TW201728267A - 非大豆之含油種子蛋白產品(「*810」)之製備 - Google Patents
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Abstract
本發明係關於非大豆含油種子蛋白產品,其具有極少豆腥、生青、蔬菜或類似風味特徵或不含該等特徵,且可用於食品及飲料產品之營養強化,且在製備製程中不使用鹽。本發明之該等非大豆含油種子蛋白產品係藉由以下獲得:用水提取非大豆含油種子蛋白質來源以形成非大豆含油種子蛋白質水溶液,使該非大豆含油種子蛋白質水溶液與剩餘非大豆含油種子蛋白質來源至少部分地分離,將該非大豆含油種子蛋白質水溶液之pH調節至介於約1.5與較等電沈澱之典型pH低約1個pH單位之值之間的pH,以溶解大部分蛋白質並形成酸化非大豆含油種子蛋白質溶液,然後使該酸化非大豆含油種子蛋白質溶液與酸不溶性固體材料分離。可在可選濃縮及滲濾之後乾燥該酸化非大豆含油種子蛋白質溶液,以形成非大豆含油種子蛋白產品,該產品可為分離物。可用酸化水洗滌該酸不溶性固體材料且然後加以乾燥以形成另一非大豆含油種子蛋白產品。該等產品可在製備其之酸性pH下乾燥或可在乾燥前調節pH。
Description
本發明係關於新穎且發明性非大豆含油種子蛋白產品及製備非大豆含油種子蛋白產品之新穎且發明性方法。
在頒予其受讓人且其揭示內容係以引用方式併入本文中之於2015年8月27日申請之美國專利申請案第14/836,864號(2016年3月3日公開之美國專利公開案第2016-0058031號)中,闡述製備具有極少豆腥味特徵或實質上不含豆腥味特徵之新穎且發明性大豆蛋白產品之程序,及用於其製備之新穎且發明性方法,該等方法不包括在自蛋白質來源材料提取蛋白質中或在任何其他製程步驟中直接添加及使用鈣鹽或其他鹽。
本發明係關於不同於大豆蛋白產品且具有極少豆腥、生青、蔬菜或其他類似異常風味特徵或實質上不含該等特徵之新穎且發明性含油種子蛋白產品,及用於其製備之新穎且發明性方法,該等方法不包括在自含油種子蛋白質來源材料提取含油種子蛋白質中或在任何其他製程步驟中直接添加及使用鈣鹽或其他鹽。 因此,在本發明之一個態樣中,提供產生在乾燥基礎上具有至少約60 wt%、較佳至少約90 wt% (N × 6.25)之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白產品之方法,該方法包含: (a)用水提取非大豆含油種子蛋白質來源以自該蛋白質來源溶解含油種子蛋白質且形成非大豆含油種子蛋白質水溶液, (b)使非大豆含油種子蛋白質水溶液與剩餘非大豆含油種子蛋白質來源至少部分地分離, (c)將非大豆含油種子蛋白質水溶液之pH調節至介於約1.5與較等電沈澱之典型pH低約1個pH單位之值之間以產生酸化非大豆含油種子蛋白質溶液, (d)使酸不溶性固體材料與酸化非大豆含油種子蛋白質溶液分離, (e)視情況藉由選擇性膜技術濃縮酸化非大豆含油種子蛋白質溶液, (f)視情況滲濾視情況濃縮之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液, (g)視情況乾燥視情況經濃縮且視情況經滲濾之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液。 在本發明之實施例中,當在低pH下製備時,本發明之非大豆含油種子蛋白產品非常適合用於具有低pH之食品應用中。 在本發明之實施例中,在可選乾燥步驟前使酸化非大豆含油種子蛋白質溶液或視情況經濃縮且視情況經滲濾之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液之pH升高至小於約8.0之值。在本發明之另一實施例中,在可選乾燥步驟之前,使酸化非大豆含油種子蛋白質溶液或視情況經濃縮且視情況經滲濾之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液之pH升高至約6.0至約8.0。在本發明之另一實施例中,在可選乾燥步驟之前,使酸化非大豆含油種子蛋白質溶液或視情況經濃縮且視情況經滲濾之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液之pH升高至約6.5至約7.5。 在本發明之實施例中,當提供具有中性或近中性pH之非大豆含油種子蛋白產品時,其係呈適於用於中性或近中性食品應用(例如中性飲料或酒吧)中之形式。 在本發明之實施例中,進一步處理由本發明製程產生且如上述步驟(d)中所闡述收集之酸不溶性固體材料以提供另一非大豆含油種子蛋白產品。與源於酸化非大豆含油種子蛋白質溶液之產品相比,此產品通常可具有更低純度及更高量之異常風味特徵。然而,源於酸不溶性固體材料之產品之純度及風味應使得其仍適用於食品及飲料應用。 在本發明之實施例中,視情況稀釋酸不溶性固體材料,然後視情況乾燥以形成基於乾重具有至少約60 wt% (N × 6.25)之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白產品。 在本發明之實施例中,視情況稀釋酸不溶性固體材料且然後在可選乾燥步驟之前使pH升高至小於約8.0之值。在本發明之另一實施例中,在可選乾燥步驟之前,使視情況經稀釋之酸不溶性材料之pH升高至約6.0至約8.0。在本發明之另一實施例中,在可選乾燥步驟之前,使視情況經稀釋之酸不溶性材料之pH升高至約6.5至約7.5。 在本發明之實施例中,藉由與約1體積至約20體積水混合來洗滌酸不溶性固體材料,該水含有食品級酸以將該水調節至選自由約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個pH單位之值組成之群且與酸不溶性固體材料之pH大致相同的pH,然後在可選稀釋及可選乾燥步驟之前與洗滌水分離。在本發明之另一實施例中,藉由與約1體積至約10體積之水混合來洗滌酸不溶性固體材料,該水含有食品級酸以將該水調節至選自由約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個pH單位之值組成之群且與酸不溶性固體材料之pH大致相同的pH,然後在可選稀釋及可選乾燥步驟之前與洗滌水分離。 在本發明之實施例中,在可選乾燥步驟之前,使視情況經稀釋之經洗滌酸不溶性固體材料之pH升高至小於約8.0之值。在本發明之另一實施例中,在可選乾燥步驟之前,使視情況經稀釋之經洗滌酸不溶性固體材料之pH升高至約6.0至約8.0。在本發明之另一實施例中,在可選乾燥步驟之前,使視情況經稀釋之經洗滌酸不溶性固體材料之pH升高至約6.5至約7.5。 在本發明之實施例中,將洗滌水與分離步驟(d)之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液合併並如步驟(e)、(f)及/或(g)中進行處理。 在本發明之實施例中,藉由將酸不溶性固體材料與約1體積至約20體積水及足夠的食品級鹼混合以使pH升高至期望值(例如選自小於約8.0且介於約5.0與約8.0之間之群之值),同時洗滌酸不溶性固體材料並調節其pH,然後在可選稀釋及可選乾燥步驟之前與洗滌水分離。在本發明之另一實施例中,藉由將酸不溶性固體材料與約1體積至約10體積水及足夠的食品級鹼混合以使pH升高至期望值(例如選自小於約8.0及介於約5.0與約8.0之間之群之值),同時洗滌酸不溶性固體材料並調節其pH,然後在可選稀釋及可選乾燥步驟之前與洗滌水分離。在本發明之另一實施例中,可視情況稀釋經分離之經洗滌及pH調節之酸不溶性固體材料且使pH進一步升高至選自小於約8.0、介於約6.0與約8.0之間及介於約6.5與約7.5之間之群之值,且然後視情況乾燥。 在本發明之實施例中,在乾燥前對視情況經稀釋、視情況經洗滌及視情況pH調節之酸不溶性固體材料進行巴氏殺菌(pasteurized)。 在本發明之實施例中,巴氏殺菌步驟係在約55℃至約85℃之溫度下實現並保持約10秒至約60分鐘。在本發明之另一實施例中,巴氏殺菌步驟係在約60℃至約70℃之溫度下實現並保持約10分鐘至約60分鐘。在本發明之另一實施例中,巴氏殺菌步驟係在約70℃至約85℃之溫度下實現並保持約10秒至約60秒。 在本發明之實施例中,提取步驟(a)係在約1℃至約100℃之溫度下實現。在本發明之另一實施例中,提取步驟(a)係在約15℃至約65℃之溫度下實現。在本發明之另一實施例中,提取步驟(a)係在約50℃至約60℃之溫度下實現。 在本發明之實施例中,用於提取之水含有pH調節劑使得提取在約6至約11之pH下實施。在本發明之另一實施例中,用於提取之水含有pH調節劑使得提取在約7至約8.5之pH下實施。在本發明之另一實施例中,pH調節劑係氫氧化鈉、氫氧化鉀或任何其他習用食品級鹼及其組合。 在本發明之實施例中,用於提取之水含有抗氧化劑。 在本發明之實施例中,由分離步驟(b)產生之非大豆含油種子蛋白質水溶液具有約5g/L至約50 g/L之蛋白質濃度。在本發明之另一實施例中,非大豆含油種子蛋白質水溶液具有約10g/L至約50 g/L之蛋白質濃度。 在本發明之實施例中,在分離步驟(b)之後且在酸化步驟(c)之前,用吸附劑處理非大豆含油種子蛋白質水溶液以自蛋白質水溶液去除色彩及/或氣味化合物。 在本發明之實施例中,在分離步驟(b)之後且在酸化步驟(c)之前,可視情況將非大豆含油種子蛋白質水溶液之溫度調節至約1℃至約35℃。在另一實施例中,可視情況將非大豆含油種子蛋白質水溶液之溫度調節至約15℃至約35℃。 在本發明之實施例中,在酸化步驟(c)中將該非大豆含油種子蛋白質水溶液之pH調節至約2.0至約2.5。 在本發明之實施例中,分離步驟(d)由離心步驟及/或過濾步驟組成。 在本發明之實施例中,使分離步驟(d)之後之酸化蛋白質水溶液經受熱處理步驟。在本發明之實施例中,進行熱處理步驟以去活化不耐熱性抗營養因子。在本發明之實施例中,抗營養因子係不耐熱性胰蛋白酶抑制劑。在本發明之另一實施例中,實現熱處理步驟以對酸化蛋白質水溶液進行巴氏殺菌。 在本發明之實施例中,熱處理係在約70℃至約160℃之溫度下實現並保持約10秒至約60分鐘。在本發明之另一實施例中,熱處理係在約80℃至約120℃之溫度下實現並保持約10秒至約5分鐘。在本發明之另一實施例中,熱處理係在約85℃至約95℃之溫度下實現並保持約30秒至約5分鐘。 在本發明之實施例中,使非大豆含油種子蛋白質溶液冷卻至約2℃至約65℃之溫度。在本發明之另一實施例中,使熱處理之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液冷卻至約50℃至約60℃之溫度。 在本發明之實施例中,乾燥經酸化非大豆含油種子蛋白質水溶液以提供具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白產品。 在本發明之實施例中,使經酸化非大豆含油種子蛋白質水溶液經受濃縮步驟(e)。在本發明之另一實施例中,使經酸化非大豆含油種子蛋白質水溶液經受濃縮步驟(e)以產生具有約50 g/L至約300 g/L之蛋白質濃度之經濃縮之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液。 在本發明之另一實施例中,使經酸化非大豆含油種子蛋白質水溶液經受濃縮步驟(e)以產生具有約100 g/L至約200 g/L之蛋白質濃度之經濃縮之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液。 在本發明之實施例中,濃縮步驟(e)係藉由使用具有約1,000道爾頓(dalton)至約1,000,000道爾頓之分子量截止值之膜進行超濾來實現。在本發明之另一實施例中,濃縮步驟(e)係藉由使用具有約1,000道爾頓至約100,000道爾頓之分子量截止值之膜進行超濾來實現。 在本發明之實施例中,使酸化非大豆含油種子蛋白質溶液經受滲濾步驟(f)。在本發明之實施例中,滲濾步驟(f)係針對經酸化非大豆含油種子蛋白質水溶液在不存在濃縮步驟(e)下或在其部分或完全濃縮之前或之後使用水或酸化水來實現。 在本發明之實施例中,滲濾步驟(f)係使用約1體積至約40體積滲濾溶液來實現。在本發明之另一實施例中,滲濾步驟(f)係使用約2體積至約25體積滲濾溶液來實現。 在本發明之實施例中,進行滲濾步驟(f)直至滲透物中不存在其他顯著量之污染物或可見色彩為止。 在本發明之實施例中,進行滲濾步驟(f)直至滲餘物已充分純化以便提供具有至少約90 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白質分離物為止。 在本發明之實施例中,滲濾步驟(f)係使用具有約1,000道爾頓至約1,000,000道爾頓之分子量截止值之膜來實現。在本發明之另一實施例中,滲濾步驟(f)係使用具有約1,000道爾頓至約100,000道爾頓之分子量截止值之膜來實現。 在本發明之實施例中,抗氧化劑係在滲濾步驟(f)之至少一部分期間存在於滲濾介質中。 在本發明之實施例中,濃縮步驟(e)及/或滲濾步驟(f)係在約2℃至約65℃之溫度下實施。在本發明之另一實施例中,濃縮步驟(e)及/或滲濾步驟(f)係在約50℃至約60℃之溫度下實施。 在本發明之實施例中,使視情況部分地或完全地經濃縮且視情況經滲濾之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液經受熱處理步驟。在本發明之實施例中,進行熱處理步驟以去活化不耐熱性抗營養因子。在本發明之實施例中,抗營養因子係不耐熱性胰蛋白酶抑制劑。 在本發明之實施例中,熱處理係在約70℃至約160℃之溫度下實現並保持約10秒至約60分鐘。在本發明之另一實施例中,熱處理係在約80℃至約120℃之溫度下實現並保持約10秒至約5分鐘。在本發明之另一實施例中,熱處理係在約85℃至約95℃之溫度下實現並保持約30秒至約5分鐘。 在本發明之實施例中,使熱處理非大豆含油種子蛋白質溶液冷卻至約2℃至約65℃之溫度。在本發明之另一實施例中,使熱處理非大豆含油種子蛋白質溶液冷卻至約50℃至約60℃之溫度。 在本發明之實施例中,用吸附劑處理視情況經濃縮且視情況經滲濾之酸化蛋白質溶液以去除色彩及/或氣味化合物。 在本發明之實施例中,在乾燥前對視情況經濃縮且視情況經滲濾之酸化蛋白質溶液進行巴氏殺菌。 在本發明之實施例中,巴氏殺菌步驟係在約55℃至約85℃之溫度下實現並保持約10秒至約60分鐘。在本發明之另一實施例中,巴氏殺菌步驟係在約60℃至約70℃之溫度下實現並保持約10分鐘至約60分鐘。在本發明之另一實施例中,巴氏殺菌步驟係在約70℃至約85℃之溫度下實現並保持約10秒至約60秒。 在本發明之實施例中,使視情況經濃縮且視情況經滲濾之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液經受乾燥步驟(g),得到具有至少約90 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白質分離物。申請者已鑑別此非大豆含油種子蛋白質分離物為*810,其中星號代表含油種子類型之縮寫,例如C代表芥花,SF代表向日葵,H代表大麻等。 在本發明之實施例中,在可選乾燥步驟(g)之前,使視情況經濃縮且視情況經滲濾之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液之pH升高至小於約8.0之值。在本發明之另一實施例中,在可選乾燥步驟(g)之前,使視情況經濃縮且視情況經滲濾之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液之pH升高至約6.0至約8.0。在本發明之另一實施例中,在可選乾燥步驟(g)之前,使視情況經濃縮且視情況經滲濾之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液之pH升高至約6.5至約7.5。 在本發明之實施例中,可選濃縮及/或可選滲濾步驟係以有利於胰蛋白酶抑制劑去除之方式操作。 在本發明之實施例中,在提取步驟(a)期間存在還原劑。在本發明之實施例中,還原劑係選自由亞硫酸鈉、半胱胺酸、N-乙醯基半胱胺酸及其組合組成之群。在本發明之實施例中,還原劑之存在意欲使胰蛋白酶抑制劑之二硫鍵斷裂或重排以達成胰蛋白酶抑制劑活性之降低。在本發明之另一實施例中,在可選濃縮步驟(e)及/或可選滲濾步驟(f)期間存在還原劑。在本發明之實施例中,還原劑係選自由亞硫酸鈉、半胱胺酸、N-乙醯基半胱胺酸及其組合組成之群。在本發明之實施例中,還原劑之存在意欲使胰蛋白酶抑制劑之二硫鍵斷裂或重排以達成胰蛋白酶抑制劑活性之降低。 在本發明之另一實施例中,在乾燥步驟(g)之前將還原劑添加至視情況經濃縮且視情況經滲濾之非大豆含油種子蛋白質溶液中及/或至經乾燥非大豆含油種子蛋白產品中。在本發明之實施例中,還原劑係選自由亞硫酸鈉、半胱胺酸、N-乙醯基半胱胺酸及其組合組成之群。在本發明之實施例中,還原劑之存在意欲使胰蛋白酶抑制劑之二硫鍵斷裂或重排以達成胰蛋白酶抑制劑活性之降低。 在本發明之另一實施例中,提供經調配而含有本發明之非大豆含油種子蛋白產品之食品產品。在本發明之實施例中,食品產品係飲料。 本文所揭示之根據本發明製程產生之非大豆含油種子蛋白產品適用於蛋白產品之眾多習用應用中,包括(但不限於)經處理食品及飲料之蛋白質之營養強化及作為食品及飲料中之功能成份。本發明之非豆類含油種子蛋白產品之其他用途為寵物食品、動物飼料以及工業及化妝品應用及個人護理產品。
提供本發明之非大豆含油種子蛋白產品之製程之初始步驟涉及自非大豆含油種子蛋白質來源溶解含油種子蛋白質。非大豆含油種子蛋白質來源可為除大豆以外之任一含油種子,包括(但不限於)芥花、向日葵、大麻、紅花、棉籽、亞麻、芝麻、芥菜及花生或源於非大豆含油種子處理之任一含油種子產物或副產物,包括(但不限於)來自含油種子去殼之外殼部分、含油種子粕及源於含油種子粕之蛋白產品。非大豆含油種子蛋白質來源可以全脂肪形式、部分脫脂形式或完全脫脂形式使用。倘若非大豆含油種子蛋白質來源含有可用用量之脫脂,則在製程期間通常需要除油步驟。自非大豆含油種子蛋白質來源回收之非大豆含油種子蛋白質可為含油種子中天然存在之蛋白質,或蛋白質性材料可為經遺傳操縱改質但具有天然蛋白質之特徵性疏水及極性特性之蛋白質。 本發明之非大豆含油種子蛋白產品可自非大豆含油種子蛋白質來源藉由分批製程或連續製程或半連續製程來製備。自非大豆含油種子蛋白質來源材料溶解蛋白質係使用水實現。所用水可為自來水或具有不同純度等級之水。較佳者係逆滲透(RO)純化水。 提取之pH可為約6至約11,較佳約7.0至約8.5。若需要可將食品級氫氧化鈉、氫氧化鉀或任何其他習用食品級鹼及其組合添加至水中來調節提取之pH。提取pH之選擇受所處理非大豆含油種子之類型之影響。對於富含酚醛樹脂之非大豆含油種子蛋白質來源(例如芥花及向日葵)而言,較低提取pH值較佳。蛋白質之溶解係在約1℃至約100℃、較佳約15℃至約65℃、更佳約50℃至約60℃之溫度下實現,較佳伴有攪動以減少溶解時間,該溶解時間通常為約1分鐘至約60分鐘。較佳實現溶解以在可行的情況下自非大豆含油種子蛋白質來源提取實質上儘可能多的蛋白質,以便提供總體較高之產品產率。 自非大豆含油種子蛋白質來源提取蛋白質在以連續操作實施時係以與自非大豆含油種子蛋白質來源連續提取蛋白質一致之方式來實施。在一實施例中,將非大豆含油種子蛋白質來源與水連續混合,且藉助具有一定長度及一定流速之管道或導管經根據本文所闡述之參數足以實現期望提取之滯留時間來輸送混合物。 在溶解步驟期間水中非大豆含油種子蛋白質來源之濃度可廣泛變化。典型濃度值為約5 w/v%至約15 w/v%。 蛋白質提取步驟具有促使可能存在於非大豆含油種子蛋白質來源中之脂肪溶解之額外效應,此然後使得脂肪存在於水相中。 源自提取步驟之蛋白質溶液通常具有約5 g/L至約50 g/L、較佳約10 g/L至約50 g/L之蛋白質濃度。 提取之水可含有抗氧化劑。抗氧化劑可為任何習用抗氧化劑,例如亞硫酸鈉或抗壞血酸。所採用抗氧化劑之量可自佔溶液之約0.01 wt%至約1 wt%變化,較佳為約0.05 wt%。抗氧化劑可用於抑制蛋白質溶液中之酚醛樹脂之氧化。 然後可藉由(例如)使用傾析式離心以任一習用方式使得自提取步驟之水相與大部分剩餘非大豆含油種子蛋白質來源分離。較佳地,較細的剩餘非大豆含油種子蛋白質來源材料留於非大豆含油種子蛋白質溶液中,但若期望,可以任一習用方式(例如藉由盤式離心及/或過濾)去除該等較細的固體。分離步驟可在與提取步驟相同之溫度下或在約1℃至約100℃、較佳約15℃至約65℃,更佳約50℃至約60℃之範圍內之任一溫度下實施。可乾燥經分離之剩餘非大豆含油種子蛋白質來源材料用於處置或進一步處理以(例如)回收剩餘蛋白質。可藉由利用淡水再提取經分離之剩餘非大豆含油種子蛋白質來源來回收剩餘蛋白質,且將在澄清後產生之蛋白質溶液與初始蛋白質溶液合併用於進一步處理,如下文所闡述。亦可利用逆流提取程序。或者可藉由任何其他習用程序處理經分離之剩餘非大豆含油種子蛋白質來源來回收剩餘蛋白質。 可用消泡劑(例如任何適宜食品級、基於非聚矽氧之消泡劑)處理非大豆含油種子蛋白質水溶液,以減小在進一步處理後形成之泡沫之體積。所用消泡劑之量通常大於約0.0003 w/v%。或者,可在提取步驟中添加所闡述量之消泡劑。 若期望或需要,可使經分離之非大豆含油種子蛋白質水溶液經受脫脂操作。經分離非大豆含油種子蛋白質水溶液之脫脂可藉由任一習用程序達成。 可用吸附劑(例如經造粒活性碳)處理非大豆含油種子蛋白質水溶液來去除色彩及/或氣味化合物。可在任何習用條件下、通常在經分離蛋白質水溶液之環境溫度下實施該吸附劑處理。 然後將非大豆含油種子蛋白質溶液之pH調節至介於約1.5與較通常實施等電沈澱之pH低約1個單位之值之間的值。由於在不同的非大豆含油種子之間通常實施等電沈澱之pH有所變化,酸化步驟之pH範圍隨非大豆含油種子蛋白質來源而變化。當將該製程應用於芥花時,將pH調節至介於約1.5與約2.5之間之值。當將該製程應用於向日葵時,將pH調節至介於約1.5與約3.5之間之值。當將該製程應用於大麻時,將pH調節至介於約1.5與約4.0之間之值。當將該製程應用於棉籽時,將pH調節至介於約1.5與約3.0之間之值。當將該製程應用於亞麻/亞麻仁時,將pH調節至介於約1.5與約3.0之間之值。當將該製程應用於紅花時,將pH調節至介於約1.5與約4.0之間之值。當將該製程應用於芝麻時,將pH調節至介於約1.5與約3.0之間之值。當將該製程應用於芥菜時,將pH調節至介於約1.5與約4.0之間之值。當將該製程應用於花生時,將pH調節至介於約1.5與約3.5之間之值。在所有情形下,較佳將非大豆含油種子蛋白質溶液之pH調節至約2.0至約2.5。pH調節係藉由添加任何習用食品級酸(例如鹽酸、磷酸或任何其他習用食品級酸及其組合)來達成。 藉由在本發明製程中將pH調節至較低值,較大部分之蛋白質、較佳顯著部分之蛋白質、較佳約60 wt%或更多、更佳約80 wt%或更多的蛋白質可溶於酸化溶液中。pH調節可在非大豆含油種子蛋白質溶液之溫度下進行,或可在pH調節前將非大豆含油種子蛋白質溶液之溫度調節至(例如)約15℃至約35℃。若期望,可如上文所闡述在酸化步驟之前用水稀釋非大豆含油種子蛋白質溶液。 不可溶於酸化蛋白質溶液中之蛋白質含於所謂的酸不溶性固體材料中,藉由任一習用方式(例如使用疊盤式離心)自酸化非大豆含油種子蛋白質溶液將該蛋白質去除,且如下文所闡述進行進一步處理。然後可藉由任一習用方式(例如使用壓濾機或藉由微濾)過濾酸化蛋白質溶液以去除在離心步驟後仍留於酸化蛋白質溶液中之任一微細酸不溶性固體材料。應用過濾步驟亦可降低酸化蛋白質溶液中之脂肪含量。 若期望,可在進一步處理前進一步降低酸化蛋白質溶液之pH。酸化蛋白質溶液之經調節pH應仍在上文所闡述之約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個單位之值、較佳約2.0至約2.5之範圍內。 由於在提取步驟期間自非大豆含油種子蛋白質來源材料提取,故可使經酸化之非大豆含油種子蛋白質水溶液經受熱處理以去活化存在於該溶液中之不耐熱性抗營養因子,該抗營養因子可包括胰蛋白酶抑制劑。此一加熱步驟亦提供降低微生物載量之額外益處。通常,將蛋白質溶液加熱至約70℃至約160℃、較佳約80℃至約120℃、更佳約85℃至約95℃之溫度並保持約10秒至約60分鐘、較佳約10秒至約5分鐘、更佳約30秒至約5分鐘。然後可使熱處理之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液冷卻至約2℃至約65℃、較佳約50℃至約60℃之溫度,以如下文所闡述進行進一步處理。 可直接乾燥所得酸化大豆蛋白質水溶液以產生非大豆含油種子蛋白產品。為提供具有降低之雜質含量之非大豆含油種子蛋白產品(例如非大豆含油種子蛋白質分離物),可在乾燥前如下文所闡述來處理經酸化之非大豆含油種子蛋白質水溶液。亦相信如下文所闡述之進一步處理對產品之風味具有有益效應。 可濃縮經酸化之非大豆含油種子蛋白質水溶液以提供具有約50 g/L至約300 g/L、較佳約100 g/L至約200 g/L之蛋白質濃度之經濃縮非大豆含油種子蛋白質溶液。 濃縮步驟可以與分批或連續操作一致之任一習用方式來實現,例如藉由使用任一習用選擇性膜技術(例如超濾或滲濾)使用具有適宜分子量截止值(例如約1,000道爾頓至約1,000,000道爾頓,較佳約1,000道爾頓至約100,000道爾頓)之膜(例如中空纖維膜或螺旋纏繞型膜)來實現,其中慮及區分膜材料及構形,且對於連續操作經定尺寸以在蛋白質水溶液穿過膜時允許期望之濃縮程度。 如人們熟知,超濾及類似選擇性膜技術允許低分子量物質穿過其同時防止較高分子量物質穿過其。低分子量物質包括自來源材料提取之低分子量材料,例如碳水化合物、顏料、低分子量蛋白質及本身為低分子量蛋白質之抗營養因子(例如胰蛋白酶抑制劑)。通常選擇膜之分子量截止值以確保顯著部分之蛋白質滯留於溶液中,同時考慮到不同的膜材料及構形允許污染物穿過。 然後可使經濃縮非大豆含油種子蛋白質溶液經受使用水之滲濾步驟。滲濾水之pH較佳等於所滲濾蛋白質溶液之pH。該滲濾可使用約1體積至約40體積滲濾溶液、較佳約2體積至約25體積滲濾溶液來實現。在滲濾操作中,其他量之污染物係藉由與滲透物一起穿過膜而自非大豆含油種子蛋白質水溶液去除。此純化蛋白質水溶液且亦可降低其黏度。可進行滲濾操作直至滲透物中不存在其他顯著量之污染物或可見色彩為止或直至滲餘物經充分純化以便提供具有至少約90 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白質分離物為止。該滲濾可使用與濃縮步驟相同之膜來實現。然而,若期望,考慮到不同的膜材料及構形可使用具有不同分子量截止值之單獨膜(例如分子量截止值在約1,000道爾頓至約1,000,000道爾頓、較佳約1,000道爾頓至約100,000道爾頓範圍內之膜)實現滲濾步驟。 或者,可在濃縮前將滲濾步驟應用至酸化蛋白質水溶液或應用至部分地濃縮之酸化蛋白質水溶液。亦可在濃縮製程期間之多個點應用滲濾。當在濃縮前應用滲濾或應用至部分地濃縮之溶液時,然後可額外濃縮所得經滲濾溶液。在濃縮蛋白質溶液時滲濾多次可容許達成最終較高、完全濃縮之蛋白質濃度。此降低欲乾燥材料之體積。 濃縮步驟及滲濾步驟在本文中可以隨後回收之非大豆含油種子蛋白產品含有小於約90 wt%蛋白質(N × 6.25) d.b.(例如至少約60 wt%蛋白質(N × 6.25) d.b.)之方式來實現。藉由部分地濃縮及/或部分地滲濾非大豆含油種子蛋白質水溶液,可僅部分地去除污染物。然後可乾燥此蛋白質溶液以提供具有較低純度等級之非大豆含油種子蛋白產品。 在滲濾步驟之至少一部分期間在滲濾水中可存在抗氧化劑。抗氧化劑可為任何習用抗氧化劑,例如亞硫酸鈉或抗壞血酸。滲濾水中所使用之抗氧化劑之量取決於所用材料且可自約0.01至約1 wt%、較佳約0.05 wt%變化。抗氧化劑可用於抑制存在於非大豆含油種子蛋白質溶液中之酚醛樹脂之氧化。 可在任一習用溫度(通常約2℃至約65℃、較佳約50℃至約60℃)下進行可選濃縮步驟及可選滲濾步驟並保持一定時間段以實現期望之濃縮及滲濾程度。所使用之溫度及其他條件在一定程度上取決於用於實現膜處理之膜設備、溶液之期望蛋白質濃度及去除滲透物之污染物之效率。 如前所述,非大豆含油種子可含有抗營養胰蛋白酶抑制劑。可藉由操縱各種製程變量來控制最終非大豆含油種子蛋白產品中胰蛋白酶抑制劑活性之程度。 如上所述,可使用經酸化非大豆含油種子蛋白質水溶液之熱處理來去活化不耐熱性胰蛋白酶抑制劑。亦可熱處理部分地濃縮或完全地濃縮之經酸化非大豆含油種子蛋白質溶液來去活化不耐熱性胰蛋白酶抑制劑。當將熱處理應用至部分地濃縮之經酸化非大豆含油種子蛋白質溶液時,然後可額外濃縮所得熱處理溶液。 另外,可以有利於去除滲透物中之胰蛋白酶抑制劑以及其他污染物之方式操作濃縮及/或滲濾步驟。胰蛋白酶抑制劑之去除可藉由以下來促進:使用較大孔徑(例如30,000至1,000,000 Da)之膜、在升高之溫度(例如約30℃至約65℃、較佳約50℃至約60℃)下操作膜及使用較大體積(例如10至40體積)之滲濾介質。 相對於在較高pH (例如2.5至4.0)下處理溶液,在較低pH(例如1.5至2.5)下酸化及膜處理非大豆含油種子蛋白質溶液可降低胰蛋白酶抑制劑活性。當在pH範圍之低端濃縮及/或滲濾蛋白質溶液時,可能期望在乾燥前升高溶液之pH。可藉由添加任何習用食品級鹼(例如氫氧化鈉、氫氧化鉀及其組合)使經濃縮及/或滲濾蛋白質溶液之pH升高至期望值(例如pH 3)。 另外,可藉由使非大豆含油種子材料暴露於斷裂或重排抑制劑之二硫鍵之還原劑降低胰蛋白酶抑制劑活性。適宜還原劑包括亞硫酸鈉、半胱胺酸、N-乙醯基半胱胺酸、任何其他習用還原劑及其組合。 該等還原劑之添加可在整體製程之各個階段實現。還原劑可在提取步驟中與非大豆含油種子蛋白質來源材料一起添加,可在去除剩餘非大豆含油種子蛋白質來源材料之後添加至非大豆含油種子蛋白質水溶液中,可在乾燥之前添加至經滲濾滲餘物中,或可與經乾燥非大豆含油種子蛋白產品乾燥摻和。還原劑之添加可與熱處理步驟及膜處理步驟組合,如上文所闡述。 若期望在蛋白質溶液中保持活性胰蛋白酶抑制劑,則此可藉由以下來達成:消除或降低熱處理步驟之強度、不利用還原劑、在pH範圍(例如2.5至4.0)之較高端下操作可選濃縮及可選滲濾步驟、利用具有較小孔徑之濃縮及滲濾膜、在較低溫度下操作膜及使用較少體積滲濾介質。 若需要,可使視情況經濃縮且視情況經滲濾之蛋白質溶液經受另一脫脂操作。可藉由任一習用程序達成視情況經濃縮且視情況經滲濾之蛋白質溶液之脫脂。 可用吸附劑(例如經造粒活性碳)處理視情況經濃縮且視情況經滲濾之酸化蛋白質水溶液來去除色彩及/或氣味化合物。該吸附劑處理可在任一習用條件下、通常在蛋白質溶液之環境溫度下實施。 可在乾燥或進一步處理之前對視情況經濃縮且視情況經滲濾之非大豆含油種子蛋白質水溶液進行巴氏殺菌。該巴氏殺菌可在任何習用巴氏殺菌條件下實現。通常,將視情況經濃縮且視情況經滲濾之非大豆含油種子蛋白質溶液加熱至約55℃至約85℃之溫度並保持約10秒至約60分鐘、較佳約60℃至約70℃並保持約10分鐘至約60分鐘或約70℃至約85℃並保持約10秒至約60秒。可使經巴氏殺菌之非大豆含油種子蛋白質溶液然後冷卻至(例如)約20℃至約35℃之溫度。 然後可藉由任一習用方式(例如噴霧乾燥或冷凍乾燥)乾燥視情況經濃縮、視情況經滲濾及視情況經巴氏殺菌之非大豆含油種子蛋白質溶液,以提供非大豆含油種子蛋白產品。或者,可在可選乾燥之前使視情況經濃縮、視情況經滲濾及視情況經巴氏殺菌之非大豆含油種子蛋白質溶液之pH升高至小於約8.0之值,較佳約6.0至約8.0,更佳約6.5至約7.5。可以任一習用方式、例如藉由添加氫氧化鈉、氫氧化鉀或任何其他習用食品級鹼溶液及其組合升高pH。若在pH調節之前未對蛋白質溶液進行巴氏殺菌,則可在pH調節之後使用上文所闡述之條件實施巴氏殺菌。 非大豆含油種子蛋白產品(在可選乾燥前進行或不進行pH調節步驟來製備)具有大於約60 wt% d.b.之蛋白質含量。較佳地,非大豆含油種子蛋白產品係具有超過約90 wt%蛋白質(N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之分離物。 根據本發明之另一態樣,可視情況用RO水稀釋在將非大豆含油種子蛋白質溶液之pH調節至約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個單位之值、較佳約2.0至約2.5之範圍之後獲得的酸不溶性固體材料,然後視情況將其乾燥以形成具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白產品。或者,可在可選乾燥之前藉由任一方式、例如藉由添加氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀或任何其他習用食品級鹼溶液及其組合使視情況經稀釋之酸不溶性固體材料之pH升高至小於約8.0之值,較佳約6.0至約8.0,更佳約6.5至約7.5,以形成具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白產品。 較佳地,洗滌酸不溶性固體材料以便去除污染物並改良產品之純度及風味。可藉由將固體懸浮於介於約1體積與約20體積之間、較佳約1體積至約10體積之含有食品級酸之RO水中來洗滌酸不溶性固體材料,以將水調節至在約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個單位之值之範圍內且較佳匹配酸不溶性固體材料之pH的pH。洗滌步驟可在任一習用溫度(例如約15℃至約35℃)下實施。將酸不溶性固體材料與洗滌溶液混合任一習用時長,較佳15分鐘或更短。然後可藉由任一習用方式(例如藉由使用疊盤式離心進行離心)使經洗滌酸不溶性固體材料與洗滌水分離。可將洗滌水添加至酸化蛋白質溶液中以如上文所論述進行進一步處理。可視情況用RO水稀釋經洗滌酸不溶性固體材料,然後視情況藉由任一習用方式(例如噴霧乾燥或冷凍乾燥)進行乾燥,以提供具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白產品。或者,可在可選乾燥之前藉由任一習用方式(例如藉由添加氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液或任何其他習用食品級鹼溶液及其組合)使視情況經稀釋之經洗滌酸不溶性固體材料之pH升高至小於約8.0之值,較佳約6.0至約8.0,更佳約6.5至約7.5。 作為另一替代,可同時進行酸不溶性固體材料之洗滌及pH調節。初始可將酸不溶性固體材料懸浮於介於約1體積與約20體積之間、較佳約1體積至約10體積之RO水中,且然後藉由任一習用方式(例如藉由添加氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液或任何其他習用食品級鹼溶液及其組合)使懸浮固體之pH升高至小於約8.0之值,較佳約5.0至約8.0。將酸不溶性固體材料與洗滌溶液混合任一習用時長,較佳15分鐘或更短。然後可藉由任一習用方式(例如藉由使用疊盤式離心進行離心)使同時經洗滌及pH調節之固體材料與洗滌溶液分離。可棄去或藉由任一習用方式進一步處理洗滌溶液以回收額外蛋白質。可視情況用RO水稀釋同時經洗滌及pH調節之酸不溶性固體材料,然後視情況藉由任一習用方式(例如噴霧乾燥或冷凍乾燥)進行乾燥以提供具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白產品。或者,可視情況用RO水稀釋同時經洗滌及pH調節之酸不溶性固體材料,然後使pH進一步升高至小於約8.0之值,較佳介於約6.0與約8.0之間且更佳介於約6.5與約7.5之間,且然後視情況進行乾燥。 與藉由處理酸可溶性蛋白質部分製備之產品相比,源於酸不溶性固體材料之產品之風味之豆腥、生青、蔬菜或類似特徵通常可能更高。然而,源於酸不溶性固體材料之產品之風味使得該產品適用於食品及飲料應用。 可在可選乾燥步驟之前對視情況經稀釋之酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之經洗滌酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之經洗滌及pH調節之酸不溶性固體材料使用巴氏殺菌步驟。該巴氏殺菌可在任何習用巴氏殺菌條件下實現。通常,視情況經稀釋之酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之經洗滌酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之經洗滌及pH調節之酸不溶性固體材料加熱至約55℃至約85℃之溫度並保持約10秒至約60分鐘、較佳約60℃至約70℃並保持約10分鐘至約60分鐘或約70℃至約85℃並保持約10秒至約60秒。然後可使經巴氏殺菌之視情況經稀釋之酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之經洗滌酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之經洗滌及pH調節之酸不溶性固體材料冷卻至(例如)約20℃至約35℃之溫度。若在pH調節之前未對視情況經稀釋之酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之經洗滌酸不溶性固體材料進行巴氏殺菌,則可在pH調節之後使用上文所闡述之條件實施巴氏殺菌。可在上文所闡述之另一pH調節步驟之後視情況對同時經洗滌及pH調節之酸不溶性固體材料進行巴氏殺菌。本發明之態樣之闡述
現參考圖1,其顯示本發明之一個態樣之製程10,在12處使非大豆含油種子蛋白質來源在約6至約11、較佳約7.0至約8.5之pH下經受水之初始提取。然後在14處藉由去除剩餘非大豆含油種子蛋白質來源使蛋白質提取溶液完全或部分地澄清,且在16處收集經去除固體。然後在20處將蛋白質提取溶液18之pH調節至約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個單位之值,較佳約2.0至約2.5。在22處藉由離心去除酸不溶性材料,在24處得到酸不溶性固體材料且在26處得到酸化蛋白質溶液。 在28處可視情況用具有與固體相同之pH(即約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個單位之值、較佳約2.0至約2.5)之水洗滌經回收之酸不溶性固體材料,且在46處可視情況將視情況經洗滌之固體34之pH調節至小於約6.0之值,然後在48處乾燥以在50處提供具有至少約60 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之命名為*810PA之大豆蛋白產品。 或者,在36處將視情況經洗滌之固體34調節至通常約6.0至約8.0、較佳約6.5至約7.5之pH,且在38處乾燥,以在40處提供具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量之命名為*810PN之大豆蛋白產品。 可將來自可選洗滌步驟28之洗滌離心濾液(centrate) 30添加至酸化蛋白質溶液26中。可在32處過濾可溶性蛋白質之溶液。可在60處使可溶性蛋白質之溶液之pH降低在約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個單位之值、較佳約2.0至約2.5之範圍內。然後在62處使可溶性蛋白質之溶液經受可選濃縮及/或可選滲濾。可在76處視情況將來自可選濃縮及/或可選滲濾步驟之滲餘物64之pH調節至小於約6.0之值,然後在78處乾燥,以在80處提供具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量之命名為*810A之非大豆含油種子蛋白產品。較佳地,*810A產品係具有至少約90 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之分離物。或者,在66處將來自可選濃縮及/或可選滲濾步驟之滲餘物64之pH調節至通常約6.0至約8.0、較佳約6.5至約7.5,然後在68處乾燥,以在70處提供具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量之命名為*810N之非大豆含油種子蛋白產品。較佳地,*810N產品係具有至少約90 wt% (N × 6.25) d.b之蛋白質含量之分離物。 *810A及*810PA蛋白產品可獨立地使用或可在84處藉由乾燥摻和加以合併。或者,可藉由以下形成合併之*810A/*810PA產品:混合視情況經洗滌之酸不溶性固體材料,在46處利用可選濃縮/可選滲濾滲餘物視情況將其調節至小於約6.0之pH,在76處視情況將其調節至小於約6.0之pH,並乾燥混合物86。*810N及*810PN蛋白產品可獨立地使用或可藉由在84處乾燥摻和加以合併。或者,可藉由以下形成合併之*810N/*810PN產品:混合視情況經洗滌之酸不溶性固體材料,在36處利用可選濃縮/可選滲濾滲餘物將其調節至約6.0至約8.0、較佳約6.5至約7.5之pH,在66處將其調節至約6.0至約8.0、較佳約6.5至約7.5之pH,並在82處乾燥混合物。實例 實例 1
此實例闡釋本發明芥花蛋白產品之製備。 將60 kg脫脂芥花籽粕連同足夠的NaOH溶液一起添加至600 L逆滲透純化(RO)水中,以將pH調節至7之目標。將混合物在環境溫度下攪動30分鐘以提供蛋白質水溶液。監測pH並在整個提取時間內維持為約7。藉由使用傾析式離心進行離心去除大部分懸浮固體以提供具有1.37 wt%之蛋白質含量之蛋白質溶液。然後藉由添加HCl溶液(用等體積水稀釋之HCl)使部分地澄清之蛋白質溶液之pH降低至約2.0,並使用疊盤式離心對溶液實施離心以提供411 L具有pH 2.00之酸化蛋白質溶液及未記錄量之酸不溶性固體材料。 藉由在具有10,000道爾頓之分子量截止值之聚醚碸膜上濃縮使410 L具有0.59 wt%之蛋白質含量之酸化蛋白質溶液之體積減少至50 L,此係在約31℃之溫度下操作。在約pH 2下利用250 L RO水在相同膜上滲濾具有3.48 wt%之蛋白質含量之所得蛋白質溶液,且該滲濾操作係在約31℃下實施。然後將具有3.12 wt%之蛋白質含量之經滲濾蛋白質溶液進一步濃縮至5.46 wt%之蛋白質含量。獲得30.18 kg經滲濾且經濃縮之蛋白質溶液且代表後傾析器提取溶液中蛋白質之產率為24.9%。在約67℃下對經滲濾且經濃縮之蛋白質溶液進行巴氏殺菌並保持60秒。對16.76 kg具有2.17之pH之經巴氏殺菌、經滲濾且經濃縮之溶液進行噴霧乾燥,以得到發現具有80.25% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為SD092-D23-15A C810A。使用NaOH/KOH溶液(2.5 kg混合有1.25 kg KOH薄片及6.25 kg水之50% w/w NaOH溶液)將16.20 kg經巴氏殺菌、經滲濾且經濃縮之蛋白質溶液調節至pH 7.45。對pH經調節、經滲濾且經濃縮之溶液進行噴霧乾燥,以得到發現具有77.62% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為SD092-D23-15A C810N。 所收集之酸不溶性固體材料具有5.11 wt%之蛋白質含量。冷凍乾燥酸不溶性固體材料之試樣,以得到發現具有75.42% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為SD092-D23-15A C810PA。實例 2
此實例闡釋本發明之大麻蛋白產品之製備。 將20 kg大麻蛋白質粉末(51.96%蛋白質,按原樣) (Hemp Oil Canada, Ste. Agathe, MB)與200 L RO水及足夠的NaOH溶液合併以將pH調節至8.59,並將混合物在約60℃下攪動30分鐘以提供蛋白質水溶液。監測pH並在整個提取時間內維持為約8.5。藉由使用傾析式離心進行離心去除大部分懸浮固體以提供具有2.34 wt%之蛋白質含量之蛋白質溶液。然後藉由使部分地澄清之蛋白質溶液穿過乳油分離器而使該溶液經受脫脂去除步驟。然後藉由添加HCl溶液(用等體積水稀釋之HCl)使160 L後分離器蛋白質溶液之pH降低至2.09,且使用疊盤式離心對溶液進行離心以提供142 L具有pH 1.99之酸化蛋白質溶液以及19.88 kg酸不溶性固體材料。 使用含有具有0.8 μm孔徑之陶瓷膜之微濾系統使132 L酸化蛋白質溶液之體積減少至42 L,且此係在約46℃之溫度下操作。然後使試樣之體積進一步減少至17 L且同時在約52℃下利用25 L pH 2之RO水進行滲濾。然後在約49℃下利用額外50 L pH 2之RO水對微濾滲餘物進行滲濾。經滲濾滲餘物具有16.32 kg之重量及2.05 wt%之蛋白質含量。 合併微濾及滲濾滲透物以形成具有1.03 wt%之蛋白質含量及2.04之pH之膜進料溶液。使用含有具有10,000道爾頓之孔徑之PES膜之超濾系統使190 L此膜進料溶液之體積降低至33 L,且此係在約46℃之溫度下操作。然後在約51℃下利用9體積pH 2之RO水隨後在約52℃下利用一個體積pH中性之RO水對蛋白質溶液進行滲濾。然後進一步濃縮經滲濾之蛋白質溶液以提供26.52 kg具有4.79%之蛋白質含量且代表後分離器蛋白質溶液中蛋白質之產率38.4%之蛋白質溶液。在72℃下對經滲濾及進一步濃縮之蛋白質溶液進行巴氏殺菌並保持若干分鐘。噴霧乾燥13.26 kg經巴氏殺菌之蛋白質溶液,以得到發現具有101.56 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為H002-L03-15A H810A。使用NaOH溶液將13.26 kg經巴氏殺菌之蛋白質溶液調節至pH 7.15。用3.52 L RO水稀釋PH經調節之溶液,然後噴霧乾燥,以得到發現具有98.32 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為H002-L03-15A H810N。 將19.88 kg酸不溶性固體材料與40 L pH 2之RO水混合,且然後使用疊盤式離心對試樣進行離心,以提供48 L具有pH 1.85之酸化洗滌溶液以及9.34 kg經洗滌酸不溶性固體材料。對酸化洗滌溶液進行取樣用於分析且然後棄去。在72℃下對9.34 kg經洗滌酸不溶性固體材料進行巴氏殺菌並保持若干分鐘,且然後用NaOH溶液將pH調節至7.02。此材料代表在後分離器蛋白質溶液中蛋白質之產率為10.0%。噴霧乾燥pH經調節之試樣,以得到發現具有77.44 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為H002-L03-15A H810PN。 發現在此實例中製備之大麻產品之蛋白質含量高於商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之蛋白質含量,發現該商業大麻蛋白質濃縮物具有64.98% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量。實例 3
將120 g向日葵粕(33.06%蛋白質,按原樣) (ADM, Decatur, IL)與1200 ml RO水及足夠的6M NaOH溶液合併以將pH調節至7.1之目標,並將混合物在約60℃下攪動30分鐘以提供蛋白質水溶液。監測pH並在整個提取時間內維持為約7.1。藉由以3,500 g對1271.32 g提取漿液離心3分鐘且然後藉助篩網傾析離心濾液去除大部分懸浮固體。收集786.54 g具有1.27 wt%之蛋白質含量及7.31之pH之蛋白質提取溶液並使其冷卻至室溫。藉由添加6.75 g HCl溶液(用等體積水稀釋之HCl)將749.31 g蛋白質提取溶液之pH調節至1.98。以7,000 g將752.01 g酸化試樣離心3分鐘且然後傾析離心濾液以提供554.89 g酸化蛋白質溶液,充分傾析該酸化蛋白質溶液。棄去另外169.29 g酸化蛋白質溶液,乃因其含有顯著量之酸不溶性固體材料(SF810P),該酸不溶性固體材料與離心濾液一起傾析。 自離心管之底部收集16.62 g酸不溶性固體材料並將其與30 ml RO水混合。然後用6M NaOH將試樣之pH自2.29調節至6.92並冷凍乾燥,以提供1.38g基於原樣具有64.04 wt%之蛋白質含量之產品。此產品稱為SF810PN。 使用具有10,000 Da之分子量截止值之Vivaflow 200聚醚碸膜使510.13 g具有0.76 wt%之蛋白質含量之酸化蛋白質溶液之體積減少至約44 ml。將超濾滲餘物與220 ml滲濾用RO水合併並用HCl溶液將混合物之pH自2.59降低至2.01。然後在Vivaflow膜上運行試樣直至收集222 ml滲透物為止。經滲濾之濃縮蛋白質溶液之體積為約44 ml。此試樣具有5.92 wt%之蛋白質含量且代表在蛋白質提取溶液中蛋白質之產率為約26.0%。原樣冷凍乾燥18.33 g經滲濾且經濃縮之蛋白質溶液,以提供1.29 g基於原樣具有79.47 wt%之蛋白質含量之產品。此產品稱為SF810A。用NaOH溶液將經滲濾且經濃縮之蛋白質溶液之另一等份試樣之pH調節至6.94,並冷凍乾燥以提供1.34 g基於原樣具有77.70 wt%之蛋白質含量之產品。此產品稱為SF810N。實例 4
與商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)相比,此實例含有根據實例2製備之大麻蛋白產品之乾燥色彩之評估。乾燥色彩係使用以反射模式操作之HunterLab ColorQuest XE來評價。結果顯示於下表1中。表 1 – 蛋白產品之乾燥色彩
如自表1中之結果可看出,本發明之大麻蛋白產品較所評估之商業大麻蛋白產品更輕、更不紅且更不黃。實例 5
此實例含有如實例2中所闡述根據本發明製備之大麻蛋白產品及商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之植酸含量之評估。植酸含量係使用Latta及Eskin (J. Agric. Food Chem., 28: 1313-1315)之方法來測定。 所獲得之結果闡述於下表2中。表 2 - 大麻產品之植酸含量
如自表2中之結果可看出,H002-L03-15A H810A及H810N之植酸低於商業大麻蛋白產品。實例 6
此實例含有如實例2中所闡述根據本發明製備之大麻蛋白產品及商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之酸可水解碳水化合物含量之評估。酸可水解碳水化合物含量係根據Dubois等人(Anal. Chem., 28: 350-356)之方法來測定結果顯示於下表3中。表 3 – 試樣之酸可水解碳水化合物含量
如自示於表3中之結果可看出,本發明之大麻蛋白產品(具體而言H810A及H810N)之酸可水解碳水化合物低於商業大麻蛋白產品。實例 7
此實例闡釋如實例2中所闡述製備之H002-L03-15A H810N與商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之風味之比較。 藉由溶解充足的蛋白質粉末以在150 ml純化飲用水中提供3 g蛋白質來製備試樣用於感覺評估。H810N溶液之pH經測定為6.00,而Hemp Pro 70溶液之pH為7.48。將食品級NaOH添加至H810N之溶液中以使pH升高至7.48。請十名組員之非正式小組盲目地比較試樣且指示哪一試樣具有更純潔的風味。 十名組員中之九名指示H810N之風味更為純潔。一名組員指示Hemp Pro 70之風味更為純潔。實例 8
此實例闡釋如實例2中所闡述製備之H002-L03-15A H810PN之風味與商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之比較。 藉由溶解充足的蛋白質粉末以在100 ml純化飲用水中提供2 g蛋白質來製備試樣用於感覺評估。H810PN溶液之pH經測定為7.13,而Hemp Pro 70溶液之pH為7.51。將食品級NaOH添加至H810PN之溶液中以使pH升高至7.51。請七名組員之非正式小組盲目比較試樣並指示哪一試樣具有更純潔的風味。 七名組員中之四名指示H810N之風味更為純潔。三名組員指示Hemp Pro 70之風味更為純潔。實例 9
此實例闡釋如實例2中所闡述根據本發明製備之大麻蛋白產品之蛋白質溶解度。蛋白質溶解度係藉由Morr等人,J. Food Sci., 50: 1715-1718之程序之經修改型式來測試。 將足以提供0.5 g蛋白質之蛋白質粉末稱重至燒杯中,且然後添加少量逆滲透(RO)純化水並攪拌混合物直至形成均勻膏糊為止。然後添加額外水以使體積達到約45 ml。然後使用磁力攪拌器將燒杯之內容物緩慢攪拌60分鐘。在蛋白質分散後立即測定pH,且用稀NaOH或HCl調節至適當值(2、3、4、5、6或7)。量測pH並在60分鐘攪拌期間週期性地校正。攪拌60分鐘後,用RO水將試樣補足至50 ml總體積,從而產生1 w/v%之蛋白質分散液。使用Leco氮測定器藉由燃燒分析來量測分散液之蛋白質含量。然後以7,800 g將分散液之等份試樣離心10分鐘,此會沉降不溶性材料且產生上清液。藉由Leco分析量測上清液之蛋白質含量且如下計算產品之溶解度: 蛋白質溶解度(%) = (上清液中之蛋白質%/初始分散液中之蛋白質%) × 100 經計算大於100%之值報告為100%。 產品在不同pH值下之蛋白質溶解度顯示於表4中。表 4 – 大麻蛋白產品在不同 pH 值下之 蛋白質溶解度
如自示於表4中之結果可看出,H810A產品高度可溶於pH範圍2至4中。實例 10
此實例進一步闡釋本發明之大麻蛋白產品之製備。 將「a」 kg「b」與「c」 L RO水及足夠的12.5% NaOH/12.5% KOH溶液合併以將pH調節至目標「d」,並將混合物在約60℃下攪動30分鐘以提供蛋白質水溶液。監測pH並在整個提取時間內維持為約「d」。藉由使用傾析式離心進行離心去除大部分懸浮固體以提供具有「e」wt%之蛋白質含量之蛋白質溶液。然後藉由添加HCl溶液(用等體積水稀釋之HCl)使蛋白質溶液之pH降低至目標2且使用疊盤式離心對溶液實施離心以提供「f」L具有「g」之pH及「h」 wt%之蛋白質含量之酸化蛋白質溶液以及「i」 kg具有「j」 wt%之蛋白質含量之酸不溶性固體材料。酸化蛋白質溶液為「k」。 使用含有具有10,000道爾頓孔徑之PES膜之超濾系統使「l」 L具有「n」 wt%之蛋白質含量之「m」酸化蛋白質溶液之體積減少至「o」 L,且此係在約「p」℃之溫度下操作。然後在約「s」℃下利用「r」 L調節至pH 2之RO水、隨後在約「u」℃下利用「t」 L中性pH之RO水滲濾具有「q」 wt%之蛋白質含量之蛋白質溶液。經滲濾蛋白質溶液具有「v」wt%之蛋白質含量。將此溶液進一步濃縮為「w」 wt%蛋白質,然後在「x」℃下進行巴氏殺菌並保持「y」秒。噴霧乾燥「z」 kg經巴氏殺菌之蛋白質溶液以得到發現具有「aa」 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為「ab」 H810A。使用12.5% NaOH/ 12.5% KOH溶液將「ac」 kg經巴氏殺菌之蛋白質溶液調節至pH「ad」。噴霧乾燥PH經調節之溶液以得到發現具有「ae」 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為「ab」 H810N。 將「af」kg酸不溶性材料與「ag」 L RO水合併並用12.5% NaOH/ 12.5% KOH溶液將pH調節至「ah」。然後再次對試樣進行離心以提供「ai」 kg具有「aj」蛋白質含量之經洗滌酸不溶性固體。在「ak」℃下對該等固體進行巴氏殺菌並保持「al」且然後噴霧乾燥以得到發現具有「am」 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為「ab」 H810PA。 參數「a」至「am」闡述於下表5中。表 5 – 產生大麻蛋白產品之運行參數 實例 11
此實例進一步闡釋本發明大麻蛋白產品之製備。 將30 kg藉由壓榨脫脂、然後磨碎之來自大麻籽之去殼之外殼材料與300 L RO水及足夠的12.5% NaOH/12.5% KOH溶液合併以將pH調節至目標8.5,並將混合物在約60℃下攪動30分鐘以提供蛋白質水溶液。監測pH並在整個提取時間內維持為約8.5。藉由使用傾析式離心進行離心去除大部分懸浮固體以提供具有0.95 wt%之蛋白質含量之蛋白質溶液。然後藉由添加HCl溶液(用等體積水稀釋之HCl)使蛋白質溶液之pH降低至目標2。將42.62 kg來自初始分離步驟之濕固體與300 L RO水合併並在60℃下混合30分鐘。懸浮液之pH為8.79,因此未實施進一步pH調節。藉由使用傾析式離心進行離心再次去除懸浮固體,以提供具有0.16 wt%之蛋白質含量之蛋白質溶液。使此溶液之pH降低至約2,併合併兩批酸化蛋白質溶液,並使用疊盤式離心進行離心以提供598 L具有1.92之pH及0.48 wt%之蛋白質含量之酸化蛋白質溶液以及未記錄量之具有0.80 wt%之蛋白質含量之酸不溶性固體材料。 藉由藉助具有2.0 μm及0.2 μm之孔徑之過濾墊連續過濾來進一步澄清酸化蛋白質溶液。 使用含有具有10,000道爾頓孔徑之PES膜之超濾系統使585 L具有0.33 wt%蛋白質含量之經過濾之酸化蛋白質溶液之體積減少至40 L,且此係在約45℃之溫度下操作。然後在約51℃下利用360 L調節至約pH 2之RO水、隨後在約50℃下利用未記錄量之pH中性之RO水滲濾具有4.90 wt%蛋白質含量之蛋白質溶液。經滲濾蛋白質溶液具有4.30 wt%之蛋白質含量。將此溶液進一步濃縮成4.43 wt%蛋白質,然後在75℃下進行巴氏殺菌並保持16秒。使用12.5% NaOH/12.5% KOH溶液將30.36 kg經巴氏殺菌之蛋白質溶液調節至pH 6.74。噴霧乾燥PH經調節之溶液,以得到發現具有93.48% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之產品。該產品稱為H003-K24-16A H810N。實例 12
此實例含有根據實例10及11製備之大麻蛋白產品之乾燥色彩之評估。乾燥色彩係使用以反射模式操作之HunterLab ColorQuest XE來評價。結果顯示於下表6中。表 6 – 蛋白產品之乾燥色彩
如自表6中之結果可看出,除來自pH 10.5提取運行之H810PA以外,本發明之大麻蛋白產品輕於所評估之商業大麻蛋白產品(參見表1)。實例 13
此實例含有如實例10及11中所闡述根據本發明製備之大麻蛋白產品之植酸含量之評估。植酸含量係使用Latta及Eskin (J. Agric. Food Chem., 28: 1313-1315)之方法來測定。 所獲得之結果闡述於下表7中。表 7 - 大麻產品之植酸含量
如自表7中之結果可看出,大麻蛋白產品之植酸通常均較低且在植酸方面低於商業大麻蛋白產品(參見表2)。實例 14
此實例含有如實例10及11中所闡述根據本發明製備之大麻蛋白產品之酸可水解碳水化合物含量之評估。酸可水解碳水化合物含量係根據Dubois等人(Anal. Chem., 28: 350-356)之方法來測定。結果顯示於下表8中。表 8 – 試樣之酸可水解碳水化合物含量
如自示於表8中之結果可看出,本發明之大麻蛋白產品(具體而言H810A及H810N)之酸可水解碳水化合物低於商業大麻蛋白產品(參見表3)。實例 15
此實例闡釋如實例2、10及11中所闡述根據本發明製備之大麻蛋白產品及商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之蛋白質溶解度。蛋白質溶解度係藉由Morr等人,J. Food Sci., 50: 1715-1718之程序之經修改型式來測試。 末將足以提供0.5 g蛋白質之蛋白質粉稱重至燒杯中且然後添加少量逆滲透(RO)純化水並攪拌混合物直至形成均勻膏糊為止。然後添加額外水以使體積達到約45 ml。然後使用磁力攪拌器將燒杯之內容物緩慢攪拌60分鐘。在蛋白質分散後立即測定pH,且用稀NaOH或HCl調節至適當值(2、3、4、5、6或7)。量測pH並在60分鐘攪拌期間週期性地校正。攪拌60分鐘後,用RO水將試樣補足至50 ml總體積,從而產生1 w/v%之蛋白質分散液。使用Leco氮測定器藉由燃燒分析來量測分散液之蛋白質含量。然後以7,800 g將分散液之等份試樣離心10分鐘,此會沉降不溶性材料且產生上清液。藉由Leco分析量測上清液之蛋白質含量且如下計算產品之溶解度: 蛋白質溶解度(%) = (上清液中之蛋白質%/初始分散液中之蛋白質%) × 100 經計算大於100%之值報告為100%。 產品在不同pH值下之蛋白質溶解度顯示於表9中。表 9 – 大麻蛋白產品在不同 pH 值下之 蛋白質溶解度
如自表9中之結果可看出,H810A在pH範圍2至4內具有良好蛋白質溶解度。在pH範圍5至7內H810N之蛋白質溶解度較低。在所測試之pH範圍內,源於酸不溶性固體材料之產品之蛋白質溶解度通常較低。實例 16
此實例闡釋如實例2、10及11中所闡述根據本發明之態樣製備之大麻蛋白產品以及如美國專利申請案13/956,619 (2014年2月6日公開之美國專利公開案第2014/0037824號)中所闡述製備之大麻蛋白產品及商業大麻蛋白產品Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之分子量概況。 分子量概況係藉由粒徑篩析層析使用配備有300 × 7.8 mm Phenomenex Yarra SEC-2000系列管柱之Varian ProStar HPLC系統來確定。管柱含有親水鍵結之二氧化矽剛性支撐介質,直徑為3微米,孔徑為145埃(Angstrom)。 在分析脈衝蛋白質試樣之前,使用含有具有在17,000道爾頓(肌球蛋白)與670,000道爾頓(甲狀腺球蛋白)之間之已知分子量之蛋白質以及作為1,350道爾頓低分子量標記物添加之維生素B12之Biorad蛋白質標準品(Biorad產品編號151-1901)製備標準曲線。製備蛋白質標準品之0.9 w/v%水溶液,利用0.45 μm孔徑過濾盤過濾,然後在管柱上使用含有0.02%疊氮化鈉之0.05M磷酸鹽/0.15M NaCl (pH 6)移動相運行50 μL等份試樣。移動相流速為1 mL/min且基於280 nm下之吸光度檢測組份。基於具有已知分子量之該等分子之滯留時間,關於分子量之log對滯留時間(以分鐘計)發展回歸公式。 為分析脈衝蛋白質試樣,使用含有0.02%疊氮化鈉之0.05M磷酸鹽/0.15M NaCl (pH 6)作為移動相且亦用於溶解乾燥試樣。將蛋白質試樣與移動相溶液混合成1 w/v%之濃度,將其置於振盪器上並保持至少1小時,然後使用0.45 µm孔徑過濾盤過濾。試樣注入大小為50 µL。移動相流速為1 mL/分鐘,且基於280 nm下之吸光度檢測組份。 使用關於分子量及滯留時間之回歸公式來計算滯留時間,該滯留時間對應於100,000 Da、15,000 Da、5,000 Da及1,000 Da之分子量。使用HPLC ProStar系統來計算在該等滯留時間範圍內之峰面積,且計算在給定分子量範圍內之蛋白質之百分比((範圍峰面積/總蛋白質峰面積) × 100)。應注意該數據並未藉由蛋白質反應因子進行校正。 大麻蛋白產品之分子量概況顯示於表10中。表 10 – 各種產品之 HPLC 蛋白質概況
如自表10之結果可看出,本發明產品之蛋白質概況與H701及商業大麻蛋白質濃縮物之概況不同。實例 17
此實例闡釋如實例10中所闡述製備之H003-I15-16A H810N之風味與商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之比較。 藉由將足以提供2.4 g蛋白質之蛋白質粉末溶解於120 ml純化飲用水中來製備試樣用於感覺評估。H810N之溶液之pH經測定為6.86,而Hemp Pro 70之溶液之pH為7.71。將食品級HCl添加至Hemp Pro 70之溶液中以使pH降低至6.85。請八名組員之非正式小組盲目比較試樣且指示哪一試樣具有更純潔的風味。 八名組員中之八者指示H810N之風味更為純潔。實例 18
此實例闡釋如實例10中所闡述製備之H005-K01-16A H810N之風味與商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之比較。 藉由將足以提供2.4 g蛋白質之蛋白質粉末溶解於120 ml純化飲用水中來製備試樣用於感覺評估。H810N之溶液之pH經測定為6.71,而Hemp Pro 70之溶液之pH為7.74。將食品級HCl添加至Hemp Pro 70之溶液中以使pH降低至6.67。請九名組員之非正式小組盲目比較試樣且指示哪一試樣具有更純潔的風味。 九名組員中之七者指示H810N之風味更為純潔。一名組員指示Hemp Pro 70之風味更為純潔,而一名組員無法鑑別一個試樣具有更純潔的風味。實例 19
此實例闡釋如實例11中所闡述製備之H003-K24-16A H810N之風味與商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之比較。 藉由將足以提供2.4 g蛋白質之蛋白質粉末溶解於120 ml純化飲用水中來製備試樣用於感覺評估。H810N之溶液之pH經測定為6.71,而Hemp Pro 70之溶液之pH為7.74。將食品級HCl添加至Hemp Pro 70之溶液中以使pH降低至6.67。請八名組員之非正式小組盲目比較試樣且指示哪一試樣具有更純潔的風味。 八名組員中之六者指示H810N之風味更為純潔。兩名組員無法鑑別一個試樣具有更純潔的風味。實例 20
此實例闡釋如實例2中所闡述製備之H002-L03-15A H810A之風味與商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之比較。 藉由將足以提供2.4 g蛋白質之蛋白質粉末溶解於120 ml純化飲用水中來製備試樣用於感覺評估。H810A之溶液之pH經測定為3.01,而Hemp Pro 70之溶液之pH為7.89。將食品級HCl添加至Hemp Pro 70之溶液中以使pH降低至3.06。請九名組員之非正式小組盲目比較試樣且指示哪一試樣具有更純潔的風味。 九名組員中之八者指示H810A之風味更為純潔。一名組員無法鑑別一個試樣具有更純潔的風味。實例 21
此實例闡釋如實例10中所闡述製備之H003-I15-16A H810A之風味與商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之比較。 藉由將足以提供2.4 g蛋白質之蛋白質粉末溶解於120 ml純化飲用水中來製備試樣用於感覺評估。H810A之溶液之pH經測定為3.89,而Hemp Pro 70之溶液之pH為7.68。將食品級HCl添加至Hemp Pro 70之溶液中以使pH降低至3.89。請九名組員之非正式小組盲目比較試樣且指示哪一試樣具有更純潔的風味。 九名組員中之八者指示H810A之風味更為純潔。一名組員無法鑑別一個試樣具有更純潔的風味。實例 22
此實例闡釋如實例10中所闡述製備之H005-K01-16A H810PA之風味與商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之比較。 藉由將足以提供2.4 g蛋白質之蛋白質粉末溶解於120 ml純化飲用水中來製備試樣用於感覺評估。H810PA之溶液之pH經測定為6.14,而Hemp Pro 70之溶液之pH為7.72。將食品級HCl添加至Hemp Pro 70之溶液中以使pH降低至6.17。請九名組員之非正式小組盲目比較試樣且指示哪一試樣具有更純潔的風味。 九名組員中之六者指示H810PA之風味更為純潔。兩名組員指示Hemp Pro 70之風味更為純潔,且一名組員無法鑑別一個試樣具有更純潔的風味。實例 23
此實例闡釋如實例10中所闡述製備之H005-L05-16A H810PA之風味與商業大麻蛋白質濃縮物Hemp Pro 70 (Manitoba Harvest Hemp Foods, Winnipeg, MB)之比較。 藉由將足以提供2.4 g蛋白質之蛋白質粉末溶解於120 ml純化飲用水中來製備試樣用於感覺評估。H810PA之溶液之pH經測定為5.88,而Hemp Pro 70之溶液之pH為7.71。將食品級HCl添加至Hemp Pro 70之溶液中以使pH降低至5.86。請九名組員之非正式小組盲目比較試樣且指示哪一試樣具有更純潔的風味。 九名組員中之七者指示H810PA之風味更為純潔。兩名組員指示Hemp Pro 70之風味更為純潔。揭示概要
在揭示概要中,提供味道有所增強之新穎且發明性非大豆含油種子蛋白產品及產生味道有所增強之非大豆含油種子蛋白產品之新穎且發明性方法,該等方法不涉及自非大豆含油種子蛋白質來源提取非大豆含油種子蛋白質或在任何其他製程步驟中直接添加及使用鈣鹽或其他鹽。在本發明之範圍內修改形式係可能的。
10‧‧‧本發明之一個態樣之製程
12‧‧‧步驟(用pH約6至約11、較佳約7至約8.5之水提取)
14‧‧‧步驟(部分或完全澄清)
16‧‧‧步驟(收集經去除的固體)
18‧‧‧蛋白質提取溶液
20‧‧‧步驟(將pH調節至約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個單位之值,較佳約2.0至約2.5)
22‧‧‧步驟(離心)
24‧‧‧步驟(得到酸不溶性固體材料)
26‧‧‧步驟(得到酸化蛋白質溶液)
28‧‧‧步驟(視情況用pH為約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個pH單位、較佳約2.0至約2.5之水洗滌,然後離心)
30‧‧‧步驟(洗滌離心濾液)
32‧‧‧步驟(過濾可溶性蛋白質之溶液;視情況降低pH用於膜處理)
34‧‧‧視情況洗滌之酸不溶性固體材料
36‧‧‧步驟(將pH調節至約6至約8,較佳約6.5至約7.5)
38‧‧‧步驟(乾燥)
40‧‧‧步驟(提供命名為*810PN之大豆蛋白產品)
46‧‧‧步驟(視情況將pH調節至小於約6)
48‧‧‧步驟(乾燥)
50‧‧‧步驟(提供命名為*810PA之大豆蛋白產品)
60‧‧‧步驟(使可溶性蛋白質之溶液之pH降低在約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個單位之值、較佳約2.0至約2.5之範圍內;可選過濾)
62‧‧‧步驟(可選濃縮/可選滲濾)
64‧‧‧滲餘物
66‧‧‧步驟(將pH調節至約6至約8,較佳約6.5至約7.5)
68‧‧‧步驟(乾燥)
70‧‧‧步驟(提供命名為*810N之非大豆含油種子蛋白產品)
76‧‧‧步驟(視情況將pH調節至小於約6)
78‧‧‧步驟(乾燥)
80‧‧‧步驟(提供命名為*810A之非大豆含油種子蛋白產品)
82‧‧‧步驟(視情況合併並乾燥)
84‧‧‧步驟(視情況合併)
86‧‧‧步驟(視情況合併並乾燥)
12‧‧‧步驟(用pH約6至約11、較佳約7至約8.5之水提取)
14‧‧‧步驟(部分或完全澄清)
16‧‧‧步驟(收集經去除的固體)
18‧‧‧蛋白質提取溶液
20‧‧‧步驟(將pH調節至約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個單位之值,較佳約2.0至約2.5)
22‧‧‧步驟(離心)
24‧‧‧步驟(得到酸不溶性固體材料)
26‧‧‧步驟(得到酸化蛋白質溶液)
28‧‧‧步驟(視情況用pH為約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個pH單位、較佳約2.0至約2.5之水洗滌,然後離心)
30‧‧‧步驟(洗滌離心濾液)
32‧‧‧步驟(過濾可溶性蛋白質之溶液;視情況降低pH用於膜處理)
34‧‧‧視情況洗滌之酸不溶性固體材料
36‧‧‧步驟(將pH調節至約6至約8,較佳約6.5至約7.5)
38‧‧‧步驟(乾燥)
40‧‧‧步驟(提供命名為*810PN之大豆蛋白產品)
46‧‧‧步驟(視情況將pH調節至小於約6)
48‧‧‧步驟(乾燥)
50‧‧‧步驟(提供命名為*810PA之大豆蛋白產品)
60‧‧‧步驟(使可溶性蛋白質之溶液之pH降低在約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個單位之值、較佳約2.0至約2.5之範圍內;可選過濾)
62‧‧‧步驟(可選濃縮/可選滲濾)
64‧‧‧滲餘物
66‧‧‧步驟(將pH調節至約6至約8,較佳約6.5至約7.5)
68‧‧‧步驟(乾燥)
70‧‧‧步驟(提供命名為*810N之非大豆含油種子蛋白產品)
76‧‧‧步驟(視情況將pH調節至小於約6)
78‧‧‧步驟(乾燥)
80‧‧‧步驟(提供命名為*810A之非大豆含油種子蛋白產品)
82‧‧‧步驟(視情況合併並乾燥)
84‧‧‧步驟(視情況合併)
86‧‧‧步驟(視情況合併並乾燥)
圖1係本發明製程之實施例之示意流程圖。
10‧‧‧本發明之一個態樣之製程
12‧‧‧步驟(用pH約6至約11、較佳約7至約8.5之水提取)
14‧‧‧步驟(部分或完全澄清)
16‧‧‧步驟(收集經去除的固體)
18‧‧‧蛋白質提取溶液
20‧‧‧步驟(將pH調節至約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個單位之值,較佳約2.0至約2.5)
22‧‧‧步驟(離心)
24‧‧‧步驟(得到酸不溶性固體材料)
26‧‧‧步驟(得到酸化蛋白質溶液)
28‧‧‧步驟(視情況用pH為約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個pH單位、較佳約2.0至約2.5之水洗滌,然後離心)
30‧‧‧步驟(洗滌離心濾液)
32‧‧‧步驟(過濾可溶性蛋白質之溶液;視情況降低pH用於膜處理)
34‧‧‧視情況洗滌之酸不溶性固體材料
36‧‧‧步驟(將pH調節至約6至約8,較佳約6.5至約7.5)
38‧‧‧步驟(乾燥)
40‧‧‧步驟(提供命名為*810PN之大豆蛋白產品)
46‧‧‧步驟(視情況將pH調節至小於約6)
48‧‧‧步驟(乾燥)
50‧‧‧步驟(提供命名為*810PA之大豆蛋白產品)
60‧‧‧步驟(使可溶性蛋白質之溶液之pH降低在約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個單位之值、較佳約2.0至約2.5之範圍內;可選過濾)
62‧‧‧步驟(可選濃縮/可選滲濾)
64‧‧‧滲餘物
66‧‧‧步驟(將pH調節至約6至約8,較佳約6.5至約7.5)
68‧‧‧步驟(乾燥)
70‧‧‧步驟(提供命名為*810N之非大豆含油種子蛋白產品)
76‧‧‧步驟(視情況將pH調節至小於約6)
78‧‧‧步驟(乾燥)
80‧‧‧步驟(提供命名為*810A之非大豆含油種子蛋白產品)
82‧‧‧步驟(視情況合併並乾燥)
84‧‧‧步驟(視情況合併)
86‧‧‧步驟(視情況合併並乾燥)
Claims (70)
- 一種產生基於乾重具有選自由至少約60 wt%及至少約90 wt% (N × 6.25)組成之群之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白產品的方法,該方法包含: (a)用水提取非大豆含油種子蛋白質來源以使得來自該蛋白質來源之蛋白質溶解並形成蛋白質水溶液, (b)使該非大豆含油種子蛋白質水溶液與剩餘非大豆含油種子蛋白質來源至少部分地分離, (c)將該非大豆含油種子蛋白質水溶液之pH調節至約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個pH單位之值之pH以產生酸化非大豆含油種子蛋白質溶液, (d)使酸不溶性固體材料與該酸化非大豆含油種子蛋白質溶液分離, (e)視情況藉由選擇性膜技術濃縮該酸化非大豆含油種子蛋白質溶液, (f)視情況滲濾該視情況經濃縮之非大豆含油種子蛋白質溶液,及 (g)視情況乾燥該視情況經濃縮且視情況經滲濾之非大豆含油種子蛋白質溶液。
- 如請求項1之方法,其中該酸不溶性固體材料視情況經稀釋,然後視情況經乾燥,以形成基於乾重具有至少約60 wt% (N × 6.25)之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白產品。
- 如請求項2之方法,其中在該可選乾燥步驟之前使該視情況經稀釋之酸不溶性固體材料之pH升高至選自由小於約8.0、約6.0至約8.0及約6.5至約7.5組成之群之值。
- 如請求項2之方法,其中藉由與選自由約1體積至約20體積水及約1體積至約10體積水組成之群之量之水混合來洗滌該酸不溶性固體材料,該水具有選自由約1.5至較等電沈澱之典型pH低約1個pH單位之值組成之群且與該酸不溶性材料之pH大致相同的pH,然後在可選稀釋、然後可選乾燥步驟之前與該洗滌水分離。
- 如請求項4之方法,其中在可選乾燥步驟之前使該視情況經稀釋之經洗滌之酸不溶性材料之pH升高至選自由小於約8.0、約6.0至約8.0及約6.5至約7.5組成之群之值。
- 如請求項4之方法,其中將該洗滌水與步驟(d)之該酸化大豆蛋白質溶液合併且如在步驟(e)至(g)中之至少一者中進行處理。
- 如請求項2之方法,其中藉由使該酸不溶性固體材料與選自由約1體積至約20體積水及約1體積至約10體積水組成之群之量之水及足夠的食品級鹼混合以使pH升高至選自由小於約8.0及介於約5.0與約8.0之間組成之群之值,同時洗滌該酸不溶性固體材料及調節其pH,然後在可選稀釋、然後可選乾燥步驟之前藉由離心與該洗滌水分離。
- 如請求項7之方法,其中在可選乾燥步驟之前使該視情況經稀釋之同時經洗滌及pH調節之酸不溶性固體材料之pH進一步升高至選自小於約8.0、介於約6.0與約8.0之間及介於約6.5與約7.5之間之群之值。
- 3、4、5、7或8之方法,其中在乾燥前對該視情況經稀釋之酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之經洗滌之酸不溶性固體材料或視情況經稀釋之經洗滌及pH調節之酸不溶性固體材料進行巴氏殺菌(pasteurized)。
- 如請求項9之方法,其中該巴氏殺菌步驟係在選自由以下組成之群之溫度及時間下實現:約55℃至約85℃並保持約10秒至約60分鐘、約60℃至約70℃並保持約10分鐘至約60分鐘及約70℃至約85℃並保持約10秒至約60秒。
- 如請求項1之方法,其中該提取步驟(a)係在選自由約1℃至約100℃、約15℃至約65℃及約50℃至約60℃組成之群之溫度下實現。
- 如請求項1之方法,其中用於該提取之該水含有pH調節劑,使得該提取在選自由約6至11及約7至約8.5組成之群之pH下實施。
- 如請求項12之方法,其中該pH調節劑係選自氫氧化鈉、氫氧化鉀及其組合。
- 如請求項1之方法,其中該非大豆含油種子蛋白質水溶液具有選自由約5g/L至約50 g/L及約10g/L至約50 g/L組成之群之蛋白質濃度。
- 如請求項1之方法,其中用於提取之該水含有抗氧化劑。
- 如請求項1之方法,其中在該分離步驟(b)之後且在該酸化步驟(c)之前,用吸附劑處理該非大豆含油種子蛋白質水溶液以自該蛋白質水溶液去除色彩及/或氣味化合物。
- 如請求項1之方法,其中在該分離步驟(b)之後且在該酸化步驟(c)之前將該非大豆含油種子蛋白質水溶液之溫度調節至選自由約1℃至約35℃及約15℃至約35℃組成之群之值。
- 如請求項1之方法,其中該非大豆含油種子蛋白產品係芥花蛋白產品且將該芥花蛋白質水溶液之pH在步驟(c)中調節至約1.5至約2.5。
- 如請求項1之方法,其中該非大豆含油種子蛋白產品係向日葵蛋白產品且將該向日葵蛋白質水溶液之pH在步驟(c)中調節至約1.5至約3.5。
- 如請求項1之方法,其中該非大豆含油種子蛋白產品係大麻蛋白產品且將該大麻蛋白質水溶液之pH在步驟(c)中調節至約1.5至約4.0。
- 如請求項1之方法,其中該非大豆含油種子蛋白產品係棉籽蛋白產品且將該棉籽蛋白質水溶液之pH在步驟(c)中調節至約1.5至約3.0。
- 如請求項1之方法,其中該非大豆含油種子蛋白產品係亞麻/亞麻仁蛋白產品且將該亞麻/亞麻仁蛋白質水溶液之pH在步驟(c)中調節至約1.5至約3.0。
- 如請求項1之方法,其中該非大豆含油種子蛋白產品係紅花蛋白產品且將該紅花蛋白質水溶液之pH在步驟(c)中調節至約1.5至約4.0。
- 如請求項1之方法,其中該非大豆含油種子蛋白產品係芝麻蛋白產品且將該芝麻蛋白質水溶液之pH在步驟(c)中調節至約1.5至約3.0。
- 如請求項1之方法,其中該非大豆含油種子蛋白產品係芥菜蛋白產品且將該芥菜蛋白質水溶液之pH在步驟(c)中調節至約1.5至約4.0。
- 如請求項1之方法,其中該非大豆含油種子蛋白產品係花生蛋白產品且將該花生蛋白質水溶液之pH在步驟(c)中調節至約1.5至約3.5。
- 如請求項1之方法,其中將該非大豆含油種子蛋白質水溶液之pH在步驟(c)中調節至約2.0至約2.5。
- 如請求項1之方法,其中在步驟(d)之後使該經酸化非大豆含油種子蛋白質水溶液經受熱處理步驟。
- 如請求項28之方法,其中進行該熱處理步驟以去活化不耐熱性抗營養因子。
- 如請求項29之方法,其中該抗營養因子係不耐熱性胰蛋白酶抑制劑。
- 如請求項28之方法,其中進行該熱處理步驟以對該酸化蛋白質水溶液進行巴氏殺菌。
- 如請求項28之方法,其中該熱處理係在選自由以下組成之群之溫度及時間下實現:約70℃至約160℃並保持約10秒至約60分鐘、約80℃至約120℃並保持約10秒至約5分鐘及約85℃至約95℃並保持約30秒至約5分鐘。
- 如請求項28之方法,其中使該熱處理之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液冷卻至選自由約2℃至約65℃及約50℃至約60℃組成之群之溫度。
- 如請求項1之方法,其中乾燥該經酸化非大豆含油種子蛋白質水溶液以提供具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白產品。
- 如請求項1之方法,其中使該經酸化非大豆含油種子蛋白質水溶液經受濃縮步驟(e)以產生具有選自由約50 g/L至約300 g/L及約100 g/L至約200 g/L組成之群之蛋白質濃度之經濃縮之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液。
- 如請求項35之方法,其中該濃縮步驟(e)係藉由使用具有選自由約1,000道爾頓(dalton)至約1,000,000道爾頓及約1,000道爾頓至約100,000道爾頓組成之群之分子量截止值之膜進行超濾來實現。
- 如請求項1或35之方法,其中使該酸化大豆蛋白質溶液、部分地濃縮之酸化大豆蛋白質溶液或經濃縮酸化大豆蛋白質溶液經受滲濾步驟(f)。
- 如請求項36之方法,其中該滲濾步驟(f)係使用水或酸化水之滲濾溶液來實現。
- 如請求項38之方法,其中該滲濾步驟(f)係使用選自由約1體積至約40體積及約2體積至約25體積組成之群之體積之滲濾溶液來實現。
- 如請求項37之方法,其中進行該滲濾步驟(f)直至滲透物中不存在其他顯著量之污染物或可見色彩為止。
- 如請求項37之方法,其中進行該滲濾步驟(f)直至該滲餘物經充分純化以便提供具有至少約90 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白質分離物為止。
- 如請求項37之方法,其中該滲濾步驟(f)係使用具有選自由約1,000道爾頓至約1,000,000道爾頓及約1,000道爾頓至約100,000道爾頓組成之群之分子量截止值之膜來實現。
- 如請求項37之方法,其中在該滲濾步驟(f)之至少一部分期間在滲濾介質中存在抗氧化劑。
- 如請求項35或37之方法,其中該濃縮步驟(e)及滲濾步驟(f)係在選自由約2℃至約65℃及約50℃至約60℃組成之群之溫度下實施。
- 如請求項35或37之方法,其中使該部分地濃縮或經濃縮及/或經滲濾之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液經受熱處理步驟。
- 如請求項45之方法,其中進行該熱處理步驟以去活化不耐熱性抗營養因子。
- 如請求項46之方法,其中該不耐熱性抗營養因子係不耐熱性胰蛋白酶抑制劑。
- 如請求項45之方法,其中該熱處理係在選自由以下組成之群之溫度及時間下實現:約70℃至約160℃並保持約10秒至約60分鐘、約80℃至約120℃並保持約10秒至約5分鐘及約85℃至約95℃並保持約30秒至約5分鐘。
- 如請求項45之方法,其中使該熱處理非大豆含油種子蛋白質溶液冷卻至選自由約2℃至約65℃及約50℃至約60℃組成之群之溫度。
- 如請求項35或37之方法,其中用吸附劑處理該經濃縮及/或經滲濾之酸化蛋白質溶液以去除色彩及/或氣味化合物。
- 如請求項35或37之方法,其中在乾燥前對該經濃縮及/或經滲濾之酸化蛋白質溶液進行巴氏殺菌。
- 如請求項51之方法,其中該巴氏殺菌步驟係在選自由以下組成之群之溫度及時間下實現:約55℃至約85℃並保持約10秒至約60分鐘、約60℃至約70℃並保持約10分鐘至約60分鐘及約70℃至約85℃並保持約10秒至約60秒。
- 如請求項41之方法,其中使該經濃縮且經滲濾之酸化大豆蛋白質溶液經受乾燥步驟(g)以提供具有至少約90 wt% (N × 6.25) d.b.之蛋白質含量之非大豆含油種子蛋白質分離物。
- 如請求項1之方法,其中在乾燥步驟(g)前使該視情況經濃縮且視情況經滲濾之酸化非大豆含油種子蛋白質溶液之pH升高至選自由小於約8.0、約6.0至約8.0及約6.5至約7.5組成之群之值。
- 如請求項35或37之方法,其中該濃縮及/或滲濾步驟係以有利於去除胰蛋白酶抑制劑之方式操作。
- 如請求項1之方法,其中在該提取步驟(a)期間存在還原劑。
- 如請求項35或37之方法,其中在該濃縮步驟(e)及/或滲濾步驟(f)期間存在還原劑。
- 如請求項57之方法,其中存在該還原劑以斷裂或重排胰蛋白酶抑制劑之二硫鍵以達成胰蛋白酶抑制劑活性之降低。
- 如請求項1之方法,其中將還原劑在該乾燥步驟(g)之前添加至視情況經濃縮且視情況經滲濾之非大豆含油種子蛋白質溶液及/或添加至該乾燥非大豆含油種子蛋白產品中。
- 如請求項59之方法,其中添加該還原劑以斷裂或重排胰蛋白酶抑制劑之該等二硫鍵以達成胰蛋白酶抑制劑活性之降低。
- 一種大麻蛋白產品,其具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量,且其: 係不利用涉及直接添加鹽之方法步驟來製備 具有極少或無豆腥、生青或蔬菜風味。
- 一種食品產品,其經調配以含有如請求項61之大麻蛋白產品。
- 如請求項62之食品產品,其係飲料。
- 一種大麻蛋白產品,其具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量,及在1 w/v%蛋白質水溶液下在約2至約4之pH下大於約80%之蛋白質溶解度,及在1 w/v%蛋白質水溶液下在約7之pH下小於約30%之蛋白質溶解度。
- 一種大麻蛋白產品,其具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量,及在1 w/v%蛋白質水溶液下在約2之pH下小於約30%之蛋白質溶解度,及在1 w/v%蛋白質水溶液下在約3之pH下小於約20%之蛋白質溶解度,及在1 w/v%蛋白質水溶液下在約7之pH下小於約20%之蛋白質溶解度。
- 一種大麻蛋白產品,其具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量及小於約1.5 wt% d.b.之植酸含量,及在1 w/v%蛋白質水溶液下在約4之pH下小於約60%之蛋白質溶解度。
- 一種大麻蛋白產品,其具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量,其乾燥粉末具有介於約65與約80之間之L*讀值。
- 一種大麻蛋白產品,其具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量,其具有介於約5% d.b與約9 % d.b之間之酸可水解碳水化合物含量。
- 一種大麻蛋白產品,其具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量,其具有包含以下之分子量概況: 約0至約6%大於約100,000 Da 約18%至約30%為約15,000 Da至約100,000 Da 約42%至約50%為約5,000 Da至約15,000 Da 約22%至約35%為約1,000 Da至約5,000 Da。
- 一種大麻蛋白產品,其具有至少約60 wt% (N × 6.25)d.b.之蛋白質含量,其具有包含以下之分子量概況: 約0至約13%大於約100,000 Da 約33%至約63%為約15,000 Da至約100,000 Da 約12%至約42%為約5,000 Da至約15,000 Da 約12%至約26%為約1,000 Da至約5,000 Da。
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