TW202019296A - 雌馬酚產生促進劑及含有其之雌馬酚產生促進用食品或飲料組成物 - Google Patents
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Abstract
本發明提供一種用以促進人之腸內之雌馬酚之產生的新穎手段,或者用以改善與其相關之經前症候群,或改善皮膚不適或伴隨年齡增加之皮膚狀態之變化的新穎手段。本發明之雌馬酚產生促進劑含有酵母甘露聚糖作為有效成分。本發明之經前症候群改善劑及皮膚狀態改善劑含有該雌馬酚產生促進劑(酵母甘露聚糖)。本發明之雌馬酚產生促進用、經前症候群改善用或皮膚狀態改善用之食品組成物及飲料組成物分別含有上述雌馬酚產生促進劑、經前症候群改善劑或皮膚狀態改善劑。
Description
本發明係關於一種用以促進腸內之雌馬酚之產生之劑,及含有其作為有效成分之食品或飲料組成物。又,本發明係關於一種自酵母之細胞壁提取之酵母甘露聚糖之用途。
雌馬酚係大豆異黃酮之一種即大豆異黃酮苷素(daidzein)之代謝產物,且係表現出高於大豆異黃酮本身之類女性激素活性(即,雌激素活性)之生理活性物質。關於雌馬酚,迄今為止報告有更年期症狀之減輕、皮膚狀態之改善、由經前症候群(PMS:premenstrual syndrome)所引起之令人不快之症狀之減輕等效果(例如非專利文獻1)。
人不具有將大豆異黃酮苷素等雌馬酚前驅物轉化成雌馬酚之酵素,但人之腸內細菌(例如卵形擬桿菌(Bacteroides ovatus)、中間鏈球菌(Streptococcus intermedius)、星群鏈球菌(Streptococcus constellatus)等)具有此種酵素,而於腸內產生雌馬酚。
為了提高人體內之雌馬酚之濃度,考慮直接經口攝取雌馬酚,但雌馬酚係不含於普通食品中之化合物,此類食用經驗有所欠缺(因此需要製成含有雌馬酚之補充品等形態),又,亦無法儲積所經口攝取之雌馬酚。另一方面,作為用以藉由腸內細菌促進產生雌馬酚之材料(組成物),例如已知有如專利文獻1~3中所揭示者。具體而言,專利文獻1揭示有一種雌馬酚產生促進組成物,其特徵在於將醛糖酸或其衍生物作為有效成分。專利文獻2揭示有一種血中雌馬酚濃度上升劑,其特徵在於含有二果糖酐及異黃酮。專利文獻3揭示有一種非產生雌馬酚者之血中雌馬酚產生促進用組成物(但是,不包含將作為食品之組成物、及含有具有使大豆異黃酮苷素合成代謝而產生雌馬酚之能力之微生物或7-羥基-4'-甲氧基異黃酮(Formononetin)之組成物),其特徵在於含有選自由大豆異黃酮苷素、大豆異黃酮、丙二醯基大豆異黃酮、乙醯基大豆異黃酮及丁二醯基大豆異黃酮所組成之群中之大豆異黃酮苷素系異黃酮作為單體或大豆胚軸萃取物或者其純化物,且含有無脂乳固形物。
然而,於上述文獻等中並未揭示自酵母提取之α-甘露聚糖或α-甘露聚糖-蛋白質複合體(於本說明書中統稱為「酵母甘露聚糖」)有助於促進雌馬酚之產生,亦無加以提示之記載。
[先前技術文獻]
[專利文獻]
[專利文獻1]國際公開第2007/148631號
[專利文獻2]日本特開2006-143623號公報(日本專利第4723849號公報)
[專利文獻3]國際公開第2008/146835號(日本專利第5617613號公報)
[非專利文獻]
[非專利文獻1]Kenneth D. R. Setchell and Carlo Clerici, Equol: History, Chemistry, and Formation, The Journal of Nutrition, pp. 1355S - 1362S, 2010 (doi: 10. 3945/ jn. 109. 119776)
[發明所欲解決之課題]
本發明之課題在於提供一種用以促進人之腸內之雌馬酚之產生的新穎手段,或用以改善與其相關之經前症候群,或改善皮膚不適或伴隨年齡增加之皮膚狀態之變化的新穎手段。另一方面,本發明之課題在於提供一種酵母甘露聚糖之新穎用途。
[解決課題之技術手段]
本發明人等發現,藉由攝取酵母甘露聚糖,可增加人之腸內之雌馬酚產生量,進而改善經前症候群,或改善皮膚不適或伴隨年齡增加之皮膚狀態之變化。酵母甘露聚糖為水溶性,其水溶液之黏性非常低,因此適合摻合至飲料或食品(以下,亦稱為「飲食品」)中來利用之材料。
即本發明包含下述事項。
[項1]
一種雌馬酚產生促進劑,其含有酵母甘露聚糖作為有效成分。
[項2]
一種雌馬酚產生促進用食品組成物或飲料組成物,其含有項1記載之雌馬酚產生促進劑。
[項3]
一種經前症候群改善劑,其含有項1記載之雌馬酚產生促進劑。
[項4]
一種經前症候群改善用食品組成物或飲料組成物,其含有項3記載之經前症候群改善劑。
[項5]
一種皮膚狀態改善劑,其含有項1記載之雌馬酚產生促進劑。
[項6]
一種皮膚狀態改善用食品組成物或飲料組成物,其含有項5記載之皮膚狀態改善劑。
[項7]
一種酵母甘露聚糖,其用以促進雌馬酚之產生。
[項8]
一種酵母甘露聚糖之用途,其用以製造雌馬酚產生促進用食品組成物或飲料組成物。
[項9]
一種酵母甘露聚糖,其用以改善經前症候群。
[項10]
一種酵母甘露聚糖之用途,其用以製造經前症候群改善用食品組成物或飲料組成物。
[項11]
一種酵母甘露聚糖,其用以改善皮膚狀態。
[項12]
一種酵母甘露聚糖之用途,其用以製造皮膚狀態改善用食品組成物或飲料組成物。
上述「雌馬酚產生促進劑」及「雌馬酚產生促進用食品組成物或飲料組成物」例如亦能夠轉換成「用以促進雌馬酚產生之(作為有效成分(劑)之)酵母甘露聚糖」、「用以促進雌馬酚產生之(作為有效成分(劑)之)酵母甘露聚糖之使用(用途)」、「用以製造雌馬酚產生促進用食品組成物或飲料組成物之(作為有效成分(劑)之)酵母甘露聚糖之使用」、「包括讓攝取或攝取(食品組成物或飲料組成物所含有之)酵母甘露聚糖之有效量(使其導入或導入至腸內)之雌馬酚之產生促進方法」等,可同樣地適用本說明書中記載之「雌馬酚產生促進劑」及「雌馬酚產生促進用食品組成物或飲料組成物」之相關事項。關於上述「經前症候群改善劑」及「經前症候群改善用食品組成物或飲料組成物」,例如亦能夠轉換成「用以改善經前症候群之(作為有效成分(劑)之)酵母甘露聚糖」、「用以改善經前症候群之(作為有效成分(劑)之)酵母甘露聚糖之使用(用途)」、「用以製造經前症候群改善用食品組成物或飲料組成物之(作為有效成分(劑)之)酵母甘露聚糖之使用」、「包括讓攝取或攝取(食品組成物或飲料組成物所含有之)酵母甘露聚糖之有效量(使其導入或導入至腸內)之經前症候群之改善方法」等,可同樣地適用本說明書中記載之「經前症候群改善劑」及「經前症候群改善用食品組成物或飲料組成物」之相關事項。關於上述「皮膚狀態改善劑」及「皮膚狀態改善用食品組成物或飲料組成物」,例如亦能夠轉換成「用以改善皮膚狀態之(作為有效成分(劑)之)酵母甘露聚糖」、「用以改善皮膚狀態之(作為有效成分(劑)之)酵母甘露聚糖之使用(用途)」、「用以製造皮膚狀態用食品組成物或飲料組成物之(作為有效成分(劑)之)酵母甘露聚糖之使用」、「包括讓攝取或攝取(食品組成物或飲料組成物所含有之)酵母甘露聚糖之有效量(使其導入或導入至腸內)之皮膚狀態之改善方法」等,可同樣地適用本說明書中記載之「皮膚狀態改善劑」及「皮膚狀態改善用食品組成物或飲料組成物」之相關事項。
再者,於本說明書中,有時將雌馬酚產生促進劑、經前症候群改善劑及皮膚狀態改善劑統稱為「本發明之劑」,或將各者稱為「本發明之各劑」。又,有時將食品組成物及飲料組成物統稱為「飲食品組成物」。
[發明之效果]
藉由利用含有酵母甘露聚糖作為有效成分之本發明之雌馬酚產生促進劑,能夠製造促進腸內之雌馬酚之產生之作用優異,且容易攝取之雌馬酚產生促進用飲食品組成物。又,藉由促進雌馬酚之產生,可改善經前症候群之各種症狀,或改善皮膚之不適或伴隨年齡增加之皮膚狀態之變化,因此,本發明之雌馬酚產生促進劑及含有其之飲食品組成物亦能夠應用於經前症候群改善劑及含有其之飲食品組成物以及皮膚狀態改善劑及含有其之飲食品組成物。如專利文獻1及3中所記載,腸內之雌馬酚之產生量(即,由大豆異黃酮苷素至雌馬酚之代謝量)存在個人差異,但本發明之雌馬酚產生促進劑等可給廣泛人群帶來使雌馬酚之產生量較攝取前增加,改善經前症候群,或改善皮膚狀態之作用。
[雌馬酚產生促進劑、經前症候群改善劑及皮膚狀態改善劑]
本發明之雌馬酚產生促進劑含有酵母甘露聚糖,可為僅含有酵母甘露聚糖作為用於促進腸內之雌馬酚產生之作用之有效成分(即,由酵母甘露聚糖所構成)者,亦可為除酵母甘露聚糖以外亦含有同樣具有雌馬酚產生促進作用之其他有效成分者。
本發明之經前症候群改善劑含有如上述之本發明之雌馬酚產生促進劑(作為用以促進該雌馬酚產生之有效成分之酵母甘露聚糖),可為僅含有酵母甘露聚糖作為用以改善經前症候群之各種症狀(例如下述實施例中記載之提問1及2之合計17個項目之至少1個)之有效成分(即,由酵母甘露聚糖所構成)者,亦可為除酵母甘露聚糖以外亦含有同樣具有經前症候群改善作用之其他有效成分者。經前症候群(PMS:premenstrual syndrome)係自正值經前之黃體期之時期起之身體及精神症狀,據說女性之80%有症狀。PMS之症狀中,精神症狀更加嚴重,且日常生活中亦存在障礙之狀態係稱為經前情緒低落症(PMDD:Premenstrual Dysphoric Disorder),於美國精神醫學學會之精神疾病之診斷基準之指南即「DSM-IV-TR」(Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders)中存在診斷基準案。
本發明之皮膚狀態改善劑含有如上述之本發明之雌馬酚產生促進劑(作為用以促進該雌馬酚產生之有效成分之酵母甘露聚糖),可為僅含有酵母甘露聚糖作為用以改善皮膚狀態之有效成分(即,由酵母甘露聚糖所構成)者,亦可為除酵母甘露聚糖以外亦含有同樣具有皮膚狀態改善作用之其他有效成分者。此處,皮膚狀態之改善包括改善皮膚狀態之不適、及改善伴隨年齡增加之皮膚狀態之變化等。作為皮膚狀態之不適,例如可列舉:粉刺、小疙瘩、乾燥、黏膩、粗澀、泛紅、發癢、其他皮膚粗糙之各種症狀等。伴隨年齡增加之皮膚狀態之變化係指以該年齡而言並非不適,但呈現出不同於以前之皮膚狀態,例如可列舉:皮膚水分量減少、皮膚彈性降低、肌理紊亂、色不均、鬆弛、黃褐斑、皺紋或毛孔醒目等。
於本發明之典型之實施形態中,藉由攝取作為雌馬酚產生促進劑之有效成分之酵母甘露聚糖,可促進雌馬酚之產生,並且達成改善經前症候群之症狀及改善皮膚狀態之變化之任一者或兩者。因此,於本發明之一實施形態中,雌馬酚產生促進劑、經前症候群改善劑及皮膚狀態改善劑可藉由同一個劑來實現。
雌馬酚產生促進作用亦關係到除如上述之經前症候群改善作用及皮膚狀態改善作用以外之作用效果。作為此種作用效果,例如可列舉:更年期障礙之改善、骨密度之增加(骨質疏鬆症之預防及/或治療)、乳癌或前列腺癌之預防及/或治療、血糖上升之抑制、血膽固醇之上升抑制、血中性脂肪之上升抑制、體脂肪及內臟脂肪面積之降低、以及動脈硬化之改善等藉由提高雌馬酚之血中濃度而發揮之作用效果。因此,本發明之雌馬酚產生促進劑亦能夠用於如上述之其他用途(或作用效果)。
(1)酵母甘露聚糖
於本發明中,酵母甘露聚糖係指含有來自酵母之「α-甘露聚糖」及來自酵母之「α-甘露聚糖-蛋白質複合體」之至少1種之物質。α-甘露聚糖及α-甘露聚糖-蛋白質複合體皆為構成酵母之細胞壁之主要成分。
上述「α-甘露聚糖」為D-甘露糖藉由α1,6-鍵、α1,2-鍵或α1,3-鍵進行聚合而成之多糖類,於其主鏈上亦可鍵結有1個或2個以上之甘露糖經α1,2-鍵結或α1,3-鍵結而成之側鏈。該α-甘露聚糖為水溶性。
另一方面,上述「α-甘露聚糖-蛋白質複合體」係藉由N-糖苷鍵或O-糖苷鍵,1個或2個以上之α-甘露聚糖鏈鍵結於局部存在於酵母之細胞壁之蛋白質而成的水溶性糖蛋白質。於該糖蛋白質上所鍵結之「α-甘露聚糖鏈」與上述「α-甘露聚糖」同樣為D-甘露糖藉由α1,6-鍵、α1,2-鍵或α1,3-鍵進行聚合而成之多糖鏈,於其主鏈上亦可鍵結有1個或2個以上之甘露糖(mannopyranose)經α1,2-鍵結或α1,3-鍵結而成之側鏈。再者,「α-甘露聚糖-蛋白質複合體」之蛋白質含有胺基酸殘基為2個以上之肽。
酵母甘露聚糖只要來自酵母,則可為以任何方式回收者。例如,可為藉由酵素或化學處理等來損傷酵母之細胞壁而分離回收(提取)所得之酵母甘露聚糖,亦可為將自酵母釋出至培養基中者進行回收所得之酵母甘露聚糖。
酵母甘露聚糖亦可以商品的形式而容易地獲取。具體而言,可列舉源自啤酒酵母菌之甘露聚糖(Mannan from Saccharomyces cerevisiae)M7504(Sigma-Aldrich Japan有限公司)等。又,酵母甘露聚糖可使用如以下所記載之任一公知之方法,由酵母進行製備。
(2)酵母甘露聚糖之製備方法
作為酵母甘露聚糖之製備方法,可使用任一公知之方法。例如,作為由酵母製備其細胞壁之步驟,可藉由自啤酒、清酒及麵包等之製造中所使用之酵母提取酵母萃取物,由作為殘渣之酵母之細胞壁製備酵母甘露聚糖之步驟,而獲得酵母甘露聚糖。作為設為酵母甘露聚糖之原料之酵母之細胞壁,例如可使用以「酵母細胞壁」之商品名由Asahi Group食品股份有限公司銷售之酵母細胞壁或其他同樣之商品。
作為由酵母之細胞壁製備酵母甘露聚糖之步驟,例如可列舉如下步驟,其包括由酵母之細胞壁獲得酵母甘露聚糖粗萃取物之步驟(於本說明書中稱為「粗提取步驟」),且視需要於該步驟之後,進而包括對酵母甘露聚糖粗萃取物進行純化,獲得酵母甘露聚糖純化物之步驟(於本說明書中稱為「純化步驟」)。亦存在於粗提取步驟之前,進行由酵母製備其細胞壁之步驟之情形,但於使用預先製造之酵母之細胞壁作為原料之情形時,不需要此種步驟。於粗提取步驟中,例如可使用:熱水(含有稀鹼)提取法(例如參照日本特公昭64-3479號公報及日本特開昭58-109423號公報)、自我分解法(例如參照日本特公昭58-57153號公報)、利用細胞壁溶解酵素之酵素分解方法(例如參照日本特公昭59-40126號公報)等方法。於純化步驟中,例如可進行利用鹽酸等之蛋白質之去除處理、乙醇沈澱處理、蛋白酶處理、及利用層析法之處理等。
於本說明書中,將酵母甘露聚糖粗萃取物及酵母甘露聚糖純化物統稱為「酵母甘露聚糖製備物」。如上述之市售之酵母甘露聚糖亦相當於酵母甘露聚糖製備物。酵母甘露聚糖製備物中除來自酵母之α-甘露聚糖及/或來自酵母之α-甘露聚糖-蛋白質複合體以外,亦可含有存在於酵母之細胞壁中、或由於用以製備酵母甘露聚糖之處理而產生之各種夾雜物(例如葡聚糖、蛋白質、甘露糖等)。關於酵母甘露聚糖製備物中之酵母甘露聚糖之含量,只要為具有於使用酵母甘露聚糖製備物作為酵母甘露聚糖時能發揮本發明之作用效果之含量之下述酵母α-甘露聚糖的酵母甘露聚糖,則並無特別限定。於粗提取步驟中使用何種方法、及是否進行純化步驟、於進行純化步驟之情形時使用何種處理等只要以獲得具有所需含量之酵母α-甘露聚糖之酵母甘露聚糖製備物之方式適當進行選擇即可。只要為該行業者,則可依據一般之方法及條件,製備具有於發揮本發明之作用效果上無障礙之含量之酵母α-甘露聚糖的酵母甘露聚糖。換言之,依據一般之方法及條件由該行業者所製備之酵母甘露聚糖具有於發揮本發明之作用效果上無障礙之含量的酵母α-甘露聚糖。
用作上述酵母甘露聚糖之製備方法中之原料之酵母只要為以上述α-甘露聚糖及上述α-甘露聚糖-蛋白質複合體作為細胞壁之構成成分的酵母則無特別限定。此種酵母例如可為酵母菌(Saccharomyces)屬菌、裂殖酵母菌(Shizosaccharomyces)屬菌、畢赤酵母菌(Pichia)屬菌、念珠菌(Candida)屬菌、克魯維酵母(Kluyveromyces)屬菌、擬威爾酵母(Williopsis)屬菌、德巴利酵母(Debaryomyces)屬菌、耐鹼酵母(Galactomyces)屬菌、有孢圓酵母(Torulaspora)屬菌、紅酵母(Rhodotorula)屬菌、耶羅威亞(Yarrowia)屬菌、結合酵母(Zygosaccharomyces)屬菌等酵母,較佳為酵母菌屬菌。只要為該行業者,則可依據一般之方法及條件,培養於作為用以製備發揮本發明之作用效果之酵母甘露聚糖之原料來使用上無障礙之酵母。換言之,依據一般之方法及條件由業者所培養之酵母可用作於製備發揮本發明之作用效果之酵母甘露聚糖上無障礙之原料。
又,用作上述酵母甘露聚糖之原料之酵母較佳為可食性酵母,更佳為用作麵包酵母或啤酒酵母之酵母。具體而言,可列舉:釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、巴斯德酵母(Saccharomyces pastorianus)、奇異酵母(Saccharomyces paradoxus)、粟酒裂殖酵母(Saccharomyces mikatae)、貝酵母(Saccharomyces bayanus)、庫德里阿茲威酵母(Saccharomyces kudriavzevii)、乳酸克魯維酵母(Kluyveromyces lactis)、高蛋白假絲酵母(Candida utilis)、白色念珠菌(Candida albicans)、熱帶念珠菌(Candida tropicalis)、解脂假絲酵母(Candida lypolitica)、及清酒假絲酵母(Candida sake)等。用作上述酵母甘露聚糖之原料之酵母例如較佳為釀酒酵母、巴斯德酵母及貝酵母。
(3)酵母α-甘露聚糖之含有率之算出方法
藉由上述製備方法獲得之酵母甘露聚糖製備物亦可含有來自酵母之α-甘露聚糖-蛋白質複合體(即與α-甘露聚糖鏈結合之狀態之蛋白質部分)。此處,於本說明書中,將來自酵母之α-甘露聚糖及來自酵母之α-甘露聚糖-蛋白質複合體中之α-甘露聚糖鏈部分合併統稱為「酵母α-甘露聚糖」。酵母甘露聚糖中之酵母α-甘露聚糖之含有率視酵母甘露聚糖之製備方法而多少有些變動,但大致在一定之範圍內,通常為30~95%。關於酵母α-甘露聚糖之含有率,只要於使用酵母甘露聚糖製備物作為酵母甘露聚糖時發揮本發明之作用效果,則無特別限定。只要為該行業者,則可依據一般之方法及條件,製備具有於發揮本發明之作用效果上無障礙之酵母α-甘露聚糖之含有率之酵母甘露聚糖。換言之,依據一般之方法及條件由業者製備之酵母甘露聚糖具有於發揮本發明之作用效果上無障礙之酵母α-甘露聚糖之含有率。
酵母甘露聚糖製備物中之酵母α-甘露聚糖之含有率係藉由如下之方法算出。首先,分別定量酵母甘露聚糖製備物之檢體(A)中之甘露糖及使酵母甘露聚糖製備物水解所得之檢體(B)中之甘露糖。此處,檢體(B)為藉由利用硫酸對檢體(A)進行處理,將檢體(A)中之所有糖鏈水解成單糖後進行中和所得之檢體。各檢體中之甘露糖例如可藉由高效液相層析法(HPLC:high performance liquid chromatography)定量,亦可藉由一般財團法人 日本食品分析中心所實施之方法進行定量。繼而,對於自檢體(B)之甘露糖量減去檢體(A)之甘露糖量所得之值,為了減去由於酵母α-甘露聚糖之水解而結合之水之量,乘以0.9,藉此算出酵母甘露聚糖製備物中之酵母α-甘露聚糖之含量。最後,藉由算出酵母α-甘露聚糖之含量相對於檢體(A)之重量之比率,可算出酵母甘露聚糖製備物中之酵母α-甘露聚糖之比率、即酵母α-甘露聚糖之含有率。本發明之各劑無需使用酵母α-甘露聚糖之純度為100%之酵母甘露聚糖製備物,亦可使用純度處於如上述之一般範圍內之酵母甘露聚糖製備物。
本發明之雌馬酚產生促進劑、經前症候群改善劑及皮膚狀態改善劑之各劑之形態並無特別限定,可為粉末狀,亦可為使用水或其他溶劑而成之溶液狀(分散液狀)。本發明之各劑典型而言,係摻合至與各劑之作用相對應之用途之飲食品組成物中而使用,因此較佳為製成適於此種飲食品組成物之製造之劑型。
本發明之各劑之作用效果、即雌馬酚產生促進作用、經前症候群改善作用、皮膚狀態改善作用可分別使用公知之手法,或依據公知之手法進行評價。關於雌馬酚產生促進作用,例如可以如下方式進行評價,即藉由免疫層析法測定受驗者之尿中之雌馬酚濃度,或藉由HPLC(High Performance Liquid Chromatography)等測定受驗者之尿中或者血中之雌馬酚濃度,通過該濃度是否因攝取雌馬酚產生促進劑(作為其有效成分之酵母甘露聚糖)而變高來進行評價。經前症候群改善作用例如可以如下方式進行評價,即對受驗者進行有關經前症候群之症狀之輕重之提問,通過與提問之回答對應之得分是否因攝取經前症候群改善劑(作為其有效成分之酵母甘露聚糖)而得到改善來進行評價。皮膚狀態之改善作用例如可以如下方式進行評價,即對受驗者進行有關皮膚不適之輕重或伴隨年齡增加之皮膚狀態之變化之程度的提問,或測定有關皮膚狀態(例如皮膚水分量、皮膚水分蒸散量、皮膚彈性、皮脂量、黃褐斑、皺紋、肌理、色不均、毛孔、棕褐斑、紅度、卟啉量、皮疹數、膠原蛋白量等)之指標值,藉此透過與對該等提問之回答對應之得分或上述測定值是否因攝取皮膚狀態改善劑(作為其有效成分之酵母甘露聚糖)而得到改善來進行評價。所有作用效果由於均於適當設定了群(包含安慰劑等之對照群)或條件後進行試驗,並進行統計學處理(檢定是否存在有意義差),故而可視為合理之評價。
[飲食品組成物]
本發明之雌馬酚產生促進用飲食品組成物(食品組成物及飲料組成物)含有本發明之雌馬酚產生促進劑、及適合於食品組成物及飲料組成物各形態之其他成分。本發明之經前症候群改善用飲食品組成物及皮膚狀態改善用飲食品組成物亦同樣地含有本發明之經前症候群改善劑及皮膚狀態改善劑、以及適合於食品組成物及飲料組成物各形態之其他成分。換言之,本發明之雌馬酚產生促進用飲食品組成物、經前症候群改善用飲食品組成物及皮膚狀態改善用飲食品組成物分別為添加本發明之雌馬酚產生促進劑、經前症候群改善劑及皮膚狀態改善劑作為用以賦予雌馬酚之產生促進、經前症候群之各種症狀之改善及皮膚狀態之改善等作用效果之成分(添加物質)的飲食品組成物。
再者,雖將作為雌馬酚產生促進劑(以及含有其之經前症候群改善劑及皮膚狀態改善劑)之有效成分之酵母甘露聚糖以具有細胞壁之酵母之形態含有,但並非作為組成物製造之天然素材或其加工品、例如殘留有酵母之醱酵食品或釀造酒本身不屬於本發明之飲食品組成物。
飲食品組成物之形態並無特別限定,可製成可摻合本發明之各劑之與公知之各種飲食品相同之形態。例如可列舉:錠劑、膠囊劑、散劑(顆粒劑)、其他劑型之補充品(營養輔助食品);清涼飲料(碳酸飲料、無酒精飲料、果汁、咖啡飲料、茶系飲料、礦泉水、運動飲料等)、乳飲料、豆乳飲料、發酵乳、乳酸菌飲料、可可(cocoa)、酒精飲料(啤酒、發泡酒、其他釀造酒、甜露酒、日本酒、甜米酒、葡萄酒、蒸餾酒等)、由即溶粉末製備之飲料、其他飲料;麵包、早餐榖類食品(cereal)、點心類(餅乾、曲奇、巧克力等)、加工品(鰹魚乾、鹽漬水產食品、鹹圓鯵魚乾等)、醃菜(糠醃菜、朝鮮泡菜、西式泡菜)、醱酵食品(納豆、乳酪、酸酪乳等)、調味料(醬油、味噌、醋等)、其他食品。
關於飲食品組成物中之本發明之各劑之含量、或作為其有效成分之酵母甘露聚糖之含量,只要具有發揮本發明之各劑之作用效果、即雌馬酚產生促進作用、經前症候群改善作用或皮膚狀態改善作用之酵母α-甘露聚糖之含量,則無特別限定。又,關於飲食品組成物中之酵母α-甘露聚糖之含量,只要發揮本發明之各劑之作用效果、即雌馬酚產生促進作用、經前症候群改善作用或皮膚狀態改善作用,則無特別限定。關於酵母甘露聚糖及酵母α-甘露聚糖之含量,可考慮飲食品組成物之形態或製造方法等,又視需要考慮每一餐或每一天之有效成分量等而適當進行設定。於使用酵母甘露聚糖製備物作為本發明之各劑之情形時,可根據該酵母甘露聚糖製備物之重量及該酵母甘露聚糖製備物中所含有之酵母α-甘露聚糖之比率(酵母α-甘露聚糖之含有率)來進行調節以使作為有效成分之酵母甘露聚糖之含量成為發揮本發明之各劑之作用效果的範圍。
本發明之飲食品組成物之除本發明之各劑以外的原料或成分可設為與習知之飲食品組成物相同。
關於本發明之飲食品組成物,成為雌馬酚之前驅物之大豆異黃酮(大豆異黃酮苷素或其配糖體、或者作為相關物之大豆異黃酮、丙二醯基大豆異黃酮、乙醯基大豆異黃酮、丁二醯基大豆異黃酮等)可不作為必須成分,但視所需,亦可成分中含有大豆異黃酮之純化物或含有大豆異黃酮之物質(例如豆乳等來自大豆之飲食品)。
取補充品之形態之本發明之飲食品組成物除本發明之各劑以外,可含有選自一般或公知之補充品所含有之各種成分、例如賦形劑、甜味料、著色料、香料及其他成分中之至少1種。補充品中之本發明之各劑之含量並無特別限定,可與一般之補充品同樣地適當設定,例如補充品中之酵母甘露聚糖製備物之含量可設為相對於補充品之總質量成為5%以上或10%以上且75%以下之量。
再者,補充品可製成酵母甘露聚糖製備物100%、即本發明之雌馬酚產生促進劑、經前症候群改善劑或皮膚狀態改善劑100%之形態。此種實施形態中之「補充品」為僅含有本發明之各劑、即僅由本發明之各劑所構成之物質,因此不屬於「飲食品組成物」,但為「本發明之雌馬酚產生促進劑、經前症候群改善劑或皮膚狀態改善劑」之實施形態之一,可視為假定如下用途者,即並非摻合至飲食品組成物中而直接攝取。
取飲料組成物之形態之本發明之飲食品組成物除本發明之各劑以外,可含有選自一般或公知之飲料所含有之各種成分、例如水(或碳酸水)、咖啡萃取物、茶葉萃取物、果汁、其他植物原料萃取物、乳、豆乳、發酵乳、甜味料、酸味料、著色料及香料中之至少1種。飲料組成物中之本發明之各劑之含量並無特別限定,可與一般之飲料組成物同樣地一面視需要考慮混濁等,一面適當進行設定,例如,飲料組成物中之酵母甘露聚糖之含量可設為相對於飲料組成物之總質量成為0.04%以上或0.1%以上且7.5%以下或4%以下之量。
此種本發明之飲食品組成物可藉由除進而包括添加本發明之各劑作為成分之步驟以外,與習知之飲食品組成物相同之方法進行製造。
飲食品組成物亦可以保健功能食品(即營養功能食品、特定保健用食品及功能性表示食品)之形式進行製造,又,亦可以治療食品(即,實現治療目的者,或醫生開出飲食單,營養師等依據其製作食譜,基於該食譜進行調理所得者)、飲食療法食品或護理食品等之形式進行製造。
飲食品組成物之一餐量或每一天之攝取標準量可視期待發揮本發明之各劑之作用效果的對象之年齡、體重、性別或攝取前之指標值等,又基於非臨床或臨床試驗結果等而適當進行設定。飲食品組成物之攝取期間亦可適當設定,較佳為持續長期反覆進行攝取,又日常性地進行攝取。於本發明之一個態樣中,關於本發明之飲食品組成物,以該飲食品組成物所含有之作為有效成分之酵母甘露聚糖之攝取量(以下亦稱為「酵母甘露聚糖之有效量」)成為較佳為0.1 g/天以上、更佳為0.2 g/天以上、進而較佳為0.3 g/天以上、且較佳為4 g/天以下、更佳為2.5 g/天以下、進而較佳為1.5 g/天以下之方式進行攝取。
關於本發明之飲食品組成物之用途、即本發明之飲食品組成物為雌馬酚產生促進用、經前症候群改善用或皮膚狀態改善用的情況可直接或間接地表示。直接表示之例為於製品本身、包裝、容器、貼紙、標籤等有體物上進行記載,間接表示之例為基於網站、店面、展示會、廣告牌、公告板、報紙、雜誌、電視、無線電廣播、郵寄物、電子郵件等場所或手段之廣告、宣傳活動。於將本發明之飲食品組成物作為功能性表示食品進行製造之情形時,例如可如「本品含有酵母甘露聚糖。報告酵母甘露聚糖有幫助保護皮膚濕潤之功能,適於皮膚容易乾燥之人」等般,表示基於作為功能性成分所含有之酵母甘露聚糖之作用效果(皮膚之保濕作用)之功能性。
[本發明之其他態樣]
本發明於一態樣提供一種促進人及除人以外之哺乳類(例如小鼠等實驗動物、或寵物等)中之雌馬酚之產生之方法,其包括讓攝取或攝取酵母甘露聚糖之有效量、換言之,使其導入至腸內或導入至腸內。本發明於一態樣提供一種改善人及除人以外之哺乳類(例如小鼠等實驗動物、或寵物等)之皮膚之方法,其包括讓攝取酵母甘露聚糖之有效量(或含有其之雌馬酚產生促進劑)。本發明於一態樣提供一種改善人(尤其是女性)之經前症候群之方法,其包括讓攝取酵母甘露聚糖之有效量(或含有其之雌馬酚產生促進劑)。
該等「雌馬酚產生促進方法」、「皮膚狀態改善方法」及「經前症候群改善方法」之發明只要為該行業者,則能夠由上述本發明之各劑(雌馬酚產生促進劑、皮膚狀態改善劑及經前症候群改善劑)及/或本發明之各飲食品組成物(分別用於促進雌馬酚之產生、改善皮膚之狀態及改善經前症候群之食品組成物及飲料組成物)之發明進行轉換,可同樣地適用本說明書中記載之該等各劑及/或各飲食品組成物之相關事項。
[實施例]
[酵母甘露聚糖製備物X之準備]
(酵母甘露聚糖製備物X:來自巴斯德酵母)
將10 kg市售之酵母之細胞壁(商品名「酵母細胞壁」,Asahi Group食品股份有限公司)懸浮於蒸餾水,添加氫氧化鈉而調整至pH值11.0後,於90℃煮沸12小時。藉由離心分離回收上清液,添加鹽酸而調整至pH值5.5。藉由冷凍乾燥操作而獲得2 kg之酵母甘露聚糖製備物X。
(酵母α-甘露聚糖之含有率)
委託一般財團法人 日本食品分析中心,分別定量上述所得之酵母甘露聚糖製備物X之檢體(A)中之甘露糖、及將上述所得之酵母甘露聚糖製備物X水解所得之檢體(B)中之甘露糖。其結果為,檢體(A)之甘露糖之含量為檢測極限值,檢體(B)之甘露糖之含量為69 g/檢體100 g。根據其等並藉由上述算出方法,算出所獲得之酵母甘露聚糖製備物X中之酵母α-甘露聚糖之含有率,結果為62%。
一般財團法人 日本食品分析中心之檢體(A)及檢體(B)中之甘露糖之定量方法之具體順序係如下所述。採取檢體(A)及檢體(B)各0.6 g,添加至濃度72%之硫酸中,於室溫下攪拌1小時。將檢體溶液之硫酸之濃度稀釋至4%後,於高壓釜(121℃)中加熱1小時。將檢體溶液冷卻至室溫後,進行中和,藉由水定量為200 mL。藉由濾紙過濾定量後之檢體溶液,藉由水將濾液稀釋至50倍,進而藉由膜濾器過濾稀釋液。藉由基於下述操作條件之高效液相層析法分析該濾液,測定濾液中之甘露糖之濃度,定量檢體(A)及檢體(B)中之甘露糖。
機種:LC-20AD(島津製作所股份有限公司)
檢測器:螢光分光光度計RF-20Axs(島津製作所股份有限公司)
管柱:TSKgel SUGAR AXI,4.6 mm×150 mm(Tosoh股份有限公司)
管柱溫度:60℃
流動相:0.5 mol/L 硼酸緩衝液(pH值8.7)
流量:0.4 mL/min
注入量:20 μL
螢光激發波長:320 nm
螢光測定波長:430 nm
柱後:反應液;1 w/v% L-精胺酸溶液
反應液流量;0.7 mL/min
反應溫度;150℃
[實施例1~4、比較例1及2]
將20~40多歲之男女33名分成3群,讓各群以每天1杯之方式攝取含有酵母甘露聚糖製備物X 1 g或2 g之麥茶飲料、或含有安慰劑(麥芽糊精1 g)之麥茶飲料(以下,亦分別稱為「試驗飲料」)4週,於攝取前後進行[A]尿中雌馬酚濃度之測定及[B]皮膚不適得分之記錄(實施例1及2、比較例1)。又,將20~40多歲之女性18名分成3群,與上述[A]及[B]同樣地,讓各群以每天1杯之方式攝取含有酵母甘露聚糖製備物X 1 g或2 g之麥茶飲料、或含有安慰劑(麥芽糊精1 g)之麥茶飲料4週,於攝取前後,記錄[C]經前不定主訴得分(實施例3及4、比較例2)。
再者,於評價與雌馬酚產生能力相關之上述事項時,受驗者全體需要攝取足夠量之成為雌馬酚之前驅物之大豆異黃酮。因此,於酵母甘露聚糖製備物之攝取前及攝取後之任一時點之採尿時,為了攝取成為雌馬酚之前驅物之大豆異黃酮,均於採尿前3天內讓各受驗者以1天1杯之方式攝取含有94 mg之異黃酮之成分無調整豆乳飲料200 ml。受驗者之尿於採取後立即冷凍保存。
[A]雌馬酚產生促進作用之評價
雌馬酚產生促進作用係藉由威爾克森符號等級檢定(Wilcoxon signed-rank test)對酵母甘露聚糖製備物X之攝取前後之各受驗者之尿中雌馬酚濃度進行評價。尿中雌馬酚濃度係使用於室溫下解凍之尿,藉由免疫層析法進行測定。將尿中雌馬酚濃度之測定結果及威爾克森符號等級檢定結果示於表1。於酵母甘露聚糖製備物X 2 g攝取群中,於試驗飲料之攝取後尿中雌馬酚濃度顯著地增加。又,於酵母甘露聚糖製備物X 1 g攝取群中,顯示出在試驗飲料之攝取後尿中雌馬酚濃度增加之傾向。另一方面,於安慰劑攝取群中,在試驗飲料之攝取前後未發現尿中雌馬酚濃度有顯著變化。
[B]皮膚狀態改善作用之評價
皮膚狀態改善作用係藉由威爾克森符號等級檢定而評價對於以下提問之基於4個等級之回答的得分(無=得分1,較弱=得分2,中等程度=得分3,較強=得分4)。
提問:回憶最近1個月之情況,皮膚有過不適嗎?
將與皮膚不適相關之得分及威爾克森符號等級檢定結果示於表2。於酵母甘露聚糖製備物X 1 g及2 g攝取群中,於試驗飲料攝取後皮膚之不適得分得到顯著改善。另一方面,於安慰劑攝取群中,於試驗飲料攝取前後未發現皮膚之不適得分有顯著變化。
[C]經前症候群改善作用之評價
經前症候群改善作用係藉由威爾克森符號等級檢定而評價對於下述全部17個項目之提問之基於4個等級之回答的得分(無=得分1,較弱=得分2,中等程度=得分3,較強=得分4)。該等提問係與精神症狀、身體症狀及社會功能降低(以下,亦稱為「經前不定主訴」)相關之提問,依據基於美國精神醫學學會之精神疾病之診斷基準之指南即DSM-IV-TR之經前情緒低落症(PMDD)診斷基準案(American Psychiatric: Association: Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, Fourth Edition Text Revision: DSM-IV-TR. Washington DC: American Psychiatric Association, 2000)之日文版(高橋三郎,大野裕,染谷俊幸(譯):DMS-IV-TR精神疾病之診斷與統計手冊新訂版. 東京:醫學書院,2003)所製作之問卷(宮岡佳子,秋元世志枝,上田嘉代子,加茂登志子:PMDD評價標準之開發與有效性及可靠性之研究(The reliability and validity of the newly developed PMDD scale):日本女性身心醫學學會雜誌(JJp Soc Psychosom ObsLet Gynecol)Vol. 14, No. 2, pp. 194 - 201. 平成21年10月))而製作。
提問1:於最近之月經週期中存在過如下情況嗎?即,如下述之症狀自月經開始之1、2週前出現,而且該症狀於月經開始後2、3天內消失。
(1)心情變得抑鬱。或心情變得絕望。
(2)變得不安。或緊張。
(3)變得愛流淚。或突然變得悲傷。
(4)變得易怒。或煩躁。或遷怒他人。
(5)喪失興趣(工作、學校、愛好等)。
(6)注意力降低。
(7)變得容易疲勞。或變得消沉。
(8)食慾增加。或想吃特定之食物(例:甜食等)。
(9)睡得比往常多。睡意濃。
(10)比往常更無法入睡。
(11)感到無法控制自己。
(12)出現下述身體症狀之任一個。乳房疼痛或發脹、感到腹部發脹、腹痛、頭痛、關節痛、肌肉痛、感到身體浮腫、體重增加、便秘。
提問2:詢問就算只有一個上述所列舉之症狀之人(較弱~較強)。
請回答於出現該症狀之期間,下述日常活動是否出現障礙。
(13)工作效率出現障礙(職場或學校)。
(14)家務出現障礙。
(15)職場之人際關係出現障礙(人際關係出現障礙之例:避免交往、遷怒他人、發生口角等)。
(16)與家人之關係出現障礙。
(17)與朋友、熟人之關係出現障礙。
將各受驗者每個人之與經前不定主訴相關之全部17個項目之得分進行合計,將合計所得之PMDD總計得分及威爾克森符號等級檢定結果示於表3。於酵母甘露聚糖製備物X 1 g及2 g攝取群中,於試驗飲料攝取後得分得到顯著改善。
又,將全部17個項目之各得分中關於(4)、(8)、(9)及(12)之得分、及威爾克森符號等級檢定結果示於表4、表5、表6及表7。關於項目(12)(身體症狀,表7),於酵母甘露聚糖製備物X 2 g攝取群中,於試驗飲料攝取後得分得到顯著改善。關於項目(4)(煩躁,表4)、項目(8)(食慾,表5)及項目(9)(睡意,表6)這3個項目,分別於酵母甘露聚糖製備物X 1 g攝取群中於試驗飲料攝取後發現得分之改善傾向。
[酵母甘露聚糖製備物A、B及C之準備]
(酵母甘露聚糖製備物A:來自巴斯德酵母)
將10 kg市售之酵母之細胞壁(商品名「酵母細胞壁」,Asahi Group食品股份有限公司)懸浮於蒸餾水,添加氫氧化鈉而調整至pH值11.0後,於90℃煮沸12小時。藉由離心分離回收上清液,添加鹽酸而調整至pH值5.5。藉由冷凍乾燥操作獲得2 kg之酵母甘露聚糖製備物A。藉由上述算出方法算出所獲得之酵母甘露聚糖製備物A之酵母α-甘露聚糖之含有率,結果為酵母α-甘露聚糖含有率為50.5%。
(酵母甘露聚糖製備物B:來自釀酒酵母)
將市售之試劑(商品名「Mannan from Saccharomyces cerevisiae M7504(Sigma-Aldrich Japan有限公司)作為酵母甘露聚糖製備物B。藉由上述算出方法算出酵母甘露聚糖製備物B之酵母α-甘露聚糖之含有率,結果為酵母α-甘露聚糖含有率為78.8%。
(酵母甘露聚糖製備物C:來自高蛋白假絲酵母)
將高蛋白假絲酵母(IFO0626)植菌於8.0 L之YPD培養基中,於2.0 L容量之錐形燒瓶各分注0.50 L,於25℃、120 rpm振盪培養24小時。對培養液進行集菌後使之於蒸餾水中懸浮,於100℃加熱10分鐘後藉由離心分離去除上清液,製備細胞壁組分。將所獲得之細胞壁組分於蒸餾水中懸浮,添加氫氧化鈉而調整至pH值11.0後,於90℃煮沸12小時。藉由離心分離回收上清液,添加鹽酸而調整至pH值5.5。藉由冷凍乾燥操作獲得3.7 g之酵母甘露聚糖製備物C。所使用之YPD培養基之組成為以下,且未調整pH值。
酵母萃取物:10 g
蛋白腖:10 g
葡萄糖:20 g
蒸餾水:1 L
[實施例5、比較例3]
將25名感覺到皮膚乾燥之30~40多歲之女性分成2群,讓各群以1天1次之方式攝取含有1230 mg酵母甘露聚糖製備物A之錠劑、或含有1230 mg麥芽糖之對照錠劑(以下亦分別稱為「試驗食」及「對照食」)8週。於試驗食及對照食之攝取前後,進行[D]經皮水分蒸散量之測定及[E]由尿中雌馬酚濃度算出雌馬酚轉化效率(實施例5、比較例3)。再者,1天攝取之試驗食中之酵母α-甘露聚糖量相當於0.62 g。
[D]經皮水分蒸散量之測定
經皮水分蒸散量係無意識中自體內通過角質層揮散之水分量,廣泛用作表示皮膚保濕等級之指標。關於經皮水分蒸散量,於將溫度管理為20~22℃、將濕度管理為50±5%之恆溫恆濕室中讓受驗者安靜30分鐘後,以側臥位使用Tewameter TM300MP(Courage+Khazaka(CK)公司)測定前臂內側。關於試驗食及對照食之皮膚保濕效果,對於試驗食攝取群(實施例5)與對照食攝取群(比較例3),分別藉由t檢定來評價試驗食及對照食之攝取8週後之經皮水分蒸散量、試驗食及對照食之攝取前之經皮水分蒸散量及兩者之經皮水分蒸散量的變化量。將各群之水分蒸散量及其變化量與檢定結果示於表8。
於試驗食及對照食之攝取前,兩群之經皮水分蒸散量未發現統計上有意義差,但於攝取試驗食及對照食8週後,試驗食攝取群相對於對照食攝取群於統計上顯示出顯著低值。又,關於試驗食及對照食之攝取前後之經皮水分蒸散量之變化量,試驗食攝取群相對於對照食攝取群於統計上顯示出顯著低值。
[E]由尿中雌馬酚濃度算出雌馬酚轉化效率
藉由下述之酵素HPLC(High Performance Liquid Chromatography)法測定尿中之大豆異黃酮苷素、二氫大豆異黃酮苷素、雌馬酚濃度,使用以下之算出式算出雌馬酚轉化效率。
雌馬酚轉化效率(%)={雌馬酚/(大豆異黃酮苷素+二氫大豆異黃酮苷素+雌馬酚)}﹡100
再者,於評價雌馬酚轉化效率時,受驗者全體需要攝取足夠量之成為雌馬酚之前驅物之大豆異黃酮,因此於試驗食及對照食之攝取前及攝取後之任一時點之採尿時,為了攝取成為雌馬酚之前驅物之大豆異黃酮,均於採尿前3天內以1天1次之方式攝取含有25 mg大豆異黃酮之錠劑,尿係於採取後立即冷凍保存。
(酵素HPLC法)
基於Redruello, B. et al.之酵素HPLC法(Redruello, B. et al., A novel UHPLC method for the rapid and simultaneous determination of daidzein, genistein and equol in human urine, Journal of Chromatography B (2015), Volume 1005 (15 November 2015), pages 1 - 8),定量尿中之大豆異黃酮苷素、二氫大豆異黃酮苷素、雌馬酚。
向於室溫下解凍之尿500 μl中添加500 μl之0.2 M乙酸鈉(pH值5.2)及4 μl之β-葡萄醣醛酸酶/芳香基硫酸酯酶(Sigma-Aldrich Japan有限公司)。於37℃反應3小時,反應結束後,將作為內部標準物質之4-羥基二苯甲酮以最終濃度成為10 μg/ml之方式進行添加,利用3 ml之乙酸乙酯提取2次。於減壓乾燥後,溶解於500 μl之DMSO/甲醇1:1溶液中,適當稀釋後供至HPLC分析。HPLC係於下述條件下進行。
裝置:ACQUITY UPLC(Waters公司製造)
管柱:ACQUITY UPLC BEH C18 1.7 μm 2.1×100 mm Column(Waters公司製造)
檢測:紫外吸光光度計(測定波長280 nm)
管柱溫度:40℃
流動相:A液:水+5 mM甲酸銨
B液:甲醇+5 mM甲酸銨
流量:0.4 mL/min
樣品注入量:1 μl
作為標準品,使用大豆異黃酮苷素(Carbosynth公司製造)、二氫大豆異黃酮苷素(Cayman Chemical公司製造)、雌馬酚(Tocris Bioscience公司製造)、4-羥基二苯甲酮(東京化成工業股份有限公司)。
關於藉由上述方法所算出之試驗食及對照食之攝取後之雌馬酚轉化效率,試驗食攝取群相對於對照食攝取群於統計上顯示出顯著高值。
[實施例6、實施例7、比較例4及比較例5]
將ICR小鼠之新鮮排泄便懸浮於30倍容量之GAM培養基中,藉由100 μm孔徑之過濾器(FALCON公司製造)進行過濾。將3 ml之過濾液植菌至7 ml之GAM培養基,於厭氧腔室內於37℃培養24小時。培養後,與一半量之80%甘油溶液加以混合,以小鼠糞便懸浮液之形式於-80℃下冷凍保存。
以酵母α-甘露聚糖之最終濃度成為1.0%之方式將酵母甘露聚糖製備物A添加至GAM糖分解用培養基。將小鼠糞便懸浮液接種至添加有酵母甘露聚糖製備物A之培養基中,於37℃進行24小時厭氧培養而使其活化。將已活化之培養液離心分離而去除培養上清液。將大豆異黃酮苷素(Carbosynth公司製造)以最終濃度成為100 μM之方式加入至GAM糖分解用培養基中。將去除了上清液之培養液於加入有大豆異黃酮苷素之培養基中再懸浮。此時,以酵母α-甘露聚糖之最終濃度成為1.0%或0.5%之方式添加酵母甘露聚糖製備物A(實施例6a及6b)或酵母甘露聚糖製備物B(實施例7a及7b)。分別於37℃厭氧培養48小時,藉由上述酵素HPLC法測定培養後之雌馬酚濃度。設定未加入酵母甘露聚糖製備物之無添加區(比較例4)、及添加1.0%之作為α-甘露聚糖之構成單糖之甘露糖(商品名「D(+)-Mannose」,FUJIFILM Wako Pure Chemical股份有限公司)代替酵母甘露聚糖製備物之甘露糖添加區(比較例5),與所測得之各雌馬酚濃度進行比較。
HPLC於下述條件下進行。
裝置:ACQUITY UPLC(Waters公司製造)
管柱:ACQUITY UPLC BEH C18 1.7 μm 2.1×100 mm Column(Waters公司製造)
檢測:紫外吸光光度計(測定波長280 nm)
管柱溫度:40℃
流動相:A液:水+5 mM甲酸銨
B液:甲醇+5 mM甲酸銨
流量:0.4 mL/min
樣品注入量:1 μl
將實施例6a及6b、實施例7a及7b、比較例4以及比較例5之結果示於表9。
關於培養後之雌馬酚濃度,於酵母甘露聚糖製備物A及B之任一情形時,酵母甘露聚糖製備物A或B添加區與無添加區相比較,皆顯示較高之值(實施例6a及6b、實施例7a及7b、以及比較例4)。又,於酵母α-甘露聚糖1.0%添加區中,與0.5%添加區相比,培養後之雌馬酚濃度顯示較高之值,確認到效果之濃度響應性。另一方面,於1.0%甘露糖添加區中,與無添加區相比較,培養後之雌馬酚濃度未顯示較高之值(比較例4及5)。
[實施例8、實施例9、比較例6及比較例7]
將ICR小鼠之新鮮排泄便懸浮於30倍容量之GAM培養基中,藉由100 μm孔徑之過濾器(FALCON公司製造)進行過濾。將3 ml之過濾液植菌於7 ml之GAM培養基中,於厭氧腔室內於37℃培養24小時。培養後,與一半量之80%甘油溶液加以混合,而以小鼠糞便懸浮液之形式於-80℃冷凍保存。
將酵母甘露聚糖製備物A以酵母α-甘露聚糖之最終濃度成為1.0%之方式添加至GAM糖分解用培養基中。將小鼠糞便懸浮液接種至添加有酵母甘露聚糖製備物A之培養基中,於37℃進行24小時厭氧培養而使其活化。將已活化之培養液離心分離而去除上清液。將大豆異黃酮苷素(Carbosynth公司製造)以最終濃度成為100 μM之方式加入至GAM糖分解用培養基中。將去除了上清液之培養液於加入有大豆異黃酮苷素之培養基中再懸浮。此時,以酵母α-甘露聚糖之最終濃度成為1.0%之方式添加酵母甘露聚糖製備物A或C(實施例8及9)。於37℃厭氧培養48小時,藉由上述酵素HPLC法測定培養後之雌馬酚濃度。將測得之各雌馬酚濃度與未加入酵母甘露聚糖製備物之無添加區(比較例6)及添加1.0%之作為α-甘露聚糖之構成單糖之甘露糖(商品名「D(+)-Mannose」,FUJIFILM Wako Pure Chemical股份有限公司)代替酵母甘露聚糖製備物之甘露糖添加區(比較例7)進行比較。
HPLC係於下述條件下進行。
裝置:ACQUITY UPLC(Waters公司製造)
管柱:ACQUITY UPLC BEH C18 1.7 μm 2.1×100 mm Column(Waters公司製造)
檢測:紫外吸光光度計(測定波長280 nm)
管柱溫度:40℃
流動相:A液:水+5 mM甲酸銨
B液:甲醇+5 mM甲酸銨
流量:0.4 mL/min
樣品注入量:1 μl
將實施例8、實施例9、比較例6及比較例7之結果示於表10。
其結果為,關於培養後之雌馬酚濃度,於酵母甘露聚糖製備物A及C之任一情形時,酵母甘露聚糖製備物添加區A及C與無添加區相比較,皆顯示較高之值(實施例8及9、以及比較例6)。另一方面,於1.0%甘露糖添加區中,與無添加區相比較,培養後之雌馬酚濃度未顯示較高之值(比較例6及7)。
無
無
Claims (12)
- 一種雌馬酚產生促進劑,其含有酵母甘露聚糖作為有效成分。
- 一種雌馬酚產生促進用食品組成物或飲料組成物,其含有請求項1所述之雌馬酚產生促進劑。
- 一種經前症候群改善劑,其含有請求項1所述之雌馬酚產生促進劑。
- 一種經前症候群改善用食品組成物或飲料組成物,其含有請求項3所述之經前症候群改善劑。
- 一種皮膚狀態改善劑,其含有請求項1所述之雌馬酚產生促進劑。
- 一種皮膚狀態改善用食品組成物或飲料組成物,其含有請求項5所述之皮膚狀態改善劑。
- 一種酵母甘露聚糖,其用以促進雌馬酚之產生。
- 一種酵母甘露聚糖之用途,其用以製造雌馬酚產生促進用食品組成物或飲料組成物。
- 一種酵母甘露聚糖,其用以改善經前症候群。
- 一種酵母甘露聚糖之用途,其用以製造經前症候群改善用食品組成物或飲料組成物。
- 一種酵母甘露聚糖,其用以改善皮膚狀態。
- 一種酵母甘露聚糖之用途,其用以製造皮膚狀態改善用食品組成物或飲料組成物。
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