TW201114907A - Process for the production of carbohydrate cleavage products from a lignocellulosic material - Google Patents

Process for the production of carbohydrate cleavage products from a lignocellulosic material Download PDF

Info

Publication number
TW201114907A
TW201114907A TW099113304A TW99113304A TW201114907A TW 201114907 A TW201114907 A TW 201114907A TW 099113304 A TW099113304 A TW 099113304A TW 99113304 A TW99113304 A TW 99113304A TW 201114907 A TW201114907 A TW 201114907A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
alcohol
xylose
sugar
hemicellulose
lignin
Prior art date
Application number
TW099113304A
Other languages
English (en)
Inventor
Karin Fackler
Chularat Krongtaew
Kurt Messner
Ortwin Ertl
Original Assignee
Annikki Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from AT0125209A external-priority patent/AT508724A1/de
Priority claimed from AT0203009A external-priority patent/AT509307A1/de
Application filed by Annikki Gmbh filed Critical Annikki Gmbh
Publication of TW201114907A publication Critical patent/TW201114907A/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P5/00—Preparation of hydrocarbons or halogenated hydrocarbons
    • C12P5/02—Preparation of hydrocarbons or halogenated hydrocarbons acyclic
    • C12P5/023—Methane
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
    • C12P7/04—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
    • C12P7/06—Ethanol, i.e. non-beverage
    • C12P7/08—Ethanol, i.e. non-beverage produced as by-product or from waste or cellulosic material substrate
    • C12P7/10—Ethanol, i.e. non-beverage produced as by-product or from waste or cellulosic material substrate substrate containing cellulosic material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
    • C12P7/04—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
    • C12P7/06—Ethanol, i.e. non-beverage
    • C12P7/14—Multiple stages of fermentation; Multiple types of microorganisms or re-use of microorganisms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
    • C12P7/04—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
    • C12P7/18—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic polyhydric
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
    • Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
    • Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
    • Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
    • Y02E50/30—Fuel from waste, e.g. synthetic alcohol or diesel

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Processing Of Solid Wastes (AREA)

Description

201114907 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種由木質纖維素材料製備醣分裂產物 (特別是糖’諸如五碳糖及六碳糖）的方法。另外，本發 明係關於一種由該糖獲得醇的方法。爲本說明書及申請專 利範圍之目的’ “糖”一詞也意圖涵蓋“糖寡聚體”。 【先前技術】 關於原油短缺及玉米作爲能量供應物之討論，可再生 原料木質纖維素（稻草、木料、廢紙等）在作爲燃料或化 學產物用之原料上是很重要的。木質纖維素之轉化可以二 種基本不同的方式進行：1) “熱化學平臺（
Thermochemical Platform)"，其中該木質纖維素首先被 氣化’且將該合成氣體合成爲所要產物，及2) “糖平臺 (Sugar Platform ) ’其中主要焦點在於利用結合於聚 合物纖維素及半纖維素中的糖，同時木質素主要仍供能量 之用。可將本發明定位於第二方式。 與澱粉相反地，木質纖維素之糖存在於纖維素及半纖 維素之緊密交聯的聚合結晶構造中，該等構造另外以木質 素外層覆蓋，因此導致極緊密之複合物。由木質纖維素獲 得糖之最明顯的方式將是直接使用纖維素酶及半纖維素酶 。然而，對於稻草及木料原料，該等使用因上述複合物之 密度而受妨礙。因其高分子量，酶不能滲透過窄的孔以進 入該木質纖維素。此意爲：必須採取第一步驟以增加該木 -5- 201114907 質之孔隙度且藉此能有另外之酶致醣化作用。 此第一步驟稱爲“預處理”（分解）。這一貫地是極 複雜的，以致例如在“第二代生物燃料”製造期間，高達 1/3的製造成本必須花費於此，而對成本效率具有負面影 響。所用之方法專注於初步液化該半纖維素（例如水蒸氣 爆發預處理、稀酸預處理）或專注於藉由液化木質素（例 如石灰預處理、氨預處理）增加孔隙度。 爲要分別獲得糖及其寡聚體，經分解之木質纖維素基 材可以另外酶致處理，其中預處理之形式對於酶活性及產 率有強烈的影響。在高的反應溫度下，通常形成有毒的破 裂產物（例如糠醛），其在直接附帶之乙醇發酵的情況中 可以抑制酵母；參見例如Chandra et al.，Advances in Biochemical Engineering/Biotechnology, 1 08:67, 2007;
Mansfield et a 1., Biotechnol. Prog. 1 5:8 04, 1 999 ° 這些方法之嚴重的缺點是：彼是能量密集的且主要是 在稍低於200 °C之溫度下進行。 在此領域中之技術改良，例如因低溫方法（亦即在低 於1 〇 〇 °C之溫度下）之發展所致者，會是代表木質纖維素 原料之任何實際利用的決定性的進步。這是本發明之目的 〇 由EP 1 02 5 3 05 B1得知木質素解聚之化學方法（銅 系統）。彼是基於與過氧化氫或有機氫過氧化物結合之複 合銅的催化效果且能在低於1〇〇。〇之溫度下氧化分裂木質 素。在此方法中所用之複合劑是吡啶衍生物。已可能在合 -6- 201114907 成之木質素模型上證明：當使用H2o2作爲氧化劑時，發 生該木質素分子之醚鍵的分裂，藉此該木質素聚合物崩解 成寡聚的亞單元。使用具有過量有機氫過氧化物的該銅系 統，可以使木料去木質化。以H2o2爲底質之系統就技術 可行觀點是較佳的，已經測試作爲牛皮紙漿之過氧化物漂 白中的漂白添加劑，且已導致經改良之去木質化速度及較 高之白度。 另夕f，由'* Oxidation of wood and its components in water-organic media ” ， Chupka et al., Proceedings:
Seventh International symposium on wood and pulping chemistry, Vol. 3, 3 7 3 - 3 8 2, Beijing P.R. China, May 25-2 8，1 9 9 3得知：若將有機溶劑（例如ο m S O、丙酮、乙醇） 添加至水性反應介質中’則木料及木質素之氧化的鹼性催 化作用大幅地增加。另外’作者們提議：在n以上之pH 値時’發生木料及木質素之氧化的急劇增加。 由WO 01/〇592〇4得知紙漿之製造方法，其中原料進 行預處理’在該預處理中該原料用緩衝溶液及去木質化觸 媒（過渡金屬）處理。去木質化係在氧、過氧化氫或臭氧 之存在下進行。 【發明內容】 相反地’依本發明之製備糖之方法特徵在於以下手段 之組合： —用含有醇（特別是Cl_4醇類或酚）且具有在n.〇 201114907 及14.0之間的pH値的水溶液處理木質纖維素材料 ，以分裂木質纖維素，且將分裂產物與該材料分離 ，藉此獲得富含纖維素及半纖維素之材料，及 -用至少一種醣分裂酶處理所得之富含纖維素及半纖 維素之材料，以獲得該醣分裂產物。 脂族或環脂族之單或多價醇類或酚類，例如（^.6醇 類，特別是Cb4醇類，諸如甲醇、乙醇、丙醇及丁醇， 包括其異構物；二醇類（乙二醇類、丙二醇類、丁二醇類 、戊二醇類、己二醇類）、甘油 '丙烯醇、丁烯醇、環戊 醇、環己醇、苄醇；或酚類，諸如酚類、甲酚類、鄰苯二 酚類、萘酚類，以及胺基醇類，諸如乙醇胺、甲醇胺及己 醇胺適合作爲醇類。C t _ 4醇類是較佳的。爲供本專利申請 案之目的，酚類也包括在廣義的“醇”一詞中。 再者，木質素萃取物之醇溶液分別對木質素及多縮木 糖分裂產物的另外再處理提供有利的選擇。 在依本發明之方法中，醇類較佳以10至70體積％， 例如20至50體積％，較佳地30至40體積％之量存在於 水溶液中。 在依本發明之方法中，該木質纖維素材料較佳以3至 40重量％ ’例如5-40重量％，特別地5-20重量％之原料 密度之量存在於該水溶液中。 較佳地，該木質纖維素在低於1 0 0 °C，諸如在低於8 0 °C，例如60°c之溫度下分裂。 p Η値可以利用鹼，較佳是無機鹼，例如苛性鈉溶液 -8 - 201114907 調節。 本發明一方面是基於以下之了解：與以另外方式（特 別是不添加醇）去木質化之材料相比，以含有醇類（特別 是C ! .4醇或酚）的含水鹼性過氧化氫溶液（其具有11.0 〜1 1.4之PH値）處理之木質纖維素材料可以更高產率地 酶致處理成醣分裂產物，諸如糖類。 主要地，五碳糖及六碳糖以醣分裂產物形式被形成。 較佳之糖類包括木糖及葡萄糖。 依本發明之方法的較佳具體實例特徵在於富含纖維素 及半纖維素之材料用木聚醣酶及纖維素酶處理以萃取糖類 〇 稻草、能量草（例如風傾草、象草）或馬尼拉麻、西 波爾麻、甘蔗渣 '非典型木質纖維素基材（諸如小麥，例 如米小麥），較佳地稻草、能量草、甘蔗渣或小麥，特佳 地稻草或甘蔗，例如稻草，較佳用來作爲木質纖維素材料 。稻草具有高度疏水性表面，以致用水潤濕彼會有問題。 已顯示：藉由使用醇，甚至在無壓力下可能將反應溶液導 入該基材之孔中’且以反應溶液取代所存在之空氣。此外 ’已顯示：醇加速從稻草萃取該分裂產物，且有助於將該 木質素分裂產物保持於溶液中。另外，已顯示：相反地， 半纖維素及其分裂產物的溶解性因醇而降低，且因此該半 纖維素保持於該基材中。 藉由在分解方法後從該基材壓出該液相，基材濃度增 加以致需要較少量的酶以分別供酶致水解及供隨後之其他 -9- 201114907 酶致處理》 在製備醇時，酶成本是重要的成本因素。醇之結果是 :在含有木質素及其分裂產物的鹼性範圍中之反應期間， 可能已釋出之該等半纖維素之溶解性劇烈地降低，且該等 半纖維素仍結合至該基材。該方法之優點是該木質素降解 之高度選擇性’在由該固體分離出萃取液的情況中，優點 是在該萃取液中極低濃度之半纖維素及其分裂產物，因爲 該半纖維素保持於固體中且因此被保留以供糖之酶致水解 及萃取。 另外，該木質素萃取物之醇溶液提供該木質素之另外 再處理及由木質素製造產物的經改良的可能性。 另外，已顯示：藉由使用醇（特別是Ci-4醇或酚） 於在低於1 oot下之鹼分解作用中，半纖維素之降解大體 上被抑制，以致可得約全部的半纖維素已供木糖之另外的 酶致分裂及轉變成高品質產物的作用，且在該分解期間不 會部分地降解，且不會在諸如其他方法中累積成木質素/ 糖混合物。 藉由在分解時所進行之去木質化，木質纖維素材料之 細胞壁的孔隙度增加，例如在稻草的情況中，該孔隙度增 加至一種獲致以下情況之程度：幾乎全部木糖對於木聚糖 酶是可接近的，且約100%之木聚糖可被水解且可獲得木 糖。這使得依本發明之方法特別適合於與該木糖之酶致轉 化結合之較高品質產物的製造。在進行此方法時，酶致轉 化可以直接發生於木糖溶液及固體之混合物中，或在由該 -10- 201114907 固體分離出之木糖溶液的情況下發生。 在由殘餘固體另外製造醇時（此是在該木聚糖之酶致 水解及依本發明之木糖轉化成木糖醇之後），酶成本是重 要的成本因素。彼部分也是因爲酶對該木質素之非專特結 合，參見例如同上述之Chandra et al, 2007。木質素之部 分移除降低此種活性損失，且具有省成本效果。 對於隨後之酶致方法的優點是例如：在萃取液中極低 濃度之半纖維素及其分裂產物是起因於該木質素降解之高 選擇率，而糖聚合物幾乎完全被保留，該半纖維素維持固 體形式且因此被保留以供酶致水解及糖萃取以及其另外之 轉變。依本發明之結果是最大的材料利用率及，例如與木 糖脫氫酶之使用相關地，所述方法之高的成本效率。 木糖轉變成木糖醇之方法的實施可以在木糖直接在固 體/液體混合物中的酶致釋出之後進行，該混合物係依本 發明之方法獲得而另外增加整個方法之成本效率。 在轉變成木糖醇的情況中，在該固體已經壓出後仍留 在基材中之分解方法所得的殘餘醇可直接用來作爲將 NAD再生成NADH之醇脫氫酶的基材。若該方法被設計 以致，爲此目的，仍留在反應混合物中之分解所得的殘餘 醇被（部分地）消耗，則由產物溶液移除醇變得（部分地 )多餘，且整個方法之效率因此進一步增加。 在該木質素分裂產物之轉變情況中，該醇作爲自由基 清除劑及分裂產物用之溶劑，該分裂產物係得自較高分子 量木質素分裂產物成爲低分子量者之酶致的、生物模擬的 -11 - 201114907 或化學的解聚作用。 在由該轉化產物分離固體以及其藉由過濾再處理期間 ，在該萃取物中小含量的半纖維素及其分裂產物以及木質 素之經增加的溶解性增加物料通過率。 依本發明之方法使例如稻草之三項主要成分（亦即葡 萄糖、木糖以及木質素）能分離進入含極少外來材料的材 料流中，且使其能另外轉變成較高品質之產物（諸如木糖 醇），且因此符合理想生物精製方法的需求。 與其他主要在150°C至200°C之溫度間進行的分解方 法相比，依本發明之方法的另外的優點是可以維持低於 1 〇〇 °C之反應溫度。小的能量消耗使該分解期間所得之木 質素能以有價値之產物形式被使用而非作爲供該分解方法 之能量來源。 在用含有醇（特別是Ci.4-醇或酚）及H202的水溶液 處理之後，依本發明之方法，含有木質素之溶液被分離， 且經分解之固體較佳在3 0-90t下用木聚糖酶處理例如6-72小時，且液相與固體分離，之後液相較佳另外被反應 成所得產物，例如木糖醇。 在液相分離後殘留之固體較佳用纖維素酶處理，藉此 經由該固體/葡萄糖溶液之另外的發酵，可以獲得乙醇、 丁醇或其他發酵產物；或殘留之固體進行熱或熱化學轉化 作用且所得產物（諸如燃料成分）、燃料添加劑及/或其 他化學產物（例如酚類）被分離；或殘留之固體藉由細菌 、酵母或黴菌進行微生物轉化；或殘留之固體進行另外之 -12- 201114907 去木質化步驟以供獲的纖維素纖維材料的目的。 殘留之固體可以在生物生成氣工廠中被發酵且可以進 一步處理成生物生成氣。 木糖在經濟上最令人感興趣之產物之一是木糖醇。 用於木糖回收之主要來源是來自紙漿工業之含有豐富 破裂產物（主要是木質素及半纖維素）的煮液，以致必須 藉由複雜之分離及純化步驟獲得木糖。例如 1 H. Harms 在 ’’Willkommen in der naturlichen Welt von Lenzing, weltweit fii hrend in der Cellulosefaser Technologie，，， Herbsttagung der o s t e r r ei ch i s c h e n Papierindustrie,
Fr ant schach ( 15.11.2007)中描述：藉由凝膠過濾由濃稠液 中回收木糖，其是一種技術上極複雜的方法，一般不用於 大量產物。然後用此方式所得之木糖觸媒轉化成木糖醇。 在另一方面，依本發明所得之木糖藉由利用木糖還原 酶（例如木糖脫氫酶，例如得自添努思念珠菌（Candida tenuis )者）之轉化作用，無須發酵地轉化成木糖醇，其 中將任意地木糖還原酶及任意地輔因子再生用之輔基材及 任意地醇脫氫酶及任意地NAD ( P ) Η添加至該木糖溶液 中；特別地所得之木糖醇藉由過濾由木質素分裂產物分離 出。 ‘ 利用以下實例1及比較用實例1 A，在酶致水解之後 ’用文件記載在醇之存在下預處理對還原糖產率的影響。 【實施方式】 -13- 201114907 實例1 小麥草之預處理 小麥草壓碎成約2公分之粒子尺寸。5克之經壓碎的 小麥草懸浮於500毫升反應槽內的200毫升溶液中，該溶 液係由49.5%水、50%乙醇及0.5%過氧化氫組成。在水 浴中將該懸浮液加熱至50°C，使之恆溫，且該懸浮液之 p Η値以N a Ο Η水溶液調節至起初之p Η値1 2。混合物在 60°C下以200 rpm之速度連續磁力攪拌24小時。之後， 固體被濾出且利用1升蒸餾水清洗。 爲供酶致水解，100毫克之來自每一平行測試的預處 理的基材以 9.8毫升之50mM的乙酸鈉緩衝液設定成 pH4.8，且與 200 微升之 Accellerase 1000 懸浮液（ www.genencor.com)混合。Accellerase 是纖維素酶及半 纖維素酶之酶混合物。酶致水解是在50 °C之搖盪水浴中 進行。在48小時後由六碳糖及五碳糖所釋出之可溶單體 依照 DNS 方法（Miller et al.，Analytical Chemistry 31 ( 3 ) :42 6，1 9 5 9 )在1毫升液體上清液中以還原糖形式被測 定’與秤入之預處理的基材的量有關且以最大理論產率％ 表示。 還原糖之最大理論產率被分開地測定且是每克未經處 理之稻草705毫克+/-5%。 經由測試用原料，進行5項平行測試。還原糖之產率 是 99% +/-4%。 -14- 201114907
比較用實例1 A 重複以上實例1，但不添加醇。還原糖之產率僅爲64 % +/-3% 。 實例2 小麥草之預處理 小麥草壓碎成約2公分之粒子尺寸。2.5克之經壓碎 的小麥草懸浮於500毫升反應槽內的200毫升溶液中，該 溶液係由49.5%水及50%異丙醇組成。在水浴中將該懸 浮液加熱至50 °C ，使之恆溫，且該懸浮液之pH値以 NaOH水溶液調節至起初之pH値13 (或分別是14 )。混 合物在60°C下以200 rpm之速度連續磁力攪拌24小時。 之後，固體被據出且利用1升蒸餾水清洗。 爲供酶致水解，1 00毫克之來自每一平行測試的預處 理的基材以9.8毫升之5 OmM的乙酸鈉緩衝液設定成 ρΗ4·8，且與 200 微升之 Accellerase 1000 懸浮液（ www.genencor.com)混合。Accellerase 是纖維素酶及半 纖維素酶之酶混合物。酶致水解是在5 之搖盪水浴中 進行。在48小時後由六碳糖及五碳糖所釋出之可溶單體 依照DNS方法在1毫升液態上清液中以還原糖形式被測 定，與秤入之預處理的基材的量有關且以最大理論產率％ 表示。 還原糖之最大理論產率被分開地測定且是每克未經處 理之稻草705毫克+/-5%。 -15- 201114907 經由測試用原料，進行5項平行測試。還原糖之產率 是 97% +/-4% 〇 實例3 由木糖溶液（其係依照實例2中所述之方法由稻草製 備）酶致製備木糖醇。使用異丙醇作爲輔基材。 反應溶液含有5毫克/毫升木糖。 得自添努思念珠菌的木糖還原酶（XR )將木糖還原 成木糖醇。該XR需要NADH (經還原之菸醯胺腺嘌呤核 苷酸）作爲輔酶，其在該反應期間經氧化成輔酶NAD+。 藉由醇脫氫酶（ADH:經偶合酶之再生）的平行活性，進 行經氧化之輔因子的再生。使用異丙醇作爲輔基材。異丙 醇及NAD +藉由該ADH反應成NADH及丙酮，如反應流 程1所示的： 反應流程1
CHO ——OH
HO
-OH
CH2OH SI化木糖 -16- 201114907 在表1中說明在該5項不同測試反應#049、#05 0、 #051、#052、#053及#054中的反應比率： 表1 反應編號 #049 #050 #052 #053 #054 基材批號Ι[μ1] 250 250 250 500 500 XR添努思念珠菌2 U/mL [μί] 50 50 50 20 mMNADH [μ^ 50 50 50 ADH L.kefir 5U/mL TuLl 50 50 異丙醇[μί] 50 50 50 mM磷酸鈉緩衝劑，pH 7.0 |>L] 750 650 550 500 300 總體積：1毫升 溫度：2 6 ± 2 °C 磁力攪拌器：200 rpm 時間：1 5小時 爲鈍化該酶，所有樣品被加熱至95°C 1 5分鐘且在製 備時被離心以供隨後的HPLC分析。 分析一Η P L C : SUGAR SP0810 管柱 + SUGAR SP-G 前管柱 偵測器：折射率偵測器 洗提液：去離子化之水 流速：0.75毫升/分鐘 樣品的量：10微升 HPLC之量化精確度：±10% 201114907 滯留時間： 木糖：13.97分鐘 木糖醇：3 7.73分鐘 異丙醇：16.69分鐘 丙酮：1 6.5 4分鐘 結果： 樣品#049之基材濃度藉由HPLC測定且含量爲〇.9 毫克/毫升。 反應混合物#050僅包括木糖還原酶（0.1U/毫升） 及NADH ( ImM)。在反應持續1 5小時後，消耗〇.〇 8 5 毫克木糖。木糖醇濃度低於偵測限度。 反應#05 2與反應#05 0相當，但差異在此情況中是應 用再生系統。結果是所用之木糖的全部轉化。所用濃度： XRC0.1U / 毫升）、NADH(lmM) 、ADH(0.25U / 毫 升）及異丙醇（5% )。 樣品#05 3之木糖濃度測定爲2.121毫克/毫升，其相 應於所預期之木糖濃度。 反應#054與反應#05 2相當，但包括增加2倍之木糖 起初濃度（在反應中50%基材濃度）。所製備之木糖醇 濃度測量爲〇.945毫克木糖醇。所用之濃度：XR(〇.l ϋ / 毫升）、NADH(lmM) 、ADH(0.25U / 毫升）及異 丙醇（5% )。 在表2中，基於經測量之HP LC數據（經消耗之木糖 -18- 201114907 及經回收之木糖醇；b · D . L ·在以下指明偵測限度），摘述 反應的結果。 表2 反應編號 049 050 052 053 054 反應前之木糖[毫克/«升] 0.9 0.815 0.8 2.121 1.945 反應後之木糖[毫克/«升] - 0.815 b.D.L. . 1.013 反應中消耗之木糖[毫克職] - b.D.L. 偷 0.932 木糖的回收[毫克/<升] - b.D.L. 0.994 • 0.945 相對於木糖濃之[%] - b.D.L. 100 - 47.9 實例4 由木糖溶液（其係依實例2中所述之方法由稻草製備 )酶致製備木糖醇。使用乙醇作爲輔基材。 使用轉動型蒸發器，基材溶液之體積與實例2比較被 降低5 0 %，以增加木糖濃度（約1 0毫克/毫升木糖）。 藉由得自經使用之添努思念珠菌的木糖還原酶（XR )的活性及得自經使用之啤酒酵母菌的醛脫氫酶的另外活 性（Sigma-Aldrich: Catalogue Ν ο . A 6 3 3 8 ； (EC) No.: 1.2.1.5 ： CAS No. ： 902 8 -8 8 -0 )，進行經氧化之輔因子之 再生。此爲基材偶合反應及酶偶合反應。使用乙醇作爲輔 基材。在第一步驟中，藉由該XR之活性，將乙醇及 NAD +轉化成NADH及乙醛》在第二步驟中，藉由醛脫氫 酶（AldDH )之活性（爲此目的分別參考Sigma-Aldrich :Catalogue No. A6338 ;及 “ Characterization and -19- 201114907
Potential Roles of Cytosolic and Mitoc Dehydrogenases in Ethanol Metabolism cerevisiae ” ， Wang et al， Molecula
Journal of Bacteriology, p. 822- 8 3 0 )， 化成乙酸酯。在此情況中，每莫耳之經 成2莫耳之還原相等物（NADH )(參考 反應流程2 hondrial Aldehyde in Saccharomyces r Cloning， 1998, 將乙醛及NAD +轉 轉化的輔基材會形 P反應流程2 ):
CHO
-OH HO-
-OH
CH2〇H 木糖
ch2oh —OH HO— —OH ch2oh 氫化木糖
NADH + H+ NAD
ch3ch2oh 乙醇 ch3cho 乙醛
乙酸陰離子 在表3中說明4個不同之測試反應 253的反應比率。使用不同的乙醇濃度 -20- 247 、 249 、 250 及 :AldDH濃度。輔 201114907 因子及基材濃度保持恆定。 表3 反應編號 247 249 250 253 基材批號III [微升] 300 (56 mM) 300 (56 mM) 300 (56 mM) 300 (56 mM) XR添努思念珠菌 5蘭升[微升] 25 (0.25 U/毫 升） 25 (0.25 U/毫 升） 25 (0.25 U/毫升） 25 (0_25 U/毫升） 20mMNAD+[微升] 10(0.4mM) 10(0.4 mM) 10(0.4mM) 10(0.4mM) AldDH S.啤酒酵母菌 5U/mL [微升] 25 (0.25U/毫升) 25 (0.25U/毫升) 0 0 Ethanol 50% [微升] 75 (1286 mM) 70 (1200 mM) 75 (1286 mM) 70(1200 mM) 50 mM TrisHCl 緩衝 劑 pH 7.0 [微升] 65 70 90 95 總體積：〇 . 5毫升 溫度：2 5 ± 2 °C 熱混合器：5 00 rpm 時間：1 1 2小時 爲要鈍化該酶，將所有樣品加熱至70°C 1 5分鐘，且 在製備時離心並過濾以供隨後之 HPLC分析（PVDF ; 0.2微米）。 分析—HPLC : SUGAR SP0810 管柱 + SUGAR SP-G 前管柱 管柱溫度：9 0 °C 偵測器：折射率偵測器 洗提液：去離子化之水 -21 - 201114907 流速：0.90毫升/分鐘 樣品的量：10微升 HPLC之量化精確度：±1〇% 結果： 利用I·2莫耳/升之乙醇濃度可以獲得最大產率（反 應249)。在如此進行時，共產生1.38毫克/毫升的木糖 醇，此在理論上對應於21.2%之木糖醇產率。 在表4中，摘述基於所測量之HP LC數據的反應結果 表4 反應編號 247 249 250 253 理論總濃度[毫克/毫升1 6.288 6.407 6.268 6.150 反應後之木糖[毫克/毫升] 5.057 5.046 5.385 5.365 反應中消耗之木糖[毫克/毫升] 1.231 1.361 0.883 0.785 木糖之回收[毫克/毫升] 1.248 1.379 0.894 0.796 結果顯示：可以使用乙醇作爲輔基材。正如藉由比較 反應249 (包括AldDH之反應混合物）與25 3 (不含
AldDH之反應混合物）可清楚顯示的：醛脫氫酶之添加導 致木糖醇產率明顯增加。經轉化之木糖與木糖醇之差約達 8 %。與上述文獻之引證資料相關的結果僅能得以下結論 :AldDH將在第一部份還原中形成之乙醛進一步氧化成乙 酸（參考反應流程2 )。此種在能量上較佳之反應及與之 -22- 201114907 相關的經增加的NADH濃度在第一平行反應中將平衡由洗 提液移向木糖醇產物。 -23-

Claims (1)

  1. <^〇\d〇°
    201114907 七、申請專利範圍： )的方法 1. 一種用以製造醣類裂解產物（特別是糖 ，其特徵在於以下手段之組合： -用含有醇（特別是（^_4醇類或酚）且具有在11.0 及14.0之間之pH値的水溶液處理木質纖維素材料 ，以裂解木質纖維素且將裂解產物與該材料分離， 藉此獲得富含纖維素及半纖維素之材料，及 -用至少一種醣類裂解酶處理所得之富含纖維素及半 纖維素之材料，以獲得該酿類裂解產物。 2. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該水溶液具 有在1 1.0及13.0之間的pH値。 3. 如申請專利範圍第1項之方法，其中在低於1〇〇 °(：之溫度下發生該裂解。 4. 如申請專利範圍第3項之方法，其中在低於40艺 之溫度下發生該裂解。 5 ·如申請專利範圍第1項之方法，其中使用稻草、 甘蔗渣、能量草、及/或小麥以作爲木質素材料。 6 ·如申請專利範圍第1項之方法，其中該木質素材 料以5-4〇重量％之原料密度存在於該水溶液中。 7 ·如申請專利範圍第1項之方法，其中用木聚糖酶 及/或纖維素酶處理該富含纖維素及半纖維素之材料，以 萃取該糖。 8 ·如申請專利範圍第1項之方法，其中所得之糖發 酵成醇，該醇經分離且回收。 -24- 201114907 9 ·如申請專利範圍第1項之方法，其中用木聚糖酶 轉化該經分解之固體且所得之液相轉化成木糖醇，且其餘 固體 -與纖維素酶進一步反應以獲得不同之發酵產物； 或 -進行熱或熱化學轉化； 或 -藉由細菌、酵母或真菌進行微生物轉化； 或 一進行進一步之去木質化步驟以獲得纖維素纖維材料 〇 I 0 _如申請專利範圍第9項之方法，其中用木聚糖酶 轉化該經分解之固體且使用木糖脫氫酶將所得之液相轉化 成木糖醇，且其餘固體 -與纖維素酶進一步反應以獲得不同之發酵產物； 或 -進行熱或熱化學轉化； 或 -藉由細菌、酵母或真菌進行微生物轉化； 或 -進行進一步之去木質化步驟以獲得纖維素纖維材料 〇 II _如申請專利範圍第9或1 0項之方法，其中在（ 發酵）產物分離後殘留之固體在生物生成氣工廠中發酵且 -25- 201114907 進一步處理成生物生成氣。 -26- 201114907 四 、指定代表圖： (一） 、本案指定代表圖為：無 (二） 、本代表圖之元件符號簡單說明：無 201114907 五 本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學 式：無
TW099113304A 2009-08-06 2010-04-27 Process for the production of carbohydrate cleavage products from a lignocellulosic material TW201114907A (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AT0125209A AT508724A1 (de) 2009-08-06 2009-08-06 Verfahren zur herstellung von zuckern aus einem lignocellulosischen material
AT0149609A AT508725A1 (de) 2009-08-06 2009-09-23 Verfahren zur herstellung von zuckern aus einem lignocellulosischen material
AT0203009A AT509307A1 (de) 2009-12-23 2009-12-23 Verfahren zur herstellung von zuckern aus einem lignocellulosischen material

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW201114907A true TW201114907A (en) 2011-05-01

Family

ID=44934219

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW106131021A TWI676687B (zh) 2009-08-06 2010-04-27 用以由木質纖維素材料製造醣類裂解產物之方法
TW099113304A TW201114907A (en) 2009-08-06 2010-04-27 Process for the production of carbohydrate cleavage products from a lignocellulosic material

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW106131021A TWI676687B (zh) 2009-08-06 2010-04-27 用以由木質纖維素材料製造醣類裂解產物之方法

Country Status (17)

Country Link
US (2) US9970038B2 (zh)
EP (2) EP2462235A2 (zh)
JP (2) JP2013500727A (zh)
KR (2) KR20120055613A (zh)
CN (1) CN102575268A (zh)
AU (1) AU2010281334B2 (zh)
BR (1) BR112012002707B1 (zh)
CA (1) CA2768159C (zh)
CO (1) CO6511213A2 (zh)
CU (1) CU20120023A7 (zh)
EC (1) ECSP12011707A (zh)
MX (1) MX350376B (zh)
PE (1) PE20121424A1 (zh)
RU (1) RU2617938C2 (zh)
TW (2) TWI676687B (zh)
WO (1) WO2011014894A2 (zh)
ZA (1) ZA201200989B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI422563B (zh) * 2011-12-13 2014-01-11 Ind Tech Res Inst 酚化物之製備方法

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AT510346A1 (de) * 2010-09-02 2012-03-15 Annikki Gmbh Ligningewinnung
AT510812A1 (de) * 2010-10-29 2012-06-15 Annikki Gmbh Verfahren zur gewinnung von lignin
UA110996C2 (uk) 2011-10-05 2016-03-10 Анніккі Гмбх Спосіб одержання ацетату
ITNO20120002A1 (it) 2012-03-20 2013-09-21 Novamont Spa Processo per la produzione di composti organici a partire da specie vegetali
AR091998A1 (es) 2012-05-03 2015-03-18 Annikki Gmbh Procedimiento de preparacion de celulosa con baja concentracion de lignina
AT513562A1 (de) 2012-11-14 2014-05-15 Annikki Gmbh Verfahren zur Gewinnung von Zuckerderivaten
FR3001464B1 (fr) * 2013-01-25 2016-02-26 Biomerieux Sa Procede d'isolement specifique d'acides nucleiques d'interet
EP3072117B1 (en) * 2013-11-20 2018-09-26 Annikki GmbH Process for fractionating lignocellulosics
US20170342510A1 (en) 2014-12-18 2017-11-30 Avantium Knowledge Centre B.V. Process for the preparation of a saccharide-containing solution from a torrefied cellulosic biomass
CN104593430B (zh) * 2015-01-11 2018-03-30 北京化工大学 定向酸化预处理提高玉米秸秆厌氧消化产气性能的方法
WO2017039439A1 (en) 2015-08-31 2017-03-09 Avantium Knowledge Centre B.V. Process for the recovery of hydrochloric acid
ITUB20154915A1 (it) * 2015-10-27 2017-04-27 Tirsi S R L Procedimento per la produzione di biogas da digestato solido di scarto
AU2016353665B2 (en) 2015-11-09 2020-09-10 Avantium Knowledge Centre B.V. Process for the production of a saccharide product from an aqueous solution
DK3416740T3 (da) 2016-02-19 2021-02-08 Intercontinental Great Brands Llc Fremgangsmåder til dannelse af multiple værdistrømme ud fra biomassekilder
EP3409727A1 (en) 2017-05-29 2018-12-05 Annikki GmbH Method for the preparation of a lignin prepolymer
CA3074198A1 (en) * 2020-02-28 2021-08-28 Fluid Energy Group Ltd. Modified methanesulfonic acid and uses thereof
CN114763680B (zh) * 2021-01-15 2024-01-30 中国石油天然气股份有限公司 从木质纤维素原料中去除木质素的方法
WO2024084032A1 (de) 2022-10-20 2024-04-25 Annikki Gmbh Verfahren zur herstellung einer wässerigen lösung enthaltend ein alkalisalz der glycolsäure und der milchsäure
EP4368720A1 (de) 2022-11-09 2024-05-15 Annikki GmbH Verfahren zur herstellung einer wässerigen lösung, welche glycerin enthält

Family Cites Families (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR840000128B1 (ko) * 1982-08-03 1984-02-16 임관 농산 폐자원을 이용한 크실리톨의 제조방법
JPS62104588A (ja) 1985-10-30 1987-05-15 Nitto Electric Ind Co Ltd キシリト−ルの製造方法
JPS62104586A (ja) 1985-10-30 1987-05-15 Nitto Electric Ind Co Ltd 酵素反応方法
US4842877A (en) * 1988-04-05 1989-06-27 Xylan, Inc. Delignification of non-woody biomass
DE4103572C2 (de) * 1991-02-06 1995-11-23 Organocell Ges Fuer Zellstoff Verfahren zum Delignifizieren von Pflanzenfasermaterial
JP2573107B2 (ja) 1991-06-25 1997-01-22 三洋電機株式会社 マイクロ波乾燥装置
US6022419A (en) * 1996-09-30 2000-02-08 Midwest Research Institute Hydrolysis and fractionation of lignocellulosic biomass
US6057438A (en) * 1996-10-11 2000-05-02 Eastman Chemical Company Process for the co-production of dissolving-grade pulp and xylan
AU3859597A (en) 1997-08-14 1999-03-08 Kurt Messner Chemical method for lignin depolymerization
AU6604100A (en) 2000-02-14 2001-08-20 Kiram Ab Process for oxygen pulping of lignocellulosic material and recovery of pulping chemicals
US20040005674A1 (en) 2002-04-30 2004-01-08 Athenix Corporation Methods for enzymatic hydrolysis of lignocellulose
US6923887B2 (en) 2003-02-21 2005-08-02 Alberta Research Council Inc. Method for hydrogen peroxide bleaching of pulp using an organic solvent in the bleaching medium
US20040231060A1 (en) * 2003-03-07 2004-11-25 Athenix Corporation Methods to enhance the activity of lignocellulose-degrading enzymes
CN101160409B (zh) 2005-04-12 2013-04-24 纳幕尔杜邦公司 获得可发酵糖的生物质处理方法
PT103331A (pt) * 2005-08-05 2007-02-28 Fundacao Da Faculdade De Cienc Expressão dum transportador activo de xilose em saccharomyces cerevisiae modificada geneticamente
JP4717756B2 (ja) 2005-08-31 2011-07-06 国立大学法人三重大学 バイオマスを原料とする糖組成物の製造方法
JP2007151433A (ja) * 2005-12-02 2007-06-21 Tsukishima Kikai Co Ltd リグノセルロースの前処理方法及びエタノール製造方法
CN1884569B (zh) * 2006-05-19 2010-06-30 南京师范大学 木糖的酶法制备方法
JP5019421B2 (ja) 2006-10-13 2012-09-05 独立行政法人産業技術総合研究所 糖の製造方法
CA2578305A1 (en) 2007-02-08 2008-08-08 Rodney Arthur Savidge Process for recovery of oligosaccharides and polysaccharides during pulping
JP5279061B2 (ja) 2007-02-09 2013-09-04 Ｂｉｏ−ｅｎｅｒｇｙ株式会社 エタノールの製造方法
EP2017349A1 (en) 2007-06-12 2009-01-21 Süd-Chemie Ag Generation of chemical building blocks from plant biomass by selective depolymerization
JP4986038B2 (ja) * 2007-05-07 2012-07-25 独立行政法人産業技術総合研究所 高加水分解活性セルラーゼおよびヘミセルラーゼの製造方法
AU2008255540B2 (en) * 2007-05-31 2013-11-28 Suzano Canada Inc. Concurrent anaerobic digestion and fermentation of lignocellulosic feedstocks
US8241873B2 (en) 2008-12-19 2012-08-14 E I Du Pont De Nemours And Company Organic solvent pretreatment of biomass to enhance enzymatic saccharification
TW201114906A (en) 2009-04-30 2011-05-01 Annikki Gmbh Process for the production of carbohydrate cleavage products from a lignocellulosic material
JP5633839B2 (ja) * 2009-05-22 2014-12-03 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 リグノセルロース系バイオマスの変換方法

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI422563B (zh) * 2011-12-13 2014-01-11 Ind Tech Res Inst 酚化物之製備方法
US8648218B2 (en) 2011-12-13 2014-02-11 Industrial Technology Research Institute Method for preparing phenolic compounds

Also Published As

Publication number Publication date
RU2012108372A (ru) 2013-09-20
KR101898849B1 (ko) 2018-09-13
CA2768159C (en) 2019-08-20
EP2462235A2 (de) 2012-06-13
KR20120055613A (ko) 2012-05-31
MX2012001450A (es) 2012-03-26
ZA201200989B (en) 2012-10-31
CA2768159A1 (en) 2011-02-10
US20180230503A1 (en) 2018-08-16
BR112012002707B1 (pt) 2021-04-06
MX350376B (es) 2017-09-05
TWI676687B (zh) 2019-11-11
WO2011014894A2 (de) 2011-02-10
JP2013500727A (ja) 2013-01-10
JP6411994B2 (ja) 2018-10-24
AU2010281334A1 (en) 2012-02-02
US9970038B2 (en) 2018-05-15
CN102575268A (zh) 2012-07-11
JP2016104020A (ja) 2016-06-09
RU2617938C2 (ru) 2017-04-28
KR20180042416A (ko) 2018-04-25
TW201814049A (zh) 2018-04-16
WO2011014894A3 (de) 2011-06-16
CO6511213A2 (es) 2012-08-31
BR112012002707A2 (pt) 2020-08-25
AU2010281334B2 (en) 2015-03-12
ECSP12011707A (es) 2012-10-30
CU20120023A7 (es) 2012-06-21
PE20121424A1 (es) 2012-10-18
EP3121285A1 (de) 2017-01-25
US20130078677A1 (en) 2013-03-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI676687B (zh) 用以由木質纖維素材料製造醣類裂解產物之方法
Robak et al. Current state-of-the-art in ethanol production from lignocellulosic feedstocks
TW201114906A (en) Process for the production of carbohydrate cleavage products from a lignocellulosic material
Sánchez et al. Delignification process of agro-industrial wastes an alternative to obtain fermentable carbohydrates for producing fuel
Fernández-Delgado et al. Comparison of mild alkaline and oxidative pretreatment methods for biobutanol production from brewer’s spent grains
US20140024093A1 (en) Process for the production of digested biomass useful for chemicals and biofuels
WO2011061400A1 (en) Method of processing a carbohydrate raw-material
EP2285971A2 (en) Fermentation of a lignocellulose-containing material
US20080171370A1 (en) Detoxifying pre-treated lignocellulose-containing materials
CN104797714A (zh) 用于获得糖衍生物的方法
CA3017538A1 (fr) Procede de production de cellulases avec du marc lignocellulosique pretraite
Jiang et al. Rapid and effective molten oxalic acid dihydrate pretreatment to enhance enzymatic saccharification for biohydrogen production by efficient coextraction of lignin and hemicellulose in wheat straw
Hii et al. Pretreatment of pressed pericarp fibers (PPF) using alcohols as solvent to increase the accessibility of cellulose for cellulase production
AT509307A1 (de) Verfahren zur herstellung von zuckern aus einem lignocellulosischen material
US20200207925A1 (en) Lignocellulosic biomass treatment method and system
UA112837C2 (uk) Спосіб одержання продуктів розщеплення вуглеводів з лігноцелюлозних матеріалів
CN116355967A (zh) 一种提高木质纤维原料酶解糖化效率和乙醇产率的方法
Medina et al. Sugar cane bagasse prehydrolysis using hot water