜或家禽組織而言質量比為1~5倍左右的乙醇並攪拌或靜置來進行。亦可加熱進行攪拌或靜置。可以例如30~50℃或35~45℃左右進行加熱。又，攪拌或靜置的時間並沒有特別限制，例如可舉0.5~24小時或1~12小時左右。視需要可藉由過濾等將所得萃取液固液分離。又，亦可針對萃取的殘渣進行同樣的操作而得到再萃取液，並與先前所獲得之萃取液相加。
此外，當氣溫低(特別是冬季)時，在該萃取步驟中會有產生析出的風險。上述溫度只要是會產生析出的溫度則沒有限制，具體而言可舉例如10℃以下、9℃以下、8℃以下、7℃以下、6℃以下、5℃以下、4℃以下、3℃以下、2℃以下、1℃以下或0℃以下。由於該析出中含有磷脂質，所以若在已有析出之狀態下繼續進行乙醇萃取操作的話，析出所含有的磷脂質將不包含於乙醇萃取物中，因而最終獲得的磷脂質濃縮物中所含有的磷脂質量會有變動的風險。因此，在已產生析出之情形下，首先宜加熱以使析出溶解，或是宜在不會產生析出的溫度下進行該步驟。加熱以使析出溶解時，加熱的溫度若是在可溶解析出且不會對品質造成影響的範圍的話則沒有特別限制，例如20~30℃左右。又，在不會產生析出的溫度下進行乙醇萃取步驟時，例如可在20~30℃左右的溫度下進行該步驟。
對所得乙醇萃取液進行濃縮的方法並沒有特別地限制，可使用公知的方法或可從公知的方法輕易思及的方法。例如可舉減壓濃縮或加熱濃縮等。
濃縮宜進行直到所得乙醇萃取物液濃縮物的水分含量成為1質量%以下，較佳為進行直到成為0.9質量%以下、0.8質量%以下、0.7質量%以下、0.6質量%以下、或0.5質量%以下，更佳為進行直到成為0.4質量%以下、0.3質量%以下、或0.2質量%以下。此外，該水分含量係透過卡爾費雪法(Karl Fischer method)求得之值。
又，所得乙醇萃取液濃縮物的乙醇含量宜為15質量%以下，較佳為14質量%以下、13質量%以下、12質量%以下、11質量%以下、10質量%以下、9質量%以下、或8質量%以下。此外，該乙醇含量係從以乾熱乾燥法(105℃、3小時)所求得之乾燥損失減去上述水分含量後之值。例如，該乾熱乾燥損失為90質量%、且上述水分含量為1質量%時，乙醇含量為100-90-1=9(質量%)。
與乙醇萃取液濃縮物混合之水量為相對於100質量份的該濃縮物小於7質量份。宜為6.9質量份以下、6.8質量份以下、6.7質量份以下、6.6質量份以下、6.5質量份以下、6.4質量份以下、6.3質量份以下、6.2質量份以下、6.1質量份以下、或6質量份以下。又該水的混合比例的下限只要是不會損及本發明效果的範圍的話即未特別受限，例如，相對於100質量份的該濃縮物宜為0.5質量份以上，較佳為1質量份以上，更佳為1.5質量份以上。
將乙醇萃取液濃縮物與水的混合液離心分離，且回收所獲得之沉澱(下層)。此時，離心分離係在2℃以下之溫度下進行。宜在1℃以下、較佳為0.5℃以下進行。又，進行離心分離時的溫度調整只要在可不致前述濃縮物凍結地進行離心分離的範圍即未特別受限，可舉例如-2℃以上、-1.5℃以上、-1℃以上、或-0.5℃以上。
沉澱(下層)的回收，可藉由例如除去液體部分(上層)來進行。該除去可透過公知的方法進行，例如可藉由傾析來進行，但宜為吸引除去。
所回收的沉澱可直接作為磷脂質濃縮物使用。又，亦可加熱(例如約35至45℃左右)及攪拌所回收的沉澱使其溶解之後使用。此處所述攪拌宜在氮氣流下進行。
又，本發明亦包含一種濃縮家畜或家禽組織中所含有的磷脂質之方法，其包含以下步驟：(A)將家畜或家禽組織之乙醇萃取液的濃縮物與水混合，且相對於100質量份的前述濃縮物混合小於7質量份的水；及(B)將所得混合液在2℃以下離心分離。該方法可經過和上述生產磷脂質濃縮物之方法相同的步驟，因此有關於上述生產磷脂質濃縮物之方法的說明亦照樣適用於該濃縮磷脂質之方法。
此外，本說明書中的「包含」包括「實質上由…構成」及「由…構成」(The term “comprising” includes “consisting essentially of” and “consisting of.”)。
實施例 以下，將更具體地說明本發明，但本發明並不限定於下述例。
此外，雞胸肉是使用經冷凍乾燥之雞胸肉(FD雞胸肉)。又，除非特定指明，%表示質量(w/w)%。
乙醇萃取 將FD雞胸肉42kg投入萃取鍋中。將FD雞胸肉之4倍量(w/v)的99%乙醇(168L)投入萃取鍋中且氮置換後，邊攪拌邊加熱達到40℃後，維持90分鐘。以30篩目過濾後，將萃取液回收至筒形容器中。將第1次之萃取殘渣投入萃取鍋中後，將FD雞胸肉之2.5倍量(w/v)的99%乙醇(105L)投入萃取鍋中且氮置換後，邊攪拌邊加熱達到40℃後，維持90分鐘。以30篩目過濾後，將萃取液回收至筒形容器中。將該萃取液以10S濾紙吸引過濾。將所獲得之液體作為乙醇萃取液來使用。
乙醇萃取液之減壓濃縮 將乙醇萃取液在內溫40℃以下減壓，且減壓濃縮至可全部放入50L盆左右的量(約8kg)。將該一次濃縮液放入50L盆且在外溫50~60℃下減壓。所得之濃縮液以30篩目過濾後，測定重量得出結果為5.12kg。該濃縮物作為乙醇萃取液濃縮物，在使用之前保管於4℃下。
此外，分別以乾熱乾燥法(105℃，3小時)測定乙醇萃取液濃縮物之乾燥損失，並以卡爾費雪法測定水分量。又，以扣除法算出乙醇濃度。結果如下。乾燥損失：8.05%、水分：0.15%、乙醇：7.9%。
膠回收 >混合水量之研究> 將乙醇萃取液濃縮物邊加熱至20℃邊混合，並且每次稱取5g。添加相對於該濃縮物為質量比率4、5、6、或7%的水(即0.2g、0.25g、0.3g或0.35g)，充分攪拌5分鐘後，以2000×g、4℃離心15分鐘而分離成2層。確認沉澱之堅實度且以薄層層析法(TLC)確認上層所含之磷脂質(PL)。該TLC結果表示於圖1及表1中。
表1
水量 4% 5% 6% 7%
沉澱的狀態 沉澱鬆散 沉澱稍微堅硬 經過一段時間仍較5%堅硬的沉澱 沉澱堅硬
上層的狀態 (TLC結果) 上層沒有PL 上層沒有PL 上層沒有PL 上層可見PL
可得知，根據混合水量的少許不同，沉澱之硬度及上層中PL的存在與否將大為不同。關於混合水量，選擇容易分離沉澱(下層)與液體(上層)、且PL回收效率最高的6%來進行進一步地研究。
>離心條件之研究> 將乙醇萃取液濃縮物邊加熱至20℃邊如下述混合水並且離心。 (I)：添加相對於前述濃縮物300g為質量比率6%的水(18g)，以螺槳式攪拌機攪拌5分鐘予以水合。 (II)：添加相對於前述濃縮物300g為質量比率6%的水(18g)，以120次/分震盪5分鐘予以水合。 條件(I)及(II)皆於以2000×g、4℃離心15分鐘後分離成2層。然而，離心完畢時兩者皆沉澱鬆散而難以進行固液分離。此外，TLC分析未於上層中檢測出磷脂質。因此，進一步研究可形成硬到至少易於進行固液分離程度之沉澱的條件。 (III)：添加相對於前述濃縮物300g為質量比率6%的水(18g)並以120次/分震盪5分鐘予以水合之後，在4℃下靜置一晚。以2000×g、4℃離心15分鐘後分離成3層(圖2左側)。中層及下層是固體所以可進行固液分離。然而，難以分離含有中性脂質的中層及含有磷脂質的下層。 (IV)：添加相對於前述濃縮物300g為質量比率6%的水(18g)並以120次/分震盪5分鐘予以水合，再以2000×g、0℃離心15分鐘後分離成2層(圖2右側)。離心完畢時沉澱堅硬而可進行固液分離。
從以上所述可知，重要的是以較4℃低的溫度進行離心分離。
條件(IV)中所回收之沉澱(下層)在氮氣流下以40℃攪拌5分鐘可輕易地溶解。此外，該溶解液量為113.5g，因此產率為37.8%。又，以薄層層析法(TLC)分析已溶解之沉澱時，確認含有大量的磷脂質。
從以上所述可知，藉由採用條件(IV)由乙醇萃取液製備磷脂質，在操作中損失磷脂質的風險降低，因此每次操作所獲得之磷脂質量的變動便受到抑制。
季節性差異 如上所述，藉由採用條件(IV)，每次操作所獲得之磷脂質量的變動受到抑制。然而，當冬季來臨，變得僅能獲得比在那之前所得之磷脂質量更少的量。就此而進行進一步研究時得知，花費長時間在上述乙醇萃取液製備時的過濾操作上、或是在過濾操作前先長時間靜置等等的話，若是氣溫低則會看見析出。當以TLC分析該析出時得知其含有磷脂質。就此認為，在已產生析出時，透過過濾除去該析出，則磷脂質量將減少。
因此，特別是在冬季中，進行乙醇萃取操作時，若是產生析出物，則予以加熱融解再繼續操作。或者，在不使乙醇萃取操作本身發生析出的溫度下(如25℃左右)進行操作。
圖1顯示以TLC研究膠回收步驟中根據添加至乙醇萃取液濃縮物之水量的不同在所得上層中磷脂質量之存在是否改變的結果。 圖2顯示研究膠回收步驟中改變離心分離條件時所得沉澱之狀態是否改變的結果。
(無)

Claims (8)

  1. 一種從家畜或家禽組織生產磷脂質濃縮物之方法，包含以下步驟： (A)將家畜或家禽組織之乙醇萃取液濃縮物與水混合，且相對於100質量份的前述濃縮物混合小於7質量份的水；及 (B)將所得混合液在2℃以下離心分離。
  2. 如請求項1之方法，其中家畜或家禽組織之乙醇萃取液濃縮物的水分含量為1質量%以下。
  3. 一種從家畜或家禽組織生產磷脂質濃縮物之方法，包含以下步驟： (a1)濃縮家畜或家禽組織之乙醇萃取液； (a2)將所得濃縮物與水混合，且相對於100質量份的前述濃縮物混合小於7質量份的水；及 (B)將所獲得之混合液在2℃以下離心分離。
  4. 如請求項3之方法，其中家畜或家禽組織之乙醇萃取液的濃縮係進行直到所得濃縮液的水分含量成為1質量%以下。
  5. 如請求項3或4之方法，其進一步包含以下步驟： (a0)乙醇萃取家畜或家禽組織； 該步驟中若是產生析出則加熱以使析出溶解，或是在不會產生析出的溫度下進行該步驟。
  6. 如請求項1至5中任一項之方法，其進一步包含以下步驟： (C)回收經由前述離心分離所產生的沉澱。
  7. 一種濃縮家畜或家禽組織中所含有的磷脂質之方法，包含以下步驟： (A)將家畜或家禽組織之乙醇萃取液的濃縮物與水混合，且相對於100質量份的前述濃縮物混合小於7質量份的水；及 (B)將所得混合液在2℃以下離心分離。
  8. 如請求項1至7中任一項之方法，其中家畜或家禽組織為鳥類組織。
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