TW201623275A - 噻吩並環烷基或噻吩並雜環基類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用 - Google Patents

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Abstract

本發明涉及噻吩並環烷基或噻吩並雜環基類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用。具體而言，本發明涉及一種通式(I)所示噻吩並環烷基或噻吩並雜環基類衍生物、其製備方法及含有該衍生物的醫藥組成物，以及其作為治療劑，特別是作為腸2B型磷酸鈉協同轉運蛋白(Npt2b)抑制劑的用途和其在製備治療和/或預防高磷血症的藥物中的用途，其中通式(I)中的各取代基的定義與說明書中的定義相同。 □

Description

噻吩並環烷基或噻吩並雜環基類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用
本發明涉及一類新型噻吩並環烷基或噻吩並雜環基類衍生物、其製備方法及含有該衍生物的醫藥組成物，以及其作為治療劑特別是作為腸2B型磷酸鈉協同轉運蛋白(Npt2b)抑制劑的用途和在製備治療和/或預防高磷酸鹽血症等疾病或病症的藥物中的用途。
無機磷酸鹽(Pi)是骨礦物質的必要組分，成體磷酸鹽的大約80%在礦外的胞外基質(如骨和牙)中，18%在細胞內，2%在細胞外液中。正常生理條件下，小腸攝取過量的磷酸鹽，磷酸鹽的體內平衡依賴於腎臟的排泄和再吸收功能來調節。體內磷酸鹽過多或過少均導致機體功能紊亂而致病：如過低則導致低磷酸鹽血症、軟骨病、佝僂病和心臟功能紊亂；過高則誘發高磷酸鹽血症、軟組織和血管鈣化以及腎功能障礙。磷酸鹽過高是心血管疾病和慢性腎病(CKD)患者的死亡率增高的重要因素。目前高磷血 症的治療主要包括飲食限磷、透析治療、磷結合劑的應用及必要時甲狀旁腺的切除。有90至95%的終末期腎病患者需要服用磷結合劑治療高磷血症。
小腸對磷酸鹽的吸收主要藉由兩種途徑， 被動運輸和主動運輸，其中主動運輸就是藉由鈉依賴型的鈉/磷共轉運通道蛋白進行的。最近的研究表明，磷酸鈉協同轉運蛋白2B(Npt2b)是治療慢性腎病(CKD)中高磷酸鹽血症的重要靶點(J Pharm Sci.2011 Sep；100(9)：3719-30)。磷酸鈉協同轉運蛋白包括1型家族(Npt1,Npt3,Npt4)，主要表達於腎臟中；2型家族(Npt2a,Npt2b,Npt2c)，主要表達於腎臟(Npt2c)，肺，腸及睾丸(Npt2a,Npt2b)中；3型家族(Pit1，Pit2)，普遍表達於各器官中。其中Npt2b在整個上消化道均有表達，介導一半左右的食物中磷酸鹽的的吸收，用於維持磷酸鹽的體內平衡。Npt2b在其他組織中也有表達，Npt2b抑制劑有必要保持不可吸收的特性和能在腸腔內保持的特點(Current Pharmaceutical Design,2012,18,1434-1445)。研究發現，Npt2b突變引起的Npt2b失活會導致常染色體隱性遺傳病肺泡微結石(PAM)的發生，暗示Npt2b在肺泡的主要功能是移除多餘的磷酸鹽。在肺癌組織切片中，發現Npt2b高表達，小干擾siRNA實驗發現降低Npt2b表達可抑制肺癌的發生。另一研究構建了非吸收Npt2b抑制劑(Ardelyx)的單獨使用和組合使用(與磷酸鹽粘合劑聯用)的兩個動物模型，發現在腺嘌呤誘導的CKD大鼠模型，NTX1942可降低尿毒癥生物標誌物(磷、肌酸酐和 BUN的血清濃度)、甲狀腺激素和FGF-23的血漿水準；而在5/6腎切除的大鼠模型中，經過50天給藥治療後，大鼠表現腎功能惡化延遲和存活率顯著提高的表徵。作為臨床劑量，Npt2b抑制劑的劑量有希望比磷酸鹽粘合劑低，為更多、範圍更廣的透析前CKD患者提供所需的磷酸鹽抑制。
激素如雌性激素、糖皮質激素、成纖維細 胞生長因子23(FGF23)、1,25(OH)維他命D3(1,25(OH)2D3)和飲食攝入的磷酸鹽均影響小腸刷狀緣膜的磷攝取或Npt2b的表達。小腸內Npt2b的缺失也導致FGF23表達的減少。 FGF23的主要功能是藉由降低磷酸鹽共轉運蛋白的表達和促進1,25(OH)2D3的合成來調節腎臟磷酸鹽的排泄，Npt2b作為磷酸鹽感測器，調控體內激素的平衡，維持全身系統的平衡。
目前公開了一系列的Npt2b抑制劑的專利 申請，其中包括WO2004085382、WO2013082751、WO2001005398、WO2001082924、WO2003057225、WO2001087294、WO2014003153、WO2012006473、WO2012006474、WO2012006475、WO2012006477、WO2012054110、WO2002028353、WO2013062065、WO2013082756、WO2013082751、WO2013129435、WO2014142273、WO 2011136269、WO2009079373和WO2013082756等，但仍需要開發新的具有更好的藥效的、在血液中不吸收或吸收少、對機體毒性作用小的化合物， 經過不斷努力，本發明設計具有通式(I)所示的結構的化合物，並發現具有此類結構的化合物表現出在結腸和空腸部位有優異的效果和作用。
本發明的目的在於提供一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用鹽： 其中：X選自C(Ra)2、O、S或NRa；Y選自-C(O)-或-NRbC(O)-；Ra相同或不同，各自獨立地選自氫原子、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-C(O)R5、-C(O)NR6R7或-S(O)pR5，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代； Rb選自氫原子或烷基，其中該烷基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基或硝基的取代基所取代；環A選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基；環B選自芳基或雜芳基；環C選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R1選自烷基，其中該烷基進一步被一個或多個選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基的取代基所取代，其中該環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R2選自氫原子、鹵素、烷氧基、氰基、硝基或烷基，其中該烷基或烷氧基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代； R3選自氫原子、鹵素、烷氧基、氰基、硝基或烷基，其中該烷基或烷氧基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R4選自氫原子或烷基，其中該烷基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R5選自氫原子、烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該烷基、環烷基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自烷基、鹵素、羥基、羥烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；R6或R7各自獨立地選自氫原子、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自烷基、鹵素、羥基、羥烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；或者，R6或R7與相連接的氮原子一起形成雜環基，其中該雜環基內含有一個或多個N、O或S(O)p雜原子，並且 該雜環基視需要進一步被一個或多個選自烷基、鹵素、羥基、烷氧基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；m為0、1、2、3或4；n為0、1、2、3或4；且p為0、1或2。
在本發明另一個較佳方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中環B為苯基或吡啶基。
在本發明一個較佳方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其為通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽： 其中：R1至R4、X、Y、m、n、環A和環C的定義如通式(I)中所述。
在本發明另一個較佳方案中，一種通式(I) 所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中環A選自雜環基或芳基，較佳為苯基或嗎啉基。
在本發明另一個較佳方案中，一種通式(I) 所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其為通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽： 其中：R1至R4、X、Y、m、n和環C的定義如通式(I)中所述。
在本發明另一個較佳方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中環C為雜環基，較佳為嗎啉基或哌嗪基。
在本發明的另一個較佳方案，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用 的鹽，其中R1選自-(CH2)r-Rc；Rc選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；r選自1、2、3、4或5，較佳為2或3；且R5、R6、R7、p的定義如通式(I)中所述。
在本發明另一個較佳方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中R2選自氫原子或烷基，較佳為甲基。
在本發明另一個較佳方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中R3選自氫原子或烷基，較佳為甲基。
本發明典型的化合物包括，但不限於：
或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用鹽。
本發明還提供一種製備通式(I)所示的化合 物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的方法，該方法包括：
在鹼性條件下，通式(IA)化合物或其鹽與通式(IB)化合物反應，視需要進一步水解和/或縮合得到通式(I)化合物；其中：Z選自羥基或鹵素；R1至R4、X、Y、m、n、環A、環B和環C的定義如式(I)中所述。
本發明還提供一種通式(IA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽： 其中：X選自C(Ra)2、O、S或NRa；Ra相同或不同，各自獨立地選自氫原子、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-C(O)R5、-C(O)NR6R7或-S(O)pR5，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰 基、硝基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；條件是當X選自C(Ra)2時，Ra不選自氫原子；環A選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，較佳為苯基；R1選自烷基，其中該烷基進一步被一個或多個選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基的取代基所取代，其中該環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R2選自氫原子、鹵素、烷氧基、氰基、硝基或烷基，其中該烷基或烷氧基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R5選自氫原子、烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該烷基、環烷基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自烷基、鹵素、羥基、羥烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、羧酸或羧酸酯的取代基所 取代；R6或R7各自獨立地選自氫原子、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自烷基、鹵素、羥基、羥烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；或者，R6或R7與相連接的氮原子一起形成雜環基，其中該雜環基內含有一個或多個N、O或S(O)p雜原子，並且該雜環基視需要進一步被一個或多個選自烷基、鹵素、羥基、烷氧基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；m為0、1、2、3或4；且p為0、1或2。
通式(IA)化合物的典型的化合物包括，但不限於：
或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用鹽。
本發明進一步涉及一種醫藥組成物，該醫 藥組成物含有治療有效量的如通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽以及藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。該醫藥組成物進一步含有另外一種或多種磷結合劑，該磷結合劑較佳為司維拉姆。
本發明進一步涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對 映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物在製備腸2B磷酸鈉協同轉運蛋白抑制劑中的用途。
本發明進一步涉及通式(I)所示的化合物或 其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物在製備治療或預防高磷血症的藥物中的用途。
本發明進一步涉及通式(I)所示的化合物或 其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物在治療或預防磷酸鈉轉運蛋白介導的疾病的藥物中的用途，該疾病包括但不限於腎病、內膜局部血管的鈣化、高磷血症引起的高濃度的活性維生素D或甲狀腺功能亢進症，該腎病較佳為慢性的腎病或終末期腎病。
本發明還涉及通式(I)所示的化合物或其互 變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物，其用作腸2B型磷酸鈉協同轉運蛋白(Npt2b)抑制劑。
本發明還涉及通式(I)所示的化合物或其互 變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物，其用於治療或預防高磷血症。
本發明還涉及通式(I)所示的化合物或其互 變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物，其用於治療或預防磷酸鈉轉運蛋白介導的疾病，該疾病較佳選自腎病、內膜局部血管的鈣化、高磷血症引起的高濃度的活性維生素D、甲狀腺功能亢進症，該腎病較佳為慢性的腎病或終末期腎病。
本發明還涉及一種抑制腸2B型磷酸鈉協同 轉運蛋白的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物。
本發明還涉及一種治療或預防高磷血症的 方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物。
本發明涉及一種治療或預防磷酸鈉協同轉 運蛋白介導的疾病或病症的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物，其中該方法包括：
(a)治療高磷血症的方法； (b)治療腎病的方法；(c)延緩腎透析時間的方法；(d)減弱內膜局部血管鈣化的方法；(e)減少高磷血症引起的活性維生素D的方法；(f)減少FGF23的方法；(g)減弱甲狀腺功能亢進症的方法；(h)藉由餐後血清中磷酸鹽的濃度來改善血管內皮異常的方法；(i)減少尿磷的方法；(j)使血清中磷水準標準化的方法；(k)治療蛋白尿的方法；(l)減少血清中甲狀旁腺素和磷酸鹽濃度的方法；其中該腎病為慢性腎病或終末期腎病。
含活性成分的醫藥組成物可以是適用於口 服的形式，例如片劑、糖錠劑、錠劑、水或油混懸液、可分散粉末或顆粒、乳液、硬或軟膠囊，或糖漿劑或酏劑。 可按照本領域任何已知製備藥用組合物的方法製備口服組合物，此類組合物可含有一種或多種選自以下的成分：甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑，以提供悅目和可口的藥用製劑。片劑含有活性成分和用於混合的適宜製備片劑的無毒的可藥用的賦形劑。這些賦形劑可以是惰性賦形劑，如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；造粒劑和崩解劑，例如微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、玉米澱粉或藻酸；粘合劑，例如澱粉、明膠、聚乙烯吡咯烷酮或阿 拉伯膠和潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉。這些片劑可以不包衣或可藉由掩蓋藥物的味道或在胃腸道中延遲崩解和吸收，因而在較長時間內提供緩釋作用的已知技術將其包衣。例如，可使用水溶性味道掩蔽物質，例如羥丙基甲基纖維素或羥丙基纖維素，或延長時間物質例如乙基纖維素、醋酸丁酸纖維素。
也可用其中活性成分與惰性固體稀釋劑例 如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合的硬明膠膠囊，或其中活性成分與水溶性載體例如聚乙二醇或油溶媒例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合的軟明膠膠囊提供口服製劑。
水懸浮液含有活性物質和用於混合的適宜 製備水懸浮液的賦形劑。此類賦形劑是懸浮劑，例如羧基甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮和阿拉伯膠；分散劑或濕潤劑可以是天然產生的磷脂例如卵磷脂，或烯基氧化物與脂肪酸的縮合產物例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或環氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產物，例如十七碳亞乙基氧基鯨蠟醇(heptadecaethyleneoxy cetanol)，或環氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇衍生的部分酯的縮合產物，例如聚環氧乙烷山梨醇單油酸酯，或環氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的縮合產物，例如聚環氧乙烷脫水山梨醇單油酸酯。水混懸液也可以含有一種或多種防腐劑例如尼泊金乙酯或尼泊金正丙酯、一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑和一種或多種甜味劑，例如蔗糖、糖精或阿司帕坦。
油混懸液可藉由使活性成分懸浮於植物油 如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油，或礦物油例如液體石蠟中配製而成。油懸浮液可含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。可加入上述的甜味劑和矯味劑，以提供可口的製劑。可藉由加入抗氧化劑例如丁羥茴醚或α-生育酚保存這些組合物。
藉由加入水可使適用於製備水混懸也的可 分散粉末和顆粒提供活性成分和用於混合的分散劑或濕潤劑、懸浮劑或一種或多種防腐劑。適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑可說明上述的例子。也可加入其他賦形劑例如甜味劑、矯味劑和著色劑。藉由加入抗氧化劑例如抗壞血酸保存這些組合物。
本發明的醫藥組成物也可以是水包油乳劑 的形式。油相可以是植物油例如橄欖油或花生油，或礦物油例如液體石蠟或其混合物。適宜的乳化劑可以是天然產生的磷脂，例如大豆卵磷脂和由脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯例如山梨坦單油酸酯，和該偏酯和環氧乙烷的縮合產物，例如聚環氧乙烷山梨醇單油酸酯。乳劑也可以含有甜味劑、矯味劑、防腐劑和抗氧劑。可用甜味劑例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖配製糖漿和酏劑。此類製劑也可含有緩和劑、防腐劑、著色劑和抗氧劑。
醫藥組成物可以是無菌注射水溶液形式。 可在使用的可接受的溶媒和溶劑中有水、林格氏液和等滲氯化鈉溶液。無菌注射製劑可以是其中活性成分溶於油相 的無菌注射水包油微乳。例如將活性成分溶於大豆油和卵磷脂的混合物中。然後將油溶液加入水和甘油的混合物中處理形成微乳。可藉由局部大量注射，將注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本發明化合物恒定循環濃度的方式給予溶液和微乳。為保持這種恒定濃度，可使用連續靜脈內遞藥裝置。這種裝置的實例是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型靜脈注射泵。
醫藥組成物可以是用於肌內和皮下給藥的 無菌注射水或油混懸液的形式。可按已知技術，用上述那些適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑配製該混懸液。無菌注射製劑也可以是在無毒腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中製備的無菌注射溶液或混懸液，例如1,3-丁二醇中製備的溶液。此外，可方便地用無菌固定油作為溶劑或懸浮介質。 為此目的，可使用包括合成甘油單或二酯在內的任何調和固定油。此外，脂肪酸例如油酸也可以製備注射劑。
可按用於直腸給藥的栓劑形式給予本發明 化合物。可藉由將藥物與在普通溫度下為固體但在直腸中為液體，因而在直腸中會溶化而釋放藥物的適宜的無刺激性賦形劑混合來製備這些醫藥組成物。此類物質包括可哥脂、甘油明膠、氫化植物油、各種分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。
本領域技術人員所熟知的，藥物的給藥劑 量依賴於多種因素，包括但並非限定以下因素：所用特定化合物的活性、病人的年齡、病人的體重、病人的健康狀 況、病人的行被、病人的飲食、給藥時間、給藥方式、排泄的速率、藥物的組合等；另外，最佳的治療方式如治療的模式、通式化合物(I)的日用量或可藥用的鹽的種類可以根據傳統的治療方案來驗證。
[發明詳述]
除非有相反陳述，否則下列用在說明書和權利要求書中的術語具有下述含義。
“烷基”指飽和的脂族烴基團，包括1至20個碳原子的直鏈和支鏈基團。較佳含有1至10個碳原子的烷基，更佳含有1至6個碳原子的烷基。非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、 3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各種支鏈異構體等。更佳的是含有1至6個碳原子的低級烷基，非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或未取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基、羧酸酯基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7。
術語“烯基”指由至少由兩個碳原子和至 少一個碳-碳雙鍵組成的如上定義的烷基，例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基等。較佳C2-10烯基，更佳C2-6烯基，最佳C2-4烯基。烯基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷 基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧酸基、羧酸酯基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7。
術語“炔基”指至少由兩個碳原子和至少 一個碳-碳三鍵組成的如上所定義的烷基，例如乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-、2-或3-丁炔基等。較佳C2-10炔基，更佳C2-6炔基，最佳C2-4炔基。炔基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧酸基、羧酸酯基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7。
“環烷基”指飽和或部分不飽和單環或多 環環狀烴取代基，其包括3至20個碳原子，較佳包括3至12個碳原子，更佳環烷基環包含3至10個碳原子，最佳環烷基環包含3至6個碳原子。單環環烷基的非限制性實施例包含環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等，較佳環丙基、環己烯基。多環環烷基包括螺環、稠環和橋環的環烷基。
“螺環烷基”指5至20員，單環之間共用 一個碳原子(稱螺原子)的多環基團，這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺環烷基、雙螺環烷基基或多螺環烷基，較佳為單螺環烷基和雙螺環烷基。更佳為4員/4員、4員/5員、4員/6員、5員/5員或5員/6員單螺環烷基。螺環烷基的非限制性實施例包含
“稠環烷基”指5至20員，系統中的每個 環與體系中的其他環共用毗鄰的一對碳原子的全碳多環基團，其中一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠環烷基，較佳為雙環或三環，更佳為5員/5員或5員/6員雙環烷基。稠環烷基的非限制性實施例包含
“橋環烷基”指5至20員，任意兩個環共 用兩個不直接連接的碳原子的全碳多環基團，這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環 的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋環烷基，較佳為雙環、三環或四環，更有選為雙環或三環。橋環烷基的非限制性實施例包含
該環烷基環可以稠合於芳基、雜芳基或雜 環基環上，其中與母體結構連接在一起的環為環烷基，非限制性實施例包括茚滿基、四氫萘基、苯並環庚烷基等。 環烷基可以是視需要取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基、羧酸酯基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7。
“雜環基”指飽和或部分不飽和單環或多 環環狀烴取代基，其包括3至20個環原子，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O)m(其中m是0至2的整數)的雜原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環部分，其餘環原子為碳。較佳包括3至12個環原子，其中1至4個是雜原子；更佳雜環基環包含3至10個環原子，其中1至3 個是雜原子；更佳雜環基環包含5至6個環原子，其中1至2個是雜原子。單環雜環基的非限制性實施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基、高哌嗪基、吡喃基、四氫呋喃基等。多環雜環基包括螺環、稠環和橋環的雜環基。
“螺雜環基”指5至20員，單環之間共用 一個原子(稱螺原子)的多環雜環基團，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O)m(其中m是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺雜環基、雙螺雜環基或多螺雜環基，較佳為單螺雜環基和雙螺雜環基。更佳為4員/4員、4員/5員、4員/6員、5員/5員或5員/6員單螺雜環基。螺雜環基的非限制性實施例包含
“稠雜環基”指5至20員，系統中的每個 環與體系中的其他環共用毗鄰的一對原子的多環雜環基團，一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O)m(其中m是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組 成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠雜環基，較佳為雙環或三環，更佳為5員/5員或5員/6員雙環稠雜環基。稠雜環基的非限制性實施例包含
“橋雜環基”指5至14員，任意兩個環共 用兩個不直接連接的原子的多環雜環基團，這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O)m(其中m是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。較佳為6至14員，更較佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋雜環基，較佳為雙環、三環或四環，更有選為雙環或三環。橋雜環基的非限制性實施例包含：
該雜環基環可以稠合於芳基、雜芳基或環 烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜環基，非限制性實施例包含：
雜環基可以是視需要取代的或未取代的， 當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基、羧酸酯基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7。
“芳基”指具有共軛的π電子體系的6至 14員全碳單環或稠合多環(也就是共用毗鄰碳原子對的環)基團，較佳為6至10員，更佳苯基和萘基，最較佳苯基。 該芳基環可以稠合於雜芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為芳基環，非限制性實施例包含：
芳基可以是取代的或未取代的，當被取代 時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基、羧酸酯基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、 -NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7。
“雜芳基”指具有1至4個雜原子作為環原 子，其餘的環原子為碳的5至14員芳基，其中雜原子包括氧、硫和氮。較佳為5至10員。雜芳基較佳為是5員或6員，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。該雜芳基環可以稠合於芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，非限制性實施例包含：
雜芳基可以是視需要取代的或未取代的， 當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基、羧酸酯基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7。
“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(未取代的環 烷基)，其中烷基的定義如上所述。非限制性實施例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環丙氧基、環丁氧基、 環戊氧基、環己氧基等。烷氧基可以是視需要取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自為烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基、羧酸酯基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7。
“鹵烷基”指烷基被一個或多個鹵素取 代，其中烷基的定義如上所述。
“羥基”指-OH基團。
“羥烷基”指被羥基取代的烷基，其中烷基的定義如上所述。
“鹵素”指氟、氯、溴或碘。
“胺基”指-NH2。
“氰基”指-CN。
“硝基”指-NO2。
“苄基”指-CH2-苯基。
“側氧基”指=O。
“羧基”指-C(O)OH。
“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或(環烷基)，其中烷基、環烷基的定義如上所述。
“視需要”或“視需要地”意味著隨後所描述地事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或 環境發生或不發生地場合。例如，“視需要被烷基取代的雜環基團”意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環基團被烷基取代的情形和雜環基團不被烷基取代的情形。
“取代的”指基團中的一個或多個氫原子， 較佳為最多5個，更較佳為1至3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。不言而喻，取代基僅處在它們的可能的化學位置，本領域技術人員能夠在不付出過多努力的情況下確定(藉由實驗或理論)可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的胺基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結合時可能是不穩定的。
“醫藥組成物”表示含有一種或多種本文 所述化合物或其生理學上可藥用的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，以及其他組分例如生理學可藥用的載體和賦形劑。醫藥組成物的目的是促進對生物體的給藥，利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。
p、R5至R7的定義如通式(I)化合物中所述。
[本發明的合成方法]
為了完成本發明的合成目的，本發明採用如下的合成技術方案：本發明通式(I)所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用鹽的製備方法，該方法包括以下步驟：
在冰浴條件下，通式(Ia)化合物與2-氰基乙酸在縮合劑存在下進行縮合反應，得到通式(Ib)化合物；通式(Ib)化合物與通式(Ic)化合物，在嗎啉存在的條件下進行反應，得到通式(Id)化合物；通式(Id)化合物與硫，在嗎啉存在的條件下進行反應，得到通式通式(IA)化合物；在鹼性條件下，通式(IA)化合物或其鹽與通式(IB)化合物在縮合劑存在下進行縮合反應，視需要進一步水解和/或縮合得到通式(I)化合物；其中：Z選自羥基或鹵素；R1至R4、X、Y、m、n、環A、環B和環C的定義如式(I)中所述。
上述合成技術方案中，提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼類包括但不限於三乙胺、嗎啉、N,N-二異丙基乙胺、吡啶、六甲基二矽基胺基鈉，正丁基鋰、第三丁醇鉀或四丁基溴化銨，該無機鹼類包括但不限於氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫化鈉、 碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀或碳酸銫，較佳為三乙胺。
縮合劑包括但不限於1-(3-二甲胺基丙 基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、N,N'-二環己基碳化二亞胺、N,N'-二異丙基碳二醯亞胺、O-苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羥基苯並三唑、1-羥基-7-偶氮苯並三氮唑、O-苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、苯並三氮唑-1-基氧基三(二甲基胺基)磷鎓六氟磷酸鹽或六氟磷酸苯並三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷。
第1圖係Npt2b對大鼠尿磷排泄影響的三天平均值圖，比率為降低輻度。
以下結合實施例進一步描述本發明，但這些實施例並非限制本發明的範圍。
本發明實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件，或按照原料或商品製造廠商所建議的條件。未注明具體來源的試劑，為市場購買的常規試劑。
[實施例]
化合物的結構是藉由核磁共振(NMR)或質譜(MS)來確定的。NMR的測定是用Bruker AVANCE-400核 磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞碸(DMSO-d 6)、氘代氯仿(CDCl3)、氘代甲醇(CD3OD)，內標為四甲基矽烷(TMS)，化學位移是以10-6(ppm)作為單位給出。
MS的測定用FINNIGAN LCQAd(ESI)質譜儀(生產商：Thermo，型號：Finnigan LCQ advantage MAX)。
HPLC的測定使用安捷倫1200DAD高壓液相色譜儀(Sunfire C18 150×4.6mm色譜管柱)和Waters 2695-2996高壓液相色譜儀(Gimini C18 150×4.6mm色譜管柱)。
激酶平均抑制率及IC50值的測定用NovoStar酶標儀(德國BMG公司)。
薄層色譜矽膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254矽膠板，薄層色譜法(TLC)使用的矽膠板採用的規格是0.15mm至0.2mm，薄層色譜分離純化產品採用的規格是0.4mm至0.5mm矽膠板。
管柱色譜一般使用煙臺黃海200至300目矽膠為載體。
本發明的已知的起始原料可以採用或按照本領域已知的方法來合成，或可購買自ABCR GmbH & Co.KG，Acros Organnics，Aldrich Chemical Company，韶遠化學科技(Accela ChemBio Inc)、達瑞化學品等公司。
實施例中如無特殊說明，反應均在氬氣氛或氮氣氛下進行。
氬氣氛或氮氣氛是指反應瓶連接一個約1L 容積的氬氣或氮氣氣球。
氫氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氫氣氣球。
加壓氫化反應使用Parr 3916EKX型氫化儀和清藍QL-500型氫氣發生器或HC2-SS型氫化儀。
氫化反應通常抽真空，充入氫氣，反復操作3次。
微波反應使用CEM Discover-S 908860型微波反應器。
實施例中如無特殊說明，反應中的溶液是指水溶液。
實施例中如無特殊說明，反應的溫度為室溫。
室溫為最適宜的反應溫度，溫度範圍是20℃至30℃。
實施例中的反應進程的監測採用薄層色譜法(TLC)，反應所使用的展開劑的體系有：A：二氯甲烷和甲醇體系，B：正己烷和乙酸乙酯體系，C：石油醚和乙酸乙酯體系，D：丙酮，溶劑的體積比根據化合物的極性不同而進行調節。
純化化合物採用的柱色譜的洗脫劑的體系和薄層色譜法的展開劑的體系包括：A：二氯甲烷和甲醇體系，B：正己烷和乙酸乙酯體系，C：正己烷和丙酮體系，D：正己烷，E：乙酸乙酯，溶劑的體積比根據化合物的極 性不同而進行調節，也可以加入少量的三乙胺和酸性或鹼性試劑等進行調節。
實施例1 4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸
第一步 4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯
將4-(3-(4-(2-胺基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩 -3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯1a(149mg，0.33mmol，採用專利申請“WO2011136269”公開的方法製備而得)溶解於5mL二氯甲烷中，加入三乙胺(101mg，1mmol)，然後加入5mL 3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯氯1b(124mg，0.40mmol，採用專利申請“WO2012006477”公開的方法製備而得)的二氯甲烷溶液，攪拌反應3小時。 加入20mL水，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，合併有機相，依次用水(50mL×1)，飽和氯化鈉溶液(50mL×1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到粗品標題產物4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯1c(238mg，黃色固體)，產物不經純化直接進行下一步反應。
MS m/z(ESI)：723.2[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 11.59(s,1H),9.68(s,1H),7.85-7.93(m,4H),7.62-7.64(d,4H),7.37(d,2H),7.18(d,2H),3.84(s,3H),3.41-3.56(m,5H),3.32(s,3H),2.88-2.96(m,3H),2.58-2.74(m,8H),2.37-2.42(m,2H),2.09(s,2H),1.75-1.93(m,6H)
第二步 4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸
將粗品4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺 甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯1c(238mg，0.33mmol)溶解於10mL四氫呋喃中，加入3mL 2M氫氧化鈉溶液，攪拌反應2小時。加入30mL水，用正己烷和乙酸乙酯(V：V=1：1)的混合溶液萃取(20mL×2)，合併水相，滴加2M鹽酸至水相pH為2至3，固體析出。過濾，濾餅烘乾，用HPLC製備分離法純化所得殘餘物，得到標題產物4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸1(160mg，白色固體)，產率：68.7%。
MS m/z(ESI)：709.2[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 12.77(s,1H),11.59(s,1H),9.65(s,1H),7.92(s,1H),7.85-7.87(m,3H),7.62(d,4H),7.33(d,2H),7.17(d,2H),3.88-3.96(m,3H),3.41-3.55(m,5H),2.88-2.96(d,3H),2.65-2.74(m,6H),2.56-2.60(m,2H),2.40(s,2H),2.10(s,2H).,1.6-1.93(m,2H),1.75-1.81(m,4H)
實施例2 4-(4-(2-(3-(3-甲基-3-(2-嗎啉乙基)脲基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸
第一步 3-(3-甲基-3-(2-嗎啉乙基)脲基)苯甲醯氯
將3-(3-甲基-3-(2-嗎啉乙基)脲基)苯甲酸2a(150mg，0.50mmol，採用專利申請“WO2012054110”公開的方法製備而得)溶解於60mL二氯甲烷中，降溫至0℃，加入氯化亞碸(177mg，1.50mmol)，升溫至回流，攪拌反應2小時。反應液減壓濃縮，得到粗品標題產物3-(3-甲基-3-(2-嗎啉乙基)脲基)苯甲醯氯2b(163mg，白色固 體)，產物不經純化直接進行下一步反應。
第二步 4-(4-(2-(3-(3-甲基-3-(2-嗎啉乙基)脲基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯
將4-(4-(2-胺基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯2c(144mg，0.33mmol，採用專利申請“WO2011136269”公開的方法製備而得)溶解於5mL三氯甲烷中，加入三乙胺(101mg，1mmol)，降溫至0℃，加入粗品3-(3-甲基-3-(2-嗎啉乙基)脲基)苯甲醯氯2b(163mg，0.50mmol)的二氯甲烷溶液，升至室溫，攪拌反應12小時。加入50mL水，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，合併有機相，依次用水(50mL×1)，飽和氯化鈉溶液(50mL×1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系B純化所得殘餘物，得到標題產物4-(4-(2-(3-(3-甲基-3-(2-嗎啉乙基)脲基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯2d(136mg，淡黃色固體)，產率：57.1%。
MS m/z(ESI)：724.2[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 13.44(s,1H),9.26(s,1H),8.16-8.07(m,2H),7.88(d,2H),7.64(d,2H),7.51-7.44(m,2H),7.36(d,2H),7.12(d,2H),4.15(s,2H),3.83(s,3H),3.55-3.51(m,3H),3.33-3.30(m,6H),3.20(s,2H),2.98-2.89(m,3H),2.68(t,2H),2.56(t,2H),2.36-2.30(m,3H),2.03(s,2H),1.91-1.87(m,2H)
第三步 4-(4-(2-(3-(3-甲基-3-(2-嗎啉乙基)脲基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸
將4-(4-(2-(3-(3-甲基-3-(2-嗎啉乙基)脲基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯2d(136mg，0.19mmol)溶解於4.5mL四氫呋喃和乙醇(V：V=2：1)的混合溶液中，加入1.1mL 2M氫氧化鈉溶液，升溫至25℃，攪拌反應12小時。反應液減壓濃縮，用HPLC製備分離法純化所得殘餘物，得到標題產物4-(4-(2-(3-(3-甲基-3-(2-嗎啉乙基)脲基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸2(15mg，白色固體)，產率：11.3%。
MS m/z(ESI)：710.2[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 8.71(s,1H).,8.03(s,1H),7.85-7.75(d,2H),7.71(d,1H),7.60-7.59(m,2H),7.48-7.37(m,2H),7.36-7.30(m,2H),7.18-7.16(m,2H),3.54(t,4H),3.44(t,2H),3.01-2.92(m,4H),2.91-2.84(m,2H),2.79(s.,2H),2.68(s,2H),2.54(s,1H),2.49-2.37(m,6H),1.85-1.55(m,4H)
實施例3 4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-6-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸
第一步 2-胺基-3-(4-(3-(4-(甲氧基羰基)苯基)丙基)苯胺基羰基)-4,5-二氫噻吩並[2,3-c]吡啶-6(7H)-甲酸第三丁酯
將硫(71mg，2.23mmol)溶解於20mL乙醇中，依次加入4-(3-(4-(2-氰基乙醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯3a(750mg，2.23mmol，採用專利申請“WO2013062065”公開的方法製備而得)，4-羰基哌啶-1-甲酸第三丁酯(443mg，4.97mmol)和嗎啉(213mg，2.45mmol)，加熱升溫至 90℃，攪拌反應12小時。加入60mL飽和氯化鈉溶液，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物2-胺基-3-(4-(3-(4-(甲氧基羰基)苯基)丙基)苯胺基羰基)-4,5-二氫噻吩並[2,3-c]吡啶-6(7H)-甲酸第三丁酯3b(600mg，黃色固體)，產率：49.0%。
MS m/z(ESI)：550.2[M+1]
第二步 3-(4-(3-(4-(甲氧基羰基)苯基)丙基)苯胺基羰基)-2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5-二氫噻吩並[2,3-c]吡啶-6(7H)-甲酸第三丁酯
將3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲酸3c(85mg，0.30mmol，採用專利申請“WO2012006477”公開的方法製備而得)和2-胺基-3-(4-(3-(4-(甲氧基羰基)苯基)丙基)苯胺基羰基)-4,5-二氫噻吩並[2,3-c]吡啶-6(7H)-甲酸第三丁酯3b(100mg，0.18mmol)溶解於10mL二氯甲烷中，依次加入1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(52mg，0.27mmol)和4-二甲胺基吡啶(33mg，0.27mmol)，攪拌反應24小時。加入50mL水，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物3-(4-(3-(4-(甲氧基羰基)苯基)丙基)苯胺基羰基)-2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺 甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5-二氫噻吩並[2,3-c]吡啶-6(7H)-甲酸第三丁酯3d(50mg，黃色固體)，產率：33.8%。
MS m/z(ESI)：824.4[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 11.66(s,1H),9.55(s,1H),7.95-7.92(m,1H),7.90-7.86(m,3H),7.63-7.61(m,4H),7.37-7.35(d,2H),7.19-7.17(d,2H),4.54(s,2H),3.87(s,3H),3.58-3.57(m,5H),3.41-3.30(m,2H),3.30-3.25(m,2H),2.96-2.83(m,5H),2.69-2.66(t,2H),2.60-2.58(t,2H),2.40-2.30(m,3H),2.15-2.05(m,2H),1.91-1.87(m,2H),1.44(s,9H)
第三步 4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯
將3-(4-(3-(4-(甲氧基羰基)苯基)丙基)苯胺基羰基)-2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5-二氫噻吩並[2,3-c]吡啶-6(7H)-甲酸第三丁酯3d(100mg，0.10mmol)溶解於3mL二氯甲烷中，降溫至0℃，加入0.5mL三氟乙酸，攪拌反應30分鐘。滴加飽和碳酸鈉至反應液pH為9至10，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到粗品標題產物4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯3e(50 mg，黃色固體)，產物不經純化直接進入下一步反應。
MS m/z(ESI)：724.2[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 7.92(s,1H),7.87(d,3H),7.67(d,1H),7.57-7.64(m,3H),7.34-7.40(m,2H),7.18(d,2H),3.83(s,3H),3.58(s,3H),3.43(d,2H),3.27(s,1H),2.84-3.02(m,10H),2.60-2.81(m,5H),2.55(s,1H),2.43(s,3H),2.06-2.18(m,2H)
第四步 4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-6-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯
將粗品4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯3e(100mg，0.14mmol)溶解於5mLN,N-二甲基甲醯胺中，依次加入碳酸鉀(57mg，0.41mmol)和4-甲基苯磺酸(四氫-2H-吡喃-4-基)甲基酯(56mg，0.21mmol，採用公知的方法文獻“Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters,21(8),2541-2546”製備而得)，加熱至70℃，攪拌反應12小時。加入30mL水，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(30mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-6-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲 醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯3f(31mg，淡黃色固體)，產率：27.4%。
MS m/z(ESI)：822.4[M+1]
第五步 4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-6-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸
將4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-6-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯3f(31mg，0.04mmol)溶解於5mL甲醇中，加入5mL 2M氫氧化鈉溶液，升溫至50℃，攪拌反應1小時。滴加3M鹽酸至水相pH為2至3，固體析出。過濾，濾餅烘乾，用HPLC製備分離法純化所得殘餘物，得到標題產物4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-6-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸3(20mg，白色固體)，產率：66.7%。
MS m/z(ESI)：808.4[M+1]
1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.08-8.15(m,2H),7.96(d,2H),7.81(d,1H),7.70(t,1H),7.58(d,2H),7.32(d,2H),7.26(d,2H),4.08(s,1H),3.92-4.06(m,5H),3.76-3.95(m,5H),3.44-3.62(m,5H),3.30(d,4H),3.09(s,3H),2.65-2.78(m,4H),2.28(d,1H),1.95-2.05(m,2H),1.79(d,2H),1.45-1.55(m,2H),1.27-1.38(m,3H),0.91-0.95(m,1H)
實施例4 4-(4-(2-(3-(甲基(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸
第一步 3-(甲基(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺甲醯基)苯甲酸甲酯
將N-甲基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙胺4b(1.73g，11.01mmol，採用專利申請“WO2013014448”公開的方法製備而得)溶解於35mL二氯甲烷中，加入三乙胺(2.22g，22.02mmol)，冷卻至0℃，加入5mL3-(氯甲醯基)苯甲 酸甲酯4a(56mg，0.21mmol，採用公知的方法文獻“Journal of the American Chemical Society,135(45),16841-16844；2013”製備而得)的二氯甲烷溶液，升至室溫，攪拌反應2小時。反應液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物3-(甲基(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺甲醯基)苯甲酸甲酯4c(2.40g，棕色油狀液體)，產率：75%。
MS m/z(ESI)：320.3[M+1]
第二步 3-(甲基(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺甲醯基)苯甲酸
將3-(甲基(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺甲醯基)苯甲酸甲酯4c(530mg，1.66mmol)，氫氧化鋰(209mg，4.98mmol)溶解於14mL四氫呋喃，水和甲醇(V：V：V=5：4：5)混合溶劑中，攪拌反應1小時。反應液減壓濃縮，用矽膠色譜製備分離法純化所得殘餘物，得到標題產物3-(甲基(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺甲醯基)苯甲酸4d(507mg，白色固體)，產率：100%。
MS m/z(ESI)：306.2[M+1]
第三步 4-(4-(2-(3-(甲基(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯
將4-(4-(2-胺基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯2c(70mg，0.16mmol)，3-(甲 基(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺甲醯基)苯甲酸4d(98mg，0.32mmol)，2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(122mg，0.32mmol)和N,N-二異丙基乙胺(80μL，0.48mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，升溫至50℃，攪拌反應12小時。加入10mL飽和碳酸氫鈉溶液，用二氯甲烷萃取(30mL×3)，合併有機相，依次用水(50mL×1)，飽和氯化鈉溶液(50mL×1)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系B純化所得殘餘物，得到標題產物4-(4-(2-(3-(甲基(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯4e(71mg，黃色固體)，產率：30.6%。
MS m/z(ESI)：722.4[M+1]
第四步 4-(4-(2-(3-(甲基(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸
將4-(4-(2-(3-(甲基(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯4e(71mg，0.098mmol)溶解於5mL甲醇中，加入1mL 2M氫氧化鈉溶液，升溫至50℃，攪拌反應1小時。反應液減壓濃縮，滴加3M鹽酸至水相pH為2至3，固體析出。過濾，濾餅烘乾，用HPLC製備分離法純化所得殘餘物，得到標題產物4-(4-(2-(3-(甲基 (2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸4(9mg，淡黃色固體)，產率：12.9%。
MS m/z(ESI)：708.2[M+1]
1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 7.98-8.10(m,2H),7.90-7.97(m,2H),7.64-7.77(m,2H),7.44-7.60(m,2H),7.29(d,2H),7.11-7.24(m,2H),3.78(s,1H),3.48(s,1H),3.21-3.31(m,2H),3.14(s,2H),2.92-3.12(m,8H),2.86(s,6H),2.76(s,2H),2.65(d,2H),1.72-1.98(m,4H),1.27-1.39(m,2H)
實施例5 4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-6-((1,1,1-三氟-2-甲基丙基-2-基側氧)羰基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸
第一步 4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-6-((1,1,1-三氟-2-甲基丙基-2-基側氧)羰基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯
將4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯3e(50mg，0.07mmol)溶解於5mL三氯甲烷中，冷卻至0℃，依次加入三乙胺(14mg，0.14mmol)和1mL 3-甲基-1-((1,1,1-三氟-2-甲基丙基-2-基側氧基)羰基)-1H-咪唑碘鹽5a(25mg，0.07mmol，採用專利申請“WO2011142359”公開的方法製備而得)的三氯甲烷溶液，升至室溫，攪拌反應1小時。加入50mL水，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(30mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題 產物4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-6-((1,1,1-三氟-2-甲基丙基-2-基側氧)羰基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯5b(40mg，黃色油狀液體)，產率：66.1%。
MS m/z(ESI)：878.4[M+1]
第二步 4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-6-((1,1,1-三氟-2-甲基丙基-2-基側氧)羰基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸
將4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-6-((1,1,1-三氟-2-甲基丙基-2-基側氧)羰基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯5b(40mg，0.65mmol)溶解於3mL四氫呋喃和甲醇(V：V=2：1)的混合溶液中，加入1mL 1M氫氧化鈉溶液，升溫至30℃，攪拌反應4小時。反應液減壓濃縮，滴加1M鹽酸至反應液pH為6，固體析出。過濾，濾液減壓濃縮，用HPLC製備分離法純化所得殘餘物，得到標題產物4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-6-((1,1,1-三氟-2-甲基丙基-2-基側氧)羰基)-4,5,6,7-四氫噻吩並[2,3-c]吡啶-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸5(6mg，白色固體)，產率：15.4%。
MS m/z(ESI)：864.4[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 11.69(s,1H),9.71(s,1H),8.15-7.95(m,2H),7.87(d,2H),7.73(d,1H),7.67(t,1H), 7.61(d,2H),7.33(d,2H),7.19(d,2H),4.58(s,2H),4.01(s,4H),3.83(s,5H),3.62(s,4H),3.18(s,2H),2.94(s,2H),2.89(s,2H),2.67(t,2H),2.59(t,2H),1.95-1.85(m,2H),1.68(s,6H)
實施例6 N 1 -(3-(4-(4-(1,3-二羥基-2-(羥基甲基)丙基-2-基胺基甲醯基)苯乙基)苯基胺基甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺
第一步 4-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺基甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯
將3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲酸3c(315mg，1.08mmol)和4-(4-(2-胺基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯2c(360mg，0.83mmol)，1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(255mg，1.33mmol)和4-二甲胺基吡啶(162mg，1.33mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，攪拌反應24小時。加入50mL水，用二氯甲烷萃取(20mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物4-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺基甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯6a(400mg，黃色固體)，產率：68.1%。
MS m/z(ESI)：709.3[M+1]
第二步 4-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺基甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸
將4-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺基甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯6a(400mg，0.56mmol)溶解於9mL四氫呋喃和甲醇(V：V=2：1)的混合溶液中，加入2.3mL 1M氫氧化鈉 溶液，升溫至30℃，攪拌反應12小時。反應液減壓濃縮，加入10mL水，滴加1M鹽酸至反應液pH為6至7，用二氯甲烷萃取(20mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到粗品標題產物4-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺基甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸6b(352mg，黃色固體)，產物不經純化直接進行下一步反應。
MS m/z(ESI)：695.3[M+1]1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 11.59(s,1H),9.67(s,1H),7.95-7.92(m,1H),7.86-7.84(m,3H),7.62-7.59(m,4H),7.36-7.34(d,2H),7.19-7.17(d,2H),3.60-3.50(m,4H),3.35-3.25(m,3H),2.97-2.93(m,4H),2.90-2.88(m,4H),2.73-2.69(m,4H),2.55-2.45(m,1H),2.40-2.35(m,1H),2.15-2.05(m,2H),1.81-1.79(m,2H),1.75-1.73(m,2H)
第三步 N 1 -(3-(4-(4-(1,3-二羥基-2-(羥基甲基)丙基-2-基胺基甲醯基)苯乙基)苯基胺基甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺
將粗品4-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺基甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸6b(170mg，0.25mmol)和2-胺基-2-(羥基甲基)丙烷-1,3-二醇(60mg，0.49mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，依次加入1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸 鹽(94mg，0.49mmol)，1-羥基苯並三唑(67mg，0.49mmol)和N,N-二異丙基乙胺(64mg，0.49mmol)，攪拌反應12小時。反應液減壓濃縮，用HPLC製備分離法純化所得殘餘物，得到標題產物N 1 -(3-(4-(4-(1,3-二羥基-2-(羥基甲基)丙基-2-基胺基甲醯基)苯乙基)苯基胺基甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺6(110mg，淡黃色固體)，產率：56.4%。
MS m/z(ESI)：798.4[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 11.59(s,1H),9.63(s,1H),7.89(d,2H),7.71(d,2H),7.67-7.58(m,4H),7.30(d,2H),7.23(s,1H),7.17(d,2H),4.78(t,3 H),3.67(d,6H),3.56-3.23(m,6 H),3.04-2.88(m,7H),2.71(d,4H),2.57-2.33(m,4 H),2.10(s,2H),1.79-1.75(m,4H)
實施例7 N 1-甲基-N 1-(2-嗎啉乙基)-N 3-(3-(4-苯乙基苯基胺基甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)間苯二甲醯胺
第一步 2-氰基-N-(4-苯乙基苯基)乙醯胺
將4-苯乙基苯胺7a(2.15g，10.91mmo1，採用公知的方法文獻“Journal of Medicinal Chemistry,56(5),2139-2149；2013”製備而得)和2-氰基乙酸(1.39g，16.37mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，降溫至0℃，加入1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(3.14g，16.37mmol)，升至室溫，攪拌反應2小時。加入10mL水，攪拌30分鐘，固體析出，過濾，濾餅烘乾，得到粗品標題產物2-氰基-N-(4-苯乙基苯基)乙醯胺7b(2.68g，白色固體)，產物不經純化直接進行下一步反應。
MS m/z(ESI)：263.3[M-1]
第二步 2-氰基-2-亞環己基-N-(4-苯乙基苯基)乙醯胺
將粗品2-氰基-N-(4-苯乙基苯基)乙醯胺7b(2.68g，10.13mmol)和環己酮(2.88g，29.38mmol)溶解於6mL甲苯中，加入嗎啉(900mg，10.33mmol)，升溫至120℃，攪拌反應2小時。反應液減壓濃縮，用乙醚和石油 醚打漿純化所得殘餘物，得到標題產物2-氰基-2-亞環己基-N-(4-苯乙基苯基)乙醯胺7c(2.52g，淺褐色固體)，產率：72.2%。
MS m/z(ESI)：345.2[M+1]
第三步 2-胺基-N-(4-苯乙基苯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺
將2-氰基-2-亞環己基-N-(4-苯乙基苯基)乙醯胺7c(2.52g，7.32mmol)和硫(246mg，7.68mmol)溶解於10mL二甲基甲醯胺中，加入嗎啉(670mg，7.68mmol)，升溫至50℃，攪拌反應2小時。加入50mL飽和氯化鈉溶液，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用異丙醇打漿純化所得殘餘物，得到標題產物2-胺基-N-(4-苯乙基苯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺7d(1.69g，黃色固體)，產率：61.2%。
MS m/z(ESI)：377.2[M+1]
第四步 N 1-甲基-N 1-(2-嗎啉乙基)-N 3-(3-(4-苯乙基苯基胺基甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)間苯二甲醯胺
將2-胺基-N-(4-苯乙基苯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺7d(200mg，0.53mmol)和3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲酸3c(292mg，1mmol)，1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(153mg，0.80mmol)和4- 二甲胺基吡啶(97mg，0.80mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，升溫至30℃，攪拌反應12小時。加入30mL水，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物N 1-甲基-N 1-(2-嗎啉乙基)-N 3-(3-(4-苯乙基苯基胺基甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)間苯二甲醯胺7(174mg，黃色固體)，產率：50.3%。
MS m/z(ESI)：651.5[M+1]
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.99-8.10(m,2H),7.59-7.77(m,2H),7.50-7.59(m,1H),7.46(d,2H),7.27-7.32(m,1H),7.04-7.23(m,5H),3.91(s,1H),3.76(s,3H),3.58(s,2H),3.39(s,1H),3.04(s,4H),2.88(s,3H),2.74(s,5H),2.50(s,2H),2.24(s,2H),1.90(s,4H)
實施例8 N 1-(6,6-二甲基-3-(3-甲基-4-苯乙基苯基胺甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺
第一步 3-甲基-4-苯乙基苯胺
將(E)-2-甲基-4-硝基-1-苯乙烯基苯8a(40mg，0.28mmol，採用公知的方法文獻“Journal of Physical Chemistry A,113(17),4868-4877；2009”製備而得)溶解於75.4mL甲醇和二氯甲烷(V：V=2：1)混合溶劑中，加入鈀/碳(280mg，20%)，置換氫氣三次，攪拌反應3小時。過濾，用二氯甲烷洗滌濾餅，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物3-甲基-4-苯乙基苯胺8b(1.20g，淡黃色油狀物)，產率：97.6%。
MS m/z(ESI)：212.3[M+1]
第二步 2-氰基-N-(3-甲基-4-苯乙基苯基)乙醯胺
將3-甲基-4-苯乙基苯胺8b(1.20g，5.68mmol)和氰基乙酸(722mg，8.50mmol)溶解於10mL二甲基甲醯胺中，降溫至0℃，加入1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基 碳二亞胺鹽酸鹽(1.62g，8.50mmol)，升至室溫，攪拌反應1小時。加入30mL冰水，後加入50mL水，過濾，濾餅烘乾，得到粗品標題產物2-氰基-N-(3-甲基-4-苯乙基苯基)乙醯胺8c(1.39g，白色固體)，產率：88.0%。
MS m/z(ESI)：279.2[M+1]
第三步 2-氰基-2-(4,4-二甲基亞環己基)-N-(3-甲基-4-苯乙基苯基)乙醯胺
將粗品2-氰基-N-(3-甲基-4-苯乙基苯基)乙醯胺8c(700mg，2.52mmol)，4,4-二甲基環己酮(921mg，7.29mmol)和嗎啉(224mg，2.57mmol)溶解於12mL甲苯中，升溫至120℃，攪拌反應3小時。反應液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物2-氰基-2-(4,4-二甲基亞環己基)-N-(3-甲基-4-苯乙基苯基)乙醯胺8d(852mg，淡黃色油狀物)，產率：87.6%。
MS m/z(ESI)：385.5[M-1]
第四步 2-胺基-6,6-二甲基-N-(3-甲基-4-苯乙基苯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺
將2-氰基-2-(4,4-二甲基亞環己基)-N-(3-甲基-4-苯乙基苯基)乙醯胺8d(853mg，2.20mmol)，硫(75mg，2.31mmol)和嗎啉(202mg，2.31mmol)溶解於8mL二甲基甲醯胺中，升溫至50℃，攪拌反應12小時。加入50mL水，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化 鈉溶液洗滌(50mL×l)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物2-胺基-6,6-二甲基-N-(3-甲基-4-苯乙基苯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺8e(720mg，粉色固體)，產率：78.2%。
MS m/z(ESI)：417.5[M-1]
第五步 N 1-(6,6-二甲基-3-(3-甲基-4-苯乙基苯基胺甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺
將2-胺基-6,6-二甲基-N-(3-甲基-4-苯乙基苯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺8e(419mg，1mmol)和3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲酸3c(381mg，1.30mmol)溶解於8mL二甲基甲醯胺中，加入1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(307mg，1.60mmol)和4-二甲胺基吡啶(196mg，1.60mmol)，攪拌反應12小時。倒入30mL水中，過濾，濾餅烘乾，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物N 1-(6,6-二甲基-3-(3-甲基-4-苯乙基苯基胺甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺8(520mg，黃色固體)，產率：75.1%。
MS m/z(ESI)：693.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 11.68(s,1H),9.54(s,1H),7.93(s,1H),7.86(s,1H),7.64-7.60(m,2H),7.48-7.45(m, 2H),7.31-7.23(m,4H),7.21-7.17(m,1H),7.12(d,1H),3.59-3.42(m,5H),3.32-3.29(m,2H),2.98-2.90(m,3H),2.81-2.76(m,6H),2.55-2.41(m,5H),2.25(s,3 H),2.11(s,2H),1.52(t,2H),1.02(s,6H)
實施例9 N 1-(3-(4-(3-(4-(二(2-羥基乙基)胺甲醯基)苯基)丙基)苯基胺甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺
將4-(3-(4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯 基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸1(250mg，0.35mmol)和2,2’-二乙醇胺(75mg，0.71mmol)，1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(136mg，0.71mmol)，1-羥基苯並三唑(96mg，0.71mmol)和N,N-二異丙基乙胺(92mg，0.71mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，升溫至25℃，攪拌反應12小時。將反應液 倒入20mL冰水中，用二氯甲烷萃取(30mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物N 1-(3-(4-(3-(4-(二(2-羥基乙基)胺甲醯基)苯基)丙基)苯基胺甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺9(120mg，黃色固體)，產率：42.7%。
MS m/z(ESI)：796.3[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 11.60(s,1H),9.65(s,1H),7.92(s,1H),7.85(s,1H),7.62(d,4H),7.31(d,2H),7.25(d,2H),7.18(d,2H),4.78(s,2 H),3.59-3.27(m,14H),2.92(d,3H),2.72(d,4H),2.65-2.57(m,4H),2.54-2.33(m,4 H),2.10(s,2H),1.93-1.85(m,2H),1.81-1.75(m,4H)
實施例10 4-(2-甲基-4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸
第一步 2-甲基-4-硝基苄基膦酸二乙酯
將1-(溴甲基)-2-甲基-4-硝基苯10a(2g，8.69mmol，採用公知的方法文獻“Journal of Physical Chemistry,90(1),168-73；1986”製備而得)和亞磷酸三乙酯(2.04g，12.26mmol)加入瓶中，升溫至160℃，攪拌反應2小時。反應液減壓濃縮，得到粗品標題產物2-甲基-4-硝基苄基膦酸二乙酯10b(2.50g，黑棕色液體)，產物不經純化直接進行下一步。
第二步 4-(2-甲基-4-硝基苯乙烯基)苯甲酸甲酯
將粗品2-甲基-4-硝基苄基膦酸二乙酯10b(2.50g，8.69mmol)溶解於20mL甲醇中，降溫至0℃， 滴加50%甲醇鈉(939mg，17.38mmol)的甲醇溶液，攪拌反應30分鐘，加入10mL 4-甲醯基苯甲酸甲酯(1.44g，8.78mmol)的甲醇溶液，升至室溫，攪拌反應12小時。過濾，濾液減壓濃縮，得到粗品標題產物4-(2-甲基-4-硝基苯乙烯基)苯甲酸甲酯10c(1.83g，黃色固體)，產物不經純化直接進行下一步。
第三步 4-(2-甲基-4-胺基苯乙基)苯甲酸甲酯
將粗品4-(2-甲基-4-硝基苯乙烯基)苯甲酸甲酯10c(1.83g，6.16mmol)溶解於100.5mL甲醇和水(V：V=100：0.5)混合溶劑中，加入鈀/碳(366mg，10%)，置換氫氣三次，攪拌反應24小時。過濾，濾液減壓濃縮，得到粗品標題產物4-(2-甲基-4-胺基苯乙基)苯甲酸甲酯10d(1.41g，黃色固體)，產物不經純化直接進行下一步。
MS m/z(ESI)：270.2[M+1]
第四步 4-(4-(2-氰基乙醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯
將粗品4-(2-甲基-4-胺基苯乙基)苯甲酸甲酯10d(1.41g，5.25mmol)和氰基乙酸(670mg，7.87mmol)溶解於20mL二甲基甲醯胺中，降溫至0℃，加入1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1.51g，7.87mmol)，升至室溫，攪拌反應40分鐘。將反應液倒入100mL冰水中，攪拌30分鐘，過濾，濾餅烘乾，得到粗品標題產物4-(4-(2-氰基乙醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯10e(1.71 g，灰白色固體)，產物不經純化直接進行下一步。
MS m/z(ESI)：335.1[M-1]
第五步 4-(4-(2-氰基-2-亞環己基乙醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯
將粗品4-(4-(2-氰基乙醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯10e(1.69g，5.25mmol)和環己酮(1.50g，15.23mmol)溶解於26mL甲苯中，加入嗎啉(467mg，5.36mmol)，升溫至120℃，攪拌反應4小時。反應液減壓濃縮，用石油醚和乙酸乙酯打漿純化所得殘餘物，得到標題產物4-(4-(2-氰基-2-亞環己基乙醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯10f(2.01g，淺棕色固體)，產率：91.4%。
MS m/z(ESI)：415.2[M-1]
第六步 4-(4-(2-胺基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯
將4-(4-(2-氰基-2-亞環己基乙醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯10f(2g，4.80mmol)和硫(161mg，5.04mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，加入嗎啉(439mg，5.04mmol)，升溫至50℃，攪拌反應1小時。加入50mL水，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用異丙醇打漿純化所得殘餘物，得到標題產物4-(4-(2-胺基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲 酸甲酯10g(1.53g，黃色固體)，產率：71.2%。
MS m/z(ESI)：449.3[M+1]
第七步 4-(2-甲基-4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯
將4-(4-(2-胺基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯10g(307mg，0.68mmol)和3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲酸3c(300mg，1.03mmol)，1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(197mg，1.03mmol)和4-二甲胺基吡啶(125mg，1.03mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，升溫至30℃，攪拌反應12小時。加入30mL水，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物4-(2-甲基-4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯10h(387mg，淡黃色固體)，產率：78.3%。
MS m/z(ESI)：723.5[M+1]
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.04-8.12(m,2H),7.97(d,2H),7.65(s,1H),7.55-7.61(m,1H),7.31-7.38(m,2H),7.25(d,2H),7.11(d,1H),3.92(s,3H),3.86(s,3H),3.61(s,2H),3.30-3.52(s,1H),3.09(m,4H),2.85-2.97(m,7H),2.72-2.83 (m,3H),2.48-2.61(s,1H),2.31(s,3H),2.29-2.21(s,1H),1.87-2.00(m,4H),1.74-1.60(s,1H)
第八步 4-(2-甲基-4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸
將4-(2-甲基-4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸甲酯10h(250mg，0.35mmol)溶解於10mL甲醇中，加入1mL 2M氫氧化鈉溶液，攪拌反應12小時。反應液減壓濃縮，滴加1M鹽酸至水相pH為4至5，用二氯甲烷萃取(30mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到標題產物4-(2-甲基-4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸10(233mg，淡黃色固體)，產率：95.1%。
MS m/z(ESI)：709.4[M+1]
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.93-8.13(m,4H),7.73(d,1 H),7.62-7.69(m,1H),7.54-7.61(m,1H),7.36(d,1H),7.14-7.23(m,2H),6.89(d,1H),3.89-4.08(m,4H),3.56-3.78(m,1H),3.11(s,6H),2.84-2.98(m,6H),2.76(s,2H),2.34-2.60(m,1H),2.21-2.33(m,3H),1.92(s,4H),1.22-1.30(m,3H)
實施例11 N 1-(3-(4-(4-(二(2-羥基乙基)胺甲醯基)苯基乙基)-3-甲基苯基胺甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺
將4-(2-甲基-4-(2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺 甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯乙基)苯甲酸10(120mg，0.17mmol)和2,2’-二乙醇胺(36mg，0.34mmol)，1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(65mg，0.34mmol)，1-羥基苯並三唑(46mg，0.34mmol)和N,N-二異丙基乙胺(66mg，0.51mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，升溫至30℃，攪拌反應12小時。將反應液倒入30mL冰水中，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A 純化所得殘餘物，得到標題產物N 1-(3-(4-(4-(二(2-羥基乙基)胺甲醯基)苯基乙基)-3-甲基苯基胺甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺11(50mg，淡黃色固體)，產率：37.0%。
MS m/z(ESI)：796.3[M+1]
1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.05-8.12(m,2H),7.77(d,1H),7.68(t,1H),7.34-7.42(m,4H),7.24(d,2H),7.06(d,1H),4.07(s,2H),3.95(s,2H),3.83(d,4H),3.65-3.75(m,4H),3.58-3.64(m,2H),3.51(d,4H),3.25(s,1H),3.04-3.17(m,4H),2.92(s,4H),2.87(s,2H),2.75(s,2H),2.27(s,3H),1.89(d,4H)
實施例12 N 1-甲基-N 1-(2-嗎啉乙基)-N 3-(3-(4-(3-苯丙基)苯基胺甲醯基)-5,7-二氫-4H-噻吩並[2,3-c]吡喃-2-基)間苯二甲醯胺
第一步 2-氰基-N-(4-苯丙基苯基)乙醯胺
將4-苯丙基苯胺12a(10.30g，48.74mmol，採用公知的方法文獻“Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters,19(3),654-657；2009”製備而得)溶解於100mL二甲基甲醯胺中，加入2-氰基乙酸(6.22g，73.12mmol)和1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(14g，73.12mmol)，攪拌反應12小時。倒入300mL冰水中，攪拌30分鐘，固體析出，過濾，濾餅烘乾，得到粗品標題產物2-氰基-N-(4-苯丙基苯基)乙醯胺12b(12.2g，灰色固體)，產物不經純化直接進行下一步。
MS m/z(ESI)：277.2[M-1]
第二步 2-胺基-N-(4-(3-苯丙基)苯基)-3-胺甲醯基-5,7-二氫-4H-噻吩並[2,3-c]吡喃
將粗品2-氰基-N-(4-苯丙基苯基)乙醯胺 12b(279mg，1mmol)，二氫-2H-吡喃-4(3H)-酮(106mg，1.05mmol)，嗎啉(92mg，1.05mmol)和硫(50mg，1.50mmol)溶解於15mL乙醇中，升溫至90℃，攪拌反應12小時。反應液減壓濃縮，用乙酸乙酯和石油醚打漿純化所得殘餘物，得到標題產物2-胺基-N-(4-(3-苯丙基)苯基)-3-胺甲醯基-5,7-二氫-4H-噻吩並[2,3-c]吡喃12c(1.13g，黃色油狀物)，產率：87.9%。
MS m/z(ESI)：393.2[M+1]
第三步 N 1-甲基-N 1-(2-嗎啉乙基)-N 3-(3-(4-(3-苯丙基)苯基胺甲醯基)-5,7-二氫-4H-噻吩並[2,3-c]吡喃-2-基)間苯二甲醯胺
將2-胺基-N-(4-(3-苯丙基)苯基)-3-胺甲醯基-5,7-二氫-4H-噻吩並[2,3-c]吡喃12c(255mg，0.65mmol)和3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲酸3c(246mg，0.84mmol)，1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(200mg，1.04mmol)和4-二甲胺基吡啶(128mg，1.04mmol)溶解於10mL二甲基甲醯胺中，攪拌反應12小時。倒入30mL冰水中，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物N 1-甲基-N 1-(2-嗎啉乙基)-N 3-(3-(4-(3-苯丙基)苯基胺甲醯基)-5,7-二氫-4H-噻吩並[2,3-c]吡喃-2-基)間苯二甲醯胺12(235mg，黃色固體)，產率：54.2%。
MS m/z(ESI)：667.2[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 11.73(s,1H),9.67(s,1H),7.94(s,1H),7.87(s,1H),7.62(d,4H),7.29(t,2H),7.21-7.16(m,5H),4.72(s,2 H),3.88(t,2H),3.56-3.27(m,6H),2.97-2.88(m,5H),2.67-2.33(m,8H),2.10(s,2H),1.91-1.84(m,2H)
實施例13 N 1-甲基-N 1-(2-嗎啉乙基)-N 3-(3-(4-苯丙基苯基胺基甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)間苯二甲醯胺
第一步 2-氰基-2-亞環己基-N-(4-苯丙基苯基)乙醯胺
將粗品2-氰基-N-(4-苯丙基苯基)乙醯胺 12b(1g，3.59mmol)和環己酮(1.02g，10.41mmol)溶解於20mL甲苯中，加入嗎啉(319mg，3.66mmol)，升溫至130℃，攪拌反應2小時。反應液減壓濃縮，用乙酸乙酯和石油醚打漿純化所得殘餘物，得到標題產物2-氰基-2-亞環己基-N-(4-苯丙基苯基)乙醯胺13a(1.13g，黃色油狀物)，產率：87.9%。
MS m/z(ESI)：357.2[M+1]
第二步 2-胺基-N-(4-苯丙基苯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺
將2-氰基-2-亞環己基-N-(4-苯丙基苯基)乙醯胺13a(1.13g，3.16mmol)和硫(106mg，3.32mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，加入嗎啉(289mg，3.32mmol)，升溫至50℃，攪拌反應1小時。加入50mL水，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用異丙醇打漿純化所得殘餘物，得到標題產物2-胺基-N-(4-苯丙基苯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺13b(1.12g，黃色固體)，產率：90.3%。
MS m/z(ESI)：391.2[M+1]
第三步 N 1-甲基-N 1-(2-嗎啉乙基)-N 3-(3-(4-苯丙基)苯基胺甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)間苯二甲醯胺
將2-胺基-N-(4-苯丙基苯基)-4,5,6,7-四氫苯 並[b]噻吩-3-甲醯胺13b(1.12g，2.87mmol)和3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲酸3c(1.25g，4.28mmol)，1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(821mg，4.28mmol)和4-二甲胺基吡啶(523mg，4.28mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，升溫至30℃，攪拌反應12小時。加入30mL水，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物N 1-甲基-N 1-(2-嗎啉乙基)-N 3-(3-(4-苯丙基)苯基胺甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)間苯二甲醯胺13(1.05g，淡黃色固體)，產率：40.2%。
MS m/z(ESI)：665.3[M+1]
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.03-8.12(m,2H),7.63-7.72(m,2H),7.53-7.60(m,1H),7.49(d,2H),7.28-7.34(m,2H),7.15-7.23(m,3H),3.75(s,3H),3.60(s,2H),3.29-3.48(m,1H),3.02-3.16(m,3H),2.87-2.94(m,2H),2.77(t,2H),2.62-2.71(m,5H),2.38-2.62(m,3H),2.26(s,2H),1.86-2.02(m,6H)
實施例14 2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-3-(4-(3-苯丙基)苯基胺甲醯基)-4,5-二氫噻吩並[2,3-c]吡啶-6(7H)-甲酸第三丁酯
第一步 2-胺基-3-(4-(3-苯丙基)苯基胺甲醯基)-4,5-二氫噻吩並[2,3-c]吡啶-6(7H)-甲酸第三丁酯
將粗品2-氰基-N-(4-苯丙基苯基)乙醯胺12b(900mg，3.23mmol)，4-羰基哌啶-1-甲酸第三丁酯(677mg，3.40mmol)，嗎啉(297mg，3.40mmol)和硫(155mg，4.85mmol)溶解於20mL乙醇中，升溫至90℃，攪拌反應12小時。反應液減壓濃縮，用乙酸乙酯和石油醚打漿純化所得殘餘物，得到標題產物2-胺基-3-(4-(3-苯丙基)苯基胺甲醯基)-4,5-二氫噻吩並[2,3-c]吡啶-6(7H)-甲酸第三丁酯14a(1.05g，黃色固體)，產率：66.2%。
MS m/z(ESI)：492.3[M+1]
第二步 2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-3-(4-(3-苯丙基)苯基胺甲醯基)-4,5-二氫噻吩並[2,3-c]吡啶-6(7H)-甲酸第三丁酯
將2-胺基-3-(4-(3-苯丙基)苯基胺甲醯基)- 4,5-二氫噻吩並[2,3-c]吡啶-6(7H)-甲酸第三丁酯14a(1.02g，2.07mmol)和3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲酸3c(789mg，2.70mmol)，1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(635mg，3.31mmol)和4-二甲胺基吡啶(405mg，3.31mmol)溶解於15mL二甲基甲醯胺中，攪拌反應12小時。倒入30mL冰水中，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-3-(4-(3-苯丙基)苯基胺甲醯基)-4,5-二氫噻吩並[2,3-c]吡啶-6(7H)-甲酸第三丁酯14(1.10g，黃色固體)，產率：69.6%。
MS m/z(ESI)：766.4[M+1]
1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 11.67(s,1H),9.70(s,1H),7.94(s,1H),7.86(s,1H),7.63-7.61(m,4H),7.30-7.27(m,2H),7.21-7.16(m,5H),4.55(s,2H),3.59-3.26(m,8H),2.97-2.84(m,5H),2.62-2.38(m,8H),2.10(s,2H),1.89-1.85(m,2H),1.44(s,9H)
實施例15 4-(3-(4-(2-(6-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)吡啶-2-甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯
第一步 6-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)-2-吡啶甲酸
將吡啶-2,6-二甲酸(500mg，3mmol)溶解於20mL二氯甲烷中，加入2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(1.30g，3.60mmol)和N,N-二異丙基乙胺(580mg，4.50mmol)，攪拌10分鐘，加入N-甲基-2-嗎啉乙胺15a(432mg，3mmol，採用公知的方法文獻“Journal of Combinatorial Chemistry,8(6),834-840；2006”製備而得)，攪拌反應4小時。反應液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物6-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)-2-吡啶甲酸15b(375mg，白色固體)，產率：41.7%。
MS m/z(ESI)：294.2[M+1]
第二步 4-(3-(4-(2-(6-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)吡啶醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯
將4-(3-(4-(2-胺基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯1a(450mg，1.06mmol)和6-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)-2-吡啶甲酸15b(375mg，1.27mmol)溶解於10mL二甲基甲醯胺中，加入1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(305mg，1.60mmol)和4-二甲胺基吡啶(195mg，1.60mmol)，升溫至25℃，攪拌反應12小時。加入50mL水，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物4-(3-(4-(2-(6-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)吡啶-2-甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)苯基)丙基)苯甲酸甲酯15(250mg，淡黃色固體)，產率：32.6%。
MS m/z(ESI)：724.4[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 12.29(d,1H),9.62(d,1H),8.30-8.08(m,2H),7.98-7.75(m,3H),7.65(d,2H),7.36(d,2H),7.20(d,2H),3.83(s,3H),3.56-3.52(m,1H),3.51-3.41(m,2H),3.40(t,1H),3.30-3.20(m,2H),3.09-2.98(m,3H),2.85-2.80(m,2H),2.76-2.63(m,4H),2.59(t,2H),2.54-2.48(m,2H),2.44-2.33(m,2H),2.00-1.96(m,2H),1.94-1.86(m, 2H),1.82(d,2H),1.79-1.68(m,2H)
實施例16 N 1-甲基-N 1-(2-嗎啉乙基)-N 3-(3-(4-(2-嗎啉乙基)苯基胺甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)間苯二甲醯胺
第一步 2-氰基-N-(4-(2-嗎啉乙基)苯基)乙醯胺
將4-(2-嗎啉乙基)苯胺16a(450mg，2.18mmol，採用公知的方法文獻“Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters,23(23),6363-6369；2013”製備而得)和氰基乙酸(277mg，3.27mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中， 降溫至0℃，加入1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(625mg，3.27mmol)，升至室溫，攪拌反應2小時。加入30mL水和5mL飽和碳酸氫鈉溶液，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物2-氰基-N-(4-(2-嗎啉乙基)苯基)乙醯胺16b(530mg，白色固體)，產率：88.9%。
MS m/z(ESI)：449.3[M+1]
第二步 2-氰基-2-亞環己基-N-(4-(2-嗎啉乙基)苯基)乙醯胺
將2-氰基-N-(4-(2-嗎啉乙基)苯基)乙醯胺16b(530mg，1.94mmol)溶解於15mL甲苯中，加入環己酮(190mg，1.94mmol)和嗎啉(168mg，1.94mmol)，升溫至130℃，攪拌反應2小時。反應液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物2-氰基-2-亞環己基-N-(4-(2-嗎啉乙基)苯基)乙醯胺16c(462mg，無色油狀物)，產率：67.5%。
MS m/z(ESI)：354.3[M+1]
第三步 2-胺基-N-(4-(2-嗎啉乙基)苯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺
將2-氰基-2-亞環己基-N-(4-(2-嗎啉乙基)苯基)乙醯胺16c(462mg，1.36mmol)和硫(44mg，1.37mmol) 溶解於6mL二甲基甲醯胺中，加入嗎啉(119mg，1.37mmol)，升溫至50℃，攪拌反應45分鐘。加入50mL水，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物2-胺基-N-(4-(2-嗎啉乙基)苯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺16d(300mg，黃色油狀物)，產率：60%。
MS m/z(ESI)：386.3[M+1]
第四步 N 1-甲基-N 1-(2-嗎啉乙基)-N 3-(3-(4-(2-嗎啉乙基)苯基胺甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)間苯二甲醯胺
將2-胺基-N-(4-(2-嗎啉乙基)苯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺16d(160mg，0.38mmol)溶解於6mL二甲基甲醯胺中，加入3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲酸3c(219mg，0.75mmol)，1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(146mg，0.76mmol)和4-二甲胺基吡啶(72mg，0.57mmol)，升溫至25℃，攪拌反應12小時。加入30mL水，用二氯甲烷萃取(30mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物N 1-甲基-N 1-(2-嗎啉乙基)-N 3-(3-(4-(2-嗎啉乙基)苯基胺甲醯基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)間苯二甲醯胺16(82mg，淡黃色固體)，產率：33.6%。
MS m/z(ESI)：674.2[M-1]
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.07(s,2H),7.73(s,2H),7.53(d,2H),7.30(s.,2H),4.10-4.02(m,4H),3.85-3.80(m,4H),3.65-3.50(m,2H),3.40-3.35(m,1H),3.20-3.10(m,6H),3.04-2.95(m,8H),2.78-2.70(m,3H),2.55-2.45(m,1H),2.35-2.25(m,2H),2.00-1.93(m,4H)
實施例17 N 1-(3-(4-(4-(1,3-二羥基-2-(羥甲基)丙烷-2-基胺甲醯基)苯乙基)-3-甲基苯基胺甲醯基)-6,6-二甲基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺
第一步 4-(4-(2-氰基-2-(4,4-二甲基亞環己基)乙醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯
將粗品4-(4-(2-氰基乙醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯10e(2g，6mmol)溶解於30mL甲苯中，加入4,4-二甲基環己酮(2.16g，17.20mmol)和嗎啉(522mg，6mmol)，升溫至140℃，攪拌反應3小時。反應液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系B純化所得殘餘物，得到標題產物4-(4-(2-氰基-2-(4,4-二甲基亞環己基)乙醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯17a(2.56g，淺黃色油狀物)，產率：95.9%。 MS m/z(ESI)：443.3[M-1]
第二步 4-(4-(2-胺基-6,6-二甲基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯
將4-(4-(2-氰基-2-(4,4-二甲基亞環己基)乙醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯17a(2.56g，5.76mmol)溶解於10mL二甲基甲醯胺中，加入硫(184mg，5.79mmol)和嗎啉(501mg，5.76mmol)，升溫至50℃，攪拌反應2小時。加入50mL水，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系B純化所得殘餘物，得到標題產物4-(4-(2-胺基-6,6-二甲基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯17b(2.30g，黃色固體)，產率：83.9%。
MS m/z(ESI)：475.2[M-1]
第三步 4-(4-(6,6-二甲基-2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯
將4-(4-(2-胺基-6,6-二甲基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯17b(2.36g，4.83mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，加入3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲酸3c(1.80g，6.25mmol)，1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1.38g，7.24mmol) 和4-二甲胺基吡啶(883mg，7.24mmol)，攪拌反應12小時。加入30mL水，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物4-(4-(6,6-二甲基-2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯17c(2.60g，黃色固體)，產率：72.2%。
MS m/z(ESI)：751.5[M+1]
第四步 4-(4-(6,6-二甲基-2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸
將4-(4-(6,6-二甲基-2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸甲酯17c(2.65g，3.46mmol)溶解於44mL四氫呋喃和甲醇(V：V=3：1)混合溶劑中，加入10mL 2M氫氧化鈉溶液，攪拌反應12小時。加入30mL水，反應液減壓濃縮，滴加1M鹽酸至水相pH為6，用二氯甲烷萃取(30mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到粗品標題產物4-(4-(6,6-二甲基-2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸17d(1.69g，黃色固體)，產率：66.5%。
MS m/z(ESI)：737.5[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 11.66(s,1H),9.55(s,1H),7.95-7.92(m,1H),7.87-7.85(m,3H),7.63-7.62(m,2H),7.48-7.45(m,2H),7.37-7.35(d,2H),7.12-7.10(d,1H),3.60-3.57(m,3H),3.42-3.30(m,5H),2.99-2.97(m,2H),2.91-2.87(m,5H),2.76-2.73(m,2H),2.54-2.41(m,4H),2.25(s,3H),2.11(m,2H),1.53-1.50(t,2H),1.02(s,6H)
第五步 N 1-(3-(4-(4-(1,3-二羥基-2-(羥甲基)丙烷-2-基胺甲醯基)苯乙基)-3-甲基苯基胺甲醯基)-6,6-二甲基-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺
將粗品4-(4-(6,6-二甲基-2-(3-(甲基(2-嗎啉乙基)胺甲醯基)苯甲醯胺基)-4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-3-甲醯胺基)-2-甲基苯乙基)苯甲酸17d(850mg，1.15mmol)溶解於5mL二甲基甲醯胺中，加入2-胺基-2-(羥甲基)丙烷-1,3-二醇(278mg，2.30mmol)，1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(439mg，2.30mmol)，1-羥基苯並三唑(310mg，2.30mmol)和N,N-二異丙基乙胺(445mg，3.50mmol)，攪拌反應12小時。加入50mL水和20mL飽和碳酸氫鈉溶液，用二氯甲烷萃取(50mL×3)，合併有機相，用飽和氯化鈉溶液洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用矽膠管柱色譜法以洗脫劑體系A純化所得殘餘物，得到標題產物N 1-(3-(4-(4-(1,3-二羥基-2-(羥甲基)丙烷-2-基胺甲醯基)苯乙基)-3-甲基苯基胺甲醯基)-6,6-二甲基 -4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩-2-基)-N 3-甲基-N 3-(2-嗎啉乙基)間苯二甲醯胺17(600mg，黃色固體)，產率：62.1%。
MS m/z(ESI)：841.8[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ 11.65(s,1H),9.53(s,1H),7.91-7.90(d,1H),7.84(s,1H),7.73-7.71(d,2H),7.65-7.70(m,2H),7.47-7.43(m,2H),7.32-7.30(d,2H),7.23(s,1H),7.11-7.08(d,1H),4.79-4.76(t,3H),3.68-3.66(d,6H),3.58-3.52(m,3H),3.45-3.35(m,2H),3.30-3.25(m,4H),2.96-2.80(m,6H),2.75-2.65(m,2H),2.50-2.30(m,4H),2.25(s,3H),2.20-2.00(m,2H),1.53-1.50(t,2H),1.01(s,6H).
測試例： 生物學評價
測試例1、本發明化合物對人源Npt2b/HEK293細胞轉運無機磷的抑制作用。
以下方法用來測定本發明中化合物對人源Npt2b/HEK293細胞轉運無機磷的抑制作用。
一、實驗材料及儀器
1、閃爍發光計數儀(PerkinElmer #1450)
2、BD BioCoatTM Poly-D-Lysine 48-孔板(BD，#356509)
3、Npt2b質粒(廣州複能# NM_006424)
4、磷-32放射性核素(Phosphorus-32 Radionuclide), 1mCi(37MBq)(H3 32PO4)(PerkinElmer,# NEX053001MC)
5、Optiphase Supermix(PerkinElmer #1200-439 for 5L)
二、實驗步驟
1、獲取人源Npt2b/HEK293細胞
將Npt2b質粒按一定比例與LipofectamineTM LTX(Invitrogen #15338-100)混合，放置30分鐘後，將上述混合物滴加到對數期生長的HEK293細胞(中科院細胞庫#GNHu43)中，邊加邊混；24小時後，換成含G418的培養基(Enzo #ALX-380-013-G005)培養至細胞將近長滿，鋪板挑選單純株細胞，驗證其功能，獲得單純株穩定細胞株。
2、化合物對人源Npt2b/HEK293細胞轉運無機磷的抑制作用實驗
提前一天將穩定細胞株人源Npt2b/HEK293細胞種於48孔板中，37℃二氧化碳培養箱中培養。棄去培養基，用膽鹼攝取緩衝液(Choline uptake buffer)洗滌細胞一次(250μL/孔)。取10μL H3 32PO4稀釋在1000ml鈉攝取緩衝液(Sodium uptake buffer)中。每孔加入80μL測試化合物和20μL稀釋後的H3 32PO4，於室溫下孵育約20分鐘。最終的化合物濃度為：100μM,10μM,1μM,0.1μM,0.01μM,0.001μM，最終的DMSO濃度為：0.5%，最終的H3 32PO4濃度為：0.2uCi/孔；棄去上述化合物和H3 32PO4，然後用冰冷的終止液(Ice cold stop solution)洗滌細胞兩次(350μL/孔)。 然後每孔加入150μL 200mM NaOH，室溫下振板器震盪裂解約5分鐘。每孔轉移120μL細胞裂解物於96-孔樣品板。96-孔樣品板每孔加入100μL Optiphase Supermix，然後用RE-SEALABLE TAPE封好96-孔樣品板，室溫下振板器上震盪約5分鐘。閃爍發光計數儀讀值。
本發明化合物對人源Npt2b/HEK293細胞轉運無機磷的抑制作用進行測定，測得的IC50值見表1。
結論：本發明中的化合物對人源Npt2b/HEK293細胞轉運無 機磷具有明顯的抑制效果。
測試例2、本發明化合物對鼠源Npt2b/HEK293細胞轉運無機磷的抑制作用。
以下方法用來測定本發明中化合物對鼠源Npt2b/HEK293細胞轉運無機磷的抑制作用。
一、實驗材料及儀器
1、閃爍發光計數儀(PerkinElmer #1450)
2、BD BioCoatTM Poly-D-Lysine 48-孔板(BD，#356509)
3、磷-32放射性核素(Phosphorus-32 Radionuclide),1mCi(37MBq)(H332PO4)(PerkinElmer,# NEX053001MC)
4、Optiphase Supermix(PerkinElmer #1200-439 for 5L)
二、實驗步驟
1、獲取鼠源Npt2b/HEK293細胞
將Npt2b質粒按一定比列與LipofectamineTM LTX混合，放置30分鐘後，將上述混合物滴加到對數期生長的HEK293細胞中，邊加邊混；24小時後，換成含G418的培養基培養至細胞將近長滿，鋪板挑選單純株細胞，驗證其功能，獲得單純株穩定細胞株。
2、化合物對鼠源Npt2b/HEK293細胞轉運無機磷的抑制作用實驗
提前一天將穩定細胞株鼠源Npt2b/HEK293細胞種於48孔板中，37℃二氧化碳培養箱中培養。棄去培養基，用膽鹼攝取緩衝液(Choline uptake buffer)洗滌細胞一次(250μL/孔)。取10μL H3 32PO4稀釋在1000ml鈉攝取緩衝液(Sodium uptake buffer)中。每孔加入80μL測試化合物和20μL稀釋後的H3 32PO4，於室溫下孵育約20分鐘。最終的化合物濃度為：100μM,10μM,1μM,0.1μM,0.01μM,0.001μM，最終的DMSO濃度為：0.5%，最終的H3 32PO4濃度為：0.2uCi/孔；棄去上述化合物和H3 32PO4，然後用冰冷的終止液(Ice cold stop solution)洗細胞兩次(350μL/孔)。每孔加入150μL 200mM NaOH，室溫下振板器上震盪裂解約5分鐘。每孔轉移120μL細胞裂解物於96-孔樣品板。96-孔樣品板每孔加入100μL Optiphase Supermix，然後用RE-SEALABLE TAPE封好96-孔樣品板，室溫下振板器上震盪約5分鐘。閃爍發光計數儀讀值。
本發明化合物對鼠源Npt2b/HEK293細胞轉運無機磷的抑制作用進行測定，測得的IC50值見表2。
結論：本發明中的化合物對鼠源Npt2b/HEK293細胞轉運無機磷具有明顯的抑制效果。
測試例3、本發明化合物的藥物代謝動力學測試
1、摘要
以大鼠為受試動物，應用LC/MS/MS法測定了大鼠灌胃給予實施例化合物後不同時刻血漿中的藥物濃度。研究本發明的化合物在大鼠體內的藥物代謝動力學行為，評價其藥動學特徵。
2、試驗方案
2.1試驗藥品
實施例6至9化合物、實施例11、實施例13、實施例14和實施例17。
2.2試驗動物
健康成年SD大鼠32隻，雌雄各半，平均分成8組，每組4隻，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司，動物生產許可證號：SCXK(滬)2008-0016。
2.3藥物配製
稱取適量樣品，加入0.5%CMC-Na至終體積，超聲波製成0.5mg/ml混懸液。
2.4給藥
SD大鼠32隻，雌雄各半，平均分成8組，禁食一夜後分別灌胃給藥，劑量為5.0mg/kg，給藥體積10mL/kg。
3、操作
於給藥前及給藥後0.5、1、2、4、6、8、11、24小時採血0.1mL，置於EDTA抗凝試管中，3500rpm離心5分鐘，分離血漿，於-20℃保存。給藥後2小時進食。
用LC/MS/MS法測定不同化合物灌胃給藥後大鼠血漿中的待測化合物含量。分析方法的線性範圍分別為5.00-2000ng/mL和1.00-500ng/mL，定量下限分別為5.00ng/mL和1.00ng/mL；血漿樣品經沉澱蛋白預處理後進行 分析。
4、藥物代謝動力學參數結果
本發明化合物的藥物代謝動力學參數見表3：
結論：本發明化合物的藥物代謝動力學特徵是其在血漿中的濃度較低，在血藥中的吸收少。
測試例4、本發明化合物大鼠糞回收率測試
1、摘要
以大鼠為受試動物，應用LC/MS/MS法測定了大鼠灌胃給予本發明較佳實施例化合物後不同時刻血漿中的藥物濃度。研究本發明的化合物在大鼠體內的藥物代謝動力學行為，評價其糞回收率。
2、試驗方案
2.1試驗藥品
實施例6、7和17化合物。
2.2試驗動物
健康成年SD大鼠12隻，雌雄各半，平均分成3組，每組4隻，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司，動物生產許可證號：SCXK(滬)2008-0016。
2.3藥物配製
稱取適量樣品，加入0.5%CMC-Na至終體積，超聲波製成2.0mg/ml混懸液。
2.4給藥
SD大鼠12隻，雌雄各半，平均分成3組，放入代謝籠中，自由攝食和飲水，同時收集空白糞樣，給藥前禁食一夜。動物分別灌胃給藥，禁食一夜後分別灌胃給藥，劑量為20.0mg/kg，給藥體積10mL/kg。
3、操作
於給藥後0至8小時，8至24小時，24至48小時，48至72小時分段收集糞樣，並分別稱重。記錄後，貼好標籤，20℃凍保存。血漿樣品分別於給藥前及給藥後1、2、4和8小時由眼眶採血0.2mL，置於肝素化試管中，3500rpm離心10分鐘後分離血漿，於-20℃保存；給藥後3小時進食。
4、累積糞便排泄率結果
本發明化合物的累積糞便排泄率見表4：
結論：灌胃給予20mg/kg的本發明化合物後，尿液和血液 中的暴露程度較低，藥物原型和代謝物的糞便回收率高，發現在消化系統的胃、結腸、空腸、十二指腸等組織相對含量較高，其中結腸和空腸是藥物的主要作用部位。
測試例5、本發明化合物治療大鼠高磷血症測試
1、摘要
以大鼠為受試動物，評價本發明的化合物的降血磷藥效
2、試驗方案
2.1試驗藥品
實施例5，6，7化合物和實施例11化合物。
低磷飼料(含0.1%磷和0.6%鈣)：由上海斯萊克實驗動物有限公司提供。
磷酸二氫鈉(NaH2PO4．H2O)：批號為201209I06，購自湖南九典制藥有限公司。臨用前配製成1mmol/ml(138mg/ml，5ml/kg)。
羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)：批號為F20090508，國藥集團化學試劑有限公司。
血磷檢測試劑盒：批號20130905，由南京建成生物公司提供。
2.2試驗動物
健康成年SD大鼠60隻，雌雄各半，平均分成6組， 每組10隻，購自上海西普爾-必凱實驗動物有限公司，動物生產許可證號：SCXK(滬)2013-0016。
3、操作
實驗方法按照專利申請(WO2012006473)中方法進行。動物購進後用普通飼料適應性餵養(至少3天)，再轉為低磷飼料餵養，對大鼠進行血清血磷篩選，
將血磷低於2.3mmol/L的大鼠按照血磷高低隨機分組，於實驗第2天灌胃磷酸二氫鈉(1mmol/1mL)建立大鼠高磷血症模型。按照入組的大鼠血磷值隨機分為6組，空白對照組給予相同容積的蒸餾水。各治療組大鼠分別於造模前15分鐘給予單次灌胃給藥(5mL/kg，30mg/kg)，模型組給予相應的0.5%CMC。造模後分別於0小時(空白血清)、0.5小時和2小時後對大鼠進行眼眶採血檢測血清血磷值。
4、降血磷值結果
本發明化合物的降血磷的效果見表5：
結論：大鼠在口服灌胃30mg/kg劑量的本發明的較佳化合 物後，在給予磷鹽0.5小時後有明顯的降血磷作用。
測試例6、Npt2b抑制劑化合物7和碳酸司維拉姆飼料餵養大鼠其磷代謝實驗報告
1.實驗目的
本實驗藉由在飼料中摻入司維拉姆(即碳酸司維拉姆，上海瀚鴻化工科技有限公司，Cat#：B12264)或Npt2b抑制劑實施例化合物7餵食大鼠，檢測大鼠尿液中無機磷含量，來評價受試藥的促磷排泄作用。
2．實驗方法和實驗材料
2.1．實驗動物、飼料和飼養條件
實驗用SD雄性大鼠，購自上海必凱實驗動物有限公司(中國上海，合格證編號2008001644738，許可證SCXK(滬)2013-0016)。動物購進後，進行3天適應性飼養後，開始普通飼料和巧克力飼料兩輪代謝籠篩選(以15g/飼料只/天吃完為標準)，成功入選的大鼠再開始實驗。
普通飼料(0.6%P，0.6%Ca)由必凱提供，巧克力飼料(巧克力含量為3%，0.6%P，0.6%Ca)由斯萊克公司加工合成，藥物飼料是在巧克力飼料中混入藥物(由藥化部應永城提供)加工而成，具體配製如下：每克飼料混入1.3mg受試化合物，達到平均劑量為100mg/kg/day；司維拉姆每克飼料混入9.75mg受試化合物，達到平均劑量為750mg/kg/day。
2.2．實驗試劑
磷檢測試劑盒：批號20140808，由南京建成生物公司提供。
2.3．實驗設計和實驗方法
2.3.1.動物分組：大鼠適應性飼養和篩選後，分組如下：
給藥方式：代謝籠自由進食飼料
2.3.2.實驗方法：實驗方法按照專利(WO2012006473)中方法進行。將大鼠先經過正常飼料(15g/天)篩選，將飼料全部吃完的大鼠再進行巧克力飼料(15g/天)篩選，最後將飼料全部吃完的大鼠分組進入實驗，隨機分組如下(劑量是mg/kg/day)：①正常空白組，②司維拉姆-750mg/kg組，③化合物7-100mg/kg組，④化合物7-100mg/kg聯合司維拉姆-200mg/kg組。每組大鼠4-5隻。兩輪篩選成功的大鼠於代謝籠中開始餵養上述藥物飼料，共4天，觀察每日體重情況、飼料消耗情況，並分別收集24-48h、48-72h和72-96h尿液，檢測尿液 中無機磷的含量。
3．結果與討論：碳酸司維拉姆和化合物7對大鼠尿磷排泄的影響
正常空白組其尿磷含量在24-48h、48-72h和72-96h三天均為25-26mg，與正常空白組比較，給藥組的3天尿磷總量或3天平均量均明顯降低(P<0.05)，司維拉姆-750mg/kg組、化合物7-100mg/kg組、化合物7-100mg/kg+司維拉姆-200mg/kg組其降低幅度均分別為30.2%、27.9%和44.2%，見表6，圖1，比率為降低幅度。
結果證明，750mg/kg司維拉姆、100mg/kg 化合物7和兩者聯用有明顯的促磷排泄作用，單用司維拉姆和化合物7藥效相當，且750mg/kg司維拉姆+200mg/kg化合物7聯用後其尿磷降低幅度要高於兩者單用。

Claims (24)

  1. 一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽： 其中：X選自C(Ra)2、O、S或NRa；Y選自-C(O)-或-NRbC(O)-；Ra相同或不同，各自獨立地選自氫原子、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-C(O)R5、-C(O)NR6R7或-S(O)pR5，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；Rb選自氫原子或烷基，其中該烷基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基或硝基的取代基所取代； 環A選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基；環B選自芳基或雜芳基；環C選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R1選自烷基，其中該烷基進一步被一個或多個選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基的取代基所取代，其中該環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R2選自氫原子、鹵素、烷氧基、氰基、硝基或烷基，其中該烷基或烷氧基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R3選自氫原子、鹵素、烷氧基、氰基、硝基或烷 基，其中該烷基或烷氧基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R4選自氫原子或烷基，其中該烷基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R5選自氫原子、烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該烷基、環烷基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自烷基、鹵素、羥基、羥烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；R6或R7各自獨立地選自氫原子、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自烷基、鹵素、羥基、羥烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；或者，R6或R7與相連接的氮原子一起形成雜環基，其中該雜環基內含有一個或多個N、O或S(O)p雜原子，並且該雜環基視需要進一步被一個或多個選自烷 基、鹵素、羥基、烷氧基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；m為0、1、2、3或4；n為0、1、2、3或4；且p為0、1或2。
  2. 如申請專利範圍第1項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其為通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽： 其中：R1至R4、X、Y、m、n、環A和環C的定義如申請專利範圍第1項中所述。
  3. 如申請專利範圍第1或2項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中環A選自雜環基或芳基。
  4. 如申請專利範圍第3項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中環A為苯基或嗎啉基。
  5. 如申請專利範圍第1項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其為通式(III)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽： 其中：R1至R4、X、Y、m、n和環C的定義如申請專利範圍第1項中所述。
  6. 如申請專利範圍第1至5項中任意一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中環C為雜環基嗎啉哌。
  7. 如申請專利範圍第6項所述的通式(I)所示的化合物或 其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中環C為嗎啉基或哌嗪基。
  8. 如申請專利範圍第1至7項中任意一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中R1選自-(CH2)r-Rc；Rc選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；r選自1、2、3、4或5；且R5、R6、R7、p的定義如申請專利範圍第1項中所述。
  9. 如申請專利範圍第8項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中r為2或3。
  10. 如申請專利範圍第1至9項中任意一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中該化合物選自：
  11. 一種製備申請專利範圍第1項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽 的方法，該方法包括： 通式(IA)化合物或其鹽與通式(IB)化合物反應，視需要進一步水解和/或縮合得到通式(I)化合物；其中：Z選自羥基或鹵素；R1至R4、X、Y、m、n、環A、環B和環C的定義如申請專利範圍第1項中所述。
  12. 一種通式(IA)所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用的鹽， 其中：X選自C(Ra)2、O、S或NRa；Ra相同或不同，各自獨立地選自氫原子、烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-C(O)R5、-C(O)NR6R7或-S(O)pR5，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥 基、烷氧基、氰基、硝基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；條件是當X選自C(Ra)2時，Ra不選自氫原子；環A選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，優選為苯基；R1選自烷基，其中該烷基進一步被一個或多個選自環烷基、雜環基、芳基或雜芳基的取代基所取代，其中所述的環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R2選自氫原子、鹵素、烷氧基、氰基、硝基或烷基，其中該烷基或烷氧基視需要進一步被一個或多個選自鹵素、羥基、烷氧基、氰基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)OR5、-OC(O)R5、-NHS(O)pR5、-C(O)R5、-NHC(O)R5、-NHC(O)OR5、-NR6R7、-OC(O)NR6R7或-C(O)NR6R7的取代基所取代；R5選自氫原子、烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該烷基、環烷基、芳基或雜芳基視需要進一步被一個或多個選自烷基、鹵素、羥基、羥烷基、烷 氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；R6或R7各自獨立地選自氫原子、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基各自獨立地視需要進一步被一個或多個選自烷基、鹵素、羥基、羥烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；或者，R6或R7與相連接的氮原子一起形成雜環基，其中該雜環基內含有一個或多個N、O或S(O)p雜原子，並且該雜環基視需要進一步被一個或多個選自烷基、鹵素、羥基、烷氧基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、羧酸或羧酸酯的取代基所取代；m為0、1、2、3或4；且p為0、1或2。
  13. 如申請專利範圍第12項所述的通式(IA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽，其中該化合物選自：
  14. 一種醫藥組成物，該醫藥組成物含有治療有效量的如申請專利範圍第1至10項中任意一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用的鹽以及藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
  15. 如申請專利範圍第14項所述的醫藥組成物，其進一步含有另外一種或多種磷結合劑。
  16. 如申請專利範圍第15項所述的醫藥組成物，其中該磷結合劑為司維拉姆。
  17. 一種申請專利範圍第1至10項中任意一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的用途，其係用在製備腸2B型磷酸鈉協同轉運蛋白(Npt2b)抑制劑。
  18. 一種申請專利範圍第14或15項所述的醫藥組成物的用途，其係用在製備腸2B型磷酸鈉協同轉運蛋白(Npt2b)抑制劑。
  19. 一種申請專利範圍第1至10項中任意一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或 其可藥用的鹽的用途，其係用在製備治療或預防高磷血症的藥物。
  20. 一種申請專利範圍第14或15項所述的醫藥組成物的用途，其係用在製備治療或預防高磷血症的藥物。
  21. 一種申請專利範圍第1至10項中任意一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用鹽的用途，其係用在製備治療或預防磷酸鈉轉運蛋白介導的疾病的藥物。
  22. 一種申請專利範圍第14或15項所述的醫藥組成物的用途，其係用在製備治療或預防磷酸鈉轉運蛋白介導的疾病的藥物。
  23. 如申請專利範圍第21或22項所述的用途，其中該疾病選自腎病、內膜局部血管的鈣化、高磷血症引起的高濃度的活性維生素D、甲狀腺功能亢進症。
  24. 如申請專利範圍地23項所述的用途，其中該腎病為慢性的腎病或終末期腎病。
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