TW201722411A - 用於治療肺癌之醫藥組合物 - Google Patents

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Abstract

一種用於治療肺癌之醫藥組合物，其為適用於治療罹患肺癌的個體，該醫藥組合物包含：第一藥劑，其至少包含去氫齒孔酸(DeEA)；及第二藥劑，其至少包含樟菇酸K(AnK)；以及其等各自可獲自牛樟芝之子實體或菌絲體之萃取物，其中相較於單獨投與該第一藥劑或該第二藥劑，該第一藥劑及該第二藥劑用於治療肺癌、預防肺癌轉移、或降低肺癌轉移之風險顯示出協同效應。

Description

用於治療肺癌之醫藥組合物
本發明係關於一種用於治療肺癌之醫藥組合物，其包含第一藥劑及第二藥劑，該第一藥劑及該第二藥劑分別獲自牛樟芝(Antrodia camphorate)之萃取物；尤其係關於一種用於治療肺癌之醫藥組合物，其包含：第一藥劑，其至少包含去氫齒孔酸(Dehydroeburicoic acid；DeEA)；及第二藥劑，其至少包含樟菇酸(Anctin K ；AnK)。
醫療用語「腫瘤(tumor)」係指藉由異常的細胞增生所形成之團塊，該異常的細胞增生甚至侵犯到周圍組織或遠端組織，影響組織之正常的生理機能。腫瘤通常藉由組織病理學檢驗而被判定係良性的或惡性的。當接管了健康細胞時，其亦可複製更多異常細胞。惡性腫瘤被稱為癌症。已知，許多類型的癌症係由遺傳畸變（即突變）所致。在最近數十年中，癌症已是臺灣人死亡原因前十名之一。
當細胞之生長開始失去控制時，癌症開始形成。幾乎身體之任何部位中之細胞均可成為癌症，且可散佈至身體之其他區域。惡性腫瘤係可生長至（侵入）周圍組織中或散佈（轉移）至身體之遠端區域之癌細胞群。
癌細胞生長快速，且侵入周圍組織，透過血流或淋巴系統侵入附近血管或淋巴管之壁，散佈至身體之其他部位。癌細胞當其等堆積於遠端位置處之微血管中時停止移動，且分配並遷移至周圍組織中，隨後癌細胞在新位置處形成小腫瘤（稱為微轉移）。
淋巴系統包含：淋巴，其含有組織液、廢物、及免疫系統細胞；淋巴結，其係免疫系統細胞之小的、豆形的集合，被認為在抵抗感染中係重要的；及淋巴管，其看起來類似小的靜脈，且與淋巴結連接，其等運載稱為淋巴（代替血液）之清透流體。因此，淋巴系統是散佈至身體之其他部位的癌症分佈之一種重要途徑。
肺係在胸內的一對錐形呼吸器官。當吸氣時，肺將氧氣帶入體內，且當呼氣時將二氧化碳送出體外。各肺具有稱為葉之部分。稱為支氣管的兩個管從導管(trachea)（氣管(windpipe)）通向肺。
肺癌之兩個主要類型係非小細胞肺癌及小細胞肺癌。該等類型係基於在顯微鏡下觀察而得之細胞特徵。非小細胞肺癌比小細胞肺癌更為常見。
肺癌係肺組織之惡性轉變及表現，且導致全球每年有130萬死亡案例；其係男性中最常見的癌症死亡原因，且在女性中係第二常見之死亡原因。
當前研究指出，引發肺癌之最主要因素係長期暴露於容易吸入致癌物之環境，尤其係指菸草煙霧；在其他情況下（小於十分之一）肺癌之發生可能歸因於遺傳因子之組合；氡氣及空氣污染亦會促進肺癌之發展。
治療及預後取決於癌症之組織類型、階段（蔓延程度）、及患者之體能狀態。當前治療包括手術、化學治療、及放射治療。總的來說，肺癌之五年存活率係約14%。
肺癌之兩個主要類型係藉由組織病理學家在顯微鏡下所看到之惡性細胞之大小及外觀來分類：非小細胞肺癌(80%)及小細胞肺癌（大致20%）。這種分類儘管僅基於簡單的組織學標準，但對於疾病之臨床管理及預後具有非常重要的含義。
非小細胞肺癌(NSCLC) 有三個主要亞型：鱗狀細胞肺癌、腺癌及大細胞肺癌，因為其等預後及管理係大致相同。。
鱗狀細胞癌佔肺癌中之29%，最初發生於較大支氣管中，但生長較緩慢。此等腫瘤之大小在診斷後變化。
腺癌係非小細胞肺癌之中最常見的亞型非小細胞肺癌，佔肺癌中之32%。其最初發生於接近肺之氣體交換表面。腺癌之大多數情況與吸煙相關聯。然而，在從不吸煙的人（「從未吸煙者(never-smoker)」）中，腺癌為最常見的肺癌種類。腺癌之亞型（細支氣管肺泡癌）在女性從未吸煙者中更常見，且對治療具有不同的反饋效果。
大細胞肺癌係一種快速生長的形式，佔肺癌中之9%，其發生於接近肺之表面。
小細胞肺癌（SCLC，亦稱為「燕麥細胞癌(oat cell carcinoma)」）係較不常見的肺癌形式。其最初傾向生成於較大呼吸管中，且迅速生長變大。最常涉及的致癌基因係L-myc。「燕麥(oat)」細胞含有密集的神經分泌顆粒，其等給予該細胞內分泌/伴腫瘤症候群關聯。該疾病起初對化療更敏感，但最後具有較差的預後效果，且時常表現出具轉移性。此類型的肺癌與吸煙密切相關。
其他類型的肺癌包括類癌、腺樣囊狀癌（圓柱瘤）及黏液類上皮癌。
肺係身體其他部位之腫瘤常見的轉移位置。腎上腺、肝、腦、及骨骼係原發性肺癌本身最常見的轉移部位。
隨時間推移，肺癌細胞可在稱為轉移之過程中侵入附近組織，如腋下淋巴結。肺癌之階段、腫瘤之大小及其生長速率均係判定所提供之治療之類型的因素。因為肺癌具有發展成產生上述此種相對攻擊性組織、以及現有的治療法只是在有限時間內有效的主要問題，所以通常肺癌之治療在近年來及甚至數十年來都一直發展的相當緩慢
治療選項包括手術以除去腫瘤、包括化療之藥品治療。預後及存活率變化幅度大；五年相對存活率可從98%至23%，取決於使用賀爾蒙治療、輻射治療及免疫療法之患者所發生的肺癌之類型。
儘管使用新的治療明顯地改善肺癌患者之結果，但是用於治療肺癌之有效的醫學組合物仍係一個臨床上的挑戰。
在現代醫學出現之前，藥用植物已使用了數個世紀來治療多種疾病並保持健康。藉由個人實驗、地方風俗、軼事、及民間傳統，植物藥用性質之累積及知識發展導致許多傳統醫療體系之形成及治療，包括中醫學(TCM)。
牛樟芝及從其得到的菌絲體產品具有高食用價值，其各種優良的功能不僅在於藥用方面，諸如具有抗氧化劑、抗過敏及免疫刺激效應，還在於具有藉由其自身的抗癌活性改善身體健康、減少治療相關的病徵及相似於野生子實體之醫療效用的其他副效應的能力。
因此，由牛樟芝製成及/或尤其包含其活性成分萃取形式之許多產品，諸如牛樟芝油(Antrodia oil)、牛樟芝萃取物、牛樟芝組合物等等，被廣泛用於各種醫學、健康照護應用中；另外，牛樟芝及野生牛樟近年來因此被臺灣政府列為生物學珍寶之一。
牛樟芝是一種非網狀裙細菌(non-mesh skirt bacteria)，是一種地方性真菌，且生長在海拔450至2000公尺山地森林的臺灣多山地區中之牛樟的內部心材（或深色/潮濕的木頭表面）中。其亦是多年生洋菇真菌，且僅生長於牛樟腦樹（具體地說牛樟樹）之經數十年或更長時間腐朽之樹幹之內壁、或枯木倒伏的濕潤表面。
牛樟芝富含三萜類、免疫刺激多糖（諸如-D-葡聚糖多糖）、腺苷、菸鹼酸、SOD（超氧化物歧化酶）、類固醇、維生素、必需礦物質及其他醫藥學上活性成份(principle)。
此外，牛樟芝萃取物及/或牛樟芝油亦含有許多對人類身體重要的營養素，例如，油酸、棕櫚酸、亞麻油酸、棕櫚油酸、蘇子油酸、硬脂酸、肉豆蘧酸(meat, beans Qu acid)、花生酸、廿二酸、二十四酸、正十七酸、正十七烯酸、維生素A、維生素B、維生素E及礦物質；以及其亦可抑制腫瘤轉移，減少冠狀動脈心臟病之發生，改善免疫及其他效應。
因此，牛樟芝顯示出各種優良的功能，諸如解毒、降血糖效應、降血壓、改善抗癌效應、抑制組織胺釋放效應、增強抗發炎效應、增強免疫、增加細胞生存力、消除自由基、促進肝細胞再生、降低丙胺酸轉胺酶、甚至增強巨噬細胞之吞噬能力、及具有改善身體健康之能力。
儘管牛樟芝之萃取物、及包含其等之抗癌劑或組合物具有如上文所述之醫療效應，且已吸引人們廣泛關注，但是其仍然不能成為用於肺癌之常規抗腫瘤劑，或用於單一療法的肺癌用藥，其歸因於仍然無法清楚地準確知道其中之具體活性成份或生物活性組分為何。
所以，對於醫學界及藥學界而言，需要一種具有令人滿意功效的治療或改善肺癌用之藥品，迫切需要開發一種醫藥組合物，其能夠解決先前技術中所存在的抗肺癌藥品之缺點並提供優良的治療肺癌之醫療效果。
鑒於如上文所提及之缺點及問題，本發明人對於上述習知技術中所存在之問題進行若干研究。
結果，當在肺癌之治療及/或預防中使用包含活性成分或組分諸如去氫齒孔酸(DeEA)及/或樟菇酸K(AnK)（其等分別從牛樟芝中萃取而得）之醫藥結合物或組合物時，意外地發現，相較於先前技術中傳統抗癌劑所提供之效果，該醫藥組合物能夠達成出乎意料的優良效果。
出乎意料的優良效果包括例如：降低或調節致癌活性、預防癌細胞增生或甚至逆轉癌細胞，進而達到治療和預防癌症及腫瘤轉移的效果。
除了彼等出乎意料的優良效果之外，亦發現以此一有效成分之組合而成的醫藥組合物不僅具有優良的化學、生物學、機械及物理特性，還具有良好的穿透率及運輸性能。
此外亦發現，該醫藥結合物或組合物極易以短時間消化及吸收之形式被使用者攝取，且可做為治療及/或預防癌症之藥品或佐劑，尤其施用於癌症之預防與治療時具有能夠抑制特定種類之癌細胞的功效。
因此，達成本發明。
即，根據本發明之一實施例，可以提供一種用於治療肺癌之醫藥組合物，其為適用於治療罹患肺癌的個體，該醫藥組合物包含：(1)第一藥劑，其至少包含獲自牛樟芝之子實體或菌絲體之萃取物之去氫齒孔酸(DeEA)；(2)第二藥劑，其至少包含獲自牛樟芝之子實體或菌絲體之樟菇酸K(AnK)；其中相較於單獨該第一藥劑或該第二藥劑之投與，該第一藥劑及該第二藥劑用於治療肺癌、預防肺癌轉移、或降低肺癌轉移之風險顯示出協同效應。
根據本發明之另一實施例，進一步可以提供一種如上文所述之醫藥組合物，其中該第一藥劑係以對於用於治療肺癌、預防肺癌轉移、或降低肺癌轉移之風險而言醫藥學上有效量的去氫齒孔酸(DeEA)；及/或該第二藥劑係以對於用於治療肺癌、預防肺癌轉移、或降低肺癌轉移之風險而言醫藥學上有效量的樟菇酸K(AnK)。
此外，根據本發明之一實施例，可以提供一種如上文所述之醫藥組合物，其中該第一藥劑及該第二藥劑係以植物性藥品物質(Botanical Drug Substance，BDS)之形式；且可以選自以下之任何方式投與至人類癌症患者：共同投與、每日投與方案、陣發性投與方案、靜脈投與、或經口投與。
此外，根據本發明之另一實施例，可以提供一種醫藥組合物，其中去氫齒孔酸(DeEA)及/或樟菇酸K(AnK)係以介於約15 mg至約20 mg之範圍，其比率(ZhAD： AnQB)係在約15：20至約20：15、約25：35至約35：25、或約60：70至約70：60之範圍。
此外，根據本發明之一實施例，可以提供一種如上文所述之醫藥組合物，其進一步包含醫藥學上可接受之成分，例如媒劑、載劑、稀釋劑、或賦形劑；其中該賦形劑包含選自由以下所組成之群組之成分：乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、玉米澱粉、小麥澱粉、大米澱粉、馬鈴薯澱粉、明膠、黃蓍膠。
此外，根據本發明之另一實施例可以提供一種如上文所述之醫藥組合物，其中更進一步包含選自由以下所組成之群組之至少一種添加劑：吸收促進劑、抗氧化劑、黏合劑、緩衝劑、塗佈劑、著色劑、稀釋劑、崩解劑、乳化劑、增效劑、填充劑、調味劑、保濕劑、潤滑劑、香料、防腐劑、推進劑、釋放劑、殺菌劑、甜味劑、增溶劑、潤濕劑、及其混合物。
以下，針對本發明的實施態樣列舉不同的具體實施例而更加詳盡地敘述與說明，以便使本發明的精神與內容更為完備而易於瞭解
然而，本項技藝中具有通常知識者應當明瞭本發明當然不受限於此等實例而已，亦可利用其他相同或均等的功能與步驟順序來達成本發明。
首先，對於本說明書中所使用的特定用語或名詞進行描述性的說明。
除非本說明書另有定義以外，在本文中所用的科學與技術詞彙之含義與本發明所屬技術領域中具有通常知識者所理解與慣用的意義相同。
應理解，上文之大致描述及以下詳細描述僅為例示說明，並不限制所主張之任何標的物。在本申請案中，除非另外明確說明，否則使用單數包括複數。
須注意，除非上下文另外明確規定，否則如本說明書及隨附申請專利範圍中所用之單數形式「一(a/an)」及「該(the)」包括複數個參考物。在本申請案中，除非另外說明，否則使用「或(or)」意謂「及/或(and/or)」。此外，使用用語「包括(including)」以及諸如「包括（include、includes、及included）」之其他形式不表示限制。
本文所使用之章節標題僅出於組織目的且不應解釋為限制所描述之標的物。
在本文中，「治療(treatment或treating)」之用語係指對於具有某種醫療狀況、症狀、疾病、病症或其先期狀況的個體或患者，實施可達成藥學和/或生理效果的預防性、治癒性或緩和性之處置，藉以部分或完全減輕嚴重性、延遲發生進程、及/或抑制該醫療狀況之一或多個病徵、異常及/或疾病出現機率之行為。
如本文中，用語「有效量(effective amount)」係指在以一特定用量直接或間接地投與癌症之醫療藥品時，能夠達到減少癌細胞數目之效果、或者治療或預防癌症之具體目的。
該「特定用量」即為所謂的有效量。
如本文所使用，「個體（受試者）(individual (subject))」或「患者(patient (patient))」可彼此互換使用。「個體（或個別受試者）」或「患者」意謂但不限於可接受治療之化合物及/或方法之人類。
除非另有具體說明，否則「個體（或個別受試者）」或「患者」可包含雄性及雌性兩種性別。同樣，適合使用本發明之醫藥組合物及/或方法治療之較佳個體或患者，較佳者為人類。
在本文中，對於用以界定本發明範圍的數值與參數，本質上不可避免地含有因個別測試方法所致的標準偏差，因而大多是以約略的數量值來表示。
然而，於具體實施例中則盡可能精確呈現的相關數值。在本文中，「約」通常視本發明所屬技術領域中具有通常知識者的考量而定。
通常，如本文所使用，「約(about)」包括可預期在實驗誤差範圍內的量。因此「約10 µg (about 10µg)」意謂「約10 µg」且亦意謂「10 µg」。其亦指代表落在可接受之標準偏差之範圍內之實際值，包括精確量，例如，實際值以± 10%表示，其意謂在特定數值之± 5%、± 1%、或± 0.5%之範圍內。
根據本發明之其他較佳實施方式中，提供一種用於治療有需要的受試者之肺癌之醫藥組合物。該醫藥組合物包含第一藥劑及第二藥劑，其等分別從牛樟芝中萃取而得。
根據本發明之其他較佳實施方式中，用於治療肺癌之醫藥組合物中之第一藥劑可包含但不限於至少去氫齒孔酸(DeEA)。在上下文中，「去氫齒孔酸(DeEA)(dehydroeburicoic acid (DeEA))」通常具有由以下化學式(1)所表示之化學結構，其中分子式係C31 H48 O3 ，且分子量係468.7。 化學式(1)
根據本發明之用於治療肺癌之醫藥組合物中的第一藥劑之去氫齒孔酸(DeEA)可藉由從牛樟芝之萃取物純化或分離來獲得，牛樟芝富含去氫齒孔酸(DeEA)及用於癌症治療之另一生物活性成分。
據報導指出，牛樟芝之萃取物包含許多在癌症治療中有效的生物成分，例如倍半萜類化合物 (Sesquiterpenoids)、雙萜類化合物 (Diterpenoids )、三萜類化合物 (Triterpenoids)、固醇類化合物 (Steroids)、五圓環結構之呋喃(Furan) 類或吡唑(Pyrrole) 類、木酚素類化合物 (Lignoids)、苯環類化合物 (Benzenoids)、超氧化物歧化酶和氨基酸類、及其類似化合物。
在牛樟芝之萃取物中，可用於癌症治療之有效生物成分的倍半萜類化合物可包含但不限於安卓幸(Antrocin)及其類似化合物。
此外，在牛樟芝之萃取物中，可用於癌症治療之有效生物成分的雙萜類化合物可包含但不限於19-羥基半日花-8(17)-烯-16,15-內酯、3β ,19-二羥基半日花-8(17),11E-二烯-16,15-內酯、13-表-3β ,19-二羥基半日花-8(17),11E-二烯-16,15-內酯、19-羥基半日花-8(17),13-二烯-6,15-內酯、14-去氧-11,12-二去氫穿心蓮-內酯、14-去氧-穿心蓮內酯、松柏酸(pinusolidic acid)等。
此外，在牛樟芝之萃取物中，可用於癌症治療之有效生物成分的三萜類化合物 (Triterpenoids)可包含但不限於樟芝素B (Camphoratin B)、樟芝素A、樟芝酸K (Antcin K)、樟芝酸I（樟菇酸B，3α -羥基-4α -甲基麥角甾(methylergost)-8,24(28)-二烯-7,11-二酮-26-酸）、樟芝素E、樟芝酸H（樟菇酸C，3α ,12α -二羥基-4α -甲基麥角甾-8,24(28)-二烯-7,11-二酮-26-酸）、樟芝酸甲酯(methyl antcinate) H（3α ,12α -二羥基-7,11-二側氧基-4α -甲基麥角甾-8,24(28)-二烯-26-酸酯(oate)）、樟菇酸E、樟芝素C、樟芝素H、樟芝素I、樟芝酸A（1,4α -甲基麥角甾-8,4(8)-二烯-3,11-二酮-26-酸）、樟芝素J、樟芝酸甲酯A（4α -甲基麥角甾-8,24(28)-二烯-3,11-二酮-26-酸甲酯）、樟芝酸E（3,11-二側氧基-4α -甲基麥角甾-8,14,24(28)-三烯-26-酸）、樟芝酸C（7β -羥基-4α -甲基麥角甾-8,24(28)-二烯-3,11-二酮-26-酸）、樟芝素G、樟芝酸F（3,11-二側氧基-7β -羥基-4α -甲基麥角甾-8,14,24(28)-三烯-26-酸）、樟芝素D、樟芝素F、樟芝酸甲酯G（7α -乙醯氧基-3,11-二側氧基-4α -甲基麥角甾-8,24(28)-二烯-26-酸酯）、樟芝酸B（樟菇酸A，4α -甲基麥角甾-8,24(28)-二烯-3,7,11-三酮-26-酸）、樟芝酸D（樟菇酸F，14-羥基-4α -甲基-3,7,11-三側氧基麥角甾-8,24(28)-二烯-26-酸）、樟芝酸甲酯B（4α -甲基麥角甾-8,24(28)-二烯-3,7,11-三酮-26-酸甲酯）、樟菇酸D、齒孔醇(eburicol)（24-亞甲基二羥基羊毛甾醇）、齒孔酸(35),7硫絢孔菌酸(sulphurenic acid)、變孔孔菌酸(versisponic acid) D、去氫齒孔酸、去氫硫絢孔菌酸、15α -乙醯基去氫硫絢孔菌酸、3β ,15α -二羥基羊毛甾-7,9(11),24-三烯-21酸、表-無羈萜醇(epi-friedelinol)等。
在牛樟芝之萃取物中，固醇類化合物通常包含β -植甾醇、豆甾醇(44),16麥角固醇過氧化物、麥角固醇D、麥角固醇、β -植甾酮(sitostenone)、麥角-4,7,8(14),22-四烯-3-酮、麥角-2,4,8(14),22-四烯-3-酮等。
此外，在牛樟芝之萃取物中，可用於癌症治療之有效生物成分的五圓環結構之呋喃(Furan) 類、或吡唑(Pyrrole) 類可包含但不限於安卓幸那莫明(Antrocinnamomin) C（3-異丁基-4-(4-羥苯基)呋喃-2,5-二酮）、3-異丁基-4-[4-(3-甲基-2-丁烯基氧基)苯基]呋喃-2,5-二酮、安卓幸那莫明D (2-羥基-3-異丁基-4-[4-(3-甲基丁烯基氧基)苯基]-2H-呋喃-5-酮)、順式-3-(4-羥苯基)-4-異丁基-二氫呋喃-2,5-二酮、二甲基-2-(4-羥苯基)-3-異丁基-順丁烯二酸酯、3-(4-羥苯基)-4-異丁基-1H-吡咯-2,5-二酮、3-異丁基-4-[4-(3-甲基-2-丁烯基氧基)苯基]-1H-吡咯-2,5-二酮（安卓啶(antrodin) B，樟芝醯亞胺(camphorataimide) B)、反式-3-異丁基-4-[4-(3-甲基-2-丁烯基氧基)苯基]吡咯啶-2,5-二酮、安卓幸那莫明B（3-異丁基-4-(4-羥苯基)-1H-吡咯-1-醇(ole)-2,5-二酮）、3-異丁基-4-[4-(3-甲基-2-丁烯基氧基)苯基]-1H-吡咯-1-醇-2,5-二酮（安卓啶C，樟芝醯亞胺C）、安卓幸那莫明A（3-異丁基-4-[4-(3-甲基-2-丁烯基氧基)苯基]-1H-吡咯-1-乙醯氧基-2,5-二酮）、反式-1-羥基-3-(4-羥苯基)-4-異丁基吡咯啶-2,5-二酮、3R,4S-1-羥基-3-異丁基-4-[4-(3-甲基-2-丁烯基氧基)苯基]吡咯啶-2,5-二酮)、安卓啶D（樟芝醯亞胺D，3R,4R-1-羥基-3-異丁基-4-[4-(3-甲基-2-丁烯基氧基)苯基]吡咯啶-2,5-二酮）、安卓二氧雜戊環酮(antrodioxolanone)等。
此外，在牛樟芝之萃取物中，可用於癌症治療之有效生物成分的木酚素類化合物可包含但不限於(+)-芝麻素、(-)-芝麻素、4-羥基芝麻素、阿托西蒙(Aptosimon)等。
在牛樟芝之萃取物中，可用於癌症治療之有效生物成分的苯環類化合物可包含但不限於1,4-二甲氧基-2,3-亞甲基-二氧基-5-甲苯、2,5-二-乙氧基-3,4-亞甲基-二氧基苯甲酸甲酯、4,5-二甲氧基-2,3-亞甲基-二氧基苯甲酸、2,4,5-三甲氧基苯甲醛、2,3-亞甲基-二氧基-6-甲苯-1,4-二醇、2,4-二甲氧基-6-甲苯-1,3-二醇、苯甲凱弗因(benzocamphorin) C、5-甲基苯并[1,3]-二氧呃-4,7-二酮、2-甲氧基-5-甲基[1,4]苯醌、2,3-二甲氧基-5-甲基[1,4]苯醌、異丁基苯酚、2,3,4,5-四甲氧基苯甲醯氯、2,2,5,5-四-甲氧基-3,4,3,4-雙(亞甲基二氧基)-6,6-二甲基聯苯、苯甲凱弗因E、苯甲凱弗因D、安卓凱因(antrocamphin) A、安卓凱因B、苯甲凱弗因A、苯甲凱弗因B等。
更特定言之，在牛樟芝之萃取物中，可用於癌症治療之有效生物成分的其他化合物可包含但不限於α -Tocospiro B、油酸甲酯、安卓奎諾爾、安卓奎諾爾B、4-乙醯基安卓奎諾爾B、腺苷、蛹蟲草菌素等。
在本發明之某些實施方式中，用於治療肺癌之醫藥組合物中之第一藥劑可包含副成分，其非為主成分去氫齒孔酸(DeEA)，例如，可係選自以下之一種化合物：倍半萜類化合物 (Sesquiterpenoids)、雙萜類化合物 (Diterpenoids )、三萜類化合物 (Triterpenoids)、固醇類化合物 (Steroids)、五圓環結構之呋喃(Furan) 類或吡唑(Pyrrole) 類、木酚素類化合物 (Lignoids)、苯環類化合物 (Benzenoids)、超氧化物歧化酶和氨基酸類、及其類似化合物。較佳的是，該第一藥劑之副成分可包含但不限於安卓奎諾爾、安卓肉桂地菌素A、安卓肉桂地菌素B、安卓奎諾爾D、樟菇酸A、樟菇酸C、樟芝酸K、樟芝酸C、及其混合物構成群組中所選出之至少一種。
根據本發明之其他較佳實施方式中，用於治療肺癌之醫藥組合物中之第二藥劑可包含但不限於至少樟菇酸K(AnK)。在上下文中，「樟菇酸K(AnK)」通常具有如下文所示由化學式(2)所表示之化學結構，其中分子式係C24 H38 O5 ，且分子量係406。 化學式(2)
在本發明之一些實施例中，該第二藥劑可包含作為主要成分之樟菇酸K(AnK)及副成分，該副成分為選自以下之一種化合物：倍半萜類（倍半萜化合物）、雙萜類、三萜類、固醇類、五圓環結構之呋喃(Furan) 類或吡唑(Pyrrole) 類、木酚素類化合物 (Lignoids)、苯環類化合物 (Benzenoids)、超氧化物歧化酶及氨基酸類及其類似化合物。較佳的是，該副成分可包含但不限於安卓奎諾爾、安卓肉桂地菌素A、安卓奎諾爾D、去氫齒孔酸、樟菇酸A、樟菇酸C、樟芝酸K、樟芝酸C、及其混合物構成群組中所選出之至少一種。
根據本發明之一技術觀點，用於獲得本發明之醫藥組合物之第一藥劑及/或第二藥劑之萃取方法並未特別加以限制，例如，可藉由使用先前技術中習知之純化方法分離自牛樟芝之子實體或菌絲體。
不管原料是牛樟芝之子實體或菌絲體，合適使用的萃取方法，一般包括：非極性溶劑萃取法、高極性溶劑萃取法、低極性溶劑萃取法、高溫萃取法、低溫萃取法、超臨界萃取法或彼等之組合等。
舉例來說，合適用於萃取牛樟芝之溶劑一般包括水、無機溶劑、有機溶劑、及其類似溶劑。本發明中所用之有機溶劑可包括但不限於：醇，諸如甲醇、乙醇、或丙醇；酯，諸如乙酸乙酯；烷烴，諸如己烷；或鹵化烷烴，諸如氯甲烷、氯乙烷。其中，較佳者為水及乙醇；更佳者為乙醇。
此外，合適用於在本發明中萃取牛樟芝之萃取溫度通常並未特別加以限制，例如，其可在低於0℃以下，亦可在0℃至40℃之低溫範圍，或者也可以是在50℃至150℃之高溫範圍內進行。
在本發明之其他實施例中，樟菇酸K(AnK)及去氫齒孔酸(DeEA)可藉由從牛樟芝之萃取物的分離及/或純化過程獲得。本發明中所用之分離及/或純化過程可包括但不限於液相層析法、氣相層析法、氣液層析法、高效液相層析法(HPLC)及其他類似方法。
具體而言，含有本發明之醫藥組合物中所用之第一藥劑及/或第二藥劑之牛樟芝之萃取物A為藉由使用特定萃取方法獲得，該方法包含以下步驟：(A)以45℃~100℃之溫度範圍內的熱水萃取牛樟芝之子實體，分別獲得萃取物HW及殘餘物HR；(B)藉由分餾萃取殘餘物HR，收集自分流設備中之冷凝液體而分別得到萃取物FD及殘餘物FR；(C)利用低極性溶劑浸沒殘餘物FR至少4小時進行萃取，而分別獲得萃取物LPS及殘餘物LPR；(D)透過超低溫冷凝法，藉由在0℃~15℃之溫度範圍中滴入冰乙醇/水混合液來萃取殘餘物LPR，而分別獲得萃取物IEW及殘餘物IER；(E)透過超臨界流萃取(SCF)，以31.26℃之溫度及72 atm之壓力之操作條件使用二氧化碳作為溶劑來萃取殘餘物IER，而獲得萃取物SCF。
根據本發明，樟菇酸K(AnK)及/或去氫齒孔酸(DeEA)之效果，諸如治療肺癌、抑制肺癌細胞之生長以及其他作用，可藉由使用先前技術中所用之任何測試方法來測試，例如使用3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,S-二苯基四唑鎓溴化物(MTT)之MTT分析，藉以測定肺癌細胞株之細胞存活率。
在本發明之一些實施例中，透過MTT分析證明，樟菇酸K(AnK)及/或去氫齒孔酸(DeEA)可降低相同時間下的肺癌細胞株（A549、CH27 、及 H460）之存活率，且半抑制濃度(IC50)值係相對低的。
因此，本發明之至少包含去氫齒孔酸(DeEA)之第一藥劑及至少包含樟菇酸K(AnK)之第二藥劑之醫藥組合物能夠有效抑制肺癌細胞之生長。同樣，本發明之醫藥組合物可進一步用於製備治療肺癌之藥用組合物，其已改良了先前技術所提及的治療技術之缺點。
此外，根據本發明之一實施例，如上文所述之醫藥組合物中之該第一藥劑及該第二藥劑可製備成但不限於植物性藥品物質(Botanical Drug Substance，BDS)之形式；且可以任何方式投與至人類癌症患者，諸如選自以下中之一者：共同投與、每日方案、陣發性方案、靜脈投與、或經口投與。
根據本發明之一實施例，如上文所述之醫藥組合物中存在之該第一藥劑之去氫齒孔酸(DeEA)及該第二藥劑之樟菇酸K(AnK)之有效量為可用於治療肺癌、預防肺癌轉移、或降低肺癌轉移之風險的醫藥量。
根據本發明之一些實施例，該第一藥劑之去氫齒孔酸(DeEA)及該第二藥劑之樟菇酸K(AnK)之有效量分別為但不限於0.05mg 至1500.0mg之範圍。例如，一般在0.05mg至8.0 mg之範圍；較佳在0.05mg至5.50 mg之範圍；更佳在0.05mg 至4.50 mg之範圍；特佳在0.05mg 至2.500 mg之範圍。
此外，根據本發明之一些實施例，如上文所述之醫藥組合物中之去氫齒孔酸(DeEA)及樟菇酸K(AnK)之比率(DeEA： AnK)為在但不限於約1.0：1.0至約1.0：20.0之範圍。例如，一般在約1.0：1.0至約1.0：15.0之範圍；較佳在約1.0：1.0至約1.0：9.0之範圍；更佳在約3.0：1.0至約1：9.0之範圍；特佳在約9.0：1.0至約1.0：9.0之範圍。
根據本發明之一些實施例，有效量的該第一藥劑之去氫齒孔酸(DeEA)及該第二藥劑之樟芝酸K (AnK)可做為治療肺癌患者之醫藥組合物。該醫藥組合物用於治療肺癌患者時，可經由Bcl-2基因之表現量顯示其具有良好的效用；即其可用於治療具有Bcl-2基因之過表現表徵的攻擊性肺癌。
此外，根據本發明之另一實施例，該醫藥組合物可進一步包含藥學上可接受之成分：媒劑、載劑、稀釋劑或賦形劑。例如，合適用於本發明中之賦形劑係選自由以下所組成之群組之成分、化合物、或組分：乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、玉米澱粉、小麥澱粉、大米澱粉、馬鈴薯澱粉、明膠、黃蓍膠、或其組合物。
此外，根據本發明之另一實施例，該醫藥組合物可進一步包含添加劑。例如，合適用於本發明中之添加劑係為選自由以下所組成之群組之至少一成分、化合物或組分：吸收促進劑、抗氧化劑、黏合劑、緩衝劑、塗佈劑、著色劑、稀釋劑、崩解劑、乳化劑、增效劑、填充劑、調味劑、保濕劑、潤滑劑、香料、防腐劑、推進劑、釋放劑、殺菌劑、甜味劑、潤濕劑、及其混合物。
在一些實施例中，本發明之醫藥組合物是被配方成為適合口服的液體劑型，例如，口服用懸浮液、乳液、微乳液、及/或特效藥液(elixirs)。在此液體劑型的情況下，本發明之醫藥組合物的活性成分可進一步地與各種甜味劑或風味劑、著色劑或染料一起配方，必要時還可加入乳化劑和/或懸浮劑、或者諸如水、酒精、丙二醇、甘油等稀釋劑、或維持pH值的緩衝液。
又，在其他實施方式中，將含有本發明醫藥組合物的液態配方製作成無菌注射溶液或懸浮液；例如，製作成適合於以靜脈內注射、肌肉內注射、皮下注射或腹膜內注射等方式施用的溶液。
適合使用於上述無菌注射溶液或懸浮液中之稀釋劑，舉例來說，例如，其可以包括但不限於1,3-丁二醇、甘露醇、水、林格氏溶液、等張性氯化鈉溶液；亦可以使用例如油酸等之脂肪酸、甘油酯衍生物、或者是例如橄欖油或菜籽油等之藥學可接受的天然油脂。
以下，藉由實施例來說明本發明之特定實施態樣，但本發明之內容範疇並不受限於此等實施例而已，任何熟習此技藝者，在不脫離本揭示內容之精神和範圍內，當可作各種之更動與潤飾，因此本揭示內容之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
本發明之實施例詳細說明如下。 《實施例1 獲自牛樟芝之萃取物A》
首先，藉由使用特定方法萃取牛樟芝之子實體來獲得萃取物A係，該方法包含以下步驟：(A)以45℃~100℃之溫度範圍內的熱水萃取牛樟芝之子實體，分別獲得萃取物HW及殘餘物HR；(B)藉由分餾萃取殘餘物HR，收集自分流設備中之冷凝液體而分別得到萃取物FD及殘餘物FR；(C)利用低極性溶劑浸沒殘餘物FR至少4小時進行萃取，而分別獲得萃取物LPS及殘餘物LPR；(D)透過超低溫冷凝法，藉由在0℃~15℃之溫度範圍中滴入冰乙醇/水混合液來萃取殘餘物LPR，而分別獲得萃取物IEW及殘餘物IER；(E)透過超臨界流萃取(SCF)，以31.26℃之溫度及72 atm之壓力之操作條件使用二氧化碳作為溶劑來萃取殘餘物IER，而獲得萃取物SCF。
接著，均勻地混合萃取物HW、萃取物FD、萃取物LPS、萃取物IEW及萃取物SCF，形成一混合物，即為萃取物A。   《實施例2 抗肺癌效果之癌細胞體外存活分析》
將個別分離自實施例1之萃取物A之樟菇酸K(AnK)及去氫齒孔酸(DeEA)所組成之醫藥組合物加入分別含有人類肺癌細胞株A549、CH27 、及H460之培養基中，藉由使用抗癌藥品篩選模型測試腫瘤細胞之存活率。該存活分析係利用廣為人知的MTT（3-[4,5-二甲基噻唑-2-基]2,5-二苯基四唑鎓溴化物）分析來進行。
A549細胞株為罹患腺癌之人類的肺泡基底上皮細胞，其廣泛用於針對藥物轉化機制之第2型肺部上皮細胞模型之體外模型，並可用於轉染宿主；另外，CH27細胞株為人類鱗狀肺癌細胞，H460細胞株為人類非小細胞肺癌細胞。將人類肺癌細胞A549、CH27、及H460分別培養於含有胎牛血清之培養基中10小時，並將增生之細胞用PBS清洗一次，隨後用1x胰蛋白酶-EDTA處理，並以2000 rpm之轉速進行離心10分鐘。接著，移除上清液，並將沉澱於底部之細胞藉由輕微振盪再懸浮於200 ml新鮮培養基中。將細胞接種於平底96孔盤中。
隨後，以酵素免疫分析儀(ELISA Reader)分析該平底96孔盤中之培養孔內之細胞，藉以換算出人類肺癌細胞株A549、CH27、及H460之存活率，並計算出半抑制濃度(IC50)，因而獲得肺癌細胞體外存活分析之結果。
根據結果顯示，肺癌細胞A549、CH27、及H460之存活率已明顯降低，因此可推斷出樟菇酸K(AnK)及去氫齒孔酸(DeEA)能夠有效抑制肺癌細胞之生長。換言之，可將含有藥學有效量之樟菇酸K(AnK)及去氫齒孔酸(DeEA)之醫藥組合物用於治療肺癌、預防肺癌轉移、或降低肺癌轉移之風險。 《實施例3至8 本發明之醫藥組合物》
將由實施例1所得之萃取物A分離而得之去氫齒孔酸(DeEA)及樟菇酸K(AnK)，根據以下表1所示之組成比率予以均勻混合，而配製成能夠預防及/或治療肺癌的本發明之醫藥組合物。 表1 DeEA：去氫齒孔酸 (DeEA) AnK：樟菇酸K (AnK)
與實施例2同樣地，分別培養人類肺癌細胞株A549、CH27 、及 H460。並於其中分別施用本發明之醫藥組合物A至F，隨後進行各樣本之MTT試驗分析，藉以評估本發明之醫藥組合物A至F抑制各種肺癌細胞活性的功效。。
經由分析抑制肺癌細胞活性之試驗結果顯示，確認本發明之醫藥組合物A至F可以抑制人類肺癌細胞株A549、CH27 、及 H460生長，具體而言，所有的半抑制濃度(IC50)均顯著優於先前技術所揭者。綜上所述，結果顯示本發明的醫藥組合物是潛在可用來治療肺癌的藥物。
無。
無。

Claims (17)

  1. 一種用於治療肺癌之醫藥組合物，其為適用於治療罹患肺癌的個體，該醫藥組合物包含： (1)  第一藥劑，其至少包含獲自牛樟芝之子實體或菌絲體之萃取物的去氫齒孔酸(DeEA)； (2)  第二藥劑，其至少包含獲自牛樟芝之子實體或菌絲體之萃取物的樟菇酸K(AnK)； 其中相較於單獨該第一藥劑或該第二藥劑之投與，該第一藥劑及該第二藥劑用於治療肺癌、預防或降低肺癌轉移之風險顯示出協同效應。
  2. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其中該第一藥劑係為用於治療肺癌、預防、或降低肺癌轉移之風險而言藥學上有效量之該去氫齒孔酸(DeEA)。
  3. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其中該第二藥劑係為用於治療肺癌、預防、或降低肺癌轉移之風險而言藥學上有效量之該樟菇酸K(AnK)。
  4. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其中該第一藥劑及該第二藥劑係以植物性藥品物質(BDS)之形式。
  5. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其中該去氫齒孔酸(DeEA)及/或樟菇酸K(AnK)係介於約15 mg至約20 mg之範圍。
  6. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其中該去氫齒孔酸(DeEA)相對於該樟菇酸K(AnK)之比率(DeEA：AnK)係介於約15：20至約20：15之範圍。
  7. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其中該去氫齒孔酸(DeEA) 相對於該樟菇酸K(AnK)之比率(DeEA：AnK)係介於約25：35至約35：25之範圍。
  8. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其中該去氫齒孔酸(DeEA) 相對於該樟菇酸K(AnK)之比率(DeEA：AnK)係介於約60：70至約70 ： 60之範圍。
  9. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其係進一步包含藥學上可接受之成分，其包含媒劑、載劑、稀釋劑或賦形劑。
  10. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其中該第一藥劑及該第二藥劑經投與方式治療癌症患者。
  11. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其中該第一藥劑及該第二藥劑經共同投與。
  12. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其中該第一藥劑及該第二藥劑係以每日方案投與。
  13. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其中該第一藥劑及該第二藥劑組合物係以陣發性方案、靜脈投與、或經口投與來投與。
  14. 如請求項9所記載之醫藥組合物，其中該賦形劑包含選自由以下所組成之群組之成分：乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、玉米澱粉、小麥澱粉、大米澱粉、馬鈴薯澱粉、明膠、黃蓍膠。
  15. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其係進一步包含選自由以下所組成之群組之至少一種添加劑：吸收促進劑、抗氧化劑、黏合劑、緩衝劑、塗佈劑、著色劑、稀釋劑、崩解劑、乳化劑、增效劑、填充劑、調味劑、保濕劑、潤滑劑、香料、防腐劑、推進劑、釋放劑、殺菌劑、甜味劑、潤濕劑、及其混合物。
  16. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其中該肺癌係由肺癌細胞株A549、肺癌細胞株CH27、及肺癌細胞株H460中之至少任一種所引發。
  17. 如請求項1所記載之醫藥組合物，其用於治療具有Bcl-2基因之過表現表徵的攻擊性肺癌。
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