KR20170040292A - 두류 단백질 제품 및 그 제조방법 - Google Patents

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Abstract

단백질원으로부터 단백질을 추출하는데 염의 사용을 포함하지 않는 방법으로 두류 단백질 제품을 생산하는 신규하고 진보된 방법을 제공한다. 또한, 맛이 향상된 새롭고 진보된 두류 단백질 제품을 제공한다. 본 발명의 범위 내에서 변경들이 가능할 수 있다.

Description

두류 단백질 제품 및 그 제조방법{PREPARATION OF PULSE PROTEIN PRODUCTS(“XY810”)}
본 발명은 새로운 두류 단백질 제품 및 그 제조방법에 관한 것이다.
본 출원인에게 양도된, 2011년 5월 9일자 출원의 미국특허출원 제13/103,528호(2011년 11월 10일자 공개된 미국특허공개 제2011-274797호), 2011년 11월 4일자 출원된 미국특허출원 제13/289,264호(2012년 5월 31일자 공개된 미국특허공개 제2012-0135117호) 및 2012년 7월 24일자 출원된 13/556,357호(2013년 7월 25일자 공개된 미국특허공개 제2013-189408호) 및 2013년 1월 7일자 출원된 미국특허출원 제13/642,003호(2013년 5월 23일자 공개된 미국특허공개 제2013-129901호), ('YP701'), 에는 우수한 용해성을 갖고 낮은 pH용액에서 선택적으로 선명하며 콩/야채 향이 없는 깨끗한 맛을 갖는 두류 단백질 제품의 제조방법들이 개시되어 있다.
본 출원인에게 양도된, 2013년 7월 9일자 출원된 미국특허출원 제13/937,266호(2014년 1월 16일자 공개된 미국특허공개 제2014-17379호)("YP701N2')에는 상술의 두류 단백질 제품들의 거의 중성 pH 형태들에 대해서 개시되어 있다. 이들 제품들은, 그들의 깨끗한 맛과 함께, 거의 중성 pH를 갖는 식품조성물에 사용하기에 유용하다. 비록 용해성이 더 향상되는 것이 바람직하지만, 거의 중성 pH에의 식품응용은 전형적으로 투명하지 않고 물에의 완전한 용해와 선명도가 필수적으로 요구되는 것은 아니다.
상술한 미국특허출원 제13/103,528호, 제13/289,264호, 제13/556,357호, 제13/642,003호 및 제13/937,266호에 개시된 제조방법들에 있어서, 단백질 추출은 칼슘염용액으로 수행된다. 이 칼슘염용액은 단백질원으로부터 단백질의 용해를 도와주고 그것을 피드산으로부터 분리하며, 여기서 이 피드산은 단백질 용액으로부터 침전되어 제거된다. 이 단백질 용액은 그 다음 선택적으로 물과 희석되고 바람직하게는 깨끗한 산성화된 단백질 용액이 제공되도록 pH가 약 1.5 내지 약 4.4로 조정된다. 이 공정들에 의해 획득된 두류 단백질 제품들의 깨끗한 맛은 샘플의 낮은 pH처리에 의해, 바람직하게는 선택적 뒤이은 막처리단계와 함께, 향상되었다.
본 출원인에게 양도된, 2014년 3월 11일자 출원의 미국특허출원 제14/203,700호(2014년 9월 11일자 공개된 미국특허공개 제2014-256914호)는 상술한 미국특허출원 제13/103,528호, 제13/289,264호, 제13/556,357호, 제13/642,003호 및 제13/937,266호에 개시된 칼슘염용액 추출 후 단백질 용액의 정제로부터 획득된 적어도 약 50wt%의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 제품을 개시하고 있다. 이러한 제품들은 칼슘염용액으로 두류 단백질원의 추출과 원심경사기에 의한 잔여 두류 단백질원의 분리에 뒤이은 디스크 스택 원심분리에 의해 획득된 질 좋은 고체를 함유할 수 있다. 한편, 이 제품들은 물로 두류 단백질원의 추출, 원심경사기에 의한 잔여 두류 단백질원의 분리 및 부분적으로 정제된 단백질 용액에 칼슘염의 첨가에 뒤이은 디스크 스택 원심분리에 의해 획득된 질 좋은 고체를 함유할 수 있다.
상술한 미국특허출원 제13/103,528호, 제13/289,264호, 제13/556,357호, 제13/642,003호, 제13/937,266호 및 제14/203,700호에 개시된 제조방법들에 있어서 하나의 관심은 단백질 추출을 수행하는데 요구되는 칼슘염의 량과 처리에 들어가는 염 량의 비용과 총량은 물론 그 공정의 낭비적 흐름에 있어서의 칼슘염의 회수 또는 폐기에 관한 것이다. 칼슘염의 감소 또는 제거는 단백질 제품의 생산 및 그 제조방법의 비용에 있어서 상당한 절감의 결과를 가져올 것이다.
본 발명의 목적은 콩/야채 맛이 실질적으로 없거나 또는 매우 낮은 그리고 단백질원 물질로부터 단백질의 추출에 칼슘염 또는 다른 염의 사용을 포함하지 않는 두류 단백질 제품의 제조를 위한 새롭고 향상된 방법을 제공하는데 있다.
따라서, 본 발명의 일 관점에 따르면, 건조기준으로 적어도 약 60 wt%, 바람직하게는 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)의 단백질함량을 갖는 두류 단백질 제품의 제조방법에 있어서,
(a) 단백질원으로부터 두류 단백질의 용해를 일으키고 수용성 두류 단백질 용액을 형성하도록 물로 두류 단백질원을 추출하는 단계,
(b) 수용성 두류 단백질 용액을 잔여 두류 단백질원으로부터 적어도 부분적으로 분리하는 단계,
(c) 산성화된 두류 단백질 용액을 생산하기 위하여 수용성 두류 단백질 용액의 pH를 약 1.5 내지 약 3.4의 pH로 조정하는 단계,
(d) 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 산성 불용 고체물질을 분리하는 단계,
(e) 선택적 막 기술에 의해 산성화된 두류 단백질 용액을 선택적으로 농축하는 단계,
(f) 선택적으로 농축된 산성화된 두류 단백질 용액을 선택적으로 다이아필트레이션(diafiltration)하는 단계, 및
(g) 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 두류 단백질 용액을 선택적으로 건조하는 단계를 포함하는 두류 단백질 제품의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 실시예에 있어서, 낮은 pH에서 제조될 때, 제품은 낮은 pH를 갖는 수용성 용액에 높은 용해성을 갖고 산성 음료와 같은 낮은 pH를 갖는 식품응용의 사용에 아주 적합하다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 산성화된 두류 단백질 용액 또는 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 산성화된 두류 단백질 용액의 pH는, 선택적 건조 전에, 약 8.0미만로 조정될 수 있다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 산성화된 두류 단백질 용액 또는 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 산성화된 두류 단백질 용액의 pH는, 선택적 건조 전에, 약6.0 내지 약 8.0으로 조정될 수 있다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 산성화된 두류 단백질 용액 또는 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 산성화된 두류 단백질 용액의 pH는, 선택적 건조 전에, 약 6.5 내지 약 7.5로 조정될 수 있다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 제품이 거의 중성 pH로 제공될 때, 중성 음료와 같은 중성 또는 거의-중성 식품응용의 사용에 적합한 형태이다.
한편, 본 발명의 산성화된 두류 단백질 용액은 콩/야채 맛에 있어서 매우 낮거나 또는 실질적으로 거의 없고, 그리고 낮은 pH를 갖는 수용성 용액에 높은 용해성을 갖고 산성 음료에 사용을 위하여 향상된 선명도의 낮은 pH 수용성 용액을 제공하는 제1 산성 두류 단백질 제품을 제공하도록 막 처리되어도 좋다. 마찬가지로 콩/야채 맛에 있어서 매우 낮거나 또는 실질적으로 거의 없는 제2 두류 단백질 제품이 산성, 중성 또는 거의 중성 식품응용에 사용되어도 좋다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 건조기준으로 적어도 약 60 wt%, 바람직하게는 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 제품의 제조방법에 있어서,
(a) 단백질원으로부터 두류 단백질의 용해를 일으키고 수용성 두류 단백질 용액을 형성하도록 물로 두류 단백질원을 추출하는 단계,
(b) 수용성 두류 단백질 용액을 잔여 두류 단백질원으로부터 적어도 부분적으로 분리하는 단계,
(c) 산성화된 두류 단백질 용액을 생산하기 위하여 수용성 두류 단백질 용액의 pH를 약 1.5 내지 약 3.4의 pH로 조정하는 단계,
(d) 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 산성 불용 고체물질을 분리하는 단계,
(e) 제1농축물 및 제1침투물에 있어서 산성화된 두류 단백질 용액의 단백질성분을 분리하기 위하여 선택적 막 기술에 의해 산성화된 두류 단백질 용액을 농축하고 및/또는 다이아필트레이션하는 단계,
(f) 제1 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 제1농축물을 선택적으로 건조하는 단계,
(g) 제2농축물 및 제2침투물을 제공하기 위하여 제1침투물을 농축하고 선택적으로 다이아필트레이션하는 단계, 및
(h) 제2 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 제2농축물을 선택적으로 건조하는 단계를 포함하는 두류 단백질 제품의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 실시예에 있어서, 제1농축물은 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 높은 분자량 단백질 종류를 포함하고 제1침투물은 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 낮은 분자량 단백질 종류 및 불순물을 포함한다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 제1 두류 단백질 제품은 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 유래된 높은 분자량 단백질을 포함한다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 제1 침투물의 농축 및 선택적 다이아필터레이션은 제2농축물에 낮은 분자량 단백질 종류는 남기고 불순물은 제2침투물로 통과하는 것을 허용한다.
본 발명의 실시예에 있어서, 제1농축물의 pH는, 선택적 건조 전에, 약 8.0 미만로 조정될 수 있다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 제1농축물의 pH는, 선택적 건조 전에, 약 6.0 내지 약 8.0으로 조정될 수 있다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 제1농축물의 pH는, 선택적 건조 전에, 약6.5 내지 약 7.5로 조정될 수 있다. 제품이 거의 중성 pH로 제공될 때, 중성 음료와 같은 중성 또는 거의-중성 식품응용의 사용에 적합한 형태이다.
본 발명의 실시예에 있어서, 상기에 언급한 본 발명의 관점들에서 야기되는 산성 불용성 고체물질은 다른 두류 단백질 제품을 제공하도록 더 처리되어도 좋다. 이 제품은 아마도 일반적으로 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 유래된 제품들과 비교하여 낮은 순도를 갖고 높은 콩/야채 맛의 레벨을 가질 수 있다. 그러나, 산성 불용성 고체물질로부터 유래된 제품의 맛 또한 아직 식품 및 음료의 응용에 사용하기에 적합하다.
본 발명의 다른 관점에 있어서, 건조기준으로 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)의 단백질함량을 갖는 두류 단백질 제품의 제조방법에 있어서, pH가 8.0 미만, 약 6.0 내지 약 8.0 및 약 6.5 내지 약 7.5로 구성되는 그룹으로부터 선택된 값으로 pH를 선택적으로 조정한 후 산성 불용 고체물질을 선택적으로 건조하는 단계를 포함하거나, 또는 바람직하게는 pH가 8.0 미만, 약 6.0 내지 약 8.0 및 약 6.5 내지 약 7.5로 구성되는 그룹으로부터 선택된 값으로 pH를 선택적으로 조정하고 산성 불용 고체물질과 동일한 pH를 갖는 약1 내지 약 20용량의 물로 산성 불용성 고체물질을 세정한 후 산성 불용성 고체물질을 선택적으로 건조하는 단계를 포함하는 두류 단백질 제품의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 또 다른 관점에 따르면, 건조중량기준으로 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)의 단백질함량을 갖는 두류 단백질 제품의 제조방법에 있어서,
(a) 단백질원으로부터 두류 단백질의 용해를 일으키고 수용성 두류 단백질 용액을 형성하도록 물로 두류 단백질원을 추출하는 단계,
(b) 수용성 두류 단백질 용액을 잔여 두류 단백질원으로부터 적어도 부분적으로 분리하는 단계,
(c) 산성화된 두류 단백질 용액을 생산하기 위하여 수용성 두류 단백질 용액의 pH를 약 1.5 내지 약 3.4의 pH로 조정하는 단계,
(d) 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 산성 불용 고체물질을 분리하는 단계, 및
택일적으로:
(e) 선택적 막 기술에 의해 산성화된 두류 단백질 용액을 선택적으로 농축하는 단계,
(f) 선택적으로 농축된 두류 단백질 용액을 선택적으로 다이아필트레이션하는 단계, 및
(g) 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 두류 단백질 용액을 선택적으로 건조하는 단계,
또는,
(h) 산성화된 두류 단백질 용액의 단백질성분을 제1농축물 및 제1침투물로 분리하기 위하여 선택적 막 기술에 의해 산성화된 두류 단백질 용액을 농축하고 및/또는 다이아필트레이션하는 단계,
(i) 제1 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 제1농축물을 선택적으로 건조하는 단계,
(j) 제2농축물 및 제2침투물을 제공하기 위하여 제1침투물을 농축하고 선택적으로 다이아필트레이션하는 단계, 및
(k) 제2 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 제2농축물을 선택적으로 건조하는 단계를 포함하는 두류 단백질 제품의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 실시예에 있어서, 제1농축물은 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 높은 분자량 단백질 종류를 포함하고 제1침투물은 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 낮은 분자량 단백질 종류 및 불순물을 포함한다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 제1 두류 단백질 제품은 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 유래된 높은 분자량 단백질을 포함한다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 제1침투물의 농축 및 선택적 다이아필터레이션은 제2농축물에 낮은 분자량 단백질 종류는 남기고 불순물은 제2침투물로 통과하는 것을 허용한다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 제2 두류 단백질 제품은 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 유래된 낮은 분자량 단백질 종류를 포함한다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 제2 두류 단백질 제품은 분리단계의 시행 없이 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 유래된 제품과 비교하여 산성용액에서의 선명도가 향상되었다.
본 발명의 실시예에 있어서, 산성 불용 고체물질은 건조중량기준으로 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 제품을 형성하기 위하여 선택적으로 건조된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 산성 불용 고체물질의 pH는, 선택적 건조단계 전에, 약 8.0 미만으로 조정될 수 있다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 산성 불용 고체물질의 pH는, 선택적 건조단계 전에, 약 6.0 내지 약 8.0으로 조정될 수 있다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 산성 불용 고체물질의 pH는, 선택적 건조단계 전에, 약6.5 내지 약 7.5로 조정될 수 있다.
본 발명의 실시예에 있어서, 산성 불용 고체물질은 약 1.5 내지 약 3.4 및 산성 불용 고체물질의 pH와 거의 동일한 그룹으로부터 선택된 pH를 갖는 약 1 내지 약 20 용량의 물과 혼합함에 의해 세정되고, 그 다음 선택적 건조단계 전에 세정 물로부터 분리된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 세정된 산성 불용 고체물질의 pH는 선택적 건조단계 전에, 약 8.0미만으로 조정될 수 있다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 세정된 산성 불용 고체물질의 pH는, 선택적 건조단계 전에, 약 6.0 내지 약 8.0으로 조정될 수 있다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 세정된 산성 불용 고체물질의 pH는, 선택적 건조단계 전에, 약 6.5 내지 약 7.5로 조정될 수 있다.
본 발명의 실시예에 있어서, 세정 물은 분리단계(d)의 산성화된 두류 단백질 용액과 결합되고 단계(e), (f) 및/또는 (g)에서와 같이 처리된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 세정 물은 분리단계(d)의 산성화된 두류 단백질 용액과 결합되고 단계(h), (i), (j) 및/또는 (k)에서와 같이 처리된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 추출단계(a)는 약 1℃ 내지 약 100℃의 온도에서 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 추출단계(a)는 약 15℃ 내지 약 65℃의 온도에서 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 추출단계(a)는 약 20℃ 내지 약 35℃의 온도에서 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 추출을 위하여 사용된 물은 추출이 약 6 내지 약 11의 pH에서 수행되도록 pH조정시약을 포함하고 있다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 추출을 위하여 사용된 물은 추출이 약 6 내지 약 8.5의 pH에서 수행되도록 pH조정시약을 포함하고 있다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, pH조정시약은 수산화나트륨이다.
본 발명의 실시예에 있어서, 수용성 두류 단백질 용액은 약 5 내지 약 50 g/L의 단백질 농도를 갖는다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 수용성 두류 단백질 용액은 약 10 내지 약 50 g/L의 단백질 농도를 갖는다.
본 발명의 실시예에 있어서, 물은 산화방지제를 포함한다.
본 발명의 실시예에 있어서, 분리단계(b)의 뒤 및 산성화단계(c)의 전에, 수용성 두류 단백질 용액은 수용성 단백질 용액으로부터 색상 및/또는 냄새화합물을 제거하기 위하여 흡착제로 처리된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 상기 수용성 두류 단백질 용액의 pH는 산성화단계(c)에서 약 2.0 내지 약 3.0으로 조정된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 분리단계(d)에 뒤이은 산성화된 수용성 단백질 용액은 열처리단계에 놓인다. 본 발명의 실시예에 있어서, 이 열처리단계는 열-불안정 반-영양인자를 불활성화하기 위하여 수행된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 반-영양인자는 열-불안정 트립신 억제제이다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 열처리단계는 산성화된 수용성 단백질 용액을 저온살균하기 위하여 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 열처리는 약 70℃ 내지 약 160℃의 온도에서 약 10초 내지 약 60분 동안 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 열처리는 약 80℃ 내지 약 120℃의 온도에서 약 10초 내지 약 5분 동안 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 열처리는 약 85℃ 내지 약 95℃의 온도에서 약 30초 내지 약 5분 동안 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 열처리되고 산성화된 두류 단백질 용액은 약 2℃ 내지 약 65℃의 온도로 냉각된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 열처리되고 산성화된 두류 단백질 용액은 약 50℃ 내지 약 60℃의 온도로 냉각된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 적어도 약 60wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 건조된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 50 내지 약 300 g/L의 단백질 농도를 갖는 농축되고 산성화된 두류 단백질 용액을 생산하기 위하여 농축단계(e)에 놓인다. 본 발명의 실시예에 있어서, 농축되고 산성화된 두류 단백질 용액은 다이아필트레이션 단계(f)에 놓이게 된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 농축되고 산성화된 두류 단백질 용액은 약 100 내지 약 200 g/L의 단백질 농도를 갖는다.
본 발명의 실시예에 있어서, 농축단계(e)는 약 1,000 내지 약 1,000,000 달톤(dalton)의 분자량차단을 갖는 막을 사용하는 한외여과에 의해 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 농축단계(e)는 약 1,000 내지 약 100,000 달톤(dalton)의 분자량차단을 갖는 막을 사용하는 한외여과에 의해 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 다이아필트레이션 단계(f)는 부분적 또는 전체의 농축 전이나 후에 산성화된 수용성 두류 단백질 용액에 물 또는 산성화된 물을 사용하여 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 다이아필트레이션 단계(f)는 약 1 내지 약 40 용량의 다이아필트레이션 용액을 사용하여 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 다이아필트레이션 단계(f)는 약 2 내지 약 25 용량의 다이아필트레이션 용액을 사용하여 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 다이아필트레이션 단계(f)는 침투물에 불순물의 량이나 가시적 색상이 의미가 없을 때까지 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 다이아필트레이션 단계(f)는 농축물이 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하도록 충분히 정제될 때까지 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 다이아필트레이션 단계(f)는 약 1,000 내지 약 1,000,000 달톤의 분자량차단을 갖는 막을 사용하여 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 다이아필트레이션 단계(f)는 약 1,000 내지 약 100,000 달톤의 분자량차단을 갖는 막을 사용하여 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 산화방지제는 다이아필트레이션 단계(f)의 적어도 일부분 동안 다이아필트레이션 매체에 존재한다.
본 발명의 실시예에 있어서, 농축단계(e) 및 선택적 다이아필트레이션 단계(f)는 약 2℃ 내지 약 65℃의 온도에서 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 농축단계(e) 및 선택적 다이아필트레이션 단계(f)는 약 50℃ 내지 약 60℃의 온도에서 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 50 내지 약 300 g/L의 단백질 농도를 갖는 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액(제1농축물)을 생산하기 위하여 단계(h)에 놓인다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 100 내지 약 200 g/L의 단백질 농도를 갖는 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액(제1농축물)을 생산하기 위하여 단계(h)에 놓인다.
본 발명의 실시예에 있어서, 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 0.05 내지 약 0.1 ㎛의 구멍크기를 갖는 막을 사용하는 정밀여과에 의해 단계(h)에 놓인다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 0.08 내지 약 0.1 ㎛의 구멍크기를 갖는 막을 사용하는 정밀여과에 의해 단계(h)에 놓인다.
본 발명의 실시예에 있어서, 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 10,000 내지 약 1,000,000 달톤의 분자량차단을 갖는 막을 사용하는 한외여과에 의해 단계(h)에 놓이다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 100,000 내지 약 1,000,000 달톤의 분자량차단을 갖는 막을 사용하는 한외여과에 의해 단계(h)에 놓인다.
본 발명의 실시예에 있어서, 다이아필트레이션 단계(h)는 뒤이은 선택적 농축 전 또는 부분적이거나 전체의 농축 후에 산성화된 수용성 두류 단백질 용액에 물 또는 산성화된 물을 사용하여 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 다이아필트레이션 단계(h)는 약 1 내지 약 40 용량의 다이아필트레이션 용액을 사용하여 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 다이아필트레이션 단계(h)는 약 2 내지 약 25 용량의 다이아필트레이션 용액을 사용하여 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 다이아필트레이션 단계(h)는 농축물이 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하도록 충분히 정제될 때까지 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 산화방지제는 다이아필트레이션 단계(h)의 적어도 일부분 동안 다이아필트레이션 매체에 존재한다.
본 발명의 실시예에 있어서, 농축단계 및 선택적 다이아필트레이션 단계는 약 2℃ 내지 약 65℃의 온도에서 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 농축단계 및 선택적 다이아필트레이션 단계는 약 50℃ 내지 약 60℃의 온도에서 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 제1침투물은 약 10 내지 약 300 g/L의 단백질 농도를 갖는 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액(제2농축물)을 생산하기 위하여 단계(j)에 놓인다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 제1침투물은 약 100 내지 약 200 g/L의 단백질 농도를 갖는 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액(제2농축물)을 생산하기 위하여 단계(j)에 놓인다.
본 발명의 실시예에 있어서, 농축 및 선택적 다이아필트레이션 단계는 약 1,000 내지 약 100,000 달톤의 분자량차단을 갖는 막을 사용하는 한외여과에 의해 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 농축 및 선택적 다이아필트레이션 단계는 약 1,000 내지 약 10,000 달톤의 분자량차단을 갖는 막을 사용하는 한외여과에 의해 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 선택적 다이아필트레이션 단계는 부분적이거나 전체의 농축 전 또는 후 제2농축물에 물 또는 산성화된 물을 사용하여 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 농축의 다이아필트레이션 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j)는 약 1 내지 약 40 용량의 다이아필트레이션 용액을 사용하여 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 농축의 다이아필트레이션 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j)는 약 2 내지 약 25 용량의 다이아필트레이션 용액을 사용하여 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 농축의 다이아필트레이션 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j)는 농축물이 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하도록 충분히 정제될 때까지 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 산화방지제는 농축의 다이아필트레이션 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j)의 적어도 일부분 동안 다이아필트레이션 매체에 존재한다.
본 발명의 실시예에 있어서, 농축의 다이아필트레이션 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j)는 약 2℃ 내지 약 65℃의 온도에서 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 농축의 다이아필트레이션 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j)는 약 50℃ 내지 약 60℃의 온도에서 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 다이아필트레이션되고 산성화된 두류 단백질 용액은 열처리단계에 놓인다. 본 발명의 실시예에 있어서, 이 열처리단계는 열 불안정 트립신 억제제를 포함하는 열-불안정 반-영양인자를 불활성화하기 위하여 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 부분적으로 농축되거나 또는 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액은 열처리단계에 놓인다. 본 발명의 실시예에 있어서, 이 열처리단계는 열 불안정 트립신 억제제를 포함하는 열-불안정 반-영양인자를 불활성화하기 위하여 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 열처리는 약 70℃ 내지 약 160℃의 온도에서 약 10초 내지 약 60분 동안 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 열처리는 약 80℃ 내지 약 120℃의 온도에서 약 10초 내지 약 5분 동안 수행된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 열처리는 약 85℃ 내지 약 95℃의 온도에서 약 30초 내지 약 5분 동안 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 열처리된 두류 단백질 용액은 약 2℃ 내지 약 65℃의 온도로 냉각된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 열처리된 두류 단백질 용액은 약 50℃ 내지 약 60℃의 온도로 냉각된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 단백질 용액은 색상 및/또는 냄새화합물을 제거하기 위하여 흡착제로 처리된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 단백질 용액은 건조 전에 저온살균된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 저온살균단계는 약 55℃ 내지 약 75℃의 온도에서 약 15초 내지 약 60분 동안 수행된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하기 위하여 건조단계(g)에 놓인다. 본 출원인은 이 두류 단백질 분리물을 810으로 명명했다.
본 발명의 실시예에 있어서, 제1농축물의 농축되고 및/또는 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하기 위하여 건조단계(i)에 놓인다. 본 출원인은 이 두류 단백질 분리물을 816B로 명명했다.
본 발명의 실시예에 있어서, 제2농축물의 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하기 위하여 건조단계(k)에 놓인다. 본 출원인은 이 두류 단백질 분리물을 816A로 명명했다.
본 발명의 실시예에 있어서, 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액의 pH는, 선택적 건조단계(g) 전에, 약 8.0미만로 조정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액의 pH는, 선택적 건조단계(g) 전에, 약6.0 내지 약 8.0으로 조정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액의 pH는, 선택적 건조단계(g) 전에, 약 6.5 내지 약 7.5로 조정된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 막처리되고 산성화된 두류 단백질 용액의 pH는, 선택적 건조단계(i) 전에, 약 8.0미만로 조정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 막처리되고 산성화된 두류 단백질 용액의 pH는, 선택적 건조단계(i) 전에, 약6.0 내지 약 8.0으로 조정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 막처리되고 산성화된 두류 단백질 용액의 pH는, 선택적 건조단계(i) 전에, 약 6.5 내지 약 7.5로 조정된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 농축 및/또는 선택적 다이아필트레이션 단계는 트립신 억제인자를 제거하는데 우호적 방법으로 작동된다.
본 발명의 실시예에 있어서, 추출단계(a) 동안 감소제가 존재한다. 본 발명의 실시예에 있어서, 추출단계(a) 동안 이 감소제의 존재는 트립신 억제인자 활동의 감소를 달성하기 위하여 트립신 억제인자의 시스틴 결합을 방해하거나 재배열하기 위한 의도이다.
본 발명의 실시예에 있어서, 감소제는 선택적 농축단계(e) 및/또는 선택적 디단계(f) 동안 또는 막처리단계(h) 동안 존재한다. 본 발명의 실시예에 있어서, 이 감소제의 존재는 트립신 억제인자 활동의 감소를 달성하기 위하여 트립신 억제인자의 시스틴 결합을 방해하거나 재배열하기 위한 의도이다.
본 발명의 실시예에 있어서, 감소제는 건조단계(g) 전의 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 두류 단백질 용액 및/또는 건조된 두류 단백질 제품에 부가된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 이 감소제의 존재는 트립신 억제인자 활동의 감소를 달성하기 위하여 트립신 억제인자의 시스틴 결합을 방해하거나 재배열하기 위한 의도이다.
본 발명의 실시예에 있어서, 감소제는 건조단계(i) 전의 막처리된 두류 단백질 용액 및/또는 건조된 두류 단백질 제품에 부가된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 이 감소제의 존재는 트립신 억제인자 활동의 감소를 달성하기 위하여 트립신 억제인자의 시스틴 결합을 방해하거나 재배열하기 위한 의도이다.
본 발명의 실시예에 있어서, 감소제는 건조단계(k) 전의 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 두류 단백질 용액 및/또는 건조된 두류 단백질 제품에 부가된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 이 감소제의 존재는 트립신 억제인자 활동의 감소를 달성하기 위하여 트립신 억제인자의 시스틴 결합을 방해하거나 재배열하기 위한 의도이다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 본 발명은 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고 염의 부가를 포함하는 처리단계 없이 제조된 두류 단백질 제품을 제공하고, 이 제품은 콩 또는 야채 맛이 거의 없으며 생산하는데 효소가 필요없는 두류 단백질 제품을 제공한다. 본 발명의 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 약 1.5 wt% d.b. 이상의 피드산을 함유한다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 약 4.0 미만의 산성 pH 값의 수용성 매체에 완전히 용해가능하다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 약 3.0 미만의 산성 pH 값의 수용성 매체에 완전히 용해가능하다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 용액 또는 미결정 상태의 단백질 제품을 유지하기 위하여 안정화제나 다른 첨가제를 요구하지 않는다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 혼합물의 수용성 용액의 생성을 위한 물-용해성 분말물질과 혼합된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 분말화된 음료이다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 상술한 바와 같은 두류 단백질 제품의 수용성 용액이 제공된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 이 수용성 용액은 음료이다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 음료는 이 두류 단백질 제품이 완전히 용해되고 실질적으로 투명한 선명한 음료이다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 음료는 선명한 음료가 아니고 용해된 두류 단백질이 헤이즈레벨을 증가시키지 않는다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 음료는 선명한 음료가 아니고 용해된 두류 단백질이 음료의 헤이즈레벨에 기여한다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 낮은 트립신 억제인자 활동을 갖는다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 약 2 내지 약 3의 pH에 있는 약 90% 이상의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도를 가지며, 약 4 내지 약 6의 pH에 있는 약 35% 미만의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도를 갖고 그리고 약 7의 pH에 있는 약 25% 내지 55% 사이의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도를 갖는 두류 단백질 제품이 제공된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 두류 단백질 제품의 용해도는 실시예 9의 방법에 의해 결정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 노란 콩 단백질 제품이다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 약 2의 pH에 있는 약 35% 내지 75% 사이의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도를 가지며, 약 3의 pH에 있는 약 25% 내지 55% 사이의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도를 갖고, 약 4의 pH에 있는 약 15% 내지 30% 사이의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도를 가지며, 그리고 약 7의 pH에 있는 약 15% 내지 50% 사이의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도를 갖는 두류 단백질 제품이 제공된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 두류 단백질 제품의 용해도는 실시예 9의 방법에 의해 결정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 노란 콩 단백질 제품이다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 약 100,000 Da 이상의 약 7 내지 약 20%, 약 15,000 내지 약 100,000 Da의 약 13 내지 약 40%, 약 5,000 내지 약 15,000 Da의 약 15 내지 약 28%, 및 약 1,000 내지 약 5,000 Da의 약 21 내지 약 57%를 포함하는 분자량 프로필(profile)을 갖는 두류 단백질 제품이 제공된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 두류 단백질 제품의 분자량 프로필은 실시예 10의 방법에 의해 결정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 노란 콩 단백질 제품이다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 약 100,000 Da 이상의 약 12 내지 약 27%, 약 15,000 내지 약 100,000 Da의 약 18 내지 약 35%, 약 5,000 내지 약 15,000 Da의 약 20 내지 약 37%, 및 약 1,000 내지 약 5,000 Da의 약 12 내지 약 43%를 포함하는 분자량 프로필(profile)을 갖는 두류 단백질 제품이 제공된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 두류 단백질 제품의 분자량 프로필은 실시예 10의 방법에 의해 결정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 노란 콩 단백질 제품이다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 약 100,000 Da 이상의 약 4 내지 약 8%, 약 15,000 내지 약 100,000 Da의 약 32 내지 약 36%, 약 5,000 내지 약 15,000 Da의 약 43 내지 약 48%, 및 약 1,000 내지 약 5,000 Da의 약 12 내지 약 16%를 포함하는 분자량 프로필(profile)을 갖는 두류 단백질 제품이 제공된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 두류 단백질 제품의 분자량 프로필은 실시예 10의 방법에 의해 결정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 노란 콩 단백질 제품이다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 약 100,000 Da 이상의 약 8 내지 약 12%, 약 15,000 내지 약 100,000 Da의 약 16 내지 약 27%, 약 5,000 내지 약 15,000 Da의 약 13 내지 약 21%, 및 약 1,000 내지 약 5,000 Da의 약 43 내지 약 57%를 포함하는 분자량 프로필(profile)을 갖는 두류 단백질 제품이 제공된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 두류 단백질 제품의 분자량 프로필은 실시예 10의 방법에 의해 결정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 노란 콩 단백질 제품이다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 약 2 내지 약 7의 pH에 있는 약 40% 미만의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도를 가지며, 약 3.0% d.b. 이상의 피드산 함량을 갖는 두류 단백질 제품이 제공된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 두류 단백질 제품의 용해도는 실시예 9의 방법에 의해 결정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 노란 콩 단백질 제품이다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 약 2 내지 약 7의 pH에 있는 약 30% 미만의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도를 가지며, 6% d.b. 이상의 산 분해성 탄수화물 함량을 갖는 두류 단백질 제품이 제공된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 두류 단백질 제품의 용해도는 실시예 9의 방법에 의해 결정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 산 분해성 탄수화물 함량은 실시예 12의 방법에 의해 결정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 노란 콩 단백질 제품이다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 약 2 내지 약 4의 pH에 있는 약 90% 이상의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도를 가지며, 6% d.b. 이상의 산 분해성 탄수화물 함량을 갖는 두류 단백질 제품이 제공된다. 본 발명의 실시예에 있어서, 두류 단백질 제품의 용해도는 실시예 9의 방법에 의해 결정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 산 분해성 탄수화물 함량은 실시예 12의 방법에 의해 결정된다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 노란 콩 단백질 제품이다.
본 발명의 다른 관점에 따르면, 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 염 또는 발효제의 첨가 없이 준비되며, 30% 미만 및 20% 미만의 그룹으로부터 선택된, 15 ml의 물에 0.48g의 단백질을 공급하기 위한 충분한 량의 단백질 분말을 용해함에 의해 제조된 용액의 분무독출을 갖는 두류 단백질 제품이 제공된다. 본 출원인은 이 두류 단백질 제품을 816A로 명명했다. 본 발명의 실시예에 있어서, 염은 칼슘염이다. 본 발명의 다른 실시예에 있어서, 이 두류 단백질 제품은 노란 콩 단백질 제품이다.
여기에 개시된 제조방법에 따라 생산된 두류 단백질 제품은, 식품 및 음료의 기능적 성분으로서 그리고 가공식품 및 음료의 단백질 보강을 포함하는, 단백질 제품의 종래의 광범위한 응용에의 사용을 위해 적합하다. 여기에 개시된 제조방법에 따라 생산된 두류 단백질 제품의 기타 용도들로서는 애완동물 식품, 동물사료, 그리고 산업 및 화장품 분야에의 응용 및 개인위생용품등이다.
도 1은 본 발명의 제조방법의 실시예를 설명하기 위한 개략적 흐름도이다.
도 2는 본 발명의 제조방법의 실시예를 설명하기 위한 개략적 흐름도이다.
본 발명의 두류 단백질 제품을 제조하는 방법의 시작단계는 두류 단백질원으로부터 두류 단백질을 용해하는 것을 포함한다. 본 발명에 적용되는 두류들은, 이것들에 한정되는 것은 아니지만, 렌틸 콩(lentils), 병아리콩, 건조 완두콩 및 건조 콩 등을 포함한다. 두류 단백질원은 두류 또는 어떤 두류제품 또는 두류 가공으로부터 유래된 반제품이어도 좋다. 예를 들면, 이 두류 단백질원은 선택적으로 탈피한 두류를 분쇄함에 의해 준비된 가루이어도 좋다. 다른 예로서, 이 두류 단백질원은 두류를 탈피하고 분쇄한 후 탈피되고 분쇄된 물질을 고탄수화물 부분과 고단백질 부분으로 공기 분류함에 의해 형성된 고단백질 두류 부분일 수 있다. 두류 단백질원으로부터 회수된 두류 단백질 제품은 두류에서 자연적으로 발생하는 단백질이어도 좋고 또는 단백질성 물질이 유전적 처리에 의해 변형된 그러나 소수성 및 극지 성질의 자연 단백질 특성을 소유하는 단백질이어도 좋다.
본 발명의 두류 단백질 제품은 뱃치 공정(batch process) 또는 연속 공정 또는 반-연속공정의 어느 것에 의해 두류 단백질원으로부터 제조될 수 있다. 두류 단백질원 물질로부터 단백질의 용해는 물을 사용하여 수행한다. 사용된 물은 수돗물 또는 다른 레벨의 순도를 갖는 물일 수 있다. 본 발명의 실시예에 있어서, 역삼투(RO) 정제된 물이 바람직하다.
추출의 pH는 약 6 내지 약 11, 바람직하게는 약 6.5 내지 약 8.5이다. 식품등급 수산화 나트륨 또는 수산화칼륨 또는 기타 적합한 식품등급 알칼리가 요구되는 추출의 pH로 조정하기 위하여 물에 부가될 수 있다. 단백질의 용해는 약 1℃ 내지 약 100℃, 바람직하게는 약 15℃ 내지 약 65℃, 더욱 바람직하게는 약 20℃ 내지 약 35℃의 온도에서, 바람직하게는 통상 약 1분 내지 약 60분이 소요되는 용해시간을 단축하기 위하여 교반을 행하면서 수행한다. 추출의 온도는 물 내의 두류 단백질원의 슬러리의 점도가 혼합 또는 펌프능력을 악화시키지 않도록 되어야 한다. 본 발명의 실시예에 있어서, 전체적 높은 생산성을 제공할 수 있도록, 할 수 있는 한 많은 단백질을 두류 단백질원으로부터 실질적으로 추출하기 위하여 용해를 수행하는 것이 바람직하다.
두류 단백질원으로부터 단백질의 추출은, 연속조작으로 수행될 때, 두류 단백질원으로부터 단백질의 연속추출을 수행하는데 어떤 일정한 방식으로 수행된다. 한 실시예에 있어서, 두류 단백질원은 연속적으로 물과 혼합되고, 이 혼합물은 미만에 개시되는 변수들에 따라 소망하는 추출을 수행하는데 충분한 체류시간을 위한 흐름율로 그리고 일정 길이를 갖는 파이프 또는 도관을 통해 전송된다.
용해단계 동안 물 내의 두류 단백질원의 농도는 광범위하게 변할 수 있다. 전형적인 농도값은 약 5 내지 약 20% w/v 이다.
단백질 추출단계는 두류 단백질 단백질원에 존재할 수 있는 지방을 용해하는 부가적 효과를 갖고, 이것은 수상에 존재하는 지방이 된다.
추출단계로부터 획득한 단백질 용액은 일반적으로 약 5 내지 약 50 g/L, 바람직하게는 약 10 내지 약 50 g/L의 단백질 농도를 갖는다.
물은 산화방지제를 포함해도 좋다. 이 산화방지제는 아황산나트륨 또는 아스코르브산과 같은 어떤 종래의 산화방지제이어도 좋다. 채용되는 산화방지제의 량은 용액의 약 0.01 내지 약 1 wt%로 다양하고, 바람직하게는 약 0.05 wt%이다. 이 산화방지제는 단백질 용액 내의 어떤 석탄산의 산화를 억제하는 역할을 한다.
다음, 추출단계로부터 획득된 수상은, 원심경사기를 채용함에 의한 것과 같은, 어떤 종래의 방식에 의해 잔여 두류 단백질원의 덩어리로부터 분리된다. 바람직하게는, 미립자 잔여 두류 단백질원 물질은 두류 단백질 용액 내에 남아 있지만, 그러나 원한다면, 이들 미립자 고체들은 디스크 원심분리 및/또는 여과에 의해 제거되어져도 좋다. 이 분리단계는 약 1℃ 내지 약 100℃, 바람직하게는 약 15℃ 내지 약 65℃, 더욱 바람직하게는 약 20℃ 내지 약 35℃의 범위 이내의 어떤 온도에서 수행되어져도 좋다. 분리단계의 온도는 물에서 두류 단백질원의 슬러리의 점도가 분리단계를 방해하지 않게 되어야 한다. 분리된 잔여 두류 단백질원 물질은, 탄수화물 및/또는 잔여 단백질의 회수와 같이, 처분 또는 추가가공을 위하여 건조되어져도 좋다. 잔여 단백질은 새로운 물로 분리된 잔여 두류 단백질원을 재-추출함에 의해 회수되어져도 좋고 정제하에 추출된 이 단백질 용액은 미만에 개시되는 바와 같이 추가처리를 위하여 초기 단백질 용액과 혼합되어도 좋다. 역류추출공정이 또한 이용되어도 좋다. 분리된 잔여 두류 단백질원은 한편 잔여 단백질의 회수를 위하여 어떤 다른 기존의 공정에 의해 처리되어도 좋다.
수용성 두류 단백질 용액은 추가가공에 의해 형성된 거품의 량을 감소시키기 위하여, 어떤 식품등급의 소포제에 기초된 비-실리콘과 같은, 소포제로 처리되어져도 좋다. 채용되는 소포제의 량은 일반적으로 약 0.0003% w/v 이상이다. 한편, 개시된 량의 소포제는 추출단계에서 부가되어도 좋다.
분리된 수용성 두류 단백질 용액은, 만약 소망하거나 요구된다면, 지방제거작동에 놓여질 수 있다. 분리된 수용성 두류 단백질 용액의 지방제거는 종래의 공정에 의해 수행되어져도 좋다.
수용성 두류 단백질 용액은 색상 및/또는 냄새화합물을 제거하기 위하여 알갱이 활성탄과 같은 흡착제로 처리되어도 좋다. 이러한 흡착제처리는 일반적으로 분리된 수용성 단백질 용액의 주변온도에서 어떤 종래의 조건들 하에서 수행될 수 있다.
이 두류 단백질 용액은 그 다음 염산 또는 인산과 같은 어떤 적합한 식품등급 산의 첨가에 의해 pH값이 약 1.5 내지 약 3.4, 바람직하게는 약 2.0 내지 약 3.0으로 조정된다. 두류 단백질을 위하여, 전형적으로 등전침전이 약 pH 4.5에서 수행된다. 본 발명의 공정에 있어서 낮은 값으로 pH를 조정함에 의해, 단백질의 더 많은 부분, 바람직하게는 단백질의 의미 있는 부분, 즉 단백질의 약 35 wt% 이상, 바람직하게는 약 60 wt% 이상, 더욱 바람직하게는 약 80 wt% 이상의 부분이 산성화된 용액에 용해가능하다. 남아 있는 단백질은 산성 불용 고체물질로 정의된 것에 함유되고, 이것은 디스크 스택 원심분리의 이용에 의해서와 같은 종래의 수단에 의해 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 제거되고 아래에 개시하는 바와 같이 추가처리 된다. pH조정은 어떤 기존의 온도에서 행하여 져도 좋고 본 발명의 한 실시예에 있어서 바람직하게는 pH조정을 위한 두류 단백질 용액의 온도는 20℃ 내지 35℃이다. 만약 원한다면, 두류 단백질 용액은 상기한 산성화단계 전에 물로 희석되어져도 좋다.
만약 소망하거나 요구된다면, 산성화된 단백질 용액의 pH는 추가처리 전에 더 낮추어 져도 좋다. 산성화된 단백질 용액의 조정된 pH는 아직 약 1.5 내지 약 3.4, 바람직하게는 약 2.0 내지 약 3.0의 범위내에 있어야 한다.
산성화된 수용성 두류 단백질 용액은, 추출단계 동안 두류 단백질원 물질로부터 추출된 용액에 존재하는 트립신 억제인자와 같은, 열 불안정 반-영양인자를 불활성화하기 위하여 열처리에 놓일 수 있다. 이러한 가열단계는 또한 세균증식을 감소시키는 부가적 이익을 제공한다. 일반적으로, 단백질 용액은 약 70℃ 내지 약 160℃의 온도, 바람직하게는 약 80℃ 내지 약 120℃, 더욱 바람직하게는 약 85℃ 내지 약 95℃의 온도에서, 약 10초 내지 약 60분, 바람직하게는 약 10초 내지 약 5분, 더욱 바람직하게는 약 30초 내지 약 5분 동안 가열된다. 이 열처리되고 산성화된 두류 단백질 용액은 그 다음 미만에 개시되는 바와 같은 추가처리를 위해 약 2℃ 내지 약 65℃, 바람직하게는 약 50℃ 내지 약 60℃의 온도로 냉각되어도 좋다.
획득한 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 두류 단백질 제품을 생산하기 위하여 직접 건조되어 져도 좋다. 두류 단백질 분리물과 같은, 불순물 함량이 감소된 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여, 산성화된 두류 단백질 용액은 건조 전에 아래에 기재되는 바와 같이 처리되어도 좋다. 아래에 기재되는 추가처리는 또한 제품의 맛에 이로운 효과가 있는 것이다.
산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 50 내지 약 300 g/L, 바람직하게는 약 100 내지 약 200 g/L의 단백질 농도를 갖는 농축된 두류 단백질 용액을 제공하기 위하여 농축되어 져도 좋다.
농축단계는, 약 1000 내지 약 1,000,000 달톤, 바람직하게는 약 1,000 내지 100,000 달톤과 같은 적절한 분자 질량 차단과 함께, 그리고 서로 다른 막 재질 및 구조를 갖는, 동공-섬유 막 또는 나선-권선 막과 같은, 막들을 사용하여, 한외여과 또는 다이아필트레이션과 같은 어떤 편리한 선택적 막 기술을 채용함에 의해서와 같이, 뱃치 또는 계속적인 조작으로 한결같은 어떤 편리한 방법으로 수행되어도 좋고, 그리고 계속적인 조작을 위하여, 수용성 단백질 용액이 막들을 통해 통과하는 것과 같이 소망하는 농도를 허용하도록 치수되어진다.
잘 알려져 있는 바와 같이, 한외여과 및 유사한 선택적 막 기술은 낮은 분자량 종류는 그 막의 통과를 허용하는 반면 높은 분자량 종류들은 통과를 허용하지 않는다. 낮은 분자량 종류는 탄수화물, 색소, 저분자량 단백질들 및 트립신 억제인자와 같은 반-영양 인자들과 같은 원 물질로부터 추출된 낮은 분자량종류를 포함하고, 이것들은 스스로 저분자량 단백질들이다. 막의 분자량 차단은 통상적으로, 다른 막 물질 및 구조와 관련하여 오염물질의 통과를 허용하는 한편, 용액 내에 단백질의 의미 있는 비율의 유지를 보장하도록 선택된다.
농축된 두류 단백질 용액은 그 다음 물을 사용하여 다이아필트레이션 단계에 놓이게 된다. 다이아필트레이션 물은 바람직하게는 다이아필트레이션되는 단백질 용액과 동일한 pH 값에 있다. 이러한 다이아필트레이션(diafiltration)은 약 1 내지 약 40 용량의 다이아필트레이션 용액, 바람직하게는 약 2 내지 약 25 용량의 다이아필트레이션 용액을 사용하여 수행되어도 좋다. 다이아필트레이션 조작에 있어서, 불순물의 추가량이 침투물과 함께 막 침투를 통해 통과함에 의해 수용성 두류 단백질 용액으로부터 제거된다. 이것은 수용성 단백질 용액을 정제하고 또한 그것의 점성을 감소시킨다. 이 다이아필트레이션 조작은 불순물 량이 의미가 없을 때까지 또는 알아볼 수 있는 색상이 침투에 나타나지 않을 때까지 또는 농축물이, 건조되었을 때, 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하도록 충분히 정제될 때까지 수행되어도 좋다. 이러한 다이아필트레이션은 농축단계를 위한 것과 동일한 막을 사용하여 수행되어도 좋다. 그러나, 원한다면, 다이아필트레이션 단계는 약 1,000 내지 약 1,000,000 달톤, 바람직하게는 약 1,000 내지 약 100,000 달톤의 범위내의 분자량 차단을 가지는 막과 같은, 그리고 재질 및 구조가 서로 다른 막을 갖는, 다른 분자량 차단을 갖는 별도의 막을 사용하여 수행되어도 좋다.
한편, 다이아필트레이션 단계는 농축 전의 산성화된 수용성 단백질 용액에 또는 부분적으로 농축된 산성화된 수용성 단백질 용액에 적용되어도 좋다. 또한 다이아필트레이션은 농축과정 동안 다수 포인트들에서 적용되어도 좋다. 다이아필트레이션이 농축 전에 또는 부분적으로 농축된 용액에 적용될 때, 획득되는 다이아필트레이션된 용액은 그 다음 추가로 농축될 수 있다. 단백질 용액이 농축되는 것으로서 다수회의 다이아필트레이션에 의해 달성되는 점성감소는 높은 최종적이고 완전히 농축된 단백질 농도가 달성되는 것을 허용한다. 이것은 건조되어 질 물질의 량을 감소시킨다.
농축단계 및 다이아필트레이션 단계는 뒤이어 회수된 두류 단백질 제품이 적어도 약 60 wt% 단백질 (N x 6.25)d.b.과 같이 약 90 wt% 단백질 (N x 6.25)d.b. 미만로 포함되는 것과 같은 방식으로 수행되어도 좋다. 수용성 두류 단백질 용액을 부분적으로 농축하고 및/또는 부분적으로 다이아필트레이션 함에 의해, 단지 불순물을 부분적으로 제거하는 것이 가능하다. 이 단백질 용액은 그 다음 낮은 레벨의 순도를 갖는 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 건조된다.
산화방지제가 다이아필트레이션 물에 적어도 다이아필트레이션 단계의 부분 동안 존재해도 좋다. 이 산화방지제는 황산 나트륨, 아스코르브산과 같은 어떤 편리한 산화방지제이어도 좋다. 다이아필트레이션 물에 채용된 산화방지제의 량은 채용된 물질에 의존하고 약 0.01 내지 1 wt%, 바람직하게는 약 0.05 wt%로 다양화될 수 있다. 이 산화방지제는 두류 단백질 용액에 나타나는 어떤 석탄산의 산화를 방지한다.
선택적 농축단계 및 선택적 다이아필트레이션 단계는 어떠한 편리한 온도, 일반적으로 약 2℃ 내지 약 65℃, 바람직하게는 약 50 내지 약 60℃의 온도 하에서, 소망하는 정도의 농축 및 다이아필트레이션을 수행하기 위한 시간 동안 수행된다. 어떤 정도에까지 사용된 온도 및 다른 조건들은 막 공정을 효과적으로 수행하는데 사용된 막 장비, 용액의 소망하는 단백질 농도 및 침투물에 대한 불순물 제거의 효과에 의존한다.
앞서 암시된 바와 같이, 두류는 반-영양 트립신 억제인자들을 함유하고 있다. 최종 두류 단백질 제품에 트립신 억제인자 활동성의 레벨은 다양한 처리 변화들의 조작에 의해 제어될 수 있다.
상기에서 알 수 있는 바와 같이, 산성화된 수용성 두류 단백질 용액의 열처리는 열 불안정 트립신 억제인자들을 불활성화하기 위하여 사용되어도 좋다. 부분적으로 농축된 또는 완전히 농축된 산성화된 두류 단백질 용액은 또한 열-불안정 트립신 억제인자들을 불활성화하기 위하여 열처리 되어도 좋다. 이 열처리가 부분적으로 농축된 산성화된 두류 단백질 용액에 적용될 때, 획득되는 열 처리된 용액은 그 다음 추가적으로 농축되어도 좋다.
부가하여, 농축 및/또는 다이아필트레이션 단계는 다른 불순물과 함께 침투물에 있는 트립신 억제인자들의 제거를 위하여 호의적인 방법으로 조작되어도 좋다. 트립신 억제인자들의 제거는, 약 30,000 내지 약 1,000,000 달톤(Da)과 같은, 보다 큰 구멍 크기의 막을 사용함에 의해, 약 30 내지 약 65℃, 바람직하게는 약 50℃ 내지 약 60℃와 같은 상승된 온도에서 막을 조작함에 의해, 그리고 약 10 내지 40 용량과 같은 보다 큰 용량의 다이아필트레이션 매체를 채용함에 의해 촉진된다.
약 1.5 내지 약 3의 낮은 pH에서 두류 단백질 용액의 산성화 및 막 처리는 약 3 내지 약 4.4의 높은 pH에서 용액을 처리하는 것에 비해 트립신 억제인자 활동성을 감소시킬 수 있다. 단백질 용액이 pH 범위의 낮은 끝단에서 농축되고 다이아필트레이션될 때, 건조 전에 농축물의 pH를 올리는 것이 바람직하다. 농축되고 및/또는 다이아필트레이션된 단백질 용액의 pH는 수산화 나트륨과 같은 어떤 편리한 식품등급 알칼리의 첨가에 의해 소망하는 값, 예를 들어 pH 3으로 올려져도 좋다.
또한, 트립신 억제인자 활동성의 감소는 억제인자들의 시스틴 결합을 방해하거나 바꾸는 감소제에 두류물질을 노출함에 의해 달성될 수 있다. 적합한 감소제로는, 이것에 한정되는 것은 아니지만, 황산나트륨, 시스테인(cysteine) 및 N-아세틸시스테인(N-acetylcysteine)을 포함한다.
이러한 감소제의 첨가는 전체공정의 다양한 단계에서 수행되어도 좋다. 감소제는 추출단계에서 두류 단백질원 물질과 함께 첨가되어도 좋고, 잔여 두류 단백질원 물질의 제거에 뒤따른 수용성 두류 단백질 용액에 첨가되어도 좋으며, 건조 전 다이아필트레이션된 농축물에 첨가되어도 좋고, 또는 건조된 두류 단백질 제품과 함께 건조 혼합되어도 좋다. 이 감소제의 첨가는 상술한 바와 같이, 열처리단계 및 막 처리 단계들과 함께 조합되어도 좋다.
만약 단백질 용액 내에 활동적 트립신 억제인자를 유지하기를 원한다면, 이것은, 감소제를 사용하지 않고, 열처리단계의 강도를 감소 또는 제거함에 의해, 선택적 농축 및 선택적 다이아필트레이션 단계들을, pH 3 내지 약 3.4와 같은, pH 범위의 높은 끝단에서 조작함에 의해, 더 작은 구멍크기의 농축 및 다이아필트레이션 막을 사용함에 의해, 낮은 온도에서 막을 조작함에 의해, 그리고 더 작은 량의 다이아필트레이션 매체를 채용함에 의해 달성될 수 있다.
선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 단백질 용액은, 만약 소망하거나 필요하다면, 탈지 조작을 더 수행해도 좋다. 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 단백질 용액의 지방제거는 어떤 다른 편리한 공정에 의해 달성되어도 좋다.
선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 수용성 단백질 용액은, 색상 및/또는 냄새 화합물을 제거하기 위하여, 낟알로 된 활성화 탄소와 같은 흡착제로 처리되어도 좋다. 이러한 흡착제 처리는 어떠한 편리한 조건 하에서, 일반적으로 단백질 용액의 주변온도에서 수행되어도 좋다.
선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 수용성 두류 단백질 용액은 건조 또는 추가처리 전에 저온살균되어 져도 좋다. 이러한 저온살균은 어떤 기존의 저온살균 조건 하에서 수행되어 질 수 있다. 일반적으로, 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 두류 단백질 용액은 약 55℃ 내지 약 75℃의 온도에서 약 15초 내지 약 60분간 가열된다. 저온살균된 두류 단백질 용액은 그 다음 바람직하게는 약 25℃ 내지 약 40℃의 온도로 냉각되어도 좋다.
선택적으로 농축되고, 선택적으로 다이아필트레이션되었으며, 선택적으로 저온살균된 두류 단백질 용액은 그 다음 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 스프레이 건조 또는 냉동건조와 같은 어떤 기존의 수단에 의해 건조되어도 좋다. 한편, 선택적으로 농축되고, 선택적으로 다이아필트레이션되었으며, 선택적으로 저온살균된 두류 단백질 용액은, 건조 전에, pH가 약 8.0 미만의 값으로, 바람직하게는 약 6 내지 약 8의 값으로, 더욱 바람직하게는 약 6.5 내지 약 7.5의 값으로 조정되어 져도 좋다. 이 pH는 수산화 나트륨 또는 수산화 칼륨 용액의 첨가에 의해서와 같은 어떤 종래의 방식으로 올려져도 좋다. 만약 단백질 용액이 pH조정 전에 저온살균되지 않았다면, 저온살균은 앞서 언급한 조건들을 사용하여 pH조정 후에 수행되어도 좋다.
건조 두류 단백질 제품(건조 전 pH조정단계를 시행하였거나 또는 하지 않고 준비된)은 약 60wt%이상의 단백질 함량을 갖는다. 바람직하게는, 건조 두류 단백질 제품은 약 90 wt%(N x 6.25)d.b. 이상의 단백질 함량을 갖는 분리물이다.
본 발명의 또 다른 관점에 따르면, 약 1.5 내지 약 3.4, 바람직하게는 약 2.0 내지 약 3.0의 범위로 두류 단백질 용액의 pH를 조정한 후 획득된 산성 불용 고체물질은 선택적으로 RO물에 의해 희석되어도 좋고 그 다음 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 제품을 형성하기 위하여 건조되어도 좋다. 한편, 선택적으로 희석된 산성 불용 고체물질의 pH는 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 제품의 형성을 위한 선택적 건조 전에 수산화나트륨 용액 또는 수산화칼륨 용액의 첨가에 의해서와 같은 어떤 종래의 방식에 의해 약 8.0 미만, 바람직하게는 약 6.0 내지 약 8.0, 더욱 바람직하게는 약 6.5 내지 약 7.5의 값으로 올려져도 좋다. 바람직하게는, 산성 불용 고체물질은 불순물을 제거하고 제품의 순도와 맛을 개선하기 위하여 세정된다. 이 산성 불용 고체물질은 약 1.5 내지 약 3.4 범위내의 pH를 갖는, 바람직하게는 산성 불용 고체물질의 pH와 일치하는 pH의 약 1 내지 약 20 용량, 바람직하게는 약 1 내지 약 10 용량의 RO 물에 고체를 매달음에 의해 세정되어도 좋다. 이 세정단계는 약 20℃ 내지 약 35℃와 같은 어떤 종래의 온도로 수행될 수 있다. 산성 불용 고체물질은 어떤 종래의 시간길이, 바람직하게는 약 15분 미만의 길이 동안 세정용액과 혼합되어 진다. 세정된 산성 불용 고체물질은 그 다음 디스크 스택 원심분리에 의해서와 같은 어떤 종래의 방식에 의해 산성 세정용액으로부터 분리되어도 좋다. 이 산성 세정용액은 상술한 바와 같이 추가처리를 위하여 산성화된 단백질 용액에 부가되어 져도 좋다. 세정된 산성 불용 고체물질은 선택적으로 RO 물로 희석되어도 좋고 그 다음 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 스프레이건조 또는 냉동건조와 같은 어떤 종래의 수단에 의해 건조되어 져도 좋다. 한편, 선택적으로 희석된 세정된 산성 불용 고체물질의 pH는 선택적 건조 전에 수산화나트륨 용액 또는 수산화칼륨 용액의 첨가에 의해서와 같은 어떤 종래의 수단에 의해 약 8.0 미만, 바람직하게는 약 6.0 내지 약 8.0, 더욱 바람직하게는 약 6.5 내지 약 7.5의 값으로 조정되어도 좋다.이 산성 불용 고체물질로부터 유래된 제품의 맛은 산성 용해성 단백질 부분을 가공하여 생산된 제품과 비교하여 일반적으로 콩/야채 맛이 약간 더 높게 될 수 있다. 그러나, 산성 불용 고체물질로부터 유래된 제품의 맛도 식품 및 음료에의 응용에 사용하기 적합하다.
저온살균단계는 선택적 건조단계 전에 선택적으로 희석된 산성 불용 고체물질 또는 선택적으로 희석되고 세정된 산성 불용 고체물질에 채용되어도 좋다. 이러한 저온살균은 어떤 종래의 저온살균 조건들 아래서 수행되어도 좋다. 일반적으로, 선택적으로 희석된 산성 불용 고체물질 또는 선택적으로 희석되고 세정된 산성 불용 고체물질은 약 55℃ 내지 약 75℃의 온도로 약 15초 내지 약 60분 동안 가열된다. 저온살균되고 선택적으로 희석된 산성 불용 고체물질 또는 선택적으로 희석되고 세정된 산성 불용 고체물질은 그 다음 바람직하게는 약 25℃ 내지 약 40℃의 온도로 냉각된다. 만약 선택적으로 희석된 산성 불용 고체물질 또는 선택적으로 희석되고 세정된 산성 불용 고체물질이 pH 조정 전에 저온살균되지 않는다면, 이 저온살균은 상기한 조건들을 사용하는 pH 조정 후에 수행되어도 좋다.
본 발명의 다른 관점에 있어서, 산성화된 수용성 두류 단백질 용액의 막처리는, 실질적으로 깨끗한 수용성 두류 단백질 용액을 제공하면서, 칼슘염의 사용 없이 제조된, 산성 용해성 두류 단백질 제품을 생산하는 낮은 분자량 단백질로부터 높은 분자량 단백질을 분리하도록 수행된다. 이 처리가 시행될 때, 산성화된 두류 단백질 용액은 낮은 분자량 단백질이 불순물과 함께 침투가 허용되도록 선택된 농축 및 다이아필트레이션 막들의 분자량 차단과 함께 농축되고 및/또는 다이아필트레이션 된다. 이러한 농축 및 다이아필트레이션 단계는 정밀여과를 위하여는 약 0.05 내지 약 0.1 ㎛, 바람직하게는 약 0.08 내지 약 0.1 ㎛와 같은 그리고 한외여과를 위하여는 약 10,000 내지 약 1,000,000 달톤, 바람직하게는 약 100,000 내지 1,000,000 달톤과 같은 적절한 분자 질량 차단과 함께, 그리고 서로 다른 막 재질 및 구조를 갖는, 동공-섬유 막 또는 나선-권선 막과 같은, 막들을 사용하여, 정밀여과 또는 한외여과와 같은 어떤 종래의 선택적 막 기술을 채용함에 의해서와 같이, 뱃치 또는 계속적인 조작으로 한결같은 어떤 편리한 방법으로 수행되어도 좋고, 그리고 계속적인 조작을 위하여, 산성화된 수용성 단백질 용액이 막들을 통해 통과하는 것과 같이 소망하는 농도를 허용하도록 치수되어진다. 농축단계에 있어서, 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 50 내지 약 300 g/L, 바람직하게는 약 100 내지 약 200 g/L의 단백질 농도로 농축된다. 이 산성화된 두류 단백질 용액 또는 부분적으로 농축되고 산성화된 두류 단백질 용액 또는 농축되고 산성화된 두류 단백질 용액은 바람직하게는 다이아필트레이션되는 단백질 용액과 동일한 pH의 물로 다이아필트레이션 되어도 좋다. 이러한 다이아필트레이션은 약 1 내지 약 40 용량의 다이아필트레이션 용액, 바람직하게는 약 2 내지 약 25 용량의 다이아필트레이션 용액을 사용하여 수행되어도 좋다. 다이아필트레이션이 산성화된 두류 단백질 용액 또는 부분적으로 농축된 두류 단백질 용액에 시행될 때, 다이아필트레이션된 용액은 뒤이어 추가적으로 농축되어도 좋다. 이 농축 및 다이아필트레이션 단계는 일반적으로 약 2℃ 내지 약 65℃, 바람직하게는 약 50℃ 내지 약 60℃의 어떤 종래의 온도에서 수행되어 져도 좋다. 낮은 분자량 단백질은 다른 작은 분자 불순물과 함께 막처리를 침투하여 모여진다.
그 다음 낮은 분자량 단백질들은, 단백질 용액의 완전한 농축의 전이나 후에 수행되고, 약 10 내지 약 300 g/L의, 바람직하게는 약 100 내지 약 200 g/L의 단백질 농도로 농축하는 한외여과 및 선택적 다이아필트레이션과 같은 막처리에 의해 단백질 용액의 뒤이은 농축(단계 1 침투물)으로 불순물로부터 분리된다. 선택적 다이아필트레이션 단계는, 바람직하게는 단백질 용액과 동일하거나 더 낮은 pH를 갖는 물 또는 산성화된 물을 사용하여 수행된다. 이 농축 및 다이아필트레이션 단계들은 상술한 바와 같이 작동되는 약 1,000 내지 약 100,000 달톤, 바람직하게는 1,000 내지 약 10,000달톤과 같은 낮은 분자량 차단을 갖는 막을 사용하여 수행된다.
이 제2막처리단계는 회수된 낮은 분자량 두류 단백질 제품이 약 90 wt%(N x 6.25)d.b. 미만, 예를 들면, 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.를 함유하도록 수행되어 져도 좋다. 수용성 낮은 분자량 두류 단백질 용액을 부분적으로 농축하고 및/또는 부분적으로 다이아필트레이션하는 것에 의해, 불순물을 단지 부분적으로 제거할 수 있다. 이 단백질 용액은 그 다음 낮은 레벨의 순도를 갖는 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 건조되어도 좋다. 이 두류 단백질 제품은 염의 사용없이 제조되고, 높은 용해도를 가지며, 산성조건 하에서 실질적으로 깨끗한 단백질 용액을 제공할 수 있다.
낮은 분자량의 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 용액 또는 막분리처리의 농축물(이것은 높은 분자량 단백질을 함유한다)은 상술한 바와 같이 트립신 억제인자의 활동성을 감소하기 위한 처리가 수행되어 져도 좋다. 낮은 분자량의 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 용액 또는 막분리처리의 농축물(이것은 높은 분자량 단백질을 함유한다)은 상술한 바와 같이 저온살균되어도 좋다.
낮은 분자량의 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 용액은 그 다음 두류 단백질 제품을 제공하도록 스프레이 건조 또는 냉동건조와 같은 어떤 편리한 수단에 의해 건조되어 져도 좋다. 이 건조 두류 단백질 제품은 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.이상의 단백질 함량을 갖는다. 바람직하게는, 이 두류 단백질 제품은 약 90 wt%(N x 6.25)d.b. 이상의 단백질 함량을 갖는 분리물이다.
높은 분자량 단백질을 함유하는 막분리처리된 농축물로부터 추가적 제품이 획득될 수 있다. 이 단백질 용액은, 식품등급 알칼리를 사용하여 단백질 용액의 pH를 약 8.0미만의 값으로, 바람직하게는 약 6.0 내지 약 8.0, 더욱 바람직하게는 약 6.5 내지 약 7.5의 값으로 조정하던지 또는 조정없이, 어떤 종래의 수단에 의해 건조되어 져도 좋다. 상술한 저온살균단계는 pH조정단계 후 막분리처리된 농축물에 시행되어 져도 좋다. 이 건조 두류 단백질 제품은 약 60 wt% d.b. 이상의 단백질 함량을 갖고, 바람직하게는 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.이상의 단백질 함량을 갖는 분리물이다. 막분리처리된 농축물로부터 획득된 제품은 콩/야채 맛이 실질적으로 없거나 매우 낮다.
본 발명의 일 관점에 따른 제조방법을 보여주는 도 1을 참조하면, 두류 단백질원은 약 6 내지 약 11의 pH, 바람직하게는 약 6.0 내지 약 8.5의 pH의 물로 초기추출에 놓인다(12). 이 단백질 추출용액은 그 다음 잔여 두류 단백질원의 제거에 의해 완전히 또는 부분적으로 정제되고(14), 이 제거된 고체는 수집된다(16). 그 다음, 단백질 추출용액(18)은 pH가 약 1.5 내지 약 3.4, 바람직하게는 약 2.0 내지 약 3.0으로 조정된다(20). 이 산 불용성 물질은 산 불용 고체 물질(24)과 산성화된 단백질 용액(26)을 생산하면서 원심분리(22)에 의해 제거된다.
회수된 산 불용 고체 물질은 고체와 동일한 pH, 즉 약 1.5 내지 3.4, 바람직하게는 약 2.0 내지 약 3.0의 pH를 갖는 물로 선택적으로 세정(28)되고, 이 선택적으로 세정된 고체(34)는 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고 810PA로 명명된(50) 두류 단백질 제품을 제공하도록 약 6.0 미만의 pH값으로 선택적으로 조정될 수 있으며 그 다음 건조(48)된다.
한편, 선택적으로 세정된 고체(34)는 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고 810PN으로 명명된 두류 단백질 제품을 제공하도록 pH가 일반적으로 약 6 내지 약 8, 바람직하게는 약 6.5 내지 약 7.5로 조정(36)되고 건조(38)된다.
선택적 세정단계(28)로부터 세정농축물(30)은 산성화된 단백질 용액에 첨가(26)되어 져도 좋다. 이 용해성 단백질 용액은 pH가 약 1.5 내지 약 3.4 범위 이내로, 바람직하게는 2.0 내지 3.0으로 낮추어진다(60). 그 다음 이 단백질 용액은 농축 및 선택적 다이아필트레이션에 놓인다(62). 농축 및 다이아필트레이션 단계로부터의 이 농축물(64)은 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고 810A로 명명(80)된 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 pH값이 약 6.0 미만로 선택적으로 조정될 수 있고 건조(78)된다. 바람직하게는, 810A 제품은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 분리물이다. 한편, 농축 및 다이아필트레이션 단계로부터의 이 농축물(64)은 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고 801N으로 명명(70)된 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 pH가 일반적으로 약 6 내지 8, 바람직하게는 약 6.5 내지 약 7.5의 값으로 조정(66)되고 건조(68)된다. 바람직하게는, 이 810N 제품은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 분리물이다.
810A 및 810PA 단백질 제품들은 그들 자체로 사용될 수도 있고 건조 혼합물로 혼합될 수도 있다(84). 한편, 혼합된 810A/810PA 제품은 선택적으로 세정된 산 불용 고체 물질을 혼합함에 의해 형성될 수 있고, 농축/선택적 다이아필트레이션된 농축물과 함께 pH가 6.0미만로 선택적으로 조정될 수 있으며(46), pH가 6.0 미만로 선택적으로 조정될 수 있고(76) 그리고 혼합물(86)을 건조함에 의해 형성될 수 있다. 이 810N 및 810PN 단백질 제품들은 그들 자체로 사용될 수도 있고 건조 혼합물로 혼합될 수도 있다(84). 한편, 혼합된 810N/810PN 제품은 선택적으로 세정된 산 불용 고체 물질을 혼합함에 의해 형성될 수 있고, 농축/선택적 다이아필트레이션된 농축물과 함께 pH가 약 6.0 내지 약 8.0, 바람직하게는 약 6.5 내지 약 7.5로 조정될 수 있으며, pH가 약 6.0 내지 약 8.0, 바람직하게는 약 6.5 내지 약 7.5로 조정될 수 있고(66) 기리고 혼합물을 건조함에 의해(82) 형성될 수 있다.
본 발명의 다른 관점에 따른 제조방법(11)을 보여주는 도 2를 참조하면, 두류 단백질원은 약 6 내지 약 11의 pH, 바람직하게는 약 6.0 내지 약 8.5의 pH의 물로 초기추출에 놓인다(12). 이 단백질 추출용액은 그 다음 잔여 두류 단백질원의 제거에 의해 완전히 또는 부분적으로 정제되고(14), 이 제거된 고체는 수집된다(16). 그 다음, 단백질 추출용액(18)은 pH가 약 1.5 내지 약 3.4, 바람직하게는 약 2.0 내지 약 3.0으로 조정된다(20). 이 산 불용성 물질은 산 불용 고체 물질(24)과 산성화된 단백질 용액(26)을 생산하면서 원심분리(22)에 의해 제거된다.
회수된 산 불용 고체 물질(24)은 고체와 동일한 pH, 즉 약 1.5 내지 3.4, 바람직하게는 약 2.0 내지 약 3.0의 pH를 갖는 물로 선택적으로 세정되고(28), 이 선택적으로 세정된 고체(34)는 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고 810PA로 명명된 두류 단백질 제품을 제공하도록 약 6.0 미만의 pH값으로 선택적으로 조정(46)될 수 있으며 그 다음 건조(48)된다.
한편, 선택적으로 세정된 고체(34)는 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고 810PN으로 명명된 두류 단백질 제품을 제공하도록 pH가 일반적으로 약 6 내지 약 8, 바람직하게는 약 6.5 내지 약 7.5로 조정(36)되고 건조(38)된다.
선택적 세정단계로부터의 세정농축물(30)은 산성화된 단백질 용액에 첨가(26)되어 져도 좋다. 이 용해성 단백질 용액은 pH가 약 1.5 내지 약 3.4 범위 이내로, 바람직하게는 2.0 내지 3.0으로 낮추어진다(60). 그 다음 이 단백질 용액은 높은 분자량 단백질(농축물, 63)로부터 낮은 분자량 단백질(침투물 91)을 분리하기 위하여 정밀여과 또는 한외여과막처리(농축 및/또는 다이아필트레이션)에 놓인다(61).
단백질 분리단계(91)로부터의 침투물은 그 다음 불순물로부터 단백질을 분리하기 위하여 작은구멍크기 막을 사용하여 농축 및 선택적 다이아필트레이션에 의해(93) 정제된다. 농축 및 선택적 다이아필트레이션 단계로부터의 이 농축물(95)은, 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 816A로 명명(99)되며, 낮은 pH 용액에서 향상된 선명도를 갖는 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여, 건조(97)되고, 바람직하게는, 이 제품은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 분리물이다.
단백질 분리단계로부터의 농축물(63)은 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고 816BA로 명명(79)된 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 약 6.0 미만의 pH로 선택적으로 조정(75)될 수 있고 그 다음 건조(77)된다. 바람직하게는, 이 제품은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 분리물이다. 한편, 단백질 분리단계로부터의 농축물(63)은 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고 816BN으로 명명(69)된 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여, pH값이 일반적으로 약 6 내지 약 8로, 바람직하게는 약 6.5 내지 약 7.5로 조정(65)될 수 있고 그 다음 건조(67)되며, 바람직하게는, 이 제품은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 분리물이다.
816BA 및 810PA 단백질 제품들은 그들 자체로 사용될 수도 있고 건조 혼합물로 혼합될 수도 있다(83). 한편, 혼합된 816BA/810PA 제품은 선택적으로 세정되고 선택적으로 pH가 6.0미만로 조정된 단백질 분리단계 농축물과 함께 pH가 6.0 미만로 선택적으로 조정된(46) 산 불용 고체 물질을 혼합함에 의해 그리고 그 혼합물(85)을 건조함에 의해 형성될 수 있다. 이 816BN 및 810PN 단백질 제품들은 그들 자체로 사용될 수도 있고 건조 혼합물로 혼합될 수도 있다(83). 한편, 혼합된 816BN/810PN 제품은 pH가 약 6.0 내지 약 8.0, 바람직하게는 약 6.5 내지 약 7.5로 조정된(65) 단백질 분리단계 농축물과 함께 pH가 약 6.0 내지 약 8.0, 바람직하게는 약 6.5 내지 약 7.5로 조정(36)된 pH가 조정되고 선택적으로 세정된 산성 불용 고체 물질을 혼합하고 그리고 그 혼합물(81)을 건조함에 의해 형성될 수 있다.
실시예
실시예 1
이 실시예는 본 발명의 방법의 일 구성에 따른 두류 단백질 제품의 제조방법을 개시하고 있다.
36 kg의 노란콩 단백질 식품이 주변온도에서 600 L의 역삼투 정제된 물에 넣어졌고 수용성 단백질 용액을 제공하기 위하여 10분간 교반되었다. 처리된 고체부분은 원심경사기를 사용하여 원심분리에 의해 제거되었고 약 'b'중량%의 단백질 함량을 갖는 'a'kg의 단백질 용액이 수집되었다. 이 단백질 용액의 pH가 그 다음 HCl 용액(동일용량의 물로 희석된 농축된(22 BE')HCl)의 첨가에 의해 'c'의 목표 pH로 낮추어 졌고 이 용액은 'e'의 pH와 'f' kg의 산성 불용 고체 물질을 갖는 'd'L의 산성화된 단백질 용액을 제공하기 위하여 디스크 스택 원심분리기를 사용하여 원심분리되었다.
'g' wt%의 단백질 함량을 갖는 이 산성화된 단백질 용액은, 약 'k'℃의 온도에서 작동된, 'j' 달톤의 분자량 차단을 갖는 폴리에테르슬폰 막 상에서 농축에 의해 용량이 'h' L로부터 'i' L로 줄었다. 'l' wt%의 단백질 함량과 함께 이 단백질 용액은 약 'o'℃에서 수행된 다이아필트레이션과 함께 'n'에서의 'm' L의 RO 물로 동일한 막 상에서 다이아필트레이션되었다. 'p' wt%의 단백질 함량을 갖는 이 다이아필트레이션된 단백질 용액은 그 다음 'q' wt%의 단백질 함량으로 더 농축되었다. 'r'의 다이아필트레이션되고 농축된 단백질 용액이 획득되었고 원심경사기를 사용한 분리단계로부터의 단백질 용액에 약 's'%의 단백질 생산률을 나타내었다. 't' kg의 다이아필트레이션되고 농축된 단백질 용액은 HCl 용액으로 pH 2.7로 조정된 'u' L의 물로 희석되었다. 이 희석된 용액은 'v' %(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 제품을 생산하도록 스프레이 건조되었다. 이 제품은 'w' YP810A로 명명되었다. 'x'의 다이아필트레이션되고 농축된 단백질 용액은 'y' L의 RO 물로 희석되었고 NaOH/KOH 용액을 사용하여 이 샘플의 pH를 'z'로 올렸다. 중성화된 용액은 'aa'%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 제품을 생산하도록 스프레이건조되었다. 이 제품은 'w' YP810N으로 명명되었다.
디스크 스택 원심분리기로부터 수집된 산성 불용 고체 물질은 'ab' wt%의 단백질 함량을 가졌다. 'ac' kg의 산성 불용 고체 물질은 주변온도에서 30분 동안 'ae'에서의 RO 물 'ad' L로 혼합되었고 'af' 원심분리기를 사용하여 원심분리되었다. 'ag' kg의 세정된 산성 불용 고체 물질은 'ah' wt%의 단백질 함량을 갖는 물 세정단계 후에 수집되었고 원심경사기를 사용한 분리단계로부터의 단백질 용액 내에 약 'ai' %의 단백질 회수율을 나타내었다. 이 세정된 산성 불용 고체 물질은 그 다음 'aj' L의 RO 물과 혼합되었고 약 'ak'℃에서 약 'al' 분 동안 저온살균되었다. 'am' kg의 저온살균되고 세정된 산성 불용 고체 물질은 HCl 용액의 첨가에 의해 pH가 'an'으로 조정되었고 'ao'(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 제품을 생산하도록 스프레이건조되었다. 이 제품은 'w' YP810PA로 명명되었다. 'ap' kg의 저온살균되고 세정된 산성 불용 고체 물질은 'aq' L의 RO 물과 혼합되었고 그 다음 pH가 NaOH/KOH 용액을 사용하여 'ar'로 올려졌으며 이 샘플은 'as' %(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 제품이 생산되도록 스프레이 건조되었다. 이 제품은 'w' YP810PN으로 명명되었다. 변수들 'a' 내지 'as'는 다음의 표 1에 기재되어 있다:
[표 1] 두류 810 제품을 생산하기 위한 시제의 변수들
Figure pct00001
N/A = 해당 없음
실시예 2
이 실시예는 본 발명의 방법의 다른 구성에 따른 두류 단백질 제품의 제조방법을 개시하고 있다.
'a' kg의 'b'가 주변온도에서 'c' L의 역삼투 정제된 물에 넣어졌고 수용성 단백질 용액을 제공하기 위하여 10분간 교반되었다. 처리된 고체부분은 원심경사기를 사용하여 원심분리에 의해 제거되었고 약 'e'중량%의 단백질 함량을 갖는 'd'kg의 단백질 용액이 생산되었다. 이 단백질 용액의 pH가 그 다음 HCl 용액(동일용량의 물로 희석된 농축된(22 BE')HCl)의 첨가에 의해 'f'의 목표 pH로 낮추어졌고 이 용액은 'h'의 pH와 'i' kg의 산성 불용 고체 물질을 갖는 'g'L의 산성화된 단백질 용액을 제공하기 위하여 디스크 스택 원심분리기를 사용하여 원심분리되었다.
'j' kg의 산성 불용 고체 물질은 'f'에서의 RO 물 'k' L로 혼합되었고, 그 다음 이 샘플은 'o' kg의 세정된 산성 불용 고체 물질은 물론 pH 'n'을 갖는 'm' L의 산성화된 세정 용액을 제공하기 위하여 'l' 원심분리기를 사용하여 원심분리되었다. 'p' L의 산성화된 단백질 용액은 'q' L의 산성화된 세정 용액과 혼합되었고 'r'의 pH와 's' wt%의 단백질 함량을 갖는 막공급을 제공하기 위하여 데워졌다. 이 막공급은 약 'w'℃의 온도에서 작동된, 'v' 달톤의 분자량 차단을 갖는 폴리에테르슬폰 막 상에서 농축에 의해 용량이 't' L로부터 'u' L로 줄었다. 'x' wt%의 단백질 함량과 함께 이 단백질 용액은 약 'aa'℃에서 수행된 다이아필트레이션과 함께 'z'에서의 'y' L의 RO 물로 동일한 막 상에서 다이아필트레이션되었다. 'ab' wt%의 단백질 함량을 갖는 이 다이아필트레이션된 단백질 용액은 그 다음 'ac' wt%의 단백질 함량으로 더 농축되었다. 'ad'의 다이아필트레이션되고 농축된 단백질 용액이 획득되었고 원심경사기를 사용한 분리단계로부터의 단백질 용액에 약 'ae'%의 단백질 생산률을 나타내었다. 이 다이아필트레이션되고 농축된 단백질 용액은 그 다음 'af' L의 RO 물과 혼합되었고 약 'ag'℃에서 약 'ah' 초 동안 저온살균되었다. 'aj'의 'ai' 다이아필트레이션되고 농축된 단백질 용액은 'ak' L의 물로 희석되었고 그 다음 'al'%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 제품을 생산하도록 스프레이건조되었다. 이 제품은 'am' 'an'으로 명명되었다. 'aj'의 'ao' 다이아필트레이션되고 농축된 단백질 용액은 'ap' L의 RO 물로 희석되었고 샘플의 pH는 'ar' 용액을 사용하여 'aq'로 올려 졌다. 이 중성화된 용액은 'as' %(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 제품이 생산되도록 스프레이 건조되었다. 이 제품은 'am' 'at'로 명명되었다.
'au' 산성 불용 고체 물질은 약 'av'℃에서 'aw' 초 동안 저온살균되었다. 'ay'의 'ax' kg 산성 불용 고체 물질은 'az'wt%의 단백질 함량을 갖도록 수집되었고 원심경사기를 사용하여 분리단계로부터의 단백질 용액 내에 약 'ba' %의 단백질 생산률을 나타내었다. 'ay'의 'bb' kg의 산성 불용 고체 물질은 'bc' L의 RO 물과 혼합되었고 'be' 용액을 사용하여 pH를 'bd'로 높였으며 이 샘플은 'bg' %(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 제품이 생산되도록 'bf' 건조되었다. 이 제품은 'am' 'bh'로 명명되었다. 변수들 'a' 내지 'bh'는 다음의 표 2에 기재되어 있다:
[표 2] 두류 810 제품을 생산하기 위한 시제의 변수들
Figure pct00002
N/A = 해당 없음, ND = 미결정, NR = 미기록
실시예 3
이 실시예는 본 발명의 방법의 또 다른 구성에 따른 두류 단백질 제품의 제조방법을 개시하고 있다.
36 kg의 노란콩 단백질 식품이 주변온도에서 600 L의 역삼투 정제된 물에 넣어졌고 수용성 단백질 용액을 제공하기 위하여 10분간 교반되었다. 처리된 고체부분은 원심경사기를 사용하여 원심분리에 의해 제거되었고 약 2.54 중량%의 단백질 함량을 갖는 608.59kg의 단백질 용액이 수집되었다. 이 단백질 용액의 pH가 그 다음 HCl 용액(동일용량의 물로 희석된 농축된(22 BE')HCl)의 첨가에 의해 3의 목표 pH로 낮추어 졌고 이 용액은 3.13의 pH와 79.30 kg의 산성 불용 고체 물질을 갖는 508L의 산성화된 단백질 용액을 제공하기 위하여 디스크 스택 원심분리기를 사용하여 원심분리되었다.
79.30 kg의 산성 불용 고체 물질은 pH 3에서의 RO 물 158.60 L로 혼합되어 졌고 그 다음 이 샘플은 29.98 kg의 세정된 산성 불용 고체 물질은 물론 pH 3을 갖는 201 L의 산성화된 세정 용액을 제공하기 위하여 디스크 스택 원심분리기를 사용하여 원심분리되었다.
500 L의 산성화된 단백질 용액은 200 L의 산성화된 세정 용액과 혼합되었고 3.10의 pH와 1.75 wt%의 단백질 함량을 갖는 막공급을 제공하기 위하여 데워졌다. 이 막공급은 약 50℃의 온도에서 작동된, 100,000 달톤의 분자량 차단을 갖는 폴리에테르슬폰 막 상에서 농축에 의해 용량이 700 L로부터 212 L로 줄었다. 5.34 wt%의 단백질 함량과 함께 이 단백질 용액은 약 51℃에서 수행된 다이아필트레이션과 함께 pH 3에서 318 L의 RO 물로 동일한 막 상에서 다이아필트레이션되었다. 이 시점에서 처리시간을 단축하기 위하여 106 L의 농축물은 폐기되었다. 나머지 106 L의 농축물은 pH 3에서 901 L의 부가적 RO 물로, 약 51℃에서 수행된 다이아필트레이션 작동으로, 동일한 막 상에서 다이아필트레이션 되었다. 5.04 wt%의 단백질 함량을 갖는 이 다이아필트레이션된 단백질 용액은 그 다음 8.56 wt%의 단백질 함량으로 더 농축되었다. 47 kg의 다이아필트레이션되고 농축된 단백질 용액이 획득되었고 원심경사기를 사용한 분리단계로부터의 단백질 용액에 약 26%의 단백질 생산률을 나타내었다. 이 다이아필트레이션되고 농축된 단백질 용액은 그 다음 20.5 L의 RO 물로 희석되었고 약 73℃에서 약 16 초 동안 저온살균되었다. 70.44 kg의 저온살균되고 다이아필트레이션되었으며 농축된 단백질 용액은 pH를 7.02로 조정하기 위하여 충분한 KOH/NaOH 용액에 첨가되었다. 이 중성화된 용액은 90.08 %(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 제품이 생산되도록 스프레이 건조되었다. 이 제품은 YP27-E13-15A YP810N으로 명명되었다.
세정된 산성 불용 고체 물질은 약 72℃에서 16초 동안 저온살균되었다. 이 저온살균된 산성 불용 고체 물질은 6.42wt%의 단백질 함량을 가졌다. 29.98 kg의 저온살균된 산성 불용 고체 물질은 pH를 5.54로 조정하기 위하여 3.28 L의 RO 물과 충분한 NaOH/KOH 용액과 혼합되었다. 이 샘플은 그 다음 75.15 %(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 제품이 생산되도록 스프레이 건조되었다. 이 제품은 YP27-E13-15A YP810PA로 명명되었다.
실시예 4
이 실시예는 본 발명의 방법의 또 다른 구성에 따른 두류 단백질 제품의 제조방법을 개시하고 있다.
72 kg의 노란콩 단백질 식품이 주변온도에서 1200 L의 역삼투 정제된 물에 넣어졌고 수용성 단백질 용액을 제공하기 위하여 10분간 교반되었다. 처리된 고체부분은 원심경사기를 사용하여 원심분리에 의해 제거되었고 약 2.57중량%의 단백질 함량을 갖는 1190.48 kg의 단백질 용액이 수집되었다. 이 단백질 용액의 pH가 그 다음 HCl 용액(동일용량의 물로 희석된 농축된(22 BE')HCl)의 첨가에 의해 3의 목표 pH로 낮추어 졌고 이 용액은 약 3.02의 pH를 갖고 1020 L의 산성화된 단백질 용액을 제공하기 위하여 디스크 스택 원심분리기를 사용하여 원심분리되었다.
이 산성화된 단백질 용액은 그 다음 pH가 목표치인 2로 조정되었고 2.08의 pH와 1.50 wt%의 단백질 함량을 갖는 막공급을 제공하기 위하여 데워졌다. 이 용액은, 약 50℃의 온도에서 작동된, 100,000 달톤의 분자량 차단을 갖는 폴리에테르슬폰 막 상에서 농축에 의해 용량이 1040 L로부터 285 L로 줄었다. 5.28 wt%의 단백질 함량과 함께 이 단백질 용액은 약 51℃에서 수행된 다이아필트레이션과 함께 pH 2에서의 2850 L의 RO 물로 동일한 막 상에서 다이아필트레이션되었다. 4.99 wt%의 단백질 함량을 갖는 이 다이아필트레이션된 단백질 용액은 그 다음 9.70 wt%의 단백질 함량으로 더 농축되었다. 133 L의 다이아필트레이션되고 농축된 단백질 용액이 획득되었고 원심경사기를 사용한 분리단계로부터의 단백질 용액에 약 42.2%의 단백질 생산률을 나타내었다. 133 L의 다이아필트레이션되고 농축된 단백질 용액은 40 L의 RO 물로 희석되었고 그 다음 약 73℃에서 약 16 초 동안 저온살균되었다. 173 L의 저온살균된 단백질 용액은 rm 다음 31.71 L의 물로 더 희석되었고 이 샘플의 pH는 NaOH 용액을 사용하여 7.05로 높여졌다. 이 저온살균된 용액은 88.85 %(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 제품을 생산하도록 스프레이 건조되었다. 이 제품은 YP27-E26-15A YP810N으로 명명되었다.
실시예 5
이 실시예는 본 발명의 일 구성에 따른 향상된 선명도의 산성 두류 단백질 제품의 생산을 개시하고 있다.
36 kg의 노란콩 단백질 식품이 주변온도에서 600 L의 역삼투 정제된 물에 넣어졌고 수용성 단백질 용액을 제공하기 위하여 10분간 교반되었다. 처리된 고체부분은 원심경사기를 사용하여 원심분리에 의해 제거되었고 약 'b'중량%의 단백질 함량을 갖는 'a'kg의 단백질 용액이 수집되었다. 이 단백질 용액의 pH가 그 다음 HCl 용액(동일용량의 물로 희석된 농축된(22 BE')HCl)의 첨가에 의해 'c'의 목표 pH로 낮추어 졌고 이 용액은 약 'e'의 pH와 'f' kg의 산성 불용 고체 물질을 갖는 'd'L의 산성화된 단백질 용액을 제공하기 위하여 디스크 스택 원심분리기를 사용하여 원심분리되었다.
'h' wt%의 단백질 함량을 갖는 'g' L의 산성화된 단백질 용액은 pH 2의 'i' L의 RO 물로 희석되었고 약 50℃로 데워졌으며 그 다음, 약 'k'℃의 온도에서 작동된, 0.08㎛의 구멍크기를 갖는 폴리플루오르화비닐리덴(PVDF) 정밀여과 막을 사용하여 'j' L로 농축되었다. 농축단계와 동시에, 이 용액은 pH 2에서의 'l' L의 부가적 RO 물로 다이아필트레이션되었다. 'n' wt%의 단백질 함량을 갖는 'm' L의 정밀여과/ 다이아필트레이션된 농축물은 약 'p'℃의 온도에서 작동된 1,000달톤의 구멍크기를 갖는 PES 한외여과 막을 사용하여 'o' kg으로 농축되었다. 농축된 이 단백질 용액은 'q' wt%의 단백질 함량을 가졌다. 이것은 원심경사기를 사용한 분리단계로부터의 단백질 용액에 약 'r'%의 단백질 생산률을 나타내었다. 이 농축된 단백질 용액은 약 's'℃에서 't'초 동안 저온살균되었고 그 다음 'u' kg의 저온살균되고 농축된 단백질 용액은 'v' %(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 'w' YP816A로 명명된 단백질 제품을 생산하도록 스프레이 건조되었다.
'j' L의 정밀여과된 농축물은 'x' wt%의 단백질 함량을 갖는 것으로 수집되었고 원심경사기를 사용한 분리단계로부터의 단백질 용액 내에 약 'y' %의 단백질 회수율을 나타내었다. 이 농축되고 다이아필트레이션된 정밀여과 농축물은 약 'z'℃에서 약 'aa' 초 동안 저온살균되었다. 'ab' kg의 저온살균된 정밀여과 농축물은 'ac' L의 RO 물로 희석되어 졌고 NaOH/KOH 용액을 사용하여 pH가 'ad'로 조정되었으며 그 다음 'ae' %(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 'w' YP816BN으로 명명된, 단백질 제품을 형성하기 위하여 스프레이 건조되었다.
변수들 'a' 내지 'ae'는 다음의 표 3에 기재되어 있다:
[표 3] 두류 816 제품의 생산을 위한 변수들
Figure pct00003
NR = 미기록
실시예 6
이 실시예는 상기한 미국특허출원 제13/103,528호, 제13/289,264호, 제 13/556,357호 및 제13/642,003호의 방법들에 따른 두류 단백질 제품들의 제조를 설명한다.
'a' kg의 'b'가 'e'에서 'c' L의 'd'와 혼합되었고 'f' 분 동안 교반되었다. 그 다음 'i' L의 RO 물에 'h' kg의 염화칼슘 알갱이(95.5%)를 용해함에 의해 준비된 'g' kg의 염화칼슘 비축용액이 첨가되었고 이 혼합물은 추가로 'j' 분 동안 교반되었다. 잔여 고체 덩어리는 원심경사기를 사용하여 원심분리에 의해 제거되었고 그 다음 'm' L의 RO 물에 'l' kg의 염화칼슘 알갱이(95.5%)를 용해함에 의해 준비된 'k' kg의 염화칼슘 비축용액이 부분적으로 정제된 단백질 용액에 첨가되었다. 질 좋은 잔여 고체는 'n'중량%의 단백질 함량을 갖는 농축물을 생산하기 위하여 디스크 스택 원심분리기에 의해 제거되었다. 'o' L의 농축물은 'q'에 있는 'p' L의 RO 물에 부가되었고 이 샘플의 pH는 희석된 HCl로 'r'로 낮추어졌다. 이 희석되고 산성화된 농축물은 't' 중량%의 단백질 함량을 갖는 선명한 산성화된 단백질 용액을 제공하기 위하여 's'에 의해 더 정제되었다.
이 선명한 산성화된 단백질 용액은 'u' 였고 그 다음 약 'y'℃의 온도에서 작동된, 'x' 달톤의 분자량 차단을 갖는 폴리에테르슬폰 막 상에서 농축에 의해 용량이 'v' L로부터 'w' L로 줄었다. 이 시점에서 'z' wt%의 단백질 함량과 함께 이 단백질 용액은 약 'ab'℃에서 수행된 다이아필트레이션과 함께 'aa' L의 RO 물로 다이아필트레이션되었다. 이 다이아필트레이션된 단백질 용액은 그 다음 'ac' L로 농축되었고 약 'ae'℃에서 수행된 다이아필트레이션 조작과 함께 'ad' L의 부가적 RO 물로 다이아필트레이션되었다. 'af' wt%의 단백질 함량을 갖는 이 농축된 단백질 용액은 'ag' wt%의 단백질 함량으로 더 농축되었고, 그 다음 스프레이건조를 용미만게 하기 위하여 'ah' wt%의 단백질 함량으로 RO 물로 희석되었다. 이 'ai'의 단백질 용액은 희석되고 산성화된 농축물의 'aj' %의 생산률로 회수되었다. 이 농축되고 다이아필트레이션된 단백질 용액은 약 'ak'℃에서 'al' 초 동안 저온살균되었고 그 다음 'am'wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 제품을 생산하기 위하여 건조되었다. 이 제품은 'an'으로 명명되었다. 변수들은 다음의 표 4에 기재되어 있다:
[표 4] YP701을 생산하기 위한 시제의 변수들
Figure pct00004
N/A = 해당 없음
실시예 7
이 실시예는 상기한 미국특허출원 제13/937,266호의 방법들에 따른 두류 단백질 제품들의 제조를 설명한다.
'a' kg의 'b'가 'e'에서 'c' L의 'd'와 혼합되었고 'f' 분 동안 교반되었다. 'g' kg의 염화칼슘 알갱이(95.5%)가 부가되었고 이 혼합물은 추가로 'h' 분 동안 교반되었다. 잔여 고체 덩어리는 원심경사기를 사용하여 원심분리에 의해 제거되었고 그 다음 'k' L의 RO 물 당 'j' kg의 염화칼슘 알갱이(95.5%)를 용해함에 의해 준비된 'i' kg의 염화칼슘 비축용액이 부분적으로 정제된 단백질 용액에 첨가되었다. 질 좋은 잔여 고체는 'l'중량%의 단백질 함량을 갖는 농축물을 생산하기 위하여 디스크 스택 원심분리기에 의해 제거되었다. 'm' L의 농축물은 주변온도에서 'n' L의 RO 물에 부가되었고 이 샘플의 pH는 희석된 HCl로 'o'로 낮추어졌다. 이 희석되고 산성화된 농축물은 선명한 산성화된 단백질 용액을 제공하기 위하여 'p'에 의해 더 정제되었다.
이 선명한 산성화된 단백질 용액은 데워졌고 그 다음 이 용액은 약 'u'℃의 온도에서 작동된, 't' 달톤의 분자량 차단을 갖는 폴리에테르슬폰 막 상에서 농축에 의해 용량이 'r' L로부터 's' L로 줄었다. 이 시점에서 'v' wt%의 단백질 함량과 함께 이 단백질 용액은 약 'x'℃에서 수행된 다이아필트레이션과 함께 'w' L의 RO 물로 다이아필트레이션되었다. 이 다이아필트레이션된 단백질 용액은 그 다음 'y' L로 농축되었고 약 'aa'℃에서 수행된 다이아필트레이션 조작과 함께 'z' L의 부가적 RO 물로 다이아필트레이션되었다. 'ac' wt%의 단백질 함량을 갖는 이 농축된 단백질 용액은 'ab'는 희석되고 산성화된 농축물의 'ad'%의 생산률로 회수되었다. 이 농축되고 다이아필트레이션된 단백질 용액은 약 'ae'℃에서 'af' 초 동안 저온살균되었고 그 다음 'ag' kg의 'ah' 농축되고 다이아필트레이션된 단백질 용액은 'ai' L의 RO 물로 희석되었다. 이 희석된 샘플의 'aj'는 'al' 용액으로 pH가 'ak'로 조정되었다. 이 pH 조정된 샘플의 'am'은 그 다음 'an'wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 제품을 생산하기 위하여 스프레이건조되었다. 이 제품은 'ao' YP701N2로 명명되었다. 변수들 'a' 내지 'ao'는 다음의 표 5에 기재되어 있다:
[표 5] YP701N2를 생산하기 위한 시제의 변수들
Figure pct00005
N/A = 해당 없음, NR = 미기록, ND = 미결정
실시예 8
이 실시예는 상업적 노란 콩 단백질 제품들 Propulse(Nutri-Pea, Portage la Prairie, MB), Nutralys S85F(Roquette America, Inc., Keokuk, IA), Pisane C9(Cosucra Groupe Warcoing, S.A., Belgium), Pea Protein YS 85%(The Scoular Company, Minneapolis, MN(Yantai Shuangta Food Co., LTD, Jinling Town, Zhaoyuan City, Shandong Province, China에 의해 제조), Empro E 86(Emsland Group, Emlichheim, Germany)의 단백질 함량을 설명한다. 이들 단백질 제품들은 현재 상업적으로 구매가능한 가장 높게 정제된 콩 단백질 성분들을 갖는 것이다.
상업적 샘플들의 단백질 함량은 Leco Nitrogen Determinator를 사용하여 연소분석에 의해 결정되었고 분말의 습도함량은 오븐건조방법에 의해 결정되었다. 이 샘플들의 건조기준 단백질 함량이 표 6에 도시되어 있다.
[표 6] 상업적 노란 콩 제품들의 단백질 함량
Figure pct00006
표 6에 나타난 값으로부터 알 수 있는 바와 같이, 상업적 제품들의 단백질 함량은 유사했고 본 발명의 방법의 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 유래된 제품들의 단백질 함량보다 약간 낮았다. 이 상업적 제품들은 일반적으로 본 방법에 있어서 pH 조정단계 후에 수집된 산성 불용 고체 물질로부터 유래된 제품보다 단백질이 더 높았다.
실시예 9
이 실시예는 소정의 상업적 콩 단백질 제품들은 물론 실시예 6 및 7에 개시된 바와 같이 칼슘 염의 사용과 함께 제조된 두류 단백질 제품과 실시예 2 내지 5에 개시된 바와 같은 본 발명의 관점들에 따라 칼슘 염의 사용없이 제조된 두류 단백질 제품들에 대한 단백질 용해도를 설명한다. 용해도는 Morr et al., J. Food Sci., 50: 1715 - 1718의 공정의 변형버전에 의해 테스트되었다.
0.5 g의 단백질을 공급하는데 충분한 단백질 분말이 비커(beaker) 속에서 계량되었고 그 다음 작은 량의 역삼투(RO) 정제된 물이 부가되었으며 이 혼합물은 스스히 반죽이 형성될 때까지 교반되었다. 그 다음 용량이 대략 45 ml가 되도록 부가적 물이 부가되었다. 비커의 내용물은 그 다음 마그네틱 막대를 사용하여 60 분 동안 천천히 교반되었다. 단백질의 분산 후 즉시 pH가 측정되었고 이 pH는 희석된 NaOH 또는 HCl에 의해 적절한 레벨(2, 3, 4, 5, 6, 또는 7)로 조정되었다. 이 pH는 60분 교반 동안 주기적으로 측정되고 수정되었다. 교반의 60분 후, 샘플들은 1% w/v 단백질 분산을 달성하면서 RO 물로 총 용량을 50 ml로 만들었다. 이 분산들의 단백질 함량은 Leco Nitrogen Determinator를 사용하여 연소분석에 의해 측정되었다. 그 다음 이 분산들의 약수는 10분 동안 7,800 g으로 원심분리되었고, 이것은 불용물질을 침전시켰고 상청액을 생산했다. 상청액의 단백질 함량이 Leco 분석에 의해 측정되어 졌고 이 제품의 용해도는 다음과 같이 계산되었다:
용해도(%) = (상청액의 단백질%/초기분산의 단백질%) x 100
100%보다 더 높게 계산된 값들은 100%로 보고되었다.
다른 pH 값들에서의 다양한 제품들의 단백질 용해도는 표 7에 도시되어 있다;
[표 7] 다른 pH값들에서 두류 단백질 제품들의 용해도
Figure pct00007
ND = 미결정
표 7의 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 여러 관점들에 의해 형성된 각 제품들은 다른 용해도 특성을 갖는다. 본 발명의 산성화된 단백질 용액으로부터 형성되고 중성화 단계 없이 건조된 제품(810A)은 pH 2 및 3에서 매우 높게 용해가능했지만 테스트된 더 높은 pH 값들에서의 용해도는 제한적이었다. 본 발명의 산성화된 단백질 용액으로부터 형성된 제품이 건조 전 중성화되었을 때(810N), 이 제품은 pH 2 및3에서 용해도가 낮게되었다. 810N 제품들을 위하여 획득된 용해도 값들은 테스트된 pH 범위에 걸쳐 상업적 콩 단백질 제품들을 위하여 획득된 용해도 값들보다 일반적으로 더 높았다. 산성화단계 후 산성 불용 고체 물질로부터 유래된 제품(810PN)은 pH 범위에 걸쳐 좋지않은 단백질 용해도로 나타났다. 본 발명의 향상된 선명도의 산성 용해가능 단백질 제품(816A)은 810A와 비교하여 넓은 pH 범위(2-4)에 걸쳐 용해도가 매우 높았다. 또한 816A는 5 및 7 사이의 pH값들에서 810A보다 주목할만하게 더 용해도가 높았다. 향상된 선명도의 산성 용해가능 제품(816BN)의 제조의 반제품은, 810N 및 810PN을 위해 발견된 용해도 값들 사이의 용해도 값으로, pH 범위에 걸쳐 용해도가 제한적이었다. 본 발명의 810A 제품은 칼슘 염 처리의 산성제품(701)과 다른 용해도 특성을 가졌다. 본 발명의 810N 제품은 칼슘 염 처리의 중성화된 제품(701N2)과 다른 용해도 특성을 가졌다.
실시예 10
이 실시예는 소정의 상업적 콩 단백질 제품들은 물론 실시예 6 및 7에 개시된 바와 같이 칼슘 염의 사용과 함께 제조된 두류 단백질 제품과 실시예 1 내지 5에 개시된 바와 같은 본 발명의 관점들에 따라 칼슘 염의 사용없이 제조된 두류 단백질 제품들에 대한 분자량 특성을 설명한다.
분자량 특성은 300 x 7.8 mm Phenomenex BioSep S-2000 시리즈 칼럼으로 장치된 Varian ProStar HPLC 시스템을 사용하여 크기배제크로마토그래피에 의해 결정되었다. 이 칼럼은 145 옹스트롬 구멍크기를 갖고 5 마이크론 직경의 친수성 본드결합 실리카 지지매체를 포함한다.
두류 단백질 샘플들이 분석되기 전에, 1,350 달톤에서 낮은 분자량 마커가 부가된 Vitamin B12와 함께 17,000 달톤(미오글로블린) 및 670,000 달톤(다이로글로블린) 사이의 알려진 분자량들을 갖는 단백질을 함유하는 Biorad 단백질 표준(Biorad 제품 # 151-1901)을 사용하여 표준곡선이 만들어졌다. 단백질 표준의 0.9% w/v 용액이 물에 준비되었고, 0.45 ㎛ 구멍크기 필터 디스크로 여과되었고 그 다음 0.02% 아지드화 나트륨을 함유하는 pH 6에서, 0.05M 인산염/0.15M NaCl의 이동상을 사용하는 칼럼 상에 50 μL 약수를 사용했다. 이 이동상 흐름률은 1 mL/분 이었고 성분이 280 nm에서의 흡광도에 기초하여 감지되었다. 알려진 분자량의 이들 분자의 정체시간에 기초하여, 분으로 된 정체시간에 대한 분자량의 자연로그에 관련하여 회귀공식이 개발되었다.
정체시간(분) = -0.865 x ln(분자량) + 17.154(r2=0.98).
두류 단백질 샘플들의 분석을 위하여, 아지드화 나트륨을 함유하는 pH 6에서, 0.05M 인산염/0.15M NaCl이 이동상으로 사용되었고 또한 건조 샘플들을 용해하는데 사용되었다. 단백질 샘플들은 1% w/v의 농도로 이동상 용액과 혼합되었고 적어도 1 시간 동안 셰이커(shaker에 놓여졌고 그 다음 0.45 ㎛ 구멍크기 여과 디스크를 사용하여 여과되었다. 샘플주입크기는 50 μL 이었다. 이동상 흐름률은 1 mL/분이었고 성분들은 280 nm 에서 흡광에 기초하여 감지되었다.
분자량 및 정체시간에 관련한 상기 회귀공식은 100,000 달톤, 15,000 달톤, 5,000 달톤 및 1,000 달톤의 분자량들에 대응하는 정체시간들을 계산하는데 사용되었다. HPLC ProStar 시스템은 이들 정체시간 범위들 내에 놓여있는 피크영역을 계산하는데 사용되어 졌고 주어진 분자량 범위 내에 떨어지는 단백질의 %((범위피크영역/총단백질피크영역) x 100)가 계산되었다. 이 데이타는 단백질 응답인자에 의해 수정되지 않았음을 알아야한다.
실시예 1-7에 개시된 바와 같이 제조된 제품들 및 상업적 제품들의 분자량 특성이 표 8에 도시되어 있다.
[표 8] 다양한 제품들의 HPLC 단백질 특성
Figure pct00008
표 8에 나타난 결과들로부터 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 산성화된 단백질 용액들로부터 유래된 두류 단백질 제품들(810A, 810N, 816A, 및 816BN)은 상업적 콩 단백질 제품들 및 칼슘 염의 처리에 의해 제조된 제품들과는 다른 단백질 특성을 가졌다.
실시예 11
이 실시예는 소정의 상업적 콩 단백질 제품들은 물론 실시예 6 및 7에 개시된 바와 같이 칼슘 염의 사용과 함께 제조된 두류 단백질 제품과 실시예 1 내지 5에 개시된 바와 같은 본 발명의 관점들에 따라 제조된 두류 단백질 제품들에 대한 피드산 함량의 평가를 포함한다. 피드산 함량은 Latta and Eskin의 방법(J. Agric. Food Chem., 28: 1313-1315)을 사용하여 결정되었다.
획득된 결과는 다음의 표 9에 개시되어 있다.
[표 9] 다양한 제품들의 피드산 함량
Figure pct00009
표 9에 나타난 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 관점에 따른 모든 제품들의 피드산 함량이 향상된 선명도를 갖는 산 용해성 제품(816A)을 제외하고 칼슘 염으로 제조된 제품들보다 더 높았다. 본 발명의 산성화된 단백질 용액들로부터 유래된 제품은 테스트된 상업적 제품들에 비교될 만큼 피드산 함량을 가졌다. 본 발명의 일 관점에 따른 산성 불용 고체 물질로부터 유래된 제품의 피드산 함량은 테스트된 상업적 제품들과 비교하여 더 높은 것으로 나타났다.
실시예 12
이 실시예는 소정의 상업적 콩 단백질 제품들은 물론 실시예 6 및 7에 개시된 바와 같이 칼슘 염의 사용과 함께 제조된 두류 단백질 제품과 실시예 1 내지 5에 개시된 바와 같은 본 발명의 관점들에 따라 제조된 두류 단백질 제품들에 대한 산 분해성 탄수화물 함량의 평가를 포함한다. 이 산 분해성 탄수화물 함량은 Dubois 등의 방법(Anal. Chem., 28: 350-356)에 따라 결정되었다. 그 결과는 다음의 표 10에 나타나 있다.
[표 10] 샘플들의 산 분해성 탄수화물 함량
Figure pct00010
표 10에 나타난 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 산성 불용 고체 물질로부터 유래된 본 발명의 제품은 평가된 다른 샘플들과 비교하여 산 분해성 탄수화물 함량이 일반적으로 더 높았다.
실시예 13
이 실시예는 소정의 상업적 콩 단백질 제품들은 물론 실시예 6 및 7에 개시된 바와 같이 칼슘 염의 사용과 함께 제조된 두류 단백질 제품과 실시예 1 내지 5에 개시된 바와 같은 본 발명의 관점들에 따라 제조된 두류 단백질 제품들에 대한 용액의 색상 및 용액의 헤이즈레벨에 대한 평가를 포함한다. 단백질 제품들의 용액은 15 ml의 RO 물에 0.48 g의 단백질을 공급하는데 충분한 단백질 분말을 용해하여 준비되었다. 용액의 pH는 pH 미터로 측정되었고 색상 및 헤이즈레벨은 전송모드로 작동된 HunterLab ColorQuest XE 설비를 사용하여 평가되었다. 결과는 다음의 표 11에 나타나 있다.
[표 11] 용액 내에서의 샘플들의 색상 및 헤이즈값
Figure pct00011
표 11의 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 816A 제품의 용액의 헤이즈레벨은 본 발명의 다른 제품들의 용액의 헤이즈레벨보다 매우 낮았고, 칼슘 염을 사용하여 제조된 낮은 pH 제품(701) 용액의 헤이즈레벨에 비교할 만 했다.
실시예 14
이 실시예는 소정의 상업적 콩 단백질 제품들은 물론 실시예 6 및 7에 개시된 바와 같이 칼슘 염의 사용과 함께 제조된 두류 단백질 제품과 실시예 1 내지 5에 개시된 바와 같은 본 발명의 관점들에 따라 제조된 두류 단백질 제품들의 건조색상에 대한 평가를 포함한다. 건조색상은 반사모드로 작동된 HunterLab ColorQuest XE 설비를 사용하여 평가되었다. 결과는 다음의 표 12에 나타나 있다.
[표 12] 단백질 제품들의 건조 색상
Figure pct00012
표 12의 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 본 발명의 제품들의 색상은 칼슘 염으로 제조된 제품들(701 및 701N2)의 색상과 유사했고 상업적 제품들보다 덜 붉고 덜 노랬으며 일반적으로 더 밝았다.
실시예 15
이 실시예는 실시예 1에 개시된 바와 같이 제조된 YP26-F17-14A YP810N의 맛을 상업적 노란 콩 단백질 제품 Pisane C9 제품과의 비교를 설명한다.
샘플들은 250 ml의 정제된 음료수에 5 g의 단백질을 공급하기에 충분한 단백질 분말을 용해함에 의해 관능평가를 위해 준비되었다. Pisane C9의 용액의 pH가 7.56이었던 한편 YP810N의 용액의 pH는 7.13으로 결정되었다. 식품등급 HCl이 pH를 7로 조정하기 위하여 두 용액에 첨가되었다. 7명의 무작위 패널들에게 눈을 가리고 샘플들을 비교하고 어느 샘플이 야채향(맛)이 덜 나는지 알려줄 것을 요청했다.
7명의 패널들은 모두 YP810N이 야채 맛이 덜 난다고 평가했다.
실시예 16
이 실시예는 실시예 2에 개시된 바와 같이 제조된 YP27-C30-15A YP810N의 맛을 상업적 노란 콩 단백질 제품 Pisane C9 제품과의 비교를 설명한다.
샘플들은 250 ml의 정제된 음료수에 5 g의 단백질을 공급하기에 충분한 단백질 분말을 용해함에 의해 관능평가를 위해 준비되었다. Pisane C9의 용액의 pH가 7.92이었던 한편 YP810N의 용액의 pH는 6.56으로 결정되었다. 식품등급 NaOH가 pH를 6.99로 올리기 위하여 YP810N의 용액에 첨가되었다. 식품등급 HCl은 Pisane C9의 pH를 6.97로 낮추기 위해 Pisane C9의 용액에 첨가되었다. 9명의 무작위 패널들에게 눈을 가리고 샘플들을 비교하고 어느 샘플이 야채향(맛)이 덜 나는지 알려줄 것을 요청했다.
9명의 패널들 중 8명은 모두 YP810N이 야채 맛이 덜 난다고 평가했고, 1명의 패널만 어느 샘플이 야채맛이 덜 나는지 구분할 수 없다고 평가했다.
실시예 17
이 실시예는 실시예 2에 개시된 바와 같이 제조된 YP27-C30-15A YP810N의 맛을 상업적 노란 콩 단백질 제품 Pea Protein YS 85%의 제품과의 비교를 설명한다.
샘플들은 250 ml의 정제된 음료수에 5g의 단백질을 공급하기에 충분한 단백질 분말을 용해함에 의해 관능평가를 위해 준비되었다. Pea Protein YS 85%의 용액의 pH가 7.16이었던 한편 YP810N의 용액의 pH는 6.65로 결정되었다. 식품등급 NaOH가 pH를 7.00으로 올리기 위하여 YP810N의 용액에 첨가되었다. 식품등급 HCl은 Pea Protein YS 85%의 pH를 7.00으로 낮추기 위해 Pea Protein YS 85%의 용액에 첨가되었다. 10명의 무작위 패널들에게 눈을 가리고 샘플들을 비교하고 어느 샘플이 야채 맛이 덜 나는지 알려줄 것을 요청했다.
10명의 패널들 중 8명은 모두 YP810N이 야채 맛이 덜 난다고 평가했다. 1명의 패널은 Pea Protein YS 85%의 제품이 야채 맛이 덜 난다고 평가했고 1명의 패널은 어느 샘플이 야채맛이 덜 나는지 구분할 수 없다고 평가했다.
실시예 18
이 실시예는 실시예 2에 개시된 바와 같이 제조된 YP27-E06-15A YP810N의 맛을 상업적 노란 콩 단백질 제품 Pea Protein YS 85%의 제품과의 비교를 설명한다.
샘플들은 250 ml의 정제된 음료수에 5 g의 단백질을 공급하기에 충분한 단백질 분말을 용해함에 의해 관능평가를 위해 준비되었다. Pea Protein YS 85%의 용액의 pH가 7.10이었고 YP810N의 용액의 pH는 7.49로 결정되었다. 식품등급 HCl이 pH를 7.03으로 낮추기 위하여 YP810N의 용액에 첨가되었다. 9명의 무작위 패널들에게 눈을 가리고 샘플들을 비교하고 어느 샘플이 야채 맛이 덜 나는지 알려줄 것을 요청했다.
9명의 패널들 중 6명은 YP810N이 야채 맛이 덜 난다고 평가했다. 2명의 패널은 Pea Protein YS 85%의 제품이 야채 맛이 덜 난다고 평가했고 1명의 패널은 어느 샘플이 야채맛이 덜 나는지 구분할 수 없다고 평가했다.
실시예 19
이 실시예는 실시예 2에 개시된 바와 같이 제조된 YP27-C30-15A YP810A의 맛을 상업적 노란 콩 단백질 제품 Pisane C9 제품과의 비교를 설명한다.
샘플들은 250 ml의 정제된 음료수에 5 g의 단백질을 공급하기에 충분한 단백질 분말을 용해함에 의해 관능평가를 위해 준비되었다. Pisane C9의 용액의 pH가 7.90이었던 한편 YP810A의 용액의 pH는 2.77로 결정되었다. 식품등급 NaOH가 pH를 3.00으로 올리기 위하여 YP810A의 용액에 첨가되었다. 식품등급 HCl은 Pisane C9의 pH를 3.00으로 낮추기 위해 Pisane C9의 용액에 첨가되었다. 9명의 무작위 패널들에게 눈을 가리고 샘플들을 비교하고 어느 샘플이 야채향(맛)이 덜 나는지 알려줄 것을 요청했다.
9명의 패널들 중 8명은 모두 YP810A가 야채 맛이 덜 난다고 평가했고, 1명의 패널만 Pisane C9이 야채 맛이 덜 난다고 평가했다.
실시예 20
이 실시예는 실시예 2에 개시된 바와 같이 제조된 YP27-C30-15A YP810A의 맛을 상업적 노란 콩 단백질 제품 Pea Protein YS 85%의 제품과의 비교를 설명한다.
샘플들은 250 ml의 정제된 음료수에 5g의 단백질을 공급하기에 충분한 단백질 분말을 용해함에 의해 관능평가를 위해 준비되었다. Pea Protein YS 85%의 용액의 pH가 7.25이었던 한편 YP810A의 용액의 pH는 2.82로 결정되었다. 식품등급 NaOH가 pH를 3.00으로 올리기 위하여 YP810A의 용액에 첨가되었다. 식품등급 HCl은 Pea Protein YS 85%의 pH를 3.00으로 낮추기 위해 Pea Protein YS 85%의 용액에 첨가되었다. 9명의 무작위 패널들에게 눈을 가리고 샘플들을 비교하고 어느 샘플이 야채 맛이 덜 나는지 알려줄 것을 요청했다.
9명의 패널들 중 8명은 모두 YP810A가 야채 맛이 덜 난다고 평가했다. 1명의 패널은 어느 샘플이 야채맛이 덜 나는지 구분할 수 없다고 평가했다.

Claims (104)

  1. 건조중량기준으로 적어도 약 60 wt% 및 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)로 구성하는 그룹으로부터 선택된 단백질함량을 갖는 두류 단백질 제품의 제조방법에 있어서,
    (a) 단백질원으로부터 두류 단백질의 용해를 일으키고 수용성 두류 단백질 용액을 형성하도록 물로 두류 단백질원을 추출하는 단계,
    (b) 수용성 두류 단백질 용액을 잔여 두류 단백질원으로부터 적어도 부분적으로 분리하는 단계,
    (c) 산성화된 두류 단백질 용액을 생산하기 위하여 수용성 두류 단백질 용액의 pH를 약 1.5 내지 약 3.4의 pH로 조정하는 단계,
    (d) 산성화된 두류 단백질 용액으로부터 산성 불용 고체물질을 분리하는 단계, 및
    선택적으로:
    (e) 선택적 막 기술에 의해 산성화된 두류 단백질 용액을 선택적으로 농축하는 단계,
    (f) 선택적으로 농축된 두류 단백질 용액을 선택적으로 다이아필트레이션하는 단계, 및
    (g) 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 두류 단백질 용액을 선택적으로 건조하는 단계,
    또는,
    (h) 산성화된 두류 단백질 용액을 제1농축물 및 제1침투물로 분류하기 위하여 선택적 막 기술에 의해 산성화된 두류 단백질 용액을 농축하고 및/또는 다이아필트레이션하는 단계,
    (i) 제 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 제1농축물을 선택적으로 건조하는 단계,
    (j) 제농축물 및 제2침투물을 제공하기 위하여 제1침투물을 농축하고 선택적으로 다이아필트레이션하는 단계, 및
    (k) 제 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 제2농축물을 선택적으로 건조하는 단계를 포함하는 두류 단백질 제품의 제조방법.
  2. 제 1항에 있어서, 농축 및/또는 다이아필트레이션 단계(h)는 단백질 성분을 제1농축물의 높은 분자량 부분과 제1침투물의 낮은 분자량 부분으로 분류하고 선택적 건조단계(i)는 높은 분자량 단백질을 포함하는 제1두류 단백질 제품을 제공하는 제조방법.
  3. 제 2항에 있어서, 농축 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j)는 낮은 분자량 부분 단백질을 제2농축물로 보유하고 불순물을 제2침투물로 막의 통과를 허용하며 선택적 건조단계(k)는 낮은 분자량 단백질을 포함하는 제2 두류 단백질 제품을 제공하는 제조방법.
  4. 제 3항에 있어서, 제2 두류 단백질 제품은 산성 용액에서 향상된 선명도를 갖는 제조방법.
  5. 제 1항에 있어서, 상기 산성 불용 고체 물질은 건조중량기준으로 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 제품을 형성하기 위하여 선택적으로 건조되는 제조방법.
  6. 제 1항에 있어서, 산성 불용 물질의 pH는, 선택적 건조단계 전에, 약 8.0 미만, 약 6.0 내지 약 8.0 및 약 6.5 내지 약 7.5로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 값으로 조정되는 제조방법.
  7. 제 1항에 있어서, 상기 산성 불용 고체 물질은 약 1.5 내지 약 3.4 및 산성 불용 고체 물질의 pH와 거의 동일한 pH로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 pH를 갖는 약 1 내지 약 20 용량의 물로 혼합함에 의해 세정되는 제조방법.
  8. 제 7항에 있어서, 세정된 산성 불용 물질의 pH는, 선택적 건조단계 전에, 약 8.0 미만, 약 6.0 내지 약 8.0 및 약 6.5 내지 약 7.5로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 값으로 조정되는 제조방법.
  9. 제 7항 또는 제 8항에 있어서, 세정 물은 단계(d)의 산성화된 두류 단백질 용액과 결합되고 단계들(e) 내지 (g) 중 적어도 하나에서와 같이 처리되는 제조방법.
  10. 제 7항 또는 제 8항에 있어서, 세정 물은 단계(d)의 산성화된 두류 단백질 용액과 결합되고 단계들(h) 내지 (k) 중 적어도 하나에서와 같이 처리되는 제조방법.
  11. 제1항에 있어서, 상기 추출단계(a)는 약 1℃ 내지 100℃, 약 15℃ 내지 65℃, 및 약 20℃ 내지 35℃로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 온도에서 수행되는 제조방법.
  12. 제 1항에 있어서, 추출에 사용된 상기 물은 추출이 약 6 내지 11 및 약 6 내지 약 8.5로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 pH에서 수행되도록 pH조정시약을 포함하는 제조방법.
  13. 제 12항에 있어서, pH 조정시약은 수산화나트륨인 제조방법.
  14. 제 1항에 있어서, 상기 수용성 두류 단백질 용액은 약 5 내지 50 g/L 및 약 10 내지 50 g/L로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 단백질 농도를 갖는 제조방법.
  15. 제 1항에 있어서, 상기 물은 산화방지제를 함유하는 제조방법.
  16. 제 1항에 있어서, 상기 분리단계(b)에 뒤이어 상기 산성화단계(c) 전에, 상기 수용성 두류 단백질 용액은 수용성 단백질 용액으로부터 색상 및/또는 냄새화합물을 제거하기 위하여 흡착제로 처리되는 제조방법.
  17. 제 1항에 있어서, 상기 수용성 두류 단백질 용액의 pH는 단계(c)에서 약 2.0 내지 약 3.0으로 조정되는 제조방법.
  18. 제 1항에 있어서, 단계(d)에 뒤이은 상기 산성화된 수용성 단백질 용액은 열처리단계에 놓이는 제조방법.
  19. 제 18항에 있어서, 열처리단계는 열-불안정 반-영양인자들을 불활성화하기 위하여 수행되는 제조방법.
  20. 제 19항에 있어서, 반-영양인자들은 열-불안정 트립신 억제인자들인 제조방법.
  21. 제 18항에 있어서, 열처리단계는 산성화된 수용성 단백질 용액을 저온살균하기 위하여 수행되는 제조방법.
  22. 제 18항에 있어서, 상기 열처리는 약 70℃ 내지 약 160℃의 온도로 약 10초 내지 약 60 분, 약 80℃ 내지 약 120℃의 온도로 약 10 초 내지 약 5분 동안, 그리고 약85℃ 내지 약 95℃의 온도로 약 30초 내지 약 5분 동안으로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 온도 및 시간으로 수행되는 제조방법.
  23. 제 18항에 있어서, 열처리되고 산성화된 두류 단백질 용액은 약2℃ 내지 약 65℃ 및 약 50℃ 내지 약 60℃로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 온도로 냉각되는 제조방법.
  24. 제 1항에 있어서, 상기 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 제품을 제공하기 위하여 건조되는 제조방법.
  25. 제 1항에 있어서, 상기 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 50 내지 300 g/L 및 약 100 내지 200 g/L로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 단백질 농도를 갖는 농축되고 산성화된 두류 단백질 용액을 생산하기 위하여 농축단계(c)에 놓이는 제조방법.
  26. 제 25항에 있어서, 상기 농축단계(c)는 약 1,000 내지 약 1,000,000 달톤 및 약 1,000 내지 약 100,000 달톤으로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 분자량 차단을 갖는 막을 사용하여 한외여과에 의해 수행되는 제조방법.
  27. 제 25항에 있어서, 농축되고 산성화된 두류 단백질 용액은 다이아필트레이션 단계(f)에 선택적으로 놓이는 제조방법.
  28. 제 27항에 있어서, 상기 다이아필트레이션 단계(f)는 부분적 또는 완전한 농축의 전 또는 후에 산성화된 수용성 두류 단백질 용액에 대하여 물 또는 산성화된 물을 사용하여 수행되는 제조방법.
  29. 제 28항에 있어서, 상기 다이아필트레이션 단계(f)는 약 1 내지 약 40 용량 및 약 2 내지 약 25 용량으로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 용량의 다이아필트레이션 용액을 사용하여 수행되는 제조방법.
  30. 제 27항에 있어서, 상기 다이아필트레이션 단계(f)는 불순물의 의미 있는 량이 없어질 때까지 또는 가시적 색상이 침투물에 존재하지 않을 때까지 수행되는 제조방법.
  31. 제 27항에 있어서, 상기 다이아필트레이션 단계(f)는 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하도록 농축물이 충분히 정제될 때까지 수행되는 제조방법.
  32. 제 27항에 있어서, 상기 다이아필트레이션 단계(f)는 약 1,000 내지 약 1,000,000 달톤 및 약 1,000 내지 약 100,000 달톤으로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 분자량차단을 갖는 막을 사용하여 수행되는 제조방법.
  33. 제 27항에 있어서, 산화방지제는 다이아필트레이션 단계(f)의 적어도 일 부분 동안 다이아필트레이션 매체에 존재하는 제조방법.
  34. 제 25항에 있어서, 상기 농축단계(e) 및 선택적 다이아필트레이션 단계(f)는 약 2℃ 내지 65℃ 및 약 50℃ 내지 60℃로 구성하는 그룹으로부터 선택된 온도에서 수행되는 제조방법.
  35. 제 1항에 있어서, 상기 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 50 내지 약 300 g/L 및 약 100 내지 200 g/L로 구성하는 그룹으로부터 선택된 단백질 농도를 갖는 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액(제1농축물)을 생산하기 위하여 단계(h)에 놓이는 제조방법.
  36. 제 1항에 있어서, 상기 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 0.05 내지 약 0.1㎛ 및 약 0.08 내지 약 0.1㎛로 구성하는 그룹으로부터 선택된 구멍크기를 갖는 막을 사용하는 정밀여과에 의해 단계(h)에 놓이는 제조방법.
  37. 제 1항에 있어서, 상기 산성화된 수용성 두류 단백질 용액은 약 10,000 내지 약 1,000,000 달톤 및 약 100,000 내지 약 1,000,000 달톤으로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 분자량차단을 갖는 막을 사용하는 한외여과에 의해 단계(h)에 놓이는 제조방법.
  38. 제 1항에 있어서, 상기 농축 및/또는 다이아필트레이션 단계(h)의 상기 다이아필트레이션은 뒤이은 선택적 농축 전에 또는 부분적 또는 완전한 농축의 후에 산성화된 수용성 두류 단백질 용액에 대하여 물 또는 산성화된 물을 사용하여 수행되는 제조방법.
  39. 제 35항 또는 제 38항에 있어서, 상기 농축 및/또는 다이아필트레이션 단계(h)의 상기 다이아필트레이션은 약 1 내지 약 40 용량 및 약 2 내지 약 25 용량으로 구성하는 그룹으로부터 선택된 용량의 다이아필트레이션 용액을 사용하여 수행되는 제조방법.
  40. 제 35항 또는 제 38항에 있어서, 상기 농축 및/또는 다이아필트레이션 단계(h)의 상기 다이아필트레이션은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하도록 농축물이 충분히 정제될 때까지 수행되는 제조방법.
  41. 제 35항 또는 제 38항에 있어서, 산화방지제가 상기 농축 및/또는 다이아필트레이션 단계(h)의 다이아필트레이션의 적어도 일 부분 동안 다이아필트레이션 매체에 존재하는 제조방법.
  42. 제 35항 또는 제 38항에 있어서, 농축 및/또는 다이아필트레이션 단계(h)의 상기 농축 및/또는 다이아필트레이션은 약 2℃ 내지 65℃ 및 약 50℃ 내지 60℃로 구성하는 그룹으로부터 선택된 온도에서 수행되는 제조방법.
  43. 제 1항에 있어서, 상기 제1침투물은 약 10 내지 약 300 g/L 및 약 100 내지 200 g/L로 구성하는 그룹으로부터 선택된 단백질 농도를 갖는 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액(제2농축물)을 제조하기 위하여 단계(j)에 놓이는 제조방법.
  44. 제 43항에 있어서, 상기 농축 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j)는 약 1,000 내지 약 100,000 달톤 및 약 1,000 내지 약 10,000 달톤으로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 분자량차단을 갖는 막을 사용하는 한외여과에 의해 수행되는 제조방법.
  45. 상기 농축 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j)의 상기 다이아필트레이션은 부분적 또는 완전한 농축의 전 또는 후에 제2농축물에 대하여 물 또는 산성화된 물을 사용하여 수행되는 제조방법.
  46. 제 44항에 있어서, 상기 농축 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j)의 상기 다이아필트레이션은 약 1 내지 약 40 용량 및 약 2 내지 약 25 용량으로 구성하는 그룹으로부터 선택된 용량의 다이아필트레이션 용액을 사용하여 수행되는 제조방법.
  47. 제 43항에 있어서, 상기 농축 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j)의 상기 다이아필트레이션은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하도록 농축물이 충분히 정제될 때까지 수행되는 제조방법.
  48. 제 43항에 있어서, 산화방지제가 다이아필트레이션 단계의 적어도 일 부분 동안 다이아필트레이션 매체에 존재하는 제조방법.
  49. 제 43항에 있어서, 상기 농축 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j)의 상기 농축 및 선택적 다이아필트레이션은 약 2℃ 내지 65℃ 및 약 50℃ 내지 60℃로 구성하는 그룹으로부터 선택된 온도에서 수행되는 제조방법.
  50. 제 27항, 제 35항, 제 38항 및 제 43항 중 어느 한 항에 있어서, 부분적으로 농축되거나 완전히 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액은 열처리단계에 놓이는 제조방법.
  51. 제 50항에 있어서, 열처리단계는 열-불안정 반-영양인자들을 불활성화하기 위하여 수행되는 제조방법.
  52. 제 51항에 있어서, 열-불안정 반-영양인자들은 열-불안정 트립신 억제인자들인 제조방법.
  53. 제 50항에 있어서, 상기 열처리는 약 70℃ 내지 약 160℃의 온도로 약 10초 내지 약 60 분, 약 80℃ 내지 약 120℃의 온도로 약 10 초 내지 약 5분 동안, 그리고 약85℃ 내지 약 95℃의 온도로 약 30초 내지 약 5분 동안으로 이루어지는 그룹으로부터 선택된 온도 및 시간으로 수행되는 제조방법.
  54. 제 50항에 있어서, 상기 열처리된 두류 단백질 용액은 약 2℃ 내지 65℃ 및 약 50℃ 내지 60℃로 구성하는 그룹으로부터 선택된 온도로 냉각되는 제조방법.
  55. 제 27항, 제 35항 및 제 43항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 단백질 용액은 색상 및/또는 냄새화합물을 제거하기 위하여 흡착제로 처리되는 제조방법.
  56. 제 27항, 제 35항 및 제 43항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 단백질 용액은 건조 전에 저온살균되는 제조방법.
  57. 제 38항에 있어서, 상기 다이아필트레이션되고 선택적으로 농축되었으며 산성화된 단백질 용액은 색상 및/또는 냄새화합물을 제거하기 위하여 흡착제로 처리되는 제조방법.
  58. 제 38항에 있어서, 상기 다이아필트레이션되고 선택적으로 농축되었으며 산성화된 단백질 용액은 건조 전에 저온살균되는 제조방법.
  59. 제 56항 또는 제 58항에 있어서, 상기 저온살균단계는 약 55℃ 내지 약 75℃의 온도에서 약 15초 내지 약 60분 동안 수행되는 제조방법.
  60. 제 31항에 있어서, 상기 농축되고 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하기 위하여 건조단계(g)에 놓이는 제조방법.
  61. 제 40항에 있어서, 상기 농축되고 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하기 위하여 건조단계(i)에 놓이는 제조방법.
  62. 제 47항에 있어서, 상기 농축되고 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액은 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 분리물을 제공하기 위하여 건조단계(k)에 놓이는 제조방법.
  63. 제 1항에 있어서, 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션되었으며 산성화된 두류 단백질 용액의 pH는, 건조단계(g) 전에, 약 8.0 미만, 약 6.0 내지 약 8.0 및 약 6.5 내지 약 7.5로 구성하는 그룹으로부터 선택된 값으로 조정되는 제조방법.
  64. 제 1항에 있어서, 제1농축물의 pH는, 건조단계(i) 전에, 약 8.0 미만, 약 6.0 내지 약 8.0 및 약 6.5 내지 약 7.5로 구성하는 그룹으로부터 선택된 값으로 조정되는 제조방법.
  65. 제 27항 또는 제 43항에 있어서, 농축 및/또는 선택적 다이아필트레이션 단계는 트립신 억제인자들의 제거에 우호적 방식으로 조작되는 제조방법.
  66. 제 1항에 있어서, 추출단계(a) 동안 감소제가 존재하는 제조방법.
  67. 제 27항, 제 35항, 제 38항 및 제 43항 중 어느 한 항에 있어서, 감소제는 선택적 농축단계(e) 및/또는 선택적 다이아필트레이션 단계(f) 동안 또는 막처리단계(h) 및/또는 농축 및 선택적 다이아필트레이션 단계(j) 동안 존재하는 제조방법.
  68. 제 66항 또는 제 67항에 있어서, 상기 감소제는 트립신 억제인자 활동성의 감소를 달성하기 위하여 트립신 억제인자들의 시스틴결합을 방해하거나 재배열하기 위하여 존재하는 제조방법.
  69. 제 1항에 있어서, 감소제는 건조단계(g) 전의 선택적으로 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 두류 단백질 용액에 및/또는 건조된 두류 단백질 제품에 부가되는 제조방법.
  70. 제 1항에 있어서, 감소제는 건조단계(i) 전의 제1농축물에 및/또는 건조된 두류 단백질 제품에 첨가되는 제조방법.
  71. 제 1항에 있어서, 감소제는 건조단계(k) 전의 농축되고 선택적으로 다이아필트레이션된 두류 단백질 용액에 및/또는 건조된 두류 단백질 제품에 첨가되는 제조방법.
  72. 제 69항 내지 제 71항 중 어느 한 항에 있어서, 감소제는 트립신 억제인자 활동성의 감소를 달성하기 위하여 트립신 억제인자들의 시스틴결합을 방해하거나 재배열하기 위하여 첨가되는 제조방법.
  73. 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 제품에 있어서,
    - 염의 첨가를 포함하는 처리단계 없이 제조되고,
    - 콩 또는 야채 맛이 거의 없거나 없으며, 및
    - 생산에 있어서 효소를 요구하지 않는 두류 단백질 제품.
  74. 제 73항에 있어서, 약 1.5 wt% d.b. 이상의 피드산을 함유하는 두류 단백질 제품.
  75. 제 73항에 있어서, 적어도 약 90 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 제품.
  76. 제 73항에 있어서, 약 4.0 미만 및 약 3.0 미만으로 구성하는 그룹으로부터 선택된 산성 pH값들에서 수용성 매체 내에 완전히 용해가능한 두류 단백질 제품.
  77. 제 76항에 있어서, 단백질 제품을 용액으로 또는 서스펜션으로 유지하기 위하여 안정제나 다른 첨가제를 요구하지 않는 두류 단백질 제품.
  78. 제 73항 내지 제 77항 중 어느 한 항에 따른 두류 단백질 제품을 포함하는 것으로 배합된 식품제품.
  79. 제 78항에 있어서, 음료인 식품제품.
  80. 제 76항에 있어서 혼합물의 수용성 용액을 생산하기 위하여 물-용해성 분말물질과 혼합되는 두류 단백질 제품.
  81. 제 80항에 있어서, 혼합물은 분말화된 음료인 두류 단백질 제품.
  82. 제 76항의 두류 단백질 제품의 수용성 용액.
  83. 제 82항에 있어서, 음료인 수용성 용액.
  84. 제 83항에 있어서, 음료는 두류 단백질 제품이 완전히 용해가능하고 실질적으로 투명한 선명한 음료인 수용성 용액.
  85. 제 83항에 있어서, 음료는 용해된 두류 단백질이 헤이즈레벨을 증가시키지 않는 선명하지 않은 음료인 수용성 용액.
  86. 제 83항에 있어서, 음료는 용해된 두류 단백질이 음료의 헤이즈레벨에 기여하는 선명하지 않은 음료인 수용성 용액.
  87. 제 73항에 있어서, 낮은 트립신 억제인자 활동성을 갖는 두류 단백질 제품.
  88. 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 약 90% 이상의 약 2 내지 약 3의 pH의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도, 약 35% 미만의 약 4 내지 약 6의 pH의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도, 그리고 약 25% 내지 55% 사이의 약 7의 pH의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도를 갖는 두류 단백질 제품.
  89. 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 약 35% 및 75% 사이의 약 2의 pH의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도, 약 25% 및 55% 사이의 약 3의 pH의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도, 약 15% 및 30% 사이의 약 4의 pH의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도, 그리고 약 15% 및 50% 사이의 약 7의 pH의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도를 갖는 두류 단백질 제품.
  90. 다음의 분자량 특성:
    약 100,000 달톤 이상의 약 7 내지 약 20%,
    약 15,000 달톤으로부터 약 100,000 달톤까지의 약 13 내지 약 40%,
    약 5,000 달톤으로부터 약 15,000 달톤까지의 약 15 내지 약 28%, 및
    약 1,000 달톤으로부터 약 5,000 달톤까지의 약 21 내지 약 57%
    를 포함하는 두류 단백질 제품.
  91. 다음의 분자량 특성:
    약 100,000 달톤 이상의 약 12 내지 약 27%,
    약 15,000 달톤으로부터 약 100,000 달톤까지의 약 18 내지 약 35%,
    약 5,000 달톤으로부터 약 15,000 달톤까지의 약 20 내지 약 37%, 및
    약 1,000 달톤으로부터 약 5,000 달톤까지의 약 12 내지 약 43%
    를 포함하는 두류 단백질 제품.
  92. 다음의 분자량 특성:
    약 100,000 달톤 이상의 약 4 내지 약 8%,
    약 15,000 달톤으로부터 약 100,000 달톤까지의 약 32 내지 약 36%,
    약 5,000 달톤으로부터 약 15,000 달톤까지의 약 43 내지 약 48%, 및
    약 1,000 달톤으로부터 약 5,000 달톤까지의 약 12 내지 약 16%
    를 포함하는 두류 단백질 제품.
  93. 다음의 분자량 특성:
    약 100,000 달톤 이상의 약 8 내지 약 12%,
    약 15,000 달톤으로부터 약 100,000 달톤까지의 약 16 내지 약 27%,
    약 5,000 달톤으로부터 약 15,000 달톤까지의 약 13 내지 약 21%, 및
    약 1,000 달톤으로부터 약 5,000 달톤까지의 약 43 내지 약 57%
    를 포함하는 두류 단백질 제품.
  94. 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 약 40% 미만의 약 2 내지 약 7의 pH의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도, 및 약 3.0 % d.b.이상의 피드산 함량을 갖는 두류 단백질 제품.
  95. 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 약 30% 미만의 약 2 내지 약 7의 pH의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도, 및 약 6 % d.b.이상의 산 분해성 탄수화물 함량을 갖는 두류 단백질 제품.
  96. 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 약 90% 이상의 약 2 내지 약 4의 pH의 물에 1% 단백질 w/v의 단백질 용해도, 및 약 6 % d.b.이상의 산 분해성 탄수화물 함량을 갖는 두류 단백질 제품.
  97. 30% 미만 및 20% 미만으로 구성하는 그룹으로부터 선택된 15 ml의 물에 0.48 g의 단백질을 공급하기에 충분한 단백질 분말을 용해함에 의해 준비된 용액을 위한 헤이즈독출을 갖는, 염의 첨가 또는 효소분해 없이 준비된, 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖는 두류 단백질 제품.
  98. 제 97항에 있어서, 염은 칼슘 염인 두류 단백질 제품.
  99. 제 88항, 제 91항, 제 94항, 제 95항 및 제 96항 중 어느 한 항에 있어서, 두류 단백질 제품의 용해도는 실시예 9의 방법에 의해 결정되는 두류 단백질 제품.
  100. 제 90항 내지 제 93항 중 어느 한 항에 있어서, 두류 단백질 제품의 분자량 특성은 실시예 10의 방법에 의해 결정되는 두류 단백질 제품.
  101. 제 95항 또는 제 96항에 있어서, 산 분해성 탄수화물 함량은 실시예 12의 방법에 의해 결정되는 두류 단백질 제품.
  102. 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 1.5 wt% 이상의 피드산 함량을 가지며, 2.5 미만의 건조분말의 a* 독출을 갖는 두류 단백질 제품.
  103. 적어도 약 60 wt%(N x 6.25)d.b.의 단백질 함량을 갖고, 1.5 wt% 이상의 피드산 함량을 가지며, 18 미만의 건조분말의 b* 독출을 갖는 두류 단백질 제품.
  104. 제88항 내지 제 103항 중 어느 한 항에 있어서, 노란 콩 단백질 제품인 두류 단백질 제품.
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