TW201417717A - 利用氯化鈣萃取製備豆類植物蛋白質產品（ｙｐ７０２） - Google Patents
利用氯化鈣萃取製備豆類植物蛋白質產品（ｙｐ７０２） Download PDFInfo
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Abstract
本發明係關於一種具有至少約60重量%(N×6.25)d.b.蛋白質含量之豆類植物蛋白質產品(較佳係具有至少約90重量%(N×6.25)d.b.蛋白質含量之豆類植物蛋白質離析物)，其係自豆類植物蛋白質源材料依以下步驟製得：以鈣鹽水溶液(較佳係氯化鈣溶液)萃取該豆類植物蛋白質源材料，導致來自該蛋白質源之豆類植物蛋白質溶解及形成豆類植物蛋白質水溶液，使該豆類植物蛋白質水溶液與殘餘豆類植物蛋白質源分離，視需要濃縮該豆類植物蛋白質水溶液同時藉由利用選擇性膜技術維持其離子強度實質上恆定，視需要透濾該視需要經濃縮之豆類植物蛋白質溶液，及視需要乾燥該視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液。
Description
本發明係關於豆類植物蛋白質產品之製備。
在美國專利申請案：2011年5月9日申請之第13/103,528號(在2011年11月10日公開之美國專利公開案第2011-0274797號)、2011年11月4日申請之第13/289,264號(在2012年5月31日公開之美國專利公開案第2012-0135117號)、2012年7月24日申請之第13/556,357號(在2013年7月25日公開之美國專利公開案第2013-0189408號)及2013年1月7日申請之第13/642,003號中，其等係讓與給其受讓人及其揭示內容均以引用的方式併入本文中，描述具有至少約60重量%(N×6.25)d.b.，較佳至少約90重量%(N×6.25)d.b.，更佳至少約100重量%(N×6.25)d.b.蛋白質含量之豆類植物蛋白質產品的製法，該等豆類植物蛋白質產品在低pH值下完全可溶，形成熱穩定溶液(較佳係透明溶液)，及因此可尤其用於軟飲料及運動飲料及其他水性系統之蛋白質強化，而無蛋白質沉澱。
本文所述豆類植物蛋白質產品具有其他豆類植物蛋白質產品所不存在的獨特參數組合。該產品在小於約4.4之酸性pH值下可完全溶於水溶液中及在該pH範圍內為熱穩定從而容許該等產品之水溶液之熱處理。考慮到該產品之完全可溶性，則不需要穩定劑或其他添加劑
來維持呈溶液或懸浮液形式之蛋白質。
一態樣中之豆類植物蛋白質產品係依包括以下步驟之方法製得：(a)以鈣鹽水溶液(較佳係氯化鈣水溶液)萃取豆類植物蛋白質源，導致來自該蛋白質源之豆類植物蛋白質溶解及形成豆類植物蛋白質水溶液，(b)使該豆類植物蛋白質水溶液與殘餘豆類植物蛋白質源分離，(c)視需要稀釋該豆類植物蛋白質水溶液，(d)將該豆類植物蛋白質水溶液之pH調整至約1.5至約4.4，較佳約2至約4之pH，可獲得酸化豆類植物蛋白質溶液，(e)視需要在該酸化豆類植物蛋白質溶液已經不透明之情況下使其澄清化，(f)視需要濃縮該豆類植物蛋白質水溶液同時藉由利用選擇性膜技術維持其離子強度實質上恆定，(g)視需要透濾該視需要經濃縮之豆類植物蛋白質溶液，及(h)視需要乾燥該視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液。
該豆類植物蛋白質產品較佳為具有至少約90重量%，較佳至少約100重量%蛋白質含量之離析物。
現已發現豆類植物蛋白質源之氯化鈣萃取物可依照替代程序處理，以提供具有至少約60重量%(N×6.25)d.b.蛋白質含量之實質上相當之豆類植物蛋白質產品，其在低pH下可溶及形成低pH值下熱穩定之溶液(較佳係透明溶液)，及因此可尤其用於軟飲料及運動飲料以及其他水性系統之蛋白質強化而無蛋白質沉澱。該豆類植物蛋白質產品較佳為具有至少約90重量%(N×6.25)d.b.，較佳至少約100重量
%(N×6.25)d.b.蛋白質含量之離析物。
於本發明一態樣中，在天然pH下以氯化鈣水溶液萃取豆類植物蛋白質源材料及所得豆類植物蛋白質水溶液經過視需要使用之超過濾及視需要使用之透濾，可提供視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液，該豆類植物蛋白質溶液可經乾燥以提供豆類植物蛋白質產品。
根據本發明一態樣，提供一種製備具有至少60重量%(N×6.25)(以乾重計)豆類植物蛋白質含量之豆類植物蛋白質產品的方法，該方法包括：(a)以鈣鹽水溶液(較佳係氯化鈣水溶液)萃取豆類植物蛋白質源，導致來自該蛋白質源之豆類植物蛋白質溶解及形成豆類植物蛋白質水溶液，(b)使該豆類植物蛋白質水溶液與殘餘豆類植物蛋白質源分離，(c)視需要濃縮該豆類植物蛋白質源同時藉由利用選擇性膜技術維持其離子強度實質上恆定，(d)視需要透濾該視需要經濃縮之豆類植物蛋白質溶液，及(e)視需要乾燥該視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液。
該豆類植物蛋白質產品較佳為具有至少約90重量%(N×6.25)d.b.，較佳至少約100重量%(N×6.25)d.b.蛋白質含量之離析物。
於上述程序之一變化形式中，可緊接於視需要使用之乾燥步驟之前將蛋白質溶液pH調整至約6至約8之pH。此pH調整有利於將該產品用於具有近中性pH之食品應用中。
根據本發明另一態樣，提供一種製備具有至少約60重量%(N×6.25)(以乾重計)豆類植物蛋白質含量之豆類植物蛋白質產品的
方法，該方法包括：(a)以鈣鹽水溶液(較佳係氯化鈣水溶液)萃取豆類植物蛋白質源，導致來自該蛋白質源之豆類植物蛋白質溶解及形成豆類植物蛋白質水溶液，(b)使該豆類植物蛋白質水溶液與殘餘豆類植物蛋白質源分離，(c)視需要濃縮該豆類植物蛋白質水溶液同時藉由利用選擇性膜技術維持其離子強度實質上恆定，(d)視需要透濾該視需要經濃縮之豆類植物蛋白質溶液，(e)將該視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液之pH調整至約6至約8之pH，及(f)視需要乾燥所得溶液。
或者，經部分濃縮或完全濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液可經pH調整達到約1.5至約4.4，較佳約2.0至約4.0之pH。使該酸化豆類植物蛋白質溶液經歷熱處理以使熱不穩定抗營養因子(諸如胰蛋白酶抑制劑)失活。
根據本發明另一態樣，提供一種製備具有至少約60重量%(N×6.25)(以乾重計)豆類植物蛋白質含量之豆類植物蛋白質產品的方法，該方法包括：(a)以鈣鹽水溶液(較佳係氯化鈣水溶液)萃取豆類植物蛋白質源，導致來自該蛋白質源之豆類植物蛋白質溶解及形成豆類植物蛋白質水溶液，(b)使該豆類植物蛋白質水溶液與殘餘豆類植物蛋白質源分離，(c)視需要濃縮該豆類植物蛋白質水溶液同時藉由利用選擇性膜技術維持其離子強度實質上恆定，(d)將該視需要經部分或完全濃縮之豆類植物蛋白質溶液之pH調整至約1.5至約4.4，較佳約2.0至約4.0之pH，及
(e)視需要乾燥所得溶液。
利用本發明之程序允許製備呈天然pH形式之豆類植物蛋白質產品之選項。無需pH調整步驟下豆類植物蛋白質產品之該製備容許更為容易、安全及經濟之處理，此乃因不需要酸或鹼及其處理。此外，考慮到各種酸之強度及調味特性不同，此程序准許飲料調配者以其所選擇的酸化劑酸化蛋白質及飲料。
儘管本發明主要係關於豆類植物蛋白質離析物之製備，但仍預期具有與豆類植物蛋白質離析物類似特性之較低純度豆類植物蛋白質產品。該等較低純度產品可能具有至少約60重量%(N×6.25)d.b.之蛋白質濃度。
本發明之新穎豆類植物蛋白質產品可與粉末飲料摻合，以藉由將其溶解於水中形成水性軟飲料或運動飲料。該摻合物可為飲料粉(powdered beverage)。
提供於本文中之豆類植物蛋白質產品可呈其水溶液形式提供。該等溶液較佳在小於約4.4之pH值下為透明且於該等pH值下為熱穩定。
於本發明另一態樣中，提供一種在低pH下熱穩定之本文所提供豆類植物產品之水溶液。該水溶液可為飲料，該飲料可為其中豆類植物蛋白質產品完全可溶之透明飲料及其中豆類植物蛋白質產品可增加或不增加濁度之透明或不透明飲料(諸如半透明或不透光飲料)。
依照本發明方法所製得之豆類植物蛋白質產品不僅適用於酸性介質之蛋白質強化，而且可用於大範圍之蛋白質離析物的習知應用，包括(但不限於)加工食品及飲料之蛋白質強化、油脂之乳化，例如，在烘焙商品中作為主體形成物及在補集氣體之產品中之補集氣體之起泡劑。此外，該豆類植物蛋白質產品可成形為蛋白質纖維，其適用於仿肉製品中及可作為蛋白替代品或增體劑用於其中蛋白用為黏結劑之
食品中。該豆類植物蛋白質產品可用作營養補充劑。該豆類植物蛋白質產品亦可用於類乳製品或乳製品替代品或為乳製品/豆類植物摻合物之產品。豆類植物蛋白質產品之其他用途係用於寵物飼料、動物飼料及工業及化妝應用及個人護理產品中。
提供豆類植物蛋白質產品之方法之初始步驟包括將來自豆類植物蛋白質源之豆類植物蛋白質之溶解。本發明可適用之豆類植物包括小扁豆、鷹嘴豆(chickpea)、乾豌豆(dry pea)及乾大豆。豆類植物蛋白質源可為豆類植物或衍生自豆類植物加工之任何豆類植物產品或副產品。例如，豆類植物蛋白質源可為藉由碾磨視需要經去殼之豆類植物所製得之粉。另一實例為，豆類植物蛋白質源可為藉由去殼及碾磨豆類植物且接著針對經去殼及碾磨之材料風吹歸類成富澱粉及富蛋白質部分所形成之富蛋白質豆類植物部分。自豆類植物蛋白質源回收之豆類植物蛋白質產品可為在豆類植物中天然存在之蛋白質或該蛋白質材料可為經基因操作改造但仍具有天然蛋白質之特徵性疏水及極性性質之蛋白質。
最簡便地使用食品級氯化鈣溶液來實現豆類植物蛋白質源材料之蛋白質溶解，然而，可使用其他鈣鹽之溶液。在豆類植物蛋白質產品計劃用於非食品應用之情況下，可使用非食品級化學物質。此外，亦可使用其他鹼土金屬鹽(諸如鎂鹽)。此外，亦可併與另一鹽溶液(諸如氯化鈉)組合使用鈣鹽溶液實現自豆類植物蛋白質源萃取豆類植物蛋白質。另外，可使用水或其他鹽溶液(諸如氯化鈉溶液)，且於隨後將鈣鹽(諸如氯化鈣)添加至在萃取步驟中製得之豆類植物蛋白質水溶液，實現自豆類植物蛋白質源萃取豆類植物蛋白質。接著於後續處理
之前移除在添加鈣鹽時形成沉澱物。
隨著鈣鹽溶液濃度之增加，自豆類植物蛋白質源之蛋白質的溶解程度在一開始時增加直到達到最大值。鹽濃度之任何後續增加均不會增加已溶解蛋白質之總量。引起最大蛋白質溶解之鈣鹽溶液的濃度隨所研究鹽而改變。通常較佳利用小於約1.0M之濃度值，及更佳利用約0.10M至約0.15M之濃度值。
於分批處理中，在約1℃至約100℃，較佳約15℃至約65℃，更佳約20℃至約35℃之溫度下，較佳同時攪拌以縮短通常為約1至約60分鐘之溶解時間來實現蛋白質之鹽溶解。較佳實現溶解以實質上自豆類植物蛋白質源萃取實際可行的儘可能多的蛋白質，從而提供高總產品產率。
於連續處理中，依符合實現自豆類植物蛋白質源連續萃取豆類植物蛋白質之任何方法進行自豆類植物蛋白質源萃取豆類植物蛋白質。於一實施例中，該豆類植物蛋白質源係持續地與鈣鹽溶液混合及通過具有一長度之管或管道及以針對足以按照文中所述之參數實現所要求萃取之滯留時間的流率傳輸該混合物。於此連續程序中，鹽溶解步驟係在約1分鐘至約60分鐘時間內實現，較佳實現溶解以自該豆類植物蛋白質源實質上萃取實際可行的儘可能多的蛋白質。該連續程序中之溶解係在介於約1℃及約100℃之間，較佳介於約15℃及約65℃之間，更佳約20℃至約35℃之溫度下實現。
萃取一般係在約4.5至約11，較佳約5至約7之pH下進行。若需要，可按需要使用任何適宜酸(通常係鹽酸)或鹼(通常係氫氧化鈉)，將萃取系統(豆類植物蛋白質源及鈣鹽溶液)之pH調整至在適用於萃取步驟之約4.5至約11範圍內之任何所需值。
溶解步驟期間鈣鹽溶液中豆類植物蛋白質源之濃度可廣泛地改變。典型濃度值為約5至約15% w/v。
自萃取步驟獲得之蛋白質溶液一般具有約5至約50g/L，較佳約10至約50g/L之蛋白質濃度。
利用鹽水溶液之蛋白質萃取步驟具有促進溶解可能存在於豆類植物蛋白質源中的脂肪之額外效應，此會導致脂肪存在於水相中。
該鈣鹽水溶液可包含抗氧化劑。抗氧化劑可為任何適宜抗氧化劑(諸如亞硫酸鈉或抗壞血酸)。抗氧化劑之用量可自約0.01至約1重量%之溶液改變，較佳為約0.05重量%。該抗氧化劑可用來抑制蛋白質溶液中任何酚醛樹脂之氧化。
接著可依任何適宜方法使自萃取步驟產生之水相與殘餘豆類植物蛋白質溶液分離，諸如藉由利用傾析離心，接著進行盤式離心及/或過濾，以移除殘餘豆類植物蛋白質源材料。該分離步驟可在落在約1℃至約100℃，較佳約15℃至約65℃，更佳約50℃至約60℃範圍內之任何溫度下進行。所分離出的殘餘豆類植物蛋白質源可經乾燥以供廢棄處置或經進一步處理(諸如)以回收澱粉及/或殘餘蛋白質。可藉以新製鈣鹽溶液再萃取所分離出的殘餘豆類植物蛋白質源來回收殘餘蛋白質及在澄清化後所獲得的蛋白質溶液併與初始蛋白質溶液組合用於如下所述之進一步處理。或者，所分離出的殘餘豆類植物蛋白質源可依照習知之等電沉積製程或任何其他適宜程序處理以回收殘餘蛋白質。
該豆類植物蛋白質水溶液可經消泡劑(諸如任何適宜之食品級非聚矽氧基消泡劑)處理，以減小進一步處理時所形成發泡體的體積。消泡劑之用量一般大於約0.0003%w/v。或者，可在萃取步驟中添加該所述用量之消泡劑。
所分離出的豆類植物蛋白質水溶液可按需要如美國專利案號5,844,086及6,005,076(讓與給其受讓人及其揭示內容以引用方式併入本文中)中所述經歷脫脂操作。或者，所分離出的豆類植物蛋白質水溶液之脫脂可藉由任何其他適宜程序而達成。
該豆類植物蛋白質水溶液可經吸附劑(諸如粉末活性碳或顆粒活性碳)處理，以移除顏色及/或氣味化合物。此吸附劑處理可在任何適宜條件(一般係在所分離出的蛋白質水溶液之環境溫度下)下進行。就粉末活性碳而言，其用量為約0.025%至約5% w/v，較佳約0.05%至約2% w/v。該吸附劑可藉由任何適宜方法(諸如過濾)自豆類植物溶液移除。
若所得豆類植物蛋白質水溶液純度足夠的話，則可將其直接乾燥以製得豆類植物蛋白質產品。為了降低雜質含量，可在乾燥之前處理該豆類植物蛋白質水溶液。
該豆類植物蛋白質水溶液可經濃縮以提高其蛋白質濃度同時維持其離子強度實質上恆定。該濃度一般可實現以提供具有約50至約400g/L，較佳約100至約250g/L蛋白質濃度之濃縮豆類植物蛋白質溶液。
該濃縮步驟可依與分批或連續操作一致之任何適宜方式實現，諸如藉由利用任何適宜選擇性膜技術(諸如超過濾或透濾)，考慮到不同膜材料及組態，利用具有諸如約1,000至約1,000,000道耳頓，較佳約1,000至約100,000道耳頓之適宜截止分子量之膜(諸如中空纖維膜或螺捲式膜)，及就連續操作而言，經尺寸調整以在蛋白質水溶液通過該等膜時准許所需濃縮程度。
眾所周知，超過濾及類似選擇性膜技術准許低分子量物質通過其同時防止較高分子量物質通過。低分子量物質不僅包括食品級鹽之離子而且包括自源材料萃取之低分子量物質(諸如碳水化合物)、色素、低分子量蛋白質及其本身為低分子量蛋白質之抗營養因子(諸如胰蛋白酶抑制劑)。考慮到不同膜材料及組態，通常選擇膜之截止分子量來確保保留顯著比例之蛋白質於溶液中，同時准許污染物通過。
接著可使用與萃取溶液相同的pH及相同的鈣鹽濃度下之鈣鹽溶
液(諸如氯化鈣溶液)使經濃縮之豆類植物蛋白質溶液經歷透濾步驟。若期望滯留物鹽含量之降低，則所使用之透濾溶液可為與萃取溶液相同的pH但鹽濃度更低之鈣鹽水溶液。然而，必須選擇透濾溶液之鹽濃度使得滯留物之鹽濃度維持足夠高以維持所需的蛋白質溶解性。如上提及，該透濾溶液之pH較佳係與進行透濾之蛋白質溶液之pH相等。透濾溶液之pH可經任何適宜酸(諸如鹽酸或磷酸)或鹼(諸如氫氧化鈉)調整。該透濾可使用約1至約40體積之透濾溶液，較佳約2至約25體積透濾溶液實現。於透濾操作中，其他量的污染物係藉由與滲透物一起通過膜而自豆類植物蛋白質水溶液移除。可實施該透濾操作直到滲透物中不存在顯著其他量的污染物或可視色或直到滯留物經過充分純化以致在乾燥時可提供具有所需蛋白質含量之豆類植物蛋白質產品，較佳係具有以乾重計至少約90重量%蛋白質含量之離析物。該透濾可利用與濃縮步驟相同的膜實現。然而，若需要，考慮到不同膜材料及組態，可使用具有不同截止分子量之單獨膜(諸如具有在約1,000至約1,000,000道耳頓，較佳約1,000至約100,000道耳頓範圍內之截止分子量之膜)來實現該透濾步驟。
或者，可如上所述針對蛋白質水溶液在濃縮之前或針對經部分濃縮之蛋白質水溶液應用該透濾步驟。當在濃縮之前或針對經部分濃縮之溶液應用透濾時，所得經透濾之溶液可接著進一步濃縮。
本文中該濃縮步驟及該透濾步驟可以使得隨後藉由乾燥經濃縮及經透濾之蛋白質溶液所回收之豆類植物蛋白質產品含有小於約90重量%蛋白質(N×6.25)d.b.(諸如至少約60重量%蛋白質(N×6.25)d.b.)來之方式實現。藉由部分濃縮及/或部分透濾該豆類植物蛋白質水溶液，僅可部分移除污染物。可接著乾燥此蛋白質溶液以提供具有較低雜質含量之豆類植物蛋白質產品。該豆類植物蛋白質產品於酸性條件下仍可溶。
於至少一部分透濾步驟期間，抗氧化劑可存在於透濾介質中。該抗氧化劑可為任何適宜抗氧化劑(諸如亞硫酸鈉或抗壞血酸)。透濾介質中之抗氧化劑用量隨所使用材料而改變及可自約0.01至約1重量%改變，較佳為約0.05重量%。該抗氧化劑可用來抑制存在於豆類植物蛋白質溶液中的任何酚醛樹脂之氧化。
該視需要使用之濃縮步驟及該視需要使用之透濾步驟可於一般約2℃至約65℃，較佳約50℃至約60℃之任何適宜溫度下及實施可實現所需濃縮及透濾程度之時段。所採用之溫度及其他條件在某種程度上取決於用於實現膜處理之膜設備、溶液之所需蛋白質濃度及污染物至滲透物之移除效率。
豆類植物包含抗營養胰蛋白酶抑制劑。可藉由操控各種製程變數來控制最終豆類植物蛋白質產品中胰蛋白酶抑制劑的活性含量。
例如，該濃縮及/或該等透濾步驟可以有利於移除滲透物中之胰蛋白酶抑制劑及其他污染物之方式操作。藉由利用較大孔徑諸如約30,000至約1,000,000道耳頓之膜，於高溫諸如約30℃至約65℃，較佳約50℃至約60℃下操作該膜及利用較大體積之透濾介質(諸如約10至約40體積)，可促進胰蛋白酶抑制劑之移除。
此外，可藉由使豆類植物材料暴露於可破壞或重排抑制劑之雙硫鍵之還原劑來達成胰蛋白酶抑制劑活性之降低。適宜之還原劑包括亞硫酸鈉、半胱胺酸及N-乙醯基半胱胺酸。
該等還原劑之添加可在整個製程之各階段實現。例如，還原劑可在萃取步驟中併與豆類植物蛋白質源材料一起添加，可在移除殘餘豆類植物蛋白質源材料之後添加至澄清化豆類植物蛋白質水溶液，可在透濾之前或之後添加至經濃縮之蛋白質溶液或可與乾燥豆類植物蛋白質產品乾式摻合。還原劑之添加可結合上述膜處理步驟。
若期望活性胰蛋白酶抑制劑保留於蛋白質溶液中，此目的可藉
由利用具有較小孔徑之濃縮及/或透濾膜，在較低溫度下操作該膜，利用較小體積之透濾介質及不利用還原劑來達成。
若需要，視需要經濃縮及視需要經透濾之蛋白質溶液可經歷如美國專利案號5,844,086及6,005,076中所述之進一步脫脂操作。或者，視需要經濃縮及視需要經透濾之蛋白質溶液之脫脂可藉由任何其他適宜程序來達成。
該視需要經濃縮及視需要經透濾之蛋白質水溶液可經吸附劑(諸如粉末活性碳或顆粒活性碳)處理，以移除顏色及/或氣味化合物。該吸附劑處理可於任何適宜條件下(一般在蛋白質水溶液之環境溫度下)進行。就粉末活性碳而言，採用約0.025%至約5% w/v，較佳約0.05%至約2% w/v的量。該吸附劑可藉由任何適宜方法(諸如藉由透濾)自豆類植物蛋白質溶液移除。
自視需要使用之脫脂及視需要使用之吸附劑處理步驟所獲得之視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液可經歷巴斯德滅菌(pasteurization)步驟以降低微生物負載量。該巴斯德滅菌可於任何所需巴斯德滅菌條件下實現。一般而言，將視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液加熱至約55℃至約70℃，較佳約60℃至約65℃之溫度維持約30秒至約60分鐘，較佳約10至約15分鐘。該巴斯德滅菌之豆類植物蛋白質溶液可接著經冷卻用於乾燥或進一步處理，較佳冷卻至約15℃至約35℃之溫度。
若需要，該視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液可依任何適宜方式(諸如藉由過濾)精製以移除任何殘餘顆粒。
根據本發明一態樣，該視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質水溶液可藉由任何便利技術(諸如噴霧乾燥或冷凍乾燥)而乾燥，以產生豆類植物蛋白質產品。該豆類植物蛋白質產品之肌醇六磷酸含量極低，一般小於約1.5重量% d.b.。
根據本發明另一態樣，該視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質水溶液可藉由添加任何適宜鹼(通常係氫氧化鈉)將其pH調整至約6.0至約8.0。所得的經pH調整之蛋白質溶液可接著進行乾燥。或者，可將經部分或完全濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液之pH調整至約1.5至約4.4，較佳約2.0至約4.0。該pH調整可以任何適宜方式(諸如藉由添加鹽酸或磷酸)而實現。所得的酸化豆類植物蛋白質溶液可如上所述精製，接著可將其乾燥。作為另一替代方式，可使該酸化豆類植物蛋白質溶液經歷熱處理以使熱不穩定抗營養因子(諸如上述胰蛋白酶抑制劑)失活。此加熱步驟亦提供可降低微生物負載量之額外效益。一般而言，將蛋白質溶液加熱至約70℃至約160℃之溫度維持約10秒至約60分鐘，較佳係約80℃至約120℃維持約10秒至約5分鐘，更佳係約85℃至約95℃維持約30秒至約5分鐘。可接著使該經熱處理之酸化豆類植物蛋白質溶液冷卻至約2℃至約65℃，較佳約20℃至約35℃之溫度。所得的經熱處理之酸化豆類植物蛋白質溶液可如上所述精製，接著可將其乾燥。
本文所製得之豆類植物蛋白質產品於酸性水性環境中可溶，令該產品可理想地併入酸性飲料(碳酸及非碳酸飲料)中，以提供針對其之蛋白質強化。該等飲料具有自約2.5至約5範圍之寬範圍酸性pH值。本文所提供之豆類植物蛋白質產品可以任何適宜量添加至該等飲料以提供該等飲料蛋白質強化(例如，每食用份至少約5g豆類植物蛋白質)。添加之豆類植物蛋白質產品溶解於飲料中及在熱處理之後仍為可溶。
該豆類植物蛋白質產品可在藉由溶解於水中進行飲料復水之前與乾飲料(dried beverage)摻合。
於一些情況中，在存於飲料中之組分會不利地影響組合物保持溶於飲料中之能力的情況下，可能需要修改飲料之一般配方以耐受本
發明之組合物。
本文中所製得之豆類植物蛋白質產品亦可在約6至約8之近中性pH值下呈溶液形式使用。該豆類植物蛋白質產品之水溶液可為飲料。在近中性pH下製得的豆類植物蛋白質產品水溶液亦可用於製備使用近中性pH之蛋白質產品溶液(諸如，基於植物之類乳製品或替代品(諸如豆乳類飲料或豆類植物冰淇淋(例如冰凍甜點))、或包含乳製品與植物成分之混合物的乳製品類產品)之任何食品應用中。
除了上述食品應用之外，本文中所製得之豆類植物蛋白質產品亦可用於多種其他食品應用(諸如營養棒、加工肉製品及烘焙食品)中。
本實例例示在天然pH下經過膜處理之豌豆蛋白質離析物的製備。
將藉由風吹分選由碾磨黃豌豆(yellow split pea)製成之粉所製得的30kg豌豆蛋白質濃縮物添加至60℃下之300L 0.15M CaCl2溶液，及攪拌30分鐘以提供蛋白質水溶液。移除殘餘的豌豆蛋白質濃縮物及藉由離心及過濾使所得蛋白質溶液澄清，以獲得具有3.14重量%蛋白質含量之溶液。
藉由於約51℃溫度下操作，在具有10,000道耳頓截止分子量之PES膜上濃縮，使得經過濾之蛋白質溶液的體積自225L減少至60L。以600L 0.075M CaCl2透濾該經濃縮之蛋白質溶液，且該透濾操作係在約59℃之溫度下進行。所得經透濾之濃縮蛋白質溶液具有61.64kg之重量、9.08重量%之蛋白質含量及表示經過濾之蛋白質溶液之79.2重量%的產率。該經透濾之濃縮蛋白質溶液經噴霧乾燥，獲得測得具有95.67重量%(N×6.25)d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱之為
YP03-L08-11A YP702。
本實例例示依照實例1及8(下方)之方法所製得之呈溶液及呈乾燥粉末形式之豌豆蛋白質離析物的顏色。
藉由將足以提供0.48g蛋白質之蛋白質粉末溶解於15ml RO水中製得YP03-L08-11A YP702之溶液及利用以透射模式操作之HunterLab ColorQuest XE儀器之評估顏色及澄清度。亦利用pH計測得pH。
pH、顏色及澄清度值記述於下表1中。
亦利用呈反射模式之HunterLab ColorQuest XE儀器評估乾燥粉末之顏色。色值記述於下表2中。
由表2可見，YP702乾燥粉末的顏色極淺。
本實例包含評估依照實例1之方法製得之豌豆蛋白質離析物在pH 3之水中的熱穩定性。
製備YP03-L08-11A YP702之2% w/v蛋白質水溶液及利用稀HCl將pH調整至3。藉以HunterLab ColorQuest XE儀器進行濁度測定來評估該蛋白質溶液之澄清度。接著將該溶液加熱至95℃，維持在該溫度持
續30秒且接著立刻在冰水浴中冷卻至室溫。接著再次測定經熱處理之溶液的澄清度。
加熱之前及之後之蛋白質溶液的澄清度記述於下表3中。
由表3中的結果可見，熱處理不減損樣本之澄清度。事實上，該熱處理會降低樣本之濁度。
本實例包含評估依照實例1之方法所製得之豌豆蛋白質離析物在水中之溶解性。基於蛋白質溶解性(稱之為蛋白質方法，Morr等人，J.Food Sci.50：1715-1718之程序的修改版)及總產品溶解性(稱之為造粒法)測試溶解性。
在燒杯中稱取足以提供0.5g蛋白質之蛋白質粉末且接著添加少量反滲透(RO)純水及攪拌該混合物直至形成平滑糊狀物。接著再添加水使體積達到約45ml。然後利用磁攪拌器慢慢攪拌該燒瓶之內容物60分鐘。在分散蛋白質後立刻測定pH及利用稀NaOH或稀HCl將pH調整至適宜水平(2、3、4、5、6或7)。亦在天然pH下製備一樣本。就經pH調整之樣本而言，在60分鐘攪拌期間定期測量及校正pH。在攪拌60分鐘後，利用RO水使該等樣本組成50ml總體積，獲得1% w/v蛋白質分散液。利用Leco Truspec N(氮)測定儀藉由燃燒分析測定該等分散液之蛋白質含量。然後將該等分散液之等分試樣(20ml)轉移至已經在100℃烘箱中乾燥過夜接著在乾燥器中冷卻之預先稱重之離心管及加管蓋。以7,800g離心該等樣本10分鐘，此可沉降不溶性物質及產生
上清液。藉由燃燒分析測定該上清液之蛋白質含量且接著棄置該上清液及管蓋及在設定在100℃之烘箱中乾燥團粒物質過夜。第二天早晨該等管轉移至乾燥器及讓其冷卻。記錄乾燥團粒物質的重量。由所用粉末重量乘以因子((100-粉末的水分含量(%))/100)計算得初始蛋白質粉末之乾重。接著以兩種不同方法計算得產品之溶解性：
1)溶解性(蛋白質方法)(%)=(上清液中之蛋白質%/初始分散液中之蛋白質%)×100
2)溶解性(造粒法)(%)=(1-(乾燥不溶性團粒物質的重量/((20ml分散液的重量/50ml分散液的重量)×乾燥蛋白質粉末的初始重量)))×100
將經計算為大於100%之值表示為100%。
於實例1中所製得蛋白質離析物於水中之天然pH(1%蛋白質)為5.79。
所獲得之溶解性結果記述於下表4及5中。
由表4及5之結果可見，YP702產品在pH 2至4範圍內極具可溶
性。
本實例包含評估依照實例1之方法所製得之豌豆蛋白質離析物在水中之澄清度。
藉由測定在600nm處之吸光度(水空白(water blank))來評估如實例4中所述製得之1% w/v蛋白質分散液的澄清度，較低的吸光度得分值表示較高的澄清度。於HunterLab ColorQuest XE儀器上以透射模式分析樣本亦提供濁度百分比讀數(澄清度之另一量度)。
澄清度結果記述於下表6及7中。
由表6及7中之結果可見，該等溶液不透明，但在最低pH值下觀察到最低濁度讀數。
本實例包含評估依照實例1之方法所製得之豌豆蛋白質離析物在
軟性飲料及運動飲料中之蛋白質溶解性。利用添加至飲料之蛋白質，在不校正pH及再次在將蛋白質強化飲料的pH調整至初始飲料之pH水平來測定溶解性。
當在不校正pH下評估溶解性時，於燒杯中稱取足以提供1g蛋白質之量的蛋白質粉末及添加少量飲料接著攪拌直到形成平滑糊狀物。另添加飲料達到50ml之體積，且接著於磁攪拌器上慢慢攪拌該等溶液60分鐘，獲得2%w/v蛋白質分散液。利用LECO TruSpec N(氮)測定儀藉由燃燒分析測定該等樣本之蛋白質含量，接著以7,800g離心含蛋白質飲料之等分試樣10分鐘及測量上清液之蛋白質含量。
溶解性(%)=(上清液中之蛋白質%/初始分散液中之蛋白質%)×100
當在pH校正下評估溶解性時，測量不含蛋白質之軟飲料(雪碧(Sprite))(3.37)及運動飲料(佳得樂橙汁(Orange Gatorade))(3.07)的pH。於燒杯中稱取足以提供1g蛋白質之量的蛋白質粉末及添加少量飲料及攪拌直到形成平滑糊狀物。另添加飲料達到約45ml之體積，且接著於磁攪拌器上慢慢攪拌該等溶液60分鐘。在分散蛋白質後立刻測定含蛋白質飲料之pH及視需要利用HCl或NaOH溶液將pH調整至初始不含蛋白質時之pH。在60分鐘攪拌期間定期地測量及校正pH。在攪拌60分鐘後，再次利用另外的飲料使各溶液之總體積達到50ml，獲得2%w/v蛋白質分散液。利用Leco TruSpec N(氮)測定儀藉由燃燒分析測定該等樣本之蛋白質含量，接著以7,800g離心含蛋白質飲料之等分試樣10分鐘及測量上清液之蛋白質含量。
溶解性(%)=(上清液中之蛋白質%/初始分散液中之蛋白質%)×100
所獲得之結果記述於下表8中。
由表8之結果可見，YP702蛋白質在雪碧及佳得樂橙汁中均具有高溶解性。請注意YP03-L08-11A YP702在水中具有近中性之天然pH但未校正之飲料樣本的略高pH看來對溶解性影響很小。
本實例包含評估依照實例1之方法所製得之豌豆蛋白質離析物在軟性飲料及運動飲料中之澄清度。
利用實例5中所述之HunterLab方法評估實例6之所製得2% w/v蛋白質分散液於軟飲料(雪碧)及運動飲料(佳得樂橙汁)中之澄清度。
所獲得之結果記述於下表9中。
由表9中之結果可見，不管極佳的蛋白質溶解性，但YP03-L08-11A YP702亦造成雪碧及佳得樂橙汁渾濁。校正其pH僅可略微地降低
濁度水平。
本實例例示於天然pH下經膜處理但具有小於90% d.b.蛋白質含量之豌豆蛋白質產品的製備。
於環境溫度下，將48kg黃豌豆粉添加至300L RO水及攪拌30分鐘可提供蛋白質水溶液。藉由離心移除廢黃豌豆粉塊體可提供經部分澄清化之蛋白質溶液。將以1kg氯化鈣：2L水比組合無水氯化鈣及RO水製得之6.84kg氯化鈣溶液添加至該經部分澄清化之蛋白質溶液，及再將該樣本混合15分鐘。該氯化鈣溶液之添加導致形成沉澱。添加氯化鈣後該蛋白質溶液之電導率為12.37mS。使該溶液之溫度增加至約50℃且接著藉由離心使具有250L之體積及2.75重量%之蛋白質含量之樣本澄清化，可提供具有1.53重量%蛋白質含量之溶液。
藉由在具有3,000道耳頓截止分子量之PES膜上於約52℃之溫度下操作進行濃縮使得經澄清化之蛋白質溶液自225L減少至24.95kg。以經離心移除添加氯化鈣時所形成之沉澱之蛋白質溶液的29.5%的產率回收具有8.13重量%蛋白質含量之該經濃縮之蛋白質溶液。該經濃縮之蛋白質溶液經噴霧乾燥獲得測得具有78.88重量%(N×6.25)d.b.蛋白質含量之產品。該產品稱之為YP08-F28-12A YP702。
本實例包含評估依照實例1及8之方法所製得豌豆蛋白質產品之肌醇六磷酸含量。利用Latta及Eskin(J.Agric.Food Chem.，28：1313-1315)之方法測定肌醇六磷酸含量。
該等產品之肌醇六磷酸含量顯示於表10中。
由顯示於表10中之結果可見，該等豌豆蛋白質產品具有極低的肌醇六磷酸含量。
於發明總結中，本發明提供一基於使用氯化鈣水溶液自源材料萃取豆類植物蛋白質的替代方法，以獲得可溶於酸性介質中及在其中形成熱穩定溶液之豆類植物蛋白質產品。可在本發明之範疇內進行修改。
Claims (67)
- 一種製備具有至少約60重量%(N×6.25)(以乾重計)豆類植物蛋白質含量之豆類植物蛋白質產品之方法，該方法包括：(a)以鈣鹽水溶液萃取豆類植物蛋白質源，導致來自該蛋白質源之豆類植物蛋白質溶解及形成豆類植物蛋白質水溶液，(b)使該豆類植物蛋白質水溶液與殘餘豆類植物蛋白質源分離，(c)視需要濃縮該豆類植物蛋白質水溶液同時藉由利用選擇性膜技術維持其離子強度實質上恆定，(d)視需要透濾該視需要經濃縮之豆類植物蛋白質溶液，及(e)視需要乾燥該視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液。
- 如請求項1之方法，其中該鈣鹽為氯化鈣。
- 如請求項2之方法，其中該氯化鈣溶液具有小於約1.0M之濃度。
- 如請求項3之方法，其中該氯化鈣溶液具有約0.10至約0.15M之濃度。
- 如請求項1之方法，其中該萃取步驟係在約15℃至約65℃之溫度下實現。
- 如請求項5之方法，其中該溫度係約20℃至約35℃。
- 如請求項1之方法，其中該萃取步驟係在約4.5至約11之pH下進行。
- 如請求項7之方法，其中該pH係約5至約7。
- 如請求項1之方法，其中該豆類植物蛋白質水溶液具有約5至約50g/L之蛋白質濃度。
- 如請求項9之方法，其中該豆類植物蛋白質水溶液具有約10至約 50g/L之蛋白質濃度。
- 如請求項1之方法，其中該鈣鹽水溶液包含抗氧化劑。
- 如請求項1之方法，其中該豆類植物蛋白質水溶液係經吸附劑處理以自該豆類植物蛋白質水溶液移除顏色及/或氣味化合物。
- 如請求項1之方法，其中該豆類植物蛋白質水溶液與殘餘豆類植物蛋白質之該分離係在約15℃至約65℃之溫度下實現。
- 如請求項13之方法，其中該溫度係約50℃至約60℃。
- 如請求項1之方法，其中該豆類植物蛋白質水溶液係經濃縮達到約50至約400g/L之蛋白質濃度。
- 如請求項15之方法，其中該豆類植物蛋白質水溶液係經濃縮達到約100至約250g/L之蛋白質濃度。
- 如請求項1之方法，其中該濃縮步驟係利用具有約1,000至約1,000,000道耳頓截止分子量之膜藉由超過濾實現。
- 如請求項17之方法，其中該濃縮步驟係利用具有約1,000至約100,000道耳頓截止分子量之膜藉由超過濾實現。
- 如請求項1之方法，其中該透濾步驟係針對在其濃縮完成之前或之後之豆類植物蛋白質溶液，使用與萃取鹽溶液相比近似相同pH及近似相等或更小莫耳濃度之鈣鹽水溶液來實現。
- 如請求項19之方法，其中該透濾步驟係使用約1至約40體積之透濾溶液來實現。
- 如請求項20之方法，其中該透濾步驟係使用約2至約25體積之透濾溶液來實現。
- 如請求項19之方法，其中該透濾係利用具有約1,000至約1,000,000道耳頓截止分子量之膜來實現。
- 如請求項22之方法，其中該膜具有約1,000至約100,000道耳頓之截止分子量。
- 如請求項19之方法，其中該透濾係經實施直至無顯著其他量之污染物或可視色存於滲透液中。
- 如請求項19之方法，其中該透濾係經實施直至滯留物已經充分純化，以便乾燥時提供具有至少約90重量%(N×6.25)d.b.蛋白質含量之豆類植物蛋白質離析物。
- 如請求項19之方法，其中在至少一部分透濾步驟期間存在抗氧化劑。
- 如請求項1之方法，其中該視需要使用之濃縮步驟及視需要使用之透濾步驟係在約2℃至約65℃之溫度下進行。
- 如請求項27之方法，其中該溫度係約50℃至約60℃。
- 如請求項1之方法，其中該濃縮及視需要使用之透濾步驟係以有利於移除胰蛋白酶抑制劑之方式操作。
- 如請求項1之方法，其中該視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液係經吸附劑處理，以移除顏色及/或氣味化合物。
- 如請求項1之方法，其中該視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液在視需要使用之乾燥步驟之前經歷巴斯德滅菌(pasteurization)步驟。
- 如請求項31之方法，其中該巴斯德滅菌步驟係在約55℃至約70℃之溫度下實施約30秒至約60分鐘。
- 如請求項32之方法，其中該巴斯德滅菌步驟係在約60℃至約65℃之溫度下實施約10至約15分鐘。
- 如請求項31之方法，其中使該經巴斯德滅菌、視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液冷卻至約15℃至約35℃之溫度供乾燥或進一步處理用。
- 如請求項1之方法，其中精製該視需要經濃縮及視需要經透濾之 豆類植物蛋白質溶液以移除殘餘顆粒。
- 如請求項1之方法，其中該視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液在視需要使用之乾燥步驟之前經調整至約6.0至約8.0之pH。
- 如請求項1之方法，其中該經部分濃縮或完全濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液在視需要使用之乾燥步驟之前經酸化至約1.5至約4.4之pH。
- 如請求項37之方法，其中該pH係約2.0至約4.0。
- 如請求項37之方法，其中精製該酸化豆類植物蛋白質溶液以移除殘餘顆粒。
- 如請求項37之方法，其中使該酸化豆類植物蛋白質溶液在視需要使用之乾燥步驟之前經歷熱處理步驟，以使熱不穩定抗營養因子失活。
- 如請求項40之方法，其中該等抗營養因子為熱不穩定之胰蛋白酶抑制劑。
- 如請求項40之方法，其中該熱處理步驟亦將該蛋白質水溶液進行巴斯德滅菌。
- 如請求項40之方法，其中該熱處理係在約70℃至約160℃之溫度下實施約10秒至約60分鐘。
- 如請求項43之方法，其中該熱處理係在約80℃至約120℃之溫度下實施約10秒至約5分鐘。
- 如請求項44之方法，其中該熱處理係在約85℃至約95℃之溫度下實施約30秒至約5分鐘。
- 如請求項40之方法，其中使該經熱處理之酸化豆類植物蛋白質溶液冷卻至約2℃至約65℃之溫度以進行視需要使用之乾燥步驟。
- 如請求項46之方法，其中使該經熱處理之酸化豆類植物蛋白質溶液冷卻至約20℃至約35℃之溫度以進行視需要進行之乾燥步驟。
- 如請求項40之方法，其中精製該酸化豆類植物蛋白質溶液以移除殘餘顆粒。
- 如請求項1之方法，其中在萃取步驟期間存在還原劑，以破壞或重排胰蛋白酶抑制劑之雙硫鍵來達致降低胰蛋白酶抑制劑活性。
- 如請求項1之方法，其中於該視需要使用之濃縮及/或視需要使用之透濾步驟期間存在還原劑，以破壞或重排胰蛋白酶抑制劑之雙硫鍵來達致降低胰蛋白酶抑制劑活性。
- 如請求項1之方法，其中將還原劑添加至乾燥之前之該視需要經濃縮及視需要經透濾之豆類植物蛋白質溶液及/或添加至該經乾燥之豆類植物蛋白質產品，以破壞或重排胰蛋白酶抑制劑之雙硫鍵來達致降低胰蛋白酶抑制劑活性。
- 如請求項1之方法，其中該豆類植物蛋白質產品具有約60至小於約90重量%(N×6.25)d.b.之蛋白質含量及其為濃縮物。
- 如請求項1之方法，其中該豆類植物蛋白質產品具有至少約90重量%(N×6.25)d.b.之蛋白質含量及其為離析物。
- 如請求項1之方法，其中該豆類植物蛋白質產品具有至少約100重量%(N×6.25)d.b.之蛋白質含量。
- 一種依如請求項1之方法製得之豆類植物蛋白質產品。
- 一種食品組合物，其包含如請求項55之豆類植物蛋白質產品。
- 如請求項56之食品組合物，其為其中溶解有如請求項55之豆類植物蛋白質產品之酸性溶液。
- 如請求項57之食品組合物，其為飲料。
- 如請求項56之食品組合物，其為如請求項55之豆類植物蛋白質產品及水可溶性粉末物質之摻合物，該水可溶性粉末物質可用於製備該摻合物之水溶液。
- 如請求項59之食品組合物，其為飲料粉(powdered beverage)。
- 如請求項56之食品組合物，其為其中含有如請求項55之豆類植物蛋白質產品之具有約6至約8之近中性pH之溶液。
- 如請求項61之食品組合物，其為飲料。
- 如請求項56之食品組合物，其為類乳製品或乳製品替代品。
- 如請求項56之食品組合物，其為乳製品及豆類植物成分之摻合物。
- 如請求項56之食品組合物，其為加工肉製品。
- 如請求項56之食品組合物，其為烘焙食品。
- 如請求項56之食品組合物，其為營養棒。
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