CN104519750A - 源自麻类植物(“h701”)的可溶性蛋白产品的制备 - Google Patents
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Abstract
麻类植物蛋白产品在低pH值下制备溶液,并可用于强化软饮料和运动饮料而无蛋白沉淀,所述麻类植物蛋白产品可为分离物。所述麻类植物蛋白产品如下获得:以含水钙盐溶液提取麻类植物蛋白源材料以形成含水麻类植物蛋白溶液,从残余的麻类植物蛋白源中分离含水麻类植物蛋白溶液,调节含水麻类植物蛋白溶液的pH至约1.5至约4.4的pH以制备酸化的麻类植物蛋白溶液,其可在任选地浓缩和渗滤之后干燥以提供麻类植物蛋白产品。
Description
相关申请的引用
本申请根据35 USC 119(e)要求2012年8月2日提交的美国申请号61/678,722的优先权。
技术领域
本发明涉及源自麻类植物(hemp)蛋白产品的制备以及新型麻类植物蛋白产品。
背景技术
在2009年10月21日提交的美国专利申请号12/603,087(美国专利公开号2010-0098818),2010年10月13日提交的12/923,897(美国专利公开号2011-0038993)和2011年6月1日提交的12/998,442(美国专利公开号2011-0236556)中,所述专利文献被授予其受让人且其公开的内容通过引用方式并入本文,其阐述了具有至少约60wt%(N x6.25)d.b.,优选至少约90wt%蛋白含量的大豆蛋白产品的制备,其在低pH值下产生透明的、热稳定的溶液,并且其可用于软饮料以及其它含水体系的蛋白强化而无蛋白沉淀。
通过以下方法来制备大豆蛋白产品:用含水氯化钙溶液提取大豆蛋白源以引起源自蛋白源的大豆蛋白的溶解,并形成含水大豆蛋白溶液;从残余大豆蛋白源中分离含水大豆蛋白溶液;任选地稀释所述大豆蛋白溶液;调节所述含水大豆蛋白溶液pH至pH约1.5至约4.4,优选约2至约4,以制备酸化的澄清的大豆蛋白溶液;任选地通过使用选择性膜技术浓缩澄清含水蛋白溶液,同时保持离子强度基本上恒定;任选地渗滤浓缩的大豆蛋白溶液;以及任选地干燥浓缩的和任选地渗滤的大豆蛋白溶液。
发明内容
现已发现,这种过程及其变形可用于形成源自麻类植物的具有至少60wt%(Nx6.25)d.b.蛋白含量的酸性可溶性蛋白产品。酸性可溶性麻类植物蛋白产品可用于蛋白强化,特别是软饮料和运动饮料的蛋白强化,更特别是粉末软饮料和运动饮料(其是由最终使用者溶解在水中)以及其他含水体系的蛋白强化,而无蛋白沉淀。
新型麻类植物蛋白产品在低于约4.4的酸性pH值的含水溶液中是完全可溶的。鉴于产品的完全可溶性,不需要稳定剂或其他添加剂以保持溶液或者混悬液中的蛋白。所述产品植酸少,通常低于约1.5wt%,优选低于约0.5wt%。在麻类植物蛋白产品的制备中不需要酶。麻类植物蛋白被描述为具有清淡的味道。所述麻类植物蛋白产品为优选具有至少约90wt%,优选至少约100wt%(N x 6.25)蛋白含量的分离物。
根据本发明的一个方面,提供了一种制备麻类植物蛋白产品的方法,所述麻类植物蛋白产品以干重计具有至少约60wt%(N x 6.25)的麻类植物蛋白含量,所述方法包括:
(a)用含水钙盐溶液,优选含水氯化钙溶液提取麻类植物蛋白源,以引起源自蛋白源的麻类植物蛋白的溶解,并形成含水麻类植物蛋白溶液,
(b)从残余麻类植物蛋白源中分离含水麻类植物蛋白溶液,
(c)任选地稀释含水麻类植物蛋白溶液,
(d)调节所述含水麻类植物蛋白溶液pH至pH约1.5至约4.4,优选约2至约4,以制备酸化的麻类植物蛋白溶液,
(e)任选地澄清酸化的麻类植物蛋白溶液,如果其尚未澄清,
(f)对于步骤(b)至(e)可替代地,任选地稀释,然后调节组合的含水麻类植物蛋白溶液以及残余的麻类植物蛋白源至pH约1.5至约4.4,优选约2至约4,然后从残余的麻类植物蛋白源中分离酸化的,优选澄清的麻类植物蛋白溶液,
(g)任选地通过使用选择性膜技术浓缩含水麻类植物蛋白溶液,同时保持离子强度基本上恒定,
(h)任选地渗滤所述浓缩的麻类植物蛋白溶液;以及
(i)任选地干燥所述浓缩的和任选渗滤的麻类植物蛋白溶液。
所述麻类植物蛋白产品为优选具有至少约90wt%,优选至少约100wt%(N x 6.25)蛋白含量的分离物。
本发明进一步提供一种新型的具有至少60wt%,优选至少约90wt%,更优选至少约100wt%(N x 6.25)d.b.蛋白含量的麻类植物蛋白产品,其在低于约4.4的酸性pH值下是水溶性的,并且对于含水体系(包括软饮料和运动饮料,特别是这些饮料的粉状形式)的蛋白强化是有用的,而未导致蛋白沉淀。所述麻类植物蛋白产品也是低植酸含量的,通常低于约1.5重量%,优选低于约0.5重量%。所述产品中的麻类植物蛋白未经水解。
因此,本发明的另一方面,提供了一种具有至少约60wt%蛋白含量的麻类植物蛋白产品,优选具有至少约90wt%(N x 6.25)d.b.蛋白含量的麻类植物蛋白分离物,更优选至少约100wt%(N x 6.25)d.b.,其在pH低于约4.4,优选约1.5至约4.4的含水介质中基本上完全可溶。
本文提供的麻类植物蛋白产品可以其水溶液形式提供,优选在酸性pH值,通常低于约4.4,优选约1.5至约4.4下具有高澄清度。
本发明的新型麻类植物蛋白产品能够通过将其溶解在水中,与用于形成含水软饮料或运动饮料的粉末饮料共混。这样的共混物可以为粉末饮料。所述具有约6至约8的近中性pH的新型麻类植物蛋白产品还可被用于各种应用。
虽然本发明主要涉及麻类植物蛋白分离物的制备,可预期的是,可提供与麻类植物蛋白分离物具有类似性质的较低纯度的麻类植物蛋白产品。这样的较低纯度的产品可具有以重量计至少约60%(N x6.25)d.b.的蛋白浓度。
在本发明的另一方面,提供本文提供的麻类植物蛋白产品的酸性含水溶液。所述酸性含水溶液可以为饮料,所述酸性含水溶液可以为澄清饮料,其中麻类植物蛋白产品为完全可溶的且透明的,或者所述酸性含水溶液可以为不透明饮料,其中麻类植物蛋白产品对于饮料中的混浊作出或不作出贡献。所述酸性含水溶液具有良好的味道属性,并在非正规品尝专家组测试中,显示出相比于市售麻类植物蛋白产品的含水溶液更清淡的味道。
根据本文方法制备的麻类植物蛋白产品稳定,不仅用于酸性介质的蛋白强化,还可在广泛的多种蛋白产品的常规应用中使用,包括但不限于加工的食品和饮料的蛋白强化、油的乳化、在焙烤食品中作为成型体(body former)和在滞留气体(entrap gases)的产品中的发泡剂。此外,可将麻类植物蛋白产品形成的蛋白纤维,用于肉类似物(meatanalogs),并且可被用作蛋清替代物或食品产品中的增量剂(extender),其中蛋清被用作稠合粉(binder)。也可将麻类植物蛋白产品用作营养补充剂。还可将麻类植物蛋白产品用于乳品类似物或替代产品或乳品/麻类植物共混物的产品。麻类植物蛋白产品的其他用途为在宠物食品、动物饲料以及工业和化妆品的应用以及在个人护理产品中使用。
具体实施方式
提供麻类植物蛋白产品的方法的初始步骤包括使源自麻类植物蛋白源的麻类植物蛋白溶解。麻类植物蛋白源可为麻类植物种子或源于麻类植物种子加工过程的任何麻类植物产品或副产品,包括但不限于由麻类植物粉(hemp meal)、过筛麻类植物粉和脱皮麻类植物种子制成的麻类植物蛋白产品。麻类植物蛋白源可以以全脂形式,部分脱脂形式或完全脱脂形式使用。当麻类植物蛋白源含有可观量的脂肪时,在加工过程中通常需要除油步骤。从麻类植物蛋白源回收的麻类植物蛋白可为天然存在于麻类植物中的蛋白或可通过基因操纵经修饰的蛋白的蛋白质类原料(proteinaceous material),但其拥有天然蛋白的特征性疏水和极性性质。
尽管可使用其他钙盐溶液,但最便利地是使用氯化钙溶液以实施源自麻类植物蛋白源材料的蛋白溶解。此外,可使用其他碱土金属化合物,如镁盐。再者,可使用钙盐溶液联合另一个盐溶液,如氯化钠,以实施从麻类植物蛋白源提取麻类植物蛋白。此外,可使用水或其他盐溶液,如氯化钠,且随后将钙盐加至在提取步骤中制备的含水麻类植物蛋白溶液以实施从麻类植物蛋白源提取麻类植物蛋白。在后续的加工之前去除由加入钙盐而形成的沉淀物。
随着钙盐溶液的浓度增加,源自麻类植物蛋白源的蛋白溶解度开始增加直至达到最大值。盐浓度的任何后续的增加并不增加溶解的总蛋白。引起最大蛋白溶解的钙盐溶液浓度依所用的盐的不同而异。通常优选的是利用的浓度值小于约1.0M,且更优选的值为约0.10至约0.15M。
在批加工过程中,在约1℃至约100℃,优选约15℃至约65℃,更优选约20℃至约35℃的温度下,实施蛋白的盐溶解,优选伴随搅动,通常约1至约60分钟,以减少溶解时间。优选的是实施溶解以尽量可行地从麻类植物蛋白源中充分地提取更多蛋白,以提供总体的高产品收率。
在连续的加工过程中,以符合实施从麻类植物蛋白源连续提取麻类植物蛋白的任何方式,实施从麻类植物蛋白源提取麻类植物蛋白。在一个实施方案中,麻类植物蛋白源连续地与钙盐溶液混合,通过具有足以实现根据本文描述的参数所需提取的长度和滞留时间的流速的管道或导管,传递该混合物。在这样的连续程序中,以约1至约60分钟的时间实施盐溶解步骤,优选实施溶解以尽量可行地从麻类植物蛋白源中充分地提取更多蛋白。在连续程序中,在约1℃至约100℃,优选约15℃至约65℃,更优选约20℃至约35℃的温度实施溶解。
通常提取在pH约4.5至约11,优选约5至约7下实施。在需要时,可通过使用任何便利的食品级酸,通常为盐酸或磷酸,或食品级碱,通常为氢氧化钠,调节提取系统(麻类植物蛋白源和钙盐溶液)的pH至约4.5至约11范围内的任何想要的值,用于提取步骤。
在溶解步骤过程中,钙盐溶液中的麻类植物蛋白源的浓度可广泛变化。典型的浓度值为约5至约15%w/v。
用盐的含水溶液提取蛋白的步骤具有额外的溶解脂肪的效应(所述脂肪可存在于麻类植物蛋白源中),然后其导致脂肪存在于水相中。
由提取步骤制备的蛋白溶液通常具有约5至约50g/L,优选约10至约50g/L的蛋白浓度。
含水钙盐溶液可包含抗氧化剂。抗氧化剂可为任何便利的抗氧化剂,如亚硫酸钠或抗坏血酸。所使用的抗氧化剂的量可从约0.01至约1wt%的溶液变化,优选约0.05wt%。抗氧化剂起抑制蛋白溶液中任何酚类物质(phenolics)氧化的作用。
以任何便利的方式,从残余的麻类植物蛋白源中分离提取步骤获得的水相,如通过采用沉降式离心机或任何适宜的筛,接着用圆盘离心和/或过滤,以除去残余的麻类植物蛋白源材料。分离步骤可在约1℃至约100℃,优选约15℃至约65℃,更优选约20℃至约35℃的任何温度下实施。备选地,可对含水麻类植物蛋白溶液和残余的麻类植物蛋白源的混合物应用如下描述的任选的稀释和酸化步骤,且随后通过如上描述的分离步骤去除残余的麻类植物蛋白源材料。为了处理可干燥所述分离的残余麻类植物蛋白源。备选地,可加工分离的残余的麻类植物蛋白源,以回收一些剩余的蛋白。可以新钙盐溶液再提取分离的残余麻类植物蛋白源,并且通过澄清获得蛋白溶液与初始的蛋白溶液组合用于进一步如下描述的加工过程。备选地,可通过常规的等电沉淀程序或任何其他便利的程序,加工分离的残余麻类植物蛋白源,以回收残余的蛋白。
可以消泡剂,如任何合适的食品级、无硅基消泡剂处理含水麻类植物蛋白溶液以降低在进一步加工过程中形成泡沫的体积。通常使用消泡剂的量高于约0.0003%w/v。备选地,可在提取步骤中加入描述量的消泡剂。
当麻类植物蛋白源包含大量脂肪时,如在美国专利号5,844,086和6,005,076中描述的,所述专利文献被授予其受让人且其公开的内容通过参考引入本文,且可以在分离的含水蛋白溶液中实施上述文献中描述的脱脂步骤。备选地,可通过任何其他便利的程序,完成分离的含水蛋白溶液的脱脂。
可用吸附剂,如粉末活性炭或颗粒活性炭处理含水麻类植物蛋白溶液以去除颜色和/或气味化合物。可在任何便利的条件下,通常在分离的蛋白溶液的环境温度下实施这样的吸附剂处理。对于粉末活性炭,使用的量为约0.025%至约5%w/v,优选约0.05%至约2%w/v。可通过任何便利的手段,如通过过滤从麻类植物蛋白溶液中去除吸附剂。
通常可用约0.1至约10体积,优选约0.5至约2体积的含水稀释剂稀释所得的含水麻类植物蛋白溶液,以降低含水麻类植物蛋白溶液的电导率至通常低于约105mS,优选约4至约21mS的值。虽然可使用具有至多约3mS电导率的稀释的盐溶液,例如氯化钠或氯化钙,但是通常使用水来实施这种稀释。
与麻类植物蛋白溶液混合的稀释剂通常具有与麻类植物蛋白溶液相同的温度,但是稀释剂的温度可为约1℃至约100℃,优选约15℃-约65℃,更优选约20℃至约35℃。
然后通过加入任何合适的食品级酸,例如盐酸或磷酸,将任选稀释的麻类植物蛋白溶液的pH的值调节至约1.5至约4.4,优选约2至约4,以获得酸化的含水麻类植物蛋白溶液,优选为酸化的澄清含水麻类植物蛋白溶液。对于稀释的麻类植物蛋白溶液,所述酸化的含水麻类植物蛋白溶液通常具有约110mS以下的导电率,或者对于未稀释的麻类植物蛋白溶液,通常约115mS以下,这两种情况均优选约4至约26mS。
如上所述,作为残余的麻类植物蛋白源的早期分离的备选选择,可任选地同时稀释并酸化含水麻类植物蛋白溶液和残余的麻类植物蛋白源材料,且随后以任何如上讨论的便利的技术澄清并从残余的麻类植物蛋白源材料中分离酸化的含水麻类植物蛋白溶液。对酸化的含水麻类植物蛋白溶液可如上描述地任选地脱脂,任选地以吸附剂处理和任选地以消泡剂处理。
如果任选地稀释的和酸化的麻类植物蛋白溶液不透明,可以通过任何便利的程序,如过滤或离心澄清。
如果具有足够的纯度,可以直接干燥所得的酸化的含水麻类植物蛋白溶液,以制备麻类植物蛋白产品。为了提供一种具有降低杂质含量的且降低盐含量的麻类植物蛋白产品,如麻类植物蛋白分离物,可在干燥前,如下描述地加工酸化的含水麻类植物蛋白溶液。
可将酸化的含水麻类植物蛋白溶液浓缩以提高其蛋白浓度,同时保持其离子强度基本上恒定。通常实施这种浓缩以提供蛋白浓度为约50至约300g/L,优选约100至约200g/L的浓缩的麻类植物蛋白溶液。
浓缩步骤可按照与分批或连续操作一致的任何便利的方式实施,例如通过采用任何便利的使用膜,如空心纤维膜或螺旋缠绕膜的选择性膜技术(如超滤或渗滤)实施,考虑到不同的膜材料和结构,所述膜具有合适的截留分子量,例如约1,000至约1,000,000道尔顿,优选约1,000至约100,000道尔顿,并且对于连续操作,当含水蛋白溶液通过膜时其尺寸允许所需的浓缩程度。
众所周知,超滤和类似的选择性膜技术允许低分子量物类(species)由此通过,同时防止较高分子量物类也由此通过。低分子量物类不仅包括盐的离子物类,而且包括从源材料提取的低分子量材料,例如碳水化合物、色素、低分子量蛋白和抗营养因子。通常考虑到不同膜材料和结构,选择膜的截留分子量,以保证在溶液中保留显著比例的蛋白,同时允许污染物通过。
然后,浓缩的麻类植物蛋白溶液可经历使用水或稀释的生理盐水溶液的渗滤步骤。渗滤溶液可在其天然pH或等于正被渗滤的蛋白溶液的pH或之间的任何pH值。这种渗滤可使用约1至约40体积的渗滤溶液,优选约2至约25体积的渗滤溶液实施。在渗滤操作中,通过与渗透液一起通过膜,将更多量的污染物从含水麻类植物蛋白溶液中去除。这纯化了含水蛋白溶液并且还可降低其粘度。可实施渗滤操作直至没有显著的更多量的污染物或可见的颜色存在于渗透液中,或直至保留物已经足够纯化,以便在干燥时提供蛋白含量为至少约90wt%(N×6.25)d.b.的麻类植物蛋白分离物。可用与浓缩步骤相同的膜实施这种渗滤。然而,如果期望,考虑到不同膜材料和结构,可使用具有不同截留分子量的分离膜实施渗滤步骤,例如截留分子量在约1,000至约1,000,000道尔顿,优选约1000至约100,000道尔顿的范围内的膜。
备选地,可在浓缩之前应用渗滤步骤于酸化的含水蛋白溶液,或部分浓缩的酸化的含水蛋白溶液。也可在浓缩过程期间,在多个点应用渗滤。当在浓缩或部分浓缩之前应用渗滤时,随后可另外浓缩所得到的渗滤溶液。通过多次渗滤获得的粘度降低,随着蛋白溶液被浓缩而可允许获得较高的最终完全浓缩的蛋白浓度。这样降低了待干燥的材料的体积。
浓缩步骤和渗滤步骤可以在本文中按这样的方式实施,使得随后回收的麻类植物蛋白产品含有小于约90wt%蛋白(N×6.25)d.b.,如至少约60wt%蛋白(N×6.25)d.b.。通过部分浓缩和/或部分渗滤含水麻类植物蛋白溶液,有可能只部分地去除污染物。然后可干燥这种蛋白溶液以提供具有较低水平纯度的麻类植物蛋白产品。该麻类植物蛋白产品仍是高度可溶的,并能够制备蛋白溶液,优选在酸性条件下的澄清蛋白溶液。
在至少部分渗滤步骤中,在渗滤介质中可存在抗氧化剂。所述抗氧化剂可为任何便利的抗氧化剂,如亚硫酸钠或抗坏血酸。应用于渗滤介质的抗氧化剂的量,取决于所用的材料,且可从约0.01至约1wt%变化,优选约0.05wt%。抗氧化剂起抑制麻类植物蛋白溶液中任何酚类物质氧化的作用。
任选的浓缩步骤和任选的渗滤步骤可在任何便利的温度,通常约2℃至约65℃,优选约20℃至约35℃实施,并实施想要的浓缩和渗滤程度的时间段。在某种程度上采用的温度和其他条件取决于用于实施膜加工过程的膜设备、想要的溶液的蛋白浓度和去除渗透物的污染物的效率。
如果需要,如在美国专利号5,844,086和6,005,076中描述的,可使任选浓缩的和任选渗滤的蛋白溶液经历进一步脱脂操作。备选地,可通过任何其他便利的程序,实施任选浓缩的和任选渗滤的蛋白溶液的脱脂。
可用吸附剂,如粉末活性炭或颗粒活性炭处理任选地浓缩的和任选地渗滤的含水麻类植物蛋白溶液,以去除颜色和/或气味化合物。可在任何便利的条件下,通常在分离的蛋白溶液的环境温度下实施这样的吸附剂处理。对于粉末活性炭,使用的量为约0.025%至约5%w/v,优选约0.05%至约2%w/v。可通过任何便利的手段,如通过过滤从麻类植物蛋白溶液中去除吸附剂。
可通过任何便利的技术,如喷雾干燥或冷冻干燥,以干燥任选浓缩的和任选渗滤的含水麻类植物蛋白溶液。在干燥之前可对麻类植物蛋白溶液实施巴氏法灭菌步骤。可在任何想要的巴氏法灭菌的条件下实施这样的巴氏法灭菌。通常来说,将浓缩的和任选渗滤的麻类植物蛋白溶液加热至约55℃至约70℃,优选约60℃至约65℃的温度约30秒至约60分钟,优选约10分钟至约15分钟。然后,可将用巴氏法灭菌的麻类植物蛋白溶液冷却干燥,优选至约25℃至约40℃的温度。
干燥的麻类植物蛋白产品具有超过约60wt%(Nx6.25)d.b.蛋白含量。优选,干燥的麻类植物蛋白产品是具有超过约90wt%的蛋白,优选至少约100wt%(Nx6.25)d.b.的高蛋白含量的分离物。
本文制备的麻类植物蛋白产品在酸性水环境中是可溶的,使得该产品理想地掺入饮料,特别是粉末饮料,以及即饮型碳酸饮料和非碳酸饮料中,以对那里提供蛋白强化。这样的饮料具有宽范围的酸性pH值,从约2.5至约5。可将本文提供的麻类植物蛋白产品按任何便利的量加入至这样的饮料中,以提供对这样的饮料的蛋白强化,例如,每份至少约5g的麻类植物蛋白。对于粉末饮料,在通过溶解于水重建饮料之前,可将麻类植物蛋白产品与干燥的饮料共混。在一些情况下,当存在于饮料中的成分可对本发明的组合物保持溶解于饮料中的能力产生不利影响时,可能有必要对饮料的正常配方修改以耐受本发明的组合物。
实施例
实施例1
该实施例阐述麻类植物蛋白分离物的制备。
将22.5kg的磨碎的麻类植物滤饼与150L的0.15M的CaCl2溶液在25.8℃混合并搅拌30分钟以提供含水蛋白溶液。去除残余的磨碎的麻类植物滤饼并通过浓缩和过滤将所得的蛋白溶液澄清以获得具有以重量计1.31%蛋白含量的滤液。
然后,以反渗透纯化水稀释所述滤液并以相等体积的水稀释过的HCl降低样品的pH至2.68。所述稀释和酸化的蛋白溶液具有0.88wt%蛋白含量。
通过具有截留分子量100,000道尔顿,在大约30℃的温度下操作的聚醚砜(PES)膜浓缩,将所述稀释和酸化的蛋白溶液的体积从160L降至7L。以35L反渗透纯化水渗滤浓缩的酸化的具有10.51wt%蛋白含量的蛋白溶液,在大约30℃下实施渗滤操作。所得的7.38kg渗滤的蛋白溶液具有9.65wt%蛋白含量,并且表现出相对进一步处理过的稀释且酸化的蛋白溶液50.4wt%的产率。然后,干燥蛋白溶液以得到产品,发现其蛋白含量为108.31wt%(N x 6.25)d.b.。将产品命名为H001-H24-11A H701。
实施例2
该实施例包含对以实施例1的方法制备的麻类植物蛋白分离物以及市售的麻类植物蛋白浓缩液Hemp Pro 70(Manitoba Harvest,温尼伯,MB)(使用Leco Nitrogen Determinator通过燃烧分析确定其蛋白含量为65.76%d.b.)的植酸含量的评价。
使用Latta和Eskin(J.Agric.Food Chem.,28:1313-1315)的方法确定植酸含量。
H001-H24-11A H701的植酸含量为0.22%d.b.,而Hemp Pro 70的植酸含量为1.43%d.b.。
实施例3
该实施例阐述以实施例1的方法制备的麻类植物蛋白分离物以及市售的麻类植物蛋白浓缩液Hemp Pro 70以溶液和干燥粉末形式的颜色。
通过溶解足够的蛋白粉末,以在15ml RO水中提供0.48g蛋白来制备H001-H24-11A H701和Hemp Pro 70溶液。以pH计检测溶液的pH并使用以传输模式操作的HunterLab ColorQuest XE仪器评估颜色和澄清度。结果显示在下表1中:
表1-H001-H24-11A H701和Hemp Pro 70溶液的pH以及HunterLab读数
如从表1中的结果可见,H001-H24-11A H701溶液颜色是浅色的且是透明的。Hemp Pro 70溶液是较暗的,更多红色,更少黄色并且相比H001-H24-11A H701溶液具有更高的混浊度。
以反射模式操作的HunterLab ColorQuest XE仪器评估干燥粉末的颜色。颜色值列于下表2中:
表2-H001-H24-11A H701和Hemp Pro 70干燥粉末的HunterLab计分
如从表2中呈现的结果可见,相比Hemp Pro 70粉末H001-H24-11A H701粉末更浅,更少红色且更少黄色。
实施例4
该实施例包含对以实施例1的方法制备的麻类植物蛋白分离物以及市售的麻类植物蛋白浓缩液Hemp Pro 70的水中的溶解度的评价,由于是水可溶的而提升了产品。基于蛋白溶解度(称为蛋白方法,Morr等人,J.Food Sci.50:1715-1718方法的改进版本)和总的产品溶解度(称为小球法(pellet method))测试溶解度。
将以供应0.5g的蛋白的足量的蛋白粉称重倒入烧杯中,然后加入少量的反渗透(RO)纯化水并搅拌该混合物直至形成光滑的糊状物。然后,加入额外的水使体积至大约45ml。然后用磁力搅拌器缓慢搅拌烧杯中的内容物60分钟。在分散蛋白之后立即测定pH并用稀释的NaOH或HC1调节pH至适当的水平(2、3、4、5、6或7)。也在中性pH下制备样品。对于已经调节pH的样品,在60分钟搅拌过程中,定期检测pH并校正pH。在60分钟搅拌后,用RO水将样品配制至50ml总体积,得到1%w/v蛋白分散体。使用Leco Nitrogen Determinator通过燃烧分析检测分散体蛋白含量。然后将分散体的等分试样(20ml)转移至预先称重的离心管中,该离心管已被在100℃的烘箱中干燥过夜,然后在干燥器中冷却并盖上管帽。将样品以7,800g离心10分钟,其沉淀不可溶性材料并得到澄清的上清液。通过燃烧分析检测上清液蛋白含量,然后弃去上清液和管盖,在设定为100℃的烘箱中将小球材料干燥过夜。次日早晨,将管转移至干燥器中并任其冷却。记录干燥小球材料的重量。通过所用的粉的重量乘以因子((100–粉末的湿含量(%))/100),计算初始蛋白粉末干重。然后以两种不同的方式计算产品的溶解度:
1)溶解度(蛋白方法)(%)=(%上清液中的蛋白/%初始分散体中的蛋白)x 100
2)溶解度(小球方法)(%)=(1-(不溶性小球物质干燥重量/((20ml分散体的重量/50ml分散体的重量)x干燥蛋白粉初始重量)))x 100
计算值超过100%的以100%表示
溶解度结果列于下表3中。样品H001-H24-11A H701的自然pH为3.31。样品Hemp Pro 70的自然pH为7.69。
表3-以蛋白方法确定在不同pH值的H001-H24-11A H701和Hemp Pro 70的溶解度
表4-以小球方法确定在不同pH值的H001-H24-11A H701和HempPro 70的溶解度
从表3和4呈现的结果可见,H001-H24-11A H701在pH 2至4下为高度可溶的。Hemp Pro 70在所有测试的pH值下仅为部分可溶的。
实施例5
该实施例包含以实施例1的方法制备的麻类植物蛋白分离物以及市售的麻类植物蛋白浓缩液Hemp Pro 70在水中的澄清度的评价。
通过在600nm(水空白(water blank))检测吸光度,评估如在实施例4中描述制备的1%w/v蛋白分散体的澄清度,其中较低的吸光度计分表示更高的澄清度。在HunterLab ColorQuest XE仪器上用传输模式对样品的分析,也提供百分比混浊读数,另一项对澄清度的检测。
澄清度结果列于下表5和6中。
表5–如通过A600评估不同的pH值下的H001-H24-11A H701和Hemp Pro 70溶液的澄清度
表6-如通过HunterLab分析评估不同的pH值下的H001-H24-11AH701和Hemp Pro 70溶液溶液的澄清度
从表5和6的结果可见,在较低的pH值时观察到H001-H24-11AH701最好的溶液澄清度。Hemp Pro 70在所有测试的pH值下提供非常混浊的溶液。
实施例6
该实施例包含评价以实施例1的方法制备的麻类植物蛋白分离物以及市售的麻类植物蛋白浓缩液Hemp Pro 70在软饮料和运动饮料中的溶解度。用加入饮料中的蛋白在无pH校正下测定溶解度,并再次以调节至原始饮料水平的蛋白强化饮料的pH下测定溶解度。
当在无pH校正下评估溶解度时,以供应1g蛋白的足量的蛋白粉称重倒入烧杯中,然后加入少量的饮料并搅拌直至形成光滑的糊状物。加入额外的饮料使体积至50ml,然后用磁力搅拌器缓慢搅拌溶液60分钟,以得到2%w/v蛋白分散体。使用Leco Nitrogen Determinator通过燃烧分析确定样品蛋白含量,然后将包含蛋白饮料的等分试样以7,800g离心10分钟,并检测上清液蛋白含量。
溶解度(%)=(%上清液中的蛋白/%初始分散体中的蛋白)x100计算值超过100%的以100%表示。
当在pH校正下评估溶解度时,检测没有蛋白的软饮料(雪碧(Sprite))(3.59)和运动饮料(佳得乐橙汁(Orange Gatorade))(3.29)的pH。以供应1g蛋白的足量的蛋白粉称重倒入烧杯中,然后加入少量的饮料并搅拌直至形成光滑的糊状物。加入额外的饮料使体积至约45ml,然后用磁力搅拌器缓慢搅拌溶液60分钟。在分散蛋白之后立即测定含蛋白饮料的pH,并在必要时用HC1或NaOH调节至原始的无-蛋白时的pH。在60分钟搅拌过程中定期检测和校正pH。60分钟搅拌后,用额外的饮料使各溶液的总体积至50ml,得到2%w/v的蛋白分散体。使用Leco Nitrogen Determinator通过燃烧分析确定样品蛋白含量,然后将包含蛋白饮料的等分试样以7,800g离心10分钟,并检测上清液蛋白含量。
溶解度(%)=(%上清液中的蛋白/%初始分散体中的蛋白)x100计算值超过100%的以100%表示。
获得的结果列于下表7中:
表7-在雪碧和佳得乐橙汁中的H001-H24-11A H701的溶解度
H701的自然pH值与饮料的自然pH类似,因此蛋白添加物对于饮料pH只有很小的影响。从表7的结果可见H001-H24-11A H701对于pH校正或无校正下在雪碧和佳得乐橙汁中均是高度可溶的,且相比于Hemp Pro 70蛋白是更可溶的。
实施例7
该实施例包含以实施例1的方法制备的麻类植物蛋白分离物在软饮料和运动饮料中的澄清度的评价。
使用实施例5中描述的分光光度和Hunter Lab的方法,评估在实施例6中制备的软饮料(雪碧)和运动饮料(佳得乐橙汁)中的2%w/v蛋白分散体的澄清度。而在这种情况下,分光光度计以合适的饮料作为空白。
获得的结果列于下表8和9中。
表8-在雪碧和佳得乐橙汁中H001-H24-11A H701的A600读数
nd=未确定的
表9-在雪碧和佳得乐橙汁中H001-H24-11A H701的HunterLab混浊读数
从表8和9的结果可见,尽管H001-H24-11A H701优异的蛋白溶解度,但是其还是对雪碧和佳得乐橙汁的混浊作出了贡献。但是,相比于H001-H24-11A H701制备的样品,Hemp Pro 70制备的样品更混浊。
实施例8
该实施例阐述了如在实施例1中描述制备的H701与市售的麻类植物蛋白浓缩液Hemp Pro 70味道的比较,评价是在低pH下进行的。
通过溶解供应5g蛋白的足量的蛋白粉于250ml纯化饮用水中制备的用于感官评价的样品。确定H701溶液的pH值为3.31。加入食品级的HCl至Hemp Pro 70溶液中以将pH从7.73降低至3.31。要求七名小组成员的非正式小组不知详情地比较样本,并指出哪些样品的味道更轻淡,以及他们更喜欢的哪些样品味道。
七名小组成员中的六名发现H701的味道更轻淡,而七名小组成员中的七名更喜欢H701的味道。
实施例9
该实施例阐述了如在实施例1中描述制备的H701与市售的麻类植物蛋白浓缩液Hemp Pro 70味道的比较,评价是在接近中性pH下进行的。
通过溶解供应5g蛋白的足量的蛋白粉于250ml纯化饮用水中制备的用于感官评价的样品。确定Hemp Pro 70溶液的pH值为7.72。将食品级的NaOH加入至H701溶液中以将pH从3.23升高至7.72。要求七名小组成员的非正式小组不知详情地比较样本,并指出哪些样品的味道更轻淡,以及他们更喜欢的哪些样品味道。
七名小组成员中的四名发现H701的味道更轻淡,而七名小组成员中的四名更喜欢H701的味道。
公开内容的概括
就本公开内容总体而言,本发明提供了一种新型的麻类植物蛋白产品,其可以分离物的形式,其在酸性pH下是完全可溶的,并且对于含水体系(包括软饮料和运动饮料,特别是这些饮料的粉状形式)的蛋白强化是有用的,而未导致蛋白沉淀。可在本发明的范围内变型。
Claims (53)
1.一种制备麻类植物蛋白产品的方法,所述麻类植物蛋白产品以干重计具有至少约60wt%,优选至少约90wt%(N x 6.25)的蛋白含量,所述方法包括:
(a)用含水钙盐溶液提取麻类植物蛋白源,以引起源自蛋白源的麻类植物蛋白的溶解,并形成含水麻类植物蛋白溶液,
(b)从残余麻类植物蛋白源中至少部分地分离含水麻类植物蛋白溶液,
(c)任选地稀释所述含水麻类植物蛋白溶液,
(d)调节所述含水麻类植物蛋白溶液的pH至约1.5至约4.4的pH,以制备酸化的含水麻类植物蛋白溶液,
(e)任选地澄清酸化的麻类植物蛋白溶液,如果其尚未澄清,
(f)对于步骤(b)至(e)可替代地,任选地稀释,然后调节组合的含水麻类植物蛋白溶液以及残余的麻类植物蛋白源的pH至约1.5至约4.4的pH,然后从残余的麻类植物蛋白源中分离酸化的含水麻类植物蛋白溶液,
(g)任选地通过选择性膜技术浓缩含水麻类植物蛋白溶液,同时保持离子强度基本上恒定,
(h)任选地渗滤任选浓缩的麻类植物蛋白溶液;以及
(i)任选地干燥任选浓缩的和任选渗滤的麻类植物蛋白溶液。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述含水钙盐溶液为含水氯化钙溶液。
3.根据权利要求2所述的方法,其中所述含水氯化钙溶液具有低于约1.0M的浓度。
4.根据权利要求3所述的方法,其中所述浓度为约0.10至约0.15M。
5.根据权利要求1所述的方法,其中所述提取步骤(a)在约1℃至约65℃,优选约15℃至约65℃,更优选20℃至约35℃的温度下实施。
6.根据权利要求1所述的方法,其中用含水钙盐溶液的所述提取在pH约4.5至约11下实施。
7.根据权利要求6所述的方法,其中所述pH为约5至约7。
8.根据权利要求1所述的方法,其中所述含水麻类植物蛋白溶液具有约5至约50g/L的蛋白浓度。
9.根据权利要求8所述的方法,其中所述蛋白浓度为约10至约50g/L。
10.根据权利要求1所述的方法,其中所述含水钙盐溶液包含抗氧化剂。
11.根据权利要求1所述的方法,其中在所述分离步骤(b)之后和在所述任选的稀释步骤(c)之前或在步骤(f)中的所述分离步骤之后,用吸附剂处理所述含水麻类植物蛋白溶液以从含水麻类植物蛋白溶液中去除颜色和/或气味化合物。
12.根据权利要求1所述的方法,其中用约0.1至约10体积的含水稀释剂在步骤(c)或(f)中稀释所述含水麻类植物蛋白溶液,以至低于约105mS的电导率。
13.根据权利要求12所述的方法,其中用约0.5至约2体积的含水稀释剂在步骤(c)或(f)中稀释所述含水麻类植物蛋白溶液,从而为所述麻类植物蛋白溶液提供约4至约21mS的电导率。
14.根据权利要求12所述的方法,其中所述含水稀释剂具有约1℃至约100℃的温度。
15.根据权利要求14所述的方法,其中所述温度为约15℃至约65℃。
16.根据权利要求15所述的方法,其中所述温度为约20℃至约35℃。
17.根据权利要求1所述的方法,其中如果稀释所述酸化的麻类植物蛋白溶液,其具有低于约110mS的导电率,或者如果不稀释,则低于约115mS。
18.根据权利要求17所述的方法,其中所述导电率为约4至约26mS。
19.根据权利要求1所述的方法,其中所述含水麻类植物蛋白溶液的pH在步骤(d)或(f)中调节为pH约2至约4。
20.根据权利要求1所述的方法,其中酸化的麻类植物蛋白溶液经历步骤(e)。
21.根据权利要求1所述的方法,其中干燥所述酸化的含水麻类植物蛋白溶液以提供具有至少约60wt%(N×6.25)d.b.蛋白含量的麻类植物蛋白产品。
22.根据权利要求1所述的方法,其中所述酸化的含水麻类植物蛋白溶液经历步骤(g)以制备具有约50至约300g/L蛋白浓度的浓缩的酸化的麻类植物蛋白溶液。
23.根据权利要求22所述的方法,其中所述浓缩的酸化的含水麻类植物蛋白溶液具有约100至约200g/L的蛋白浓度。
24.根据权利要求22所述的方法,其中通过使用具有约1,000至约1,000,000道尔顿的截留分子量膜的超滤以实施所述浓缩步骤(g)。
25.根据权利要求24所述的方法,其中所述膜具有约1,000至约100,000道尔顿的截留分子量。
26.根据权利要求1所述的方法,其中对酸化的麻类植物蛋白溶液在其部分或完全浓缩之前或之后,使用水、酸化的水、稀释的生理盐水或酸化的稀释的生理盐水以实施所述渗滤步骤(h)。
27.根据权利要求26所述的方法,其中使用约1至约40体积的渗滤溶液以实施所述渗滤步骤(h)。
28.根据权利要求27所述的方法,其中使用约2至约25体积的渗滤溶液以实施所述渗滤步骤(h)。
29.根据权利要求26所述的方法,其中实施所述渗滤步骤(h)直至没有显著的更多量的污染物或可见的颜色存在于渗透液中。
30.根据权利要求26所述的方法,其中实施所述渗滤步骤(h)直至保留物已经足够纯化,以便在干燥时提供蛋白含量为至少约90wt%(N×6.25)d.b.的麻类植物蛋白分离物。
31.根据权利要求26所述的方法,其中使用具有约1,000至约1,000,000道尔顿截留分子量的膜以实施所述渗滤步骤(h)。
32.根据权利要求31所述的方法,其中所述膜具有约1,000至约100,000道尔顿的截留分子量。
33.根据权利要求26所述的方法,其中在至少部分渗滤步骤(h)的过程中,在渗滤介质中存在抗氧化剂。
34.根据权利要求22或权利要求26所述的方法,其中所述浓缩步骤(g)和任选的渗滤步骤(h)在约2℃至约65℃的温度下进行。
35.根据权利要求34所述的方法,其中所述温度为约20℃至约35℃。
36.根据权利要求1所述的方法,其中所述酸化的含水麻类植物蛋白溶液经历步骤(g)和(h)以制备浓缩的和/或渗滤的酸化的麻类植物蛋白溶液,其在干燥时提供蛋白浓度为至少约60wt%(N×6.25)d.b.的麻类植物蛋白产品。
37.根据权利要求22或权利要求26所述的方法,其中用吸附剂处理所述任选地浓缩的和任选地渗滤的酸化的麻类植物蛋白溶液以去除颜色和/或气味化合物。
38.根据权利要求22或权利要求26所述的方法,其中所述任选地浓缩的和任选地渗滤的酸化的麻类植物蛋白溶液在干燥之前用巴氏法灭菌。
39.根据权利要求38所述的方法,其中所述巴氏法灭菌步骤在约55℃至约70℃的温度下实施约30秒至约60分钟。
40.根据权利要求39所述的方法,其中所述巴氏法灭菌步骤在约60℃至约65℃的温度下实施约10至约15分钟。
41.根据权利要求30所述的方法,其中所述任选地浓缩的且渗滤的酸化的麻类植物蛋白溶液经历步骤(i)以提供具有至少约90wt%(N×6.25)d.b.蛋白含量的麻类植物蛋白分离物。
42.根据权利要求41所述的方法,其中所述麻类植物蛋白分离物具有至少约100wt%(N×6.25)d.b.的蛋白含量。
43.一种麻类植物蛋白产品,其具有至少约60wt%(N×6.25)d.b.的蛋白含量,在低于约4.4的酸性pH值下是水溶性的。
44.根据权利要求43所述的麻类植物蛋白产品,其具有至少约90wt%(N×6.25)d.b.的蛋白含量。
45.根据权利要求43所述的蛋白产品,其具有至少约100wt%(N×6.25)d.b.的蛋白含量。
46.根据权利要求43所述的麻类植物蛋白产品,其具有清淡的味道。
47.根据权利要求43所述的麻类植物蛋白产品,其与水溶性粉末材料共混以制备共混物的含水溶液。
48.根据权利要求47所述的共混物,所述共混物是粉末饮料。
49.一种根据权利要求43所述的麻类植物蛋白产品的含水溶液,其具有低于约4.4的pH。
50.根据权利要求49所述的含水溶液,所述含水溶液为饮料。
51.一种根据权利要求43所述的麻类植物蛋白产品的含水溶液,其具有约6至约8的pH。
52.根据权利要求51所述的含水溶液,其为饮料。
53.根据权利要求51所述的含水溶液,其用于制备乳品类似物或乳品替代产品或植物和乳品成分共混物的产品。
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PB01 | Publication | ||
EXSB | Decision made by sipo to initiate substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
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