KR20210138674A - Tsg-6 항체 및 그 용도 - Google Patents

Abstract

본 발명은 신규한 항-TSG-6 항체, 이러한 항체를 포함하는 제약 조성물, 및 암 또는 자가면역 질환과 같은 질환의 치료를 위해 이러한 항체 및 제약 조성물을 사용하는 치료 방법을 제공한다.

Description

TSG-6 항체 및 그 용도

관련 출원의 교차 참조

본 출원은 2019년 3월 12일에 출원된 미국 가출원 제62/817,152호에 대한 우선권의 이익을 주장하며, 이의 내용은 모든 목적을 위해 그 전체가 본원에 명시적으로 포함된다.

서열 목록

본 출원은 ASCII 형식으로 전자적으로 제출되었던 서열 목록을 포함하며, 그 전체는 본원에 참고로 포함된다. 2020년 3월 6일에 생성된 상기 ASCII 사본의 명칭은 011506-5023_ST25.txt이고 71 킬로바이트 크기이다.

기술분야

본 개시내용은 TSG-6, 예를 들어 인간 TSG-6(hTSG-6)에 특이적으로 결합하는 분자, 및 이러한 TSG-6-결합 항체를 포함하는 제약 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 항체를 사용하여 인간 TSG-6를 검출하거나 자가면역 질환, 염증성 질환, 섬유성 질환 및 암을 비롯한 다양한 질환의 치료에서 인간 TSG-6 활성을 조절하는 방법이 또한 본 발명에 포함된다.

종양 괴사 인자, 알파 유도 단백질 6(TNFAIP6) 유전자에 의해 인간에서 인코딩되는 종양 괴사 인자 유도성 유전자 6 단백질(TSG-6)은 히알라데린(hyaladherin)이라고 불리는 히알루로난(hyaluronan) 결합 단백질의 부류에 속하는 세포외(분비) 단백질이다. TSG-6은 히알루로난에 결합하는 N-말단 링크 도메인(Link domain), 및 단백질-단백질 상호작용에 관여하는 많은 단백질에서 발견되는 다기능 도메인인 C-말단 CUB 도메인을 포함한다. TSG-6은 면역 반응을 조절하는 역할을 한다. 일반적으로, 단백질은 상황에 따라 효과가 다를 수 있지만 항염증 매개체로 간주되며; TSG-6을 인코딩하는 유전자가 파괴된 마우스는 관절염 모델에서 더 빠른 진행과 더 심한 중증도를 나타내었지만, 알레르기 천식 모델에서는 약화된 염증 및 감소된 기도 호산구 증가증을 나타냈다. TSG-6의 명백한 주요 기능은 히알루로난에 결합하고 공유적으로 변형하여 세포외 매트릭스 구조 및 기능에 영향을 미치는 것이며; TSG-6은 또한 다양한 케모카인(chemokine) 및 콘드로이딘 설페이트(chondroidin sulfate), 아그레칸(aggrecan), 베르시칸(versican), 피브로넥틴(fibronectin) 및 펜트락신-3(pentraxin-3)과 같은 기타 세포외 매트릭스 관련 분자에 결합하고 그의 활성을 조절할 수 있다.

히알루로난(히알루론산 또는 HA)은 반복되는 글루쿠론산 및 N-아세틸 글루코사민 서브유닛으로 이루어진 세포외 매트릭스 글리코사미노글리칸 분자이다. 그것은 윤활을 제공하고 인접한 조직 층들 사이의 운동을 보조하는 것으로 생각되며, 또한 고도로 수화되어 세포외 매트릭스에서 정수압을 증가시키는 역할을 하고 압박에 대한 내성을 제공한다. HA는 또한 CD44, 히알루로난 관련 운동성 수용체(RHAMM, HMMR 또는 CD168로도 알려짐) 및 림프관 내피 히알루로난 수용체 1(LYVE1)을 포함하는 세포 표면 수용체에 결합함으로써 세포 과정에 영향을 미치는 신호 전달 분자이다. HA는 췌장암, 일부 유방암 및 기타 암을 포함한 많은 종양의 기질(stroma)에 매우 풍부하게 존재하며, 여기서 종양 성장, 혈관신생 및 전이에 유리한 미세 환경을 제공하고, 매트릭스 강성 및 정수압을 증가시켜 면역 세포 및 치료 약물에 의한 진입에 대해 물리적 장벽을 형성하는 데에 관여한다. HA는 또한 유사한 역할을 하는 많은 섬유성 질환에 다량으로 존재한다.

TSG-6은 주로 섬유아세포, 평활근 세포, 및 중간엽 줄기 세포(MSC), 염증 부위에서 유출될 수 있는 강력한 면역억제 특성을 갖는 골수 유래 섬유아세포 유사 세포에 의해 분비된다. TSG-6은 에스테르 교환 반응에서 IαI에서 HA로의 HC 단백질(혈청 히알루로난 관련 단백질 또는 SHAP로도 알려짐)의 전달을 촉매한다. 생성된 HC-HA 복합체는 더 분산된 네트워크보다는 케이블형 구조를 형성한다. 이 케이블은 HA 수용체 CD44를 통한 백혈구의 부착을 포함하는 변경된 특성을 가지며 대식세포의 분극화를 대안적으로 활성화된 'M2' 표현형으로 변경한다. HC-HA 케이블은 암에서 병원성 역할을 하는 것으로 생각되며; HC-HA는 또한 기저 폐 섬유증으로부터 자주 발생하는 병태인 특발성 폐동맥 고혈압 환자의 절제된 폐 조직에서 검출되었다. TSG-6은 또한 HC 변형 없이 HA에 결합하고 이를 비공유적으로 가교결합시키며; 이 HA 가교결합은 백혈구에 결합하여 이를 비활성화된 상태로 유지한다.

종합적으로, 이러한 발견은 TSG-6의 HC-HA 전달 활성을 억제하는데 유용한 약제의 개발이 만성 염증성 질환, 섬유성 질환 및 암을 포함하여 높은 섬유아세포 활성 및 세포외 매트릭스 함량을 포함하는 질환에서 큰 이점이 될 것임을 시사한다.

일 양태에서, 본 발명은 신규한 항-TSG-6 항체에 관한 것이다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(heavy chain variable region) 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(light chain variable region)을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 14의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 23의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 25의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 27을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 28을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 29를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 30을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 31을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 32를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 33을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 34를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 35를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 36을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 37을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 38을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 39를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 40을 포함하는 vhCDR2, 서열번호41를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 42를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 43을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 44를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 45를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 46을 포함하는 vhCDR2, 서열번호47을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 48을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 49를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 50을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 51을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 52를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 53을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 54를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 55를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 56을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 57을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 58을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 59를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 60을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 61을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 62을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 63을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 64를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 65를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 66을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 67을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 68을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 69를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 70을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 71를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 72를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 73을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 74를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 75를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 76을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 77을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 78을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 79를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 80을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 81을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 82를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 83을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 84를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 85를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 86을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 87을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 88을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 89를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 90을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 91을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 92를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 93을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 94를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 95를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 96을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 97을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 98을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 99를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 100을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 101을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 102를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 103을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 104를 포함하는 vlCDR3을 포함한다.

일부 실시형태에서, 본원에 기재된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 결합한다.

일부 실시형태에서, 본원에 기재된 항-TSG-6 항체는 인간 IgG와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 불변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, IgG는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 중에서 선택된다. 일부 실시형태에서, IgG는 IgG1이다. 일부 실시형태에서, IgG는 IgG2b이다.

다른 양태에서, 본 발명은 본원에 기재된 항-TSG-6 항체들 중 어느 하나를 인코딩하는 핵산 조성물에 관한 것이다. 일부 실시형태에서, 핵산 조성물은 중쇄를 포함하는 제1 핵산 및 경쇄를 포함하는 제2 핵산을 포함한다.

본 발명의 다른 양태는 본원에 기재된 항-TSG-6 항체들 중 어느 하나를 인코딩하는 핵산 조성물들 중 어느 하나를 포함하는 발현 벡터 조성물에 관한 것이다. 일부 실시형태에서, 제1 핵산은 제1 발현 벡터에 함유되고 제2 핵산은 제2 발현 벡터에 함유된다. 일부 다른 실시형태에서, 제1 핵산 및 제2 핵산은 단일 발현 벡터에 포함된다.

본 발명의 다른 양태는 본원에 기재된 발현 벡터들 중 어느 하나를 포함하는 숙주 세포에 관한 것이다. 또한 항-TSG-6 항체를 제조하는 방법이 제시되는데, 상기 방법은 상기 항체가 발현된 조건 하에서 숙주 세포를 배양하는 단계, 및 상기 항체를 회수하는 단계를 포함한다.

다른 양태에서, 본 발명은 본원에 기재된 항-TSG-6 항체들 중 어느 하나 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 조성물에 관한 것이다.

또한 대상체에서 면역 반응을 조절하는 방법이 기술되는데, 본 방법은 본원에 기재된 항-TSG-6 항체들 중 어느 하나 또는 본원에 기재된 조성물들 중 어느 하나의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 방법은 대상체에서 면역 반응을 자극하고, 본 방법은 TSG-6 길항제로서 작용하는 항-TSG-6 항체 또는 그의 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 방법은 대상체에서 면역 반응을 억제하고, 본 방법은 TSG-6 작용제로서 작용하는 항-TSG-6 항체 또는 그의 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.

추가 실시형태에서, 상기 중 임의의 것에 따르면, 본 개시내용은 항체가 TSG-6 길항제로서 작용하는 항체의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 대상체에서 암을 치료하는 방법을 기재한다. 일부 실시형태에서, 치료되는 암은 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 추가 실시형태에서, 치료될 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 암은 고형 종양이다. 추가 실시형태에서, 암은 흑색종이다. 일부 실시형태에서, 항체는 암을 치료하기 위해 하나 이상의 추가 치료제와 조합된다. 추가 실시형태에서, 추가 치료제는 다른 면역 체크포인트 억제제(immune checkpoint inhibitor)이다. 일부 실시형태에서, 면역 체크포인트 억제제는 PD-1 억제제, PD-L1 억제제, CTLA-4 억제제, TIM-3 억제제, 및 LAG-3 억제제로 이루어진 군으로부터 선택된다.

다른 양태에서, 본 발명은 대상체에게 유효량의 항체를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 섬유증을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 항체는 TSG-6 길항제로서 작용한다. 일부 실시형태에서, 섬유성 조직은 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서 치료될 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 항체는 섬유증을 치료하기 위해 하나 이상의 추가 치료제와 조합된다.

다른 양태에서, 본 발명은 대상체에게 유효량의 항체를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 항체는 TSG-6 길항제로서 작용한다. 일부 실시형태에서, 자가면역 또는 염증성 장애는 특발성 폐동맥 고혈압이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 대상체는 또한 폐 섬유증을 갖는다. 일부 실시형태에서, 항체는 폐동맥 고혈압 및/또는 폐 섬유증을 치료하기 위해 하나 이상의 추가 치료제와 조합된다. 일부 실시형태에서, 자가면역 또는 염증성 장애는 천식이다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 폐에서 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 기도 호산구 증가증을 갖는다.

다른 양태에서, 본 발명은 대상체에게 유효량의 항체를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 항체는 TSG-6 작용제로서 작용한다. 일부 실시형태에서, 자가면역 또는 염증성 장애는 류마티스 관절염이다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 낮은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 항체는 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하기 위해 하나 이상의 추가 치료제와 조합된다.

본 발명은 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 항-TSG-6 항체에 관한 것이다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 75를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 76을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 77을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 78을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 79를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 80을 포함하는 vlCDR3을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 결합한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 인간 IgG와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 불변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 인간 IgG는 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4로 구성된 군에서 선택된다. 일부 실시형태에서, IgG는 IgG1이다.

다른 양태에서, 본 발명은 본원에 기재된 항-TSG-6 항체를 인코딩하는 핵산 조성물에 관한 것이다.

다른 양태에서, 본 발명은 본원에 기재된 항-TSG-6 항체를 인코딩하는 핵산 조성물에 관한 것이다. 일부 실시형태에서, 핵산 조성물은 중쇄를 포함하는 제1 핵산 및 경쇄를 포함하는 제2 핵산을 포함한다.

본 발명의 다른 양태는 본원에 기재된 항-TSG-6 항체를 인코딩하는 핵산 조성물들 중 어느 하나를 포함하는 발현 벡터 조성물에 관한 것이다. 일부 실시형태에서, 제1 핵산은 제1 발현 벡터에 함유되고 제2 핵산은 제2 발현 벡터에 함유된다. 일부 다른 실시형태에서, 제1 핵산 및 제2 핵산은 단일 발현 벡터에 포함된다.

본 발명의 다른 양태는 본원에 기재된 발현 벡터들 중 어느 하나를 포함하는 숙주 세포에 관한 것이다. 또한 항-TSG-6 항체를 제조하는 방법이 제시되는데, 상기 방법은 상기 항체가 발현된 조건 하에서 숙주 세포를 배양하는 단계, 및 상기 항체를 회수하는 단계를 포함한다.

다른 양태에서, 본 발명은 본원에 기재된 항-TSG-6 항체 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 조성물에 관한 것이다.

다른 양태에서, 본 발명은 대상체에서 면역 반응을 조절하는 방법에 관한 것이며, 본 방법은 본원에 기재된 항-TSG-6 항체 또는 본원에 기재된 조성물들 중 어느 하나의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 방법은 대상체에서 면역 반응을 자극하고, 본 방법은 TSG-6 길항제로서 작용하는 항-TSG-6 항체 또는 그의 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.

다른 양태에서, 본 발명은 대상체에게 유효량의 항-TSG-6 항체를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 암을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 항체는 TSG-6 길항제로서 작용한다. 일부 실시형태에서, 암은 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 암은 고형 종양이다. 일부 실시형태에서, 암은 흑색종이다. 일부 실시형태에서, 항체는 암을 치료하기 위해 하나 이상의 추가 치료제와 조합된다. 일부 실시형태에서, 추가 치료제는 다른 면역 체크포인트 억제제이다. 일부 실시형태에서, 다른 면역 체크포인트 억제제는 PD-1 억제제, PD-L1 억제제, CTLA-4 억제제, TIM-3 억제제, 및 LAG-3 억제제로 이루어진 군으로부터 선택된다.

다른 양태에서, 본 발명은 대상체에게 유효량의 항-TSG-6 항체를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 섬유증을 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 항체는 TSG-6 길항제로서 작용한다. 일부 실시형태에서, 섬유성 조직은 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 항체는 섬유증을 치료하기 위해 하나 이상의 추가 치료제와 조합된다.

다른 양태에서, 본 발명은 대상체에게 유효량의 항체를 투여하는 것을 포함하는, 대상체에서 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하는 방법에 관한 것이며, 여기서 항체는 TSG-6 길항제로서 작용한다. 일부 실시형태에서, 자가면역 또는 염증성 장애는 특발성 폐동맥 고혈압이다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 또한 폐 섬유증을 갖는다. 일부 실시형태에서, 항체는 폐동맥 고혈압 및/또는 폐 섬유증을 치료하기 위해 하나 이상의 추가 치료제와 조합된다. 일부 실시형태에서, 자가면역 또는 염증성 장애는 천식이다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 폐에서 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 기도 호산구 증가증을 갖는다. 일부 실시형태에서, 항체는 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하기 위해 하나 이상의 추가 치료제와 조합된다.

본 발명은 첨부된 도면과 함께 읽을 때 다음의 상세한 설명으로부터 가장 잘 이해될 수 있다. 도면에는 다음의 도면이 포함된다.
도 1은 항-TSG-6 항체에 의한 TSG-6에 대한 HA 결합의 억제를 나타낸다.
도 2는 항-TSG-6 항체에 의한 TSG-6 HC-HA 트랜스에스테라제 활성의 억제를 나타낸다.
도 3은 항-TSG-6 항체의 약력학을 나타낸다.
도 4a 내지 4c는 CAF와 공동 주사된 B16F0 흑색종 세포로부터 발생하는 종양에서 항-TSG-6 항체의 항종양 활성을 나타낸다.
도 5a 내지 5e는 항-TSG-6 항체의 항종양 활성 및 그의 항-PD-1과의 조합 활성을 나타낸다.

본 개시내용은 신규한 항-TSG-6 항체를 제공한다. 본원에 기재된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 결합한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 높은 친화도로 결합한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 기능적 TSG-6 길항제로서 작용하고, TSG-6에 결합할 때 TSG-6과 HA의 상호작용을 차단하고 HC-HA 트랜스에스테라제 활성을 차단한다. 일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 기능적 TSG-6 작용제로서 작용하고, TSG-6에 결합할 때 TSG-6과 HA의 상호작용을 증가시키고, HC-HA 트랜스에스테라제 활성을 촉진한다. 또한, 본 개시내용에서는, 대상체에서 면역 반응을 조절하고, 예를 들어 암, 섬유증, 또는 천식을 비제한적으로 포함하는 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하기 위해 이러한 항체를 사용하는 방법이 제공된다.

본 발명의 이해를 용이하게 하기 위해, 다수의 용어 및 구문이 아래에 정의된다.

본원에서 사용되는 바와 같이, 다음 용어들의 각각은 본 섹션에서 그와 관련된 의미를 갖는다.

단수 표현(영문 관사 "a" 및 "an"에 대응)은 관사의 문법적 대상 중 하나 또는 하나 초과(즉, 적어도 하나)를 지칭하기 위해 본원에서 사용된다. 예로서, "요소"는 하나의 요소 또는 하나 이상의 요소를 의미한다.

양, 시간적 지속기간 등과 같은 측정 가능한 값을 지칭할 때 본원에서 사용되는 "약"은 명시된 값으로부터 ±20% 또는 ±10%, 더 바람직하게는 ±5%, 더욱더 바람직하게는 ±1%, 여전히 더 바람직하게는 ±0.1%의 변동을 포함하도록 의도되며, 그러한 변동은 개시된 방법을 수행하기에 적절하기 때문이다.

본원에서 "절제"란 활성의 감소 또는 제거를 의미한다. 따라서, 예를 들어, "FcγR 결합의 절제"는 Fc 영역 아미노산 변이체가 특정 변이체를 포함하지 않는 Fc 영역과 비교하여 50% 미만의 출발 결합을 갖는 것을 의미하며, 이때 70-80-90-95-98% 미만의 활성 손실이 바람직하고, 일반적으로 활성은 Biacore 분석에서 검출 가능한 결합 수준 미만이다.

본원에 사용되는 "ADCC" 또는 "항체 의존적 세포 매개 세포독성"이란, FcγR을 발현하는 비(非)특이적 세포독성 세포가 표적세포 상의 결합된 항체를 인식하고, 이어서 표적세포의 용해를 유발하는 세포 매개 반응을 의미한다. ADCC는 FcγRIIIa에 대한 결합과 상관관계가 있고, FcγRIIIa에 대한 결합 증가는 ADCC 활성을 증가시킨다. 본원에 논의된 바와 같이, 본 발명의 다수의 실시형태는 ADCC 활성을 완전히 제거한다.

본원에 사용되는 "ADCP" 또는 항체 의존적 세포 매개 포식작용(phagocytosis)이란, FcγR을 발현하는 비특이적 세포독성 세포가 표적세포 상의 결합된 항체를 인식하고, 이어서 표적세포의 포식작용을 유발하는 세포 매개 반응을 의미한다.

본원에서 "항원 결합 도메인" 또는 "ABD"란 본원에 기술된 바와 같이 폴리펩티드 서열의 일부로서 존재할 때 표적 항원에 특이적으로 결합하는 6개의 상보성 결정 영역(CDR)의 세트를 의미한다. 따라서, "항원 결합 도메인"은 본원에 요약된 바와 같이 표적 항원에 결합한다. 당업계에 공지된 바와 같이, 이들 CDR은 일반적으로 제1 세트의 가변 중 CDR(vhCDR 또는 VHCDR 또는 CDR-HC) 및 제2 세트의 가변 경 CDR(vlCDR 또는 VLCDR 또는 CDR-LC)로서 존재하며, 각각은 3개의 CDR을 포함한다: 중쇄의 경우 vhCDR1, vhCDR2, vhCDR3, 및 경쇄의 경우 vlCDR1, vlCDR2 및 vlCDR3. CDR은 가변 중 및 가변 경 도메인에 각각 존재하고 함께 Fv 영역을 형성한다. 따라서, 일부 경우에, 항원 결합 도메인의 6개의 CDR은 가변 중쇄 및 가변 경쇄에 의해 제공된다. "Fab" 형식에서, 6개의 CDR의 세트는 가변 중 도메인(vh 또는 VH; vhCDR1, vhCDR2 및 vhCDR3을 포함) 및 가변 경 도메인(vl 또는 VL; vlCDR1, vlCDR2 및 vlCDR3을 포함)인 2개의 상이한 폴리펩티드 서열에 의해 제공되며, vh 도메인의 C 말단은 중쇄의 CH1 도메인의 N 말단에 부착되고, vl 도메인의 C 말단은 불변 경쇄 도메인의 N 말단에 부착된다(이에 따라 경쇄를 형성함). scFv 형식에서, VH 도메인과 VL 도메인은 일반적으로 본원에 개괄된 바와 같은 링커의 사용을 통해 단일 폴리펩티드 서열 내에 공유결합으로 부착되고, 이는 (N-말단에서 시작하여) vh-링커-vl 또는 vl-링커-vh일 수 있으며, 일반적으로 전자가 바람직하다(사용된 형식에 따라 각 측부에 선택적 도메인 링커를 포함함). 당업계에서 이해되는 바와 같이, CDR은 가변 중 및 가변 경 도메인 각각에서 프레임워크(framework) 영역에 의해 분리되며: 경 가변 영역의 경우, 이들은 FR1-vlCDR1-FR2-vlCDR2-FR3-vlCDR3-FR4이고, 중 가변 영역의 경우, 이들은 FR1-vhCDR1-FR2-vhCDR2-FR3-vhCDR3-FR4이며, 프레임워크 영역은 인간 생식 계열 서열에 높은 동일성(identity)을 나타낸다. 본 발명의 항원 결합 도메인은 Fab, Fv 및 scFv를 포함한다.

본원에서 "링커(linker)"는 scFv 및/또는 다른 항체 구조에 사용되는 링커를 의미한다. 일반적으로, 재조합 기술에 의해 생성된 전통적인 펩티드 결합을 포함하여 사용될 수 있는 다수의 적합한 scFv 링커가 있다. 링커 펩티드는 주로 Gly, Ser, Ala, 또는 Thr의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 링커 펩티드는 원하는 활성을 유지하도록 서로에 대해 알맞은 형태를 가정하는 방식으로 2개의 분자를 연결하기에 적절한 길이를 가져야 한다. 일 실시형태에서, 링커는 약 1 내지 50개 아미노산 길이, 바람직하게는 약 1 내지 30개 아미노산 길이이다. 일 실시형태에서, 1 내지 20개 아미노산 길이의 링커가 사용될 수 있으며, 일부 실시형태에서는 약 5 내지 약 10개 아미노산이 사용된다. 유용한 링커는 예를 들어 (GS)n, (GSGGS)n, (GGGGS)n 및 (GGGS)n - 여기서 n은 1 이상(및 일반적으로 3 내지 4)의 정수임 - 을 포함하는 글리신-세린 중합체, 글리신-알라닌 중합체, 알라닌-세린 중합체 및 기타 유연한 링커를 포함한다. 대안적으로, 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 폴리프로필렌 글리콜, 폴리옥시알킬렌, 또는 폴리에틸렌 글리콜과 폴리프로필렌 글리콜의 공중합체를 포함하나 이에 제한되지 않는 다양한 비단백질성 중합체가 링커로서 사용될 수 있으며, 즉 링커로서 사용될 수 있다. 다른 링커 서열은 CL/CH1 도메인의 모든 잔기가 아니고 임의의 길이의 CL/CH1 도메인의 임의의 서열, 예를 들어 CL/CH1 도메인의 처음 5개 내지 12개의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 링커는 면역글로불린 경쇄, 예를 들어 Cκ 또는 Cλ로부터 유도될 수 있다. 링커는 예를 들어 Cγ1, Cγ2, Cγ3, Cγ4, Cα1, Cα2, Cδ, Cε, 및 Cμ를 포함하는 임의의 이소타입의 면역글로불린 중쇄로부터 유도될 수 있다. 링커 서열은 또한 다른 단백질, 예컨대 Ig-유사 단백질(예를 들어, TCR, FcR, KIR), 힌지 영역 유래 서열, 및 다른 단백질로부터의 다른 천연 서열로부터 유도될 수 있다. 일부 실시형태에서, 링커는 본원에 개괄된 바와 같이 임의의 2개의 도메인을 함께 연결하는 데 사용되는 "도메인 링커"이다. 임의의 적합한 링커가 사용될 수 있는 한편, 많은 실시형태는 예를 들어 (GS)n, (GSGGS)n, (GGGGS)n 및 (GGGS)n - 여기서 n은 1 이상의 정수(일반적으로 3 내지 4 내지 5)임 - 을 포함하는 글리신-세린 중합체, 뿐만 아니라 각각의 도메인이 이의 생물학적 기능을 보유하도록 충분한 길이 및 유연성을 갖는 2개 도메인의 재조합 부착을 가능하게 하는 임의의 펩타이드 서열을 이용한다.

용어 "항체"는 가장 넓은 의미로 사용되며, 예를 들어 온전한 면역글로불린 또는 항원 결합 부분을 포함한다. 항원 결합 부분은 재조합 DNA 기술 또는 온전한 항체의 효소적 또는 화학적 절단에 의해 생성될 수 있다. 따라서 용어 항체는 Fv, Fab 및 scFv와 같은 항원 결합 단편뿐만 아니라 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄의 전통적인 4량체 항체를 포함한다. 일부 경우에서, 본 발명은 본원에 개략된 바와 같은 적어도 하나의 항원 결합 도메인을 포함하는 이중특이성(bispecific) 항체를 제공한다.

본원에서 "변형"이란, 폴리펩티드 서열에서의 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실, 또는 단백질에 화학적으로 연결된 모이어티에 대한 변경을 의미한다. 예를 들어, 변형은 단백질에 부착된 변경된 탄수화물 또는 PEG 구조일 수 있다. 본원에서 "아미노산 변형"이란, 폴리펩티드 서열에서의 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실을 의미한다. 명확성을 위해, 달리 언급되지 않는 한, 아미노산 변형은 항상 DNA에 의해 코딩된 아미노산, 예를 들어 DNA 및 RNA에 코돈을 갖는 20개의 아미노산에 대한 것이다.

본원에서 "아미노산 치환" 또는 "치환"이란, 모(parent) 폴리펩티드 서열에서 특정 위치의 아미노산을 상이한 아미노산으로 대체하는 것을 의미한다. 특히, 일부 실시형태에서, 치환은 특정 위치에서 자연적으로 발생하지 않거나, 유기체 내에서 또는 임의의 유기체에서 자연적으로 발생하지 않는 아미노산에 대한 것이다. 예를 들어, 치환 M252Y는 변이 폴리펩티드, 이 경우 252번 위치의 메티오닌이 티로신으로 대체된 Fc 변이체를 나타낸다. 명확하게 하기 위해, 핵산 코딩 서열을 변화시키지만 출발 아미노산을 변화시키지 않도록 조작된 단백질 (예를 들어, CGG (아르기닌을 인코딩함)을 CGA (여전히 아르기닌을 인코딩함)와 교환하여 숙주 유기체 발현 수준을 증가시킴)은 "아미노산 치환"이 아니며; 즉, 동일한 단백질을 인코딩하는 새로운 유전자의 생성에도 불구하고, 단백질이 시작하는 특정 위치에서 동일한 아미노산을 가지면, 이는 아미노산 치환이 아니다.

본원에서 사용되는 "변이 단백질", "단백질 변이체" 또는 "변이체"란, 적어도 하나의 아미노산 변형에 의해 모 단백질과 다른 단백질을 의미한다. 단백질 변이체는 단백질 자체, 단백질을 포함하는 조성물, 또는 이를 인코딩하는 아미노산 서열을 나타낼 수 있다. 바람직하게는, 단백질 변이체는 모 단백질과 비교하여 적어도 하나의 아미노산 변형, 예를 들어 모 단백질과 비교하여 약 1 내지 약 70개의 아미노산 변형, 바람직하게는 약 1개 내지 약 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 하기에 기재되는 바와 같이, 일부 실시형태에서, 모 폴리펩티드, 예를 들어 Fc 모 폴리펩티드는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4의 Fc 영역과 같은, 인간 야생형 서열이다. 본원의 단백질 변이체 서열은 바람직하게는 모 단백질 서열과 적어도 약 80%의 동일성, 가장 바람직하게는 적어도 약 90%의 동일성, 더욱 바람직하게는 적어도 약 95%-98%-99%의 동일성을 보유할 것이다. 변이 단백질은 변이 단백질 자체, 단백질 변이체를 포함하는 조성물, 또는 이를 인코딩하는 DNA 서열을 나타낼 수 있다.

따라서, 본원에서 사용되는 "항체 변이체" 또는 "변이 항체"란, 적어도 하나의 아미노산 변형에 의해 모 항체와 다른 항체를 의미하고, 본원에서 사용되는 "IgG 변이체" 또는 "변이 IgG"란, 적어도 하나의 아미노산 변형에 의해 모 IgG(다시 말해서, 다수의 경우에, 인간 IgG 서열)와 다른 항체를 의미하고, 본원에서 사용되는 "면역글로불린 변이체" 또는 "변이 면역글로불린"이란, 적어도 하나의 아미노산 변형에 의해 모 면역글로불린 서열과 다른 면역글로불린 서열을 의미한다. 본원에서 사용되는 "Fc 변이체" 또는 "변이 Fc"는, Fc 도메인에 아미노산 변형을 포함하는 단백질을 의미한다. 본 발명의 Fc 변이체는 이를 이루는 아미노산 변형에 따라 정의된다. 따라서, 예를 들어 M252Y 또는 252Y는 모 Fc 폴리펩티드에 비해 252 위치에 티로신 치환을 갖는 Fc 변이체이며, 여기서 넘버링은 EU 인덱스에 따른다. 마찬가지로, M252Y/S254T/T256E는 모 Fc 폴리펩티드에 비해 치환 M252Y, S254T 및 T256E를 갖는 Fc 변이체로 정의된다. 야생형 아미노산의 정체성(identity)은 특정되지 않을 수 있으며, 이 경우 전술한 변이체는 252Y/254T/256E로 지칭된다. 치환이 제공되는 순서는 임의적이며, 즉, 예를 들어 252Y/254T/256E는 254T/252Y/256E와 동일한 Fc 변이체라는 것 등에 주목해야 한다. 항체와 관련된 본 발명에서 논의된 모든 위치에 대해, 달리 언급되지 않는 한, 아미노산 위치 넘버링은 가변 영역 넘버링의 경우 카밧(Kabat)에 따르고 Fc 영역을 포함하는 불변 영역의 경우 EU 인덱스에 따른다. EU 인덱스 또는 카밧 또는 EU 넘버링 체계에서와 같은 EU 인덱스는 EU 항체의 넘버링을 지칭한다(문헌[Edelman et al., 1969, Proc Natl Acad Sci USA 63:78-85], 그 전체 내용이 본원에 인용됨). 변형은 첨가, 결실 또는 치환일 수 있다. 치환은 자연 발생 아미노산, 및 일부 경우에 합성 아미노산을 포함할 수 있다.

본원에서 사용되는 "단백질"이란, 적어도 2개의 공유결합으로 부착된 아미노산을 의미하며, 이에는 단백질, 폴리펩티드, 올리고펩티드 및 펩티드가 포함된다. 펩티딜기는 자연 발생 아미노산 및 펩티드 결합을 포함할 수 있다.

본원에서 사용되는 "Fab" 또는 "Fab 영역"이란, VH, CH1, VL 및 CL 면역글로불린 도메인을 포함하는 폴리펩티드를 의미한다. Fab는 분리된 이 영역, 또는 전장 항체, 항체 단편 또는 Fab 융합 단백질의 맥락에서 이 영역을 지칭할 수 있다.

본원에서 사용되는 "Fv" 또는 "Fv 단편" 또는 "FV 영역"이란, 단일 항원 결합 도메인(ABD)의 VL 도메인 및 VH 도메인을 포함하는 폴리펩티드를 의미한다. 당업자가 이해하는 바와 같이, 이는 일반적으로 2개의 사슬로 이루어져 있거나, (일반적으로 본원에 논의된 바와 같은 링커를 이용하여) 조합되어 scFv를 형성할 수 있다.

본원에서 사용되는 "아미노산" 및 "아미노산 정체성"이란, DNA 및 RNA에 의해 코딩되는 20개의 자연 발생 아미노산 중 하나를 의미한다.

본원에 사용되는 "이펙터 기능"이란, 항체 Fc 영역과 Fc 수용체 또는 리간드의 상호작용으로부터 초래되는 생화학적 사건을 의미한다. 이펙터 기능에는 ADCC, ADCP 및 CDC가 포함되지만, 이에 제한되지는 않는다.

본원에서 사용되는 "모 폴리펩티드"란, 변이체를 생성하기 위해 후속으로 변형되는 출발 폴리펩티드를 의미한다. 모 폴리펩티드는 자연 발생 폴리펩티드, 또는 자연 발생 폴리펩티드의 변이체 또는 조작된 버전일 수 있다. 모 폴리펩티드는 폴리펩티드 자체, 모 폴리펩티드를 포함하는 조성물, 또는 이를 인코딩하는 아미노산 서열을 지칭할 수 있다. 따라서, 본원에서 사용되는 "모 면역글로불린"이란, 변이체를 생성하기 위해 변형되는 변형되지 않은 면역글로불린 폴리펩티드를 의미하고, 본원에서 사용되는 "모 항체"란, 변이 항체를 생성하기 위해 변형되는 변형되지 않은 항체를 의미한다. "모 항체"는 하기에 개괄되는 바와 같이 공지된 상업적이고 재조합적으로 생산된 항체를 포함한다는 점에 주목해야 한다.

본원에서 "중 불변 영역"이란 일반적으로 인간 IgG1, IgG2 또는 IgG4로부터의 항체의 CH1-힌지-CH2-CH3 부분을 의미한다.

본원에서 사용된 "표적 항원"이란, 주어진 항체의 가변 영역에 의해 특이적으로 결합하는 분자를 의미한다. 본 경우, 표적 항원은 BTLA 단백질이다.

본원에서 사용되는 "표적 세포"란, 표적 항원을 발현하는 세포를 의미한다.

본원에서 사용되는 "가변 영역"은 카파, 람다 및 중쇄 면역글로불린 유전자 자리를 각각 만드는 V.카파, V.람다 및/또는 VH 유전자 중 임의의 것에 의해 실질적으로 인코딩되는 하나 이상의 Ig 도메인을 포함하는 면역글로불린의 영역을 의미한다.

본원에서 "야생형 또는 WT"란, 대립유전자 변이를 포함하는, 자연에서 발견되는 아미노산 서열 또는 뉴클레오타이드 서열을 의미한다. WT 단백질은 의도적으로 변형되지 않은 아미노산 서열 또는 뉴클레오타이드 서열을 갖는다.

본원에서 사용되는 "위치"란, 단백질 서열 내 위치를 의미한다. 위치는 순차적으로, 또는 확립된 형식, 예를 들어 항체 넘버링에 대한 EU 인덱스에 따라 넘버링될 수 있다.

본원에서 사용되는 "잔기"란, 단백질 및 이의 관련 아미노산 정체의 위치를 의미한다. 예를 들어, 아스파라긴 297(Asn297 또는 N297로도 지칭됨)은 인간 항체 IgG1에서 297번 위치의 잔기이다.

본 발명의 항체는 일반적으로 재조합된다. "재조합"은 항체가 외인성 숙주 세포에서 재조합 핵산 기술을 사용하여 생성되는 것을 의미한다.

단백질 서열에 대한 "아미노산 서열 동일성 백분율(%)"은 서열을 정렬하고, 필요한 경우 갭을 도입하여 최대 서열 동일성%를 달성하고, 임의의 보존적 치환을 서열 동일성의 일부로서 간주하지 않은 후, 특정 (모) 서열의 아미노산 잔기와 동일한 후보 서열 내 아미노산 잔기의 백분율(%)로 정의된다. 아미노산 서열 동일성%를 결정하기 위한 정렬은, 예를 들어 BLAST, BLAST-2, ALIGN 또는 Megalign(DNASTAR) 소프트웨어와 같은 공개적으로 이용 가능한 컴퓨터 소프트웨어를 사용하여 당업계의 기술에 속하는 다양한 방식으로 달성될 수 있다. 당업자는, 비교되는 서열의 전체 길이에 대하여 최대 정렬을 달성하는 데 필요한 임의의 알고리즘을 포함하여, 정렬 측정을 위한 적절한 파라미터를 결정할 수 있다. 하나의 특정한 프로그램은 미국 특허출원공개 제20160244525호의 단락 [0279] 내지 [0280]에 개괄된 ALIGN-2 프로그램이며, 상기 문헌은 본원에 참조로서 인용된다. 핵산 서열에 대한 다른 대략적인 정렬은 문헌[Smith and Waterman, Advances in Applied Mathematics, 2:482-489 (1981)]의 로컬 상동성 알고리즘에 의해 제공된다. 이 알고리즘은 Dayhoff에 의해 개발되고(문헌[Dayhoff, Atlas of Protein Sequences and Structure, M.O. Dayhoff ed., 5 suppl. 3:353-358, National Biomedical Research Foundation, Washington, D.C., USA]), Gribskov에 의해 정규화된(문헌[Gribskov, Nucl. Acids Res. 14(6):6745-6763 (1986)]) 스코어링 매트릭스를 사용하여 아미노산 서열에 적용될 수 있다.

서열의 동일성%을 결정하기 위한 이 알고리즘 구현의 예는 "BestFit" 유틸리티 애플리케이션으로 Genetics Computer Group(Madison, WI)에 의해 제공된다. 이 방법에 대한 디폴트(default) 파라미터는 문헌[Wisconsin Sequence Analysis Package Program Manual, Version 8 (1995)](Genetics Computer Group(Madison, WI)으로부터 입수 가능)에 기재되어 있다. 본 발명의 맥락에서 동일성%을 설정하는 다른 방법은 John F. Collins 및 Shane S. Sturrok에 의해 개발되고 University of Edinburgh가 저작권을 보유하며 IntelliGenetics, Inc.(Mountain View, CA)에 의해 배포되는 프로그램의 MPSRCH 패키지를 사용하는 것이다. 이 패키지 모음에서, Smith-Waterman 알고리즘은 디폴트 파라미터가 스코어링 테이블에 사용되는 경우에(예를 들어, 갭 개방 패널티 12, 갭 확장 패널티 1, 갭 6) 사용될 수 있다. 생성된 데이터에서 "매칭(Match)" 값은 "서열 동일성"을 반영한다. 서열들 간의 동일성 또는 유사성 백분율을 계산하기 위한 다른 적합한 프로그램은 일반적으로 당업계에 공지되어 있으며, 예를 들어, 다른 정렬 프로그램은 디폴트 파라미터와 함께 사용되는 BLAST이다. 예를 들어, BLASTN 및 BLASTP는 다음의 디폴트 파라미터를 사용하여 사용될 수 있다: 유전 코드 = 표준; 필터 = 없음; 가닥 = 둘 다; 컷오프 = 60; 기대 = 10; 매트릭스 = BLOSUM62; 설명 = 50개의 서열; 정렬 기준 = HIGH SCORE; 데이터베이스 = 비중복(non-redundant), GenBank + EMBL + DDBJ + PDB + GenBank CDS 번역 + 스위스 단백질 + Spupdate + PIR. 이러한 프로그램에 대한 자세한 내용은 http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi의 인터넷 주소에서 찾을 수 있다.

본 발명의 아미노산 서열("발명 서열")과 모 아미노산 서열 사이의 동일성 정도는, 2개 서열의 정렬에서 정확한 매칭의 수를, "발명 서열"의 길이 또는 모 서열의 길이(어느 것이든 가장 짧은 쪽)로 나눈 값으로 계산된다. 결과는 동일성%로 표현된다.

일부 실시형태에서, 2개 이상의 아미노산 서열은 적어도 50%, 60%, 70%, 80% 또는 90% 동일하다. 일부 실시형태에서, 2개 이상의 아미노산 서열은 적어도 95%, 97%, 98%, 99% 또는 심지어 100% 동일하다.

특정 항원 또는 에피토프에 대해 "특이적으로 결합하는" 또는 "특이적으로 결합한다" 또는 "특이적인"은, 비특이적 상호작용과는 측정 가능하게 상이한 결합을 의미한다. 특이적 결합은, 예를 들어 분자의 결합을 일반적으로 결합 활성을 갖지 않는 유사한 구조의 분자인 대조군 분자의 결합과 비교하여 결정함으로써 측정될 수 있다. 예를 들어, 특이적 결합은 표적과 유사한 대조군 분자와의 경쟁에 의해 측정될 수 있다.

본원에 사용되는 용어 "IC₅₀" 또는 "절반의 최대 억제 농도"는 반응(또는 결합)이 절반으로 감소되는 억제제의 농도를 지칭하는 것으로 의도된다. 항체에 대한 IC₅₀ 값은 당업계에 잘 확립된 방법을 사용하여 결정될 수 있다. 일부 실시형태에서, 항체의 IC50을 결정하는 방법은 4-파라미터 로지스틱 모델을 사용하는 것이다.

"질환(disease)"은 인간을 포함한 동물이 항상성을 유지할 수 없는 동물의 건강 상태를 포함하며, 질환이 개선되지 않으면 동물의 건강은 계속 악화된다.

대조적으로, 인간을 포함한 동물의 "장애(disorder)"는 동물이 항상성을 유지할 수 있은 건강 상태를 포함하지만, 동물의 건강 상태가 장애가 없는 경우보다 덜 유리한 상태를 포함한다. 치료하지 않고 방치되면, 장애는 반드시 동물의 건강 상태를 더 악화시키는 것은 아니다. 일부 경우에, "장애"는 "질환"과 서로 교환가능하게 사용될 수 있다.

용어 "치료", "치료하는", "치료하다" 등은, 원하는 약리학적 및/또는 생리학적 효과를 수득하는 것을 지칭한다. 효과는 질환 또는 이의 증상을 완전히 또는 부분적으로 예방하거나 질병 또는 이의 증상의 가능성을 감소시키는 측면에서 예방적일 수 있고/있거나 질환에 대한 부분적 또는 완전한 치유 및/또는 질환에 기인하는 부작용 측면에서 치료적일 수 있다. 본원에서 사용되는 "치료"는 포유류, 특히 인간에서의 질환의 임의의 치료를 포괄하며, (a) 질환에 걸리기 쉬울 수 있지만 아직 걸린 것으로 진단되지 않은 대상체에서 질환이 발생하는 것을 예방하는 것; (b) 질환을 저해하는 것, 즉 이의 발달 또는 진행을 저지하는 것; 및 (c) 질환을 완화시키는 것, 예를 들어, 질환의 퇴행을 야기하는 것 및/또는 하나 이상의 질환 증상을 완화시키는 것을 포함한다. "치료"는 또한 심지어 질환 또는 병태의 부재 하에서도 약리학적 효과를 제공하기 위해 약제의 전달을 포괄하도록 의도된다. 예를 들어, "치료"는, 예를 들어, 백신의 경우, 질환 상태의 부재 하에 면역 반응을 유발하거나 면역력을 부여할 수 있는 조성물의 전달을 포괄한다.

본원에서 사용되는 용어 "포유 동물"은 마우스 및 햄스터와 같은 설치목의 포유 동물 및 토끼와 같은 토끼목의 포유동물을 포함하나 이에 제한되지 않는 임의의 포유 동물을 지칭한다. 일부 실시형태에서, 포유 동물은 고양이류(고양이) 및 개류(개)를 포함하는 식육목에서 유래한다. 일부 실시형태에서, 포유 동물은 소류(소) 및 돼지류(돼지)를 포함하는 소목(Artiodactyla) 또는 말류(말)을 포함하는 말목(Perssodactyla)에서 유래한다. 포유 동물은 영장류, 세보이드 또는 시모이드(원숭이) 목 또는 유인원(Anthropoid)목(인간 및 유인원)인 것이 가장 바람직한다. 일부 실시형태에서, 포유 동물은 인간이다. 일부 실시형태에서, 포유 동물은 사이노몰구스 원숭이이다.

본원에서 사용되는 용어 "회귀(regression)" 및 그로부터 유래된 단어는 반드시 100% 또는 완전한 회귀를 의미하지는 않는다. 오히려, 당업자가 잠재적인 이점 또는 치료 효과를 갖는 것으로 인식하는 다양한 정도의 회귀가 존재한다. 이와 관련하여, 개시되는 방법은 포유 동물에서 암의 회귀의 임의 수준의 임의 양을 제공할 수 있다. 또한, 본 발명의 방법에 의해 제공되는 회귀는 질환, 예를 들어 암의 하나 이상의 상태 또는 증상의 회귀를 포함할 수 있다. 또한, 본원의 목적을 위해, "회귀"는 질환의 발병 지연, 증상의 발병 지연 및/또는 병태의 발병 지연을 포함할 수 있다. 진행성 질환 및 장애와 관련하여, "회귀"는 질환 또는 장애의 진행을 늦추는 것, 질환 또는 장애의 증상의 진행을 늦추는 것, 및/또는 그 병태의 진행을 늦추는 것을 포함할 수 있다.

조성물의 "유효량" 또는 "치료적 유효량"은 조성물이 투여되는 대상체에게 유익한 효과를 제공하기에 충분한 조성물의 양을 포함한다. 전달 비히클의 "유효량"은 조성물을 효과적으로 결합하거나 전달하기에 충분한 양을 포함한다.

"개체" 또는 "숙주" 또는 "대상체" 또는 "환자"는 진단, 치료 또는 처치가 필요한 임의의 포유동물 대상체, 특히 인간을 의미한다. 다른 대상체는 사이노몰구스 원숭이, 소, 개, 고양이, 기니 피그, 토끼, 래트, 마우스, 말 등을 포함할 수 있다.

본원에서 사용되는 용어 "병용(in combination with)"은 예를 들어, 제1 요법(therapy)이 제2 요법의 전체 투여 과정 동안 투여되는 경우; 제1 요법이 제2 요법의 투여와 겹치는 기간 동안 투여되는 경우, 예를 들어 제1 요법의 투여는 제2 요법의 투여 전에 시작되고 제1 요법의 투여는 제2 요법의 투여 전에 종료되는 경우; 제2 요법의 투여는 제1 요법의 투여 전에 시작되고 제2 요법의 투여는 제1 요법의 투여가 종료되기 전에 종료되는 경우; 제1 요법의 투여는 제2 요법의 투여가 시작되기 전에 시작되고 제2 요법의 투여는 제1 요법의 투여가 종료되기 전에 종료되는 경우; 제2 요법의 투여는 제1 요법의 투여가 시작되기 전에 시작되고 제1 요법의 투여는 제2 요법의 투여가 종료되기 전에 종료되는 경우의 사용을 지칭한다. 이와 같이, "병용"은 또한 둘 이상의 요법의 투여를 포함하는 양생법(regimen)을 지칭할 수 있다. 본원에서 사용되는 "병용"은 또한 동일하거나 상이한 제형으로, 동일하거나 상이한 경로에 의해, 동일하거나 상이한 투여 형태 유형으로 투여될 수 있는 둘 이상의 요법의 투여를 지칭한다.

"인코딩(encoding)"은 뉴클레오티드의 정의된 서열(즉, rRNA, tRNA 및 mRNA) 또는 아미노산의 정의된 서열 및 그로부터 초래된 생물학적 특성을 갖는 생물학적 과정에서의 다른 중합체 및 거대분자의 합성을 위한 주형으로서 작용하기 위한 폴리뉴클레오티드, 예를 들어 유전자, cDNA, 또는 mRNA에서의 뉴클레오티드의 특이적 서열의 선천적 특성을 포함한다. 따라서, 유전자는, 예를 들어 그 유전자에 대응하는 mRNA의 전사 및 번역이 세포 또는 다른 생물학적 시스템에서 단백질을 생성하는 경우, 상기 단백질을 인코딩한다. 뉴클레오티드 서열이 mRNA 서열과 동일하고 일반적으로 서열 목록에 제공되는 코딩 가닥, 및 유전자 또는 cDNA의 전사를 위한 주형으로서 사용되는 비코딩 가닥 둘 모두가 그 유전자 또는 cDNA의 단백질 또는 다른 생성물을 인코딩하는 것으로 지칭될 수 있다.

용어 "핵산"은 단일 가닥, 이중 가닥, 올리고뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 임의의 형태로 하나 초과의 뉴클레오티드를 갖는 RNA 또는 DNA 분자를 포함한다. 용어 "뉴클레오티드 서열"은 단일 가닥 형태의 핵산의 올리고뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드에서 뉴클레오티드의 순서를 포함한다.

"핵산 구조물"은 자연에서 함께 발견되지 않는 하나 이상의 기능적 단위를 포함하도록 구성된 핵산 서열을 의미한다. 예는 원형, 선형, 이중 가닥, 염색체 외 DNA 분자(플라스미드), 코스미드(람다 파지의 COS 서열을 포함하는 플라스미드), 비-천연 핵산 서열을 포함하는 바이러스 게놈 등을 포함한다.

본원에서 사용되는 용어 "작동 가능하게 연결된"은 제2 폴리뉴클레오티드와 기능적 관계에 있는 폴리뉴클레오티드, 예를 들어, 2개의 폴리뉴클레오티드 중 적어도 하나가 다른 것에 대해 특징이 되는 생리학적 효과를 발휘할 수 있는 방식으로 핵산 모이어티 내에 배열된 2개의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 단일 가닥 또는 이중 가닥 핵산 모이어티를 포함한다. 예를 들어, 유전자의 코딩 영역에 작동 가능하게 연결된 프로모터는 코딩 영역의 전사를 촉진할 수 있다. 작동 가능한 연결을 표시할 때 지정된 순서는 중요하지 않다. 예를 들어, "프로모터는 뉴클레오티드 서열에 작동 가능하게 연결됨" 및 "뉴클레오티드 서열은 프로모터에 작동 가능하게 연결됨"이라는 구절은 본원에서 상호 교환적으로 사용되며 동등한 것으로 간주된다. 일부 경우에, 원하는 단백질을 인코딩하는 핵산이 프로모터/조절 서열을 추가로 포함하는 경우, 프로모터/조절 서열은 원하는 단백질 코딩 서열의 5' 말단에 위치하여 세포에서 원하는 단백질의 발현을 유도한다.

본원에서 상호 교환적으로 사용되는 용어 "올리고뉴클레오티드", "폴리뉴클레오티드" 및 "핵산 분자"는 리보뉴클레오티드 또는 데옥시리보뉴클레오티드와 같은 임의의 길이의 뉴클레오티드의 중합체 형태를 지칭한다. 따라서, 이 용어는 단일-, 이중- 또는 다중-가닥 DNA 또는 RNA, 게놈 DNA, cDNA, DNA-RNA 하이브리드, 또는 퓨린과 피리미딘 염기, 또는 다른 천연이거나 화학적으로 또는 생화학적으로 변형되거나 비-천연이거나 또는 유도체화된 뉴클레오티드 염기를 포함하는 중합체를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다. 폴리뉴클레오티드의 골격은 당 및 포스페이트 기(전형적으로 RNA 또는 DNA에서 발견될 수 있음), 또는 변형 또는 치환된 당 또는 포스페이트 기를 포함할 수 있다.

폴리뉴클레오티드에 적용되는 용어 "재조합"은 폴리뉴클레오티드가 클로닝, 제한 또는 결찰 단계, 및 자연에서 발견되는 폴리뉴클레오티드와 구별되고/되거나 상이한 구조물을 생성하는 기타 절차의 다양한 조합의 산물임을 의미한다. 이 용어는 각각 원래의 폴리뉴클레오티드 구조물의 복제물과 원래의 바이러스 구조물의 자손을 포함한다.

본원에 사용되는 용어 "프로모터"는 원하는 분자를 인코딩하는 핵산 서열과 같은 전사될 핵산 서열에 작동가능하게 연결된 DNA 서열을 포함한다. 프로모터는 일반적으로 전사될 핵산 서열의 상류에 위치하며 RNA 폴리머라제 및 기타 전사 인자에 의한 특이적 결합 부위를 제공한다.

"벡터"는 유전자 서열을 표적 세포로 전달할 수 있다. 전형적으로, "벡터 구조물", "발현 벡터" 및 "유전자 전달 벡터"는 관심 유전자의 발현을 지시할 수 있고 유전자 서열을 표적 세포로 전달할 수 있는 임의의 핵산 구조물을 의미하며, 이는 벡터의 전부 또는 일부의 게놈 통합 또는 염색체외 요소로서 벡터의 일시적 또는 유전적 유지에 의해 달성될 수 있다. 따라서, 이 용어는 클로닝, 발현 비히클, 통합 벡터를 포함한다.

본원에 사용되는 용어 "조절 요소"는 핵산 서열의 발현의 일부 측면을 제어하는 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 조절 요소의 예는 예시적으로 인핸서(enhancer), 내부 리보솜 진입 부위(IRES), 인트론, 복제 기점, 폴리아데닐화 신호(pA), 프로모터, 인핸서, 전사 종결 서열, 및 상류 조절 도메인을 포함하고, 이는 핵산 서열의 복제, 전사 및/또는 전사후 처리에 기여한다. 경우에 따라, 조절 요소는 또한 시스 조절 DNA 요소와 전이 요소(TE)를 포함할 수 있다. 당업자는 일상적인 실험만으로 발현 구조물에서 이들 및 다른 조절 요소를 선택하고 사용할 수 있다. 발현 구조물은 유전자 재조합 접근법을 사용하거나 잘 알려진 방법을 합성적으로 사용하여 생성될 수 있다.

"제어 요소" 또는 "제어 서열"은 폴리뉴클레오티드의 복제, 복사, 전사, 스플라이싱, 번역 또는 분해를 포함하는 폴리뉴클레오티드의 기능적 조절에 기여하는 분자의 상호작용에 관여하는 뉴클레오티드 서열이다. 조절은 프로세스의 빈도, 속도 또는 특이성에 영향을 미칠 수 있으며 본질적으로 향상되거나 억제될 수 있다. 당업계에 공지된 제어 요소는 예를 들어 프로모터 및 인핸서와 같은 전사 조절 서열을 포함한다. 프로모터는 RNA 중합효소에 결합하고 일반적으로 프로모터의 하류(3' 방향으로)에 위치한 코딩 영역의 전사를 개시하는 특정 조건 하에서 가능한 DNA 영역이다.

본원에서 아미노산 잔기가 '인산화된다'는 표현은 아미노산 잔기의 측쇄에 인산기가 에스테르 결합된다는 것을 의미한다. 인산화될 수 있는 전형적인 아미노산 잔기는 세린(Ser), 트레오닌(Thr) 및 티로신(Tyr)을 포함한다.

본원에서 사용되는 용어 "제약 조성물"은 활성 약제와 불활성 또는 활성 담체의 조합을 지칭하며, 조성물을 생체 내 또는 생체 외 진단 또는 치료 용도에 특히 적합하게 만든다.

본원에서 사용되는 용어 "제약상 허용되는 담체"는 임의의 표준 제약 담체, 에컨대 포스페이트 완충 식염수 용액, 물, 에멀젼(예를 들어, 오일/물 또는 물/오일 에멀젼) 및 다양한 유형의 습윤제를 지칭한다. 조성물은 또한 안정화제 및 방부제를 포함할 수 있다. 담체, 안정화제 및 보조제의 예는 예를 들어 문헌[Martin, Remington's Pharmaceutical Sciences, 15th Ed., Mack Publ. Co., Easton, PA [1975]]을 참조한다.

설명 전반에 걸쳐, 조성물이 특정 성분을 갖거나 함유하거나 포함하는 것으로 기술되는 경우, 또는 공정 및 방법이 특정 단계를 갖거나 함유하거나 포함하는 것으로 기술되는 경우, 추가적으로, 기재된 성분으로 본질적으로 구성되거나 구성되는 본 발명의 조성물이 존재하고, 기재된 처리 단계로 본질적으로 구성되거나 구성되는 본 발명에 따른 공정 및 방법이 존재한다는 것이 고려된다.

일반적으로 백분율을 특정하는 조성물은 달리 특정되지 않는 한 중량 기준이다. 또한 변수에 정의가 수반되지 않으면 변수의 이전 정의가 규제한다.

본 발명의 다양한 양태들이 아래 섹션에서 설명되지만, 하나의 특정 섹션에서 설명된 본 발명의 양태는 임의의 특정 섹션에 제한되지 않는다.

I. 항체

본 개시내용은 신규한 항-TSG-6 항체를 제공한다. 이러한 항체는 인간 및 마우스 TSG-6에 결합한다. 표 1은 표 1에 명시된 바와 같이 조합하여 인간 및 마우스 TSG-6 모두에 결합할 수 있는 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역의 펩티드 서열을 나열한다. 일부 실시형태에서, 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 Fab 형식으로 배열된다. 일부 실시형태에서, 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 함께 융합되어 scFv를 형성한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 1과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 2와 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 27을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 28을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 29를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 30을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 31을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 32를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 3과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 4와 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 33을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 34를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 35를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 36을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 37을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 38을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 5와 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 6과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 39를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 40을 포함하는 vhCDR2, 서열번호41를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 42를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 43을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 44를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 7과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 8과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 45를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 46을 포함하는 vhCDR2, 서열번호47을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 48을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 49를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 50을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 9와 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 10과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 51을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 52를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 53을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 54를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 55를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 56을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 11과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 12와 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 57을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 58을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 59를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 60을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 61을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 62를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 13과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 14와 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 63을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 64를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 65를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 66을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 67을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 68을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 15와 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 16과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 69를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 70을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 71을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 72를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 73을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 74를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 17과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 18과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 75를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 76을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 77을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 78을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 79를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 80을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 19와 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 20과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 81을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 82를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 83을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 84를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 85를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 86을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 21과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 22와 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 87을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 88을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 89를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 90을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 91을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 92를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 23과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 24와 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 93을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 94를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 95를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 96을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 97을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 98을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에서 항-TSG-6 항체는 서열번호 25와 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 26과 적어도 80%(예를 들어, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체는 서열번호 99를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 100을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 101을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 102를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 103을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 104를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 실시형태에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가 실시형태에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 결합을 유지한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본원에 기재된 아미노산 서열 변이체 중 임의의 하나를 인코딩하는 핵산을 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본원에 기재된 임의의 핵산을 포함하는 발현 벡터를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 개시내용은 본원에 기재된 발현 벡터 중 임의의 하나를 포함하는 숙주 세포를 포함한다.

중쇄 및 경쇄 가변 영역 및/또는 CDR에서 본원에 기재된 서열번호 변이체에 추가하여, 중쇄 및/또는 경쇄 가변 영역(들)의 프레임워크 영역(들)의 변화가 이루어질 수 있다. 일부 실시형태에서, 프레임워크 영역의 변이체(예를 들어, CDR 제외)는 생식 계열 서열에 대해 적어도 약 80, 85, 90 또는 95% 동일성을 유지한다. 경쇄 V-GENE, 경쇄 J-GENE, 중쇄 V-GENE, 중쇄 J-GENE 및 중쇄 D-GENE 대립 유전자 중 어느 하나에 대해 적어도 약 80, 85, 90 또는 95% 동일성을 유지하도록 변이체가 만들어질 수 있다.

일부 실시형태에서, 6개의 CDR을 변경되지 않은 상태로 유지하면서 생식 계열 유전자 서열에 대해 적어도 80, 85, 90 또는 95% 동일성을 유지하는 프레임워크 영역에서 변이가 이루어진다.

일부 실시형태에서, 생식 계열 유전자 서열에 대해 적어도 80, 85, 90 또는 95% 동일성을 유지하는 프레임워크 영역 및 6개의 CDR 모두에서 변이가 이루어진다. CDR은 아미노산 변형(예를 들어, CDR의 세트에서 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개의 아미노산 변형)을 가질 수 있다(즉, 6개 CDR의 세트에서 변화의 총 수가 6개 미만의 아미노산 변형인 한 CDR이 변형될 수 있고, CDR의 임의의 조합은 변화되고; 예를 들어 vlCDR1에서 1개의 변화, vhCDR2에서 2개의 변화, vhCDR3에서의 무변화 등이 있을 수 있음).

본원에 기술된 것들로부터 CDR 및/또는 중쇄 및 경쇄의 가변 영역의 아미노산 서열을 선택하고 이들을 항체의 중쇄 및 경쇄의 프레임워크 영역 및/또는 불변 영역의 아미노산 서열과 적절하게 조합함으로써, 당업자는 본 발명에 따른 항-TSG-6 항체를 설계할 수 있을 것이다. 본 발명에 기재된 항체 프레임워크 영역 및/또는 불변 영역(Fc 도메인)은 인간, 토끼, 개, 고양이, 마우스, 말 또는 원숭이와 같은 임의의 종의 항체로부터 유래할 수 있다.

일부 실시형태에서, 불변 영역은 인간으로부터 유래되고, IgG, IgA, IgM, IgE 및 IgD 서브타입 또는 그의 변이체로부터 유래된 중쇄 불변 영역, 및 카파 또는 람다 서브타입 또는 그 변이체로부터 유래된 경쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 실시형태에서, 중쇄 불변 영역은 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4를 포함하는 인간 IgG로부터 유래된다. 일부 실시형태에서, 중쇄 불변 영역의 아미노산 서열은 인간 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 불변 영역과 적어도 80%, 85%, 90% 또는 95% 동일하다. 일부 다른 실시형태에서, 불변 영역의 아미노산 서열은 토끼, 개, 고양이, 마우스, 말 또는 원숭이와 같은 다른 포유동물의 항체 불변 영역과 적어도 80%, 85%, 90% 또는 95% 동일하다. 일부 실시형태에서, 항체 불변 영역은 힌지, CH2 도메인, CH3 도메인 및 선택적으로 CH1 도메인을 포함한다.

일부 실시형태에서, 본원에 기재된 항체는 상이한 종으로부터의 혼합물, 예를 들어 키메라 항체 및/또는 인간화 항체를 형성하는 혼합물로부터 유래될 수 있다. 일반적으로, "키메라 항체" 및 "인간화 항체" 모두는 하나 초과의 종의 영역을 결합하는 항체를 지칭한다. 예를 들어, "키메라 항체"는 전통적으로 마우스(또는 일부 경우에는 래트)의 가변 영역(들) 및 인간의 불변 영역(들)을 포함한다. "인간화 항체"는 일반적으로 인간 항체에서 발견되는 서열로 교체된 가변 도메인 프레임워크 영역을 가진 비인간 항체를 지칭한다. 일반적으로, 인간화 항체에서, CDR을 제외한 전체 항체는 인간 기원의 폴리뉴클레오티드에 의해 인코딩되거나 CDR 내를 제외하고는 이러한 항체와 동일하다. 비인간 유기체에서 유래하는 핵산에 의해 일부 또는 전부가 인코딩되는 CDR은 인간 항체 가변 영역의 베타 시트 프레임워크에 이식되어 항체를 생성하며, 그 특이성은 이식된 CDR에 의해 결정된다. 이러한 항체의 생성은 예를 들어 국제공개 WO 92/11018호, 문헌[Jones, 1986, Nature 321:522-525], 문헌[Verhoeyen et al., 1988, Science 239:1534-1536]에 기재되어 있는데, 이들 모두는 전체적으로 참고로 인용된다. 선택된 수용체 프레임워크 잔기의 대응하는 도너(donor) 잔기로의 "역돌연변이(backmutation)"는 초기 이식된 구조물에서 손실된 친화성을 회복하기 위해 종종 요구된다(US 5530101; US 5585089; US 5693761; US 5693762; US 6180370; US 5859205; US 5821337; US 6054297; US 6407213(이들 모두는 전체가 참조로 인용됨)). 인간화 항체는 또한 최적으로 면역글로불린의 불변 영역의 적어도 일부, 전형적으로 인간 면역글로불린의 일부를 포함할 것이고, 따라서 전형적으로 인간 Fc 영역을 포함할 것이다. 인간화 항체는 또한 문헌[Roque et al., 2004, Biotechnol. Prog.20:639-654](이는 전체가 참고로 인용됨)에 기재된 바와 같이 유전적으로 조작된 면역계를 가진 마우스를 사용하여 생성될 수 있다. 비인간 항체를 인간화하고 재성형하기 위한 다양한 기법 및 방법이 당업계에 널리 공지되어 있다(문헌[Tsurushita & Vasquez, 2004, Humanization of Monoclonal Antibodies, Molecular Biology of B Cells, 533-545, Elsevier Science (USA)] 및 이에 인용된 참고문헌(이들은 모두 전체가 참조로 인용됨) 참조). 인간화 방법은 문헌[Jones et al., 1986, Nature 321:522-525]; 문헌[Riechmann et al.,1988; Nature 332:323-329]; 문헌[Verhoeyen et al., 1988, Science, 239:1534-1536]; 문헌[Queen et al., 1989, Proc Natl Acad Sci, USA 86:10029-33]; 문헌[He et al., 1998, J. Immunol.160: 1029-1035]; 문헌[Carter et al., 1992, Proc Natl Acad Sci, USA 89:4285-9], 문헌[Presta et al., 1997, Cancer Res.57(20):4593-9]; 문헌[Gorman et al., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:4181-4185]; 문헌[O'Connor et al., 1998, Protein Eng 11:321-8](이들 모두는 전체가 참고로 인용됨)에 기재된 방법들을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 비인간 항체 가변 영역의 면역원성을 감소시키는 인간화 또는 다른 방법은, 예를 들어 문헌[Roguska et al., 1994, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:969-973](이는 그 전체가 참조로 인용됨)에 기재된 바와 같은 재표면화(resurfacing) 방법을 포함할 수 있다. 다른 인간화 방법은 CDR의 일부만 이식하는 것을 포함할 수 있으며, 이에는, 비제한적으로, 문헌[Tan et al., 2002, J. Immunol.169:1119-1125]; 문헌[De Pascalis et al., 2002, J. Immunol.169:3076-3084](이들은 모두 그 전체가 참조로 인용됨)에 기재된 방법이 포함된다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 항체는 특정 인간 생식계열 중쇄 면역글로불린 유전자로부터 유래된 중쇄 가변 영역 및/또는 특정 인간 생식계열 경쇄 면역글로불린 유전자로부터 유래된 경쇄 가변 영역을 포함한다. 이러한 항체는 예를 들어 자연 발생 체세포 돌연변이 또는 부위 지정 돌연변이의 의도적 도입으로 인해 인간 생식계열 서열과 비교하여 아미노산 차이를 포함할 수 있다. 그러나, 인간화 항체는 전형적으로 인간 생식계열 면역글로불린 유전자에 의해 인코딩된 아미노산 서열과 아미노산 서열이 적어도 80% 동일하며, 다른 종의 생식계열 면역글로불린 아미노산 서열(예를 들어, 쥣과 생식계열 서열)과 비교할 때 항체를 인간 서열에서 유도된 것으로서 식별하는 아미노산 잔기를 함유한다. 특정 경우에, 인간화 항체는 인간 생식계열 면역글로불린 유전자에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 아미노산 서열이 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%, 또는 심지어 적어도 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일할 수 있다. 전형적으로, 특정 인간 생식계열 서열로부터 유래된 인간화 항체는 인간 생식계열 면역글로불린 유전자에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 10 내지 20개 이하의 아미노산 차이를 나타낼 것이다. 특정 경우에서, 인간화 항체는 생식계열 면역글로불린 유전자에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 5개 이하 또는 심지어 4개, 3개, 2개 또는 1개 이하의 아미노산 차이를 나타낼 수 있다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용의 항체는 당업계에 공지된 바와 같이 인간화되고 친화성 성숙되어 있다. 구조 기반 방법은 예를 들어 미국 특허 제7,657,380호에 기재된 바와 같이 인간화 및 친화성 성숙을 위해 이용될 수 있다. 선택 기반 방법은 항체 가변 영역을 인간화하고/하거나 이의 친화성을 성숙시키기 위해 이용될 수 있으며, 이에는, 비제한적으로, 문헌[Wu et al., 1999, J. Mol. Biol. 294:151-162]; 문헌[Baca et al., 1997, J. Biol. Chem. 272(16):10678-10684]; 문헌[Rosok et al., 1996, J. Biol. Chem. 271(37): 22611-22618]; 문헌[Rader et al., 1998, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 8910-8915]; 문헌[Krauss et al., 2003, Protein Engineering 16(10):753-759](이들은 모두 그 전체가 참조로 인용됨)에 기재된 방법이 포함된다.

II. 항체의 특징

일부 실시형태에서, 본원에 기재된 항-TSG-6 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 결합한다. 일부 실시형태에서, 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 항-TSG-6 항체의 결합은 실시예 2에 기재된 예시적 분석과 같은 ELISA를 사용하여 HA에 대한 결합을 연구함으로써 측정된다. 이러한 실시형태에서, 본원에 기재된 항체는 이러한 분석에 의해 측정될 때 10 내지 2000 nM 범위일 수 있는 IC50을 나타낸다. 일부 실시형태에서, 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 대한 항-TSG-6 항체의 결합은 실시예 2에 기재된 예시적 분석과 같은 ELISA를 사용하여 TSG-6 HC-HA 트랜스에스테라제 활성을 연구함으로써 측정된다. 이러한 실시형태에서, 본원에 기재된 항체는 ELISA에 의해 측정할 때 4 내지 3000 nM 범위의 IC50을 나타낸다. 추가 실시형태에서, 본원에 기재된 항체의 IC50은 ELISA에 의해 측정할 때 약 0.1 내지 4000, 0.1 내지 3000, 1 내지 2800, 2 내지 2600, 3 내지 2400, 4 내지 2200, 5 내지 2000, 6 내지 1800, 7 내지 1600, 8 내지 1400, 또는 9 내지 1200 nM의 범위이다. 일부 실시형태에서, 본원에 기재된 항체의 IC50은 ELISA에 의해 측정할 때 50 내지 3500, 100 내지 3000, 150 내지 2500, 200 내지 2000, 250 내지 1500, 및 300 내지 1000 nM의 범위이다.

일부 실시형태에서, 기재된 항-TSG-6 항체는 TSG-6 길항제로서 작용하고, TSG-6과 HA의 상호작용, 뿐만 아니라 HC-HA의 생성을 차단한다. 결과적으로, 이러한 항-TSG-6 항체는 면역 반응을 자극한다.

일부 실시형태에서, 본원에 기재된 항-TSG-6 항체는 HC-HA의 수준을 감소시킨다. 일부 실시형태에서, HC-HA의 감소는 실시예 3에 기재된 예시적 분석에서와 같이 ELISA를 사용하여 측정된다.

일부 실시형태에서, 본원에 기재된 항-TSG-6 항체는 실시예 4에 기재된 예시적 분석에서와 같이 종양 부피를 감소시킨다.

일부 다른 실시형태에서, 본원에 기재된 항-TSG-6 항체는 TSG-6 작용제로서 작용하고, 염증 촉진성(pro-inflammatory) T 세포 기능을 포함하는 면역 세포 기능을 억제한다. 결과적으로 이러한 항TSG-6 항체는 면역 반응을 억제한다.

다른 실시형태에서, 본원에 기재된 항-TSG-6 항체는 HC-HA의 수준을 증가시킨다. 일부 실시형태에서, HC-HA의 증가는 실시예 3에 기재된 예시적 분석에서와 같이 ELISA를 사용하여 측정된다.

III. 본 발명의 핵산

항-TSG-6 항체를 인코딩하는 핵산, 뿐만 아니라 이러한 핵산을 함유하는 발현 벡터 및 이러한 핵산 및/또는 발현 벡터로 형질전환된 숙주 세포가 또한 본 발명의 범위에 속한다. 당업자에 의해 이해되는 바와 같이, 단백질 서열은 유전자 코드의 축퇴성으로 인해 임의의 수의 가능한 핵산 서열에 의해 인코딩될 수 있다.

항-TSG-6 항체 및/또는 TSG-6-결합 도메인을 인코딩하는 핵산 조성물이 또한 본 발명의 범위에 속한다. 당업자에 의해 이해되는 바와 같이, 항원 결합 도메인의 경우, 핵산 조성물은 일반적으로 중쇄 가변 영역을 인코딩하는 제1 핵산 및 경쇄 가변 영역을 인코딩하는 제2 핵산을 포함한다. scFv의 경우, 본원에 기재된 링커에 의해 분리된, 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 인코딩하는 단일 핵산이 제조될 수 있다. 전통적인 항체의 경우, 핵산 조성물은 일반적으로 중쇄를 인코딩하는 제1 핵산 및 경쇄를 인코딩하는 제2 핵산을 포함하며, 이는 세포에서 발현될 때 자발적으로 2개의 중쇄와 2개의 경쇄의 "전통적인" 4량체 형식으로 조립될 것이다.

당업계에 공지된 바와 같이, 본 발명의 성분을 인코딩하는 핵산은 발현 벡터 내로 혼입될 수 있고, 숙주 세포에 따라 본 발명의 항체를 생산하는데 사용된다. 이들 2개의 핵산은 단일 발현 벡터 내로 또는 2개의 상이한 발현 벡터 내로 혼입될 수 있다. 일반적으로, 핵산은 발현 벡터에서 임의의 수의 조절 요소(프로모터, 복제 기점, 선택 가능한 마커, 리보솜 결합 부위, 유도제 등)에 작동 가능하게 연결될 수 있다. 발현 벡터는 염색체외 벡터 또는 통합 벡터일 수 있다.

본 발명의 핵산 및/또는 발현 벡터는 포유 동물, 박테리아, 효모, 곤충 및 진균 세포를 포함하여 당업계에 잘 알려진 임의의 유형의 숙주 세포에 도입될 수 있다. 형질 감염 후, 단일 세포 클론은 제한 희석, ELISA, FACS, 현미경 또는 클론픽스(Clonepix)와 같은 당업계에 공지된 방법을 사용하여 세포 은행 생성을 위해 분리될 수 있다. 클론은 생물반응기 규모 확대(bio-reactor scale-up) 및 항체의 발현 유지에 적합한 조건 하에서 배양될 수 있다. 항체는 원심 분리, 심층 여과, 세포 용해, 균질화, 동결-해동, 친화성 정제, 겔 여과, 이온 교환 크로마토그래피, 소수성 상호작용 교환 크로마토그래피 및 혼합 모드 크로마토그래피를 포함하는 당업계에 공지된 방법을 사용하여 분리 및 정제될 수 있다.

IV. 치료 응용

본 개시내용은 대상체에서 면역 반응을 조절하는 방법을 제공하며, 본 방법은 본원에 기재된 항-TSG-6 항체, 또는 항-TSG-6 항체를 함유하는 제약 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용에 포함되는 면역 반응을 조절하는 방법은 대상체에서 면역 반응을 자극하는 것을 포함하며, 추가 실시형태에서, 이러한 방법은 TSG-6 길항제로서 작용하는 항-TSG-6 항체의 유효량을 대상체에게 투여하는 것, 또는 길항성 항-TSG-6 항체를 함유하는 제약 조성물을 투여하는 것을 포함한다.

일부 실시형태에서, 본 개시내용은 예를 들어 TSG-6 작용제로서 작용하는 항-TSG-6 항체의 유효량을 대상체에게 투여함으로써, 또는 이러한 작용성 항-TSG-6 항체를 함유하는 제약 조성물을 대상체에게 투여함으로써, 대상체에서 면역 반응을 억제하는 방법을 제공한다.

본 개시내용은 또한 대상체에서 암을 치료하는 방법을 제공하며, 이러한 방법은 TSG-6 길항제로서 작용하는 항-TSG-6 항체, 또는 이러한 항-TSG-6 항체를 함유하는 제약 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 치료될 암은 상응하는 비-암성 조직과 비교하여 HC-HA 및/또는 TSG-6의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 치료될 암은 암 진행을 촉진하기 위해 TSG-6/HA 경로를 사용한다. 일부 실시형태에서, 치료될 암은 트랜스에스테르화 반응에서 HC 단백질을 인터-알파-억제제(IaI)로부터 HA로 전달하여 HC-HA 복합체를 형성하는 것을 촉매하기 위해 TSG-6을 사용한다. 일부 실시형태에서, HC-HA 복합체는 변경된 결합 특성을 갖고 대식세포의 분극화를 'M2' 표현형으로 변경하며 암의 발병을 증가시키는 케이블형 구조를 형성한다. 일부 실시형태에서, 치료될 암은 CTLA-4, PD-1 또는 PD-L1과 같은 다른 면역 체크포인트를 표적으로 하는 기존 면역 조절 항체에 비-반응성이다.

일부 실시형태에서, 암은 위암, 결장직장암, 간세포 암종, 흑색종 또는 식도 편평 세포 암종과 같은 고형 종양이다. 일부 실시형태에서, 암은 B 세포 만성 림프구성 백혈병, 호지킨 림프종, B 세포 비-호지킨 림프종 또는 T 세포 비-호지킨 림프종이다.

일부 다른 실시형태에서, 암은 뇌암, 방광암, 유방암, 자궁경부암, 자궁내막암, 식도암, 백혈병, 폐암, 간암, 흑색종, 난소암, 췌장암, 전립선암, 직장암, 신장암, 고환암 또는 자궁암이다. 또 다른 실시형태에서, 암은 혈관성 종양, 편평세포암종, 선암종, 소세포암종, 신경모세포종, 육종(예를 들어, 혈관육종 또는 연골육종), 후두암, 이하선암, 담도암, 갑상선암, 말단흑색점 흑색종, 광선각화증, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 선양낭성암종, 선종, 선육종, 선편평암종, 항문관암, 항문암, 항문직장암, 성상세포 종양, 바르톨린선암종, 기저세포암종, 담도암, 골암, 골수암, 기관지암, 기관지선암종, 유암종, 담관암종, 연골육종, 맥락총 유두종/암종, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 투명 세포암종, 결합 조직암, 낭선종, 소화기암, 십이지장암, 내분비계암, 내배엽동 종양, 자궁내막증식증, 자궁내막기질육종, 자궁내막양선암, 내피세포암, 뇌실막암, 상피세포암, 유잉육종, 눈 및 안와암, 여성 생식기암, 국소결절과형성, 담낭암, 위전정부암(gastric antrum cancer), 위저부암(gastric fundus cancer), 가스트린종, 교모세포종, 글루카곤종, 심장암, 혈관모세포종, 혈관내피종, 혈관종, 간선종, 간선종증, 간담도암, 간세포암종, 호지킨 병, 회장암, 인슐린종, 상피내종양, 상피간편평세포종양, 간내담도암, 침습성 편평세포암, 공장암, 관절암, 카포시 육종, 골반암, 대세포암종, 대장암, 평활근육종, 악성흑색점 흑색종, 림프종, 남성 생식기암, 악성흑색종, 악성중피 종양, 수모세포종, 수질상피종, 수막암, 중피암, 전이성암종, 구강암, 점막표피양암종, 다발성 골수종, 근육암, 비강암, 신경계암, 신경상피선암종 결절흑색종, 비상피성 피부암, 귀리세포암종, 희소돌기아교세포암, 구강암, 골육종, 유두장액선암, 음경암, 인두암, 뇌하수체 종양, 형질세포종, 가육종, 폐모세포종, 직장암, 신장세포암종, 호흡기암, 망막모세포종, 횡문근육종, 육종, 장액암, 부비동암, 피부암, 소세포암, 소장암, 평활근암, 연조직암, 소마토스타틴 분비 종양, 척추암, 편평세포암, 횡문근암, 중피하암, 표재성 전이흑색종, T세포백혈병, 혀암, 미분화 암종, 요관암, 요도암, 방광암, 비뇨기암, 자궁경부암, 자궁체암, 포도막흑색종, 질암, 사마귀암종, 비포마, 외음부암, 잘 분화된 암종, 또는 윌름스(Wilms) 종양이다.

일부 다른 실시형태에서, 치료될 암은 B-세포 림프종 또는 T-세포 림프종과 같은 비-호지킨 림프종이다. 특정 실시형태에서, 비-호지킨 림프종은 B-세포 림프종, 예컨대 미만성 거대 B-세포 림프종, 원발성 종격동 B-세포 림프종, 여포성 림프종, 소림프구성 림프종, 외투 세포 림프종, 변연부 B-세포 림프종, 결절외 변연부 B-세포 림프종, 결절 변연부 B-세포 림프종, 비장 변연부 B-세포 림프종, 버킷 림프종, 림프형질세포성 림프종, 털세포 백혈병 또는 원발성 중추 신경계(CNS) 림프종이다. 다른 특정 실시형태에서, 비-호지킨 림프종은 T-세포 림프종, 예컨대 전구 T-림프모구 림프종, 말초 T-세포 림프종, 피부 T-세포 림프종, 혈관면역모세포 T-세포 림프종, 결절외 자연 살해/T-세포 림프종, 장병증 유형 T-세포 림프종, 피하지방층염유사 T-세포 림프종, 역형성 대세포 림프종 또는 말초 T-세포 림프종이다.

본 개시내용은 또한 대상체에서 섬유증을 치료하는 방법을 제공하며, 그 방법은 TSG-6 길항제로서 작용하는 항-TSG-6 항체, 또는 이러한 항-TSG-6 항체를 함유하는 제약 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 섬유성 조직은 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, HC-HA 복합체는 변경된 결합 특성을 갖고 대식세포의 분극화를 'M2' 표현형으로 변경하며 섬유증의 발병을 증가시키는 케이블형 구조를 형성한다. 일부 실시형태에서, 항체는 섬유증을 치료하기 위해 하나 이상의 추가 치료제와 조합된다.

일부 실시형태에서, 섬유증은 콜라겐 질환, 간질성 폐 질환, 인간 섬유성 폐 질환(예를 들어, 폐쇄성 세기관지염, 특발성 폐 섬유증, 알려진 병인의 폐 섬유증, 폐 질환의 종양 기질, 폐에 영향을 미치는 전신 경화증, 헤르만스키-푸들라크 증후군(Hermansky-Pudlak syndrome), 석탄 노동자의 진폐증, 석면폐증, 규폐증, 만성 폐고혈압, AIDS 관련 폐고혈압, 유육종증 등), 섬유성 혈관 질환, 동맥 경화증, 죽상 경화증, 정맥류, 관상 동맥 경색, 뇌경색, 심근 섬유증, 근골격 섬유증, 수술 후 유착, 인간 신장 질환(예를 들어, 신염 증후군, 알포트 증후군, HIV 관련 신병증, 다낭성 신장 질환, 파브리병, 당뇨병성 신병증, 만성 사구체신염, 전신성 루푸스와 관련된 신염 등), 표피 켈로이드 형성, 진행성 전신 경화증(PSS), 원발성 경화성 담관염(PSC), 간 섬유증, 간 경화증, 신장 섬유증, 폐 섬유증, 낭포성 섬유증, 만성 이식편대숙주병, 경피증(국소 및 전신) 그레이브스 안병(Grave's opthalmopathy), 당뇨망막병증, 녹내장, 페이로니병, 음경섬유증, 방광경 검사 후 요도 협착증, 수술 후 내부 유착, 흉터, 골수 섬유증, 특발성 후복막 섬유증, 알려진 병인에 의한 복막 섬유증, 약물 유발성 맥각증, 양성 또는 악성 암에 의한 섬유증, 미생물 감염(예를 들어, 바이러스, 박테리아, 기생충, 곰팡이 등)에 의한 섬유증, 알츠하이머병, 염증성 장 질환에 의한 섬유증(크론병 및 현미경적 대장염의 협착 형성을 포함), 화학적 또는 환경적 손상(예를 들어, 암 화학 요법, 살충제, 방사선(예를 들어, 암 방사선 요법) 등)에 의해 유발된 섬유증 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 일부 실시형태에서, "섬유증 조직"은 이들 예 중 하나를 포함하는 섬유증에 의해 영향을 받지만 이에 제한되지 않는 임의의 조직이다.

본 개시내용은 또한 대상체에서 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하는 방법을 제공하며, 본 방법은 항-TSG-6 항체 또는 이러한 항-TSG-6 항체를 함유하는 제약 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, TSG-6 항체는 길항제이다. 다른 실시형태에서, TSG-6 항체는 작용제이다.

일 양태에서, 대상체에서 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하는 방법은 TSG-6 길항제로서 작용하는 항-TSG-6 항체, 또는 이러한 항-TSG-6 항체를 함유하는 제약 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 염증이 있는 조직에서TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. TSG-6 길항제로서 작용하는 항-TSG-6 항체를 투여하는 것은 면역 반응을 자극하여 자가면역 또는 염증성 장애의 결과로서 발생하는 염증을 해결할 수 있다.

일부 실시형태에서, 길항성 항-TSG-6 항체로 치료될 자가면역 또는 염증성 장애는 천식이다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 폐에서 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 기도 호산구 증가증을 갖는다. 일부 실시형태에서, 항체는 천식을 치료하기 위해 하나 이상의 추가 치료제와 조합된다.

일부 실시형태에서, 길항성 항-TSG-6 항체로 치료될 자가면역 또는 염증성 장애는 특발성 폐동맥 고혈압이다. 일부 실시형태에서, 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서 치료될 대상체는 또한 폐 섬유증을 갖는다. 일부 실시형태에서, 항체는 특발성 폐동맥 고혈압 및/또는 폐 섬유증을 치료하기 위해 추가의 치료제와 조합된다.

다른 양태에서, 대상체에서 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하는 방법은 TSG-6 작용제로서 작용하는 항-TSG-6 항체, 또는 이러한 항-TSG-6 항체를 함유하는 제약 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 낮은 발현을 갖는다. 일부 실시형태에서, 치료될 대상체는 염증이 있는 조직에서TSG-6 및/또는 HC-HA의 낮은 발현을 갖는다. TSG-6 작용제로서 작용하는 항-TSG-6 항체를 투여하는 것은 염증 촉진성 T 세포 반응을 포함하는 염증 촉진성 면역 반응을 억제할 수 있고, 자가면역 또는 염증성 장애를 앓고 있는 대상체에서 면역 반응을 조절할 수 있다.

일부 실시형태에서, 작용성 항-TSG-6 항체로 치료되는 자가면역 또는 염증성 장애는 류마티스 관절염이다. TSG-6 작용제로서 작용하는 항-TSG-6 항체를 투여하는 것은 병원성 세포의 이동을 억제함으로써 염증 촉진성 면역 반응을 억제할 수 있다.

일부 실시형태에서, 길항성 또는 작용성 항-TSG-6 항체로 치료될 자가면역 또는 염증성 장애는 죽상동맥경화증, 다발성 경화증, 애디슨 병, 근위축성 측삭 경화증, 크론병, 쿠싱 증후군, 진성 1형 당뇨병, 이식편 대 숙주 질환, 그레이브스 병, 길랭-바레 증후군, 염증성 장 질환, 홍반성 루푸스, 건선, 건선성 관절염, 류마티스성 관절염, 유육종증, 경피증, 전신성 홍반성 루푸스, 이식 거부 또는 혈관염이다.

일부 실시형태에서, 길항성 또는 작용성 항-TSG-6 항체로 치료될 자가면역 또는 염증성 장애는 부신, 방광, 뼈, 골수, 뇌, 유방, 자궁경부, 담낭, 신경절, 위장관, 심장, 신장, 간, 폐, 근육, 난소, 췌장, 부갑상선, 음경, 전립선, 침샘, 피부, 비장, 척수, 고환, 흉선, 갑상선 또는 자궁의 염증성 장애이다.

일부 다른 실시형태에서, 길항성 또는 작용성 항-TSG-6 항체로 치료될 자가면역 또는 염증성 장애는 급성 파종성 뇌척수염(ADEM), 무감마글로불린혈증, 원형 탈모증, 강직성 척추염, 항인지질 증후군, 항합성효소 증후군, 아토피 알레르기, 아토피 피부염, 자가면역 재생 불량성 빈혈, 자가면역 심근병증, 자가면역 장병증, 자가면역 용혈성 빈혈, 자가면역 간염, 자가면역 내이 질환, 자가면역 림프 증식 증후군, 자가면역 췌장염, 자가면역 말초신경 병증, 자가면역 다내분비 증후군, 자가면역 프로게스테론 피부염, 자가면역 혈소판 감소성 자반병, 자가면역 두드러기, 자가면역 포도막염, 발로병/발로동심경화증, 베체트병, 버거병, 비커스스타프 뇌염, 블루 증후군, 수포성 천포창, 기관지폐 이형성증, 암, 캐슬만병, 셀리악병, 샤가스병, 만성 염증성 탈수초성 다발 신경병증, 만성 염증성 탈수초성 다발 신경병증, 만성 폐쇄성 폐질환, 만성 재발성 다초점 골수염, 처그-스트라우스(Churg-Strauss) 증후군, 흉터유사 천포창, 코간 증후군, 한랭응집소병, 보체 성분 2 결핍, 접촉성 피부염, 두개 동맥염, CREST 증후군, 피부 백혈구파쇄성 혈관염, 데고병, 더컴병, 포진 피부염, 피부근염, 미만성 피부 전신 경화증, 원반형 홍반성 루푸스, 드레슬러 증후군, 약물 유발성 루푸스, 습진, 자궁내막증, 호산구성 근막염, 호산구성 위장염, 호산구성 폐렴, 후천성 표피수포증, 결절성 홍반, 태아 적혈구증, 필수 혼합 한랭글로불린혈증, 에반 증후군, 진행성골화성 섬유이형성증, 섬유화 폐포염(또는 특발성 폐섬유증), 위염, 위장 천포창, 사구체신염, 굿파스처 증후군, 하시모토 뇌병증, 하시모토-갑상선염, 헤노흐-쇤라인 자색반, 임신성 헤르페스(별칭 임신성 천포창), 화농성한선염, 휴즈-스토빈 증후군, 저감마글로불린혈증, 특발성 염증성 탈수초성 질환, 특발성 폐섬유증, 특발성 혈소판 감소성 자반병, IgA 신병증, 봉입체 근염, 간질성 방광염, 소아 특발성 관절염(별칭 소아 류마티스 관절염), 가와사키병, 램버트-이튼 근무력 증후군, 백혈구모세포성 혈관염, 편평태선, 경화태선, 선형 IgA병, 루포이드 간염(별칭 자가면역 간염), 마지드 증후군, 현미경적 대장염, 현미경적 다발혈관염, 밀러-피셔 증후군, 혼합 결합 조직 질환, 모르페아, 무카-하버만병(별칭 급성 태선모양잔비늘증), 다발성 경화증, 중증 근무력증, 근염, 메니에르병, 기면증, 시신경 척수염, 신경근긴장증, 눈의 간대성 천포창, 간대성 근간대성 증후군, 오르드 갑상선염, 회문형 류머티즘, PANDAS(연쇄구균과 관련된 소아 자가면역 신경정신병), 부종양성 소뇌 변성, 발작성 야간 혈색소뇨증(PNH), 파리 롬버그 증후군, 평면부염, 파소니지-터너 증후군, 심상천포창, 뇌척수염, 악성빈혈, POEMS 증후군, 결절다발성 동맥염, 류마티스성 다발근육통, 다발성근염, 원발성 담즙성 간경변증, 원발성 경화성 담관염, 진행성 염증성 신경병증, 순수 적혈구 무형성증, 괴저성 농피증, 라스무센 뇌염, 레이노 현상, 라이터 증후군, 재발성 다발연골염, 하지불안 증후군, 후복막 섬유증, 류마티스 열, 정신분열증, 슈미트 증후군, 슈니츨러 증후군, 공막염, 혈청병, 쇼그렌 증후군, 척추관절병증, 강직인간 증후군, 스틸병, 아급성 세균성 심내막염(SBE), 수삭(Susac) 증후군, 스위트(Sweet) 증후군, 시데남(Sydenham) 무도병, 교감성 안염, 타카야스(Takayas) 동맥염, 측두 동맥염, 혈소판 감소증, 톨로사-헌트(Tolosa-Hunt) 증후군, 횡단 척수염, 궤양성 대장염, 미분화 척추관절병증, 두드러기 혈관종염, 백반증, 베게너 육아종증을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

V. 병용요법

본원에 기재된 항-TSG-6 항체는 암, 섬유증, 또는 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하기 위해 추가 치료제와 조합하여 사용될 수 있다.

암 치료에서 병용 요법의 일부로 사용될 수 있은 예시적인 치료제는 예를 들어 방사선, 미토마이신, 트레티노인, 리보무스틴, 젬시타빈, 빈크리스틴, 에토포시드, 클라드리빈, 미토브로니톨, 메토트렉세이트, 독소루비신, 카보쿠온, 펜토스타틴, 니트라크린, 지노스타틴, 시트로렐릭스, 레트로졸, 랄티트렉시드, 다우노루비신, 파드로졸, 포테무스틴, 티말파신, 소부족산, 네다플라틴, 시타라빈, 비칼루타미드, 비노렐빈, 베스나리논, 아미노글루테티미드, 암사크린, 프로글루미드, 엘립티늄 아세테이트, 케탄세린, 독시플루리딘, 에트레티네이트, 이소트레티노인, 스트렙토조신, 니무스틴, 빈데신, 플루타미드, 드로게닐, 부토신, 카르모푸르, 라족산, 시조필란, 카보플라틴, 미톨락톨, 테가푸르, 이포스파미드, 프레드니무스틴, 피시바닐, 레바미솔, 테니포시드, 임프로설판, 에노시타빈, 리수리드, 옥시메톨론, 타목시펜, 프로게스테론, 메피티오스탄, 에피티오스타놀, 포메스탄, 인터페론-알파, 인터페론-2 알파, 인터페론-베타, 인터페론-감마, 콜로니 자극 인자-1, 콜로니 자극 인자-2, 데닐류킨 디프티톡스, 인터루킨-2, 황체형성 호르몬 방출 인자, 및 동족 수용체에 대한 차별적인 결합 및 증가 또는 감소된 혈청 반감기를 나타낼 수 있는 전술한 약제의 변이를 포함한다.

특정 양태에서, 면역 반응에 관여하는 하나 이상의 단백질의 발현은 암 치료에서 병용 요법의 일부로서 억제된다. "억제제"로서 작용하는 약제는 단백질, 예를 들어 항체, 항체-약물 접합체, 가용성 단백질 및 융합 단백질에 직접 결합할 수 있다. 일부 실시형태에서, 병용 요법에 사용되는 억제제는 예를 들어 올리고뉴클레오티드, siRNA, miRNA, piRNA 및 shRNA이다. 일부 실시형태에서, 병용 요법에 사용되는 억제제는 프로테아좀 기능을 차단한다. 일부 실시형태에서, 병용 요법에 사용되는 억제제는 DNA 메틸화를 차단한다.

본 발명에서 사용되는 억제제 중에는 면역 체크포인트 억제제가 있다. 예시적인 면역 체크포인트 억제제는 (i) 세포독성 T-림프구 관련 항원 4(CTLA4), (ii) 프로그램된 세포 사멸 단백질 1(PD1), (iii) PDL1, (iv) LAG3, (v) B7-H3, (vi) B7-H4, 및 (vii) TIM3, 예컨대 이필리무맙, 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 아벨루맙, 더발루맙, 및 아테졸리주맙 중 하나 이상을 억제하는 약제를 포함한다. 추가의 예시적인 면역 체크포인트 억제제는 세미플리맙, 트레멜리무맙, 더발루맙, 스파르탈리주맙, 렐라틀리맙, IMP321, LAG525, MBG453, MEDI9447, 및 에노블리투주맙을 포함한다.

암 치료에서 병용 요법의 일부로 사용될 수 있는 또 다른 약제는 암 관련 섬유아세포 또는 암 관련 세포외 매트릭스를 표적으로 하는 약제이다. 이러한 약제는 예를 들어 섬유아세포 활성화 단백질 알파(FAP) 차단 항체, 예컨대 시브로투주맙 또는 FAP 백신, 페그보히알루로니다제 알파(PEGPH20), CD44 표적화 항체, 예컨대 RG7356/RO5429083, 메트포르민, 리실 옥시다제 억제제 또는 차단 항체, 예컨대 심투주맙, TGF-베타 차단 항체, 예컨대 프레솔리무맙, 및 TGF-베타 수용체 억제제, 예컨대 갈루니세르팁을 포함한다.

암 치료에서 병용 요법의 일부로 사용될 수 있는 또 다른 약제는 비-체크포인트 표적(예를 들어, 허셉틴) 및 비-세포독성 약제(예를 들어, 티로신-키나제 억제제)를 표적으로 하는 모노클론 항체 약제이다.

또 다른 범주의 항암제는 예를 들어, (i) ALK 억제제, ATR 억제제, A2A 길항제, 염기 절단 복구 억제제, Bcr-Abl 티로신 키나제 억제제, 브루톤 티로신 키나제 억제제, CDC7 억제제, CHK1 억제제, 사이클린 의존성 키나제 억제제, DNA-PK 억제제, DNA-PK 및 mTOR 둘 다의 억제제, DNMT1 억제제, DNMT1 억제제 + 2-클로로-데옥시아데노신, HDAC 억제제, 헤지혹(Hedgehog) 신호전달 경로 억제제, IDO 억제제, JAK 억제제, mTOR 억제제, MEK 억제제, MELK 억제제, MTH1 억제제, PARP 억제제, 포스포이노시티드 3-키나제 억제제, PARP1 및 DHODH 둘 다의 억제제, 프로테아좀 억제제, 토포이소머라제-II 억제제, 티로신 키나제 억제제, VEGFR 억제제 및 WEE1 억제제 중에서 선택된 억제제; (ii) OX40, CD137, CD40, GITR, CD27, HVEM, TNFRSF25, 또는 ICOS의 작용제; 및 (iii) IL-12, IL-15, GM-CSF 및 G-CSF 중에서 선택된 시토카인을 포함한다.

본 발명의 항체는 또한 원발성 병변으로부터 암을 외과적으로 제거하기 위한 보조제로서 사용될 수 있다.

섬유증을 치료하기 위한 항-TSG-6 항체와의 병용 요법의 일부로 사용될 수 있는 예시적인 치료제는 예를 들어 닌테다닙, 피르페니돈, 코르티코스테로이드, 양성자 펌프 억제제, 메트포르민, 리실 옥시다제 억제제 또는 차단 항체, 예컨대 심투주맙, TGF-베타 차단 항체, 예컨대 프레솔리무맙, 및 TGF-베타 수용체 억제제, 예컨대 갈루니세르팁을 포함한다.

자가면역 또는 염증성 장애의 증상을 치료, 진행 지연, 재발 방지 또는 완화하기 위한 항-TSG-6 항체와의 병용 요법의 일부로서 사용될 수 있는 예시적인 치료제는 예를 들어 다양한 알려진 항염증 및/또는 면역억제 요법을 포함한다. 일부 실시형태에서, 항염증 및/또는 면역억제 요법은 메토트렉세이트, 사이클로스포린 A(예를 들어, 사이클로스포린 마이크로에멀젼 포함), 타크롤리무스, 코르티코스테로이드, 스타틴, 인터페론 베타, 비-스테로이드성 항염증제, 및 6-MP(메르캅토퓨린, 6-메르캅토퓨린 또는 퓨리네톨이라고도 함)를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체와 조합하기 위한 항염증 및/또는 면역억제 요법은 TOPK 억제제(예를 들어, OTS964((R)-9-(4-(1-(디메틸아미노)프로판-2-일)페닐)-8-히드록시-6-메틸티에노[2,3-c]퀴놀린-4(5H)-온)(Oncotherapy Science)), 티로신 키나제 억제제(예를 들어, 악시티닙, 다사티닙, 이코티닙), 토포이소머라제 억제제(예를 들어, 토포테칸), 스핑고신-1-포스페이트 수용체 작용제(예를 들어, 핀골리모드(fingolimod), KRP-203), 항-T 세포 면역글로불린(예를 들어, AtGam), 항IL-2 수용체 항체(예를 들어, 다클리주맙), 아미드(CTX), 이포스파미드(IFO), 아드리아마이신(ADM), 다우노루비신(DNR), 빈크리스틴(VCR), 빈블라스틴(VBL), 에토포시드(VP16), 베르미르(Vumon), 카보플라틴(CBP), 타크로리무스, 시롤리무스, 에베롤리무스, 아자티오프린, 브레퀴나르, 레플루노미드, LEA-29Y, 항-CD3 항체(예를 들어, OKT3), 아스피린, B7-CD28 차단 분자(예를 들어, 벨라타셉트, 아바타셉트), CD40-CD154 차단 분자(항CD40 항체), 아세트아미노펜, 이부프로펜, 나프록센, 피록시캄 및 항염증 스테로이드(예를 들어, 프레드니솔론 또는 덱사메타손)를 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.

일부 실시형태에서, 항-TSG-6 항체와 조합하기 위한 항염증 및/또는 면역억제 요법은 예를 들어, TNF-알파, CFA, 인터루킨-1(IL-1), 프로테아좀 억제제, NFκB 억제제, 항염증제, 조직 플라스미노겐 활성화제(TPA), 지질다당류, UV 광선, 및 TNF-알파 신호전달 경로의 세포내 매개체의 투여에 의한 자가면역 세포의 절제를 포함한다. 이러한 약제는 TNF-알파 수용체 신호전달의 하류 경로를 방해함으로써 자가반응성 림프구의 아포토시스(apoptosis)를 유도하거나 TNF-알파 수용체 결합의 하류에 작용한다(문헌[Baldwin et al., Ann. Rev. Immunol.(1996) 12:141; Baltimore, Cell (1996) 87:13]).

특발성 폐동맥 고혈압을 치료하기 위한 항-TSG-6 항체와의 병용 요법의 일부로 사용될 수 있는 예시적인 치료제는 예를 들어 칼슘 채널 차단제, 혈관 확장제, 프로스타사이클린 경로 작용제, 엔도텔린 수용체 길항제, 산화질소(NO)-cGMP 인핸서, 혈액 희석제, 이뇨제, 디곡신, 항응고 요법 및 수술을 포함한다.

특발성 폐동맥 고혈압을 치료하기 위한 항-TSG-6 항체와의 병용 요법의 일부로서 사용될 수 있는 예시적인 치료제는 또한 예를 들어 닌테다닙, 피르페니돈, 코르티코스테로이드, 양성자 펌프 억제제, 메트포르민, 리실 옥시다제 억제제 또는 차단 항체, 예컨대 심투주맙, TGF-베타 차단 항체, 예컨대 프레솔리무맙, 및 TGF-베타 수용체 억제제, 예컨대 갈루니세르팁으로 기저 섬유증을 치료하는 것을 포함할 수 있다.

다른 실시형태에서, 항-TSG-6 항체와 조합하기 위한 항염증 및/또는 면역억제 요법은 속효성 β2 작용제, 지속성 β2 작용제, 항콜린제, 코르티코스테로이드, 전신 코르티코스테로이드, 비만 세포 안정제, 류코트리엔 조절제, 메틸크산틴, β2 작용제, 알부테롤, 레발부테롤, 피르부테롤, 아트포르모테롤, 포르모테롤, 살메테롤, 이프라트로피움 및 티오트로피움을 포함하는 항콜린제; 베클로메타손, 부데소니드, 플루니솔리드, 플루티카손, 모메타손, 트리암시놀론, 메티프레드니솔론, 프레드니솔론, 프레드니손을 포함하는 코르티코스테로이드; 몬테루카스트, 자피르루카스트 및 질류톤을 포함하는 류코트리엔 개질제; 크로몰린 및 네도크로밀을 포함하는 비만 세포 안정화제; 테오필린을 포함하는 메틸크산틴; 이프라트로피움 및 알부테롤, 플루티카손 및 살메테롤, 부데소니드 및 포르모테롤을 포함하는 조합 약물; 히드록시진, 디펜히드라민, 로라타딘, 세티리진 및 히드로코르티손을 포함하는 항히스타민제; 타크로리무스 및 피메크로리무스를 포함하는 면역계 조절 약물; 사이클로스포린; 아자티오프린; 미코페놀라테모페틸; 및 이들의 조합을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

항체 및 추가 치료제의 양 및 상대적 투여 시기는 원하는 조합된 치료 효과를 달성하기 위해 선택될 수 있다. 예를 들어, 이러한 투여를 필요로 하는 환자에게 병용 요법을 투여할 때, 조합된 치료제, 또는 치료제들을 포함하는 제약 조성물 또는 조성물들은 임의의 순서로, 예를 들어 순차적으로, 동시에, 함께, 일제히 등과 같이 투여될 수 있다. 또한, 예를 들어, 다중 특이적 결합 단백질은 추가 치료제(들)가 예방적 또는 치료적 효과를 발휘하는 시간 동안 투여될 수 있거나, 또는 그 반대로 투여될 수 있다.

VI. 제약 조성물 및 투여

본 개시내용은 또한 본원에 기재된 항-TSG-6 항체의 치료적 유효량을 함유하는 제약 조성물/제제를 특징으로 한다. 조성물은 다양한 약물 전달 시스템에서 사용하기 위해 제제화될 수 있다. 적절한 제제를 위해 하나 이상의 생리학적으로 허용되는 부형제 또는 담체가 또한 조성물에 포함될 수 있다. 본 개시내용에 사용하기에 적합한 제제는 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Philadelphia, Pa., 17th ed., 1985]에서 찾을 수 있다. 약물 전달 방법에 대한 간략한 검토는 예를 들어 문헌[Langer (Science 249:1527-1533, 1990)]을 참조한다.

본 개시내용의 항체는 동결 건조된 제제 또는 액체 수성 제약 제제에 존재할 수 있다. 본원에서 관심있는 수성 담체는 제약상 허용 가능하고(인간 투여에 안전하고 비독성임) 액체 제제의 제조에 유용한 것이다. 예시적인 담체는 주사용 멸균수(SWFI), 주사용 정균수(BWFI), pH 완충 용액(예를 들어, 인산염 완충 식염수), 멸균 식염수 용액, 링거 용액 또는 덱스트로스 용액을 포함한다.

본 개시내용의 항체는 단백질 및 동결 보호제를 포함하는 동결 건조된 제제에 존재할 수 있다. 동결 보호제는 당, 예를 들어 이당류일 수 있다. 특정 실시형태에서, 동결 보호제는 수크로스 또는 말토스이다. 동결 건조된 제제는 또한 완충제, 계면 활성제, 증량제 및/또는 보존제 중 하나 이상을 포함할 수 있다.

본 발명의 제약 조성물에서 활성 성분의 실제 투여 수준은 특정 환자, 조성물 및 투여 방식에 대해 환자에게 독성이 없이 원하는 치료 반응을 달성하는 데 효과적인 활성 성분의 양을 얻기 위해 변화될 수 있다. 이는 성인에 대해 투여당 0.1 mg 내지 1 g의 범위, 바람직하게는 0.5 mg 내지 500 mg 범위의 활성 항체로 투여될 수 있다. 대안적으로, 환자의 투여량은 대략적인 환자의 체중이나 표면적에 맞출 수 있다. 적절한 투여량을 결정하는 다른 요인은 치료 또는 예방할 질병 또는 병태, 질병의 중증도, 투여 경로, 환자의 연령, 성별 및 의학적 상태를 포함할 수 있다. 치료를 위한 적절한 투여량을 결정하는 데 필요한 계산의 추가 개선은 특히 본원에 개시된 투여량 정보 및 분석에 비추어 당업자에 의해 일상적으로 이루어진다. 투여량은 또한 적절한 투여량-반응 데이터와 함께 사용되는 투여량을 결정하기 위한 알려진 분석법을 사용하여 결정될 수도 있다. 질환의 진행을 모니터링하면서 개별 환자의 투여량이 조정될 수 있다. 환자에서 표적화 가능한 구조물 또는 착물의 혈중 농도를 측정하여 유효 농도에 도달하거나 이를 유지하기 위해 투여량이 조정되어야 하는지를 확인할 수 있다. 약리 유전학을 사용하여 어떤 표적화 가능한 구조물 및/또는 착물 및 이의 투여량이 주어진 개인에게 가장 효과적일 것 같은지를 결정할 수 있다(문헌[Schmitz et al., Clinica Chimica Acta 308: 43-53, 2001]; 문헌[Steimer et al., Clinica Chimica Acta 308: 33-41, 2001]).

투여량은 매일, 매주, 매월 또는 매년 1회 이상 또는 심지어 2 내지 20년마다 1회 투여될 수 있다. 당업자는 체액 또는 조직에서 표적화 가능한 구조물 또는 착물의 측정된 체류 시간 및 농도에 기초하여 투여를 위한 반복 속도를 쉽게 추정할 수 있다. 본 발명의 투여는 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 피하, 흉막내, 척추강내, 강내, 카테터를 통한 관류 또는 직접 병변내 주사일 수 있다. 이것은 매일 1회 이상, 매주 1회 이상, 매달 1회 이상, 매년 1회 이상 투여될 수 있다.

실시예

이제, 일반적으로 설명되는 본 발명은 다음의 실시예를 참조함으로써 보다 쉽게 이해될 것이며, 이 실시예는 단지 본 발명의 특정 양태 및 실시형태를 예시하는 목적으로 포함되며 본 발명을 제한하고자 하는 것은 아니다.

실시예 1 - TSG-6 항체의 생성

마우스 TSG-6 단백질(mTSG-6)에 대한 마우스 항체는 통상적인 마우스 단일클론 항체 기술을 사용하여 생성되었다. 간단히 말해서, 마우스(균주 SJL/J)에 KLH 결합 재조합 마우스 TSG-6(R&D Biosystems, 카탈로그 #2326-TS)을 접종했다. 부스팅 후, 항체 역가는 대조로서 비-관련 His6-태그된 단백질을 사용하여 ELISA에 의해 결정되었다. 융합을 위해 선택된 마우스를 희생시키고, 융합 파트너로서 P3X63Ag8.653 뮤린 골수종 세포주를 사용하여 하이브리도마 융합을 수행하였다. 클론은 제한 희석에 의해 단리되고 하이브리도마 상청액의 ELISA에 의해 선택되었다. 재조합 인간 TSG-6(R&D Biosystems, 카탈로그 #2104-TS)을 ELISA 분석의 기질로서 사용하여 인간 및 마우스 교차 반응성 클론의 선택을 용이하게 했다(2개의 단백질은 아미노산 수준에서 92% 동일함). 하이브리도마 mRNA는 cDNA로 전사되었고 cDNA 말단의 5'-급속 증폭(RACE)에 의해 증폭되었다. PCR 산물은 적절한 시퀀싱 벡터 내로 클로닝되고 디데옥시 생어(dideoxy Sanger) 방법에 의해 시퀀싱되었다. 각 클론의 클론성을 확인하기 위해 다수의 카피가 시퀀싱되었다. 번역된 단백질 서열은 NCBI IgBLAST 검색 도구(문헌[Ye, J., et al., 2013, Nucleic Acids Res. 41, W34-40])에 입력되어 CDR을 식별한다.

실시예 2 - 항-TSG-6 항체에 의한 TSG-6에 대한 HA 결합의 억제

재조합 인간 TSG-6을 96-웰 폴리스티렌 미세적정 플레이트(MaxiSorp, Nunc) 상에 100 ng/웰로 고정화시켰다. 웰은 PBS 중 1% BSA로 차단되었다. 웰은 다양한 농도의 항-TSG-6 항체의 존재 하에 1 μg/mL에서 히알루로난-비오틴(Sigma, B1557)으로 배양되었다. TBST로 플레이트를 세척한 후, 아비딘(avidin)-HRP(e-Biosciences, 18-4100-51)로 TSG-6에 결합하는 비오틴을 검출하고 TMB ELISA 기질 용액(e-Biosciences, 00-4201-56)으로 발색시켰다. 1M H3PO4로 발색을 중단하고 SpectraMax M5 플레이트 판독기(Molecular Devices) 상에서 플레이트를 판독했다. (도 1) IC50 값은 4-파라미터 로지스틱 모델(XLfit, IDBS)을 사용하여 결정되었다.

실시예 3 - 항-TSG-6 항체에 의한 TSG-6 HC-HA 트랜스에스테라제 활성의 억제

재조합 인간 TSG-6(PBS 중 1 nM)을 37℃에서 1 내지 2시간 동안 1% 인간 혈장(IαI의 공급원으로서), 5 mM MgCl2, 1 μg/mL HA 및 다양한 농도의 항-TSG-6 항체의 존재 하에 배양하였다. EDTA(10 mM)는 금속 이온 의존성인 트랜스에스테라제 활성을 100% 억제하기 위한 대조로서 사용되었다. 그 다음 이러한 배양물은 소 연골 히알루로난 결합 단백질(Millipore, 385910)로 사전 코팅된 96웰 폴리스티렌 미세역가 플레이트(MaxiSorp, Nunc) 상에 100 ng/웰로 로딩하고 PBS 중 1% BSA로 차단했다. 실온에서 1시간 동안 배양한 후, 플레이트를 PBST로 헹군 다음, HC-HA를 항-HC(ITIH1) 항체(Abnova, H00003697)로, 이어서 HRP-연결된 항 토끼 항체(GE Life Sciences, NA934)로 검출했다. TMB ELISA 기질 용액(e-Biosciences, 00-4201-56)으로 발색시키고 1M H3PO4로 정지시켰다. 플레이트를 SpectraMax M5 플레이트 판독기(Molecular Devices)에서 판독하였고 IC50 값은 4-파라미터 로지스틱 모델(XLfit, IDBS)을 사용하여 결정하였다. (도 2)

실시예 4 - 항-TSG-6 항체 약력학적 분석의 입증

C57Bl/6 마우스(그룹당 n=3)는 치료 1일 전에 접종되지 않거나 B16F0 흑색종 세포(1x10⁶)로 접종된 상태로 두었다. 치료는 PBS(비히클) 또는 항TSG-6 항체 3C6을 사용하여 1 mg의 고정 용량으로 복강 내로 했다. 투여 10일 후, 혈청 샘플을 수집하고 PBS로 1:10 희석하였다. 그 다음 이러한 샘플을 소 연골 히알루로난 결합 단백질(Millipore, 385910)로 사전 코팅된 96웰 폴리스티렌 미세역가 플레이트(MaxiSorp, Nunc) 상에 100 ng/웰로 로딩하고 PBS 중 1% BSA로 차단했다. 실온에서 1시간 동안 배양한 후, 플레이트를 PBST로 헹군 다음, HC-HA를 항-HC(ITIH1) 항체(Abnova, H00003697)로, 이어서 HRP-연결된 항 토끼 항체(GE Life Sciences, NA934)로 검출했다. TMB ELISA 기질 용액(e-Biosciences, 00-4201-56)으로 발색시키고 1M H3PO4로 정지시켰다. (도 3) (기술적 오류로 인해 비접종된 미처리 그룹 및 비접종된 처리 그룹의 각각에서 하나의 반복이 제거되었으며; 이러한 특이값은 플레이트 레이아웃 상의 인접한 웰에서 나왔다).

실시예 5 - CAF와 공동 주사된 B16F0 흑색종 세포로부터 발생하는 종양에서 항-TSG-6 항체 3C6의 항종양 활성

CAF는, 종양을 분해한 후, 자기 분류(Miltenyi Biotec)를 사용하여 상피 마커, 내피 마커 및 백혈구 마커에 대해 음성인 세포, 및 PDGFRα에 대해 양성인 세포를 분류함으로써, 전통적으로 성장된 B16F0 종양(106개 세포 접종, ~1500 mm3에서 절단)으로부터 단리되었다. 그 다음 이러한 CAF는 B16F0 흑색종 세포(1000 B16F0: 1000 CAF 세포)와 함께 나이브 암컷 C57Bl/6 마우스 내로 공동 주사되었다. 세포 접종 시점(0일)에 치료를 시작하였다. 치료는 PBS(비히클 대조) 또는 항-TSG-6 항체 3C6(1 mg 고정 용량)으로 7일마다(그룹당 n=8) 이루어졌다(도 4a 내지 4c). 개별 종양 성장 곡선은 오른쪽에 나타낸다.

실시예 6 - 항-TSG-6 항체 3C6의 항종양 활성, 및 그의 항-PD-1과의 조합 활성

마우스(C57Bl/6, 암컷, 그룹당 n=8)는 치료 6일 전에 B16F0 흑색종 세포로 접종되었다. 마우스는 음성 대조로서 래트 IgG2a(항-PD-1 항체와 동일한 이소타입), 항-마우스 PD-1(CD279) RMP1-14(BioXcell)(150 μg 0, 3, 6, 10일), 항-TSG-6 항체 3C6(1 mg 0, 7일) 또는 조합으로 처리되었다. 개별 종양 성장 곡선은 오른쪽에 나타낸다. 상청액에서 IL-2는 항-IL2 포획 항체(R&D 시스템 MAB602)를 사용하여 ELISA에 의해 측정되었다(도 5a 내지 5e).

참조로서의 인용

본원에서 언급된 각각의 특허 문서 및 과학 논문의 전체 개시내용은 모든 목적을 위해 참조로 인용된다.

균등물

본 발명은 그 정신 또는 본질적인 특성에서 벗어나지 않고 다른 특정 형태로 구체화될 수 있다. 따라서, 전술한 실시형태는 본원에서 설명된 발명을 제한하기보다는 예시적인 모든 측면에서 고려되어야 한다. 따라서, 본 발명의 범위는 상기 설명보다는 첨부된 청구범위에 의해 표시되며, 청구범위와 균등한 의미 및 범위 내에 있는 모든 변경은 청구범위에 포함되도록 의도된다.

SEQUENCE LISTING <110> University Health Network Brokx, Richard Mason, Jacqueline M. Bray, Mark R. <120> TSG-6 ANTIBODIES AND USES THEREFOR <130> 011506-5023 <150> US 62/817,152 <151> 2019-03-12 <160> 104 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 262 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 1 Met Glu Arg His Trp Ile Phe Leu Ser Leu Leu Ser Val Ile Ala Gly 1 5 10 15 Val His Ser Gln Val Arg Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Ser Tyr Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Ile Pro Ser Ser Gly Tyr Thr Lys Asn Lys 65 70 75 80 Gln Asn Phe Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Asn Leu Thr Tyr Glu Asp Ser Ala Val 100 105 110 Tyr Ser Cys Ala Arg Ser Asp Gly Ser Tyr Pro Tyr Tyr Phe Asp Tyr 115 120 125 Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro 130 135 140 Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser 145 150 155 160 Met Val 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<223> Synthetic polypeptide <400> 78 Ser Val Ile Tyr 1 <210> 79 <400> 79 000 <210> 80 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 80 Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Pro Thr 1 5 <210> 81 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 81 Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Gln Trp 1 5 <210> 82 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 82 Ile His Pro Asn Ser Gly Ser Thr 1 5 <210> 83 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 83 Thr Arg Trp Ala Met Asp Tyr 1 5 <210> 84 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 84 Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr 1 5 10 <210> 85 <400> 85 000 <210> 86 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 86 Ser Gln Ser Thr His Val Pro Trp Thr 1 5 <210> 87 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 87 Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr 1 5 <210> 88 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 88 Ile Arg His Lys Ala Lys Gly Tyr Thr Ala 1 5 10 <210> 89 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 89 Ala Arg Leu Tyr Tyr Tyr Gly Ser Pro His Trp Tyr Phe Asp Val 1 5 10 15 <210> 90 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 90 Ser Ser Val Ser Tyr 1 5 <210> 91 <400> 91 000 <210> 92 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 92 Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Pro Thr 1 5 <210> 93 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 93 Asp Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp 1 5 <210> 94 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 94 Ile Asp Pro Ser Ser Gly Gly Ala 1 5 <210> 95 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 95 Val Arg Ser Arg Tyr Asp Tyr Asp Gly Trp Phe Ala Tyr 1 5 10 <210> 96 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 96 Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Tyr 1 5 10 <210> 97 <400> 97 000 <210> 98 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 98 Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr 1 5 <210> 99 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 99 Asp Asp Thr Phe Ile Asn Tyr Gly 1 5 <210> 100 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 100 Thr Phe Pro Ser Asn Gly Asn Thr 1 5 <210> 101 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 101 Ala Arg His Ser Asn Leu Pro Tyr Phe Asp His 1 5 10 <210> 102 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 102 Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly Asn Gln Lys Asn Tyr 1 5 10 <210> 103 <400> 103 000 <210> 104 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic polypeptide <400> 104 Gln Asn Asp His Ser Tyr Pro Phe Thr 1 5

Claims (77)

1. 다음을 포함하는 항체:
   a) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
   b) 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
   c) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
   d) 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
   e) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
   f) 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
   g) 서열번호 13의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 14의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
   8) 서열번호 15의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 16의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
   h) 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
   i) 서열번호 19의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 20의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
   j) 서열번호 21의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 22의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
   k) 서열번호 23의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 24의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
   l) 서열번호 25의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 26의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
2. 다음을 포함하는 항체:
   a) 서열번호 27을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 28을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 29를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 30을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 31을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 32를 포함하는 vlCDR3;
   b) 서열번호 33을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 34를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 35를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 36을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 37을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 38을 포함하는 vlCDR3;
   c) 서열번호 39를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 40을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 41을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 42를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 43을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 44를 포함하는 vlCDR3;
   d) 서열번호 45를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 46을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 47을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 48을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 49를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 50을 포함하는 vlCDR3;
   e) 서열번호 51을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 52를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 53을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 54를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 55를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 56을 포함하는 vlCDR3;
   f) 서열번호 57을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 58을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 59를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 60을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 61을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 62를 포함하는 vlCDR3;
   g) 서열번호 63을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 64를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 65를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 66을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 67을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 68을 포함하는 vlCDR3;
   h) 서열번호 69를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 70을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 71을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 72를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 73을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 74를 포함하는 vlCDR3;
   i) 서열번호 75를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 76을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 77을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 78을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 79를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 80을 포함하는 vlCDR3;
   j) 서열번호 81을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 82를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 83을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 84를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 85를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 86을 포함하는 vlCDR3;
   k) 서열번호 87을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 88을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 89를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 90을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 91을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 92를 포함하는 vlCDR3;
   l) 서열번호 93을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 94를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 95를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 96을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 97을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 98을 포함하는 vlCDR3;
   m) 서열번호 99를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 100을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 101을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 102를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 103을 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 104를 포함하는 vlCDR3.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 결합하는, 항체.
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는, 인간 IgG와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 불변 영역을 포함하는, 항체.
5. 제4항에 있어서, 상기 인간 IgG는 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4로 구성된 군에서 선택되는, 항체.
6. 제5항에 있어서, 상기 IgG는 IgG1인, 항체.
7. 제5항에 있어서, 상기 IgG는 IgG2b인, 항체.
8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따른 항체를 인코딩하는 핵산 조성물.
9. 제8항에 따른 핵산 조성물을 포함하는 발현 벡터 조성물로서, 상기 제1 핵산은 제1 발현 벡터에 함유되고, 상기 제2 핵산은 제2 발현 벡터에 함유되는, 발현 벡터 조성물.
10. 제8항에 따른 핵산 조성물을 포함하는 발현 벡터 조성물로서, 상기 제1 핵산 및 상기 제2 핵산은 단일 발현 벡터에 함유되는, 발현 벡터 조성물.
11. 제9항 또는 제10항의 발현 벡터 조성물을 포함하는, 숙주 세포.
12. 항체를 제조하는 방법으로서, 상기 항체가 발현되는 조건 하에서 제11항의 숙주 세포를 배양하는 단계, 및 상기 항체를 회수하는 단계를 포함하는, 방법.
13. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 항체, 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 조성물.
14. 대상체에서 면역 반응을 조절하는 방법으로서, 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제13항에 따른 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
15. 제14항에 있어서, 상기 방법은 대상체에서 면역 반응을 자극하고, 상기 방법은 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제13항에 따른 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하며, 상기 항체는 TSG-6 길항제로서 역할을 하는, 방법.
16. 제14항에 있어서, 상기 방법은 대상체에서 면역 반응을 억제하고, 상기 방법은 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제13항에 따른 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하며, 상기 항체는 TSG-6 작용제로서 역할을 하는, 방법.
17. 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제13항에 따른 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하고, 상기 항체는 TSG-6 길항제로서 역할을 하는, 방법.
18. 제17항에 있어서, 상기 암은 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
19. 제15항, 제17항 또는 제18항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
20. 제17항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 암은 고형 종양인, 방법.
21. 제17항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 암은 흑색종인, 방법.
22. 제17항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 하나 이상의 추가 치료제와 조합되어 암을 치료하는, 방법.
23. 제22항에 있어서, 상기 추가 치료제는 다른 면역 체크포인트 억제제인, 방법.
24. 제23항에 있어서, 상기 다른 면역 체크포인트 억제제는 PD-1 억제제, PD-L1 억제제, CTLA-4 억제제, TIM-3 억제제, 및 LAG-3 억제제로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
25. 대상체에서 섬유증을 치료하는 방법으로서, 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제13항에 따른 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하고, 상기 항체는 TSG-6 길항제로서 역할을 하는, 방법.
26. 제25항에 있어서, 섬유성 조직은 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
27. 제25항 또는 제26항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
28. 제25항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 하나 이상의 추가 치료제와 조합되어 섬유증을 치료하는, 방법.
29. 대상체에서 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하는 방법으로서, 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제13항에 따른 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하고, 상기 항체는 TSG-6 길항제로서 역할을 하는, 방법.
30. 제29항에 있어서, 상기 자가면역 또는 염증성 장애는 특발성 폐동맥 고혈압인, 방법.
31. 제29항 또는 제30항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
32. 제30항 또는 제31항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 또한 폐 섬유증을 갖는, 방법.
33. 제29항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 하나 이상의 추가 치료제와 조합되어 폐동맥 고혈압 및/또는 폐 섬유증을 치료하는, 방법.
34. 제29항에 있어서, 상기 자가면역 또는 염증성 장애는 천식인, 방법.
35. 제34항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
36. 제34항 또는 제35항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 폐에서 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
37. 제34항 내지 제36항 중 어느 한 항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 기도 호산구 증가증을 갖는, 방법.
38. 대상체에서 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하는 방법으로서, 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제13항에 따른 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하고, 상기 항체는 TSG-6 작용제로서 역할을 하는, 방법.
39. 제38항에 있어서, 상기 자가면역 또는 염증성 장애는 류마티스 관절염인, 방법.
40. 제16항, 제38항 또는 제39항 중 어느 한 항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 낮은 발현을 갖는, 방법.
41. 제29항 내지 제40항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 하나 이상의 추가 치료제와 조합되어 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하는, 방법.
42. 다음을 포함하는 항체:
    a) 서열번호 17의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 18의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
43. 다음을 포함하는 항체:
    a) 서열번호 75를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 76을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 77을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 78을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 79를 포함하는 vlCDR2, 및 서열번호 80을 포함하는 vlCDR3.
44. 제42항 또는 제43항에 있어서, 상기 항체는 인간 및/또는 마우스 TSG-6에 결합하는, 항체.
45. 제42항 내지 제44항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는, 인간 IgG와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 불변 영역을 포함하는, 항체.
46. 제45항에 있어서, 상기 인간 IgG는 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4로 구성된 군에서 선택되는, 항체.
47. 제46항에 있어서, 상기 IgG는 IgG1인, 항체.
48. 제42항 내지 제47항 중 어느 한 항에 따른 항체를 인코딩하는 핵산 조성물.
49. 제48항에 따른 핵산 조성물을 포함하는 발현 벡터 조성물로서, 상기 제1 핵산은 제1 발현 벡터에 함유되고, 상기 제2 핵산은 제2 발현 벡터에 함유되는, 발현 벡터 조성물.
50. 제48항에 따른 핵산 조성물을 포함하는 발현 벡터 조성물로서, 상기 제1 핵산 및 상기 제2 핵산은 단일 발현 벡터에 함유되는, 발현 벡터 조성물.
51. 제49항 또는 제50항의 발현 벡터 조성물을 포함하는, 숙주 세포.
52. 항체를 제조하는 방법으로서, 상기 항체가 발현되는 조건 하에서 제51항의 숙주 세포를 배양하는 단계, 및 상기 항체를 회수하는 단계를 포함하는, 방법.
53. 제42항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 항체, 및 제약상 허용되는 담체 또는 희석제를 포함하는 조성물.
54. 대상체에서 면역 반응을 조절하는 방법으로서, 제42항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제53항에 따른 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
55. 제54항에 있어서, 상기 방법은 대상체에서 면역 반응을 자극하고, 상기 방법은 제42항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제53항에 따른 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하며, 상기 항체는 TSG-6 길항제로서 역할을 하는, 방법.
56. 대상체에서 암을 치료하는 방법으로서, 제42항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제53항에 따른 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하고, 상기 항체는 TSG-6 길항제로서 역할을 하는, 방법.
57. 제56항에 있어서, 상기 암은 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
58. 제55항 내지 제57항 중 어느 한 항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
59. 제56항 내지 제58항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 암은 고형 종양인, 방법.
60. 제56항 내지 제59항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 암은 흑색종인, 방법.
61. 제56항 내지 제60항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 하나 이상의 추가 치료제와 조합되어 암을 치료하는, 방법.
62. 제61항에 있어서, 상기 추가 치료제는 다른 면역 체크포인트 억제제인, 방법.
63. 제62항에 있어서, 상기 다른 면역 체크포인트 억제제는 PD-1 억제제, PD-L1 억제제, CTLA-4 억제제, TIM-3 억제제, 및 LAG-3 억제제로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
64. 대상체에서 섬유증을 치료하는 방법으로서, 제42항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제53항에 따른 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하고, 상기 항체는 TSG-6 길항제로서 역할을 하는, 방법.
65. 제64항에 있어서, 섬유성 조직은 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
66. 제64항 또는 제65항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
67. 제64항 내지 제66항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 하나 이상의 추가 치료제와 조합되어 섬유증을 치료하는, 방법.
68. 대상체에서 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하는 방법으로서, 제42항 내지 제48항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제53항에 따른 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하고, 상기 항체는 TSG-6 길항제로서 역할을 하는, 방법.
69. 제68항에 있어서, 상기 자가면역 또는 염증성 장애는 특발성 폐동맥 고혈압인, 방법.
70. 제68항 또는 제69항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
71. 제69항 또는 제70항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 또한 폐 섬유증을 갖는, 방법.
72. 제69항 내지 제71항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 하나 이상의 추가 치료제와 조합되어 폐동맥 고혈압 및/또는 폐 섬유증을 치료하는, 방법.
73. 제68항에 있어서, 상기 자가면역 또는 염증성 장애는 천식인, 방법.
74. 제73항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
75. 제73항 또는 제74항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 폐에서 TSG-6 및/또는 HC-HA의 높은 발현을 갖는, 방법.
76. 제73항 내지 제75항 중 어느 한 항에 있어서, 치료될 상기 대상체는 기도 호산구 증가증을 갖는, 방법.
77. 제68항 내지 제76항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체는 하나 이상의 추가 치료제와 조합되어 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하는, 방법.

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