TW200920355A

TW200920355A - Compositions and methods for treating immunological and inflammatory diseases and disorders

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Publication number: TW200920355A
Application number: TW097133621A
Authority: TW
Inventors: Tamas Oravecz
Original assignee: Lexicon Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2007-09-06
Filing date: 2008-09-02
Publication date: 2009-05-16
Also published as: AR068229A1; EP2182944A1; CL2008002652A1; US7825150B2; JP2010538088A; ZA201001055B; MX2010002559A; US20090068180A1; CN101878030A; CA2698713A1; AU2008296212A2; IL203988A; WO2009032972A1; BRPI0816386A2; RU2010112997A; UY31325A1; NZ583278A; AU2008296212A1; KR20100061666A

Description

200920355 九、發明說明：【發明所屬之技術領域】揭露〜療免疫及發炎疾病與異常的方法與組合物。特疋方法與組合物包括施用抑制S丨p裂解酶活性之試劑與至少一額外的免疫抑制與/或抗_發炎劑。【先前技術】神，、& 胺醇-1-鱗酸醋（Sphing0sine_i_ph〇sphate, S1P)係對多種器官系統具有可能功效之生物活性分子。Saba，J.D. 與 Hla，T. Circ. Res. 94:724-734 (2004)。雖然某些人認為此化合物為細胞内的二級傳訊物，但其作用模式仍是爭論的話題。同上之文獻。確實，甚至尚不清楚其代謝機制。 Hla，T_，Science, 309:1682-3 (2005)。研究者目前相信 SIP 係由神經胺醇的磷酸化加以形成，並藉由去磷酸化或分裂 (cleavage)而分解。報導指出其藉由S1P裂解酶催化而分裂成乙醇胺填酸醋（ethanolamine phosphate)與長鍵搭類。同上之文獻；Pyne & Pyne，Biochem J. 349:385-402 (2000)。神經胺醇-1 -磷酸酯裂解酶為位於内質網膜中的維他命 Be-依賴型酵素。Van Veldhoven 與 Mannaerts，J. Biol. Chem. 266:1 2502- 12507 (1 99 1) ; Van Veldhoven 與

Mannaerts, Adv. Lipid. Res. 26:6 9 (1993)。人類 SP1 裂解酶之聚核苷酸與胺基酸序列與其基因產物描述於PCT專利申請案編號WO 99/1 6888。近來，Schwab團隊推斷焦糖色素（caramel color)III之 200920355 成分， 2- 乙醯 -4- 四羥丁基咪唑 (2-acetyl-4-tetrahydroxybutylimidazole，THI)’ 施用於小鼠時可抑制 S1P 裂解酶活性。Schwab，S ·等人 Science 309:1735-1739 (2005)。雖然其他人假定THI藉由不同機制來發揮其功效（參閱例如，Pyne，S.G.，ACGC Chem. Res. Comm. 1 1:108-1 12 (2000))，但明顯的是對大鼠與小鼠施用該化合物會引發淋巴球減少症（lymp.hopenia)並導致成熟的T細胞累積於胸腺中。參閱例如，Schwab上方之文獻； Pyne, S. G.，ACGC Chem. Res. Comm. 11:108-112 (2000)； Gugsyan，R.等人 Immunology 93(3):398-404 (1998);

Halweg，K.M.與 Bttchi，G·，J.Org.Chem. 50:1 1 34-1 1 36 (1 985) ; Kroeplien 與 Rosdorfer 的美國專利號 4,567,1 94。再者，沒有ΤΗ I對除了小鼠與大鼠之外的動物具有免疫效應的已知報導。雖然美國專利號4,567,1 94宣稱THI與某些相關化合物可用來當作免疫抑制藥物，但在人類中並沒有發現化合物的免疫效應。參閱Thuvander, A.與Oskarsson， A.，£d-_ Chem· Toxic. 32 ⑴：7- 1 3 ( 1 994) ; Houben, G.F.等人 Fd. Chem. Toxic. 3 0(9^:749-7 5 7 (1 992)。【發明内容】本發明係部分關於治療、管理或預防免疫或發炎疾病或異常的方法，其包括抑制需要該方法之患者中Sip裂解酶活性並對患者施用免疫抑制劑與/或抗-發炎劑。可藉由對患者施用式I : 6 200920355

r5 r4

的化合物或其藥學可接受之鹽類（於此界定其之取代基）而達成S 1 P裂解酶活性的抑制。本發明亦包括包含式I之化合物與一或多個額外活性劑的藥學組合物。【實施方式】本發明部分係由與被認為可活體内抑制S 1 P裂解酶之化合物相關之發現所引起。定義除非特別指明，否貝ij 「烯基（alkenyl )」一詞意指具有2至2 0個（例如，2至10個或2至6個）碳原子且至少一個碳-碳雙鍵的直鏈、支鏈及/或環狀碳氫化合物。代表性之烯基基團包括乙烯基、烯丙基、1-丁烯基、2 -丁烯基、異丁燦基（isobutylenyl)、1-戊烯基、2 -戊稀基、3 -甲基-1-丁烯基、2-曱基-2-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基、1-己烯基、2 -己烯基、3 -己烯基、1-庚烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、 1-辛烯基、2-辛烯基、3-辛烯基、1-壬烯基、2-壬烯基、3-壬烯基、1-癸烯基、2-癸烯基及3-癸烯基。除非特別指明，否則「烷基（alkyl )」一詞意指具有1 200920355 至20個（例如，1至l〇個或1至4個）碳原子的直鍵、支鏈及/或環狀（「環烧基（cyci〇alkyi)」）破氫化合物。具有1 至4個碳原子之燒基基困稱為「小型烧基（lower alkyl)」。烷基基團的實例包括（但不限於）曱基、乙基、丙基、異丙基、正-丁基、第三-丁基、異丁基、戊基、己基、異己基、庚基、4，4-二曱基戊基、辛基、2，2,4-三曱基戊基、壬基、癸基、Η--烷基及十二烷基。環烷基基團可為單環或多環，其實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基及金剛烷基 (adamantyl)。烷基基團的其他實例具有線性、分支及/或環狀的部分（例如’ 1-乙基-4-甲基-環己基）。r烷基」一詞包括飽和碳氫化合物以及烯基與炔基基困。現牙基j或「烷基-芳基」除非特別指明，否意指一個烷基基團連結至一個芳基基團一除非特別指明，否則「烷基雜芳基」或「烷基-雜芳基」一詞意指一個烷基基團連結至一個雜芳基基團。知7非特別指明，否則「烷基雜環」或「烷基_雜環」一 β 個烷基基困連結至—個雜環基團。 =非特別指明，否則「炔基（心^丨）」一詞意指具有至個（例如，2 $ m y 一個唆_ 至20個或2至6個）碳原子且至少性之执a —鍵的直鏈支鏈與/或環狀碳氫化合物。代表、基基團包含乙休其、土、丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、 Μ、\、2_戊炔基、3_甲基-1-丁炔基、4-戊炔基、卜己基己块基、5-己炔基、丨庚炔基、2_庚炔基、6庚炔、块基、2_辛炔基、7-辛块基Ί-壬炔基、2-壬快基、 8 200920355 8-壬炔基、1-癸炔基、2-癸炔基及9-癸炔基。除非特別指明，否則「烷氧基（alkoxy)」一詞意指-〇 — 烷基。院氧基的實例包括（但不限於）-〇CH3、 -OCH2CH3、-〇(CH2)2CH3、-0(CH2)3CH3、-〇(CH2)4CH3 及 0(CH2)5CH3 〇除非特別指明’否則「芳基（aryl)」一詞意指由碳原子及氫原子所組成之一芳香環或一芳香環或部分芳香環系統。一個芳基基團可包含數個連結或併合（fused)在一起的 %。方基基團之實例包含（但不限於）蒽基（anthracenyl)、奠基（azulenyl )、聯苯（biphenyl )、第基（fluorenyl )、二氫節基（indan )、節基（indenyl )、萘基（naphthyl )、菲基（phenanthrenyl )、苯基（phenyl)、1，2,3,4-四氫-萘 (1,2,3,4-tetrahydro-naphthalene)及曱苯基（tolyl)。除非另有明示’否則「芳烷基」或「芳基-烷基」一詞意指一個芳基基團連結至一烷基基團。除非另有明示’否則「循環淋巴球減少劑（circulating

lymphocyte reduction agent)」一詞意指一化合物的 CLRF 高於約2 0 %。除非另有明示，否則「循環淋巴球減少係數 (circulating lymphocyte reduction factor 或 CLRF)」一詞意指以1 00 mg/kg的單劑量化合物口服施用於小鼠對循環淋巴球數目的減少’其係由下述之實施例所述之方法所測定。除非特別指明，否則「鹵素（halogen)」及「鹵基（halo)」 200920355 二詞涵括氟、氯、溴及块。除非特別指明，否則「雜烧基（heteroalkyl )」一詞指的是一炫基基團（諸如，直鍵、支鍵或環狀），其中至少有一個碳原子已被一個雜原子（例如，N、0或S)所取代。除非特別指明，否則「雜芳基（heteroaryl )j —詞意指一芳基基團，其中至少有一個碳原子已被一個雜原子（例如，N、0或 S)所取代。實例包含（但不限於）吖啶基 (acridinyl )、苯並咪唾基（benzimidazolyl )、苯並°夫喃基 (benzofuranyl) > 苯並異嗟嗤基（benzoisothiazolyl)、苯並異口等®坐基（benzoisoxazolyl )、苯並啥"坐基 (benzoquinazolinyl)、苯並嗟0坐基（benzothiazolyl)、苯並口咢峻基（benzoxazolyl)、吱°南基（furyl)、咪吐基 (imidazolyl ) 、 σ引味基（indolyl )、異嘆嗤基 (isothiazolyl)、異口等唾基（isoxazolyl )、口咢二。坐基 (oxadiazolyl ) 、口等峻基（oxazolyl ) 、 °太口井基 (phthalazinyl)、0比口( pyrazinyl)、0比0坐基（pyrazolyl)、 0荅口井基（pyridazinyl )、°比咬基（pyridyl )、变咬基 (pyrimidinyl)、b底唤基（pyrimidyl)、°比洛基（pyrrolyl)、喧唾琳基（quinazolinyl)'啥琳基（quinolinyl)、四0坐基 (tetrazolyl)、η塞坐基（thiazolyl)、及三嗪基（triazinyl)。除非特別指明，否則「雜芳基院基（heteroarylalkyl) _ 或「雜芳基-炫基（heteroaryl-alkyl)」一詞意指一個雜芳基基團連結至一個烷基基團。除非特別指明，否貝|J「雜環（heterocycle)」一詞指的 10 200920355 是由碳與氫與至少一雜原子（例如’ N、0或S)所構成之芳香族、部分芳香族或非芳香族的單環或多環或環系統^ _ 個雜環可包含數個（即，2個或多個）併合或連結在_起的環。雜環類包含雜芳類。實例包含（但不限於）苯並[1，3 ] 間二口号'坐基（benzo[l，3]dioxolyl)、2,3-二氫·苯並[ι，4]二口号英基（2,3-dihydro-benzo[l，4]dioxinyl )、口辛琳基 (cinnolinyl)、口夫喃基（furanyl)' 腺乙醯基（hydantoinyl)、口末琳基（morpholinyl )、氧雜環丁基（oxetanyl )、環氧乙基（oxiranyl )、旅口井基（piperazinyl )、派咬基 (piperidinyl)、》比洛烧綱基（pyrrolidinonyl)、》比洛唆基 (pyrrolidinyl )、四氫呋喃基（tetrahydrofuranyl )、四氫 11比喃基（tetrahydropyranyl )、四氫比咬基 ( tetrahydropyridinyl ) 四氫0^ 咬基 ( tetrahydropyrimidinyl ) 四氫嗟吩基 ( tetrahydrothiophenyl ) 、四氬嚷〇tb 喃基 (tetrahydrothiopyranyl )及戊内醯胺基（vaier〇lactamyl )。除非特別指明’否則「雜環烧基（heterocyclealkyl)」或「雜環-烷基（heterocycle-alkyl)」一詞指的是一雜環基團連結至一烷基基團。除非特別指明，否則「雜環烧基（heterocycloalkyl)」一詞指的是一非芳香族雜環。除非特別指明，否則「雜環烷基烷基 (heterocyCl〇aikylalkyl)」或「雜環烷基-烷基」一詞指的是一雜環烷基基團連結至一烷基基團。 200920355 除非特別指明，否則「管理（“manage” 、“managing”及 “management”）」一詞係包含預防病患（已經罹患疾病或異常）某特定疾病或異常的復發，與/或延長罹患該疾病或異常之患者保持缓解（remission)的時間。該詞彙包括調節該疾病或異常的閾值（threshold)、發展及/或持續時間，或改變該病患對於該疾病或異常的反應方式。除非特別指明，否則「藥學上可接受之鹽類」一詞係指自藥學上可接受之無毒性酸類或鹼類（包含無機酸及無機鹼以及有機酸及有機鹼）所製備之鹽類。適當的藥學上可接受之驗加成鹽類（base addition salt)包括但不限於：由鋁、鈣、鋰、鎂、鉀、鈉及辞所形成的金屬鹽類（metallic salt)，或由離胺酸（lysine)、N，N二苄基乙二胺 (N,N5-di benzyl ethyl enedi amine)、氣普魯卡因 (chloropro caine)、膽驗（choline)、二乙醇胺 (diethanolamine)、乙二胺（ethy lenediamine)、葡胺 (meglumine)(N-葡甲胺）及普魯卡因（procaine)所形成的有機鹽類（organic salt) »適當的無毒性酸類包括但不限於：諸如乙酸（acetic acid)、薄酸（alginic acid)、鄰胺基笨曱酸 (anthranilic acid)、苯確酸（benzenesulfonic acid)、苯甲酸 (benzoic acid)、樟腦續酸（camphorsulfonic acid)、棒檬酸 (citric acid)、乙稀基續酸（ethenesulfonic acid)、犧酸 (formic acid)、反-丁稀二酸（fumaric acid)、0夫喃曱酸 (furoic acid)、半乳糖搭酸（galacturonic acid)、葡萄糖酸 (gluconic acid)、葡萄糖酸酸（glucuronic acid)、麩胺酸 12 200920355 (glutamic acid)、乙醇酸（glycolic acid)、氫溴酸 (hydrobromic acid)、鹽酸（hydrochloric acid)、經基乙續酸 (isethionic acid)、乳酸（lactic acid)、順-丁稀二酸（maleic acid)、蘋果酸（malic acid)、苯乙醇酸（mandelic acid)、曱基續酸（methanesulfonic acid)、黏液酸（mucic acid)、頌酸 (nitric acid)、雙經萘酸（pamoic acid)、泛酸（pantothenic acid)、苯乙酸（phenylacetic acid)、鱗酸（phosphoric acid)、丙酸（propionic acid)、柳酸（salicylic acid)、硬脂酸（stearic acid)、破雖acid)、續胺酸（sulfanilic acid)、硫酸（sulfuric acid)、酒石酸（tartaric acid)、及對曱苯績酸 (p-toluenesulfonic acid)等無機酸與有機酸。特定的無毒性酸包括鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸及曱基磺酸。因此，特定的鹽類包括鹽酸鹽（hydrochloride salt)及曱磺酸鹽 (mesylate salt)。其他則為此技術已知之鹽類，參照例如 Remington ’ s Pharmaceutical Sciences,第 18 版(Mack Publishing, Easton PA: 1 990)及 Remington: The Science and Practice of Pharmacy,第 19 版（Mack Publishing， Easton PA: 1 9 9 5)。除非特別指明，否則「預防（“prevent” 、“preventing” 及“prevention”）」此詞意指發生於病患開始罹患特定疾病或異常之前的行動’其可抑制或減少該疾病或異常的嚴重度。換句話說’該詞囊包括預防法（prophylaxis)。除非特別指明’否則一化合物之一「預防有效劑量 (prophylactically effective amount)」係一足以預防疾病或 13 200920355 徵兆（或是與該疾病或異常相關之一或多種症狀）或預防其復發之劑量。化合物的預防有效劑量為治療藥劑的一劑量，其可單獨或搭配其他藥劑在該疾病的預防中提供預防疾病的好處。「預防有效劑量」一詞可以包括可改善整體預防法或提高另一預防藥劑之預防效應的劑量。除非特別指明，否則「Sip水平提高劑（S1P ievel enhancing agent)」一詞意指一化合物的 sLEF至少約1 0 倍。除非特別指明’否則「S 1 Ρ水平提高係數（s 1 Ρ 1 e v e 1 enhancing factor 或 SLEF)」一詞意指以 100 mg/kg 的單劑量化合物口服施用於小鼠對脾臟内SIP的提高，其係由下述之實施例所述之方法所測定。除非特別指明，否則「立體異構混合物（stereoisomeric mixture)」一詞包含外消旋混合物（racemic mixture)及立體異構濃縮混合物（stereomerically enriched mixture)(例如，R/S = 30/70 、 35/65 、 40/60 、 45/55 、 55/45 、 60/40 、 65/35 及 70/30)。除非特別指明，否則「純淨立體異構（stereomerically pure)」一詞係指一組合物，其包含一化合物之一立體異構物，且實質上不含該化合物的其他立體異構物。例如’具有一個立體中心之化合物的純淨立體異構組合物，將實際上不具該化合物之反立體異構物。而具有兩個立體中心之化合物的純淨立體異構組合物，將實際上不具該化合物之其他非鏡像立體異構物（diastereomer)。一典型純淨立體異 14 200920355 構化合物包含重量百分比大於約80%之該化合物的一立體異構物及重量百分比小於約2〇%之該化合物的其他立體異構物、重量百分比大於約90%之該化合物的一立.體異構物及重量百分比小於約10%之該化合物的其他立體異構物、重量百分比大於約95%之該化合物的一立體異構物及重量百分比小於約5%之該化合物的其他立體異構物、重量百分比大於約97%之該化合物的一立體異構物及重量百分比小於約3%之該化合物的其他立體異構物、重量百分比大於約99%之該化合物的一立體異構物及重量百分比小於約1 %之該化合物的其他立體異構物。除非特別指明，否則當詞彙「經取代（substituted)·!用於描述一化學結構或基團時其意指該結構或基團之衍生物，其中該結構或基團之一或多個氫原子係經化學基團或官能基（functional group)取代，該化學基團或官能基諸如 (但不限於）：醇類、醛類、烷氧基、鏈烷氧基（alkan〇yi〇xy)、燒氧基幾基（alkoxycarbonyl)、烯基、院基（諸如’曱基、乙基、丙基、第三-丁基）、炔基、烷羰氧基（alkylcarbonyloxy) (-OC(O)烷基）、醯胺（-C(O)NH-烷基-或-烷基NHC(O)烷基）、脒基（-C(NH)NH-烷基或- C(NR)NH2 )、胺類（一級、二級及三級，諸如烧胺基（alkylamino)、芳胺基 (arylamino)、芳基貌胺基（arylalkylamino))、芳醯基 (aroyl)、芳基、芳氧基、偶氮、胺甲醢基（carbamoyl) (-NHC(0)0-烷基-或-0C(0)NH-烷基）、胺基曱醯基 (carbamyl)(例如，CONH2、C0NH-烷基、C0NH-芳基及 15 200920355 CONH-芳烧基）、羰基、羧基、羧酸、羧酸酐、氣化缓酸、氰基、酯類、環氧化物、醚類（例如，甲氧基、乙氧基）、胍基（guanidino)、鹵基（halo)、鹵炫基（例如，-CCl3、-CF3、 -C(CF3)3 )、雜烷基、半縮醛（hemiacetal )、亞胺（一級及二級）、異氰酸鹽、異硫氰酸鹽、酮類、腈類、硝基、氧、礙酸二酯（phosphodiester)、硫化物、績酿胺基 (sulfonamido )(例如，SO2NH2 )、職類（sulfone )、績趨基（sulfonyl )(包含烷磺醯基、芳磺醯基及芳烷基磺醯基）、亞礙（sulfoxide )、硫醇基（thiol )(例如，硫氫基 (sulfhydryl )、硫醚（thioether ))及尿素（urea ) (-NHCONH-烷基-)。除非特別指明，否則一化合物之一「治療有效劑量 (therapeutically effective amount)」係一足以在一疾病或症狀的治療或管理中提供治療好處的劑量，或是足以延緩或使一或多個與該疾病或異常相關之症狀減至最輕的劑量。化合物的治療有效劑量意指治療藥劑的一劑量，其可單獨或搭配其他治療在該疾病或症狀之治療或管理上提供治療好處。詞彙「治療有效劑量」包括可改善整體治療、減少或避免疾病或症狀的徵候或起因或是提高另一治療藥劑之治療效應的一劑量。除非特別指明，否則「治療（“treat”、“treating”及 “treatment”）」此詞乃盤計一種在病患正罹患特定疾病或異常時所採取的行動，其減輕該疾病或異常的嚴重度，或是阻滯或減緩該疾病或異常之進展。 16 200920355 除非特別指明，否則「包含」一詞和「包含，但不於」具有相同之意義。同樣地，「諸如」—詞和「諸如，不限於」具有相同的意義。除非特別指明，否則一連串名詞前方的一或多個形詞被視為應用於該些名詞的各者上。例如「選擇性經取之统基 '芳基或雜芳基」此句和「選擇性經取代之烷基選擇性經取代之芳基、選擇性經取代之雜芳基」具有相之意義。除非特別指明’否則化合物或化合物種類的結構或稱包括化合物或化合物種類的所有形式以及包含化合物化合物種類的所有組合物。應注意的是’一個形成一個大塑化合物的一部分之學基團，在文中可使用當其以一單獨分子存在時一般所予之名稱或是一般賦予其基團之名稱。例如當用於描述個連接在其他化學基團的基團時，「吡啶」及「吡啶基」賦予了相同的意義。因此，「ΧΟΗ，其中X為吡啶基」「ΧΟΗ，其中X為吡啶」這兩個句子被鹎予了相同之意拿且包含化合物吡啶_2_醇、吡啶_3-醇、》比啶_4_醇。亦應；主意者係假如一結構或一結構之一部分的立體學並未以例如粗線或虛線標示，則該結構或該結構的該分應被視為包含其所有立體異構物。再者，圓式中所示具有未滿足原子價（unsatisfied valence)的任何原子係假連接足夠的氫原子以滿足其原子價。此外，要是原子價許，以一實線平行於一虛線所示之化學鍵包含單鍵及雙（限但容代 > 同名或化賦被及匕，化部之定容例 17 200920355 如芳香族）鍵。化合物本發明係關於包含可在活體内減少S 1 P裂解酶活性之化合物與至少一影響免疫或發炎反應之額外藥劑的組合物與其應用方法。 S1P裂解酶抑制劑本發明盤計S1P裂解酶抑制劑的應用，其揭露於2007 年1月25日申請之美國專利申請號u/6 98,253。特定化合物係式I :

或其藥學可接受之鹽類，其中：X係0或NR3 ; Ri係 OR1A、NHOH、氫、或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；R2係 OR2A、C(0)0R2A、氫、鹵素、腈類、或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；R3 係 OR3A、N(R3A)2、nhc(o)r3A、nhso2r3A 或氫；R4係OR4A、〇c(o)r4A、氫、_素、或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；R5係N(R5A)2、氫、羥基、或選擇性經 18 200920355 取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、基雜環或雜環烧基；而各個RlA、Κ·2Α、Κ·3Α、Κ·4Α 別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基。式I的特定化合物係若X為〇 ; Ri係1 -4碳笨基、苄基或苯乙基；R2係氫；且R4與R5之一則R4與R5另一者就不是1 -6碳的烷基、1 -6碳的具有高達每個碳一個羥基之1 - 6個碳的聚羥烷基達每個碳一個乙醯基之1-6碳的聚乙醯烷基、苯或苯乙基。特定實施例中，化合物不是2-乙醯-4-四羥丁 1-(4-(1，1,2,2，4-五羥基丁基）-1Η-咪唑-2-基）乙酮醯-1H -咪唑-4-基）丁烷-1，1，2,2 -四基四乙酸酯或 -1H-咪唑-4-基）丁烷-1,1，2,2,4-五基五乙酸酯。特定實施例包括式Π : 雜環、烷與Κ·5 A分芳烷基、的烧基、為羥基；羥烷基、、具有兩基、苄基基咪β坐、、1 -(2-乙 1 -(2-乙醯

II 的化合物與其藥學可接受之鹽類，其中：X NR3 ; 係OR1A、NHOH、氫、或選擇性經取代芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜係 Ο或之烧基、環或雜環 19 200920355 烷基；R2係OR2A、C(0)0R2A、氫、i素、腈類、或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；R3係〇R3A、N(R3A)2、NHC(0)R3A、 NHSO2R3A 或氫；R6 係 OR6A、〇C(0)R6A、N(R6B)2、 nhc(o)r6B、氫或自素；R7 係 OR7A、0C(0)R7A、N(R7B)2、 nhc(o)r7B、氫或 i 素；r8 係〇R8A、oc(o)r8A、N(R8B)2、 nhc(o)r8B、氫或鹵素：R9 係 CH2OR9A、ch2oc(o)r9A、 N(R_9b)2、nhc(o)r9B、氫或鹵素；各個 R1A、R2A、r3a、 R6A、R7A、R8A與R9A分別為氫或選擇性經取代之烷基、方基、炫* ^基、芳院基、雜烧基、雜環、烧基雜環或雜環烧基’而各個R_6B、R_7B、尺“與R_9B分別為氫或選擇性趣一或多個羥基或函素基團取代之烧基。式II的特定化合物係：丨）若X係0、Ri為丨-4碳的境基、苯基、苄基或苯乙基且R2係氫，則至少兩個R6、r7、 R8與R9不是羥基或乙酸根（acetate) ; 2)若X係Ο、係甲基、R·2係氫、Re與R7兩者係羥基且r8與R9其中之〜係氳，則另一個就不是NHC(0)R9B ; 3)若X係Ο、R,係〇 R 1 A ( R 1 A係風或小型燒基）且R 2係氮，則至少一個（但非全部）R6、R_7、R8與R9係羥基或乙酸根。本發明之特定化合物係式II(a): 20 200920355

H(a) 其他係式in :

HO

III 其中：Z係選擇性經取代之垸基；R!係〇R1A、ΝΗΟΗ、氫、或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；R2係or2A、c(o)or2A、氫、齒素、腈類、或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；113係〇R3A、 N(R_3A)2、NHC(0)R3A、NHSO2R3A 或氫；而各個 R1A、R2a 與r3A分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基。特定化合物係式： 21 200920355

本發明另一實施例包括式IV :

R1 叭 R3 R7 Re ==\ K6

IV 的化合物與其藥學可接受之鹽類，其中：1^係0RiA、 NHOH、氫、或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；尺3係〇R3a、 N(R3A)2、nhc(o)r3A、nhso2r3A 或氫；r6 係 0R6A、 oc(o)r6A、n(r6B)2、nhc(o)r6B、氫或 i 素；r7 係〇r?a、 0C(0)R7A、N(R7B)2、NHC(0)R7B、氫或 _ 素；n8 係〇R8A、 oc(o)r8A、n(r8b)2、nhc(o)r8B、氫或南素；r9 係 CH2OR9A、CH20C(0)R9A、N(R9B)2、NHC(0)R9B、氫或鹵素；而各個RlA、R3A、R6A、R7A、R8A與R9A分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜壞、烧基雜環或雜環院基。 22 200920355 特定化合物係式IV(a):

Ri r3 IV(a) 其他係式：

R3 關於上方包含下述基團之各個式，本發明某些實施例係：某些實施例中，X係0。其他實施例中，X係nr3。某些實施例中，R i係氫。其他實施例中，R i係選擇性經取代之小型烷基。其他實施例中，Ri係NHOH。其他實施例中，R1係〇 R1 a且R1 a係諸如氫或選擇性經取代之小型烧基。某些實施例中，R2係氫。其他實施例中，R2不是氫。其他實施例中，R2係腈類。其他實施例中，R2係選擇性經取代之小型烷基。其他實施例中，R2係 OR2A。其他實施 23 200920355 例中’ R2係C(0)0R2A。某些實施例中，Rza係氫或選擇性經取代之小型烷基。某些實施例中，R3係ORsa。其他實施例中，r3係 n(r3A)2 或 nhc(o)r3A。其他實施例中’ R3 係 nhs〇2R3a。某些實施例中，RSA係氫或選擇性經取代之小型烧基。其他實施例中，R·3 a係選擇性經取代之芳基或雜環。某些實施例中，R4係。其他實施例中，R4係鹵素。某些實施例中’ Rs係N(R5A)2。其他實施例中，Rs係氫。其他實施例中，Rs係羥基。其他實施例中，Rs係雜烷基（例如，烷氧基）。其他實施例中，R$係選擇性經取代之烧基。其他實施例中，R5係選擇性經取代之芳基。某些實施例中’一或多個、R7、與R9係羥基或 i素。某些實施例中’所有的R6、R7、r8與R9係羥基或乙酸根。某些實施例中’ Z係選擇性經一或多個經基、乙酸根或鹵素基困取代之烷基。本發明之化合物（即，本文所揭露之化合物）可包含一或多個立體中心’且可能存在有鏡像異構物的外消旋混合物或非鏡像異構物的混合物。本發明涵括上述化合物的純淨立體異構形式及這些形式的混合物。立體異構物可為不對稱合成或使用標準技術解析，如掌形異構物分離管柱或掌升》解析劑。參閱’例如’ Jacques，j·等人五 Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, New York, 24 200920355 1981);Wilen，S.H.等人 Tetrahedron 33 ： 2725 (1 977)； Eliel, E. L., Stereochemistry of Carbon Compounds^WLcGraw Hill, NY， 1962);及 Wilen， S.H·， Tables of Resolving Agents and Optical Resoultions，第 268 頁（E.L. Eliel, Ed., Univ. of N o t r e D a m e P r e s s, N o t r e D a m e，IN, 1 9 7 2) 〇本發明更包含本文揭露之化合物的立體異構混合物。其亦包括本文揭露之化合物的結構異構物，不論為混合物或純淨或大致純淨形式，諸如順式（Z)與反式（E)烯烴異構物與同（syn)與逆（anti)肪異構物。某些化合物為循環淋巴球減少劑。特定化合物可抑制循環淋巴球之數量高於約20、50、75、100、150或200%，這係由實施例所述之方法測定。某些化合物直接或間接活體内抑制 S 1 P裂解酶且係 S1P水平提高劑。特定化合物可提高S1P量高於約10、15、 20、25或3 0倍，這係由下方實施例所述之方法測定。可藉由技術中已知的方法（例如，藉由改變與增加 Pyne, S.G., ACGC Chem. Res. Comm. 1 1:108-1 12 (2000)； Halweg, K.M.與 Bttchi，G.，J.Org.Chem. 50:1 134-1 136 (1985)所述之方法）與本文所述之方法製備式I之化合物〇免疫抑制與抗-發炎劑適合用於本發明之方法與組合物之免疫抑制劑包括技術中習知之那些免疫抑制劑。實例包括胺喋呤、硫唑嘌呤 (azathioprine)、環孢靈 A(cyclosporin A)、D-青黴胺（D-penicillamine)、金鹽、羥基氯奎寧（hydroxychloroquine)、 25 200920355 來氟米特（leflunomide)、滅殺除癌（methotrexate)、米諾環素（minocycline)、雷帕黴素（rapamycin)、柳氮磺胺呦啶 (sulfasalazine)、他克莫司（tacr〇iimus)(FK506)與其藥學可接受之鹽類。特定免疫抑制劑係滅殺除癌。額外實例包括抗-TNF抗體，諸如阿達木單抗 (adalimumab)、.塞妥珠單抗（certolizumab pegol)、依那西普（etaner cep t)與英夫利昔單抗（infliximab)。其他包括白介素-1阻擋劑，例如何那白滞素（anakinra)。._其:他.包括抗-B 細胞（CD20)抗體，例如利妥昔單抗（rituximab)。其他包括 T細胞活性阻礙劑，例如阿巴西普（abatacept)。額外實例包括單磷酸肌苷脫氫酶抑制劑，諸如霉酚酸酯（mycophenolate mofetil) (CellCept®)與霉盼酸 (mycophenolic acid) (Myfortic®) ° 適合用於本發明之方法與組合物的抗發炎藥物包括技術中習知的那些藥物。實例包括酷皮質素（glucocorticoid) 與 NSAID » 醣皮質素的實例包括醛固酮、倍氣米松 (beclometasone)、倍他米松（betamethasone)、可體松 (cortisone)、去氧皮質固酮（deoxycorticosterone) ' 地塞米松（dexamethasone)、故氫可體松（fludrocortisone)、氫可體松（hydrocortisone)、甲基普賴蘇漠（methylprednisolone)、普賴蘇濃（prednisolone)、普賴松（prednisone)、曲安西龍 (triamcinolone)與其藥學可接受之鹽類。 NSAID 的實例包括柳酸化合物（諸如，阿司匹靈 26 200920355 (aspirin)、阿莫西靈（amoxiprin)、貝諾醋（benorilate)、柳酸膽驗鎮（choline magnesium salicylate)、二氟苯柳酸 (diflunisal)、菲斯拉敏（faislamine)、柳酸甲醋、柳酸鎂、雙柳酸3旨（salic yl sal icyl ate)與上述之藥學可接受鹽類）、芳基烧酸化合物（諸如，雙氣芬酸（diclofenac)、醋氣芬酸 (aceclofenac) 艾斯美辛（acemetacin) 、 ί臭芬酸 (bromfenac)、依托度酸（etodolac)、吲哚美辛 (indometacin)、萘丁美嗣（nabumetone)、舒林酸（sulindac)、托美汀（tolmetin)與上述之藥學可接受鹽類）、芳基丙酸化合物（諸如’依普芬（ibuprofen)、卡洛芬（carprofen)、芬布芬（fenbufen)、非諾洛芬（fenoprofen)、夫比普洛芬 (flurbiprofen)、凱妥普洛芬（ket〇profen)、克妥洛 (ketorolac)、洛索洛芬（i〇XOprofen)、那普洛辛（napr〇xen)、奥沙普秦（oxa.prozin)、泰普菲酸（tiaprofenic acid)、舒洛芬 (suprofen)與上述之藥學可接受鹽類）、芳基鄰胺苯甲酸化合物（諸如’甲氣芬那酸（mecl〇fenamic acid)、甲芬那酸 (mefenamic acid)與上述之藥學可接受鹽類）、吡唑啉酮衍生物（諸如’阿札丙宗（azapropazone)、安乃近 (metamizole)、幾布宗（〇Xyphenbutazone)、苯丁 .唾 _ (phenylbutazone)、燒吩帕宗（suifinpraz〇ne)與上述之藥學可接受鹽類）、昔康類（oxicam)(諸如，氣諾昔康 (lornoxicam)、美洛昔康（mei〇xicam)、比羅昔康 (piroxicam)替諾昔康（tenoxicam)與上述之藥學可接受鹽類）c〇x 2抑制劑（諸如，塞來考昔（ceiec〇xib)、依託考 27 200920355 昔（etorieoxib)、羅美昔布（lumirac〇xib)、帕瑞考昔 (parecoxib)、羅非昔布（r〇fecoxib)、伐地昔布（valdec〇xib) 與上述之藥學可接受鹽類）與磺醯胺苯類（sulph〇nanilide) (諸如，尼美舒利（nimesulide)與其藥學可接受之鹽類）。應用方法本發明包括治療、管理或預防患者（例如，人類）中免疫或發炎疾病或異常之方法，其包括抑制患者内的SIPS 解酶活性並對患者施用藉由不同機制作用的免疫抑制與/ 或抗-發炎藥物。本發明亦包括減少治療、管理或預防免疫或發炎疾病或異常所需之免疫抑制與/或抗-發炎藥物劑量的方法，其包括對患者輔助性施用抑制S 1 P裂解酶活性之化合物。此方法可減少與許多免疫抑制及抗·發炎藥物有關之毒性並同時維持其效力。免疫與發炎疾病與異常的實例包括艾迪生病 (Addison's Disease)、抗磷脂症候群（anti_ph〇spholipid syndrome)、氣喘、異位性皮膚炎（atopic dermatitis)、自體免疫萎縮性胃炎（autoimmune atrophic gastritis)、自體免疫胃酸缺乏（achlorhydra autoimmune)、貝西氏病（Behcet’s disease)、腹腔性疾病（Celiac Disease)、慢性自體性蓴蘇療 (chronic idiopathic urticaria)、慢性嬰兒神經皮膚與關節 (Chronic infantile neurological cutaneous and articular, CINCA)症候群（亦稱為新生兒發病多系統發炎疾病 (neonatal-onset multisystem inflammatory disease, 28 200920355 NOMID))、慢性阻塞性肺病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD)、克隆氏症（Crohn's Disease)、庫欣氏症候群（Cushing’s Syndrome)、皮肌炎（dermatomyositis)、古德巴斯德症候群（Goodpasture's Syndrome)、移植物抗宿主疾病（graft-vs-host disease)、葛瑞夫茲病（Grave's Disease)、橋本氏曱狀腺炎（Hashimoto's thyroiditis)、特發性腎上腺萎縮（idiopathic adrenal atrophy)、特發性血小板減少 (idiopathic thrombocytopenia)、藍伯-耶頓症候群 (Lambert-Eaton Syndrome) 、紅斑性狼瘡(lupus erythematosus)、多發性硬化症（multiple sclerosis)、類天皰瘡（pemphigoid)、尋常型天皰瘡（pemphigus vulgaris)、惡性貧金（pernicious anemia)、花粉熱（pollinosis)、結節狀多動脈炎（polyarteritis nodosa)、原發性膽汁性肝硬化 (primary biliary cirrhosis)、原發性硬化性膽道炎（primary sclerosing cholangitis)、牛皮癬（psoriasis)、雷諾式症 (Raynauds)、雷德氏症候群（Reiter's Syndrome)、復發性多軟骨炎（relapsing polychondritis)、類風濕性關節炎 (rheumatoid arthritis)、鼻炎（rhinitis)、施密特氏症 (Schmidt's Syndrome)、敗血症（sepsis)、薛格連氏症候群 (Sjogren's Syndrome)、交感性眼炎（sympathetic ophthalmia)、高安氏血管炎（Takayasu’s Arteritis)、顳動脈炎（temporal arteritis)、曱狀腺毒症（thyrotoxicosis)、移植排斥（例如，組織移植、骨髓移植）、潰瘍性大腸炎（ulcerative colitis)、葡萄膜炎（uveitis)、血管炎（vasculitis)與華格納 29 200920355 肉芽腫（Wegener's granulomatosis) 〇化合物之數量、施用路徑與劑量排程取決於下列因素，諸如即將治療、預防或管理之特定徵兆以及患者之年紀、性別與狀態。技術中習知上述因素所扮演的角色，且可藉由例行的實驗加以調整。特定實施例中，以約〇. 5、1、 2.5或5 .mpk的量對人類患者施用式I之化合物。藥學配方本發明包含藥學組合物，其包含至少兩個活性藥學成分。某些藥學組合物係適合口服、黏棋式施用（例如，鼻部、舌下 '陰道 '頻内或直腸式）、非腸胃式施用（例如，皮下、靜脈内、快速注射（bolus injection)、肌肉内或動脈内）或皮膚渗透式施用於患者的單一單位（single unit)劑型。劑型的實例包括（但不限於）：藥片（tablet);糖衣鍵（capiet);膠囊（capsule)，例如軟式彈性凝膠膠囊（soft elastic gelatin capsule);膠囊（cachet);片劑（troche);键劑（l〇zenge);擴散劑（dispersion);栓劑（suppository);藥膏（ointment);泥罨劑（cataplasm)(糊藥（poultice));糊劑（paste);藥粉 (powder);軟膏（dressing);乳膏（cream);膏藥（plaster); 藥水（solution);貼片（patch);氣霧劑（aerosol)(例如，鼻部喷霧器或吸入器）；凝膠（gel);適合口服或黏膜式施用於患者的液體劑型，包括懸浮劑（例如，水相或非水相液體懸浮劑，水基乳劑（〇il-in-water emulsion)或油基液體乳劑 (water-in-oil liquid emulsion))、藥水與酿劑（elixir);適合非腸胃式施用於患者的液體劑型；以及滅菌固體（例如，結 30 200920355 晶或非晶固體），其可經重新構成以提供適合非腸胃式施用於患者的液體劑型》該配方應與施用模式相稱。例如，口服需要腸溶包膜 (enteric coating)以保護本發明之化合物在胃腸道中不被分解。同樣地，配方内可含有能幫助運送活性成分至作用位置的成分。例如，為了保護化合物免於酵素的分解、幫助其在循環系統内的運送及使其有效穿透細胞膜至細胞内等目的，可用脂質體配方來施用化合物。劑型之成分、外形與類型將取決於其之應用而有所改變。例如，用在疾病急性治療之劑型比起用在相同疾病慢性治療之劑型而言包含較大量的一或多種活性成分。同樣地，非腸胃式劑型比起用於治療相同疾病之口服劑型而言包含較少量的一或多種活性成分。本發明包含之特定劑型的這些與其他方面彼此之間有所不同，且熟悉技術人士可輕易理解之。參閱，例如Kew/wgion’s p/jarwiiceMi/ca/ Sciences，第 18 版，Mack Publishing, Easton PA (1990) » 口服剤型適合口服施用之本發明的藥學組合物可以不同的劑型呈現，諸如（但不限於）藥片（例如，可咀嚼的藥片）、糖衣錠、膠囊及液體（例如，調味糖漿）。這些劑型含有預定劑量的活性成分，並且可以利用配藥習知技術來製備，可以參照、Remington's Pharmaceutical Sciences,第 1 8 版(Mack Publishing, Easton PA: 1990) 〇典型口服劑型的製備，依照習知的藥物化合技術，係 31 200920355 於一適當的混合物中以至少一賦形劑（excipient)化合活性成分。賦形劑可以依據施用所欲之劑型而有許多不同的種類選擇。因為施用的便利性’藥片及膠囊為最有效的口服劑型。如果有需要’藥片可以利用標準水溶液或非水溶液技術進行外部塗層。這些劑型可以利用習知的配藥學方法來製備。一般來說，藥學組合物及劑型的製備，係將活性成分與液體載體（liquid carrier)、微細的固體載體（s〇Hd carrier)或二者，進行均質且充分的混合，然後形塑所得產物成為需要的形狀。固體劑型必須添加崩解劑（disintegrant) 以幫助快速的溶解。赤可添加润滑劑（1 u b r i c a n t)以助於劑型（例如，藥片）的製造。非勝道刺型非腸道劑型可以多種不同的路徑施用於患者，包括（但不限於）皮下、靜脈内（包括快速注射）、肌肉内及動脈内。由於這些給藥方式通常避開了患者對抗污染物的自然防紫系統，因此，非腸道劑型特別需要滅菌或在施用於患者之前進行滅菌。非腸道劑型的例子包括但不限於注射用的溶液、用於注射之可溶解或懸浮於一藥學上可接受之載體 (pharmaceutically acceptable vehicle)的乾燥產物、注射用懸浮液及乳狀液。熟悉技術之人士習知可用於提供非腸道劑型之合適載體。其實例包括但不限於注射USP用的水；水溶液載體，例如但不限於氯化鈉注射、林格（R i n g e r ’ S)注射、右旋糖 32 200920355 (Dextrose)注射、右旋糖及氯化納注射，以及乳酸化林格注射；水溶性載體，例如但不限於乙醇、聚乙二醇 (polyethylene glycol)及聚丙二醇（polypropylene glycol); 及非水溶性載體，例如但不限於玉米油（corn oil)、棉花子油（cottonseed oil)、花生油（peanut oil)、芝麻油（sesame oil)、油酸乙酯（ethyl oleate)、肉豆蔻酸異丙酯（isopropyl myristate)及苯曱酸笨甲酯（benzyl benzoate)。皮唐滲透、届部及黏膜劑型皮膚滲透、局部及黏膜劑型包括但不限於眼溶液 (ophthalmic solution)、喷劑、浮質、乳液、乳霜（lotion)、藥膏、凝膠、溶液、乳狀液、懸浮液或其它技術中習知的齊！I 型，可以參考 Remington’s Pharmaceutical Sciences，第 18 版（Mack Publishing, Easton PA: 1980&1990);以及 Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms,第 4 版（Lea & Febiger，Philadelphia: 1985)。皮膚滲透劑型包括「儲存型（reservoir type)」或「骨架型（matrix type)」貼片，其可施用於皮膚上，並且使用一段時間以允許活性成分之所欲劑量穿透皮膚。可用於提供皮膚滲透'局部及黏膜劑型之適當賦形劑 (例如，載體及稀釋液）及其它物質係技術中所習知的，且取決於已知藥學組合物或劑型施用的特定組織而定。依據即將處理的特定組織，額外成分可能使用於本發明之活性成分處理前、處理後或與該活性成分併同使用。例如，穿透促進劑（penetration enhancer)可用於幫助將活 33 200920355 性成分送至該組織。藥學組合物、劑型或其施用組織之PH值的調整，有助於改善一或多個活性成分的運送。同樣的，亦可調整溶劑載體的極性、離子強度或液體張力（t ο n i c i t y )以改善運送效率。一些化合物（例如，硬脂酸醋）亦可添加至藥學組合物或劑型内以改變一或多個活性成分的親水性或親脂性，進而改善活性成分的運送效率。就這一點而言，硬脂酸酯可作為配方的脂質運送體（lipid vehicle)、乳化劑或界面活性劑及運送促進劑或穿透促進劑。活性成分之不同形式可進一步用以調整所形成之組合物的特性。實施例本發明之態樣可藉由下述實施例加以理解，但其並非用來限制本發明之範圍。 1.1. (E/Z)-l-(4-((lR.2S,3R)-l,2,3,4-四羥丁某）-1Η- 咪唾_-_2z_&_h_L·_m_n. ((E/Z)-l-r4-(flR.2S.3R)-1.2.3.4-tetrahvdroxvbutvn-lH-i midazol-2-yn-ethanone oxime)的合成

OH 將 1-[4-((1 R,2S,3R)-1,2,3,4 -四羥基-丁基）-1 H -咪唑 -2-基]-乙酮（THI，根據 Halweg，K.M.與 Btichi，G·， 34 200920355 J.Org.Chem. 50:1134-1136 (1985)加以製僙）（350 mg，1.52 mmol)懸浮於水（10 ml)中。加入氫氣酸羥胺（hydroxyl amine hydrochloride)(126.8 mg，1.82 mmol，1.2 當量）與乙酸鈉 (24 7.3 mg，3.04 mmol，2當量）並在50°C下攪拌懸浮液。約4小時後反應混合物變得清澈。在5 〇〇C下持續攪拌i 6 小時。LCMS分析指出產物的形成與起始材料的消失。讓反應混合物達到室溫並通過微孔過濾器。直接用此溶液來純化產物，這係藉由利用製備級（preparatiVe)HPLC :

Atlantis HILIC 破土管柱（siHca c〇lumn)30 X 100mm ;超過 ό分鐘溶於乙腈中的2% - 21%水；45毫升/分；在254 nm 下偵測。收集產物部分（fraeti〇n)並在減壓下蒸發乙腈。將水溶液凍乾以產生產物，約3: 1之逆：同異構物的白色固體混合物：284 mg (77%)。 LCMS : Sunfire C-18 管柱 4.6 X 5 0mm ;超過 5 分鐘溶於水（0.1% TFA)中之〇 _ 17% MeOH (0.1% TFA);流速=3 毫升/分；偵測220nm ;滯留時間：0.56分（同異構物，246.0 (M+1))及〇_69 分（逆異構物，246.0 (M+l))。4 NMR (D20 與 DC1) δ 2.15 與 2.22 (單線（singiet)，3H)、3.5 - 3.72 (m， 4Η)、4·76 (br、〇H 質子與 h20)、4.95 與 4.97 (單線，1H)、 7.17 與 7.25 (單線，iH)。13c NMR (D2O 與 DC1) δ 10.80、 16.76、63.06、64.59、64.75、70.86、72.75、72.85、117.22、 117.64、 135.32、 138.39、 141.35、 144.12。 35 200920355 1.2. fE)-l-(4-((lR，2S.3R)-1.2.3.4-四 ^丁某唑-2-基乙網肟的合成

OH 在裝有THI (21.20 mmol ’ 4.88g)的燒瓶中加入水（25 m 1)與1N液態HC1 (21.2 ml’ 21.2 mmol)。在所有固體溶解後，加入溶於二氧陸囷（dioxane)(55 ml)中之三苯曱基經胺（25.44 mmol，7.00 g)溶液並維持反應在5(rc下4小時。完成時，將反應冷卻至室溫並藉由加入1N液態NaOH調整至pH = 7。接著將經中和之溶液濃縮至塑性團，藉由在矽膠[溶於DCM中之1〇〇/0 MeOH/1% NH4OH (溶於水中的5% 重量百分濃度溶液）]上快速層析（flash chromatography)加以純化以提供清晰塑料的三苯甲基-醚（trityl_ether)。以己烧處理塑性團並濃縮以提供白色泡沫，其可在真空下乾燥成片狀固體（10.00 g, 97 %產率）。在溶於二氧陸圜（90 ml)中之三苯甲基肟-醚（4.8 g，10 mmol)的劇烈攪拌室溫溶液中加入溶於二氧陸圜中之HC1 溶液（4M ’ 60 ml)。數分鐘後發現白色沉澱物，並在玻釉玻璃（fritted glass)濾器上過濾且以二氧陸圜與乙醚清洗濾餅 (Cake)之前持續攪拌整整30分鐘。將濾餅重新溶解於水 (2 0 0 ml) φ 、磁_ τ 聲裂5分鐘，接著冷卻至〇。〇、以矽藻土 36 200920355 (ceHte)(5 g)處理並在玻釉破璃濾器上過濾。將水溶液濃縮至乾燥，接著自甲醇（30HU)/二乙基謎（6〇1111)單離以提供分析上純淨之白色粉末的肟（3 8 g，8 〇 %產率）。 1,3* j j 四麵丁其）味嗤_2 -基）已嗣〇 -甲基柄的合巧

% och3 如描述於上方實施例1 · 1般製備標題化合物，這係藉由利用氫氯酸曱氧基胺（methoxylamine hydrochloride)取代氫氣酸羥胺，且有74%的產率。產物係白色絨毛狀固體。 LCMS: Sunfire C-18 管柱 4.6 X 50mm;超過 5 分鐘溶於水（0.1% TFA)中之 0 - 17% MeOH (0.1% TFA);流速=3 毫升/分；偵測220 nm;滯留時間：1.59分（同異構物，260.1 (M+1))與 1.73 分（逆異構物，260.1 (M+l))。〖H NMR (D2〇) δ2.18 與 2·22 (單線，3H)、3.54 — 3·60 (m，lH)、3.66- 3.79 (m，3H)、3.94 與 3.95 (單線，3H)、4.76 (br、OH 質子與 H2〇)、4_93 與 4_97 (單線，1H)、7.17 與 7.25 (單線， 1H)。13C NMR (D20) δ 11.55、17.56、62.32、62.38、62.99、 63.07 ' 67.09 > 71.54 、 73.86 、 119.09 、 138.64 、 139.79 、 142.95 、 144.98 、 148.97 〇 37 200920355 1-4. 1-(5-甲某-4-((111，28,31〇-1.2.3,4-四海丁基、-1|^ 咪唑-2-基）乙酮的合成

在溶於曱苯（200 ml)之 4_甲基咪唑（3.00 g，36.54 mmol)室溫溶液中連續加入三乙胺（5·6 ml，40.20 mmol)與 N, N-二 f 基胺續酿氯（MiV-dimethylaminosulfamoyl chloride) (3.9 rrd ’ 36.54 mmol)。將容器存放在 5 °C 冷藏室 48小時，接著自反應濾除固體並濃縮液體以得到4-曱咪唑 -1-二曱基胺續酿胺之位置異構物（regioisomer)的2.5: 1混合物。藉由矽膠（80-100 %乙酸乙酯：己烷洗提液）上快速層析來純化粗製產物以得到5.5 : 1混合的異構物（4 · 3 1 g，6 2 % 產率）：M+l = 190.1。在溶於四氫呋喃（70 ml)之4-甲咪唑-卜二曱基胺磺醯胺（1.99 g，10.54 mmol)的-78°C溶液中緩慢加入溶於己烷之《-BuLi溶液（2.5M，11.60 ml)» 40分鐘之後，將甲氧 -iV"-甲基乙酿胺（1.30 g，12.65 mmol)逐滴加入冷卻溶液中。讓反應回溫到室溫並維持2小時。完成時’藉由加入飽和NWCl水溶液（2〇 ml)來悴熄反應接著以水（20 ml)稀釋。將層分離並以乙酸乙酯（2 X 30 ml)清洗有機層。以鹵水（20 ml)清洗結合之有機物，接著在MgS〇4上乾燥並濃 38 200920355 縮。在矽膠（60-80%乙酸乙酯：己烷洗提液）上快速層析來純化粗製產物以提供油狀的4-甲基-2-乙醯咪唑_丨·二甲基胺磺醢胺（1.85 g，76%產率）：M+1 = 232.1。在溶於二氣曱烷（45 ml)之咪唑4 -曱基-2-乙醯咪唾_j· 二甲基胺確醯胺（1.65 g’ 7.14 mmol)溶液中連續加入三乙胺（1.00 ml’ 14.28 mmol)與三異丙基矽基三氟曱烷續酸輯 (triisopropylsilyl trifluoromethanesulfonate)(2.1 2 ml» 7 86 mmol)。將反應維持在室溫20小時，接著藉由加入飽和 NaHC03水溶液（20 ml)悴熄。以水（20 ml)稀釋混合物並分層。以二氣曱烷（2 X 20 ml)清洗水層並以鹵水溶液（2〇 ml) 清洗結合之有機物’接著在MgSCU上乾燥並濃縮。在梦膠 (1 -2%曱醇：二氣甲烷洗提液）上快速層析來純化得到之油狀物以提供燈色油狀物的4 -曱基- 2- (1-(三異丙基發氧）乙烯基）-1-二曱基胺磺醯胺（2.26 g，83%產率）：M+l = 388.2。在溶於四氫呋喃（40 ml)之4-甲基-2-(1-(三異丙基矽氧）乙稀基）-1-二甲基胺績酿胺（2.26 g，5.84 mmol)的-78 °C 溶液中缓慢加入《-BuLi (2.5M，3.27 ml)的己炫溶液。30 分鐘後，將溶於四氫呋喃（10 ml)之（-)-2,3-0-異亞丙基-D-赤酮酸内醋 ((-)-2,3-0-isopropylidine-D-erythronolactone)( 1.66 g ， 10.5 1 mmol)溶液緩慢加入-78°C溶液中。將反應維持在 -78°C下2小時’接著在藉由加入飽和NH4C1水溶液（20 ml) 悴熄反應前讓其回溫至〇°C。以水（10 ml)稀釋混合物並分層。以乙酸乙酯（2 X 20 ml)清洗有機物並以鹵水（20 ml)清 39 200920355 洗結合之有機物，接著在MgS04上乾燥並濃縮。在矽膠 (3 0-5 0%乙酸乙酯：己烷洗提液）上純化粗製產物以提供 2.69 g (85%產率）白色泡沫的 5-((3aR，6aR)-4-羥基-2,2-二甲基四氫氟[3,4-d][l,3]二口咢唑-4-基）-N,N,4-三甲基 -2-(1-(三異丙基梦氧）乙稀基）-iH-味哇-1-績臨胺 (5-((3aR,6aR)-4-hydroxy-2,2-dimethyltetrahydrofuro[3,4-d][l,3]dioxol-4-yl)-N,N,4-trimethyl-2-(l-(triisopropylsily loxy)vinyl)-lH-imidazole-l- sulfonamide) ： M+l =546.4 » 在溶於乙醇（70〇11)之5-((3&11，6&尺）-4-羥基-2,2-二甲基四氫氟[3,4-d][l,3]二口咢唑-4-基）-N,N，4-三甲基 -2-(1-(三異丙基矽氧）乙烯基）_iH -咪唑-1-績酿胺（2.09 g， 3.83 mmol) 0°C溶液中分成多部分加入粒狀NaBH4 (1.4 g，38.32 mmol)。2小時後，將反應回溫至室溫30分鐘接著濃縮。將殘餘物重新溶解於水（40 ml)與乙酸乙酯（40 ml) 中。將雙相混合物劇烈攪拌1 〇分鐘接著分層。以乙酸乙酯 (2 X 40 ml)清洗水層並以鹵水（30 ml)清洗結合之有機物，接著在MgS04上乾燥並濃縮。在矽膠（5%甲醇：二氣曱烷洗提液）上快速層析來純化粗製泡沫以提供5-((R)-羥基 ((4S，5R)-5-(羥曱基）-2,2-二曱基-1，3-二口咢口柬-4-基）曱基）-N，N，4-三甲基-2-(1-(三異丙基矽氧）乙烯基）-1Η-咪唑 _1· 磺醯胺 (5-((R)-hydroxy((4S,5 R)-5- (hydroxymethyl)-2,2-dimethyl-l,3-di〇x〇lan-4«yl)methyl)-N,N,4-trimethyl-2-(l-(triisopro pylsilyl〇xy)vinyl)-lH-imidazole-l-sulfonamide)(1.88g ， 40 200920355 9 0 %產率）在苄基位置之不可分離非鏡向異構物的3 : 1混合物：Μ+ 1 = 5 47.4。將敗化絶（315 mg’ 2.08 mmol)加入溶於乙醇（1〇 ml) 之 5-((R)-羥基（（4S，5R)-5-(羥甲基）·2,2-二曱基- l，3-二口咢口柬-4-基）甲基）-N，N，4-三曱基三異丙基矽氧）乙烯基）-1Η-咪唑-1-磺醯胺（567 mg，1.04 mmol)溶液並加熱至 65 C。1小時後’將反應冷卻至室溫並以飽和nh4C1水溶液（1 ml)處理接著濃縮。在矽膠（5 %曱醇：二氯曱烷洗提液）上快速層析來純化粗製產物以提供白色泡沫的2_乙醯 -5-((R)-羥基（（4S，5R)-5-(羥曱基）_2 2_ 二甲基 _13_ 二口咢口柬 -4-基）甲基）-N，N，4-三曱基-1H-咪唑-^磺酿胺（380 mg， 94%產率）：Μ+1=392·1 » 將 2 -乙醢-5-((R)-羥基（（4S,5R)-5-(羥甲基）-2,2-二甲基-1,3-二口等口東-4-基）甲基）_ν，Ν，4-三甲基-1Η-咪唑-1-磺醯胺（380 mg，0.97 mmol)溶於丙綱（6 ml)並連績以水（6 mI) 與濃縮HC1水溶液（3 ml)處理。將容器加熱至4〇〇c下45分鐘，接著冷卻至室溫並濃縮。藉由逆相製備級層析利用 150mm X 30 mm Zorbax C-6管柱（利用未緩衝溶劑）藉由下述方法純化粗製材料：1%乙腈：水等位（is〇cratic)流動5 分鐘（TR= 1.52分）》凍乾後，可得到非晶固體之二甲基胺磺胺酸鹽的標題產物：M+l= 245.1 ; NMR (400 MHz, CDC13)主要 δ 5.04 (d，1H)、3.62 (comp. m，2H)、3.42 (comp, m，2H)、2.62 (s，6H)、2.4 3 (s, 3H)、2.2 1 (s, 3H); 次要 δ 5.01 (d，1H)、3.79 (comp. m，2H)、3.55 (comp· m， 41 200920355 2H)、2.62 (s，6H)、2.43 (s，3H)、2.21 (s，3H)。 1.5. (lR，2S，3R)-l-(2-(l-亞肼乙基）-1Η-喃唑-4-基）丁 ^_-1,2,3,4-___四 _Ml fnR.2S.3R)-l-(2-(l-hydrazon〇ethyn-lH-imidazol-4-vnb utane-l,2,3,4-tetraol)的合成

將 1_[4_((1r，2S，3R)-1，2,3,4-四經基-丁基）_ih -咪嗤

-2-基]-乙酮（THI 根據 Halweg，K.M.與 Btichi，G.， J.〇rg.C_hem^ 50:1 1 34-1 136 ( 1 9 8 5 )加以製備）（！ 4 8 mg，〇 “ mmol)懸浮於甲醇（3 ml)與水（1 ml^ 。將肼水合物（35 mg，0.7 mmol，1·2當量）與乙酸（一滴）加入並在5〇<t下攪拌懸浮液6小時》LCMS分析指出連姑|认&上、… 竹相ίΰ屋物的形成與起始材料

的消失。將反應混合物冷卻至宮廿，、，拉L 洗以產生產物，約 90 mg (58%)。集得到之白色沉澱物並以四氫吱味清 3: 1之E:Z異構物的白色固體混合物： LCMS: Zorbax C-8 管杈 4.6 X l5〇mm ;超過6分鐘溶 2毫升/分；偵測 245.0 (M+1))與於水中10-90 %的10 mM乙酸銨；流速. 220nm ;滯留時間：0.576分（同異構物 42 200920355 1·08 分（逆異構物，245.0 (M+U^hNMR (DMSO-d6) δ 2.5 (單線，DMSO 下 3Η)、3.4 - 3.7 (m，4Η)、4.3 (m，2Η)、 4·6 (m，2H)、4.8 (m，1Ή)、4.9 與 5.0 (雙線，1H)、7.04 與 7·21 (單線，ih)。 1.6. N’-(l-(4-((lR,2S,3R)-1.2.3.4-四羥丁某 1-1H-咪唑 -2- 某、亞乙基）乙醯肼 (Ν’-(1-(4-(Π. R,2S,3R)-l,2.3,4-tetrahvdroxvbutvl)-lH-imi dazol-2-yl)ethvlidene)acetohvdrazide)的合成

OH OH

r 將 l-[4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥基-丁基）-1Η-咪唑 -2 -基]-乙酮（160 mg，0.70 mmol)懸浮於曱醇（3 ml)與水（1 ml)中。加入乙酼肼（Acetic hydrazide)(56 mg，0.75 mmol， 1.2當量）與氫氣酸（一滴，12 K)並在50 °C下攪拌懸浮液48 小時。LCMS分析指出產物的形成與起始材料的消失。將反應混合物冷卻至室溫並以四氫呋喃稀釋。收集得到之白色沉澱物並以四氫呋喃清洗以產生產物，約3 : 1之E:Z 異構物的白色固體混合物：129 mg (65%)。 LCMS: Sunfire C-18 管柱 4.6 X 50mm ;超過 2.5 分鐘 43 200920355 溶於水中2-20 %的lOmM乙酸銨；流速=3.5毫升/分；偵測 220 nm ;滞留時間：〇·53 分（287.1 (M+1))。4 NMR (DMSO-d6) δ 2.2 (單線，3H)、2.5 (單線，DMSO 下 3H)、 3·4 - 3.7 (m，4H)、4.3 (br，2Η)、4·6·5·0 (br，4H)、7.0 (br， 1H)、10.30 與 10.3 7 (單線，1H)。 1.7. (E)-4-甲基 _1^，-(1々4-((1只.28.31〇_1,2,3,4-四羥丁基）-1Η-咪唑-2-基）亞乙某）笨碏醢肼 ((E)-4-me thyl-N*-(1-(4-((1 R.2S.3RU1.2.3.4-tetrahvdeoxv btttyI)-lH-imidazol-2-vnethvlidene^benzenesulfonohvdr azide)的合成

l 將 1_[4-((1r，2S，3R)-1，2,3,4-四羥基-丁基）-1Η-咪唑

_2_基]-乙酮（153 mg，〇·67 mmol)懸浮於曱醇（3 ml)與水（1 ml)中。加入 P-曱苯續醯肼（P-toluenesulf〇nyl hydrazide)(140 mg ’ 0.75 mm〇h12 當量）與氫氣酸（一滴， 12过）並在50C下攪拌懸浮液24小時。LCMS分析指出產物的形成與起始材料的消失。將反應混合物冷卻至室溫並在矽膠上乾置（dry-l〇aded)。在矽膠（l〇g Si02，4 : 1乙酸乙醋：甲醇）上快速層析以產生產物’約85: 15之E:Z 44 200920355 異構物的白色固體混合物：142 mg (53%)。 LCMS: Sun fire C-18 管柱 4.6 X 50mm;超過 2.5 分鐘溶於水中1 0-90%的1 0 mM乙酸銨；流速=3.5毫升/分；偵測220nm ;滯留時間：0.50分（3 99.2 (M+1))與0.66分 (3 99.3 (M+1))。NMR (曱醇-d4) δ 2.2 (單線，3H)、2.41 與 2.45 (單線，3Η)、3.6 - 3.85 (m, 4Η)、4.99 與 5.05 (單線，1H)、7.09 (br s’ 1H)、7.39 (d，2H，j =8 Hz)、7.77 與 7.87 (d，2H，j =8 Hz)。 1.8. N，-fl-M-i(lR,2S，3R)-l,2,3,4_ 四韁丁甚）·1Η·咪峰 -2 - 基_)_S^^_2_^_勝 (N,-(l-f4-f(lR.2S.3R)-l,2<3.4-tetrahvdroxvlbutvl)-lH-im idaz〇l-2-vl)ethvlidene)benzohvdrazide)的合成

將 i-[4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥基-丁基）-lH-咪唑 -2-基]-乙酮（150 mg’ 0.65 mmol)懸浮於曱醇（3 ml)與水（1 ml)中。將苯甲醯肼（Benzoic acid hydrazide)( 102 mg，0.75 mmol，1·2當量）與氫氯酸（一滴，12幻加入並在5〇°C下攪拌懸浮液1 8小時。LCMS分析指出產物的形成與起始材料的消失。將均質反應混合物冷卻至室溫並在真空下濃縮。 45 200920355 C-18 逆相 SPE (10g Alltech Hi-load C18，梯度由水至 20% 甲醇/水）用以產生產物，約1: 1之E: Z異構物的無色固體混合物：1 93 mg (85%)。 LCMS: Sunfire C-18 管柱 4.6 X 50mm;超過 2.5 分鐘溶於水中1 0 - 9 0 %的1 0 m Μ乙酸銨；流速=3.5毫升/分；偵測 22 0 nm;滯留時間：0.49 分（349.2 (Μ+1))。4 NMR (曱醇-d4) δ 2.2 (單線，3H)、2.42 與 2.45 (單線，3 H)、3.6 — 3.85 (m，4H)、5.11 與 5.14 (單線，1H)、7.30 (br s，1H)、7.40-7.7 (m，4H)、7.80 與 7.95 (m，2H)、8.1 (br s，1H)。 1.9. fE、-2-n-(4-f(lR,2S,3R)-l,2,3,4-四韆丁基）-1Η-咪唑 -2- 基）亞乙基）肼甲酸乙酯 (，(E)-ethvl-2-(l-(4-(flR,2S.3R')-1.2.3.4-tetrahvdroxvbMtv l)-lH-imidazol-2-vl)ethvlidene)hvdrazinecarboxvlate)的合成

OH OH

將卜[4-((111，23,311)-1，2,3,4-四羥基-丁基）-111-咪唑 -2 -基]-乙網（150 mg，0.65 mmol)懸浮於曱醇（3 ml)與水（1 ml)中。加入耕基曱酸乙酯（Ethyl carbazate)(78 mg，0.75 mmol, 1.2 eq.)與氫氯酸（一滴，12 並在50°C下授拌懸浮 46 200920355 液1 8小時。LCMS分析指出產物的形成與起始材料的消失。將反應混合物冷卻至室溫、在真空下濃縮並以丙酮稀釋。收集得到之白色沉澱物並以丙酮清洗以產生產物，一白色固體的明顯異構物：96mg (47%)。 LCMS: Sunfire C-18 管柱 4.6 X 50mm;超過 2 5 分溶於水中2-20%的1〇111]\1乙酸銨；流速=3_5毫升/分；镇測 220 nm ;滯留時間：〇·25 分（317.35 (M+l))。4 NMR (甲醇-d4) δ 1.36 (t，3H，j =8 Hz)、2.28 (s，3H)、2.42 與 2.45 (單線 ’ 3H)、3.60 — 3.85 (m，4H)、4·34 (dd，2H，j =8 Hz)、 5.08 (s，1H)、7.27 (s，1H)。 1.10. (E)-N，-fl-f4-friR.2S.3in-l,2,3.4- 四迤丁基 )-1Η- 味峻 -2- 基)亞乙基)路松斑'肼 ((E^-N'-d-M-fflR.lS.SRl-l.l.S^-tetrahvdroxvhnty^-lTT -imidazol-2-vl)ethvlidene)nicotinohvdrazide)的合成

OH OH

將 l-[4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥基-丁基）-1Η-咪唑 -2 -基]-乙嗣（215 mg，0.93 mmol)懸浮於曱醇（3 ml)與水（1 ml)中。加入終鹼醢肼（Nicotinic acid hydrazide)(137 mg ’ 1.0 mmo卜1.1當量）與氫氣酸（一滴，12 MJ並在50 °C下攪 47 200920355 拌懸浮液48小時。LCMS分析指出產物的形成與起始材料的消失。將反應混合物冷卻至室溫並在真空下部分濃縮。收集得到之白色沉澱物並以水清洗以產生產物，一白色固體的明顯異構物：3 1 1 mg (95%)。 LCMS: Sunfire C-18 管柱 4.6 X 50mm ;超過 2.5 分溶於水中10 — 90 %的10mM乙酸銨；流速=3.5毫升/分；偵測 220nm;滯留時間：0.22分（350.27 (M+l))。1HNMR (DMSO-d6) δ 2.37 (s，3H)、3.60 - 3.85 (m，4H)、4.40 (m， 2H)、4.71 (m，1H)、5.01 (m，2H)、5.16 (m，1H)、7.25 (br， 1H)、7.64 (br，1H)、8.35 (br > 1H)、8.80 (br - 1H)、9.1 4 (br，1H)。 1.11.3-氯 _N，-n-(4-fnR,2S,3R)-l,2,3,4-四羥丁

ο 將 1-[4-((111,28,31〇-1，2,3,4-四羥基-丁基）-111-咪唑 -2 -基]-乙酮（194 mg，0.84 mmol)懸浮於乙醇（4 ml)與水（1 ml)中。加入3 -氣苯甲酿肼（170 mg，1.0 mmol’ 1.2當量）與氫氯酸（一滴，1 2 並在5 0 °C下攪拌懸浮液4 8小時。 LCMS分析指出產物的形成與起始材料的消失。將反應混 48 200920355 合物冷卻至室溫並在真空下部分濃縮。收集得到之白色沉澱物並以乙醇清洗以產生產物，約〜3 : 1之E : Z的白色固體混合物：108mg (33%)。 LCMS: Sunfire C-18 管柱 4.6 X 50mm ;超過 2.5 分溶於水中1 0-90%的1 0 mM乙酸銨；流速=3 · 5毫升/分；偵測 220nm ;滯留時間：0.63 分（3 83.23 (M+1))。1H NMR (甲醇-d4) 5 2.44 (s，3H)、3.60 — 3.90 (m，4H)、5.12 (s，1H)、 7·29 (s，1H)、7.65 (m，2H)、8.04 (m，2H)。 1.12·(Ε)-4-氟-N，-(l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥丁

ο 將 l-[4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4 -四羥基-丁基）-1Η-咪唑 -2 -基]-乙嗣（172 mg，0.74 mmol)懸浮於乙醇（4 ml)與水（1 ml)中。加入4 -氟苯甲酿肼（131 mg，0.85 mmol，1.1當量）與氫氣酸（一滴，1 2 K)並在5 5 °C下攪拌懸浮液4 8小時。 LCMS分析指出產物的形成與起始材料的消失。將反應混合物冷卻至室溫並在真空下部分濃縮。收集得到之白色沉澱物並以乙醇清洗以產生產物，一白色固體的明顯異構物：97 mg (3 5%)。 49 200920355 LCMS: Sunfire C-18 管柱 4.6 X 50mm;超過 2.5 分鐘溶於水中10-90 %的10 mM乙酸銨；流速=3.5 毫升/分；偵測 220nm;滯留時間：0.55 分（367.24 (M+l))。1!! NMR (甲醇-d4，一滴 DC1) δ 2.55 (s，3H)、3.60 — 3.90 (m，4H)、 5.22 (s，1H) ' 7.30 (m > 2H) ' 7.54 (s > 1H)、8.08 (m，2H)。 1.13· (E)-6-胺-N，-n-(4-((lR,2S,3IU-l,2,3,4-四羥丁基）-1 H-咪唑-2-基）亞乙基）菸鹼醯肼的合成

ο 將 1-[4-((111，23,311)-1，2,3,4-四羥基-丁基）-111-咪唑 -2 -基]-乙酮（115 mg，0.50 mmol)懸浮於乙醇（4 ml)與水（I ml)中。加入取代之肼（91 mg，0.6 mmol，1.2當量）與氫氯酸（一滴，1 2 ϋ)並在5 5 °C下攪拌懸浮液4 8小時。LCMS 分析指出產物的形成與起始材料的消失。將反應混合物冷卻至室温並在真空下部分濃縮。收集得到之白色沉澱物並以乙醇清洗以產生產物，一白色固體的明顯異構物：136mg (75%) ° LCMS: Sunfire C-18 管柱 4.6 X 50mm;超過 2.5 分溶於水中10-90 %的10mM乙酸銨；流速= 3.5毫升/分；偵測 220nm ;滯留時間：0.15 分（3 65.32 (M+1))。4 NMR (甲 50 200920355 醇-d4，一滴 DC1) δ 2.58 (s，3H)、3.60 - 3.90 (m，4H)、 5.22 (s > 1H) > 7.17 (m > 1H)、7.54 (m，1H)、8.44 (m，1H)、 8.68 (m，1H)。 1.14. fE)-N，-n-f4-f(lR，2S,3R)-l,2,3,4- 四羥丁基）-1Η-咪唑-2-基）亞乙基）異菸鹼醯肼的合成

OH OH

將 1-[4-((111,23,311)-1，2,3,4-四羥基-丁基）-111-咪唑 -2 -基]-乙酮（168 mg，0.73 mmol)懸浮於乙醇（4 ml)與水（1 ml)中。加入異终驗龜肼（isonicotinic hydrazide)(110 mg， 0.80 mmol，1.1當量）與氫氣酸（一滴，12 K)並在55 °C下攪拌懸浮液24小時。LCMS分析指出產物的形成與起始材料的消失。將反應混合物冷卻至室溫並在真空下部分濃縮。收集得到之白色沉澱物並以乙醇清洗以產生產物，一白色固體的明顯異構物：1 3 6 mg (7 5 %)。 LCMS: Sunfire C-18 管柱 4.6 X 50mm;超過 2.5 分溶於水中1 0- 90%的1 0 mM乙酸銨；流速=3.5毫升/分；偵測 220nm ;滯留時間：0.15 分（3 65.32 (M+1))。4 NMR (甲醇-d4，一滴 DC1) δ 2.63 (s，3H)、3.60 - 3.90 (m，4H)、 5_12 (s，1H)、7,58 (s，1H)、8_63 (d，2H，j = 8 Hz)、9.14 51 200920355 (d，2H，j = 8 Hz) » 1.15. (E^-N,-(l-r4-((lR,2S,3R)-1.2.3.4- 四羥丁基）-1Η-咪唑 -2-基）亞乙基）聯笨 -3-卡肼 ((E)-N,-n-r4-fnR.2S.3R)-1.2.3.4-tetrahvdroxvbutvn-lH -imidazol-2-vl)ethvlidene~)bii)henvl-3-carbohvdrazide)的合成

OH OH

將 l-[4-((lR，2S，3R)_l，2,3,4-四羥基·丁基）_1H_ 味唑 -2-基]-乙酮（315 mg’ 1_36 mmol)與聯苯-3-卡肼（36〇 mg， 1.81 mmol)懸浮於DMSO (2 ml)中。加入濃縮氩氣酸（兩滴）並在401：下攪拌懸浮液5小時。LCMS分析指出產物的形成與起始材料的消失。將反應混合物冷卻至室、溫、以$胃稀釋並藉由逆相HPLC (10 mM NH4OAc/乙腈）加以純化。分別收集所欲群的兩個部分（E與Z異構物）並陳乾。部分丄提供白色固體，95 mg (16%)。部分2係白色固體，82 mg (14%)。部分 1 :分析 HPLC Zorbax C-8 管柱 4.6 x 15〇mm ;溶 52 200920355 劑A = 10 mM乙酸銨；溶劑B = MeCN ; 0分時5% B、1 分時5% B、3分時90% B、4分停止；流速=3毫升/分；偵測22 0 nm ;滯留時間：2.9分（注意：包含〜5%的其他異構物）。M + H = 425.28。NMR (DMS0-d6 與 2 滴 D20) δ 2.3 (單線，3Η)、3.3 - 3.7 (m，4Η)、4.9 (m，1Η)、7.19 (s， 1H)、7.3 7 (m，1H)、7.47 (m，2H)、7.67 (m，3H)、7.85-7.92 (m，2H)與8_15 (s，1H)。相同樣本的HSQC使2.3下質子訊號（CH3)與20 ppm下的碳訊號相關。部分 2:分析 HPLC Zorbax C-8 管柱 4.6 X 150mm;溶劑A = 10 mM乙酸銨；溶劑B = MeCN ; 0分時5% B、1 分時5% B、3分時90% B、4分時停止；流速=3毫升/分；偵測220 nm ;滯留時間：2.963分（注意：包含~6%的其他異構物）。M + H = 425.28。NMR (DMSO-d6 與 2 滴 D20) δ 2.4 (單線，3Η)、3.4 - 3.6 (m，4Η)、4.77 與 4.86(寬單線，聯合=1H)、6.9 與 7.1 (寬單線，聯合=1H)、7.40 (m，1H)、 7.50 (m，2H)、7.61 (m，1H)、7.73 (m，2H)、7.87 (m， 2H)與8.10 (s，1H)。相同樣本的HSQC使2.4下的質子訊號（CH3)與13 ppm下的碳訊號有關。 1.16. N-Μ & -4-((lR.2S.3R)-1.2.3.4- eg 1¾ T ^ 病__- 2 -_5_^_胺 £N-hydroxv-4-((lR.2S.3R)-1.2,3,4-tetrahvdroxvbutvn-l TT-imidazole-2-carboxamide)的合成 53 200920355

OH -2-基]-乙酮（18 g，78.3 mm〇i)懸浮於二氣乙烷（16〇 ml)與 2,2-二甲氧丙烷（160〇11)中。加入4_曱苯磺酸（38)並在7〇。(：下搜拌混合物1 8小時《以二氣甲烷稀釋反應並以水、5 % 碳酸氫化合物、鹵水清洗，接著在Si〇2上乾置。藉由快速層析（己院/乙酸乙酯）純化提供無色油狀的基）-1Η· 咪嗤 -2- 基）乙酮 (l-(4-((4S,4'R,5R)-2,2,2',2'-tetramethyl-4,4,-bi(l,3-diox〇l an)-5-y 1)-1 H-imidazol-2-y l)ethanone) (1 8.8 g» 60.6 mmol ' 7 7% ; M + H 計算值：311.4、發現值：311.3)。將上方得到之產物（20 g，64.5 mmol)溶解於DMF中。加入 K2C03(12.5 g，90.3 mmol)接著為溴甲苯（10.7 ml， 90.3 mmol) »將反應在50°C下加熱18小時》LC/MS分析指出起始材料仍殘留。加入額外部分的溴甲苯（5 m卜42 mmol) 並將溫度提高至6 0 °C。3小時後，以冷水焯熄反應並以乙酸乙酯萃取。以水、接著齒水清洗有機萃取物，在硫酸鈉上乾燥並放置於矽膠上。快速層析（溶於己烷中 20-40%的乙酸乙酯）提供1-(1·苄基-4-((43,4,11，5尺）-2,2,2，，2，-四曱基 54 200920355 -4,4’-聯（1，3-二口咢口東）-5-基）-1Η-咪唑-2-基）乙酮 (l-(l-benzyl-4-((4S,4,R,5R)-2,2,2,,2,-tetramethyl-4,4,-bi( 1，3 -diοX〇1 an) - 5 -y 1) -1 Η-imidazo 1 - 2 -y 1)ethanone) (1 6.1 g， 62%) ° 將得到之中間產物（1 3 g，3 2.5 mmo 1)溶解於二氧陸圜 (120 ml)中並以溶解於商業漂白劑（200 ml，6% NaOCl)之 NaOH (13.2 g)處理。劇烈攪拌2小時後，以乙酸乙酯萃取反應。以鹵水清洗有機萃取物接著在矽藻土上乾燥。過濾與蒸發提供之固體進一步在真空下乾燥以提供1-苄基 -4-((48,4'11，511)-2,2,2'，2，-四甲基-4,4’-聯（1,3-二口咢口柬)_5-基）-1Η- 咪嗤 -2- 曱酸 (l-benzyl-4-((4S,4'R,5R)-2,2,2',2,-tetramethyl-4,4'-bi(l,3 -dioxolan)-5-yl)-lH-imidazole-2-carboxylic acid)(13 g，定量產量，M + H計算值：403.2、發現值：403.2)。將上方得到之產物（600 mg，1.49 mmol)、Ο-三苯曱基幾胺（820 mg，2.98 mmol)、EDAC (430 mg，2.24 mmol)與 HOBt (305 mg，2.24 mmol)和 DMF (8 ml)與三乙胺（622 μΐ ’ 4.47 mmol)聯合。在室溫下攪拌反應22小時、濃縮、接著放置於利用DCM / MeOH之矽膠上《快速層析（MeOH / DCM)提供 1-苄基-4-((48,4，11，511)-2,2,2，，2，-四曱基-4,4'· 聯（1，3-二口咢口東)-5-基）-N-(三苯甲基氧）-iH-咪唑-2-甲醯胺 (l-benzyl-4-((4S，4，R，5R)-2,2,2，，2，-tetramethyl-4,4i-bi(l，3 -dioxolan)-5-yl)-N-(trityloxy)-l H-imidazole-2-carboxamid e) (480 mg ’ 0.73 mmol，49%，M + H 計算值：660.3、發現 55 200920355 值：660.4) 〇將上方得到之產物（480 mg，0.73 mmol)溶解於乙醇 (5〇 ml)中。加入Pd(OH)2 (500 mg，20%於碳上，潮濕）並在H2 (6 5 p si)下攪拌反應is小時並過滤。在真空下移除乙醇。將殘餘物溶解於DCM中並藉由快速層析（MeOH / DCM) 純化以提供>^-羥基_4-((4 3,4,11，511)-2,2,2，，2|-四曱基-4,4,-聯（1，3_二口咢口東）-5-基）-1Η-咪唑-2-甲醯胺 (N-hydroxy-4-((4S,4'R，5R)-2,2,2，，2'-tetramethyl-4,4'-bi(l, 3 - di οχ 〇 1 an) - 5-y 1). 1 η - i mi dazo 1 e - 2 - c ar b ο X am i d e) (1 5 0 mg * 0·46 mmol ’ 63%，m + H 計算值：328.1、發現值：328.3)。將上方得到之產物（150 mg，0.46 mmol)溶解於丙嗣（8 ml)與水（8 ml)中。利用乾冰/丙_浴將反應内部溫度冷卻至 -1 5°C »以一速度加入濃縮HC1 (3 ml)使得内部溫度保持低於-1 0 °C。移除冷浴並在室溫下攪拌反應3小時、在4 °C下攪拌1 8小時並再度在室溫下攪拌7小時。在真空下移除丙酮與少許水分之後，形成沉澱物。加入二氧陸園（20 ml)接著為THF (10 ml)。藉由過濾單離固體、以THF/二氧陸圜清洗並在真空下乾燥以提供氫溴鹽的 N-羥基 -4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥丁基）-1Η-咪唑-2-甲醯胺（98 mg，0.40 mmol，87%)。質譜：計算值：248.1、發現值：24 8_2。分析HPLC : Luna Pheny-Hexyl » 5um，4.6x50 mm，10 mM 乙酸録與 l 〇/〇乙腈等位流動，流速=3毫升/分，偵測220 nm，滯留時間 =0.245 分。1H NMR (DMSO-d6) δ 3.37-3.64 (m，4H)、4.96 56 200920355 (寬單線，1H)、7.47 (s，1Η)、ΐι·9(寬單線，1H)。測量掛小鼠淋巴被的影f 藉由口服強飼（gavage)或飲用水來施用化合物。針對口服實驗，將化合物由結晶以丨〇 mg/ml再懸浮於載體（例如，水）中。以100 mg/kg單_劑量的化合物（相當於各個化合物100 mPk的自由鹼基）或僅有載體之對照組強飼小鼠（1 29/B6品種的F 1混種）’:並讓其返回其籠子中。在服藥後18小時使用異氟烧（iS0fiurane)麻醉小鼠並收集組織以如下述般分析。針對飲用水研究’將化合物以5〇 mg/L 溶於含有10 g/L葡萄糖之酸性水（pH = 2 8)中。讓小鼠自由接觸含有化合物的水（或作為對照組的葡萄糖溶液）72個小時。72個小時結束時，收集組織以便分析。如下述般取得C B C測量值。以異氟烷麻醉小鼠並自眼後叢（retroorbital plexus)收集血液置於EDTA血液收集管 (Capiject-MQK，Terumo Medical Corp·，Elkton，MD)。利用 Cell-Dyn 3500 (Abbott Diagnostics，Abbott Park，IL)或 HemaVet 850 (Drew Scientific，Inc.，Oxford，CT)儀器進行自動化CBC分析。如下述般取得流式細胞技術（FACS)測量值。藉由低張休克（hyoptonic shock)來裂解 25 μΐ 全血，在 2 ml FACS 清洗緩衝液（FWB : PBS/0.1% BSA/0.1% NaN3/2mM EDTA)中清洗一次，並在黑暗中以稀釋於50 μΐ FWB的螢光色素 (fluorochrome)-耦聯抗體組合物在4°C下染色30分鐘。染色之後’以2 ml FWB清洗細胞一次並再懸浮於300 μΐ 57 200920355 FWB以便取得。依循非無菌式移除脾臟與胸腺之標準程序。藉由迫使組織通過 70 μπι 細胞過濾器（Falcon，Becton Dickinson Labware，Bedford，ΜΑ)而將器官分散成單細胞懸浮液。針對FACS分析，藉由低張裂解液來裂解RBC，清洗，並以 10 μΐ 抗-CD16/CD32 (Fc Block™， BD-PharMingen, San Diego，CA) (1/10稀釋於FWB)抗體在4°C下培養lxl〇6細胞15分鐘。.以稀釋於50-100 μΐ FWB的螢光色素-耦聯抗體組合物對細胞染色，這係在黑暗中將抗體直接加入Fc 阻礙中之細胞於4°C下30分鐘。染色之後以1 ml FWB清洗細胞一次，並再懸浮於300 μΐ FWB以便取得。除非另有明示，否則所有抗體係購自BD-PharMingen，San Diego, CA。利用FACSCalibur流式細胞儀與CellQuest Pro軟體 (Becton Dickinson Immunocytometry Systems, San Jose, C A)分析樣本。用於胸腺之抗體混合物為：TCRb APC Cy7 ; CD4 APC ; CD8 PerCP ; CD69 FITC ;與 CD62L PE1。用於脾臟與血液之抗體混合物為：B220 PerCP; TCRb APC; CD4 APC Cy7 ； CD8 PE Cy7 ； CD69 FITC ；與 CD62L PE。 M量對小鼠SIP水平的影馨利用 Murata，N.等人 Anal. Biochem. 282:1 1 5-120 (2000)所述之放射-受體結合試驗（radio-receptor binding assay)的改良來測量小鼠（129/B6品種的F1混種）脾臟内的 S1P水平。此方法利用HEK293F細胞來過量表現S1P受 58 200920355 體亞型之一的Edg-l’並且係基於已知樣本中標記sip與無標記S 1 P的競爭。以pEFneo S1P受體（Edg-Ι)-表現載體轉染HEK293F 細胞並挑選抗G418的細胞株。在潮濕氣體：c〇2 (19: 1) 空氣中，在含有5 % (Wv) FBS之DMEM中培養12多孔盤的Edg-Ι-表現之HEK293F細胞。實驗前24小時，將培養基換成含有0.1% 〇/v) BSA的新鮮DMEM (不帶有血清）。施用試驗化合物1 8小時後，犧牲小鼠並取出其脾臟且冷凍之。利用已知方法自冷凍組織中取得S1P。參閱，例如 Yatomi，Y.等人 FEBS Lett. 404:173-174 (1997)。明確地說，將1 0個小鼠脾臟溶於包含1 mM EGTA、ImM DTT與 Roche完全蛋白酶抑制劑之1 ml冰冷50 mM碟酸緩衝液 (pH 7.5)，並在冰上以一分鐘間隔均質化三次。在4〇C下以25 00 rpm離心得到之產物1〇分鐘以去除細胞殘骸。接著在4°C下，用70Ti轉子以45000 rpm超高速離心上清液 1小時以拉下與膜連結之蛋白質》丟掉上清液，將片狀物 (pellet)再懸浮於包含1 mM EGTA、ImM DTT與存在Roche 完全蛋白酶抑制劑的33%甘油之最小體積（〜1 ml)冰冷50 mM磷酸缓衝液（pH 7.5) »利用Bradford試驗來測量整體蛋白濃度。將S1P萃取於氣仿/KC1/NH40H (pH ~ 12)並保留上方之水相。接著萃取於氣仿/曱醇/HC1 (pH < 1)，並保留下方之有機相且蒸發以提供S1P，將其保存於冷藏室直到使用。恰好在試驗前，藉由在20mMTris-HCl (pH 7.5)、100 59 200920355 mM NaCl、15 mM NaF 與〇·4 % (w/v) BSA 所構成之結合緩衝液中的聲裂法來溶解乾燥樣本。藉由放射受體結合試驗來測量樣本的S 1 P含量，這係基於樣本中[33P]S1P會與S1P競爭性結合於Edg-丨·表現細胞上。匯合12多孔盤的Edg-i_表現之HEK293F細胞以冰冷結合緩衝液清洗兩次並接著以含有1 nM [33P]S1P(每孔約18,00 dpm)的相同缓衝液培養，並提高最終體積〇4 ml中真實S1P或試驗樣本的劑量。將盤維持於冰上30分鐘’並以相同的冰冷結合缓衝液清洗兩次以除去未結合之配體。以 0.1 % SDS、0.4 % NaOH 與 2 % Na2C03 構成之溶液溶解細胞並以液態閃爍計數器計算放射性。由標準位移曲線（standard displacement curve)外推來估計試驗孔中的 S1P含量。藉由將標準曲線得到之數值乘以S1P萃曲的回收效率（recovery efficiency)與稀釋倍數來計算最初試驗樣本申的S1P含量。大鼠佐劑绣發關節炎掇式. 在利用 Lewis 大鼠之佐劑誘發關節炎 (adjuvant-induced arthritis，AA)模式中試驗 S1P 裂解酶抑制劑（「化合物」）搭配滅殺除癌（「MTX」）之功效。佐劑誘發關節炎係一種類風濕性關節炎（rheumatoid arthritis， RA)廣泛使用之大鼠模式，而類風濕性關節炎係一種自體免疫與發炎過程所導致之關節疾病。大部分公開的研究中，當用於治療設定（即’已建立的疾病狀態）時單獨的Μτχ 處理在此模式中無效。 60 200920355 爲了引發關節炎’以60 μΐ弗氏（Freund’s)不完全佐劑中的 600 pg 結核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis)在尾巴基部皮膚内注射大鼠。藉由臨床評分關節炎徵兆並利用體積測量儀（plethysmometer)(型號 7140 ; Ugo Basile North America，Schwenksville，PA，USA)測量腳掌體積來監測動物。平均兩個後腳的數值並藉由自隨後測量數值減去第一次測量基線數值來計算膨脹度。利用疾病嚴重度分數來評估發炎嚴重度；利用廣泛使用的視覺評分〇_4 : 〇 = 正常’無紅斑與腫脹跡象；1 =紅斑與輕微腫脹，偈限於中足（mid-foot)或踝關節或個別指頭；2 =紅斑與輕微腫脹延伸至踝與中足或腫脹於超過一個指頭；3 =紅斑與中度腫脹自踩延伸至趾骨關節；而4 =紅斑與嚴重腫脹，包括踩、足與指頭。紀錄各個分數作為各個動物兩個後腳之臨床分數總計。一天一次以化合物（3〇 mg/kg)、MTX (0.2 mg/kg)、化合物組合或载體（〇.lxPBS ρΗ 7·2)讓大鼠口服。各個處理、组·應用十隻大鼠。在50%動物呈現疾病徵兆時施用化合物’與此實驗中發現腳腫脹最大平均與臨床分數一半之曰同時。如第1圖所示，化合物與ΜΤχ的聯合處理明顯有效於化合物或ΜΤΧ任一單獨的處理。移植棍# 在移植模式（其中將來自Balb/C小鼠的尾巴皮膚移植於C5 7Bl/6xl29 F1接受者的背部上）中試驗sip裂解酶抑制劑（「化合物」）搭配環孢靈A (「CyA」）的功效。 61 200920355 分別自麻醉之供應者與接受者的腹側尾巴與背部取得移植物與移植床，這係藉由以# 1 0解剖刀刀片移除約1 cm2 的全層（full-thickness)皮膚。將來自性交供應者小鼠的外植體置於接受者準備好的移植床上，並以雙層Vaseline紗布覆蓋移植床接著為石膏繃帶。在第8天移除繃帶後每天視覺觀察移植物，且當超過90%壞死時視為排斥。單獨或搭配環孢靈試驗化合物。將各個化合物（分別）與組合溶解於無菌9 5 : 5的水：乙醇混合物（载體）。移植前三天開始每天口服一次並每天持續到實驗完。如第2A圖所示，單獨施用5 mg/kg劑量的環孢靈無法延遲移植物排斥，但與100 mg/kg的化合物共同施用則造成移植物排斥時間的明顯增加（由1 0.5 土 0.5天至1 3 土 0.5天）。第2B圖顯示共同施用對超過10天移植存活小鼠數目的影響。所有上列的文獻（諸如專利與專利申請書）其全文在此併入作為參考。【圖式簡單說明】可參照附圖理解本發明的某些態樣。第1圖顯示滅殺除癌（「MTX」）、S 1P裂解酶抑制劑 (「化合物」）與兩者之組合對小鼠中膠原誘發關節炎的效應。這些效應係對比於未處理之小鼠與施用載體對照组 (「VC」）之小鼠。 62 200920355 第2圖顯示單獨與类物在移植模式中的效應。僅有化合物與兩者之組名圖顯示載體、僅有CsA、超過1 0天仍存活之小鼠；【主要元件符號說明】配環孢靈A (「C s A」）施第2A圖顯示載體、僅有對排斥移植物天數的影響僅有化合物與兩者之組合 :目的影響。用化合 CsA、。第2B 對移植 63

Claims

200920355 十、申請專利範圍： 1. 一種治療、管理或預防一免疫或發炎疾的方法，其至少包括對一需要其之患者施用一第與一第一活性劑，其中該第一活性劑抑制S 1 P裂而該第二活性劑係一免疫抑制或抗發炎藥物。 2·如申睛專利範圍第1項所述之方法，其活性劑係式I : 或異常活性劑酶活性該第一

Rs 之一化合物或其一藥學可接受之鹽類，其中： X係0或NR3 ; 1^係OR1A、NHOH、氫、或選擇性經取代之基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環基（heterocyclealkyl); 係 0R2A、C(0)0R2A、氫 ' i 素、腈類、或經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、院基雜環或雜環烷基； R3 係〇r3a、n(R3A)2、NHC(0)R3A、nhso2r3 R4係or4a、〇C(0)R4a、氫、鹵素、或選擇档基、芳雜環烷選擇性雜環、或氫；經取代 64 200920355 之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基； R5係N(R5A)2、氫、羥基、或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烧基；及各個RlA、Κ·2Α、Κ·3Α、Κ·4Α與Κ·5Α分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基。 3. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中該式I 的化合物係：若X為0 ; Ri為1 -4碳的烷基、苯基、苄基或苯乙基；R2為氫；且R4與R5之一為羥基；貝|J R4與R5 之另一者不是1-6碳的烷基、1-6碳的羥烷基、具有高達每個碳1個羥基之1-6碳的聚羥烷基、具有高達每個碳一個乙酿之1-6碳的聚乙酿烧基（polyacetylalkyl)、苯基、苄基或苯乙基。 65 200920355 4. 如申請專利範圍第2項所述之方法，其中該式I 的化合物係式： HO

其中： Z係選擇性經取代之烷基； Ri係氫或選擇性經取代之烷基或芳基； R2係氫或選擇性經取代之小型烷基； R3 係 OR3A、NHC(0)R3A、NHS02R3A 或氫；及 R3A分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基。 5. 如申請專利範圍第4項所述之方法，其中Z係選擇性經一或多個羥基或乙酸根（acetate)基團取代之烷基。 6. 如申請專利範圍第4項所述之方法，其中R!係選擇性經取代之小型烷基。 7. 如申請專利範圍第4項所述之方法，其中R2係 66 200920355 8. 如申請專利範圍第4項所述之方法，其中R3係 OR_3A。 9. 如申請專利範圍第4項所述之方法，其中R3係 NHC(0)R3A。 1 0. 如申請專利範圍第4項所述之方法，其中R3係 NHS02R3A。 11. 如申請專利範圍第 8-10項任一項所述之方法，其中R3a係氫或選擇性經取代之小型烷基。 12. 如申請專利範圍第4項所述之方法，其中該式I 的化合物係式： R7 戶8

67 200920355 其中： R>6 係〇Κ·6Α 或〇C(0)R6A; r7 係 or7A 或 oc(o)r7A ; R8 係 OR8A 或 0C(0)R8A ; 及或小型烷基。方法，其中該式I r9 係氫、ch2or9A 或 CH20C(0)R9A ; 各個R_6A、Κ·7Α、Κ·8Α與Κ·9Α分別為氫 13. 如申請專利範圍第1 2項所述之的化合物係式：

r3 方法，其中該式I 1 4.如申請專利範圍第1 2項所述之的化合物係式：

68 200920355 15.如申請專利範圍第14項所述之方法，其中該式I 的化合物係式：

r3 16.如申請專利範圍第15項所述之方法，其中1^係選擇性經取代之小型烷基。 1 7.如申請專利範圍第1 5項所述之方法，其中R3係〇Κ·3Α。 18.如申請專利範圍第1 5項所述之方法，其中R3係 N(R3A)2 或 NHC(0)R3A。 1 9.如申請專利範圍第1 5項所述之方法，其中R3係 NHS02R3A。 69 200920355 20. 如申請專利範圍第17-19項任一項所述之方法，其中R3a係氫或選擇性經取代之小型烷基。 2 1. 如申請專利範圍第4項所述之方法，其中該式的化合物係式： HO OH

其中= R1係小型烷基； r3 係氫、〇r3A、nhc(o)r3A 或 NHS02R3A ; R9係氫或CH2OH ;及 R 3 A分別為氫或小型烧基。 70 200920355 22. 如申請專利範圍第21項所述之方法，其中該式I 的化合物係式：

r3 23.如申請專利範圍第22項所述之方法，其中R3係〇Κ·3 A。 24.如申請專利範圍第23項所述之方法，其中R3A 係氫。 25. 如申請專利範圍第4項所述之方法，其中該式I 的化合物係： l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥丁基）-1Η-咪唑-2-基）-乙酮肟； (E)-l-(4-((lR,2S，3R)-l,2,3,4 -四羥丁基）-1Η·咪唑-2-基）-乙酮肟； (Ζ)-卜（4-((111，28,311)-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪唑-2- 71 200920355 基）-乙酮肟； 1-(4-((111，28,311)-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪唑-2-基）乙酮0-甲基肟； (丑）-1-(4-((111，28,311)-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪唑-2-基）乙酮0-曱基肟； (Z)-1_(4-((1R，2S，3R)-1，2,3,4 -四羥丁基）-1Η-咪唑-2-基）乙酮0-甲基肟； 1-(5-甲基-4-((1尺，23,311)-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪唑 -2 -基）乙嗣， (111，28,311)-1-(2-(1-亞肼乙基）-111-咪唑-4-基）丁烷 -1,2,3,4- 四醇 ((lR，2S,3R)-l-(2-(l-hydrazonoethyl)-lH-imidazol-4-yl)bu tane-1,2,3,4-tetraol)； N’-(l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥丁基）-1Η-咪唑-2-基）亞乙基）乙醯肼 (N'-(l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-tetrahydroxybutyl)-lH-imid azol-2-yl)ethylidene)acetohydrazide); 4-曱基-1^-(1-(4-((111，23,311)-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪唑 -2- 基）亞乙基）苯磺醯肼 (4-methyl-N'-(l- (4-(( 1R,2S,3R) -1,2,3,4-tetrahydroxybutyl )-lH-imidazol-2-yl)ethylidene)benzenesulfonohydrazide)； (E)-4-曱基-N'-(l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥丁基）-1Η -咪唑-2-基）亞乙基）笨磺醯肼； 72 200920355 (Ζ)，4·曱基-N'-(l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥丁基）-1Η-咪唑-2-基）亞乙基）苯磺醯肼； N'-(l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4 -四羥丁基）-1Η -咪唑-2-基）亞乙基）苯曱醯肼 (N'-(l-(4-((lR,2S,3R)-l,2,3,4-tetrahydroxybutyl)-lH-imid azol-2-yl)ethylidene)benzohydrazide)； 2-(1-(4-((111，23,311)-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪唑-2-基）亞乙基）肼甲酸乙酯 (ethyl-2-( 1-(4-(( 1R,2S,3R) -1,2,3,4-tetrahydroxybutyl) -1H-imidazol-2-yl)ethylidene)hydrazinecarboxylate)； (丑）-2-(1-(4-((111，23,3尺）-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪唑 -2-基）亞乙基）肼曱酸乙酯； (Z)-2-(l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥丁基）-1Η-咪唑 -2-基）亞乙基）肼曱酸乙酯； 1^，-(1-(4-((111，28,31〇-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪唑-2-基）亞乙基）菸鹼醯肼 (N'-(l-(4-((lR,2S,3R)-l,2,3,4-tetrahydroxybutyl)-lH-imid azol-2-yl)ethylidene)nicotinohydrazide)； (丑）-14，-(1-(4-((111，28,311)-1，2,3,4-四羥丁基），111-咪唑 -2-基）亞乙基）終驗醢肼； (Z)-N，-(l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥丁基）_1H-咪唑 -2-基）亞乙基）終驗醯肼； 3 -氯-N，-(l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4 -四羥丁基）-1Η·咪 73 200920355 唑-2-基）亞乙基）苯甲醯肼； 4-氟-：^’-(1-(4_((111，23,31〇-1，2,3,4-四羥丁基）-11^咪唑-2-基）亞乙基）苯甲醯肼； (E)-4 -氟-N，-(l-(4-((lR，2S,3R)-l，2,3,4-四羥丁基）-lH-咪唑-2-基）亞乙基）苯甲醯肼； (Z)-4 -氟N'-(l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥丁基）-lH-咪唑-2-基）亞乙基）苯甲醯肼； 6-胺-：^，-(1-(4-((111，23,311)-1，2,3,4-四羥丁基），111-咪唑-2-基）亞乙基）菸鹼醯肼； (E)-6-胺-N，-(1-(4-(( 1R，2S,3R)-1，2,3，4-四羥丁基）-1Η-咪唑-2-基）亞乙基）菸鹼醯肼； (2)-6-胺->^'-(1-(4-((111,2 3,311)-1，2,3,4-四羥丁基）-111· 咪唑-2-基）亞乙基）菸鹼醯肼； N'-(l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4 -四羥丁基）-1Η -咪唑-2-基）亞乙基）異菸鹼醯肼； (丑）-：^-(1-(4-((111，28,311)-1，2,3,4-四羥丁基）-1}1-咪唑 -2-基）亞乙基）異菸鹼醯肼； (Z)-N，-(l-(4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4 -四羥丁基）-1Η-咪唑 -2-基）亞乙基）異菸鹼醯肼； ]^-(1-(4-((111，28,311)-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪唑-2-基）亞乙基）聯苯 -3- 卡肼 (N'-(l-(4-((lR,2S,3R)-l,2,3,4-tetrahydroxybutyl)-lH-imid azol-2-yl)ethylidene)biphenyl-3-carbohydrazide)； 74 200920355 斤）-；^-(1-(4-((111，23,311)-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪唑 -2-基）亞乙基）聯笨-3-卡肼； (Z)-N，-(l-(4-((lR，2S，3R)-l,2,3,4-四羥丁基）-1Η-咪唑 -2-基）亞乙基）聯苯-3-卡肼；或 N-羥基-4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥丁基）-1Η-咪唑-2-甲醯胺。 26.如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該第活性劑係一免疫抑制劑。 27.如申請專利範圍第26項所述之方法，其中該免疫抑制劑係胺喋呤 '硫峻嘌呤（azathioprine)、環孢靈 A(cycl〇sporin A)、D-青黴胺（D-penicillamine)、金、羥基氣奎寧（hydroxychloroquine)、來氟米特（leflunomide)、滅殺除癌（methotrexate)、米諾環素（min〇cycline)、柳氮磺胺唼啶（sulfasalazine)或上述之一藥學可接受鹽類。 28，如申請專利範圍第27項所述之方法其中該免疫抑制劑係滅殺除癌。 29.如申請專利範圍$ 27帛所述之方法，其中該免 75 200920355 疫抑制劑係環孢靈A。 30·如申請專利範圍第26項所述之方法，其中該免疫抑制劑係一抗-TNF抗體（諸如，阿達木單抗 (adalimumab)、塞妥珠單抗（cert〇iizuniab pegol)、依那西普（etanercept)、英夫利昔單抗（inflixiinab))。 31.如申請專利範圍第26項所述之方法，其中該免疫抑制劑係一白介素-1阻礙劑（例如，阿那白滯素 (anakinra)) » 32. 如申請專利範圍第26項所述之方法，其中該免疫抑制劑係一抗-B細胞（CD20)抗體（例如，利妥昔單抗 (rituximab))。 33. 如申請專利範圍第26項所述之方法，其中該免疫抑制劑係一 T細胞活性阻礙劑（例如，阿巴西普 (abatacept))。 34.如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該第二活性劑係一抗-發炎藥物D 76 200920355 35. 如申請專利範圍第34項所述之方法，其中該抗-發炎藥物係一醣皮質素（glucocorticoid)或一 NSAID。 36· 如申請專利範圍第35項所述之方法，其中該醣皮質素係搭固嗣、倍氯米松（beclometasone)、倍他米松 (betamethasone)、可體松（cortisone)、去氧皮質固明 (deoxycorticosterone)、地塞米松（dexamethasone) ' 氟氫可體松（fludrocortisone)、氫可體松（hydrocortisone)、甲基普賴蘇漢（methylprednisolone)、普賴蘇漠（prednisolone)、普賴松（prednisone)、曲安西龍（triamcinolone)或上述之一藥學可接受鹽類。 37. 如申請專利範圍第35項所述之方法，其中該 NS AID係一柳酸化合物（諸如，阿司匹靈（aspirin)、阿莫西靈（amoxiprin)、貝諾酯（benorilate)、柳酸膽鹼鎂（choline magnesium salicylate)、二氟苯柳酸（diflunisal)、菲斯拉敏 (faislamine)、柳酸甲酯、柳酸鎂、雙柳酸酯（saiicyl salicylate)與上述之藥學可接受鹽類）。 38. 如申請專利範圍第35項所述之方法，其中該 77 200920355 NSAID係一芳基院醆（諸如，雙氣芬酸（dicl〇fenac)、醋氣芬酸（aceclofenac)、艾斯美辛（acemetacin)、溴芬酸 (bromfenac) ^依托度酸（etodolac)、吲哚美辛 (indometacin)、秦丁美綱（nabumet〇ne)、舒林酸（suiin(jac)、托美汀（tolmetin)與上述之藥學可接受鹽類 39.如申請專利範圍第35項所述之方法，其中該 NSAID係一芳基丙酸（諸如’依普芬（ibupr〇fen)、卡洛芬 (carprofen)、芬布芬（fenbufen)、非諾洛芬（fen〇pr〇fen)、夫比普洛芬（flurbiprofen)、凱妥普洛芬（ketoprofen)、克妥洛（ketorolac)、洛索洛芬（i〇xopr〇fen)、那普洛辛 (naproxen)、奥沙普秦（oxaprozin)、泰普菲酸（tiapr〇fenic acid)、舒洛芬（SUprofen)與上述之藥學可接受鹽類）β 40·如申請專利範圍第35項所述之方法，其中該 NSAID係一芳基鄰胺苯甲酸（諸如，曱氣芬那酸 (meclofenamic acid)、甲芬那酸（mefenamic acid)與上述之藥學可接受鹽類）。 41.如申請專利範圍第35項所述之方法，其中該 NSAID 係一吡唑啉酮衍生物（諸如，阿扎丙宗 78 200920355 (azapropazone) 安乃近（metamizole)、經布宗 (oxyphenbutazone)、本丁唾酿I (phenylbutazone)、燒吩帕宗 (sulfinprazone)與上述之藥學可接受鹽類）。 42. 如申請專利範圍第35項所述之方法，其中該 NSAID 係一昔康（oxicam)(諸如，氣諾昔康（i〇rnoxicam)、美洛昔康（meloxicam)、比羅昔康（pir〇xicam)、替諾昔康 (tenoxicam)與上述之藥學可接受鹽類）。 43. 如申請專利範圍第35項所述之方法，其中該 NSAID係一 COX-2抑制劑（諸如，塞來考昔（celec〇xib)、依託考昔（etoricoxib)、羅美昔布（lumirac〇xib)、帕瑞考昔 (parecoxib)、羅非昔布（r〇fec〇xib)、伐地昔布（valdec〇xib) 與上述之藥學可接受鹽類）。 44. 如申請專利範圍第35項所述之方法，其中該 NSAID係一績酿胺苯（suiph〇naniiide)(諸如，尼美舒利 (nimesulide)與上述之藥學可接受鹽類）。 45. 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中該免疫或發炎疾病或異常係艾迪生病（Addison's Disease)、抗磷脂 79 200920355 症候群（anti-phospholipid syndrome)、氣喘、異位性皮膚炎（atopic ' dermatitis)、自體免疫萎縮性胃炎（autoimmune atrophic gastritis)、自體免疫胃酸缺乏（achlorhydra autoimmune)、貝西氏病（Behcet's disease)、腹腔性疾病 (Celiac Disease)、慢性自體性蓴蔴療（chronic idiopathic urticaria)、慢性嬰兒神經皮膚與關節（Chronic infantile neurological cutaneous and articular, CINCA)症候群（亦稱為新生兒發病多系統發炎疾病（neonatal-onset multisystem inflammatory disease, NOMID))、慢性阻塞性肺病（chronic obstructive pulmonary disease, COPD) ' 克隆氏症（Crohn's Disease)、庫欣氏症候群（Cushing’s Syndrome)、皮肌炎 (dermatomyositis)、古德巴斯德症候群（Goodpasture's Syndrome)、移植物抗宿主疾病（graft-vs-host disease)、葛瑞夫兹病（Grave's Disease)、橋本氏甲狀腺炎（Hashimoto's thyroiditis)、特發性腎上腺萎縮（idiopathic adrenal atrophy)、特發性金小板減少（idiopathic thrombocytopenia)、藍伯-耶頓症候群（Lambert-Eaton Syndrome)、紅斑性狼瘡（lupus erythematosus)、多發性硬化症（multiple sclerosis)、類天皰瘡（pemphigoid)、尋常型天皰瘡（pemphigus vulgaris)、惡性貧血（pernicious anemia)、花粉熱（pollinosis)、結節狀多動脈炎（polyarteritis nodosa)、原發性膽汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis)、原發性硬化性膽道炎（primary sclerosing 80 200920355 cholangitis)、牛皮癬（psoriasis)、雷諾式症（Raynauds)、雷德氏症候群（Reiter's Syndrome)、復發性多軟骨炎 (relapsing polychondritis)、類風濕性關節炎（rheumatoid arthritis)、鼻炎（rhinitis)、施密.特氏症（Schmidt's Syndrome)、敗血症（sepsis)、薛格連氏症候群（Sjogren’s Syndrome)、交感性眼炎（sympathetic ophthalmia)、高安氏血管炎（Takayasu’s Arteritis)、顳動脈炎（temporal arteritis)、甲狀腺毒症（thyrotoxicosis)、移植排斥（例如，組織移植、骨髓移植）、潰瘍性大腸炎（ulcerative colitis)、葡萄膜炎（uveitis)、血管炎（vascuUtis)與華格納肉芽腫 (Wegener's granulomatosis) ° 官理或預防一免疫或發炎疾病異常所需之一免疫抑制與/或枋^ 丹4仉發炎藥物劑量的方法，其至少包括對該患者輔助式施用一可心λ 八用可抑制S 1 Ρ裂解酶活性之化合物。項所述之方法，其中該可式I : 47·如申請專利範圍第46 抑制S 1 Ρ裂解酶活性之化合物係 81 200920355 R4

x 或其一藥學可接受之鹽類，其中： X係0或NR3 ; Ri係OR1A、NHOH、氫、或選擇相基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、基； Κ·2 係 OR2A、c(o)or2A、氫、鹵 Ί 經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷遵烷基雜環或雜環烷基； R3 係 or3a、n(r3A)2、nhc(o)r3A R4 係 or4a、〇c(o)r4a、氫、鹵 Ί 之燒基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜賴環或雜環烷基； Κ·5係N(R5A)2、氫、經基、或選措芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜驾烷基；及各個 RiA、R2a、R3A、R4A 與 r5A ^ 取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、基雜環或雜環烷基。經取代之烧基、芳烷基雜環或雜環烷、腈類、或選擇性、雜烧基、雜環、、NHS02R3A 或氫；、或選擇性經取代基、雜環、烷基雜性經取代之烷基、、貌基雜環或雜環別為氫或選擇性經雜燒基、雜環、烷 82 200920355

48. 一種藥學組合物，其至少包括一免疫抑制

劑與式

之一化合物或其一藥學可接受之鹽類，其中： X係0或NR3 ; Rl係OR1A、NHOH、氫、或選擇性經取代之烷基、院芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或基；汉2係OR2A、C(0)0R2a、氫、鹵素、腈類、或經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、炫·基雜環或雜環烷基； R3 係 or3A、n(r3A)2、nhc(o)r3A、nhso2r3A r4係〇r4A、0C(0)R4a、氫、鹵素、或選擇性之烧基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、環或雜環烷基； 1係N(R5A)2、氫、經基、或選擇性經取代之芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環炫> 基I及基、芳雜環烷選擇性雜環、或氫；經取代烷基雜燒基、或雜環 83 200920355 別為氫或選擇性經雜燒基、雜環、烷各個 Ια、R2A、R3A、R4A 與 R5A 分取代之燒基、芳基、烷芳基、芳烷基、基雜環或雜環烷基。 —抗-發炎藥物與 49 ‘ —種藥學組合物，其至少包才式I :

之—化合物或其一藥學可接受之鹽類， X係0或NR3 ; R1係OR1A、NHOH、氫、或選擇性基、燒方基、芳炫基、雜烧基、雜環、基；尺2 係 or2a、c(o)or2A、氫、鹵素經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基燒基雜環或雜環烷基；汉3 係 or3A、n(r3A)2、nhc(o)r3A R4 係 OR4a、0C(0)R4A、氫、鹵素之燒基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷環或雜環烷基；其111 : 經取代之烷基、芳院基雜環或雜環烷、腈類、或選擇性、雜燒基、雜環、、NHS02R3A 或氫；、或選擇性經取代基、雜環、烷基雜 84 200920355 R 5係N ( R 5 A) 2、氫 '經基、或選擇性經取芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基烧基；及各個 RlA、Κ·2Α、Κ·3Α、Κ·4Α 與 Κ·5Α 分別為氫取代之烧基、芳基、烧芳基、芳烧基、雜院基基雜環或雜環烷基。代之烧基、雜環或雜環或選擇性經、雜環、烷 85