TW201734041A - 抗ｉｌ-１７ｃ抗體 - Google Patents
抗ｉｌ-１７ｃ抗體 Download PDFInfo
- Publication number
- TW201734041A TW201734041A TW106105384A TW106105384A TW201734041A TW 201734041 A TW201734041 A TW 201734041A TW 106105384 A TW106105384 A TW 106105384A TW 106105384 A TW106105384 A TW 106105384A TW 201734041 A TW201734041 A TW 201734041A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- seq
- antibody
- region
- antibody fragment
- amino acid
- Prior art date
Links
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 title claims abstract description 191
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 title claims abstract description 191
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 claims abstract description 255
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 claims abstract description 255
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims abstract description 99
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 110
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 33
- 241000282553 Macaca Species 0.000 claims description 27
- 239000004575 stone Substances 0.000 claims description 25
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 24
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 24
- 101000998177 Mus musculus Interleukin-17C Proteins 0.000 claims description 23
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 15
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 13
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 11
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 5
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 2
- 230000027455 binding Effects 0.000 abstract description 57
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 abstract description 43
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 abstract description 43
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 abstract description 10
- 241000282412 Homo Species 0.000 abstract description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract 1
- LWQQLNNNIPYSNX-UROSTWAQSA-N calcipotriol Chemical compound C1([C@H](O)/C=C/[C@@H](C)[C@@H]2[C@]3(CCCC(/[C@@H]3CC2)=C\C=C\2C([C@@H](O)C[C@H](O)C/2)=C)C)CC1 LWQQLNNNIPYSNX-UROSTWAQSA-N 0.000 description 46
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 38
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 33
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 description 32
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 30
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 27
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 24
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 24
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 24
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 21
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 20
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 19
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 19
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 19
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 19
- 102100035016 Interleukin-17 receptor E Human genes 0.000 description 18
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- 101001019590 Homo sapiens Interleukin-17 receptor E Proteins 0.000 description 16
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 16
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 16
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 15
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 14
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 14
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 13
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 13
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 13
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 12
- MFZOSKPPVCIFMT-UHFFFAOYSA-N pinazepam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N(CC#C)C(=O)CN=C1C1=CC=CC=C1 MFZOSKPPVCIFMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 12
- 241000894007 species Species 0.000 description 12
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 11
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 11
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 11
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 11
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 10
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 9
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 9
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 208000005141 Otitis Diseases 0.000 description 8
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 8
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 8
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 7
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 7
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 7
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 7
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 7
- 101000845170 Homo sapiens Thymic stromal lymphopoietin Proteins 0.000 description 6
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 6
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 102100031294 Thymic stromal lymphopoietin Human genes 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 6
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 6
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 6
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 6
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 5
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 5
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 5
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 101710186076 Interleukin-17 receptor E Proteins 0.000 description 5
- 101001019589 Mus musculus Interleukin-17 receptor E Proteins 0.000 description 5
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 5
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 5
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 5
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 5
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 4
- 102100023698 C-C motif chemokine 17 Human genes 0.000 description 4
- 108010052495 Calgranulin B Proteins 0.000 description 4
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 4
- 102100039619 Granulocyte colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 4
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101000978362 Homo sapiens C-C motif chemokine 17 Proteins 0.000 description 4
- 101000746367 Homo sapiens Granulocyte colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 4
- 101001019598 Homo sapiens Interleukin-17 receptor A Proteins 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- 102100035018 Interleukin-17 receptor A Human genes 0.000 description 4
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 4
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 4
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 4
- 102100032420 Protein S100-A9 Human genes 0.000 description 4
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 4
- 238000007413 biotinylation Methods 0.000 description 4
- 230000006287 biotinylation Effects 0.000 description 4
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 4
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 210000000744 eyelid Anatomy 0.000 description 4
- 238000012781 high pressure - size exclusion chromatography Methods 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 238000004091 panning Methods 0.000 description 4
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 4
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 4
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 4
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 4
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 3
- 206010014025 Ear swelling Diseases 0.000 description 3
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 3
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 3
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 230000036566 epidermal hyperplasia Effects 0.000 description 3
- 210000002980 germ line cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 3
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 3
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 3
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 3
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 3
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 3
- OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N (2,4-dichlorophenyl) benzenesulfonate Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)CC(S(O)(=O)=O)C(=O)OCC(CC)CCCC HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100038326 Beta-defensin 4A Human genes 0.000 description 2
- 108010052500 Calgranulin A Proteins 0.000 description 2
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical group [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 2
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 2
- 208000019028 Epidermal thickening Diseases 0.000 description 2
- 206010015548 Euthanasia Diseases 0.000 description 2
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 101000884714 Homo sapiens Beta-defensin 4A Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 108010017525 Interleukin-17 Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000004554 Interleukin-17 Receptors Human genes 0.000 description 2
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 2
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 102100032442 Protein S100-A8 Human genes 0.000 description 2
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 2
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 2
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000009266 disease activity Effects 0.000 description 2
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 238000010149 post-hoc-test Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 238000002424 x-ray crystallography Methods 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- 229940122739 Calcineurin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710192106 Calcineurin-binding protein cabin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100024123 Calcineurin-binding protein cabin-1 Human genes 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238145 Cancer pagurus Species 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 108010072220 Cyclophilin A Proteins 0.000 description 1
- 108010068682 Cyclophilins Proteins 0.000 description 1
- 102000001493 Cyclophilins Human genes 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 108010092408 Eosinophil Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000044708 Eosinophil peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 1
- 102000002090 Fibronectin type III Human genes 0.000 description 1
- 108050009401 Fibronectin type III Proteins 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 102100037009 Filaggrin-2 Human genes 0.000 description 1
- 101000878281 Homo sapiens Filaggrin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000998146 Homo sapiens Interleukin-17A Proteins 0.000 description 1
- 101001023833 Homo sapiens Neutrophil gelatinase-associated lipocalin Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- -1 IL-1β Proteins 0.000 description 1
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 1
- 101710186083 Interleukin-17 receptor A Proteins 0.000 description 1
- 102100033461 Interleukin-17A Human genes 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 241000195947 Lycopodium Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102100035405 Neutrophil gelatinase-associated lipocalin Human genes 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102100034539 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase A Human genes 0.000 description 1
- 229940122907 Phosphatase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 238000010240 RT-PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 102000001400 Tryptase Human genes 0.000 description 1
- 108060005989 Tryptase Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 241000212749 Zesius chrysomallus Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 108091006004 biotinylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000010217 blepharitis Diseases 0.000 description 1
- 229960002882 calcipotriol Drugs 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 229940097957 dexamethasone 2 mg Drugs 0.000 description 1
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 230000000062 effect on obesity Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 210000005175 epidermal keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004299 exfoliation Methods 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000009454 functional inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000011990 functional testing Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000010842 high-capacity cDNA reverse transcription kit Methods 0.000 description 1
- 102000043448 human IL17RA Human genes 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000011078 in-house production Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000034190 positive regulation of NF-kappaB transcription factor activity Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000003571 reporter gene assay Methods 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 239000012146 running buffer Substances 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 208000037851 severe atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 230000008591 skin barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000010936 titanium Substances 0.000 description 1
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N vitamin D3 Chemical class C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/244—Interleukins [IL]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本發明提供結合至人類IL-17C之抗體或抗體片段。特定言之，本發明係關於具有組合有利性質且因此適用於治療患有(例如)異位性皮膚炎或牛皮癬之人類之抗體或抗體片段。
Description
本申請案係關於與人類IL-17C相互作用之抗體或抗體片段。本發明亦係關於可表現該等抗體或其片段之核酸、載體及宿主細胞；包含該等抗體或其片段之醫藥組合物；及該等抗體或其片段於治療特定疾病之用途。
IL-17C係IL17蛋白質家族之分泌性同源二聚物。活體外已顯示IL-17C刺激單核球性細胞系THP-1釋放TNF-α及IL-1β (Li等人(2000) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 97, 773-8)。IL-17C可誘導炎性細胞介素(諸如IL-1β、IL-6及IL-23)於腹膜滲出物細胞(PECS)及3T3細胞系中之mRNA表現(Yamaguchi等人(2007) J. Immunol 179, 7128-36)。 IL-17C作為與宿主防禦相關之促炎性細胞介素之作用係假設於幾種研究(Chang等人(2011) Immunity 35, 611–621, Song等人(2011) Nature Immunology 12, 12；Ramirez-Carrozzi等人(2011) Nature Immunology 12, 12)中。近期亦顯示於特異性腫瘤及癌組織之進展中之潛在作用(Xinyang Song (2014) Immunity 40, 140–152)。 近期於WO 2013/057241中，已實驗性評估IL-17C之抑制為治療炎性失調症之有前景方法。然而，WO 2013/057241中使用之個別抗體為對小鼠IL-17C具特異性之替代抗體，但顯示對人類IL-17C完全無反應性。另外，已提議可拮抗IL-17C之其他抗體(例如，於WO 1999/060127中)，但不是為特異性僅結合至小鼠IL-17C之多株血清就是替代抗體。 因此，存在研究及識別結合至人類IL-17C之抗體以減輕人類中與IL-17C相關聯之疾病或失調症之需求。
本發明提供新穎抗體及抗體片段。本文揭示之該等抗體及抗體片段結合至人類IL-17C且亦與來自石蟹獼猴及小鼠之IL-17C交叉反應。另外，本文揭示之抗體在整個相關物種(人類、小鼠及石蟹獼猴)中以80 pM或更小之IC50
濃度抑制IL-17C結合至其受體。如本文揭示及例示，該等抗體經證明在針對異位性皮膚炎及牛皮癬之各種活體內小鼠模型中為有效的。 因此，本發明揭示之抗體或抗體片段就效用而言係優越的且為用於治療患有(例如)異位性皮膚炎或牛皮癬之病患提供適合且有前景之化合物。 本發明提供結合至具有根據本說明書之表1之CDR區之人類IL-17C之抗體或抗體片段。本發明亦提供具有包含根據本說明書之表1之胺基酸序列之可變重鏈區及可變輕鏈CDR區之特異性抗體或抗體片段。 本發明亦提供與本文揭示之特異性抗體或抗體片段競爭之特異性抗體或抗體片段。本發明亦提供結合至與本文揭示之特異性抗體或抗體片段相同之抗原決定基之特異性抗體或抗體片段。 本發明亦提供本發明之經分離抗體或抗體片段，其用於藥物中。 本發明亦提供用於治療罹患失調症(諸如炎性失調症)之個體之方法，該方法藉由對該個體投與有效量之本發明之抗體或抗體片段。較佳地該個體為人類。 本發明亦提供醫藥組合物，其包含本發明之經分離抗體或抗體片段及醫藥上可接受之載劑。 本發明亦提供編碼本發明之抗體或抗體片段之核酸。 本發明亦提供包含編碼本發明之抗體或抗體片段抗體之核酸之載體。 本發明亦提供包含編碼本發明之抗體或抗體片段之載體或核酸之宿主細胞。 本發明主張之抗體或抗體片段具有效用。此外，本發明主張之識別此等抗體或片段之方法具有效用。 本發明主張之抗體或抗體片段之效用係欲改變人類IL-17C之生物活性。特定言之，本發明主張之抗體或抗體片段係用於治療用途，諸如炎性失調症(諸如，例如類風濕性關節炎、牛皮癬、肺炎、COPD)之治療及/或異位性皮膚炎(AD) (包括中度至重度AD)之治療。
本揭示內容涉及許多識別人類IL-17C之抗體或抗體片段。定義：
術語「IL-17C」係指稱為介白素17C的蛋白質。 人類IL-17C具有以下之胺基酸序列(UniProt Q9P0M4)： MTLLPGLLFLTWLHTCLAHHDPSLRGHPHSHGTPHCYSAEELPLGQAPPHLLARGAKWGQALPVALVSSLEAASHRGRHERPSATTQCPVLRPEEVLEADTHQRSISPWRYRVDTDEDRYPQKLAFAECLCRGCIDARTGRETAALNSVRLLQSLLVLRRRPCSRDGSGLPTPGAFAFHTEFIHVPVGCTCVLPRSV (SEQ ID No.: 1) 小鼠IL-17C具有以下之胺基酸序列(UniProt Q8K4C5)： MSLLLLGWLPTGMTHQDPPSWGKPRSHRTLRCYSAEELSHGQAPPHLLTRSARWEQALPVALVASLEATGHRRQHEGPLAGTQCPVLRPEEVLEADTHERSISPWRYRIDTDENRYPQKLAVAECLCRGCINAKTGRETAALNSVQLLQSLLVLRRQPCSRDGTADPTPGSFAFHTEFIRVPVGCTCVLPRSTQ (SEQ ID No.: 2) 石蟹獼猴IL-17C具有以下之胺基酸序列(XP_005592825.1)： MTLLPGLLFLTWLHACLAHQDPFLRGHPHTHGTPRCYSAEELPLGQAPPHLLARGAKWGQALPVALVSSLEAAGHRRRHDRPSAATQCPVLRPEEVLEADTHQRSISPWRYRVDTDEDRYPQKLAFAECLCRGCIDPRTGRETAALNSVRLLQSLLVLRRRPCSRDGSGLPTPGAFAFHTEFIRVPVGCTCVLPRSV (SEQ ID No.: 3) 術語「IL17RA」係指稱為介白素17受體A的蛋白質。人類IL17RA具有以下之胺基酸序列(UniProt Q96F46)： MGAARSPPSAVPGPLLGLLLLLLGVLAPGGASLRLLDHRALVCSQPGLNCTVKNSTCLDDSWIHPRNLTPSSPKDLQIQLHFAHTQQGDLFPVAHIEWTLQTDASILYLEGAELSVLQLNTNERLCVRFEFLSKLRHHHRRWRFTFSHFVVDPDQEYEVTVHHLPKPIPDGDPNHQSKNFLVPDCEHARMKVTTPCMSSGSLWDPNITVETLEAHQLRVSFTLWNESTHYQILLTSFPHMENHSCFEHMHHIPAPRPEEFHQRSNVTLTLRNLKGCCRHQVQIQPFFSSCLNDCLRHSATVSCPEMPDTPEPIPDYMPLWVYWFITGISILLVGSVILLIVCMTWRLAGPGSEKYSDDTKYTDGLPAADLIPPPLKPRKVWIIYSADHPLYVDVVLKFAQFLLTACGTEVALDLLEEQAISEAGVMTWVGRQKQEMVESNSKIIVLCSRGTRAKWQALLGRGAPVRLRCDHGKPVGDLFTAAMNMILPDFKRPACFGTYVVCYFSEVSCDGDVPDLFGAAPRYPLMDRFEEVYFRIQDLEMFQPGRMHRVGELSGDNYLRSPGGRQLRAALDRFRDWQVRCPDWFECENLYSADDQDAPSLDEEVFEEPLLPPGTGIVKRAPLVREPGSQACLAIDPLVGEEGGAAVAKLEPHLQPRGQPAPQPLHTLVLAAEEGALVAAVEPGPLADGAAVRLALAGEGEACPLLGSPGAGRNSVLFLPVDPEDSPLGSSTPMASPDLLPEDVREHLEGLMLSLFEQSLSCQAQGGCSRPAMVLTDPHTPYEEEQRQSVQSDQGYISRSSPQPPEGLTEMEEEEEEEQDPGKPALPLSPEDLESLRSLQRQLLFRQLQKNSGWDTMGSESEGPSA (SEQ ID No.: 4) 術語「IL17RE」係指稱為介白素17受體E的蛋白質。人類IL17RE具有以下之胺基酸序列(UniProt Q8NFR9)： MGSSRLAALLLPLLLIVIDLSDSAGIGFRHLPHWNTRCPLASHTDDSFTGSSAYIPCRTWWALFSTKPWCVRVWHCSRCLCQHLLSGGSGLQRGLFHLLVQKSKKSSTFKFYRRHKMPAPAQRKLLPRRHLSEKSHHISIPSPDISHKGLRSKRTQPSDPETWESLPRLDSQRHGGPEFSFDLLPEARAIRVTISSGPEVSVRLCHQWALECEELSSPYDVQKIVSGGHTVELPYEFLLPCLCIEASYLQEDTVRRKKCPFQSWPEAYGSDFWKSVHFTDYSQHTQMVMALTLRCPLKLEAALCQRHDWHTLCKDLPNATARESDGWYVLEKVDLHPQLCFKFSFGNSSHVECPHQTGSLTSWNVSMDTQAQQLILHFSSRMHATFSAAWSLPGLGQDTLVPPVYTVSQARGSSPVSLDLIIPFLRPGCCVLVWRSDVQFAWKHLLCPDVSYRHLGLLILALLALLTLLGVVLALTCRRPQSGPGPARPVLLLHAADSEAQRRLVGALAELLRAALGGGRDVIVDLWEGRHVARVGPLPWLWAARTRVAREQGTVLLLWSGADLRPVSGPDPRAAPLLALLHAAPRPLLLLAYFSRLCAKGDIPPPLRALPRYRLLRDLPRLLRALDARPFAEATSWGRLGARQRRQSRLELCSRLEREAARLADLG (SEQ ID No.: 5) 鼠科IL17RE具有以下之胺基酸序列(UniProt Q8BH06)： MGSPRLAALLLSLPLLLIGLAVSARVACPCLRSWTSHCLLAYRVDKRFAGLQWGWFPLLVRKSKSPPKFEDYWRHRTPASFQRKLLGSPSLSEESHRISIPSSAISHRGQRTKRAQPSAAEGREHLPEAGSQKCGGPEFSFDLLPEVQAVRVTIPAGPKASVRLCYQWALECEDLSSPFDTQKIVSGGHTVDLPYEFLLPCMCIEASYLQEDTVRRKKCPFQSWPEAYGSDFWQSIRFTDYSQHNQMVMALTLRCPLKLEASLCWRQDPLTPCETLPNATAQESEGWYILENVDLHPQLCFKFSFENSSHVECPHQSGSLPSWTVSMDTQAQQLTLHFSSRTYATFSAAWSDPGLGPDTPMPPVYSISQTQGSVPVTLDLIIPFLRQENCILVWRSDVHFAWKHVLCPDVSHRHLGLLILALLALTALVGVVLVLLGRRLLPGSGRTRPVLLLHAADSEAQRRLVGALAELLRTALGGGRDVIVDLWEGTHVARIGPLPWLWAARERVAREQGTVLLLWNCAGPSTACSGDPQAASLRTLLCAAPRPLLLAYFSRLCAKGDIPRPLRALPRYRLLRDLPRLLRALDAQPATLASSWSHLGAKRCLKNRLEQCHLLELEAAKDDYQGSTNSPCGFSCL (SEQ ID No.: 6) 術語「IL-17C之拮抗劑」及「IL-17C拮抗劑」係在本文中可交換使用且係指抑制IL-17C之活性或功能之任何分子。術語「IL-17C拮抗劑」包括(但不限於)特異性結合至IL-17C之抗體或抗體片段。較佳地，本發明中之IL-17C拮抗劑係對人類IL-17C具特異性之抗體。此抗體可為任何類型之抗體，諸如鼠科、大鼠、嵌合、人類化或人類抗體。 如本文使用之術語「抗體」係指包含藉由雙硫鍵相互連接之至少兩條重(H)鏈及輕(L)鏈之蛋白質，其與抗原相互作用。各重鏈係由重鏈可變區(本文縮寫為VH)及重鏈恆定區組成。重鏈恆定區係由三個域CH1、CH2及CH3組成。各輕鏈係由輕鏈可變區(本文縮寫為VL)及輕鏈恆定區組成。輕鏈恆定區係由一個域CL組成。VH及VL區可進一步細分為稱為互補決定區(CDR)之高變區，其間散佈稱為框架區(FR)之更保守區。各VH及VL係由自胺基端至羧基端以下列順序排列之三個CDR及四個FR組成：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3及FR4。重鏈及輕鏈之可變區含有與抗原相互作用之結合域。該等抗體之該等恆定區可介導免疫球蛋白結合至宿主組織或因子(包括免疫系統之各種細胞(例如，效應細胞)及經典互補系統之第一組分(Clq))。術語「抗體」包括(例如)單株抗體、人類抗體、人類化抗體、駱駝化抗體及嵌合抗體。該等抗體可為任何同型(例如，IgG、IgE、IgM、IgD、IgA及IgY)、類別(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1及IgA2)或子類之抗體。輕鏈及重鏈兩者均可分為結構及功能同源之區。 如本文使用之片語「抗體片段」係指抗體之保留與抗原特異性相互作用(例如，藉由結合、空間位阻、穩定空間分佈)之能力之一或更多個部分。結合片段之實例包括(但不限於)Fab片段，由VL、VH、CL及CH1域組成之單價片段；F(ab)2片段，包含於鉸鏈區處藉由雙硫鍵連接之兩個Fab片段之二價片段；由VH及CH1域組成之Fd片段；由抗體之單臂之VL及VH域組成之Fv片段；dAb片段(Ward等人，(1989) Nature 341:544-546)，其由VH域組成；及經分離互補決定區(CDR)。此外，儘管Fv片段之兩個域(VL及VH)經不同基因編碼，但其等可使用重組方法藉由合成連接子連接，該等合成連接子使得其等成為其中VL及VH區配對以形成單價分子(稱為單鏈Fv (scFv)之單一蛋白鏈；參見例如Bird等人，(1988) Science 242:423-426；及Huston等人，(1988) Proc. Natl. Acad. Sci. 85:5879-5883)。此等單鏈抗體亦意欲包含於術語「抗體片段」內。此等抗體片段係使用熟習此項技術者已知的習知技術獲得，及該等片段使用與篩選完整抗體相同之方式針對效用進行篩選。抗體片段亦可併成單域抗體、最大抗體、迷你抗體、細胞內抗體、雙功能抗體、三功能抗體、四功能抗體、v-NAR及雙scFv (參見，例如，Hollinger及Hudson, (2005) Nature Biotechnology 23:1126-1136)。抗體片段可基於多肽諸如纖連蛋白III型(Fn3)移植至支架內(參見美國專利案第6,703,199號，其描述纖連蛋白多肽單功能抗體)。抗體片段可併成包含一對串聯Fv段(VH-CH1-VH-CH1)之單鏈分子，該等Fv段連同互補輕鏈多肽一起形成一對抗原結合位點(Zapata等人，(1995) Protein Eng. 8:1057-1062；及美國專利案第5,641,870號)。 如本文使用之「人類抗體」或「人類抗體片段」包括具有其中框架區及CDR區兩者均衍生自人類起源之序列之可變區之抗體及抗體片段。此外，若該抗體含有恆定區，則該恆定區亦係衍生自此等序列。人類起源包括(例如)人類生殖細胞系序列或人類生殖細胞系序列之突變版本或含有衍生自人類框架序列分析之共通框架序列之抗體，例如，如描述於Knappik等人，(2000) J Mol Biol 296:57-86)中。 免疫球蛋白可變域(例如，CDR)之結構及位置可使用熟知的編號方案例如，Kabat編號方案、Chothia編號方案或Kabat及Chothia之組合來定義(參見，例如，Sequences of Proteins of Immunological Interest, U.S. Department of Health and Human Services (1991)編，Kabat等人；Lazikani等人，(1997) J. Mol. Bio. 273:927-948)；Kabat等人，(1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，NIH Publication no. 91-3242 U.S. Department of Health and Human Services；Chothia等人，(1987) J. Mol. Biol. 196:901-917；Chothia等人，(1989) Nature 342:877-883；及Al-Lazikani等人，(1997) J. Mol. Biol. 273:927-948。 本文將「人類化抗體」或「人類化抗體片段」定義為具有衍生自人類起源之序列之恆定抗體區且可變抗體區或其部分或僅CDR衍生自其他物種之抗體分子。例如，人類化抗體可經CDR移植，其中可變域之CDR係來自非人類起源，而可變域之一或更多個框架係具有人類起源及恆定域(若有)係具有人類起源。 本文將術語「嵌合抗體」或「嵌合抗體片段」定義為具有衍生自或對應於一個物種中發現之序列之恆定抗體區及衍生自其他物種之可變抗體區之抗體分子。較佳地，該等恆定抗體區係衍生自或對應於人類中發現之序列，及該等可變抗體區(例如，VH、VL、CDR或FR區)係衍生自非人類動物(例如，小鼠、大鼠、兔或倉鼠)中發現之序列。 術語「經分離」係指大體上不含其他具有不同抗原特異性之抗體或抗體片段之化合物，其可為(例如)抗體或抗體片段。此外，經分離抗體或抗體片段可大體上不含其他細胞材料及/或化學物質。因此，在一些態樣中，本文提供之抗體係經分離抗體，其等已與具有不同特異性之抗體分離。經分離抗體可為單株抗體。經分離抗體可為重組單株抗體。然而，特異性結合至目標之抗原決定基、同型或變體之經分離抗體可對其他相關抗原(例如，來自其他物種(例如，物種同源物))具有交叉反應性。 如本文使用之術語「重組抗體」包括藉由自然中不存在之方式製備、表現、產生或分離之所有抗體。例如，自經轉形可表現抗體之宿主細胞分離之抗體；自重組、組合人類抗體庫選擇及分離之抗體；及藉由涉及以下其他方法所製備、表現或分離的抗體：將人類免疫球蛋白基因、序列之所有或一部分序列剪接成其他DNA序列或分離自針對人類免疫球蛋白基因是轉基因或轉染色體之動物(例如，小鼠)的抗體或自該等動物製備之融合瘤分離之抗體。較佳地，此等重組抗體具有其中框架區及CDR區係衍生自人類生殖細胞系免疫球蛋白序列之可變區。在某些實施例中，然而，此等重組人類抗體可進行活體外誘變(或當使用針對人類Ig序列轉基因之動物時，活體內體細胞誘變)及因此該等重組抗體之VH及VL區之胺基酸序列為該序列：雖然衍生自人類生殖細胞系VH及VL序列及與之相關，但其在活體內非天然存在於人類抗體生殖細胞系庫。重組抗體可為單株抗體。在一個實施例中，本文揭示之抗體及抗體片段係分離自Ylanthia®
抗體庫，如揭示於US 13/321,564或US 13/299,367中，其等均以引用之方式併入本文中。 如本文使用之術語「單株抗體」係指單分子組合物之抗體分子之製劑。單株抗體組合物顯示具有針對特異性抗原決定基之唯一結合特異性及親和力之唯一結合位點。 如本文使用之術語「特異性結合至」、「對…具特異性」或「特異性識別」或類似語係指可量測及可複製相互作用，諸如目標與抗體或抗體片段間之結合，此可確定在分子(包括生物分子)之異質群體之存在下目標之存在。例如，特異性結合至目標(其可為抗原或抗原之抗原決定基)之抗體或抗體片段為相較於結合至其他目標以更大親和力、結合性、更容易及/或更大持續時間結合此目標之抗體或抗體片段。在某些實施例中，抗體或抗體片段特異性結合至蛋白質上之抗原決定基，其在來自不同物種之蛋白質之間係保守的。在另一個實施例中，特異性結合可包括但無需排他性結合。本文揭示之抗體或抗體片段特異性結合至人類IL-17C。較佳地，對人類IL-17C具特異性之本文揭示之抗體或抗體片段特異性結合至其他物種之IL-17C(諸如來自小鼠、大鼠、恆河猴及/或石蟹獼猴之IL-17C)。甚至更佳地，本文揭示之抗體或抗體片段係對人類IL-17C、石蟹獼猴IL-17C及小鼠IL-17C具特異性。用於判定兩個分子是否特異性結合之方法係此項技術中熟知且包括(例如)標準ELISA分析。該評分可藉由標準顯色(例如，二級抗體與辣根過氧化物酶及四甲基聯苯胺與過氧化氫)進行。在某些孔中之反應係藉由(例如)於450 nM下之光學密度來評分。典型背景(=陰性反應)可為0.1 OD；典型陽性反應可為1 OD。此意謂陽性/陰性差值可超過5倍。通常，結合特異性之判定係藉由使用非單一參照抗原，而為一組約三至五個無關抗原(諸如奶粉、BSA、轉鐵蛋白或類似物)進行。 術語「結合性」係用以描述蛋白質間之多個鍵相互作用之組合強度。結合性不同於親和力，親和力描述單一鍵之強度。因此，結合性為鍵親和力(功能性親和力)之經組合之協同強度而非鍵之總和。憑藉本發明之抗體，來自VH/VL對之兩個抗原結合位點與IL-17C同時相互作用。然而各單一結合相互作用可易於被破壞(取決於相對親和力)，因為許多結合相互作用係同時存在的，單一位點之瞬態未結合不容許分子擴散開，及該位點之結合很可能恢復。整體作用為抗原協同、牢固地結合至該抗體。 如本文使用，術語「親和力」係指多肽與其目標之單一位點之間之相互作用之強度。在各位點內，多肽之結合區通過與其目標之許多位點之弱非共價力進行相互作用；相互作用越多，親和力越強。 如本文使用之術語「KD
」係指解離常數，其係獲得自Kd
相對於Ka
(即，Kd
/Ka
)之比率及表示為莫耳濃度(M)。針對抗原結合部分(諸如，例如，單株抗體)之KD
值可使用此項技術中已建立之方法進行測定。用於測定抗原結合部分(諸如，例如，單株抗體)之KD
之方法為SET (可溶性平衡滴定)或表面電漿子共振，其使用諸如Biacore®系統之生物感測系統。在本發明中，對IL-17C具特異性之抗體通常具有小於5x10-2
M、小於10‑2
M、小於5x10-3
M、小於10-3
M、小於5x10-4
M、小於10-4
M、小於5x10-5
M、小於10-5
M、小於5x10-6
M、小於10-6
M、小於5x10-7
M、小於10-7
M、小於5x10-8
M、小於10-8
M、小於5x10-9
M、小於10-9
M、小於5x10-10
M、小於10-10
M、小於5x10-11
M、小於10-11
M、小於5x10‑ 12
M、小於10-12
M、小於5x10-13
M、小於10-13
M、小於5x10-14
M、小於10-14
M、小於5x10-15
M或小於10-15
M或更低之解離速率常數(KD
) (koff
/kon
)。 「交叉競爭」意謂在標準競爭結合分析中抗體、抗體片段或其他抗原結合部分干擾其他抗體、抗體片段或抗原結合部分結合至特異性抗原之能力。抗體、抗體片段或其他抗原結合部分可干擾另一抗體、抗體片段或抗原結合部分結合至特異性抗原之能力或程度(及因此是否可被認為係根據本發明之交叉競爭)可使用標準競爭結合分析進行判定。一個合適之分析涉及使用Biacore技術(例如，藉由使用BIAcore 3000儀器(Biacore, Uppsala, Sweden))，其可使用表面電漿子共振技術量測相互作用之程度。用於量測交叉競爭之另一分析使用基於ELISA之方法。針對「抗原決定基結合」抗體基於其等交叉競爭之高通量方法係描述於國際專利申請案第WO 2003/48731號中。若研究表中的抗體或抗體片段使表1中描述之抗體之一者對IL-17C之結合減少60%或以上，具體言之減少70%或以上及更特定言之減少80%或以上，及若表1中描述之抗體之一者使該抗體或抗體片段對IL-17C之結合減少60%或以上，具體言之減少70%或以上及更特定言之減少80%或以上，則存在交叉競爭。 術語「抗原決定基」包括經抗體或其片段或T細胞受體特異性識別或以其他方式與分子相互作用之任何蛋白質區。通常，抗原決定基具有分子之化學活性表面基團諸如胺基酸或醣或糖側鏈且通常可具有特定三維結構特徵及特定電荷特徵。如熟習此項技術者將知曉，實際上抗體可特異性結合之任何事物可為抗原決定基。 「結合與…相同之抗原決定基」意謂為比較抗體使用相同抗原決定基繪圖技術時，抗體、抗體片段或其他抗原結合部分結合至特異性抗原且係結合至如例示抗體相同之抗原決定基之能力。經例示之抗體及其他抗體之抗原決定基可使用抗原決定基繪圖技術進行判定。此項技術中熟知抗原決定基繪圖技術。例如，構形抗原決定基可藉由判定胺基酸之空間構形而簡單識別，諸如藉由(例如)氫/氘交換、X光結晶學及二維核磁共振。 本發明之組合物可用於治療或預防性應用。因此，本發明包括含有如本文揭示之抗體(或功能抗體片段)及用於其之醫藥上可接受之載劑或賦形劑之醫藥組合物。在相關態樣中，本發明提供用於治療炎性失調症之方法。此方法含有對有此需要之個體投與有效量之含有如本文描述或本文預期之抗體(或功能抗體片段)之醫藥組合物之步驟。 本發明提供包括對需要此治療之個體投與治療有效量之如本文揭示之IL-17C抗體之治療方法。如本文使用之「治療有效量」或「有效量」係指引起所需生物反應所需之IL-17C抗體之量。根據本發明，該治療有效量為治療及/或預防疾病所需之IL-17C抗體之量。 如本發明中使用之「個體」或「物種」係指任何哺乳動物，包括嚙齒動物(諸如小鼠或大鼠)及靈長類動物(諸如石蟹獼猴(食蟹猴)、恆河猴(恆河獼猴))或人類(智人)。較佳地，該個體為靈長類動物，最佳為人類。實施例：
在一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含： (a) 包含SEQ ID No.: 7之胺基酸序列之HCDR1區、包含SEQ ID No.: 8之胺基酸序列之HCDR2區、包含SEQ ID No.: 9之胺基酸序列之HCDR3區、包含SEQ ID No.: 13之胺基酸序列之LCDR1區、包含SEQ ID No.: 14之胺基酸序列之LCDR2區及包含SEQ ID No.: 15之胺基酸序列之LCDR3區，或 (b) 包含SEQ ID No.: 20之胺基酸序列之HCDR1區、包含SEQ ID No.: 21之胺基酸序列之HCDR2區、包含SEQ ID No.: 22之胺基酸序列之HCDR3區、包含SEQ ID No.: 26之胺基酸序列之LCDR1區、包含SEQ ID No.: 27之胺基酸序列之LCDR2區及包含SEQ ID No.: 28之胺基酸序列之LCDR3區。 在一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含： SEQ ID No.: 7之HCDR1區、SEQ ID No.: 8之HCDR2區、SEQ ID No.: 9之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 20之HCDR1區、SEQ ID No.: 21之HCDR2區、SEQ ID No.: 22之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區。 在另一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含： (a) 包含SEQ ID No.: 10之胺基酸序列之HCDR1區、包含SEQ ID No.: 11之胺基酸序列之HCDR2區、包含SEQ ID No.: 12之胺基酸序列之HCDR3區、包含SEQ ID No.: 13之胺基酸序列之LCDR1區、包含SEQ ID No.: 14之胺基酸序列之LCDR2區及包含SEQ ID No.: 15之胺基酸序列之LCDR3區，或 (b) 包含SEQ ID No.: 23之胺基酸序列之HCDR1區、包含SEQ ID No.: 24之胺基酸序列之HCDR2區、包含SEQ ID No.: 25之胺基酸序列之HCDR3區、包含SEQ ID No.: 26之胺基酸序列之LCDR1區、包含SEQ ID No.: 27之胺基酸序列之LCDR2區及包含SEQ ID No.: 28之胺基酸序列之LCDR3區。 在另一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含： SEQ ID No.: 10之HCDR1區、SEQ ID No.: 11之HCDR2區、SEQ ID No.: 12之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 23之HCDR1區、SEQ ID No.: 24之HCDR2區、SEQ ID No.: 25之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區。 在一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含： (a) 包含SEQ ID No.: 7之胺基酸序列之HCDR1區、包含SEQ ID No.: 8之胺基酸序列之HCDR2區、包含SEQ ID No.: 9之胺基酸序列之HCDR3區、包含SEQ ID No.: 13之胺基酸序列之LCDR1區、包含SEQ ID No.: 14之胺基酸序列之LCDR2區及包含SEQ ID No.: 15之胺基酸序列之LCDR3區，或 (b) 包含SEQ ID No.: 10之胺基酸序列之HCDR1區、包含SEQ ID No.: 11之胺基酸序列之HCDR2區、包含SEQ ID No.: 12之胺基酸序列之HCDR3區、包含SEQ ID No.: 13之胺基酸序列之LCDR1區、包含SEQ ID No.: 14之胺基酸序列之LCDR2區及包含SEQ ID No.: 15之胺基酸序列之LCDR3區，或 (c) 包含SEQ ID No.: 20之胺基酸序列之HCDR1區、包含SEQ ID No.: 21之胺基酸序列之HCDR2區、包含SEQ ID No.: 22之胺基酸序列之HCDR3區、包含SEQ ID No.: 26之胺基酸序列之LCDR1區、包含SEQ ID No.: 27之胺基酸序列之LCDR2區及包含SEQ ID No.: 28之胺基酸序列之LCDR3區。 (d) 包含SEQ ID No.: 23之胺基酸序列之HCDR1區、包含SEQ ID No.: 24之胺基酸序列之HCDR2區、包含SEQ ID No.: 25之胺基酸序列之HCDR3區、包含SEQ ID No.: 26之胺基酸序列之LCDR1區、包含SEQ ID No.: 27之胺基酸序列之LCDR2區及包含SEQ ID No.: 28之胺基酸序列之LCDR3區。 在一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含： SEQ ID No.: 7之HCDR1區、SEQ ID No.: 8之HCDR2區、SEQ ID No.: 9之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 10之HCDR1區、SEQ ID No.: 11之HCDR2區、SEQ ID No.: 12之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 20之HCDR1區、SEQ ID No.: 21之HCDR2區、SEQ ID No.: 22之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 23之HCDR1區、SEQ ID No.: 24之HCDR2區、SEQ ID No.: 25之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區。 在本發明之另一個實施例中，該抗體或抗體片段特異性結合至人類IL-17C。 在本發明之另一個實施例中，該抗體或抗體片段係單株抗體或抗體片段。 在本發明之另一個實施例中，該抗體或抗體片段係人類、人類化或嵌合抗體或抗體片段。在本發明之另一個實施例中，該抗體或抗體片段係具有IgG同型。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段係IgG1。 在一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含： SEQ ID No.: 7之HCDR1區、SEQ ID No.: 8之HCDR2區、SEQ ID No.: 9之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，及進一步包含SEQ ID No.: 17之重鏈或SEQ ID No.: 16之輕鏈，或 SEQ ID No.: 10之HCDR1區、SEQ ID No.: 11之HCDR2區、SEQ ID No.: 12之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區及進一步包含SEQ ID No.: 17之重鏈或SEQ ID No.: 16之輕鏈，或 SEQ ID No.: 20之HCDR1區、SEQ ID No.: 21之HCDR2區、SEQ ID No.: 22之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區及進一步包含SEQ ID No.: 30之重鏈或SEQ ID No.: 29之輕鏈，或 SEQ ID No.: 23之HCDR1區、SEQ ID No.: 24之HCDR2區、SEQ ID No.: 25之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區，及進一步包含SEQ ID No.: 30之重鏈或SEQ ID No.: 29之輕鏈。 在一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 17之重鏈及SEQ ID No.: 16之輕鏈。 在一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 30之重鏈及SEQ ID No.: 29之輕鏈。 在另一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 43之重鏈及SEQ ID No.: 42之輕鏈。 在一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 56之重鏈及SEQ ID No.: 55之輕鏈。 在本發明之另一個實施例中，該抗體或抗體片段係經分離抗體或抗體片段。 在本發明之另一個實施例中，該抗體或抗體片段係重組抗體或抗體片段。 在一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其用於治療與IL-17C之非所需存在相關聯之失調症或病症。 在一個實施例中，本發明係指核酸組合物，其包含編碼對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段之核酸序列或複數個核酸序列，其中該抗體或抗體片段包含： SEQ ID No.: 7之HCDR1區、SEQ ID No.: 8之HCDR2區、SEQ ID No.: 9之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 10之HCDR1區、SEQ ID No.: 11之HCDR2區、SEQ ID No.: 12之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 20之HCDR1區、SEQ ID No.: 21之HCDR2區、SEQ ID No.: 22之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 23之HCDR1區、SEQ ID No.: 24之HCDR2區、SEQ ID No.: 25之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區。 在另一個實施例中，本發明係指載體組合物，其包含編碼如表1中揭示之抗體或抗體片段之核酸序列或複數個核酸序列之載體或複數個載體。 在一個實施例中，本發明係指包含載體組合物之細胞，該載體組合物包含包括編碼如表1中揭示之抗體或抗體片段之核酸序列或複數個核酸序列之載體或複數個載體。 在另一個實施例中，本發明係指醫藥組合物，其包含如表1中揭示之抗體或抗體片段及醫藥上可接受之載劑或賦形劑。 在一個實施例中，對IL-17C具特異性之該抗體或抗體片段阻斷IL-17C結合至IL-17C之受體。在另一個實施例中，對IL-17C具特異性之該抗體或抗體片段阻斷IL-17C結合至IL-17C之受體，其中該受體為IL17RE。在另一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段阻斷IL-17C結合至IL17RE。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 7之HCDR1區、SEQ ID No.: 8之HCDR2區、SEQ ID No.: 9之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 10之HCDR1區、SEQ ID No.: 11之HCDR2區、SEQ ID No.: 12之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 20之HCDR1區、SEQ ID No.: 21之HCDR2區、SEQ ID No.: 22之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 23之HCDR1區、SEQ ID No.: 24之HCDR2區、SEQ ID No.: 25之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區。 在另一個實施例中，該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 17之重鏈及SEQ ID No.: 16之輕鏈或SEQ ID No.: 30之重鏈及SEQ ID No.: 29之輕鏈或與SEQ ID No.: 17或30之重鏈及SEQ ID No.: 16或29之輕鏈具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%一致性之重鏈及輕鏈。 在另一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段係以二價性地結合至IL-17C同源二聚體及形成由該抗體或抗體片段及一個IL-17C同源二聚體組成之複合物且其中該抗體或抗體片段阻斷IL-17C結合至IL17RE。 在某些實施例中，對IL-17C具特異性之該抗體或抗體片段阻斷IL-17C結合至IL-17C之一或更多個受體。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 7之HCDR1區、SEQ ID No.: 8之HCDR2區、SEQ ID No.: 9之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 10之HCDR1區、SEQ ID No.: 11之HCDR2區、SEQ ID No.: 12之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 20之HCDR1區、SEQ ID No.: 21之HCDR2區、SEQ ID No.: 22之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 23之HCDR1區、SEQ ID No.: 24之HCDR2區、SEQ ID No.: 25之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區。 在另一個實施例中，該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 17之重鏈及SEQ ID No.: 16之輕鏈或SEQ ID No.: 30之重鏈及SEQ ID No.: 29之輕鏈或與SEQ ID No.: 17或30之重鏈及SEQ ID No.: 16或29之輕鏈具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%一致性之重鏈及輕鏈。 在替代實施例中，對IL-17C之受體具特異性之該抗體或抗體片段阻斷IL-17C結合至IL-17C之受體，其中IL-17C之該受體包括IL17RE及IL17RA。在替代實施例中，對IL-17C之受體具特異性之該抗體或抗體片段阻斷IL-17C結合至IL17RE及IL17RA。在某些實施例中，對IL-17C具特異性之該抗體或抗體片段以小於100nM、90nM、80nM、70nM、60nM、50nM、40nM、30nM、20nM、10nM、9nM、8nM、7nM、6nM、5nM、4nM、3nM、2nM、1nM、100pM、90pM、80pM、70pM、60pM、50pM、40pM、30pM、20pM、10pM、9pM、8pM、7pM、6pM、5pM、4pM、3pM、2pM或1pM之IC50
濃度阻斷IL-17C結合至IL17RE。在某些態樣中，該IC50
濃度可藉由ELISA、SET、FACS或MSD (Meso Scale Discovery)測定。在另一個態樣中，該IC50
濃度可藉由如本文於實例3中描述之方法測定。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 17之重鏈及SEQ ID No.: 16之輕鏈或SEQ ID No.: 30之重鏈及SEQ ID No.: 29之輕鏈或與SEQ ID No.: 17或30之重鏈及SEQ ID No.: 16或29之輕鏈具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%一致性之重鏈及輕鏈。 在一個實施例中，本文揭示之抗體或抗體片段對人類IL-17C具特異性。在另一個實施例中，對IL-17C具特異性之本文揭示之抗體或抗體片段係與其他物種之IL-17C(諸如來自小鼠、大鼠、恆河猴及/或石蟹獼猴之IL-17C)交叉反應。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段對人類IL-17C、石蟹獼猴IL-17C及小鼠IL-17C具特異性。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段對人類IL-17C、石蟹獼猴IL-17C及小鼠IL-17C具特異性。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段對人類IL-17C、石蟹獼猴IL-17C及小鼠IL-17C具特異性，其中該抗體或抗體片段包含： SEQ ID No.: 7之HCDR1區、SEQ ID No.: 8之HCDR2區、SEQ ID No.: 9之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 10之HCDR1區、SEQ ID No.: 11之HCDR2區、SEQ ID No.: 12之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 20之HCDR1區、SEQ ID No.: 21之HCDR2區、SEQ ID No.: 22之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 23之HCDR1區、SEQ ID No.: 24之HCDR2區、SEQ ID No.: 25之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 17之重鏈及SEQ ID No.: 16之輕鏈或SEQ ID No.: 30之重鏈及SEQ ID No.: 29之輕鏈或與SEQ ID No.: 17或30之重鏈及SEQ ID No.: 16或29之輕鏈具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%一致性之重鏈及輕鏈。 在又另一個實施例中，本文揭示之抗體或抗體片段特異性結合至人類IL-17C、石蟹獼猴IL-17C及小鼠IL-17C且以小於100nM、90nM、80nM、70nM、60nM、50nM、40nM、30nM、20nM、10nM、9nM、8nM、7nM、6nM、5nM、4nM、3nM、2nM、1nM、100pM、90pM、80pM、70pM、60pM、50pM、40pM、30pM、20pM、10pM、9pM、8pM、7pM、6pM、5pM、4pM、3pM、2pM或1pM之IC50
濃度阻斷人類IL-17C、石蟹獼猴IL-17C及小鼠IL-17C結合至其特異性受體IL17RE。在另一個態樣中，該抗體係呈IgG1形式。在另一個實施例中，該IC50
濃度係在如本文於實例3中描述之受體抑制分析中進行測定。 在又另一個實施例中，本文揭示之抗體或抗體片段特異性結合至人類IL-17C並以小於100nM、90nM、80nM、70nM、60nM、50nM、40nM、30nM、20nM、10nM、9nM、8nM、7nM、6nM、5nM、4nM、3nM、2nM、1nM、100pM、90pM、80pM、70pM、60pM、50pM、40pM、30pM、20pM、10pM、9pM、8pM、7pM、6pM、5pM、4pM、3pM、2pM或1pM之IC50
濃度阻斷人類IL-17C結合至人類IL17RE。在另一個態樣中，該抗體係呈IgG1形式。在其他實施例中，該IC50
濃度係在如本文於實例3中描述之受體抑制分析中進行測定。 在又另一個實施例中，本文揭示之抗體或抗體片段特異性結合至石蟹獼猴IL-17C且以小於100nM、90nM、80nM、70nM、60nM、50nM、40nM、30nM、20nM、10nM、9nM、8nM、7nM、6nM、5nM、4nM、3nM、2nM、1nM、100pM、90pM、80pM、70pM、60pM、50pM、40pM、30pM、20pM、10pM、9pM、8pM、7pM、6pM、5pM、4pM、3pM、2pM或1pM之IC50
濃度阻斷石蟹獼猴IL-17C結合至石蟹獼猴IL17RE。在另一個態樣中，該抗體係呈IgG1形式。在其他實施例中，該IC50
濃度係在如本文於實例3中描述之受體抑制分析中進行測定。 在又另一個實施例中，本文揭示之抗體或抗體片段特異性結合至人類IL-17C、石蟹獼猴IL-17C及小鼠IL-17C，且各自分別以小於100nM、90nM、80nM、70nM、60nM、50nM、40nM、30nM、20nM、10nM、9nM、8nM、7nM、6nM、5nM、4nM、3nM、2nM、1nM、100pM、90pM、80pM、70pM、60pM、50pM、40pM、30pM、20pM、10pM、9pM、8pM、7pM、6pM、5pM、4pM、3pM、2pM或1pM之IC50
濃度阻斷人類IL-17C、石蟹獼猴IL-17C及小鼠IL-17C結合至人類IL17RE、石蟹獼猴IL17RE及小鼠IL17RE。在一個較佳實施例中，該抗體或抗體片段包含： SEQ ID No.: 7之HCDR1區、SEQ ID No.: 8之HCDR2區、SEQ ID No.: 9之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 10之HCDR1區、SEQ ID No.: 11之HCDR2區、SEQ ID No.: 12之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 20之HCDR1區、SEQ ID No.: 21之HCDR2區、SEQ ID No.: 22之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 23之HCDR1區、SEQ ID No.: 24之HCDR2區、SEQ ID No.: 25之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 17之重鏈及SEQ ID No.: 16之輕鏈或SEQ ID No.: 30之重鏈及SEQ ID No.: 29之輕鏈或與SEQ ID No.: 17或30之重鏈及SEQ ID No.: 16或29之輕鏈具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%一致性之重鏈及輕鏈。在另一個態樣中，該抗體係呈IgG1形式。在其他實施例中，該IC50
濃度係在如本文於實例3中描述之受體抑制分析中進行測定。 在又另一個實施例中，本文揭示之抗體或抗體片段以小於100pM、90pM、80pM、70pM、60pM、50pM、40pM、30pM、20pM、10pM、9pM、8pM、7pM、6pM、5pM、4pM、3pM、2pM或1pM之IC50
濃度抑制NIH3T3細胞中人類IL-17C、石蟹獼猴IL-17C及小鼠IL-17C驅動之NF-κB報導子基因活化。在一個較佳實施例中，該抗體或抗體片段包含： SEQ ID No.: 7之HCDR1區、SEQ ID No.: 8之HCDR2區、SEQ ID No.: 9之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 10之HCDR1區、SEQ ID No.: 11之HCDR2區、SEQ ID No.: 12之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 20之HCDR1區、SEQ ID No.: 21之HCDR2區、SEQ ID No.: 22之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 23之HCDR1區、SEQ ID No.: 24之HCDR2區、SEQ ID No.: 25之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 17之重鏈及SEQ ID No.: 16之輕鏈或SEQ ID No.: 30之重鏈及SEQ ID No.: 29之輕鏈或與SEQ ID No.: 17或30之重鏈及SEQ ID No.: 16或29之輕鏈具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%一致性之重鏈及輕鏈。在另一個態樣中，該抗體係呈IgG1形式。在其他實施例中，該IC50
濃度係在如本文於實例4中描述之IL-17C驅動之NF-κB報導子基因分析中進行測定。 在一個實施例中，本文揭示之抗體或抗體片段對由SEQ ID No.: 1之胺基酸序列編碼之人類IL-17C具特異性。在一個實施例中，本文揭示之抗體或抗體片段對包含SEQ ID No.: 1之胺基酸序列之多肽具特異性。在另一個實施例中，該單株抗體或抗體片段係對由SEQ ID No.: 1之胺基酸序列組成之多肽具特異性之單株抗體。在另一個實施例中，本文揭示之抗體或抗體片段對由SEQ ID No.: 1之胺基酸序列編碼之人類IL-17C具特異性且為單株抗體或抗體片段。 在一個實施例中，對IL-17C具特異性之本文揭示之抗體或抗體片段為單株抗體或抗體片段。 在一個實施例中，對IL-17C具特異性之本文揭示之抗體或抗體片段係人類、人類化或嵌合抗體。在某些實施例中，對IL-17C具特異性之該抗體或抗體片段係經分離抗體或抗體片段。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段係重組抗體或抗體片段。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段係重組人類抗體或抗體片段。在另一個實施例中，該重組人類抗體或抗體片段係經分離重組人類抗體或抗體片段。在另一個實施例中，該重組人類抗體或抗體片段或經分離重組人類抗體或抗體片段係單株的。 在另一個實施例中，本文揭示之抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 17之重鏈及SEQ ID No.: 16之輕鏈或SEQ ID No.: 30之重鏈及SEQ ID No.: 29之輕鏈或與SEQ ID No.: 17或30之重鏈及SEQ ID No.: 16或29之輕鏈具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%一致性之重鏈及輕鏈。 在一個實施例中，本文揭示之抗體或抗體片段包含人類重鏈恆定區及人類輕鏈恆定區。在另一個實施例中，該人類重鏈恆定區包含SEQ ID No.: 17之胺基酸序列及人類輕鏈恆定區包含SEQ ID No.: 16之胺基酸序列或該人類重鏈恆定區包含SEQ ID No.: 30之胺基酸序列及人類輕鏈恆定區包含SEQ ID No.: 29之胺基酸序列。 在一個實施例中，本文揭示之抗體或抗體片段係具有IgG同型。在另一個實施例中，該抗體為IgG1。 在一個實施例中，該抗體片段為二價抗體片段。 在另一個實施例中，本發明係指與表1中描述之抗體交叉競爭之抗體或抗體片段。在一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段與表1中之抗體之一者之包含藉由Kabat定義之6個CDR之抗體或抗體片段交叉競爭。在另一個實施例中，本發明係指對人類IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段係以二價性地結合至IL-17C同源二聚體及形成由該抗體或抗體片段及一個IL-17C同源二聚體組成之複合物且其中該抗體或抗體片段與表1中之抗體之一者之包含藉由Kabat定義之6個CDR之抗體或抗體片段交叉競爭。 在另一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段與包含6個CDR之抗體或抗體片段交叉競爭，其中HCDR1係SEQ ID No.: 7之胺基酸序列，HCDR2係SEQ ID No.: 8之胺基酸序列，HCDR3係SEQ ID No.: 9之胺基酸序列，LCDR1係SEQ ID No.: 13之胺基酸序列，LCDR2係SEQ ID No.: 14之胺基酸序列及LCDR3係SEQ ID No.: 15之胺基酸序列。在另一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段與包含根據SEQ ID No.: 17之VH及根據SEQ ID No.: 16之VL之抗體或抗體片段交叉競爭。 在另一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段與包含6個CDR之抗體或抗體片段交叉競爭，其中HCDR1係SEQ ID No.: 20之胺基酸序列，HCDR2係SEQ ID No.: 21之胺基酸序列，HCDR3係SEQ ID No.: 22之胺基酸序列，LCDR1係SEQ ID No.: 26之胺基酸序列，LCDR2係SEQ ID No.: 27之胺基酸序列及LCDR3係SEQ ID No.: 28之胺基酸序列。在另一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段與包含根據SEQ ID No.: 30之VH及根據SEQ ID No.: 29之VL之抗體或抗體片段交叉競爭。 在另一個實施例中，本發明係指與表1中描述之抗體交叉競爭之抗體或抗體片段。在一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段與表1中之抗體之一者之包含藉由Chothia定義之6個CDR之抗體或抗體片段交叉競爭。在另一個實施例中，本發明係指對人類IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段係以二價性地結合至IL-17C同源二聚體及形成由該抗體或抗體片段及一個IL-17C同源二聚體組成之複合物且其中該抗體或抗體片段與表1中之抗體之一者之包含藉由Chothia定義之6個CDR之抗體或抗體片段交叉競爭。 在另一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段與包含6個CDR之抗體或抗體片段交叉競爭，其中HCDR1係SEQ ID No.: 10之胺基酸序列，HCDR2係SEQ ID No.: 11之胺基酸序列，HCDR3係SEQ ID No.: 12之胺基酸序列，LCDR1係SEQ ID No.: 13之胺基酸序列，LCDR2係SEQ ID No.: 14之胺基酸序列及LCDR3係SEQ ID No.: 15之胺基酸序列。在另一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段與包含根據SEQ ID No.: 17之VH及根據SEQ ID No.: 18之VL之抗體或抗體片段交叉競爭。 在另一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段與包含6個CDR之抗體或抗體片段交叉競爭，其中HCDR1係SEQ ID No.: 23之胺基酸序列，HCDR2係SEQ ID No.: 24之胺基酸序列，HCDR3係SEQ ID No.: 25之胺基酸序列，LCDR1係SEQ ID No.: 26之胺基酸序列，LCDR2係SEQ ID No.: 27之胺基酸序列及LCDR3係SEQ ID No.: 28之胺基酸序列。在另一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段與包含根據SEQ ID No.: 30之VH及根據SEQ ID No.: 29之VL之抗體或抗體片段交叉競爭。 在某個實施例中，本發明係指與表1中描述之抗體交叉競爭並在基於ELISA之交叉競爭分析中使表1中描述之抗體之一者之特異性結合減少至少70%、80%或90%之抗體或抗體片段。在某個實施例中，本發明係指與表1中描述之抗體交叉競爭並在基於ELISA之交叉競爭分析中使表1中描述之抗體之一者對IL-17C之特異性結合減少至少70%、80%或90%之單株抗體或抗體片段。本發明於實例6中闡述典型分析建立。 在另一個實施例中，本發明係指結合(例如，藉由結合、穩定、空間分佈)至與表1中之抗體之一者相同之抗原決定基之抗體或抗體片段。在另一個實施例中，該抗體或抗體片段結合(例如，藉由結合、穩定、空間分佈)至與表1中之抗體之一者之包含藉由Kabat定義之6個CDR之抗體或抗體片段相同之抗原決定基。在又另一個實施例中，該抗體或抗體片段結合(例如，藉由結合、穩定、空間分佈)至與表1中之抗體之一者之包含藉由Kabat定義之6個CDR之抗體或抗體片段相同之IL-17C之抗原決定基。在又另一個實施例中，該抗體或抗體片段結合(例如，藉由結合、穩定、空間分佈)至與表1中之抗體之一者之包含藉由Kabat定義之6個CDR之抗體或抗體片段相同之包含SEQ ID No.: 1之胺基酸序列之多肽之抗原決定基。 在另一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合至與包含6個CDR之抗體或抗體片段相同之抗原決定基，其中HCDR1係SEQ ID No.: 10之胺基酸序列，HCDR2係SEQ ID No.: 11之胺基酸序列，HCDR3係SEQ ID No.: 12之胺基酸序列，LCDR1係SEQ ID No.: 13之胺基酸序列，LCDR2係SEQ ID No.: 14之胺基酸序列及LCDR3係SEQ ID No.: 15之胺基酸序列。在另一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合至與包含根據SEQ ID No.: 17之VH及根據SEQ ID No.: 18之VL之抗體或抗體片段相同之抗原決定基。 在另一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合至與包含6個CDR之抗體或抗體片段相同之抗原決定基，其中HCDR1係SEQ ID No.: 23之胺基酸序列，HCDR2係SEQ ID No.: 24之胺基酸序列，HCDR3係SEQ ID No.: 25之胺基酸序列，LCDR1係SEQ ID No.: 26之胺基酸序列，LCDR2係SEQ ID No.: 27之胺基酸序列及LCDR3係SEQ ID No.: 28之胺基酸序列。在另一個實施例中，本發明係指抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合至與包含根據SEQ ID No.: 30之VH及根據SEQ ID No.: 29之VL之抗體或抗體片段相同之抗原決定基。 給定多肽(包括抗原決定基)之區可使用任何數量之此項技術中熟知的抗原決定基繪圖技術識別。參見例如Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology，第66卷(Glenn E.Morris編，1996) Humana Press, Totowa, New Jersey。例如，抗原決定基可藉由(例如)於固體載體上同時合成大量肽(對應於蛋白分子之部分之肽)並使該等肽與抗體反應而該等肽仍結合至該等載體進行判定。此等技術係此項技術中已知且描述(例如)於美國專利案第4,708,871號；Geysen等人，(1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 8:3998-4002；Geysen等人，(1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82:78-182；Geysen等人，(1986) Mol. Immunol. 23:709-715中。同樣地，抗原決定基可藉由判定胺基酸空間構形簡單識別，諸如藉由(例如)氫/氘交換、X光結晶學及二維核磁共振。參見例如Epitope Mapping Protocols，同上。蛋白質之抗原區亦可藉由使用標準抗原性及親水性圖識別，諸如彼等使用(例如)可購買自Oxford Molecular Group之Omiga 1.0版軟體程式)計算者。此電腦程式採用Hopp/Woods方法，Hopp等人，(1981) Proc. Natl. Acad. Sci USA 78:3824-3828；用於測定抗原性曲線，及Kyte-Doolittle技術，Kyte等人，(1982) J.Mol. Biol. 157:105-132；用於親水性圖。 在一個實施例中，本發明係指表1中之抗體之任何一者之包含藉由Kabat定義之6個CDR之抗體或抗體片段。在另一態樣中，本發明涉及表1中之抗體之各者之包含藉由Kabat定義之6個CDR之經分離單株抗體或其片段。 在另一個實施例中，本發明係指表1中之抗體之任何一者之包含藉由Chotia定義之6個CDR之抗體或抗體片段。在另一態樣中，本發明涉及表1中之抗體之各者之包含藉由Chotia定義之6個CDR之經分離單株抗體或其片段。 在某些實施例中，本發明係指表1中揭示之抗體或抗體片段，其中該等抗體或抗體片段可以約小於100 nM、更佳小於約60 nM及仍更佳小於約30 nM之親和力結合至IL-17C。又更佳為以小於約10 nM、及更佳小於約3 nM之親和力結合至IL-17C之抗體或抗體片段。 在某些實施例中，本發明係指表1中揭示之抗體或抗體片段，其中該等抗體或抗體片段可以約小於100 nM、更佳小於約60 nM及又更佳小於約30 nM之單價親和力結合至IL-17C。又更佳為以小於約10 nM及更佳小於約3 nM之單價親和力結合至IL-17C之抗體或抗體片段。 在另一個實施例中，本發明係指對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該等抗體或抗體片段對IL-17C具有小於5x10-2
M、小於10-2
M、小於5x10-3
M、小於10-3
M、小於5x10-4
M、小於10-4
M、小於5x10-5
M、小於10-5
M、小於5x10-6
M、小於10-6
M、小於5x10-7
M、小於10-7
M、小於5x10-8
M、小於10-8
M、小於5x10-9
M、小於10-9
M、小於5x10‑ 10
M、小於10-10
M、小於5x10-11
M、小於10-11
M、小於5x10-12
M、小於10-12
M、小於5x10-13
M、小於10-13
M、小於5x10-14
M、小於10-14
M、小於5x10-15
M或小於10-15
M之解離速率常數(KD
)之單價親和力及其中呈二價形式之該等抗體或抗體片段對IL-17C具有相較於單價形式之解離速率常數(KD)低至少2倍、5倍、10倍、100倍、1000倍、10000倍、100000倍之解離速率常數(KD
)之親和力。在另一個實施例中，該等抗體或抗體片段之二價親和力係以IgG形式測定，其中該等抗體或抗體片段之單價親和力係以Fab形式測定。 本發明之組合物較佳為包含如本文揭示之對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段及醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物，其等用於治療炎性失調症或癌症。此項技術中熟知此等載劑、稀釋劑及賦形劑，及熟練技工將發現最適用於以本發明之IL-17C抗體或抗體片段治療個體之調配物及投與途徑。 在另一個實施例中，本發明係指包含如本文揭示之對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段之醫藥組合物，其用於治療與IL-17C之非所需存在相關聯之失調症或病症。在另一個實施例中，與IL-17C之非所需存在相關聯之該病症為炎性失調症或癌症。在另一個實施例中，該炎性失調症為類風濕性關節炎、牛皮癬、肺炎、COPD及/或異位性皮膚炎(AD)，包括中度至重度AD。在一個較佳實施例中，該炎性失調症為異位性皮膚炎(AD)及/或中度至重度AD。 在另一個實施例中，本發明係指包含如本文揭示之對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段之該等醫藥組合物在製備用於治療與IL-17C之非所需存在相關聯之失調症或病症之藥劑中之用途。在另一個實施例中，與IL-17C之非所需存在相關聯之該病症為炎性失調症或癌症。在另一個實施例中，該炎性失調症為類風濕性關節炎、牛皮癬、肺炎、COPD及/或異位性皮膚炎(AD)，包括中度至重度AD。在一個較佳實施例中，該炎性失調症為異位性皮膚炎(AD)及/或中度至重度AD。 在另一個實施例中，本發明係指該醫藥組合物於治療與IL-17C之非所需存在相關聯之失調症或病症之用途。在另一個實施例中，與IL-17C之非所需存在相關聯之該病症為炎性失調症或癌症。在另一個實施例中，該炎性失調症為類風濕性關節炎、牛皮癬、肺炎、COPD及/或異位性皮膚炎(AD)，包括中度至重度AD。在一個較佳實施例中，該炎性失調症為異位性皮膚炎(AD)及/或中度至重度AD。 在另一態樣中，本文提供治療個體之異位性皮膚炎(AD)及/或中度至重度異位性皮膚炎(AD)之方法，該方法包括投與包含治療有效量之本發明之IL-17C抗體或抗體片段之醫藥組合物。在一個實施例中，該個體對藉由局部皮質類固醇(TCS)或鈣依賴磷酸酶(calcineurin)抑制劑之治療耐受、無反應或不適當反應。在另一個實施例中，該個體為有此需要之個體。在一個較佳實施例中，該個體為人類。在替代態樣中，該個體為嚙齒動物，諸如大鼠或小鼠。 在另一個實施例中，本發明係指用於預防個體之炎性失調症之方法，該方法包括對該個體投與IL-17C拮抗劑。如本文中使用之「預防」係指目標在於預防疾病之發病或延遲疾病之發病之方法。在一些實施例中，該個體為人類。在替代態樣中，該個體為嚙齒動物，諸如大鼠或小鼠。 在一些實施例中，對本發明之IL-17C具特異性之抗體或抗體片段係經皮下投與。在其他態樣中，對本發明之IL-17C具特異性之抗體或抗體片段係經靜脈內、關節內或脊髓內投與。 在一個實施例中，本發明涉及經分離單株抗體或其片段，其包含表1中之抗體之任何一者之VH及VL。 在另一個實施例中，本發明涉及經分離單株抗體或其片段，其包含表1中之抗體之任何一者之重鏈(IgG1)及輕鏈。 在另一個實施例中，本發明係指編碼結合至IL-17C之抗體之重鏈序列及/或輕鏈序列之經分離核酸，該核酸包含： SEQ ID No.: 58之HCDR1區、SEQ ID No.: 59之HCDR2區、SEQ ID No.: 60之HCDR3區、SEQ ID No.: 64之LCDR1區、SEQ ID No.: 65之LCDR2區及SEQ ID No.: 66之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 61之HCDR1區、SEQ ID No.: 62之HCDR2區、SEQ ID No.: 63之HCDR3區、SEQ ID No.: 64之LCDR1區、SEQ ID No.: 65之LCDR2區及SEQ ID No.: 66之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 33之HCDR1區、SEQ ID No.: 34之HCDR2區、SEQ ID No.: 35之HCDR3區、SEQ ID No.: 39之LCDR1區、SEQ ID No.: 40之LCDR2區及SEQ ID No.: 41之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 36之HCDR1區、SEQ ID No.: 37之HCDR2區、SEQ ID No.: 38之HCDR3區、SEQ ID No.: 39之LCDR1區、SEQ ID No.: 40之LCDR2區及SEQ ID No.: 41之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 46之HCDR1區、SEQ ID No.: 47之HCDR2區、SEQ ID No.: 48之HCDR3區、SEQ ID No.: 52之LCDR1區、SEQ ID No.: 53之LCDR2區及SEQ ID No.: 54之LCDR3區，或 SEQ ID No.: 49之HCDR1區、SEQ ID No.: 50之HCDR2區、SEQ ID No.: 51之HCDR3區、SEQ ID No.: 52之LCDR1區、SEQ ID No.: 53之LCDR2區及SEQ ID No.: 54之LCDR3區。 在另一個實施例中，本發明係指編碼經分離單株抗體或其片段之核酸，其中該核酸包含SEQ ID No.: 19之VH區及SEQ ID No.: 18之VL區，或與SEQ ID No.: 19之VH區及/或SEQ ID No.: 18之VL區具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%一致性之VH區及VL區。 在另一個實施例中，本發明係指編碼經分離單株抗體或其片段之核酸，其中該核酸包含SEQ ID No.: 68之VH區及SEQ ID No.: 67之VL區，或與SEQ ID No.: 68之VH區及/或SEQ ID No.: 67之VL區具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%一致性之VH區及VL區。 在另一個實施例中，本發明係指編碼經分離單株抗體或其片段之核酸，其中該核酸包含SEQ ID No.: 32之VH區及SEQ ID No.: 31之VL區，或與SEQ ID No.: 32之VH區及/或SEQ ID No.: 31之VL區具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%一致性之VH區及VL區。 在另一個實施例中，本發明係指編碼經分離單株抗體或其片段之核酸，其中該核酸包含SEQ ID No.: 45之重鏈(IgG1)及SEQ ID No.: 44之輕鏈。 在另一個實施例中，本發明係指編碼經分離單株抗體或其片段之核酸，其中該核酸包含SEQ ID No.: 70之重鏈(IgG1)及SEQ ID No.: 69之輕鏈。 在另一個實施例中，本發明係指編碼經分離單株抗體或其片段之核酸，其中該核酸包含SEQ ID No.: 71之重鏈(IgG1)及SEQ ID No.: 57之輕鏈。 在另一個實施例中，本發明係指編碼經分離單株抗體或其片段之核酸，其中該核酸包含表1中之抗體之任何一者之VH及VL。 在另一個實施例中，本發明係指編碼經分離單株抗體或其片段之核酸，其中該核酸包含表1中之抗體之任何一者之重鏈(IgG1)及輕鏈。 在另一個實施例中，本發明係指產生表1中之抗體之任何一者之經分離單株抗體或其片段之方法。 表1：抗體序列
工作實例 縮寫之列表 實例 1 ： 抗原、 Fab 片段及抗體之產生
1.1抗原產生及品質控制 比對來自人類、石蟹獼猴及小鼠之IL-17C之胺基酸序列。 在無前導序列之情況下，在所有三個物種間共用79%之同源性。
來自不同物種之IL-17C係購買自不同供應商或內部生產及視需要溶解。每100 µg蛋白質添加ECLTM
生物素化模組之4 µl生物素化試劑及在室溫下在黑暗中以輕輕攪拌培養60 min。接著，生物素化蛋白質係使用ZebaTM脫鹽離心管柱純化及OD280nm係經測定。 抗原係藉由使用ECLTM
生物素化模組(GE Healthcare; #1061918)生物素化。在生物素化後，該產物係使用ZebaTM脫鹽離心管柱(Pierce; #89889)純化。 生物素化及非生物素化小鼠、石蟹獼猴及人類IL-17C係經品質控制，該品質控制包括在變性、還原及變性、非還原條件下於SDS-PAGE中及於天然狀態下藉由高壓尺寸排阻層析術(HP-SEC)及動態光散射(DLS)進行分析。 HP-SEC係於與Wyatt miniDAWN Treos及Wyatt Optilab rEX (Wyatt Technology Europe, Dernbach, Germany)組合之Dionex UltiMate 3000 Titanium HPLC系統(Dionex Corporation, Germering, Germany)上進行。為分離，使用Tosoh TSK-Gel G3000SWxl管柱(Tosoh Bioscience, Stuttgart, Germany)。就各樣品而言，將15 µg蛋白質裝載於該管柱上，分離係在0.5 ml/min之流動速率下進行及記錄於280 nM下分析UV吸收。運行緩衝劑係由在pH 6.8下之49 mM NaH2
PO4
、51 mM Na2
HPO4
、100 mM K2
SO4
、0.0005% Tween-80組成。 所有DLS實驗係使用DynaPro Titan光析槽系統(Wyatt Technology Europe, Dernbach, Germany)以介於0.2與1.0 mg/ml之間之蛋白質濃度進行。在沈澱或顆粒形成之情況下，樣品係在實驗前以10.000 g離心5分鐘。 使用KpnI及EcoRV將小鼠IL-17受體E (UniProt Q8BH06，同型1)及人類IL-17受體E (UniProt Q8NFR9)之細胞外域(ECD)轉殖至表現載體pMAX_vk_Fc2_His中，從而產生C端Fc2_H融合構築體。除天然前導者(AG00158)外，亦產生具有Vκ前導者之第二構築體(AG00159)。 兩種構築體均瞬態表現於HKB11細胞中。細胞懸浮液在轉染後三天經按比例增加及細胞培養物上清液在轉染6天後收穫。在無菌過濾後，對該溶液進行蛋白質A親和力層析術。緩衝劑交換成PBS及樣品係經無菌過濾(0.2 µm孔徑)。蛋白質濃度係藉由UV-分光光度法測定。產物之純度係在變性、還原及變性、非還原條件下於SDS-PAGE中及於天然狀態下藉由HP-SEC及DLS進行分析。 1.2.淘選及Fab /抗體產生 就抗體產生而言，使用MorphoSys Ylanthia®
庫以選擇抗人類IL-17C之Fab片段。該MorphoSys Ylanthia®
庫(Tiller等人，mAbs 5:3, 1–26; May/June (2013)及美國專利案第8,728,981號)係購買獲得之噬菌體庫及採用CysDisplay®
技術用於在噬菌體表面上顯示Fab(Lohning等人，WO2001/05950)。 為識別IL-17C特異性抗體，使用不同淘選策略。各淘選策略包含針對個別抗原(包括人類IL-17C (SEQ ID NO.: 1)及小鼠IL-17C)之至少3次個別輪淘選。 經識別之經分離純系係經成熟化、工程化及/或生殖細胞系化以增加親和力及/或功能性。其後，幾百個純系係經篩選及在包含(例如)經由SET評估對人類、石蟹獼猴及小鼠IL-17C之結合；對人類、石蟹獼猴及小鼠IL-17C結合至其各自IL-17RE之抑制及IL-17C之功能抑制(小鼠NIH3T3細胞中IL-17RE驅動之NF-κB報導子基因分析及小鼠原代角化細胞(MPEK)中IL-17C介導之CSF3表現)之活體外分析中嚴格測試功能性。 最後，兩個較佳前導分子(MAB#1及MAB#2)係經選擇及進一步描述於如下文概述之工作實例中。實例 2 ：單價 Fab 及二價 IgG 形式之親和力測定
單價Fab及二價IgG親和力係藉由SET測定。因此經純化之Fab係於人類、石蟹獼猴或小鼠IL-17C上滴定用於測定KD。經分別純化之IgG係於人類、石蟹獼猴或小鼠IL-17C上滴定用於測定EC50
。 溶液平衡滴定(SET)基本上如參考文獻(Friquet等人，(1985) J. Immunol. Meth. 77: 305-19)中所述般進行。為改善SET方法之靈敏度及精確度，自經典ELISA轉移至基於ECL之技術(Haenel等人(2005) Anal Biochem. 339.1: 182-84)。 針對MAB#1及MAB#2之個別結果分別顯示於表2及表3中。實例 3 ：針對受體抑制活性表徵 IL-17C 特異性 Fab 或 IgG
測試分別經純化之IL-17C特異性Fab或IgG之其抑制IL-17C結合至其特異性受體IL-17RE之能力。因此，將MA6000 384孔盤(Meso Scale Discovery, MSD)在4℃下以溶於PBS中之30 µl 75 ng/ml小鼠IL17RE/Fc嵌合蛋白塗佈整夜。第二天，連續抗體稀釋劑(濃度自0.001至100 nM)在室溫下以平衡體積之生物素化人類/石蟹獼猴或小鼠IL-17C預培養30 min以測定受體結合抑制之IC50
濃度。在用溶於PBST中之2.5% BSA將盤阻斷1 h後，將預先形成之抗體-配體複合物歷時1 h添加至經塗佈之IL17RE/Fc及使用MSD Sector Imager經由鏈酶親和素-ECL偵測受體結合。 兩種抗體(MAB#1及MAB#2)在Fab及IgG形式下均等抑制人類/石蟹獼猴或小鼠IL-17C與IL-17RE之相互租用。在整個所有三種臨床相關之物種中，針對IgG形式之兩種抗體觀察到雙位數pM範圍中之IC50
濃度。結果分別顯示於表2及表3中之第3及第4行。實例 4 ： IL-17C 驅動之 NF-κB 報導子分析中之功能測試
經純化之IL-17C特異性IgG係在監測過表現鼠科IL-17RE之NIH3T3細胞中IL-17C驅動之NF-κB報導子基因活化之基於功能細胞之分析中針對其等抑制人類、小鼠及石蟹獼猴IL-17C之生物活性之能力而經進一步測試。 在37℃、5% CO2
下將NIH3T3細胞培養於以10% FBS及1% Pen/Strep補充之DMEM中。就分析而言，NIH3T3細胞係以總量為100 ng DNA (20 ng小鼠IL-17RE表現構築體、50 ng NF-κB發光酶報導子構築體及30 ng pBluescript)使用Polyplus jet-PEI轉染劑懸浮轉染。簡而言之，將DNA稀釋於5 μl 150 mM NaCl (每孔)中及製備於8 μl 150 mM NaCl (每孔)中之0.2 μl jet-PEI。在室溫下培養5分鐘後，將JetPEI®
溶液添加至DNA溶液中及在室溫下進一步培養20至30分鐘。將NIH3T3細胞稀釋至在87 μl培養基中具有~40,000個細胞。將該等細胞添加至DNA-JetPEI I®
混合物(87 μl細胞及13 μl DNA-JetPEI I®
混合物/孔)中及將最終體積轉移至96孔盤內。 在37℃下於濕潤5% CO2
培養器中培養整夜後，移除培養基及用含有5% FBS及1% Pen/Strep之90 μl培養基置換jetPEI®
。將在室溫下以等體積之經純化之重組IL-17C (人類IL-17C (Novus #NBP1-42910)、小鼠IL-17C (R&D Systems #2306-ml-025)或石蟹獼猴IL-17C (內部生產))預培養30分鐘之於DPBS中製造之10 μl連續抗體稀釋劑添加至細胞中。IL-17C之最終濃度為0.5 ng/ml。 在37℃下於CO2
培養器中培養該等盤後，添加100 μl SteadyLite Plus (Perkin Elmer)，接著在Envision (Perkin Elmer)上讀取發光強度。 兩種抗體在人類、小鼠及石蟹獼猴IL-17C之存在下有效減少由IL-17RE介導之NF-κB報導子基因活化。個別結果分別發現於表2及表3中之第5行。實例 5 ：原代人類角化細胞中 IL-17C 驅動之基因表現
角化細胞會內源性地表現IL-17RE及IL-17RA受體，其等兩者均為IL-17C之功能傳訊所需。因此，衍生自健康個體之人類原代角化細胞及衍生自C57BL/6小鼠之小鼠原代角化細胞可以較生理情況下用以測定MAB#1 IgG1及MAB#2 IgG1抑制分別人類及小鼠IL-17C之生物活性之能力。 NHEK (正常人類表皮角化細胞)係獲自Lonza，且遵循製造商步驟培養於含有補充物(KGM-Gold™ Bullet套組，Lonza)之角化細胞生長培養基中。經傳代培養至第3繼代並於第3繼代冷凍保存之NHEK係經解凍及立即以30,000個細胞/孔接種於96孔細胞培養盤中之KGM細胞培養基中。2天後，在添加hIL-17C (Novus #NBP1-42910)及hTNFα (Peprotech #300-01A)至各10 ng/ml之最終濃度前，移除該培養基並換成不含有皮質醇的KGM-Gold培養基。 就測試抗體而言，在室溫下以等體積之於DPBS中製造之抗體之連續稀釋劑與人類IL-17C首先預培養30分鐘。細胞係用重組IL-17C (在有或無抗體之稀釋劑之情況下經預培養)在TNFα之存在下進行刺激。使用IL-17C及TNFα之共刺激已知會導致各種基因之協同誘導且經證明顯示是必需的，因為單獨僅有IL-17C對經研究之基因之表現是有侷限性的效果。 將細胞培養48小時及然後總RNA係使用RNeasy 96套組(Qiagen)萃取，使用Taqman®
逆轉錄試劑(Applied Biosystems)進行逆轉錄及β-防禦素2 DEFB4A (人類)或CSF3 (小鼠)基因之表現係藉由定量聚合酶鏈反應(qPCR)測定。簡而言之，10 μl PCR反應係使用Taqman®
通用PCR主要混合物/No AmpErase®
UNG及針對DEF4B或CSF3 (#Hs00823638_m1，所有均獲自Applied Biosystems)之經初步設計之Assay-on-demand基因表現引子/探針組製備。qPCR係於ViiA7™即時PCR儀器(Applied Biosystems)上進行。基因表現經標準化至持家基因(housekeeping gene) β-肌動蛋白(Taqman引子組#4310881E)或GAPDH (Taqman引子組#4310893E)。 兩種抗體(MAB#1及MAB#2)均顯示分別可有效減少2 DEFB4A (人類)或CSF3 (小鼠)基因表現，並證實其等中和人類IL-17C及亦小鼠IL-17C之生物活性之能力(表2及表3)。活體外功能表徵之綜述：
來自活體外測試之個別結果總結於表2(針對MAB#1)及表3(針對MAB#2)中。彼等兩種抗體之可變區及CDR之胺基酸及核酸序列顯示於表1中。兩種抗體滿足個別標準及認為係用於臨床發展之有潛力分子。 表2：綜述活體外表徵MAB#1
表3：綜述活體外表徵MAB#2 實例 6 ： 基於 ELISA 之交叉競爭分析
抗IL-17C抗體或另一IL-17C結合劑之交叉競爭可藉由使用ELISA分析根據下列標準程序偵測。 ELISA分析之一般原則涉及將抗IL-17C抗體(諸如MAB#1或MAB#2)塗佈於ELISA盤之孔上。以溶液(即，非結合至ELISA盤)形式添加過量第二、潛在交叉競爭之抗IL-17C抗體。接著然後將有限量之IL-17C-Fc添加至該等孔中。 塗佈於孔上之抗體及溶液中之抗體將競爭結合有限數量之IL-17C分子。然後清洗盤以移除未結合至經塗佈之抗體之IL-17C分子及亦移除第二、溶液相抗體及在第二、溶液相抗體與IL-17C間形成之任何複合物。結合之IL-17C之量然後使用適當之IL-17C偵測試劑進行量測。因此，IL-17C可與標籤(例如，Fc、Flag等)融合，其可經由適當之標籤特異性試劑加以偵測。 與經塗佈之抗體交叉競爭之呈溶液形式之抗體將可引起相對於經塗佈之抗體在缺乏第二、溶液相抗體之情況下可結合之IL-17C分子之數量，經塗佈之抗體可結合之IL-17C分子之數量減小。 下文針對兩種抗體(稱為Ab-X及Ab-Y)進一步更詳細描述此分析。在其中選擇Ab-X作為固定化抗體之實例中，將其塗佈於ELISA盤之孔上，接著用合適之阻斷溶液阻斷該等盤以最小化後續添加之試劑之非特異性結合。然後將過量Ab-Y添加至ELISA盤使得每孔Ab-Y IL-17C結合位點之莫耳比在ELISA盤之塗佈期間每孔使用之Ab-X IL-17C結合位點之莫耳高至少10倍。添加IL-17C使得每孔添加之IL-17C之莫耳比用於塗佈各孔之Ab-X IL-17C結合位點之莫耳低至少25倍。在合適之培養週期後，清洗ELISA盤及添加對IL-17C抗原具特異性之偵測試劑以量測藉由經塗佈之抗IL-17C抗體(在此情況下，Ab-X)特異性結合之IL-17C分子之量。將用於該分析之背景信號定義為含經塗佈之抗體(在此情況下，Ab-X)、第二溶液相抗體(在此情況下，Ab-Y)、僅緩衝劑(即，無IL-17C)及偵測試劑之孔中獲得之信號。將用於分析之陽性對照信號定義為含經塗佈之抗體(在此情況下，Ab-X)、僅第二溶液相抗體緩衝劑(即，無第二溶液相抗體)、IL-17C偵測試劑之孔中獲得之信號。該ELISA分析需要以便於具有為背景信號至少6倍之陽性對照信號之此方式運行。 為避免源自選擇哪種抗體用作塗佈抗體及哪種用作第二(競爭者)抗體之任何人工因素(例如，在Ab-X與Ab-Y之間針對IL-17C之顯著不同親和力)，交叉阻斷分析需以兩種格式運行：1)格式1為其中Ab-X為塗佈於ELISA盤上之抗體及Ab-Y為在溶液中之競爭者抗體及2)格式2為其中Ab-Y為塗佈於ELISA盤上之抗體及Ab-X為在溶液中之競爭者抗體。實例 7 ： IL-23 誘導之 小鼠 牛皮癬模型
為檢查活體內效用及治療潛能，兩種候選抗體於IL-23誘導之小鼠牛皮癬模型中經進一步評估。 IL-23誘導之小鼠牛皮癬模型基本上如由Rizzo H等人，J Immunol (2011)第186(3)卷第1495至1502頁之描述進行。 簡而言之，將IL-23(1 μg)連續4天(第1天至第4天)真皮內注射至Balb/C小鼠的耳內而使Balb/C小鼠引起皮膚病變。總耳厚度之量測係每日量測直至第5天，於第5天對該等小鼠執行安樂死。在執行安樂死時，將耳廓耳製成樣品及縱向切成2半。一半固定於福爾馬林中用於深度組織學分析耳皮膚之表皮/真皮厚度。將第二半浸入RNAlater中用於疾病相關之IL-17A、IL-22及IL-1β促炎性細胞介素及LCN2、S100A8及S100A9抗微生物蛋白質之mRNA表現程度之定量逆轉錄聚合酶鏈反應(qRT-PCR)分析。注射IL-23之小鼠之組(n=10)係經MAB#1或MAB#2抗體治療，該等抗體以10 mg/kg之劑量i.p.兩次(一次在第一IL-23真皮內注射前及一次恰好在第一IL-23真皮內注射前)。 各抗體在2個被分為超過3個不同研究之獨立實驗中經測試。在各研究中，包括下列對照組(各n=10)： 小鼠之對照組不接受IL-23之每日注射而接受相同體積之BSA/PBS溶液之每日真皮內注射。此組係經陰性對照同型抗體MOR03207 (2x 10 mg/kg，i.p.)治療。 就各研究而言，總耳厚度及表皮厚度經時記錄及每個動物之個別資料點係用以測定IL-23介導之增厚之%預防。qPCR表現資料在標準化至用作持家基因之親環素A表現程度後使用Rq (相對數量)方程(Rq=2-ΔCt，其中ΔCt= Ct (受關注之基因) – Ct (持家基因))表現。就所有量測而言，組之平均值± SEM資料係使用PRISM軟體以單向方差分析(ANOVA)及杜納多重比較事後檢驗加以比較。＜ 0.05之「p」值係視為統計學顯著的(*：p＜0.05；**：p＜0.01；***：p＜0.001；ns：不顯著)。 總而言之，兩種候選IgG MAB#1及MAB#2 (2x10 mg/kg)之投與減輕IL-23誘導之皮膚炎症，其證實兩種抗體之活體內效用及治療效用。兩種抗體在IL-23誘導之表皮增厚之程度方面具有相似作用及在IL-23誘導之基因表現之程度方面具有相似影響。(參見表4)。 表4：IL-23模型中綜述活體內效用 實例 8 ： 異位性皮膚炎之 MC903 小鼠 模型
MAB#1抗體於異位性皮膚炎中之效用係於異位性皮膚炎之非感染性皮膚炎症小鼠模型中加以檢測，在該模型中，低鈣維生素D3類似物MC903 (卡泊三醇)之局部施用誘導類似皮膚病變之異位性皮膚炎，其特徵為紅色鱗狀皮膚並伴有各種細胞類型之表皮增生及真皮浸潤及皮膚中Th2細胞介素增加及高血清IgE (Li M等人，Proc Natl Acad Sci USA ( 2006)，第103(31)卷，第11736至11741頁；Li M等人，J Invest Dermatol. (2009)，第129(2)卷，第498至502頁)。 8.1動物 BALB/c小鼠(雌性，8週齡)係獲得自Janvier Labs (France)。使小鼠維持於12小時明/暗循環(0700-1900)下。溫度維持在22℃下，及食物與水以自由採食之形式提供。 8.2.實驗程序 為誘導AD樣反應，將2 nmol MC903 (Tocris，溶解於乙醇中)以20 μL之體積局部施用至小鼠之兩個耳上，連續施用5天。非疾病對照組接受相同量之乙醇(EtOH)。 每日觀察皮膚炎症(紅斑及增厚)之嚴重性。耳厚度係用電子卡尺(Mitutoyo)量測。炎症係使用活體內成像技術進一步評估。為此，在成像前藉由腹腔內途徑投與Prosense 680探針(1.6 nmol, Perkin Elmer)24小時。成像係使用Bruker In-vivo Xtreme成像系統進行。影像係藉由經深度冷卻之4MP CCD攝像機(光圈1.1，像素組合2x2，5秒獲取時間，Ex 630 nM, Em 700 nM)捕獲。就解剖共配準(anatomical co-registration)而言，拍攝反射影像(光圈2.8，0.175秒獲取時間)。所有影像以190x190視野拍攝及影像係使用分子成像軟體7.1版(Bruker Biospin, Billerica, MA, USA)分析。就各組而言，平均值及平均值之標準誤差(sem)係針對各小鼠使用左耳及右耳之平均值計算。 在執行安樂死時，收集來自耳皮膚之樣品及在植入石蠟前固定於4%甲醛中。將4 μm厚切片用蘇木精及曙紅(H&E染色劑)染色以供藉由使用Sisn’Com軟體(France)之影像分析進行表皮厚度之組織形態學評估。量測自頂部至底部覆蓋整個耳之每耳五個視野(高倍視野x20)，及該等5個值係針對每個耳及每個小鼠(左耳/右耳)平均化。額外組之組織切片係經製備以供使用抗IL-17C生物素化MAB抗體(及生物素化MOR03207同型陰性對照抗體)IHC染色IL-17C。處理及染色係基本如上文描述進行。 耳皮膚樣品亦經獲取以供使用qPCR或ELISA分析細胞介素表現。用於qPCR基因分析之耳組織片係淹沒於RNALater®穩定溶液(Ambion)中及儲存在-20℃下。用於在蛋白質濃度下定量之耳皮膚樣品立即迅速冰凍於液體N2
中及儲存在-80℃下。就基因表現分析而言，組織使用Precellys均質器(經1.4 mm神經醯胺珠填充之微管，在6000 rpm下15 sec之3乘3循環)進行破壞並溶解於RNA溶解溶液中。總RNA係使用NucleoSpin® RNA套組根據製造商指導方針(Macherey-Nagel)進一步萃取及300 ng係使用Applied Biosystems ™高容量cDNA逆轉錄套組逆轉錄。將5 μL 10倍稀釋cDNA用於使用SYBR Green技術與來自Qiagen之基因特異性引子之即時定量PCR反應中。qPCR係於ViiA™ 7即時PCR系統(Applied Biosystems)上進行。基因表現經標準化至3種不同持家基因(親環素、b-肌動蛋白及GAPDH)之表現及表示為如使用2- D Ct
方法獲得之特異性基因表現之相對mRNA含量，及DCt=Ctgene-Geomean Ct-值(持家基因)。就在蛋白質濃度下表現之定量而言，使用Precellys均質器(經2.8 mm金屬珠填充之微管，在4℃下10 min 14000 rpm)將組織首先破壞並溶解於250 μL裂解緩衝劑(用蛋白酶抑制劑混合物(Roche)及Halt™磷酸酶抑制劑混合物(Pierce)補充之(T-PER™組織蛋白萃取試劑(Pierce))中。耳中TSLP之量係使用來自R&D系統之TSLP小鼠DuoSet ELISA套組進行測定。將該量標準化至溶解物中之總蛋白含量，其係使用Coomassie蛋白分析試劑(Thermo Fisher)參照BSA蛋白標準進行測定。資料表示為耳中細胞介素之量，其係使用下式計算：樣品中細胞介素濃度/樣品中蛋白質濃度x總耳蛋白含量。 治療對各讀數之影響之顯著性係以Prism®軟體使用單向ANOVA，接著杜納多重比較事後檢驗相對於MC903 + MOR03207對照組評估，及*：p＜0.05；**：p＜0.01；***：p＜0.001。 8.3.MAB#1於異位性皮膚炎之小鼠模型中之效用(預防) MAB#1之各種劑量於MC903異位性皮膚炎模型中之效用係於預防情境中評估。簡而言之，藉由在BALB/c小鼠雙耳上局部投與2 nmol MC903 (溶解於乙醇中)，連續投與5天而在BALB/c小鼠中誘導皮膚病變；在第8天對小鼠執行安樂死。i.p. MAB#1 3次，即第一MC903施用開始前3天及第一MC903施用開始時及第一MC903施用後4天。評估對耳腫脹、耳發炎、表皮增生、真皮厚度及基因表現之影響。接受同型陰性對照抗體(MOR03207)之一組小鼠充當對照物。地塞米松(溶於0.5%甲基纖維素中之5 mg/kg，作為MC903施用之第一天藉由經口途徑(p.o.)每日投與)係用作活性對照物。小鼠被隨機分為相等組(n=10)。 在實驗過程期間追蹤皮膚炎症(紅斑及增厚)之嚴重性。在實驗過程期間，總耳厚度係使用Mitutoyo厚度計量器進行量測。炎症係在第5天使用如8.2)中描述之活體內成像技術進行進一步評估。 乙醇(作為載體對照)對耳無影響。對比之下，經MC903治療之耳變紅及腫脹。使用以2 mg/kg或更高劑量之MAB#1進行治療顯著預防耳增厚。MAB#1之作用係在10 mg/kg劑量下最大且堪比地塞米松之作用(圖1)。與此等觀察結果一致，耳發炎(藉由在第5天的活體內成像評估)於經MC903治療之動物中明顯增加及藉由MAB#1減少，及在10 mg/kg劑量下可見顯著及接近最大之作用(圖2)。 為證實MAB#1減小耳厚度，用蘇木精及曙紅染色於第8天收集之耳組織切片以組織形態學評估表皮及真皮厚度。捕獲自頂部至底部覆蓋整個耳之每耳五個視野之值，及針對每個小鼠平均化。在10 mg/kg及更高劑量下之MAB#1顯著預防表皮及真皮層兩者之厚度之增加(圖3)。 8.3.1 MAB#1對基因表現之影響 為進一步表徵MAB#1於MC903異位性皮膚炎樣皮膚炎症模型中之影響，各種異位性皮膚炎相關基因之表現係在mRNA水平下藉由qPCR或在蛋白質水平下藉由酵素結合免疫吸附分析法(ELISA)分析。耳中TSLP及IL-33蛋白表現及血漿中TARC含量係藉由MC903施用增加及一經使用以10 mg/kg或更高劑量之MAB#1治療而得到顯著抑制(圖4)。觀察到MAB#1對在經MC903治療之耳中經上調之若干其他基因(諸如IL-31 (與異位性皮膚炎中瘙癢相關之細胞介素)、Th2-細胞介素IL-4及顯示已於人類異位性皮膚炎中經上調之其他基因(諸如S100A8/9及IFN-g))之類似抑制效應。反之亦然，顯示MAB#1防止經MC903治療之耳中之FLG2之下調，其可表明MAB#1在恢復屏障功能中之潛在作用。 8.4.MAB#1於異位性皮膚炎之小鼠模型中之效用(治療) MAB#1之各種劑量於MC903異位性皮膚炎模型中之效用係於與疾病更相關之治療情境中加以評估。簡而言之，藉由在BALB/c小鼠雙耳上局部投與2 nmol MC903 (溶解於乙醇中)，連續投與5天而在BALB/c小鼠中誘導皮膚病變；MAB#1係i.p.4次，第一次投與在MC903皮膚投與之最後一天(第5天)進行及後續之投與在第8、12及15天進行。在第16天對小鼠執行安樂死。評估對耳腫脹、耳發炎、表皮增生、真皮厚度及基因表現之影響。另外，亦評估對免疫細胞(嗜伊紅球、T細胞及肥胖細胞)之流入之影響。接受同型陰性對照抗體(MOR03207)之一組小鼠充當對照物。地塞米松(溶於0.5%甲基纖維素中之1 mg/kg，在第5天作為MC903施用之最後一天開始經口投與及接著自第8至12天及自第15至16天經口投與)係用作活性對照物。 8.4.1 MAB#1對總耳厚度及炎症之影響 在實驗過程期間，總耳厚度係使用Mitutoyo厚度計量器進行量測。與經乙醇(作為MC903之載體對照)治療之耳相比，對耳局部施用MC903到第3天為止引起耳厚度顯著增加。疾病活性亦於在第5天(即，首次治療之日)加以適當誘導且自經陰性對照抗體MOR03207治療之組中之耳腫脹繼續增加明顯看出，在(即使停止MC903施用)後亦繼續發展(圖5)。使用以0.4 mg/kg或更高劑量之MAB#1之治療到第12天為止顯著減小耳增厚，及MAB#1之更高劑量具有更強作用及顯著減小甚至於較早時間點(50 mg/kg之MAB#1到第8天為止及10及2 mg/kg之劑量到第10天為止)下之耳厚度。與此等觀察結果一致，如藉由活體內成像(如描述於8.2中)於第12天評估之耳發炎於經陰性對照抗體治療之動物中仍增加及所有劑量下之MAB#1顯著減少，及在2 mg/kg劑量下可見最大效應(圖6)。 8.4.2 MAB#1對耳表皮/真皮厚度之影響 為證實MAB#1減小耳厚度，用蘇木精及曙紅染色在第16天收集之耳組織切片以組織形態學評估表皮及真皮厚度。在2 mg/kg及更高劑量下之MAB#1顯著減少表皮及真皮層兩者之厚度之增加，與總耳厚度之量測一致(圖7)。 8.4.3 MAB#1對真皮細胞浸潤之影響 為進一步表徵MAB#1對MC903異位性皮膚炎模型中疾病過程之影響，吾人評估對細胞浸潤之影響。更具體言之，吾人藉由免疫組織化學(IHC)評估對嗜伊紅球、T-淋巴細胞及肥胖細胞之影響及接著定量經分別偵測嗜伊紅球過氧化物酶、T細胞標識物CD3及肥胖細胞類胰蛋白酶之抗體染色之區域(詳情參見(Marsais, 2016))。與增加之炎症及耳厚度一致，嗜伊紅球、T細胞及在較小程度上肥胖細胞之浸潤在第16天於其中疾病活性係由MC903誘導之小鼠之耳中仍顯著。MAB#1之治療減少所檢查之所有三種細胞類型之真皮浸潤(圖8)。在所測試之所有MAB#1劑量下均觀察到浸潤的嗜伊紅球及T細胞之數量之顯著減小，50 mg/kg之更高劑量具有將此等細胞類型之流入減少至堪比地塞米松之作用之水平之更強作用。對肥胖細胞浸潤之影響一般而言較弱但仍顯著： 50及10 mg/kg之較高劑量下之MAB#1顯著減少流入。 8.4.4 MAB#1對基因表現之影響 表現係針對於第16天所收集之耳皮膚樣品或血漿針對八種疾病相關基因藉由qPCR或針對產生於耳中之TSLP及IL-33及血漿TARC藉由ELISA加以分析，如8.2中所述。 針對在經EtOH治療之非疾病對照小鼠與其中疾病係藉由在最初5天施用MC903誘導之小鼠之間之所分析基因中之大多數可見無顯著差異表現。僅IL-33蛋白及IL-4之含量、S100A9及IFN-g mRNA表現程度仍增加。彼等基因(除IFN-g外)之增加之表現程度係因如圖9中顯示之所有劑量水平下之MAB#1治療而減小。 8.5.結果 MAB#1於MC903模型中預防異位性皮膚炎樣皮膚炎症之產生，及在以3x10 mg/kg腹腔內注射(i.p.)預防給藥時，顯著影響表皮及真皮增厚、炎症及2型T輔助細胞(Th2)樣基因表現。對總耳厚度之顯著影響係於此模型中觀察到在3x2 mg/kg (i.p.)之劑量下。亦於治療MC903模型中，MAB#1改善皮膚炎症。對總耳厚度、表皮增厚、炎症及嗜伊紅球及T細胞之流入之顯著治療作用係在4x0.4 mg/kg (i.p.)之劑量，高達4x2至10 mg/kg (i.p.)之劑量下觀察到。實例 9 ： 特異性皮膚炎之鱗狀尾小鼠模型
於鱗狀尾模型中評估MAB#1抗體之效用。鱗狀尾小鼠在Flg及Matt (Mattma/ma
Flgft/ft
)基因中具有導致皮膚屏障功能障礙之突變。此等小鼠自發發展特徵為混合Th2/Th17炎性表型之異位性及漸進性皮膚炎及重現人類中AD之主要特徵。 9.1.動物及實驗程序 使用同類系C57BL/6J背景之鱗狀尾(Mattma
/ma
Flgft/ft
)小鼠，如Fallon等人，(2009) Nat Genet. 41(5): 602–608及Saunders等人，(2013) J Allergy Clin Immunol 132(5): 1121-1129中所述。雌性鱗狀尾小鼠(9至10週齡)被隨機分為四組(每組8隻小鼠)及經如下治療6週： - I組：同型陰性對照抗體(MOR03207) (30 mg/kg，ip每週兩次x 6週) - II組：MAB#1 (3mg/kg，ip每週兩次x 6週) - III組：MAB#1(30mg/kg，ip每週兩次x 6週) - IV組：地塞米松2mg/kg (ip每週兩次x 6週)作為活性對照物 AD樣皮膚炎症之嚴重性係使用宏觀診斷標準進行評分，該標準擷用如Saunders等人，(2013) J Allergy Clin Immunol 132(5): 1121-1129中描述之NC/Nga小鼠模型中之皮膚炎症之評估。簡而言之，評分系統(0：無；1：輕度；2：中度；3：顯著)應用於紅斑、表皮剝落及抓傷之跡象。用於各小鼠之總評分(最大評分為9)係計算自用於三個參數之各者之個別評分之總和。 在研究結束時監測到眼瞼皮膚中出現濕疹樣病變及眼瞼炎針對其嚴重性經單獨評分(0：正常；1：眼瞼紅斑及/或水腫；2眼瞼紅斑、水腫及抓傷；3：眼瞼紅斑、水腫、抓傷、糜爛)。針對各小鼠之最大眼瞼炎評分(雙眼平均值)為3。 9.2.MAB#1在AD之自發及慢性鱗狀尾小鼠模型中之效用 皮膚炎症之臨床評分顯示鱗狀尾小鼠在治療開始時已有自發濕疹樣皮膚炎之跡象，在未經治療之動物中，該自發濕疹樣皮膚炎在6週隨訪期期間進一步進展為顯型皮膚炎(overt dermatitis)。使用MAB#1之治療以堪比在30 mg/kg之最高測試劑量下可見之地塞米松之作用之顯著作用減少進展(圖10)。MAB#1抗體之類似作用在眼瞼炎之水平下於治療結束時可見(圖11)。
圖1：MAB#1以劑量依賴性方式預防於耳皮膚上局部施用MC903誘導之耳增厚。 資料表示為平均值±平均值之標準誤差(SEM) (n=8/組)。相對於MC903+MOR03207之統計顯著性係使用ANOVA及杜納多重比較檢驗(Dunnett’s multiple comparison test)計算：* p＜0.05；** p＜0.01；*** p＜0.001。(DEX：地塞米松；EtOH:乙醇) 圖2：MAB#1以劑量依賴性方式減少於耳皮膚上局部施用MC903誘導之耳發炎。 耳發炎係在第5天使用活體內成像進行評估。左側：耳中信號強度之定量。個別資料點(n=8/組)表示雙耳之平均強度；資料亦顯示為平均值(水平線) ± SEM。相對於MC903+MOR03207之統計顯著性係使用ANOVA及杜納多重比較檢驗計算：* p＜0.05；** p＜0.01；*** p＜0.001。右側：來自不同治療組之動物之小鼠耳之典型影像係於Prosense 680探針之注射後在Bruker In-vivo Xtreme Imager 24 h上獲取。(DEX：地塞米松；EtOH：乙醇) 圖3：MAB#1以劑量依賴性方式減少於耳皮膚上局部施用MC903誘導之表皮及真皮皮膚層之增厚。 資料呈現為個別資料點(n=8/組)及平均值(水平線) ± SEM。相對於MC903+MOR03207之統計顯著性係使用ANOVA及杜納多重比較檢驗計算：* p＜0.05；** p＜0.01；*** p＜0.001。左側：針對表皮厚度之資料；右側：針對真皮厚度之資料。 圖4：MAB#1以劑量依賴性方式抑制MC903介導之耳TSLP及IL-33表現及血漿TARC含量之增加。 資料呈現為個別資料點(n=8/組)及平均值(水平線) ± SEM。相對於MC903+MOR03207組之統計顯著性係使用ANOVA及杜納多重比較檢驗計算：* p＜0.05；** p＜0.01；*** p＜0.001。左上側：針對耳中TSLP蛋白表現之資料；左下側：針對耳中IL-33蛋白表現之資料；右上側：針對血漿中TARC蛋白含量之資料。 圖5：MAB#1之治療投與以劑量依賴性方式減少於耳皮膚上局部施用MC903誘導之耳增厚。 資料表示為平均值± SEM (n=10/組)。相對於MC903+MOR03207之統計顯著性係使用ANOVA及杜納多重比較檢驗計算：* p＜0.05；** p＜0.01；*** p＜0.001。DEX：地塞米松；EtOH：乙醇。 圖6：MAB#1之治療投與以劑量依賴性方式減少於耳皮膚上局部施用MC903誘導之耳發炎。 耳發炎係在第12天使用活體內成像進行評估及耳中信號強度係用圖表呈現。個別資料點(n=10/組)表示雙耳之平均強度；資料亦顯示為平均值(水平線) ± SEM。相對於MC903+MOR03207之統計顯著性係使用ANOVA及杜納多重比較檢驗計算：* p＜0.05；** p＜0.01；*** p＜0.001。DEX：地塞米松；EtOH：乙醇。 圖7：MAB#1之治療投與以劑量依賴性方式減少於耳皮膚上局部施用MC903誘導之表皮及真皮皮膚層之增厚。 資料呈現為個別資料點(n=10/組)及平均值(水平線) ± SEM。相對於MC903+MOR03207之統計顯著性係使用ANOVA及杜納多重比較檢驗計算：* p＜0.05；** p＜0.01；*** p＜0.001。左側：表皮厚度之資料；右側：真皮厚度之資料。DEX：地塞米松；EtOH：乙醇。 圖8：MAB#1之治療投與以劑量依賴性方式減少嗜伊紅球、T細胞及肥胖細胞之真皮浸潤。 資料呈現為個別資料點(n=10/組)及平均值(水平線) ± SEM。相對於MC903+MOR03207之統計顯著性係使用ANOVA及杜納多重比較檢驗計算：* p＜0.05；** p＜0.01；*** p＜0.001。左上側：嗜伊紅球之資料；右上側：肥胖細胞之資料；左下側：T細胞之資料。DEX：地塞米松；EtOH：乙醇。 圖9：MAB#1之治療投與減少IL-33、IL-4及S100A9之表現，其等於第16天(停止MC903施用後11天)仍增加。 資料呈現為個別資料點(n=10/組)及平均值(水平線) ± SEM。相對於MC903+MOR03207組之統計顯著性係使用ANOVA及杜納多重比較檢驗計算：* p＜0.05；** p＜0.01；*** p＜0.001。左上側：針對耳中S100A9 mRNA表現之資料；左下側：針對耳中IL-4 mRNA表現之資料；右上側：針對耳中IL-33蛋白質量之資料。 圖10：MAB#1減少自發及慢性鱗狀尾(Flaky Tail)模型中AD樣炎症之宏觀臨床症狀。 針對各小鼠之皮膚炎症之臨床評分於治療開始(第0週)及結束(第6週)時進行。資料為針對各治療組(n=8/組)之平均值± SD。相對於經同型抗體治療之組之統計顯著性係使用ANOVA及杜納多重比較檢驗計算(* p＜0.05；** p＜ 0.01；*** p＜ 0.001)。 圖11：MAB#1減少自發及慢性鱗狀尾模型中濕疹樣眼瞼炎症。 皮膚眼瞼炎症係在治療結束(第6週)時進行評分。資料為針對各治療組(n=8/組)之平均值± SD。相對於經同型抗體治療之組之統計顯著性係使用ANOVA及杜納多重比較檢驗計算(* p＜0.05；** p＜ 0.01；*** p＜ 0.001)。
Claims (15)
- 一種對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段與包含以下之抗體交叉競爭： (a) SEQ ID No.: 7之HCDR1區、SEQ ID No.: 8之HCDR2區、SEQ ID No.: 9之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 (b) SEQ ID No.: 20之HCDR1區、SEQ ID No.: 21之HCDR2區、SEQ ID No.: 22之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區。
- 一種對IL-17C具特異性之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含： (a) 包含SEQ ID No.: 7之胺基酸序列之HCDR1區、包含SEQ ID No.: 8之胺基酸序列之HCDR2區、包含SEQ ID No.: 9之胺基酸序列之HCDR3區、包含SEQ ID No.: 13之胺基酸序列之LCDR1區、包含SEQ ID No.: 14之胺基酸序列之LCDR2區及包含SEQ ID No.: 15之胺基酸序列之LCDR3區，或 (b) 包含SEQ ID No.: 20之胺基酸序列之HCDR1區、包含SEQ ID No.: 21之胺基酸序列之HCDR2區、包含SEQ ID No.: 22之胺基酸序列之HCDR3區、包含SEQ ID No.: 26之胺基酸序列之LCDR1區、包含SEQ ID No.: 27之胺基酸序列之LCDR2區及包含SEQ ID No.: 28之胺基酸序列之LCDR3區。
- 如請求項2之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含： (a) SEQ ID No.: 7之HCDR1區、SEQ ID No.: 8之HCDR2區、SEQ ID No.: 9之HCDR3區、SEQ ID No.: 13之LCDR1區、SEQ ID No.: 14之LCDR2區及SEQ ID No.: 15之LCDR3區，或 (b) SEQ ID No.: 20之HCDR1區、SEQ ID No.: 21之HCDR2區、SEQ ID No.: 22之HCDR3區、SEQ ID No.: 26之LCDR1區、SEQ ID No.: 27之LCDR2區及SEQ ID No.: 28之LCDR3區。
- 如前述請求項中任一項之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段係對人類IL-17C具特異性。
- 如請求項4之經分離抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段係對人類IL-17C、石蟹獼猴IL-17C及小鼠IL-17C具特異性。
- 如前述請求項中任一項之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段係人類、人類化或嵌合抗體或抗體片段。
- 如前述請求項中任一項之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 17之重鏈及SEQ ID No.: 16之輕鏈。
- 如請求項1至7中任一項之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含SEQ ID No.: 30之重鏈及SEQ ID No.: 29之輕鏈。
- 如前述請求項中任一項之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段係經分離抗體或抗體片段。
- 如前述請求項中任一項之抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段係重組抗體或抗體片段。
- 如前述請求項中任一項之抗體或抗體片段，其用於治療有此需要之個體。
- 一種核酸組合物，其包含一或複數個編碼如請求項1至11中任一項之抗體或抗體片段之核酸序列。
- 一種載體組合物，其包含一或複數個包含一或複數個如請求項12之核酸序列之載體。
- 一種細胞，其包含如請求項13之載體組合物。
- 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至11中任一項之抗體或抗體片段及醫藥上可接受之載劑或賦形劑。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP16156582 | 2016-02-19 | ||
| EP16156651 | 2016-02-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TW201734041A true TW201734041A (zh) | 2017-10-01 |
Family
ID=58057136
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW106105384A TW201734041A (zh) | 2016-02-19 | 2017-02-17 | 抗ｉｌ-１７ｃ抗體 |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US20190048071A1 (zh) |
| EP (1) | EP3416983B1 (zh) |
| JP (2) | JP6535139B2 (zh) |
| KR (1) | KR102715157B1 (zh) |
| CN (1) | CN108699143B (zh) |
| AU (1) | AU2017219837B2 (zh) |
| BR (1) | BR112018016798A2 (zh) |
| CA (1) | CA3014842A1 (zh) |
| CL (1) | CL2018002340A1 (zh) |
| CO (1) | CO2018008724A2 (zh) |
| CU (1) | CU20180087A7 (zh) |
| CY (1) | CY1124296T1 (zh) |
| DK (1) | DK3416983T3 (zh) |
| EA (1) | EA037813B1 (zh) |
| EC (1) | ECSP18070641A (zh) |
| ES (1) | ES2877376T3 (zh) |
| HR (1) | HRP20211059T1 (zh) |
| HU (1) | HUE054755T2 (zh) |
| IL (1) | IL260733B2 (zh) |
| LT (1) | LT3416983T (zh) |
| MA (2) | MA43088B1 (zh) |
| MD (1) | MD3416983T2 (zh) |
| MX (1) | MX2018009860A (zh) |
| PH (1) | PH12018501739A1 (zh) |
| PL (1) | PL3416983T3 (zh) |
| RS (1) | RS62012B1 (zh) |
| SG (1) | SG11201806161TA (zh) |
| SI (1) | SI3416983T1 (zh) |
| SM (1) | SMT202100361T1 (zh) |
| TN (1) | TN2018000289A1 (zh) |
| TW (1) | TW201734041A (zh) |
| WO (1) | WO2017140831A1 (zh) |
| ZA (1) | ZA201806249B (zh) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3359161A1 (en) * | 2015-10-05 | 2018-08-15 | MorphoSys AG | Antagonists of il-17c for the treatment and/or prevention of atopic dermatitis |
| EA037813B1 (ru) | 2016-02-19 | 2021-05-24 | МорфоСис АГ | Антитела к il-17c |
| EP3688031A1 (en) * | 2017-09-25 | 2020-08-05 | MorphoSys AG | Treatment of atopic dermatitis |
| GB201803563D0 (en) | 2018-03-06 | 2018-04-18 | Galapagos Nv | Antibodies and pharmaceutical compositions thereof for the treatment of autoimmune skin diseases |
| TW202011995A (zh) * | 2018-07-03 | 2020-04-01 | 比利時商葛萊伯格有限公司 | 高濃度液體抗體配製物 |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0138854B1 (en) | 1983-03-08 | 1992-11-04 | Chiron Mimotopes Pty. Ltd. | Antigenically active amino acid sequences |
| US5641870A (en) | 1995-04-20 | 1997-06-24 | Genentech, Inc. | Low pH hydrophobic interaction chromatography for antibody purification |
| DE69839147T2 (de) | 1997-06-12 | 2009-02-19 | Novartis International Pharmaceutical Ltd. | Künstliche antikörperpolypeptide |
| CA2328496C (en) * | 1998-05-15 | 2016-01-05 | Genentech, Inc. | Il-17 homologous polypeptides and therapeutic uses thereof |
| ES2327382T3 (es) | 1999-07-20 | 2009-10-29 | Morphosys Ag | Metodos para presentar (poli)peptidos/proteinas en particulas de bacteriofagos a traves de enlaces disulfuro. |
| JP2005512044A (ja) | 2001-12-03 | 2005-04-28 | アブジェニックス・インコーポレーテッド | 結合特性に基づく抗体分類 |
| US20060142192A1 (en) | 2004-10-18 | 2006-06-29 | Zeren Gao | Soluble ZcytoR21, anti-ZcytoR21 antibodies and binding partners and methods of using in inflammation |
| EP1931708A1 (en) * | 2005-10-18 | 2008-06-18 | Zymogenetics, Inc. | Il-17c antagonists and methods of using the same |
| CA2666842A1 (en) | 2006-10-18 | 2008-04-24 | Zymogenetics, Inc. | Il-17c antagonists and methods of using the same |
| AR083546A1 (es) | 2010-10-25 | 2013-03-06 | Genentech Inc | Tratamiento de inflamacion gastrointestinal, soriasis y asma |
| US8728981B2 (en) | 2010-11-19 | 2014-05-20 | Morphosys Ag | Collection and methods for its use |
| WO2013016220A1 (en) | 2011-07-22 | 2013-01-31 | Amgen Inc. | Il-17 receptor a is required for il-17c biology |
| AU2012324895B2 (en) * | 2011-10-19 | 2017-03-16 | Galapagos Nv | Antagonists of IL17C for the treatment of inflammatory disorders |
| DK2858670T3 (en) | 2012-06-12 | 2018-10-22 | Orega Biotech | Antagonists of IL-17 isoforms and their applications |
| MX2017007747A (es) * | 2014-12-15 | 2018-02-13 | Morphosys Ag | Anticuerpos para il-17c. |
| EA037813B1 (ru) | 2016-02-19 | 2021-05-24 | МорфоСис АГ | Антитела к il-17c |
-
2017
- 2017-02-17 EA EA201891594A patent/EA037813B1/ru unknown
- 2017-02-17 SM SM20210361T patent/SMT202100361T1/it unknown
- 2017-02-17 MD MDE20190007T patent/MD3416983T2/ro unknown
- 2017-02-17 WO PCT/EP2017/053592 patent/WO2017140831A1/en active Application Filing
- 2017-02-17 JP JP2018543220A patent/JP6535139B2/ja active Active
- 2017-02-17 AU AU2017219837A patent/AU2017219837B2/en active Active
- 2017-02-17 CN CN201780011965.2A patent/CN108699143B/zh active Active
- 2017-02-17 US US16/076,401 patent/US20190048071A1/en not_active Abandoned
- 2017-02-17 MX MX2018009860A patent/MX2018009860A/es unknown
- 2017-02-17 SG SG11201806161TA patent/SG11201806161TA/en unknown
- 2017-02-17 BR BR112018016798A patent/BR112018016798A2/pt unknown
- 2017-02-17 TW TW106105384A patent/TW201734041A/zh unknown
- 2017-02-17 EP EP17705873.2A patent/EP3416983B1/en active Active
- 2017-02-17 HU HUE17705873A patent/HUE054755T2/hu unknown
- 2017-02-17 TN TNP/2018/000289A patent/TN2018000289A1/en unknown
- 2017-02-17 KR KR1020187024953A patent/KR102715157B1/ko not_active Application Discontinuation
- 2017-02-17 ES ES17705873T patent/ES2877376T3/es active Active
- 2017-02-17 MA MA43088A patent/MA43088B1/fr unknown
- 2017-02-17 SI SI201730777T patent/SI3416983T1/sl unknown
- 2017-02-17 LT LTEP17705873.2T patent/LT3416983T/lt unknown
- 2017-02-17 RS RS20210775A patent/RS62012B1/sr unknown
- 2017-02-17 CA CA3014842A patent/CA3014842A1/en active Pending
- 2017-02-17 PL PL17705873T patent/PL3416983T3/pl unknown
- 2017-02-17 IL IL260733A patent/IL260733B2/en unknown
- 2017-02-17 CU CU2018000087A patent/CU20180087A7/es unknown
- 2017-02-17 DK DK17705873.2T patent/DK3416983T3/da active
- 2017-02-17 MA MA44227A patent/MA44227B1/fr unknown
-
2018
- 2018-08-08 US US16/058,143 patent/US10259869B2/en active Active
- 2018-08-16 PH PH12018501739A patent/PH12018501739A1/en unknown
- 2018-08-16 CL CL2018002340A patent/CL2018002340A1/es unknown
- 2018-08-21 CO CONC2018/0008724A patent/CO2018008724A2/es unknown
- 2018-09-17 ZA ZA2018/06249A patent/ZA201806249B/en unknown
- 2018-09-19 EC ECSENADI201870641A patent/ECSP18070641A/es unknown
-
2019
- 2019-02-26 US US16/286,231 patent/US10633439B2/en active Active
- 2019-04-26 JP JP2019086144A patent/JP6916834B2/ja active Active
-
2020
- 2020-03-18 US US16/822,844 patent/US11987621B2/en active Active
-
2021
- 2021-07-02 HR HRP20211059TT patent/HRP20211059T1/hr unknown
- 2021-07-06 CY CY20211100604T patent/CY1124296T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11987621B2 (en) | Antibodies for IL-17C | |
| TWI526223B (zh) | 人化ａｘｌ抗體類 | |
| CN112166124A (zh) | 拮抗性cd73抗体 | |
| JP7257971B2 (ja) | 抗ｃｄ４０抗体、その抗原結合フラグメント、およびその医学的使用 | |
| CN113201073A (zh) | 双特异性EGFR/c-Met抗体 | |
| CN104334722A (zh) | 具有修饰的cdr的抗-涎免凝集素15抗体 | |
| WO2019184935A1 (zh) | 抗cd27抗体、其抗原结合片段及其医药用途 | |
| US20230406922A1 (en) | Humanized cd19 antibody and use thereof | |
| CN110790839A (zh) | 抗pd-1抗体、其抗原结合片段及医药用途 | |
| WO2020228604A1 (zh) | 抗trop-2抗体、其抗原结合片段及其医药用途 | |
| TW202241944A (zh) | 新穎的抗ｇｒｅｍｌｉｎ１抗體 | |
| EP4403573A1 (en) | Pharmaceutical composition comprising anti-pvrig/tigit bispecific antibody | |
| KR20210138674A (ko) | Tsg-6 항체 및 그 용도 | |
| JP2024533488A (ja) | 抗ヒトｃｄ３抗体及びその応用 | |
| KR20220143882A (ko) | 항-il-4r 항체를 함유하는 약학적 조성물 및 이의 용도 | |
| KR20240049304A (ko) | 융합 단백질을 함유하는 약학적 조성물 | |
| TW202144005A (zh) | 一種抗ｏｘ４０抗體醫藥組成物及其用途 | |
| WO2021251340A1 (ja) | 抗癌剤への抵抗性改善剤 | |
| CN115916821A (zh) | 用于疫苗接种和感染性疾病的治疗的组合物和方法 |