KR20150036790A - 대마(大麻) 유래의 가용성 단백질 제품(h701)의 생산 - Google Patents
대마(大麻) 유래의 가용성 단백질 제품(h701)의 생산 Download PDFInfo
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Abstract
분리단백으로서, 낮은 pH 값에서 용액을 생산하고, 단백질의 침전없이 소프트 드링크 및 스포츠 음료의 강화를 위하여 사용되는 대마 단백질 제품. 대마 단백질 제품은 대마 단백질원을 칼슘염 수용액으로 추출하여 대마 단백질 수용액을 형성하고, 대마 단백질 수용액을 잔류 대마 단백질원으로부터 분리하고, 약 1.5 내지 약 4.4 의 pH로 대마 단백질 수용액의 pH 를 조정하여 산성화된 대마 단백질 용액을 생산하고, 건조될 수 있으며, 임의선택 농축 및 투석여과를 거쳐서 대마 단백질 제품을 제공한다.
Description
본 출원은 2012년 8월 2일자로 출원된 미국 특허출원 제 61/678,722 호로부터 35USC 119(e) 하의 우선권을 주장한다.
본 발명은 대마(大麻) 유래의 단백질 제품의 생산 및 신규한 대마 단백질 제품에 관한 것이다.
본 출원인에게 양도되고 그의 개시내용이 본 명세서에 참조로 결합된 2009년 10월 21일자 미국 특허출원 제 12/603,087 호(미국 특허공개번호 2010-0098818호), 2010년 10월 13일자 미국 특허출원 제12/923,897 호(미국 특허공개번호 2011-0038993호) 및 2011년 6월 1일자 미국 특허출원 제 12/998,422 호(미국 특허공개번호 2011-0236556 호)에 있어서는, 적어도 약 60 wt%(N×6.25)d.b., 바람직하게는 적어도 약 90 wt%의 단백질 함량을 가지며, 투명하고 낮은 pH값에서 열 안정성이 있으며, 단백질의 침전이 없이 소프트 드링크 및 기타 수용성 시스템의 단백질 강화용으로 사용될 수 있는 콩 단백질 제품의 제조에 관하여 개시하고 있다.
콩 단백질 제품은 단백질원으로부터 콩 단백질의 가용화를 야기하고 콩 단백질 수용액을 형성하기 위하여 염화칼슘 수용액으로 콩 단백질원을 추출하고, 잔류 콩 단백질원으로부터 콩단백질 수용액을 분리하며, 콩 단백질 용액을 선택적으로 희석하고, 산성화한 깨끗한 콩 단백질 용액을 생산하기 위하여 콩 단백질 수용액의 pH를 약 1.5 내지 약 4.4로, 바람직하게는 약 2 내지 약 4 로 조정하며, 선택적인 박막기술을 이용함으로써 이온강도를 실질적으로 일정하게 유지하면서 수용성의 깨끗한 단백질 용액을 농축하고, 선택적으로 그 농축된 콩단백질 용액을 투석여과(diafiltering)하고, 선택적으로 그 농축 및 투석여과된 콩단백질 용액을 건조함으로써 생산된다.
이러한 절차 및 그의 변형은 적어도 60 wt%(N×6.25)d.b.의 단백질 함량을 가지는 대마로부터 산용융성 단백질 제품을 형성하는데 사용될 수 있다는 것이 발견되었다. 산용융성 대마 단백질 제품은, 특히 소프트 드링크 및 스포츠 음료의 단백질 강화용으로 사용될 수 있으며, 더욱 특별하게는 분말 소프트 드링크 및 스포츠 음료에 사용될 수 있는데, 이들은 단백질의 침전없이, 최종 사용자에 의하여 물 또는 기타 수용성 시스템에 용해된다.
신규한 대마 단백질 제품은 약 4.4 미만의 산성 pH 값에서 수용액에 완전히 용해된다. 제품의 완전한 용해도가 주어지면, 용액 또는 현탁액 내에 단백질을 유지하기 위한 안정제 또는 기타 첨가물이 필요 없다. 이 제품은 피틴산이 약 1.5 wt%, 바람직하게는 약 0.5 wt%로 낮다. 대마 단백질 제품의 생산에는 효소가 필요하지 않다. 대마 단백질 제품은 자극성이 없는 맛을 가지는 것으로 묘사된다. 대마 단백질 제품은 바람직하게는 적어도 약 90 wt%, 바람직하게는 적어도 약 100 wt% (N×6.25)의 단백질 함량을 가지는 분리단백이다.
본 발명의 일 실시형태에 따르면, 건조중량 기준으로 적어도 60 wt%(N×6.25)의 단백질 함량을 가지며:
(a) 대마 단백질원을 칼슘염 수용액으로 추출하고, 대마 단백질원으로부터의 대마 단백질의 가용화를 일으키고, 대마 단백질 수용액을 형성하고,
(b) 잔류 대마 단백질원으로부터 대마 단백질 수용액을 분리하며,
(c) 대마 단백질 수용액을 선택적으로 희석하고,
(d) 산성화한 대마 단백질 용액을 생산하기 위하여, 대마 단백질 수용액의 pH를 약 1.5 내지 약 4.4, 바람직하게는 약 2 내지 약 4 로 조정하며,
(e) 산성화한 단백질 용액이 깨끗하지 않으면 선택적으로 정제하고,
(f) 상기 (b) 내지 (e) 단계로부터 교호로, 선택적으로 혼합된 대마 단백질 수용액 및 잔류 대마 단백질원의 pH를 약 1.5 내지 약 4.4, 바람직하게는 약 2 내지 약 4 로 조정하고, 그 후 잔류 대마 단백질원으로부터 바람직하게는 청정한 산성화한 대마 단백질 용액을 분리하고,
(g) 선택적인 박막기술을 이용함으로써 이온강도를 실질적으로 일정하게 유지하면서 대마 단백질 수용액을 농축하고,
(h) 선택적으로 그 농축된 대마 단백질 용액을 투석여과하고, 또한
(i) 선택적으로 그 농축 및 투석여과된 대마 단백질 용액을 건조하는 단계를 포함하는 대마 단백질 제품의 제조방법이 제공된다.
바람직하게는 대마 단백질 제품은 적어도 약 90 wt%, 바람직하게는 적어도 약 100 wt% (N×6.25)d.b. 의 단백질 함량을 가지는 분리단백이다.
본 발명은 또한, 적어도 60 wt%, 바람직하게는 적어도 약 90 wt%, 보다 바람직하게는 적어도 약 100 wt% (N×6.25)d.b. 의 단백질 함량을 가지며, 약 4.4 미만의 산성 pH 값에서 수용성이며, 단백질의 침전을 일으키지 않고, 소프트 드링크 및 스포츠 음료, 특히 이들 음료의 분말화된 형태를 포함하여 수용성 시스템의 단백질 강화에 사용되는 신규한 대마 단백질 제품을 제공한다. 대마 단백질 제품은 피틴산의 함량이 중량비로 약 1.5 % 미만, 바람직하게는 약 0.5 %로 낮다. 제품에 있어서의 대마 단백질은 가수분해되지 않는다.
따라서, 본 발명의 다른 실시형태에 있어서는, 적어도 약 60 wt%의 단백질 함량을 가지는 대마 단백질 제품, 바람직하게는 적어도 약 90 wt% (N×6.25)d.b., 보다 바람직하게는 적어도 약 100 wt% (N×6.25)d.b.의 함량을 가지며, 약 4.4 미만, 바람직하게는 약 1.5 내지 약 4.4 의 pH에서 수용성 용매 내에 실질적으로 완전히 용해되는 분리 대마단백이 제공된다.
본 발명에서 제공되는 대마 단백질 제품은 그의 수용액으로 제공되며, 바람직하게는 산성 pH 값, 일반적으로 약 4.4 미만, 바람직하게는 약 1.5 내지 약 4.4 의 pH에서 고도의 정화도(clarity)를 가진다.
본 발명의 신규한 대마 단백질 제품은 물에 용해함으로써 수용성 소프트 드링크 또는 스포츠 음료의 형성을 위하여 강화용 드링크와 혼합될 수 있다. 그러한 혼합물은 강화된 음료일 수 있다. 신규한 대마 단백질 제품은 약 6 내지 약 8의 중성에 가까운 pH 를 가지는 적용분야에서 사용될 수 있다.
본 발명은 분리 대마단백의 제조에 대해서 언급하고 있는 반면, 낮은 순도의 대마 단백질 제품이 분리 대마단백에 가까운 특성을 가지고 제공될 수 있다. 그러한 낮은 순도의 제품은 중량비로 약 60% (N×6.25)d.b.의 단백질 농도를 가질 수 있다.
본 발명의 다른 실시형태에 있어서는, 본 명세서에서 마련된 대마 단백질 제품의 산성 수용액이 제공된다. 산성 수용액은 음료일 수 있어서, 대마 단백질 제품이 완전히 용해되고 투명한 맑은 음료일 수 있고, 또는 산성 수용액은 대마 단백질 제품이 음료수 내에서 탁함에 영향을 주거나 또는 주지 않는 불투명 음료일 수 있다. 산성 수용액은 양호한 풍미를 가지며, 비공식적인 시음자 테스트에서는 통상의 대마 단백질 제품의 수용액보다 자극적이지 않은 맛을 나타내었다.
본 명세서의 방법에 따라 제조된 대마 단백질 제품은 산성 매체의 단백질 강화 뿐아니라 단백질 제품의 종래의 다양한 적용분야 내에서도 사용될 수 있어서, 그에 한정되는 것은 아니지만 가공 음식 및 음료의 단백질 강화, 오일의 유화, 가스봉입 제품에서의 발포제 및 빵 제품에서의 바디 형성제(body former)로서 사용될 수 있다. 부가적으로, 대마 단백질 제품은 단백질 섬유 내에 형성될 수 있어서, 육류 유사품 및 달걀흰자가 결합제로 사용되는 음식제품에서 달걀 흰자의 대용품으로서 또는 증량제로서 사용될 수 있다. 대마 단백질 제품은 영양보조제품으로서 사용될 수 있다. 대마 단백질 제품은 또한 유제품 유사제품 또는 유제품 대체품이나 유제품/대마 블렌드인 제품에 사용될 수 있다. 대마 단백질 제품의 기타 용도로서는, 반려동물의 사료, 동물 사료 및 공업 및 화장품 분야 및 개인의 케어제품을 들 수 있다.
대마 단백질 제품을 마련하는 방법의 초기 단계는 대마 단백질원으로부터의 대마 단백질을 용융하는 것을 포함한다. 대마 단백질원은 대마씨이거나 또는 대마씨의 처리에서 유래된 어떠한 대마 제품 또는 부산물일 수 있으며, 반드시 한정되는 것은 아니지만 대마 밀(meal), 대마 밀 및 탈각된 대마씨를 체로 걸름으로써 만들어지는 대마 단백질등이다. 대마 단백질원은 전지(全脂), 부분탈지 또는 완전탈지된 형태로 이용될 수 있다. 대마 단백질원은 상당량의 지방을 함유하는 경우, 일반적으로는 프로세스의 사이에 기름제거공정이 필요하다. 대마 단백질원으로부터 회수된 대마 단백질은 대마에서 천연으로 생성되는 단백질일 수도 있고 또는 그 단백질성 재료는 유전자 조작에 의하여 개변되어 있기는 하지만 천연 단백질에 특징적인 소수성 특성 및 극성특성을 가지는 단백질일 수 있다.
대마 단백질 원료로부터의 단백질 가용화는, 염화칼슘 용액을 이용하여 가장 편리하게 행해진다. 단, 다른 칼슘염의 용액을 사용할 수 있다. 또한, 마그네슘염 등, 다른 알칼리 토류금속 화합물을 이용하여도 좋다. 더욱이, 대마 단백질원으로부터의 대마 단백질의 추출은, 칼슘염 용액을 염화나트륨 등의 다른 염용액와 조합시켜 사용하여 행할 수도 있다. 더욱이, 대마 단백질원으로부터의 대마 단백질의 추출은, 물 또는 염화 나트륨 등의 염의 용액을 이용하고, 그 후, 추출공정에서 발생하는 대마 단백질 수용액에 칼슘염을 첨가하는 것으로 행할 수도 있다. 칼슘염의 첨가시에 형성된 침전물은 후속의 처리 전에 제거된다.
칼슘염 용액의 농도가 증가함에 따라서, 대마 단백질원으로부터의 단백질의 가용화의 정도는, 처음에는 최대치가 달성될 때까지 증가한다. 염농도의 그 후의 증가는, 가용화되는 총 단백질을 증가시키지 않는다. 최대의 단백질 가용화를 일으키는 칼슘염 용액의 농도는, 관여하는 염에 의존하여 변한다. 통상, 약 1.0M 미만의 농도치, 보다 바람직하게는 약 0.10M 내지 0.15M의 값을 사용하는 것이 바람직하다.
배치(batch) 프로세스에서는, 단백질의 염가용화는, 약 1℃ 내지 약 100℃, 바람직하게는 약 15℃ 내지 약 65℃, 보다 바람직하게는 약 20℃ 내지 약 35℃의 온도에서 행해지고, 바람직하게는, 가용화시간을 감소시키기 위하여 교반을 수반하고, 가용화시간은 통상, 약 1 부터 약 60분이다. 전체로서 높은 제품수율을 얻기 위하여, 대마 단백질원으로부터 실질적으로 실시가 가능한한 많은 단백질을 추출하도록 가용화를 행하는 것이 바람직하다.
연속 프로세스에서는, 대마 단백질원으로부터의 대마 단백질의 추출은, 대마 단백질원으로부터의 대마 단백질의 연속적인 추출의 실시와 합치하는 임의의 양식으로 실시된다. 한 실시형태에서는, 대마 단백질원이 연속적으로 칼슘염 용액과 혼합되고, 그 혼합물이, 본 명세서에 기재된 파라미터에 따라서 소망의 추출을 행하기에 충분한 체류시간을 위하여, 길이를 가지는 파이프 혹은 도관을 통하여 운반된다. 이러한 연속적 수순에서는, 염가용화 공정은, 바람직하게는 대마 단백질원으로부터 실질적으로 실시가능한한 많은 단백질을 추출하기 위한 가용화를 행하기 때문에, 약 1 내지 약 60분의 시간에서 행해진다. 연속적 수순에서의 가용화는, 약 1℃와 약 100℃의 사이, 바람직하게는 약 15℃ 내지 약 65℃, 보다 바람직하게는 약 20℃ 내지 약 35℃의 온도에서 행해진다.
추출은, 일반적으로는, 약 4.5 내지 약 11, 바람직하게는 약 5로부터 7의 pH 에서 행해진다. 추출시스템(대마 단백질원 및 칼슘염 용액)의 pH 는, 임의의 바람직한 식품등급의 산, 통상은 염산 또는 인산, 혹은 식품등급의 알칼리, 통상의 수산화나트륨을 필요에 따라서 사용함으로써, 추출공정에 있어서의 사용을 위하여 약 4.5 로부터 11의 범위 내의 임의의 소망치로 조정할 수 있다.
가용화 공정의 사이의 칼슘염 용액에 있어서의 대마 단백질원의 농도는, 넓게 변화될 수 있다. 전형적인 농도치는, 약 5 내지 약 15%w/v 이다.
염수용액을 이용한 단백질 추출공정은, 대마 단백질원 중에 존재할 수 있는 지방을 가용화한다고 하는 부가적인 효과를 가지고, 다음으로, 이것에 의하여 지방이 수상(水相)내에 존재하는 것으로 된다.
추출공정으로부터 얻어지는 단백질 용액은, 일반적으로, 약 5 내지 약 50g/L, 바람직하게는 약 10 내지 약 50g/L 의 단백질농도를 가진다.
칼슘염 수용액은 산화방지제를 포함할 수 있다. 산화방지제는, 아황산나트륨 또는 아스코르빈산 등의 임의의 적절한 산화방지제라도 좋다. 사용하는 산화방지제의 양은, 용액의 약 0.01 내지 약 1 중량% 까지 변화할 수 있고, 바람직하게는 약 0.05 중량% 이다. 산화방지제는, 단백질 용액 중의 임의의 페놀류의 산화를 억제하는 역할을 한다.
추출단계에서 얻어진 액상은, 다음으로, 잔류 대마 단백질원으로부터 분리하지만, 이것은 임의의 적절한 방식으로, 예를 들면 잔류 대마단백질원을 제거하기 위하여, 디칸터(decanter)형 원심분리기 또는 임의의 적절한 여과기를 이용하고, 그 후 디스크 원심분리기 및/또는 여과에 의하여 행한다. 분리공정은, 일반적으로, 임의선택으로 희석하고, pH 조정한, 대마 단백질 용액과 잔류 대마 단백질 재료와의 혼합물의 온도에서 행해지지만, 약 1°내지 약 100℃, 바람직하게는 약 15°내지 약 65℃, 보다 바람직하게는 약 20°내지 약 35℃의 범위 내의 온도에서 행해진다. 선택적으로, 이하에서 기술되는 임의의 희석 및 산성화 단계가 대마 단백질 수용액 및 잔류 대마 단백질원에 대하여 가해지고, 상술한 분리단계에 의한 잔류 단백질원 재료의 제거가 행해질 수 있다. 분리한 잔류 대마 단백질원은 새로운 칼슘염 용액 및 이하에서 기술되는 바와 같은 추후의 처리를 위하여 초기 단백질용액과 혼합되어 산출된 단백질용액으로 재처리된다. 선택적으로, 분리된 잔류 대마 단백질원은 종래의 등전침전법이나 잔류 단백질을 회수하는 임의의 다른 적절한 수순으로 처리될 수 있다.
대마 단백질 수용액은, 추후의 처리에서 형성될 수 있는 거품의 양을 감소시키기 위하여 어떠한 적절한 식품등급의 비실리콘계 소포제로 처리될 수 있다. 채택되는 소포제의 양은 일반적으로 약 0.0003%w/v 이상이다. 선택적으로 기술된 양의 소포제는 추출단계에서 첨가될 수도 있다.
본 출원인에게 양도되고, 그의 개시가 참조에 의하여 본 명세서에 포함되는 미국특허 제 5,844,086 호 및 제 6,005,076 호에 기재되어 있는 바와 같이, 대마 단백질원이 상당량의 지방을 함유하는 경우, 계속하여, 상기 문헌에 기재되는 탈지공정을, 단백질 수용액에 대하여 행할 수 있다. 또는 분리된 단백질 수용액의 탈지를, 임의의 다른 적절한 수순에 의하여 달성할 수 있다.
산성화한 대마 단백질 수용액은, 분말 활성탄 또는 과립 활성탄 등의 흡착제로 처리하여, 색상 및/또는 냄새 화합물을 제거할 수 있다. 이러한 흡착처리는, 임의의 바람직한 조건하에서, 일반적으로, 분리된 단백질 수용액의 주위 온도에서 행할 수 있다. 분말 활성탄에 대해서는, 약 0.025% 내지 약 5%w/v, 바람직하게는 약 0.05% 내지 약 2%w/v 의 양이 사용된다. 흡착제는, 여과 등의 임의의 바람직한 수단에 의하여, 대마용액으로부터 제거될 수 있다.
얻어진 대마 단백질 수용액은 대마 단백질 수용액의 도전율을 일반적으로 105mS 이하, 바람직하게는 약 4 내지 약 21mS 로 감소시키기 위하여 수성 희석액의 약 0.1 내지 약 10 용량, 바람직하게는 약 0.5 내지 약 2 용량으로 희석될 수 있다. 그러한 희석은 일반적으로 물을 사용하지만, 최대 약 3mS 의 도전율을 가지는 염화나트륨 또는 염화칼슘 등의 희석염용액을 사용하여도 좋다.
대마 단백질 용액이 잔류 대마 단백질원과 혼합되는 희석제는, 일반적으로 대마 단백질 용액과 같은 온도를 가지지만, 희석제는 약 1°내지 약 100℃, 바람직하게는 약 15°내지 약 65℃, 보다 바람직하게는 약 20°내지 약 35℃ 의 온도를 가지는 것이 가능하다.
임의선택으로 희석된, 대마 단백질 용액과 잔류 대마 단백질원의 혼합물을, 계속하여, 임의의 적절한 식품등급의 산을 첨가하여, 약 1.5 내지 약 4.4, 바람직하게는 약 2 내지 4 의 값으로 pH 조정한다. 산성화된 혼합물은, 일반적으로 희석된 혼합물에 대하여 약 110mS 미만, 일반적으로 희석되어 있지 않은 혼합물에 대하여 약 115mS 미만, 양쪽의 경우에 있어서 바람직하게는 약 4 내지 26mS 의 도전율을 가진다.
상술한 바와 같이, 잔류 대마 단백질원의 조기 분리에 대한 대안으로, 대마 단백질 수용액 및 잔류 대마 단백질원 재료는 임의선택 희석 및 산성화되고, 그 후 산성화한 대마 단백질 수용액이 상술한 적절한 기술에 의하여 잔류 대마 단백질원 재료로 부터 정제 및 분리된다. 산성화한 대마 단백질 수용액은 임의선택으로 탈지될 수 있고 흡착제로 임의로 처리될 수 있으며, 상술한 바와 같이 소포제로 처리될 수 있다.
만약 임의선택 희석 및 산성화한 대마 단백질 수용액이 투명하지 않으면 여과 또는 원심분리와 같은 공지의 수순으로 정제될 수 있다.
만약 적절한 순도로 얻어지면, 산성화한 대마 단백질 수용액은 직접 건조되어 대마 단백질 제품을 제공할 수 있다. 감소된 불순물 농도 및 감소된 염농도를 가지는, 분리 대마단백과 같은 대마 단백질 제품을 제공하기 위해서는, 산성화한 대마 단백질 수용액은 건조하기 전에 이하에서와 같이 처리될 수 있다.
산성화된 대마 단백질 수용액은 그의 이온강도를 실질적으로 일정하게 유지하면서 그의 단백질 농도를 증가시키도록 농축될 수 있다. 일반적으로 그러한 농축은 약 50 내지 약 300g/L, 바람직하게는 약 100 내지 약 200g/L 의 단백질 농도를 가지는 농축된 대마 단백질 용액을 제공하도록 수행된다.
농축공정은, 배치 조작 또는 연속조작에 합치되는 임의의 적절한 방식으로 행할 수 있으며, 예를 들면, 한외여과 또는 투석여과 등의, 막을 이용하는 임의의 적절한 선택적 막기술을 채용함으로써 행할 수 있다. 상기 막은, 예를 들면 중공사막 또는 스파이어럴막(spiral-wound membranes)으로서, 다른 막재료 및 막의 구성을 고려하여 약 1,000 내지 약 1,000,000 달톤(Daltons), 바람직하게는 약 1,000 내지 약 100,000 달톤 등의 적절한 분획분자량을 가지며, 연속조작에 대해서는 단백질 수용액이 막을 통과할 때 소망하는 정도의 농축을 가능하게 하도록 수치가 결정된다.
주지된 바와 같이, 한외여과 및 유사한 선택적 막기술에 의하여, 저분자량종이 막을 통과하는 것이 가능하게 되는 한편, 고분자량종의 통과는 방해된다. 저분자량종에는, 식품등급의 염의 이온종만이 아니고, 탄수화물, 안료, 저분자량 단백질, 및 트립신 저해제 등의 원료로부터 추출된 저분자량 재료도 포함된다. 막의 분획분자량은 통상 용액중의 상당한 비율의 단백질의 유지를 확실하게 하는 한편, 오염물질의 통과는 가능하도록 다양한 막재료 및 막의 구성을 고려하여 선택된다.
농축된 대마 단백질 용액은 다음으로, 물 또는 희석 식염수를 이용하여 투석여과 공정에 처해질 수 있다. 투석여과 용액은, 그 천연의 pH, 또는 투석여과되는 단백질 용액의 pH 와 같은 pH, 또는 이들 사이의 임의의 pH 값으로 할 수 있다. 이와 같은 투석여과는, 약 1 내지 40 용량의 투석여과용액, 바람직하게는 약 2 내지 약 25 용량의 투석여과용액을 이용하여 행할 수 있다. 투석여과 조작에서는, 투과액과 함께 막을 통과하는 것에 의하여, 어느 정도 양의 오염물질이 대마 단백질 수용액으로부터 제거된다. 이는 단백질 수용액을 정제하고 그의 점도를 낮출 수 있다. 투석여과 공정은 의미있는 양의 오염물질 또는 시인가능한 색이 여과액 내에 존재하지 않을 때까지, 또는 잔류액(retentate)이 충분히 정제되고, 건조된 경우에 적어도 약 90 wt%(N×6.25)d.b. 의 단백질 함량을 가지는 분리 대마단백을 얻을 때까지 행할 수 있다. 이러한 투석여과는, 농축공정과 같은 막을 이용하여 행할 수 있다. 예를 들어, 다양한 막재료 및 막의 구성을 고려하여 약 1,000 내지 약 1,000,000 달톤, 바람직하게는 약 1,000 내지 100,000 달톤 범위의 분획분자량을 갖는 막을 이용할 수 있다.
또는 투석여과공정은, 농축전에 산성화 단백질 수용액에 적용할 수 있고, 또는 부분적으로 농축된 산성화 단백질 수용액에 적용할 수 있다. 투석여과는 또한, 농축과정의 사이에 복수의 포인트에 적용할 수 있다. 투석여과가 농축 전에 적용되거나, 또는 부분적으로 농축된 용액에 적용되는 경우, 얻어진 투석여과된 용액을, 계속하여 더 농축해도 좋다. 단백질 용액을 농축하면서 복수 회, 투석여과함으로써 달성되는 점도 저하에 의하여, 보다 높은 충분히 농축된 단백질 최종농도를 달성할 수 있게 된다. 이것에 의하여 건조해야할 재료의 용량이 감소한다.
농축공정 및 투석여과 공정은, 여기에서 그 후 회수되는 대마 단백질 제품이 약 90wt% 미만의 단백질 (N×6.25)d.b., 예를 들면 적어도 약 60wt% 의 단백질(N×6.25)d.b.을 포함하는 방식으로 행해질 수 있다. 대마 단백질 수용액을 부분적으로 농축하는 것 및/또는 부분적으로 여과함으로써, 오염물질을 부분적으로만 제거할 수 있다. 이 단백질 용액은, 다음에, 건조되고, 저순도의 대마 단백질 제품을 얻을 수 있다. 이 대마 단백질 제품은 여전히 높은 가용성을 가지며 산성조건하에서 깨끗한 단백질 용액을 생성할 수 있다.
산화방지제가, 투석여과 공정의 적어도 일부의 사이, 투석여과 매체중에 존재할 수 있다. 산화방지제는, 아황산나트륨 또는 아스코르빈산 등의 임의의 적절한 산화방지제라도 좋다. 투석여과 매체중에서 사용하는 산화방지제의 양은, 사용하는 재료에 의존하고, 약 0.01 내지 약 1 wt% 까지 변화할 수 있으며, 바람직하게는 약 0.05wt% 로 할 수 있다. 산화방지제는, 대마 단백질 용액중에 존재하는 임의의 페놀류의 산화를 억제하는 역할을 한다.
농축공정 및 임의선택의 투석여과공정은, 임의의 적합한 온도, 일반적으로 약 2°내지 약 65℃, 바람직하게는 약 20°내지 약 35℃에서, 소망의 정도의 농축 및 투석여과를 행하기 위한 시간에 걸쳐서 행할 수 있다. 온도 및 사용되는 다른 조건은 어느 정도, 막처리를 행하기 위하여 이용되는 막기기, 용액의 소망의 단백질 농도, 및 투과액으로의 오염물질의 제거의 효율에 의존한다.
농축되고, 임의선택으로 투석여과된 단백질 용액은, 필요에 따라서, 미국특허 제 5,844,086 호 및 미국특허 제 6,005,076 호에 기재되어 있는 바와 같이, 탈지조작에 붙일 수 있다. 혹은, 농축되고, 임의선택으로 투석여과된 단백질 용액의 탈지는, 임의의 다른 바람직한 수순에 의하여 달성할 수 있다.
농축되고, 임의선택으로 투석여과된 단백질 용액은, 분말 활성탄 또는 과립 활성탄 등의 흡착제로 처리하고, 색 및/또는 냄새 화합물을 제거할 수 있다. 이러한 흡착처리는, 임의의 사정이 좋은 조건 하에서, 일반적으로는, 농축된 단백질 용액의 주위온도에서 행할 수 있다. 분말활성탄에서는, 약 0.025% 로부터 약 5%w/v, 바람직하게는 약 0.05%로부터 약 2%w/v 의 양이 이용된다. 흡착제는, 여과 등의 임의의 바람직한 수단에 의하여, 대마 단백질 용액으로부터 제거할 수 있다.
농축되고, 임의선택으로 투석여과된 대마 단백질 수용액은, 분무건조 또는 동결건조 등의 임의의 적합한 기술에 의하여 건조할 수 있다. 건조 전에, 대마 단백질 용액에 저온살균공정을 실시하여도 좋다. 이러한 저온살균은, 임의의 원하는 저온살균 조건하에서 행할 수 있다. 일반적으로는, 농축되고, 임의선택으로 투석여과된 대마 단백질 용액은, 약 55°내지 약 70℃, 바람직하게는 약 60°내지 약 65℃의 온도까지, 약 30초간으로부터 약 60분간, 바람직하게는 약 10분간으로부터 약 15분간 가열된다. 저온살균된 농축 대마 단백질 용액은, 다음으로 건조를 위하여, 바람직하게는 약 25°내지 약 40℃의 온도까지, 냉각할 수 있다.
건조 대마 단백질 제품은 약 60wt% (N×6.25)d.b.를 넘는 단백질 함량을 가진다. 바람직하게는, 건조 대마 단백질 제품은, 약 90wt% (N×6.25)d.b.를 넘는, 바람직하게는 적어도 약 100wt% (N×6.25)d.b.의 고단백질 함량을 가지는 분리단백이다.
본 명세서에서 제조되는 대마 단백질 제품은, 산성의 수성환경에 가용성이고, 이것에 의하여 해당 제품이, 단백질 강화를 위하여 음료, 산성 및 무탄산 음료의 양쪽에 넣는 것에 이상적으로 된다. 그러한 음료는, 약 2.5 내지 약 5의 범위에 걸치는, 산성 pH 값의 넓은 범위를 가진다. 본 명세서에서 제공되는 대마 단백질 제품은, 그러한 음료에 단백질 강화를 제공하기 위하여, 임의의 바람직한 양, 예를 들면 1인분당 적어도 약 5g 의 대마 단백질로 그러한 음료에 첨가할 수 있다. 첨가된 대마 단백질 제품은, 음료에 용해하고, 열처리의 후에도 용해한 채이다. 대마 단백질 제품은, 물로의 용해에 의한 음료의 재조제의 전에, 건조음료와 블랜드할 수 있다. 본 발명의 조성물의 음료중에 용해한 상태라고 하는 능력에, 음료중에 존재하는 성분이 악영향을 미칠 수 있는 경우, 경우에 따라서, 본 발명의 조성물을 허용하기 위하여 음료의 통상의 배합을 개변하는 것이 필요하다.
실시예
실시예 1
본 실시예는 분리 대마단백의 제조를 예시한다.
22.5kg 의 빻은 대마 압착 케이크를 25.8℃에서 0.15M CaCl2 150L 와 혼합하여 30분간 교반함으로써 단백질 수용액을 얻었다. 잔류하는 빻은 대마 압착 케이크가 제거되고 얻어진 단백질 용액은 원심분리 및 여과에 의하여 청정화되고 중량비로 1.31% 의 단백질 함량을 가지는 여과액을 얻었다.
여과액은 역삼투 정제수로 희석되고 동일한 용량의 물로 희석된 HCl 로 샘플의 pH 를 2.68로 낮추었다. 희석 및 산성화된 단백질 용액은 0.88 wt% 의 단백질 함량을 가졌다.
희석 및 산성화된 단백질 용액은 100,000 달톤의 분획분자량을 가지며 약 30℃의 온도에서 운용되는 폴리에스테르술폰(PES)상에서 농축에 의하여 160L 로부터 7L 로 용량이 감소되었다. 10.51 wt% 의 단백질 함량을 가지며 농축 및 산성화된 단백질 용액은 약 30℃에서 수행된 투석여과 작업에서 35L 의 역삼투 정제수로 투석여과되었다. 얻어진 7.38kg 의 투석여과된 단백질 용액은 9.65 wt%의 단백질 함량을 가졌으며 추후처리로 여과 및 산성화된 단백질 용액의 50.4 wt% 의 수율을 나타내었다. 단백질 용액은 건조되고 108.31 wt% (N×6.25)d.b.의 단백질 함량을 가지는 제품으로 생성되었다. 이 제품을 H001-H24-11A H701 로 명명되었다.
실시예 2
이 실시예는 실시예 1의 방법에 의하여 제조된 분리 대마단백 및 상용 대마단백 농축액 Hemp Pro 70 (마니토바 하베스트, 위니펙, MB)의 피틴산 농도의 평가를 포함하며, 그의 단백질 농도는 Leco 질소 측정기를 사용한 연소분석에 의하여 65.76%d.b.로 결정되었다.
피틴산 농도는 Latta 및 Eskin 방법(J.Agric. Food Chem., 28:1313-1315)을 사용하여 결정되었다.
H001-H24-11A H701 의 피틴산 함량은 0.22%d.b. 였고 Hemp Pro 70의 피틴산 함량은 1.43%d.b. 였다.
실시예 3
본 실시예는 실시예 1의 방법에 의하여 제조된 분리 대마단백 및 상용 대마단백 농축액 Hemp Pro 70의 용액 및 분말상에서의 색상을 나타낸다.
H001-H24-11A H701 및 Hemp Pro 70의 용액이 충분한 단백질 분말을 용해함으로써 준비되어 RO 정제수 15 ml 내에 0.48 g 의 단백질을 공급하였다. 용액의 pH 가 pH미터로 측정되고 색상 및 정화도가 투과모드로 운용되는 HunterLab ColorQuest XE 측정기를 사용하여 평가되었다. 결과는 이하의 표 1에 나타내었다:
| 샘플 | pH | L* | a* | b* | 헤이즈(Haze) |
| H001-H24-11A H701 Hemp Pro 70 |
3.24 7.45 |
97.69 1.53 |
-0.21 3.64 |
10.54 2.42 |
67.5 96.5 |
표 1로부터 알 수 있는 바와 같이, H001-H24-11A H701의 용액은 색상이 밝고 투명하였다. Hemp Pro 70의 용액은 어둡고, 보다 붉은 색이었고, 덜 노란 색이었으며 H001-H24-11A H701의 용액에서보다 더 높은 헤이즈 레벨을 가졌다.
건조 분말의 색상을 반사도 모드에서 운용되는 HunterLab ColorQuest XE 측정기를 사용하여 평가되었다. 결과는 이하의 표 2에 나타내었다:
| 샘플 | L* | a* | b* |
| H001-H24-11A H701 Hemp Pro 70 |
85.45 52.29 |
0.90 2.78 |
9.58 24.44 |
표 2로부터 알 수 있는 바와 같이, H001-H24-11A H701 분말이 Hemp Pro 70에비해서 더 밝은 색이고, 덜 붉은 색이고 덜 노란 색이었다.
실시예 4
이 실시예는 실시예 1의 방법에 의하여 제조된 분리 대마단백 및, 수용성으로 선전된 제품인 상용 대마단백 농축액 Hemp Pro 70 의 물에 대한 용해도의 평가를 포함한다. 용해도는 단백질 용해도(단백질법이라고 칭해지는, Morr 등, J.Food Sci. 50:1715-1718의 수순의 수정판)과 전제품 용해도(팰릿법이라고 칭해짐)에 근거하여 시험되었다.
단백질 0.5g 을 공급하기에 충분한 단백질 분말을 비이커에 칭량하고, 다음으로 소량의 역삼투(RO) 정제수를 첨가하고, 그 혼합물을 부드러운 페이스트가 형성될 때까지 교반하였다. 다음으로, 그 용량이 약 45ml 로 되도록, 추가의 물을 가하였다. 다음으로, 비이커의 내용물을 천천히 마그네틱 교반기를 이용하여 60분간 교반하였다. pH 는, 단백질을 분산한 후 바로 측정하고, 희석 NaOH 또는 HCl로, 적절한 레벨(2,3,4,5,6 또는 7)로 조정하였다. 또한, 한 개의 샘플을, 천연의 pH로 조제하였다. pH 를 조정한 샘플에 대해서는, 60분간 교반시에 정기적으로, pH를 측정하고, 수정하였다. 60분의 교반 후, 샘플을, RO 수를 보충하여 총용적 50ml 로 하고, 1%w/v 단백질 분산액을 얻었다. 분산액의 단백질 함량은 Leco 질소측정기를 이용하여 연소분석하였다. 분산액의 알리코트(20ml) 를, 계속하여 100℃의 오븐중에서 한번 건조하고, 그 후 데시케이터 중에서 냉각한 미리 칭량한 원심분리관으로 옮기고, 관에 캡을 씌웠다. 샘플을, 10분간 7,800 g 으로 원심분리하고, 그것에 의하여 불용성 재료를 침강시켜서, 청정한 상청액을 얻었다. 상청액의 단백질 함량을 연소분석에 의하여 측정하고, 계속하여 상청액 및 관의 뚜껑을 벗겨내고, 팰릿재료를 100℃로 측정한 오븐에서 한번 건조시켰다. 다음날 아침, 관을 데시케이터로 옮기고, 냉각하였다. 건조 팰릿재료의 중량을 기록하였다. 초기의 단백질 분말의 건조중량을, 사용한 분말의 중량으로 팩터((100-분말의 함수율(%))/100)을 곱함으로써 산출하였다. 다음에, 제품의 용해도를, 2 종류의 다른 방법으로 계산하였다.
1) 용해도(단백질법)(%) = (상청액 중의 단백질%/초기분산액 중의 단백질%)× 100
2) 용해도 (팰릿법)(%) = (1-(건조불용성 팰릿재료의 중량/((분산액 20ml의 중량/분산액 50ml의 중량) × 건조 단백질 분말의 초기중량))) × 100.
100% 보다 큰 것으로 계산된 값은 100% 로 표시하였다.
용해도의 결과는 이하의 표 3에 나타내었다.
H001-H24-11A H701의 샘플에 대한 천연 pH 는 3.31 이었다. Hemp Pro 70 의 샘플에 대한 천연 pH 는 7.69 였다.
| 용해도(%) | |||||||
| 제품 | pH 2 | pH 3 | pH 4 | pH 5 | pH 6 | pH 7 | 천연pH |
| H001-H24-11A H701 | 94.4 | 100 | 99.1 | 81.7 | 67.0 | 63.7 | 99.1 |
| Hemp Pro 70 | 53.2 | 47.7 | 12.7 | 10.3 | 10.4 | 15.1 | 16.2 |
| 용해도(%) | |||||||
| 제품 | pH 2 | pH 3 | pH 4 | pH 5 | pH 6 | pH 7 | 천연pH |
| H001-H24-11A H701 | 99.7 | 99.2 | 98.5 | 77.6 | 66.5 | 59.3 | 98.2 |
| Hemp Pro 70 | 50.0 | 46.0 | 27.2 | 24.3 | 25.6 | 26.9 | 30.3 |
표 3 및 4에서 볼 수 있는 바와 같이, H001-H24-11A H701 의 pH 범위 2-4에서 많이 가용성이 있었다. Hemp Pro 70 은 시험된 모든 pH 값들에서 부분적으로 가용성이 있었다.
실시예 5
이 실시예는 실시예 1의 방법에 의하여 제조된 분리 대마단백 및 상용 대마단백 농축액 Hemp Pro 70 의 물 내에서의 정화도의 평가를 포함한다.
실시예 4에 기재된 바와 같이 마련된 1%w/v 단백질 용액의 정화도를, 600nm 에서의 흡광도(물 블랭크)를 측정함으로써 평가하였다. 보다 낮은 흡광도 스코어는 보다 높은 정화도를 나타낸다. 투과모드에서의 HunterLab ColorQuest XE 측정기에 의한 샘플의 분석으로, 퍼센트의 노이즈 측정치, 즉 정화도의 다른 척도를 얻었다.
정화도의 결과는 이하의 표 5 및 6에 기재되어 있다.
| A600 | |||||||
| 제품 | pH 2 | pH 3 | pH 4 | pH 5 | pH 6 | pH 7 | 천연pH |
| H001-H24-11A H701 | 0.011 | 0.043 | 0.110 | 1.542 | 2.477 | 2.567 | 0.058 |
| Hemp Pro 70 | 2.644 | 2.744 | 3.153 | 3.063 | 3.031 | 3.023 | 3.130 |
| HunterLab 헤이즈 측정치(%) | |||||||
| 제품 | pH 2 | pH 3 | pH 4 | pH 5 | pH 6 | pH 7 | 천연pH |
| H001-H24-11A H701 | 0.0 | 11.2 | 30.0 | 94.8 | 95.5 | 95.5 | 16.5 |
| Hemp Pro 70 | 96.2 | 96.0 | 97.2 | 99.0 | 97.7 | 96.7 | 96.3 |
표 5 및 6의 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, H001-H24-11A H701에 대한 가장 큰 용액 정화도는 낮은 pH 값에서 관찰되었다. Hemp Pro 70 은 모든 시험된 pH 값에서 매우 탁한 용액을 제공하였다.
실시예 6
이 실시예는 제 1 실시예의 방법에 의하여 제조된 분리 대마단백 및 상용 대마단백 농축액 Hemp Pro 70 의 소프트 드링크 및 스포츠 음료 내에서의 용해성의 평가를 포함한다. 용해도는 이들 음료에 pH 조절없이 첨가한 단백질에 대하여 측정하고, 이들 단백질 강화음료의 pH를 원래의 음료의 pH 로 조절한 것에 대하여 다시 측정하였다.
pH 조절없이 용해도를 평가할 때에는, 단백질 1g 을 공급하기에 충분한 양의 단백질 분말을 비이커에 칭량하고, 음료를 소량 첨가하고, 부드러운 페이스트가 형성될 때가지 교반하였다. 그 용량을 50ml가 되도록 추가의 음료를 가하고, 계속하여, 그 용액을 60분간 마그네틱 교반기로 천천히 교반하여, 2% 단백질w/v 분산액을 얻었다. 샘플의 단백질 함량을 LECO 질소측정기를 사용하여 연소분석하고 단백질을 포함하는 음료의 알리코트를 10분간 7,800g 으로 원심분리하여 상청액의 단백질 함량을 측정하였다.
용해도(%) = (상청액 중의 단백질%/초기 분산액 중의 단백질%) × 100
100% 보다 큰 것으로 계산된 값은 100% 로 표시하였다.
용해도가 pH 조절을 수반하는 경우를 평가함에 있어서는, 단백질을 포함하지 않은 소프트 드링크(스프라이트:Sprite)(3.59)와 스포츠 음료(오렌지 게토레이: Orange Gatorade)(3.29)의 pH 를 측정하였다. 단백질 1g 을 공급하기에 충분한 양의 단백질 분말을 비이커에 칭량하고, 소량의 음료를 가하고, 부드러운 페이스트가 형성될 때 가지 교반하였다. 그 용량이 약 45ml 로 되도록 추가의 음료를 가하고, 계속하여, 그 용액을 60분간 마그네틱 교반기로 천천히 교반하였다. 그 단백질 함유 음료의 pH 를, 단백질을 분산시킨 후 바로 측정하고, 필요에 따라서 HCl 또는 NaOH 를 이용하여, 원래의 무 단백질의 경우의 pH 로 조절하였다. 60분의 교반 시, 정기적으로 pH를 측정하고, 수정하였다. 60분의 교반 후, 각 용액의 총용량을, 추가 음료로 50ml 로 하고, 2% 단백질w/v 분산액을 얻었다. 이들 샘플의 단백질 함유량을 Leco 질소측정기로 연소분석하고, 계속하여 단백질 함유 음료의 알리코트를, 10분간 7,800g 으로 원심분리하여, 상청액의 단백질 함량을 측정하였다.
용해도(%) = (상청액 내의 단백질%/초기분산액 중의 단백질%)× 100
100% 보다 큰 것으로 계산된 값은 100% 로 표시하였다.
얻어진 결과는 표 7에 나타내었다.
| pH 조절없음 | pH 조절 | |||
| 제품 | 스프라이트내의 용해도(%) |
오렌지 게토레이 내의 용해도(%) |
스프라이트내의 용해도(%) |
오렌지 게토레이 내의 용해도(%) |
| H001-H24-11A H701 | 96.6 | 100 | 100 | 98.1 |
| Hemp Pro 70 | 8.7 | 9.0 | 32.3 | 39.5 |
H701 의 천연 pH는 음료의 천연 pH 와 유사하였고, 따라서 단백질의 첨가는 음료 pH 에 대하여 적은 효과만을 가지고 있었다. 도 7의 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, H001-H24-11A H701는 pH 조절이 있거나 없거나에 관계없이 Hemp Pro 70 단백질에 비하여 스프라이트 및 오렌지 게토레이 내에 높은 가용성을 가지고 있었다.
실시예 7
본 실시예는, 실시예 1 의 방법에 의하여 제조된 분리 대마단백의 소프트 드링크 및 스포츠 음료 내에서의 정화도의 평가를 포함한다.
실시예 6 에서의 소프트 드링크(스프라이트) 및 스포츠 음료 (오렌지 게토레이)에 마련된 2% w/v 단백질 분산액의 정화도를, 분광광도법(spectrophotometric) 및 실시예 5에서 기재된 HunterLab 법을 사용하여 평가하였다. 하지만, 이 경우에 분광광도법은 적절한 음료로 블랭크하였다.
얻어진 결과를 이하의 표 8 및 9에 기재하였다.
| pH 조절없음 | pH 조절 | |||
| 제품 | 스프라이트내의 A600(%) |
오렌지 게토레이 내의 A600(%) |
스프라이트내의 A600(%) |
오렌지 게토레이 내의 A600(%) |
| H001-H24-11A H701 | 0.189 | 0.352 | 0.530 | 0.444 |
| Hemp Pro 70 | nd | 3.596 | nd | 3.157 |
nd= 결정되지 않음
| pH 조절없음 | pH 조절 | |||
| 제품 | 스프라이트 내의 헤이즈(%) |
오렌지게토레이 내의 헤이즈(%) |
스프라이트 내의 헤이즈(%) |
오렌지게토레이 내의 헤이즈(%) |
| 단백질 없음 | 0.0 | 50.9 | ||
| H001-H24-11A H701 | 58.2 | 88.6 | 88.7 | 91.1 |
| Hemp Pro 70 | 98.4 | 99.3 | 96.4 | 95.9 |
표 8 및 9로부터 알수 있는 바와 같이, 우수한 단백질 용해도에도 불구하고, H001-H24-11A H701는 스프라이트 및 오렌지 게토레이의 헤이즈에 영향을 준다. 하지만, Hemp Pro 70으로 준비된 샘플은 H001-H24-11A H701으로 마련된 샘플에 비해서 더 어두웠다.
실시예 8
본 실시예는, 낮은 pH 에서 행해진, 실시예 1 에서 기술된 바에 따라 준비된 H701 의 맛과 상용 단백질 농축액 Hemp Pro 70 의 맛의 비교를 나타낸다.
단백질 5g 을 공급하기에 충분한 단백질 분말을 250ml 의 정제음료수 내에 용해함으로써 관능평가용 샘플들이 준비되었다. H701 의 용액의 pH 는 3.31 로 결정되었다. 식품 등급의 HCl 이 Hemp Pro 70 의 용액에 첨가되어 pH 를 7.73 에서 3.31로 낮추었다. 7명의 평가단의 비공식 패널에게 샘플들을 눈을 가리고 비교하고 어느쪽 샘플이 맛에 있어서 더 단조로운지 혹은 어떤 맛을 선호하는지 물었다.
7명 중의 6명은 H701 의 맛이 더 담백하다고 하였으며, 7명 중의 7명은 H701 의 맛을 선호하였다.
실시예 9
본 실시예는 천연 pH 에 가까운 상태에서 평가가 실행된, 실시예 1 에서 기술된 바에 따라 준비된 H701 의 맛과, 상용 단백질 농축액 Hemp Pro 70 의 맛의 비교를 나타낸다.
단백질 5g 을 공급하기에 충분한 단백질 분말을 250ml 의 정제음료수 내에 용해함으로써 관능평가용 샘플들이 준비되었다. Hemp Pro 70 의 용액의 pH 는 7.72 로 결정되었다. 식품 등급의 NaOH 가 H701의 용액에 첨가되어 pH 를 3.23 에서 7.72 로 상승시켰다. 7명의 평가단의 비공식 패널에게 샘플들을 눈을 가리고 비교하고 어느쪽 샘플이 맛에 있어서 더 단조로운지 혹은 어떤 맛을 선호하는지 물었다.
7명 중의 4명은 H701 의 맛이 더 담백하다고 하였고, 7명 중의 4명은 H701 의 맛을 선호하였다.
Claims (53)
- 건조중량 기준으로 적어도 약 60 wt%, 바람직하게는 90 wt%, (N×6.25)의 단백질 함량을 가지며:
(a) 대마 단백질원을 칼슘염 수용액으로 추출하고, 대마 단백질원으로부터의 대마 단백질의 가용화를 일으키고, 대마 단백질 수용액을 형성하고,
(b) 잔류 대마 단백질원으로부터 대마 단백질 수용액을 분리하며,
(c) 대마 단백질 수용액을 선택적으로 희석하고,
(d) 산성화한 대마 단백질 수용액을 생산하기 위하여, 대마 단백질 수용액의 pH를 약 1.5 내지 약 4.4 로 조정하며,
(e) 산성화한 단백질 용액이 깨끗하지 않으면 선택적으로 정제하고,
(f) 상기 (b) 내지 (e) 단계로부터 교호로, 선택적으로 혼합된 대마 단백질 수용액 및 잔류 대마 단백질원의 pH를 약 1.5 내지 약 4.4 로 조정하고, 그 후 잔류 대마 단백질원으로부터 바람직하게는 산성화한 대마 단백질 수용액을 분리하고,
(g) 선택적인 박막기술을 이용함으로써 이온강도를 실질적으로 일정하게 유지하면서 대마 단백질 수용액을 농축하고,
(h) 선택적으로 그 농축된 대마 단백질 용액을 투석여과하고, 또한
(i) 선택적으로 그 농축 및 투석여과된 대마 단백질 용액을 건조하는 단계를 포함하는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 칼슘염 수용액은 염화칼슘 수용액인 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 2 항에 있어서,
상기 염화칼슘 수용액은 약 1.0M 미만의 농도를 가지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 3 항에 있어서,
상기 농도는 약 0.10 내지 0.15M 인 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 추출단계(a)는 약 1° 내지 약 65℃, 바람직하게는 약 15° 내지 약 65℃, 보다 바람직하게는 약 20° 내지 약 35℃ 의 온도에서 수행되는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 칼슘염 수용액에 의한 추출은 약 4.5 내지 약 11의 pH 에서 도출되는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 6 항에 있어서,
상기 pH 는 약 5 내지 약 7 인 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 대마 단백질 수용액은 약 5 내지 약 50 g/L 의 단백질 농도를 가지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 8 항에 있어서,
상기 단백질 농도는 약 10 내지 약 50 g/L 인 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 칼슘염 수용액은 산화방지제를 포함하는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 분리단계(b) 후 상기 선택적 희석단계(c) 또는 상기 분리단계 이후의 단계(f)에서, 상기 대마 단백질 수용액은 대마 단백질 수용액으로부터 색깔 및/또는 향성분을 제거하기 위하여 흡착제로 처리되는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 대마 단백질 수용액은 약 105 mS 미만의 도전율로 0.1 내지 10 배의 수성 희석제로 (c) 또는 (f)단계에서 희석되는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 12 항에 있어서,
상기 대마 단백질 수용액은 약 4 내지 약 21 mS 의 대마 단백질 수용액의 도전율을 제공하도록 약 0.5 내지 약 2 배의 수성 희석제로 (c) 또는 (f)단계에서 희석되는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 12 항에 있어서,
상기 수성 희석제는 약 1° 내지 약 100℃ 의 온도를 가지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 14 항에 있어서,
상기 온도는 약 15° 내지 약 65℃ 인 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 15 항에 있어서,
상기 온도는 약 20° 내지 약 35℃ 인 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 산성화한 대마 단백질 용액은 희석되었을 때 대략 110 mS 미만, 또는 희석되지 않았을 때에는 115 mS 미만의 도전율을 가지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 17 항에 있어서,
상기 도전율은 약 4 내지 약 26 mS 인 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 대마 단백질 수용액의 pH 가 (d) 단계 또는 (f) 단계에서 약 2 내지 약 4의 pH 로 조정되는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
산성화한 대마 단백질 수용액을 (e) 단계에 처하는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 산성화한 대마 단백질 수용액이 건조되어 적어도 약 60 wt% (N×6.25)d.b. 의 단백질 함량을 가지는 대마 단백질 제품을 제공하는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 산성화한 대마 단백질 수용액이 (g) 단계에 처해져서 약 50 내지 약 300 g/L 의 단백질 농도를 가지는 산성화한 단백질 농축액을 제조하는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 22 항에 있어서,
상기 산성화한 단백질 농축액은 약 100 내지 약 200 g/L 의 단백질 농도를 가지느 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 22 항에 있어서,
상기 농축단계 (g)는 약 1,000 내지 약 1,000,000 달톤의 분획분자량을 가지는 막을 이용한 한외여과에 의하여 행해지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 24 항에 있어서,
상기 막은 약 1,000 내지 약 100,000 달톤의 분획분자량을 가지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 투석여과 단계(h)는 산성화된 대마 단백질 용액에 대하여 부분적 또는 완전 농축의 전 또는 후에, 물, 산성화된 물, 희석 식염수 또는 산성화된 희석 식염수를 이용하여 행해지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 26 항에 있어서,
상기 투석여과 단계(h)는 약 1 내지 약 40 용량의 투석여과용액을 이용하여 행해지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 27 항에 있어서,
상기 투석여과 단계(h)는 약 2 내지 약 25 용량의 투석여과용액을 이용하여 행해지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 26 항에 있어서,
상기 투석여과 단계(h)는 유의한 양의 오염물질 또는 시인가능한 색이 투과액 중에 존재하지 않을 때까지 행해지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 26 항에 있어서,
상기 투석여과 단계(h)는 건조시에 적어도 약 90 wt% (N×6.25)d.b. 의 단백질 함량을 가지는 분리 대마단백이 얻어지도록 잔류액(retentate)이 충분히 정제될 때까지 행해지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 26 항에 있어서,
상기 투석여과 단계 (h)는 약 1,000 내지 약 1,000,000 달톤의 분획분자량을 가지는 막을 이용하여 행해지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 31 항에 있어서,
상기 막은 약 1,000 내지 약 100,000 달톤의 분획분자량을 가지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 26 항에 있어서,
투석여과 단계(h)의 적어도 일부에 있어서의 투석여과 매체 내에 산화방지제가 존재하는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 22 항 또는 제 26 항에 있어서,
상기 농축단계(g) 및 선택적인 투석여과 공정(h)이 약 2° 내지 약 65℃ 의 온도에서 수행되는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 34 항에 있어서,
상기 온도는 약 20° 내지 약 35℃ 의 온도인 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 1 항에 있어서,
상기 산성화한 대마 단백질 수용액이 단계 (g) 및 (h)에 처해져서 건조시에 적어도 약 60 wt% (N×6.25)d.b. 의 단백질 함량을 가지는 대마 단백질 제품을 제공하는 농축 및/또는 투석여과 산성화한 대마 단백질 용액을 제조하는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 22 항 또는 제 26 항에 있어서,
상기 임의선택 농축 및 임의선택 투석여과 산성화한 대마 단백질 용액이 흡착제로 처리되어 색 및/또는 향기 화합물을 제거하는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 22 항 또는 제 26 항에 있어서,
상기 임의선택 농축 및 임의선택 투석여과 산성화한 대마 단백질 용액이 건조전에 저온살균되는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 38 항에 있어서,
상기 저온살균 단계는 약 55°내지 약 70℃ 의 온도에서 약 30초 내지 약 60분간 행해지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 39 항에 있어서,
상기 저온살균 단계는 약 60° 내지 약 65℃ 의 온도에서 약 10 내지 약 15분간 행해지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 38 항에 있어서,
상기 임의선택 농축 및 투석여과 산성화한 대마 단백질 용액이 단계(i)에 처해져서 적어도 약 90 wt% (N×6.25)d.b. 의 단백질 함량을 가지는 분리 대마단백이 얻어지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 제 41 항에 있어서,
상기 분리 대마단백은 약 100 wt% (N×6.25)d.b. 의 단백질 함량을 가지는 대마 단백질 제품의 제조방법.
- 약 4.4 미만의 산성 pH 값에서 수용성인, 적어도 약 60 wt%(N×6.25)d.b. 의 단백질 함량을 가지는 대마 단백질 제품.
- 제 43 항에 있어서,
적어도 약 90 wt%(N×6.25)d.b. 의 단백질 함량을 가지는 대마 단백질 제품.
- 제 43 항에 있어서,
적어도 약 100 wt%(N×6.25)d.b. 의 단백질 함량을 가지는 대마 단백질 제품.
- 제 43 항에 있어서,
무자극성 향미를 가지는 대마 단백질 제품.
- 제 43 항에 있어서,
블렌드(blend)의 수용액의 제조를 위하여 수용성 분말재료와 블렌드된 대마 단백질 제품.
- 분말음료인 청구항 47의 블렌드.
- 4.4 미만의 pH 를 가지는 청구항 43의 대마 단백질 제품의 수용액.
- 음료인 청구항 49의 수용액.
- 약 6 내지 약 8 의 pH를 가지는 청구항 43 의 대마 단백질 제품의 수용액.
- 제 51 항에 있어서,
음료인 수용액. - 제 51 항에 있어서,
유제품의 유사제품 또는 유제품의 대체제품, 또는 식물 및 유제품 성분의 블렌드인 제품의 생산에 사용되는 수용액.
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