本發明之化合物係多巴胺1受體(D1)之正性別構調節劑(positive allosteric modulators;PAM)。因此,本發明之化合物可用於治療其中D1起作用之病狀,例如帕金森氏症及精神分裂症,包括緩解相關症狀,例如輕微認知損傷。亦認為本發明之化合物可用於治療阿茲海默氏症(Alzheimer's disease)之症狀,例如認知損傷。本發明之化合物亦作為單一療法用於改良帕金森氏症之運動性症狀。此外,據信本發明之化合物可用於治療抑鬱症及注意力缺失-過動病症(ADHD)。 本發明提供新型結晶形式之化合物2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮,其係多巴胺1受體(D1)之正性別構調節劑(PAM)並因此用於治療上文所述之病症。據信結晶形式之2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮提供製造及研發該化合物自身以及相關化合物(例如包含2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮及4-羥基苯甲酸之組合物之共結晶形式)之優勢。 美國專利第8962654號揭示某些3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基化合物作為多巴胺1受體(D1)之正性別構調節劑(PAM),包括2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮以及包含2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮及4-羥基苯甲酸之組合物之共結晶形式。 本發明提供結晶形式之2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮。 此外,本發明提供結晶形式之2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮,其特徵在於使用CuKα輻射之X射線粉末繞射圖案,其具有在9.15°繞射角2θ處之繞射峰與一或多個選自由以下組成之群之峰之組合:19.4°、16.1°及16.6°;其中繞射角之公差為0.2°。 此外,本發明提供醫藥組合物,其包含結晶形式之2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮及醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。 此外,本發明提供治療帕金森氏症之方法,其包含將有效量之結晶形式之2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮投與需要其之患者。 此外,本發明提供治療與帕金森氏症相關聯之輕微認知損傷之方法,其包含將有效量之結晶形式之2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮投與需要其之患者。 此外,本發明提供結晶形式之2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮用於療法。 此外,本發明提供結晶形式之2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮用於療法,其特徵在於使用CuKα輻射之X射線粉末繞射圖案,其具有在9.15°繞射角2θ處之繞射峰與一或多個選自由以下組成之群之峰之組合:19.4°、16.1°及16.6°;其中繞射角之公差為0.2°。 此外,本發明提供結晶形式之2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮用於治療帕金森氏症。 此外,本發明提供結晶形式之2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮之用途,其用於製造用於帕金森氏症之藥劑。 化合物2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮由下式Ia所表示。
式Ia之化合物可與其他藥物結合使用,該等其他藥物用於治療/預防/阻抑或改善式Ia化合物對其有用之疾病或病狀,包括帕金森氏症及精神分裂症。因此,該(等)其他藥物可藉由常用路徑並以常用量與式Ia化合物同時或依序地投與。當式Ia化合物與一或多種其他藥物同時使用時,除式Ia化合物之外含有此等其他藥物之醫藥單位劑型係較佳的。因此,本發明之醫藥組合物包括除式Ia化合物之外亦含有一或多種其他活性成分之彼等。可與式Ia化合物組合,分開投與或在同一醫藥組合物中之有效治療帕金森氏症之其他活性成分之實例包括,但不限於: (a)多巴胺前體,例如左旋多巴;甲基左旋多巴及乙基左旋多巴;及 (b)多巴胺激動劑,其包括普拉克索、羅匹尼羅(ropinirole)、阿樸嗎啡(apomorphine)、羅替高汀(rotigotine)、溴隱亭(bromocriptine)、卡麥角林(cabergoline)及培高利特(pergolide)。 應瞭解,本發明之化合物可以立體異構物存在。本發明之實施例包括所有鏡像異構物、非鏡像異構物及其混合物。較佳實施例係單一非鏡像異構物,且更佳實施例係單一鏡像異構物。 如本文中所使用,術語「共晶體(cocrystal)」係指包含兩種化合物之多組份結晶固體形式,其中該等化合物主要係藉助非共價及非離子化學相互作用(例如氫鍵)結合。在醫藥領域內,共晶體通常包含係活性醫藥成分之第一化合物及稱為客體化合物或共構物之第二化合物。共晶體與結晶鹽形式之區別之處在於第一化合物保持基本上不帶電或中性。共晶體與結晶水合物或溶劑合物形式之區別之處在於客體化合物不僅僅係水或溶劑。較佳共晶體係具有適宜熔點之穩定形式。 如本文中所使用,術語「患者」係指動物(例如哺乳動物),並包括人類。人類係較佳患者。 亦認識到熟習此項技術者可藉由將有效量之式Ia化合物投與目前顯示出症狀之患者來治療帕金森氏症。因此,術語「治療(treatment及treating)」意欲指所有過程,其中係指現存病症及/或其症狀進展之減慢、中斷、阻止、控制或停止,但不一定顯示完全消除所有症狀。 亦認識到熟習此項技術者可藉由將有效量之式Ia化合物投與有未來症狀之風險的患者來治療帕金森氏症且意欲包括其預防性治療。 如本文中所使用,術語式Ia化合物之「有效量」係指有效治療病症(例如本文中所述帕金森氏症)之劑量的量。主治醫師作為熟習此項技術者,可藉由使用習用技術及藉由觀察在類似情況下所獲得之結果而容易地確定有效量。在確定式Ia化合物之有效量或劑量時要考慮若干因素,包括但不限於:欲投與之式Ia化合物;若使用,其他試劑之共投與;哺乳動物之種類;其大小、年齡及一般健康狀況;病症(例如帕金森氏症)之侵犯程度或嚴重程度;個別患者之反應;投與模式;所投與製劑之生物有效性特徵;所選擇之劑量方案;其他合併用藥之使用;及其他相關情況。 式Ia化合物可單獨投與或以具有醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑之醫藥組合物之形式投與。此等醫藥組合物及其製備製程在業內已眾所周知(參見,例如Remington:The Science and Practice of Pharmacy, D.B. Troy編輯,第21版,Lippincott, Williams & Wilkins,2006)。
人類 D1 受體正性別構調節分析
穩定表現人類D1受體之HEK293細胞係使用pBABE-bleo載體及Phoenix逆轉錄病毒系統,經由逆轉錄病毒基因轉導而生成。在37℃及5% CO
2
下,使細胞於補充有10%小牛血清、20mM HEPES、2mM麩胺酸鹽及150µg/ml吉歐黴素(zeocin)之DMEM/F12 (Gibco)中生長。融匯約80%時,使用0.25%胰蛋白酶/EDTA獲取細胞,懸浮於附加有8% DMSO之FBS中並儲存於液氮中。在分析之日,將細胞解凍並再懸浮於STIM緩衝液(補充有0.1% BSA、20mM HEPES、200µM IBMX及100µM抗壞血酸之Hanks平衡鹽溶液)中。將測試化合物於DMSO中連續稀釋(1:3)並然後進一步以1:40稀釋至含有2× EC
20
濃度之多巴胺之STIM緩衝液中。將多巴胺之EC
20
濃度定義為使環狀AMP增至高達可由多巴胺誘導之最大量之20%之濃度;在此分析中,EC
max
係5µM且EC
20
通常係12nM。將25 µl此溶液與25µl細胞懸浮液(1,250個細胞)混合並分配至96孔半區板之每個孔中;最終DMSO濃度係1.25%。將板在25℃下培育60分鐘。根據廠商說明使用HTRF檢測(Cisbio™)將cAMP產生量化:將含有抗cAMP穴狀化合物及D2-偶聯物(各25µl)之裂解緩衝液添加至孔,將板再培育60-90分鐘並使用EnVision板讀取儀(PerkinElmer™)檢測螢光。使用cAMP標準曲線將數據轉換為cAMP濃度,並使用4參數非線性邏輯方程(Abase™ v5.3.1.22)將其分析為絕對EC
50
。正性別構調節劑之絕對EC
50
係作為產生半最大量之cAMP之濃度來計算,其係基於自定義最小反應之多巴胺EC
20
至藉由添加5µM多巴胺定義之EC
max
反應範圍內之窗口。 在以上分析中,參考化合物1之化合物在人類D1受體處展現4.59 ± 0.96 nM (SEM; n=7)之絕對EC
50
及79.7 ± 6.2%之最大反應。參考化合物2之共晶體在人類D1受體處展現1.11 ± 0.11 nM (SEM; n=2)之絕對EC
50
。該等數據證明參考化合物1之化合物係人類D1受體之正性別構調節劑。 本發明化合物之抗帕金森效應可使用業內熟知之程序(例如自發活動之動物模型)來測定。例如,參考化合物1之化合物展示對人類化多巴胺1受體(D1)敲入小鼠之基礎(習慣性)自發活動及蛇根鹼誘導之運動不能之效應。
人類 D1 受體敲入小鼠之生成
其中鼠類多巴胺1 (D1)受體由其人類對應體取代之基因轉殖小鼠可藉由標準技術生成。例如,小鼠基因體片段係自RP23細菌人工染色體文庫亞選殖且再選殖至PGK-neo靶向載體中。小鼠開放閱讀框係由外顯子2中人類D1受體開放閱讀框所取代。外顯子2上游之neo選擇標記側接有frt位點用於之後去除。外顯子2側接有loxP選擇位點允許藉由與表現cre核酸酶基因之小鼠雜交以生成D1敲出小鼠之選擇。 C57BL/6 N胚胎幹細胞系B6-3生長於具有20%胎牛血清及2×10
6
單位/l白血病抑制因子之高葡萄糖DMEM中小鼠胚胎成纖維細胞之有絲分裂不活化飼養層上。將10百萬胚胎幹細胞加30微克線性化載體DNA電穿孔並經受G418選擇(200微克/ml)。將純系分離並藉由南方墨點法(Southern blotting)分析。 將含有預期大小之插入物之純系插入囊胚中並藉由PCR將所得小鼠基因分型。將雄性嵌合體與含有Flp核酸酶基因之雌性雜交以消除選擇標記。藉由PCR鑑定含有人類D1受體而無選擇標記之後代。將雄性異形合子與雌性C57BL/6小鼠交配。將含有人類D1受體之雄性及雌性後代交配並藉由PCR鑑定同型合子。同型合子之行為及繁殖係正常的,且對以後世代而言,細胞群落會維持在同型合子狀態。
基礎 ( 習慣性 ) 自發活動
自發活動係使用自動化系統追蹤小鼠移動來量測。將人類D1受體敲入小鼠置於籠室中並使其習慣籠室60分鐘。在此期間,這些小鼠顯示會隨時間而減少運動。投與本發明之化合物之後,動物移動會以劑量依賴性方式增加。 更具體地,自發活動箱盒係被置於以具有紅外光束用於量測稱為步行(ambulation)之運動活動(水平及垂直活動)的矩形機框中。在7:30與15:00鐘點之間記錄自發活動。 將小鼠隨機分配至處理組,如表1所示。將每隻小鼠個別置於一個自發活動箱中習慣60分鐘。然後小鼠經口給藥且在60分鐘時期內每10分鐘記錄每隻小鼠步行之總數。在利用蛇根鹼預處理之小鼠中,不包括先前的習慣時期。因此,給藥後立即量測步行總數60分鐘。將數據自軟體/電腦轉移至試算表用於進一步分析。使用單向ANOVA實施統計學分析,隨後使用Fishers’ LSD或Dunnett’s測試實施事後分析。 在基礎(習慣性)運動分析中,參考化合物1係以劑量反應性方式促進小鼠移動(表1)。此證明參考化合物1對習慣於環境之動物的自發活動係有效的。 表1
蛇根鹼誘導之運動不能之逆轉
蛇根鹼係兒茶酚胺消耗劑(消耗多巴胺及正腎上腺素),且小鼠在處理後18-24小時,會變得運動不能並具有減少之自發活動計數。蛇根鹼誘導之運動不能係藉由在0.15 mg/kg或0.3 mg/kg蛇根鹼單一皮下劑量後約18-24小時,量測化合物對自發活動之效應來評估。所用器材與如先前所述之用於習慣性自發活動者相同。 將雄性人類化多巴胺D1受體敲入小鼠隨機分配至處理組,如表2中所示。將每隻小鼠個別置於一個自發活動箱中。在給藥後長達60分鐘內量測每隻小鼠每10分鐘之步行數。因此,在共計60分鐘內評估對蛇根鹼誘導之探索行為之效應。將數據自軟體/電腦轉移至試算表用於進一步分析。使用單向ANOVA實施統計學分析,隨後使用t-測試實施事後分析。 在上述分析中,參考化合物1之化合物可逆轉蛇根鹼處理之效應並係以劑量反應性方式恢復小鼠之移動(表2)。此證明參考化合物1之化合物在帕金森氏症之活體內模型中係有效的。 表2
式Ia化合物可藉由化學領域內已知之方法或藉由本文中所述之新穎方法來製備。用於製備式Ia化合物及製造式Ia化合物之新穎中間體之方法提供本發明之其他特徵且藉由以下程序說明。 通常,式Ia化合物可自其中Pg1表示適宜羥基保護基團之式II化合物製備(方案1)。Pg1之特定值包括第三丁基(二甲基)矽基及第三丁基(二苯基)矽基。更具體地,使式II化合物(其中Pg1係第三丁基(二甲基)矽基)與四丁基氟化銨在諸如四氫呋喃之溶劑中反應以提供式Ia化合物。式II化合物(其中Pg1係第三丁基(二甲基)矽基)可藉由使式III化合物與甲基鋰在適宜溶劑中反應來製備。適宜溶劑包括四氫呋喃。式III化合物(其中Pg1係第三丁基(二甲基)矽基)可藉由使式IV化合物與氫在適宜過渡金屬觸媒之存在下反應來製備,該觸媒係例如1,1'-雙(二異丙基膦基)二茂鐵(1,5-環辛二烯)四氟硼酸銠(I)。反應方便地於例如甲醇之溶劑中實施。式IV化合物(其中Pg1係第三丁基(二甲基)矽基)可藉由使式V化合物與丙烯酸乙酯在過渡金屬偶合觸媒(例如乙酸鈀)、配體(例如三鄰甲苯基膦)及鹼(例如三乙胺)之存在下反應來製備。反應方便地於例如乙腈之溶劑中實施。式V化合物可藉由在活化劑(例如六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯啶基鏻)及鹼(例如三乙胺)之存在下用2,6-二氯苯乙酸醯化式VIII化合物來製備。反應方便地於例如二甲基甲醯胺之溶劑中實施。 方案1
或者,式II化合物可自其中Pg1係適宜羥基保護基團之式VI化合物製備(方案2)。更具體地,將式VI化合物(其中Pg1係第三丁基(二甲基)矽基)利用2,6-二氯苯乙酸在活化劑(例如1,1’-羰基二咪唑)之存在下醯化以提供式II化合物。反應方便地於例如四氫呋喃之溶劑中實施。式VI化合物可藉由利用氫在例如鈀之觸媒存在下還原式VII化合物來製備。反應方便地於例如乙醇之溶劑中實施。式VII化合物可藉由在觸媒(例如乙酸鈀)、配體(例如2-二環己基膦基-2′,6′-二甲氧基聯苯)及鹼(例如碳酸鉀)之存在下使式VIII化合物與2-甲基丁-3-烯-2-醇偶合來製備。反應方便地於例如二甲基甲醯胺之溶劑中實施。式VIII化合物可自式X化合物經式IX中間體化合物以多步驟方式來製備,如製備與實例中所述。式X化合物可如製備與實例中所述來製備。 方案2
如本文中所使用,「DMSO」係指二甲亞碸;「Tris」係指參羥甲基胺基甲烷;「DTT」係指二硫蘇糖醇;「HEC」係指羥乙基纖維素;「DMEM」係指杜爾貝寇改良之伊格爾培養基(Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium);「MS」係指質譜;及「HEPS」係指4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸。
製備 1
2-溴-D-苯丙胺酸甲酯鹽酸鹽之合成
將2-溴-D-苯丙胺酸(22.4 g, 91.8 mmol)溶解於甲醇(459 mL)中。在室溫下添加乙醯氯(65.3 mL, 917.7 mmol)。攪拌36小時。在減壓下濃縮,以得到標題化合物(27.2 g, 92.3 mmol)。MS (m/z):258 (M+1)。 2-溴-D-苯丙胺酸甲酯鹽酸鹽之替代合成 在0℃下,於適當容器中將乙醯氯(562.79 g, 7.17 mol)添加至甲醇(10.00 L)。將混合物加熱至17.5℃並攪拌。30分鐘後添加2-溴-D-苯丙胺酸(500.00 g, 2.05莫耳)並加熱至回流。4小時後,冷卻至20℃並在減壓下去除溶劑以得到呈灰白色固體之標題化合物(589 g, 1.96 mol)。MS (m/z):258(M-Cl (
79
Br)),260 (M-Cl (
81
Br))。
製備 2
2-溴-N-(甲氧基羰基)-D-苯丙胺酸甲酯之合成
將2-溴-D-苯丙胺酸甲酯鹽酸鹽(27.2 g, 92.3 mmol)溶解於二氯甲烷(923 mL)及水(185 mL)中。在室溫下添加碳酸氫鈉(31.0 g, 369.4 mmol)及氯甲酸甲酯(7.86 mL, 101.6 mmol)。將混合物攪拌2.5小時。利用水稀釋並利用二氯甲烷萃取。經硫酸鈉乾燥二氯甲烷萃取物,過濾並在減壓下濃縮。藉由矽膠層析利用乙酸乙酯:己烷(10%-75%梯度)溶析來純化殘餘物,以得到標題化合物(29.1 g, 92.1 mmol)。MS (m/z):316 (M+1)。 2-溴-N-(甲氧基羰基)-D-苯丙胺酸甲酯之替代合成 在10℃下,於適當容器中將水(2.94 L)及碳酸氫鈉(648.25 g, 7.64 mol)添加至於二氯甲烷(9.86 L)中之2-溴-D-苯丙胺酸甲酯鹽酸鹽(580 g, 1.91 mol)。5分鐘後,添加氯甲酸甲酯(198.53 g, 2.10 mol)並在20℃下攪拌混合物。3小時後,添加水(2.5 L)並分離層。利用二氯甲烷萃取水層,經硫酸鈉乾燥合併之有機萃取物並在減壓下濃縮,以得到標題化合物(556 g, 1.74 mol)。MS (m/z):315.8(M+1 (
79
Br)),317.8(M+1 (
81
Br))。
製備 3
(3R)-5-溴-3,4-二氫-1
H
-異喹啉-2,3-二甲酸二甲酯之合成
在室溫下,將2-溴-N-(甲氧基羰基)-D-苯丙胺酸甲酯(29.1 g, 92.10 mmol)及多聚甲醛(9.13 g, 101.3 mmol)於冰乙酸(115 mL, 2.01 mol)及濃硫酸(38.4 mL, 719.9 mmol)中之混合物攪拌7小時。在水與乙酸乙酯之間分配。分離層並利用乙酸乙酯萃取水層。將乙酸乙酯萃取物合併並經硫酸鈉乾燥,過濾並在減壓下濃縮。藉由矽膠層析利用乙酸乙酯:己烷(5%-40%梯度)溶析來純化殘餘物,以得到標題化合物(27.6 g, 84.0 mmol)。MS (m/z):328 (M+1)。
製備 3a
(3R)-5-溴-3,4-二氫-1
H
-異喹啉-2,3-二甲酸二甲酯及(3R)-5-溴-2-甲氧基羰基-3,4-二氫-1
H
-異喹啉-3-甲酸之合成
在10℃下,於適當容器中向乙酸(4.29 L)中添加2-溴-N-(甲氧基羰基)-D-苯丙胺酸酯(572 g, 1.81 mol)及多聚甲醛(205.86 g, 2.17 mol)。10分鐘後,緩慢添加濃硫酸(2.63 kg, 26.83 mol)並然後在35℃下攪拌。12小時後,冷卻至15℃並添加水(7.5 L)及乙酸乙酯(6 L)。分離層並利用乙酸乙酯再萃取水層(2.5 L)。經硫酸鈉乾燥合併之有機萃取物,過濾並在減壓下濃縮,以得到標題化合物與乙酸(640 g, 1.69莫耳)之混合物。質譜(m/z):3a:327.95(M+1 (
79
Br)),330.05(M+1 (
81
Br))。3b:314(M+1 (
79
Br)),315.95(M+1 (
81
Br))。
製備 4 (3R)-5-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酸甲酯鹽酸鹽之合成 將(3R)-5-溴-3,4-二氫-1
H
-異喹啉-2,3-二甲酸二甲酯(27.55 g, 84.0 mmol)溶解於5N鹽酸(330.6 mL, 1.65 mol)中並加熱至回流保持3天。在減壓下濃縮以得到白色固體。利用二乙醚洗滌固體並在40℃於真空下乾燥過夜,以得到(3R)-5-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酸鹽酸鹽(1:1)(20.8 g, 71.1 mmol)。將乙醯氯(50.6 mL, 711.0 mmol)添加至(3R)-5-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酸鹽酸鹽(1:1)(20.8 g, 71.1 mmol)於甲醇(474 mL)中之0℃混合物。升溫至室溫並攪拌36小時。在減壓下濃縮並乾燥,以得到標題化合物(21.9 g, 71.4 mmol)。MS (m/z):270 (M+1)。
製備 5
(3R)-5-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酸鹽酸鹽之合成
於適當容器中,將水(1.3 L)及36.5%鹽酸(9.07 Kg, 90.81莫耳)添加至(3R)-5-溴-3,4-二氫-1
H
-異喹啉-2,3-二甲酸二甲酯與(3R)-5-溴-2-甲氧基羰基-3,4-二氫-1
H
-異喹啉-3-甲酸(製備3a)(520 g, 1.27莫耳)之混合物並在95℃下攪拌混合物。12小時後,將混合物冷卻至10℃並攪拌15分鐘。將混合物過濾並在40℃於真空下乾燥固體,以得到標題化合物(332 g, 1.13莫耳)。MS (m/z):256.1(M-Cl (
79
Br)),258(M-Cl (
81
Br))。
製備 6
(3R)-5-溴-3,4-二氫-1
H
-異喹啉-2,3-二甲酸2-第三丁酯-3-甲酯之合成
將(3R)-5-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酸甲酯鹽酸鹽(21.0 g, 68.5 mmol)溶解於1,4-二噁烷(685 mL)中。在室溫下添加飽和碳酸氫鈉溶液(685 mL, 17.5 mol)及二碳酸二-第三丁酯(29.9 g, 137.0 mmol)。將雙相混合物攪拌90分鐘。利用乙酸乙酯萃取。經硫酸鈉乾燥乙酸乙酯,過濾並在減壓下濃縮。藉由矽膠層析利用乙酸乙酯:己烷(5%-50%梯度)溶析來純化殘餘物,以得到標題化合物(19.5 g, 52.7 mmol)。MS (m/z):270 (M-tBOC+1)。
製備 7
[(3R)-5-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基]甲醇之合成
在-35℃下,於適當容器中將氫化鋁鋰(2 L, 2.00 mol, 1M於THF中)添加至於四氫呋喃(4.88 L)中之(3R)-5-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-甲酸鹽酸鹽(325.4 g, 1.11 mol),然後經60分鐘升溫至25℃並攪拌。3小時後,將混合物冷卻至-5℃,然後添加水(76 mL)、15% w/w氫氧化鈉水溶液(76 mL)及水(228 mL)。將混合物加熱至25℃,添加無水硫酸鎂(750 g)並攪拌。將混合物過濾並在減壓下濃縮以得到固體。將二氯甲烷(690 mL)添加至固體並漿化30分鐘,然後過濾以得到固體。在35℃於真空下乾燥固體,以得到標題化合物(148.9 g 0.55 mol)。MS (m/z):242(M+1 (
79
Br)),244(M+1 (
81
Br))。
製備 8
(3R)-5-溴-3-(羥甲基)-3,4-二氫-1
H
-異喹啉-2-甲酸第三丁酯之合成
在室溫下,於水浴上將甲醇(10.1 mL, 248.5 mmol)及硼氫化鋰(99.4 mL, 198.8 mmol, 2 M於THF中)添加至(3R)-5-溴-3,4-二氫-1
H
-異喹啉-2,3-二甲酸2-第三丁基酯-3-甲基酯(18.4 g, 49.7 mmol)於四氫呋喃(497 mL)中之溶液。攪拌40分鐘並利用水使反應淬滅。利用乙酸乙酯萃取。經硫酸鈉乾燥乙酸乙酯萃取物,過濾並在減壓下濃縮。藉由矽膠層析利用乙酸乙酯:己烷(5%-80%梯度)溶析來純化殘餘物。在高真空下乾燥過夜以得到呈白色固體之標題化合物(19.1 g, 55.8 mmol)。MS (m/z):286 (M-tBu+1)。
製備 9
(3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉之合成
在室溫下,將三氟乙酸(75.5 mL, 998.3 mmol)添加至(3R)-5-溴-3-(羥甲基)-3,4-二氫-1
H
-異喹啉-2-甲酸第三丁酯(15.5 g, 45.3 mmol)於二氯甲烷(226 mL)之溶液中。攪拌30分鐘並在減壓下濃縮。在真空下乾燥以得到呈濕固體之[(3R)-5-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基]甲醇; 2,2,2-三氟乙酸。將[(3R)-5-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基]甲醇; 2,2,2-三氟乙酸溶解於二氯甲烷(753 mL)中。添加1
H
-咪唑(51.3 g, 753 mmol)、
N
,
N
-二甲基-4-吡啶胺(460 mg, 3.77 mmol)及第三丁基二甲基氯矽烷(13.6 g, 90.4 mmol)。在室溫下攪拌過夜。添加飽和氯化銨溶液並利用二氯甲烷萃取。經硫酸鈉乾燥二氯甲烷萃取物,過濾並在減壓下濃縮。與來自利用19.4 mmol (3R)-5-溴-3-(羥甲基)-3,4-二氫-1
H
-異喹啉-2-甲酸第三丁酯運行之大體上相同之反應之粗產物合併。藉由矽膠層析利用乙酸乙酯:己烷(5%-40%梯度)溶析來純化殘餘物,以得到標題化合物(14.3 g, 40.1 mmol)。MS (m/z):356 (M+1)。 (3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉之替代合成 在20℃下,將第三丁基二甲基氯矽烷(193.7 g, 1.29 mol)添加至[(3R)-5-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-基]甲醇(148.9 g, 0.58 mol)、1
H
-咪唑(202.9 g, 2.92 mol)、4-二甲基胺基吡啶(0.72 g, 5.84 mmol)及N,N-二甲基甲醯胺(1.04 L)於二氯甲烷(2.61 L)中之混合物並於適當容器中攪拌。3小時後,將混合物冷卻至10℃並添加氯化銨飽和水溶液(1.3 L)。利用二氯甲烷萃取水溶液並利用鹽水(2×2L)洗滌合併之有機萃取物,經無水硫酸鈉乾燥並在減壓下濃縮,以得到殘餘物。將殘餘物溶解於甲基第三丁基醚(1.5 L)中並利用鹽水(2×1 L)洗滌。利用甲苯(5 L)稀釋有機相並在減壓下濃縮,以得到殘餘物。將甲苯(2.6 L)添加至殘餘物並在減壓下濃縮,以得到標題化合物(210 g, 0.53 mol)。MS (m/z) . 356(M+1 (
79
Br)),358(M+1 (
81
Br))。
製備 10
(3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-3,4-二氫異喹啉之合成
將(3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(4.2 g, 11.8 mmol)溶解於二乙醚(118 mL)中。添加N-氯琥珀醯亞胺(2.36 g
,
17.7 mmol)。在室溫下攪拌30分鐘並在減壓下濃縮。將殘餘物溶解於氫氧化鉀(42.0 mL, 30.3 mmol, 5%於MeOH中)中並在室溫下攪拌30分鐘。倒入水並利用二氯甲烷萃取。經硫酸鈉乾燥二氯甲烷萃取物,過濾並在減壓下濃縮。藉由矽膠層析利用乙酸乙酯:己烷(5%-100%梯度)溶析來純化殘餘物,以得到標題化合物(3.40 g, 9.59 mmol)。MS (m/z):354 (M+1)。 (3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-3,4-二氫異喹啉之替代合成 在20℃下,於適當容器中將N-氯琥珀醯亞胺(106.7 g, 0.79 mol)添加至(3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(220 g, 0.52 mol)於四氫呋喃(3.85 L)中之溶液中並攪拌。30分鐘後,在減壓下濃縮混合物並將殘餘物溶解於甲醇中之5% w/w氫氧化鉀(2.2 L, 1.69莫耳)中並在20℃下攪拌。30分鐘後,將混合物添加至水(3 L)中並利用二氯甲烷(3×1 L)萃取三次。經無水硫酸鎂乾燥合併之有機萃取物並在減壓下濃縮,以得到標題化合物(210 g, 0.50 mol)。MS (m/z):354(M+1 (
79
Br)),356(M+1 (
81
Br))。
製備 11
(1S,3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉之合成
將(3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-3,4-二氫異喹啉(3.4 g, 9.59 mmol)溶解於二乙醚(160 mL)中。在乾冰-丙酮浴上冷卻至‑78℃。逐滴添加氯化甲鎂(26.9 mL, 80.6 mmol, 3M於THF中)。使反應混合物緩慢升溫至室溫並攪拌過夜。利用飽和氯化銨溶液緩慢淬滅。利用二氯甲烷萃取並經硫酸鈉乾燥,過濾並在減壓下濃縮。與來自利用1.73 mmol (3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-3,4-二氫異喹啉運行之大體上相同之反應之粗產物合併。藉由矽膠層析利用乙酸乙酯:己烷(5%-65%梯度)溶析來純化合併之殘餘物,以得到標題化合物(3.78 g, 10.2 mmol):MS (m/z):370 (M+1)。 化合物(1S,3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉之相對組態係藉由NMR光譜學使用一維NOE實驗(1D-NOESY)所測定。在1.30 ppm處選擇性激發甲基在3.11 ppm處產生Ha之NOE。此NOE增強僅與其中甲基與Ha在環(反式異構物)之同側之組態一致,此乃因在順式異構物中甲基質子離Ha太遠而不能展示NOE。由於已知3位之絕對化學為R,則推導1位之絕對化學為S。
(1S,3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉之替代合成
在-65℃下,於適當容器中將氯化甲鎂(0.66 L, 1.99 mol, 3M於THF中)添加至(3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-3,4-二氫異喹啉(93.5 g, 0.24 mol)於二乙醚(2.8 L)中之溶液。然後經2小時將反應混合物加熱至20℃並攪拌。16小時後,將混合物冷卻至0℃並利用氯化銨飽和水溶液(2.5 L)使反應淬滅及利用乙酸乙酯(2.5 L)萃取以及將混合物過濾。利用鹽水(1 L)洗滌合併之有機萃取物,經無水硫酸鎂乾燥並在減壓下濃縮,以得到呈油狀物之粗標題化合物。將油狀物與來自利用48 mmol及229 mmol之[(3R)-5-溴-3,4-二氫異喹啉-3-基]甲氧基-第三丁基-二甲基-矽烷運行之大體上相同之反應之粗產物合併並藉由矽膠層析利用於己烷中之乙酸乙酯(梯度5%-65%乙酸乙酯)溶析將其純化,以得到標題化合物(151 g, 0.41 mol)。MS (m/z):370.1 (M+1 (
79
Br)),372.1(M+1 (
81
Br))。
製備 12
1-[(1S,3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]-2-(2,6-二氯苯基)乙酮之合成
將六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯啶基鏻(7.97 g,15.3 mmol)添加至(1S,3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉(3.78 g, 10.2 mmol)及2,6-二氯苯乙酸(2.30 g, 11.2 mmol)於二甲基甲醯胺(51.0 mL)中之混合物。添加三乙胺(2.13 mL, 15.3 mmol)並在室溫下攪拌3小時。利用水稀釋並利用二氯甲烷萃取。經硫酸鈉乾燥二氯甲烷萃取物,過濾並在減壓下濃縮。藉由矽膠層析利用乙酸乙酯:己烷(5%-50%梯度)溶析來純化殘餘物,以得到標題化合物(4.70 g, 8.43 mmol)。MS (m/z):556 (M+1)。
製備 13
(2E)-3-{(1S,3R)-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-2-[(2,6-二氯苯基)乙醯基]-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基}丙-2-烯酸乙酯之合成
使氮氣鼓泡穿過乙腈。將三鄰甲苯基膦(72.3 mg, 0.23 mmol)、乙酸鈀(II)(11.8 mg, 0.052 mmol)及乙腈(0.96 mL)置於微波容器中。攪拌10分鐘。添加丙烯酸乙酯( 0.31 mL, 2.88 mmol)。添加1-[(1S,3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]-2-(2,6-二氯苯基)乙酮(0.54 g, 0.96 mmol)。添加三乙胺(0.40 mL, 2.88 mmol)並劇烈攪拌。使氮氣吹過反應液表面。將容器密封並在微波中加熱至160℃保持35分鐘。冷卻至室溫並利用乙酸乙酯稀釋。將沈澱物過濾並利用乙酸乙酯洗滌。在減壓下將濾液濃縮以得到棕色油狀物。與來自利用0.27 mmol 1-[(1S,3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]-2-(2,6-二氯苯基)乙酮運行之大體上相同之反應之粗產物合併。藉由矽膠層析利用乙酸乙酯:己烷(梯度,0%-10%)溶析來純化合併之殘餘物,以得到標題化合物(0.54 g, 0.93 mmol)。MS (m/z):576 (M+1)。
製備 14
3-{(1S,3R)-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-2-[(2,6-二氯苯基)乙醯基]-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基}丙酸乙酯之合成
在乾燥箱中向具有攪拌棒及玻璃襯墊之85 ml Parr高壓釜添加1,1'-雙(二異丙基膦基)二茂鐵(1,5-環辛二烯)四氟硼酸銠(I)(7 mg, 0.010 mmol)。添加(2E)-3-{(1S,3R)-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-2-[(2,6-二氯苯基)乙醯基]-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基}丙-2-烯酸乙酯(133 mg, 0.23 mmol)作為於無水甲醇(5 mL)中之溶液。將高壓釜密封並自乾燥箱去除。利用氫氣吹掃容器並加壓至690 kPa氫氣。在室溫下攪拌過夜。通氣並打開容器。在減壓下濃縮反應混合物。藉由矽膠層析利用25%甲基第三丁醚:己烷溶析來純化殘餘物,以得到呈澄清無色油狀物之標題化合物(121 mg, 0.21 mmol)。MS (m/z):578 (M+1)。
製備 15
(1S,3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽之合成
在10℃下,將氯化氫(267.24 g, 1.02 mol, 4M於1,4-二噁烷中)添加至於乙酸異丙酯(4.19 L)中之(1S,3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉(419 g, 1.02 mol)並於適當容器中攪拌15分鐘。將混合物過濾並用乙酸異丙酯(2.5 L)洗滌濾餅,在過濾器上乾燥30分鐘,然後於40℃烘箱中在真空下保持16小時以得到標題化合物(380 g, 0.89 mol)。MS (m/z):370(M-Cl (
79
Br)),372(M-Cl (
81
Br))。
製備 16
(E)-4-[(1S,3R)-3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]-2-甲基-丁-3-烯-2-醇之合成
於適當容器中將(1S,3R)-5-溴-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽(310 g, 723.83 mmol)及2-甲基丁-3-烯-2-醇(508.95 g, 5.79 mol)添加至N,N-二甲基甲醯胺(1.08 L)並藉由使氮氣鼓泡穿過溶液脫氣10分鐘。添加碳酸鉀(315.12 g, 2.28 mol)、2-二環己基膦基-2′,6′-二甲氧基聯苯(15.32 g, 36.19 mmol)及乙酸鈀(II)(8.29 g, 36.19 mmol),並藉由使氮氣鼓泡穿過混合物脫氣15分鐘,然後加熱至125℃。16小時後,將混合物冷卻至20℃並利用乙酸乙酯(1.5L)及水(2.5 L)稀釋。利用鹽水(2.5 L)洗滌乙酸乙酯層,然後經硫酸鈉乾燥並在減壓下濃縮以得到殘餘物。藉由急速層析法利用於異己烷中之0%-50%乙酸乙酯溶析來純化殘餘物,以得到標題化合物(193 g, 459.1 mmol)。MS (m/z):376 (M+1)。
製備 17
4-[(1S,3R)-3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]-2-甲基-丁烷-2-醇之合成
將(E)-4-[(1S,3R)-3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]-2-甲基-丁-3-烯-2-醇(68 g, 168.83 mmol)於乙醇(816 mL)中之溶液添加至加壓氫化容器並添加於活性炭上之5%鈀(35.83 g, 16.84 mmol)。利用氫氣吹掃容器,加壓至470 kPa氫氣並在25℃下攪拌。16小時後,使容器通氣並將反應混合物過濾通過矽藻土。利用乙酸乙酯洗滌矽藻土並將濾液在減壓下濃縮以得到油狀物。將油狀物溶解於乙酸乙酯(1 L)中並在減壓下濃縮,以得到標題化合物(64 g, 161 mmol)。MS (m/z):378.2 (M+1)。
製備 18
1-[(1S,3R)-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]-2-(2,6-二氯苯基)乙酮之合成
將4-[(1S,3R)-3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]-2-甲基-丁烷-2-醇(0.21 g, 0.36 mmol)溶解於THF (2.0 mL)中。在乾冰-丙酮浴上冷卻。緩慢添加甲基鋰(0.67 mL, 1.07 mmol, 1.6 M於二乙醚中)並在乾冰-丙酮浴上攪拌4小時。添加飽和氯化銨溶液(2 mL)。去除乾冰-丙酮浴並使混合物升溫至室溫。利用乙酸乙酯萃取。合併乙酸乙酯萃取物;利用鹽水洗滌,經硫酸鈉乾燥,過濾並在減壓下濃縮以得到澄清無色油狀物。藉由矽膠層析利用乙酸乙酯:己烷(梯度,0%-30%)溶析來純化殘餘物,以得到呈澄清無色油狀物之標題化合物(0.16 g, 0.29 mmol)。MS (m/z):564 (M+1)。 1-[(1S,3R)-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]-2-(2,6-二氯苯基)乙酮之替代合成 於適當容器中,將1,1’-羰基二咪唑(112.9 g, 682.36 mmol)添加至2,6-二氯苯乙酸(173.09 g, 818.83 mmol)於四氫呋喃(1.63 L)中之混合物並在25℃下攪拌。1小時後,將4-[(1S,3R)-3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-1-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-5-基]-2-甲基-丁烷-2-醇(217 g, 545.89 mmol)於四氫呋喃(1.63 L)中之溶液添加至混合物,將混合物加熱至45℃並攪拌。24小時後,將混合物冷卻至20℃,藉由在減壓下濃縮去除2 L四氫呋喃並利用乙酸乙酯(2.5 L)稀釋殘餘物。利用飽和氯化銨水溶液(1.5 L)、1M氫氧化鈉水溶液(1 L)、水(1 L)及鹽水(1.5 L)洗滌乙酸乙酯溶液。經無水硫酸鈉乾燥有機物並在減壓下濃縮,以得到標題化合物(376 g, 532.70 mmol)。MS (m/z):564.2(M+1 (
35
Cl)),566.2 (M+1 (
37
Cl))。
參考化合物 1
2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮之合成
將1-[(1S,3R)-3-({[第三丁基(二甲基)矽基]氧基}甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]-2-(2,6-二氯苯基)乙酮(0.16 g, 0.28 mmol)溶解於THF (2.8 mL)中。添加四丁基氟化銨(0.30 mL, 0.30 mmol, 1M於THF中)。攪拌40分鐘。添加飽和氯化銨溶液並利用乙酸乙酯萃取。合併乙酸乙酯萃取物;利用水及鹽水洗滌,經硫酸鈉乾燥,過濾並在減壓下濃縮以得到殘餘物。藉由矽膠層析利用乙酸乙酯:己烷(梯度,0%-60%)溶析來純化殘餘物,以得到呈白色泡沫狀之標題化合物(0.12 g, 0.26 mmol)。MS (m/z):450 (M+1)。 2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮之替代合成 在5℃下,於適當容器中將四正丁基氟化銨(651.71 mL, 651.71 mmol, 1M於THF中)添加至1-[(1S,3R)-3-[[第三丁基(二甲基)矽基]氧基甲基]-5-(3-羥基-3-甲基-丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]-2-(2,6-二氯苯基)乙酮(400 g, 566.71 mmol)於四氫呋喃(4 L)中之溶液。將混合物加熱至20℃並攪拌。3小時後,藉由在減壓下濃縮去除3 L四氫呋喃並利用乙酸乙酯(2.5 L)稀釋殘餘物。利用氯化銨飽和水溶液(2 L)、水(2 L)及鹽水(2×2 L)洗滌有機物。經無水硫酸鈉乾燥乙酸乙酯溶液並在減壓下濃縮以得到油狀物。將此油狀物溶解於2-丙醇(2.5 L)中並在減壓下濃縮以得到油狀物。藉由手性SFC使用AS-H管柱(50×250mm,5微米粒度),利用80%之超臨界二氧化碳及20%之二乙基甲胺於異丙醇中之0.2%溶液以280 g/min溶析來純化,以得到標題化合物(182.8 g, 389.62 mmol)。MS (m/z):450.2(M+1 (
35
Cl)),452.2 (M+1 (
37
Cl))。旋光度:[α]
20 D
-39.4° (c = 0.95, MeOH)。
參考化合物 2
2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮與4-羥基苯甲酸之共結晶.
將化合物2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮(402.56 mg)與4-羥基苯甲酸(144.7 mg)連同攪拌棒一起置於40 mL小瓶中。將小瓶填滿水(39 mL)。在50℃下以1200 rpm攪拌試樣(攪拌盤設置)。將矽油滴在小瓶底部周圍以確保與熱板的良好熱傳遞。得到含有灰白色固體塊的濃稠白色漿液。漿化1小時後,穿過小瓶之隔膜插入的溫度計讀數為40.5℃,且試樣已轉變為亮白色固體之均勻漿液。漿化過夜後,試樣係絮狀白色固體之均勻漿液。溫度計讀數為43.1℃。偏光顯微術展示完全雙折射。藉由真空過濾分離亮白色固體並在空氣流下就地乾燥10分鐘。將試樣置於75℃真空烘箱中2小時,以提供呈白色結晶固體之標題組合物(484 mg, 94.9%產率)。 起始熔點=160.0℃(差示掃描量熱法)。
X 射線粉末繞射
在配備有CuKa源(λ = 1.54060 Å)及Vantec檢測器,於35 kV及50 mA下操作之Bruker D4 Endeavor X射線粉末繞射儀上獲得結晶固體之X射線繞射(XRD)圖案。在4°與40° 2θ之間掃描試樣,其中步長係0.009° 2θ且掃描速率係0.5秒/步,且具有0.6 mm發散、5.28固定防散射及9.5 mm檢測器狹縫。將乾燥粉末填充於石英試樣架上並使用載玻片獲得光滑表面。在環境溫度及相對濕度下收集晶形繞射圖案。晶體學領域中已眾所周知,對於任一給定晶形而言,繞射峰之相對強度可由於諸如晶體形態及習性等因素所致之較佳取向而變化。倘若存在較佳取向之效應,則峰強度會改變,但多形體之特徵峰位置不變。另外,在晶體學領域中亦眾所周知,對於任一給定晶形而言,角峰位置可略微變化。舉例而言,峰位置可因分析試樣時之溫度或濕度變化、試樣位移或內標準之存在或不存在而發生移位。在此情形下,0.2 2θ之峰位置變化性將考慮到該等潛在變化,此並不妨礙所指示晶形之明確鑑別。晶形之證實可基於有區別之峰(以° 2θ為單位),通常為更突出之峰之任一獨特組合來實施。(United States Pharmacopeia #35,National Formulary #30,<941>章,第427頁至432頁,2012)。於環境溫度及相對濕度下收集之晶形繞射圖案係基於具有在8.853° 2θ及26.774° 2θ處之峰之NBS標準參考物質675 (雲母)而調節。 參考化合物2之共晶體之所製備試樣之特徵在於使用CuKa輻射之X射線繞射圖案,如具有如下表3中所述之繞射峰(2θ值),且特定而言具有18.2°處之峰與一或多個選自由以下組成之群之峰之組合:16.0°、25.4°及7.0°;其中繞射角公差為0.2°。 表3
2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮與4-羥基苯甲酸之替代共結晶. 將2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮(2.00 g, 1.00當量;4.44毫莫耳)添加至20 mL小瓶。在室溫下在攪拌的同時添加丙酮(4 mL)。形成澄清溶液。在室溫下在攪拌的同時添加4-羥基苯甲酸(0.756 g;1.23當量;5.47毫莫耳)。先形成稀薄懸浮液,然後形成濃稠懸浮液。在熱板上將混合物加熱至60℃。以1 mL等份添加丙酮直至在60℃下觀察到充分混合的懸浮液。所添加之丙酮共計9.00 mL
(
122.43毫莫耳, 7.11 g)。將溫度保持在約60℃若干小時。將混合物冷卻至室溫並置於冰箱中以提高回收率。藉由真空過濾收集所得固體,利用2 mL丙酮沖洗並在40℃下於真空烘箱中乾燥過夜,以提供呈白色結晶固體之標題組合物。HPLC分析證明共晶體中2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮對4-羥基苯甲酸之莫耳比係1:1。
HPLC 分析
管柱:Agilent ZORBAX Bonus-RP,Rapid Resolution,4.6×75mm,3.5µ 管柱溫度:30℃ 注入體積:2 µL 檢測:UV 2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮(參考化合物1),在219 nm下 4-羥基苯甲酸,在256 nm下 流速:1.5 mL/min。 流動相:A) 0.1% TFA於水中 B) 0.1% TFA於乙腈中 梯度表
相對比率
2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮與4-羥基苯甲酸之第二替代共結晶. 在23℃下,將化合物2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮(45.06 g, 0.1 mol)與4-羥基苯甲酸(14.5 g, 1.05 mol eq)於53:47之異丙醇:庚烷(236 mL, 4體積)中漿化並加熱至65℃。將所得溶液利用2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮與4-羥基苯甲酸(553 mg, 1.0 wt.%晶種負載)之共晶體加晶種並在65℃下攪拌30分鐘。在65℃下經4.6小時添加庚烷(943 mL, 16體積
3
) 。在65℃下將漿液再攪拌30分鐘,經2小時冷卻至23℃,在23℃下攪拌過夜並真空過濾。利用10:90之異丙醇:庚烷(2×50 mL)沖洗固體產物並然後將庚烷(50 mL)在40℃真空烘箱中乾燥2小時,以產生呈白色結晶產物之標題組合物(51.3 g, 86.3 wt%產率)。 起始熔點=162.2℃(差示掃描量熱法)。
實例 1
2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮之結晶.
在室溫下取約10g 2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮與4-羥基苯甲酸之共晶體於500mL燒杯中並添加100mL去離子水。緩慢添加50mL 1N NaOH溶液。形成懸浮液。逐漸添加100mL氯仿。固體溶解並形成雙層溶液。使用分液漏斗分離有機層。在室溫下使有機層蒸發。向所得膠黏物質添加20mL庚烷並攪拌。在真空下分離所得固體並在室溫下於開放盤中風乾,以提供非晶形2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮。MS (m/z):450.2(M+1 (
35
Cl))。 取非晶形2‑(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮(251.8mg)於20mL小瓶中並添加4mL甲苯。將所得懸浮液在室溫下攪拌過夜。將結晶固體在真空下過濾並風乾。起始熔點=146.3℃(差示掃描量熱法)。 2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮之替代結晶. 取約3g非晶形2-(2,6-二氯苯基)-1-[(1S,3R)-3-(羥甲基)-5-(3-羥基-3-甲基丁基)-1-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1
H
)-基]乙酮於20mL小瓶中並添加10mL丙酮。在室溫下攪拌時立即形成濃稠沈澱物。再添加5mL丙酮以稀釋漿液並在室溫下攪拌過夜。在真空下將所得結晶固體分離並風乾。
X 射線粉末繞射
在裝備有CuKα源(λ=1.54056 Å)及Linxeye檢測器並於40 kV及40 mA下操作、具有0.2 mm發散狹縫之Bruker D8 Advance X射線粉末繞射儀上收集體X射線粉末繞射(XRPD)圖案。自2º至40º以0.02º 2θ步長以0.2秒/步之速率掃描試樣。在環境溫度及相對濕度下收集晶形繞射圖案且峰位置係基於具有在8.853° 2θ及26.774° 2θ之峰之NBS標準參考物質675 (雲母)而調節。在晶體學領域中已眾所周知,對於任一給定晶形而言,繞射峰之相對強度可因諸如晶體形態及習性等因素所致之較佳取向而變化。倘若存在較佳取向之效應,則峰強度會改變,但多形體之特徵峰位置不變。另外,在晶體學領域中亦眾所周知,對於任一給定晶形而言,角峰位置可略微變化。舉例而言,峰位置可因分析試樣時之溫度或濕度變化、試樣位移或內標準之存在或不存在而發生移位。在此情形下,0.2 2θ之峰位置變化性將考慮到該等潛在變化,此並不妨礙所指示晶形之明確鑑別。晶形之證實可基於有區別之峰(以° 2θ為單位),通常為更突出之峰之任一獨特組合來實施。(United States Pharmacopeia #35,National Formulary #30,<941>章,第427頁至432頁,2012)。 實例1晶體之所製備試樣之特徵在於使用CuKa輻射之X射線繞射圖案,如具有如下表4中所述之繞射峰(2θ值),且特定而言在於具有在9.15°處之峰與一或多個選自由以下組成之群之峰之組合:19.4°、16.1°及16.6°;其中繞射角公差為0.2°。 表4