TW201300374A - 布魯頓氏酪氨酸激酶（ｂｒｕｔｏｎ’ｓ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ）之抑制劑 - Google Patents

布魯頓氏酪氨酸激酶（ｂｒｕｔｏｎ’ｓ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ）之抑制劑 Download PDF

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Rama K Kondru
Francisco Javier Lopez-Tapia
Yan Lou
Timothy D Owens
Yimin Qian
Sung-Sau So
Kshitij Chhabilbhai Thakkar
Jutta Wanner
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Hoffmann La Roche
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Abstract

本案揭示通式I之化合物：□其中所有變數如本文所定義，其抑制Btk。本文揭示之化合物適用於調節Btk活性且治療與過度Btk活性有關之疾病。該等化合物另外適用於治療與異常B細胞增殖有關之發炎及自體免疫疾病，諸如類風濕性關節炎。亦揭示含有式I化合物及至少一種載劑、稀釋劑或賦形劑之組合物。

Description

布魯頓氏酪氨酸激酶(BRUTON'S TYROSINE KINASE)之抑制劑
本發明係關於新穎化合物之用途，該等化合物能抑制Btk且適用於治療由異常B細胞活化引起之自體免疫及發炎疾病。
蛋白激酶構成最大人類酶家族中之一者且藉由向蛋白質中添加磷酸基來調節許多不同信號傳導過程(T.Hunter,Cell 1987 50：823-829)。特定言之，酪氨酸激酶使酪氨酸殘基之酚系部分上的蛋白質磷酸化。酪氨酸激酶家族包括控制細胞生長、遷移及分化之成員。異常激酶活性已與多種人類疾病有關，該等人類疾病包括癌症、自體免疫疾病及發炎疾病。因為蛋白激酶為細胞信號傳導之關鍵調節因子之一，所以其為以小分子激酶抑制劑調節細胞功能提供標靶且因此形成良好藥物設計標靶。除治療激酶介導之疾病過程以外，激酶活性之選擇性及有效抑制劑亦適用於研究細胞信號傳導過程及鑑別具有治療重要性之其他細胞標靶。
有足夠證據表明，B細胞在自體免疫及/或發炎疾病之發病機理中起關鍵作用。消耗B細胞之基於蛋白質之治療劑(諸如美羅華(Rituxan))可有效對抗自體抗體驅動之發炎疾病(諸如類風濕性關節炎)(Rastetter等人，Annu Rev Med 2004 55：477)。因此，在B細胞活化中起作用之蛋白激酶之抑制劑應為B細胞介導之疾病病理(諸如自體抗體產生)的 適用治療劑。
經由B細胞受體(BCR)傳導信號可控制一系列B細胞反應，包括增殖及分化成產生成熟抗體之細胞。BCR為B細胞活性之關鍵調節點，且異常信號傳導會引起無制約之B細胞增殖及形成致病性自體抗體，導致多種自體免疫及/或發炎疾病。布魯頓氏酪氨酸激酶(Bruton's Tyrosine Kinase，Btk)為非BCR相關之激酶，其最接近膜且緊接於BCR下游。已顯示缺乏Btk會阻斷BCR信號傳導，且因此Btk之抑制可為阻斷B細胞介導之疾病過程的適用治療方法。
Btk為酪氨酸激酶之Tec家族的一員，且已顯示其為早期B細胞發育及成熟B細胞活化及存活的關鍵調節因子(Khan等人，Immunity 1995 3：283；Ellmeier等人，J.Exp.Med.2000 192：1611)。人類中Btk之突變導致X病狀有關之無γ球蛋白血症(XLA)(綜述於Rosen等人，New Eng.J.Med.1995 333：431及Lindvall等人，Immunol.Rev.2005 203：200中)。此等患者免疫功能不全且顯示B細胞成熟異常、免疫球蛋白及周邊B細胞含量降低、與T細胞無關之免疫反應減少以及繼BCR刺激後之鈣移動減弱。
Btk缺乏型小鼠模型亦已提供Btk於自體免疫及發炎疾病中之作用的證據。在全身性紅斑性狼瘡症(SLE)之臨床前鼠類模型中，Btk缺乏型小鼠顯示疾病進展得到顯著改善。此外，Btk缺乏型小鼠對膠原蛋白誘導之關節炎具有抗性(Jansson及Holmdahl Clin.Exp.Immunol.1993 94： 459)。已在小鼠關節炎模型中證明選擇性Btk抑制劑之劑量依賴性功效(Z.Pan等人，Chem.Med Chem.2007 2：58-61)。
Btk亦由疾病過程中可能涉及之除B細胞以外的細胞表現。舉例而言，Btk由肥大細胞表現且源自Btk缺乏型骨髓之肥大細胞展示異常之抗原誘導之脫粒現象(Iwaki等人，J.Biol.Chem.2005 280：40261)。此顯示Btk可用於治療病理性肥大細胞反應，諸如過敏及哮喘。此外，來自XLA患者之單核細胞(其中不存在Btk活性)顯示刺激後TNF α產生減少(Horwood等人，J Exp Med 197：1603,2003)。因此，小分子Btk抑制劑可調節TNF α介導之發炎。此外，已報導Btk在細胞凋亡中起作用(Islam及Smith Immunol.Rev.2000 178：49)，且因此Btk抑制劑將適用於治療特定B細胞淋巴瘤及白血病(Feldhahn等人，J.Exp.Med.2005 201：1837)。
本申請案提供式I之Btk抑制劑化合物、其使用方法，如下文所述：本申請案提供式I化合物， 其中：為單鍵或雙鍵；A為5員雜芳基或5,6-員雙環雜芳基，其中CONH2連接於5員雜芳基，其各自視情況經一或多個A'取代；A'為-NHR或R4；R為H、-R1、-R1-R2-R3、-R1-R3或-R2-R3；R1為芳基、雜芳基、環烷基、雜環烷基或與雜環烷基稠合之雜芳基，其各自視情況經一或多個R1'或R1"取代；各R1'獨立地為鹵基、硝基、氰基、低碳烷基磺醯胺基、-S(O)2或側氧基(oxo)；各R1"獨立地為低碳烷基、環烷基、雜環烷基、低碳烷氧基、胺基或醯胺基，其各自視情況經一或多個R1'''取代；各R1'''獨立地為羥基、鹵基、胺基、烷基胺基、二烷基胺基或雜環烷基；R2為-C(=O)、-C(=O)O、-C(=O)NR2'、-NHC(=O)O、-C(R2')2、-O、-C(=NH)NR2'或-S(=O)2；各R2'獨立地為H或低碳烷基；R3為H或R4；R4為低碳烷基、低碳鹵烷基、低碳烷氧基、胺基、低碳烷基胺基、低碳二烷基胺基、芳基、芳基烷基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基、雜芳基烷基、環烷基、烷基環烷基、環烷基烷基、雜環烷基、烷基雜環 烷基、雜環烷基烷基、雙環環烷基、雙環雜環烷基、螺環烷基或螺雜環烷基，其各自視情況經一或多個低碳烷基、鹵基、低碳烷基胺基、低碳二烷基胺基、羥基、羥基低碳烷基、低碳烷氧基、鹵基、硝基、胺基、醯胺基、醯基、氰基、側氧基、胍基、羥基胺基、羧基、胺甲醯基、胺基甲酸酯基、鹵基低碳烷氧基或鹵基低碳烷基取代，其中兩個低碳烷基可一起形成環；Q為CH或N；X為CH、N或N(X')；X'為低碳烷基；Y0為H、鹵素或低碳烷基；Y1為Y1a、Y1b、Y1c或Y1d；Y1a為H或鹵素；Y1b為低碳烷基，其視情況經一或多個選自由以下組成之群的取代基取代：低碳鹵烷基、鹵素、羥基、胺基、氰基及低碳烷氧基；Y1c為低碳環烷基，其視情況經一或多個選自由以下組成之群的取代基取代：低碳烷基、低碳鹵烷基、鹵素、羥基、胺基、氰基及低碳烷氧基；Y1d為胺基，其視情況經一或多個低碳烷基、烷氧基低碳烷基或羥基低碳烷基取代；Y2為H、鹵素或低碳烷基；Y3為H、鹵素、低碳烷基、低碳鹵烷基、低碳烷氧基或低 碳羥基烷基；且Y4為H、低碳烷基或低碳羥基烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。
本申請案提供一種治療發炎及/或自體免疫病狀之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。
本申請案提供一種醫藥組合物，其包含式I化合物與至少一種醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑之混合物。
定義
如本文所用之「一」實體一詞係指一或多個彼實體；例如一(種)化合物係指一或多種化合物或至少一種化合物。同樣，術語「一」、「一或多個/一或多種」及「至少一個/種」在本文中可互換使用。
「如上文所定義」一詞係指如[發明內容]或最寬泛的[申請專利範圍]中所提供之各基團的最寬泛定義。在下文提供之所有其他實施例中，各實施例中可存在且未經明確定義之取代基保留[發明內容]中所提供之最寬泛定義。
如本說明書中所用，不管是在申請專利範圍之連接詞(transitional phrase)中還是在其主體中，術語「包含」應解釋為具有開放性含義。亦即，該術語應解釋為與「至少具有」或「至少包括」等詞同義。當在方法之情形下使用時，術語「包含」意謂該方法至少包括所敍述之步驟，而 且可包括其他步驟。當在化合物或組合物之情形下使用時，術語「包含」意謂該化合物或組合物至少包括所敍述之特徵或組分，而且可包括其他特徵或組分。
除非另外明確說明，否則如本文所用之「或」一詞以「及/或」之「包括性」意義而非「非此即彼」之「排他性」意義使用。
術語「獨立地」在本文中用於表示變數適用於任一狀況中，而不管同一化合物中具有相同或不同定義之變數的存在或不存在。因此，在R"出現兩次且定義為「獨立地為碳或氮」之化合物中，兩R"可皆為碳，兩R"可皆為氮，或一個R"可為碳且另一者為氮。
當任何變數在描繪及說明本發明所採用或所主張之化合物之任何部分或化學式中出現一次以上時，其每次出現時的定義與其另一次出現時的定義無關。同樣，僅當該等化合物產生穩定化合物時，才允許取代基及/或變數之組合。
在一鍵末端處之符號「*」或穿過一鍵繪製之「------」各自係指官能基或另一化學部分與該官能基或該另一化學部分所屬分子之其餘部分的連接點。因此，舉例而言： MeC(=O)OR4，其中。
繪製至環系統中之鍵(與在各別頂點處連接相對)表明該鍵可與適合環原子中之任一者連接。
如本文所用之術語「視情況」或「視情況地」意謂可能出現但並非必定出現隨後所述之事件或情形，且該描述包 括該事件或情形出現之狀況及該事件或情形不出現之狀況。舉例而言，「視情況經取代」意謂視情況經取代之部分可併有氫原子或取代基。
「視情況存在之鍵」一詞意謂該鍵可能存在或可能不存在，且該描述包括單鍵、雙鍵或參鍵。若某一取代基被指定為「一鍵」或「不存在」，則與該取代基連接之原子被直接連接。
術’語「約」在本文中用於意謂大致、大約、粗略地或左右。當術語「約」與數值範圍結合使用時，其藉由使邊界擴展超出或低於所述數值來修飾彼範圍。一般而言，術語「約」在本文中用於修飾超出及低於所述值之偏差為20%的數值。
某些式I化合物可展現互變異構現象(tautomerism)。互變異構化合物可以兩種或兩種以上可互相轉化之物質形式存在。質子轉移互變異構體係由兩個原子之間的共價鍵結之氫原子的遷移產生。互變異構體一般以平衡狀態存在且嘗試分離個別互變異構體一般會產生化學及物理特性與化合物之混合物一致的混合物。平衡位置視分子內之化學特徵而定。舉例而言，在許多脂族醛及酮(諸如乙醛)中，酮形式佔優勢；而在酚中，烯醇形式佔優勢。常見質子轉移互變異構體包括酮/烯醇(-C(=O)-CH--C(-OH)=CH-)、醯胺/亞胺酸(-C(=O)-NH--C(-OH)=N-)及脒(-C(=NR)-NH--C(-NHR)=N-)互變異構體。後兩者在雜芳基及雜環中尤其常見且本發明涵蓋該等化合物之所有互變異構形式。
除非另外定義，否則本文所用之技術及科學術語具有熟習本發明所屬技術者通常所理解之含義。本文提及熟習此項技術者已知之各種方法及材料。闡述藥理學一般原理之標準參考文獻包括Goodman及Gilman之The Pharmacological Basis of Therapeutics，第10版，McGraw Hill Companies Inc.,New York(2001)。熟習此項技術者已知之任何適合材料及/或方法可用於實施本發明。然而，描述較佳材料及方法。除非另外說明，否則以下描述及實例中提及之材料、試劑及其類似物可自商業來源獲得。
可隨附本文所述之定義以形成化學相關組合，諸如「雜烷基芳基」、「鹵烷基雜芳基」、「芳基烷基雜環基」、「烷基羰基」、「烷氧基烷基」及其類似組合。當術語「烷基」用作跟隨另一術語之詞尾時，如在「苯基烷基」或「羥基烷基」中，此意欲指如上文所定義之烷基經1至2個選自其他經特定命名之基團之取代基取代。因此，舉例而言，「苯基烷基」係指具有1至2個苯基取代基之烷基，因此包括苯甲基、苯乙基及聯苯基。「烷基胺基烷基」為具有1至2個烷基胺基取代基之烷基。「羥基烷基」包括2-羥基乙基、2-羥基丙基、1-(羥基甲基)-2-甲基丙基、2-羥基丁基、2,3-二羥基丁基、2-(羥基甲基)、3-羥基丙基等等。因此，如本文所用，術語「羥基烷基」用於定義下文所定義之雜烷基之子集。術語-(芳)烷基係指未經取代之烷基或芳烷基。術語(雜)芳基係指芳基或雜芳基。
如本文所用之術語「螺環烷基」意謂螺環環烷基，諸如 螺[3.3]庚烷。如本文所用之術語螺雜環烷基意謂螺環雜環烷基，諸如2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷。
如本文所用之術語「醯基」表示式-C(=O)R之基團，其中R為氫或如本文所定義之低碳烷基。如本文所用之術語「烷基羰基」表示式C(=O)R之基團，其中R為如本文所定義之烷基。術語C1-6醯基係指含有1至6個碳原子之基團-C(=O)R。如本文所用之術語「芳基羰基」意謂式C(=O)R之基團，其中R為芳基；如本文所用之術語「苯甲醯基」為R為苯基之「芳基羰基」。
如本文所用之術語「酯」表示式-C(=O)OR之基團，其中R為如本文所定義之低碳烷基。
如本文所用之術語「烷基」表示含有1至10個碳原子之無分支或分支鏈飽和單價烴殘基。術語「低碳烷基」表示含有1至6個碳原子之直鏈或分支鏈烴殘基。如本文所用之「C1-10烷基」係指由1至10個碳構成之烷基。烷基之實例包括(但不限於)低碳烷基，包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基或戊基、異戊基、新戊基、己基、庚基及辛基。
當術語「烷基」用作跟隨另一術語之詞尾時，如在「苯基烷基」或「羥基烷基」中，此意欲指如上文所定義之烷基經1至2個選自其他經特定命名之基團之取代基取代。因此，舉例而言，「苯基烷基」表示基團R'R"-，其中R'為苯基，且R"為如本文所定義之伸烷基，條件為苯基烷基部分之連接點將在伸烷基上。芳基烷基之實例包括(但不限於) 苯甲基、苯乙基、3-苯基丙基。類似地解釋術語「芳基烷基」或「芳烷基」，但R'為芳基除外。類似地解釋術語「(雜)芳基烷基」或「(雜)芳烷基」，但R'視情況為芳基或雜芳基除外。
術語「鹵烷基」或「鹵基-低碳烷基」或「低碳鹵烷基」係指含有1至6個碳原子之直鏈或分支鏈烴殘基，其中一或多個碳原子經一或多個鹵素原子取代。
除非另外說明，否則如本文所用之術語「伸烷基」表示具有1至10個碳原子之二價飽和直鏈烴基(例如(CH2)n)或具有2至10個碳原子之分支鏈飽和二價烴基(例如-CHMe-或-CH2CH(i-Pr)CH2-)。除了在亞甲基之情形下，伸烷基之開放價不與同一原子連接。伸烷基之實例包括(但不限於)亞甲基、伸乙基、伸丙基、2-甲基-伸丙基、1,1-二甲基-伸乙基、伸丁基、2-乙基伸丁基。
如本文所用之術語「烷氧基」意謂-O-烷基，其中烷基如上文所定義，諸如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第三丁氧基、戊氧基、己氧基，包括其異構體。如本文所用之「低碳烷氧基」表示具有如先前所定義之「低碳烷基」的烷氧基。如本文所用之「C1-10烷氧基」係指-O-烷基，其中烷基為C1-10。
術語「PCy3」係指經三個環狀部分三取代之膦。
術語「鹵基烷氧基」或「鹵基低碳烷氧基」或「低碳鹵基烷氧基」係指一或多個碳原子經一或多個鹵素原子取代之低碳烷氧基。
如本文所用之術語「羥基烷基」表示如本文所定義之烷基中不同碳原子上之1至3個氫原子經羥基置換。
如本文所用之術語「烷基磺醯基」及「芳基磺醯基」係指式-S(=O)2R之基團，其中R分別為烷基或芳基，且烷基及芳基如本文所定義。如本文所用之術語「雜烷基磺醯基」表示式-S(=O)2R之基團，其中R為如本文所定義之「雜烷基」。
如本文所用之術語「烷基磺醯胺基」及「芳基磺醯胺基」係指式-NR'S(=O)2R之基團，其中R分別為烷基或芳基，R'為氫或C1-3烷基且烷基及芳基如本文所定義。
如本文所用之術語「環烷基」係指含有3至8個碳原子之飽和碳環，亦即環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基或環辛基。如本文所用之「C3-7環烷基」或「低碳環烷基」係指在碳環中由3至7個碳構成之環烷基。
如本文所用之術語羧基-烷基係指一個氫原子經羧基置換的烷基部分，條件為雜烷基之連接點經過碳原子。術語「羧基」係指-CO2H部分。
如本文所用之術語「雜芳基」或「雜芳族」意謂具有5至12個環原子且具有至少一個芳族或部分不飽和環(每個環含有4至8個原子)，併入有一或多個N、O或S雜原子，其餘環原子為碳之單環或雙環基團，條件為雜芳基之連接點將在芳族或部分不飽和環上。如熟習此項技術者所熟知，雜芳基環之芳族特徵少於其全碳對應部分。因此，出於本發明之目的，雜芳基僅需要具有一定程度之芳族特 徵。雜芳基部分之實例包括具有5至6個環原子及1至3個雜原子之單環芳族雜環，包括(但不限於)吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噁嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、4,5-二氫-噁唑基、5,6-二氫-4H-[1,3]噁唑基、異噁唑、噻唑、異噻唑、三唑啉、噻二唑及噁二唑啉，其可視情況經一或多個，較佳為1或2個選自以下之取代基取代：羥基、氰基、烷基、烷氧基、硫基、低碳鹵基烷氧基、烷基硫基、鹵基、低碳鹵基烷基、烷基亞磺醯基、烷基磺醯基、鹵素、胺基、烷基胺基、二烷基胺基、胺基烷基、烷基胺基烷基及二烷基胺基烷基、硝基、烷氧羰基及胺甲醯基、烷基胺甲醯基、二烷基胺甲醯基、芳基胺甲醯基、烷基羰基胺基及芳基羰基胺基。雙環部分之實例包括(但不限於)喹啉基、異喹啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑、苯并異噁唑、苯并噻唑、啶基、5,6,7,8-四氫-[1,6]啶基及苯并異噻唑。雙環部分可視情況在任一環上經取代，然而連接點在含有雜原子之環上。
除非另外說明，否則如本文所用之術語「雜環基」、「雜環烷基」或「雜環」表示由一或多個環，較佳為1至2個環(包括螺環環系統)組成，每個環有3至8個原子，併入有一或多個環雜原子(選自N、O或S(O)0-2)的單價飽和環狀基團，其可視情況經一或多個，較佳為1或2個選自以下之取代基獨立地取代：羥基、側氧基、氰基、低碳烷基、低碳烷氧基、低碳鹵烷氧基、烷基硫基、鹵基、低碳鹵烷基、羥基烷基、硝基、烷氧羰基、胺基、烷基胺基、烷基磺醯 基、芳基磺醯基、烷基胺基磺醯基、芳基胺基磺醯基、烷基磺醯基胺基、芳基磺醯基胺基、烷基胺基羰基、芳基胺基羰基、烷基羰基胺基、芳基羰基胺基及其離子形式。雜環基之實例包括(但不限於)嗎啉基、哌嗪基、哌啶基、氮雜環丁烷基、吡咯啶基、六氫氮雜卓基、氧雜環丁烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、噁唑啶基、噻唑啶基、異噁唑啶基、四氫哌喃基、硫代嗎啉基、啶基及咪唑啉基，及其離子形式。實例亦可為雙環，諸如3,8-二氮雜-雙環[3.2.1]辛烷、2,5-二氮雜-雙環[2.2.2]辛烷或八氫-吡嗪并[2,1-c][1,4]噁嗪。
Btk之抑制劑
本申請案提供式I化合物， 其中：為單鍵或雙鍵；A為5員雜芳基或5,6-員雙環雜芳基，其中CONH2連接於5員雜芳基，其各自視情況經一或多個A'取代；A'為-NHR或R4；R為H、-R1、-R1-R2-R3、-R1-R3或-R2-R3； R1為芳基、雜芳基、環烷基、雜環烷基或與雜環烷基稠合之雜芳基，其各自視情況經一或多個R1'或R1"取代；各R1'獨立地為鹵基、硝基、氰基、低碳烷基磺醯胺基、-S(O)2或側氧基(oxo)；各R1"獨立地為低碳烷基、環烷基、雜環烷基、低碳烷氧基、胺基或醯胺基，其各自視情況經一或多個R1'''取代；各R1'''獨立地為羥基、鹵基、胺基、烷基胺基、二烷基胺基或雜環烷基；R2為-C(=O)、-C(=O)O、-C(=O)NR2'、-NHC(=O)O、-C(R2')2、-O、-C(=NH)NR2'或-S(=O)2；各R2'獨立地為H或低碳烷基；R3為H或R4；R4為低碳烷基、低碳鹵烷基、低碳烷氧基、胺基、低碳烷基胺基、低碳二烷基胺基、芳基、芳基烷基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基、雜芳基烷基、環烷基、烷基環烷基、環烷基烷基、雜環烷基、烷基雜環烷基、雜環烷基烷基、雙環環烷基、雙環雜環烷基、螺環烷基或螺雜環烷基，其各自視情況經一或多個低碳烷基、鹵基、低碳烷基胺基、低碳二烷基胺基、羥基、羥基低碳烷基、低碳烷氧基、鹵基、硝基、胺基、醯胺基、醯基、氰基、側氧基、胍基、羥基胺基、羧基、胺甲醯基、胺基甲酸酯基、鹵基低碳烷氧 基或鹵基低碳烷基取代，其中兩個低碳烷基可一起形成環；Q為CH或N；X為CH、N或N(X')；X'為低碳烷基；Y0為H、鹵素或低碳烷基；Y1為Y1a、Y1b、Y1c或Y1d；Y1a為H或鹵素；Y1b為低碳烷基，其視情況經一或多個選自由以下組成之群的取代基取代：低碳鹵烷基、鹵素、羥基、胺基、氰基及低碳烷氧基；Y1c為低碳環烷基，其視情況經一或多個選自由以下組成之群的取代基取代：低碳烷基、低碳鹵烷基、鹵素、羥基、胺基、氰基及低碳烷氧基；Y1d為胺基，其視情況經一或多個低碳烷基、烷氧基低碳烷基或羥基低碳烷基取代；Y2為H、鹵素或低碳烷基；Y3為H、鹵素、低碳烷基、低碳鹵烷基、低碳烷氧基或低碳羥基烷基；且Y4為H、低碳烷基或低碳羥基烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。
本申請案提供式I化合物，其中X為N。
本申請案提供式I化合物，其中Q為CH。
本申請案提供式I化合物，其中Y1為Y1a。
本申請案提供式I化合物，其中Y1a為H。
本申請案提供式I化合物，其中Y1為低碳烷基或低碳環烷基。
本申請案提供式I化合物，其中Y1為第三丁基、異丙基、環丙基或異丙腈。
本申請案提供式I化合物，其中Y1為第三丁基。
本申請案提供式I化合物，其中X為N且Y1為第三丁基或環丙基。
本申請案提供式I化合物，其中Y2為H。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或鹵素。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F。
本申請案提供式I化合物，其中Y0為H，Y2為H，Y3為F或H，且Y4為羥基甲基。
本申請案提供式I化合物，其中Q為CH，X為N，且為雙鍵。
本申請案提供式I化合物，其中A為呋喃基、咪唑基、噻唑基、吡咯基、吡唑基、苯基、吲哚基、吡咯并[2,3-b]吡啶基或噁唑基。
本申請案提供式I化合物，其中Y1為第三丁基或環丙基。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為F。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F且X為N。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F且Y1為第三丁基或環丙基。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F，X為N且Y1為第三丁基或環丙基。
本申請案提供式I化合物，其中Y4為低碳羥基烷基。
本申請案提供式I化合物，其中Y4為羥基甲基。
本申請案提供式I化合物，其中A為視情況經一或多個A'取代之呋喃基。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F，X為N且Y1為第三丁基或環丙基，且A為視情況經一或多個A'取代之呋喃基。
本申請案提供式I化合物，其中A為視情況經一或多個A'取代之咪唑基。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F，X為N且Y1為第三丁基或環丙基，且A為視情況經一或多個A'取代之咪唑基。
本申請案提供式I化合物，其中A為視情況經一或多個A'取代之噻唑基。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F，X為N且Y1為第三丁基或異丙基，且A為視情況經一或多個A'取代之噻唑基。
本申請案提供式I化合物，其中A為視情況經一或多個A'取代之吡咯基。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F，X為N且Y1為第三丁基或異丙基，且A為視情況經一或多個A'取代之吡咯基。
本申請案提供式I化合物，其中A為視情況經一或多個A'取代之吡唑基。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F，X為N且Y1為第三丁基或異丙基，且A為視情況經一或多個A'取代之吡唑基。
本申請案提供式I化合物，其中A視情況經一或多個A'取代。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F，X為N且Y1為第三丁基或異丙基，且A為視情況經一或多個A'取代之苯基。
本申請案提供式I化合物，其中A為視情況經一或多個A'取代之吲哚基。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F，X為N且Y1為第三丁基或異丙基，且A為視情況經一或多個A'取代之吲哚基。
本申請案提供式I化合物，其中A為視情況經一或多個A'取代之吡咯并[2,3-b]吡啶基。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F，X為N且Y1為第三丁基或異丙基，且A為視情況經一或多個A'取代之吡咯并[2,3-b]吡啶基。
本申請案提供式I化合物，其中A為視情況經一或多個A'取代之噁唑基。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為H或F，X為N且Y1為第三丁基或異丙基，且A為視情況經一或多個A'取代之噁 唑基。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為羥基甲基。
本申請案提供式I化合物，其中Y3為羥基甲基，X為N且Y1為第三丁基或異丙基。
本申請案提供選自由以下組成之群的式I化合物：4-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-咪唑-2-甲醯胺；2-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-噻唑-4-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯-2-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；5-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；2-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-4-甲基-噁唑-5-甲醯胺；2-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-噻唑-4-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-咪唑-2-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；5-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲 基-苯基]-呋喃-2-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-呋喃-2-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-8-羥基甲基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；4-[3-(6-環丙基-8-氟-1-側氧基-1H-異喹啉-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-3-甲基-1-側氧基-3,4-二氫-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；4-[2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-3-羥基甲基-吡啶-4-基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吲哚-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吲哚-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺； 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(1-羥基-1-甲基-乙基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氯-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；3-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-甲基-4,5,6,7-四氫-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(4-甲烷磺醯基-苯基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(吡嗪-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氟-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基胺基)-1H-吡唑-4-甲 醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-三氟甲基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-甲基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氟-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(吡嗪-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-甲基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-甲烷磺醯基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氰基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺； 7-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-嗎啉-4-基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(6-乙氧基-吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(2-氟-苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(2-氯-苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；6-溴-1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(1,2-二羥基-乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(1,1-二側氧基-1λ6-硫代嗎啉-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(2-二甲基胺基-乙基胺基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡 啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-二甲基胺基甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；3-(4-乙醯基-苯基胺基)-1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-二甲基胺基甲基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；及1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺。
本申請案提供式I化合物之用途，其用作治療活性物質。
本申請案提供式I化合物之用途，其用於治療發炎及/或自體免疫病狀。
本申請案提供式I化合物之用途，其用於治療發炎病狀。
本申請案提供式I化合物之用途，其用於治療類風濕性關節炎或哮喘。
本申請案提供式I化合物，其用於治療發炎及/或自體免疫病狀。
本申請案提供式I化合物，其用於治療發炎病狀。
本申請案提供式I化合物，其用於治療類風濕性關節炎或哮喘。
本申請案提供治療發炎及/或自體免疫病狀之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。
本申請案提供治療發炎病狀之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。
本申請案提供治療類風濕性關節炎之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。
本申請案提供治療哮喘之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。
本申請案提供一種醫藥組合物，其包含式I化合物與至少一種醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑之混合物。
本申請案提供式I化合物之用途，其用於製造用以治療發炎病症之藥物。
本申請案提供式I化合物之用途，其用於製造用以治療自體免疫病症之藥物。
本申請案提供式I化合物之用途，其用於製造用以治療發炎及/或自體免疫病症之藥物。
本申請案提供式I化合物之用途，其用於製造用以治療類風濕性關節炎或哮喘之藥物。
本申請案提供如本文所述之化合物、方法或組合物。
化合物及製備
下表提供本發明所涵蓋且屬於本發明範疇內之代表性化 合物之實例。提供此等實例及以下製備使熟習此項技術者能夠更清楚地理解本發明及實施本發明。其不應理解為限制本發明之範疇，而是僅用於說明及解釋本發明。
一般而言，本申請案中所用之命名法係基於4.0版AUTONOMTM，即用於產生IUPAC系統命名之Beilstein Institute電腦化系統。若所描繪之結構與對該結構所給出之名稱之間存在差異，則更以所描繪之結構為準。此外，若一結構或一結構之一部分之立體化學未以例如粗體或虛線表示，則該結構或該結構之部分應理解為涵蓋其所有立體異構體。
表I展示通式I之噠嗪酮化合物的實例：
合成：一般合成流程
如流程1中所示，經溴取代之5員雜環芳族羧醯胺(1)可由相應酯或羧酸經由與氨反應形成醯胺來製備。在結構(1)中，X可為NH、NR、O或S，其中R可為低碳烷基，諸如甲基。在結構(1)中，Y可為CH，或經低碳烷基(諸如甲基)取代之碳，或氮原子。在結構(2)中，Z可為氮或CH，且R可為單取代或二取代。取代可為氟、氯、烷基、經取代烷基或環狀烷基。(2)之製備已描述於文獻(US 2010/0222325)中。在鈀催化之偶合條件下(US 2010/0222325)，化合物(1)與(2)之偶合可提供化合物(3)，其可水解成所要之化合物(4)。
或者，5員羧醯胺(4)可根據流程(2)製備。經溴取代之5員雜環芳族羧醯胺(1)可由相應酯或羧酸經由與氨反應形成醯胺來製備。在結構(1)中，X可為NH、NR、O或S，其中R可為低碳烷基，諸如甲基。在結構(1)中，Y可為CH，或經低碳烷基(諸如甲基)取代之碳，或氮原子。經溴取代之5員雜環芳族羧醯胺(1)可藉由在鈀催化之硼酸芳基酯形成條件(US 2010/0222325)下與雙-頻哪醇根基硼烷反應而轉化為相應頻哪醇根基硼酸酯(5)。在結構(6)中，Z可為氮或CH，且R可為單取代或二取代。取代可為氟、氯、烷基、 經取代烷基或環狀烷基。化合物(6)之製備描述於流程9中。芳基溴(6)可與5員雜芳族硼酸酯(5)在鈀催化之偶合條件(US 2010/0222325)下偶合提供所要化合物(4)。
5員雜環羧醯胺可與芳族環稠合產生雙環雜芳族羧醯胺，如流程3中所示。吲哚或氮雜吲哚衍生物(7)可與芳基酸(8)根據與文獻(Tetrahedron Letters 2009,50,15-18)中類似之條件在鈀催化之偶合條件下偶合，得到經芳基取代之吲哚或氮雜吲哚(9)。芳基酸(8)之製備描述於流程9中。在結構(7)中，X可為CH或氮，且Y可為烷基、經雜原子取代之烷基，或雜環。在結構(8)中，R可為單取代或二取代。取代可為氟、氯、烷基、經取代烷基或環狀烷基。在結構(8)中，Z可為氮或CH。可在中性條件下，在鉑催化作用(Journal of Organic Chemistry 2004,69,2327-2331)存在下實現化合物(9)中氰基之水解，獲得相應羧醯胺(10)。
或者，羧醯胺(10)可根據流程4製備。在結構(7)中，X可為CH或氮，且Y可為烷基、經雜原子取代之烷基，或雜環。在鹼性條件(諸如第三丁醇鉀)下，化合物(7)可與芳基氟(11)經由親核芳族取代反應進行反應，獲得化合物(12)，其中化合物(11)中之鹵素可為溴原子或碘原子。在碘化亞銅存在下(US 2010/0222325)以(13)處理化合物(12)可得到化合物(14)。化合物(13)之製備已描述於文獻(US 2010/0222325)中，其中R可為單取代或二取代。取代可為氟、氯、烷基、經取代烷基或環狀烷基。在結構(13)中，Z可為氮或CH。可藉由使用還原劑(諸如硼氫化鈉)將化合物(14)中之醛基還原成醇。可在中性條件下，在鉑催化作用(Journal of Organic Chemistry 2004,69,2327-2331)存在下實現化合物(14)中氰基之水解，獲得相應羧醯胺(10)。
對於5員雜芳族羧醯胺為胺基吡唑羧醯胺之化合物，製備描述於流程5中。市售胺基吡唑腈(15)可與三氟硼酸鉀鹽(16)在乙酸銅存在下反應來獲得化合物(17)。對於(15)轉化為(17)之期間N-芳化之混合區位異構體，所要化合物(17)可在超臨界流體層析(SFC)條件下分離。在結構(16)中，R1可為氫、烷基及乙醯氧基。在結構(16)中，R可為單取代或二取代。取代可為氟、氯、烷基、經取代烷基或環狀烷基，且Z可為氮或碳。化合物(16)之製備描述於流程10中。化合物(17)與芳基鹵化物(諸如芳基溴)在鈀催化條件下之N-芳化反應可獲得化合物(18)，其中X及Y可為CH，或X及Y中之一者可為氮。芳基鹵化物中之R2基團可為二烷基胺基羰基、胺基烷基、雜環烷基、甲基磺醯基、單羥基或二羥基取代之烷基。(17)轉化為(18)中之芳基鹵化物反應物不限於6員芳族鹵化物，且其可為5員芳族鹵化物或與雜環稠合之5員芳族鹵化物。(18)中之氰基的水解可產生 所要羧醯胺(19)。
製備含有胺基吡唑部分之5員芳族羧醯胺的替代途徑描述於流程6中。在鹼(諸如氫化鈉)存在下以三甲基矽烷基乙氧基亞甲基氯(SEM-Cl)保護化合物(15)中之NH基團可產生兩種區位異構體。可分離兩種區位異構體獲得(20)。(20)與芳基鹵化物在鈀催化作用存在下之N-芳化反應可獲得化合物(21)，其中X及Y可為CH，或X及Y中之一者可為氮。芳基鹵化物中之R基團可為二烷基胺基羰基、胺基烷基、雜環烷基、甲基磺醯基、單羥基或二羥基取代之烷基。(20)轉化為(21)中之芳基鹵化物反應物不限於6員芳族鹵化物，且其可為5員芳族鹵化物或與雜環稠合之5員芳族鹵化 物。可在酸條件(諸如稀鹽酸)或鹼性條件(諸如氟化四丁基銨)下脫除(21)中之SEM保護基獲得化合物(22)。在鹼(諸如第三丁醇鉀)存在下以2-氟-6-碘苯甲醛處理化合物(22)可獲得化合物(23)。在Cu(I)催化條件(諸如碘化亞銅)下，化合物(23)可經化合物(13)N-芳化而獲得化合物(24)，其中化合物(24)中之Z及R1與化合物(13)中之Z及R相同定義。還原化合物(24)中之醛，繼之以腈水解，產生所要羧醯胺(25)。
製備含有胺基吡唑部分之5員芳族羧醯胺的替代途徑描述於流程7中。市售化合物(15)可根據文獻程序(WO 2005/005414)轉化為相應碘化物(26)。根據文獻程序(WO 2005/005414)以SEM-Cl保護(26)中之NH基團可獲得化合物 (27)。化合物(27)可與芳基胺在鈀催化劑(諸如雙(三-第三丁基膦)鈀(0))存在下反應獲得N-芳化產物(28)，其中芳基可為雜芳族部分，且芳基可經以下取代：二烷基胺基羰基、胺基烷基、雜環烷基、甲基磺醯基、單羥基或二羥基取代之烷基。可在酸條件(諸如稀鹽酸)或鹼性條件(諸如氟化四丁基銨)下脫除(28)中之SEM保護基，獲得化合物(29)。在Cu(II)催化作用(諸如乙酸銅)存在下以三氟硼酸鉀鹽(16)處理化合物(29)可獲得化合物(30)，其中化合物(16)中之R及R1基團如流程5中所定義。化合物(30)中之氰基的水解可產生所要羧醯胺(31)。
在流程7中(29)至(30)之轉化中，N-芳化產物之所要區位異構體可經由混合區位異構體之純化獲得。
或者，可根據流程8製備所要胺基吡唑衍生物。可藉由在碘化亞銅存在下以化合物(13)處理R1取代之2,6-二溴苯來獲得化合物(32)。在鈀催化條件下以化合物(32)N-芳化 市售腙(33)，繼之以在酸性條件下水解可獲得所要肼(34)。可藉由使用類似文獻程序(Journal of Organic Chemistry 2005,70,9222)來實現以市售化合物(35)處理化合物(34)，從而獲得所要胺基吡唑(36)。可如流程5中化合物(18)之製備中所述，以芳基鹵化物使化合物(36)N-芳化。化合物(30)中之腈水解可產生所要羧醯胺(31)。
流程9中描述所需硼酸芳基酯(2)、芳基酸(8)及中間物(6)之製備。化合物(37)可在碘化亞銅存在下經化合物(13)取代獲得N-芳化產物(38)。在溫和鹼性條件下水解(38)可獲得所要羥基衍生物(6)。可在鈀催化條件下藉由使用雙(頻哪醇根基)硼烷來使(38)轉化為(2)。硼酸酯(2)之水解可獲得酸(8)。
最終，流程10中描述所要三氟硼酸鉀鹽(16)之製備。在碘化亞銅存在下以芳基溴(39)使化合物(13)N-芳化可獲得化合物(40)，其中R可為單取代或二取代。可在鈀催化作用存在下藉由使用雙(頻哪醇根基)硼烷來使(40)轉化為(41)。可根據文獻程序(Tetrahedron Letters 2005,46,7899)將頻哪醇硼酸酯(41)轉換為相應三氟硼酸鹽(16)。
醫藥組合物及投藥
本發明化合物可以各式各樣的口服劑型及載劑調配。口服投藥可為錠劑、包衣錠劑、糖衣藥丸、硬明膠膠囊及軟明膠膠囊、溶液、乳液、糖漿或懸浮液之形式。本發明化合物當藉由其他投藥途徑投與時亦為有效的，其他投藥途徑包括連續(靜脈滴注)局部非經腸、肌肉內、靜脈內、皮下、經皮(其可包括穿透增強劑)、經頰、經鼻、吸入及栓劑投藥。較佳投藥方式一般為使用可根據病痛程度及患者對活性成分之反應調整的適宜每日給藥方案口服。
本發明化合物，以及其醫藥學上可用之鹽可與一或多種 習用賦形劑、載劑或稀釋劑一同配製成醫藥組合物及單位劑量之形式。醫藥組合物及單位劑型可包含習知比例之習知成分，其中有或無其他活性化合物或成分，且單位劑型可含有與欲採用之預期每日劑量範圍相對應的任何適合有效量之活性成分。醫藥組合物可以以下形式採用：固體，諸如錠劑或填充膠囊；半固體；散劑；持續釋放調配物；或液體，諸如供口服用之溶液、懸浮液、乳液、酏劑或填充膠囊；或用於直腸或陰道投與之栓劑形式；或供非經腸使用之無菌可注射溶液形式。典型製劑將含有約5重量%至約95重量%的活性化合物。術語「製劑」或「劑型」意欲包括活性化合物之固體及液體調配物，且熟習此項技術者將瞭解活性成分可視標靶器官或組織及所要劑量及藥物動力學參數而定以不同製劑形式存在。
如本文所用之術語「賦形劑」係指適用於製備醫藥組合物、一般安全、無毒且在生物學或其他方面均合乎需要之化合物，且該化合物包括可為獸醫之用以及人類醫藥之用所接受的賦形劑。本發明化合物可單獨投與，但一般將與一或多種關於所欲投藥途徑及標準醫藥實務所選擇之適合醫藥賦形劑、稀釋劑或載劑混合投與。
「醫藥學上可接受」意謂適於製備一般安全、無毒且在生物學或其他方面均合乎需要的醫藥組合物且包括可為獸醫之用以及人類醫藥之用所接受的醫藥組合物。
活性成分之「醫藥學上可接受之鹽」形式亦可最初賦予活性成分非鹽形式所沒有之所要藥物動力學特性，且甚至 會積極影響活性成分關於其在體內之治療活性的藥效學。化合物之「醫藥學上可接受之鹽」一詞意謂醫藥學上可接受且具有母體化合物之所要藥理學活性的鹽。該等鹽包括：(1)酸加成鹽，其與無機酸形成，該等無機酸諸如有鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其類似酸；或與有機酸形成，該等有機酸諸如有乙酸、丙酸、己酸、環戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、丁二酸、蘋果酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲醯基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、1,2-乙烷-二磺酸、2-羥基乙烷磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟腦磺酸、4-甲基雙環[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸、葡糖庚酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、第三丁基乙酸、月桂基硫酸、葡萄糖酸、麩胺酸、羥基萘甲酸、水楊酸、硬脂酸、黏康酸及其類似酸；或(2)當母體化合物中存在之酸性質子由金屬離子(例如鹼金屬離子、鹼土金屬離子或鋁離子)置換；或與有機鹼(諸如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、緩血酸胺、N-甲基葡糖胺及其類似物)配位時所形成之鹽。
固體形式製劑包括散劑、錠劑、丸劑、膠囊、扁囊劑、栓劑及可分散性顆粒。固體載劑可為一或多種亦可充當稀釋劑、調味劑、增溶劑、潤滑劑、懸浮劑、黏合劑、防腐劑、錠劑崩解劑或囊封材料之物質。在散劑中，載劑一般為細粉狀固體，其與細粉狀活性組分混合。在錠劑中，活性組分一般與具有必要結合能力之載劑以適合比例混合且 壓製成所要形狀及尺寸。適合載劑包括(但不限於)碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、糖、乳糖、果膠、糊精、澱粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點蠟、可可脂及其類似載劑。固體形式製劑除活性組分外亦可含有著色劑、調味劑、穩定劑、緩衝劑、人造及天然甜味劑、分散劑、增稠劑、增溶劑及其類似物。
液體調配物亦適於經口投與，包括包含乳液、糖漿、酏劑、水溶液、水性懸浮液之液體調配物。此等物質包括欲在臨用前轉化成液體形式製劑之固體形式製劑。乳液可於例如丙二醇水溶液之溶液中製備或可含有諸如卵磷脂、脫水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠之乳化劑。水溶液可藉由將活性組分溶解於水中且添加適合著色劑、調味劑、穩定劑及增稠劑來製備。水性懸浮液可藉由使細粉狀活性組分與黏性材料一起分散於水中來製備，該黏性材料諸如有天然或合成膠狀物、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉及其他熟知懸浮劑。
本發明化合物可經調配用於非經腸投與(例如藉由注射，例如快速注射或連續輸注)且可以單位劑型存在於安瓿、預填充注射器、小體積輸液或附加有防腐劑之多劑量容器中。組合物可呈現諸如在油性或水性媒劑中之懸浮液、溶液或乳液之形式，例如在水性聚乙二醇中之溶液。油性或非水性載劑、稀釋劑、溶劑或媒劑之實例包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄欖油)及可注射有機酯(例如油酸乙酯)，且可含有諸如防腐劑、濕潤劑、乳化劑或懸 浮劑、穩定劑及/或分散劑之調配劑。或者，活性成分可為藉由無菌分離無菌固體或藉由自溶液凍乾來獲得以便在使用前以適合媒劑(例如無菌無熱原質水)復原之散劑形式。
本發明化合物可經調配用於以軟膏、乳膏或洗劑形式，或以經皮貼片形式向表皮局部投與。軟膏及乳膏可例如用水性或油性基質在添加適合增稠劑及/或膠凝劑下來調配。洗劑可用水性或油性基質調配且一般亦將含有一或多種乳化劑、穩定劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑或著色劑。適於口腔局部投與之調配物包括口含錠，其包含活性劑於一般為蔗糖及阿拉伯膠或黃蓍膠之經調味基質中；片劑，其包含活性成分於諸如明膠及甘油或蔗糖及阿拉伯膠之惰性基質中；及漱口劑，其包含活性成分於適合液體載劑中。
本發明化合物可經調配而以栓劑形式投與。首先使諸如脂肪酸甘油酯混合物之低熔點蠟或可可脂熔融且例如藉由攪拌均勻分散活性組分。接著將熔融之均質混合物倒入適宜尺寸之模具中，使其冷卻且固化。
本發明化合物可經調配用於陰道投與。除活性成分之外亦含有如此項技術中已知之載劑的子宮托、棉塞、乳膏、凝膠、糊劑、發泡體或噴霧劑為適當的。
本發明化合物可經調配用於經鼻投與。溶液或懸浮液係藉由習知方式(例如用滴管、吸管或噴霧器)直接施用於鼻腔。調配物可以單劑量或多劑量形式提供。在滴管或吸管 之後一情形中，此可藉由向患者投與適當預定體積之溶液或懸浮液來實現。在噴霧器之情形中，此可例如藉助於計量霧化噴射泵來實現。
本發明化合物可經調配用於氣霧劑投與，尤其向呼吸道投與，且包括鼻內投與。該化合物一般將具有例如約5 μm或5 μm以下之小粒徑。該粒徑可藉由此項技術中已知之方式獲得，例如藉由微粉化獲得。該活性成分係於具有適合推進劑之加壓包裝中提供，該推進劑諸如氯氟碳化物(CFC)(例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷)或二氧化碳或其他適合氣體。氣霧劑亦可便利地含有界面活性劑，諸如卵磷脂。藥物劑量可由計量閥控制。或者，活性成分可以乾粉形式提供，例如化合物於適合粉末基質中之粉末混合物，該粉末基質諸如乳糖、澱粉、澱粉衍生物(諸如羥丙基甲基纖維素)及聚乙烯吡咯啶酮(PVP)。粉末載劑將在鼻腔中形成凝膠。粉末組合物可以單位劑型呈現，例如明膠或泡殼(blister)包裝之膠囊或藥筒，其中粉末可藉吸入器投與。
必要時，調配物可經製備而具有適於活性成分之持續或控制釋放投與的腸溶衣。舉例而言，本發明化合物可於經皮或皮下藥物傳遞裝置中調配。當必需持續釋放化合物時且當患者對治療方案之順應性重要時，此等傳遞系統有利。經皮傳遞系統中之化合物通常附著於皮膚黏著性固體支撐物上。所關注化合物亦可與滲透增強劑(例如Azone(1-十二烷基氮雜環庚-2-酮))組合。持續釋放傳遞系統藉由 手術或注射皮下嵌入至皮下層(subdermal layer)。皮下植入物將化合物囊封於脂質可溶膜(例如聚矽氧橡膠)或生物可降解聚合物(例如聚乳酸)中。
適合調配物以及醫藥載劑、稀釋劑及賦形劑描述於Remington：The Science and Practice of Pharmacy 1995,E.W.Martin編，Mack Publishing Company，第19版，Easton,Pennsylvania中。熟練的調配科學家可在本說明書之教示下改良調配物，以提供用於特定投與途徑之多種調配物，而不使本發明組合物不穩定或減損其治療活性。
為了使本發明化合物更易溶於水或其他媒劑中而對該等化合物所作之改變例如可易於藉由較小改變(鹽調配、酯化等)實現，其完全處於此項技術之一般技能範疇內。改變特定化合物之投與途徑及給藥方案以控制本發明化合物之藥物動力學從而在患者中產生最大有益作用亦完全處於此項技術之一般技能範疇內。
如本文所用之術語「治療有效量」意謂減輕個體疾病症狀所需之量。在各特定情形中將根據個體需要調整劑量。劑量可視眾多因素而定在寬泛限度範圍內變化，該等因素諸如有欲治療之疾病之嚴重程度、患者之年齡及一般健康狀況、治療患者所用之其他藥物、投與途徑及投與形式，及所涉及醫師的偏好及經驗。對於經口投與，在單一療法及/或組合療法中，每天每公斤體重約0.01至約1000 mg的每日劑量應為適當的。較佳每日劑量為每天每公斤體重約0.1至約500 mg，更佳為每天每公斤體重0.1至約100 mg， 且最佳為每天每公斤體重1.0至約10 mg。因此，對於向70 kg個體投與，劑量範圍將為每天約7 mg至0.7 g。每日劑量可以單次劑量或分次劑量投與，通常為每天1至5劑量。一般而言，以小於化合物最佳劑量之較小劑量開始治療。此後，劑量以小增量增加直至個別患者達到最佳效果。一般熟習治療本文所述疾病之人員將無需過度實驗而依賴於個人知識、經驗及本申請案之揭示內容即能夠確定本發明化合物對於既定疾病及患者的治療有效量。
醫藥製劑較佳呈單位劑型。在該形式中，製劑細分為含有適當量之活性組分的單位劑量。單位劑型可為包裝製劑，該包裝含有個別量之製劑，諸如包裝錠劑、膠囊及小瓶或安瓿裝散劑。又，單位劑型可為膠囊、錠劑、扁囊劑或口含錠本身，或其可為適當數目之呈包裝形式之此等單位劑型中的任一者。
適應症及治療方法
通式I化合物抑制布魯頓氏酪氨酸激酶(Btk)。藉由上游激酶活化Btk可使磷脂酶-Cγ活化，其又刺激促發炎介體的釋放。併入有1-側氧基-1H-酞嗪-2-基側鏈之通式I化合物 相較於具有其他側鏈之類似物展現抑制活性出乎意料地得到提高。值得注意的是，不飽和側鏈上之氟取代使人類全血中之效能產生出乎意料之約5-10倍的增加。苯環上之羥基甲基取代與在彼位置處具有替代性取代之類似物相比較出乎意料地進一步使效能增加。式I化合物適用於治療關節炎及其他消炎及自體免疫疾病。式I化合物因此適用於治療關節炎。式I化合物適用於抑制細胞中之Btk及用於調節B細胞發育。本發明另外包含醫藥組合物，其含有式I化合物與醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑之混合物。
本文所述之一級羧醯胺衍生物為激酶抑制劑，尤其為Btk抑制劑。此等抑制劑可用於治療一或多種對激酶抑制起反應之疾病，包括對哺乳動物中Btk抑制及/或抑制B細胞增殖起反應之疾病。不期望受任何特定理論約束，咸信本發明化合物與Btk之相互作用可抑制Btk活性，因此產生此等化合物之醫藥效用。因此，本發明包括治療患有對抑制Btk活性及/或抑制B細胞增殖起反應之疾病的哺乳動物(例如人類)之方法，其包含向患有該種疾病之哺乳動物投與有效量之至少一種本文提供的化學實體。有效濃度可例如藉由分析化合物之血液濃度用實驗方式確定或藉由計算生物可用性用理論方式確定。除Btk之外可能受影響的其他激酶包括(但不限於)其他酪氨酸激酶及絲胺酸/蘇胺酸激酶。
激酶在控制基本細胞過程(諸如增殖、分化及死亡(細胞 凋亡))之信號傳導路徑中起顯著作用。異常激酶活性已與多種疾病有關，該等疾病包括多種癌症、自體免疫及/或發炎疾病，及急性發炎反應。激酶在關鍵細胞信號傳導路徑中之多方面作用為鑑別靶向激酶及信號傳導路徑之新穎藥物提供一個重要的機會。
一實施例包括治療患有自體免疫及/或發炎疾病，或具有對抑制Btk活性及/或B細胞增殖起反應之急性發炎反應之患者的方法。
可使用本發明化合物及組合物來影響之自體免疫及/或發炎疾病包括(但不限於)：牛皮癬、過敏、克羅恩氏病(Crohn's disease)、大腸急躁症、休格連氏病(Sjogren's disease)、組織移植排斥反應及移植器官之過急性排斥反應、哮喘、全身性紅斑性狼瘡症(及相關絲球體腎炎)、皮肌炎、多發性硬化症、硬皮病、血管炎(ANCA相關及其他血管炎)、自體免疫溶血性及血小板減少性狀態、古巴士德氏症候群(Goodpasture's syndrome)(及相關絲球體腎炎及肺出血)、動脈粥樣硬化、類風濕性關節炎、慢性特發性血小板減少性紫癜(ITP)、艾迪森氏病(Addison's disease)、帕金森氏病(Parkinson's disease)、阿茲海默氏病(Alzheimer's disease)、糖尿病、敗血性休克及重症肌無力。
本文包括治療方法，其中至少一種本文提供之化學實體與消炎劑組合投與。消炎劑包括(但不限於)NSAID、非特異性及COX-2特異性環氧酶酵素抑制劑、金化合物、皮質 類固醇、甲胺喋呤(methotrexate)、腫瘤壞死因子受體(TNF)受體拮抗劑、免疫抑制劑及甲胺喋呤。
NSAID之實例包括(但不限於)布洛芬(ibuprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、萘普生(naproxen)及萘普生鈉、雙氯芬酸、雙氯芬酸鈉與米索普魯斯托爾(misoprostol)之組合、舒林酸(sulindac)、奧沙普嗪(oxaprozin)、二氟尼柳(diflunisal)、吡羅昔康(piroxicam)、吲哚美辛(indomethacin)、依託度酸(etodolac)、非諾洛芬鈣(fenoprofen calcium)、酮洛芬(ketoprofen)、萘丁美酮鈉(sodium nabumetone)、柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)、托美汀鈉(tolmetin sodium)及羥氯喹。NSAID之實例亦包括COX-2特異性抑制劑，諸如塞內昔布(celecoxib)、伐地昔布(valdecoxib)、盧米羅可(lumiracoxib)及/或依託昔布(etoricoxib)。
在一些實施例中，消炎劑為水楊酸酯。水楊酸酯包括(但不限於)乙醯基水楊酸或阿司匹靈(aspirin)、水楊酸鈉及膽鹼及水楊酸鎂。
消炎劑亦可為皮質類固醇。舉例而言，皮質類固醇可為皮質酮、地塞米松(dexamethasone)、甲潑尼龍(prednisolone)、潑尼龍(prednisolone)、潑尼龍磷酸鈉或潑尼松(prednisone)。
在其他實施例中，消炎劑為金化合物，諸如硫代蘋果酸金鈉或金諾芬(auranofin)。
本發明亦包括如下實施例，其中消炎劑為代謝抑制劑，諸如二氫葉酸還原酶抑制劑，諸如甲胺喋呤或二氫乳清酸 去氫酶抑制劑，諸如來氟米特(leflunomide)。
本發明之其他實施例係關於組合，其中至少一種消炎化合物為抗C5單株抗體(諸如艾庫組單抗(eculizumab)或培克珠單抗(pexelizumab))、TNF拮抗劑(諸如依那西普(entanercept))或英利昔單抗(infliximab)(其為抗TNFα單株抗體)。
本發明之其他實施例係關於組合，其中至少一種活性劑為免疫抑制化合物，諸如選自以下之免疫抑制化合物：甲胺喋呤、來氟米特、環孢靈(cyclosporine)、他克莫司(tacrolimus)、硫唑嘌呤(azathioprine)及黴酚酸嗎啉乙酯(mycophenolate mofetil)。
表現BTK之B細胞及B細胞前驅物已與B細胞惡性疾病之病理學有關，該等惡性疾病包括(但不限於)B細胞淋巴瘤、淋巴瘤(包括霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)及非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma))、毛狀細胞淋巴瘤、多發性骨髓瘤、慢性及急性骨髓性白血病以及慢性及急性淋巴球性白血病。
已顯示BTK為B系淋巴樣細胞中之Fas/APO-1(CD-95)死亡誘導信號傳導複合物(DISC)的抑制劑。白血病/淋巴瘤細胞之命運可能在於由DISC活化之卡斯蛋白酶的反向促凋亡效應與涉及BTK及/或其受質之上游抗細胞凋亡調節機制之間的平衡(Vassilev等人，J.Biol.Chem.1998,274,1646-1656)。
亦已發現BTK抑制劑適用作化學增敏劑，且因此適用於 與其他化學治療劑(尤其誘導細胞凋亡之藥物)組合。可與化學增敏BTK抑制劑組合使用之其他化學治療藥物的實例包括I型拓撲異構酶抑制劑(喜樹鹼或拓朴替康(topotecan))、II型拓撲異構酶抑制劑(例如道諾黴素(daunomycin)及依託泊苷(etoposide))、烷化劑(例如環磷醯胺、美法侖(melphalan)及BCNU)、微管蛋白定向劑(例如紫杉醇(taxol)及長春鹼(vinblastine))，及生物製劑(例如抗體，諸如抗CD20抗體、IDEC 8、免疫毒素及細胞激素)。
Btk活性亦與由部分染色體9及22之移位產生的表現bcr-abl融合基因之一些白血病有關。慢性骨髓性白血病中通常觀測到此異常。Btk經bcr-abl激酶構成性磷酸化，該激酶誘生下游存活信號，其會阻止bcr-abl細胞之凋亡。(N.Feldhahn等人，J.Exp.Med.2005 201(11)：1837-1852)。
治療方法
本申請案提供治療發炎及/或自體免疫病狀之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。
本申請案提供治療發炎病狀之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。
本申請案提供治療類風濕性關節炎之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。
本申請案提供治療哮喘之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。
本申請案提供治療發炎及/或自體免疫病狀之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I之Btk抑制劑化 合物。
本申請案提供治療發炎病狀之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。
本申請案提供治療關節炎之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I之Btk抑制劑化合物。
本申請案提供治療哮喘之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I之Btk抑制劑化合物。
本申請案提供抑制B細胞增殖之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I之Btk抑制劑化合物。
本申請案提供抑制Btk活性之方法，其包含投與具有任一種式I之Btk抑制劑化合物，其中Btk抑制劑化合物在Btk活性之活體外生物化學分析法中展現50 μmol或50 μmol以下之IC50。
在上述方法之一個變體中，Btk抑制劑化合物在Btk活性之活體外生物化學分析法中展現100 nmol或100 nmol以下之IC50。
在上述方法之另一變體中，化合物在Btk活性之活體外生物化學分析法中展現10 nmol或10 nmol以下之IC50。
本申請案提供治療發炎病狀之方法，其包含向有需要之患者共投與治療有效量之消炎化合物與式I之Btk抑制劑化合物的組合。
本申請案提供治療關節炎之方法，其包含向有需要之患者共投與治療有效量之消炎化合物與式I之Btk抑制劑化合物的組合。
本申請案提供治療淋巴瘤或BCR-ABL1+白血病細胞之方法，其藉由向有需要之患者投與治療有效量之式I之Btk抑制劑化合物來達成。
實例 縮寫
通常所用之縮寫包括：乙醯基(Ac)、偶氮基-雙-異丁醯腈(AIBN)、大氣壓(Atm)、9-硼雙環[3.3.1]壬烷(9-BBN或BBN)、2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯萘(BINAP)、第三丁氧羰基(Boc)、焦碳酸二-第三丁酯或boc酐(BOC2O)、苯甲基(Bn)、丁基(Bu)、化學文摘登記號(Chemical Abstracts Registration Number，CASRN)、苯甲氧羰基(CBZ或Z)、羰基二咪唑(CDI)、1,4-二氮二環[2.2.2]辛烷(DABCO)、二乙基胺基三氟化硫(DAST)、二亞苯甲基丙酮(dba)、1,5-二氮二環[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1,8-二氮二環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、N,N'-二環己基碳化二亞胺(DCC)、1,2-二氯乙烷(DCE)、二氯甲烷(DCM)、2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(DDQ)、偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)、偶氮二甲酸二異丙酯(DIAD)、氫化二異丁基鋁(DIBAL或DIBAL-H)、二異丙基乙基胺(DIPEA)、N,N-二甲基乙醯胺(DMA)、4-N,N-二甲基胺基吡啶(DMAP)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、二甲亞碸(DMSO)、1,1'-雙-(二苯膦基)乙烷(dppe)、1,1'-雙-(二苯膦基)二茂鐵(dppf)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDCI)、2-乙氧基-1-乙氧羰基-1,2-二氫喹啉(EEDQ)、乙基(Et)、乙酸乙酯(EtOAc)、乙醇(EtOH)、2-乙 氧基-2H-喹啉-1-甲酸乙酯(EEDQ)、乙醚(Et2O)、乙基異丙基醚(EtOiPr)、六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基(HATU)、乙酸(HOAc)、1-N-羥基苯并三唑(HOBt)、高壓液相層析法(HPLC)、異丙醇(IPA)、氯化異丙基鎂(iPrMgCl)、六甲基二矽氮烷(HMDS)、液相層析質譜法(LCMS)、六甲基二矽氮烷鋰(LiHMDS)、間氯過氧苯甲酸(m-CPBA)、甲醇(MeOH)、熔點(mp)、MeSO2-(甲磺醯基或Ms)、甲基(Me)、乙腈(MeCN)、間氯過苯甲酸(MCPBA)、質譜(ms)、甲基第三丁基醚(MTBE)、甲基四氫呋喃(MeTHF)、N-溴代丁二醯亞胺(NBS)、正丁基鋰(nBuLi)、N-羧酸酐(NCA)、N-氯代丁二醯亞胺(NCS)、N-甲基嗎啉(NMM)、N-甲基吡咯啶酮(NMP)、氯鉻酸吡錠(PCC)、二氯-((雙-二苯膦基)二茂鐵基)鈀(II)(Pd(dppf)Cl2)、乙酸鈀(II)(Pd(OAc)2)、參(二亞苯甲基丙酮)二鈀(0)(Pd2(dba)3)、重鉻酸吡錠(PDC)、苯基(Ph)、丙基(Pr)、異丙基(i-Pr)、磅/平方吋(psi)、吡啶(pyr)、1,2,3,4,5-五苯基-1'-(二-第三丁基膦基)二茂鐵(Q-Phos)、室溫(環境溫度，rt或RT)、第二丁基鋰(sBuLi)、第三丁基二甲基矽烷基或t-BuMe2Si(TBDMS)、氟化四-正丁基銨(TBAF)、三乙胺(TEA或Et3N)、2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基(TEMPO)、三甲基矽烷基乙氧基甲基(SEM)、三氟甲磺酸鹽或CF3SO2-(Tf)、三氟乙酸(TFA)、1,1'-雙-2,2,6,6-四甲基庚烷-2,6-二酮(TMHD)、四氟硼酸O-苯并三唑-1-基-N,N,N',N'-四甲基(TBTU)、薄層層析法(TLC)、四氫呋 喃(THF)、三甲基矽烷基或Me3Si(TMS)、單水合對甲苯磺酸(TsOH或pTsOH)、4-Me-C6H4SO2-或甲苯磺醯基(Ts)及N-胺基甲酸酯-N-羧酸酐(UNCA)。包括詞首正(n)、異(i-)、第二(sec-)、第三(tert-)及新(neo)之習知命名法當與烷基部分一起使用時，具有其慣用含義。(J.Rigaudy及D.P.Klesney,Nomenclature in Organic Chemistry,IUPAC 1979 Pergamon Press,Oxford.)。
一般條件
可以市售起始物質開始，利用熟習此項技術者已知之一般合成技術及程序製備本發明化合物。以下概述內容為適於製備該等化合物之反應流程。其他例證可見於特定實例中。
製備實例 4-溴-1-甲基-1H-咪唑-2-甲醯胺(中間物-1)
向1-甲基-1H-咪唑(2 g，24.4 mmol)於16 mL DCM中之溶液中逐滴添加4.4 g三氯乙醯氯，且所得混合物在25℃下攪拌6小時。使混合物冷卻至0℃且在攪拌下逐滴添加3.4 mL三乙胺。蒸發溶劑且藉由急驟管柱層析法(石油醚/DCM=4/1)純化殘餘物獲得2,2,2-三氯-1-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)乙酮(3.1 g，產率56%)。1H NMR(300 MHz,CDCl3)δ 7.35(s,1H),7.16(s,1H),4.06(s,3H)。
在-10℃下，向2,2,2-三氯-1-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)乙酮(1.5 g，6.6 mmol)於26 mL無水THF中之溶液中添加2.35 g NBS。所得混合物在-10℃下攪拌2小時，接著在25℃下攪拌16小時。蒸發溶液且藉由矽膠管柱(DCM作為溶離劑)純化殘餘物獲得1-(-4-溴-1-甲基-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氯乙酮(1.18 g，產率58%)。1H NMR(300 MHz,CDCl3)δ 7.15(s,1H),4.05(s,3H)。
向1.18 g 1-(-4-溴-1-甲基-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氯乙酮於10 mL甲醇中之溶液中添加42 mg甲醇鈉，且所得混合物在25℃下攪拌20分鐘。TLC顯示反應完成。蒸發溶液，再溶解於30 mL DCM中，以水(15 mL×2)及鹽水(15 mL)洗滌。溶液經無水硫酸鈉乾燥且過濾。藉由矽膠管柱(DCM/MeOH=60/1)純化殘餘物獲得4-溴-1-甲基-1H-咪唑-2-甲酸甲酯(0.575 g，產率68%)。1H NMR(300 MHz,CDCl3)δ 7.02(s,1H),4.00(s,3H),3.93(s,3H)。C6H7BrN2O2(m/e)之LC-MS計算值217.97，觀測值219及221[M+1]+
向氨於MeOH中之飽和溶液中添加165 mg 4-溴-1-甲基-1H-咪唑-2-甲酸甲酯，且所得混合物在20℃下攪拌16小時。蒸發溶液獲得4-溴-1-甲基-1H-咪唑-2-甲醯胺(154 mg，產率100%)。C5H6BrN3O(m/e)之LC-MS計算值202.97，觀測值204及206[M+1]+。
2-溴噻唑-4-甲醯胺(中間物-2)
將2-溴噻唑-4-甲酸甲酯(50 mg)溶解於氨於甲醇中之飽和溶液(4 ml)中。反應溶液在室溫下攪拌隔夜。減壓移除溶劑獲得呈黃色固體形式之2-溴噻唑-4-甲醯胺(46 mg，產率100%)。1H NMR(300 MHz,CDCl3)：δ 8.11(s,1H)。C4H3BrN2OS(m/e)之LC-MS計算值205.91，觀測值207及209[M+1]+。
4-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(中間物-3)
將4-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸(122 mg，0.60 mmol)、HATU(274 mg，0.72 mmol)及DIEA(194 mg，1.50 mmol)溶解於DMF(5 mL)中。在室溫下攪拌反應混合物，且使氨氣連續鼓泡通過，隔夜。反應混合物以100 mL DCM稀釋，接著以水(50 mL)洗滌。水層以DCM(20 mL×2)萃取。合併所有有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚/乙酸乙酯6/1)純化殘餘物獲得4-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(56 mg，產率46%)。1H NMR(300 MHz,CDCl3)：δ 6.74(d,J=1.8 Hz,1H),6.59(d,J=1.8 Hz,1H),3.92(s,3H)。C6H7BrN2O(m/e)之LC-MS計算值201.97，觀測值203及205[M+1]+。
乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼 -2-基)-苯甲酯(中間物-4)
向2,6-二溴甲苯(55.5 g，222.1 mmol)及NBS(43.5 g，244.3 mmol)於四氯化碳(300 mL)中之溶液中添加過氧化苯甲醯(5.37 g，22.2 mmol)。使反應混合物回流20小時，冷卻至室溫，以水(300 mL×3)及鹽水(300 mL)洗滌且經無水硫酸鈉乾燥。過濾且蒸發溶液獲得呈黃色粉末形式之1,3-二溴-2-溴甲基苯(71g)。此物質未經進一步純化即進入下一步驟。
向1,3-二溴-2-溴甲基苯(71.3 g)於DMF(300 mL)中之溶液中添加乙酸鈉(91.7 g)，且所得混合物在105℃下攪拌6小 時。冷卻混合物且以水(1500 mL)淬滅且以乙酸乙酯(1000 mL×2)萃取。合併之有機層以水(1000 mL)及鹽水(1000 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且過濾。藉由矽膠管柱(200-300目，以石油醚/乙酸乙酯30/1溶離)純化殘餘物獲得呈黃色油狀物之乙酸2,6-二溴苯甲酯(59.42 g，產率89%)。1H NMR(300 MHz,d6-DMSO)δ 7.57(d,J=8.0 Hz,2H),7.07(t,J=7.8 Hz,1H),5.41(s,2H),2.11(s,3H)。
在N2下，將乙酸2,6-二溴苯甲酯(34.88 g，113 mmol)、6-第三丁基-2H-酞嗪-1-酮(4.56 g，22.5 mmol)、Cs2CO3(14.72 g，45 mmol)、CuI(6.44 g，33.8 mmol)及N,N-二甲基乙烷-1,2-二胺(2 g，22.7 mmol)溶解於DMF(92 mL)中。反應混合物在150℃下攪拌4小時，接著冷卻至室溫，以乙酸乙酯(500 mL)稀釋，且以500 mL水洗滌。分離水層且以乙酸乙酯(200 mL×2)萃取。合併之有機層以水(300 mL×2)及鹽水(300 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥。過濾且蒸發溶液。藉由矽膠層析法(石油醚/乙酸乙酯4/1)純化殘餘物獲得乙酸2-溴-6-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯甲酯(6.2 g，64%產率)。1H NMR(300 MHz,CDCl3)δ 8.39(d,J=8.3 Hz,1H),8.25(s,1H),7.91-7.87(m,1H),7.72(s,2H),7.41-7.35(m,2H),5.17(s,2H),1.91(s,3H),1.44(s,9H)。C21H21BrN2O3(m/e)之LC-MS計算值428.07，觀測值429及431[M+1]+。
在N2下，在80℃下攪拌含乙酸2-溴-6-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯甲酯(1.43 g，10.7 mmol)、雙(頻哪醇根基)二硼(1.03 g，4.05 mmol)、KOAc(0.99 g，10.1 mmol)及Pd(dppf)Cl2(0.3 g，0.36 mmol)之16.7 mL DMSO 16小時。將混合物冷卻至室溫，以乙酸乙酯(100 mL)稀釋且以100 mL水洗滌。水層以乙酸乙酯(50 mL×2)萃取。合併之有機層以水(100 mL×2)及鹽水(100 mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥。過濾且蒸發溶液。藉由矽膠層析法(石油醚/乙酸乙酯2/1)純化殘餘物獲得呈淺綠色固體形式之乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(1.45 g，91%產率)。1H NMR(300 MHz,CDCl3)δ 8.39(d,J=8.5 Hz,1H),8.23(s,1H),7.96(dd,J=6.4,2.5 Hz,1H),7.86(dd,J=8.5,1.8 Hz,1H),7.71(d,J=1.7 Hz,2H),7.52-7.45(m,2H),5.30(s,2H),1.86(s,3H),1.43(s,9H),1.33(s,12H)。C27H33BN2O5(m/e)之LC-MS計算值476.25，觀測值477[M+1]+。
乙酸2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼 -2-基)-苯甲酯(中間物-5)
在N2下，將乙酸2,6-二溴苯甲酯(24.74 g，80.3 mmol)、6-第三丁基-8-氟-2H-酞嗪-1-酮(3.54 g，16.1 mmol)、Cs2CO3(10.46 g，32.1 mmol)、CuI(4.61 g，24.2 mmol)及N,N-二甲基乙烷-1,2-二胺(1.42 g，16.1 mmol)溶解於DMF(70 mL)中。在150℃下攪拌反應混合物持續4小時。所得混合物冷卻至室溫，且以乙酸乙酯(200 mL)稀釋，接著添加200 mL水。分離混合物，且水層以乙酸乙酯(200 mL ×2)萃取。合併有機層且以水(200 mL)及鹽水(200 mL)洗滌。溶液經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析法(石油醚/乙酸乙酯4/1)純化所得粗產物獲得2-溴-6-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯甲酯(3.21 g，45%)。1H NMR(300 MHz,CDCl3)：δ 8.17(d,J=2.7 Hz,1H),7.71(t,J=4.8 Hz,1H),7.50-7.45(m,2H),7.36(s,1H),7.34(d,J=0.9 Hz,1H),5.17(s,2H),1.94(s,3H),1.42(s,9H)。C21H20BrFN2O3(m/e)之LC-MS計算值446.06，觀測值447及449[M+1]+。
在N2下，將2-溴-6-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯甲酯(1.51 g，3.39 mmol)、雙頻哪醇根基二硼(1.03 g，4.06 mmol)、KOAc(0.998 g，10.7 mmol)及Pd(dppf)Cl2(0.277 g，0.339 mmol)溶解於無水DMSO(80 mL)中。在80℃下攪拌反應混合物24小時。反應混合物以乙酸乙酯(100 mL)稀釋且以水(200 mL×2)洗滌。水層以乙酸乙酯(100 mL×2)萃取。合併之有機層以水(200 mL×2)及鹽水(200 mL)洗滌，且經無水硫酸鈉乾燥。過濾且濃縮溶 液。藉由層析法(石油醚/乙酸乙酯2/1)純化殘餘物獲得乙酸2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(1.26 g，75%)。1H NMR(300 MHz,CDCl3)：δ 8.17(d,J=2.6,2.4 Hz,1H),7.95(dd,J=6.9,2.2 Hz,1H),7.49-7.44(m,4H),6.31(br s,2H),1.90(s,3H),1.42(s,9H),1.34(s,12H)。C27H32BFN2O5(m/e)之LC-MS計算值494.24，觀測值495[M+1]+。
6-第三丁基-2-(3-氯-2-羥基甲基-苯基)-8-羥基甲基-2H-酞嗪-1-酮(中間物-6)
向100 mL圓底燒瓶中添加6-第三丁基-2-[3-氯-2-(羥基甲基)苯基]-8-氟酞嗪-1(2H)-酮(671 mg，1.86 mmol，根據US 2010/0222325製備)、氰化鈉(365 mg，7.44 mmol)及DMSO(10 mL)獲得淡黃色懸浮液。在80℃下攪拌混合物16小時。添加額外氰化鈉(182 mg，3.72 mmol)且混合物在80℃下進一步攪拌60小時。使混合物冷卻至室溫且以乙酸乙酯及水萃取。有機層以水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥且 過濾。蒸發溶劑且經急驟管柱層析法(220 g矽膠，含0%至40%丙酮之庚烷)純化殘餘物獲得呈黃色固體形式之7-第三丁基-3-[3-氯-2-(羥基甲基)苯基]-4-側氧基-3,4-二氫酞嗪-5-甲腈(390 mg，57%產率)。
向250 mL圓底燒瓶中添加7-第三丁基-3-[3-氯-2-(羥基甲基)苯基]-4-側氧基-3,4-二氫酞嗪-5-甲腈(390 mg，1.06 mmol)及甲苯(8 mL)。在冰浴下冷卻溶液且添加含DIBAH之甲苯(2.33 mL，2.33 mmol)。混合物在冰浴下攪拌1小時，接著以二氯甲烷稀釋且以1M鹽酸淬滅。攪拌混合物10分鐘且以二氯甲烷萃取。有機層以水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥且過濾。蒸發溶劑且藉由急驟管柱層析法(矽膠，120 g，含0%至35%乙酸乙酯之庚烷)純化粗物質獲得呈淡黃色粉末形式之7-第三丁基-3-[3-氯-2-(羥基甲基)苯基]-4-側氧基-3,4-二氫酞嗪-5-甲醛(147 mg，37.4%)。
上述7-第三丁基-3-[3-氯-2-(羥基甲基)苯基]-4-側氧基-3,4-二氫酞嗪-5-甲醛(147 mg，0.396 mmol)與二氯乙烷(5 mL)及甲醇(5 mL)組合獲得黃色溶液。添加硼氫化鈉(27 mg，0.714 mol)且混合物在室溫下攪拌4小時。混合物以1N鹽酸處理且以二氯甲烷萃取。有機層以鹽水洗滌且經硫酸鈉乾燥。蒸發溶劑後，藉由急驟管柱層析法(矽膠40 g，含0%至40%乙酸乙酯之庚烷)純化殘餘物獲得呈淡黃色固體形式之6-第三丁基-2-[3-氯-2-(羥基甲基)苯基]-8-(羥基甲基)酞嗪-1(2H)-酮(39 mg，26.4%)。C20H21ClN2O3(m/e)之LC/MS計算值372.12，觀測值371.1(M-H,ES-)。
實例1 5-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-呋喃-2-甲醯胺
在微波燒瓶中，5-溴呋喃-2-甲醯胺(200 mg，1.05 mmol)、乙酸2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(中間物-5，1.04 g，2.11 mmol)、X-PHOS(50.2 mg，0.105 mmol)、Pd2(dba)3(48.2 mg，0.052 mmol)及磷酸鉀(894 mg，4.21 mmol)於二噁烷(7 ml)及水(0.7 ml)中之懸浮液以氬氣脫氣3-5分鐘。混合物在微波中設為125℃持續30分鐘。添加水，且混合物以乙酸乙酯萃取兩次。有機層以鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥且蒸發至乾燥。藉由急驟管柱層析法(含乙酸乙酯之己烷至100%乙酸乙酯之梯度)純化粗物質獲得乙 酸2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(5-胺甲醯基-呋喃-2-基)-苯甲酯(78.5 mg，16%)。
向上述乙酸酯(78.5 mg，0.164 mmol)於甲醇(2 mL)中之溶液中添加碳酸鉀(4.5 mg，0.033 mmol)。混合物在N2下攪拌5小時。添加二氯甲烷，且混合物以水洗滌。水相以二氯甲烷萃取一次。合併之有機物經硫酸鈉乾燥且蒸發至乾燥。添加乙酸乙酯，且攪拌懸浮液5分鐘，且濾出固體且乾燥獲得5-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-呋喃-2-甲醯胺(42 mg，59%)。1H NMR(300 MHz,DMSO-d 6)δ ppm 1.38(s,9 H)4.33-4.53(m,2 H)4.66-4.92(m,1 H)7.05(d,J=3.78 Hz,1 H)7.20(d,J=3.40 Hz,1 H)7.29-7.47(m,2 H)7.50-7.63(m,1 H)7.75(dd,J=13.41,1.70 Hz,1 H)7.81-8.03(m,3 H)8.52(d,J=2.64 Hz,1 H)；C24H22FN3O4(m/e)之LC/MS計算值435.16，觀測值458[M+Na]+。
實例2 4-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-呋喃-2-甲醯胺
在微波燒瓶中，4-溴呋喃-2-甲醯胺(150 mg，0.79 mmol)、乙酸2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲酯(中間物5，468 mg，0.95 mmol)、X-PHOS(37.6 mg，0.079 mmol)、Pd2(dba)3(36.1 mg，0.040 mmol)及磷酸鉀(670 mg，3.16 mmol)於二噁烷(5 mL)及水(0.5 mL)中之懸浮液以氬氣藉由鼓泡脫氣5分鐘。混合物在微波中設為125℃持續30分鐘。添加水，且混合物以乙酸乙酯萃取兩次。有機層以鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥且蒸發至乾燥。藉由急驟管柱層析法(含乙酸乙酯之己烷至100% EtOAc的線性梯度)純化粗物質獲得乙酸2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-6-(5-胺甲醯基呋喃-3-基)苯甲酯(273 mg，0.572 mmol，72.4%產率)。
向上述乙酸酯(262.6 mg，0.55 mmol)於甲醇(5 mL)中之溶液中添加碳酸鉀(15.2 mg，0.11 mmol)。混合物在N2下攪拌3.5小時。添加二氯甲烷(50 mL)，且混合物以水洗滌，經硫酸鈉乾燥且濃縮至乾燥。藉由急驟管柱層析法 (含乙酸乙酯之己烷至100% EtOAc的線性梯度)純化粗物質獲得4-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-呋喃-2-甲醯胺(192 mg，80%)。1H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.36-1.62(m,9 H)4.40(br.s.,2 H)7.35(dd,J=6.80,2.64 Hz,1 H)7.44-7.64(m,5 H)8.14(d,J=1.13 Hz,4 H)8.29(d,J=2.64 Hz,1 H)；C24H22FN3O4(m/e)之LC/MS計算值435.16，觀測值436[M+H]+。
實例3 4-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-咪唑-2-甲醯胺
此化合物以與實例1中所述相同之方法，藉由使用4-溴-1-甲基-1H-咪唑-2-甲醯胺(中間物-1)及乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(中間物4)製備。所要化合物分兩步驟製備(33%產率)。1H NMR(300 MHz,CDCl3)δ 8.46(d,J=8.5 Hz,1H),8.36(s,1H),7.95-7.91(m,2H),7.77(d,J=1.6 Hz,1H),7.70(s,1H),7.54(t,J=7.9 Hz,1H),7.36(dd,J=7.9,1.3 Hz,1H),4.42(br s,2H),4.14(s,3H),1.46(s,9H)。C24H25N5O3(m/e)之LC-MS計算值431.20，觀測值432 [M+1]+。
實例4 2-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-噻唑-4-甲醯胺
此化合物以與實例1中所述相同之方法，藉由使用2-溴噻唑-4-甲醯胺(中間物-2)及乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(中間物4)製備。所要化合物分兩步驟製備(25%產率)。1H NMR(300 MHz,DMSO-d 6)：δ 8.56(s,1H),8.41(s,1H),8.24(d,J=8.4 Hz,1H),8.05-8.00(m,2H),7.82(dd,J=1.8,7.2 Hz,1H),7.61-7.58(m,2H),4.54-4.45(m,2H),1.41(s,9H)。C23H22N4O3S(m/e)之LC-MS計算值434.14，觀測值435[M+1]+。
實例5 4-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺
此化合物以與實例1中所述相同之方法，藉由使用4-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(中間物-3)及乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(中間物4)製備。所要化合物分兩步驟製備(20%產率)。1H NMR(300 MHz,DMSO-d 6)δ 8.54(s,1H),8.25(d,J=8.4 Hz,1H),8.04(d,J=1.5 Hz,1H),8.01(dd,J=1.8,8.4 Hz,1H),7.48-7.45(m,2H),7.28-7.23(m,2H),7.08(d,J=1.8 Hz,1H),4.35(s,2H),3.89(s,3H),1.41(s,9H)。C25H26N4O3(m/e)之LC-MS計算值430.20，觀測值431[M+1]+。
實例6 2-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-噻唑-4-甲醯胺
此化合物以與實例1中所述相同之方法，藉由使用2-溴噻唑-4-甲醯胺(中間物-2)及乙酸2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(中間物5)製備。所要化合物分兩步驟製備(10%產率)。1H NMR(300 MHz,DMSO-d 6)δ 8.59(d,J=2.4 Hz,1H),8.46(s,1H),7.94(d,J=1.8 Hz,1H),7.88-7.79(m,2H),7.66-7.63(m,2H),4.61-4.52(m,2H),1.46(s,9H)。 C23H21FN4O3S之LC-MS計算值452.13，觀測值453[M+1]+。
實例7 4-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基苯基]-1-甲基-1H-咪唑-2-甲醯胺
此化合物以與實例1中所述相同之方法，藉由使用4-溴-1-甲基-1H-咪唑-2-甲醯胺(中間物-1)及乙酸2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(中間物5)製備。所要化合物分兩步驟製備(12%產率)。1H NMR(300 MHz,DMSO-d 6)δ 8.50(d,J=2.7 Hz,1H),7.87-7.71(m,5H),7.50-7.44(m,2H),7.30(dd,J=1.2,7.8 Hz,1H),4.38-4.33(m,2H),4.00(s,3H),1.39(s,9H)。C24H24FN5O3(m/e)之LC-MS計算值449.19，觀測值450[M+1]+。
實例8 4-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺
此化合物以與實例1中所述相同之方法，藉由使用4-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(中間物-3)及乙酸2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(中間物5)製備。所要化合物分兩步驟製備(60%產率)。1H NMR(300 MHz,d 6 -DMSO)δ 8.49-8.48(m,1H),7.86(s,1H),7.73(d,J=13.2 Hz,1H),7.44-7.42(m,3H),7.25-7.23(m,2H),7.06(br s,2H),4.56(s,1H),4.36(s,2H),3.88(s,3H),1.37(s,9H)。C25H25FN4O3(m/e)之LC-MS計算值448.19，觀測值449.1[M+H]+。
實例9 4-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯-2-甲醯胺
步驟1：在N2下，乙酸2-溴-6-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯甲酯(中間物-4中所述之製備，300 mg，0.699 mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-吡咯-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-甲酯(270 mg，0.769 mmol)、Pd(dppf)Cl2(171 mg，0.21 mmol)及K2CO3(289 mg，2.19 mmol)於二噁烷(15 mL)及水(3 mL)中之混合物在100℃下加熱4小時。混合物濃縮至乾燥。藉由矽膠管柱層析法(以2/1比例之石油醚/乙酸乙酯溶離)純化殘餘物獲得4-[2-乙醯氧基甲基-3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-吡咯-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-甲酯(160 mg，產率40%)。C32H35N3O7(m/e)之LC-MS計算值573.25，觀測值473[M-Boc+1]+。
步驟2：向4-[2-乙醯氧基甲基-3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-吡咯-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-甲酯(136 mg，0.24 mmol)於5 mL二噁烷及5 mL水中之溶液中添加NaOH(40 mg)，且反應混合物在室溫下攪拌20小時。減壓濃縮混合物。殘餘物溶解於8 mL水中，且以1 N HCl 酸化至pH 3-4。混合物以乙酸乙酯(5 mL×3)萃取。合併之有機層經Na2SO4乾燥且減壓濃縮獲得4-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯-2-甲酸(99 mg，產率100%)。C24H23N3O4(m/e)之LC-MS計算值417.17，觀測值418[M+1]+。
步驟3：向4-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯-2-甲酸(95 mg，0.23 mmol)於無水THF(15 mL)中之溶液中添加HATU(104 mg，0.27 mmol)及三乙胺(1 mL)。使氨氣鼓泡通過溶液5小時。減壓濃縮混合物。藉由製備型TLC(石油醚/乙酸乙酯=2：1)純化殘餘物獲得呈白色固體形式之4-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯-2-甲醯胺(25 mg，產率26%)。1H NMR(300 MHz,CD3OD)δ 8.43(s,1H),8.28(d,J=8.5 Hz,1H),7.98-7.92(m,2H),7.52-7.39(m,2H),7.26-7.19(m,2H),7.03(d,J=1.6 Hz,1H),4.38(s,2H),1.38(s,9H)。C24H24N4O3(m/e)之LC-MS計算值416.18，觀測值417[M+1]+。
實例10 5-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺
步驟1：在N2下，乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(中間物4之製備中所述，300 mg，0.63 mmol)、5-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸甲酯(150 mg，0.69 mmol)、Pd(dppf)Cl2(150 mg，0.19 mmol)及K2CO3(261 mg，1.9 mmol)於二噁烷(15 mL)及水(3 mL)中之混合物在100℃下加熱3小時。混合物濃縮至乾燥。藉由矽膠管柱層析法(以8：1至5：1比率之石油醚/乙酸乙酯溶離)純化殘餘物獲得呈黃色液體形式之5-[2-乙醯氧基甲基-3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸甲酯(237 mg，產率77%)。C28H29N3O5(m/e)之LC-MS計算值487.21，觀測值997[2M+Na]+。
步驟2：5-[2-乙醯氧基甲基-3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸甲酯(237 mg，0.486 mmol)於飽和NH3/MeOH(20 mL)中之混合物在室溫下攪拌48小時。使混合物蒸發至乾燥獲得呈黃色固體形式之 5-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸甲酯(150 mg，產率68%)。C26H27N3O4(m/e)之LC-MS計算值445.20，觀測值913[2M+Na]+。
步驟3：向5-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸甲酯(150 mg，0.337 mmol)於二噁烷(5 mL)中之溶液中添加水(5 mL)。混合物攪拌5分鐘且添加NaOH(40 mg)。在室溫下攪拌反應混合物16小時。減壓濃縮混合物。殘餘物以乙醚(5 mL×3)萃取。合併之有機層以鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且減壓濃縮獲得呈黃色固體形式之5-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸(113 mg，產率78%)。C25H25N3O4(m/e)之LC-MS計算值431.18，觀測值885[2M+23]+。
步驟4：向5-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲酸(113 mg，0.262 mmol)於無水THF(15 mL)中之溶液中添加HATU(110 mg，0.288 mmol)。使氨氣鼓泡通過溶液。混合物在室溫下在NH3(g)下攪拌16小時。減壓濃縮混合物。藉由製備型HPLC純化殘餘物獲得呈白色固體形式之5-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(25 mg，產率22%)。1H NMR(300 MHz,CD3OD)δ 8.42(s,1H),8.27(d,J=8.5 Hz,1H),8.02-7.90(m,2H),7.54-7.35(m,2H),7.24-7.13(m,2H),7.02(d, J=1.9 Hz,1H),4.37(s,2H),3.87(s,3H),1.37(s,9H)。C25H26N4O3(m/e)之LC-MS計算值430.20，觀測值883[2M+Na]+。
實例11 2-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-4-甲基-噁唑-5-甲醯胺
步驟1：在N2下，將乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(中間物-4中所述之製備，72 mg，0.153 mmol)、2-溴-4-甲基-噁唑-5-甲酸乙酯(34 mg，0.146 mmol)、Pd(dppf)Cl2(36 mg，0.0438 mmol)及K2CO3(61 mg，0.438 mmol)溶解於二噁烷/H2O(5：1，6 mL)中。在100℃下攪拌反應混合物約1.5小時。減壓移除溶劑，且藉由矽膠層析法(石油醚/乙酸乙酯=2：1)純化殘餘物獲得2-[2-乙醯氧基甲基-3-(6-第三 丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-4-甲基-噁唑-5-甲酸乙酯。
步驟2：將上述2-[2-乙醯氧基甲基-3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-4-甲基-噁唑-5-甲酸乙酯溶解於10 mL NH3/MeOH中。將反應物在室溫下攪拌2天。減壓移除溶劑且藉由矽膠層析法(石油醚/乙酸乙酯=1：1)純化殘餘物獲得呈白色固體形式之2-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-4-甲基-噁唑-5-甲醯胺(47 mg，兩步驟之產率68%)。1H NMR(300 MHz,DMSO-d 6)：δ 8.57(s,1H),8.24(d,J=8.1 Hz,1H),8.20(dd,J=2.1,8.4 Hz,1H),8.06-8.00(m,2H),7.66-7.58(m,2H),4.73-4.57(m,2H),2.46(s,3H),1.41(s,9H)。C24H24N4O4(m/e)之LC-MS計算值432.18，觀測值433[M+H]+。
實例12 4-[3-(6-環丙基-8-氟-1-側氧基-1H-異喹啉-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺
步驟1：將1-(4-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-基)-2,2,2-三氟乙酮(5.0 g，19.5 mmol)溶解於氫氧化銨(72.5 ml，29.4%水溶液)中且在室溫下攪拌45分鐘。以2 N HCl使溶液達到pH=7。藉由過濾收集固體沈澱物。固體以水洗滌且在50℃ 下減壓乾燥隔夜。水層以二氯甲烷萃取兩次。真空濃縮有機相獲得更多固體。合併由過濾及萃取獲得之固體獲得呈白色固體形式之4-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(3.2 g，81%)：LC/MS-ESI觀測值[M+H]+ 203及205。
步驟2：向25 mL微波試管中添加雙(頻哪醇根基)二硼(2.5 g，9.85 mmol)、4-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(1.0 g，4.93 mmol)及乙酸鉀(1.45 g，14.8 mmol)。添加雙(二亞苯甲基丙酮)鈀(142 mg，246 μmol)，隨後添加X-phos(235 mg，493 μmol)。添加1,4-二噁烷(10.0 mL)獲得黑色溶液。密封試管且混合物以氬氣淨化10分鐘。反應混合物加熱至65℃且攪拌18小時。粗反應混合物倒入至100 mL H2O中，且以乙酸乙酯(4×100 mL)萃取。有機相以鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，150 g，5%-50%乙酸乙酯/己烷梯度)純化粗物質。真空濃縮獲得呈淡黃色發泡體形式之1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-1H-吡咯-2-甲醯胺(973 mg，79%)。LC/MS-ESI觀測值[M+H]+ 251。
步驟3：向10 mL微波小瓶中添加1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-1H-吡咯-2-甲醯胺(100 mg，400 μmol，Eq：1.00)、2-(3-氯-2-(羥基甲基)苯基)-6-環丙基-8-氟異喹啉-1(2H)-酮(137 mg，400 μmol，Eq：1.00)、X-phos(19.1 mg，40.0 μmol，Eq：0.1)、Pd2(dba)3(18.3 mg，20.0 μmol，Eq：0.05)及磷酸三鉀(212 mg，1.00 mmol，Eq：2.50)，繼之以添加1,4-二噁烷(5 ml)及水(0.5 ml)，獲得深褐色懸浮液。攪拌反應混合物，同時以氬氣淨化10分鐘。在125℃下在微波中加熱溶液30分鐘。使反應混合物冷卻至室溫。反應混合物以50 mL二氯甲烷稀釋且以水萃取。真空濃縮水溶液。藉由急驟層析法(矽膠，25%-50%[60：10：1二氯甲烷：甲醇：氫氧化銨水溶液]/二氯甲烷梯度)純化粗物質獲得呈白色固體形式之4-[3-(6-環丙基-8-氟-1-側氧基-1H-異喹啉-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(25.9 mg，15%)：LC/MS-ESI觀測值[M+H]+ 432。
實例13 4-[3-(6-第三丁基-3-甲基-1-側氧基-3,4-二氫-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺
步驟1：在100 mL圓底燒瓶中，合併6-第三丁基-2-(3-氯-2-(羥基甲基)苯基)-3-甲基-3,4-二氫酞嗪-1(2H)-酮(500 mg，1.39 mmol，Eq：1.00)、乙酸酐(711 mg，657 μl，6.97 mmol，Eq：5)及吡啶(331 mg，338 μl，4.18 mmol，Eq：3)與二氯甲烷(10.0 ml)獲得無色溶液。反應混合物加熱至45℃且攪拌8小時。冷卻至室溫且攪拌48小時。真空濃縮粗反應混合物獲得棕褐色油狀物。藉由急驟層析法(矽膠，20%-30%乙酸乙酯/己烷梯度)純化粗物質獲得乙酸 2-(6-第三丁基-3-甲基-1-側氧基-3,4-二氫酞嗪-2(1H)-基)-6-氯苯甲酯(489 mg，88%)：1H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.37(s,9 H)2.03(s,3 H)2.62(s,3 H)4.45(s,2 H)5.33(s,2 H)7.23(d,J=1.51 Hz,1 H)7.35-7.39(m,2 H)7.43-7.52(m,2 H)8.03(d,J=8.31 Hz,1 H)。
步驟2：在裝配有冷凝器以及氬氣球與溫度計之50 mL 2頸燒瓶中，乙酸2-(6-第三丁基-3-甲基-1-側氧基-3,4-二氫酞嗪-2(1H)-基)-6-氯苯甲酯(489 mg，1.22 mmol，Eq.1.00)及雙(頻哪醇根基)二硼(619 mg，2.44 mmol，Eq：2)與1,4-二噁烷(20.0 ml)合併獲得無色溶液。攪拌直至全部物質溶解。將混合物抽真空且以氬氣回填三次，接著添加乙酸鉀(359 mg，3.66 mmol，Eq：3)。添加雙(二亞苯甲基丙酮)鈀(35.1 mg，61.0 μmol，Eq：0.05)。添加X-phos(58.1 mg，122 μmol，Eq：0.1)。將混合物抽真空且以氬氣回填3次。反應混合物加熱至65℃且攪拌18小時。反應混合物冷卻至室溫且倒入50 mL H2O中，接著以乙酸乙酯(4×50 mL)萃取。合併有機相且以鹽水洗滌。向有機層添加脫色炭。攪拌溶液5分鐘。經Celite過濾溶液，接著真空濃縮。藉由急驟層析法(二氧化矽，25%乙酸乙酯/己烷)純化粗物質獲得乙酸2-(6-第三丁基-3-甲基-1-側氧基-3,4-二氫酞嗪-2(1H)-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲酯(518 mg，82%)：1H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.35(d,J=9.44 Hz,21 H)1.99(s,3 H)2.62(s,3 H)4.44(br.s.,2 H)5.44(s,2 H)7.22(d,J=1.51 Hz,1 H)7.36-7.58(m,3 H)7.87(dd,J=7.18,1.89 Hz,1 H)8.04(d,J=8.31 Hz,1 H)。
步驟3：在10 ml微波小瓶中，4-溴-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(82.5 mg，406 μmol，Eq：1.00)[實例12，步驟1中製備]、乙酸2-(6-第三丁基-3-甲基-1-側氧基-3,4-二氫酞嗪-2(1H)-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲酯(200 mg，406 μmol，Eq：1.00)、X-phos(19.4 mg，40.6 μmol，Eq：0.10)及磷酸三鉀(259 mg，1.22 mmol，Eq：3.00)與1,4-二噁烷(5 ml)及水(0.5 ml)合併獲得深褐色懸浮液。攪拌反應混合物，同時以氬氣淨化10分鐘。反應混合物在125℃下在微波中加熱30分鐘。反應混合物以50 mL二氯甲烷稀釋且乾燥(MgSO4)。真空濃縮。藉由急驟層析法(二氧化矽，20%-100%乙酸乙酯/己烷梯度)純化粗物質獲得乙酸2-(6-第三丁基-3-甲基-1-側氧基-3,4-二氫酞嗪-2(1H)-基)-6-(5-胺甲醯基-1-甲基-1H-吡咯-3-基)苯甲酯(31 mg，16%)：1H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.37(s,9 H)1.98(s,3 H)2.68(s,3 H)3.99(s,2 H)5.28(s,2 H)6.72(d,J=1.89 Hz,1 H)6.84-6.94(m,1 H)7.23(d,J=1.51 Hz,1 H)7.27-7.52(m,5 H)7.61(s,1 H)8.04(d,J=7.93 Hz,1 H)。
步驟4：向含乙酸2-(6-第三丁基-3-甲基-1-側氧基-3,4-二氫酞嗪-2(1H)-基)-6-(5-胺甲醯基-1-甲基-1H-吡咯-3-基)苯甲酯(31 mg，63.4 μmol，Eq：1.00)之四氫呋喃中添加NaOH(1.0 M(水溶液)，1.0 mL，1.00 mmol，Eq：15.8)。反 應混合物在60℃下加熱4小時。使混合物冷卻至室溫。溶液以飽和NaHCO3(水溶液)及二氯甲烷稀釋。分離各層。水層以二氯甲烷萃取一次。合併有機萃取物且經MgSO4乾燥。過濾溶液。真空濃縮獲得4-[3-(6-第三丁基-3-甲基-1-側氧基-3,4-二氫-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(28 mg，99%)：1H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.26-1.40(m,9 H)2.56(s,3 H)3.95(s,3 H)4.53(br.s.,2 H)5.23(s,2 H)6.93(d,J=1.89 Hz,1 H)7.14(d,J=1.89 Hz,1 H)7.24-7.38(m,3 H)7.39-7.53(m,1 H)7.64(dd,J=5.67,3.40 Hz,1 H)8.01(d,J=8.31 Hz,1 H)。LC/MS-ESI觀測值[M+H]+ 447。
實例14 4-[3-(6-第三丁基-8-羥基甲基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺
向15 mL試管中添加6-第三丁基-2-[3-氯-2-(羥基甲基)苯基]-8-(羥基甲基)酞嗪-1(2H)-酮(39 mg，0.105 mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-1H-吡咯-2-甲醯胺(26.2 mg，0.105 mmol，在與中間物-4製備中所述之硼酸酯形成相同之條件下自中間物-3及雙(頻哪醇根基)二硼製備)、X-Phos(4.99 mg，0.0105 mmol)及磷酸參鉀 (55.5 mg，0.262 mmol)。添加二噁烷(5 mL)及水(0.5 mL)，繼之以添加Pd2(dba)3(4.79 mg，0.00523 mmol)。混合物以氬氣淨化，接著在攪拌下加熱至125℃持續30分鐘。添加額外Pd2(dba)3(6.0 mg，0.00655 mmol)，且混合物在125℃下再攪拌30分鐘。混合物以二氯甲烷及水萃取。有機層以鹽水洗滌且經硫酸鈉乾燥。蒸發溶劑且藉由急驟管柱層析法(12 g矽膠，含0%至10%甲醇之二氯甲烷)純化殘餘物。藉由製備型TLC(矽膠，二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨90/10/1)進一步純化所要溶離份獲得呈淡黃色粉末形式之4-[3-(6-第三丁基-8-羥基甲基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(7.6 mg，15.8%產率)。C26H28N4O4(m/e)之LC/MS計算值460.21，觀測值459.0(M-H,ES-)。
實例15 1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺
步驟1：3-胺基-1H-吡唑-4-甲腈(10 g，92.5 mmol)溶解於100 mL DMF中且在0℃下攪拌溶液。分小份添加氫化鈉(礦物油中60%，7.4g，185 mmol)。攪拌混合物30分鐘，且添加(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷(90%純度，17.1 g，92.5 mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時，接著以氯仿及氯化銨水溶液萃取。有機層以鹽酸洗滌且經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。經ISCO急驟管柱層析法(220 g矽膠，25分鐘內己烷中乙酸乙酯5%至40%)純化殘餘物。蒸發作為主要組分之具有略微較大Rf之溶離份，接著自含7%乙酸乙酯之己烷結晶獲得白色結晶純化合物1N-三甲基矽烷基乙氧基甲基-5-胺基-4-氰基吡唑(3.75 g)。蒸發作為主要組分之具有 略微較小Rf之溶離份，接著自含4%乙酸乙酯之己烷結晶獲得純結晶化合物1N-三甲基矽烷基乙氧基甲基-3-胺基-4-氰基吡唑(3.50 g)。合併母液與含有兩種組分之溶離份，且蒸發獲得混合物(7.4 g，此步驟總產率67%)。對於1N-三甲基矽烷基乙氧基甲基-5-胺基-4-氰基吡唑：C10H18N4OSi(m/e)之LC/MS計算值238.12，觀測值237.2(M-H,ES-)；1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6)δ ppm 0.00(s,9 H),0.82(t,J=8.0 Hz,2 H),3.53(t,J=8.0 Hz,2 H),5.24(s,2 H)6.80(s,2 H)7.58(s,1 H)；對於1N-三甲基矽烷基乙氧基甲基-3-胺基-4-氰基吡唑：1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6)δ ppm 0.00(s,9 H),0.83(t,J=8.0 Hz,2 H),3.51(t,J=8.0 Hz,2 H),5.15(s,2 H),5.65(s,2 H),8.28(s,1 H)。
步驟2：將來自步驟1之5-胺基-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-甲腈(476 mg，2.0 mmol)及(4-溴苯基)(N-嗎啉基)甲酮(539 mg，2.0 mmol，自4-溴苯甲醯氯及嗎啉製備)溶解於溫甲苯(10 mL)中，且添加碳酸銫(976 mg，3.0 mmol)，繼之以添加甲苯(4 mL)。混合物以氬氣脫氣，且添加雙(三-第三丁基膦)鈀(102 mg，0.2 mmol)。密封混合物且在120℃下攪拌5小時。過濾混合物且以乙酸乙酯(60 mL)沖洗。以乙酸乙酯及水萃取有機層。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。經ISCO急驟管柱層析法(使用含乙酸乙酯(含有8%甲醇)之己烷(15分鐘內5%至50%，50 g矽膠))純化殘餘物獲得所要溶離份，其自乙醚及己烷 結晶獲得白色結晶物質5-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1-(2-三甲基矽烷基-乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-甲腈(631 mg，74.1%產率)。C21H29N5O3Si(m/e)之LC/MS計算值427.20，觀測值428.0(M+H,ES+)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 0.02(s,9 H),0.95(t,J=8.0 Hz,2 H),3.61(t,J=8.0 Hz,2H),3.50-3.80(m,8 H),5.44(s,2 H),6.57(br.s.,1 H),7.02(d,J=8.5 Hz,2 H),7.42(d,J=8.5 Hz,2 H),7.68(s,1 H)。
步驟3：將5-(4-(嗎啉-4-羰基)苯基胺基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-甲腈(880 mg，2.06 mmol)溶解於40 mL乙醇中。添加鹽酸(2 N)且混合物在室溫下攪拌隔夜。在室溫下16小時後，LC/MS指示60%所要物質及40%未反應起始物質。混合物加熱至65℃且攪拌2小時。LC/MS指示起始物質完全消耗及形成所要產物。混合物在冰浴下以氫氧化鈉溶液(含4g NaOH之40 mL水)處理。所得混合物以乙酸乙酯(350 mL)萃取兩次。有機層以鹽水洗滌且經硫酸鈉乾燥。TLC指示清潔斑點。蒸發溶劑且以無水乙醚濕磨殘餘物獲得呈白色固體形式之5-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲腈(530 mg，86.6%產率)。H-NMR與所要結構一致。LC/MS清潔且與所要分子量一致。C15H15N5O2(m/e)之LC/MS計算值297.12，觀測值298.0(M+H,ES+)。
步驟4：第三丁醇鉀(68 mg，0.60 mmol)溶解於3 mL DMSO中且在室溫下攪拌5分鐘。添加5-(4-(嗎啉-4-羰基) 苯基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(150 mg，0.505 mmol)且攪拌混合物5分鐘。添加2-氟-6-碘苯甲醛(378 mg，1.51 mmol)，且混合物在室溫下攪拌24小時。以乙酸乙酯及水萃取混合物。以鹽水洗滌有機層且乾燥。蒸發溶劑。以乙酸乙酯濕磨殘餘物。過濾固體獲得灰白色固體71 mg。藉由TLC及LC/MS分析白色固體指示清潔物質。濃縮濾液且溶解於二氯甲烷中，且經ISCO急驟管柱層析法(使用含甲醇之二氯甲烷(15分鐘內0至5%，24g矽膠)純化獲得淺粉紅色固體58 mg。兩種經分離固體的TLC及LC/MS皆顯示與所要1-(2-甲醯基-3-碘-苯基)-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲腈(48.5%產率)相同。C22H18N5O3I(m/e)之LC/MS計算值527.05，觀測值526.0(M-H,ES-)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 3.52-3.85(m,8H),6.60(br.s,1H),7.33(t,J=8.0 Hz,1H),7.38-7.49(m,4H),7.52(d,J=8.1 Hz,1H),8.04(s,1H),8.08(d,J=8.0 Hz,1H),9.93(br.s,1H)。
步驟5：在2 mL DMSO中合併1-(2-甲醯基-3-碘苯基)-3-(4-(嗎啉-4-羰基)苯基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(71 mg，0.135 mmol)、6-第三丁基酞嗪-1(2H)-酮(27.2 mg，0.135 mmol)、碘化亞銅(25.6 mg，0.135 mmol)及碳酸氫鈉(22.6 mg，0.269 mmol)。混合物以氬氣澈底脫氣，接著在預熱至100℃之油浴中攪拌。1小時後，混合物以二氯甲烷及水萃取。有機層經硫酸鈉乾燥且過濾。蒸發溶劑且藉由急驟管柱層析法(12 g矽膠，含0%至5%甲醇之二氯甲烷)純化殘餘物獲得呈淺粉紅色固體形式之1-(3-(6-第三丁基- 1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-甲醯基苯基)-3-[4-(嗎啉-4-羰基)苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲腈(34 mg，42%產率)。C34H31N7O4(m/e)之LC/MS計算值601.24，觀測值602.1(M+H,ES+)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 1.45(s,9 H),3.68(br.m.,8 H),6.68(br.s.,1 H),7.39(d,J=8.6 Hz,2 H),7.46(d,J=8.6 Hz,2 H),7.57(dd,J=8.0,1.1Hz,1 H),7.65-7.74(m,1 H),7.74-7.81(m,2 H),7.93(dd,J=8.6,1.8 Hz,1 H),8.17(s,1 H),8.40(d,J=8.6 Hz,1 H),8.47(br.s.,1 H),9.90(br.s.,1 H)。
步驟6：將1-(3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-甲醯基苯基)-3-[4-(嗎啉-4-羰基)苯基胺基]吡唑-4-甲腈(53 mg，0.0875 mmol)溶解於6 mL二氯甲烷及2 mL甲醇中。逐滴添加水(0.5 mL)及甲醇(1.0 mL)中之硼氫化鈉溶液(8.28 mg，0.219 mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時。LC/MS顯示清潔之所要產物。混合物蒸發至乾燥且以二氯甲烷及水萃取。有機層經硫酸鈉乾燥且蒸發獲得純所要1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲腈(52.8 mg，100%產率)。C34H33N7O4(m/e)之LC/MS計算值603.26，觀測值604.1(M+H,ES+)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 1.47(s,9 H),3.61-3.77(m,8 H),4.35(br.s.,2 H),6.59(br.s.,1 H),7.43(d,J=8.6 Hz,2 H),7.50(d,J=8.1 Hz,1 H),7.58(d,J=8.6 Hz,2 H),7.67(t,J=8.1 Hz,1 H),7.80(d,J=1.7 Hz,1H),7.83(dd,J=8.1,1.3 Hz,1 H),7.97(dd,J=8.6,1.7 Hz,1 H),8.39(d,J=0.5 Hz,1 H),8.48(d,J=8.6 Hz,1 H),8.79(s,1 H)。
步驟7：將1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲腈(52 mg，0.0861 mmol)溶解於4 mL THF及0.4 mL水中。接著添加二氫參(二甲基亞膦酸酯基)氫鉑酸鹽(CAS#173416-05-2，3 mg，8%當量)。使混合物回流1小時。TLC指示起始物質完全耗盡。LC/MS指示形成具有正確MW之清潔產物。混合物蒸發至乾燥，接著溶解於二氯甲烷中，經硫酸鈉乾燥且過濾。蒸發溶劑後，經急驟管柱層析法(24 g矽膠，含甲醇之二氯甲烷，16分鐘內0%至5%)純化殘餘物獲得呈白色固體形式之1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺(41 mg，76.6%產率)。C34H35N7O5(m/e)之LC/MS計算值621.27，觀測值622.1(M+H,ES+)；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 1.41(s,9 H)3.41-3.71(m,8 H),4.37(br.s.,2 H),4.74(br.s.,1 H),7.36(d,J=6.3 Hz,3 H),7.49-7.71(m,5 H),7.80(br.s.,1 H),8.04(d,J=9.1 Hz,2 H),8.25(d,J=6.6 Hz,1 H),8.56(br.s.,2 H),9.44(br.s.,1 H)。
實例16 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺
此化合物以與實例15(實例15之步驟5、6及7)中所述相同之方法，藉由使用6-第三丁基-8-氟-2H-酞嗪-1-酮(根據US 2010/0222325製備)製備。
在2 mL DMSO中合併1-(2-甲醯基-3-碘苯基)-3-(4-(嗎啉-4-羰基)苯基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(115 mg，0.218 mmol)、6-第三丁基-8-氟酞嗪-1(2H)-酮(48 mg，0.218 mmol)、碘化亞銅(41.5 mg，0.218 mmol)及碳酸氫鈉(36.6 mg，0.436 mmol)。混合物以氬氣澈底脫氣，且在預熱至100℃之油浴中攪拌1小時。混合物以二氯甲烷及水萃取。有機層以鹽酸洗滌，經硫酸鈉乾燥且過濾。蒸發溶劑且藉由急驟管柱層析法(使用含甲醇之二氯甲烷(16分鐘內0%至5%，24 g矽膠)純化殘餘物獲得呈淺粉紅色固體形式之1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-甲醯基-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲腈(54 mg，40%產率)。C34H30FN7O4(m/e)之LC/MS計算值619.23，觀測值620.0(M+H,ES+)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 1.43(s,9 H),3.56-3.76(m,8 H),6.61(br.s.,1 H),7.40(d,J=8.6 Hz,2 H),7.46(d,J=8.6 Hz,2 H),7.52(dd,J=12.4,1.8 Hz,1 H),7.55-7.59(m,2 H),7.64(d,J=7.8 Hz,1 H),7.78(t,J=8.1 Hz,1 H),8.16(s,1 H),8.32(s,1 H),9.97(s,1 H)。
將1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-甲醯基-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲腈(52 mg，0.0839 mmol)溶解於6 mL二氯甲烷及2 mL甲醇中。逐滴添加水(0.5 mL)及甲醇(1.0 mL)中之硼氫化鈉溶液(9.52 mg，0.252 mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時。LC/MS顯示清潔之所要產物。混合物蒸發至乾燥且以二氯甲烷及水萃取。有機層經硫酸鈉乾燥且蒸發獲得純所要1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲腈(51 mg，98%產率)。C34H32FN7O4(m/e)之LC/MS計算值621.25，觀測值622.1(M+H,ES+)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ ppm 1.45(s,9 H),3.59-3.77(m,8 H),4.37(br.s.,2 H),6.59(br.s.,1 H),7.43(d,J=8.6 Hz,2 H),7.48(dd,J=7.8,1.3 Hz,1 H),7.54-7.61(m,4 H),7.66(t,J=8.1 Hz,1 H),7.81(dd,J=8.1,1.3 Hz,1 H),8.32(d,J=2.5 Hz,1 H),8.74(s,1H)。
將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-3-(4-(嗎啉-4-羰基)苯基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(46 mg，0.074 mmol)溶解於4 mL THF及0.5 mL水中。接著添加二氫參(二甲基亞膦酸酯基)氫鉑酸鹽(3 mg，0.0069 mmol)，且在回流下攪拌混合物。1小時後，TLC指示起始物質完全耗盡。LC/MS指示形成清潔所要產物。蒸發混合物且將殘餘物溶解於二氯甲烷中且經硫酸鈉乾燥，經微過濾器過濾且蒸發。經急驟管柱層析法(使用含甲醇之二氯 甲烷(10分鐘內1.5%至5%甲醇，12 g矽膠))純化殘餘物獲得呈白色固體形式之1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺(36 mg，76.1%產率)。C34H34FN7O5(m/e)之LC/MS計算值639.26，觀測值640.1(M+H,ES+)；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 1.38(s,9 H),3.50(br.,4 H),3.59(br.,4 H),4.38(br.s.,2 H),4.78(t,J=5.2 Hz,1 H),7.36(d,J=8.6 Hz,3 H),7.52-7.69(m,5 H),7.76(d,J=13.1 Hz,2 H),7.88(s,1 H),8.54(m,2 H),9.44(s,1 H)。
實例17 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺
步驟1：將第三丁醇鉀(120 mg，1.07 mmol)溶解於5 mL DMSO中且在室溫下攪拌5分鐘。接著添加5-(4-(嗎啉-4-羰基)苯基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(290 mg，0.975 mmol)且攪拌混合物5分鐘。向此溶液中添加2-溴-6-氟苯甲醛(396 mg，1.95 mmol)且混合物在室溫下攪拌隔夜。以乙酸乙酯及水萃取混合物。有機層以水及鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥且蒸發。殘餘物以20 mL乙酸乙酯濕磨且過濾獲得所要化合物70 mg。藉由急驟管柱層析法分離濾液獲得第二批所要化合物(110 mg)1-(3-溴-2-甲醯基-苯基)-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲腈(38.4%產率)。C22H18BrN5O3(m/e)之LC/MS計算值479.06，觀測值477.8(M-H,ES-)；1H NMR(300 MHz,DMSO-d6)δ ppm 3.50(br.s.,4 H),3.59(d,J=3.8 Hz,4 H),7.34(d,J=8.7 Hz,2 H),7.53(d,J=8.7 Hz,2 H),7.65(t,J=7.9 Hz,1 H),7.79(d,J=7.9 Hz,1 H),7.85(d,J=7.9 Hz,1 H),9.08(s,1 H),9.47(s,1 H),10.07(s,1 H)。1H-NMR之NOE分析確認所要區位化學性。
步驟2：在1 mL DMSO中合併1-(3-溴-2-甲醯基苯基)-3-(4-(嗎啉-4-羰基)苯基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(34 mg，0.0708 mmol)、6-第三丁基-8-氟酞嗪-1(1H)-酮(31.2 mg，0.142 mmol)、碘化亞銅(27 mg，0.142 mmol)及碳酸氫鈉(14.9 mg，0.177 mmol)。溶液以氬氣脫氣，接著在微波中在120℃下加熱1小時。所得混合物以乙酸乙酯及氯化銨溶液萃取。濃縮有機層且藉由急驟管柱層析法(使用含乙酸乙酯(含5%甲醇)之己烷(15分鐘內5%至80%線性梯度，12 g矽膠)純化獲得純所要產物。此物質以含乙醚之己烷濕磨，且過濾獲得呈淺粉紅色固體形式之1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲腈(18.2 mg，41.5%產率)。C33H30FN7O3(m/e)之LC/MS計算值591.24，觀測值592.0(M+H,ES+)；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 1.38(s,9 H),3.50(br.,4 H),3.59(br.,4 H),7.37(d,J=8.6 Hz,2 H),7.59(d,J=8.3 Hz,1 H),7.65-7.71(m,3 H),7.78(d,J=13.1 Hz,1 H),7.87-7.93(m,2 H),8.08(s,1 H),8.58(d,J=2.3 Hz,1 H),9.29(s,1 H),9.47(s,1 H)。
步驟3：將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)苯基)-3-(4-(嗎啉-4-羰基)苯基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(30 mg，0.050 mmol)溶解於4 mL THF及0.5 mL水中。接著添加二氫參(二甲基亞膦酸酯基)氫鉑酸鹽(2.3 mg，0.0052 mmol)，且在回流下攪拌混合物。1小時後，TLC指示起始物質完全耗盡。LC/MS指示形成清潔所要產物。蒸發混合物且將殘餘物溶解於二氯甲烷中且經硫酸鈉乾燥，經微過濾器過濾且蒸發。經急驟管柱層析法(使用含甲醇之二氯甲烷(10分鐘內0%至5%甲醇，12 g矽膠))純化殘餘物獲得呈白色固體形式之1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺(21 mg，68%產率)。C33H32FN7O4(m/e)之LC/MS計算值609.25，觀測值608.0(M-H,ES-)；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 1.39(s,9 H),3.51(br.s.,4 H),3.59(br.s.,4 H),7.39(d,J=8.3 Hz,3 H),7.56(d,J=7.8 Hz,1 H),7.65-7.73(m,3 H),7.75-7.86(m,3 H),7.89(s,1 H),7.98(br.s.,1 H),8.60(d,J=2.0 Hz,1 H),9.04(s,1 H),9.42(s,1 H)。
實例18 1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-1H-吲哚-3-甲醯胺
步驟1：在氮氣氛圍下，向1H-吲哚-3-甲腈(1 g，7.03 mmol)於無水二甲基甲醯胺(10 mL)中之經冷卻(冰浴)溶液中經約4分鐘分2份添加氫化鈉(383 mg，8.44 mmol，油中60%)。將物質攪拌5分鐘，接著移除冰浴且將混合物升溫至環境溫度。2-溴-6-氟苯甲醛(1.43 g，7.03 mmol)以粉末形式以一份添加。劇烈攪拌物質2小時。混合物置於連接於機械泵的旋轉式蒸發器上且汽提溶劑。剩餘物溶解於5%氯化銨水溶液(40 ml)及乙酸乙酯(40 ml)中且轉移至分液漏斗中。收集有機相且以50%稀鹽水溶液(40 ml)洗滌。收集乙酸乙酯相且水相以乙酸乙酯(2×35 mL)反萃取。合併有機相，乾燥(硫酸鎂)，過濾且汽提。粗產物吸附至二氧化矽(10 g，來自二氯甲烷)上且藉由以100%二氯甲烷溶離之HPLC(乾負載；矽膠；40 g)純化獲得半純產物(990 mg)。此物質經熱二氯甲烷/己烷濕磨純化獲得呈橙色固體形式之1-(3-溴-2-甲醯基苯基)-1H-吲哚-3-甲腈(354 mg，16%產率)。1H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 7.02-7.11(m,1 H)7.27-7.38(m,2 H)7.45(d,J=7.93 Hz,1 H)7.61(t,J=8.12 Hz,1 H)7.68(s,1 H)7.80-7.86(m,1 H)7.90 (dd,J=7.93,1.13 Hz,1 H)10.05(s,1 H)。
步驟2：在氬氣氛圍下，向6-第三丁基-8-氟酞嗪-1(2H)-酮(根據US 2010/0222325製備，36 mg，0.16 mmol)及1-(3-溴-2-甲醯基苯基)-1H-吲哚-3-甲腈(59 mg，0.18 mmol)於無水二甲亞碸(1.8 mL)中之溶液中添加碳酸氫鈉(31 mg，0.36 mmol)。接著添加碘化銅(35 mg，0.18 mmol)，且混合物加熱至110℃持續2小時。反應物冷卻至環境溫度且溶解於水(40 ml)及二氯甲烷(40 ml)中。物質經矽藻土栓過濾，以二氯甲烷良好沖洗。濾液轉移至分液漏斗且收集二氯甲烷相。此以50%稀鹽水溶液(40 ml)洗滌。收集有機相且水相以二氯甲烷(2×35 ml)反萃取。合併二氯甲烷相，乾燥(MgSO4)，過濾且汽提。接著使用1-(3-溴-2-甲醯基苯基)-1H-吲哚-3-甲腈(290 mg，0.89 mmol)及類似成比例量之上文所述試劑且在相同程序及處理下大規模重複相同反應。合併來自兩個反應之粗產物且藉由HPLC(矽膠，以100% CH2Cl2至1% MeOH/CH2Cl2溶離)純化獲得半純產物。藉由製備型薄層層析法(3個板，以0.5% MeOH/CH2Cl2溶離，接著以0.75%且接著1% MeOH/CH2Cl2再溶離)進一步純化物質。收集產物條帶獲得呈黃色泡沫狀固體形式之1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-甲醯基苯基)-1H-吲哚-3-甲腈。(384 mg，77%產率)。C28H21FN4O2(m/e)之LC/MS計算值464.49，觀測值465.0(M+H,ES+)：1H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.42(s,9 H)7.24-7.32(m,1 H)7.34-7.41(m,2 H)7.46-7.60(m,3 H)7.75(d,J=7.55 Hz,1 H)7.81(s,1 H)7.83-7.87(m,1 H)7.90(t,J=7.96 Hz,1 H)8.25(d,J=2.64 Hz,1 H)9.56(s,1 H)。
步驟3：將圓底燒瓶所含之1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-甲醯基苯基)-1H-吲哚-3-甲腈(12 mg，0.03 mmol)溶解於10%水/四氫呋喃(1.5 ml)中。接著添加氫(二甲基三價膦酸-kp)[氫雙-(二甲基亞膦酸酯基-kp)]鉑(II)催化劑(2 mg，0.005 mmol)，且混合物加熱至回流(油浴)。1小時後，混合物冷卻至環境溫度且汽提揮發物(旋轉式蒸發器)獲得粗產物。以61 mg規模(0.24 mmol)重複此反應(如上文所述-但使用10% H2O/乙醇作為溶劑)且如所述處理。藉由製備型薄層層析法(3個板，以5% MeOH/CH2Cl2溶離，接著以5% MeOH/CH2Cl2再顯色)純化兩個反應之經合併粗物質。收集產物條帶獲得呈淡黃色固體形式之1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-甲醯基苯基)-1H-吲哚-3-甲醯胺(51 mg)。C28H23FN4O3(m/e)之LC/MS計算值482.52，觀測值483.0(M+H,ES+)：1H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.40(s,9 H)6.03(br.s,2 H)7.20-7.36(m,3 H)7.44-7.59(m,3 H)7.66(d,J=7.93 Hz,1 H)7.81(t,J=7.60 Hz,1 H)7.91(s,1 H)8.19(m,1 H)8.23(d,J=2.64 Hz,1 H)9.52(s,1 H)。
步驟4：經緩慢逐滴添加向含有溶解於甲醇/二氯甲烷(1.35 ml，2.9：1)中之1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-甲醯基苯基)-1H-吲哚-3-甲醯胺(51 mg，0.11 mmol)的經冷卻(冰浴)燒瓶中添加硼氫化鈉(20 mg，0.53 mmol)於水(0.35 ml)中之溶液。攪拌混合物10分鐘，接著溶解於二氯甲烷(20 ml)及水(20 ml)中。內容物倒入分液漏斗中且攪動。收集有機相且以50%稀鹽水溶液(20 ml)洗滌。收集二氯甲烷層且水相以二氯甲烷(2×20 mL)反萃取。合併有機相，經硫酸鎂乾燥，過濾且汽提。藉由經短矽膠管柱(以7.5%甲醇/二氯甲烷溶離)過濾純化粗物質。收集所要溶離份，接著物質自熱二氯甲烷/己烷溶液結晶，獲得白色結晶產物1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-1H-吲哚-3-甲醯胺(37 mg)。C28H25FN4O3(m/e)之LC/MS計算值484.54，觀測值485.0(M+H,ES+)：1H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.44(s,9 H)4.03-4.37(m,2 H)5.49-6.00(br.s,2 H)7.18-7.38(m,3 H)7.49-7.71(m,5 H)8.13-8.28(m,2 H)8.32(d,J=2.64 Hz,1 H)。
實例19 1-(3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)-苯基)-1H-吲哚-3-甲醯胺。
步驟1：以與實例18中所述類似之程序，經1-(3-溴-2-甲醯基苯基)-1H-吲哚-3-甲腈(222 mg，40%純，0.27 mmol，如上文實例18，步驟1中所述之合成)與6-第三丁基酞嗪-1(2H)-酮(138 mg，0.68 mmol)反應製備1-(3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-甲醯基苯基)-1H-吲哚-3-甲腈。類似處理及純化提供呈淡黃色-白色固體形式之所要產物(82 mg，66%產率)。C28H22N4O2(m/e)之LC/MS計算值446.51，觀測值447.0(M+H,ES+)：1H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.44(s,9 H)7.23-7.40(m,3 H)7.55(dd,J=7.93,1.13 Hz,2 H)7.72-7.94(m,6 H)8.32(s,1 H)8.39(d,J=8.31 Hz,1 H)9.59(s,1 H)。
步驟2：以與實例18中所述類似之程序，經1-(3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-甲醯基苯基)-1H-吲哚-3-甲腈(82 mg，0.18 mmol)之腈水解及使用催化劑氫(二甲基三價膦酸-kp)[氫雙-(二甲基亞膦酸酯基-kp)]鉑(II)催化劑(5 mg，0.064 mmol)製備1-(3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-甲醯基苯基)-1H-吲哚-3-甲醯胺。類似處理及 純化提供呈淡黃色玻璃狀固體形式之所要產物(54 mg，63%產率)。C28H24N4O3(m/e)之LC/MS計算值464.5，觀測值465.0(M+H,ES+)：1H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.44(s,9 H)7.21-7.37(m,3 H)7.48-7.59(m,2 H)7.67-7.76(m,2 H)7.85(t,J=7.93,1.00 Hz,1 H)7.90(s,1 H)8.14-8.20(m,1 H)8.30(s,1 H)8.37(d,J=8.31 Hz,1 H)9.56(s,1 H)。
步驟3：以與實例18中所述類似之程序，藉由使用硼氫化鈉(22 mg，0.58 mmol)還原1-(3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-甲醯基苯基)-1H-吲哚-3-甲腈(54 mg，0.12 mmol)製備1-(3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)-苯基)-1H-吲哚-3-甲醯胺。類似處理及純化提供呈白色結晶固體形式之所要產物(36 mg，64%產率)。C28H26N4O3(m/e)之LC/MS計算值466.54，觀測值467.0(M+H,ES+)：1H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.46(s,9 H)4.07(br.d,J=11.70 Hz,1 H)4.30(br.d,J=11.70 Hz,1 H)5.60-5.97(m,2 H)7.20-7.38(m,3 H)7.52-7.71(m,3 H)7.80(d,J=1.89 Hz,1 H)7.96(dd,J=8.31,1.89 Hz,1 H)8.17-8.29(m,2 H)8.39(s,1 H)8.46(d,J=8.31 Hz,1 H)。
實例20 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺
步驟1：在100 mL梨形燒瓶中，將1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(150 mg，1.05 mmol，Eq：1.00)、乙酸銅(II)(381 mg，2.1 mmol，Eq：2)、吡啶(166 mg，170 μl，2.1 mmol，Eq：2)及6-第三丁基-8-氟-2-(1-羥基-1,3-二氫-苯并[c][1,2]噁硼-4-基)-2H-酞嗪-1-酮(706 mg，1.15 mmol，Eq：1.1)與二氯甲烷(10 ml)合併獲得綠松石色懸浮液。以氮氣吹拂反應混合物。反應混合物加熱至80℃且攪拌16小時。反應物以飽和NH4Cl(50 mL)稀釋且以EtOAc(3×50 mL)萃取。在使用含30-50% EtOAc之己烷的ISCO上分離混合物獲得呈灰白色發泡體形式之1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(122 mg，25%)。1H NMR(DMSO-d6)δ：8.64(dd,J=7.9,1.6 Hz,1H),8.60(d,J=2.5 Hz,1H),8.45(s,1H),8.36(dd,J=4.8,1.8 Hz,1H),7.94(d,J=1.8 Hz,1H),7.82(dd,J=13.2,1.6 Hz,1H),7.66-7.78(m,3H),7.63(dd, J=7.3,2.3 Hz,1H),7.36(dd,J=8.0,4.8 Hz,1H),7.18(br.s.,1H),4.72(t,J=5.4 Hz,1H),4.11-4.34(m,2H),1.44(s,9H)。MS m/e 468.5(M+H+)。
步驟2：將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(610 mg，783 μmol，Eq：1.00)、乙醛肟(139 mg，143 μl，2.35 mmol，Eq：3)及氯化銦(III)(8.66 mg，39.1 μmol，Eq：0.05)於甲苯(25.2 ml)中之經攪拌溶液加熱至110℃且攪拌3小時。將反應混合物倒入15 mL EtOAc中且以飽和NH4Cl(1×25 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。移除溶劑後，且藉由急驟層析法(矽膠，12 g，含80%至100% EtOAc之己烷)分離殘餘物獲得66 mg具有雜質之所要產物。此物質藉由製備型逆相HPLC在TFA中再純化。所要產物以NaHCO3(1×25 mL)中和。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮，以乙酸乙酯/甲醇(9：1)萃取獲得呈白色固體形式之1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺(43 mg，12%)。1H NMR(DMSO-d6)δ：8.64(dd,J=7.9,1.6 Hz,1H),8.60(d,J=2.5 Hz,1H),8.45(s,1H),8.36(dd,J=4.8,1.8 Hz,1H),7.94(d,J=1.8 Hz,1H),7.82(dd,J=13.2,1.6 Hz,1H),7.66-7.78(m,3H),7.63(dd,J=7.3,2.3 Hz,1H),7.36(dd,J=8.0,4.8 Hz,1H),7.18(br.s.,1H),4.72(t,J=5.4 Hz,1H),4.11-4.34(m,2H),1.44(s,9H)。MS m/e 486.6(M+H+)。
實例21
步驟1：在100 mL圓底燒瓶中，將1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)-1H-吡咯-2-甲醯胺(61.0 mg，244 μmol，Eq：1.10)、2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-4-碘菸鹼醛(100 mg，222 μmol，Eq：1.00)及[1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(16.2 mg，22.2 μmol，Eq：0.1)與二噁烷(667 μl)合併獲得紅色溶液。添加含碳酸鉀(61.3 mg，443 μmol，Eq：2)之水(66.7 μl)且所得懸浮液加熱至70℃且攪拌32小時。反應物以乙酸乙酯(10 mL)稀釋，以鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，12 g，含10%至15% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得呈灰白色固體形式之4-[2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-3-甲醯基-吡啶-4-基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(28 mg，28.2%)。1H NMR(DMSO-d6)δ：10.06 (s,1H),8.72(d,J=5.3 Hz,1H),8.53(d,J=2.5 Hz,1H),7.91(d,J=1.8 Hz,1H),7.79(dd,J=13.3,1.8 Hz,1H),7.73(d,J=5.3 Hz,1H),7.69-7.76(m,1H),7.50(d,J=1.8 Hz,1H),7.17(d,J=2.0 Hz,1H),7.12(br.s.,1H),3.93(s,3H),1.39(s,9H)；MS m/e 448.5(M+H+)。
步驟2：在25 mL梨形燒瓶中，將4-(2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-3-甲醯基吡啶-4-基)-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(28 mg，62.6 μmol，Eq：1.00)與CH2Cl2(3 ml)及MeOH(1 ml)合併獲得無色溶液。添加硼氫化鈉(4.73 mg，125 μmol，Eq：2.00)。攪拌反應混合物1小時。反應混合物倒入EtOAc(25 mL)中且以飽和NH4Cl(3×10 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮，隨後凍乾獲得呈白色固體形式之4-[2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-3-羥基甲基-吡啶-4-基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺(14 mg，50%)。1H NMR(DMSO-d6)δ ppm 8.52(d,J=2.8 Hz,1H),8.46(d,J=5.0 Hz,1H),7.90(d,J=1.8 Hz,1H),7.77(dd,J=13.3,1.8 Hz,1H),7.55-7.72(m,1H),7.52(d,J=5.0 Hz,1H),7.49(d,J=1.8 Hz,1H),7.23(d,J=2.0 Hz,1H),7.04(br.s.,1H),4.88(br.s.,1H),4.29-4.57(m,2H),3.91(s,3H),1.39(s,9H)；MS m/e 450.5(M+H+)。
實例22 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(1-羥基-1-甲基-乙基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺
步驟1：將來自實例15，步驟1之5-胺基-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-甲腈(500 mg，2.1 mmol)、2-(4-溴苯基)丙-2-醇(519 mg，2.41 mmol)及碳酸銫(1.03 g，3.15 mmol)溶解於無水甲苯(14 ml)中。混合物以氬氣脫氣，且添加雙(三-第三丁基膦)鈀(107 mg，0.21 mmol)。混合物以氬氣再次脫氣，接著在氬氣下在120℃下攪拌4.5小時。添加額外2-(4-溴苯基)丙-2-醇(50 mg)，且將混合物再加熱2小時。物質冷卻至環境溫度且攪拌隔夜。粗產物經矽藻土栓過濾，以乙酸乙酯(60 ml)良好沖洗。有機層與水(60 ml)一起在分液漏斗中振盪且收集。水相以乙酸乙酯(2×40 ml)反萃取。合併之有機相以硫酸鎂乾燥，過濾且汽 提。經使用含乙酸乙酯之己烷之Analogix急驟管柱層析法(10%至45%梯度，23g矽膠)純化剩餘物獲得呈紅褐色黏稠油狀物之5-(4-(2-羥基丙-2-基)苯基胺基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-甲腈(482 mg，62%產率)。C19H28N4O2Si(m/e)之LC/MS計算值372.55，觀測值371(M-H,ES-)。
步驟2：將5-(4-(2-羥基丙-2-基)苯基胺基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-甲腈(480 mg，1.13 mmol)溶解於氟化四丁基銨之溶液(1M，16.8 ml)中且密封燒瓶。將混合物置於加熱至110℃之油浴中且攪拌28小時。使混合物冷卻至環境溫度。添加水(60 ml)及乙醚(60 ml)且物質在分液漏斗中振盪，且收集有機相。水相以乙醚(2×50 ml)反萃取。合併有機相，自硫酸鎂乾燥，過濾且汽提。經使用含乙酸乙酯之己烷之Analogix急驟管柱層析法(30%至90%梯度，40 g矽膠)的純化粗剩餘物獲得呈灰白色粉末形式之3-(4-(2-羥基丙-2-基)苯基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(128 mg，47%產率)。C13H14N4O(m/e)之LC/MS計算值242.28，觀測值241(M-H,ES-)。
步驟3：藉由遵照與實例15中所述類似之方案將3-(4-(2-羥基丙-2-基)苯基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈轉化為1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-甲醯基-苯基]-3-[4-(1-羥基-1-甲基-乙基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲腈。
步驟4：將1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-甲醯基-苯基]-3-[4-(1-羥基-1-甲基-乙基)-苯基胺基]- 1H-吡唑-4-甲腈(78 mg，0.14 mmol)及二氫參(二甲基亞膦酸酯基)氫鉑酸鹽(7.1 mg，0.12當量)溶解於四氫呋喃(3.1 ml)及水(0.31 ml)中。攪拌物質且加熱至回流(油浴)持續1小時。使混合物冷卻至環境溫度且汽提揮發物(旋轉式蒸發器)。藉由製備型薄層層析法(2個板，首先以含7%甲醇之二氯甲烷溶離，接著以含6%甲醇之二氯甲烷再顯色)純化粗物質。收集產物條帶，獲得呈淡黃色粉末形式之所要1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-甲醯基-苯基]-3-[4-(1-羥基-1-甲基-乙基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺(41 mg)。C32H31FN6O4(m/e)之LC/MS計算值582.62，觀測值581.0(M-H,ES-)。
步驟5：將1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-甲醯基-苯基]-3-[4-(1-羥基-1-甲基-乙基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺(34 mg，0.06 mmol)溶解於1：1甲醇及二氯甲烷之溶液中(15 ml)。經逐滴添加向其中添加硼氫化鈉(11 mg，0.29 mmol)溶解於水(0.25 ml)中之溶液。攪拌10分鐘後，汽提揮發物(旋轉式蒸發器)且將剩餘物溶解於二氯甲烷(30 ml)及水(30 ml)中，且在分液漏斗中振盪。收集有機相且水相以二氯甲烷(2×25 ml)反萃取。合併有機萃取物，自硫酸鎂乾燥，過濾且汽提。藉由矽膠層析法(1 g，以含7.5%甲醇之二氯甲烷溶離)純化粗產物獲得呈灰白色粉末形式之所要產物1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(1-羥基-1-甲基-乙基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺(32 mg)。C32H33FN6O4(m/e) 之LC/MS計算值584.66，觀測值583(M-H,ES-)。
實例23 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氯-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺
步驟1：遵照WO 2005/5414 A2類似程序。因此，將3-胺基-4-氰基吡唑(11 g，102 mmol)溶於二碘甲烷(150 ml，1.87 mol)中，且使燒瓶冷卻至-10℃。以有效攪拌經40分鐘逐滴添加亞硝酸異戊酯(92.4 ml，688 mmol)。添加完成後，攪拌混合物5分鐘。接著加料燒瓶移除且換為有效冷凝器，且物質在100℃加熱(油浴)2小時。燒瓶冷卻至環境溫度且移除溶劑(旋轉式蒸發器及最終機械泵)。剩餘物溶於乙酸乙酯(120 ml)中且移至分液漏斗。添加5%偏亞硫酸 氫鈉水溶液(120 ml)且振盪兩相混合物。收集有機相且與1N鹽酸溶液(水溶液，120 ml)繼之與水(120 ml)一起振盪。收集有機相，且水相以乙酸乙酯(2×100 ml)反萃取。合併有機萃取物，以硫酸鎂乾燥，過濾且汽提。粗產物吸附至二氧化矽(約25 g，自二氯甲烷)且藉由Analogix急驟管柱層析法使用於己烷中之乙酸乙酯(23%至50%梯度，80 g矽膠)純化(乾負載)，獲得淡黃色粉末(20 g)。此物質藉由自熱乙酸乙酯/己烷結晶進一步純化，獲得呈淡褐色固體之3-碘-1H-吡唑-4-甲腈(11.3 g)，其藉由過濾(以5%乙酸乙酯/己烷完全沖洗)收集。自母液亦獲得第二批收穫物質(3.76 g)。C4H2IN3之LC/MS(m/e)計算值218.98，觀測值218(M-H,ES-)。
步驟2：在氮氣氛圍下將3-碘-1H-吡唑-4-甲腈(3.62 g，16.5 mmol)溶於無水四氫呋喃(67 ml)中。以一份添加氫化鈉(992 mg，24.8 mmol，60%於油中)，且將混合物置於加熱(50℃)音波處理浴中50分鐘。向此混合物中添加2-氟-6-碘苯甲醛(5.37 g，21.5 mmol)，且將混合物置於加熱至60-65℃的油浴中。攪拌2小時後，添加另外2-氟-6-碘苯甲醛(350 mg，1.4 mmol)且將物質再攪拌1小時。將燒瓶冷卻至環境溫度且汽提接近90%溶劑(旋轉式蒸發器)。添加乙醚(30 ml)及水(50 ml)且劇烈攪拌混合物30分鐘。沈澱之產物藉由過濾收集，以乙醚及水完全沖洗，且在真空烘箱中乾燥，獲得淡棕褐色粉末(4.78 g)。將此固體產物溶於2%甲醇於二氯甲烷中之溶液(約60 ml，加熱至溶解)中且移至 分液漏斗中。添加水(60 ml)且振盪物質，且收集有機相。此以硫酸鎂乾燥，過濾且汽提，獲得所要之1-(2-甲醯基-3-碘-苯基)-3-碘-1H-吡唑-4-甲腈，呈淡黃色粉末(3.973 g)。C11H5I2N3O之LC/MS(m/e)計算值448.99，觀測值450(M+H,ES+)。
步驟3：向烘乾之燒瓶裝入1-(2-甲醯基-3-碘-苯基)-3-碘-1H-吡唑-4-甲腈(1.703 g，3.79 mmol)、6-第三丁基-8-氟酞嗪-1(2H)-酮[根據US 2010/0222325製備](919 mg，4.17 mmol)及碳酸氫鈉(637 mg，7.59 mmol)且溶解於無水二甲亞碸(30 ml)中。混合物在音波處理浴槽中以氬氣脫氣。添加碘化銅(722 mg，3.79 mmol)且將物質再次澈底脫氣。在超音處理時，混合物加熱至60℃持續2.5小時且在環境溫度下隔夜。添加額外碘化銅(360 mg)且在超音處理下在60℃下將物質加熱4小時。燒瓶冷卻至環境溫度且在劇烈攪拌下添加二氯甲烷(40 ml)及水(40 ml)。5分鐘後，物質經矽藻土栓過濾，以1%甲醇於二氯甲烷中之溶液良好沖洗。濾液轉移至分液漏斗且收集有機相。將其與50%稀鹽水溶液(60 ml，一定程度翻騰(ragging))一起振盪。收集二氯甲烷相且水相以二氯甲烷反萃取(注意：觀測到一定程度翻騰。有助於在反萃取時使用較大體積之有機溶液及水溶液)。合併之有機相以硫酸鎂乾燥，過濾且汽提。剩餘物溶解於二氯甲烷中且經Analogix急驟管柱層析法(首先以100%二氯甲烷(固持5分鐘)溶離，接著換為含1%至3%甲醇之二氯甲烷之梯度溶離(25g矽膠))純化，獲得呈淡褐色粉 末形式之所要1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-甲醯基-苯基]-3-碘-1H-吡唑-4-甲腈(1.2 g)。C23H17FIN5O2(m/e)之LC/MS計算值541.32，觀測值542(M+H,ES+)。
步驟4：將1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-甲醯基-苯基]-3-碘-1H-吡唑-4-甲腈(1.2 g，2.22 mmol)溶解於二氯甲烷(40 ml)及甲醇(80 ml)之溶液中。經逐滴添加向其中添加硼氫化鈉(21 mg，0.53 mmol)溶解於水(0.35 ml)中之溶液。攪拌10分鐘後，汽提揮發物(旋轉式蒸發器)且將剩餘物溶解於二氯甲烷(60 ml)及水(50 ml)中，且在分液漏斗中振盪。收集有機相且水相以二氯甲烷(2×50 ml)反萃取。合併有機萃取物，自硫酸鎂乾燥，過濾且汽提。藉由Analogix急驟管柱層析法(40 g管柱，首先以100%二氯甲烷[固持10分鐘]溶離，接著換為含1%甲醇之二氯甲烷溶離)純化粗產物，獲得呈淡橙色油狀物之所要產物1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-碘-1H-吡唑-4-甲腈(1.029 g)，其在靜置後凝固。C23H19FIN5O2(m/e)之LC/MS計算值543.33，觀測值544(M+H,ES+)。
步驟5：向小圓底燒瓶中裝入1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-碘-1H-吡唑-4-甲腈(212 mg，0.39 mmol)、5-氯吡啶-2-胺(65 mg，0.51 mmol)、XANTPHOS(56 mg，0.098 mmol)及碳酸銫(381 mg，1.17 mmol)。添加無水二噁烷(5.7 ml)且混合物以氬 氣澈底脫氣。添加Pd2(dba)3(46 mg，0.051 mmol)且物質以氬氣再次脫氣。燒瓶置於加熱至95℃之油浴中2.5小時。燒瓶冷卻至環境溫度且添加乙酸乙酯(30 ml)及水(30 ml)。內容物在分液漏斗中振盪且收集有機相。水相以乙酸乙酯(2×30 ml)反萃取，且合併有機相，以硫酸鎂乾燥，過濾且汽提。藉由製備型薄層層析法(2個板，以含4%甲醇之二氯甲烷溶離)純化粗物質。收集產物條帶，獲得呈淡黃色粉末形式之所要1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氯-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(111 mg)。C28H23ClFN7O2(m/e)之LC/MS計算值543.98，觀測值544(M+H,ES+)。
步驟6：將1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氯-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(111 mg，0.204 mmol)及二氫參(二甲基亞膦酸酯基)氫鉑酸鹽(10.5 mg，0.025 mmol)溶解於四氫呋喃(3.8 ml)及水(0.38 ml)中。攪拌物質且加熱至回流(油浴)持續1小時。使混合物冷卻至環境溫度且汽提揮發物(旋轉式蒸發器)。藉由製備型薄層層析法(2個板，首先以含7%甲醇之二氯甲烷溶離，接著以含7%甲醇之二氯甲烷再顯色)純化粗剩餘物。收集產物條帶，獲得呈灰白色粉末形式之所要1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氯-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺(70 mg)。C28H25ClFN7O3(m/e)之LC/MS計算值561.99，觀測值562(M+H,ES+)。
實例24 3-[5-(2-氮雜環丁烷-3-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺。
步驟1：在氮氣氛圍下，將2-(6-氯吡啶-3-基氧基)-2-甲基丙醛[根據US 2012/40949 A1製備](28 g，140 mmol，Eq：1.00)溶解於無水二氯甲烷(252 ml)中且冷卻至-10℃(乾冰/乙腈冷卻浴)。添加乙酸(10.4 ml，182 mmol)及三乙醯氧基硼氫化鈉(41.6 g，196 mmol)。接著在高效攪拌下經6分鐘經逐滴添加方式添加氮雜環丁烷(17 ml，252 mmol)。添加完成後，攪拌混合物5分鐘，接著移除冷卻浴且將物質升溫至環境溫度。1小時後，添加碳酸氫鈉飽和水溶液(200 ml)以及二氯甲烷(80 ml)。將兩相物質轉移至分液漏斗中，攪動且收集有機相。此與5%碳酸氫鈉溶液(200 ml)，接著50%稀鹽水溶液(200 ml)一起振動。收集有機相 且水相以二氯甲烷(2100 ml)反萃取。合併有機相，以硫酸鎂乾燥，過濾且汽提。經以4%甲醇於二氯甲烷中之溶液溶離之管柱層析法(矽膠，40 g)純化粗剩餘物獲得呈金褐色流動性油狀物之所要5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-2-氯-吡啶(29.66 g)。C12H17ClN2O(m/e)之LC/MS計算值240.73，觀測值241(M+H,ES+)。
步驟2：向5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-2-氯-吡啶(21.2 g，88.1 mmol)於無水四氫呋喃(314 ml)中之經脫氣溶液中添加2-(二環己基膦基)聯苯(6.17 g，17.6 mmol)及參(二亞苯甲基丙酮)二鈀(0)(8.06 g，8.81 mmol)。接著，經5分鐘經加料漏斗添加1 M雙(三甲基矽烷基)胺化鋰於THF(264 ml，264 mmol)中之溶液。反應混合物在氬氣氛圍下在75℃下攪拌隔夜。將反應混合物倒入氯化銨飽和水溶液(400 ml)中且以乙酸乙酯(350 ml)萃取。收集有機相且以50%稀鹽水(350 ml)洗滌。收集有機相且水相以乙酸乙酯(2×200 ml)反萃取。合併之有機物自硫酸鎂乾燥，過濾且汽提。藉由以含0%至12%甲醇之二氯甲烷溶離之Analogix急驟管柱層析法(80 g管柱)純化剩餘物獲得呈深褐色半黏稠油狀物之所要5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺(10.59 g)(以及較不純溶離份，其可在類似條件下再純化獲得另一份4.01 g產物)。C12H19N3O(m/e)之LC/MS計算值221.3，觀測值222(M+H,ES+)。
步驟3及4：使用與實例16-C，步驟5及6中所述類似之方 案，將上文步驟2中製備之5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺轉化為所要產物獲得粗產物。藉由製備型薄層層析法(2個板，首先以含14%甲醇之二氯甲烷溶離，接著以含12%甲醇之二氯甲烷再顯色兩次)純化此物質，獲得呈淡褐色粉末形式之所要3-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺(27 mg)。C35H39FN8O4(m/e)之LC/MS計算值654.73，觀測值655(M+H,ES+)。
表I*展示使用與上文實例中所述者類似之程序製備之其他類似物。
實例39 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氰基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺
步驟1. 在小容量微波試管中將1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氯-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4甲醯胺(上文實例23中製備)(31 mg，55.2 μmol)、氰化鈉(51.8 mg，441 μmol)及2-二環己基膦 基-2',6'-二甲氧基聯苯(6 mg，14.6 μmol)溶解於1.5 ml無水二甲基甲醯胺中且以氬氣澈底脫氣。添加參(二亞苯甲基丙酮)二鈀(0)(7 mg，7.6 μmol)且再次脫氣。在150℃下在微波反應器中加熱混合物60分鐘。汽提溶劑(旋轉式蒸發器/泵)且剩餘物溶解於乙酸乙酯(25 ml)及水(25 mL)中且在分液漏斗中振盪。收集有機相且水相以乙酸乙酯(2×20 ml)反萃取。合併有機相，自硫酸鎂乾燥，過濾且汽提。藉由製備型薄層層析法(1個板，以含9.5%甲醇之二氯甲烷溶離)純化粗產物。收集產物條帶，獲得半純所要產物(21 mg，91%純)。對於較大純度，將物質再裝載至1個製備型薄層層析板上且以含7%甲醇之二氯甲烷溶離。以含7%，接著8.5%且最終9%甲醇之二氯甲烷使板再顯色，此時分離較具極性之雜質。收集極性較低之產物條帶，獲得呈灰白色固體形式之所要1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氰基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺(17 mg，56%)。C29H25FN8O3(m/e)之LC/MS計算值552.57，觀測值553(M+H,ES+)。
實例40 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-3-甲醯胺
步驟1. 將1H-吡唑-3-甲腈(850 mg，9.13 mmol)溶解於15 mL無水DMSO中且添加第三丁醇鉀(1.08 g，9.13 mmol，Eq：1.00)。混合物在室溫下攪拌20分鐘，且添加2-溴-6-氟苯甲醛(3.71 g，18.3 mmol，Eq：2)。混合物在室溫下攪拌隔夜，接著以乙酸乙酯及水萃取。乾燥有機層且濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含20%至40% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得1-(3-溴-2-甲醯基苯基)-1H-吡唑-3-甲腈(1.83 g，73%)。
步驟2. 在25 mL容器中，將1-(3-溴-2-甲醯基苯基)-1H-吡唑-3-甲腈(50 mg，181 μmol，Eq：1.00)、6-第三丁基-8-氟酞嗪-1(2H)-酮(79.8 mg，362 μmol，Eq：2)及碘化銅(I)(69.0 mg，362 μmol，Eq：2.00)與DMSO(2.00 ml)合併獲得黃色懸浮液。向其中添加碳酸氫鈉(38.0 mg，453 μmol，Eq：2.5)。混合物在微波中在120℃下加熱1小時。將反應混合物倒入25 mL飽和NH4Cl中且以EtOAc(3×25 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。濃縮有機層且經使用含乙酸乙酯(含有5%甲醇)之己烷的ISCO急驟管柱層析法(15分鐘內5%至80%線性梯度，12 g矽膠)純化獲得 純所要產物，其以含乙醚之己烷濕磨且過濾獲得1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-甲醯基苯基)-1H-吡唑-3-甲腈(19 mg，25%)。
步驟3. 在25 mL容器中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-甲醯基苯基)-1H-吡唑-3-甲腈(18 mg，43.3 μmol，Eq：1.00)、硼氫化鈉(6.56 mg，173 μmol，Eq：4)與CH2Cl2(2 mL)及MeOH(1 mL)合併獲得白色懸浮液。攪拌混合物1小時。將反應混合物倒入25 mL飽和NH4Cl中且以EtOAc(3×25 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。濃縮有機層獲得白色產物1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-1H-吡唑-3-甲腈(16 mg，99%)。
步驟4. 在10 mL圓底燒瓶中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-1H-吡唑-3-甲腈(16 mg，38.3 μmol，Eq：1.00)及[氫雙(二甲基亞膦酸酯基-kP)]鉑(II)(1 mg，2.33 μmol，Eq：0.0608)與乙醇(821 μl)及水(410 μl)合併獲得無色溶液。反應混合物加熱至80℃且攪拌2小時。以DCM稀釋反應混合物。反應混合物經玻璃纖維紙過濾。藉由製備型HPLC純化粗物質獲得呈凍乾白色固體形式之1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-3-甲醯胺(11 mg，66%，[M+H]+ 436)。
實例41 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基 甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺
步驟1. 將1H-吡唑-4-甲腈(935 mg，10.0 mmol，Eq：1.00)溶解於15 mL無水DMSO中且添加第三丁醇鉀(1.19 g，10.0 mmol，Eq：1.00)。混合物在室溫下攪拌20分鐘，且添加2-溴-6-氟苯甲醛(4.08 g，20.1 mmol，Eq：2)。混合物在室溫下攪拌隔夜，接著以乙酸乙酯及水萃取。乾燥有機層且濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含20%至40% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得1-(3-溴-2-甲醯基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(1.53 g，55%)。
步驟2. 在25 mL容器中，將1-(3-溴-2-甲醯基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(100 mg，362 μmol，Eq：1.00)、6-第三丁基-8-氟酞嗪-1(2H)-酮(160 mg，724 μmol，Eq：2)及碘化銅(I)(138 mg，724 μmol，Eq：2.00)與DMSO(2.00 ml)合併獲得黃色懸浮液。向其中添加碳酸氫鈉(76.1 mg，906 μmol，Eq：2.5)。混合物在微波中在120℃下加熱1小時。將反應混合物倒入25 mL飽和NH4Cl中且以EtOAc(3×25 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。濃縮有機層 且經使用含乙酸乙酯(含有5%甲醇)之己烷的ISCO急驟管柱層析法(15分鐘內5%至80%線性梯度，24g矽膠)純化獲得純所要產物，其以含乙醚之己烷濕磨且過濾獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-甲醯基-苯基]-1H-吡唑-4-甲腈(110 mg，73%)。
步驟3. 如實例22中將醛還原為醇。
步驟4. 在25 mL圓底燒瓶中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(89 mg，213 μmol，Eq：1.00)及氫(二甲基三價膦酸-kP)(4.58 mg，10.7 μmol，Eq：0.05)與乙醇(1 ml)及水(1.00 ml)合併獲得無色溶液。反應混合物加熱至85℃且攪拌45分鐘。使混合物達到室溫，且真空移除溶劑。藉由逆相HPLC純化獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺(51 mg，56%，[M+H]+ 436)。
實例42 7-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲醯胺
步驟1. 在250 mL圓底燒瓶中，將7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(4.34 g，36.4 mmol，Eq：1.00)及N-碘代丁二醯亞胺(8.61 g，38.3 mmol，Eq：1.05)與乙腈(60 ml)合併獲得淡褐色懸浮液。攪拌反應混合物3小時。將反應混合物倒入100 mL H2O中，且以EtOAc(3×50 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。粗物質以乙醚(2×25 mL)濕磨獲得呈橙色固體形式之5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(7.58 g，85%)。
步驟2. 在200 mL圓底燒瓶中，將5-碘-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(2.5 g，10.2 mmol，Eq：1.00)、三乙胺(1.14 g，1.56 ml，11.2 mmol，Eq：1.1)及DMAP(74.8 mg，612 μmol，Eq：0.06)與CH2Cl2(50.0 ml)合併獲得橙色懸浮液。將Tosyl-Cl(2.00 g，10.5 mmol，Eq：1.03)分多份添加至反應混合物中且再攪拌反應混合物3小時。將反應混合物倒入25 mL H2O中，且以DCM(3×25 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮獲得2 gm紅色油狀物。藉由急驟層析法(矽膠，80 g，含25%至70% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得呈黃色固體形式之5-碘-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(1 g，24.6%)。
步驟3. 在20 mL圓底燒瓶中，將5-碘-7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(3.32 g，8.32 mmol，Eq：1.00)、氰化銅(I)(2.98 g，33.3 mmol，Eq：4)、Pd2(dba)3(305 mg，333 μmol，Eq：0.04)及DPPF(738 mg，1.33 mmol，Eq：0.16)與二噁烷(48.1 ml)合併獲得黃色懸浮液。反應物以氬氣淨化且將混合物加熱至80℃且攪拌4小時。4小時時，LCMS顯 示反應完成。真空濃縮粗反應混合物。粗物質以乙醇(2×15 mL)濕磨獲得1 g灰黃色固體。
步驟4. 在15 mL圓底燒瓶中，7-甲苯磺醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(1 g，3.35 mmol，Eq：1.00)及TBAF(13.4 ml，13.4 mmol，Eq：4.00)與四氫呋喃合併獲得灰白色溶液。攪拌反應混合物3小時。將反應混合物倒入20 mL飽和NH4Cl中且以EtOAc(3×25 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。粗物質以乙醚(1×20 mL)濕磨獲得7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(312 mg，65%)。
步驟5. 在25 mL圓底燒瓶中，將7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(40.9 mg，284 μmol，Eq：1.00)、6-第三丁基-8-氟-2-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]噁硼-4-基)酞嗪-1(2H)-酮(100 mg，284 μmol，Eq：1.00)、乙酸銅(34.8 mg)及吡啶(44.9 mg，45.9 μl，568 μmol，Eq：2)與二氯乙烷合併獲得深藍色懸浮液。以氮氣吹拂反應混合物。反應混合物加熱至80℃且攪拌16小時。反應物以飽和NH4Cl(50 mL)稀釋且以EtOAc(3×50 mL)萃取。藉由使用含30-50% EtOAc之己烷的急驟管柱分離混合物獲得呈凍乾白色粉末形式之7-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(42 mg，31%)。
步驟6. 在10 mL圓底燒瓶中，7-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲腈(39 mg，83.2 μmol，Eq：1.00)及[氫雙(二甲基亞膦酸酯基-kP)]鉑(II)(1 mg，2.33 μmol，Eq：0.0280)與 乙醇(2 ml)及水(1 ml)合併獲得無色溶液。將反應混合物加熱至80℃且攪拌2小時。以DCM稀釋反應混合物。反應混合物經玻璃纖維紙過濾。進行HPLC純化獲得7-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲醯胺(33 mg，66%，[M+H]+ 487)。
實例43 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺
步驟1. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(250 mg，1.27 mmol，Eq：1.00)、TIPS-OTf(972 mg，860 μl，3.17 mmol，Eq：2.5)及DIEA(492 mg，665 μl，3.81 mmol，Eq：3)與二噁烷(6.25 ml)合併獲得淡褐色溶液。反應混合物加熱至55℃且攪拌16小時。將反應混合物倒入20 mL EtOAc中且以飽和NaHCO3(3×10 mL)萃取。 有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，12 g，含5%至10% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得呈無色油狀物之6-溴-1-(三異丙基矽烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(380 mg，85%)。
步驟2. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-溴-1-(三異丙基矽烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(520 mg，1.47 mmol，Eq：1.00)、乙酸鈀(II)(165 mg，736 μmol，Eq：0.5)及三-第三丁基膦(149 mg，182 μl，736 μmol，Eq：0.5)與甲苯合併獲得黃色溶液。1-甲基哌嗪(442 mg，491 μl，4.41 mmol，Eq：3)及第三丁醇鈉(424 mg，4.41 mmol，Eq：3)。反應混合物加熱至80℃且攪拌1小時。將反應混合物倒入20 mL EtOAc中且以飽和NaCl(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，12 g，含2%至5% MeOH之DCM)純化粗物質獲得黃色油狀物6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1-(三異丙基矽烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(326 mg，60%)，其在靜置後凝固。
步驟3. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1-(三異丙基矽烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(320 mg，859 μmol，Eq：1.00)與DMF(11.8 ml)合併獲得無色溶液。反應混合物冷卻至-20℃且攪拌5分鐘。逐滴添加含異氰酸氯磺醯酯(365 mg，224 μl，2.58 mmol，Eq：3)之乙腈(11.8 ml)且在-20℃下攪拌所得經冷卻反應物且攪拌3小時。將反應混合物倒入25 mL EtOAc中且以飽和NaCl(3×20 mL)萃取。藉由急驟層析法(矽膠，12 g，含5%至10% MeOH之DCM) 純化粗物質獲得6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(113 mg，55%)。
步驟4. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(110 mg，456 μmol)、6-第三丁基-8-氟-2-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]噁硼-4-基)酞嗪-1(2H)-酮(177 mg，501 μmol，Eq：1.10)及乙酸銅(112 mg)與1,2-二氯乙烷(3.03 ml)合併獲得藍色懸浮液。添加吡啶(72.1 mg，73.7 μl，912 μmol，Eq：2)。反應混合物加熱至45℃且攪拌2天。將反應混合物倒入20 mL EtOAc中且以飽和NH4Cl(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含5%至10% MeOH之DCM)純化粗物質獲得呈灰白色固體形式之1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(43 mg，17%)。
步驟5. 在25 mL圓底燒瓶中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(43 mg，76.0 μmol)及[氫雙(二甲基亞膦酸酯基-kP)]鉑(II)(2.00 mg，4.66 μmol，Eq：0.0613)與乙醇(1.00 ml)及水(1.00 ml)合併獲得無色溶液。反應混合物加熱至45℃且攪拌1小時。真空濃縮粗反應混合物。混合物以乙腈及水稀釋且過濾。凍乾所得濾液獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1H-吡咯并 [2,3-b]吡啶-3-甲醯胺(35 mg，97%，[M+H]+ 584)。
實例44 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-嗎啉-4-基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺
步驟1. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-溴-1-(三異丙基矽烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(800 mg，2.26 mmol，Eq：1.00)、乙酸鈀(II)(254 mg，1.13 mmol，Eq：0.5)及三-第三丁基膦(229 mg，279 μl，1.13 mmol，Eq：0.5)與甲苯合併獲得黃色溶液。添加嗎啉(789 mg，789 μl，9.06 mmol，Eq：4)及第三丁醇鈉(653 mg，6.79 mmol，Eq：3)。反應混合物加熱至80℃且攪拌1小時。將反應混合物倒入20 mL飽和NaCl中且以EtOAc(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，80 g，含10%至15% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得呈淡褐色油狀物之4-(1-(三異丙基矽烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)嗎啉(703 mg， 86%)。
步驟2. 在25 mL圓底燒瓶中，將4-(1-(三異丙基矽烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)嗎啉(803 mg，2.23 mmol)與DMF(1.00 ml)合併獲得無色溶液。反應混合物冷卻至-20℃且攪拌5分鐘。逐滴添加含異氰酸氯磺醯酯(474 mg，291 μl，3.35 mmol，Eq：1.5)之乙腈(1 ml)且在-20℃下攪拌所得經冷卻反應物且攪拌3小時。將反應混合物倒入飽和NaCl(25 mL)中且以EtOAc(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮獲得390 mg油狀物。在25 mL圓底燒瓶中，將粗氰基化合物及TBAF(1.02 ml，1.02 mmol，Eq：1)與THF(2.00 ml)合併獲得白色懸浮液。攪拌反應混合物1小時。t=1 h之LC-MS顯示反應完成。將反應混合物倒入20 mL DCM中且以飽和NaHCO3(2×25 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，24 g，含50% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得呈白色固體形式之6-(N-嗎啉基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(180 mg，35%)。
步驟3. 在25 mL圓底燒瓶中，6-(N-嗎啉基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(65 mg，285 μmol，Eq：1.00)、6-第三丁基-8-氟-2-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]噁硼-4-基)酞嗪-1(2H)-酮(150 mg，427 μmol，Eq：1.5)及乙酸銅(69.8 mg)與1,2-二氯乙烷(3 ml)合併獲得藍色懸浮液。添加吡啶(45.1 mg，46.1 μl，570 μmol，Eq：2)。反應混合物加熱至45℃且攪拌2天。將反應混合物倒入20 mL飽和NH4Cl中且 以EtOAc(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含5%至10% MeOH之DCM，接著矽膠，12 g，含30%至45% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得呈無色油狀物之1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(N-嗎啉基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(157 mg，50%)，其在乾燥後起泡。
步驟4. 在25 mL圓底燒瓶中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(N-嗎啉基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(75 mg，136 μmol，Eq：1.00)及[氫雙(二甲基亞膦酸酯基-kP)]鉑(II)(2 mg，4.66 μmol，Eq：0.0343)與乙醇(1 ml)及水(1.00 ml)合併獲得無色溶液。將反應混合物加熱至45℃且攪拌1小時，接著真空濃縮。混合物以乙腈及水稀釋且過濾。凍乾所得濾液獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-嗎啉-4-基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺(70 mg，90%，[M+H]+ 571)。
實例45 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(6-乙氧基-吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺
步驟1. 在100 mL圓底燒瓶中，將1-乙醯基-6-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(250 mg，947 μmol，Eq：1.00)、三乙胺(575 mg，792 μl，5.68 mmol，Eq：6)及X-PHOS(181 mg，379 μmol，Eq：0.40)與二噁烷(25 ml)合併獲得無色溶液。添加[1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(173 mg，237 μmol，Eq：0.25)及2-乙氧基-5-吡啶酸(205 mg，1.23 mmol，Eq：1.3)且所得混合物在氮氣下脫氣5分鐘。反應混合物加熱至100℃且攪拌O/N小時。將反應混合物倒入50 mL H2O中，且以EtOAc(3×50 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含20%至30% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得6-(6-乙氧基吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(167 mg，67%)。
步驟2. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-(6-乙氧基吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(110 mg，416 μmol，Eq： 1.00)、6-第三丁基-8-氟-2-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]噁硼-4-基)酞嗪-1(2H)-酮(161 mg，458 μmol，Eq：1.10)及乙酸銅(102 mg)與1,2-二氯乙烷(3 ml)合併獲得藍色懸浮液。添加吡啶(65.8 mg，67.3 μl，832 μmol，Eq：2)。反應混合物加熱至45℃且攪拌2天。將反應混合物倒入20 mL飽和NH4Cl中且以EtOAc(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含5%至10% MeOH之DCM)，接著藉由SFC純化粗物質獲得1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(6-乙氧基吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(36 mg，15%)。
步驟3. 在25 mL圓底燒瓶中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(6-乙氧基吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(36 mg，61.2 μmol)及[氫雙(二甲基亞膦酸酯基-kP)]鉑(II)(263 μg，0.612 μmol，Eq：0.01)與乙醇(480 μl)及水(480 μl)合併獲得無色溶液。反應混合物加熱至45℃且攪拌1小時。真空濃縮粗反應混合物。混合物以乙腈及水稀釋且過濾。凍乾所得濾液獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(6-乙氧基-吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺(31 mg，84%，[M+H]+ 607)。
實例46 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(2-氟-苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺
步驟1. 在100 mL圓底燒瓶中，將1-乙醯基-6-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(250 mg，947 μmol，Eq：1.00)、三乙胺(575 mg，792 μl，5.68 mmol，Eq：6)及X-PHOS(181 mg，379 μmol，Eq：0.40)與二噁烷(25.0 ml)合併獲得無色溶液。添加[1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(173 mg，237 μmol，Eq：0.25)及2-氟苯基酸(265 mg，1.89 mmol)且所得混合物在氮氣下脫氣5分鐘。將反應混合物加熱至100℃且微波1小時。反應混合物倒入50 mL EtOAc中且以H2O洗滌。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含20%至30% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得6-(2-氟苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(220 mg，98%)。
步驟2. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-(2-氟苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(200 mg，843 μmol)、6-第三丁基-8-氟-2-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]噁硼-4-基)酞嗪-1(2H)-酮(297 mg，843 μmol，Eq：1.00)及乙酸銅(207 mg)與1,2- 二氯乙烷(10 ml)合併獲得藍色懸浮液。添加吡啶(133 mg，136 μl，1.69 mmol，Eq：2)。反應混合物加熱至45℃且攪拌2天。將反應混合物倒入20 mL飽和NH4Cl中且以EtOAc(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含50%至60% EtOAc之己烷)，接著藉由SFC純化粗物質獲得1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(2-氟苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(163 mg，13%)。
步驟3. 在25 mL圓底燒瓶中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(2-氟苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(65 mg，116 μmol)及[氫雙(二甲基亞膦酸酯基-kP)]鉑(II)(497 μg，1.16 μmol，Eq：0.01)與乙醇(853 μl)及水(853 μl)合併獲得無色溶液。反應混合物加熱至45℃且攪拌1小時。真空濃縮混合物，接著以乙腈及水稀釋且過濾。凍乾所得濾液獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(2-氟-苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺(61 mg，91%，[M+H]+ 580)。
實例47 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(2-氯-苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺
步驟1. 在100 mL圓底燒瓶中，將1-乙醯基-6-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(250 mg，947 μmol，Eq：1.00)、三乙胺(575 mg，792 μl，5.68 mmol，Eq：6)及X-PHOS(181 mg，379 μmol，Eq：0.40)與二噁烷(25.0 ml)合併獲得無色溶液。添加[1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(173 mg，237 μmol，Eq：0.25)及2-氯苯基酸(296 mg，1.89 mmol)且所得混合物在氮氣下脫氣5分鐘。將反應混合物加熱至100℃且攪拌隔夜。將反應混合物倒入50 mL H2O中，且以EtOAc(3×50 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含20%至30% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得6-(2-氯苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(142 mg，59%)。
步驟2. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-(2-氯苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(125 mg，493 μmol)、6-第三丁基-8-氟-2-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]噁硼-4-基)酞嗪-1(2H)-酮(174 mg，493 μmol，Eq：1.00)及乙酸銅(121 mg)與1,2- 二氯乙烷(6.25 ml)合併獲得藍色懸浮液。添加吡啶(78.0 mg，79.7 μl，985 μmol，Eq：2)。反應混合物加熱至45℃且攪拌2天。將反應混合物倒入飽和NH4Cl(20 mL)中且以EtOAc(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含5%至10% MeOH之DCM)，接著藉由SFC純化粗物質獲得1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(2-氯苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(4.5 mg，2%)。
步驟3. 在25 mL圓底燒瓶中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(2-氯苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(4 mg，6.92 μmol)及[氫雙(二甲基亞膦酸酯基-kP)]鉑(II)(29.7 μg，0.0692 μmol，Eq：0.01)與乙醇(853 μl)及水(853 μl)合併獲得無色溶液。將反應混合物加熱至45℃且攪拌1小時，接著真空濃縮。混合物以乙腈及水稀釋且過濾。凍乾所得濾液獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(2-氯-苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺(3.9 mg，95%，[M+H]+596)。
實例48 6-溴-1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺
步驟1. 在25 mL圓底燒瓶中，6-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(75.0 mg，338 μmol，Eq：1.19)、6-第三丁基-8-氟-2-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]噁硼-4-基)酞嗪-1(2H)-酮(100 mg，284 μmol，Eq：1.00)及乙酸銅(52.2 mg)與1,2-二氯乙烷(3.00 ml)合併獲得藍色懸浮液。添加吡啶(44.9 mg，45.9 μl，568 μmol，Eq：2)。反應混合物加熱至45℃且攪拌2天。將混合物倒入20 mL飽和NH4Cl中且以EtOAc(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含25%至45% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得6-溴-1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(16 mg，10.3%)。
步驟2. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-溴-1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(14 mg，25.6 μmol)及[氫雙(二甲基亞膦酸酯基-kP)]鉑(II)(110 μg，0.256 μmol，Eq：0.01)與乙醇(2.99 ml)及水(2.99 ml)合併獲得無色溶液。將反應混合物加熱至45℃且攪拌1小時。真空濃縮粗反應混合物。藉由HPLC純化獲得6-溴-1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺(11 mg，77%，[M+H]+ 565)。
實例49 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(1,2-二羥基-乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3- 甲醯胺
步驟1. 在25 mL圓底燒瓶中，將1-乙醯基-6-溴-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(372 mg，1.41 mmol，Eq：1.00)、2,6-二第三丁基-4-甲基苯酚(5 mg，22.7 μmol，Eq：0.0161)及三丁基(乙烯基)錫(536 mg，494 μl，1.69 mmol，Eq：1.20)與甲苯(8 ml)合併獲得淡黃色溶液。混合物以鼓泡通過其中之氮氣脫氣持續5分鐘且添加肆(三苯膦)鈀(0)(130 mg，113 μmol，Eq：0.08)。反應物以氮氣再次脫氣且將反應混合物加熱至80℃且攪拌隔夜。將混合物倒至15 mL飽和NaHCO3上且以EtOAc(3×25 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含10%至20% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得兩種產物：1-乙醯基-6-乙烯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(160 mg)及6-乙烯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(138 mg)。
步驟2. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-乙烯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(138 mg，816 μmol，Eq：1.00)、6-第三 丁基-8-氟-2-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]噁硼-4-基)酞嗪-1(2H)-酮(287 mg，816 μmol，Eq：1.00)及乙酸銅(200 mg)與1,2-二氯乙烷(3.58 ml)合併獲得藍色懸浮液。添加吡啶(129 mg，132 μl，1.63 mmol，Eq：2)。反應混合物加熱至45℃且攪拌2天。將反應混合物倒入20 mL飽和NH4Cl中且以飽和EtOAc(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含5%至10% MeOH之DCM)，接著藉由HPLC純化粗物質獲得1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-乙烯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(51 mg，13%)。
步驟3. 在10 mL梨形燒瓶中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-乙烯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(50 mg，101 μmol，Eq：1.00)、4-甲基嗎啉N-氧化物(17.8 mg，152 μmol，Eq：1.50)及四氧化鋨(41.2 mg，50.9 μl，4.05 μmol，Eq：0.04)與丙酮(2 ml)合併獲得無色溶液。將反應混合物攪拌2天。反應物以亞硫酸鈉淬滅，以乙酸乙酯萃取且蒸發。添加額外4-甲基嗎啉N-氧化物(17.8 mg，152 μmol，Eq：1.50)、四氧化鋨(41.2 mg，50.9 μl，4.05 μmol，Eq：0.04)及丙酮(3 ml)獲得褐色溶液，且繼續反應1天。反應物以亞硫酸鈉淬滅，以乙酸乙酯萃取且蒸發。使粗1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(1,2-二羥基乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(15 mg)進入下一步驟。
步驟4. 在25 mL圓底燒瓶中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟- 1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(1,2-二羥基乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(14 mg，26.5 μmol，Eq：1.00)及[氫雙(二甲基亞膦酸酯基-kP)]鉑(II)(373 μg，0.870 μmol，Eq：0.0328)與乙醇(200 μl)及水(200 μl)合併獲得無色溶液。反應混合物加熱至45℃且攪拌1小時。真空濃縮粗反應混合物。混合物以乙腈及水稀釋且過濾。凍乾所得濾液獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(1,2-二羥基-乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺(11.2 mg，77%，[M+H]+546)。
實例50 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(1,1-二側氧基-1λ*6*-硫代嗎啉-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺
步驟1. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-溴-1-(三異丙基矽烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(420 mg，1.19 mmol，Eq： 1.00)及硫代嗎啉1,1-二氧化物(482 mg，3.57 mmol)與甲苯(3 ml)合併獲得黃色溶液。添加雙(三-第三丁基膦)鈀(0)(60.7 mg，119 μmol)及第三丁醇鉀(400 mg，4.16 mmol，Eq：3.5)。反應混合物加熱至80℃且攪拌1小時。將反應混合物倒入20 mL飽和NaCl中且以EtOAc(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含20%至40% EtOAc之己烷)純化粗物質獲得呈黃色油狀物之6-(1,1-二側氧基-1λ*6*-硫代嗎啉-4-基)-1-三異丙基矽烷基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(327 mg，68%)，其在靜置後凝固為灰白色固體。
步驟2. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-(1,1-二側氧基-1λ*6*-硫代嗎啉-4-基)-1-三異丙基矽烷基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(322 mg，790 μmol，Eq：1.00)與DMF(11.9 ml)合併獲得無色溶液。反應混合物冷卻至-20℃且攪拌5分鐘。逐滴添加含異氰酸氯磺醯酯(335 mg，206 μl，2.37 mmol，Eq：3)之乙腈(11.9 ml)且在-20℃下攪拌所得經冷卻反應物且攪拌3小時。將反應混合物倒入25 mL EtOAc中且以飽和NaCl(3×20 mL)洗滌。蒸發後，藉由急驟層析法(矽膠，12 g，含5%至10% MeOH之DCM)純化粗物質獲得6-(1,1-二側氧基-1λ*6*-硫代嗎啉-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(122 mg，56%)。
步驟3. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-(1,1-二側氧基-1λ*6*-硫代嗎啉-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(122 mg，442 μmol)、6-第三丁基-8-氟-2-(1-羥基-1,3-二氫苯并 [c][1,2]噁硼-4-基)酞嗪-1(2H)-酮(155 mg，442 μmol，Eq：1.00)及乙酸銅(108 mg)與1,2-二氯乙烷(3.89 ml)合併獲得藍色懸浮液。添加吡啶(69.8 mg，71.4 μl，883 μmol，Eq：2)。反應混合物加熱至45℃且攪拌2天。將反應混合物倒入20 mL飽和NH4Cl中且以EtOAc(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含5%至10% MeOH之DCM)，接著藉由HPLC純化粗物質獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(1,1-二側氧基-1λ*6*-硫代嗎啉-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(22 mg，8%)。
步驟4. 在25 mL圓底燒瓶中，將1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(1,1-二側氧基-1λ*6*-硫代嗎啉-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(22 mg，36.6 μmol)及[氫雙(二甲基亞膦酸酯基-kP)]鉑(II)(1.1 mg，2.56 μmol，Eq：0.07)與乙醇(200 μl)及水(200 μl)合併獲得無色溶液。反應混合物加熱至45℃且攪拌1小時。真空濃縮粗反應混合物，接著以乙腈及水稀釋且過濾，且藉由HPLC純化獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(1,1-二側氧基-1λ*6*-硫代嗎啉-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺(15.5 mg，68%，[M+H]+ 619)。
實例51 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(2-二甲基胺基-乙基胺基)-1H-吡咯并[2,3-b] 吡啶-3-甲醯胺
步驟1. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-溴-1-(三異丙基矽烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(713 mg，2.02 mmol，Eq：1.00)、N,N-二甲基乙二胺(1.07 g，1.32 ml，12.1 mmol，Eq：6)及雙(三-第三丁基膦)鈀(0)(206 mg，404 μmol，Eq：0.2)與甲苯(2 ml)合併獲得黃色溶液。添加第三丁醇鈉(582 mg，6.05 mmol，Eq：3)。將反應混合物加熱至80℃且攪拌1小時，接著倒入20 mL飽和NaCl中且以EtOAc(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，12 g，含2%至5% MeOH之DCM)純化粗物質獲得呈黃色油狀物之N1,N1-二甲基-N2-(1-(三異丙基矽烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)乙烷-1,2-二胺(405 mg，56%)，其在靜置後凝固。
步驟2. 在25 mL圓底燒瓶中，將N1,N1-二甲基-N2-(1-(三異丙基矽烷基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-6-基)乙烷-1,2-二 胺(405 mg，1.12 mmol)與DMF(14.9 ml)合併獲得無色溶液。反應混合物冷卻至-20℃且攪拌5分鐘。逐滴添加含異氰酸氯磺醯酯(477 mg，293 μl，3.37 mmol，Eq：3)之乙腈(14.9 ml)且在-20℃下攪拌所得經冷卻反應物且攪拌3小時。將反應混合物倒入25 mL飽和NaCl中且以EtOAc(3×20 ml)萃取。蒸發後，藉由急驟層析法(矽膠，12 g，含5%至10% MeOH之DCM)純化粗物質獲得6-(2-(二甲基胺基)乙基胺基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(211 mg，82%)。
步驟3. 在25 mL圓底燒瓶中，將6-(2-(二甲基胺基)乙基胺基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(211 mg，920 μmol)、6-第三丁基-8-氟-2-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]噁硼-4-基)酞嗪-1(2H)-酮(324 mg，920 μmol，Eq：1.00)及乙酸銅(226 mg)與1,2-二氯乙烷(6.73 ml)合併獲得藍色懸浮液。添加吡啶(146 mg，149 μl，1.84 mmol，Eq：2)。反應混合物加熱至45℃且攪拌2天。將混合物倒入20 mL飽和NH4Cl中且以EtOAc(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。藉由急驟層析法(矽膠，40 g，含5%至10% MeOH之DCM)，接著藉由HPLC純化粗物質獲得1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(2-(二甲基胺基)乙基胺基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(18 mg，3.5%)。
步驟4. 在25 mL圓底燒瓶中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-(2-(二甲基胺基)乙基胺基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(19 mg， 34.3 μmol，Eq：1.00)及[氫雙(二甲基亞膦酸酯基-kP)]鉑(II)(1.47 mg，3.43 μmol，Eq：0.1)與乙醇(271 μl)及水(271 μl)合併獲得無色溶液。反應混合物加熱至45℃且攪拌1小時。真空濃縮粗反應混合物，接著以乙腈及水稀釋且過濾。凍乾所得濾液獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(2-二甲基胺基-乙基胺基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺(14.2 mg，71%，[M+H]+572)。
實例52
步驟1. 在10 mL梨形燒瓶中，將6-乙烯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(274 mg，1.62 mmol)、4-甲基嗎啉N-氧化物(17.8 mg，152 μmol，Eq：1.50)及四氧化鋨(3.29 g，4.07 ml，324 μmol，Eq：0.2)與丙酮(3 ml)合併獲得無色溶液。反應混合物保持於室溫下且攪拌2天。反應物以亞硫酸鈉淬滅，以乙酸乙酯萃取且蒸發。添加額外4-甲基嗎啉 N-氧化物(17.8 mg，152 μmol，Eq：1.50)及四氧化鋨(41.2 mg，50.9 μl，4.05 μmol，Eq：0.04)及丙酮(3 ml)獲得褐色溶液，且繼續反應1天。反應物以亞硫酸鈉淬滅，以乙酸乙酯萃取且蒸發。使粗6-甲醯基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈進入下一步驟。
步驟2及3. 遵照標準還原胺化條件後，將6-((二甲基胺基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(18 mg，89.9 μmol)、6-第三丁基-8-氟-2-(1-羥基-1,3-二氫苯并[c][1,2]噁硼-4-基)酞嗪-1(2H)-酮(38.0 mg，108 μmol，Eq：1.20)及乙酸銅(22.0 mg)與1,2-二氯乙烷(574 μl)合併獲得藍色懸浮液。添加吡啶(14.2 mg，14.5 μl，180 μmol，Eq：2)。反應混合物加熱至45℃且攪拌2天。將反應混合物倒入20 mL EtOAc中且以飽和NH4Cl(3×20 mL)萃取。有機層經MgSO4乾燥且真空濃縮。粗1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-((二甲基胺基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(8 mg)未經純化即進入下一步驟。
步驟4. 在25 mL圓底燒瓶中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-6-((二甲基胺基)甲基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲腈(8 mg，15.3 μmol，Eq：1.00)及[氫雙(二甲基亞膦酸酯基-kP)]鉑(II)(655 μg，1.53 μmol，Eq：0.1)與乙醇(1 mL)及水(1 mL)合併獲得無色溶液。反應混合物加熱至45℃且攪拌1小時。真空濃縮粗反應混合物。粗產物之LCMS顯示所要產物。反應混合物以乙腈及水稀釋且過濾，且通過HPLC純化，隨後 凍乾獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-二甲基胺基甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺(2.5 mg，30%，[M+H]+ 543)。
實例53 3-(4-乙醯基-苯基胺基)-1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲腈
步驟1. 向無水乙腈(10 mL)及無水四氫呋喃(30 mL)之溶液中添加5-胺基-1H-吡唑-4-甲腈(1.0 g，9.25 mmol)，繼之以添加三乙胺(1.08 mL，1.74 mmol)。所得懸浮液在室溫下攪拌5分鐘，接著冷卻至0℃。經裝備有氮氣入口之加料漏斗以使溫度不會升高超過5℃之速率逐滴添加(溴甲烷三基)三苯(1.89 g，5.84 mmol)於無水四氫呋喃(10 mL)中之溶液。加料漏斗接著以無水四氫呋喃(5 mL)沖洗且反應混 合物在0℃下攪拌10分鐘，接著升溫至室溫且攪拌2小時。真空移除揮發物且將殘餘物溶解於EtOAc(150 mL)中，且以水(100 mL)洗滌一次，以氯化鈉飽和水溶液洗滌一次，經Na2SO4乾燥，過濾且真空濃縮。使用二氯甲烷將粗產物施加至80 g矽膠柱，且管柱以10-30% EtOAc/己烷梯度溶離。合併含有產物之溶離份獲得呈灰白色半結晶固體形式之3-(三苯甲基-胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(1.3 g，41%)。
步驟2. 向經脫氣DMF(1.5 mL)中添加5-(三苯甲基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(1.36g，3.89 mmol)、2-溴-6-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)苯甲醛(1.0 g，2.6 mmol)、碘化銅(I)(494 mg，2.6 mmol)及碳酸鉀(717 mg，5.19 mmol)。藉由交替真空及氮氣淨化使反應物呈惰性5次，接著加熱至100℃(外部)持續8小時。第二天早晨之TLC顯示痕量起始物質。反應物以EtOAc(50 mL)稀釋且通過矽藻土墊。墊子以額外EtOAc(50 mL)沖洗且真空濃縮。粗物質結合於二氧化矽管柱且經40 g矽膠柱(以20-40% EtOAc/己烷，等強度固持5分鐘，接著經20分鐘40-100% EtOAc/己烷梯度溶離管柱)純化。合併含有產物之溶離份且濃縮獲得1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-甲醯基-苯基]-3-(三苯甲基-胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(632 mg，37%)。
步驟3. 在0℃下，向1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-甲醯基-苯基]-3-(三苯甲基-胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(632 mg，0.965 mmol)於二氯甲烷(20 mL)及甲醇(10 mL)中之溶液中添加硼氫化鈉(37 mg，0.965 mmol)。所得 混濁反應混合物在0℃下攪拌5分鐘，接著在室溫下攪拌10分鐘。藉由TLC判斷反應完成。真空移除揮發物且使粗產物結合於矽膠且經40 g矽膠柱(以20-50% EtOAc/己烷梯度溶離管柱)純化獲得1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(三苯甲基-胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(482 mg，76%)。
步驟4. 將1-(3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-3-(三苯甲基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(382 mg，0.582 mmol)溶解於Et2O(30 mL)中且冷卻至0℃。添加MeOH(2 mL)，繼之以添加HCl飽和醚溶液(2 mL，藉由使HCl氣體鼓泡進入100 mL乙醚而製備)。反應混合物在0℃下攪拌30分鐘，此後藉由TLC判斷反應完成。真空移除揮發物且將殘餘物分配於NaHCO3飽和水溶液(100 mL)與EtOAc(100 mL)之間且劇烈攪拌。分離水層且以EtOAc(50 mL)萃取。合併之有機層經Na2SO4乾燥，過濾且真空濃縮。油性殘餘物結合於矽膠，且經25g矽膠柱(以20-70% EtOAc/己烷梯度溶離管柱)純化粗產物獲得呈白色粉末狀固體形式之3-胺基-1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲腈(178 mg，74%)。
步驟5. 向5 mL微波反應小瓶中引入3-胺基-1-(3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(50 mg，0.121 mmol)、1-(4-溴苯基)乙酮(29 mg，0.145 mmol)、Pd2(dba)3(7.7 mg，0.008 mmol)、2-(二環己基膦基)-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三-異丙基-1,1'-聯苯 (Brett-Phos)(9.1 mg，0.017 mmol)、碳酸銫(59 mg，0.181 mmol)且懸浮於第三丁醇(1.5 mL)中。藉由交替真空及Ar淨化使反應容器呈惰性3次，接著在室溫下攪拌5分鐘獲得非均質混合物，其自微紫紅色向微紅橙色變色。反應物加熱至100℃(外部)，在加熱約2分鐘後反應混合物顏色變為橙色。1.5小時後，藉由TLC判斷反應完成。混合物以EtOAc稀釋，經矽藻土墊過濾且結合於矽膠。經矽膠(使用12 g矽膠柱，以30%-100% EtOAc/己烷梯度溶離管柱)純化粗產物獲得呈白色粉末形式之3-(4-乙醯基-苯基胺基)-1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲腈(40 mg，62%)。
步驟6. 遵照與實例22步驟4相同之程序。因此，3-(4-乙醯基-苯基胺基)-1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲腈(114 mg，0.214 mmol)獲得粗羧醯胺，其經矽膠(使用12 g RediSep矽膠柱，以30%-100%(20% MeOH/EtOAc)/己烷梯度溶離管柱)純化獲得呈灰白色粉末形式之3-(4-乙醯基-苯基胺基)-1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺(99 mg，84%，[M+H]+ 551)。
實例54 1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺
步驟1. 向5 mL微波反應小瓶中引入3-胺基-1-(3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(25 mg，0.060 mmol)、2-溴吡啶(11mg，0.072 mmol)、Pd2(dba)3(3.9 mg，0.004 mmol)、2-(環己基膦基)-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三-異丙基-1,1'-聯苯(Brett-Phos)(4.5 mg，0.008 mmol)、碳酸銫(29.5 mg，0.091 mmol)且懸浮於第三丁醇(0.609 mL)中。藉由交替真空及Ar淨化使反應容器呈惰性3次，接著在室溫下攪拌5分鐘獲得非均質混合物，其自微紫紅色向微紅橙色變色。反應物加熱至100℃(外部)，在加熱約2分鐘後反應混合物顏色變為橙色。2小時後，藉由TLC判斷反應完成。混合物以EtOAc稀釋，經矽藻土墊過濾且結合於矽膠。經矽膠(使用12 g RediSep矽膠柱，以30%-100% EtOAc/己烷梯度溶離管柱)純化粗產物獲得呈白色粉末形式之1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(15 mg，51%)。
步驟2. 遵照與實例22步驟4相同之程序。因此，1-[3- (6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(15 mg，0.0305 mmol)獲得粗羧醯胺，其經矽膠(使用12 g RediSep矽膠柱，以30%-100%(20% MeOH/EtOAc)/己烷梯度溶離管柱)純化獲得呈灰白色粉末形式之1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺(10 mg，67%，[M+H]+ 510)，其含有5-10%吡啶水解醯胺副產物。
實例55 1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-二甲基胺基甲基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺
步驟1. 向5 mL微波反應小瓶中引入3-胺基-1-(3-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-2-(羥基甲基)苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(25 mg，0.06 mmol)、1-(6-氯吡啶-3-基)-N,N-二甲基甲胺(13mg，0.075 mmol)、Pd2(dba)3(4 mg，0.004 mmol)、2-(二環己基膦基)-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三-異丙基-1,1'-聯苯(Brett-Phos)(4.5 mg，0.008 mmol)、碳酸銫(30 mg，0.091 mmol)且懸浮於第三丁醇(0.609 mL)中。藉由交替真空及Ar淨化使反應容器呈惰性3次，接著在室溫下攪拌5分鐘獲得非均質混合物，其自微紫紅色向微紅橙色變色。反應物加熱至100℃(外部)，在加熱約2分鐘後反應混合物顏色變為橙色。4小時後，藉由TLC判斷反應完成。混合物以EtOAc稀釋，經矽藻土墊過濾且結合於矽膠。經矽膠(使用12 g RediSep矽膠柱，以30%-100% EtOAc/己烷梯度至30-100% EtOAc/己烷梯度溶離管柱)純化粗產物獲得呈白色粉末形式之1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-二甲基胺基甲基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(18 mg，54%)。
步驟2. 遵照與實例22步驟4相同之程序。因此，1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-二甲基胺基甲基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲腈(18 mg，0.0328 mmol)獲得粗羧醯胺，其經矽膠(使用12 g RediSep矽膠柱，以30%-100%(20% MeOH/EtOAc)/己烷梯度溶離管柱)純化獲得呈灰白色粉末形式之1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-二甲基胺基甲基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺(10 mg，54%，[M+H]+ 567)。
實例56 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]- 1H-吡唑-4-甲醯胺
步驟1. 以與實例21之實例中步驟2類似之方式，將1-(3-溴-2-甲醯基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(100 mg，362 μmol，上文實例41中獲得)轉換為1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(88 mg，63%)。
步驟2. 在25 mL圓底燒瓶中，將1-(3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(87 mg，225 μmol，Eq：1.00)及氫(二甲基三價膦酸-kP)(4.82 mg，11.2 μmol，Eq：0.05)與乙醇(1 ml)及水(1.00 ml)合併獲得無色溶液。反應混合物加熱至85℃且攪拌45分鐘。在所要反應時間(藉由LCMS及TLC檢驗轉化)後，使反應物達到室溫且真空移除溶劑。混合物接著經HPLC鐵氟龍過濾器過濾且通過逆相HPLC，且凍乾隔夜獲得1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺(49 mg，54%，[M+H]+ 406)。
生物實例 布魯頓氏酪氨酸激酶(Btk)抑制分析法
該分析法為經由過濾捕捉放射性33P磷酸化產物。Btk、生物素標記SH2肽受質(Src同源物)與ATP之相互作用使得肽受質磷酸化。生物素標記產物為經結合抗生蛋白鏈菌素瓊脂糖凝膠珠粒。藉由閃爍計數器偵測所有經結合之放射 性標記產物。
所分析之培養板為96孔聚丙烯(Greiner)及96孔1.2 μm親水PVDF過濾板(Millipore)。此處所報導之濃度為最終分析濃度：DMSO中之10至100 μM化合物(Burdick and Jackson)、5至10 nM Btk酶(His標記，全長)、30 μM肽受質(生物素-Aca-AAAEEIYGEI-NH2)、100 μM ATP(Sigma)、8 mM咪唑(Sigma，pH 7.2)、8 mM甘油-2-磷酸酯(Sigma)、200 μM EGTA(Roche Diagnostics)、1 mM MnCl2(Sigma)、20 mM MgCl2(Sigma)、0.1 mg/ml BSA(Sigma)、2 mM DTT(Sigma)、1 μCi 33P ATP(Amersham)、20%抗生蛋白鏈菌素瓊脂糖凝膠珠粒(Amersham)、50 mM EDTA(Gibco)、2 M NaCl(Gibco)、2 M NaCl+1%磷酸(Gibco)、microscint-20(Perkin Elmer)。
利用由標準96孔培養板分析模板產生的資料，自每種化合物10個資料點計算IC50測定值。對各板測試一種對照化合物及7種未知抑制劑，且各板進行兩次。通常，化合物以100 μM起始及3 nM結束之半對數稀釋。對照化合物為星孢菌素(staurosporine)。在無肽受質存在下對背景進行計數。在肽受質存在下測定總活性。使用以下方案測定Btk抑制。
1)樣本製備：測試化合物以半對數增量在分析緩衝液(咪唑、甘油-2-磷酸酯、EGTA、MnCl2、MgCl2、BSA)中稀釋。
2)珠粒製備
a.)藉由在500 g下離心來沖洗珠粒
b.)以PBS及EDTA復原珠粒產生20%珠粒漿液
3)在不與受質混合(分析緩衝液、DTT、ATP、33P ATP)及與受質混合(分析緩衝液、DTT、ATP、33P ATP、肽受質)的情形中在30℃下預培育反應物15分鐘。
4)在室溫下預培育10 μL含Btk之酶緩衝液(咪唑、甘油-2-磷酸酯、BSA)及10 μL測試化合物持續10分鐘以開始分析。
5)將30 μL反應混合物不與受質一起或與受質一起添加至Btk及化合物中。
6)在30℃下培育50 μL總分析混合物30分鐘。
7)將40 μL分析物轉移至過濾板中之150 μL珠粒漿液中以停止反應。
8)在30分鐘後，使用以下步驟洗滌過濾板
a. 3×250 μL NaCl
b.含有1%磷酸之3×250 μL NaCl
c. 1×250 μL H2O
9)使培養板在65℃下乾燥1小時或在室溫下乾燥隔夜
10)添加50 μL microscint-20且在閃爍計數器上計數33P cpm。
自以cpm為單位之原始資料計算活性百分比活性百分比=(樣品-bkg)/(總活性-bkg)×100
使用一位點劑量反應S形模型由活性百分比計算IC50 y=A+((B-A)/(1+((x/C)D)))
x=化合物濃度，y=活性%，A=min，B=max，C=IC50，D=1(希爾斜率(hill slope))
藉由CD69表現量測之全血中B細胞活化的抑制
測試Btk抑制劑抑制B細胞受體介導之B細胞於人類血液中活化之能力的程序如下：自健康志願者獲得人類全血(HWB)，存在以下限制條件：24小時未服用藥物，非吸菸者。藉由靜脈穿刺將血液收集至以肝素鈉抗凝血之Vacutainer試管中。測試化合物在PBS(20×)中稀釋至10倍所要起始藥物濃度，繼之以在含10% DMSO之PBS中按3倍連續稀釋，產生9點劑量反應曲線。5.5 μl各化合物稀釋液一式兩份添加至2 ml 96孔V型底培養板(Analytical Sales and Services,#59623-23)中；向用於對照且無刺激物之孔中添加5.5 μl含10% DMSO之PBS。向各孔中添加HWB(100 μl)，且在混合後，培養板在37℃、5% CO2、100%濕度下培育30分鐘。在混合下向各孔(無刺激物之孔除外)中添加山羊F(ab')2抗人類IgM(Southern Biotech,#2022-14)(10 μl 500 μg/ml溶液，50 μg/ml最終濃度)，且再培育培養板20小時。
在20小時培育結束時，將樣品與螢光(florescent)探針標記之抗體(15 μl PE小鼠抗人類CD20，BD Pharmingen，#555623，及/或20 μl APC小鼠抗人類CD69，BD Pharmingen #555533)一起在37℃、5% CO2、100%濕度下培育30分鐘。包括用於補償調整及初始電壓設定的經誘導對照者、未染色者及單次染色者。樣品接著以1 ml 1×Pharmingen溶解緩衝液(BD Pharmingen # 555899)溶解，且培養板在1800 rpm下離心5分鐘。經抽吸移除上清液且剩餘集結粒以另一份1 ml 1×Pharmingen溶解緩衝液再次溶解，且培養板如上文所述加以離心。吸出上清液且剩餘集結粒在FAC緩衝液(PBS+1% FBS)中洗滌。在最終旋轉後，移除上清液且將集結粒再懸浮於180 μl FAC緩衝液中。將樣品轉移至適於在BD LSR II流式細胞儀上之HTS 96孔系統上操作的96孔培養板。
使用適合於所用螢光團之激發及發射波長，獲得資料且使用Cell Quest軟體獲得陽性細胞值百分比。最初藉由FACS分析軟體(Flow Jo)分析結果。測試化合物之IC50係定義為在由抗IgM刺激後使CD69陽性細胞(亦為CD20陽性)之百分比降低50%時的濃度(自8個孔之平均值減去無刺激物之背景後的8個對照孔之平均值)。使用XLfit軟體第3版，等式201計算IC50值。
此分析法之代表性化合物資料列於下表II中。
抑制B細胞活化-Ramos細胞中之B細胞FLIPR分析法
藉由測定測試化合物對抗IgM刺激之B細胞反應之影響來證明本發明化合物對B細胞活化之抑制。
B細胞FLIPR分析法為測定由抗IgM抗體刺激引起的胞內鈣增加之潛在抑制劑作用的基於細胞之功能法。在生長培養基(下文所述)中培養Ramos細胞(人類伯基特氏淋巴瘤細胞株(Burkitt's lymphoma cell line).ATCC第CRL-1596號)。分析之前一天，將Ramos細胞再懸浮於新鮮生長培養基(與上文所述相同)中且在組織培養燒瓶中設為每毫升0.5×106個之濃度。在分析當天，計數細胞且在組織培養燒瓶中在補充有1 μM FLUO-3AM(TefLabs目錄號0116，配製於無水DMSO及10%普朗尼克酸(Pluronic acid)中)之生長培養基中設為每毫升1×106個之濃度，且在27℃(4% CO2)下培育1小時。為了移除胞外染料，藉由離心(5 min，1000 rpm)收集 細胞，以每毫升1×106個細胞再懸浮於FLIPR緩衝液(下文所述)中，接著以每孔1×105個細胞分散於96孔聚D-離胺酸塗覆之黑色/透明板(BD目錄號356692)中。以100 μM至0.03 μM範圍內的多個濃度(7個濃度，下文詳述)添加測試化合物，且與細胞一起在室溫下培育30分鐘。藉由添加10 μg/mL抗IgM(Southern Biotech，目錄號2020-01)刺激Ramos細胞Ca2+信號傳導，且在FLIPR(Molecular Devices，使用具有氬氣雷射器之CCD相機在480nM激發下捕捉96孔培養板之影像)上量測。
培養質/緩衝液：
生長培養基：具有L-麩醯胺酸(Invitrogen，目錄號61870-010)、10%胎牛血清(FBS,Summit Biotechnology目錄號FP-100-05)、1 mM丙酮酸鈉(Invitrogen目錄號11360-070)之RPMI 1640培養基。
FLIPR緩衝液：HBSS(Invitrogen，目錄號141175-079)、2 mM CaCl2(Sigma目錄號C-4901)、HEPES(Invitrogen，目錄號15630-080)、2.5 mM丙磺舒(Probenecid)(Sigma，目錄號P-8761)、0.1% BSA(Sigma，目錄號A-7906)、11 mM葡萄糖(Sigma，目錄號G-7528)化合物稀釋詳情：為了獲得100 μM之最高最終分析濃度，向576 μL FLIPR緩衝液中直接添加24 μL 10 mM化合物儲備溶液(在DMSO中製備)。將測試化合物稀釋於FLIPR緩衝液中(使用Biomek 2000機械人吸移管)，產生以下稀釋方案：媒劑、 1.00×10-4 M、1.00×10-5、3.16×10-6、1.00×10-6、3.16×10-7、1.00×10-7、3.16×10-8。
分析法及分析：
使用最大-最小統計量(max-min statistic)報導鈣之胞內增加(使用Molecular Devices FLIPR控制及統計輸出軟體自由添加刺激抗體產生之峰值減去靜止基線)。使用非線性曲線擬合(GraphPad Prism軟體)測定IC50。
小鼠膠原蛋白誘導之關節炎(mCIA)
在第0天，對小鼠在尾巴基部或背部若干點注射第II型膠原蛋白於完全傳氏佐劑(Complete Freund's adjuvant，CFA)中之乳液(皮內注射(i.d.))。在膠原蛋白免疫後，動物將在約21至35天顯現關節炎。在第21天，藉由全身投與含膠原蛋白之不完全傳氏佐劑(Incomplete Freund's adjuvant，IFA；i.d.)來同步化(增強)關節炎之發作。在第20天後，每天檢驗動物的輕度關節炎(得分為1或2；參看下文之得分說明)之任何發作，此為增強之信號。增強後，對小鼠進行評分且投與候選治療劑持續規定時間(通常2-3週)，且給藥頻率為每天(QD)或每天兩次(BID)給藥。
大鼠膠原蛋白誘導之關節炎(rCIA)
在第0天，對大鼠在背部若干位置皮內注射(i.d.)牛第II型膠原蛋白於不完全傳氏佐劑(IFA)中之乳液。在約第7天在尾巴基部或背部之替代部位增強注射膠原蛋白乳液(i.d.)。一般在初始膠原蛋白注射後12-14天觀測到關節炎。自第14天起往後，可如下文所述(關節炎評估)評估動 物之關節炎發展情況。動物以在二次攻擊時開始之預防方式被投與候選治療劑且持續規定時間(通常2-3週)，且給藥頻率為每日(QD)或每日兩次(BID)給藥。
關節炎評估：
在兩種模型中，使用評分系統定量腳爪及肢體關節之發炎發展狀況，該評分系統涉及遵照下文所述之準則評定4隻腳爪：
評分：1=腳爪或一個腳趾腫脹及/或發紅。
2=兩個或兩個以上關節腫脹。
3=腳爪中涉及兩個以上關節整體腫脹。
4=整個腳爪及腳趾嚴重關節炎。
在第0天進行基線量測評估，且在第一次病徵或腫脹時再次開始，每週持續多達3次直至實驗結束。藉由加上個別腳爪之4個得分而獲得各小鼠之關節炎指數，每隻動物最大得分為16。
大鼠活體內哮喘模型
Brown-Norway雄性大鼠以含100 μg OA(卵白蛋白)之0.2 ml明礬腹膜內敏化，每週一次，持續3週(第0天、第7天及第14天)。在第21天(最後一次敏化後一週)，大鼠每日一次在OA氣霧劑攻擊(1% OA持續45分鐘)之前0.5小時經皮下投與媒劑或化合物調配物且在攻擊後4小時或24小時結束。在處死時，自所有動物收集血清及血漿，分別用於血清學及PK。插入氣管套管且肺以PBS灌洗3次。分析BAL流體之總白血球數及白血球分類計數。藉由Coulter計數器 測定細胞等分試樣(20-100 μl)之總白血球數。對於白血球分類計數，在Cytospin中離心50-200 μl樣品且以Diff-Quik染色載玻片。利用光學顯微鏡法使用標準形態準則計數單核細胞、嗜伊紅血球、嗜中性白血球及淋巴細胞之比例且以百分比表示。代表性Btk抑制劑顯示OA敏化及攻擊之大鼠的BAL中之總白血球計數相較於對照程度降低。
為了清楚及理解之目的，藉助於說明及實例已相當詳細地描述了前述發明內容。熟習此項技術者將顯而易見可在隨附申請專利範圍之範疇內進行改變及修正。因此，應瞭解，上述說明書意欲為說明性而非限制性的。因此，本發明之範疇不應根據上述說明書來確定，而是應根據下文隨附申請專利範圍連同該等申請專利範圍授權之等效形式的全部範疇來確定。
出於所有目的，本申請案中引用之所有專利、專利申請案及公開案據此以全文引用的方式併入，該引用的程度就如同各個別專利、專利申請案或公開案如此個別地被表述一般。

Claims (13)

  1. 一種式I化合物， 其中：為單鍵或雙鍵；A為5員雜芳基或5,6-員雙環雜芳基，其中該CONH2連接於該5員雜芳基，各視情況經一或多個A'取代；A'為-NHR或R4；R為H、-R1、-R1-R2-R3、-R1-R3或-R2-R3；R1為芳基、雜芳基、環烷基、雜環烷基，或與雜環烷基稠合之雜芳基，各視情況經一或多個R1'或R1"取代；各R1'獨立地為鹵基、硝基、氰基、低碳烷基磺醯胺基、-S(O)2或側氧基(oxo)；各R1"獨立地為低碳烷基、環烷基、雜環烷基、低碳烷氧基、胺基或醯胺基，各視情況經一或多個R1'''取代；各R1'''獨立地為羥基、鹵基、胺基、烷基胺基、二烷基胺基或雜環烷基； R2為-C(=O)、-C(=O)O、-C(=O)NR2'、-NHC(=O)O、-C(R2')2、-O、-C(=NH)NR2'或-S(=O)2；各R2'獨立地為H或低碳烷基；R3為H或R4；R4為低碳烷基、低碳鹵烷基、低碳烷氧基、胺基、低碳烷基胺基、低碳二烷基胺基、芳基、芳基烷基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基、雜芳基烷基、環烷基、烷基環烷基、環烷基烷基、雜環烷基、烷基雜環烷基、雜環烷基烷基、雙環環烷基、雙環雜環烷基、螺環烷基或螺雜環烷基，各視情況經一或多個低碳烷基、鹵基、低碳烷基胺基、低碳二烷基胺基、羥基、羥基低碳烷基、低碳烷氧基、鹵基、硝基、胺基、醯胺基、醯基、氰基、側氧基、胍基、羥基胺基、羧基、胺甲醯基、胺基甲酸酯基(carbamate)、鹵基低碳烷氧基或鹵基低碳烷基取代，其中兩個低碳烷基可一起形成一環；Q為CH或N；X為CH、N或N(X')；X'為低碳烷基；Y0為H、鹵素或低碳烷基；Y1為Y1a、Y1b、Y1c或Y1d；Y1a為H或鹵素；Y1b為低碳烷基，視情況經一或多個選自由以下組成之群的取代基取代：低碳鹵烷基、鹵素、羥基、胺基、氰 基及低碳烷氧基；Y1c為低碳環烷基，視情況經一或多個選自由以下組成之群的取代基取代：低碳烷基、低碳鹵烷基、鹵素、羥基、胺基、氰基及低碳烷氧基；Y1d為胺基，視情況經一或多個低碳烷基、烷氧基低碳烷基或羥基低碳烷基取代；Y2為H、鹵素或低碳烷基；Y3為H、鹵素、低碳烷基、低碳鹵烷基、低碳烷氧基或低碳羥基烷基；及Y4為H、低碳烷基或低碳羥基烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。
  2. 如請求項1之化合物，其中Y0為H，Y2為H，Y3為F或H，且Y4為羥基甲基。
  3. 如請求項1或2之化合物，其中Q為CH，X為N，且為雙鍵。
  4. 如請求項3之化合物，其中A為呋喃基、咪唑基、噻唑基、吡咯基、吡唑基、苯基、吲哚基、吡咯并[2,3-b]吡啶基或噁唑基。
  5. 如請求項4之化合物，其中Y1為第三丁基或環丙基。
  6. 如請求項5之化合物，其中Y3為F。
  7. 如請求項6之化合物，其中A為呋喃基、咪唑基、噻唑基、吡咯基、吡唑基、苯基、吲哚基、吡咯并[2,3-b]吡啶基或噁唑基；視情況經一或多個A'取代。
  8. 如請求項1或2之化合物，其選自由以下組成之群： 4-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-咪唑-2-甲醯胺；2-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-噻唑-4-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯-2-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；5-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；2-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-4-甲基-噁唑-5-甲醯胺；2-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-噻唑-4-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-咪唑-2-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；5-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-呋喃-2-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-呋喃-2-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-8-羥基甲基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺； 4-[3-(6-環丙基-8-氟-1-側氧基-1H-異喹啉-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；4-[3-(6-第三丁基-3-甲基-1-側氧基-3,4-二氫-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；4-[2-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-3-羥基甲基-吡啶-4-基]-1-甲基-1H-吡咯-2-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吲哚-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吲哚-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-3-[4-(嗎啉-4-羰基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-[4-(1-羥基-1-甲基-乙基)-苯基胺基]-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基 甲基-苯基]-3-(5-氯-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；3-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-甲基-4,5,6,7-四氫-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(4-甲烷磺醯基-苯基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(1-甲基-1H-吡唑-3-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(吡嗪-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氟-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-三氟甲基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲 醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-甲基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氟-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(吡嗪-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-甲基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-甲烷磺醯基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-氰基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺；7-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基 甲基-苯基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-嗎啉-4-基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(6-乙氧基-吡啶-3-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(2-氟-苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(2-氯-苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；6-溴-1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(1,2-二羥基-乙基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(1,1-二側氧基-1λ6-硫代嗎啉-4-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺； 1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-(2-二甲基胺基-乙基胺基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-6-二甲基胺基甲基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-甲醯胺；3-(4-乙醯基-苯基胺基)-1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；1-[3-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-2-羥基甲基-苯基]-3-(5-二甲基胺基甲基-吡啶-2-基胺基)-1H-吡唑-4-甲醯胺；及1-[3-(6-第三丁基-8-氟-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯基]-1H-吡唑-4-甲醯胺。
  9. 一種如請求項1至8中任一項之化合物的用途，其用於製造用以治療類風濕性關節炎或哮喘之藥物。
  10. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至8中任一項之化合物與至少一種醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑混合。
  11. 一種如請求項1至8中任一項之化合物的用途，其用作治療活性物質。
  12. 一種如請求項1至8中任一項之化合物的用途，其用於製造用以治療發炎及/或自體免疫病狀之藥物。
  13. 如請求項1或2之化合物，其用於治療發炎及/或自體免疫病狀。
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