TW201410704A - 長效胰島素及胰促泌素肽之液體製劑 - Google Patents

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Abstract

本發明係有關於長效胰島素及胰促泌素肽的組合之液體製劑，其包含屬於生理上活性胜肽之胰島素與胰促泌素肽，以及不含白蛋白的安定劑，其中該安定劑係包含緩衝劑、糖醇、非離子性界面活性劑及等張劑；及該液體製劑之製備方法。本發明之液體製劑不含人類血清白蛋白及人體的潛在毒性因子，因而對高濃度胰島素接合物及胰促泌素肽接合物具有優異的儲存安定性而無病毒污染風險。

Description

長效胰島素及胰促泌素肽之液體製劑
本發明係有關於長效胰島素及胰促泌素肽的組合之液體製劑，其包含屬於生理上活性胜肽之胰島素與胰促泌素肽，以及不含白蛋白的安定劑，其中該安定劑係包含緩衝劑、糖醇、非離子性界面活性劑及等張劑；及該液體製劑之製備方法。
胰島素乃胰臟β細胞分泌的胜肽，在體內血糖的調控上扮演中心要角。若胰島素的分泌量不足或分泌的胰島素在體內無法適當發揮功能，則血糖濃度將升高，引發稱為糖尿病的代謝疾病。當胰島素分泌不當或在體內無法適當發揮功能時，血糖未調節而造成血糖濃度升高，此型糖尿病稱作為第二型糖尿病。第一型糖尿病係因胰臟無法製造足量胰島素以調節增高的血糖而導致。第二型糖尿病的治療通常係投予主要由化學化合物所組成的口服降血糖劑，偶爾有些病人可投予胰島素。另一方面，第一型糖尿病的治療則須投予胰島素。
廣為使用的胰島素治療為於餐前及餐後注射胰島素。目前可取得的胰島素為腸道外注射製劑，原則上以皮下注射投予為主，但依據療程長短會有不同的投予方法。注射胰島素比 口服藥物更能有效地減低血糖濃度，且可安全地施打在口服藥物無法使用的情況。又，腸道外注射胰島素沒有劑量限制，但因須每日三次持續投予，故有諸如造成對針頭反感、投予方法困難、低血糖症狀以及因長期投予胰島素而導致體重增加的缺點。更明確言之，體重增加提高了發展成心血管疾病的風險，且可能擾亂身體對血糖濃度的調節功能。同時，曾有多方試圖在投藥至體內後，藉由長時間維持血中高藥物濃度以最大化胰島素胜肽藥物的療效。結果，長效型胰島素藥物得以被發展、製作與銷售。此等長效型藥物包括蘭德仕(Lantus)(甘精胰島素(insulin glargrine)；賽諾菲安萬特(Sanofi Aventis))及瑞和密爾(Levemir)(胰島素得密爾(insulin detemir)；諾和諾德(Novo Nordisk))。與赫氏中性魚精蛋白(neutral protamine Hagedorn,NPH)胰島素不同，長效型藥物在催眠樣狀態期間具有較低的低血糖風險。特別地，瑞和密爾能夠減緩體重增加的症狀。但投予方法涉及每日注射一或二劑仍為其缺點。
同時，類升糖素肽-1(GLP-1)乃一型胰促泌素肽，係 從迴腸及大腸的L-細胞分泌的腸促胰島素激素。GLP-1的主要功能係增加胰島素的分泌，以建立體內的葡萄糖依賴型胰島素分泌，藉此預防低血糖。藉由此功效，GLP-1可應用於治療第二型糖尿病。但因GLP-1的血清半生期短至2分鐘，故其發展成藥物的限制高。因此，新穎GLP-1促效劑已被發展與製造，稱作艾塞素-4(exendin-4)。艾塞素-4乃大毒蜥蜥蜴唾液腺製造的GLP-1促效劑。此外，艾塞素-4能抵抗二肽基肽酶-4(DPP-IV)的作用，且具有比GLP-1更高的生理活性。因此，艾塞素-4在體內的半生期為2至4小時，遠比GLP-1所具者長得多(美國專利註冊第5,424,286 號)。然而，單純增加對DPPIV的抗性無法使藥物之生理活性持續足夠的時間。舉例言之，目前可得的艾塞素-4(艾塞那肽(exenatide))每日須藉注射投予病人兩次，且仍有造成嘔吐及噁心的缺點。
因此，至於為了維持蛋白質藥物活性並同時改良其 於體內的安定性以解決前述問題之方法，本案發明人先前曾揭示一種藉由使用非肽基聚合物作為連接基，而透過共價鍵將已知之生理上活性多肽與免疫球蛋白Fc區連接而發展的長效蛋白質接合物(韓國專利第10-0725315號)。特別地，先前已證實長效胰島素接合物及長效艾塞素-4接合物具有顯著延長的活體內時間(韓國專利註冊第10-1058290號及公告第10-2011-0134210號)。然而，若投予治療上有效量的胰島素或艾塞素-4以維持穩定的血糖濃度，則可能導致體重增加或嘔吐及噁心的症狀。因此，極度需要發展一種可減低用藥劑量與投藥頻率，同時對糖尿病提供優異療效的治療方法。
在此背景之下，致力於提供長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的組合之穩定液體製劑，其可長時間儲存兩種接合物的組合而無病毒污染風險，本案發明人已使用包含緩衝劑、糖醇、作為等張劑的氯化鈉、及非離子性界面活性劑的安定劑提升兩種接合物之組合的安定性，而且發展出具有成本效益且穩定的液體製劑，因而完成本發明。
本發明之一個目的係提供一種長效胰島素及胰促泌 素肽的組合之液體製劑，其包含屬於生理上活性胜肽的胰島素與胰促泌素肽，以及不含白蛋白的安定劑，其中該安定劑係包含緩衝劑、糖醇、非離子性界面活性劑及等張劑。
本發明之另一個目的係提供一種液體製劑的製備方法。
本發明之另一個目的係提供一種用於預防或治療糖尿病之醫藥組成物，其包含胰島素及胰促泌素肽。
本發明之另一個目的係提供一種治療糖尿病之方法，其包含將該組成物投予罹患糖尿病的個體。
本發明之長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的組合顯示治療糖尿病的優異療效。又復，本發明之長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的組合之液體製劑包含安定劑，其中該安定劑包括緩衝劑、糖醇、等張劑及非離子性界面活性劑，但不含人類血清白蛋白及其它人體的潛在毒性因子，因而無病毒污染風險。又，該液體製劑提供優異的安定性以儲存長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物，其中該接合物係以胰島素及胰促泌素肽與免疫球蛋白Fc區所組成，相較於天然形式，具有更大的分子量且能存於活體內更長的時間。特別地，本發明提供一種長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的組合之穩定液體製劑。本發明之液體製劑乃提供優異儲存安定性的簡單製劑，因而比其它安定劑或凍乾配方更具成本效益。又，比較其它習知的胰島素及胰促泌素肽製劑，本發明之液體製劑可長時間維持體內蛋白質活性，因而可用作為有效的藥物製劑。
第1圖顯示針對以表3之組成物所製備的長效胰促泌素肽接合物製劑於40℃儲存1週時沈澱產生的監測結果。
第2圖顯示針對以表4之組成物所製備的長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物於40℃儲存4週時進行IE-HPLC分析的結果。
第3圖顯示針對以表4之組成物所製備的長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物於40℃儲存4週時進行RP-HPLC分析的結果。
第4圖顯示具有不同組成的組合配方與分開配方比較後各自產生蛋白質沈澱的監測結果。
[最佳模式]
本發明之一態樣中，提供一種長效胰島素及胰促泌素肽的組合之液體製劑，其包含屬於生理上活性胜肽之的胰島素與胰促泌素肽，以及不含白蛋白的安定劑，其中該安定劑係包含緩衝劑、糖醇、非離子性界面活性劑及等張劑。本發明之液體製劑的特徵在於胰島素及胰促泌素肽係共同投予。
胰島素可以醫藥上有效量的長效胰島素接合物形式包含於液體製劑中，其中該胰島素係連接至免疫球蛋白Fc區。胰促泌素肽可以醫藥上有效量的長效胰促泌素肽接合物形式包含於液體製劑中，其中該胰促泌素肽係連接至免疫球蛋白Fc區。
本文所採用術語「長效胰島素接合物」一詞係指接 合物，其包含連接至免疫球蛋白Fc區的生理上活性胰島素，其中該胰島素包含衍生物、變體、前驅物及片段；亦可指稱相較於天然胰島素，在活體內具有增加的生理活性時間的接合物。本文所採用術語長效胰島素接合物一詞係指透過非肽基連接基或肽基連接基而連接至免疫球蛋白Fc區的胰島素。本文所採用術語「長效胰促泌素肽接合物」一詞係指接合物，其包含連接至免疫球蛋白Fc區的生理上活性胰促泌素肽，其中該胰促泌素肽包含衍生物、變體、前驅物及片段；亦可指稱相較於天然胰促泌素肽，在活體內具有增加的生理活性時間的接合物。本文所採用術語長效胰促泌素肽接合物一詞係指透過非肽基連接基或肽基連接基而連接至免疫球蛋白Fc區的胰促泌素肽。
本文所採用術語「長效」詞係指相較於天然胜肽，具有生理活性之時間的延長。術語「接合物」一詞係指胜肽形式，其中胰島素或胰促泌素肽係連接至免疫球蛋白Fc區。
相較於天然胰島素或胰促泌素肽，本發明之長效胰島素接合物或胰促泌素肽接合物，具有提升的耐久效果。該長效胰島素接合物或胰促泌素肽接合物的類型包括：來自天然胰島素或胰促泌素肽的胺基酸經過修飾、取代、添加或刪除所產生的一種胰島素或胰促泌素肽之形式；胰島素或胰促泌素肽連接至生物可分解聚合物(如PEG)所形成的接合物；其中胰島素或胰促泌素肽連接至具高耐久度的蛋白質(如白蛋白或免疫球蛋白)所形成的接合物；其中胰島素或胰促泌素肽連接至與體內白蛋白具有結合親和力之脂肪酸所形成的接合物；或包覆於生物可分解奈米粒子中的胰島素或胰促泌素肽之形式，但並不限於此。
本發明使用的長效胰島素或胰促泌素肽接合物為將 合成之胰島素或胰促泌素肽連接至免疫球蛋白Fc區所製備。連接二者的方法可為透過非肽基聚合物使胰島素或胰促泌素肽與免疫球蛋白Fc區交聯，或藉由基因重組產生連接胰島素或胰促泌素肽與免疫球蛋白Fc區之融合蛋白質。
本文所採用術語「胰島素」一詞係指胰臟因應體內 血糖濃度升高而分泌的胜肽，藉此將葡萄糖吸收入肝、肌肉或脂肪組織中轉換成肝醣，並停止使用脂肪作為能源，因而發揮調控血糖的功能。此種胜肽包括天然胰島素、基礎胰島素、其促效劑、前驅物、衍生物、片段及變體。
本文所採用術語「天然胰島素」一詞係指胰臟分泌的激素，其能促進葡萄糖吸收並抑制細胞內的脂肪分解，因而調控血糖濃度。胰島素係經由處理其前驅物(亦即，不具調節血糖濃度)的功能之胰島素原所生成。胰島素的胺基酸序列如下：α鏈：Gly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Thr-Ser-Ile-Cys-Ser-Leu-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-Asn(SEQ ID NO.1)
β鏈：Phe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His-Leu-Val-Glu-Ala-Leu-Tyr-Leu-Val-Cys-Gly-Glu-Arg-Gly-Phe-Phe-Tyr-Thr-Pro-Lys-Thr(SEQ ID NO.2)
本文所採用術語「基礎胰島素」一詞係指每日調節正常血糖濃度變化的胜肽，此胜肽之實例包括瑞和密爾(levemir)、蘭德仕(lantus)及德谷胰島素(degludec)。本文所採用術 語「胰島素促效劑」一詞係指結合至內生性的胰島素受體並顯示與胰島素相同生物活性之化合物，其與胰島素的結構差異無關。 本文所採用術語「胰島素變體」一詞係指具有一或多個不同於天然胰島素之胺基酸序列的胜肽，其具有調節體內血糖濃度的功能。該胰島素衍生物可藉由來自天然胰島素的某些胺基酸經過取代、添加、刪除及修飾或其組合中任一種方式而製備。本文所採用術語「胰島素衍生物」係指與天然胰島素具有至少80%胺基酸序列同源的胜肽，其胺基酸殘基上的某些基團可經化學性取代(例如α-甲基化、α-羥基化)、刪除(例如脫胺化)或修飾(例如N-甲基化)，且其具有調節體內血糖濃度的功能。本文所採用術語「胰島素片段」一詞係指在天然胰島素的N端或C端具有一或多個胺基酸的添加或刪除的片段，其中可添加非天然胺基酸(例如D型胺基酸)。該胰島素片段具有調節體內血糖濃度的功能。
用以製備該胰島素的促效劑、衍生物、片段及變體 之方法可各自個別地或組合地施用。舉例言之，本發明之範疇包含具有一或多個不同於天然胜肽之胺基酸序列之胜肽，其具有脫胺化的N端胺基酸殘基，同時具有調節體內血糖濃度的功能。
本發明使用的胰島素可藉重組技術產生或藉固相合 成法合成。又，本發明使用的胰島素可連接至非肽基聚合物，該非肽基聚合物可用作為本發明的連接基。藉由連接胰島素與作為連接基的非肽基聚合物，可改良胰島素的安定性並同時維持其活性。胜肽可藉使用基因重組技術而作為連接基。
本文所採用術語「非肽基聚合物」一詞係指由一或 多個重複單元組成的生物可相容性聚合物，其中該重複單位係透 過肽鍵以外之任一型共價鍵而彼此連接。於本發明中，「非肽基聚合物」可與「非肽基連接基」互換使用。
本發明可使用的非肽基聚合物係選自於由下列各者 所組成之群組：生物可分解聚合物，諸如聚乙二醇、聚丙二醇、乙二醇與丙二醇之共聚物、聚氧乙基化多元醇、聚乙烯醇、多醣、葡聚糖、聚乙烯基乙基醚、聚乳酸(PLA)及聚乳酸-乙醇酸(PLGA)；脂質聚合物；幾丁質；玻尿酸及其組合。較佳者，使用聚乙二醇作為非肽基聚合物。本領域習知之其衍生物及易使用本領域習知之方法所製備的衍生物亦於本發明範疇內。
藉由傳統讀框融合法所製備的用於融合蛋白質之肽 基連接基，其限制為易被體內蛋白酶分解，因而無法如使用載體時，可充分增加活性藥物的血清半生期。然而，於本發明中，藉由使用具有抵抗蛋白酶之能力的聚合物，胜肽的血清半生期可維持在與使用載體時相近的水平。因此，本發明可使用的非肽基聚合物包括任一型非肽基聚合物，只要其具有前述功能，亦即對蛋白酶有抗性即可。該非肽基聚合物具有1至100kDa分子量，且較佳為1至20kDa。又，本發明之非肽基聚合物係連接至免疫球蛋白Fc區，可為單一類型聚合物或不同類型聚合物的組合。
本發明使用的非肽基聚合物可具有可連接至免疫球 蛋白Fc區及蛋白質藥物之官能基。在非肽基聚合物兩末端的該等官能基較佳為選自於由下列各者所組成之群組：反應性乙醛基、丙醛基、丁醛基、順丁烯二醯亞胺基、及丁二醯亞胺衍生物。該丁二醯亞胺衍生物可為丁二醯亞胺基丙酸酯、羥基丁二醯亞胺基、丁二醯亞胺基羧甲基或丁二醯亞胺基碳酸酯。特別地，當非肽基聚 合物之兩末端皆具有反應性乙醛基時，可最小化非專一性結合，使非肽基聚合物與生理上活性多肽及免疫球蛋白在各末端進行有效連接。經還原烷基化反應形成由醛基鍵結的終產物比由醯胺鍵連結的終產物更具穩定性。該醛官能基於低pH值時選擇性地結合至N端，而於高pH值(如pH 9.0)時，與離胺酸殘基形成共價鍵。 在非肽基聚合物兩末端的官能基可為相同或相異。舉例言之，非肽基聚合物可在一末端具有順丁烯二醯亞胺基，而其另一端具有乙醛基、丙醛基或丁醛基。當以兩末端具有羥基的聚乙二醇作為非肽基聚合物時，該羥基可藉由習知化學反應活化成為各種官能基，或可使用市售之具有經官能基修飾的聚乙二醇以製備本發明之長效胰島素接合物。
較佳者為該非肽基聚合物可連接至胰島素β鏈的N 端。
本發明之胰島素可使用非肽基聚合物修飾。
當使用免疫球蛋白片段以發展長效胰島素接合物 時，若生理上活性多肽係使用PEG修飾用以增加藥物的耐久性而不造成低血糖，則可能減低效價。然而，效價的減低變成長效胰島素接合物的一大優勢，因此，經PEG修飾的胰島素可透過非肽基聚合物而與免疫球蛋白Fc區結合。可用以修飾胰島素的該非肽基聚合物類型係同前述，且較佳為聚乙二醇(PEG)。於經PEG修飾的胰島素中，PEG係選擇性地連接至胰島素α鏈的N端或連接至β鏈的特定離胺酸殘基。修飾胰島素的PEG較佳為在末端包含乙醛基或丁二醯基，更佳為包含丁二醯基者。
本發明之長效胰島素接合物的製備方法及效果係揭 示於韓國專利公開案第10-2011-0134210、10-2011-0134209、及10-2011-0111267號。熟諳此領域之人士藉由參考此等參考文獻能夠製備本發明使用的長效胰島素接合物。又，本案發明人先前發現製備長效胰島素接合物的一種方法，該方法係將免疫球蛋白Fc區之N端進行單-PEG基化，並將其附接至胰島素β鏈的第一個苯基丙胺酸。
本文所採用術語「胰促泌素肽」一詞係指具有分泌 胰島素功能的胜肽，及其可刺激胰島素於胰臟β細胞的合成或表現。該胰促泌素肽較佳為類升糖素胜肽-1(GLP-1)、類升糖素胜肽-2(GLP-2)、艾塞素(exendin)-3或艾塞素-4，但不限於此。該胰促泌素肽包括天然胰促泌素肽、及其前驅物、促效劑、衍生物、片段及變體。
本發明之胰促泌素肽的衍生物可指稱刪除胰促泌素 肽N端的胺基(amino group)(或胺基(amine group))所產生的衍生物(亦即，脫胺基-組胺醯基衍生物)；經由羥基取代胰促泌素肽的胺基所產生的衍生物(亦即，β-羥基咪唑基丙醯基衍生物)；經由二甲基修飾胰促泌素肽的胺基所產生的衍生物(亦即，二甲基-組胺醯基衍生物)；經由羧基取代胰促泌素肽N端的胺基所產生的衍生物(亦即，β-羧基咪唑基丙醯基衍生物)；或藉由刪除N端組胺酸殘基的α-碳，只留下咪唑基乙醯基，而將胰促泌素肽胺基的正電荷去除後所產生的衍生物(咪唑基乙醯基衍生物)。此外，本發明之範疇包含其它形式的N端胺基修飾的衍生物。
於本發明中，該胰促泌素肽衍生物較佳為艾塞素-4N 端的胺基或胺基酸殘基經化學性修飾所生成的衍生物，更佳為位 於艾塞素-4N端的第一個胺基酸，即組胺酸殘基上的α-碳之α-胺基或α-碳基經過取代或刪除所產生的艾塞素-4衍生物。又更佳者，該胰促泌素肽衍生物為：脫胺基-組胺醯基艾塞素-4(DA-艾塞素-4)，其係藉由刪除艾塞素-4N端的胺基所產生；β-羥基咪唑基丙醯基艾塞素-4(HY-艾塞素-4)，其係由藉羥基或羧基取代艾塞素-4產生；β羧基咪唑基丙醯基艾塞素-4(CX-艾塞素-4)；二甲基-組胺醯基-艾塞素-4(DM-艾塞素-4)，其係藉二甲基修飾艾塞素-4所產生；或咪唑基乙醯基-艾塞素-4(CA-艾塞素-4)，其係刪除N端組胺酸殘基的α-碳所產生。
GLP-1乃小腸分泌的激素，而且係正常作用以刺激胰島素的生物合成及分泌、遏止升糖素的分泌及促進細胞吸收葡萄糖。升糖素前驅物在小腸中會被分解成三種胜肽，為升糖素、GLP-1及GLP-2。此處的GLP-1係指GLP-1(1-37)，其不具分泌胰島素的功能，但經加工形成GLP-1(7-37)時則變成具有活性。GLP-1(7-37)的胺基酸序列如下：GLP-1(7-37)：HAEGT FTSDV SSYLE GQAAK EFIAW LVKGR G(SEQ ID No.3)
本文所採用術語「GLP-1衍生物」一詞係指具有與天然GLP-1至少80%序列同源的胜肽，且其可為經化學性修飾之形式，該形式顯現更好或至少相等的促胰島素分泌活性。本文所採用術語「GLP-1片段」一詞係指一於天然GLP-1的N端或C端具有一或多個添加或刪失的胺基酸的胜肽之形式，其中該添加的胺基酸可為非天然胺基酸(例如D型胺基酸)。本文所採用術語「長 效胰促泌素肽接合物」係指相較於天然胰促泌素肽，提升的具有耐久效果的胜肽。該長效胰促泌素肽接合物可為其中天然胰促泌素肽的胺基酸經過修飾、取代、添加或刪除的形式；其中胰島素連接至生物可分解聚合物(如PEG)之接合物形式；其中胰島素連接至具有高耐久度的蛋白質(如白蛋白、免疫球蛋白及其片段)之接合物形式；其中胰促泌素肽連接至與體內白蛋白具有結合親和力的脂肪酸之接合物形式；或包覆在生物可分解奈米粒子中的胰促泌素肽，但該長效胰促泌素肽接合物的類型並不限於本發明。
本文所採用術語「GLP-1變體」一詞係指具有一或 多個不同於天然GLP-1的胺基酸序列之胜肽，其經加工後會具有分泌胰島素的功能。
艾塞素-3及艾塞素-4乃39個胺基酸組成的胰促泌素肽，其具有與GLP-1的53%胺基酸序列同源。艾塞素-3及艾塞素-4的胺基酸序列如下：艾塞素-3 HSDGT FTSDL SKQME EEAVR LFIEW LKNGG PSSGA PPPS(SEQ ID No.4)
艾塞素-4 HGEGT FTSDL SKQME EEAVR LFIEW LKNGG PSSGA PPPS(SEQ ID No.5)
艾塞素促效劑係指結合至活體內的艾塞素受體並具有與艾塞素相同生物活性的物質，其與艾塞素的結構相似性無關。艾塞素衍生物係指顯示與天然艾塞素至少80%序列同源之胜肽，其胺基酸殘基上的某些基團可經化學性取代(例如α-甲基化及α-羥基化)、刪除(例如脫胺化)或修飾(例如N-甲基化)，且該艾塞素衍生物具有分泌胰島素的功能。
艾塞素片段係指其中於天然艾塞素的N端或C端具 有一或多個添加或刪除的胺基酸之胜肽形式，其中可添加非天然胺基酸(例如D型胺基酸)。該艾塞素片段具有分泌胰島素的功能。
艾塞素變體乃具有一或多個不同於天然艾塞素的胺 基酸序列且具有分泌胰島素的功能之胜肽。艾塞素變體包含艾塞素-4的第12個胺基酸，即離胺酸，經絲胺酸或精胺酸取代後所產生的胜肽。製備各艾塞素促效劑、衍生物、片段及變體的方法可各自個別地或組合地使用。舉例言之，胰促泌素肽的範圍包含具有一或多個不同於天然胜肽之胺基酸序列的胰促泌素肽(其具有脫胺化之N端胺基酸殘基)。本發明可使用的天然胰促泌素肽及經修飾的胰促泌素肽可藉由固相合成法合成。又，含天然胰促泌素肽在內的大部分天然胜肽皆可藉由重組方法製造。
本發明使用的長效胰促泌素肽接合物具有使用 基因重組技術而透過非肽基連接基或肽基連接基而連接至免疫球蛋白片段(如免疫球蛋白Fc)的胰促泌素肽之形式。該非肽基連接基係與前述相同。該長效胰促泌素肽接合物係藉由使用免疫球蛋白片段作為長效胰島素接合物製備。該長效胰促泌素肽接合物維持既有的胰促泌素肽生理活性，諸如促進胰島素的合成與分泌、抑制食欲、誘發體重減輕、提升β細胞對血清葡萄糖的敏感度、促進β細胞增殖、延遲胃排空及抑制升糖素，且因該胰促泌素肽的血清半生期的延長，故也具有在活體內提升耐久性的效果。因此，長效胰促泌素肽接合物可有效用於糖尿病及肥胖的治療。
為了製備本發明使用的長效胰促泌素肽接合物，可 參考下列參考文獻：韓國專利註冊案第10-0725315號、韓國專利公開案第10-2009-0008151號及韓國專利註冊案第10-1058290號。熟諳此領域之人士可根據前述參考文獻製備本發明使用的長效胰促泌素肽接合物。
此外，本案發明人先前已經發展出一種長效艾塞素-4接合物之製法，係經由首先將PEG附接至咪唑基乙醯基艾塞素-4(CA艾塞素-4)，接著將該經PEG修飾的艾塞素-4連接至免疫球蛋白Fc。
本發明使用的胰島素及胰促泌素肽係以非肽基聚合物作為連接基而連接至載體。本發明使用的載體可選自於由免疫球蛋白Fc區、白蛋白、轉鐵蛋白及PEG所組成的群組，且較佳為免疫球蛋白Fc區。
本發明之長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物各自具有胰島素或胰促泌素肽，其係透過非肽基連接基而連接至免疫球蛋白Fc區且其具有持久性及安定性。於本發明中，「免疫球蛋白Fc」可與「免疫球蛋白片段」互換使用。
此外，因免疫球蛋白Fc區相較於完整免疫球蛋白分子具有相對低的分子量，故其使用上有利於接合物的製備與純化以及獲得高產率。此外，免疫球蛋白Fc區不含Fab片段，該Fab片段依據其抗體亞類而會有不同胺基酸序列，故為高度異源性，因而可預期免疫球蛋白Fc區具有較高的同質性及較低的抗原性。
本文所採用術語「免疫球蛋白Fc區」一詞係指一種蛋白質，其含有免疫球蛋白的重鏈恆定區2(CH2)及重鏈恆定區3(CH3)，但排除該免疫球蛋白的重鏈及輕鏈可變區、重鏈恆定區1 (CH1)及輕鏈恆定區1(CL1)。該重鏈恆定區可復包含一鉸鏈區。又，本發明之免疫球蛋白Fc區可含有部分或全部的Fc區，包括重鏈恆定區1(CH1)及/或輕鏈恆定區1(CL1)，但重鏈及輕鏈可變區除外，只要其具有實質上相似於或優於天然蛋白質之生理功能即可。又，該Fc區可為具有刪除相對較長CH2及/或CH3的胺基酸序列部分的片段。換言之，本發明之免疫球蛋白Fc區可包含：(1)CH1功能域、CH2功能域、CH3功能域及CH4功能域；(2)CH1功能域及CH2功能域；(3)CH1功能域及CH3功能域；(4)CH2功能域及CH3功能域；(5)一或多個功能域與免疫球蛋白鉸鏈區(或鉸鏈區之部分)的組合；及(6)該重鏈恆定區及該輕鏈恆定區的各個功能域之二元體。
又，本發明之免疫球蛋白Fc區包括天然胺基酸序列及其序列衍生物(突變株)。該胺基酸序列衍生物具有與天然胺基酸序列不同的序列，其不同的原因在於一或多個胺基酸殘基的刪除、插入、非保守取代、保守取代或其組合。舉例言之，於IgG Fc中，已知對結合作用為重要的胺基酸殘基位於位置214至238、297至299、318至322、或327至331，而且可用作為修飾作用之適當標靶。
此外，可能有其它各種衍生物，該衍生物包含能夠形成雙硫鍵的區域經刪除者、天然Fc形式的N端中的數個胺基酸殘基經刪除者，或添加蛋胺酸殘基至天然Fc形式者。此外，為了去除作用子(effector)功能，補體結合位置，諸如Clq結合位置及抗體依賴性細胞媒介胞殺作用(ADCC)位置，可能發生刪除。此種免疫球蛋白Fc區的序列衍生物之製備技術係揭示於WO 97/34631及WO 96/32478。
通常不改變分子活性的蛋白質及胜肽中的胺基酸交 換乃本領域中已知者(H.Neurath、R.L.Hill，The Protein，Academic Press，New York，1979)。最常見的交換為Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Thy/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Val、Ala/Glu及Asp/Gly之雙向交換。若有所需，Fc區可藉由磷酸化、硫酸化、丙烯酸化、糖化、甲基化、法尼基化、乙醯化、醯胺化等而予修正。
前述Fc衍生物為與本發明之Fc區具有相同的生物 活性或具有例如對熱、pH等的改良結構安定性之衍生物。
此外，此等Fc區可得自分離自人類及其它動物，包含牛、山羊、豬、小鼠、兔、倉鼠、大鼠及天竺鼠的天然形式，或可為得自轉形動物細胞或微生物的其重組株或其衍生物。本文中，其可藉由單離得自人類或其它動物有機體的全免疫球蛋白及以蛋白解酶處理之而得自天然免疫球蛋白。木瓜酶將天然免疫球蛋白分解成Fab區及Fc區，而經胃蛋白酶處理可得pF'c及F(ab)2片段。此等片段可進行例如粒徑排阻層析法，而單離成Fc或pF'c。較佳為人類衍生之Fc區乃得自微生物的重組免疫球蛋白Fc區。
此外，本發明之免疫球蛋白Fc區可呈具有天然糖鏈形式，具有較天然形式為增加的糖鏈，或具有較天然形式為減少的糖鏈，或可為去糖基化形式。免疫球蛋白Fc糖鏈的增加、減少或去除可藉本領域常用的方法達成，諸如化學方法、酶試驗法及運用微生物的基因工程法。從Fc區去除糖鏈，可使其對補體(clq)的結合親和力銳減，並使抗體依賴性細胞媒介胞殺作用或補體依 賴性胞殺作用減少或消失，因而於活體內不會誘生不必要的免疫反應。就此方面而言，去糖基化或無糖基化形式的免疫球蛋白Fc區更適用於本發明之一目的，即作為藥物載體。
本文所採用術語「去糖基化」一詞係指以酶作用方 式從Fc區去除糖部分；而術語「無糖基化」一詞係指Fc區係由原核生物，較佳為大腸桿菌(E.coli)所製造，即未經糖基化作用之形式製造。
同時，免疫球蛋白Fc區可衍生自人類或動物，諸如牛、山羊、豬、小鼠、兔、倉鼠、大鼠、天竺鼠，且較佳為人類。
此外，免疫球蛋白Fc區可為衍生自IgG、IgA、IgD、IgE及IgM的Fc區，或由其組合或雜合體所製成。較佳為衍生自IgG或IgM，此乃人體血液中最豐富的蛋白質，且最佳為衍生自IgG，其已知可增加配體結合蛋白質的半生期。
本文所採用術語「組合」一詞係指具有相同來源之編碼成單鏈免疫球蛋白Fc區的多肽連接至不同來源的單鏈多肽以形成之二元體或多元體。換言之，該二元體或多元體可從選自於由IgG Fc、IgA Fc、IgM Fc、IgD Fc及IgE Fc片段所組成的群組中之二或更多二或更多個片段形成。
本文所採用術語「雜合體」一詞係指存在於單鏈免疫球蛋白Fc區中，具有不同來源的編碼成二或更多二或更多個免疫球蛋白Fc區的序列。於本發明中，可能有各型雜合體。換言之，功能域雜合體可由選自於由IgG Fc、IgM Fc、IgA Fc、IgE Fc、及IgD Fc的CH1、CH2、CH3及CH4所組成的群組中之一至四個功能域所組成，且可包含鉸鏈區。
另一方面，IgG係分成IgG1、IgG2、IgG3及IgG4亞 類，本發明包括其組合或雜合體。較佳為IgG2及IgG4亞類，且最佳為罕見具有效應物功能(如補體依賴性胞殺作用(CDC))的IgG3及IgG4亞類、及IgG4之Fc區，。
本發明之藥物載體，該免疫球蛋白Fc區最佳為人類 IgG4衍生的非糖基化Fc區。該人類衍生的Fc區係比非人類衍生Fc區更佳，後者在人體內之作用如同抗原，會引發非期望的免疫反應，如製造對抗該抗原的新抗體。
本發明之長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合 物組合的液體製劑包含治療上有效量之長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物。本發明使用的長效胰島素接合物之濃度為0.1毫克/毫升至200毫克/毫升，且較佳為10毫克/毫升至200毫克/毫升。本發明使用的長效胰促泌素肽接合物之濃度為0.1毫克/毫升至200毫克/毫升，且較佳為0.5毫克/毫升至150毫克/毫升。相較於既有低濃度之液體製劑，於高濃度的本發明之長效胰島素及胰促泌素肽接合物的液體製劑，每劑包含高濃度之胰島素接合物及胰促泌素肽接合物。因此，與既有液體製劑不同，本發明之液體製劑可穩定地提供胰島素至體內、允許高濃度的胰島素接合物及胰促泌素肽接合物可共同給予，以及穩定地儲存不會沈澱。
本文所採用術語「安定劑」一詞係指允許可穩定地 儲存長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的物質。術語「穩定化」一詞係指活性成分的損耗小於某個量，一般而言，在某段期間及在特定儲存條件下係小於10%。當長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物在5±3℃儲存2年、在25±2℃儲存6個月， 或在40±2℃儲存1週或2週後，其殘留純度為90%或以上，且更佳為92%至95%時，該製劑被視為穩定製劑。對於蛋白質例如長效胰島素接合物或長效胰促泌素肽接合物而言，儲存安定性對於提供準確劑量以及遏止對長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的抗原性物質的潛在形成上極其重要。儲存期間，長效胰島素接合物或長效胰促泌素肽接合物的10%損耗對實質投藥上為可接受，除非造成組成物中形成聚集物或片段而導致抗原性化合物的形成。
本發明之安定劑較佳為包含緩衝劑、糖醇、作為等 張劑的氯化鈉，及非離子性界面活性劑，用以穩定化長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的組合，且可更包含蛋胺酸。
該緩衝劑的作用係維持溶液的pH值，防止液體製劑 的pH值劇烈改變，用以穩定化長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的組合。緩衝劑可包括鹼鹽(磷酸鈉或鉀或其氫鹽或其二氫鹽)、檸檬酸鈉/檸檬酸、乙酸鈉/乙酸、領域本領域習知的任何其它醫藥上可接受之pH緩衝劑及其組合。此緩衝劑之較佳實例包括檸檬酸鹽緩衝劑、乙酸鹽緩衝劑及磷酸鹽緩衝劑，其中以乙酸鈉緩衝劑或檸檬酸鈉緩衝劑為佳。組成乙酸鈉緩衝劑的乙酸濃度較佳為占溶液總體積的5mM至100mM，且更佳為5mM至50mM。緩衝劑的pH較佳為4.0至8.0，更佳為5.0至7.0，又更佳為5.0至6.5。
該糖醇係作用以提高長效胰島素接合物及長效胰促 泌素肽接合物的組合的安定性。於本發明中，糖醇的濃度較佳為占製劑總體積的1至20%(w/v)，更佳為占製劑總體積的1至15% (w/v)。本發明有用的糖醇之實例包括甘露糖醇及山梨糖醇，且較佳實施例為甘露糖醇。
當呈溶液劑的長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽 接合物的組合注射入體內時，該等張劑具有維持適當滲透壓的效果。又，該等張劑具有進一步穩定化該組合呈溶液劑時的效果。 該等張劑典型地為水溶性無機鹽，包括氯化鈉、硫酸鈉、檸檬酸鈉，且較佳為氯化鈉。該等張劑之含量可根據配方內各成分的類型及用量作適當調整，故包含全部混合物的液體製劑可呈等張溶液。此種等張劑之濃度可占溶液總體積的0.5毫克/毫升至30毫克/毫升，但不限於此。
非離子性界面活性劑減低蛋白質溶液的表面張力， 防止蛋白質吸收或聚集至疏水性表面上。本發明有用的非離子性界面活性劑之實例包括聚山梨酸酯類、泊洛沙姆及其組合，較佳為聚山梨酸酯類。聚山梨酸酯類非離子性界面活性劑包括聚山梨酸酯20、聚山梨酸酯40、聚山梨酸酯60及聚山梨酸酯80。最佳非離子性界面活性劑為聚山梨酸酯20。
高濃度非離子性界面活性劑不適合使用於液體製 劑，其原因為當通過分析法(如紫外光光譜術或等電聚焦)測量蛋白質濃度與測定蛋白質安定性時，高濃度非離子性界面活性劑會誘發干擾效應，造成準確地測定蛋白質安定性的困難。因此，本發明之液體製劑包含較佳為低於0.2%(w/v)，更佳為0.001%(w/v)至0.05%(w/v)的低濃度的非離子性界面活性劑。
包含於本發明之安定劑中的蛋胺酸具有遏止雜質形成而進一步穩定化標靶蛋白質的效果，該雜質形成的原因可能係 溶液中的蛋白質發生氧化。蛋胺酸之濃度係占溶液總體積的0.005%至0.1%(w/v)，且較佳為占溶液總體積的0.01%至0.1%(w/v)。
依據本發明之一個實施例，其顯示當緩衝劑、糖醇 及非離子性界面活性劑存在時添加氯化鈉作為等張劑，長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的組合的儲存安定性會顯著增高。此現象指出使用氯化鈉作為等張劑，同時使用緩衝劑、糖醇及非離子性界面活性劑時，會誘生協同效果，藉此提供給長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的組合高度安定性。
本發明較佳之安定劑為不含白蛋白。由於可用作為 蛋白質安定劑的人類血清白蛋白係從人類血清製造，故經常有受到源自人類的病原性病毒污染的可能性。明膠或牛血清白蛋白可能引起疾病，或在有些病人身上容易誘發過敏反應。因本發明之安定劑不含異源蛋白質，諸如人或動物來源的血清白蛋白或經純化的明膠，故不可能造成病毒污染。
此外，本發明之安定劑可更包含糖類、多元醇或中 性胺基酸。添加該糖類可進一步提高長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的組合的儲存安定性，該糖類之較佳例包括單醣類，諸如甘露糖、葡萄糖、岩藻糖及木糖；以及多醣類，諸如乳糖、麥芽糖、蔗糖、鼠李糖、及葡聚糖。多元醇之較佳例包括丙二醇、低分子量聚乙二醇、甘油、低分子量聚丙二醇及其組合。
除了前述緩衝劑、等張劑、糖醇及非離子性界面活 性劑外，本發明之液體製劑可選擇性地更包含領域本領域習知的其它物質及材料，只要其不影響本發明效果。
本發明之不含白蛋白的高濃度組合液體製劑，對長 效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的組合提供安定性且沒有病毒污染風險，同時提供具有優異儲存安定性的簡單製劑，因此本發明提供比其它安定劑或凍乾配方更高成本效益的製劑。
又，因本發明之液體製劑包含長效胰島素及胰促泌 素肽接合物，其相較於天然胜肽，較具有增加的生理活性時間，故比起習知的胰島素及胰促泌素肽製劑，其在體內的蛋白質活性保有較長時間，因而可用作為有效藥物製劑。又，本液體製劑提供用於儲存高濃度長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的組合之優異安定性。
較佳為本發明之液體製劑可包含長效胰島素接合 物，其中該胰島素及該胰促泌素肽係經由聚乙二醇而連接至免疫球蛋白片段；長效胰促泌素肽；及不含白蛋白的安定劑，其中該安定劑係包含乙酸鹽緩衝劑、甘露糖醇、聚山梨酸酯20及氯化鈉。又，該液體製劑可更包含蛋胺酸。
另一態樣中，本發明提供一種製備本發明之液體製劑的方法。
長效胰島素接合物及胰促泌素肽接合物的組合的安定液體製劑可經由下列步驟製備：生成長效胰島素及胰促泌素肽接合物；及將所生成的長效胰島素及胰促泌素肽接合物與含緩衝劑、糖醇、非離子性界面活性劑及等張劑的安定劑混合。
另一態樣中，本發明提供一種預防或治療糖尿病之組成物，其包含胰島素接合物及胰促泌素肽接合物。
本發明組成物之特徵在於允許長效胰島素接合物及 長效胰促泌素肽接合物可共同投予。
當長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物係共 同投予時，該長效胰島素接合物係作用在胰島素受體上，而同時該長效胰促泌素肽接合物係作用在類升糖素肽-1(GLP-1)受體上。 如此，相較於分開投予兩種接合物，共同投予兩種接合物能夠更有效地減低血糖濃度並驗證穩定變化。此外，當接合物係共同投予時，可降低低血糖風險(低血糖可能出現於單獨投予胰島素時)，並減低體重，及藉由包含胰促泌素肽也減低了胰島素的總劑量。此外，可減低胰促泌素肽(如艾塞素-4)的劑量，因此，共同投予具有減少單獨投予艾塞素-4時所見的副作用(諸如噁心及嘔吐)之優勢。使用長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物可顯著地延長藥物的半生期及於活體內的耐久性，因此，對於需要每日投藥的慢性病人而言，減少投藥頻率高度有利於治療糖尿病，因而改善病人的生活品質。此外，本發明之醫藥組成物具有優異的活體內耐久性及效價，且採用共同投藥法在使用上可顯著地減低劑量。
長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物可同時 地、循序地或相反順序地投予。又，其可為二者的有效量之組合同時投予。較佳為，長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物可置於單一容器內然後共同投予。
此外，本發明之用於共同投予的長效胰島素接合物 及長效胰促泌素肽接合物之組成物，其可製備成單一容器，作為糖尿病治療用的套組形式。該套組可包括醫藥上可接受之載劑及該套組的使用指南。
鏈脲黴素(Streptozotocin,STZ)誘發高血糖小鼠共同 投予長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物並監測其血糖濃度變化。結果顯示，相較於分開投予該接合物，當接合物係共同投予時，其血糖濃度的變化更穩定。於另一個實驗中，第二型糖尿病模式小鼠每週一次共同投予長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物，並且比較投藥前與投藥後的空腹血糖濃度。結果顯示，相較於分開投予兩種接合物，共同投予時顯示調節血糖濃度之效果較高；未觀察到投予胰島素後體重的增加，因而證實共同投予可減低因胰島素所致的體重增加副作用。
本文所採用術語「糖尿病」一詞係指缺乏胰島素的 分泌或胰島素無法適當發揮功能的代謝性疾病。將本發明之組成物共同投予個體，藉調節血糖濃度可治療糖尿病。
本文所採用術語「預防」一詞係指藉共同投予本發 明之組成物防止或延遲糖尿病開始發作的作用。術語「治療」一詞係指藉共同投予本發明之組成物能夠減輕或有利地改變糖尿病症狀之所有作用。糖尿病的治療可施用至可能罹患糖尿病的任何哺乳動物，此等哺乳動物例如包括人類及靈長類，以及家畜，如牛、豬、綿羊、馬、犬及貓，但不限於此，且較佳為人類，本文所採用術語「投予」一詞係指藉某種適當方法將預定量的物質導入病人體內。該組成物可透過習知途徑中之任一者投予，只要該組成物能夠到達標靶組織。投藥途徑包括腹膜內、靜脈、肌肉、皮下、皮內、經口、經局部、鼻內、肺內及直腸內投予，但不限於此。但因胜肽經口投予時會被分解，口服投予之組成物的活性成分須經包覆或調配，用以保護不受胃部分 解。較佳者，接合物可以注射劑型投予。此外，該組成物可運用能夠傳送活性成分進入標靶細胞的某種設備投予。
此外，本發明之醫藥組成物可由多項因素決定，包 括欲治療的疾病類型、投予途徑、病人年齡、性別、體重、病情嚴重程度以及藥物中的活性成分類型。
又復，本發明之醫藥組成物可包含醫藥上可接受之 載劑。如此處使用，「醫藥上可接受之載劑」一詞係指不會干擾生理活性及所投予化合物的性質且不刺激個體的載劑或稀釋劑。為了供口服投予，醫藥上可接受之載劑可包括黏結劑、潤滑劑、崩散劑、賦形劑、增溶劑、分散劑、安定劑、懸浮劑、著色劑及香料。用於注射製劑時，醫藥上可接受之載劑可包括緩衝劑、保藏劑、止痛劑、增溶劑、等張劑及安定劑。用於局部投予製劑時，醫藥上可接受之載劑可包括基劑、賦形劑、潤滑劑及保藏劑。本發明之醫藥組成物可添加醫藥上可接受之載劑而調配成各種劑型。舉例言之，用於口服投予時，醫藥組成物可調配成錠劑、口含錠、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿或薄片。用於注射製劑時，醫藥組成物可調配成單劑安瓿或多劑容器。該醫藥組成物也可調配成溶液、懸浮液、錠劑、丸劑、膠囊及持續釋放製劑。
另一態樣，本發明提出一種預防或治療糖尿病之方 法，該方法係包含將包含長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物的組成物投予可能罹患糖尿病或已患有糖尿病之個體。
於投予步驟中，長效胰島素接合物及長效胰促泌素 肽接合物可共同投予，其中具有適當有效量的該接合物係經組合且合併投予。
本發明之包含長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽 接合物二者的組成物即便減少投藥頻率仍可有效地減低血糖濃度，不會造成副作用如體重增加，因此可有效地用於預防或治療糖尿病。
[發明模式]
下文中將參考實施例以進一步詳細描述本發明。但此等實施例僅用於說明目的，本發明並無意受此等實施例所限。
實施例1：長效胰島素接合物之安定性評估
發展長效胰島素接合物作為延長藥物在體內的血清半生期及預防低血糖的策略。因此，該胰島素接合物係經由免疫球蛋白Fc區、非肽基聚合物及胰島素透過共價鍵的位置專一性接合所生成，其具有顯著延長的血清半生期且能減低低血糖風險。
為了評估此種長效胰島素接合物之安定性，該製劑係以表1之組成物所製備，並於40℃儲存2週，其中胜肽之安定性係藉離子交換層析法(IE-HPLC)分析。
此時，促成胜肽安定性的主要因素係設定為緩衝劑的pH值、類型及濃度、等張劑類型、包含甘露糖醇之糖醇濃度、界面活性劑類型、包含聚山梨酸酯20之界面活性劑濃度、是否含有其他添加物，以及蛋胺酸與氯化鈉的共同添加。各組成物中之長效胰島素接合物濃度為61.1毫克/毫升，此等製劑用於實驗。
表1之IE-HPLC(%)表示面積%/起始面積%之值，顯示長效胰島素接合物之初始純度與殘餘純度的比較結果。
如表2所示，在pH值為5.6或6.0時，長效胰島素 接合物在包含作為緩衝劑之乙酸鈉、作為等張劑之氯化鈉、作為糖醇之甘露糖醇及作為界面活性劑之聚山梨酸酯20之液體製劑中最為安定。
實施例2：長效胰促泌素肽接合物之安定性評估
為了證實長效胰促泌素肽接合物於各個pH值及取決於是否存在有安定劑時的溶解度，先以表3所示之下列組成製備長效胰促泌素肽接合物之不同液體製劑，並於40℃儲存1週，接著以肉眼監測蛋白沈澱，比較接合物之安定性。各個組成物中，長效胰促泌素肽接合物之濃度為10毫克/毫升，實驗係使用此等製劑進行。
第1圖中未有蛋白質沈澱的時間(天數)表示該製劑 儲存於40℃後未出現蛋白質沈澱的時間。如上所示，使用乙酸鈉且pH值為5.0至5.4(#1，#2及#3)，或使用5%(w/v)甘露糖醇(#5)，於40℃儲存4日內皆出現蛋白質沈澱。但當pH值為5.6並添加10%(w/v)甘露糖醇於製劑時，溶解度增高，而且7日內皆未出現沈澱(第1圖)。
實施例3：長效胰島素接合物與長效胰促泌素肽接合物之組合的安定性評估
基於個別液體製劑，比較長效胰島素接合物與長效胰促泌素肽接合物之組合的安定性。又，測定添加對長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物之安定化分別為重要的氯化鈉及蛋胺酸，如何影響長效胰島素接合物與長效胰促泌素肽接合物之組合的安定性。
長效胰島素接合物、長效胰促泌素肽接合物，或二 者之組合的液體製劑係以表4所示之組成物所製備，並於40℃儲存4週。接著透過監測蛋白質沈澱及使用離子交換層析法(IE-HPLC)、粒徑排阻層析法(SE-HPLC)及反相-高效液相層析法(RP-HPLC)進行兩種接合物之組合製劑的安定性測試，且與個別接合物的製劑之安定性做比較。
各液體製劑中長效胰促泌素肽接合物(對照-1、#1至#4)及長效胰島素接合物(對照-2、#1至#4)的濃度分別為10毫克/毫升及61.1毫克/毫升。
於第2圖至第3圖中，IE-HPLC及RP-HPLC分析顯 示面積%/起始面積%之值，表示比較長效胰島素接合物及長效胰促泌素肽接合物之初始純度與殘餘純度。其中，第2圖顯示針對長效胰島素接合物之IE-HPLC及RP-HPLC分析結果，第3圖證實 胰促泌素肽接合物之IE-HPLC及RP-HPLC之分析結果。
如上所示，當長效胰島素接合物與長效胰促泌素肽 接合物的組合之安定性與長效胰島素接合物或長效胰促泌素肽接合物之安定性做比較時，發現於組合製劑(製劑#3及#4)及於個別製劑中的長效胰島素接合物具有相似的純度及安定性(第2圖)。
然而，當0.01%(w/v)蛋胺酸含括於包含10mM乙酸 鈉、pH 6.0、10毫克/毫升氯化鈉10%(w/v)甘露糖醇及0.02%(w/v)聚山梨酸酯20之液體製劑(亦即製劑#4)時，相較於缺乏蛋胺酸的製劑，長效胰促泌素肽接合物的安定性較為增進(第3圖)。其原因可能為蛋胺酸具有防止長效胰促泌素肽接合物氧化的作用。由於長效胰促泌素肽接合物的個別製劑過量沈澱，故無法與之進行比較個別製劑。
如第4圖所示，長效胰促泌素肽接合物之個別製劑 在兩週以內出現蛋白質沈澱，而相較之下，長效胰島素接合物與長效胰促泌素肽接合物之組合製劑(製劑#3及#4)具有增高的溶解度，其中之沈澱被抑制長達4週的相對較長時間。
此等結果證實本發明之液體製劑之組成可維持高濃度胰促泌素肽接合物與胰島素接合物之組合的高度安定性。
實施例4：根據等張劑及糖醇濃度評估長效胰島素接合物與長效胰促泌素肽接合物之組合的安定性
比較接合物之組合於液體製劑(包含作為等張劑之4.8至6.7毫克/毫升氯化鈉、作為糖醇之1至2%(w/v)甘露糖醇)與實施例2已驗證的甘露糖醇及接合物之組合於液體製劑(10mM乙酸鈉、pH 6.0、10毫克/毫升氯化鈉、10%(w/v)甘露糖醇、0.02%(w/v) 聚山梨酸酯20、0.01%(w/v)蛋胺酸)中的長效胰島素接合物與長效胰促泌素肽接合物之組合的安定性。
長效胰島素接合物與長效胰促泌素肽接合物之組合的液體製劑係以表5所示之組成物所製備，並於25℃儲存4週。接著藉IE-HPLC、SE-HPLC及RP-HPLC檢驗接合物之安定性。
表6及7之IE-HPLC(%)及RP-HPLC(%)表示面積%/起始面積%之值，證實長效胰島素接合物與長效胰促泌素肽接合物之組合之殘餘純度與初始純度的比較結果。其中，表6證實對長效胰島素接合物進行IE-HPLC及RP-HPLC之分析結果，表7證實對長效胰促泌素肽接合物進行IE-HPLC及RP-HPLC之分析結果。
如上所示，當氯化鈉濃度減至4.8毫克/毫升且甘露 糖醇濃度減至1至2%(w/v)(製劑#1及#2)時，以及當氯化鈉濃度減至6.7毫克/毫升且甘露糖醇濃度減至1至2%(w/v)(製劑#3及#4)時，相較於實施例2已驗證的液體製劑(10mM乙酸鈉、pH 6.0、10毫克/毫升氯化鈉、10%(w/v)甘露糖醇、0.02%(w/v)聚山梨酸酯20，0.01%(w/v)蛋胺酸)，四種測試製劑皆顯示高度安定性，其結果類似於實施例3已驗證的液體製劑。
此等結果證實若本發明之液體製劑之組成包含作為 等張劑之氯化鈉及作為糖醇之甘露糖醇，即便作為等張劑的氯化鈉及作為糖醇的甘露糖醇皆為低濃度，仍可對胰島素接合物及胰促泌素肽接合物的組合提供相等程度的安定性。
基於前文說明，熟諳此領域之人士可顯然易知地不 悖離本發明之範圍及精髓做出多項修改及變化。因此須瞭解前述具體例並非侷限本發明，反而於全部態樣皆有示例說明性。本發明之範圍係由隨附之申請專利範圍定義而非由其前述之詳細說明部分定義，因此落入於申請專利範圍之範疇及界限範圍內的全部變化及修改，或與此等範疇及界限之同等物，皆意圖申請專利範圍。
<110> 韓美藥品股份有限公司(HANMI PHARM.CO.,LTD.)
<120> 長效胰島素及胰促泌素肽之液體製劑(A LIQUID FORMULATION OF LONG-ACTING INSULIN AND INSULINOTROPIC PEPTIDE)
<130> OPA13096
<150> KR10-2012-0081478
<151> 2012-07-25
<160> 5
<170> KopatentIn 2.0
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<223> 艾塞素-4
<400> 5
該代表圖無元件符號及其代表之意義。

Claims (30)

  1. 一種長效胰島素及胰促泌素肽的組合之液體製劑，係包含屬於生理上活性胜肽之胰島素與胰促泌素肽，以及不含白蛋白的安定劑，其中該安定劑係包含緩衝劑、糖醇、非離子性界面活性劑及等張劑。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該胰島素係醫藥上有效量之長效胰島素接合物，且該胰島素係連接至免疫球蛋白Fc區，而該胰促泌素肽係醫藥上有效量之長效胰促泌素肽接合物，且該胰促泌素肽係連接至該免疫球蛋白Fc區。
  3. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該胰島素係具有與天然胰島素相同的胺基酸序列。
  4. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該胰島素係由天然胰島素的胺基酸取代、刪除或插入所產生的胰島素衍生物，或係具有與天然胰島素相似活性的胜肽促效劑。
  5. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該胰促泌素肽係選自於由下列各者所組之群組：類升糖素肽-1(GLP-1)、類升糖素肽-2(GLP-2)、艾塞素(exendin)-3、艾塞素-4、及其前驅物、促效劑、衍生物、片段、變體及其組合。
  6. 如申請專利範圍第5項所述之液體製劑，其中該胰促泌素肽變體為咪唑基乙醯基艾塞素-4。
  7. 如申請專利範圍第2項所述之液體製劑，其中該免疫球蛋白Fc區係衍生自IgG、IgA、IgD、IgE或IgM的Fc區。
  8. 如申請專利範圍第7項所述之液體製劑，其中該免疫球蛋白Fc區係衍生自免疫球蛋白之具有不同來源的功能域之雜合體， 且該免疫球蛋白係選自於由IgG、IgA、IgD、IgE及IgM所組成之群組。
  9. 如申請專利範圍第7項所述之液體製劑，其中該免疫球蛋白Fc區係由包含具有相同來源的功能域之單鏈免疫球蛋白所組成的二元體或多元體。
  10. 如申請專利範圍第7項所述之液體製劑，其中該免疫球蛋白Fc區為IgG4 Fc區。
  11. 如申請專利範圍第10項所述之液體製劑，其中該免疫球蛋白Fc區為人類非糖基化IgG4 Fc區。
  12. 如申請專利範圍第2項所述之液體製劑，其中該接合物係使用非肽基聚合物或重組技術連接。
  13. 如申請專利範圍第12項所述之液體製劑，其中該非肽基聚合物為聚乙二醇。
  14. 如申請專利範圍第12項所述之液體製劑，其中該非肽基聚合物係選自於由下列各者所組成之群組：生物可分解聚合物，如聚丙二醇、乙二醇與丙二醇之共聚物、聚氧乙基化多元醇、聚乙烯醇、多醣、葡聚糖、聚乙烯基乙醚、聚乳酸(PLA)及聚乳酸-乙醇酸(PLGA)；脂質聚合物；幾丁質；玻尿酸及其組合。
  15. 如申請專利範圍第2項所述之液體製劑，其中該醫藥上有效量之該長效胰島素接合物之濃度為10毫克/毫升至200毫克/毫升，而該長效胰促泌素肽接合物之濃度為0.5毫克/毫升至150毫克/毫升。
  16. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該糖醇係選自於由甘露糖醇及山梨糖醇所組成之群組中之一或多者。
  17. 如申請專利範圍第16項所述之液體製劑，其中該糖醇之濃度係以製劑總體積為基準之1%(w/v)至15%(w/v)。
  18. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該緩衝劑為檸檬酸鹽緩衝劑、乙酸鹽緩衝劑或磷酸鹽緩衝劑。
  19. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該緩衝劑之濃度係以製劑總體積為基準之5mM至50mM。
  20. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該緩衝劑之pH值範圍為5至6.5。
  21. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該等張劑係選自於由氯化鈉、硫酸鈉及檸檬酸鈉所組成之群組。
  22. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該等張劑之濃度為0.5毫克/毫升至30毫克/毫升。
  23. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該非離子性界面活性劑為聚山梨酸酯(polysorbate)或泊洛沙姆(poloxamer)。
  24. 如申請專利範圍第23項所述之液體製劑，其中該非離子性界面活性劑之濃度為0.001%(w/v)至0.05%(w/v)。
  25. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該安定劑更包含蛋胺酸。
  26. 如申請專利範圍第25項所述之液體製劑，其中該蛋胺酸之濃度係以製劑總體積為基準之0.005%(w/v)至0.1%(w/v)。
  27. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，其中該安定劑更包含選自於由糖類、多元醇及胺基酸所組成之群組中之一或多種物質。
  28. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，係包含長效胰島素接 合物及長效胰促泌素肽接合物、及不含白蛋白的安定劑，其中該胰島素及該胰促泌素肽係經由聚乙二醇而各自連接至免疫球蛋白片段，其中該安定劑係包含乙酸鹽緩衝劑、甘露糖醇、聚山梨酸酯20及氯化鈉。
  29. 如申請專利範圍第1項所述之液體製劑，更包含蛋胺酸。
  30. 一種製備如申請專利範圍第1至29項中任一項所述之液體製劑之方法，包含：(a)製備胰島素及胰促泌素肽；以及(b)將步驟(a)中所製備的該胰島素及胰促泌素肽與包含緩衝劑、糖醇、非離子性界面活性劑及等張劑的安定劑混合。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11396534B2 (en) 2016-09-23 2022-07-26 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Insulin analogs with reduced affinity to insulin receptor and use thereof
TWI784914B (zh) * 2014-05-29 2022-11-21 南韓商韓美藥品股份有限公司 包含長效胰島素類似物接合物及長效促胰島素肽接合物之治療糖尿病組成物
US11752216B2 (en) 2017-03-23 2023-09-12 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Insulin analog complex with reduced affinity for insulin receptor and use thereof

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3228320B1 (de) 2008-10-17 2019-12-18 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Kombination von einem insulin und einem glp-1-agonisten
UY33025A (es) 2009-11-13 2011-06-30 Sanofi Aventis Deustschland Gmbh Composicion farmaceutica que comprende un agonista de glp-1 metionina
AR080669A1 (es) 2009-11-13 2012-05-02 Sanofi Aventis Deutschland Composicion farmaceutica que comprende un agonista de glp-1, una insulina y metionina
MX339614B (es) 2010-08-30 2016-06-02 Sanofi - Aventis Deutschland GmbH Uso de ave0010 para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de la diabetes mellitus tipo 2.
US9821032B2 (en) 2011-05-13 2017-11-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin
TWI559929B (en) 2011-09-01 2016-12-01 Sanofi Aventis Deutschland Pharmaceutical composition for use in the treatment of a neurodegenerative disease
KR20130049671A (ko) 2011-11-04 2013-05-14 한미사이언스 주식회사 생리활성 폴리펩타이드 결합체 제조 방법
AR090281A1 (es) 2012-03-08 2014-10-29 Hanmi Science Co Ltd Proceso mejorado para la preparacion de un complejo polipeptidico fisiologicamente activo
UA116217C2 (uk) 2012-10-09 2018-02-26 Санофі Пептидна сполука як подвійний агоніст рецепторів glp1-1 та глюкагону
HUE035803T2 (en) 2012-12-21 2018-05-28 Sanofi Sa Dual GLP1 / GIP or trigonal GLP1 / GIP / glucagon agonists
TWI641381B (zh) 2013-02-04 2018-11-21 法商賽諾菲公司 胰島素類似物及／或胰島素衍生物之穩定化醫藥調配物
EP3080149A1 (en) 2013-12-13 2016-10-19 Sanofi Dual glp-1/glucagon receptor agonists
WO2015086730A1 (en) 2013-12-13 2015-06-18 Sanofi Non-acylated exendin-4 peptide analogues
TW201609799A (zh) 2013-12-13 2016-03-16 賽諾菲公司 雙重ｇｌｐ－１／ｇｉｐ受體促效劑
TW201609795A (zh) 2013-12-13 2016-03-16 賽諾菲公司 作為雙重ｇｌｐ－１／ｇｉｐ受體促效劑的艾塞那肽－４（ｅｘｅｎｄｉｎ－４）胜肽類似物
RU2016132386A (ru) 2014-01-09 2018-02-14 Санофи Стабилизированные фармацевтические составы без глицерина на основе инсулиновых аналогов и/или инсулиновых производных
CN114939156A (zh) 2014-01-09 2022-08-26 赛诺菲 门冬胰岛素的稳定化药物制剂
WO2015104314A1 (en) 2014-01-09 2015-07-16 Sanofi Stabilized pharmaceutical formulations of insulin analogues and/or insulin derivatives
PE20161153A1 (es) 2014-01-20 2016-10-27 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Insulina de accion prolongada y uso de la misma
ES2897935T3 (es) * 2014-03-31 2022-03-03 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Método para mejorar la solubilidad de proteína y péptido mediante el uso del enlace a un fragmento Fc de inmunoglobulina
TW201625669A (zh) 2014-04-07 2016-07-16 賽諾菲公司 衍生自艾塞那肽－４（Ｅｘｅｎｄｉｎ－４）之肽類雙重ＧＬＰ－１／升糖素受體促效劑
TW201625668A (zh) 2014-04-07 2016-07-16 賽諾菲公司 作為胜肽性雙重ｇｌｐ－１／昇糖素受體激動劑之艾塞那肽－４衍生物
TW201625670A (zh) 2014-04-07 2016-07-16 賽諾菲公司 衍生自ｅｘｅｎｄｉｎ－４之雙重ｇｌｐ－１／升糖素受體促效劑
AR100695A1 (es) 2014-05-30 2016-10-26 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Composición para el tratamiento de diabetes mellitus que comprende insulina y un agonista dual glp-1 / glucagón
US9932381B2 (en) 2014-06-18 2018-04-03 Sanofi Exendin-4 derivatives as selective glucagon receptor agonists
CN107206058A (zh) 2014-12-12 2017-09-26 赛诺菲-安万特德国有限公司 甘精胰岛素/利西拉来固定比率配制剂
TWI748945B (zh) 2015-03-13 2021-12-11 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患治療
TW201705975A (zh) 2015-03-18 2017-02-16 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患之治療
AR105616A1 (es) 2015-05-07 2017-10-25 Lilly Co Eli Proteínas de fusión
AR105319A1 (es) 2015-06-05 2017-09-27 Sanofi Sa Profármacos que comprenden un conjugado agonista dual de glp-1 / glucagón conector ácido hialurónico
TW201706291A (zh) 2015-07-10 2017-02-16 賽諾菲公司 作為選擇性肽雙重ｇｌｐ－１／升糖素受體促效劑之新毒蜥外泌肽（ｅｘｅｎｄｉｎ－４）衍生物
UY36870A (es) 2015-08-28 2017-03-31 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Análogos de insulina novedosos
GB201607918D0 (en) 2016-05-06 2016-06-22 Arecor Ltd Novel formulations
KR20190038456A (ko) * 2017-09-29 2019-04-08 한미약품 주식회사 효력이 향상된 지속성 단백질 결합체
TWI705820B (zh) * 2018-06-22 2020-10-01 美商美國禮來大藥廠 Gip/glp1促效劑組合物
CN110628723B (zh) * 2019-09-05 2021-05-04 清华大学 基因修饰MSCs治疗2型糖尿病
BR112022010096A2 (pt) * 2019-12-06 2022-09-06 CSL Behring Lengnau AG Composições estáveis de multímeros fc
IL298298A (en) * 2020-05-22 2023-01-01 Hanmi Pharm Ind Co Ltd A liquid formulation of a long-acting conjugate of glp–2
IL298415A (en) * 2020-05-22 2023-01-01 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Liquid formulations of long-acting conjugate of glucagon, glp-1, and gip trigonal agonist
KR20210144606A (ko) * 2020-05-22 2021-11-30 한미약품 주식회사 글루카곤 유도체의 지속형 결합체의 액상 제제

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5424286A (en) 1993-05-24 1995-06-13 Eng; John Exendin-3 and exendin-4 polypeptides, and pharmaceutical compositions comprising same
US6096871A (en) 1995-04-14 2000-08-01 Genentech, Inc. Polypeptides altered to contain an epitope from the Fc region of an IgG molecule for increased half-life
EP0904107B1 (en) 1996-03-18 2004-10-20 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobin-like domains with increased half lives
KR20080085082A (ko) * 2000-12-07 2008-09-22 일라이 릴리 앤드 캄파니 Ｇｌｐ-1 융합 단백질
US20030104996A1 (en) * 2001-08-30 2003-06-05 Tiansheng Li L-methionine as a stabilizer for NESP/EPO in HSA-free formulations
DE10333317A1 (de) * 2003-07-22 2005-02-17 Biotecon Therapeutics Gmbh Formulierung für Proteinarzneimittel ohne Zusatz von humanem Serumalbumin (HSA)
US20090238838A1 (en) * 2003-11-13 2009-09-24 Hanmi Pharm. Ind. Co. Ltd. Insulinotropic peptide conjugate using an immunoglobulin fc
WO2005047334A1 (en) 2003-11-13 2005-05-26 Hanmi Pharmaceutical. Co., Ltd. Igg fc fragment for a drug carrier and method for the preparation thereof
EP1684793B1 (en) 2003-11-13 2011-09-21 Novo Nordisk A/S Pharmaceutical composition comprising an insulinotropic glp-1(7-37) analogue, asp(b28)-insulin, and a surfactant
JP5248113B2 (ja) * 2004-11-12 2013-07-31 ノヴォ ノルディスク アー／エス ペプチドの安定な処方
JP2008169195A (ja) * 2007-01-05 2008-07-24 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd キャリア物質を用いたインスリン分泌ペプチド薬物結合体
AU2008228823A1 (en) * 2007-03-22 2008-09-25 Imclone Llc Stable antibody formulations
US20100196405A1 (en) * 2007-07-10 2010-08-05 Kingman Ng GLP-1 Fc FUSION PROTEIN FORMULATION
JP2009019027A (ja) 2007-07-16 2009-01-29 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd アミノ末端のアミノ酸が変異したインスリン分泌ペプチド誘導体
JP5789515B2 (ja) * 2008-12-19 2015-10-07 インディアナ ユニバーシティー リサーチ アンド テクノロジー コーポレーションＩｎｄｉａｎａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ インスリン類似体
UY33025A (es) * 2009-11-13 2011-06-30 Sanofi Aventis Deustschland Gmbh Composicion farmaceutica que comprende un agonista de glp-1 metionina
US8829163B2 (en) * 2010-01-19 2014-09-09 Hanmi Science Co., Ltd Liquid formulations for long-acting erythropoietin conjugate
CN107412737A (zh) 2010-01-19 2017-12-01 韩美科学株式会社 长效g‑csf缀合物的液体制剂
AR081066A1 (es) * 2010-04-02 2012-06-06 Hanmi Holdings Co Ltd Conjugado de insulina donde se usa un fragmento de inmunoglobulina
AU2011202239C1 (en) 2010-05-19 2017-03-16 Sanofi Long-acting formulations of insulins
KR101330868B1 (ko) 2010-06-08 2013-11-18 한미사이언스 주식회사 면역글로불린 단편을 이용한 인슐린 유도체 약물 결합체
KR101324828B1 (ko) 2010-06-08 2013-11-01 한미사이언스 주식회사 면역글로불린 단편을 이용한 단쇄 인슐린 아날로그 약물 결합체
KR101337797B1 (ko) * 2010-07-14 2013-12-06 한미사이언스 주식회사 지속형 인간 성장 호르몬 결합체 액상 제제
KR101303388B1 (ko) * 2010-10-26 2013-09-03 한미사이언스 주식회사 지속형 인터페론 알파 결합체의 액상 제제
UA113626C2 (xx) * 2011-06-02 2017-02-27 Композиція для лікування діабету, що містить кон'югат інсуліну тривалої дії та кон'югат інсулінотропного пептиду тривалої дії

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI784914B (zh) * 2014-05-29 2022-11-21 南韓商韓美藥品股份有限公司 包含長效胰島素類似物接合物及長效促胰島素肽接合物之治療糖尿病組成物
US11396534B2 (en) 2016-09-23 2022-07-26 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Insulin analogs with reduced affinity to insulin receptor and use thereof
US11752216B2 (en) 2017-03-23 2023-09-12 Hanmi Pharm. Co., Ltd. Insulin analog complex with reduced affinity for insulin receptor and use thereof

Also Published As

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HUE045837T2 (hu) 2020-01-28
KR20140015208A (ko) 2014-02-06
US9833516B2 (en) 2017-12-05
AU2013293720B2 (en) 2018-05-10
PT2877201T (pt) 2019-09-10
TWI630214B (zh) 2018-07-21
BR112015001593B1 (pt) 2023-12-26
BR112015001593A2 (pt) 2019-07-30
US20150190528A1 (en) 2015-07-09
AU2013293720A1 (en) 2015-02-12
RU2015104489A (ru) 2016-09-20

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