CN109071498B

CN109071498B - 激酶抑制剂及其制备方法和用途

Info

Publication number: CN109071498B
Application number: CN201880001642.XA
Authority: CN
Inventors: 刘钢; 于华; 唐建川; 杜静; 王坤建; 刘金明; 蔡家强; 曾宏; 宋宏梅; 王利春; 王晶翼
Original assignee: Sichuan Kelun Biotech Biopharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Sichuan Kelun Biotech Biopharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2017-02-16
Filing date: 2018-01-26
Publication date: 2021-03-30
Anticipated expiration: 2038-01-26
Also published as: WO2018149284A1; CN109071498A

Abstract

本发明涉及凋亡信号调节激酶1(ASK1)抑制剂、包含其的药物组合物、其制备方法和中间体及其用于预防或治疗ASK1介导的疾病的用途。

Description

激酶抑制剂及其制备方法和用途

发明领域

发明背景

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号级联将不同的细胞外和细胞内队列(queue)与适当的细胞应激反应结合起来，所述细胞应激反应包括细胞生长、分化、炎症以及细胞凋亡(Kumar，S.，Boehm，J.和Lee.，J.C.(2003)Nat.Rev.Drug Dis.2：717-726；Pimienta，G.和Pascual，J.(2007)Cell Cycle，6：2826-2632)。MAPK以MAP3K、MAP2K以及MAPK的形式存在，其依次活化。MAPK3直接对环境信号作出响应，并磷酸化MAP2K，继而磷酸化特定的MAPK。MAPK随后通过使包括调节基因表达的转录因子的细胞基质磷酸化来介导适当的细胞响应。

凋亡信号调节激酶1(ASK1)是活化c-Jun N端蛋白激酶(“JNK”)和p38MAP激酶的丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶(“MAP3K”)家族成员(Ichijo，H.，Nishida，E.，Irie，K.，Dijke，P.T.，Saitoh，M.，Moriguchi，T.，Matsumoto，K.，Miyazono，K.和Gotoh，Y.(1997)Science，275，90-94)。ASK1的活化可通过包括氧化应激、反应性氧物质(ROS)、LPS、TNF-α、FasL、ER应激以及提高的细胞内钙浓度的多种刺激来实现(Hattori，K.，Naguro，I.，Runchel，C.和Ichijo，H.(2009)Cell Comm.Signal.7：1-10；Takeda，K.，Noguchi，T.，Naguro，I.和Ichijo，H.(2007)Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.48：1-8.27)。响应于这些刺激信号，ASK1经由Thr838处的自身磷酸化而活化并且继而使MAP2K(如MKK3/6和MKK4/7)磷酸化，其随后分别使p38和JNK MAPK磷酸化和活化。

ASK1蛋白的磷酸化可导致细胞凋亡或其它细胞响应。据报道，ASK1活化和信号传导在包括慢性脂肪性和纤维性变性引起的病症和疾病(例如非酒精性脂肪肝病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH))，神经变性疾病、心血管疾病、糖尿病(包括糖尿病肾病以及糖尿病的其他并发症)、炎性疾病、自身免疫性疾病、呼吸道疾病(包括慢性阻塞性肺病(COPD)、特发性肺纤维化(IPF)和急性肺损伤)以及代谢障碍的多种疾病中发挥重要作用。另外，ASK1牵涉在心脏、大脑以及肾脏的局部缺血和再灌注后的器官损伤(Watanabe等人，(2005)BBRC 333，562-567；Zhang等人，(2003)Life Sci74-37-43；Terada等人，(2007)BBRC364：1043-49)。因此，ASK1抑制剂可补救或改善患有此类疾病的患者的生活。

发明概述

本发明提供用作ASK1抑制剂的化合物，其具有对ASK1的良好抑制活性、良好的物理化学性质(例如溶解度、物理和/或化学稳定性)、良好的药物代谢动力学性质(例如良好的生物利用度、合适的血药浓度、半衰期和作用持续时间)、良好的安全性(较低的毒性和/或较少的副作用，较宽的治疗窗)等优异的性质。

本发明的一个方面提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中所述化合物具有式(I)的结构：

其中：

表示单键或双键，条件是Y和Z各自至多与一个双键连接；

R¹选自氢、C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-10环烷基、3-10元杂环基、C_6-10芳基、5-14元杂芳基和C_6-12芳烷基，其中所述烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基和芳烷基各自任选地被一个或多个独立地选自下列的取代基取代：卤素、氧代、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、3-10元杂环基、苯基、苯氧基、氰基、硝基、-OR⁶、-C(＝O)R⁶、-OC(＝O)R⁶、-C(＝O)OR⁶、-N(R⁶)C(＝O)OR⁷、-N(R⁶)C(＝O)R⁷、-N(R⁶)(R⁷)、-N(R⁶)C(＝O)N(R⁶)(R⁷)、-C(＝O)N(R⁶)(R⁷)、-S(＝O)_mR⁶和-S(＝O)_mN(R⁶)(R⁷)，其中所述烷基、环烷基、杂环基、苯基和苯氧基各自任选地进一步被一个或多个选自卤素、羟基、C_1-6烷基、C_3-10环烷基和-O-C_1-6烷基的取代基取代；

R²选自氢、卤素、氰基、C_1-6烷基和-O-C_1-6烷基，其中所述烷基任选地被一个或多个卤素取代；

R³选自任选地与另一C_3-10环烷基、3-10元杂环基、C_6-10芳基或5-14元杂芳基稠合的3-10元杂环基、C_6-10芳基和5-14元杂芳基，其中所述环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自任选地被一个或多个独立地选自下列的取代基取代：C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、-O-C_1-6烷基、C_3-8环烷基、C_6-10芳基、C_6-12芳烷基、5-14元杂芳基、3-10元杂环基、卤素、氧代、氰基、-OR⁶、-OC(＝O)R⁶、-OC(＝O)N(R⁶)(R⁷)、-N(R⁶)(R⁷)、-S(＝O)_mR⁶、-S(＝O)_mOR⁶、-S(＝O)_mN(R⁶)(R⁷)、-N(R⁶)C(＝O)R⁷、-N(R⁶)C(＝O)OR⁷、-N(R⁶)C(＝O)N(R⁶)(R⁷)、-C(＝O)R⁶、-C(＝O)OR⁶、-C(＝O)N(R⁶)(R⁷)和-N(R⁶)S(＝O)_mR⁷；其中所述烷基、环烷基、芳基、芳烷基、杂芳基和杂环基各自任选地进一步被一个或多个独立地选自下列的取代基取代：卤素、羟基、氧代、氰基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、C_6-10芳基、5-14元杂芳基、3-10元杂环基和-OR⁶；

Q选自C、C(R⁴)和N；

W¹、W²、W³、W⁴、W⁵、W⁶和W⁷各自独立地选自C(R⁴)和N；

当W⁵和W⁶均为C(R⁴)时，两个R⁴连同其所连接的碳原子任选地共同形成任选地被C_1-6烷基、羟基或卤素取代的5元或6元环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；

X、Y和Z各自独立地选自直接键、C(R⁴)、C(R⁴)(R⁵)、N、N(R⁴)和O；

R⁴和R⁵各自独立地选自氢、氧代、卤素、硝基、氰基、C_1-6烷基、-O-C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-10环烷基、C_6-10芳基、C_6-12芳烷基、5-14元杂芳基、3-10元杂环基、-OR⁶、-OC(＝O)R⁶、-OC(＝O)N(R⁶)(R⁷)、-N(R⁶)(R⁷)、-S(＝O)_mR⁶、-S(＝O)_mOR⁶、-S(＝O)_mN(R⁶)(R⁷)、-N(R⁶)C(＝O)R⁷、-N(R⁶)C(＝O)OR⁷、-N(R⁶)C(＝O)N(R⁶)(R⁷)、-C(＝O)R⁶、-C(＝O)OR⁶、-C(＝O)N(R⁶)(R⁷)和-N(R⁶)S(＝O)_mR⁷；其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、芳烷基、杂芳基和杂环基各自任选地进一步被一个或多个独立地选自下列的取代基取代：卤素、羟基、氧代、氰基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、-O-C_1-6烷基、-O-卤代C_1-6烷基、C_3-6环烷基、C_6-10芳基、5-14元杂芳基、3-10元杂环基、-N(R⁶)(R⁷)、-C(＝O)R⁶、-C(＝O)OR⁶、-C(＝O)N(R⁶)(R⁷)和-OR⁶；

R⁶和R⁷各自独立地选自氢、C_1-6烷基和C_3-8环烷基；或者当R⁶和R⁷与同一氮原子连接时，R⁶和R⁷连同其所连接的氮原子任选地共同形成3-10元杂环基；并且

m为0、1或2。

本发明的另一方面提供药物组合物，其包含预防或治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药以及一种或多种药学上可接受的载体，所述药物组合物优选为固体制剂、半固体制剂、液体制剂或气态制剂。

本发明的另一方面提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物在制备用作ASK1抑制剂的药物中的用途。

本发明的另一方面提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物，其用作ASK1抑制剂。

本发明的另一方面提供预防或治疗ASK1介导的疾病的方法，所述方法包括向需要其的个体给药有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物。

本发明的另一方面提供本发明的化合物的制备方法以及所述方法中使用的中间体。

发明详细描述

定义

除非在下文中另有定义，本文中所用的所有技术术语和科学术语的含义意图与本领域技术人员通常所理解的相同。提及本文中使用的技术意图指在本领域中通常所理解的技术，包括那些对本领域技术人员显而易见的技术的变化或等效技术的替换。虽然相信以下术语对于本领域技术人员很好理解，但仍然阐述以下定义以更好地解释本发明。

如本文中所使用，术语“包括”、“包含”、“具有”、“含有”或“涉及”及其在本文中的其它变体形式为包含性的(inclusive)或开放式的，且不排除其它未列举的元素或方法步骤。

如本文中所使用，术语“烷基”定义为线性或支化饱和脂肪族烃。在一些实施方案中，烷基具有1至12个，例如1至6个碳原子。例如，如本文中所使用，术语“C_1-6烷基”指1至6个碳原子的线性或支化的基团(例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基或正己基)，其任选地被1或多个(诸如1至3个)适合的取代基如卤素取代(此时该基团被称作“卤代烷基”)(例如CH₂F、CHF₂、CF₃、CCl₃、C₂F₅、C₂Cl₅、CH₂CF₃、CH₂Cl或-CH₂CH₂CF₃等)。术语“C_1-4烷基”指1至4个碳原子的线性或支化的脂肪族烃链(即甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基)。

如本文中所使用，术语“烯基”意指线性的或支化的单价烃基，其包含一个或多个双键，且具有2-6个碳原子(“C_2-6烯基”)。所述烯基为例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、2-甲基-2-丙烯基和4-甲基-3-戊烯基。当本发明的化合物含有烯基时，所述化合物可以纯E(异侧(entgegen))形式、纯Z(同侧(zusammen))形式或其任意混合物形式存在。

如本文中所使用，术语“炔基”表示包含一个或多个三键的单价烃基，其优选具有2、3、4、5或6个碳原子，例如乙炔基或丙炔基。

如本文中所使用，术语“环烷基”指饱和的单环或多环(诸如双环)烃环(例如单环，诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基，或双环，包括螺环、稠合或桥连系统(诸如双环[1.1.1]戊基、双环[2.2.1]庚基、双环[3.2.1]辛基或双环[5.2.0]壬基、十氢化萘基等)，其任选地被1或多个(诸如1至3个)适合的取代基取代。所述环烷基具有3至15个碳原子。例如，术语“C_3-6环烷基”指3至6个成环碳原子的饱和的单环或多环(诸如双环)烃环(例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基)，其任选地被1或多个(诸如1至3个)适合的取代基取代，例如甲基取代的环丙基。

如本文中所使用，术语“杂环基”指饱和或部分不饱和的一价单环或双环基团，其在环中具有2、3、4、5、6、7、8或9个碳原子和一个或多个(例如一个、两个、三个或四个)选自C(＝O)、O、S、S(＝O)、S(＝O)₂和NR^a的含杂原子的基团，其中R^a表示氢原子或C_1-6烷基或卤代-C_1-6烷基；所述杂环基可以通过所述碳原子中的任一个或氮原子(如果存在的话)与分子的其余部分连接。特别地，3-10元杂环基为在环中具有3-10个碳原子及杂原子的基团，例如但不限于环氧乙烷基、氮丙啶基、氮杂环丁烷基(azetidinyl)、氧杂环丁烷基(oxetanyl)、四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基(dioxolinyl)、吡咯烷基、吡咯烷酮基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡咯啉基、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基(dithianyl)、硫吗啉基、哌嗪基或三噻烷基(trithianyl)。

如本文中所使用，术语“芳基”指具有共轭π电子系统的全碳单环或稠合环多环芳族基团。例如，如本文中所使用，术语“C_6-14芳基”意指含有6至14个碳原子的芳族基团，诸如苯基或萘基。芳基任选地被1或多个(诸如1至3个)适合的取代基(例如卤素、-OH、-CN、-NO₂、C_1-6烷基等)取代。

如本文中所使用，术语“芳烷基”优选表示芳基取代的烷基，其中所述芳基和所述烷基如本文中所定义。通常，所述芳基可具有6-14个碳原子，并且所述烷基可具有1-6个碳原子。示例性芳烷基包括但不限于苄基、苯基乙基、苯基丙基、苯基丁基。

如本文中所使用，术语“杂芳基”指一价单环、双环或三环芳族环系，其具有5、6、8、9、10、11、12、13或14个环原子，特别是1或2或3或4或5或6或9或10个碳原子，且其包含至少一个可以相同或不同的杂原子(所述杂原子是例如氧、氮或硫)，并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。特别地，杂芳基选自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基等，以及它们的苯并衍生物；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它们的苯并衍生物。

如本文中所使用，术语“卤代”或“卤素”基团定义为包括F、Cl、Br或I。

如本文中所使用，术语“取代”指所指定的原子上的一个或多个(例如一个、两个、三个或四个)氢被从所指出的基团的选择代替，条件是未超过所指定的原子在当前情况下的正常原子价并且所述取代形成稳定的化合物。取代基和/或变量的组合仅仅当这种组合形成稳定的化合物时才是允许的。

如果取代基被描述为“任选地被取代”，则取代基可(1)未被取代或(2)被取代。如果取代基的碳被描述为任选地被取代基列表中的一个或多个取代，则碳上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可单独和/或一起被独立地选择的任选的取代基替代。如果取代基的氮被描述为任选地被取代基列表中的一个或多个取代，则氮上的一个或多个氢(至存在的任何氢的程度)可各自被独立地选择的任选的取代基替代。

如果取代基被描述为“独立地选自”一组，则各取代基独立于另一者被选择。因此，各取代基可与另一(其他)取代基相同或不同。

如本文中所使用，术语“一个或多个”意指在合理条件下的1个或超过1个，例如2个、3个、4个、5个或10个。

除非另外指明，否则如本文中所使用，取代基的连接点可来自取代基的任意适宜位置。

当取代基的键显示为穿过环中连接两个原子的键时，则这样的取代基可键连至该可取代的环中的任一成环原子。

本发明还包括所有药学上可接受的同位素标记的化合物，其与本发明的化合物相同，除了一个或多个原子被具有相同原子序数但原子质量或质量数不同于在自然界中占优势的原子质量或质量数的原子替代。适合包含入本发明的化合物中的同位素的实例包括(但不限于)氢的同位素(例如氘(²H)、氚(³H))；碳的同位素(例如¹¹C、¹³C及¹⁴C)；氯的同位素(例如³⁶Cl)；氟的同位素(例如¹⁸F)；碘的同位素(例如¹²³I及¹²⁵I)；氮的同位素(例如¹³N及¹⁵N)；氧的同位素(例如¹⁵O、¹⁷O及¹⁸O)；磷的同位素(例如³²P)；及硫的同位素(例如³⁵S)。某些同位素标记的本发明的化合物(例如掺入放射性同位素的那些)可用于药物和/或底物组织分布研究(例如分析)中。放射性同位素氚(即³H)及碳-14(即¹⁴C)因易于掺入且容易检测而特别可用于该目的。用正电子发射同位素(例如¹¹C、¹⁸F、¹⁵O及¹³N)进行取代可在正电子发射断层显像术(PET)研究中用于检验底物受体占据情况。被同位素标记的本发明的化合物可通过与描述于随附路线和/或实施例及制备中的那些类似的方法通过使用适当的被同位素标记的试剂代替之前采用的非标记的试剂来制备。本发明的药学上可接受的溶剂合物包括其中结晶溶剂可被同位素取代的那些，例如，D₂O、丙酮-d₆或DMSO-d₆。

术语“立体异构体”表示由于至少一个不对称中心形成的异构体。在具有一个或多个(例如一个、两个、三个或四个)不对称中心的化合物中，其可产生外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单独的非对映异构体。特定个别分子也可以几何异构体(顺式/反式)存在。类似地，本发明的化合物可以两种或更多种处于快速平衡的结构不同的形式的混合物(通常称作互变异构体)存在。互变异构体的代表性实例包括酮-烯醇互变异构体、苯酚-酮互变异构体、亚硝基-肟互变异构体、亚胺-烯胺互变异构体等。要理解，本申请的范围涵盖所有这样的以任意比例(例如60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％)的异构体或其混合物。

本文中可使用实线

实楔形

或虚楔形

描绘本发明的化合物的碳-碳键。使用实线以描绘键连至不对称碳原子的键欲表明，包括该碳原子处的所有可能的立体异构体(例如，特定的对映异构体、外消旋混合物等)。使用实或虚楔形以描绘键连至不对称碳原子的键欲表明，存在所示的立体异构体。当存在于外消旋混合物中时，使用实及虚楔形以定义相对立体化学，而非绝对立体化学。除非另外指明，否则本发明的化合物意欲可以立体异构体(其包括顺式及反式异构体、光学异构体(例如R及S对映异构体)、非对映异构体、几何异构体、旋转异构体、构象异构体、阻转异构体及其混合物)的形式存在。本发明的化合物可表现一种以上类型的异构现象，且由其混合物(例如外消旋混合物及非对映异构体对)组成。

本发明涵盖本发明的化合物的所有可能的结晶形式或多晶型物，其可为单一多晶型物或多于一种多晶型物的任意比例的混合物。

还应当理解，本发明的某些化合物可以游离形式存在用于治疗，或适当时，以其药学上可接受的衍生物形式存在。在本发明中，药学上可接受的衍生物包括但不限于，药学上可接受的盐、酯、溶剂合物、N-氧化物、代谢物或前药，在将它们向需要其的患者给药后，能够直接或间接提供本发明的化合物或其代谢物或残余物。因此，当在本文中提及“本发明的化合物”时，也意在涵盖化合物的上述各种衍生物形式。

本发明的化合物的药学上可接受的盐包括其酸加成盐及碱加成盐。

适合的酸加成盐由形成药学可接受盐的酸来形成。实例包括天冬氨酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、乳清酸盐、棕榈酸盐及其它类似的盐。

适合的碱加成盐由形成药学可接受盐的碱来形成。实例包括铝盐、精氨酸盐、胆碱盐、镁盐及其它类似的盐。

适合的盐的综述参见Stahl及Wermuth的“Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use”(Wiley-VCH，2002)。用于制备本发明的化合物的药学上可接受的盐的方法为本领域技术人员已知的。

如本文中所使用，术语“酯”意指衍生自本申请中各个通式化合物的酯，其包括生理上可水解的酯(可在生理条件下水解以释放游离酸或醇形式的本发明的化合物)。本发明的化合物本身也可以是酯。

本发明的化合物可以溶剂合物(优选水合物)的形式存在，其中本发明的化合物包含作为所述化合物晶格的结构要素的极性溶剂，特别是例如水、甲醇或乙醇。极性溶剂特别是水的量可以化学计量比或非化学计量比存在。

本领域技术人员会理解，由于氮需要可用的孤对电子来氧化成氧化物，因此并非所有的含氮杂环都能够形成N-氧化物；本领域技术人员会识别能够形成N-氧化物的含氮杂环。本领域技术人员还会认识到叔胺能够形成N-氧化物。用于制备杂环和叔胺的N-氧化物的合成方法是本领域技术人员熟知的，包括用过氧酸如过氧乙酸和间氯过氧苯甲酸(MCPBA)、过氧化氢、烷基过氧化氢如叔丁基过氧化氢、过硼酸钠和双环氧乙烷(dioxirane)如二甲基双环氧乙烷来氧化杂环和叔胺。这些用于制备N-氧化物的方法已在文献中得到广泛描述和综述，参见例如：T.L.Gilchrist，Comprehensive Organic Synthesis，vol.7，pp748-750；A.R.Katritzky和A.J.Boulton，Eds.，Academic Press；以及G.W.H.Cheeseman和E.S.G.Werstiuk，Advances in Heterocyclic Chemistry，vol.22，pp 390-392，A.R.Katritzky和A.J.Boulton，Eds.，Academic Press。

在本发明的范围内还包括本发明的化合物的代谢物，即在给药本发明的化合物时体内形成的物质。这样的产物可由例如被给药的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、酶解等产生。因此，本发明包括本发明的化合物的代谢物，包括通过使本发明的化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的时间的方法制得的化合物。

本发明在其范围内进一步包括本发明的化合物的前药，其为自身可具有较小药理学活性或无药理学活性的本发明的化合物的某些衍生物当被给药至身体中或其上时可通过例如水解裂解转化成具有期望活性的本发明的化合物。通常这样的前药会是所述化合物的官能团衍生物，其易于在体内转化成期望的治疗活性化合物。关于前药的使用的其他信息可参见“Pro-drugs as Novel Delivery Systems”，第14卷，ACS Symposium Series(T.Higuchi及V.Stella)。本发明的前药可例如通过用本领域技术人员已知作为“前-部分(pro-moiety)(例如“Design of Prodrugs”，H.Bundgaard(Elsevier，1985)中所述)”的某些部分替代本发明的化合物中存在的适当官能团来制备。

本发明还涵盖含有保护基的本发明的化合物。在制备本发明的化合物的任何过程中，保护在任何有关分子上的敏感基团或反应基团可能是必需的和/或期望的，由此形成本发明的化合物的化学保护的形式。这可以通过常规的保护基实现，例如，在T.W.Greene&P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley&Sons，1991中所述的那些保护基，这些参考文献通过援引加入本文。使用本领域已知的方法，在适当的后续阶段可以移除保护基。

术语“约”是指在所述数值的±10％范围内，优选±5％范围内，更优选±2％范围内。

化合物及其制备方法

在一个实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中所述化合物具有式(I)的结构：

其中：

表示单键或双键，条件是Y和Z各自至多与一个双键连接；

Q选自C、C(R⁴)和N；

W¹、W²、W³、W⁴、W⁵、W⁶和W⁷各自独立地选自C(R⁴)和N；

m为0、1或2。

在另一实施方案中，当Q为C时，其与一个双键连接；当Q为C(R⁴)或N时，其不与双键连接。

在另一实施方案中，当X、Y或Z为C(R⁴)或N时，其与一个双键连接；当X、Y或Z为C(R⁴)(R⁵)、N(R⁴)或O时，其不与双键连接。

在另一的实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中所述化合物具有式(II)的结构：

在另一实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中所述化合物具有式(III)、式(IV)、式(V)、式(VI)、式(VII)、式(VIII)或式(IX)的结构：

在优选的实施方案中，所述式(IV)的化合物为式(IV)-1的化合物或式(IV)-2的化合物：

在优选的实施方案中，所述式(V)的化合物为式(V)-1的化合物或式(V)-2的化合物：

在优选的实施方案中，所述式(VIII)的化合物为式(VIII)-1的化合物或式(VIII)-2的化合物：

在优选的实施方案中，所述式(IX)的化合物为式(IX)-1的化合物或式(IX)-2的化合物：

在另一实施方案中，本发明提供任意上述通式的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中R¹选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、环丙基和吡咯烷基，所述基团任选地被1个、2个或3个独立地选自下列的取代基取代：F、Cl、Br、I、-OH、-CF₃、-OCH₃和-C(＝O)CH₃。在优选的实施方案中，R¹选自异丙基、环丙基、

在另一实施方案中，本发明提供任意上述通式的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中R³选自以下基团：

上述基团通过任意的环原子与分子的其余部分连接；并且

上述基团任选地被1个、2个或3个独立地选自下列的取代基取代：F、Cl、Br、I、-OH、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、环丙基和-CF₃。

在优选的实施方案中，R³选自

在优选的实施方案中，R³选自

在另一实施方案中，本发明提供任意上述通式的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中R⁴选自H、F、Cl、Br、I、CN、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、环丙基、

在优选实施方案中，R⁴选自F、Cl、Br、I、CN、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基和环丙基。

在另一实施方案中，本发明提供任意上述通式的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中W¹、W²、W³、W⁴、W⁵、W⁶和W⁷各自独立地选自CH、C-F、C-CH₃、N、

在优选的实施方案中，W¹、W²、W³、W⁴、W⁵、W⁶和W⁷各自独立地选自C-F、C-CH₃和N。

在另一实施方案中，本发明提供任意上述通式的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中W¹、W²选自N；W³、W⁴、W⁵和W⁷选自CH；且W⁶选自CH、

本发明涵盖对各个实施方案进行任意组合所得的化合物。

在另一实施方案中，本发明提供化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药，其中所述化合物选自：

在另一实施方案中，本发明提供式(IN-8)的化合物：

其中：

Hal¹为卤素，例如F、Cl、Br或I；并且

其余各基团如上述所定义；

所述式(IN-8)的化合物优选为：

在另一实施方案中，本发明提供制备式(IN-8)的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中：

Hal¹、Hal²和Hal³为相同或不同的卤素，例如F、Cl、Br或I；

其余各基团如上述所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：将IN-1通过卤化反应得到IN-2，卤化试剂例如Cl₂、Br₂、I₂或N-溴代丁二酰亚胺(NBS)，反应优选在非质子性溶剂(例如四氯化碳)中进行；

第二步：使IN-3与DMF-DMA反应得到IN-4，所述反应优选在加热下进行；

第三步：使IN-4与R¹-NH₂进行环化反应，得到IN-5，所述反应优选在酸(例如乙酸)存在下，于非质子性溶剂(例如乙腈)中进行；

第四步：IN-5首先进行重氮化反应(优选在酸(优选无机酸，如氢溴酸)存在下，与亚硝酸盐(如亚硝酸钠)反应)，随后进行卤化反应(卤化试剂例如Cl₂、Br₂或I₂)，得到IN-6；

第五步：IN-6与肼反应得到IN-7，所述反应优选在质子性溶剂(例如乙醇)中进行；以及

第六步：IN-7与IN-2反应得到IN-8，所述反应优选在加热条件下进行。

在另一实施方案中，本发明提供制备式(IV)-1的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中：

Hal¹、Hal²和Hal³为相同或不同的卤素，例如F、Cl、Br或I；

PG为羟基保护基，其包括但不限于苄基、三苯基甲基、四氢吡喃基、甲酰基、乙酰基、苯甲酰基和甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基等)；

LG选自H和卤素；

R^a和R^a’在每次出现时各自独立地选自H和C_1-6烷基；或者R^a和R^a’连同其所连接的基团共同构成5-10元环系(例如共同构成

)；

其余各基团如上述所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：将式(IV)-1-a的化合物中的羟基用合适的羟基保护基(例如苄基)在相应的条件(例如在有机碱或无机碱(例如碳酸钾)的存在下，于极性溶剂(例如DMF)中)中进行保护，得到式(IV)-1-b的化合物；

第二步：将式(IV)-1-b与R³-LG在金属或金属盐(例如铜盐催化剂，如CuO、Cu₂O或CuI)的催化下，于有机碱或无机碱(例如碳酸钾)的存在下，任选地在金属配体(例如8-羟基喹啉)的存在下反应，得到式(IV)-1-c的化合物；

第三步：将式(IV)-1-c的化合物在可将PG基团脱除的条件(例如当PG为苄基时，所述条件为在钯/碳催化下于氢气气氛中进行氢化)下进行脱除，得到式(IV)-1-d的化合物；

第四步：将式(IV)-1-d的化合物与甲酰胺(例如DMF)反应(所述反应优选在非质子性溶剂(例如甲苯)中，于加热(例如在90-150℃)下进行)，得到式(IV)-1-e的化合物；

第五步：将式(IV)-1-e的化合物在有机碱(例如吡啶)或无机碱，以及卤素(例如Br₂或I₂)的存在下进行反应，得到式(IV)-1-f的化合物；

第六步：将式(IV)-1-f的化合物与硼酸或硼酸酯(例如联硼酸频那醇酯)在钯催化剂(例如Pd(dppf)Cl₂)的催化下，优选在有机碱或无机碱(例如醋酸钾)的存在下反应，得到式(IV)-1-g的化合物；以及

第七步：将式(IV)-1-g的化合物与化合物Int-3-E在钯催化剂(例如Pd(dppf)Cl₂)的催化下，优选在有机碱或无机碱(例如碳酸钾)的存在下反应，得到式(IV)-1的化合物。

在另一实施方案中，本发明提供制备式(V)-1的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中：

Hal¹为卤素，例如F、Cl、Br或I；

R’选自-OH、-O-C_1-6烷基和卤素；

LG选自H和卤素；

R^a和R^a’在每次出现时各自独立地选自H和C_1-6烷基；

其余各基团如上述所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：任选地，首先将式(V)-1-a的化合物在例如三氯化磷、五氯化磷、三氯氧磷、SOCl₂或草酰氯等的酰卤化试剂的存在下形成酰卤化合物(例如酰氯化合物或酰溴化合物)，然后将其与Int-3-D在有机碱(例如吡啶)或无机碱的存在下反应，得到式(V)-1-b的化合物；

第二步：将式(V)-1-b的化合物与甲酰胺(例如DMF)反应(所述反应优选在非质子性溶剂(例如甲苯)中，于加热(例如在90-150℃)下进行)，得到式(V)-1-c的化合物；

第三步：将式(V)-1-c的化合物在非质子性溶剂(例如甲苯)中，于加热(例如在90-150℃)下反应，得到式(V)-1-d的化合物；以及

第四步：将式(V)-1-d与R³-LG在金属或金属盐(例如铜盐催化剂，如CuO、Cu₂O或CuI)的催化下，于有机碱或无机碱(例如碳酸钾)的存在下，任选地在金属配体(例如8-羟基喹啉)的存在下反应，得到式(V)-1的化合物。

在另一实施方案中，本发明提供制备式(V)-2的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中各基团如上述所定义；并且所述反应在氢化条件(例如在钯/碳催化下于氢气气氛中进行氢化)下进行。

在另一实施方案中，本发明提供制备式(VIII)-2的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中：

Hal¹和Hal³为相同或不同的卤素，例如F、Cl、Br或I；

LG选自H和卤素；

其余各基团如上述所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：将式(VIII)-2-a与R³-LG在金属或金属盐(例如铜盐催化剂，如CuO、Cu₂O或CuI)的催化下，于有机碱或无机碱(例如碳酸钾)的存在下，任选地在金属配体(例如8-羟基喹啉)的存在下反应，得到式(VIII)-2-b的化合物；

第二步：将式(VIII)-2-b的化合物与叠氮盐(例如叠氮化钠)在强酸(例如强无机酸，如浓硫酸)的存在下反应，得到式(VIII)-2-c的化合物；以及

第三步：将式(VIII)-2-c的化合物与化合物Int-3-E在钯催化剂(例如Pd(dppf)Cl₂或Pd₂(dba)₃)的催化下，优选在有机碱或无机碱(例如碳酸钾或碳酸铯)的存在下，任选地在配体(例如Xantphos)的存在下反应，得到式(VIII)-2的化合物。

在另一实施方案中，本发明提供制备式(VII)的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中：

Hal¹为卤素，例如F、Cl、Br或I；

R’选自-OH、-O-C_1-6烷基和卤素；

LG选自H和卤素；

其余各基团如上述所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：任选地，首先将式(VII)-a的化合物在例如三氯化磷、五氯化磷、三氯氧磷、SOCl₂或草酰氯等的酰卤化试剂的存在下形成酰卤化合物(例如酰氯化合物或酰溴化合物)，然后将其与Int-3-D在有机碱(例如吡啶)或无机碱的存在下反应，得到式(VII)-b的化合物；

第二步：将式(VII)-b的化合物在强酸(例如强无机酸，如浓盐酸)存在下，与亚硝酸盐(例如亚硝酸钠)反应，得到(VII)-c的化合物；以及

第三步：将式(VII)-c与R³-LG在金属或金属盐(例如铜盐催化剂，如CuO、Cu₂O或CuI)的催化下，于有机碱或无机碱(例如碳酸钾)的存在下，任选地在金属配体(例如8-羟基喹啉)的存在下反应，得到式(VII)的化合物。

在另一实施方案中，本发明提供制备式(VI)的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中：

Hal¹和Hal²为相同或不同的卤素，例如F、Cl、Br或I；

LG选自H和卤素；

R^a和R^a’在每次出现时各自独立地选自H和C_1-6烷基；

其余各基团如上述所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：将式(VI)-a的化合物与例如三氯化磷、五氯化磷、三氯氧磷、SOCl₂或草酰氯等的酰卤化试剂，在甲酰胺(例如DMF)的存在下反应，得到式(VI)-b的化合物；

第二步：将式(VI)-b的化合物与Int-3-D在有机碱(例如吡啶)或无机碱的存在下反应，得到式(VI)-c的化合物；以及

第三步：将式(VI)-c的化合物与R³-LG在金属或金属盐(例如铜盐催化剂，如CuO、Cu₂O或CuI)的催化下，于有机碱或无机碱(例如碳酸钾)的存在下，任选地在金属配体(例如8-羟基喹啉)的存在下反应，得到式(VI)的化合物。

在另一实施方案中，本发明提供制备式(IX)-1的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中：

Hal¹和Hal³为相同或不同的卤素，例如F、Cl、Br或I；

LG选自H和卤素；并且

其余各基团如上述所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：将式(IX)-1-a与R³-LG在金属或金属盐(例如铜盐催化剂，如CuO、Cu₂O或CuI)的催化下，于有机碱或无机碱(例如碳酸钾或碳酸铯)的存在下，任选地在金属配体(例如8-羟基喹啉)的存在下反应，得到式(IX)-1-b的化合物；

第二步：将式(IX)-1-b的化合物与化合物Int-3-E在钯催化剂(例如Pd(dppf)Cl₂或Pd₂(dba)₃)的催化下，优选在有机碱或无机碱(例如碳酸钾、碳酸铯或叔丁醇钠)的存在下，任选地在配体(例如Xantphos)的存在下反应，得到式(IX)-1-c的化合物；以及

第三步：将式(IX)-1-c的化合物与甲酸酯(例如甲酸甲酯)或者DMF-DMA，任选地在有机碱或无机碱(例如碳酸钾或氢化钠)的存在下反应，得到式(IX)-1的化合物。

药物组合物和治疗方法

在另种实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含预防或治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药以及一种或多种药学上可接受的载体，所述药物组合物优选为固体制剂、半固体制剂、液体制剂或气态制剂。在另种实施方案中，所述药物组合物还可包含一种或多种其它治疗剂。

在另种实施方案中，本发明提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物在制备用作ASK1抑制剂的药物中的用途。

在另种实施方案中，本发明提供本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物，其用作ASK1抑制剂。

在另种实施方案中，本发明提供预防或治疗ASK1介导的疾病的方法，所述方法包括向需要其的个体给药有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、立体异构体、多晶型物、溶剂合物、N-氧化物、同位素标记的化合物、代谢物或前药或者本发明的药物组合物。

在另种实施方案中，本发明的化合物用于预防或治疗ASK1介导的疾病，其包括慢性脂肪性和纤维性变性引起的病症和疾病(例如非酒精性脂肪肝病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、原发性硬化性胆管炎、肝外胆汁郁积性病症；肝纤维化；肝的梗阻性或慢性炎性紊乱；肝硬化；与酒精引发的肝硬化或与病毒传染性形式的肝炎相关的胆汁郁积性病变和纤维化病变)；自身免疫性疾病；呼吸道疾病(包括慢性阻塞性肺病(COPD)、特发性肺纤维化(IPF)和急性肺损伤)；炎性疾病；慢性肾病；心血管疾病；糖尿病(包括糖尿病肾病和糖尿病的其他并发症)；代谢障碍；心脏、大脑以及肾脏的局部缺血和再灌注后的器官损伤以及神经变性疾病。

本发明中“药学上可接受的载体”是指与治疗剂一同给药的稀释剂、辅剂、赋形剂或媒介物，并且其在合理的医学判断的范围内适于接触人类和/或其它动物的组织而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或与合理的益处/风险比相应的其它问题或并发症。

在本发明的药物组合物中可使用的药学上可接受的载体包括但不限于无菌液体，例如水和油，包括那些石油、动物、植物或合成来源的油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当所述药物组合物通过静脉内给药时，水是示例性载体。还可以使用生理盐水和葡萄糖及甘油水溶液作为液体载体，特别是用于注射液。适合的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽糖、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙二醇、水、乙醇等。所述组合物还可以视需要包含少量的湿润剂、乳化剂或pH缓冲剂。口服制剂可以包含标准载体，如药物级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。适合的药学上可接受的载体的实例如在Remington’s PharmaceuticalSciences(1990)中所述。

本发明的药物组合物可以系统地作用和/或局部地作用。为此目的，它们可以适合的途径给药，例如通过注射(如静脉内、动脉内、皮下、腹膜内、肌内注射，包括滴注)或经皮给药；或通过口服、含服、经鼻、透粘膜、局部、以眼用制剂的形式或通过吸入给药。

对于这些给药途径，可以适合的剂型给药本发明的药物组合物。

所述剂型包括但不限于片剂、胶囊剂、锭剂、硬糖剂、散剂、喷雾剂、乳膏剂、软膏剂、栓剂、凝胶剂、糊剂、洗剂、软膏剂、水性混悬剂、可注射溶液剂、酏剂、糖浆剂。

如本文中所使用的术语“有效量”指被给药后会在一定程度上缓解所治疗病症的一或多种症状的化合物的量。

可调整给药方案以提供最佳所需响应。例如，可给药单次推注，可随时间给药数个分剂量，或可如治疗情况的急需所表明而按比例减少或增加剂量。要注意，剂量值可随要减轻的病况的类型及严重性而变化，且可包括单次或多次剂量。要进一步理解，对于任何特定个体，具体的给药方案应根据个体需要及给药组合物或监督组合物的给药的人员的专业判断来随时间调整。

所给药的本发明的化合物的量会取决于所治疗的个体、病症或病况的严重性、给药的速率、化合物的处置及处方医师的判断。一般而言，有效剂量在每日每kg体重约0.0001至约50mg，例如约0.01至约10mg/kg/日(单次或分次给药)。对70kg的人而言，这会合计为约0.007mg/日至约3500mg/日，例如约0.7mg/日至约700mg/日。在一些情况下，不高于前述范围的下限的剂量水平可以是足够的，而在其它情况下，仍可在不引起任何有害副作用的情况下采用较大剂量，条件是首先将所述较大剂量分成数个较小剂量以在一整天中给药。

本发明的化合物在药物组合物中的含量或用量可以是约0.01mg至约1000mg，适合地是0.1-500mg，优选0.5-300mg，更优选1-150mg，特别优选1-50mg，例如1.5mg、2mg、4mg、10mg、25mg等。

除非另外说明，否则如本文中所使用，术语“治疗(treating)”意指逆转、减轻、抑制这样的术语所应用的病症或病况或者这样的病症或病况的一或多种症状的进展，或预防这样的病症或病况或者这样的病症或病况的一或多种症状。

如本文所使用的“个体”包括人或非人动物。示例性人个体包括患有疾病(例如本文所述的疾病)的人个体(称为患者)或正常个体。本发明中“非人动物”包括所有脊椎动物，例如非哺乳动物(例如鸟类、两栖动物、爬行动物)和哺乳动物，例如非人灵长类、家畜和/或驯化动物(例如绵羊、犬、猫、奶牛、猪等)。

在另种实施方案中，本发明的药物组合物还可以包含一种或多种另外的治疗剂或预防剂，其包括但不限于PPAR α/δ激动剂(GFT505)、2型和5型趋化因子受体拮抗剂(cenicriviroc[CVC])、脂肪酸-胆汁酸缀合物(aramchol)、FXR激动剂(奥贝胆酸、GS-9674、LJN-452、EDP-305)。

实施例

以下结合实施例进一步描述本发明，但提供这些实施例并非意在限制本发明的范围。

化合物的结构通过核磁共振波谱(¹HNMR)或质谱(MS)进行确证。

化学位移(δ)以百万分之一(ppm)为单位给出。¹HNMR的测定在JEOL Eclipse 400核磁仪上进行，测试溶剂为氘代甲醇(CD₃OD)、氘代氯仿(CDCl₃)或六氘代二甲基亚砜(DMSO-d₆)，内标为四甲基硅烷(TMS)。

MS的测定在Agilent(ESI)质谱仪(生产商：Agilent，型号：Agilent 6120B)上进行。

制备高效液相色谱法使用岛津LC-8A制备液相色谱仪(YMC，ODS，250×20mm色谱柱)进行。

薄层色谱法(TLC)使用Merck产的铝板(20×20cm)进行，薄层制备色谱法采用规格为烟台产GF254(0.4～0.5nm)硅胶板进行。

采用薄层色谱法(TLC)或LC-MS检测反应，使用的展开剂体系包括二氯甲烷和甲醇体系、正己烷和乙酸乙酯体系以及石油醚和乙酸乙酯体系，根据要分离的化合物的极性不同对展开剂体系进行调节(通过调节溶剂的体积比或者加入三乙胺等进行)。

微波反应使用BiotageInitiator+(400W，RT～300℃)微波反应器。

柱色谱法一般使用青岛海洋200～300目硅胶为固定相。洗脱剂的体系包括二氯甲烷和甲醇体系和正己烷和乙酸乙酯体系，根据要分离的化合物的极性不同对洗脱剂体系进行调节(通过调节溶剂的体积比或者加入三乙胺等进行)。

如在实施例中无特殊说明，反应的温度为室温(20℃～30℃)

实施例中所使用的试剂购自Acros Organics、Aldrich Chemical Company或特伯化学等公司。

本发明中的缩写具有以下含义：

中间体的制备

中间体制备例1：3，6-二溴异苯并呋喃-1(3H)-酮(Int-1)的制备

第一步：6-氨基异苯并呋喃-1(3H)-酮(Int-1-b)的制备

将6-硝基异苯并呋喃-1(3H)-酮(Int-1-a)(1.79g，10mmol)在MeOH(30mL)中溶解，加入Pd/C(179mg)，并在氢气气氛下搅拌过夜。然后将反应液抽滤，浓缩，得到化合物(Int-1-b)(1.4g，收率：94.0％)。

第二步：6-溴异苯并呋喃-1(3H)-酮(Int-1-c)的制备

将化合物(Int-1-b)(1.4g，9.39mmol)在HBr水溶液(20mL)中溶解，在冰浴下滴加NaNO₂水溶液(648mg，9.39mmol)，并在该温度下搅拌0.5小时。然后将反应液倒入CuBr(4.32g，30mmol)和HBr水溶液(10mL)的混合溶液中，搅拌1小时。将反应液用DCM萃取，浓缩有机相，将残留物通过硅胶柱色谱法分离得到化合物(Int-1-c)(870mg，收率：43.7％)。

第三步：3，6-二溴异苯并呋喃-1(3H)-酮(Int-1)的制备

将化合物(Int-1-c)(870mg，4.1mmol)溶于CCl₄(10mL)中，将Br₂(985mg，6.1mmol)用CCl₄稀释，然后将其滴加入反应体系，滴完后反应5小时，TLC监测反应完毕后，旋转蒸发移除溶剂，将残留物通过薄层制备色谱法纯化，得到化合物(Int-1)(620mg，收率：52.1％)。

中间体制备例2：4-环丙基-1H-咪唑(Int-2)的制备

将2-溴-1-环丙基乙酮(Int-2-a)(8.2g，50mmol)、醋酸甲脒(26g，250mmol)加入至乙二醇(60mL)中，并在135℃下搅拌过夜。将反应液倒入水中，用EA萃取6次，旋转蒸发至干燥，制备高效液相色谱法纯化得到标题化合物(2.4g，收率：44.4％)。

中间体制备例3：2-肼基-6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶(Int-3)的制备

第一步：6-氨基吡啶甲酰肼(Int-3-b)的制备

将6-氨基吡啶甲酸甲酯(Int-3-a)(50g，329mmol)和水合肼(32.9g，658mmol)加入甲醇(500mL)中，并加热回流搅拌3小时。然后将反应液冷却到室温，过滤，用乙酸乙酯洗涤滤饼，得到化合物(Int-3-b)(42g，收率：84.0％)。

第二步：(E)-N’-(6-((E)-2-((二甲基氨基)亚甲基)肼羰基)吡啶-2-基)-N，N-二甲基甲脒(Int-3-c)的制备

将化合物(Int-3-b)(42g，275mmol)溶于DMF-DMA(500mL)中，并加热回流18小时。然后将反应液冷却，浓缩。加入乙酸乙酯，并将反应体系加热到50℃搅拌20分钟，冷却，过滤得到化合物(Int-3-c)(60g，收率：72％)。

第三步：6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(Int-3-d)的制备

将化合物(Int-3-c)(10g，38.2mmol)溶于乙腈和醋酸的混合溶剂(4∶1，100mL)中，加入异丙胺(11.3g，191mmol)，并加热回流24小时。然后将反应液冷却，浓缩，向其中加入水，用1N的NaOH溶液将反应液调到弱碱性，析出固体，过滤，干燥得到化合物(Int-3-d)(3.0g，收率：39％)。

第四步：2-溴-6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶(Int-3-e)的制备

将化合物(Int-3-d)(3.0g，14.8mmol)溶于氢溴酸的水溶液(30mL)中，冷却到0℃后滴加NaNO₂(1.0g，14.8mmol)的水溶液，在该温度下继续搅拌0.5小时，然后滴加Br₂(2.37g，14.8mmol)，在室温下搅拌2小时。用2N的NaOH溶液将反应液调到弱碱性，用乙酸乙酯萃取，用硫代硫酸钠水溶液洗涤乙酸乙酯层，干燥，过滤，浓缩并纯化后得到化合物(Int-3-e)(2.8g，收率：72％)。

第五步：2-肼基-6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶(Int-3)的制备

将(Int-3-e)(2.8g，10.5mmol)溶于乙醇(30mL)中，加入水合肼(1.1g，21.0mmol)，并回流5小时，浓缩得到化合物(Int-3)(2.26g，收率：99％)。

中间体制备例4：2-(4-环丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)-6-肼基吡啶(Int-4)的制备

除在第三步中用环丙胺(2.0g，35.1mmol)代替异丙胺外，通过与中间体制备例3中类似的方法，制备得到化合物(Int-4)(300mg)。

中间体制备例5：2-肼基-6-(4-(1，1，1-三氟丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶(Int-5)的制备

除在第三步中用1，1，1-三氟丙-2-胺(2.0g，17.7mmol)代替异丙胺外，通过与中间体制备例3中类似的方法，制备得到化合物(Int-5)(150mg)。

中间体制备例6：2-溴-6-(4-(1，1，1-三氟丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶(Int-6)的制备

除在第三步中用1，1，1-三氟丙-2-胺(4.0g，35.4mmol)代替异丙胺外，通过与中间体制备例3中类似的方法，制备得到化合物(Int-6)(450mg)。

中间体制备例7：6-(4-(1-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(Int-7)的制备

第一步：6-氨基吡啶甲酰肼(Int-7-b)的制备

将6-氨基吡啶甲酸甲酯(Int-7-a)(5g，32.9mmol)和水合肼(3.3g，65.8mmol)加入甲醇(50mL)中，并加热回流搅拌3小时。然后让反应液冷却到室温，过滤，用乙酸乙酯洗涤滤饼，得到化合物(Int-7-b)(4.0g，收率：80.0％)。

第二步：(E)-N’-(6-(2-((E)-(二甲基氨基)亚甲基)肼-1-羰基)吡啶-2-基)-N，N-二甲基甲脒(Int-7-c)的制备

将化合物(Int-7-b)(4g，27mmol)溶于DMF-DMA(50mL)中，并加热回流18小时。然后将反应液冷却，浓缩。加入乙酸乙酯，将反应物加热到50℃搅拌20分钟，冷却，过滤得到化合物(Int-7-c)(6.0g，收率：86.9％)。

第三步：2-(3-(6-氨基吡啶-2-基)-4H-1，2，4-三唑-4-基)丙-1-醇(Int-7-d)的制备

将化合物(Int-7-c)(6.0g，22.9mmol)溶于乙腈和醋酸的混合溶剂(4∶1，100mL)中，加入2-氨基丙-1-醇(8.6g，114mmol)，并加热回流24小时。然后将反应液冷却，浓缩，向其中加入水，用1N的氢氧化钠水溶液将反应液调到弱碱性，析出固体，过滤，干燥，通过制备高效液相色谱法纯化得到化合物(Int-7-d)(3.0g，收率：59.9％)。

第四步：6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(Int-7)的制备

将化合物(Int-7-d)(1.3g，5.93mmol)和咪唑(1.6g，23.72mmol)溶于DMF(25.0mL)，加入叔丁基二甲基氯硅烷(2.7g，17.79mmol)，加入完毕后室温搅拌6小时，反应液减压蒸干，剩余物用硅胶柱色谱法纯化得到化合物(Int-7)(1.1g，无色油状物，收率：55.6％)

中间体制备例8：(R)-2-肼基-6-(4-(1-甲氧基丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶(Int-8)的制备

除在第三步中用(R)-1-甲氧基丙-2-胺盐酸盐(4.8g，38mmol)代替异丙胺外，通过与中间体制备例3中类似的方法，制备得到化合物(Int-8)(1.2g)。

实施例1：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-环丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(1)的制备

第一步：7-溴-2-(6-(4-环丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(1-b)的制备

将化合物(Int-4)(216mg，1mmol)在乙醇(10mL)中溶解，加入化合物(Int-1)(292mg，1mmol)。将混合物加热回流2h后，LC-MS显示反应完全。将反应物真空减压浓缩，将残留物通过制备HPLC纯化得到化合物(1-b)(89mg，收率：21.7％)。

MS m/z(ESI)：409[M+H]⁺.

第二步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-环丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(1)的制备

将化合物(1-b)(89mg，0.22mmol)在DMSO(1mL)中溶解，加入化合物(Int-2)(25.8mg，0.24mmol)、Cu₂O(32mg，0.22mmol)和K₂CO₃(45mg，0.32mmol)。将混合物在110-120℃下加热过夜。将反应物真空减压浓缩，将残留物通过制备HPLC纯化得到标题化合物(4mg，收率：4.4％)。

MS m/z(ESI)：437[M+H]⁺.

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.91(s，1H)，8.63(s，1H)，8.44(m，2H)，8.34-8.31(m，1H)，8.26-8.18(m，3H)，7.85-7.81(m，2H)，5.21-5.18(m，1H)，1.89-1.85(m，1H)，0.92-0.90(m，2H)，0.85-0.81(m，4H)，0.75-0.72(m，2H)。

实施例2：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(2)的制备

第一步：7-溴-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(2-b)的制备

将化合物(Int-3)(218mg，1mmol)在乙醇(10mL)中溶解，加入化合物(Int-1)(292mg，1mmol)。将混合物加热回流3h后，LC-MS显示反应完全。将反应物真空减压浓缩，将残留物通过制备HPLC纯化得到化合物(2-b)(112mg，收率：27.3％)。

MS m/z(ESI)：411[M+H]⁺.

第二步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(2)的制备

将化合物(2-b)(112mg，0.27mmol)在DMSO(1mL)中溶解，加入化合物(Int-2)(32.4mg，0.3mmol)、Cu₂O(39mg，0.27mmol)和K₂CO₃(55mg，0.4mmol)。将混合物在110-120℃下加热过夜。将反应物真空减压浓缩，将残留物通过制备HPLC纯化得到标题化合物(12mg，收率：10.1％)。

MS m/z(ESI)：439[M+H]⁺.

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.91(s，1H)，8.63(s，1H)，8.44(m，2H)，8.34-8.31(m，1H)，8.26-8.18(m，3H)，7.85-7.81(m，2H)，5.41-5.37(m，1H)，1.89-1.85(m，1H)，1.45(s，3H)，1.43(s，3H)，0.85-0.81(m，2H)，0.75-0.72(m，2H)。

实施例3：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-(1，1，1-三氟丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(3)的制备

第一步：7-溴-2-(6-(4-(1，1，1-三氟丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(3-b)的制备

将化合物(Int-5)(272mg，1mmol)在乙醇(10mL)中溶解，加入化合物(Int-1)(292mg，1mmol)。将混合物加热回流1.5-2h后，LC-MS显示反应完全。将反应物真空减压浓缩，将残留物通过制备HPLC纯化得到化合物(3-b)(159mg，收率：34.2％)。

MS m/z(ESI)：465[M+H]⁺.

第二步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-(1，1，1-三氟丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(3)的制备

将化合物(3-b)(159mg，0.34mmol)在DMSO(2mL)中溶解，加入化合物(Int-2)(40mg，0.37mmol)、Cu₂O(49mg，0.34mmol)和K₂CO₃(70mg，0.51mmol)。将混合物在120℃下加热过夜。将反应物真空减压浓缩，将残留物通过制备HPLC纯化得到标题化合物(19mg，收率：11.4％)。

MS m/z(ESI)：493[M+H]⁺.

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：9.18(s，1H)，8.66(s，1H)，8.44-8.43(m，2H)，8.34-8.31(m，1H)，8.28-8.25(m，2H)，8.21-8.19(m，1H)，7.94-7.92(m，1H)，7.81(s，1H)，6.85-6.82(m，1H)，1.89-1.86(m，1H)，1.81(m，3H)，0.86-0.81(m，2H)，0.76-0.72(m，2H)。

实施例4：6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-4H-色烯-4-酮(4)的制备

第一步：1-(2-(苄氧基)-5-溴苯基)乙酮(4-b)的制备

将1-(5-溴-2-羟基苯基)乙酮(4-a)(1.0g，4.6mmol)在DMF(10mL)中溶解，加入碳酸钾(1.29g，9.2mmol)和溴苄(0.87g，5.1mmol)。将混合物室温搅拌5-6h后，LC-MS显示反应完全。将反应物滴入水中析出固体，过滤，干燥，浓缩得到化合物(4-b)(1.0g，收率：70.4％)。

MS m/z(ESI)：305[M+H]⁺.

第二步：1-(2-(苄氧基)-5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙酮(4-c)的制备

将化合物(4-b)(1.0g，3.3mmol)在DMSO(10mL)中溶解，加入化合物(Int-2)(396mg，3.3mmol)、CuI(94mg，0.50mmol)、8-羟基喹啉(72mg，0.50mmol)和K₂CO₃(912mg，6.6mmol)。将混合物在120-125℃下加热过夜。将反应物真空减压浓缩，加水，用乙酸乙酯萃取，干燥，浓缩，纯化得到化合物(4-c)(350mg，收率：31.8％)。

MS m/z(ESI)：333[M+H]⁺.

第三步：1-(5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-羟基苯基)乙酮(4-d)的制备

将化合物(4-c)(350mg，1.1mmol)在甲醇(10mL)中溶解，加入钯/碳(50mg)，通入氢气。将混合物在室温下搅拌过夜，LC-MS显示反应完全。将反应物过滤，干燥，浓缩得到化合物(4-d)(230mg，收率：90.1％)。

MS m/z(ESI)：243[M+H]⁺.

第四步：(E)-1-(5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-羟基苯基)-3-(二甲基氨基)丙-2-烯-1-酮(4-e)的制备

将化合物(4-d)(230mg，0.95mmol)在甲苯(5mL)中溶解，加入DMF(170mg，1.4mmol)。将混合物在105-110℃下搅拌4-4.5h，LC-MS显示反应完全。将反应物浓缩得到化合物(4-e)(270mg，收率：96％)。

MS m/z(ESI)：298[M+H]⁺.

第五步：6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-碘-4H-色烯-4-酮(4-f)的制备

将化合物(4-e)(270mg，0.91mmol)在氯仿(5mL)中溶解，加入吡啶(79mg，1.0mmol)和碘(462mg，1.8mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，LC-MS显示反应完全。将反应物倒入硫代硫酸钠的水溶液中，搅拌10min，用乙酸乙酯萃取，干燥，浓缩，纯化得到化合物(4-f)(208mg，收率：61％)。

MS m/z(ESI)：379[M+H]⁺.

第六步：6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-4H-色烯-4-酮(4-g)的制备

将化合物(4-f)(208mg，0.55mmol)在二氧六环(5mL)中溶解，加入联硼酸频那醇酯(280mg，1.1mmol)、醋酸钾(135mg，1.34mmol)和Pd(dppf)Cl₂(40mg，0.06mmol)。将混合物在50-55℃下搅拌3.5-4h，LC-MS显示反应完全。将混合物浓缩，纯化得到化合物(4-g)(120mg，收率：58％)。

MS m/z(ESI)：379[M+H]⁺.

第七步：6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-4H-色烯-4-酮(4)的制备

将化合物(4-g)(120mg，0.32mmol)在DMF(5mL)中溶解，加入Int-3-e(85mg，0.32mmol)、碳酸钾(88mg，0.64mmol)和Pd(dppf)Cl₂(22mg，0.03mmol)。将混合物在75-80℃下搅拌4-5h，LC-MS显示反应完全。将混合物浓缩，通过制备HPLC纯化得到化合物(4)(6mg，收率：4.3％)。

MS m/z(ESI)：439[M+H]⁺.

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：9.15(s，1H)，8.53(s，1H)，8.41(s，1H)，8.25(m，1H)，7.73-7.50(m，4H)，7.52(s，1H)，7.12(s，1H)，5.41-5.36(m，1H)，1.87-1.84(m，1H)，1.42(s，3H)，1.41(s，3H)，0.84-0.80(m，2H)，0.73-0.71(m，2H)。

实施例5：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮(5)的制备

第一步：5-碘N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-2-甲基苯甲酰胺(5-b)的制备

将5-碘-2-甲基苯甲酸(5-a)(1.0g，3.9mmol)在DCM(10mL)中溶解，加入DMF(1滴)和草酰氯(0.73g，5.7mmol)。将混合物在室温下搅拌2-3h后，LC-MS显示反应完全。将混合物浓缩，向其中加入溶于吡啶中的化合物(Int-3-d)(792mg，3.9mmol)，将所得的混合物在室温下搅拌过夜，将反应物滴入水中，用乙酸乙酯萃取，干燥，浓缩，纯化得到化合物(5-b)(1.6g，收率：94％)。

MS m/z(ESI)：448[M+H]⁺.

第二步：(Z)-2-(2-(二甲基氨基)乙烯基)-5-碘-N-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)苯甲酰胺(5-c)的制备

将化合物(5-b)(1.6g，3.6mmol)在甲苯(20mL)中溶解，加入DMF(642mg，5.4mmol)。将混合物在120-130℃下搅拌3-4h后，LC-MS显示反应完全。浓缩得到化合物(5-c)的粗品(2.0g)。

MS m/z(ESI)：503[M+H]⁺.

第三步：7-碘-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮(5-d)的制备

将化合物(5-c)(2.0g，4.0mmol)在甲苯(20mL)中溶解。将混合物在封管中130℃下搅拌6h后，LC-MS显示反应完全。将混合物浓缩纯化得到化合物(5-d)(600mg，收率：33％)。

MS m/z(ESI)：458[M+H]⁺.

第四步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)异喹啉-1(2H)-酮(5)的制备

将化合物(5-d)(300mg，0.66mmol)在DMSO(10mL)中溶解，加入化合物(Int-2)(84mg，0.72mmol)、CuI(18mg，0.09mmol)、8-羟基喹啉(12mg，0.09mmol)和K₂CO₃(180mg，1.3mmol)。将混合物在120℃下加热过夜。将反应物真空减压浓缩，通过制备HPLC纯化得到化合物(5)(35mg，收率：12％)。

MS m/z(ESI)：438[M+H]⁺.

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.76(s，1H)，8.60(s，1H)，7.84-7.81(m，1H)，7.60-7.56(m，2H)，7.45(s，1H)，7.42-7.39(m，3H)，7.12(s，1H)，6.13-6.11(m，1H)，5.22-5.18(m，1H)，1.87-1.84(m，1H)，1.43(s，3H)，1.42(s，3H)，0.84-0.79(m，2H)，0.74-0.71(m，2H)。

实施例6：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(6)的制备

将化合物(5)(25mg，0.06mmol)在甲醇(5mL)中溶解，加入钯/碳(10mg)后通入氢气。将混合物在室温下搅拌过夜。将反应物过滤，真空减压浓缩，通过制备HPLC纯化得到化合物(6)(3mg，收率：12％)。

MS m/z(ESI)：440[M+H]⁺.

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.76(s，1H)，8.59(s，1H)，7.62-7.60(m，2H)，7.47-7.42(m，3H)，7.13(s，1H)，6.67-6.65(m，1H)，5.21-5.18(m，1H)，3.52-3.50(m，2H)，3.14-3.12(m，2H)，1.89-1.86(m，1H)，1.41(s，3H)，1.40(s，3H)，0.84-0.80(m，2H)，0.73-0.71(m，2H)。

实施例7：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3，4-二氢苯并[f][1，4]氧氮杂

-5(2H)-酮(7)的制备

第一步：6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)色满-4-酮(7-b)的制备

将6-溴色满-4-酮(7-a)(1.0g，4.4mmol)在DMSO(10mL)中溶解，加入化合物(Int-2)(528mg，4.8mmol)、CuI(125mg，0.66mmol)、8-羟基喹啉(96mg，0.66mmol)和K₂CO₃(1.22g，8.8mmol)。将混合物在110-120℃下加热过夜。将反应物真空减压浓缩，通过制备HPLC纯化得到化合物(7-b)(302mg，收率：27％)。

MS m/z(ESI)：254[M+H]⁺.

第二步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3，4-二氢苯并[f][1，4]氧氮杂

-5(2H)-酮(7-c)的制备

将化合物(7-b)(302mg，1.19mmol)在甲苯(5mL)中溶解，加入NaN₃(309mg，4.8mmol)，将混合物冷却到0℃，滴加浓硫酸(1mL)，将混合物的温度始终维持在约5℃以下。滴加完毕后，将混合物在室温下搅拌过夜。将反应物滴入水中，用乙酸乙酯萃取，干燥，浓缩，纯化得到化合物(7-c)(103mg，收率：32％)。

MS m/z(ESI)：269[M+H]⁺.

第三步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3，4-二氢苯并[f][1，4]氧氮杂

-5(2H)-酮(7)的制备

将化合物(7-c)(103mg，0.38mmol)在二氧六环(5mL)中溶解，加入Int-3-e(204mg，0.76mmol)，Xantphos(23mg，0.04mmol)和碳酸铯(173mg，0.53mmol)，将混合物用氮气保护，加入Pd2(dba)3(18mg，0.02mmol)，将混合物在97-100℃下搅拌过夜。将反应物过滤，浓缩，通过制备HPLC纯化得到化合物(7)(15mg，收率：8.6％)。

MS m/z(ESI)：456[M+H]⁺.

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.70(s，1H)，8.61(s，1H)，7.74-7.71(m，1H)，7.61-7.41(m，4H)，7.12(s，1H)，6.69-6.67(m，1H)，5.21-5.19(m，1H)，4.32-4.29(m，2H)，3.63-3.59(m，2H)，1.90-1.87(m，1H)，1.40(s，3H)，1.39(s，3H)，0.84-0.81(m，2H)，0.74-0.73(m，2H)。

实施例8：6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基喹啉-4(1H)-酮(43)的制备

第一步：1-(5-溴-2-(甲基氨基)苯基)乙-1-酮(43-b)的制备

将1-(5-溴-2-氟苯基)乙-1-酮(43-a)(1.0g，4.6mmol)和碳酸钾(1.2g，9.1mmol)加入到DMF(30mL)中，加入甲胺水溶液(20mL)，99℃下反应过夜。将反应液浓缩至干后得到化合物(43-b)(0.8g，收率：81.0％)。

第二步：1-(5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(甲基氨基)苯基)乙-1-酮(43-c)的制备

将化合物(43-b)(300mg，1.4mmol)、4-环丙基-1H-咪唑(Int-2)(150mg，1.4mmol)、8-羟基喹啉(29mg，0.2mmol)、碳酸铯(515mg，1.6mmol)和碘化亚铜(38mg，0.2mmol)加入到二甲基亚砜(10mL)中，氮气保护下120℃反应过夜。然后用乙酸乙酯进行萃取，饱和食盐水洗涤，干燥浓缩后得到化合物(43-c)(130mg，收率：43.3％)。

第三步：1-(5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(甲基氨基)苯基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)乙-1-酮(43-d)的制备

将第二步所得化合物(300mg，1.2mmol)和2-溴-6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶(化合物Int-3-e)(400mg，1.5mmol)溶解于二氧六环溶液(10mL)中，加入Xantphos(340mg，0.6mmol)、Pd₂(dba)₃(538mg，0.6mmol)和叔丁醇钠(160mg，1.6mmol)，氮气保护下微波90℃反应4小时。然后将反应液过滤，收集滤液，浓缩后用制备高效液相色谱法纯化得到化合物(43-d)(20mg，收率：3.8％)。

第四步：6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-1-甲基喹-4(1H)-酮(43)的制备

将第三步所得化合物(20mg，0.05mmol)溶于DMF-DMA(10mL)中，并在96℃下反应4小时。然后用乙酸乙酯萃取，浓缩有机相，通过制备薄层色谱法纯化，得到化合物(43)(10mg，收率：50.4％)。

MS m/z(ESI)：452[M+H]⁺.

¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)δ：8.81-8.83(m，1H)，8.67-8.71(m，1H)，8.55(s，1H)，8.39(s，1H)，8.04-8.40(m，1H)，7.89-7.93(m，2H)，7.73-7.76(m，1H)，7.58-7.61(d，J＝6.8Hz，1H)，7.17(s，1H)，5.47-5.50(m，1H)，3.99(s，3H)，1.91-2.05(m，1H)，1.59-1.61(d，J＝6.8Hz，6H)，1.25-1.43(m，4H)。

实施例9：6-(4-异丙基-1H-咪唑-1-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮(9)的制备

第一步：(E)-5-溴-2-(((二甲基氨基)亚甲基)氨基)苯甲酰氯(9-b)的制备

将2-氨基-5-溴苯甲酸(9-a)(1.0g，4.6mmol)在DCM(10mL)中溶解，加入DMF(335mg，4.6mmol)和草酰氯(1.17g，9.2mmol)。将混合物下室温下搅拌2.5-3h后，LC-MS显示反应完全。将混合物浓缩得到化合物(9-b)的粗品。

第二步：6-溴-3-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮(9-c)的制备

将化合物(Int-3-d)(0.9g，4.6mmol)溶于吡啶中，加入化合物(9-b)(1.33g，4.6mmol)，将混合物在60℃下搅拌5h，将反应物滴入水中，用氯仿萃取，干燥，浓缩，纯化得到化合物(9-c)(200mg，收率：11％)。

MS m/z(ESI)：409[M+H]⁺.

第三步：6-(4-异丙基-1H-咪唑-1-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹唑啉-4(3H)-酮(9)的制备

将化合物(9-c)(200mg，0.48mmol)在DMSO(4mL)中溶解，加入化合物(Int-2)(59mg，0.54mmol)、CuI(14mg，0.07mmol)、8-羟基喹啉(10mg，0.07mmol)和K₂CO₃(132mg，0.96mmol)。将混合物在120℃下加热过夜。将反应物真空减压浓缩，通过制备HPLC纯化得到化合物(9)(3mg，收率：1.3％)。

MS m/z(ESI)：439[M+H]⁺.

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.86(s，1H)，8.63(s，1H)，7.68-7.61(m，2H)，7.53-7.42(m，4H)，7.14(s，1H)，6.72-6.70(m，1H)，5.19-5.17(m，1H)，1.92-1.89(m，1H)，1.40-1.39(m，6H)，0.81-0.78(m，2H)，0.73-0.71(m，2H)。

实施例10-7-(3-羟基哌啶-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(21)的制备

除在第二步中用哌啶-3-醇(200mg，1.98mmol)代替化合物(Int-2)外，通过与实施例2中类似的方法，制备得到标题化合物(11mg)。

MS m/z(ESI)：432[M+H]⁺.

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.85(s，1H)，8.43(s，1H)，8.01(m，1H)，7.99-7.54(m，4H)，7.43(m，1H)，5.41-5.37(m，1H)，3.21(s，1H)，3.15-3.10(m，1H)，3.05-2.95(m，4H)，1.75-1.60(m，4H)，1.45(s，3H)，1.43(s，3H)。

实施例11：6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-(6-(4-(1，1，1-三氟丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-4H-色烯-4-酮(22)的制备

除在第七步中用化合物Int-6(450mg，1.4mmol)代替Int-3-e，通过与实施例4中类似的方法，制备得到标题化合物(5mg)。

MS m/z(ESI)：493[M+H]⁺.

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：9.19(s，1H)，8.96(s，1H)，8.33-8.26(m，3H)，8.22-8.13(m，3H)，7.97-7.95(m，1H)，7.68(s，1H)，6.74(s，1H)，1.87-1.83(m，4H)，0.84-0.80(m，2H)，0.75-0.72(m，2H)。

实施例12：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-(1-甲基哌啶-4-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(37)的制备

第一步：5-溴-6-硝基-2，3-二氢-1H-茚-1-酮(37-b)的制备

将5-溴-2，3-二氢-1H-茚-1-酮(37-a)(30.0g，142mmol)分次加入冰盐浴冷却的发烟硝酸中(200mL)，-10℃～-15℃搅拌4.5小时，将反应液倒入冰水中搅拌30分钟后过滤，将滤饼用乙酸乙酯溶解，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后，将粗品用硅胶柱色谱法纯化得到化合物(37-b)(19.0g，收率：52.2％)。

第二步：6-氨基-5-溴-2，3-二氢-1H-茚-1-酮(37-c)的制备

将化合物(37-b)(19.0g，74.2mmol)溶于乙醇(180mL)和水(60mL)中，加入还原铁粉(20.8g，371.0mmol)和氯化铵(2.0g，37.1mmol)，升温至回流搅拌4小时，将反应液趁热过滤，滤饼用热的无水乙醇洗涤两次，合并滤液，减压蒸干，将粗品溶于二氯甲烷(500mL)，用饱和氯化钠水溶液洗涤两次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干得到化合物(37-c)(11.2g，收率：66.8％)。

第三步：5-溴-6-((2-环丙基-2-氧代乙基)氨基)-2，3-二氢-1H-茚-1-酮(37-d)的制备

将化合物(37-c)(7.0g，31.0mmol)、碘化钾(4.7g，28.2mmol)和碳酸钾(5.1g，37.2mmol)溶于DMF(100mL)，氮气保护下搅拌10分钟后加入2-溴-1-环丙基乙酮(10.1g，62.0mmol)，加毕，升温至60℃搅拌过夜，反应液减压蒸干，将剩余物用硅胶柱色谱法纯化得到化合物(37-d)(7.3g，收率：76.8％)。

第四步：5-溴-6-(4-环丙基-2-巯基-1H-咪唑-1-基)-2，3-二氢-1H-茚-1-酮(37-e)的制备

将化合物(37-d)(6.6g，21.4mmol)溶于醋酸(80mL)，加入硫氰酸钾(4.2g，42.8mmol)，加毕，升温至110℃搅拌8小时，将反应液减压蒸去醋酸，向剩余物中加入水(100mL)，乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠水溶液洗涤两次，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压蒸干得到化合物(37-e)的粗品(6.8g棕色固体，直接用于下一步反应)。

第五步：5-溴-6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2，3-二氢-1H-茚-1-酮(37-f)的制备

将双氧水(9mL)、醋酸(80mL)和水(16mL)置于三口瓶中，升温至45℃，分次加入化合物(37-e)(6.8g，19.5mmol)，搅拌2小时后，加入20％硫化钠(30mL)，搅拌1小时后用氨水调节pH值至10，二氯甲烷萃取，有机相浓缩后用硅胶柱色谱法纯化得到化合物(37-f)(4.0g，收率：64.7％)。

第六步：6-溴-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(37-g)的制备

将化合物(37-f)(4.0g，12.6mmol)溶于氯仿(80mL)，加入甲基磺酸(12.1g，126mmol)，冰浴冷却至0℃后分次加入叠氮化钠(2.5g，37.8mmol)，加毕，缓慢恢复至室温搅拌过夜，将反应液在冰浴冷却下用1N氢氧化钠水溶液淬灭后，用二氯甲烷萃取，将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干得到化合物(37-g)(3.6g，收率：85.9％)。

第七步：4-(7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-1-氧代-1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(37-h)的制备

将化合物(37-g)(500mg，1.5mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(702mg，2.3mmol)和碳酸钾(626mg，4.5mmol)溶于1，4-二氧六环(20mL)和水(0.5mL)中，氮气保护下加入Pd(dppf)Cl₂(100mg)，加毕，升温至10)0℃搅拌过夜，反应液减压蒸干，将剩余物用硅胶柱色谱法纯化得到化合物(37-h)(600mg，收率：92.0％)。

第八步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮盐酸盐(37-i)的制备

将化合物(37-h)(600mg，1.4mmol)溶于甲醇(5mL)中，加入盐酸的1，4二氧六环溶液(5mL)，室温搅拌过夜，反应液减压蒸干，将剩余物(0.6g，粗品)直接用于下一步反应。

第九步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-6-(1-甲基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(37-j)的制备

将化合物(37-i)(0.6g，粗品)溶于pH为4的醋酸-甲醇缓冲液(20mL)，加入甲醛水溶液(30％，3mL)和醋酸硼氢化钠(890mg，4.2mmol)，室温搅拌4小时。将反应液用碳酸钾调pH值至9，减压蒸干，将剩余物加入甲醇(50mL)中，搅拌30分钟，过滤，滤液减压蒸干，将剩余物用制备高效液相色谱法纯化得到化合物(37-j)(410mg，两步收率：84.0％)。

第十步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-6-(1-甲基哌啶-4-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(37-k)的制备

将化合物(37-j)(410mg，1.2mmol)溶于无水乙醇(20mL)，加入二氧化铂(200mg)，通入氢气，50℃搅拌两天，反应液过滤，滤液减压蒸干得到化合物(37-k)(400mg，收率：97.1％)。

第十一步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-(1-甲基哌啶-4-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(37)的制备

将化合物(37-k)(400mg，1.1mmol)、化合物(Int-3-e)(454mg，1.7mmol)、反式-N，N-二甲基-1，2-环己二胺(171mg，1.2mmol)和无水磷酸钾(318mg，1.5mmol)溶于1，4-二氧六环(30mL)中，氮气保护下加入碘化亚铜(209mg，1.1mmol)，加入完毕后升温至回流搅拌两天。将反应液过滤，滤液减压蒸干，将剩余物用制备高效液相色谱法纯化得化合物(37)(310mg，收率：52.5％)。

MS m/z(ESI)：537[M+H]⁺.

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.91(s，1H)，8.91(s，1H)，8.08-8.00(m，1H)，7.99-7.92(m，2H)，7.79(s，1H)，7.69(d，J＝0.8Hz，1H)，7.47(s，1H)，7.17(d，J＝1.2Hz，1H)，5.38-5.35(m，1H)，4.25(t，J＝6.4Hz，2H)，3.18(t，J＝6.4Hz，2H)，2.51-2.41(m，4H)，2.24(s，3H)，1.92-1.87(m，4H)，1.85-1.84(m，1H)，1.50(d，J＝6.8Hz，6H)，0.85-0.77(m，2H)，0.76-0.68(m，2H)。

实施例13：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-(3-吗啉代丙-1-炔-1-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(38)的制备

第一步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-6-(3-吗啉代丙-1-炔-1-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(38-a)的制备

将化合物(37-g)(140mg，0.42mmol)、4-(丙-2-炔-1-基)吗啉(210mg，1.68mmol)和碳酸钾(116mg，0.84mmol)溶于乙腈(5mL)和DMF(2mL)中，氮气保护下加入Pd₂(dba)₃(20mg)和Xantphos(20mg)，升温至85℃搅拌过夜，反应液减压蒸干，剩余物用制备薄层色谱法纯化得到化合物(38-a)(130mg，收率：82.3％)。

第二步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-6-(3-吗啉代丙-1-炔-1-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(38)的制备

将化合物(38-a)(130mg，0.35mmol)、化合物(Int-3-e)(142mg，0.53mmol)、反式-N，N-二甲基-1，2-环己二胺(55mg，0.39mmol)和无水磷酸钾(104mg，0.49mmol)溶于1，4-二氧六环(30mL)，氮气保护下加入碘化亚铜(67mg，0.35mmol)，加入完毕后，升温至回流搅拌过夜，反应液过滤，滤液减压蒸干，剩余物用制备高效液相色谱纯化得到化合物(38)(26mg，收率：13.2％)。

MS m/z(ESI)：563[M+H]⁺.

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.92(s，1H)，8.08-8.01(m，1H)，8.00-7.94(m，2H)，7.91(s，1H)，7.84(d，J＝1.2Hz，1H)，7.72(s，1H)，7.29(d，J＝1.2Hz，1H)，5.38-5.36(m，1H)，4.26(s，2H)，3.65-3.52(m，4H)，3.51(s，2H)，3.20(t，J＝6.0Hz，2H)，2.41-2.39(m，4H)，1.91-1.81(m，1H)，1.50(d，J＝6.8Hz，6H)，0.84-0.76(m，2H)，0.74-0.66(m，2H)。

实施例14：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-6-(3-羟基丙-1-炔-1-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(39)的制备

除在第一步中用丙-2-炔-1-醇(300mg，5.3mmol)代替4-(丙-2-炔-1-基)吗啉外，通过与实施例13中类似的方法，制备得到标题化合物(6mg)。

MS m/z(ESI)：494[M+H]⁺.

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.39(s，1H)，8.12-8.10(m，2H)，8.03-8.00(m，1H)，7.96-7.89(m，2H)，7.51(s，1H)，7.00(s，1H)，5.49-5.46(m，1H)，4.46(s，2H)，4.30-4.27(m，2H)，3.18(t，J＝6.4Hz，2H)，1.93-1.91(m，1H)，1.50(d，J＝6.8Hz，6H)，0.91-0.88(m，2H)，0.83-0.81(m，2H)。

实施例15：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(40)的制备

第一步至第五步：2-(6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(40-f)的制备

除用6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-胺(Int-7)(500mg，2.28mmol)代替化合物(Int-3-d)外，通过与实施例5以及实施例6中类似的方法，制备得到化合物(40-f)(60mg)。

第六步：7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-(1-羟基丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-3，4-二氢异喹啉-1(2H)-酮(40)的制备

将化合物(40-f)(60mg，0.1mmol)置于单口瓶，加入4N盐酸的1，4-二氧六环溶液(15.0mL)，室温搅拌过夜，反应液减压蒸干，将剩余物用制备高效液相色谱法纯化得到化合物(40)(30mg)。

MS m/z(ESI)：456[M+H]⁺.

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.78(s，1H)，8.61(s，1H)，7.62-7.59(m，2H)，7.44-7.40(m，3H)，7.15(s，1H)，6.67-6.65(m，1H)，4.10-3.85(m，3H)，3.66(br，1H)，3.28-3.22(m，2H)，3.10-3.3.08(m，2H)，1.89-1.86(m，1H)，1.53(m，3H)，0.89-0.85(m，2H)，0.73-0.70(m，2H)。

实施例16：6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹啉-4(1H)-酮(41)的制备

第一步：1-(2-氨基-5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)苯基)乙-1-酮(41-b)的制备

将4-环丙基-1H-咪唑(Int-2)(1.08g，10mmol)、1-(2-氨基-5-溴苯基)乙-1-酮(41-a)(2.14g，10mmol)、8-羟基喹啉(290mg，2mmol)和碳酸钾(1.51g，11mmol)溶于二甲基亚砜(30mL)中，氮气保护下加入碘化亚铜(382mg，2mmol)，加入完毕后，氮气置换3次，升温至125℃搅拌过夜。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取，将有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，然后将粗品用硅胶柱色谱法纯化得化合物(41-b)(1.3g，收率：53.9％)。

MS m/z(ESI)：242[M+H]⁺。

第二步：1-(2-氨基-5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)苯基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)乙-1-酮(41-c)的制备

将化合物(41-b)(1.3g，5.4mmol)、2-溴-6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶(Int-3-e)(1.44g，5.4mmol)、叔丁醇钠(623mg，6.5mmol)和Xantphos(50mg)溶于四氢呋喃(20mL)中，氮气置换3次，再加入Pd₂(dba)₃(150mg)，反应液在80℃下搅拌过夜。将反应物真空减压浓缩，将残余物通过制备高效液相色谱法纯化得到化合物(41-c)(460mg，收率：20％)。

MS m/z(ESI)：428[M+H]⁺。

第三步：6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)喹啉-4(1H)-酮(41)的制备

将化合物(41-c)(460mg，1.08mmol)溶于DMF(5mL)中，在冰浴下加入氢化钠(56mg，1.4mmol)反应液室温搅拌20分钟，再加入甲酸甲酯(1mL)，将反应液在40℃下继续搅拌过夜，然后将反应液倒入冰水中，二氯甲烷萃取。真空减压浓缩，用制备薄层色谱纯化得到化合物(41)(98mg，收率：22.4％)。

MS m/z(ESI)：438[M+H]⁺.

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.64(s，1H)，8.54(s，1H)，7.99(s，1H)，7.63-7.55(m，2H)，7.45(s，1H)，7.39-7.22(m，3H)，6.99-6.85(m，1H)，5.31-5.29(m，1H)，1.89-1.86(m，1H)，1.55-1.51(m，6H)，0.83-0.80(m，2H)，0.72-0.70(m，2H)。

实施例17：(R)-7-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-(6-(4-(1-甲氧基丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(17)的制备

除在第一步中用(R)-2-肼基-6-(4-(1-甲氧基丙-2-基)-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶(Int-8)(234mg，1.0mmol)代替化合物(Int-4)外，通过与实施例1中类似的方法，制备得到标题化合物(11mg)。

MS m/z(ESI)：469[M+H]⁺.

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.93(s，1H)，8.66(s，1H)，8.41-8.39(m，2H)，8.30-8.28(m，1H)，8.13-8.08(m，3H)，7.90-7.86(m，2H)，4.47-4.38(m，1H)，3.94-3.89(m，2H)，3.26(s，3H)，1.88-1.86(m，1H)，1.77-1.73(m，3H)，0.85-0.81(m，2H)，0.75-0.72(m，2H)。

实施例18：7-(6-环丙基吡啶-3-基)-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(42)的制备

将7-溴-2-(6-(4-异丙基-4H-1，2，4-三唑-3-基)吡啶-2-基)酞嗪-1(2H)-酮(化合物2-b)(88mg，0.21mmol)在DMF(1mL)中溶解，加入(6-环丙基吡啶-3-基)硼酸(49mg，0.3mmol)和碳酸钾(56mg，0.42mmol)，氮气置换，加入Pd(dppf)Cl₂(16mg，0.02mmol)，将混合物在80℃下加热过夜。将反应物真空减压浓缩，将残留物用制备高效液相色谱法纯化得到标题化合物(6mg)。

MS m/z(ESI)：450[M+H]⁺.

¹H-NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ：8.87(s，1H)，8.63(s，1H)，8.48(s，1H)，8.34-8.29(m，3H)，8.18-8.10(m，1H)，7.60-7.55(m，2H)，7.33-7.28(m，1H)，6.89-6.86(m，1H)，5.33-5.30(m，1H)，1.88-1.86(m，1H)，1.40-1.39(m，6H)，0.83-0.80(m，2H)，0.77-0.73(m，2H)。

通过与实施例1-18中类似的方法制备下列化合物：

生物学实验

1.ASK1抑制试验

1.1试验方法

采用HTRF KinEZSE-STK(Cisbio)试剂盒测定化合物对ASK1酶的抑制作用。将ASK1酶与不同浓度的测试化合物在室温下预孵育30min后加入底物和三磷酸腺苷(ATP)启动反应。在室温下孵育120min后加入TK抗体-穴状化合物以及抗生蛋白链菌素-XL665后进行检测。以溶媒组(DMSO)为阴性对照，缓冲剂组(不含ASK1酶)为空白对照，通过下式计算不同浓度的测试化合物的相对抑制活性百分比：

相对抑制活性百分比＝1-(不同浓度的测试化合物组-缓冲剂组)/(溶媒组-缓冲剂组)*100％

将不同浓度的化合物组的相对抑制活性百分比相对于化合物浓度作图，按照四参数模型拟合曲线，通过下式计算IC₅₀值：

y＝min+(max-min)/(1+(x/IC₅₀)^(-Hillslope))

其中y为相对抑制活性百分比，max和min分别为拟合曲线的最大值与最小值，x为化合物的对数浓度，Hillslope为曲线斜率。

1.2试验结果

按照上述方法测定化合物对ASK1活性的抑制作用，结果如下：

由以上结果可见，各实施例化合物对ASK1酶有较强抑制活性。

2.ASK1细胞报告基因试验

2.1试验方法

构建pcDNA3.1-ASK1表达载体，与pGL4.44[1uc2P/APl RE/Hygro]载体共转染入HEK293细胞，以3×10⁴细胞/孔铺板，加入不同浓度的测试化合物孵育24h后，采用Bright-Glo^TM荧光素酶测定系统(Promega)，按照说明书方法检测细胞中萤光素酶的活性。以溶媒组(DMSO)为阴性对照，通过下式计算不同浓度的测试化合物的相对抑制活性百分比：

相对抑制活性百分比＝1-(不同浓度的测试化合物组)/(溶媒组)*100％

将不同浓度的测试化合物组的相对抑制活性百分比相对于化合物浓度作图，按照四参数模型拟合曲线，通过下式计算IC₅₀值：

y＝min+(max-min)/(1+(x/IC₅₀)^(-Hillslope))

2.2试验结果

按照上述方法测定化合物对细胞ASK1活性的抑制作用，结果如下：

化合物编号	IC<sub>50</sub>(nM)
		2	108.31±28.24
3	27.68±12.40

由以上结果可见，各实施例化合物对细胞ASK1酶有抑制作用。

另外，在抗炎试验中，本发明的实施例化合物表现出良好的肿胀抑制率；本发明的实施例化合物对脂肪肝、炎症、纤维化的改善具有良好效果。

本发明的实施例化合物同时具有良好的药物代谢动力学性质、药效动力学性质以及优良的安全性。

除本文中描述的那些外，根据前述描述，本发明的多种修改对本领域技术人员而言会是显而易见的。这样的修改也意图落入所附权利要求书的范围内。本申请中所引用的各参考文献(包括所有专利、专利申请、期刊文章、书籍及任何其它公开)均以其整体援引加入本文。

Claims

1.化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中所述化合物具有式(III)、式(IV)、式(V)、式(VI)、式(VIII)或式(IX)的结构：

其中：

表示单键或双键；

R¹选自氢、C_1-6烷基和C_3-10环烷基，其中所述烷基和环烷基各自任选地被一个或多个独立地选自下列的取代基取代：卤素、C_1-6烷基和-OR⁶；

R²为氢；

R³为5-14元杂芳基，其任选地被一个或多个C_3-8环烷基取代；

W¹和W²为N；

W³、W⁴、W⁵、W⁶和W⁷为C(R⁴)；

R⁴选自氢、卤素、C_1-6烷基、C_2-6炔基、C_3-10环烷基和3-10元杂环基；其中所述烷基、炔基、环烷基和杂环基各自任选地进一步被一个或多个独立地选自下列的取代基取代：C_1-6烷基、3-10元杂环基和-OR⁶；并且

R⁶选自氢、C_1-6烷基和C_3-8环烷基。

2.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中R¹选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基和环丙基，所述基团任选地被1个、2个或3个独立地选自下列的取代基取代：F、-OH和-OCH₃。

3.权利要求2的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中R¹选自乙基、异丙基和环丙基，所述基团任选地被1个、2个或3个独立地选自下列的取代基取代：F、-OH和-OCH₃。

4.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中R³选自以下基团：

上述基团通过任意的环原子与分子的其余部分连接；并且上述基团任选地被环丙基取代。

5.权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中R⁴选自氢、F、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、环丙基、

6.权利要求5的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中R⁴为氢、F、甲基、

7.化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，其中所述化合物选自：

8.药物组合物，其包含预防或治疗有效量的权利要求1-7中任一项的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体，以及药学上可接受的载体。

9.权利要求8的药物组合物，其为固体制剂、半固体制剂、液体制剂或气态制剂。

10.权利要求1-7中任一项的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体或者权利要求8或9的药物组合物在制备用作ASK1抑制剂的药物中的用途。

11.权利要求10的用途，其中所述药物用于预防或治疗ASK1介导的疾病，其选自慢性脂肪性和纤维性变性引起的病症和疾病；自身免疫性疾病；呼吸道疾病；炎性疾病；慢性肾病；心血管疾病；糖尿病；代谢障碍；心脏、大脑以及肾脏的局部缺血和再灌注后的器官损伤以及神经变性疾病。

12.权利要求11的用途，其中所述药物用于预防或治疗ASK1介导的疾病，其选自非酒精性脂肪肝病(NAFLD)或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、原发性硬化性胆管炎、肝外胆汁郁积性病症；肝纤维化；肝的梗阻性或慢性炎性紊乱；肝硬化；慢性阻塞性肺病(COPD)、特发性肺纤维化(IPF)和急性肺损伤；糖尿病肾病和糖尿病的其他并发症。

13.权利要求11的用途，其中所述药物用于预防或治疗ASK1介导的疾病，其选自与酒精引发的肝硬化或与病毒传染性形式的肝炎相关的胆汁郁积性病变和纤维化病变。

14.式(IN-8)的化合物：

其中：

Hal¹为F、Cl、Br或I；并且

其余各基团如权利要求1-6中任一项所定义。

15.权利要求14的化合物，其为：

16.制备方法，

所述制备方法为制备式(IN-8)的化合物的方法，所述方法包括以下步骤：

其中：

Hal¹、Hal²和Hal³为相同或不同的卤素；

其余各基团如权利要求1-6中任一项所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：将IN-1通过卤化反应得到IN-2；

第二步：使IN-3与DMF-DMA反应得到IN-4；

第三步：使IN-4与R¹-NH₂进行环化反应，得到IN-5；

第四步：IN-5首先进行重氮化反应，随后进行卤化反应得到IN-6；

第五步：IN-6与肼反应得到IN-7；以及

第六步：IN-7与IN-2反应得到IN-8；

或者，所述制备方法为制备式(IV)-1的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中：

Hal¹、Hal²和Hal³为相同或不同的卤素；

PG为羟基保护基；

LG选自H和卤素；

R^a和R^a’在每次出现时各自独立地选自H和C_1-6烷基；或者R^a和R^a’连同其所连接的基团共同构成5-10元环系；

其余各基团如权利要求1-6中任一项所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：将式(IV)-1-a的化合物中的羟基用合适的羟基保护基进行保护，得到式(IV)-1-b的化合物；

第二步：将式(IV)-1-b与R³-LG反应，得到式(IV)-1-c的化合物；

第三步：将式(IV)-1-c的化合物的羟基保护基脱除，得到式(IV)-1-d的化合物；

第四步：将式(IV)-1-d的化合物与甲酰胺反应，得到式(IV)-1-e的化合物；

第五步：将式(IV)-1-e的化合物在有机碱或无机碱以及卤素的存在下进行反应，得到式(IV)-1-f的化合物；

第六步：将式(IV)-1-f的化合物与硼酸或硼酸酯在钯催化剂的催化下反应，得到式(IV)-1-g的化合物；以及

第七步：将式(IV)-1-g的化合物与化合物Int-3-E在钯催化剂的催化下反应，得到式(IV)-1的化合物；

或者，所述制备方法为制备式(V)-1的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中：

Hal¹为卤素；

R’选自-OH、-O-C_1-6烷基和卤素；

LG选自H和卤素；

R^a和R^a’在每次出现时各自独立地选自H和C_1-6烷基；

其余各基团如权利要求1-6中任一项所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：任选地，首先将式(V)-1-a的化合物形成酰卤化合物，然后将其与Int-3-D反应，得到式(V)-1-b的化合物；

第二步：将式(V)-1-b的化合物与甲酰胺反应，得到式(V)-1-c的化合物；

第三步：将式(V)-1-c的化合物在非质子性溶剂中，于加热下反应，得到式(V)-1-d的化合物；以及

第四步：将式(V)-1-d与R³-LG反应，得到式(V)-1的化合物；

或者，所述方法为制备式(V)-2的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中各基团如权利要求1-6中任一项所定义；并且所述反应在氢化条件下进行；

或者，所述方法为制备式(VIII)-2的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中：

Hal¹和Hal³为相同或不同的卤素；

LG选自H和卤素；

其余各基团如权利要求1-6中任一项所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：将式(VIII)-2-a与R³-LG反应，得到式(VIII)-2-b的化合物；

第二步：将式(VIII)-2-b的化合物与叠氮盐在强酸的存在下反应，得到式(VIII)-2-c的化合物；以及

第三步：将式(VIII)-2-c的化合物与化合物Int-3-E反应，得到式(VIII)-2的化合物；

或者，所述方法为制备式(VI)的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中：

Hal¹和Hal²为相同或不同的卤素；

LG选自H和卤素；

R^a和R^a’在每次出现时各自独立地选自H和C_1-6烷基；

其余各基团如权利要求1-6中任一项所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：将式(VI)-a的化合物与酰卤化试剂，在甲酰胺的存在下反应，得到式(VI)-b的化合物；

第二步：将式(VI)-b的化合物与Int-3-D反应，得到式(VI)-c的化合物；以及

第三步：将式(VI)-c的化合物与R³-LG反应，得到式(VI)的化合物；

或者，所述方法为制备式(IX)-1的化合物的方法，其包括以下步骤：

其中：

Hal¹和Hal³为相同或不同的卤素；

LG选自H和卤素；并且

其余各基团如上述所定义；

各步骤的反应条件如下：

第一步：将式(IX)-1-a与R³-LG在金属或金属盐的催化下，于有机碱或无机碱的存在下，任选地在金属配体的存在下反应，得到式(IX)-1-b的化合物；

第二步：将式(IX)-1-b的化合物与化合物Int-3-E在钯催化剂的催化下，任选地在有机碱或无机碱的存在下，任选地在配体的存在下反应，得到式(IX)-1-c的化合物；以及

第三步：将式(IX)-1-c的化合物与甲酸酯或者DMF-DMA，任选地在有机碱或无机碱的存在下反应，得到式(IX)-1的化合物。

17.权利要求16的方法，其中所述卤素为F、Cl、Br或I。

18.权利要求16的方法，其中所述氢化条件为在钯/碳催化下于氢气气氛中进行氢化。