TW201619372A

TW201619372A - 培養基的複製方法

Info

Publication number: TW201619372A
Application number: TW103140885A
Authority: TW
Inventors: 黃俊文
Original assignee: 黃俊文
Priority date: 2014-11-25
Filing date: 2014-11-25
Publication date: 2016-06-01
Also published as: TWI655284B

Abstract

本發明係有關於一種培養基的複製方法，其步驟包含︰預先混合培養基原液並抽取部份原液至新桶；於新桶內加入糖蜜及水後拌勻；於馬鈴薯瘡痂病菌、乾酪乳酸菌、木質醋酸菌、釀酒酵母、枯草桿菌及雙歧桿菌菌種中，取其中五菌種分別倒入玻璃瓶再加入水後均勻搖晃，直至產生氣泡為止；將上述五菌種由各玻璃瓶內取出部分置入一容器，且均勻搖晃直至產生氣泡為止，並於靜置適當時間後倒入該新桶；將具特定需求功能之菌種倒入該新桶，並拌勻、曝氣以完成新桶培養基；再次將具特定需求功能之菌種倒入該新桶培養基，並拌勻、曝氣以完成酵素成品。

Description

培養基的複製方法

本發明係關於一種酵素培養基，尤指能縮短培養時間並產出培養基及酵素成品之培養基複製方法者。

按，酵素係益生菌作用將食物分解為氨基酸、維生素及礦物質…等易吸收之小分子物質，且能消化食物、修復組織，催動細胞使其正常運作，為具有特殊生物活性並係維持生命活動之必要物質，同時也是生物進行化學反應與新陳代謝之催化劑。當酵素於人體內進行化學變化時會不斷損耗，因此，除了透過肝臟、胰臟自行分泌外，亦需藉由日常食物中攝取及補充。

目前，於科技的進步下，酵素已能透過培養方式進行量產，以利用酵素產品中之益菌群對人體發揮效用。此外，酵素除使用於食品外，目前亦廣泛應用於洗衣精、洗碗精、牙膏…等洗淨或除臭產品上，而能藉微生物降解以達成去污及除臭的效果，且能取代具化學成份之洗淨產品，提升環保效益。

而酵素產出方式雖能透過水果與蔬菜自然發酵，然而，自然發酵耗時長，且容易因感染雜菌而造成酵素變質或功效特徵不明顯…等情況，因此，產出率不高且穩定性不佳。

另外，透過培養方式可針對不同功能及訴求進行培養，其係藉固態或液態培養基以提供菌種所需之營養物質，待菌種發酵後生長出菌株，並依不同菌種使酵素具有不同功效。然而，酵素培養過程中仍可能受到設備、環境及培養方式影響，因此，如何培養、操作使微生物適當發酵，係為酵素製造與產出之重要關鍵。

有鑑於自然發酵耗時長，且易因感染雜菌而造成時間與成本的浪費。

因此，本發明之目的乃是透過一複製方法來產出培養基及酵素成品，而能有效縮短再次培養的時間並簡化製程。

為達前揭目的，本發明提供一種培養基的複製方法，該方法包含下述(a)~(g)步驟︰ (a) 預先混合培養基原液； (b) 抽取部份該原液至新桶，並使該原液佔該新桶總重量50%； (c) 於該新桶內加入佔總重量10~30%之糖蜜及20~40%之水後均勻攪拌； (d) 於馬鈴薯瘡痂病菌（Streptomyces Turgidiscabies）、乾酪乳酸菌（Lactobacillus casei）、木質醋酸菌（Acetobacter xylinum）、釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、枯草桿菌（Bacillus subtilis）及雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum）菌種中，取其中五菌種各40~60ML並分別倒入玻璃瓶再加入400~600ML的水後均勻搖晃，直至產生氣泡為止； (e) 將上述五菌種由各玻璃瓶內取出500ML置入一容器且均勻搖晃直至產生氣泡為止，並靜置適當時間後倒入該新桶； (f) 將100~300ML具特定需求功能之菌種倒入該新桶，並拌勻、曝氣以完成新桶培養基；以及 (g) 再將100~300ML具特定需求功能之菌種倒入該新桶培養基，並拌勻、曝氣以完成酵素成品。

是以，能透過上述步驟來形成新桶培養基，再將新桶培養基一分為二，而能一部分添加特定菌種培養以製成並量產酵素成品，並利用另一部分續行培養基之複製動作，而能不斷複製培養基以製造酵素成品，並藉此簡化製程，節省成本與時間。

為使貴審查委員瞭解本發明欲達成目的所運用之技術、手段及功效，茲舉一較佳實施例並配合圖式，詳細說明如后︰

首先，請參閱第1圖所示，係本發明培養基複製之流程圖，該培養基之複製方法係包含下述步驟︰

Ｓ２１預先混合培養基原液；

Ｓ２２抽取部份該原液至新桶，並使該原液佔該新桶總重量50%；

Ｓ２３於該新桶內加入佔總重量10~30%之糖蜜及20~40%之水後均勻攪拌；

Ｓ２４於馬鈴薯瘡痂病菌（Streptomyces Turgidiscabies）、乾酪乳酸菌（Lactobacillus casei）、木質醋酸菌（Acetobacter xylinum）、釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、枯草桿菌（Bacillus subtilis）及雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum）菌種中，取其中五菌種各40~60ML並分別倒入玻璃瓶再加入400~600ML的水後均勻搖晃，直至產生氣泡為止；

Ｓ２５將上述菌種由各玻璃瓶內取出500ML置入一容器且均勻搖晃直至產生氣泡為止，並靜置適當時間後倒入該新桶；

Ｓ２６將100~300ML具特定需求功能之菌種倒入該新桶，並拌勻、曝氣以完成新桶培養基；以及

Ｓ２７再將100~300ML具特定需求功能之菌種倒入該新桶培養基，並拌勻、曝氣以完成酵素成品。

其次，請仍然參閱第1圖並配合第2圖所示，於本發明之一實施例中，上述步驟Ｓ２１之培養基原液製造上，係包含下述步驟︰

Ｓ１１　依重量比例取水40~60%、糖蜜10~30%後拌勻；

Ｓ１２　取馬鈴薯瘡痂病菌（Streptomyces Turgidiscabies）、乾酪乳酸菌（Lactobacillus casei）、木質醋酸菌（Acetobacter xylinum）、釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）及枯草桿菌（Bacillus subtilis）菌株各10株，並於每一菌種加水調整為佔總重量4~6%後加入；

Ｓ１３　曝氣觀察，較佳者，其曝氣時間為180天；以及

Ｓ１４　形成培養基原液。

接著，步驟Ｓ２２係抽取部份培養基原液倒入新桶，並使該原液佔新桶總重量50%，再於新桶內加入佔總重量10~30%之糖蜜及20~40%之水後均勻攪拌（步驟Ｓ２３），較佳者，新桶內之培養基原液、糖蜜及水之比例為5:2:3。

而步驟Ｓ２４係於馬鈴薯瘡痂病菌（Streptomyces Turgidiscabies）、乾酪乳酸菌（Lactobacillus casei）、木質醋酸菌（Acetobacter xylinum）、釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、枯草桿菌（Bacillus subtilis）及雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum）菌種中，扣除所欲強調功效之菌種而取其中五菌種；其中，馬鈴薯瘡痂病菌（Streptomyces Turgidiscabies）能分解有機質、分泌抗生物質，而具有抑制病害之功效；乾酪乳酸菌（Lactobacillus casei）能合成維生素及蛋白質，且具耐酸、能通過胃酸膽鹼、具強力整腸效能以及能幫助消化吸收之特性；木質醋酸菌（Acetobacter xylinum）為能生產純纖維素之細菌，並能發酵蔬果產生二次代謝產物，以作為懸浮劑或調稠劑添加於食品中，且具有製造養分、整腸道之功效；釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）能合成不同蛋白質及維他命，為製作培養基常用成分酵母提取物之主要原料；枯草桿菌（Bacillus subtilis）能抑制病毒、強化免疫功能，並能用於種子保護與生物防治上；而雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum）為人體腸道最優勢之益菌，能幫助人體合成維他命以促進營養吸收，並能增加免疫力，減少抗生素危害。於本實施例中，若欲製造能合成維他命、促進營養吸收、增加免疫力及減少抗生素危害之酵素成品，則扣除雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum）後，取其餘五菌種各40~60ML，並分別倒入玻璃瓶再加入400~600ML的水，接著均勻搖晃直至產生氣泡為止，再將上述五菌種由各玻璃瓶內分別取出500ML置入一容器，使五菌種混合並再次均勻搖晃直至產生氣泡為止，待靜置1~2小時後倒入該新桶（步驟Ｓ２５）。

步驟Ｓ２６，於新桶內加入100~300ML之雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum）菌種並均勻攪拌，且每天曝氣觀察90天以完成新桶培養基；此時，該新桶培養基能於取出部分原液後，再次加入100~300ML之雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum）菌種並均勻攪拌，且每天曝氣觀察90天即完成具預定功效之酵素成品（步驟Ｓ２７），較佳者，該酵素成品為液態，並能稀釋或加工成粉末狀，且能利用另一部份新桶培養基續行培養基之複製與製作酵素成品的動作。

藉此，能將培養基原液一分為二（配合參閱第3圖），再透過上述步驟加入菌種並曝氣觀察以完成新桶培養基，而新桶培養基則能再次一分為二，以一部分添加具需求功能之菌種後製造酵素成品，另一部分則作為培養基以續行複製動作，而能不斷複製培養基以製造酵素成品，並能簡化製程，達到節省再次配製培養基之人力與時間成本之功效。

惟以上所述者，僅為本發明之較佳實施例，並非用以限定本發明之實施範圍，凡未脫離本發明技藝精神所為之變化與修飾，皆為本發明專利範圍所涵蓋。

綜上所述，本發明確實已突破傳統並具有改良及創新之創作內容且能具體實施，理應符合發明專利之法定要件，爰依法提出專利申請，懇請　鈞局審查委員授予合法專利權，以勵創作，至感德便。

本發明
Ｓ１１‧‧‧依重量比例取水40~60%、糖蜜10~30%後拌勻
Ｓ１２‧‧‧取馬鈴薯瘡痂病菌（Streptomyces Turgidiscabies）、乾酪乳酸菌（Lactobacillus casei）、木質醋酸菌（Acetobacter xylinum）、釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）及枯草桿菌（Bacillus subtilis）菌株各10株，並於每一菌種加水調整為佔總重量4~6%後加入
Ｓ１３‧‧‧曝氣觀察
Ｓ１４‧‧‧形成培養基原液
Ｓ２１‧‧‧預先混合培養基原液
Ｓ２２‧‧‧抽取部份該原液至新桶，並使該原液佔該新桶總重量50%
Ｓ２３‧‧‧於該新桶內加入佔總重量10~30%之糖蜜及20~40%之水後均勻攪拌
Ｓ２４‧‧‧於馬鈴薯瘡痂病菌（Streptomyces Turgidiscabies）、乾酪乳酸菌（Lactobacillus casei）、木質醋酸菌（Acetobacter xylinum）、釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、枯草桿菌（Bacillus subtilis）及雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum）菌種中，取其中五菌種各40~60ML並分別倒入玻璃瓶再加入400~600ML的水後均勻搖晃，直至產生氣泡為止
Ｓ２５‧‧‧將上述五菌種由各玻璃瓶內取出500ML置入一容器且均勻搖晃直至產生氣泡為止，並靜置適當時間後倒入該新桶
Ｓ２６‧‧‧將100~300ML具特定需求功能之菌種倒入該新桶，並拌勻、曝氣以完成新桶培養基
Ｓ２７‧‧‧再將100~300ML具特定需求功能之菌種倒入該新桶培養基，並拌勻、曝氣以完成酵素成品

第1圖係本發明培養基複製之流程圖。第2圖係本發明培養基原液之製造流程圖。第3圖係本發明培養基複製之示意圖。

S21‧‧‧預先混合培養基原液

S22‧‧‧抽取部份該原液至新桶，並使該原液佔該新桶總重量50%

S23‧‧‧於該新桶內加入佔總重量10~30%之糖蜜及20~40%之水後均勻攪拌

S24‧‧‧於馬鈴薯瘡痂病菌(Streptomyces Turgidiscabies)、乾酪乳酸菌(Lactobacillus casei)、木質醋酸菌(Acetobacter xylinum)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草桿菌(Bacillus subtilis)及雙歧桿菌(Bifidobacterium bifidum)菌種中，取其中五菌種各40~60ML並分別倒入玻璃瓶再加入400~600ML的水後均勻搖晃，直至產生氣泡為止

S25‧‧‧將上述五菌種由各玻璃瓶內取出500ML置入一容器且均勻搖晃直至產生氣泡為止，並靜置適當時間後倒入該新桶

S26‧‧‧將100~300ML具特定需求功能之菌種倒入該新桶，並拌勻、曝氣以完成新桶培養基

S27‧‧‧再將100~300ML具特定需求功能之菌種倒入該新桶培養基，並拌勻、曝氣以完成酵素成品

Claims

一種培養基的複製方法，包含下述(a)~(g)步驟︰ (a) 預先混合培養基原液； (b) 抽取部份該原液至新桶，並使該原液佔該新桶總重量50%； (c) 於該新桶內加入佔總重量10~30%之糖蜜及20~40%之水後均勻攪拌； (d) 於馬鈴薯瘡痂病菌（Streptomyces Turgidiscabies）、乾酪乳酸菌（Lactobacillus casei）、木質醋酸菌（Acetobacter xylinum）、釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、枯草桿菌（Bacillus subtilis）及雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum）菌種中，取其中五菌種各40~60ML並分別倒入玻璃瓶再加入400~600ML的水後均勻搖晃，直至產生氣泡為止； (e) 將步驟(d)之五菌種由各玻璃瓶內取出500ML置入一容器且均勻搖晃直至產生氣泡為止，並靜置適當時間後倒入該新桶； (f) 將100~300ML具特定需求功能之菌種倒入該新桶，並拌勻、曝氣以完成新桶培養基；以及 (g) 再將100~300ML具特定需求功能之菌種倒入該新桶培養基，並拌勻、曝氣以完成酵素成品。
根據申請專利範圍第1項所述之培養基的複製方法，其中，該步驟(a)之培養基原液製造上係包含下列步驟︰依重量比例取水40~60%、糖蜜10~30%後拌勻，再取馬鈴薯瘡痂病菌（Streptomyces Turgidiscabies）、乾酪乳酸菌（Lactobacillus casei）、木質醋酸菌（Acetobacter xylinum）、釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）及枯草桿菌（Bacillus subtilis）菌株各10株，並於每一菌種加水調整為佔總重量4~6%後加入，接著曝氣觀察以形成該培養基原液。
根據申請專利範圍第2項所述之培養基的複製方法，其中，該曝氣時間為180天。
根據申請專利範圍第1項所述之培養基的複製方法，其中，該步驟(e)之靜置時間為1~2小時。
根據申請專利範圍第1項所述之培養基的複製方法，其中，該步驟(f)之曝氣時間為90天。
根據申請專利範圍第1項所述之培養基的複製方法，其中，該步驟(f)之菌種為馬鈴薯瘡痂病菌（Streptomyces Turgidiscabies）、乾酪乳酸菌（Lactobacillus casei）、木質醋酸菌（Acetobacter xylinum）、釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、枯草桿菌（Bacillus subtilis）或雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum）其一。
根據申請專利範圍第1項所述之培養基的複製方法，其中，該步驟(g)之曝氣時間為90天。
根據申請專利範圍第1項所述之培養基的複製方法，其中，該步驟(g)之菌種為馬鈴薯瘡痂病菌（Streptomyces Turgidiscabies）、乾酪乳酸菌（Lactobacillus casei）、木質醋酸菌（Acetobacter xylinum）、釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）、枯草桿菌（Bacillus subtilis）或雙歧桿菌（Bifidobacterium bifidum）其一。
根據申請專利範圍第1項所述之培養基的複製方法，其中，該酵素成品為液態，並能稀釋或加工成粉末狀。