TW201247680A - Amorphous N-benzoyl-staurosporine, processes for the preparation, and use thereof - Google Patents

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201247680 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係有關N-节醯基-十字孢靈素（staur〇sp〇rine)的新 穎、.、σ aa形II，製備N-苄醯基-十字孢靈素的新穎結晶形π的 方法，包含Ν-苄醯基-十字孢靈素的新穎結晶形π的組合 物，和Ν-苄醯基-十字孢靈素新穎結晶在溫血動物（特 別疋人類）之診斷方法或治療方面的用途。 本發明係有關非晶形的Ν-苄醯基_十字孢靈素；製備非 晶形Ν-节醯基-十字孢靈素的方法，包含非晶形ν_节醯基_ 十字孢靈素的組合物，和非晶形Ν_苄醯基_十字孢靈素在 溫血動物（特別是人類）之診斷方法或治療方面的用途。 【先前技術】 藥品，Ν-苄醯基_十字孢靈素被用來作為一種抗腫瘤 劑。Ν-苄醯基-十字孢靈素的製備方法一般是業界已知 的。然而，亦已知的是，相同藥品之不同多晶型在某些具 醫學重要性的性質上確有大幅的差異。因此，Ν_苄醯基_ 十字孢靈素新穎的固態型和新的製備方法是持續需要的。 【發明内容】 根據某一態樣，本發明係提供沁苄醯基·十字孢靈素的 結晶形II。Ν-苄醯基-十字孢靈素結晶形„的尽射線繞射光 譜如圖1所描繪在反射角2Θ為8.7±0.2之處具有一譜峰。該 Ν-苄醯基·十字孢靈素的結晶形„在95%的相對濕度和25。〇 下仍保持為乾燥的。 根據另一態樣，本發明係提供包含固態之Ν_苄醯基·十 165I57.doc 201247680 字孢靈素的組合物，其中至少80重量。/〇的該固態N-节醯基_ 十字孢靈素為X-射線繞射光譜如圖1所描繪在反射角2Θ為 8.7±0.2之處具有一譜峰的結晶形Π。亦提供各式各樣的具 體實施例和變體。 根據另一態樣，本發明係提供包含Ν -节1¾基-十字抱靈 素的結晶形II和醫藥上可接受載體或稀釋劑的醫藥組合 物《該醫藥組合物較佳為經口服投藥者。 根據又另一態樣，本發明亦係有關非晶形的N_苄醯基· 十子孢靈素，製備非晶形N-苄酿基_十字抱靈素的方法， 和包含非晶形N-苄酿基_十字孢靈素的組合物。 根據另一態樣，本發明係提供一種醫藥組合物，包括一 疾病預防上或醫療上有效量的N•苄醯基-十字孢靈素和一 或多種的醫藥上可接受賦形劑。本發明此態樣的醫藥組合 物可調配成例如經口服投藥者。。 八坻银，本發 丨卞筮I的万法。 根據另-態樣，本發明係提供令十字抱靈素和节肝反^ 製備N-节醯基-十字孢靈素的方法。此方法視情況進” 包3播種該反應溶液，以製造非晶形的节酼基_十字不 靈素或N1醯基.十字抱靈相結晶形Η。 根據又一態樣， 字孢靈素的方法， 素的溶液。 本發明係提供製備非晶形Ν-苄醯基-十 涉及喷霧乾燥包含Ν-苄酿基-十字孢靈 防上或醫療上有效 的醫藥上可接受賦 处捉伢包括以所述方法製得之这 量的Ν-节醯基-十字抱靈素和—或 165157.doc 201247680 形劑的醫藥組合物。 根據另一態樣，本發明係提供製備N_苄醯基-十字孢靈 素結晶形π的方法，該方法包含： (a) 提供溶於質子性或非質子性溶劑中的N_苄醯基-十字 孢靈素溶液； (b) 播種N-苄醯基-十字炮靈素的結晶形π，並讓該反應 混合物和一種醇溶劑接觸，形成一種沉澱物：和 ⑷分離此沉;殿物，其乃N_f酿基·十字抱靈素的結晶形 II 〇 也長1供各式各樣的具體實施例和變體。 【實施方式】 除非另有定義，否則本文所用的所有技#和科學術語皆 和本發明有關的一般技術者所公認的定義是一樣的。雖然 任何類似或等同於本文所述的方法和材質皆可用於本發明 的實施和試驗中，但所描述的乃較佳的方法和材質。 對本發明目的而言，以下術語係定義如下。 :晶化合⑯’本文指定為"結晶形„ ”且於下文中稱之為 4醯基-十字抱靈素的結晶形π。透過χ•射線的粉末繞 射，和/或紅外線光譜學作鑑定。 醫樂上可接受"意指其有助於製備—種通常是無毒以及 =生物學上不受歡迎的醫藥組合物，包括對獸醫的使用 σ或人類醫學上的使用是可接受的。 反溶劑"是當其添加至某一 該物質的溶解度的溶劑。 物質的現有溶液中時會降低 165157.doc 201247680 。物乙°可包括（但不限於）粉末’溶液’懸浮液’凝 膠軟膏，乳劑和/或其混合物。術語組合物意涵蓋包含 特定量之特定成份的產物，以及任何直接或間接導致特定 成份以特定量結合的$ .. 產物。組合物”可包括一種單一化合 物或化合物的混合物。"化合物"是-種包括相同化學結構 之分子的化學物質。 術-醫藥組合物’·意涵蓋包含活性成份，構成載體之醫 藥上可接受賦形劑的產物，以及任何直接或間接導致兩種 或多種該等組份的結合’錯合或聚集的產物，或導致一或 多種該等組份分解的產物，或導致—或多種該等組份之其 他類型的反應或相互作用的產物。因&，本發明的醫藥組 合物涵蓋任何藉摻合活性成份’額外的活性成份和醫藥上 可接受賦形劑的組合物。 ' 術語”賦形劑，，意指醫藥組合物中不是活性成份(像是填 料’稀釋劑和載體）的組份。有助於製備醫藥組合物的賦 形劑通常是安全’無毒且既不是生物學上不受歡迎也不是 其他方面不受歡迎的，並且對獸醫的使用和人類醫學上的 使用是可接受的。說明書和申請專利範圍中所用"醫藥上 可接党賦形劑"包括一和一種以上的此種賦形劑。 ’’醫療上有效量"意指當投藥供治療或預防一種疾病之化 合物的量足以對這個疾病的治療或預防產生效果的量。 "醫療上有效量"會依化合物，待治療病患的疾病和其嚴重 性與年齡，體重等等而變。 ' 當指的是一種化學反應時，術語"處理”，”接觸"和"反應" 165157.doc 201247680 本文中是可以交替使用的，並且指的是在適當條件下添加 或混合兩種或兩種以上的試劑，以製得所指和/或所希的 產物。應理解地是，產生所指和/或所希產物的反應未必 直接起因於-開始所添加之兩種試劑的結合，也就是說， 有可能是-或-種以上於混合物中生成的中間物，其最後 導致形成所指和/或所希的產物。 本文所用有關組合物的術語"大體上不含"意指該組合物 不含的物形無法以熟悉本技術者已知的方法偵測出。 術語”非晶形"意指大體上不含結晶形雜質的材料，或是 包含大量之結晶形雜質者。包含大量為雜質之結晶形質的 非晶形材料在此稱之為"基本上是非晶形的Ν_节醯基-十字 孢靈素"。如圖4所示，結晶形雜質的存在不會產生一種對 大體上不含結晶材料的非晶形為典型之暈圈般的漂亮圖 案。大體上不含結晶形的非晶形材料稱之為"Ν_苄醯基-十 字孢靈素的純非晶形"。圖3說明此形態的χ_射線繞射光譜 圖，此處圖案的暈圈形說明實質上不存在結晶構造。譜峰 在這些是結晶形特徵的區域内尤其是找不到的。 實例進一步說明獲得"基本上是非晶形的N_f醯基_十字 孢靈素"和|'N-苄醯基-十字孢靈素的純非晶形"兩者的方 法。 N-苄醢基十字孢靈素已知為（9α，1〇β，11β，13α)_Ν_ (2，3,1〇, 11’12,13 -六虱-10-曱氧基-9-甲基-卜氧_9,13·環氧- 1^1，911-二1^丨。朵[1，2,3-£11:3|，2'，1'-1111]咣咯[3,4-】][1，7]苯并重 氮寧-11-基）甲基-苯甲醯胺）並具有以下的化學結構： 165157.doc 201247680

的=利第5’。93,33。號(，33。專利_案之全文， 式併人本文中）請求N.㈣基·切抱靈^本發明车 系有關如上所述下文稱之為式⑴化合物之N_㈣基y 字抱靈素衍生物之結晶形„的特殊形態，以及㈣㈣陶 基-十字孢靈素的非晶形。 ^同固形的相同藥品也許具有不同的性質，包括其等作 為藥品之用途具機能含意的特徵在具 面(如溶解速率和生物可利用性)可能有很二 地，不同的多晶形物可能會有不同的加工性質，像是吸溼 性，流動性等等，其可能影響作為商業製造用之活性醫藥 品的溶解度。 利用Bragg-Brentano的對交幾何學，在Scintag ΙΝ(： χ又 上測量X-射線的粉末繞射光譜。圖i的χ_射線繞射光譜總 結於表1中。 165157.doc 201247680 表1.N-苄醯基-十字孢靈素之結晶形π改質的粉末狀χ•射線 繞射譜峰 2Θ(度數) ~ΪΑ~ 6.0 7.8 8.7 9.2 9.7 10.1 10.4 11.2 12,6 14.1 15.7 16.8 18.2 18.9 19.3 19.6 20.2 24.5 d-間隔(埃) ~~26Λ 14.8 11.3 10.1 9.6 9.1 8.8 8.5 7.9 7.0 6.3 5.7 5.3 4.9 4.7 4.6 4.5 4.4 3.6 度 強 對 相 中中中強中中中低中中中中中中中中強強中 應謹記在心的是，觀察到的2Θ角或間隔值因所用的特定 繞射儀’化驗人員和樣品的製作技術的不同如有稍許的變 化是可預期的。相對譜峰強度有更多的變化也是可以預期 的。一化合物之精確結晶形的鑑定主要應以對相對譜峰強 度較不具重要性之觀察到的2Θ角為基礎。 本文記錄的每個2Θ角值會存在某誤差限度。一較佳變體 中，Ν_苄醯基十字孢靈素結晶形II的指定誤差限度對每一 譜峰而言約為±0.2。 Ν-苄醯基_十字孢靈素的結晶形π也可用紅外線光譜學描 繪其特徵。結晶形II會表現出如®12之紅外線（IR)光譜分析 的獨有及收圖案° 的光譜分析是於Bruker IFS-55上測量 165157.doc 201247680 的β N-苄醯基-十字孢靈素的結晶形Π具有特有和其他多晶 型相區別的吸收值，IR光譜分析上的譜峰位置為約789， 773 ， 743 ， 704 ， 1066 ， 1026 ， 1458 , 1398 ， 1383 , 1602 ’ 1577，1497，1627，1680，2934 和 3055 公分.丨。本 文記錄的每個特定吸收值會存在某誤差限度。特定吸收值 的指定誤差限度在1900-800公分」範圍内約為2公分-1。 一或一種以上的物理性質和/或光譜性質可以是描繪N_ 节醢基·十字孢靈素的結晶形或多晶型特徵的基礎。 本發明亦提供一種包含固態N-苄醯基-十字孢靈素的組 合物，其中組合物中固態N_苄醯基-十字孢靈素的至少8〇0/〇 疋結晶形II。該組合物的較佳型態為在調配醫藥產品時適 合用來作為活性成份的^[•苄醯基-十字孢靈素固體粉末。 組合物中固態N-苄醯基·十字孢靈素剩餘的部份，也就是 N-苄醯基-十字孢靈素總重的2〇%或少於2〇%的部份可以是 例如其他結晶形的N_苄醯基_十字孢靈素。一特定具體實 施例中，s亥組合物包含佔組合物中固態N_苄酼基十字孢 靈素總重至少90% N-苄醯基·十字孢靈素的結晶形另一 特定具體實施例中，該組合物包含佔組合物中固態节酿 基-十字抱靈素總重至少95% Ν·$醯基·十字抱靈素的結晶 形II。 另一層面中，本發明亦提供純化十字孢靈素的方法。同 時，本發明並不限定於任何特殊的理論，發明人發現一種 涉及以下步驟的方法： ⑷在醇溶劑中提供十字孢靈素的懸浮液； 165157.doc 201247680 (b) 讓此懸浮液和f烷磺酸接觸獲得一種溶液； (c) 再讓此溶液和三乙胺接觸；以及 (d) 分離出產物。 該方法進-步包括在f子性或㈣子性溶财清洗該產 物。質子性溶劑的非限制性實例有乙醇，而非質子性溶劑 的非限制性實例為四氫吱喃（THF)。本發明亦提供一種方 法’用來： ⑷在質子性或非質子性溶劑中提供粗十字孢靈素的溶 液； (b)用純的十字抱靈素播種該溶液； ⑷讓此反應混合物和—醇系溶劑接觸形成—種沉激物； 以及 (d)分離出產物，其係經純化的十字孢靈素。 原料經純化後，該物質可被轉換成N_苄醯基·十字孢靈 素的結晶形II或非晶形的N_节酿基_十字抱靈素。該物質可 破轉換成N-苄酿基-十字孢靈素的結晶形π，此方法包括： (a) 在-醇系溶劑中，像是乙醇中，讓十字抱靈素和节酸 酐反應；以及 (b) 用N-节醯基—十字孢靈素的結晶形Π播種該反應溶 液’以製得產物； (c) 分離從N-苄醯基-十字孢靈素結晶出的產物。 材料或可利用以下方式轉換成非晶形的N _苄醯基-十字 孢靈素： ⑷在-溶劑中’像是乙醇或THF中，讓十字抱靈素和节 165157.doc •11 - 201247680 酸酐反應；以及 (b)用非晶形的N-苄醯基-十字孢靈素播種該反應，以製 得產物； (0分離為非晶形苄醯基-十字孢靈素的產物。 產物或可進一步用溶劑清洗多次以製得基本上為非晶 形的N-苄醯基_十字孢靈素。 喷霧乾燥的技術也可用來製備純粹為非晶形的节酿 基-十字孢靈素。

B4 165157.doc •12· 201247680 本發月也提供包含基本上為非晶形之N_苄醯基_十字孢 靈素的組合物4發明亦提供包含純粹為非晶形之n_节酿 基-十字孢靈素的組合物。 亦提供製備N-苄醯基_十字孢靈素之結晶形π的方法。該 方法涉及： ⑷在質子性或非質子性溶劑中提供Ν_节酿基-十字抱靈 素的溶液； ⑻用N-f酿基_十字抱靈素的結晶形π播種該溶液， ⑷讓此懸浮液和-醇系溶劑接觸形成—種沉殿物；以及 (d)分離出產物，其係Ν_爷酿其斗_空7Λι #古， 货卞醞I _十子孢靈素的結晶形 II。 質子性或非質子性溶劑的非限制性實例列於下表中： 實例 苄醇 乙醇

二甲亞砜（DMSO) 二甲醯胺（DMF) THF 聚乙二醇（PEG 200) 從上面所指明溶劑所得結晶形^之^射線粉末繞射圖的 譜.強度為中到低，因為在晶格結構内存在不同的溶劑分 165157.doc 201247680 子其強度會有一些變化。 >具體實施例令，係將N_节酿基·十字抱靈素溶解於 醇中透過添加N_节醯基·十字抱靈素結晶形η的種晶而沉

;殿’並添加乙醇竹i G 辟作為反溶劑，以及獲得Ν_苄醢基_十字妁 靈素的結晶形11。該方法具有高的再現性，並且所得結: 產物有良好的過濾性質。Β6中殘餘的溶劑量約為4.3重量/ 重量％的节醇和0.5」重量/重量％的乙醇。流程圖解如下：

爷醇和乙醇中 的結晶反應 Β4 IP-方法

B6 上面有關各別結晶形的選擇性製備條件並非決定性的。 例如其通常可以改變像是式⑴化合物相對溶劑和反溶劑重 量比的參數。 也提供包含N-苄醯基-十字孢靈素的結晶形π或非晶形& 节醯基-十字孢靈素和醫藥上可接受载體的醫藥組合物。 除了活性化合物以外，該醫藥組合物另包括一或一種以上 的醫藥上可接觉載體，亦已知為一般缺乏藥學活性但具有 165157.doc • 14· 201247680 各種有用性質（例如可增加溶解度，殺菌力，生物可利用 η :易使4藥組合物調配之特性)的賦形劑。這些載體 為醫藥上可接受者，代矣仗楚$旦士 θ 代表其荨*攝取適量時對人類或動物 是無害的並且和-既^配方中的其他成份是相容的。載體 可乂疋固L帛固態或是液態，且可和大塊的化合物作調 配，但最終仍為單元劑量形的配方，也就是物理上是分離 二直到包含—特定量的活性成份，像是錠劑或膠囊。該醫 藥組合物可包括除了本發明化合物以外’一或多種的活性 醫藥化合物。 該醫樂組合物可以县縣、分％ .. . J 乂疋懸洋液，溶液，樂液酉也，氣溶膠 或固態的劑型。 5亥醫藥組合物可以是各種適合不同模式投藥的配方，包 括（仁不限於）吸入，口服，直腸投藥，非經腸投藥（包括皮 :’皮内，肌内和靜脈内投藥），可植入投藥和經皮投 藥 已知隋况中，最適當的投藥途徑視所投藥對象的症 狀所希的治療期間’待治療疾病的種類和嚴重性，以及 待使用的特殊配方而定。酉己方可以是散裝或為單位劑型 者，並且對一已知配方而言可以業界熟知的方法製備。 單位劑型中所包括之活性成份的量視其中所含活性成份 之配方的類型而定。醫藥組合物通常包括約丨重量％至約 99重量％的活性成份，對口服投藥而言較佳為約1重量❶/〇至 約5〇重里％，而對非經腸投藥而言約0.2重量％至約20重量 %。 適合口服投藥用的配方包括膠囊（硬式或軟式），扁囊 165157.doc •15- 201247680 劑，旋劑，糖漿’拾 的活性化合物；^ 樂片，每一種皆包含一已確定量 溶液或懸浮液.:g ^末或粒狀，水性或非水性液體令的 以任何製藥I二&包’由或油包水的乳液。此等配方可 -種適當的載體或多種人㈣其和活性化合物與 活性成份的量可如“。母單位劑量固體配方中 所述。 月•技藝中製備n•苄醯基-十字孢靈素 藥二一層面係提供使用該等化合物和本發明之醫 來…預/D療方法。本發明的化合物和經合物可將-用 =療和預防|33。專利"斤揭示疾病所用之有效量投予一 二 V對象意指人類或動物，較佳為人類。本發明 物°。η物包曰括任何可以本發明化合物作安全治療的動 ·.'、者的疋結晶形II和非晶形的醯基·十字抱靈素 因蛋白活化酵素C(PKC)的抑制作用而具有高抗增殖和抗 腫瘤的活性’其極適合用來治療癌症。再者，PKC的高選 擇性和有效的抑制作用對病患具有優良的臨床效果，也就 是延緩或塵制疾病的發展，是同樣可接受的攝生法。潛在 的應用包括各種的固體腫瘤’較特定而言例如是乳癌，結 腸癌’卵巢癌和血癌。此外，其他各種被PKC活性影響的 徵兆可以這些組合物作有效的治療，包括抗多/藥性 _R)’目前使用m症化療法和發炎性疾病最主要 的問題之一。 本發明特別係有關本文揭示用來治療該等疾病之一或用 來製備其治療用的藥學試劑的結晶形Π和非晶形的N_节醯 165l57.doc 201247680 基-十字孢靈素6 本發明亦係有關治療罹患該等疾病之溫血動物的方法， 特別是腫瘤的疾病’其中係將某量（尤其是具有抗增殖和 抗腫瘤功效的量）的結晶形II或非晶形的N_节醢基·十字抱 靈素（其可有效對抗有關的疾病）投予需要此一治療的溫血 動物。再者，本發明係有關結晶形Π或非晶形的N_节醯基_ 十字孢靈素用於抑制上述PKC的用途，或用來製備可用以 治療人類或動物體的醫藥組合物，特別是用來治療各種固 體腫瘤，較特定而言例如是乳癌，結腸癌，卵巢癌和血 癌。視人種，年齡，各別症狀’投藥模式和討論中的臨床 徵候而定，將有效劑量（例如日劑量為約N2500毫克，較佳 為1-1000毫克，尤佳為5-500毫克）投予體重約7〇公斤的溫 血動物。 本發明亦係有關包含-有效量（尤其是預防或治療該等 疾病之一的有效量）之結晶形π或非晶形的式⑴节醯基_ 十予孢靈I ’連同醫藥上可接受载體的藥劑，此醫藥上可 j載體適合於局部；_，例如口服或直腸或非經腸的 藥並且可以是無機的或有機的和固體或液體的。包含活 t成份連同稀釋劑⑼如乳糖1㈣，隸，甘露糖 知’山梨糖醇，纖維素和/或甘油；和/或潤滑劑，例如矽 /月石硬月曰酸或其鹽’典型為硬脂酸鎂或硬脂酸鈣； 和/或PEG)的鍵劑或明膠膠囊特別係用來供口服投藥用。 :劑可同樣包含黏合劑’例如石夕紐酸鎮，澱粉，通常是玉 …小麥或米殿粉，明膠，甲基纖維素，級基甲基纖維素 •65l57.doc 201247680 鈉和/或聚乙歸基吼略㈣；以及如果真的想要的話亦 包括崩解劑’例如澱粉’瓊脂’》每議酸或其鹽，通常為海 藻酸鈉；和/或起泡的混合物，或是吸附劑，t色劑，調 味料和甜味劑。本發明具藥學活性的化合物可進一步以供 非經腸投藥的製劑或浸泡溶液的型態使用。此等溶液較佳 為等滲透壓的水溶液或懸浮液，這些可在使用前先行製 備，例如對包含活性成份（不論是單獨或和載體（例如甘露 糖醇）一起）的凍乾製劑而言。製藥物質可經消毒和/或可包 含賦形劑，例如防腐劑’安定劑，溼潤劑和/或乳化劑； 溶解劑；調節滲透壓的鹽；和/或緩衝液。本發明的藥學 製劑(如果真的想要的#，其可包含其他具藥學活性的物 質，像是抗生素）以本身已知的方式製備，例如透過傳統 的混合，粒化，塗覆，溶解或凍乾方法，並包含約卜 100%(尤其是約1。/。至約20%)的多種或單一活性物質。 本發明進-步藉參考下列詳細說明本發明之化合物和组 合物的製備以及其等之用途的實例而定義β對熟悉此項技 術者而言，材料和方法的許多改變可在不偏離本發明之目 的和利益情況下得以實施是顯而易知的。後續的實例無意 用來限制本發明之範圍為上文所定義的範圍或如以下之申 請專利範圍所定義的範圍。 實例 實例1利用甲烷磺酸和三乙胺之十字孢靈素扪變為十字 孢靈素Β2的純化方法 進料十字孢靈素Β1和乙醇至一反應器中。加熱懸浮液至 165l57.doc •18- 201247680 約70°C *將甲烷磺酸加入該懸浮液中，並老化所得溶液。 添加活化的木炭和Hyflo，並老化該混合物。過渡此懸浮 液，並用乙醇清洗該濾器裝置和濾餅多次。將清澈經過據 的’谷液移轉到另一反應器中’並冷卻至約60。(3。緩緩將於 乙醇中稀釋的三乙胺加入該反應混合物中。之後，冷卻此 懸浮液至約20°C並予以老化。十字孢靈素B2以過渡的方式 分離。用乙醇漂洗產物數次。 實例2透過結晶純化粗的十字孢靈素則到十字孢靈素B2 進料十字孢靈素B1和苄醇至一反應器中。加熱懸浮液至 約85 C。將活化的木炭和Hyflo加入該溶液中，並再次老 化該混合物。約90°C的溫度下過濾此懸浮液。用节醇清洗 s亥慮裝置和滤餅多次。將清澈經過丨慮的溶液移轉到另_ 反應器中，並冷卻至約701。溶液以懸浮於乙醇中的十字 孢靈素B2播種。之後，將乙醇加入此懸浮液中並老化此懸 浮液，然後冷卻至約0°C。約〇°C下再度老化該懸浮液至少 2小時。十字孢靈素B2以過濾的方式分離。用乙醇漂洗產 物數次。 實例3苄基化十字孢靈素B2以製備基本上是非晶形的节 醯基·十字孢靈素 進料含苄酸酐的十字孢靈素B1，乙醇和水至一反應器 中。加熱該反應混合物至約70°C。過濾此溶液並用乙醇清 洗該濾器裝置和濾餅多次。將經過濾的溶液移轉到另一反 應器中，並冷卻至約60°C。緩緩地將水加入此溶液中《用 非晶形的N-苄醯基-十字孢靈素播種。老化此懸浮液，然 165157.doc -19- 201247680 後冷卻至約20°C，然後再予以老化。N-苄醯基_十字抱^靈 素以過濾的方式分離。用純乙醇漂洗N-节醯基_十字？包靈 素溼的濾餅數次。然後將溼的濾餅再懸浮於乙醇中的據器 裝置中，約25°C下老化，然後冷卻至約〇_5。(：，然後再予以 老化。重覆該方法步驟數次。N-苄醯基-十字孢靈素以過 濾的方式分離。在外部溫度為約40°C以及真空度為約1〇_ 20毫巴的真空烘箱中乾燥此溼的濾餅約24小時，獲得產 物：35-40克的乾濾餅：27克的理論減輕重量。產率：相 對B 1 10 0 %為約8 2 %的理論減輕值。 上述反應中的乙醇可以THF取代。 實例4苄基化十字孢靈素Β2以製備結晶形的〜苄醢基_十 字孢靈素Β4 進料含苄酸酐的十字孢靈素Β2，純乙醇和水至一反應器 中。加熱該反應混合物至約7(TC並予以老化。反應結束之 際’用懸浮於純乙醇中的N-苄醯基-十字孢靈素結晶形11播 種該反應混合物》老化後，緩緩地將純的乙醇和水加入此 懸浮液中。再度老化此懸浮液，然後在N_苄醯基-十字抱 靈素以過濾方式分離之前冷卻至約〇»c。用純的乙醇漂洗 N-苄醯基-十字孢靈素溼的濾餅數次。然後置於外部溫度 為60°C以及真空度為約5_30毫巴的真空烘箱中乾燥約16小 時，獲得產物：39.70克，乾式濾餅：27.2克的理論減輕重 量。產率：相對B1 1〇〇%約91.5%的理論減輕值。 實例5利用苄基醇和乙醇製備結晶形1](的N_苄醯基-十字 孢靈素 165157.doc -20- 201247680 進料粗的十字孢靈素和苄基醇至一反應器中。加熱該混 合物至85°C，並接著老化此溶液。冷卻溶液至約7〇。〇，然 後用懸浮於純乙醇中之N-苄醯基-十字孢靈素B6純的結晶 形II播種》之後’添加乙醇’並老化此懸浮液’然後在N_ 苄醢基-十字孢靈素結晶形II以過濾方式分離之前冷卻至約 〇°C。溼的濾餅用乙醇漂洗數次並乾燥之。 實例6利用乙酸和乙醇製備結晶形11的〜苄醯基-十字孢 靈素 進料粗的十字孢靈素和乙酸至一反應器中。加熱該混合 物至約70°C，並接著老化此溶液。用懸浮於純乙醇中之 苄醯基-十字孢靈素B6純的結晶形Π播種此溶液。之後，添 加乙醇至該懸浮液中’並老化此懸浮液，然後在N_节醯 基-十字抱靈素結晶形Η以過據方式分離之前冷卻至約 20°C。溼的濾餅用乙醇漂洗數次並乾燥之。 實例7利用PEG製備N-苄醯基·十字孢靈素的結晶形π的 晶體 進料粗的N-苄醯基-十字孢靈素和PEG至一反應器中。 加熱該混合物至約90°C ’並接著老化此溶液。冷卻此溶液 至約70°C，然後用懸浮於純乙醇中之N-苄醯基·十字抱靈 素B6純的結晶形II播種。之後，緩緩添加比例為1 : 1的乙 醇和水，並在冷卻至20°C以前老化此懸浮液。以過渡方式 分離N-节酿基-十字抱靈素的結晶形II。渥的濾餅用乙醇漂 洗數次並乾燥之。 實例8利用DMSO製備N-苄醯基-十字孢靈素的結晶形π 165157.doc -21 - 201247680 進料N-苄醯基-十字孢靈素和DMSO至一反應器中。加熱 該混合物至約70°C，並接著老化此溶液，然後用懸浮於乙 醇中之N-苄醯基-十字孢靈素B6純的結晶形II播種》之 後，添加乙醇至懸浮液中，並在70°C下老化此懸浮液，然 後冷卻至約20。(：。以過濾方式分離N-苄醯基十字孢靈素 的結晶形II以前再度老化此懸浮液。產物用乙酵漂洗數次 並乾燥之。 實例9利用DMF製備N-苄醯基·十字孢靈素的結晶形η 進料Ν-苄醯基-十字孢靈素和DMF至一反應器中。加熱 該混合物至約70°C，老化此溶液，然後用乙醇中之Ν-节醯 基-十字孢靈素B6純的結晶形Π播種。之後，添加乙醇至懸 浮液中，並在約70°C下老化此懸浮液，然後冷卻至約 20°C。以過濾方式分離N-苄醯基十字孢靈素的結晶形卩以 前再度老化此懸浮液。產物用乙醇漂洗數次並乾燥之。 實例10利用DMF製備N-苄醯基-十字孢靈素的結晶形Η 進料非晶形的Ν-苄醯基-十字孢靈素和THF至一反應器 中。加熱該混合物至約65°C，老化此溶液，然後用THF中 之N-苄醯基-十字孢靈素B6純的結晶形II播種。老化此懸 浮液，然後冷卻至約20°C，並以過濾方式分離N-苄醯基-十字孢靈素的結晶形Π以前再度老化此懸浮液》產物用 THF漂洗數次並乾燥之。 實例11利用乙醇製備N-苄醯基-十字孢靈素的結晶形Π 進料非晶形的N-苄醯基-十字孢靈素和乙醇至一反應器 中。加熱該混合物至約70°C，老化，然後用乙醇中之ν-节 165157.doc • 22· 201247680 醢基-十字孢靈素B6的結晶形II播種。老化此懸浮液，冷 卻至約20°C，並以過濾方式分離N-苄醯基-十字孢靈素的 結晶形II以前再度老化此懸浮液。產物用乙醇漂洗數次拉 乾燥之。 實例12喷霧乾燥實驗以獲得非晶形的PKC412 將10克的PKC412(結晶形II)溶解於160克的二氯甲烷中 以製備進料溶液。進料備妥後被原子化成液滴，有機溶劑 透過加熱的氮於乾室中蒸發出來，加熱的氮會導致生成非 晶形的PKC412 »入口溫度設定為60°C，而出口溫度則設 定為40°C。喷霧乾燥後殘餘的溶劑量約為1%重量/重量。 實例13喷霧乾燥實驗以獲得非晶形的PKC412 將7克的PKC412(結晶形II)溶解於約400克的THF中以製 備進料溶液。進料備妥後被原子化成液滴，有機溶劑透過 加熱的氮於乾室中蒸發出來，加熱的氮會導致生成非晶形 的PKC412。入口溫度設定為ii〇_i2〇t：，而出口溫度則設 定為70-80°C。喷霧乾燥後殘餘的溶劑量約為3%重量/重 量。真空下進一步乾燥PKC412，獲得不含溶劑的材料。 實例14喷霧乾燥實驗以獲得非晶形的PKC412 將7克的PKC412(結晶形Π)溶解於約350克70 : 30重量/重 量的乙醇/乙酸中以製備進料溶液。進料備妥後被原子化 成液滴，有機溶劑透過加熱的氮於乾室中蒸發出來，加熱 的氮會導致生成非晶形的PKC412。入口溫度設定為 215°C，而出口溫度則設定為12(rc。喷霧乾燥後殘餘的溶 劑量低於0.5°/〇。不需要作進一步的傳統乾燥處理。 165157.doc •23· 201247680 實例I5含N-苄醯基聿 字抱靈素的結晶形的鍵铜 含1〇〇毫克標題中所命名之活 列組成製備： 物質仏劑㈣是依下 組合漏^¥ * -____ 活性成份 --------(毫克1 結晶乳糖 100

Avicel 240 PVPPXL 80 一種高度分散的石夕勝 2〇 硬脂酸鎂 2 製備方法：活性物質和載體材料混合，並置於—壓錠機 (Korsch EKO，衝壓直徑為丨〇毫米）上加以壓縮 Avicel是微晶纖維素（FMc，費城，美國） PVPPXL是聚乙稀基聚。比„各β定酮，經交聯的（巴地斯，德 國） "

Aerisol疋二氧化石夕（Degussa，德國） 實例16含N-V醯基-十字抱靈素的結晶形η的膠囊 含1 〇〇毫克標題中所命名之化合物作為活性物質的膠囊 通常是依下列組成製備： 組合物含量 (毫克） —---- 活性成份 100 Avicel 200 PVPPXL 15 一種高度分散的矽膠 2 硬脂酸鎂 1.5 總計 318.5 膠囊藉混合該等組份並將混合物填充至硬式明膠膠囊 (尺寸1)中而製得。 【圖式簡單說明】 165157.doc •24- 201247680 圖1顯示N-苄醯基-十字抱靈素結晶形11的X_射線粉末繞 • 射圖譜。 圖2顯示N-苄醯基-十字孢靈素結晶形11之特有的紅外線 光譜。 圖3顯示N-苄醯基-十字孢靈素純非晶形的X-射線粉末繞 射圖譜。 二4顯示N-节醯基-十字孢靈素基本上為非晶形的X-射線 粉末繞射圖譜。 165157.doc •25-

Claims (1)

1. 201247680 七、申請專利範圍： • 1. 一種製備非晶形N-苄醯基-十字孢靈素之方法，包括： (a) 讓十字孢靈素和苄酸酐反應，以形成一溶液； (b) 用非晶形的N-苄醯基-十字孢靈素播種該溶液；以及 (c) 分離該產物。 2. —種化合物’係非晶形的N-苄醯基-十字孢靈素，具有大 體上如下圖3或圖4所示相同的X-射線繞射圖譜：

   165157.doc 201247680 範团：2.00-40.00(度）連續掃描速率：0.50度/分饋

   3 . 一種醫藥組合物，包括： (a) 如請求項2之化合物；和 (b) —種醫藥上可接受載體或稀釋劑。 4.如請求項3之醫藥組合物，進一步包括一或多種醫藥上 I65157.doc 201247680 可接受的Η形劑。 月求項3之醫藥組合物’其係適合 型〇 服投藥用的劑 6 ·如請求項3之 或溶液。 醫藥、、且口物’其中該劑型選自錠劑，膠囊 7. 一種如請求項2之非晶祕㈣基·十字抱靈素用 治療腫瘤疾病用的藥劑的用途。 來製備 165157.doc