TW201608994A - 豆類蛋白質產品(「yp810」)的製備 - Google Patents
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Abstract
本發明係關於豆類蛋白質產品,該等產品之習知商業豆類蛋白質產品所特有之豌豆/蔬菜味道特徵(flavour note)極小或實質上沒有,且可用於強化食品及飲品,且在製程中無需使用鹽下製得。本發明之豆類蛋白質產品係如下獲得:藉由用水萃取豆類蛋白質源以形成豆類蛋白質水溶液,從殘留豆類蛋白質源至少部分分離豆類蛋白質水溶液,將該豆類蛋白質水溶液之pH調整至約1.5至約3.4之pH,以溶解蛋白質塊體,且形成酸化豆類蛋白質溶液,接著從酸不溶性固體材料分離酸化豆類蛋白質溶液。該酸化豆類蛋白質溶液可在視情況選用的濃縮及透濾後乾燥,以形成可為離析物之豆類蛋白質產品。該酸不溶性固體材料可用酸化水洗滌,且接著乾燥以形成另一豆類蛋白質產品。此等產品可在製備其之酸性pH下乾燥或可在乾燥前調節pH。本發明所描述亦可為離析物及可提供具有經改良澄清度之酸性溶液,且衍生自酸化豆類蛋白質溶液之酸溶性蛋白質產品之製法。
Description
本發明係關於製備豆類蛋白質產品之新穎且具發明性之方法及新穎且具發明性之豆類蛋白質產品。
在2011年5月9日申請之美國專利申請案第13/103,528號(2011年11月10日公開之美國專利公開案第2011-0274797號)、2011年11月4日申請之美國專利申請案第13/289,264號(2012年5月31日公開之美國專利公開案第2012-0135117號)、2012年7月24日申請之美國專利申請案第13/556,357號(2013年7月25日公開之美國專利公開案第2013-0189408號)及2013年1月7日申請之美國專利申請案第13/642,003號(2013年5月23日公開之美國專利公開案第2013-0129901號)(「YP701」)(其讓與至受讓人,且其揭示內容係以引用的方式併入本文)中,描述製備在低pH溶液中具有優異溶解度及視情況選擇的澄清度以及無豌豆/蔬菜特徵的清爽味道之豆類蛋白質產品之程序。此等產品之清爽味道係具商業價值之屬性。
在2013年7月9日申請之美國專利申請案第13/937,266號(2014年1月16日公開之美國專利公開案第2014-0017379號)(「YP701N2」)(其讓與至受讓人,且其揭示內容係以引用的方式併入本文)中,描述提供上述豆類蛋白質產品之接近中性pH形式。由於具有清爽味道,此等產品可用於具有接近中性pH之食品組合物中。雖然仍期望溶解
性,但在接近中性pH下之食品應用通常係不透明的,及因此不一定要求在水中係完全溶解及澄清。
在前述美國專利申請案號13/103,528、13/289,264、13/556,357、13/642,003及13/937,266中所述之程序中,用鈣鹽溶液進行蛋白質之萃取。鈣鹽溶液促進蛋白質源之蛋白質之溶解,同時使其與肌醇六磷酸分離,其從蛋白質溶液沈澱出並移除。接著視情況用水稀釋該蛋白質溶液及將pH調整至約1.5至約4.4,以提供較佳透明的酸化蛋白質溶液。然而不希望受任何特定理論約束,據認為,對樣品進行低pH處理,較佳組合視情況選用的後續膜處理步驟,可增進由此等程序所獲得豆類蛋白質產品之清爽的味道。
在2014年3月11日申請之美國專利申請案第14/203,700號(2014年9月11日公開之美國專利公開案第2014-0256914號)(其讓與至受讓人,且其揭示內容係以引用的方式併入本文)中,描述提供在前述美國專利申請案號13/103,528、13/289,264、13/556,357、13/642,003及13/937,266中所述之鈣鹽溶液萃取後使蛋白質溶液澄清所得之豆類蛋白質產品,其具有至少約50重量%之蛋白質含量。此等產品可由在用鈣鹽溶液萃取豆類蛋白質源及用傾析離心機分離殘留豆類蛋白質源塊體後藉由圓盤疊式離心機捕獲得的微細固體組成。或者,該等產品可由在用水萃取豆類蛋白質源,用傾析離心機分離殘留豆類蛋白質源塊體及將鈣鹽添加至部分澄清的蛋白質溶液後藉由圓盤疊式離心機捕獲得的微細固體組成。
前述美國專利申請案號13/103,528、13/289,264、13/556,357、13/642,003、13/937,266及14/203,700中所述程序之一可能問題可為進行蛋白質萃取步驟時所需要鈣鹽的量以及進入製程中的鹽量及製程廢棄物流中鈣鹽之回收或處置之成本及問題。鈣鹽之減少或消除可明顯節省蛋白質產品之處理及生產成本。
本發明係關於製備豌豆/蔬菜味道特徵極小或實質上沒有的豆類蛋白質產品之新穎且具發明性之方法,其不包括在萃取蛋白質源材料之蛋白質中使用鈣鹽或其他鹽。
因此,在本發明之一個態樣中,提供一種生產基於乾重具有至少約60重量%,較佳至少約90重量%(N x 6.25)之蛋白質含量之豆類蛋白質產品的方法,其包括:(a)用水萃取豆類蛋白質源,導致來自該蛋白質源之豆類蛋白質溶解及形成豆類蛋白質水溶液,(b)從殘留豆類蛋白質源中至少部分分離該豆類蛋白質水溶液,(c)將該豆類蛋白質水溶液之pH調整至約1.5至約3.4之pH,產生酸化豆類蛋白質溶液,(d)從該酸化豆類蛋白質溶液分離酸不溶性固體材料,(e)視情況藉由選擇性膜技術濃縮該酸化豆類蛋白質溶液,(f)視情況透濾該視情況經濃縮之酸化豆類蛋白質溶液,及(g)視情況乾燥該視情況經濃縮及視情況經透濾之豆類蛋白質溶液。
在本發明之一實施例中,當在低pH下製得時,產品在具有低pH之水溶液中具高溶解性且相當適合用於具有低pH之食品應用(諸如酸性飲料)中。在本發明之另一實施例中,可在視情況進行乾燥前將酸化豆類蛋白質溶液或視情況經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液之pH調整至小於約8.0。在本發明之另一實施例中,可在視情況進行乾燥前將酸化豆類蛋白質溶液或視情況經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液之pH調整至約6.0至約8.0。在本發明之另一實施例中,可在視情況進行乾燥前將酸化豆類蛋白質溶液或視情況經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液之pH調整至約6.5至約7.5。在
本發明之另一實施例中,當在接近中性的pH下提供產品時,其係呈適合用於中性或接近中性之食品應用(諸如中性飲料或棒)中之形式。
或者,本發明之酸化豆類蛋白質溶液可經膜處理,以便提供在具有低pH之水溶液中具高溶解性且提供具改良之用於酸性飲料中之澄清度之低pH水溶液之豌豆/蔬菜味道特徵極小或實質上沒有的第一酸性豆類蛋白質產品。亦製得豌豆/蔬菜味道特徵亦極小或實質上沒有的第二豆類蛋白質產品,其可用於酸性、中性或接近中性之食品應用中。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種生產基於乾重具有至少約60重量%,較佳至少約90重量%(N x 6.25)之蛋白質含量之豆類蛋白質產品的方法,其包括:(a)用水萃取豆類蛋白質源,導致來自該蛋白質源之豆類蛋白質溶解及形成豆類蛋白質水溶液,(b)從殘留豆類蛋白質源中至少部分分離該豆類蛋白質水溶液,(c)將該豆類蛋白質水溶液之pH調整至約1.5至約3.4之pH,產生酸化豆類蛋白質溶液,(d)從該酸化豆類蛋白質溶液分離酸不溶性固體材料,(e)藉由選擇性膜技術濃縮及/或透濾該酸化豆類蛋白質溶液,以將該酸化豆類蛋白質溶液之蛋白質組分分餾成第一滯留物及第一滲透物,(f)視情況乾燥該第一滯留物,以提供第一豆類蛋白質產品,(g)濃縮且視情況透濾該第一滲透物,以提供第二滯留物及第二滲透物,及(h)視情況乾燥該第二滯留物,以提供第二豆類蛋白質產品。
在本發明之一實施例中,該第一滯留物包含酸化豆類蛋白質溶液之較高分子量蛋白質物質,且該第一滲透物包含酸化豆類蛋白質溶
液之較低分子量蛋白質物質及污染物。在本發明之另一實施例中,該第一豆類蛋白質產品包含衍生自酸化豆類蛋白質溶液之較高分子量蛋白質。在本發明之另一實施例中,該第一滲透物之濃縮及視情況選用的透濾使得較低分子量蛋白質物質滯留在第二滯留物中,且允許污染物進入至第二滲透物中。
在本發明之一實施例中,可在視情況選用的乾燥步驟之前將第一滯留物之pH調整至小於約8.0。在本發明之另一實施例中,可在視情況選用的乾燥步驟之前將該第一滯留物之pH調整至約6.0至約8.0。在本發明之另一實施例中,可在視情況選用的乾燥步驟之前將該第一滯留物之pH調整至約6.5至約7.5。當在接近中性pH下提供產品時,其係呈適合用於中性或接近中性的食品應用(諸如中性飲料或棒)中之形式。
在本發明之一實施例中,在本發明之上述任一態樣中產生的酸不溶性固體材料可經進一步處理以提供另一豆類蛋白質產品。與衍生自酸化豆類蛋白質溶液之產品相比,此產品一般可具有較低純度及較高豌豆/蔬菜味道特徵水平。然而,該衍生自酸不溶性固體材料之產品之味道使得其仍適合用於食品及飲料應用中。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種生產基於乾重具有至少約60重量%(N x 6.25)之蛋白質含量之豆類蛋白質產品的方法,其包括在視情況將pH調整至選自由小於約8.0、約6.0至約8.0及約6.5至約7.5組成之群之值後視情況乾燥酸不溶性固體材料,或較佳在用約1至約20體積的具有與酸不溶性固體材料相同的pH之水洗滌且視情況將pH調整至選自由小於約8.0、約6.0至約8.0及約6.5至約7.5組成之群之值後視情況乾燥酸不溶性固體材料。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種生產基於乾重具有至少約60重量%(N x 6.25)之蛋白質含量之豆類蛋白質產品的方法,其
包括:(a)用水萃取豆類蛋白質源,導致來自該蛋白質源之豆類蛋白質溶解及形成豆類蛋白質水溶液,(b)從殘留豆類蛋白質源中至少部分分離該豆類蛋白質水溶液,(c)將該豆類蛋白質水溶液之pH調整至約1.5至約3.4之pH,產生酸化豆類蛋白質溶液,(d)從該酸化豆類蛋白質溶液分離酸不溶性固體材料,及替代性地:(e)視情況藉由選擇性膜技術濃縮該酸化豆類蛋白質溶液,(f)視情況透濾該視情況經濃縮之豆類蛋白質溶液,及(g)視情況乾燥該視情況經濃縮及視情況經透濾之豆類蛋白質溶液,或(h)藉由選擇性膜技術濃縮及/或透濾該酸化豆類蛋白質溶液,以將該酸化豆類蛋白質溶液之蛋白質組分分餾成第一滯留物及第一滲透物,(i)視情況乾燥該第一滯留物,以提供第一豆類蛋白質產品,(j)濃縮且視情況透濾該第一滲透物,以提供第二滯留物及第二滲透物,及(k)視情況乾燥該第二滯留物,以提供第二豆類蛋白質產品。
在本發明之一實施例中,該第一滯留物包含酸化豆類蛋白質溶液中之較高分子量蛋白質物質,且該第一滲透物包含酸化豆類蛋白質溶液中之較低分子量蛋白質物質及污染物。在本發明之另一實施例中,該第一豆類蛋白質產品包含衍生自酸化豆類蛋白質溶液之較高分子量蛋白質。在本發明之另一實施例中,該第一滲透物之濃縮及視情況選用的透濾將較低分子量蛋白質物質滯留在第二滯留物中,且允許
污染物進入至第二滲透物中。在本發明之另一實施例中,該第二豆類蛋白質產品包含衍生自酸化豆類蛋白質溶液之較低分子量蛋白質物質。在本發明之另一實施例中,與該不使用分餾步驟衍生自酸化豆類蛋白質溶液之產品相比,該第二豆類蛋白質產品在酸性溶液中具有改良之澄清度。
在本發明之一實施例中,酸不溶性固體材料視情況經乾燥以形成基於乾重具有至少約60重量%(N x 6.25)之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。
在本發明之一實施例中,在視情況選用的乾燥步驟之前將該酸不溶性材料之pH調整至小於約8.0。在本發明之另一實施例中,在視情況選用的乾燥步驟之前將該酸不溶性材料之pH調整至約6.0至約8.0。在本發明之另一實施例中,在視情況選用的乾燥步驟之前將該酸不溶性材料之pH調整至約6.5至約7.5。
在本發明之一實施例中,該酸不溶性固體材料係藉由與約1至約20體積之具有選自由約1.5至約3.4及大約與酸不溶性材料之pH相同組成之群之pH之水混合進行洗滌,接著在視情況選用的乾燥步驟之前從洗滌水分離。
在本發明之一實施例中,在視情況選用的乾燥步驟之前將該經洗滌之酸不溶性材料之pH調整至小於約8.0。在本發明之另一實施例中,在視情況選用的乾燥步驟之前將該經洗滌之酸不溶性材料之pH調整至約6.0至約8.0。在本發明之另一實施例中,在視情況選用的乾燥步驟之前將該經洗滌之酸不溶性材料之pH調整至約6.5至約7.5。
在本發明之一實施例中,將該洗滌水與分離步驟(d)之酸化豆類蛋白質溶液組合及如步驟(e)、(f)及/或(g)進行處理。
在本發明之一實施例中,將該洗滌水與分離步驟(d)之酸化豆類蛋白質溶液組合及如步驟(h)、(i)、(j)及/或(k)進行處理。
在本發明之一實施例中,萃取步驟(a)係在約1℃至約100℃之溫度下進行。在本發明之另一實施例中,萃取步驟(a)係在約15℃至約65℃之溫度下進行。在本發明之另一實施例中,萃取步驟(a)係在約20℃至約35℃之溫度下進行。
在本發明之一實施例中,用於萃取的水包含pH調節劑,使得萃取在約6至約11之pH下進行。在本發明之另一實施例中,用於萃取的水包含pH調節劑,使得萃取在約6至約8.5之pH下進行。在本發明之另一實施例中,該pH調節劑為氫氧化鈉。
在本發明之一實施例中,豆類蛋白質水溶液具有約5至約50g/L之蛋白質濃度。在本發明之另一實施例中,豆類蛋白質水溶液具有約10至約50g/L之蛋白質濃度。
在本發明之一實施例中,該水包含抗氧化劑。
在本發明之一實施例中,在分離步驟(b)之後及在酸化步驟(c)之前,用吸附劑處理該豆類蛋白質水溶液,以去除該蛋白質水溶液中之顏色及/或氣味化合物。
在本發明之一實施例中,在酸化步驟(c)中將該豆類蛋白質水溶液之pH調整至約2.0至約3.0。
在本發明之一實施例中,在分離步驟(d)後,使酸化蛋白質水溶液進行加熱處理步驟。在本發明之一實施例中,進行該加熱處理步驟,以使熱不穩定抗營養因子失去活性。在本發明之一實施例中,該等抗營養因子為熱不穩定之胰蛋白酶抑制劑。在本發明之另一實施例中,進行該加熱處理步驟,以對該酸化蛋白質水溶液進行巴氏滅菌。
在本發明之一實施例中,該加熱處理係在約70℃至約160℃之溫度下進行約10秒至約60分鐘。在本發明之另一實施例中,該加熱處理係在約80℃至約120℃之溫度下進行約10秒至約5分鐘。在本發明之另一實施例中,該加熱處理係在約85℃至約95℃之溫度下進行約30秒至
約5分鐘。
在本發明之一實施例中,使該經加熱處理的酸化豆類蛋白質溶液冷卻至約2℃至約65℃之溫度。在本發明之另一實施例中,使該經加熱處理的酸化豆類蛋白質溶液冷卻至約50℃至約60℃之溫度。
在本發明之一實施例中,該酸化豆類蛋白質水溶液經乾燥以提供具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。
在本發明之一實施例中,使該酸化豆類蛋白質水溶液進行濃縮步驟(e),以產生具有約50至約300g/L蛋白質濃度之濃縮酸化豆類蛋白質溶液。在本發明之一實施例中,使該濃縮酸化豆類蛋白質溶液進行透濾步驟(f)。
在本發明之一實施例中,該濃縮酸化豆類蛋白質溶液具有約100至約200g/L之蛋白質濃度。
在本發明之一實施例中,濃縮步驟(e)係使用具有約1,000至約1,000,000道爾頓之截止分子量之膜藉由超過濾進行。在本發明之另一實施例中,濃縮步驟(e)係使用具有約1,000至約100,000道爾頓之截止分子量之膜藉由超過濾進行。
在本發明之一實施例中,透濾步驟(f)係對部分或完全濃縮之前或之後的酸化豆類蛋白質水溶液使用水或酸化水進行。
在本發明之一實施例中,透濾步驟(f)係使用約1至約40體積之透濾溶液進行。在本發明之另一實施例中,透濾步驟(f)係使用約2至約25體積之透濾溶液進行。
在本發明之一實施例中,進行透濾步驟(f),直到滲透物中不存在顯著其他數量的污染物或可見的顏色。
在本發明之一實施例中,進行透濾步驟(f),直到滯留物已經充分純化,以提供具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之
豆類蛋白質離析物。
在本發明之一實施例中,透濾步驟(f)係使用具有約1,000至約1,000,000道爾頓之截止分子量之膜進行。在本發明之另一實施例中,透濾步驟(f)係使用具有約1,000至約100,000道爾頓之截止分子量之膜進行。
在本發明之一實施例中,抗氧化劑係在至少一部分透濾步驟(f)期間存在於透濾介質中。
在本發明之一實施例中,濃縮步驟(e)及視情況選用的透濾步驟(f)係在約2℃至約65℃之溫度下進行。在本發明之另一實施例中,濃縮步驟(e)及視情況選用的透濾步驟(f)係在約50℃至約60℃之溫度下進行。
在本發明之一實施例中,使該酸化豆類蛋白質水溶液進行步驟(h),以產生具有約50至約300g/L蛋白質濃度之經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液(第一滯留物)。在本發明之另一實施例中,使該酸化豆類蛋白質水溶液進行步驟(h),以產生具有約100至約200g/L蛋白質濃度之經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液(第一滯留物)。
在本發明之一實施例中,使用具有約0.05至約0.1μm孔徑之膜藉由微過濾使該酸化豆類蛋白質水溶液進行步驟(h)。在本發明之另一實施例中,使用具有約0.08至約0.1μm孔徑之膜藉由微過濾使該酸化豆類蛋白質水溶液進行步驟(h)。
在本發明之一實施例中,使用具有約10,000至約1,000,000道爾頓之截止分子量之膜藉由超過濾使該酸化豆類蛋白質水溶液進行步驟(h)。在本發明之另一實施例中,使用具有約100,000至約1,000,000道爾頓之截止分子量之膜藉由超過濾使該酸化豆類蛋白質水溶液進行步驟(h)。
在本發明之一實施例中,透濾步驟(h)係在視情況選用的後續濃縮之前或在其部分或完全濃縮之後對酸化豆類蛋白質水溶液使用水或酸化水進行。
在本發明之一實施例中,透濾步驟(h)係使用約1至約40體積之透濾溶液進行。在本發明之另一實施例中,透濾步驟(h)係使用約2至約25體積之透濾溶液進行。
在本發明之一實施例中,進行透濾步驟(h),直到滯留物已經充分純化,以提供具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質離析物。
在本發明之一實施例中,抗氧化劑係在至少一部分透濾步驟(h)期間存在於透濾介質中。
在本發明之一實施例中,濃縮步驟及視情況選用的透濾步驟係在約2℃至約65℃之溫度下進行。在本發明之另一實施例中,濃縮步驟及視情況選用的透濾步驟係在約50℃至約60℃之溫度下進行。
在本發明之一實施例中,使第一滲透物進行步驟(j),以產生具有約10至約300g/L蛋白質濃度之經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液(第二滯留物)。在本發明之另一實施例中,使第一滲透物進行步驟(j),以產生具有大約100至約200g/L蛋白質濃度之經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液(第二滯留物)。
在本發明之一實施例中,濃縮及視情況選用的透濾步驟係使用具有約1,000至約100,000道爾頓之截止分子量之膜藉由超過濾進行。在本發明之另一實施例中,濃縮及視情況選用的透濾步驟係使用具有約1,000至約10,000道爾頓之截止分子量之膜藉由透超過濾進行。
在本發明之一實施例中,該視情況選用的透濾步驟係在其部分或完全濃縮之前或之後對第二滯留物使用水或酸化水進行。
在本發明之一實施例中,濃縮及視情況選用的透濾步驟(j)中之透濾係使用約1至約40體積之透濾溶液進行。在另一實施例中,濃縮及視情況選用的透濾步驟(j)中之透濾係使用約2至約25體積之透濾溶液進行。
在本發明之一實施例中,進行濃縮及視情況選用的透濾步驟(j)中之透濾,直到滲透物已經充分純化,以提供具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質離析物。
在本發明之一實施例中,抗氧化劑在該濃縮及視情況選用的透濾步驟(j)中之至少一部分透濾期間存在於透濾介質中。
在本發明之一實施例中,該濃縮及視情況選用的透濾步驟(j)係在約2℃至約65℃之溫度下進行。在本發明之另一實施例中,該濃縮及視情況選用的透濾步驟(j)係在約50℃至約60℃之溫度下進行。
在本發明之一實施例中,使該經透濾之酸化豆類蛋白質溶液進行加熱處理步驟。在本發明之一實施例中,進行該加熱處理步驟,以使熱不穩定抗營養因子(包括熱不穩定胰蛋白酶抑制劑)失去活性。
在本發明之一實施例中,使經部分濃縮或經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液進行加熱處理步驟。在本發明之一實施例中,進行該加熱處理步驟,以使熱不穩定抗營養因子(包括熱不穩定胰蛋白酶抑制劑)失去活性。
在本發明之一實施例中,該加熱處理係在約70℃至約160℃之溫度下進行約10秒至約60分鐘。在本發明之另一實施例中,該加熱處理係在約80℃至約120℃之溫度下進行約10秒至約5分鐘。在本發明之另一實施例中,該加熱處理係在約85℃至約95℃之溫度下進行約30秒至約5分鐘。
在本發明之一實施例中,使該經加熱處理的豆類蛋白質溶液冷卻至約2℃至約65℃之溫度。在本發明之另一實施例中,使該經加熱
處理的豆類蛋白質溶液冷卻至約50℃至約60℃之溫度。
在本發明之一實施例中,該經濃縮且視情況經透濾之酸化蛋白質溶液係經吸附劑處理,以去除顏色及/或氣味化合物。
在本發明之一實施例中,該經濃縮且視情況經透濾之酸化蛋白質溶液係在乾燥之前進行巴氏滅菌。
在本發明之一實施例中,該巴氏滅菌步驟係在約55℃至約75℃之溫度下進行約15秒至約60分鐘。
在本發明之一實施例中,使該視情況經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液進行乾燥步驟(g),以提供具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質離析物。本申請者已將此豆類蛋白質離析物鑑定為810。
在本發明之一實施例中,使該第一滯留物之經濃縮及/或經透濾之酸化豆類蛋白質溶液進行乾燥步驟(i),以提供具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質離析物。本申請者已將此豆類蛋白質離析物鑑定為816B。
在本發明之一實施例中,使該第二滯留物之經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液進行乾燥步驟(k),以提供具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質離析物。本申請者已將此豆類蛋白質離析物鑑定為816A。
在本發明之一實施例中,在視情況選用的乾燥步驟(g)之前將該視情況經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液之pH調整為小於約8.0。在本發明之另一實施例中,在視情況選用的乾燥步驟(g)之前將該視情況經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液之pH調整為約6.0至約8.0。在本發明之另一實施例中,在視情況選用的乾燥步驟(g)之前將該視情況經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液之pH調整為約6.5至約7.5。
在本發明之一實施例中,在乾燥步驟(i)之前將經膜處理之酸化豆類蛋白質溶液之pH調整為小於約8.0。在本發明之一實施例中,在乾燥步驟(i)之前將經膜處理之酸化豆類蛋白質溶液之pH調整為約6.0至約8.0。在本發明之另一實施例中,在乾燥步驟(i)之前將經膜處理之酸化豆類蛋白質溶液之pH調整為約6.5至約7.5。
在本發明之一實施例中,該濃縮及/或視情況選用的透濾步驟係以有利於移除胰蛋白酶抑制劑之方式操作。
在本發明之一實施例中,在萃取步驟(a)期間存在還原劑。在本發明之一實施例中,在萃取步驟(a)期間存在該還原劑旨在破壞或重排胰蛋白酶抑制劑之雙硫鍵,以降低胰蛋白酶抑制劑活性。
在本發明之一實施例中,在視情況選用的濃縮步驟(e)及/或視情況選用的透濾步驟(f)期間或膜處理步驟(h)期間存在還原劑。在本發明之一實施例中,存在該還原劑旨在破壞或重排胰蛋白酶抑制劑之雙硫鍵,以降低胰蛋白酶抑制劑活性。
在本發明之一實施例中,將還原劑添加至乾燥步驟(g)之前的視情況經濃縮、視情況經透濾之豆類蛋白質溶液及/或經乾燥之豆類蛋白質產品。在本發明之一實施例中,存在該還原劑旨在破壞或重排胰蛋白酶抑制劑之雙硫鍵,以降低胰蛋白酶抑制劑活性。
在本發明之一實施例中,將還原劑添加至乾燥步驟(i)之前的經膜處理之豆類蛋白質溶液及/或經乾燥之豆類蛋白質產品。在本發明之一實施例中,存在該還原劑旨在破壞或重排胰蛋白酶抑制劑之雙硫鍵,以降低胰蛋白酶抑制劑活性。
在本發明之一實施例中,將還原劑添加至乾燥步驟(k)之前的經濃縮、視情況經透濾之豆類蛋白質溶液及/或經乾燥之豆類蛋白質產品。在本發明之一實施例中,存在該還原劑旨在破壞或重排胰蛋白酶抑制劑之雙硫鍵,以降低胰蛋白酶抑制劑活性。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品,及其係在無涉及添加鹽之處理步驟下製得,具有極少或不具有豌豆或蔬菜味道,且在其生產中不需要酶。在本發明之一實施例中,該豆類蛋白質產品包含多於約1.5重量% d.b.之肌醇六磷酸。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品在酸性pH值小於約4.0之水性介質中完全可溶。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品在酸性pH值小於約3.0之水性介質中完全可溶。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品不需要穩定劑或其他添加劑以維持呈溶液或懸浮液形式之蛋白質產品。在本發明之另一實施例中,將豆類蛋白質產品與水溶性粉末材料摻合,以生產該摻合物之水溶液。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品為粉末飲料。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種如上所述豆類蛋白質產品之水溶液。在本發明之一實施例中,該水溶液為飲料。在本發明之另一實施例中,該飲料為其中豆類蛋白質產品完全可溶且實質上透明之澄清飲料。在本發明之另一實施例中,該飲料不為澄清飲料,且其中已溶解的豆類蛋白質不增加濁度水平。在本發明之另一實施例中,該飲料不為澄清飲料,且其中已溶解的豆類蛋白質造成飲料之濁度水平。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品具有低胰蛋白酶抑制劑活性。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種豆類蛋白質產品,其具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量,及以1%蛋白質w/v含於水中時在約2至約3之pH下大於約90%之蛋白質溶解度及以1%蛋白質w/v含於水中時在約4至約6之pH下小於約35%之蛋白質溶解度及以1%蛋白質w/v含於水中時在約7之pH下介於約25%與55%之間之蛋白
質溶解度。在本發明之一實施例中,該豆類蛋白質產品之溶解度係由實例9之方法測定。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品為黃豌豆蛋白質產品。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種豆類蛋白質產品,其具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量,及以1%蛋白質w/v含於水中時在約2之pH下介於約35%與75%之間之蛋白質溶解度及以1%蛋白質w/v含於水中時在約3之pH下介於約25%與55%之間之蛋白質溶解度及以1%蛋白質w/v含於水中時在約4之pH下介於約15%與30%之間之蛋白質溶解度及以1%蛋白質w/v含於水中在約7之pH下介於約15%與50%之間之蛋白質溶解度。在本發明之一實施例中,該豆類蛋白質產品之溶解度係由實例9之方法測定。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品為黃豌豆蛋白質產品。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種具有包括以下之分子量量分佈之豆類蛋白質產品:約7至約20%為大於約100,000Da,約13至約40%為約15,000至約100,000Da,約15至約28%為約5,000至約15,000Da,及約21至約57%為約1,000至約5,000Da。在本發明之一實施例中,該豆類蛋白質產品之分子量分佈係由實例10之方法測定。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品為黃豌豆蛋白質產品。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種具有包括以下之分子量分佈之豆類蛋白質產品:約12至約27%為大於約100,000Da,約18至約35%為約15,000至約100,000Da,約20至約37%為約5,000至約15,000Da,及約12至約43%為約1,000至約5,000Da。在本發明之一實施例中,該豆類蛋白質產品之分子量分佈係由實例10之方法測定。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品為黃豌豆蛋白質產品。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種具有包括以下之分子量分佈之豆類蛋白質產品:約4至約8%為大於約100,000Da,約32至
約36%為約15,000至約100,000Da,約43至約48%為約5,000至約15,000Da,及約12至約16%為約1,000至約5,000Da。在本發明之一實施例中,該豆類蛋白質產品之分子量分佈係由實例10之方法測定。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品為黃豌豆蛋白質產品。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種具有包括以下之分子量分佈之豆類蛋白質產品:約8至約12%為大於約100,000Da,約16至約27%為約15,000至約100,000Da,約13至約21%為約5,000至約15,000Da,及約43至約57%為約1,000至約5,000Da。在本發明之一實施例中,該豆類蛋白質產品之分子量分佈係由實例10之方法測定。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品為黃豌豆蛋白質產品。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種豆類蛋白質產品,其具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量,及以1%蛋白質w/v含於水中時在約2至約7之pH下小於約40%之蛋白質溶解度及大於約3.0% d.b.之肌醇六磷酸含量。在本發明之一實施例中,該豆類蛋白質產品之溶解度係由實例9之方法測定。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品為黃豌豆蛋白質產品。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種豆類蛋白質產品,其具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量,及以1%蛋白質w/v含於水中時在約2至約7之pH下小於約30%之蛋白質溶解度及大於6% d.b.之酸解性碳水化合物含量。在本發明之一實施例中,該豆類蛋白質產品之溶解度係由實例9之方法測定。在本發明之另一實施例中,該酸解性碳水化合物含量係由實例12之方法測定。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品為黃豌豆蛋白質產品。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種豆類蛋白質產品,其具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量,及以1%蛋白質w/v含於水中時在約2至約4之pH下大於約90%之蛋白質溶解度及大於6%
d.b.之酸解性碳水化合物含量。在本發明之一實施例中,該豆類蛋白質產品之溶解度係由實例9之方法測定。在本發明之另一實施例中,該酸解性碳水化合物含量係由實例12之方法測定。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品為黃豌豆蛋白質產品。
因此,在本發明之另一態樣中,提供一種在未添加鹽或無酶水解下製得之具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品,其藉由使足以提供0.48g蛋白質之蛋白質粉溶解於15ml水中製得之溶液具有選自由小於30%及小於20%組成之群之濁度讀數。本申請人已將此豆類蛋白質產品鑑定為816A。在本發明之一實施例中,該鹽為鈣鹽。在本發明之另一實施例中,該豆類蛋白質產品為黃豌豆蛋白質產品。
依本文所揭示方法生產的豆類蛋白質產品適合用於蛋白質產品之多種習知應用中,包括(但不限於)加工食品及飲料之蛋白質強化及在食品及飲料中作為功能性成分。依本文所揭示方法生產的豆類蛋白質產品之其他用途係用於寵物食品、動物食品以及工業及化妝應用以及個人護理產品中。
10‧‧‧製程
11‧‧‧製程
12‧‧‧用pH為約6至約11,較佳約6至約8.5之水萃取
14‧‧‧部分或完全澄清化
16‧‧‧固體
18‧‧‧蛋白質萃取溶液
20‧‧‧將pH調整至約1.5至約3.4,較佳約2.0至約3.0
22‧‧‧離心
24‧‧‧酸不溶性固體材料
26‧‧‧酸化蛋白質溶液
28‧‧‧視情況用pH為約1.5至約3.4,較佳約2.0至約3.0之水洗滌,接著離心
30‧‧‧洗滌離心濾液
34‧‧‧視情況經洗滌之酸不溶性固體材料
36‧‧‧將pH調整至約6至約8,較佳約6.5至約7.5
38‧‧‧乾燥
40‧‧‧810PN
46‧‧‧視情況將pH調整至小於約6
48‧‧‧乾燥
50‧‧‧810PA
60‧‧‧視情況減小pH以進行膜處理
61‧‧‧濃縮及/或透濾
62‧‧‧濃縮/透濾
63‧‧‧滯留物
64‧‧‧滯留物
65‧‧‧將pH調整至約6至約8,較佳約6.5至約7.5
66‧‧‧將pH調整至約6至約8,較佳約6.5至約7.5
67‧‧‧乾燥
68‧‧‧乾燥
69‧‧‧816BN
70‧‧‧810N
75‧‧‧視情況將pH調整至小於約6
76‧‧‧視情況將pH調整至小於約6
77‧‧‧乾燥
78‧‧‧乾燥
79‧‧‧816BA
80‧‧‧810A
81‧‧‧視情況組合及乾燥
82‧‧‧視情況組合及乾燥
83‧‧‧視情況組合
84‧‧‧視情況組合
85‧‧‧視情況組合及乾燥
86‧‧‧視情況組合及乾燥
91‧‧‧滲透物
93‧‧‧濃縮/透濾
95‧‧‧滯留物
97‧‧‧乾燥
99‧‧‧816A
圖1為說明本發明方法之一實施例之示意性流程圖。
圖2為說明本發明方法之一實施例之示意性流程圖。
提供本發明之豆類蛋白質產品之方法之初始步驟包括使來自豆類蛋白質源之豆類蛋白質溶解。本發明可應用之豆類包括(但不限於)小扁豆、鷹嘴豆(chickpea)、乾豌豆(dry pea)及乾大豆。豆類蛋白質源可為豆類或衍生自加工豆類之任何豆類產品或副產品。例如,豆類蛋白質源可為藉由碾磨、視情況經去殼之豆類所製得之粉。另一實例為,豆類蛋白質源可為藉由去殼及碾磨豆類且接著針對經去殼及碾磨
之材料風吹歸類成富澱粉及富蛋白質部分所形成之富蛋白質豆類部分。自豆類蛋白質源回收之豆類蛋白質產品可為在豆類中天然存在之蛋白質,或該蛋白質材料可為經基因操作改造但仍具有天然蛋白質特有之疏水及極性性質之蛋白質。
本發明之豆類蛋白質產品可從豆類蛋白質源由分批方法或連續方法或半連續方法製得。使用水實現豆類蛋白質源材料中蛋白質之溶解。使用的水可為自來水或具有不同純度之水。在本發明之一實施例中,以逆滲透(RO)純水為較佳。
萃取之pH可為約6至約11,較佳約6.5至約8.5。可將食品級氫氧化鈉或氫氧化鉀或其他適宜食品級鹼添加至水,以視情況調整萃取之pH。在約1℃至約100℃,較佳約15℃至約65℃,更佳約20℃至約35℃之溫度下進行蛋白質之溶解,較佳地伴有攪拌以減少溶解時間(通常為約1至約60分鐘)。萃取溫度應使得豆類蛋白質源含於水中之漿液的黏度不顯著損及混合或可泵送性。在本發明之一實施例中,較佳實現溶解以實質上自豆類蛋白質源按實際可行情況萃取儘可能多的蛋白質,從而提供總體高產品產率。
當以連續操作方式進行時,自豆類蛋白質源萃取蛋白質係以與進行自豆類蛋白質源連續萃取蛋白質一致的任何方法進行。在一個實施例中,豆類蛋白質源係連續地與水混合及讓該混合物通過管道或導管,其長度及流速所達成之滯留時間足以按照本文所述之參數實現所要求萃取。
在溶解步驟期間,水中豆類蛋白質源之濃度可廣泛地改變。典型濃度值為約5至約20% w/v。
該蛋白質萃取步驟具有溶解可能存在於豆類蛋白質源中的脂肪之額外效應,此會導致脂肪存在於水相中。
來自萃取步驟之蛋白質溶液一般具有約5至約50g/L,較佳約10
至約50g/L之蛋白質濃度。
該水可包含抗氧化劑。該抗氧化劑可為任何習知的抗氧化劑,諸如亞硫酸鈉或抗壞血酸。抗氧化劑的用量可在溶液之約0.01至約1重量%之間變化,較佳約0.05重量%。該抗氧化劑係用於抑制蛋白質溶液中任何酚類物質之氧化。
來自萃取步驟之水相接著可以任何習知方法(諸如藉由使用傾析離心機)與殘留豆類蛋白質源塊體分離。較佳地,較微細的殘留豆類蛋白質源材料留在豆類蛋白質溶液中,但若需要的話,則此等較微細固體可藉由盤式離心及/或過濾除去。該分離步驟可在於約1℃至約100℃,較佳約15℃至約65℃,更佳約20℃至約35℃範圍內的任何溫度下進行。該分離步驟之溫度應使得豆類蛋白質源含於水中之漿液的黏度不會顯著妨礙該分離步驟。所分離出的殘留豆類蛋白質源材料可經乾燥以供處置或經進一步處理,以回收澱粉及/或殘留蛋白質。可藉以新鮮的水再萃取所分離出的殘留豆類蛋白質源來回收殘留蛋白質,且所獲得的蛋白質溶液在澄清後與初始蛋白質溶液組合用於如下所述之進一步處理。亦可使用逆流萃取程序。所分離出的殘留豆類蛋白質源可替代性地藉由任何其他習知程序處理來回收殘留蛋白質。
該豆類蛋白質水溶液可經消泡劑(諸如任何適宜之食品級非聚矽氧基消泡劑)處理,以減小進一步處理時所形成發泡體的體積。消泡劑的用量一般大於約0.0003% w/v。或者,可在萃取步驟中添加所述量的消泡劑。
若需要或有所要求,則可使所分離出的豆類蛋白質水溶液進行脫脂操作。所分離出的豆類蛋白質水溶液之脫脂可藉由任何習知程序達成。
該豆類蛋白質水溶液可經吸附劑(諸如顆粒活性碳)處理,以移除顏色及/或氣味化合物。可在任何習知的條件下,一般在分離之蛋白
質水溶液的環境溫度下進行該吸附劑處理。
接著藉由添加任何適宜的食品級酸(諸如鹽酸或磷酸)將豆類蛋白質溶液的pH調整至約1.5至約3.4,較佳而言約2.0至約3.0的值。豆類蛋白質之等電沈澱通常在約pH 4.5下進行。在本發明之方法中,將pH調整至較低值,較大部分的蛋白質,較佳顯著部分的蛋白質,諸如約35重量%或更多,較佳約60重量%或更多,更佳約80重量%或更多蛋白質可溶解在酸化溶液中。殘留的蛋白質包含於所謂的酸不溶性固體材料中,以任何習知方法,諸如使用圓盤疊式離心機,將其從酸化豆類蛋白質溶液去除,且進一步如下所述進行處理。調整pH可在任何習知溫度下進行,且在本發明之一個實施例中,較佳地,豆類蛋白質溶液之用於pH之調整的溫度為20℃至35℃。若需要,則可在上述酸化步驟之前用水稀釋豆類蛋白質溶液。
若需要或有所要求,則可進一步在進一步的處理之前使酸化蛋白質溶液的pH減小。酸化蛋白質溶液之經調整的pH仍應在約1.5至約3.4,較佳約2.0至約3.0範圍內。
該酸化豆類蛋白質水溶液可進行加熱處理以使存在於在萃取步驟期間自豆類蛋白質源材料萃取所得之溶液中的熱不穩定抗營養因子(諸如胰蛋白酶抑制劑)失去活性。該加熱步驟亦提供減少微生物載量的額外益處。一般而言,將該蛋白質溶液加熱至約70℃至約160℃,較佳約80℃至約120℃,更佳約85℃至約95℃之溫度,維持約10秒至約60分鐘,較佳約10秒至約5分鐘,更佳約30秒至約5分鐘。接著,可將經加熱處理之酸化豆類蛋白質溶液冷卻至約2℃至約65℃,較佳約50℃至約60℃之溫度,以備進行如下所述之進一步處理。
可直接乾燥所得的酸化豆類蛋白質水溶液,以產生豆類蛋白質產品。為提供具有低純度水平的豆類蛋白質產品,諸如豆類蛋白質離析物,酸化豆類蛋白質水溶液可在乾燥之前按以下所述之方式處理。
據信,如下所述之進一步處理亦對產品的味道具有有益效果。
該酸化豆類蛋白質水溶液可經濃縮以提供具有約50至約300g/L,較佳約100至約200g/L之蛋白質濃度之濃縮豆類蛋白質溶液。
可利用與分批或連續操作相容之任何習知的方式進行濃縮步驟,諸如藉由應用任何習知的選擇性膜技術,諸如超過濾及透濾,利用諸如中空纖維膜或螺旋纏繞膜之膜,考慮到不同膜材料及組態,其具有諸如約1,000至約1,000,000道爾頓,較佳約1,000至約100,000道爾頓之適宜截止分子量,且就連續操作而言,調整尺寸,以在蛋白質水溶液通過膜時容許所要求的濃縮程度。
眾所周知,超過濾及類似的選擇性膜技術容許低分子量物質經由其通過,同時避免較高分子量物質通過。低分子量物質包括從源材料萃取得的低分子量材料,諸如碳水化合物、顏料、低分子量蛋白質及抗營養因子(諸如胰蛋白酶抑制劑,其自身為低分子量蛋白質)。考慮到不同膜材料及組態,通常選擇膜之截止分子量,以確保溶液中保留顯著比例的蛋白質,同時容許污染物通過。
經濃縮之豆類蛋白質溶液可接著進行使用水之透濾步驟。該透濾用水之pH較佳係與進行透濾之蛋白質溶液之pH相等。可使用約1至約40份體積之透濾溶液,較佳約2至約25份體積之透濾溶液進行該透濾。在透濾操作中,其他量的污染物係藉由與滲透物一起通過膜而自豆類蛋白質水溶液移除。此使得蛋白質水溶液純化及亦可降低其黏度。可進行透濾操作,直到在滲透物中不存在顯著其他數量的污染物或可見的顏色或直到已經充分純化滯留物,從而在乾燥時,以提供具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質離析物。可使用如用於濃縮步驟之相同膜進行此透濾。然而,若需要,考慮到不同膜材料及組態,可使用具有不同截止分子量之分離膜,諸如具有在約1,000至約1,000,000道爾頓,較佳約1,000至約100,000道爾頓
範圍內之截止分子量之膜進行該透濾步驟。
或者,可對濃縮之前的酸化蛋白質水溶液或經部分濃縮之酸化蛋白質水溶液應用該透濾步驟。亦可在濃縮處理期間之多個點應用透濾。當透濾在濃縮之前應用或應用至經部分濃縮之溶液時,可接著另外濃縮所得的透濾溶液。藉由在濃縮蛋白質溶液時透濾多次所實現之黏度降低可允許達成更高的最終完全濃縮的蛋白質濃度。此使得待乾燥之物質的體積減小。
本文中可以使隨後回收的豆類蛋白質產品包含小於約90重量%之蛋白質(N x 6.25)d.b.,諸如至少約60重量%之蛋白質(N x 6.25)d.b.的方式進行濃縮步驟及透濾步驟。藉由部分濃縮及/或部分透濾該豆類蛋白質水溶液,僅可部分移除污染物。可接著乾燥此蛋白質溶液以提供具有較低純度水平之豆類蛋白質產品。
抗氧化劑可能於至少一部分透濾步驟期間存在於透濾用水中。抗氧化劑可為任何習知的抗氧化劑,諸如亞硫酸鈉或抗壞血酸。透濾用水中之抗氧化劑的用量取決於所用物質,且可能從約0.01變化至約1重量%,較佳約0.05重量%。該抗氧化劑可用來抑制存在於豆類蛋白質溶液中的任何酚類物質之氧化。
該視情況選用的濃縮步驟及視情況選用的透濾步驟可在一般約2℃至約65℃,較佳約50℃至約60℃之任何習知溫度下進行且歷時可實現所需要濃縮及透濾程度之時段。所採用的溫度及其他條件在某種程度上取決於用於進行膜處理之膜設備、溶液之所需蛋白質濃度及將污染物移至透析物之效率。
如前所述,豆類包含抗營養胰蛋白酶抑制劑。可藉由操控各種製程變數來控制最終豆類蛋白質產品中胰蛋白酶抑制劑的活性水平。
如上所述,該酸化豆類蛋白質水溶液之加熱處理可用於使熱不穩定胰蛋白酶抑制劑失去活性。亦可加熱處理經部分濃縮或完全濃縮
之酸化豆類蛋白質溶液,以使熱不穩定胰蛋白酶抑制劑失去活性。當對經部分濃縮之酸化豆類蛋白質溶液應用加熱處理時,接著可另外濃縮所得經加熱處理之溶液。
此外,可以有利於除去滲透物中之胰蛋白酶抑制劑以及其他污染物之方式操作該濃縮及/或透濾步驟。藉由使用具有更大孔徑諸如30,000至1,000,000Da之膜,在高溫諸如約30℃至約65℃,較佳約50℃至約60℃下操作膜及使用更大體積諸如10至40體積之透濾介質,來促進除去胰蛋白酶抑制劑。
相比在諸如約3至約3.4之較高pH下處理溶液,在諸如約1.5至約3之較低pH下對豆類蛋白質溶液進行酸化及膜處理可降低胰蛋白酶抑制劑活性。當在pH範圍之下端下濃縮及/或透濾蛋白質溶液時,可能需要在乾燥之前提高溶液的pH。可添加任何習知的食品級鹼(諸如氫氧化鈉)使得經濃縮及/或透濾之蛋白質溶液的pH增加至所需值(例如,約3之pH)。
此外,可藉由使豆類材料暴露於可破壞或重排抑制劑之雙硫鍵之還原劑來降低胰蛋白酶抑制劑活性。適宜的還原劑包括(但不限於)亞硫酸鈉、半胱胺酸及N-乙醯基半胱胺酸。
可在整個處理之不同階段添加此等還原劑。還原劑可在萃取步驟中與豆類蛋白質源材料一起添加,可在移除殘留豆類蛋白質源材料之後添加至豆類蛋白質水溶液,可在乾燥之前添加至經透濾之滯留物或可與乾燥豆類蛋白質產品乾式摻合。還原劑之添加可與如上所述之加熱處理步驟及膜處理步驟組合。
假若需要在蛋白質溶液中保留活性胰蛋白酶抑制劑,此可藉由取消加熱處理步驟或減少其強度、不利用還原劑、在pH範圍之較上端下(諸如,約3至約3.4)操作視情況選用的濃縮及視情況選用的透濾步驟、利用具有更小孔徑的濃縮及透濾膜、在較低溫度下操作膜及應
用較少體積的透濾介質而達成。
若需要或有所要求,則可使該視情況經濃縮且視情況經透濾之蛋白質溶液進行進一步之脫脂操作。該視情況經濃縮且視情況經透濾之蛋白質溶液之脫脂可藉由任何習知的程序進行。
可使用吸附劑(諸如顆粒活性碳)處理視情況經濃縮且視情況經透濾之蛋白質水溶液,以除去顏色及/或氣味化合物。可在任何習知的條件下,一般在蛋白質溶液之環境溫度下進行該吸附劑處理。
該視情況經濃縮且視情況經透濾之豆類蛋白質水溶液可在乾燥或進一步的處理之前進行巴氏滅菌。可在任何習知的巴氏滅菌條件下進行此巴氏滅菌。一般而言,將該視情況經濃縮且視情況經透濾之豆類蛋白質溶液加熱至約55℃至約75℃之溫度維持約15秒至約60分鐘。接著可使該經巴氏滅菌之豆類蛋白質溶液冷卻,較佳使其冷卻至約25℃至約40℃之溫度。
該視情況經濃縮、視情況經透濾且視情況經巴氏滅菌之豆類蛋白質溶液接著可以任何習知方法(諸如噴霧乾燥或冷凍乾燥)進行乾燥,以提供豆類蛋白質產品。或者,可在乾燥之前將該視情況經濃縮、視情況經透濾且視情況經巴氏滅菌之豆類蛋白質溶液的pH調整至小於約8.0,較佳約6至約8,更佳約6.5至約7.5的值。可以任何習知方法(諸如添加氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液)增加pH。假若蛋白質溶液在調整pH之前不進行巴氏滅菌,則可在調整pH之後使用上述條件進行巴氏滅菌。
乾燥豆類蛋白質產品(在乾燥之前進行或不進行pH調整步驟下製得)具有大於約60重量%之蛋白質含量。較佳地,該乾燥豆類蛋白質產品為具有超過約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之離析物。
根據本發明之另一態樣,在將豆類蛋白質溶液的pH調整至約1.5至約3.4,較佳約2.0至約3.0之範圍之後所獲得的酸不溶性固體材料可
視情況用RO水稀釋,接著可經乾燥以形成具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。或者,可在視情況乾燥之前以任何習知的方法(諸如添加氫氧化鈉溶液或氫氧化鉀溶液)使視情況經稀釋之酸不溶性固體材料的pH增加至小於約8.0,較佳約6.0至約8.0,更佳約6.5至約7.5的值,以形成具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。較佳地,洗滌該酸不溶性固體材料,以去除污染物及改良產物純度及味道。該酸不溶性固體材料可藉由使固體懸浮於在約1及約20體積之間,較佳約1至約10體積之具有在約1.5至約3.4範圍內且較佳與該酸不溶性固體材料之pH匹配之pH的RO水中而洗滌。可在任何習知溫度(諸如約20℃至約35℃)下進行該洗滌步驟。將該酸不溶性固體材料與洗滌溶液混合任何習知長度的時間,較佳約15分鐘或更少。可接著以任何習知方法(諸如藉由使用圓盤疊式離心機之離心)使經洗滌之酸不溶性固體材料與酸洗滌溶液分離。可將該酸洗滌溶液添加至酸化蛋白質溶液,以進行如上所述之進一步的處理。經洗滌之酸不溶性固體材料可視情況用RO水稀釋,接著可以任何習知方法(諸如噴霧乾燥或冷凍乾燥)進行乾燥以提供具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。或者,可在視情況乾燥之前以任何習知方法(諸如添加氫氧化鈉溶液或氫氧化鉀溶液)將該視情況經稀釋之已洗滌的酸不溶性固體材料之pH調整至小於約8.0,較佳約6.0至約8.0,更佳約6.5至約7.5的值。與處理酸溶性蛋白質部分所製得的產品相比,衍生自該酸不溶性固體材料的產品之味道中可一般具有更大的豌豆/蔬菜特徵。然而,衍生自酸不溶性固體材料的產品之味道使得該等產品適合用於食品及飲料飲用中。
可在視情況選用的乾燥步驟之前對視情況經稀釋之酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之已洗滌的酸不溶性固體材料採用巴氏滅菌步
驟。此巴氏滅菌可在任何習知巴氏滅菌條件下進行。一般而言,將該視情況經稀釋之酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之已洗滌的酸不溶性固體材料加熱至約55℃至約75℃之溫度維持約15秒至約60分鐘。接著,可使該經巴氏滅菌、視情況經稀釋之酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之已洗滌的酸不溶性固體材料冷卻,較佳使其冷卻至約25℃至約40℃之溫度。假若該視情況經稀釋之酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之已洗滌的酸不溶性固體材料在調整pH之前不進行巴氏滅菌,則該巴氏滅菌可在調整pH之後使用上述條件下進行。
在本發明之另一態樣中,進行酸化豆類蛋白質水溶液之膜處理,以使較高分子量蛋白質與較低分子量蛋白質分離,其獲得在不使用鈣鹽下製備之酸溶性豆類蛋白質產品,從而提供實質上澄清的豆類蛋白質水溶液。當採用此替代製程時,用經選擇以允許較低分子量蛋白質傳輸至具有污染物之滲透物的濃縮及透濾膜之截止分子量濃縮及/或透濾該酸化豆類蛋白質溶液。此等濃縮及透濾步驟可以與分批或連續操作一致的任何習知方法實現,諸如採用任何習知的選擇性膜技術,諸如微過濾或超過濾,考慮到不同膜材料及組態,使用就微過濾而言具有諸如約0.05至約0.1μm,較佳約0.08至約0.1μm及就超過濾而言具有約10,000至約1,000,000道爾頓,較佳約100,000至約1,000,000道爾頓之適宜截止分子量之膜(諸如中空纖維膜或螺旋纏繞膜),且就連續操作而言,調整尺寸,以在酸化蛋白質水溶液通過該等膜時准許所需濃縮程度。在濃縮步驟中,將酸化豆類蛋白質水溶液濃縮至約50至約300g/L,較佳約100至約200g/L之蛋白質濃度。該酸化豆類蛋白質溶液或部分濃縮之酸化豆類蛋白質溶液或濃縮之酸化豆類蛋白質溶液可用較佳等於所透濾蛋白質溶液之pH之pH的水透濾。可使用約1至約40份體積之透濾溶液,較佳約2至約25份體積之透濾溶液進行該透濾。當對酸化豆類蛋白質溶液或部分濃縮之豆類蛋白質溶
液進行透濾時,可接著另外濃縮經透濾之溶液。該等濃縮及透濾步驟可在任何習知溫度,一般約2℃至約65℃,較佳約50℃至約60℃下進行。較低分子量蛋白質與其他小分子污染物一起捕獲於在膜製程之滲透物中。
接著,於隨後藉由膜處理(諸如超過濾)濃縮蛋白質溶液(步驟1滲透物)至約10至約300g/L,較佳約100至約200g/L之蛋白質濃度及視情況透濾(其可對在完成濃縮之前或之後之蛋白質溶液進行),將較低分子量蛋白質與污染物分離。使用較佳具有與蛋白質溶液相同或相比其更低的pH之水或酸化水之透濾溶液進行該視情況選用的透濾步驟。使用如上述操作的具有諸如約1,000至約100,000道爾頓,較佳1,000至約10,000道爾頓之較低截止分子量之膜進行該等濃縮及透濾步驟。
可以使得所回收的較低分子量豆類蛋白質產品包含小於約90重量%蛋白質(N x 6.25)d.b.,諸如(例如)至少約60重量%蛋白質(N x 6.25)d.b.的方式進行此第二膜處理步驟。藉由部分濃縮及/或部分透濾該較低分子量豆類蛋白質水溶液,僅可部分移除污染物。可接著乾燥此蛋白質溶液,以提供具有較低純度水平之豆類蛋白質產品。該豆類蛋白質產品係在不使用鹽下製得,具有高溶解性且能夠在酸性條件下產生實質上澄清的蛋白質溶液。
經濃縮且視情況經透濾之較低分子量蛋白質溶液或膜分餾製程之滯留物(其包含較高分子量蛋白質)可經處理以降低如上所述之胰蛋白酶抑制劑之活性。經濃縮且視情況經透濾之較低分子量蛋白質溶液或膜分餾製程之滯留物(其包含較高分子量蛋白質)可如上所述進行巴氏滅菌。
經濃縮且視情況經透濾之較低分子量蛋白質溶液接著可以任何方便方法(諸如噴霧乾燥或冷凍乾燥)進行乾燥,以提供豆類蛋白質產
品。該乾燥豆類蛋白質產品具有大於約60重量% d.b.之蛋白質含量。較佳地,該乾燥豆類蛋白質產品為具有超過約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之離析物。
可從包含較高分子量蛋白質之膜分餾製程之滯留物獲得其他產品。可以在使用食品級鹼將蛋白質溶液之pH調整至小於約8.0,較佳約6.0至約8.0,更佳約6.5至約7.5之值或不調整pH下藉由任何習知方法乾燥此蛋白質溶液。上述巴氏滅菌步驟可在pH調整步驟之後應用於膜分餾製程之滯留物。該乾燥豆類蛋白質產品具有大於約60重量% d.b.之蛋白質含量,較佳地,該乾燥豆類蛋白質產品為具有超過約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之離析物。從膜分餾製程之滯留物獲得的產品之豌豆/蔬菜味道特徵極小或實質上沒有。
現參考圖1,其顯示根據本發明一態樣之製程10,豆類蛋白質源在12用pH為約6至約11,較佳約6.0至約8.5之水進行首次萃取。接著在14去除殘留豆類蛋白質源使得蛋白質萃取溶液完全或部分澄清化,而在16收集所去除的固體。接著在20將蛋白質萃取溶液18之pH調整至約1.5至約3.4,較佳約2.0至約3.0。在22藉由離心去除酸不溶性材料,從而在24獲得酸不溶性固體材料及在26獲得的酸化蛋白質溶液。
可在28視情況用具有與固體相同,亦即,約1.5至約3.4,較佳約2.0至約3.0之pH之水洗滌所回收的酸不溶性固體材料,且可視情況將經視情況洗滌之固體34之pH調整至小於約6.0之值,接著在48乾燥以提供在50命名為810PA之具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。
或者,在36將該經視情況洗滌之固體34調整至一般約6至約8,較佳約6.5至約7.5之pH,及在38乾燥,以提供在40命名為810PN之具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。
來自視情況選用的洗滌步驟28之洗滌離心濾液30可添加至酸化
蛋白質溶液26。可在60減小可溶性蛋白質溶液之pH,使其在約1.5至約3.4,較佳約2.0至約3.0範圍內。接著使可溶性蛋白質溶液在62進行濃縮及視情況選用的透濾。可視情況將來自濃縮及視情況選用的透濾步驟之滯留物64之pH調整至小於約6.0之值,接著在78乾燥以提供在80命名為810A之具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。較佳地,該810A產品為具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之離析物。或者,在66將來自濃縮及視情況選用的透濾步驟之滯留物64調整至一般約6至約8,較佳約6.5至約7.5之pH,且接著在68乾燥以提供在70命名為810N之具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。較佳地,該810N產品為具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之離析物。
810A及810PA蛋白質產品可單獨使用或可在84以乾式摻合方式組合。或者,可使視情況經洗滌之酸不溶性固體材料混合,在46視情況用濃縮/視情況選用的透濾滯留物調整至小於約6.0之pH,在76視情況調整至小於約6.0之pH,及乾燥混合物86,以形成經組合之810A/810PA產品。810N及810PN蛋白質產品可單獨使用或可在84以乾式摻合方式組合。或者,可使在36調整至約6.0至約8.0,較佳約6.5至約7.5之pH之視情況經洗滌之酸不溶性固體材料與在66調整至約6.0至約8.0,較佳約6.5至約7.5之pH之濃縮/視情況選用的透濾滯留物混合,及乾燥混合物82,以形成經組合之810N/810PN產品。
現參考圖2,其顯示根據本發明另一態樣之製程11,豆類蛋白質源在12用pH為約6至約11,較佳約6.0至約8.5之水進行首次萃取。接著在14去除殘留豆類蛋白質源使得蛋白質萃取溶液完全或部分澄清化,從而在16收集所去除的固體。接著在20將蛋白質萃取溶液18之pH調整至約1.5至約3.4,較佳約2.0至約3.0。在22以離心去除該酸不溶性材料,從而在24獲得酸不溶性固體材料及在26獲得酸化蛋白質溶
液。
可在28視情況用具有與固體相同,亦即,約1.5至約3.4,較佳約2.0至約3.0之pH之水洗滌所回收的酸不溶性固體材料24,及可在46視情況將視情況經洗滌之酸不溶性固體材料34調整至小於約6.0之pH,接著在48乾燥以提供在50命名為810PA之具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。
或者,在36將視情況經洗滌之酸不溶性固體材料34調整至一般約6.0至約8.0,較佳約6.5至約7.5之pH,及在38乾燥,以提供在40命名為810PN之具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。
來自視情況選用的洗滌步驟之洗滌離心濾液30可添加至酸化蛋白質溶液26。可在60降低可溶性蛋白質之溶液之pH,使其在約1.5至約3.4,較佳約2.0至約3.0範圍內。接著在61使不溶性蛋白質溶液進行微過濾或超過濾膜處理(濃縮及/或透濾),以使較低分子量蛋白質(滲透物91)與較高分子量蛋白質(滯留物63)分離。
接著在93以使用較小孔徑膜之濃縮及視情況選用的透濾純化從蛋白質分餾步驟91獲得的滲透物,以使蛋白質與污染物分離。接著在97乾燥從濃縮及視情況選用的透濾步驟95獲得的滯留物,以提供在99命名為816A,在低pH溶液中具有改良的澄清度,具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品,較佳地,該產品為具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之離析物。
可在75視情況將從蛋白質分餾步驟63獲得之滯留物調整至小於約6.0之pH,接著在77乾燥,以提供在79命名為816BA之具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。較佳地,該產品為具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之離析物。或者,可在65將從蛋白質分餾步驟63獲得之滯留物調整至一般約
6至約8,較佳約6.5至約7.5之pH,且接著在67乾燥,以提供在69命名為816BN之具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。較佳地,該產品為具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之離析物。
816BA及810PA蛋白質產品可單獨使用或可在83以乾式摻合組合。或者,可使視情況經洗滌且在46視情況調整至小於約6.0之pH之酸不溶性固體材料與在75視情況調整至小於約6.0之pH之蛋白質分餾步驟滯留物混合,及乾燥混合物85,以形成經組合之816BA/810PA產品。816BN及810PN蛋白質產品可單獨使用或可在83以乾式摻合方式組合。或者,可使經在36調整至約6.0至約8.0,較佳約6.5至約7.5之pH之經pH調整之視情況洗滌之酸不溶性固體材料與在65調整至約6.0至約8.0,較佳約6.5至約7.5之pH之蛋白質分餾步驟滯留物混合,及乾燥混合物81,以形成經組合之816BN/810PN產品。
實例
實例1
本實例根據本發明方法之一實施例描述豆類蛋白質產品之製法。
於環境溫度下,將36kg黃豌豆蛋白質濃縮物添加至600L逆滲透純水中,及攪拌10分鐘提供蛋白質水溶液。以使用傾析離心機之離心去除一部分懸浮固體,及收集得「a」kg之具有約「b」重量%蛋白質含量之蛋白質溶液。接著添加HCl溶液(經等體積的水稀釋之濃(22BÉ)HCl)使該蛋白質溶液之pH減小至為「c」之目標pH,及使用圓盤疊式離心機將該溶液離心,以提供「d」L之具有「e」之pH之酸化蛋白質溶液及「f」kg酸不溶性固體材料。
加熱具有「g」重量%蛋白質含量之酸化蛋白質溶液,接著在具有「j」道爾頓之截止分子量之聚醚碸膜上濃縮使其體積從「h」L減
小至「i」L,於約「k」℃之溫度下操作。接著在相同膜上用「m」L RO水(「n」)透濾具有「1」重量%蛋白質含量之蛋白質溶液,其中透濾操作在約「o」℃下進行。接著將具有「p」重量%蛋白質含量之經透濾蛋白質溶液進一步濃縮至「q」重量%之蛋白質含量。獲得「r」之經透濾且濃縮之蛋白質溶液,且經由使用傾析離心機的分離步驟測定獲得的蛋白質溶液中蛋白質之約「s」%之產率。用經HCl溶液調整至pH 2.7之「u」L水稀釋「t」kg經透濾且濃縮之蛋白質溶液。噴霧乾燥稀釋溶液,以獲得發現具有「v」%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為「w」YP810A。用「y」L RO水稀釋「x」之經透濾且濃縮之蛋白質溶液,及使用NaOH/KOH溶液將樣品之pH提升至「z」。噴霧乾燥該中和溶液,以獲得發現具有「aa」%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為「w」YP810N。
由從圓盤疊式離心機收集的酸不溶性固體材料具有「ab」重量%之蛋白質含量。使「ac」kg部分之酸不溶性固體材料與「ad」L「ae」的RO水在環境溫度下混合30分鐘,接著使用「af」離心機離心。在水洗滌步驟之後收集「ag」kg具有「ah」重量%蛋白質含量之經洗滌之酸不溶性固體材料,且經由使用傾析離心機的分離步驟測定獲得的蛋白質溶液中蛋白質之約「ai」%之產率。接著使該經洗滌之酸不溶性固體材料與「aj」L RO水混合,且在約「ak」℃下進行巴氏滅菌約「al」分鐘。藉由添加HCl溶液將「am」kg之經巴氏滅菌、經洗滌之酸不溶性固體材料之pH調整至「an」,接著噴霧乾燥以獲得發現具有「ao」(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為「w」YP810PA。將「ap」kg之經巴氏滅菌、經洗滌之酸不溶性固體材料與「aq」L RO水混合,接著使用NaOH/KOH溶液將pH提升至「ar」,及噴霧乾燥樣品以獲得發現具有「as」%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為「w」YP810PN。下表1中闡明參數
「a」至「as」:
N/A=不適用
實例2
本實例進一步根據本發明方法之另一實施例描述豆類蛋白質產品之製法。
在環境溫度下將「a」kg「b」添加至「c」L逆滲透純水及攪拌10分鐘,可提供蛋白質水溶液。以使用傾析離心機之離心去除一部分懸浮固體,以產生「d」kg之具有約「e」重量%蛋白質含量之蛋白質溶液。接著添加HCl溶液(經等體積的水稀釋之濃(22BÉ)HCl)使蛋白質溶液之pH減小至「f」之目標pH,及使用圓盤疊式離心機將該溶液離心,提供「g」L之具有「h」之pH之酸化蛋白質溶液及「i」kg酸不溶性固體材料。
將「j」kg酸不溶性固體材料與「k」L pH為「f」之RO水混合,且接著使用「l」離心機將樣品離心,提供「m」L具有pH「n」之酸化洗滌溶液及「o」kg經洗滌之酸不溶性固體材料。將「p」L酸化蛋白質溶液與「q」L酸化洗滌溶液組合及加熱,提供具有「r」之pH及「s」重量%之蛋白質含量之膜進料。在具有「v」之道爾頓之截止分子量之聚醚碸膜上濃縮使該膜進料之體積從「t」L減小至「u」L,於約「w」℃之溫度下操作。接著在相同膜上用「y」L RO水「z」透濾具有「x」重量%蛋白質含量之蛋白質溶液,其中透濾操作在約「aa」℃下進行。接著將具有「ab」重量%蛋白質含量之經透濾之蛋白質溶液進一步濃縮至「ac」重量%之蛋白質含量。獲得「ad」之經透濾且濃縮之蛋白質溶液,且經由使用傾析離心
機的分離步驟測定獲得的蛋白質溶液中蛋白質之約「ae」%之產率。接著用「af」L RO水稀釋該經透濾且濃縮之蛋白質溶液,接著在約「ag」℃下巴氏滅菌「ah」秒。用「ak」L水稀釋「ai」之「aj」經透濾且濃縮之蛋白質溶液,且接著噴霧乾燥,獲得發現具有「al」%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為「am」「an」。用「ap」L RO水稀釋「ao」之「aj」經透濾且濃縮之蛋白質溶液,及使用「ar」溶液將樣品之pH提升至「aq」。噴霧乾燥該中和溶液,以得到發現具有「as」%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為「am」「at」。
在約「av」℃下對「au」酸不溶性固體材料巴氏滅菌約「aw」秒。收集「ax」kg之具有「az」重量%蛋白質含量之「ay」酸不溶性固體材料,且經由使用傾析離心機的分離步驟測定獲得的蛋白質溶液中蛋白質之約「ba」%之產率。將「bb」kg之「ay」酸不溶性固體材料與「bc」L RO水組合,及使用「be」溶液將pH提升至「bd」及「bf」乾燥樣品,以獲得發現具有「bg」%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為「am」「bh」。
下表2闡明參數「a」至「bh」:
N/A=不適用,ND=未測定,NR=未記錄
實例3
本實例進一步根據本發明方法之另一實施例描述豆類蛋白質產品之製法。
於環境溫度下,將36kg黃豌豆蛋白質濃縮物添加至600L逆滲透純水中,及攪拌10分鐘以提供蛋白質水溶液。以使用傾析離心機之離心去除一部分懸浮固體,以產生608.59kg具有約2.54重量%蛋白質含量之蛋白質溶液。接著添加HCl溶液(經等體積的水稀釋之濃(22
BÉ)HCl)使該蛋白質溶液之pH減小至為3之目標pH,及使用圓盤疊式離心機將該溶液離心,提供508L具有約3.13之pH之酸化蛋白質溶液及79.30kg酸不溶性固體材料。
將79.30kg酸不溶性固體材料與158.60L pH為3之RO水混合,且接著使用圓盤疊式離心機將樣品離心,提供201L具有3.00之pH之酸化洗滌溶液及29.98kg之經洗滌之酸不溶性固體材料。
將500L酸化蛋白質溶液與200L酸化洗滌溶液組合及加熱,提供具有3.10之pH及1.75重量%之蛋白質含量之膜進料。在具有100,000道爾頓之截止分子量之聚醚碸膜上濃縮使膜進料之體積從700L減小至212L,於約50℃之溫度下操作。接著在相同膜上用318L pH為3之RO水透濾具有5.34重量%蛋白質含量之蛋白質溶液,其中透濾操作在約51℃下進行。在此時間點,棄去106L滯留物以減少處理時間。在相同膜上用額外901L pH為3之RO水透濾殘留的106L滯留物,其中透濾操作在約51℃下進行。接著將具有5.04重量%蛋白質含量之經透濾之蛋白質溶液進一步濃縮至8.56重量%之蛋白質含量。獲得47kg之經透濾且濃縮之蛋白質溶液,且經由使用傾析離心機的分離步驟測定獲得的蛋白質溶液中蛋白質之約26%之產率。接著用20.5L RO水稀釋該經透濾且濃縮之蛋白質溶液,接著在約73℃下巴氏滅菌16秒。將足量的KOH/NaOH溶液添加至70.44kg之經巴氏滅菌、經透濾且濃縮之蛋白質溶液,以將pH調整至7.02。噴霧乾燥該中和溶液,以獲得發現具有90.08%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為YP27-E13-15A YP810N。
經洗滌之酸不溶性固體材料在約72℃下巴氏滅菌約16秒。所收集的經巴氏滅菌之酸不溶性固體材料具有6.41重量%之蛋白質含量。將29.98kg經巴氏滅菌之酸不溶性固體材料與3.28L RO水及足量NaOH/KOH溶液組合,以將pH調整至5.54。接著噴霧乾燥樣品以獲得
發現具有75.15%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為YP27-E13-15A YP810PA。
實例4
本實例進一步根據本發明方法之另一實施例描述豆類蛋白質產品之製法。
於環境溫度下,將72kg黃豌豆蛋白質濃縮物添加至1200L逆滲透純水中,及攪拌10分鐘以提供蛋白質水溶液。藉由使用傾析離心機之離心作用去除一部分懸浮固體,及收集1190.48kg具有約2.57%重量%蛋白質含量之蛋白質溶液。接著添加HCl溶液(經等體積的水稀釋之濃(22BÉ)HCl)使該蛋白質溶液之pH降低至3之目標pH,及使用圓盤疊式離心機將該溶液離心,提供1020L具有約3.02之pH之酸化蛋白質溶液。
接著將該酸化蛋白質溶液之pH調整至2之目標及加熱,提供具有2.08之pH及1.50重量%之蛋白質含量之膜進料。在具有100,00道爾頓之截止分子量之聚醚碸膜上濃縮,使此溶液之體積從1040L減小至285L,於約50℃之溫度下操作。接著在相同膜上用2850L pH為2之RO水透濾具有5.28重量%蛋白質含量之蛋白質溶液,其中透濾操作在約51℃下進行。接著將具有4.99重量%蛋白質含量之經透濾之蛋白質溶液進一步濃縮至9.70重量%之蛋白質含量。獲得133L經透濾且濃縮之蛋白質溶液,且經由使用傾析離心機的分離步驟測定獲得的蛋白質溶液中蛋白質之約42.2%之產率。用40L RO水稀釋133L經透濾且濃縮之蛋白質溶液,且接著在約73℃下巴氏滅菌16秒。接著進一步用31.71L水稀釋173L經巴氏滅菌之蛋白質溶液,及使用NaOH溶液將樣品之pH提升至7.05。接著噴霧乾燥該中和溶液,以獲得發現具有88.85%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為YP27-E26-15A YP810N。
實例5
本實例說明本發明一實施例之具有經改良澄清度之酸性豆類蛋白質產品之製法。
將36kg豌豆蛋白質濃縮物與600L逆滲透純(RO)水組合,及在環境溫度下攪拌該混合物10分鐘。以使用傾析離心機之離心去除一部分懸浮固體,及收集「a」kg之具有約「b」重量%蛋白質含量之蛋白質溶液。接著添加HCl溶液(經等體積的水稀釋之濃(22BÉ)HCl)使該蛋白質溶液之pH降低至為「c」之目標pH,及使用圓盤疊式離心機將該溶液離心,提供「d」L具有約「e」之pH之酸化蛋白質溶液及「f」kg酸不溶性固體材料。
用「i」L pH為2之RO水稀釋「g」L具有「h」重量%蛋白質含量之酸化蛋白質溶液,加熱至約50℃且接著使用具有0.08μm孔徑之聚偏二氟乙烯(PVDF)微過濾膜濃縮至「j」L,於約「k」℃之溫度下操作。與濃縮步驟同步地,用額外「l」L pH為2之RO水透濾該溶液。接著使用具有1,000道爾頓孔徑之PES超過濾膜將「m」L具有「n」重量%蛋白質濃度之微過濾/透濾滲透物濃縮至「o」kg,在約「p」℃之溫度下操作。經濃縮之蛋白質溶液具有「q」重量%之蛋白質含量。此經由使用傾析離心機的分離步驟測定獲得的蛋白質溶液中蛋白質之約「r」%之產率。該經濃縮之蛋白質溶液在約「s」℃下巴氏滅菌「t」秒,且接著噴霧乾燥「u」kg之經巴氏滅菌、經濃縮之蛋白質溶液,以獲得稱為「w」YP816A之具有「v」%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之蛋白質產品。
所收集的「j」L具有「x」重量%蛋白質含量之微過濾滯留物經由使用傾析離心機的分離步驟測定獲得的蛋白質溶液中蛋白質之「y」%之產率。該經濃縮且透濾之微過濾滯留物在約「z」℃下巴氏滅菌「aa」秒。用「ac」L RO水稀釋「ab」kg之經巴氏滅菌之微過
濾滯留物及用NaOH/KOH溶液調整至pH「ad」,且接著噴霧乾燥以形成稱為「w」YP816BN之具有「ae」%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之蛋白質產品。
下表3闡明參數「a」至「ae」。
NR=未記錄
實例6
本實例依前述美國專利申請案號13/103,528、13/289,264、13/556,357及13/642,003之方法描述豆類蛋白質產品之製法。
將「a」kg「b」與「c」L在「e」下的「d」組合,且攪拌「f」分鐘。接著添加將「h」kg氯化鈣丸粒(95.5%)溶解於「i」L RO水中所製得之「g」kg氯化鈣原液,及再攪拌該混合物「j」分鐘。以使用傾析離心機之離心去除殘留固體塊,且接著將「l」kg氯化鈣丸粒(95.5%)溶解於「m」L RO水中所製得之「k」kg氯化鈣原液添加至部分澄清化的蛋白質溶液中。以圓盤疊式離心機去除微細殘留固體,以產生具有「n」重量%蛋白質含量之離心濾液。將「o」L離心濾液添加至「p」L在「q」下的RO水中,及用稀HCl將樣品之pH減小至「r」。進一步由「s」澄清化該經稀釋且酸化之離心濾液,以提供具有「t」重量%蛋白質含量之澄清的酸化蛋白質溶液。
該澄清的酸化蛋白質溶液為「u」且接著在具有「x」道爾頓之截止分子量之聚醚碸膜上濃縮使其體積從「v」L減小至「w」L,於約「y」℃之溫度操作。在此時間點,用「aa」L RO水透濾具有「z」重量%蛋白質含量之蛋白質溶液,其中透濾操作在約「ab」℃下進行。接著將該經透濾之蛋白質溶液濃縮至「ac」L,及用額外「ad」L RO水透濾,其中透濾操作在約「ae」℃下進行。接著將該具有「af」重量%蛋白質含量之經濃縮之蛋白質溶液進一步濃縮至「ag」重量%之蛋白質含量,接著用RO水稀釋至「ah」重量%之蛋白質含量以促進噴霧乾燥。回收「ai」蛋白質溶液,經稀釋及酸化之離心濾液之產率為「aj」%。在約「ak」℃下巴氏滅菌該經濃縮且透濾之蛋白質溶液「al」秒,接著乾燥以產生發現具有「am」重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量的產品。該產品命名為「an」。下表4闡明參數「a」至「an」。
表4-生產YP701之操作參數
N/A=不適用
實例7
本實例依前述美國專利申請案第13/937,266號之方法描述豆類蛋白質產品之製法。
將「a」kg「b」與「c」L「e」的「d」水組合,且攪拌「f」分鐘。添加「g」kg氯化鈣丸粒(95.5%),及再攪拌該混合物「h」分鐘。以使用傾析離心機之離心去除殘留固體塊,且接著將每「k」L RO水溶解「j」kg氯化鈣丸粒(95.5%)製得之「i」kg氯化
鈣原液添加至部分澄清化的蛋白質溶液。以圓盤疊式離心機去除微細殘留固體,以產生具有「l」重量%蛋白質含量之離心濾液。在環境溫度下將「m」L離心濾液添加至「n」L RO水中,及用稀HCl將樣品之pH減小至「o」。進一步由「p」澄清化該經稀釋且酸化之離心濾液,以提供澄清的酸化蛋白質溶液。
加熱該澄清的酸化蛋白質溶液,且接著在具有「t」道爾頓之截止分子量之聚醚碸膜上濃縮使該具有「q」重量%蛋白質含量之溶液之體積從「r」L減小至「s」L,於約「u」℃之溫度操作。在此時間點,用「w」L RO水透濾具有「v」重量%蛋白質含量之蛋白質溶液,其中透濾操作在約「x」℃下進行。接著將該經透濾之蛋白質溶液濃縮至「y」L,及用額外「z」L RO水透濾,其中透濾操作在約「aa」℃下進行。回收「ab」之具有「ac」重量%蛋白質含量之經濃縮之蛋白質溶液,經稀釋及酸化之離心濾液之產率為「ad」%。在約「ae」℃下對該經濃縮且透濾之蛋白質溶液巴氏滅菌「af」秒,接著用「ai」L RO水稀釋「ag」kg之「ah」經濃縮且透濾之蛋白質溶液。用「al」溶液將「aj」之經稀釋之樣品之pH調整至「ak」。接著噴霧乾燥「am」之經pH調整之樣品,以獲得發現具有「an」重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之產品。將產品命名為「ao」YP701N2。下表5闡明參數「a」至「ao」。
N/A=不適用NR=未記錄 ND=未測定
實例8
本實例說明商業黃豌豆蛋白質產品Propulse(Nutri-Pea,Portage la Prairie,MB)、Nutralys S85F(Roquette America,Inc.,Keokuk,IA)、Pisane C9(Cosucra Groupe Warcoing,S.A.,Belgium)、豌豆蛋白YS
85%(The Scoular Company,Minneapolis,MN(由Yantai Shuangta Food Co.,LTD,Jinling Town,Zhaoyuan City,Shandong Province,China製造)、Empro E 86(Emsland Group,Emlichheim,Germany)之蛋白質含量。此等蛋白質產品為當前可購得的純度最高之豌豆蛋白質成分。
以使用Leco氮測定器之燃燒分析測量商業樣品之蛋白質含量及以烘箱乾燥方法測量粉末之水分含量。該等樣品之基於乾重之蛋白質含量顯示於表6中。
由表6中呈現的值可看出,商業產品之蛋白質含量與衍生自本發明方法之酸化豆類蛋白質溶液之產品之蛋白質含量相似或略低。該等商業產品之蛋白質一般比衍生自在當前方法中之pH調整步驟之後所收集的酸不溶性固體材料之產品高。
實例9
本實例說明如實例2至5中所述根據本發明之態樣不使用鈣鹽下製得之豆類蛋白質產品以及某些商業豌豆蛋白質產品及如實例6及7中所述使用鈣鹽下製得之豆類蛋白質產品之蛋白質溶解度。由Morr等人之J.Food Sci.,50:1715-1718之程序之修改版本測試溶解度。
稱量足以提供0.5g蛋白質之蛋白質粉加入燒杯中,且接著添加少量的逆滲透(RO)純水,及攪拌該混合物直到形成光滑的糊劑。接著添加額外的水,以使體積達到約45ml。接著使用磁性攪拌器緩慢地攪拌燒杯之內容物60分鐘。在分散蛋白質之後立即測定pH,及用稀NaOH或HCl調整至適宜的水平(2、3、4、5、6或7)。測量pH及在60分
鐘攪拌期間定期校正。在60分鐘的攪拌之後,用RO水使樣品達到50ml的總體積,從而獲得1% w/v蛋白質分散液。以使用Leco氮測定器之燃燒分析測量該等分散液之蛋白質含量。接著在7,800g下離心該等分散液之分液10分鐘,其沈澱出不溶性物質及產生上清液。由Leco分析測量上清液之蛋白質含量及按如下之方式計算產品之溶解度:溶解度(%)=(上清液中之蛋白質%/初始分散液中之蛋白質%)×100將經計算為大於100%之值表示為100%。
各種產品在不同pH值下之蛋白質溶解度顯示於表7中。
ND=未測定
由表7中所顯示之結果可看出,藉由本發明之不同態樣形成之不同產品具有不同的溶解度曲線。由本發明之酸化蛋白質溶液形成且無中和步驟下乾燥所形成之產品(810A)在pH 2及3下具有高度溶解性但在所測試更高的pH值下具有有限溶解度。當由本發明之酸化蛋白質溶液形成之產品(810N)在乾燥之前中和時,該產品在pH 2及3下之溶解度變小。在所測試的pH範圍中,810N產品之溶解度值一般比商業豌豆蛋白質產品之溶解度值高。發現衍生自酸化步驟(810PN)之後的酸不溶性固體材料之產品在該pH範圍中之蛋白質溶解度較差。本發明之具有經改良澄清度之酸溶性蛋白質產品(816A)相比810A在更寬pH範圍(2至4)中具高溶解性。816A相比810A在介於5與7之間之pH值下亦明顯更易溶解。製備具有經改良澄清度之酸溶性產品中之副產物(816BN)在該pH範圍內具有有限溶解度,其中其溶解度值介於彼等810N及810PN之溶解度值之間。本發明之810A產品具有不同於鈣鹽方法之酸性產品(701)之溶解度曲線。本發明之810N產品具有不同於鈣鹽方法之中和產品(701N2)之溶解度曲線。
實例10
本實例說明如實例1至5中所述根據本發明之態樣不使用鈣鹽下製得之豆類蛋白質產品以及某些商業豌豆蛋白質產品及如實例6及7中所述使用鈣鹽下製得之豆類蛋白質產品之分子量分佈。
由使用配備300×7.8mm Phenomenex BioSep S-2000系列管柱的Varian ProStar HPLC系統之尺寸篩除層析測量分子量分佈。管柱含有親水性鍵合二氧化矽剛性支撐介質,直徑為5微米,孔徑為145埃。
在分析豆類蛋白質樣品之前,使用包含具有已知的介於17,000道
爾頓(肌球蛋白)與670,000道爾頓(甲狀腺球蛋白)之間之分子量之蛋白質及作為1,350道爾頓之低分子量標記物添加之維生素B12之Biorad蛋白質標準品(Biorad product #151-1901)製備標準曲線。在水中製得蛋白質標準品之0.9% w/v溶液,用0.45μm孔徑濾盤過濾,接著使用包含0.02%疊氮化鈉之0.05M磷酸鹽/0.15M NaCl移動相(pH 6)使50μL分液在管柱上流動。移動相流速為1mL/min,及基於280nm下之吸光度偵測組分。基於此等已知分子量之分子之滯留時間,開發出將分子量之自然對數與滯留時間(以分鐘計)相關聯之回歸公式。
滯留時間(min)=-0.865×ln(分子量)+17.154(r2=0.98)。
就豆類蛋白質樣品之分析而言,將包含0.02%疊氮化鈉之0.05M磷酸鹽/0.15M NaCl(pH 6)用作移動相及亦用於溶解乾燥樣品。將蛋白質樣品與移動相溶液混合混合達成1% w/v之濃度,置於振盪器上至少1小時,接著使用0.45μm孔徑濾盤過濾。樣品注射量為50μL。移動相流速為1mL/分鐘,及基於280nm下之吸光度偵測組分。
上述將分子量及滯留時間相關聯之回歸公式用於計算對應於100,000Da、15,000Da、5,000Da及1,000Da之分子量之滯留時間。將HPLC ProStar系統用於計算位於此等滯留時間範圍中之峰面積,及計算落在給定分子量範圍中之蛋白質百分比((峰面積範圍/總蛋白質峰面積)×100)。請注意,該數據未經蛋白質反應因子校正。
如實例1至7中所述製得之產品及商業產品之分子量分佈顯示於表8中。
由表8中呈現的結果可看出,衍生自本發明之酸化蛋白質溶液之豆類蛋白質產品(810A、810N、816A及816BN)具有不同於商業豌豆蛋白質產品及由用鈣鹽處理製得之產品之蛋白質分佈。
實例11
本實例包含評估如實例1至5中所述依本發明之態樣製得之豆類產品以及某些商業豌豆蛋白質產品及如實例6及7中所述使用鈣鹽下製得之豆類蛋白質產品之肌醇六磷酸含量。使用Latta與Eskin(J.Agric.Food Chem.,28:1313-1315)之方法測量肌醇六磷酸含量。
所獲得的結果列於下表9中。
由表9中呈現的結果可看出,除了具有經改良澄清度之酸溶性產品(816A)以外,本發明之態樣之所有產品之肌醇六磷酸含量均比使用鈣鹽製得之產品之肌醇六磷酸高。衍生自本發明之酸化蛋白質溶液之產品具有與所測試商業產品相當之肌醇六磷酸含量。衍生自根據本發明之一態樣之酸不溶性固體材料之產品之肌醇六磷酸含量似乎比所測試商業產品之肌醇六磷酸更高。
實例12
本實例包含評估如實例1至5中所述根據本發明之態樣製得之豆類產品以及某些商業豌豆蛋白質產品及如實例6及7中所述使用鈣鹽製得之豆類蛋白質產品之酸解性碳水化合物含量。依Dubois等人(Anal.Chem.,28:350-356)之方法測量酸解性碳水化合物含量。結果顯示於下表10中。
由表10中呈現的結果可看出,本發明之衍生自酸不溶性固體材料之產品之酸解性碳水化合物含量一般相比所評估的其他樣品更高。
實例13
本實例包含評估如實例1至5中所述根據本發明之態樣製得之豆類產品以及某些商業豌豆蛋白質產品及如實例6及7中所述使用鈣鹽製得之豆類蛋白質產品之溶液顏色及溶液濁度水平。將足以提供0.48g蛋白質之蛋白質粉末溶解於15ml RO水中來製備蛋白質產品之溶液。用pH計測量該等溶液之pH,及使用在透射模式下操作之HunterLab ColorQuest XE儀器評估顏色及濁度水平。結果顯示於下表11中。
由表11中的結果可看出,816A產品之溶液之濁度水平遠小於本發明之其他產品之溶液之濁度水平,且與使用鈣鹽製得之低pH產品(701)之溶液之濁度水平相當。
實例14
本實例包含評估如實例1至5中所述根據本發明之態樣製得之豆類產品以及某些商業豌豆蛋白質產品及如實例6及7中所述使用鈣鹽製得之豆類蛋白質產品在乾燥時之顏色。使用以反射模式操作之HunterLab ColorOuest XE評估乾燥時的顏色。結果顯示於下表12中。
由表12中的結果可看出,本發明產品之顏色類似於使用鈣鹽製得之產品(701及701N2)之顏色,且一般相比商業產品更淺,紅色及黃色更淡。
實例15
本實例說明如實例1中所述製得之YP26-F17-14A YP810N之味道與商業黃豌豆蛋白質產品Pisane C9之味道之間的比較。
將足以提供5g蛋白質之蛋白質粉溶於250ml純淨飲用水中,來製備用於感官評估之樣本。YP810N之溶液之pH經測量為7.13,而Pisane C9之溶液之pH為7.56。將食品級HCl添加至兩種溶液中,以將pH調整至7。要求由7名成員組成之非正式小組盲目地比較該等樣品及指出哪一樣品的蔬菜味道更小。
7名成員全部指出YP810N的蔬菜味道更小。
實例16
本實例說明如實例2中所述製得之YP27-C30-15A YP810N之味道與商業黃豌豆蛋白質產品Pisane C9之味道之間的比較。
將足以提供5g蛋白質之蛋白質粉溶於250ml純淨飲用水中,來製備用於感官評估之樣本。YP810N之溶液之pH經測量為6.56,而Pisane C9之溶液之pH為7.92。將食品級NaOH添加至YP810N之溶液中,以將pH升至6.99。將食品級HCl添加至Pisane C9之溶液中,以將
pH降至6.97。要求由9名成員組成之非正式小組盲目地比較該等樣品及指出哪一樣品的蔬菜味道更小。
9名成員中有8名指出YP810N的蔬菜味道更小,而1名成員無法辨別出哪一樣品的蔬菜味道更小。
實例17
本實例說明如實例2中所述製得之YP27-C30-15A YP810N之味道與商業黃豌豆蛋白質產品豌豆蛋白YS 85%之味道之間的比較。
將足以提供5g蛋白質之蛋白質粉溶於250ml純淨飲用水中,來製備用於感官評估之樣本。YP810N之溶液之pH經測量為6.65,而豌豆蛋白YS 85%之溶液之pH為7.16。將食品級NaOH添加至YP810N之溶液中,以將pH升至7.00。將食品級HCl添加至豌豆蛋白YS 85%之溶液中,以將pH降至7.00。要求由10名成員組成之非正式小組盲目地比較該等樣品及指出哪一樣品的蔬菜味道更小。
10名成員中有8名指出YP810N的蔬菜味道更小。1名成員指出豌豆蛋白YS 85%的蔬菜味道更小,且1名成員無法辨別出哪一樣品的蔬菜味道更小。
實例18
本實例說明如實例2中所述製得之YP27-E06-15A YP810N之味道與商業黃豌豆蛋白質產品豌豆蛋白YS 85%之味道之間的比較。
將足以提供5g蛋白質之蛋白質粉溶於250ml純淨飲用水中,來製備用於感官評估的樣本。YP810N之溶液之pH經測量為7.49,且豌豆蛋白質YS 85%之溶液之pH為7.10。將食品級HCl添加至YP810N之溶液中,以將pH降至7.03。要求由9名成員組成之非正式小組盲目地比較該等樣品及指出哪一樣品的蔬菜味道更小。
9名成員中有6名指出YP810N的蔬菜味道更小。2名成員指出豌豆蛋白YS 85%的蔬菜味道更小,而1名成員無法辨別出哪一樣品的蔬菜
味道更小。
實例19
本實例說明如實例2中所述製得之YP27-C30-15A YP810A之味道與商業黃豌豆蛋白質產品Pisane C9之味道之間的比較。
將足以提供5g蛋白質之蛋白質粉溶於250ml純淨飲用水中,來製備用於感官評估之樣本。YP810A之溶液之pH經測量為2.77,而Pisane C9之溶液之pH為7.90。將食品級NaOH添加至YP810A之溶液中以將pH升至3.00。將食品級HCl添加至Pisane C9之溶液中以將pH降至3.00。要求由9名成員組成之非正式小組盲目地比較該等樣品及指出哪一樣品的蔬菜味道更小。
9名成員中有8名指出YP810A的蔬菜味道更小。1名成員指出Pisane C9的蔬菜味道更小。
實例20
本實例說明如實例2中所述製得之YP27-C30-15A YP810A之味道與商業黃豌豆蛋白質產品豌豆蛋白YS 85%之味道之間的比較。
將足以提供5g蛋白質之蛋白質粉溶於250ml純淨飲用水中,來製備用於感官評估之樣本。YP810A之溶液之pH經測量為2.82,而豌豆蛋白YS 85%之溶液之pH為7.25。將食品級NaOH添加至YP810A之溶液中,以將pH升至3.00。將食品級HCl添加至豌豆蛋白YS 85%之溶液中,以將pH降至3.00。要求由9名成員組成之非正式小組盲目地比較該等樣品及指出哪一樣品的蔬菜味道更小。
9名成員中有8名指出YP810A的蔬菜味道更小。1名成員指出Pisane C9的蔬菜味道更小。
揭示案之小結
在揭示案之小結中,提供生產豆類蛋白質產品之新穎且具發明性之方法,該等方法未涉及將鹽用於萃取蛋白質源之蛋白質。亦提供
新穎且具發明性之豆類蛋白質產品,該等豆類蛋白質產品具有改進的味道。可在本發明之範圍內作出修改。
10‧‧‧製程
12‧‧‧用pH為約6至約11,較佳約6至約8.5之水萃取
14‧‧‧部分或完全澄清化
16‧‧‧固體
18‧‧‧蛋白質萃取溶液
20‧‧‧將pH調整至約1.5至約3.4,較佳約2.0至約3.0
22‧‧‧離心
24‧‧‧酸不溶性固體材料
26‧‧‧酸化蛋白質溶液
28‧‧‧視情況用pH為約1.5至約3.4,較佳約2.0至約3.0之水洗滌,接著離心
30‧‧‧洗滌離心濾液
34‧‧‧視情況經洗滌之酸不溶性固體材料
36‧‧‧將pH調整至約6至約8,較佳約6.5至約7.5
38‧‧‧乾燥
40‧‧‧810PN
46‧‧‧視情況將pH調整至小於約6
48‧‧‧乾燥
50‧‧‧810PA
60‧‧‧視情況減小pH以進行膜處理
62‧‧‧濃縮/透濾
64‧‧‧滯留物
66‧‧‧將pH調整至約6至約8,較佳約6.5至約7.5
68‧‧‧乾燥
70‧‧‧810N
76‧‧‧視情況將pH調整至小於約6
78‧‧‧乾燥
80‧‧‧810A
82‧‧‧視情況組合及乾燥
84‧‧‧視情況組合
86‧‧‧視情況組合及乾燥
Claims (104)
- 一種製備基於乾重具有選自由至少約60重量%及至少約90重量%(N x 6.25)組成之群之蛋白質含量之豆類蛋白質產品的方法,該方法包括:(a)用水萃取豆類蛋白質源,產生來自該蛋白質源之豆類蛋白質之溶解及形成豆類蛋白質水溶液,(b)從殘留豆類蛋白質源中至少部分分離該豆類蛋白質水溶液,(c)將該豆類蛋白質水溶液之pH調整至約1.5至約3.4之pH,產生酸化豆類蛋白質溶液,(d)從該酸化豆類蛋白質溶液分離酸不溶性固體材料,及另一種替代性是:(e)視情況藉由選擇性膜技術濃縮該酸化豆類蛋白質溶液,(f)視情況透濾該視情況經濃縮之豆類蛋白質溶液,及(g)視情況乾燥該視情況經濃縮及視情況經透濾之豆類蛋白質溶液,或(h)藉由選擇性膜技術濃縮及/或透濾該酸化豆類蛋白質溶液以將該酸化豆類蛋白質溶液之蛋白質組分分餾成第一滯留物及第一滲透物,(i)視情況乾燥該第一滯留物以提供第一豆類蛋白質產品,(j)濃縮且視情況透濾該第一滲透物以提供第二滯留物及第二滲透物,及(k)視情況乾燥該第二滯留物以提供第二豆類蛋白質產品。
- 如請求項1之方法,其中該濃縮及/或透濾步驟(h)係將蛋白質組 分分餾成該第一滯留物中之較高分子量餾份及該第一滲透物中之較低分子量餾份,且其中該視情況選用的乾燥步驟(i)提供包含較高分子量蛋白質之第一豆類蛋白質產品。
- 如請求項2之方法,其中該濃縮及視情況選用的透濾步驟(j)將較低分子量餾份蛋白質組分滯留在第二滯留物中,及允許污染物通過膜進入第二滲透物中,且其中該視情況選用的乾燥步驟(k)提供包含較低分子量蛋白質之第二豆類蛋白質產品。
- 如請求項3之方法,其中該第二豆類蛋白質產品在酸性溶液中具有經改良之澄清度。
- 如請求項1之方法,其中該酸不溶性固體材料視情況經乾燥,以形成基於乾重具有至少約60重量%(N x 6.25)之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。
- 如請求項1之方法,其中該酸不溶性材料之pH係在視情況選用的乾燥步驟之前調整至選自由小於約8.0、約6.0至約8.0及約6.5至約7.5組成之群之值。
- 如請求項1之方法,其中該酸不溶性固體材料係藉由與約1至約20體積之具有選自由約1.5至約3.4及大約與酸不溶性材料之pH相同組成之群之pH之水混合進行洗滌,接著在視情況選用的乾燥步驟之前從洗滌水分離。
- 如請求項7之方法,其中該經洗滌之酸不溶性材料之pH係在視情況選用的乾燥步驟之前調整至選自由小於約8.0、約6.0至約8.0及約6.5至約7.5組成之群之值。
- 如請求項7或8之方法,其中該洗滌水與步驟(d)之酸化豆類蛋白質溶液組合,且如在步驟(e)至(g)中之至少一個步驟中進行處理。
- 如請求項7或8之方法,其中該洗滌水與(d)之酸化豆類蛋白質溶 液組合,且如在步驟(h)至(k)中之至少一個步驟中進行處理。
- 如請求項1之方法,其中該萃取步驟(a)係在選自由約1℃至約100℃、約15℃至約65℃及約20℃至約35℃組成之群之溫度下實現。
- 如請求項1之方法,其中該用於萃取之水包含pH調節劑,使得萃取作用係在選自由約6至11及約6至約8.5組成之群之pH下進行。
- 如請求項12之方法,其中該pH調節劑為氫氧化鈉。
- 如請求項1之方法,其中該豆類蛋白質水溶液具有選自由約5至約50g/L及約10至約50g/L組成之群之蛋白質濃度。
- 如請求項1之方法,其中該水包含抗氧化劑。
- 如請求者1之方法,其中在該分離步驟(b)之後及在該酸化步驟(c)之前,該豆類蛋白質水溶液係經吸附劑處理,以去除該蛋白質水溶液中之顏色及/或氣味化合物。
- 如請求項1之方法,其中該豆類蛋白質水溶液之pH係在步驟(c)中調整至約2.0至約3.0。
- 如請求項1之方法,其中該酸化蛋白質水溶液係在步驟(d)後經受加熱處理步驟。
- 如請求項18之方法,其中該加熱處理步驟係為達到使熱不穩定抗營養因子失去活性。
- 如請求項19之方法,其中該等抗營養因子為熱不穩定之胰蛋白酶抑制劑。
- 如請求項18之方法,其中該加熱處理步驟係為實現將該酸化蛋白質水溶液進行巴氏滅菌。
- 如請求項18之方法,其中該加熱處理係在某一溫度下達到一段時間,該溫度及時間係選自由約70℃至約160℃及約10秒至約60分鐘、約80℃至約120℃持續約10秒至約5分鐘及約85℃至約95 ℃持續約30秒至約5分鐘組成之群。
- 如請求項18之方法,其中該經加熱處理之酸化豆類蛋白質溶液係經冷卻至選自由約2℃至約65℃及約50℃至約60℃組成之群之溫度。
- 如請求項1之方法,其中該酸化豆類蛋白質溶液係經乾燥,以提供具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品。
- 如請求項1之方法,其中該酸化豆類蛋白質水溶液係經受濃縮步驟(e),以獲得具有選自由約50至約300g/L及約100至約200g/L組成之群之蛋白質濃度之濃縮酸化豆類蛋白質溶液。
- 如請求項25之方法,其中該濃縮步驟(e)係利用具有選自由約1,000至約1,000,000道爾頓及約1,000至約100,000道爾頓組成之群之截止分子量之膜藉由超過濾作用實現。
- 如請求項25之方法,其中該濃縮酸化豆類蛋白質溶液視情況經受透濾步驟(f)。
- 如請求項27之方法,其中該透濾步驟(f)係使用水或酸化水對部分或完全濃縮之前或之後的酸化豆類蛋白質水溶液實現。
- 如請求項28之方法,其中該透濾步驟(f)係使用選自由約1至約40體積及約2至約25體積組成之群的體積之透濾溶液實現。
- 如請求項27之方法,其中該透濾步驟(f)係經實現至直到滲透物中不存在顯著其他數量的污染物或可見的顏色。
- 如請求項27之方法,其中該透濾步驟(f)係經實現至直到滯留物已經充分純化,以提供具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質離析物。
- 如請求項27之方法,其中該透濾步驟(f)係使用具有選自由約1,000至約1,000,000道爾頓及約1,000至約100,000道爾頓組成之群 之截止分子量之膜實現。
- 如請求項27之方法,其中抗氧化劑在至少一部分該透濾步驟(f)期間係存在於該透濾介質中。
- 如請求項25之方法,其中該濃縮步驟(e)及視情況選用的透濾步驟(f)係在選自由約2℃至約65℃及約50℃至約60℃組成之群之溫度下進行。
- 如請求項1之方法,其中該酸化豆類蛋白質水溶液係經受步驟(h),以獲得具有選自由約50至約300g/L及約100至約200g/L組成之群之蛋白質濃度之經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液(第一滯留物)。
- 如請求項1之方法,其中該酸化豆類蛋白質水溶液係藉由微過濾使用具有選自由約0.05至約0.1μm及約0.08至約0.1μm組成之群之孔徑之膜經受步驟(h)。
- 如請求項1之方法,其中該酸化豆類蛋白質水溶液係藉由超過濾使用具有選自由約10,000至約1,000,000道爾頓及約100,000至約1,000,000道爾頓組成之群之截止分子量之膜經受步驟(h)。
- 如請求項1之方法,其中該濃縮及/或透濾步驟(h)中之該透濾係使用水或酸化水在視情況選用的後續濃縮之前或其部分或完全濃縮之後對酸化豆類蛋白質水溶液實現。
- 如請求項35或38之方法,其中該濃縮及/或透濾步驟(h)中之該透濾係使用選自由約1至約40體積及約2至約25體積組成之群之體積的透濾溶液實現。
- 如請求項35或38之方法,其中該濃縮及/或透濾步驟(h)中之該透濾係實現至直到滯留物已經充分純化,以提供具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質離析物。
- 如請求項35或38之方法,其中抗氧化劑在該濃縮及/或透濾步驟 (h)中之至少一部分該透濾期間係存在於該透濾介質中。
- 如請求項35或38之方法,其中該濃縮及/或透濾步驟(h)中之該濃縮及/或透濾係在選自由約2℃至約65℃及約50℃至約60℃之溫度下進行。
- 如請求項1之方法,其中該第一滲透物係經受進行步驟(j),以獲得具有選自由約10至約300g/L及約100至約200g/L組成之群之蛋白質濃度之經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液(第二滯留物)。
- 如請求項43之方法,其中該濃縮且視情況選用的透濾步驟(j)係藉由超過濾使用具有選自由約1,000至約100,000道爾頓及約1,000至約10,000道爾頓組成之群之截止分子量之膜實現。
- 如請求項44之方法,其中該濃縮且視情況選用的透濾步驟(j)中之該透濾係使用水或酸化水在其部分或完全濃縮之前或之後對第二滯留物實現。
- 如請求項44之方法,其中該濃縮且視情況選用的透濾步驟(j)中之該透濾係使用選自由約1至約40體積及約2至約25體積之體積的透濾溶液實現。
- 如請求項43之方法,其中該濃縮且視情況選用的透濾步驟(j)中之該透濾係實現至直到滯留物已經充分純化,以提供具有至少約90重量%(N×6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質離析物。
- 如請求項43之方法,其中抗氧化劑在至少一部分該透濾步驟期間係存在於該透濾介質中。
- 如請求項43之方法,其中該濃縮且視情況選用的透濾步驟(j)中之該濃縮且視情況選用的透濾係在選自由約2℃至約65℃及約50℃至約60℃組成之群之溫度下進行。
- 如請求項27、35、38或43之方法,其中該經部分濃縮或濃縮且 視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液係經受加熱處理步驟。
- 如請求項50之方法,其中該加熱處理步驟係為達到使熱不穩定抗營養因子失去活性。
- 如請求項51之方法,其中該等熱不穩定抗營養因子為熱不穩定胰蛋白酶抑制劑。
- 如請求項50之方法,其中該加熱處理係在某一溫度下達到一段時間,該溫度及時間係選自由約70℃至約160℃持續約10秒至約60分鐘、約80℃至約120℃持續約10秒至約5分鐘及約85℃至約95℃持續約30秒至約5分鐘組成之群。
- 如請求項50之方法,其中該經加熱處理的豆類蛋白質溶液係經冷卻至選自由約2℃至約65℃及約50℃至約60℃組成之群之溫度。
- 如請求項27、35或43之方法,其中該經濃縮且視情況經透濾之酸化蛋白質溶液係經吸附劑處理,以去除顏色及/或氣味化合物。
- 如請求項27、35或43之方法,其中該經濃縮且視情況經透濾之酸化蛋白質溶液在乾燥之前係經巴氏滅菌。
- 如請求項38之方法,其中該經透濾且視情況經濃縮之酸化蛋白質溶液係經吸附劑處理以去除顏色及/或氣味化合物。
- 如請求項38之方法,其中該經透濾且視情況經濃縮之酸化蛋白質溶液在乾燥之前係經巴氏滅菌。
- 如請求項56之方法,其中該巴氏滅菌步驟係在約55℃至約75℃之溫度下達到約15秒至約60分鐘。
- 如請求項31之方法,其中該經濃縮且經透濾之酸化豆類蛋白質溶液係經受乾燥步驟(g),以提供具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質離析物。
- 如請求項40之方法,其中該經濃縮且經透濾之酸化豆類蛋白質溶液係經受乾燥步驟(i),以提供具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質離析物。
- 如請求項47之方法,其中該經濃縮且經透濾之酸化豆類蛋白質溶液係經受乾燥步驟(k),以提供具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質離析物。
- 如請求項1之方法,其中該視情況經濃縮且視情況經透濾之酸化豆類蛋白質溶液之pH係在乾燥步驟(g)前調整至選自由小於約8.0、約6.0至約8.0及約6.5至約7.5組成之群之值。
- 如請求項1之方法,其中該第一滯留物之pH係在乾燥步驟(i)前調整至選自由小於約8.0、約6.0至約8.0及約6.5至約7.5組成之群之值。
- 如請求項27或43之方法,其中該濃縮且/或視情況選用之透濾步驟係以有利於去除胰蛋白酶抑制劑方式操作。
- 如請求項1之方法,其中一還原劑係存在於萃取步驟(a)期間。
- 如請求項27、35、38或43之方法,其中一還原劑係存在於視情況選用的濃縮步驟(e)及/或視情況選用的透濾步驟(f)期間或在膜處理步驟(h)及/或濃縮及視情況選用的透濾步驟(j)期間。
- 如請求項66之方法,其中該還原劑係存在為破壞或重排胰蛋白酶抑制劑之雙硫鍵,以降低胰蛋白酶抑制劑活性。
- 如請求項1之方法,其中還原劑經添加至乾燥步驟(g)之前的視情況經濃縮、視情況經透濾之豆類蛋白質溶液及/或經乾燥之豆類蛋白質產品。
- 如請求項1之方法,其中還原劑經添加至乾燥步驟(i)之前的第一滯留物及/或經乾燥之豆類蛋白質產品。
- 如請求項1之方法,其中還原劑經添加至乾燥步驟(k)之前的經濃 縮、視情況經透濾之豆類蛋白質溶液及/或經乾燥之豆類蛋白質產品。
- 如請求項69至71中任一項之方法,其中該還原劑經添加係為破壞或重排胰蛋白酶抑制劑之雙硫鍵,以降低胰蛋白酶抑制劑活性。
- 一種豆類蛋白質產品,其具有約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之,且其:係在無涉及添加鹽之處理步驟下製得,具有很小或沒有豌豆或蔬菜味道,且在製備中不需要酶。
- 如請求項73之豆類蛋白質產品,其包含多於約1.5重量% d.b.之肌醇六磷酸。
- 如請求項73之豆類蛋白質產品,其具有至少約90重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量。
- 如請求項73之豆類蛋白質產品,其係完全溶解於選自由小於約4.0及小於約3.0組成之群之酸性pH值下之水性介質中。
- 如請求項76之豆類蛋白質產品,其不需要穩定劑或其他添加劑來維持呈溶液或懸浮液形式之蛋白質產品。
- 如請求項76之豆類蛋白質產品,其係與水溶性粉末材料摻合,以用於產生該摻合物之水溶液。
- 如請求項78之豆類蛋白質產品,其中該摻合物為粉末飲料。
- 如請求項73之豆類蛋白質產品,其具有低的胰蛋白酶抑制劑活性。
- 一種食品產品,其係經調配以包含如請求項73至77中任一項之豆類蛋白質產品。
- 如請求項81之食品,其為飲料。
- 一種如請求項76之豆類蛋白質產品之水溶液。
- 如請求項83之水溶液,其為飲料。
- 如請求項84之水溶液,其中該飲料為其中豆類蛋白質產品係完全可溶且實質上透明之澄清飲料。
- 如請求項84之水溶液,其中該飲料不是澄清的,且其中已溶解的豆類蛋白質不會增大濁度水平。
- 如請求項84之水溶液,其中該飲料不是澄清飲料,且其中已溶解的豆類蛋白質會造成飲料之濁度水平。
- 一種豆類蛋白質產品,其具有以下:至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量;及以1%蛋白質w/v含於水中時在約2至約3之pH下大於約90%之蛋白質溶解度;及以1%蛋白質w/v含於水中時在約4至約6之pH下小於約35%之蛋白質溶解度;及以1%蛋白質w/v含於水中時在約7之pH下介於約25%與55%之間之蛋白質溶解度。
- 一種豆類蛋白質產品,其具有以下:至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量;及以1%蛋白質w/v含於水中時在約2之pH下介於約35%與75%之間之蛋白質溶解度;及以1%蛋白質w/v含於水中時在約3之pH下介於約25%與55%之間之蛋白質溶解度;及以1%蛋白質w/v含於水中時在約4之pH下介於約15%與30%之間之蛋白質溶解度;及以1%蛋白質w/v含於水中時在約7之pH下介於約15%與50%之間之蛋白質溶解度。
- 一種具有包括以下之分子量分佈之豆類蛋白質產品:約7至約20%為大於約100,000Da,約13至約40%為約15,000至約100,000Da,約15至約28%為約5,000至約15,000Da,及約21至約57%為約1,000至約5,000Da。
- 一種具有包括以下之分子量分佈之豆類蛋白質產品:約12至約27%為大於約100,000Da,約18至約35%為約15,000至約100,000Da,約20至約37%為約5,000至約15,000Da,及約12至約43%為約1,000至約5,000Da。
- 一種具有包括以下之分子量分佈之豆類蛋白質產品:約4至約8%為大於約100,000Da,約32至約36%為約15,000至約100,000Da,約43至約48%為約5,000至約15,000Da,及約12至約16%為約1,000至約5,000Da。
- 一種具有包括以下之分子量分佈之豆類蛋白質產品:約8至約12%為大於約100,000Da,約16至約27%為約15,000至約100,000Da,約13至約21%為約5,000至約15,000Da,及約43至約57%為約1,000至約5,000Da。
- 一種豆類蛋白質產品,其具有以下:至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量;及以1%蛋白質w/v含於水中時在約2至約7之pH下小於約40%之蛋白質溶解度;及大於約3.0% d.b.之肌醇六磷酸含量。
- 一種豆類蛋白質產品,其具有以下:至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量;及以1%蛋白質w/v含於水中時在約2至約7之pH下小於約30%之蛋白質溶解度;及大於6% d.b.之酸解性碳水化合物含量。
- 一種豆類蛋白質產品,其具有以下:至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量;及以1%蛋白質w/v含於水中時在約2至約4之pH下大於約90%之蛋白質溶解度;及大於6% d.b.之酸解性碳水 化合物含量。
- 一種在未添加鹽或無酶水解下製得之具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量之豆類蛋白質產品,其藉由使足以提供0.48g蛋白質之蛋白質粉溶解於15ml水中製得之溶液具有選自由小於30%及小於20%組成之群之濁度讀數。
- 如請求項97之豆類蛋白質產品,其中該鹽為鈣鹽。
- 如請求項88、91、94、95或96之豆類蛋白質產品,其中該豆類蛋白質產品之溶解度係由實例9之方法測定。
- 如請求項90至93中任一項之豆類蛋白質產品,其中該豆類蛋白質產品之分子量分佈係由實例10之方法測定。
- 如請求項95或96之豆類蛋白質產品,其中該酸解性碳水化合物含量係由實例12之方法測定。
- 一種豆類蛋白質產品,其具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量,且其具有大於1.5重量%之肌醇六磷酸含量,且其乾燥粉末具有小於2.5之a*讀數。
- 一種豆類蛋白質產品,其具有至少約60重量%(N x 6.25)d.b.之蛋白質含量,且其具有大於1.5重量%之肌醇六磷酸含量,且其乾燥粉末具有小於18之b*讀數。
- 如請求項88至98、102及103中任一項之豆類蛋白質產品,其為黃色豌豆蛋白質產品。
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