TW200817327A - Bicyclic compositions and methods for modulating a kinase cascade - Google Patents

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TW200817327A
TW200817327A TW096123720A TW96123720A TW200817327A TW 200817327 A TW200817327 A TW 200817327A TW 096123720 A TW096123720 A TW 096123720A TW 96123720 A TW96123720 A TW 96123720A TW 200817327 A TW200817327 A TW 200817327A
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Description

200817327 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於調節激酶級聯之一或多個組份的化合物 和方法。 L无W技術】 發明背景 :仏唬轉導疋細胞藉以將一類型信號或刺激轉變為另一 ^勺任何過&。％為信號轉導的過程通常涉及在細胞内的 連串生化反應，這藉著酵素完成，並經由第二信使連結。 在許多轉導過程中，在從最初刺激而進行的事件中吸引了 越來越夕的酵素和其他分子。在這類情況下，將連鎖步驟 稱為，，信號級聯（signanng cascade)，，或，，第二信使路徑 (second messenger pathway)”， 〜 町）且通常產生小刺激誘發大反 =二。涉及信號轉導的一種分子是酵素的激酶家族。 二、=激酶是蛋白質激酶’其作用在特定蛋白質上並修 的:工處理這些被廣泛地用來轉送信號並控制細胞中複雜 轉移酶是—A類酵素，其催化將Μ酸基從ATP 轉私至蛋白質㈣巾SdTh4 密切涉及久链I# y之惻鏈上的羥基，且 是：信號轅t ，或+取值得注意的 現轉導、分化和增殖。 個不同的I占所 叶在人體中大約有2,〇〇〇 的蛋白貝激酶，雖然這些八 肽受質，作它 〜刀別^酉夂化特殊的蛋白質/ 受質，ATP α入 窩（Pocket)與相同的第二 、、，°δ。蛋白質磷酸酶催化磷酸以反方向轉移。 200817327 酪胺酸激酶是可將磷酸基團從ATP轉移至蛋白質中酪 月女酸殘基的酵素。蛋白質被激酶磷酸化的作用，是在信號 轉導中用以調節酵素活性的重要機制。㈣胺酸激酶分成 兩群，為細胞質蛋白質和穿透膜受體_連鎖激酶。在人類中， 有32個細胞質蛋白質酪胺酸激酶和58個受體-連鎖蛋白質 -酪胺酸激酶。作用在細胞表面酪胺酸激酶_連鎖受體的激 素和生長因子，通常是促進生長並具有刺激細胞分裂功能 的（例如胰島素、類胰島素生長因子i、上皮生長因子 σ種已知蛋白質激轉或蛋白質填酸酶的抑制劑，具有 各種治療用途。蛋白質激酶或蛋白質磷酸酶抑制劑的一項 有希差的可此冶療用途，是作為抗〜癌劑。大约$ 已知的 致癌基因產物是蛋白質酪胺酸激酶（pTKs)，且已經顯示其 激酶活性將導致細胞轉化。 可將PTKs分為兩類，膜受體PTKs(例如生長因子受 體PTKs)和非-受體PTKs(例如原致癌基因產物的Src家 族）。具有至少9個成員的帶有pp60c-src之非-受體pTK，s 的Six家族（在後文中簡稱為” Six，，），為家族的原型ρτκ， 其中大約300個胺基酸的催化功能部位被高度保留。已經 在許多人類癌症中報告了 Src的高度活化，包括結腸、乳 房、肺、膀胱和皮膚的那些，以及在胃癌、毛細胞白血病 和神經胚細胞瘤中。來自穿透膜受體（例如EGFR和 pl8 5HER2/Neu)之過度刺激細胞增殖信號至細胞内部，似 乎也經過Src。因此’目前已經提出Src是癌症治療的萬 能目標’因為高度活化（沒有突變）涉及許多重要人類腫瘤 6 200817327 類型的腫瘤開始、進行和轉移。 因為激酶涉及各式久接x a e l 谷式各樣正吊細胞信號轉導路徑的調節 (例如細胞生長、分化、左 + 存活、附者、遷移等等），故認為 激S#在各種疾病和病症中少 用庄甲知肩某種角色。因此，激酶信號 級聯的調節可能是治療蠖 席及預防这類疾病和病症的重要方 式。 對蛋白質激酶領域的重要貢獻，曾經是利用與衍生自 熱穩定抑制劑蛋白質，Ρκ吵24)和Mg2ATp之2〇個-殘基 肽結合的絲胺酸激酶cAMp_依賴性蛋白質激酶（“ρκΑ”）的 X-射線結構研究（Tayl〇r等人，1993)。該結構研究是特別有 價值的’因為認為PKA是蛋白質激酶之全部家族的原型， 它們是從單一的袓先蛋白質激酶演化而來的。ρκΑ與其他 絲胺酸和酪胺酸激酶的序列排列，已經確認一保留的催化 核心，具有大約260個殘基，且在該核心中有丨丨個高度 保留的殘基（Taylor等人，1993)。在本文中提出之研究特別 注意到兩個咼度保留的殘基，為普通鹼基Asp_丨66，提出 它與受質OH產生交互作用，以及絲胺酸激酶中帶正電的 殘基Lys-168和酪胺酸激酶的Arg(Knighton等人，1993)， 提出它與ATP的γ-磷酸產生交互作用，幫助催化該磷酸的 轉移。已經報告了另外兩個重要的ΡΚΑ晶體結構 (Madhusudan 等人，1994)，一個是三元 PKA:ADP:PKI(5-24) 複合體，其中已經以Ser代替PKI Ala 21(藉此變成受質）， 而一個是二元PKA:PKI(5-24)複合體，其中已經以磷酸絲 胺酸代替PKI Ala 21 (終產物抑制劑）。三元複合體顯示絲 200817327 &c酸OH把H-鍵贈送給Asp_ 166，並接受來自Lys-168側 鏈的H-鍵。二元複合體顯示磷酸絲胺酸的磷酸基團，與 Lys-168側鏈形成鹽橋，並在Asp-166羧基基團的Η-鍵長 内這些結構支持較早提出之Asp-166和Lys-168在催化 機制中的角色。 A的X-射線結構顯示該酵素是由兩葉組成，其中較 小葉與ATP結合，而較大葉與肽受質結合。催化作用發生 在葉間的裂縫。PKA的結晶學和溶液結構研究指出，當它 與受質結合時，酵素經歷重大的構形改變，從，，開放，，形式
C \ 轉變成，，關閉，，催化活性形式（cox等人，1994)。推測這些構 形上的改變涉及因受質結合而使在兩葉之間的裂縫關閉， 使得ATP之γ_填酸和Ser0H#常靠近，直接轉移該破酸。 然而，蛋白質激酶和蛋白質磷酸酶的 小 貝，欠姆的沣多抑制劑仍缺 夕>口療用途想要的專一性和效力。因為 m 貝激I#和蛋白 貝石拜酸酶在許多不同疾病，包括癌症、 石承儿斤 卞皮癬、動脈粥樣 更化、弟Π型糖尿病、肥胖中扮演的關鍵 上田… 1王角色，及里在 。周即免疫系統活性上的角色，故需要蛋白 /、 節劑。 為教酶級聯的調 【發明内容】 發明概述 本發明一方面提供具有式I之化合物： 8 200817327
（式i )，其中x為鹵素，且h、 R2、R3、R4、R5和R6是相同或不同的，並選自Η、C(0)Ra、 C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、 0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、 NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、 NRaS(0)0Rb 、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Rc 、 NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、 B(OH)2、鹵素、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環 化合物，以及具有從1到20個碳原子的烷基（分支、環狀 或未分支的），可視需要含有雙或三鍵，並可視需要以雜原 子或其他官能基取代，如羧酸、羧酸酯、醇、烷氧基、硫 醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烷、亞砜、砜、膦酸、膦酸 酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和 雜聯芳基，或R5和R6 —起形成雜環化合物。Ra、Rb和Re 是相同或不同的，並選自由Η、芳基、雜芳基、聯芳基、 雜聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的）所組成之群組， 其可視需要以雜原子或其他官能基取代，如羧酸、羧酸酯、 醇、烷氧基、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烷、亞砜、 砜、膦酸、膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜 芳基、聯芳基和雜聯芳基。應瞭解在上述側鏈中的所有開 9 200817327 放取代位置，均可含有更多的取代。 在一具體態樣中，r5或r6中至少有一個是
R/為附接點，並為（CH2)X，其中
X 選自 0、1、2、3、4、5、6、7、8、9 和 10，CH2CHOH、 CH(CH3)(R-異構體）或CH(CH3)(S-異構體），且每個R8、R9、 R1()、Rn和R12是相同或不同的，並選自 Η、C(0)Ra、 C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、 0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、 NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、 NRaS(0)0Rb 、 NRaS(0)2ORb 、 NRaP(0)0Rb0Rc 、 NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)ORaORb、 B(OH)2、鹵素、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環 化合物，以及具有從1到20個碳原子的烷基（分支、環狀 或未分支的），可視需要含有雙或三鍵，並可視需要以雜原 子或其他官能基取代，如羧酸、羧酸酯、醇、醚、硫醚、 醯胺、硫代醯胺、脲、尿烷、亞砜、砜、膦酸、膦酸酯、 次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯 芳基。Ra、Rb和1是相同或不同的，並選自由H、芳基、 雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和烧基（分支、環狀或未分支的） 所組成之群組，其可視需要以雜原子或其他官能基取代， 如羧酸、羧酸酯、醇、醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、 200817327 尿烷亞碾、砜、膦酸、膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、 i、方基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳基。應瞭解任何的R堋 9 10 R1 1和R12是經取代或未經取代的。 、 在另一具體態樣中，R或R6中至少有一個 OH 疋
其中星號代表與氮的_ 本發明另一方面為具有式π之化合物：
X Rd R*i (式Π )，其中X為鹵素，例如氣， 且Ri、尺2、R3和R4是專一性側鏈元件，並如上述之定 在一具體態樣中，心為H，R2為
… ，尺3為Η且114為1^。在另一具體 悲樣中，在吲哚環上的任何其他位置處取代該化合物。 本發明其他方面為一種確認蛋白質激酶之抑制劑的方 法。該方法涉及提供至少一個第一模件，纟具有一或多個 22分別與該蛋白質激酶之催化殘基共價或非_共價結合的 官能基，其中該一或多個官能基中至少有一個是_素，將 至少一個第一模件與至少一個提供非-肽支架（ηοη邛eptide 200817327 scaffold)的第：模件混合，形成—或多—★ 的組合，針對蛋㈣—和第二模件 和第二模#的,A |恥作用术師選该一或多個第一 矛弟始牛的組合’並選出地 第二模件的組合胃激酶活性的第一和 實體或官… 使用時，模件為單-的分子 .體成基的集合。當在本文中使用 能包含肽鍵的分子，&支木為可 太細子的一部分不是肽即可。 所、I另方面為一種抑制蛋白質激酶的方法。使蛋 “:酶與包括至少一個第一模件，其具有
:別::蛋白質激酶之催化殘基共價或非共價結合的J 二第:V::的或多個官能基包括鹵素’以及提供非-肽支架 杈件的化合物接觸。至少-個第-模件和第二模件 之組合’抑制該蛋白質激酶活性。 本發明另-方面為一種在個體中治療對蛋白質激酶抑 制劑有反應之狀況的方法。本發明另一方面是本發明之化 合物在製造可用來在個时治療對蛋白質激酶抑制劑有反 應之狀況之藥劑上的用③。將蛋白質激酶抑制劑投與個 體。蛋白質激酶抑制劑具有至少一個第一模件，其具有一 或多個能夠分別與該蛋白質激酶之催化殘基共價或=共價 結合的官能基，其中該一或多個官能基包括鹵素，以及提 供非-肽支架的第二模件。至少一個第一模件與第二模件的 組合，在個體中抑制了該蛋白質激酶活性。 本發明另一方面是一種確認蛋白質磷酸酶之抑制劑的 方法。該方法涉及提供至少一個第一模件，其具有_咬夕 個能夠分別與該蛋白質磷酸酶之催化殘基共價或非共價於 12 200817327 合的官能基’將至少—個第一模件與 架的第二模件混合，形成,^ 個提供非-肱支 形成一或多個第一和證一 合’針對磷酸酶抑制作用篩 模件的組 組合，並選出抑制蛋白編酶和第二模件之 組合。 性的第—和第二模件之 本發明另-方面是一種抑制蛋 發明另一方面早士欠 _的方法。本 万面疋本發明之化合物在 酸酶之藥劑上的用择 抑制蛋白質磷 w上的用途。使蛋白質磷酸酶 ^ 一模件，其具有-或多個能夠分別血續蛋白晰/、一個弟 化殘基共價或非共價結合的官能基二及提；：酸酶之催 ::模件的化合物接觸。至少-個第一模件：第 、、且口，抑制了該蛋白質磷酸酶活性。 、 本發明另一方面是一種在個體 抑制劑有反應之狀、χ Μ σ〜、’蛋白質磷酸酶 化合物在絮I: 本發明另-方面是本發明之 反庫之狀在個體中治療對蛋白㈣酸酶抑制劑有 個體。蛋白所的用途°將蛋白質鱗酸酶抑制劑投與 0酸酶抑制劑具有至少一個第一模件，其具 非丘=個能夠分別與該蛋白質碟酸酶之催化殘基共價或 少二:；：：官能基：以及提供非-肽支架的第二模件。至 白質鱗酸酶=與弟二模件的組合’在個體中抑制了該蛋 毛月另一方面是—種根據式ν化合物： 13 200817327
(式v)，或其鹽、溶劑合物、 水合物或前藥。Ri、R2、R3、R4和R5是相同或不同的， 並獨立地為 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、 OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、NRaP(0)0Rb0Rc、 NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)ORaORb、 B(OH)2、P、鹵素、芳基、苄基、雜芳基、聯芳基、雜聯 芳基、雜環，和分支、未分支或環狀的烷基。r6和r7是 相同或不同的，並獨立地為Η、分支或未分支的，或 (CH2)t-Z，其中Ζ為芳基、雜芳基、聯芳基、環烷基或雜 環，或116和化7 —起形成雜環。t為0、1、2、3、4、5、6、 7、8、9或1 0。Ra、Rb和Rc是相同或不同的，並獨立地為 Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基或分支、未分支或 環狀的烷基。Ρ 為 so3h、oso3h、ορο3η2、ΟΡ03Η2、〇-低碳數（Ci、c2、c3、c4、c5 或 c6)烷基-κ、o-c(o)•低碳 數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基 _L、NH-低碳數（Ci、C2、 C3、C4、C5或C6)烷基-M或0芳基-Q，其中低碳數（Cr C2、 C3、C4、C5或C6)烷基為直鏈或分支的烷基。K為c(o)nh2、 COOH、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、NH2、NHR19、 14 200817327 NR19R2〇、 烧氧基或 so2r21、糖苷、低碳數 c!、C2、c3、c4、c5、c6
。:L 為芳基、OH、C(0)NH2、CQOH、S03H、 〇so3h、p〇3h2、0P03H2、nh2、NHR19、NR19R20、s〇2R2i、
糖苷、低碳數c〗、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或 M〇。 M 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、〇S〇3H、P〇3H2、
〇po3h2、nh2、nhr19、nr19r20 Ci、C2、C3、C4、C5、c6^氧基或 S02R21、糖苷、低碳數
° Q為芳基、OH、 c(o)nh2、COOH、so3H、oso3h、p〇3H2、〇p〇3h2、丽2、 nhr19、nr19r20、so2R21、糖苷、低碳數 q、c2、c3、c4、 Κλ C5、C6烷氧基或A 〇。Rl9、R2G和獨立地為q、c2、 C3、C4、cs或C6烧基，或Rb和R2。與附接之氮原子一起
形成五員環。任何Ri、R2、R3、R4、R5、R6和R?，以及Ra、 Rb和Re為經取代或未經取代的。Ri、R2、和R 中至少有一個是P。 在一具體態樣中，p 為 so3h、oso3H、〇p〇3h2、〇P〇3H2、 O-低碳數（Cl、c2、c3、c4、c5 或 c6)烷基_κ、〇_c(〇)低 石反數（C〗、c2、C3、c4、C5或C6)烷基_L、NH-低碳數（Ci、 c2 c3、c4' c5或c6)烷基_M或0·芳基-Q，其中〖為s〇3H、 〇s^3h、p〇3H2、〇p〇3h2、丽2、nhr19、nr19r20、糖苷和 雜％，且其中 L 為 s〇3H、oso3h、P〇3H2、〇p〇3H2、nh2、 HR19 NR19R2〇、糠苷和雜環；且其中M為〇s〇3H、 15 200817327 19、NR19R2G、糖苦和雜環。 h、r3、r4和r5中至少有 Ρ03Η2、〇P〇3H2、NH2、NHRi
在一具體態樣中，、R 個選自IS素、硼酸、羥基、膦酸、胺基磺酸、胍、羧酸、 醛、醯胺和羥甲基膦酸。在另一具體態樣中，、R2、R3、 R4和R5中至少有一個是鹵素。在另一具體態樣中，Ri、&、 R3、R4和Rs中至少有一個是硼酸。在另一具體態樣中，Ri、 I、I、R4和Rs中至少有一個是羥基。在另一具體態樣 中’ R〗、R2、R3、r4和r5中至少有一個是醯胺。例如， 醯胺為鄰位三羰基醯胺。在一具體態樣中，r3為_素。例 如，&為氟。在另一具體態樣中，r3為羥基。 在一具體態樣中’ R6和r7中至少有一個是
，在此處*R8為附接點。在一具體態樣中，R 為（CH2)x，其中 X 為 0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。 在另一具體態樣中，R為CH2CHOH、CH(CH3)(R-異構體） 或CH(CH3)(S-異構體）。在另一具體態樣中，r9、r1q、Rn、 1112和R13分別是相同或不同的，且 R13 獨立地為 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、 OH、〇Ra、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(Q)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、NRaP(0)ORbORc、 NRaP(〇)〇RbRc、NRaP(0)0Rb0Re、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)ORaORb、 16 200817327 b(〇h)2、鹵素、p’、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、 雜環，或分支、環狀或未分支的烧基， P，為 so3h、oso3H、OP〇3H2、op〇3H2、〇 低礙數（Ci、 C2、c3、c4、c5 或 c6)烷基_κ，、〇_c(〇)_低碳數（Ci、、 c3、C4、C5 或 C6)烧基 _L’、贿_ 低碳數（Ci、c2、c3、、 C5或C：6)烧基-M或0_芳基_Q，，其中低碳數（Cl、c2、c3、 C4、C5或C：6)炫基為直鏈或分支的烧基。K，為c(〇)NH2、 COOH、S03H、0S03H、P〇3H2、〇P〇3H2、NH2、NHR22、 NR22R23、S02R24、糖苷、低碳數 c!、c2、c3、c4、c5、c6
烷氧基或 。L’為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、 oso3h、P03H2、0P03H2、NH2、nhr22、nr22r23、so2r24、 糖苷、低碳數Cl、C2、C3、C4、C5、烷氧基或
ο M，為芳基、oh、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、Ρ03Η2、 〇P03H2、NH2、NHR22、NR22R23、S02R24、糖苷、低碳數 c2、c3、c4、c5、06烷氧基或
Q’為芳基、OH、 C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、PO3H2、〇P〇3H2、nh2、 NHR22、NR22R23、S02R24、糖苷、低碳數 C1、c2、C3、c4、 C5、匕烷氧基或
。r22、r23和尺24獨立地為Ci、C2、 c3、C4、C5或C6烷基，或R22和R23與附接之氮原子一起 形成五員環。Ra、Rb和Re是相同或不同的，並獨立地為Η、 芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、分支、環狀或未分支 17 200817327
的烷基’其中任何R9、Rl。、R"、Rl2和R13是經取代或未 經取^的；且其限制條件為若Ri、R2、R3、R44 R5中之 不疋P則R9、Rl0、R11、R12和Rl3中至少有一個是P，。 在另一具體態樣中，P，為SO#、〇S〇3H、〇p〇3H2、 〇卩〇3112、〇-低碳數（(：：1、0：2、〇3、（：4、（：5或（：^烷基氺，、〇<(〇) 低碳數（Ci、C2、c3、c4、c5 或 c6)烷基 _L，、NH_ 低碳數（Ci、 c2、c3、C4、C5 或 C6)烧基 _M，或 芳基-Q，。K，為 s〇3h、 0S03H、P〇3H2、〇P〇3H2、NH2、NHR22、NR22R23、糖苷或 雜環。L，為 so3H、oso3H、P〇3H2、0P03H2、nh2、nhr22、 NR22R23、糖苦或雜環。M，為 S〇3H、〇s〇3H、p〇办、〇p〇3H2、 NH2、NHR22、NR22R23、糖苷或雜環。在另一具體態樣中，
本發明另一方面包括一種式γΐ化合物：
^ (式VI )，或其鹽、溶劑合物、 水合物或前藥。Ri、R2、、R4、、R0和分別是相同 或不同的，並獨立地為 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 200817327 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)〇Rb、NRaS(0)2〇Rb、 NRaP(0)0Rb0Re、NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)ORbORe、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、P、鹵素、芳基、雜 芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和分支、環狀或未分支 的烷基。Ra、Rb和Rc是相同或不同的，並獨立地為Η、芳 基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和分支、環狀或未分支的 烷基。Ρ 為 S03H、0S03H、0Ρ03Η2、ΟΡ〇3Η2、0-低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基·Κ、O-C(O)-低碳數（Ci、c2、c3、 C4、C5 或 C6)烧基 _L、NHH& 碳數（(^、C2、C3、C4、c5 或 C6)烷基-M或0·芳基-Q，其中低碳數（Cl、c2、C3、c4、C5 或c6)烷基為直鏈或分支的烷基。K為C(0)NH2、COOH、 so3h、oso3h、p〇3H2、〇p〇3H2、nh2、nhr19、nr19r20、
、糖苦、低碳數Ci、C2、C3、c4、c5、c6烷氧基或 。L 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、、0S03H、
'V p〇3H2、〇p〇3H2、NH2、NHR19、NR19R2〇、s〇2r2i、糖苷、
低碳數Ci、C2、c3、c4、c5、匕烷氧基或為芳 基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、〇S〇3H、p〇3H2、〇p〇3H2、 NH2、NHR19、NR19R2〇、S02R21、糖苦、低碳數 q、c；2、c3、 c4、c5、C6 燒氧基或 H 。Q 為芳基、OH、c(o)nh2、 COOH、S03H、0S03H、P03H2、〇P〇3h2、丽2、NHRi9、 nr19r20、so2r21、糖：g：、低碳數 q、c2、c3、c4、c5、c 19 200817327
烷氧基或 。β ^ 19、R2G 和 R21 獨立地為 Cl、C2、C3、 4 c54c6燒基，瘘 五員環。x^、2、t 19和2°與附接之氮原子一起形成 r、r 4、5、6、7、8、9或1〇。1^、1、 3 4、 5、R6和\中至少有一個是p。 在一具體態樣φ，D τ 為 so3H、oso3H、〇ρ〇3η2、ΟΡΟ Η 〇-低石反數（q、ρ η , 碳數（〇丨、〇：2、（：3、€：3、、/ 6)烧基汊、〇-〇:(0)-低 3 4 5或C6)烷基-L、ΝΗ-低碳數（Ci、 2、C3、C4、C5 或 C6)院基 _M 或 〇_ 芳基 _Q。κ 為 so#、 0S03H、P〇3H2、〇p〇 w 〇3比、NH2、NHR19、NRl9R2〇、糖苷或 雜裱。L 為 S03H、〇s〇 η id。u a 3H ' P〇3H2、〇p〇3h2、贿2、NHR19、 NRl9R2〇、糖芽或雜環。M 為 S〇3H、_3H、P〇3h2、〇p〇3h2、 蘭2、NHRl9、NRi9R2〇、糖苷或雜環。 本毛月方面包括式v化合物在製造用以在個體中預 防或治療聽力喪失之藥劑上的用《。本發明另一方面包括 在個體中預防或治療聽力喪失的方法，包括投與具有式V 之化合物：
並獨立地為 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、 OH、0Ra、0C(0)Ra、〇C(0)〇Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 20 200817327 NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、NRaP(〇)〇Rb〇Rc、 NRaP(0)ORbRc、NRaP(〇)〇Rb〇Re、SRa、s(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)2ORa、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(〇)〇Ra〇Rb、 B(OH)2、P、鹵素、芳基、苄基、雜芳基、聯芳基、雜聯 芳基、雜環，和分支、未分支或環狀的烷基。r6和R7是 相同或不同的，並獨立地為Η、分支或未分支的，或 (CH2)t-Z，其中Ζ為芳基、雜芳基、聯芳基、環烷基或雜 環，或R6和R7 —起形成雜環。t為〇、1、2、3、4、5、6、 7、8、9或10。Ra、Rb和Rc是相同或不同的，並獨立地為 Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基或分支、未分支或 環狀的烷基。Ρ 為 so3h、oso3h、ορο3η2、ορο3η2、〇-低碳數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 c6)烷基-Κ、O-C(O)-低碳 數（c〗、c2、C3、C4、C5 或 c6)烧基-L、NH-低碳數（Ci、C2、 〔3、04、（^5或（^6)烧基-1^1或〇-芳基-(^，其中低碳數（(^1、（^2、 C3、CV c5或C6)烷基為直鏈或分支的烷基。K為c(o)nh2、 COOH、S03H、0S03H、P〇3H2、〇p〇3H2、NH2、NHR19、 nr19r20、so2r21、糖苷、低碳數 c!、c2、c3、c4、c5、c6
0S03H、P03H2、0P03H2、NH2、NHR 、C(〇)NH2、COOH、S03H、 NHR19、NR19R20、S09R，】、
糖苷、低碳數Ci、C2、C3、C4、c5、c6烷氧基或 3。 M 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、P〇3H2、 so2r21、糖苷、低碳數 〇P〇3H2、nh2、NHR19、nr19r20、 21 200817327
C】C2 c3、c4、c5、c6烷氧基或H 為芳基、〇H C(0)NH2，COOH > S03H ^ OSO3H ^ P〇3H2 > 〇P〇3H2 > nh2 19 NR19r2。、、糖芽、低碳數 Cl、C2、c3、q c5、ca氧基或"。Ri9、R2Q和％獨立地為Ci、c2、 C3、Ά或C6烷基’或R19和R2。與附接之氮原子一起 形成五員環。任何mm，r7，以及Ra、
Rb和rc為經取代或未經取代的。mR 中至少有一個是P。 在八體怨樣中，p 為 S03H、〇SOsH、〇p〇3H2、〇ρ〇3Η2、 〇_低碳數（Ci、C，、c、r n . ^ 石山 3 4、c5或c6)烷基-K、o_c(0)_低 反 1、2、C3、C4、C5 或 C6)烧基 _L、NH-低碳數（c、 一 W或〇-芳基-Q，其"二、 〇叫H、P〇3H2、OP〇3H2、NH2、NHR,9、NRA。^^^ 雜 ％。L 為 S〇3H、〇s〇3H、p〇 H2、〇p 雜環。M 為⑽3H、⑽ 3H、pQ3H2〇p〇3 二 2 19 NRi9R2G、糖苷或雜環。 的二樣中，該化合物抑制蛋白質激酶信號路徑 制劑。在另-具體態樣中，t二V:化合物— 激酶的結合。在—且 。物不抑制ATP與蛋白質 蛋白質激酶。例如:s::之：化合物 胺酸激酶。 Src豕叔之蛋白質激酶為沖60_路 在一具體態樣令，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 22 200817327 :肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 局啊例如藉著投與滴劑至耳朵内）、動脈内、病灶 著計量幫浦，或藉著施用在a膜上，完成該化合物的投藥。 日 在-具體態樣中’將該化合物與引起聽力喪失之藥物，例 如順氯氨#或胺基糖^:類抗生素，混合投藥。在另—具體 態樣中，將該化合物與猫準毛細胞的藥物混合投藥。^一 具體態樣中，將該化合物與在藥學上可接受之載劑一起投 與。在-具體態樣中，纟開始喪失聽力之前先投與該化合 物。在另-具體態樣中，在開始喪失聽力之後投與該化： 物。 在一具體態樣中，111'112、113、1和115中至少有一 個選自鹵素、硼酸、羥基、膦酸、胺基磺酸、胍、羧酸、 醛、醯胺和羥甲基膦酸。在另一具體態樣中，Ri、、尺广 I和R5中至少有一個是i素。在另一具體態樣中，Ri、r2、 l、R4和&中至少有一個是硼酸。在另一具體態樣中，Ri、 I、I、R4和h中至少有一個是羥基。在另一具體態樣 中，Ri、r2、r3、r4和R5中至少有一個是醯胺。例如， 醯胺為鄰位三羰基醯胺。在一具體態樣中，R3為鹵素。例 如，R3為氟。在一具體態樣中，R3為羥基
Rs為附接點，並為（Ch2)x，其中X為〇、 2、3、4、5、6、7、8、9或 10, CH2CH〇h、CH(CH3)(R· 23 200817327 異構體）或€別(：113)(8-異構體）。119、111()、1111、1112和尺13 分別是相同或不同的，並獨立地為H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)ORb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Rc 、 NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、 鹵素、P ’、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，或 分支、環狀或未分支的烷基。P’為so3h、oso3h、opo3h2、 0Ρ03Η2、Ο-低碳數（CV C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-K’、o-c(o)· 低碳數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-L’、NH-低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C5或C6)烷基-M，或O-芳基-Q，，其中低碳數（Cl、 C2、C3、C4、C5或C6)烷基為直鏈或分支的烷基。K’為 C(0)NH2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、NH2、 NHR22、NR22R23、SO2R24、糖普、低碳數 Ci、C2、C3、C4、
C5、C6 烷氧基或 H ϋ。L’為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、 S03H、0S03H、P03H2、0P03H2、NH2、NHR22、NR22R23、 S02R24、糖苷、低碳數Cl、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或
。M，為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、 P03H2、0P03H2、NH2、NHR22、NR22R23、S02R24、糖苷、 低碳數q、c2、c3、c4、c5、06烷氧基或
。Q’為芳 24 200817327 基、OH、c(o)NH2、COOH、so3H、〇s〇3H、p〇3h2、〇P〇3h2、 nh2、nhr22、NR22R23、s〇2R24、糖苷、低碳數 Cl、c2、c3、 C4、C5、c6烷氧基或Η 〇。r22、和r24獨立地為Cl、 C2、C3、c4、c5或c6烷基，或r22和r23與附接之氮原子 一起形成五員環。Ra、Rb和是相同或不同的，並獨立地 為Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、分支、環狀或 未分支的烷基。其中任何R9、Ri〇、R"、Ri2和Ru是經取 代或未經取代的。若Ri、R2、、R4或中之一不是p， 此時R9、Rl0、Rn、R12和R13中至少有〆個是P，。 在一具體態樣中，P，為 S〇3H、oso3h、OP〇3H2、 0Ρ03Η2、Ο-低碳數（Ci、c2、c3、c4、或 c6)烷基 _κ，、〇<(〇)_ 低碳數d、c2、c3、c4、c5或c6)烷基-L，、NH-低碳數（q、 c2、c3、c4、c5 或 c6)烧基-M，或 O-芳基-Q，。K，為 S03H、 oso3h、p〇3h2、〇p〇3h2、顧2、NHR22、Nr22R23、糖苷或 雜壞。L，為 S03H、〇S〇3H、P〇3H2、0P03H2、NH2、nhr22、 NR22R23、糖普或雜環 qM，為 s〇H 〇s〇3H p〇办、〇p〇3H2、 NH2、NHR22、NR22R23、糖苷或雜環。在另一具體態樣中， R6和R7中至少有一個是
本發明一方面為式V化合物在製造用以在個體中預防 或治療增殖性疾病之藥劑上的用途。本發明另一方面包括 25 200817327 在個體中預防或治療增殖性疾病的方法，包括投與具有式 v之化合物：
(式V )，或其鹽、溶劑合物、 水合物或前藥。Ri、R2、R3、R4和R5是相同或不同的，並 獨立地為 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、 ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)ORb、NRaS(0)2ORb、NRaP(0)0Rb0Rc、 NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)ORaORb、 B(OH)2、P、鹵素、芳基、苄基、雜芳基、聯芳基、雜聯 芳基、雜環，和分支、未分支或環狀的烷基。R6和R7是 相同或不同的，並獨立地為 Η、分支或未分支的，或 (CH2)t-Z，其中Ζ為芳基、雜芳基、聯芳基、環烷基或雜 環，或R6和R7 —起形成雜環。t為0、1、2、3、4、5、6、 7、8、9或1 0。Ra、Rb和Re是相同或不同的，並獨立地為 Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基或分支、未分支或 環狀的烷基。Ρ 為 so3h、oso3h、ορο3η2、ΟΡ03Η2、0-低碳數（Ci、c2、c3、c4、c5 或 c6)烷基·κ、o-c(o)•低碳 數（C,、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-L、NH_低碳數（Cl、C2、 C3、C4、C5或C6)烷基-M或O-芳基-Q，其中低碳數（Cr C2、 26 200817327 C3、C4、CS或C6)烧基為直鍵或分支的院基。κ為c(0)NH2、 COOH、S03H、〇S03H、p〇3H2、0Ρ03Η2、NH2、NHR19、 NR19R2〇、S02R21、糖苦、低碳數 Ci、C2、c3、c4、c5、c6
烧氧基或 。[為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、 oso3h、p〇3H2、〇p〇3H2、nh2、nhr19、NR19R2G、s〇2R2i、 糖苷、低碳數Ci、C2、c3、c4、C5、（：6烷氧基或 M 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、〇S〇3H、P〇3H2、 〇p〇3H2、nh2 ' nhr19、NRi9R2〇 c!、c2、c3、c4、c5、（：6烷氧基或 、S02R21
、糖苷、低碳數 Q為芳基、OH、 C(0)NH2、COOH、S03H、〇s〇3H、Ρ03Η2、〇p〇3H2、NH2、 nhr19、nr19r2G、so2r21、糖苦、低碳數 Ci、c c c、 K: 4 C5、C6烷氧基或H o ; Ri9、。和R21獨 立地為q、c2、
C3、C4、cs或c0烷基，或R”和Rn與附接之氮原子一起 形成五員環；其中任何Ri、R2、R3、R4、R5、I和R?， 以及Ra、Rb和Re為經取代或未經取代的。R1、R2、 r、 R5和R6中至少有一個是p。 在一具體態樣中，p 為 S〇3H、〇s〇3H、〇p〇3H2、〇p〇3H2、 o-低碳數（Cl、C2、c3、c4、c5 或 c6)烷基-κ、〇_c(0)_低 反數（Cl c2、C3、c4、c5 或 c6)烧基-L、NH-低碳數（Cj、 C2 3 C4 C5 或 C6)燒基 或 〇-芳基-Q。K 為 S03H、 〇so3H、p〇3h2、〇p〇3H2、腿2、NHRi9、Ν“、糖苷和 27 200817327 雜環。l 為 S〇3h、os〇3H、p〇3H2、 糖料雜環。MS〇3H、qs〇3H =^、 nh2、NHRi9、職i9r2g、糖普和雜環。 〇p〇3h2、 在一具體態樣中，該化合物抑㈣ 的-或多個組份。在另-具體態樣中，該化c 另-且二. 該化合物為肽受質抑制劑。在 另具體恶樣中，該化合物不抑制Ατρ與蛋白#__ ::在另-具體態樣中，該化合物抑制Src家族之蛋白質 竑酶。例如，Src家族之蛋白質激酶為_。_路胺酸激酶。 在-具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 1部、動脈内、病灶内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏 膜上，完成該化合物的投藥。在另一具體態樣中，將該化 合物與在藥學上可接受之載劑一起投與。在一具體態樣 中，在增殖性疾病開始之前先投與該化合物。在另一具體 態樣中’在增殖性疾病開始之後投與該化合物。 在一具體態樣中，R〗、R2、R3、R4和r5甲至少有一個 砥自i素、硼酸、羥基、膦酸、胺基磺酸、胍、羧酸、醛、 酿胺和經甲基膦酸。在另一具體態樣中，&、&、&、& 和I中至少有一個是鹵素。在另一具體態樣中，、 R3、R4和Rs中至少有一個是硼酸。在另一具體態樣中，、 反2、汉3、R4和&中至少有一個是經基。在另一具體態樣中， 、R2、R3、R4和R5中至少有一個是醯胺。例如，醯胺為 鄰位三羰基醯胺。在一具體態樣中，R3為鹵素。例如，r3 28 200817327 為氟。在一具體態樣中，r3為羥基。在一具體態樣中，r6
Rig 和r7中至少有一個是 ns K13 。*R8為附接點，並為 ((：112)乂，其中又為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10, CH2CHOH、CH(CH3)(R-異構體）或 ch(ch3)(s-異構體）。R9、 R10、Rn、R12和R13分別是相同或不同的，並獨立地為Η、 C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)ORa、C(0)SRa、OH、ORa、 0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)2ORb、NRaP(0)0Rb0Rc、 NRaP(0)0RbRe、NRaP(0)0Rb0Re、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、 B(OH)2、鹵素、P，、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、 雜環，或分支、環狀或未分支的烷基。P’為S03H、0S03H、 opo3h2、opo3h2、ο-低碳數、c2、c3、c4、c5 或 c6) 烷基-K’、O-C(O)-低碳數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-L，、NHM 氏碳數（¢^、C2、C3、C4、C5 或 C6)烧基 _M，或 〇-芳基-Q’，其中低碳數（Ci、C2、C3、C4、C5或C6)烷基為直 鏈或分支的烷基。K，為 C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、 P03H2、OP03H2、NH2、NHR22、NR22R23、S02R24、糖苷、 低碳數Ci、C2、C3、C4、C5、C6烷氧基或 K 。L’為芳 基、OH、C(0)NH2、COOH、so3h、oso3h、Ρ03Η2、0Ρ03Η2、 29 200817327 NH2、NHR22、NR22R23、S〇2r24、糖:g：、低碳數 Ci、c2、c3、 C4、C5、C6 烷氧基或 H 。M，為芳基、OH、C(0)NH2、 COOH、S03H、〇s〇3H、P〇3H2、〇P〇3H2、NH2、NHR22、 nr22r23、so2R24、糖:g：、低碳數 Ci、c2、q
烧氧基或 。Q，為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、 oso3h、p〇3H2、〇p〇3h2、丽2、NHR22、NR22R23、s〇2r24、
H4! 糖普、低碳數Ci、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或③0。 R22、R23 和 R24 獨立地為 Cl、c2、c3、c4、c5 或 c6 烷基， 或R22和R23與附接之氮原子一起形成五員環。、Rb和R。 是相同或不同的，並獨立地為Η、芳基、雜芳基、聯芳基、 雜聯芳基、分支、環狀或未分支的烷基。R9、R1()、Rn、R12 和Ru是經取代或未經取代的。若R】、R2、R3、或中 之一不是P，則此時R9、Rl0、Rii、Ri2和Ri3中至少有一 個是P’。 在一具體態樣中，p，為 so3h、oso3h、〇P〇3H2、 〇p〇3H2、〇低碳數（Ci、c2、c3、c4、c5 或 c6)烷基-K，、O-C(O)-低礙數（C!、C2、C3、c4、C5 或 C6)烷基-L，、NH-低碳數（Ci、 c2、c3、c4、C5 或 c6)烷基 _M，或 0_ 芳基 _Q，。K，為 S03H、 oso3h、P〇3H2、〇P〇3H2、NH2、NHR22、NR22R23、糖苷或 雜環。L’為 S03H、〇S〇3H、P〇3H2、0P03H2、nh2、nhr22、 nr22r23、糖苷或雜環。M，為 S03H、0S03H、P03H2、0P03H2、 NH2、NHR22、NR22R23、糖皆或雜環。 30 200817327 在一具體態樣中，r6和r7中至少有一個是
本發明一方面為式W化合物在製造用以在個體中預防 或治療骨質疏鬆症之藥劑上的用途。本發明另一方面包括 在個體中預防或治療骨質疏鬆症的方法，包括投與式W化 合物：
(式ΥΠ )，或其鹽、溶劑合物、 水合物或前藥。Ri、、R4和R5是相同或不同的，並 獨立地為 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、 ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、NRaP(0)ORbORc、 NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Re、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、 B(OH)2、P、鹵素、芳基、苄基、雜芳基、聯芳基、雜聯 芳基、雜環，和分支、未分支或環狀的烷基。R6和R7是 相同或不同的，並獨立地為 Η、分支或未分支的，或 (CH2)t-Z，其中Ζ為芳基、雜芳基、聯芳基、環烷基或雜 環，或以6和R7 —起形成雜環。t為0、1、2、3、4、5、6、 31 200817327 7、8、9或1 0。Ra、Rb和Rc是相同或不同的，並獨立地為 Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基或分支、未分支或 壞狀的烷基。Ρ 為 so3h、0S03H、ορο3η2、ορο3η2、〇-低碳數（Cl、C2、C3、c4、c5 或 c6)烷基-Κ、O-C(O)-低碳 數（Ci、C2、C3、c4、c5 或 c6)烷基-L、NH_低碳數（Ci、C2、 C3、C4、C5或C6)烷基_M或〇_芳基_Q，其中低碳數（Cl、C2、 <^3、。4、(：5或0：6)院基為直鏈或分支的烧基。1^為。（〇讲^、 COOH、S03H、〇S〇3H、p〇3H2、〇p〇A、丽2、NHR”、 NR19R2。、S02R21、糖苦、低碳數 Ci、c2、C3、 c、c
烷氧基或 。L 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、 oso3H、p〇3H2、OP〇3H2、簡2、NHRi9、、s〇A、 N、〇 糖苦、低碳數c,、c2、c3、c4、c5、氧基或。 M 為芳基、〇H、C(0)贿2、COOH、S03H、〇S〇3h、p〇3H2、 〇p〇3H2、nh2、nhr19、NR R、so R 4一 3 NK19K20匕。2凡21、糖苷、低碳婁欠
Ci、C2、C3、C4、c5、c6 烷氧基或 Εί 0 Q為芳基、OH、 C(0)NH2、COOH、S〇3H、〇s〇3H、p〇3H2、〇p〇3H2、叫、 nhr19、nr19r20、s〇2r2i、糖苷、低碳數 2 Η^ί 2 3、L4、 C5、C6烧氧基或Η 0 ;r19、r2。和r21獨立地為\ c3、c4、。或(：6烷基’或‘和r2。與附接之 起 形成五員環；其中任何汉 ’、子起
J Kl、R2、R3、R4、n5、R6 和 R 以及Ra、Rb和Re為經取代或未經取代的。 7 32 200817327 在一具體態樣中’ p為s〇3H、〇s〇3H、〇p〇3H2、 o-低碳數（Ci、C2、c、「、r + 。 石户數 ic、r、r 3 4 5 或 C6)烷基-K、O-C(O)-低 A 1 2 3、C4、C5 或 C6)燒基-L、NH-低碳數（q、 c2 C3、c4、c5或c6)燒基_M或〇芳基。K為犯、 OSO3H λ PO3H9 Λ 〇Ρ〇 xj χτττ τ Qn 凡、腿2、NHR丨 9、NR19R2〇、糖苷或
雜壞。L 為 SO3H、〇S〇 Η、w A ⑽ D /、 b〇3H、P〇3H2、〇P〇3H2、NH2、NHR19、 nr19r2。、糖苷或雜環。m XT & MA S〇3H、〇S〇3H、P03H2、〇P〇3H2、 f 簡2、NHRb、NRb、、糖普或雜環。 r具體態樣中，該化合物抑制蛋白質激酶信 二或多個組份。在另—具體態樣中，該化合物為 在另一具體態樣中，該化合物為肽受質抑制劑。在 另一具體態樣中，該仆人铷艾七心 八如 口物不抑制ATP與蛋白質激酶的結 口。在另一具體態樣中，兮人 該化a物抑制Six家族之蛋白質 /放酶。例如，Src家族之|白皙私a 蛋白貝激酶為pp60c-src酪胺酸激酶。 在具體悲樣中，瘦由口 Hg .r 时南 、、工由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著富内噙 朴奸 ^ ’’、糟者腔内或膀胱内滴注、 居口Ρ、動脈内、病灶内、葬英 ^糟者计夏幫浦，或藉著施用在黏 、上，完成該化合物的投藥。在— 札„丄 你具體怨樣中，將該化合 物與在藥學上可接受之載一 ^ 起杈與。在另一具體態樣 处’在骨質疏鬆症開始之前先投與該化合物。在另一具體 樣中’在骨質疏鬆症開始之後投與該化合物。 在另一具體態樣中，心、 阳 2 R3 R4和r5中至少有一 们砥自鹵素、硼酸、羥基、膦 ^甘廿私 鱗®^、胺基續酸、脈、緩酸、 醯胺和經甲基膦酸。在另-具體態樣中，m 33 200817327 I和Rs中至少有一個是鹵素。在一具體態樣中，&、R2、 R；3、R4和中至少有一個是侧酸。在另一具體態樣中，I、 R2、Rs、I和&中至少有一個是羥基。在另一具體態樣中， R〗、I、I、I和Rs中至少有一個是醯胺。例如，醯胺基 團為鄰位三羰基醯胺。在一具體態樣中，r3為鹵素。例如， 反3為氟。在一具體態樣中，R3為經基。 在一具體態樣中，R0和R7中至少有一個是
Ri。 R11
。*RS為附接點，並為（CH2)x，其中X為〇、 1、2、3、4、5、6、7、8、9*10，CH2CHOH、CH(CH3)(R-異構體）或（：11((：113)(8-異構體）。尺9、尺1()、尺11、尺12和^3 分別是相同或不同的，並獨立地為H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)ORa、C(0)SRa、OH、ORa、〇C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Rc 、 NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)0Rb0Re、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(〇)〇RaORb、B(0H)2、 鹵素、p’、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和 分支、環狀或未分支的烷基，P’為so3h、oso3h、0Ρ03Η2、 〇ρ〇3Η2、Ο-低碳數（Cl、c2、c3、c4、c5 或 c6)烷基-K，、O-C(O)-低碳數（Ci、c2、C3、C4、c5 或 C6)烷基-L’、NH-低碳數（C!、 C2、C3、C4、C54 C6)烷基-M’或0-芳基-Q’，其中低碳數（Ci、 34 200817327 C2、c3、c4、c5或c6)烷基為直鏈或分支的烷基。K，為 C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、P〇3H2、0Ρ03Η2、NH2、 nhr22、nr22r23、so2r24、糖苷、低碳數 c】、c2、c3、c4、
0：5、（：6烷氧基或 n…。L’為芳基、OH、C(0)NH2、COOH so3h、oso3h、P〇3H2、opo3h2、nh2、nhr22、nr22r23、 S02R24、糖苷、低碳數Ci、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或
I
。M’為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、OS03H、 P03H2、OP03H2、NH2、NHR22、NR22R23、so2r24、糖苷、
低碳數c〗、c2、c3、c4、c5、〇：6烷氧基或··。卩，為芳 基、OH、c(o)nh2、COOH、S03H、〇S〇3H、P〇3H2、OP〇3H2、 NH2、nhr22、nr22r23、so2r24、糖苷、低碳數 Cl、C2、c3、
c4、c5、c6烧氧基或H 。r22、r23和R24獨立地為Ci、 C2、C3、c4、c5或c6烷基，或r22和r23與附接之氮原子 一起形成五員裱。Ra、Rb和Re是相同或不同的，並獨立地 為Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、分支、環狀或 未分支的院基；且其中任何的119、1^、1111、1112和1113是 經取代或未經取代的。 在一具體態樣中，Ρ，為 S03H、〇s〇3h、ΟΡ〇3Η2、 〇Ρ〇3Η2、〇-低碳數（Cl、C2、C3、C4、Cptc6)^*_K，、〇c(〇)_ 低碳數（C,、c2、c3、c4、c5 或 c6成基_L，、NH_低碳數（Ci、 C2、c3、C4、c5 或 C6)貌基七’或 〇 芳基 _Q，。K,為 s〇3H、 35 200817327 nhr22、NR22R23、糖苷或 2、0P03H2、NH2、NHR22、 為 S03H、〇s〇3H、P〇3H2、 、糖苷或雜環。在一具體 0S03H、P〇3H2、〇P〇3H2、nh2、 雜環。L’為 S03H、〇S〇3H、P〇3H nr22r23、糖苷或雜環；且其中M， opo3h2、nh2、nhr22、NR22R23 態樣中，R0和R?中至少有一個是
在其他的具體態樣中，該化
合物是
本發明一方面為式VI化合物在製造用以在個體中預防 或治療聽力喪失之藥劑上的用途。本發明另一方面包括在 個體中預防或治療聽力喪失的方法，包括投與式贝化合 物： °
尺3 r4
(式VI)，或其鹽、溶劑合物、 水合物或前藥u2、r3、r4、R5、Ra r7分別是相同 或不同的，並獨立地為H、C(〇)Ra、c(〇)NRaRb、C⑴）C)R 36 200817327 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)ORb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Re、NRaP(0)ORbRe、NRaP(0)ORbORe、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、P、鹵素、芳基、雜 芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和分支、環狀或未分支 的烷基。Ra、Rb和Rc是相同或不同的，並獨立地為Η、芳 基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和分支、環狀或未分支的 烷基；Ρ 為 S03H、0S03H、0Ρ03Η2、0Ρ03Η2、Ο-低碳數（Cj、 C2、C3、C4、0：5或 C6)烷基-K、O-C(O)-低碳數（Cl、c2、c3、 C4、C5 或 C6)烧基-L、碳數（C!、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-M或O-芳基-Q，其中低碳數（C:、C2、C3、C4、C5 或c6)烷基為直鏈或分支的烷基。K為C(0)NH2、COOH、 S03H、0S03H、Ρ03Η2、0Ρ03Η2、NH2、NHR19、NR19R20、 S02R21、糖苷、低碳數Cl、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或
。L 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、 P03H2、0P03H2、NH2、nhr19、nr19r20、so2r21、糖苷、 低碳數q、c2、c3、c4、c5、06烷氧基或
。M為芳 基、OH、C(0)NH2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、 NH2、NHR19、NR19R20、S02R21、糖苷、低碳數 Ci、c2、c3、
c4、C5、C6 烷氧基或 3 。Q 為芳基、OH、C(0)NH2、 37 200817327 COOH、so3h、oso3h、po3h2、0Ρ03Η2、NH2、NHR19、 nr19r20、so2r21、糖苷、低碳數 q、c2、C3、C4、C5、c6
匸5或C6烷基，或Rl9和R2G與附接之氮原子一起形成五員 環。父為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。尺1、112、尺3、 R4、r5、r6和r7中至少有一個是P。 在一具體態樣中，p 為 so3h、oso3h、opo3h2、opo3h2、 〇-低碳數（C〗、C2、c3、c4、c5 或 c6)烷基 _κ、O-C(O)-低 碳數（Ci、c2、C3、c4、c5 或 c6)烷基-L、NH-低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C54 C6)烷基-M 或 0-芳基-Q〇K 為 S03H、0S03H、 p〇3H2、〇p〇3h2、NH2、nhr19、nr19r2〇、糖苷或雜環。L 為 so3H、〇so3H、p〇3h2、〇p〇3H2、NH2、nhr19、nr19r20、 糖苷或雜環。M 為 so3h、oso3h、p〇3h2、〇p〇3h2、nh2、 NHR19、NR19R2G、糖苷或雜環。 在一具體態樣中，該化合物抑制蛋白質激酶信號路徑 的一或多個組份。在另一具體態樣中， 制劑。在一具體態樣中，該化合物為取 一具體態樣中，該化合物不抑 合。在另-具體態樣中，該化合 該化合物為異位抑 激酶。例如， 具體態樣中，該化合物抑制 Src家族夕疋a陆、A. 1 Src家族之蛋白質激酶為 體態樣中，經由口服、 在一具體態樣中， 肌肉内、腹腔内、藉著 局部（例如藉著措盥、:禽 、腔内、藉著鼻内滴注、藉著 藉著投與滴劑至耳朵 該化合物為肽受質抑制劑。在另 不抑制ATP與蛋白質激酶的結 該化合物抑制Src家族之蛋白質 &質激酶為pp6〇C-m酪胺酸激酶。 ^ 口服、非經腸、皮下、靜脈内、 丨滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 -耳朵内）、動脈内、病灶 38 200817327 著計量幫浦，或藉著施用在黏膜上，完成該化合物的投藥。 在一具體態樣中，將該化合物與引起聽力喪失之藥物混合 投藥。在另一具體態樣中，將該化合物與在藥學上可接受 之載劑一起投與。在另一具體態樣中，在開始喪失聽力之 前先投與該化合物。在另一具體態樣中，在開始喪失聽力 之後投與該化合物。 本發明一方面為式Μ化合物在製造用以在個體中預防 或治療骨質疏鬆症之藥劑上的用途。本發明另一方面包括 在個體中預防或治療骨質疏鬆症的方法，包括投與式Μ化 合物：
〜 （式Μ )，或其鹽、溶劑合
物、水合物或前藥。Ri、R2、R3、R4、R5、R6和R7分別是 相同或不同的，並獨立地為 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)ORb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)ORb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Rc > NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、 P、i素、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和 分支、環狀或未分支的烷基。Ra、Rb和Re是相同或不同的， 39 200817327 並獨立地為Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和分支、 壞狀或未分支的烷基。Ρ為So#、〇Ρ〇3ϋ2、0Ρ03：Η2、 〇_ 低碳數（Ci、C2、C3、c4、c5 或 c6)烷 基-K、O-C(O)-低 碳數（Ci、C2、C3、C4、c5 或 c6)烷基 _L、NH-低碳數（Ci、 C2、c3、c4、c5或c6)烷基，或小芳基_Q，其中低碳數（Ci、
C2、C3、C4、C5或c0)烷基為直鏈或分支的烷基。κ為 C(〇)NH2、COOH、so3h、os〇3H、ρ〇3η2、〇ρ〇3η2、簡2、 NHR19、NR19R20、S02R21、糖:g：、低碳數 Ci、c2、c3、q、 C5、C6 烧氧基或 。[為芳基、〇H、C(0)NH2、COOH、
oso3h ^ po3h2 > opo3h2 > nh2 > nhr19 > nr19r20 > 、糖苷、低碳數Ci、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或 。M 為芳基、OH、C(〇)NH2、COOH、S03H、0803ϋ、 po3h2、opo3h2、NH2、nhr19、nr19r20、so2r21、糖苷、 K叉 低碳數c^、c2、c3、c4、c5、C6^氧基或 H 〇。Q為芳 基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、P03H2、〇P〇3H2、 nh2、nhr19、nr19r20、so2r21、 C4、C5、C6烧氧基或
糠苷、低碳數Ci、c2、（:3 19、R2Q和R21獨立地為Cj C2、C3、C4、C5或C6烧基，或R19和R2Q與附接之氮原子 一起形成五員環。X為1、2、3、4、5、6、7、8、9或1〇。 在一具體態樣中，P 為 so3h、oso3h、〇ρ〇3Η2、〇ρ〇3ΪΪ2、 Ο-低碳數（C〗、c2、c3、c4、c5 或 C6)烷基-κ、o-c(o)·低 200817327 反數（C】c2 (：3、（：4、（：5或 c6)貌基_L、NH_低碳數（Cl、 c2、C3、c4、c5 或 c6)燒基-M 或 〇 芳基_Q。K 為 s 〇s〇3H、P〇3H2、OP〇3H2、NH2、NHRi9、NRi9R2Qi^ 雜環。L 為 S〇3H、OS〇3H、p〇3H2、〇p〇3H2、NH2、丽心、 NR19R2G、料或雜環。^ s〇3H、〇s〇3H p〇办咖3H、 顺2、NHRb、NRbRm、糖苷或雜環。 一在-具體態樣中’該化合物抑制蛋白質激酶信號路徑 的-或多個組份。在另—具體態樣中，該化合物為異位抑 制劑。在另-具體態樣中，該化合物為肽受質抑制劑。在 :-具體態樣中，該化合物不抑制Ατρ與蛋白質激酶的結 5。在另-具體態樣中’該化合物抑㈣Src家族之蛋白質 激酶。例如，SrC家族之蛋白質激酶為PP60…路胺酸激酶。 在骨質^私”正闹％炙丽无投與該化合物 中，在骨質疏鬆症開始之後投與該化合物 本毛明一方面為式VI化合物在製造用以在個體中預防 或治療增殖性病症之藥劑上的用i。本發明另—方面包括 在们體中預防或治療增殖性病症的方法，包括投與式谓化 合物： 在-具體態樣中’經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 =部、=脈内、病灶内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏 h上’完成該化合物的投藥。在一具體態樣中，將該化合 物與在藥學上可接受之載劑一起投與。在一具體態樣中， 具體態樣 41 200817327
^ (式Μ )，或其鹽、溶劑
合物、水合物或前藥。R!、R2、R3、R4、R5、R6和R7分別 是相同或不同的，並獨立地為H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)ORa、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)ORbORe 、 NRaP(0)0RbRc > NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、 P、鹵素、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和 分支、環狀或未分支的烧基。Ra、Rb和是相同或不同的， 並獨立地為Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和分支、 環狀或未分支的烷基。Ρ為so3h、oso3h、opo3h2、ορο3η2、 Ο-低碳數（Ci、c2、c3、c4、c5 或 c6)烷基-κ、o-c(o)-低 碳數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基 _L、NH-低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C5或C6)烷基-M或O-芳基-Q，其中低碳數、 C2、C3、C4、C5或C6)烷基為直鏈或分支的烷基。K為 C(0)NH2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、OP03H2、NH2、 NHR19、NR19R20、S02R21、糖苷、低碳數 c!、c2、c3、c4、 c5、06烷氧基或
。L 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、 42 200817327 so3h、oso3h、p〇3h2、opo3h2、nh2、NHR19、NR19r、 so。，、糖皆、低碳數Ci、c2、c3、c4、c5、c6烷氣基0或 H 。M 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、SC^H、〇s〇 H、 p〇3H2、〇P〇3H2、nh2、nhr19、NR19R20、s〇2R2i、糖芽、 低碳數Ci、c2、C3、c4、c5、06烷氧基或"為芳 基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、P〇3H2、〇P〇3H、 NH2、NHR19、NR19R2〇、S02R21、糖苷、低碳數 c c、r \ 2 3、 CVCVCA氧基或W 〇 〇Ri9、R2G和R21獨立地為^、 c2、c3、C4、C5或C6烷基，或r19和r2。與附接之氮原子 一起形成五員環。乂為丨、2、3、4、5、6、7、8、9或1〇。 在-具體態m中，該化合物抑制蛋白質激酶信號路巧 的一或多個組份。在另具體態樣中，該化合物為異位ς 制劑。在另一具體態樣中，該化合物為肽受質抑制劑。在 一具體態樣中，該化合物不抑制Ατρ與蛋白質激酶的結 合。在另一具體態樣中，該化合物抑希4 Src家族之蛋白質 激酶。例如’Src家族之蛋白質激酶為pp60…赂胺酸激酶： 在一具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内 '腹腔内、藉著鼻內该i、、t — # 精#T内漓左、稭著腔内或膀胱内滴注、 局部、動脈内、病灶内、获荃4曰Ρ 肢…、 内猎者计篁幫浦’或藉著施用在黏 、上，70成该化合物的投藥。在一 物與在藥學上可接受之載劑—起二體祕中，將該化合 中，/· Μ # Μ· Θ 之杈/、。在另一具體態樣 在曰殖性病症開始之前先投與該化合物。在另一具體 43 200817327 態樣中’在增殖性病症開始之後投與該化合物。 本發明一方面為本發明之化合 P VI ^ ^ ^ 例如式 VII 或 Μ，在 η用以預防或治療眼科疾病之藥劑上的用途 一方面包括在個體中預防或治療眼” " M r ^ . ^ ，、科疾病（例如黃斑變性、 ’ =了斑水腫)的方法，包括投與式处或硼之化合^ 七夕加^ ^ ^ 中4贫曰貝激_信號路徑的一 在^另一具體態樣中，該化合物為異位抑制劑。 在^具體態樣中，該化合物為肽受質抑制劑。在另-且 體恶樣中，該化合物不抑制Ατρ "、贫曰貝激酶的結合。在 另-具體態樣中，該化合物抑制Src家族之蛋白質激酶。 在-具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 局部二如藉著以眼藥水或乳霜投與眼睛）、動脈内、病灶 内、，者計量幫浦，或藉著施用在黏膜上，完成該化合物 的投藥。在一具體悲樣中，將該化合物與在藥學上可接受 之載劑一起投與。在另— 一 隹为八體悲樣中，在眼科疾病開始之 前先投與該化合物。在另一具體態樣中，在眼科疾病開始 之後投與該化合物。 本發明一方面為本發明之化合物，例如式珊或观，在 製造用以在個體中預防或治療糖尿病之藥劑上的用途。本 發明另-方面包括在個體中預防或治療糖尿病的方法，包 括投與式W或Μ之化合物。在一具體態樣中，該化合物抑 制蛋白質激酶信號路徑的一或多個組份。在另一具體態樣 中，该化合物為異位抑制劑。在另一具體態樣令，該化合 44 200817327 物為肽受質抑制劑。在另一具體態樣中，該化合物不抑制 :ΤΡ與蛋白質激酶的結合。在另一具體態樣中，該化合物 抑制Src家族之蛋白質激酶。 在一具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 2部、動脈内、病灶内、藉著計量幫冑，或藉著施用在點 、上，完成該化合物的投藥。在一具體態樣中，將該化合 物與在藥學上可接受之載劑一起投與。在另一具體態樣 2 ’在糖尿病開始之前先投與該化合物。在另一具體態樣 ，在糖尿病開始之後投與該化合物。 劍本毛明一方面為本發明之化合物，例如式W或Μ，在 日衣&用以在個體中預防或治療肥胖之藥劑上的用途。本發 明另-方面包括在個體中預防或；台療肥胖的方&，包括投 與心或观之化合物。在一具體態樣中，該化合物抑制蛋 ，質激酶信號路徑的—或多個組份。在另_具體態樣中， 忒化合物為異位抑制劑。在另一具體態樣中，該化合物為 肽党質抑制劑。在另一具體態樣中，該化合物不抑制A” 與蛋一白質激酶的結合。在另一具體態樣中，該化合物抑制
Src家族之蛋白質激酶。 在—具體態樣中，經由口 m、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 局部、動脈内、病灶内、藉著計量幫冑，或藉著施用在黏 膜上，完成該化合物的投藥。在一具體態樣中，將該化人 物與在藥學上可接受之載劑一起投與。在另一具體態樣 45 200817327 .中，在肥胖開始之前先投與該化合物。在另一具體態樣中， 在肥胖開始之後投與該化合物。 本發明一方面為本發明之化合物，例如式狐或洄在 製造用以在個體中預防或治療中風之藥劑上的用途。本發 明另-方面包括在個體巾預防或治療中風的方法，包括^ 與式w或观之化合物。在一具體態樣中，該化合物抑心 白質激酶信號路徑的一或多個組份。在另一具體態樣 r 純合物為異位抑制劑。在另—具體態樣中，該化合物為
肽受質抑制劑。在另一具體態樣中’該化合物不抑制AW 與蛋白質激酶的結合。在另一具體態樣中，該化合物抑制 Src家族之蛋白質激酶。 在一具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 局+部、：脈内、病灶内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏 膜上，凡成該化合物的投藥。在一具體態樣中，將該化合 I 物與在藥學上可接受之載劑一起投與。在另一具體態樣 中，在中風發生之前先投與該化合物。在另一具體態樣中， 在中風發生之後投與該化合物。 本毛明一方面為本發明之化合物，例如式VII或观，在 製造用以預防或治療動脈粥樣硬化之藥劑上的用途。本發 另方面包括在個體令預防或治療動脈粥樣硬化的方 2 ’包括投與式W或谓之化合物。在一具體態樣中，該化 合物抑制蛋白質激酶信號路徑的一或多個組份。在另一具 -〜樣中，忒化合物為異位抑制劑。在另一具體態樣中， 46 200817327 遠化合物為肽受質抑制劑。在另一具體態樣中，該化合物 不抑制ATP與蛋白質激酶的結合。在另一具體態樣中，該 化合物抑制Src家族之蛋白質激酶。 在一具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 局部、動脈内、病灶内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏 膑上，完成該化合物的投藥。在—具體態樣中，將該化合 :與在藥學上可接受之載劑一起投與。在另一具體態樣 中i在動脈粥樣硬化開始之前先投與該化合物。在另一具 體悲樣中，在動脈粥樣硬化開始之後投與該化合物。 制本發明一方面為本發明之化合物，例如式W或观，在 :造用以在個體中調節免疫系統活性之藥劑上的用途。本 务明另-方面包括在個體中調節免疫系統 :投與=或獲之化合物。在-具體態樣中，該化合物： 中』貝激酶仏说路徑的一或多個組份。在另一具體態樣 五該化合物為異位抑制齊卜在另—具體態樣中，該化合 受質抑制劑。在另一具體態樣中，該化合物不抑制 广質激酶的結合。在另一具體態樣中，該化合物 抑制Src家族之蛋白質激酶。 肌内Γ具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肉二腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 膜1，内、病灶内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏
、 70成該化合物的投筚。在一呈鰣#接A 物與在藥學上可接二“具體祕中，將該化合 予丄j接又之載劑一起投與。 47 200817327 本發明-方面為本發明之化合物，例如式观或观，在 製造用以在個體中預防或治療慢性神經病性疼痛之藥劑上 的用途。本發明另一方面包括在個體中預防或治療慢性神 經病性疼痛的方法，包括投與式观或观之化合物。在一具 體態樣中，該化合物抑制蛋白質激酶信號路徑的一或多個 組份。在另一具體態樣中，該化合物為異位抑制劑。在另 一具體態樣中’該化合物為肽受質抑制劑。在另—且體離 樣':該化合物不抑制ATP與蛋白質激酶的結合。在另二 具體態樣中’該化合物抑制Sre家族之蛋白質激酶。 在-具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 :部、：脈内、病灶内、藉著計量幫冑，或藉著施用在黏 膜上Ί亥化合物的投藥。在__具體態樣中，將該化合 物與在藥學上可接受之載劑—起投與。在―具體態樣中， 在忮性神經病性疼痛開始之前先投與該化合物。在另一具 -〜樣中在恢性神經病性疼痛開始之後投與該化合物。 ♦本發明一方面為本發明之化合物，例如式νπ或观，在 製1用以在個體中預防或㈣Β型肝炎之藥劑上的用途。 本土月另一方面包括在個體中預防或治療Β型肝炎的方 法包括技與式狐或Μ之化合物。在一具體態樣中，該化 δ物抑制蛋白質激酶信號路徑的一或多個組份。在另一具 體心樣中，该化合物為異位抑制劑。在另一具體態樣中， 該化合物為肽受質抑制劑。在另一具體態樣中，該化合物 不抑制ΑΤΡ與蛋白質激酶的結合。在另一具體態樣中，該 48 200817327 化合物抑制Src家族之蛋白質激酶。
在一具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 :部、動脈内、病灶内、藉著計量幫肖，或藉著施用在黏 膜上’：成該化合物的投藥。在一具體態樣中，將該化合 物/、在藥予上可接文之载劑一起投與。在一具體態樣中， 在B型肝炎開始之前先投與該化合物。在另—具體態樣中， 在B型肝炎開始之後投與該化合物。 【實施方式】 發明之詳細說明 為激酶β及各式各樣正常細胞信號轉導路徑（例如細 長刀化#活、附著、遷移等等）的調節，故認為激 酶在各種疾病和病症中粉演某個角色。⑽匕，激酶信號級 聯的調節可能是治療或預防這類疾病和病症的重要方法。 這類疾病和病症包括’例如癌症、骨質疏鬆症、 症、免疫系統功能障礙、第Η糖尿病、肥胖和移植排斥。 本發明之化合物可用來調節激酶信號級聯的组份。本 ㈣造用以調節激酶信號級聯之組份的 樂劑。有些化合物可用來 μ 份。片語，，調節蛋白質激：二上， 能改變…質激酶信Si:到影響，而使得細胞之功 接涉及激酶信號路徑的蛋：！之組份，包括任何直接或間 游目標。 ❹貝’包括第二信使和上游與下 49 200817327 已知許多蛋白質激酶和構酸酶，並為發展治療之目 標。參見，例如 Hidaka 和 Kobayashi，Annu. Rev. Pharmacol· Toxicol，1992, 32:377-397 ; Davies 等人，Biochem. J·，2000, 35 1:95-105，分別以引用方式納入本文中。 將一激酶家族，蛋白質酪胺酸激酶分成兩大家族：受 體酪胺酸激酶，或RTKs(例如胰島素受體激酶（IRK)、上皮 生長因子受體（EGFR)、鹼性纖維母細胞生長因子受體 (FGFR)、血小板-衍生之生長因子受體（PDGFR)、血管内皮 生長因子受體（VEGFR-2或Flkl/KDR)和神經生長因子受體 (NGFR))，以及非受體酪胺酸激酶，或NRTKs(例如，Src 家族（Src、Fyn、Yes、Blk、Yrk、Fgr、Hck、Lck 和 Lyn)、 Fak、Jak、Abl 和 Zap70) 〇 參見，例如 Parang 和 Sun，Expert Opin. Ther. Patents，2005，15:1183-1207，以弓I 用方式納入 本文中。 因為Src激酶在各種癌症中的角色，使這些激酶成為 許多關於發展Src抑制劑當作癌症治療之研究，包括高度 轉移之癌細胞生長的主題。尋找Src抑制劑作為各種癌症 之治療劑，包括例如結腸癌、癌前結腸病灶、卵巢癌、乳 癌、上皮癌、食道癌、非-小細胞肺癌、胰臟癌及其他。參 見，例如 Frame, Biochim. Biophys. Acta，2002，1602:1 14-130，以及 Parang 和 Sun，Expert Opin. Ther. Patents，2005, 15:1183-1207 。 其他激酶的抑制作用，亦可用來治療並調節其他類型 的疾病和病症。例如，可藉著投與VEGF受體酿胺酸激酶 50 200817327 抑制d抑制或預防各種眼睛疾病。酪胺酸磷酸酶ΡΤΡ_ 1B 及:或肝糖麟解酶的抑制劑，可提供對第n型糖尿病或肥胖 々口療p561ck的抑制劑可用來治療免疫系統病症。其他 目枯包括HIV逆轉錄酶、前列凝素合成酶、EGFRTx、p55 等等。 ，明之化合物可以是Src信號抑制劑，其結合在Src 肽文貝位置。本發明之化合物可用來製造包括結合在Src 肽受質中之Src信號抑制劑的藥劑。已經在c_Src(527F， 在組成上有活性並轉化的）轉化ΝΙΗ3Τ3細胞，以及在人類 結腸癌細胞（HT29)中，研究本發明之各種化合物的活性。 例如，在這些細胞株中，顯示KX2-391以劑量-依賴性之 方式降低已知的Src蛋白質受質之磷酸化程度，並與生長 抑制影響有良好的相關性。因此’在某些具體態樣中，本 發明之化合物可直接抑制Src，並可藉著結合在肽結合位 置而這樣做（與結合在異位處相反）。 已經進行分子模擬實驗，其顯示本發明之化合物吻合 杈型Src受質位置（參見，例如美國專利第7,005,445號和 7,070,936號）。藉著簡單地使用出現在分子上不同組的側 鏈’口並/或修改支架本身，亦使用模擬改组激酶抑制劑 支架’以便瞄準其他的激酶。 不希望與理論結合，咸相信某些激酶（例如Src)在細胞 外的構形，相對於細胞内的構形是明顯不同的，因為在細 胞内，許多激酶被埋入多蛋白信號複合體中。因此，因為 在經分離之激酶中並未充分形成肽受質結合位置（如藉著 51 200817327
Src χ_射線結構所示），咸相信肽受質結合抑制劑對抗經分 離之激酶的/¾•性會很弱。在經分離之激酶測定中與該位置 結合，需要抑制劑來捕捉在經分離之激酶測$中，以與出 現在細胞内相同之構形存在的極少百分比之總蛋白質。這 需要過量很多的抑制劑’從測定中之催化循環中排出大量 的酵素，以便成為可檢測的。 然而，以細胞為基礎的測定，不需要過量很多的抑制 劑’因為預期會形成肽結合位置。在以細胞為基礎的& 測定中，SH2&SH3功能部位結合蛋白業已變換—構形， 以致於完全形成肽受質結合位置。因&，低濃度的抑制劑 便可從催化循環中移出酵素，因為所有的酵素都是緊密結 合的構形。 大多數已知的激酶抑制劑是ATP競爭性的，並在經分 離之激酶測定小組中，顯示出不良的選擇性。然而，認為 本發明的許多化合物是肽受質結合抑制劑。因此，對抗經 分離之酵素，如Src的傳統高輸貫量之化合物篩選，結果 會無法發現本發明之化合物。 有相當多的近期文獻支持以瞄準pp6〇c_src(Src)作為廣 泛使用的癌症治療方法，不會產生嚴重的毒性。例如，展 現出提高EGF受體ρτκ信號，或過度表現相關Her_2/neu 文體的腫瘤，具有在組成上活化的Src，並提高腫瘤的侵 入。在這些細胞中抑制Src，引起生長停止、誘發細胞凋 亡，並逆轉轉化的表現型（Karni等人（1999) Oncogene 18(33): 4654-4662)。已知異常升高的Src活性，允許轉化細胞以 52 200817327 _、土依賴性的方式生長。這似乎是由細胞外基質以與有 、糸刀衣仏就對等的方式發出信號，在FAK/Src路徑中升高 ' ’並藉此阻斷正常已經激活之細胞凋亡機制的事 弓 | 么士 貝 。〜果’在腫瘤細胞中的FAK/Src抑制作用可能引 之、、、田胞/周亡’因為當脫離細胞外基質時，將會誘使細胞凋 為制正$受成激活的（Hisano等人，？1*〇〇.人111111.]^1661:.八111·
Assoc· Cancer Res· 38:A1925(1997))。此外，注意到在 Src 抑制時降低了 VEGF mRNA的表現，且衍生自這些Src_抑 制細胞株的腫瘤亦顯示降低的血管新生發展（EUis等人， Journal of Biological Chemistry 273(2):1052-1057 (1998)) 〇 例如’在老鼠中剔除Src基因僅導致一種缺陷，即破 月細胞無法形成起皺的邊緣，結果不能吸收骨質。然而， 在這些老鼠中’藉著插入激酶缺陷Src基因，解救了破骨 細胞的骨吸收功能（Schwartzberg等人，（1997) Genes &
Development 1 1:2835-2844)。這暗示可在活體内抑制src 激酶活性，但不會誘發唯一已知的的毒性，因為Src蛋白 質的存在，似乎足以在破骨細胞必要的信號複合體中恢復 並激活其他的PTKs(其對於維持破骨細胞功能是必要的）。 已經k出Src是癌症治療的”萬能（universai)，，目標，因 為已經發現它在越來越多的人類腫瘤中是過度活化的 (Levitzki, Current Opinion in Cell Biology, 8, 239- 244(1996)，Levitzki，Anti-Cancer Drug Design，11，175_i82 (1996))。Six抑制作用對癌症治療的可能利益似乎是四倍： 由自體分泌（autocrine)生長因子環效應引起之不受控制之 53 200817327 、’田胞生長的抑制，因為脫離細胞基質而誘發細胞凋亡的轉 移抑制，經由降低VEGF含量而抑制腫瘤血管新生，低毒 性。 已經報告了前列腺癌細胞過度表現細胞黏附蛋白和 Pl3CaS ’並且是過度磷酸化的（丁ambiay等人，Int. J. Cancer， ，164 171，1996)，並因此可能是Src抑制劑的主要目標。 如在本文中描述的，本發明之化合物可用來在個體中 防止或預防聽力喪失。本發明之化合物可用來製造用以在 们體中防止或預防聽力喪失的藥劑。& 了防止聽力喪失， 可在暴露於噪音下或接觸引起聽力喪失的藥物之前，先投 與該化合物。這類藥物可包括化療藥物（例如以翻為基礎， 目苗準毛細胞的藥物）和胺基糖芽抗生素。本發明之化合物可 提供與某些癌症藥物的協同作用。例如可在原發人類腫瘤 組織測定中篩選有希望的抑制劑，特別是找出與其他已知 抗-癌藥物的協同作用。此外，蛋白質激酶抑制劑可降低某 些癌症藥物的毒性（例如以鉬為基礎的藥物’其對耳蜗和腎 臟有毒性），藉此容許增加劑量。 或者’本發明之化合物可用來在個體中治療聽力喪 失。在該具體態樣中’將化合物投與隨後開始喪失聽力的 個體’以便降低轉；< … 失的程度。本發明之化合物可能涉 及δ周卽激_：級聯，例如激絡& 例如激_抑制劑、非-ATP競爭性抑制劑、
酪胺酸激酶抑制劑、Src缸& w A 抑制劑或焦點黏連激酶（F Ακ)調節 j雖义不希主與理論結合，但相信激酶抑制劑的投藥防 止了耳蜗毛細胞的細胞洞亡，藉此防止聽力喪失。在二具 54 200817327 體態樣中，本發明之#人 yg, m u μ 〇的投藥是投與患有聽力喪失的 癸明^^ ν的聽力喪失。在另一具體態樣中，本 /Λ- + . ^ 〜μ有I力喪失的個體，以便恢 復喪失的聽力。特定而古， # σ 在暴路於噪音下之後，在耳蜗 毛細胞之間的緊密細胞接 设σ慝以及細胞_細胞外基質交互 作用均將被撕裂並變得緊。、士 % 家張延些緊岔細胞接合處的緊 張’經由複雜的信號路徑使细 1文、、、田胞中開始細胞凋亡，其中酪 胺酸激酶的作用為分$ „ 4關’/、焦點黏連激酶產生交互作 用，將細胞-基質瓦觫士&絲、耸 — 貝X解的4唬轉導至核。咸相信激酶抑制劑 的投藥將防止在該級聯中開始細胞凋亡。 在暴露在噪音下之耳蜗中確認細胞洞亡，已經產生許 夕預防本曰引起之聽力喪失（NIHL)的新穎可能性（Hu等人， 2000, Acta. 0tolaryngol·，12〇, 19 24)。例如，可藉著投盥 抗氧化劑藥物至耳圓窗，保護耳朵免KNIHL(mght等人； 2〇〇3, Hear. Res·，179, 2K32 ; Hu 等人；^ 113, 198 206)。明確地說，已經藉著在南美栗鼠中投與叩八_核 准之抗氧化劑化合物（N-L-乙醯半胱胺酸（L_NAC)*水揚酸 鹽），降低了 NmL(K〇Pke 等人；2_，HearRes，149, 138_ 146)。此外，Harris等人最近描述利用Src_pTK抑制劑來 預防 MlHL(Harris 等人；2005, Hear. Res·，208, 14-25)。因 此’假設投與可調節激酶活性的本發明化合物，可用來治 療聽力喪失。 在細胞附著或細胞壓力上的改變，可激活各種信號， 經由整合素的激活作用，並經由PTKs的磷酸化作用，包 55 200817327 括酪胺酸激酶的Six家族。Src交互作用已經與信號路徑連 接’其修飾細胞骨架，並激活各種蛋白質激酶級聯，其調 即細胞存活和基因轉錄（在Giancotti和Ru〇slahti; 1999, Science，285, 1028-1032中回顧）。事實上，最近的結果已 經指出外部的毛細胞（OHC)，其在強烈的噪音暴露之後已 經脫離細胞基底，經歷細胞凋亡的細胞死亡。明確地說’ 認為Src PTK信號級聯，在耳蝸的感覺細胞中涉及代謝-和 機械上-兩者誘導之細胞凋亡的開始。在近期的研究中，Src 抑制劑對4小時4千赫茲，在106dB之八音階頻帶噪音提 供了保護，表示在噪音暴露之後可能在外部毛細胞中激活 了 SrC-PTKS(HarriS 等人；2005, Hear. Res.，2〇8, 14 25)。 因此’調f Src#性的本發明化合物，可用來治療聽力喪 失。 本發明係關於-種在個體中預防或治療骨質疏鬆症的 方法。該方法涉及對欲預防或治療骨質疏鬆症的個體投與 有效量的本發明之化合物。為了預防骨質疏鬆症，可在發 展出骨質疏鬆症之前先投與該化合物。或者，可使用該化 合物來治療個體之骨質疏鬆症。在該具體態樣中，將該化 合物投與隨後開始發生骨質疏鬆症的個體，降低骨質疏鬆 症的程度1使用本發明之化合物，製造用以在個體中預 防或治療骨質疏鬆症的藥劑。 本發明之化合物可以是例如非_Ατρ競爭性抑制劑。本 發明之化合物可調節激酶信號級聯，視所選擇的特定側鏈 和支架修飾而定。本發明之化合物可以是激酶抑制劑。例 56 200817327 如，該化合物可以是蛋白質酪胺酸激酶（PTK)抑制劑。富 含脯胺酸的酪胺酸激酶（Ρ ΥΚ2 ;亦稱為細胞黏連激酶泠； 相關的黏連焦點酪胺酸激酶或鈣-依賴性酪胺酸激酶）和焦 點黏連激酶（FAK)是非受體蛋白質-酪胺酸激酶之不同家族 的成員，其受到各種細胞外刺激的調節（Avr ah am等人；2000, Cell Signal·，12，123-133 ; Schlaepfer 等人；1999，Prog. Biophys· Mol· Biol·，71, 43 5-478)。本發明之化合物可以是 Src抑制劑。已經顯示Src缺陷與老鼠的骨質疏鬆症有關， 因為喪失破骨細胞功能（Soriano等人；1991，Cell，64，693-7〇2)。或者，本發明之化合物能調節介白素_丨受體相關激 酶M(IRAK-M)的表現。缺少lRAK-M的老鼠發展出嚴重的 骨質疏鬆症，其與破骨細胞的加速分化，增加破骨細胞的 半衰期及其激活作用有關（H〇ngmei等人；2〇〇5, Exp. 201， 1169-1177)。 多核的破骨細胞起源自單核吞噬細胞的融合，並經由 骨吸收在骨發育和改造上扮演主要的角色。破骨細胞是多 核的，分化末期的細胞，其降解無機化基質。在正常骨組 織中’在藉著成骨細胞的骨形成和藉著破骨細胞的骨吸收 ，間維持平衡。當該動態且高度調節之過程的平衡瓦解 日才，骨吸收可能超過骨形成，結果導 骨细月貝冰失0因為破 月、、，田胞為月發育和改造所必要的， 捭加脾道從a 牡數里及/或活性上的 限性骨、、☆失(例1又化月流失（例如疏鬆症）和其他與局 破⑽風濕性關節炎、牙周病）有關的疾病。 和成骨細胞兩者均指揮大批涉及蛋白質激酶 57 200817327
的細胞信號路徑。藉著附著在骨骼上、細胞骨架的重排、 封閉帶的形成和極化皺摺膜的形成，開始破骨細胞的活 化。咸相信蛋白質-酪胺酸激酶2(ΡΥΚ2)參與從細胞表面將 信號轉移至細胞骨架，因為它是酪胺酸磷酸化的，並在破 骨細胞中藉著附著-開始的信號激活（Duong等人；1998 J
Clin· Invest·，102，881-892)。最近的證據已經指出 ργκ2 蛋白質含量的減少，導致在活體外抑制破骨細胞的形成和 骨吸收（Duong 等人；2001，J. Bio· Chem.，276, 7484-7492)。 因此，PYK2或其他蛋白質酿胺酸激酶的抑制，可藉著減 少破骨細胞形成和骨吸收，而降低骨質疏鬆症的程度。因 此不希望與理論結合，假没投與會調節激酶（例如ρτκ) 活性的本發明之化合物，並因此導致破骨細胞形成及/或骨 吸收的抑制，藉此治療骨質疏鬆症。
Src酪胺酸激酶因其為有前途之骨骼疾病的治療目標 而引人/主目，並藉著剔除§rc基因的老鼠研究和在活體外 的細胞實驗而得到證實，暗示Src在破骨細胞（正面）和成 骨細胞（負面）兩者中的調節角色。在破骨細胞中，藉著 調解各種信號轉導路徑，尤其是在細胞激動素和整合素信 號中，在運動性、極化、存活、激活（起皺邊緣的形成）和 黏著中扮演關鍵性的角色（parang和Sun; 2〇〇5, Exp^t
Ther· Patents，15, 1183_1207)。此外，在老鼠中㈣基因的 猫準失敗導致骨石化症，—種特徵為減少骨吸收的病症， 在其他組織或細胞中沒有顯示任何明顯的形態學或功能異 常（Soriano 等人；1991，CeU，64, 693_7〇2)。骨石化症表現 58 200817327 型src·/-的老鼠是細胞_自主的，並起因於成熟破骨細胞之 缺fe，其正g表現咼量的Src蛋白質（Horne等人；1991，Cell， 119，1003-1013)。藉著限制Src酪胺酸激酶的效力，其誘 發破骨細胞活性，並抑制成骨細胞，認為Src抑制劑減少 了骨的毀壞並激勵骨形成。因為破骨細胞正常表現高量的 Src，故Src激酶活性的抑制可用來治療骨質疏鬆症 (Missbach 等人；1999, Bone，24，437-449)。因此，本發明 之調節Src活性的PTK抑制劑，可用來治療骨質疏鬆症。 如同在本文中描述的，本發明之化合物可用來在個體 中防止或預防肥胖。為了防止肥胖，可在個體發展出肥胖 之河先投與該化合物。或者，可使用該化合物來治療個體 的肥胖。本發明之化合物可能涉及調節激酶信號級聯，例 如激酶抑制劑、非-ATP競爭性抑制劑、酪胺酸激酶抑制劑、 蛋白質酿胺酸磷酸酶抑制劑或蛋白質-酪胺酸磷酸酶1B抑 制劑。本發明之化合物可用來製造在個體中防止或預防肥 胖的藥劑。 肥胖與糖尿病’以及在胰島素反應性組織，如骨絡肌、 肝臟和白脂肪組織中增加胰島素抵抗力有關（Klaman等人； Mol· Cell· Biol·，20, 5479-5489)。胰島素在血糖穩態、 脂質代謝和能量平衡的調節中扮演重要的角色。藉著胰島 素與胰島素受體（IR)，受體酪胺酸激酶的結合，開始胰島 素的信號發送。胰島素結合引起磷酸化事件的級聯，從在 多個路胺醯基殘基上IR的自我磷酸化開始。自我磷酸化提 馬了 IR激酶活性，並誘發下游的信號事件。蛋白質酪胺酸 59 200817327 /放酶的，激作用，以及蛋白質㈣酸魏酶的抑制效果， 、一::疋了胰島素的作肖。適當地發送胰島素信號，將血 2甸糖，辰度的大幅變動減至最少，並確保將葡萄糖適當 Ί、、、田胞。因為胰島素刺激導致多個酪胺醯基磷酸化 2件，提向一或多個蛋白質-酪胺酸磷酸酶（PTPs)的活性可 月匕^致胰島素抵抗力，其可能導致肥胖。確f，已經在數 個騰島素-抵抗性狀態，包括肥胖中報告增加的PTP活性 (Ahmad 等人，1997, Metabolism，46，1 140-1 145)。因此，不 希望與理論結合，投與調節激酶（ρτρ)活性的本發明之化合 物’藉此治療個體之肥胖。 胰島素信號始於經由酪胺酸磷酸化的IR激活作用，並 在藉由葡萄糖運載蛋白GLUT4將葡萄糖攝取至細胞内時 達到最高（Saltiel 和 Kahn; 2001，Nature，414, 799-806)。然 後必須使激活的IR失活，並回到基礎狀態，咸相信該過程 涉及蛋白質-酪胺酸磷酸酶_1B(PTp]B)(Ahmad等人；1997, J· Biol· Chem·，2 70，20503-20508)。在老鼠中編碼 ptp]b 基因的瓦解，結果產生對胰島素的敏感性，並增加對飲食_ 引起之肥胖的抵抗力（Elchebly等人；1999，Science，283, 1544-1548 ; Klaman 等人；2000, Mol. Cell. Biol·，20, 5479- 5489)。在PTP-1B缺陷的老鼠中減少肥胖是因為在脂肪細 胞質量上的明顯減少，但沒有脂肪細胞數目的降低（Klaman 等人；2000，Mol_ Cell· Biol” 20，5479-5489)。此外，在 P 丁P-1B缺陷老鼠中的瘦，伴隨有增加的基礎代謝率和總能 量支出，但沒有解偶聯蛋白質mRNA表現的明顯改變。 60 200817327 PTP-1B基因的瓦解，證實改變ρτρ_ΐΒ的活性可在活體内 调即胰島素信號，以及飲食-誘導的肥胖。因此，不希望與 理論結合，投與調節胰島素信號（例如ΡΤΡ-1Β活性）的本發 明之化合物，可用來治療個體之肥胖。 如同在本文中描述的，本發明之化合物可用來在個體 中防止或預防糖尿病。為了預防糖尿病，可在個體發展出 糖尿病之刚先投與該化合物。或者，可使用該化合物來治 療個體之糖尿病。本發明之化合物可能涉及調節激酶信號 、、及恥’例如激酶抑制劑、非_Ατρ競爭性抑制劑、酪胺酸激 酶抑制劑、磷酸酶和在染色體10上的張力同系物(ΡΤΕΝ) Ρ制d或3有序列同系物2的肌醇5，-麟酸酶2(SHIP2) 抑制劑。本發明之化合物可用來製造用以在個體中防止或 預防糖尿病的藥劑。 旦第2餘尿病（丁2_是能量代謝調節障礙的病症。能 s m t要疋由激素胰島素’—種有效的合成代謝劑控 制，、促進蛋自質、石炭水化合物和脂質的合成和储藏，並 ^制，、刀解及釋放回循環内。藉著與其酪胺酸激酶受體結 合而開始胰島素的作用，結果產生自我磷酸化並增加激酶 的催化活性（Patti 等人；1998，J Clin physi〇1 L 9’ 89-109)。酪胺酸磷酸化引起胰島素受體受質 (IRS)蛋自f與磷㈣肌醇3_激酶⑽κ)之邮調節次單元 產生交互作用，導致酵素的激活作用，並使其瞄準特定的 亞=胞位置’視細胞類型而定。酵素產生脂質產物構脂醯 肌醇_3’4’5_三鱗酸（mp，4,5%)，其調節許多蛋白質的 61 200817327 定位和活性（Kido 等人；2001，J· Clin. Endocrinol· Metab 86 972-979)。PI3K在胰島素-刺激之葡萄糖攝取和儲存、脂肪 分解的抑制，以及肝基因表現的調節上具有不可或缺的角 色（Saltiel 等人；2001，Nature，414，799-806)。PI3K 之顯性 _ 干擾形式的過度表現’可阻斷匍萄糖攝取’和榖胺酸運載 蛋白四，GLUT4移位至漿膜（Quon等人；1995，Mol. Cell Biol·，15，5403-5411)。因此，投與調節激酶（例如ρΐ3κ)活 性的本發明之化合物，結果增加了葡萄糖攝取，並因此可 用來治療糖尿病。 PTEN在許多細胞類型中是PI3K信號的主要調節者， 並具有腫瘤抑制者的功能，因為PI3K路徑之抗-細胞〉周亡、 增殖和肥大活性的拮抗作用（Goberdhan等人；2003，Hum
Mol· Genet·，12, R239-R248 ; Lesile 等人，2004, J· Biochem.， 3 82，1 -1 1 )。雖然不希望與理論結合，咸相信pten藉著 PtdIns(3,4,5)P3分子的去磷酸化減弱了 PI3L路徑，使該重 要的脂質第二信使退化成PtdIns(4,5)P2。在最近的研究中， 使用小型干擾RNA(siRNA)，使内源的pteN蛋白質減少 50% ’提高了胰島素—依賴性的PtdIns(3,4,5)p3含量增加， 以及葡萄糖攝取（Tang等人；2005，J. Biol. Chem.， 280:22523-22529)。因此，不希望與理論結合，假設投與 调節PTEN活性的本發明之化合物，結果因此增加了葡萄 糖攝取，可用來治療糖尿病。
PtdIns(3,4,5)P3含量亦受含有SRC同系物2(SH2)之肌 醇5’-破酸酶（SHIP)蛋白質的家族，SHIP 1和SHIP2的控制 62 200817327 (Lazar 和 Saltiel; 2006，Nature Reviews，5，333-342)。 SHIP2，在骨骼肌中，在其他胰島素-敏感性組織中表現， 催化 PtdIns(3,4,5)P3 轉變為 PtdIns(3,4)P2(Pesesse 等人；1997, Biochem Biophys. Res· Commun·，239, 697-700 ; Backers 等 人；2003, Adv· Enzyme Regul·，43, 15-2 8 ; Chi 等人；2004, J. Biol. Chem·，279, 44987-44995 ; Sleeman 等人；2005, Nature
Med·，11，199-205)。SHIP2的過度表現，明顯降低了胰島 素-刺激之PtdIns(3,4,5)P3含量，與提出SHIP2能減弱PI3K 之下游效應物的激活作用的能力一致（Ishihara等人；1999,
Biochem· Biophys· Res. Commun·，260，265-272)。因此， 不希望與理論結合，假設投與調節SHIP2活性的本發明之 化合物，結果因此產生增加的葡萄糖攝取，可用來治療糖 尿病。 如同在本文中描述的，本發明之化合物可用來在個體 中防止或預防眼睛疾病。為了預防眼睛疾病，可在個體發 展出眼睛疾病之前先投與該化合物。或者，可使用該化合 物來治療個體之眼睛疾病，例如黃斑變性、視網膜病和黃 斑水腫。本發明之化合物可能涉及調節激酶級冑，例如激 酶抑制d、非_ ATP競爭性抑制劑、赂胺酸激酶抑制劑，例 如血官内皮生長因子（VEGF)受體酪胺酸激酶抑制劑。本發 月之化口物可用來製造用以在個體中防止或預防眼睛疾 的藥劑。 ' 可此叙生在生理學上無血管角膜的威脅視力之血管新 生作用。該增殖性視網膜病，主要是糖尿病性視網心， 63 200817327 和與年齡有關的黃斑變性，其特徵在於增加金管之通透 性，導致視網膜水腫和視網膜下的流體堆積，以及新血管 的增殖，其有出血的傾向。血管生成，從預先存在之微血 笞开y成新的血苔，疋正常發育和許多病理學過程兩者的必 要部分。VEGF，血管生成之複雜級聯的核心介體，以及 有效的通透性因子，是新穎治療的誘人目標。VEGF為兩 種膜-結合酪胺酸激酶受體VEGFR-1和vEGFR_2的配體。 配體結合誘發VEGFR二聚作用和轉磷酸作用，隨後激活 細胞内的酪胺酸激酶功能部位。接著的細胞内信號軸結果 導致血管内皮細胞增殖、移動和存活。因此，不希望與理 _結合，假設投與調節激酶活性，例如酪胺酸激酶活性的 本發明之化合物’結果抑制了血管生成及/或新生血管作 用，可用來治療眼睛疾病，例如黃斑變性、視網膜病及/或 黃斑水腫。 黃斑變性之特徵在於VEGF_調解之視網膜漏出（增加血 官的通透性），並在眼睛背面有異常的小血管生長（血管生 成）。已經在糖尿病性視網膜病和與年齡有關之黃斑變性兩 者的新血管膜中確認VEGF，且該因子的眼内含量與在糖 火病丨生視網膜病中之新生血管的嚴重性有關連（Kvanta等 人；1996, Invest· Ophthal. Vis· Sci·，37，1929-1924 ; Aiello 等人；1994，Ν· Engl· J· Med·，331，1480-1487)。在這些模 式中VEGF的治療拮抗作用，導致視網膜和脈絡膜新生血 官的顯著抑制，並降低血管通透性（Aiell〇等人；1995, Pr〇c. Natl· Acad. Sci. USA·，92，10457-10461 ; Krzystolik 等人； 64 200817327 2002, Arch. Ophthal·，120, 338-346; Qaum 等人；2001，Invest
Ophthal· Vis· Sci.，42, 2408-2413)。因此，不希望與理論 結合，假設投與調節VEGF活性的本發明之化合物，結果 抑制血管生成及/或新生血管，可用來治療眼睛疾病，例如 黃斑變性、視網膜病及/或黃斑水腫。
本發明之化合物可用在治療、預防、改善個體之中風 的方法中，該個體有中風的風險、正罹患中風或已經中風。 本發明之化合物可用在治療經歷中風後復健之患者的方法 中。本發明之化合物可用來製造用以在個體中治療、預防 或改善中風的藥劑。 經學傷害， 部分腦的血
中風’亦稱為腦血管意外（CVA)，是急性神 為動脈阻塞或血管破裂，而藉此中斷供應一 液。被中斷的血液所供應的一部分腦，不再收到由血液帶 來的氧氣及/或營養。腦細胞受傷害或壞死，而損害該部分 腦中或來自該部分腦的功能。若剝奪氧氣超過6〇至％秒， 腦組織便停止產生功能，並在數分鐘之後將遭受到不^逆 的傷害，可能導致組織的死亡，即梗塞。 中風主要分為兩類··局部缺血，即供應腦的血管阻塞， 以及出血，即在腦中或周圍出血4多數时風為局耗 血中風。局部缺A中風通常分為▲栓性中風、栓塞性中風、 系統性灌流不足（分水線中風）或靜脈血栓。在血栓性中風 中，形成血栓的過程在受影f的動脈t發展，血栓，即金 塊逐漸使動脈管腔變窄，藉此阻礙血流至遠處的㈣。這 些凝塊通常形成翻的動脈粥樣硬化斑。有兩型血检性中 65 200817327 風，以在其上形成血栓的血管類型為基礎來分類。大血管 的血栓性中風涉及總頸動脈和内頸動脈、脊椎的，以及大 腦動脈環。小以的血錄中風涉及腦内動脈、大腦動脈 %的分支、中腦動脈幹和起因於遠端脊椎和基底動脈的動 血权即使/又有發生，若血栓瓦解並在該處變成栓塞， 亦可能導致栓塞性中風。栓塞意指起源自其他地方，且正 在=脈血流中旅行的顆粒或碎屬。栓塞性中風意指由检塞 阻塞了通往-部分腦的動脈。栓塞通常是域，但它亦可 能是從動脈粥樣硬化之血管中崩解下來的斑塊，或是一些 f他的物f’包括脂肪、空氣’甚至還有癌細胞。因為检 塞起因於別處，局部治療僅暫時解決問題。因此，必須確 認栓塞的來源。有四類栓塞性中&:已知為心臟來源的那 些、已知可能為心臟或主動脈來源的那些（從經_胸或經-食 運心臟超音波得知）；已知為動脈來源的那些；以及未知來 源的那些。 系統性灌流不足是流至身體所有部分的血液減少。最 苇見的疋因為心臟幫浦衰竭，起因於心跳驟停或心律不 整，或起因於心肌梗塞、肺栓塞、心包膜滲漏或出血引起 的降低心輸出。血氧過低（即低血氧含量）可能參與灌流不 足。因為血流降低是全面性的，可能影響全部的腦，尤其 疋分水線”區域’它是由主要腦動脈供應的邊緣帶狀區。 至该區的血流不一定停止，但可能減弱至發生腦傷害的決 定點。 66 200817327 在細中之靜脈的功能是使金液流回身體。當靜脈因血 权而封閉時’ a液的排出受阻並使血液停滯，引起腦水腫。 該腦水腫可能宴絲& n , 、 σ邛缺血和出血性中風。這經常發生在 罕見疾病竇靜脈血栓中。 在们體或患者中使用—或多個在技術領域中已知的各 種技術來診斷中風，像是例如神經學檢查、血液檢查、π =不用造影增強）、刪#描、都普勒超音波和動脈造 即纽射放射線不透性造影劑至血流内之後的動脈X 在影像上證實中風’便進行各種其他的研究， =有周圍來源的栓塞。這些研究包括，例如頸動脈 的起曰波/都普勒研究（檢測頭動脈狹窄）；心電圖（ecg)和 心f超音波（相'讀不整和結果在㈣中產生的凝塊，其 可月(3經由血流散播$日怒‘ & "欠播至月自血官）；HoUer監視研究，確認間歇 性心律不整，以及腦其 及細血官系統的血管造影（若認為出血起源 於動脈瘤或動靜脈畸形）。 ” I用在治療、預防或改善中風，或與中風有關之徵候 法：的化合物，是在中風之前1間或之後調節 气酶和：：聯的化合物。在某些具體態樣中，該化合物為 轉抑制劑。例如，該化合物是絡胺酸激酶抑制劑。在一 ,體態樣中’該酪胺酸激酶抑制劑為Src抑制劑。較佳的 在/口療11防或改善中風或在本文中描述之與中 =關，徵候的方法中的化合物，是在中風之前、期間或之 <的激酶信號級聯的異位抑制劑。較佳的是，用在治療、 預防或改善中風或在本文中描述之與中風有關之徵候的方 67 200817327 法中的化合物，是在中風之前、期間或之後的激酶信號級 聯的非-ATP競爭性抑制劑。 已經顯示抑制Src活性，在中風期間提供對腦的保護（參 見 Paul 等人，Nature Medicine，第 7(2)冊：222-227 (2001)， 全部以引时式納人本文巾）。已經顯示血管时生長因子 (VEGF)，其反映局部缺血傷害而產生，促進血管通透性。 研九已、、二頒示在中風之後的腦中，Src激酶調節調 解之vp，且在中風之前和之後投與Src抑制劑，在傷害發 生之後降低了水腫，改善腦灌注並減少梗塞體積（1^^11等人， 2〇〇1)。因此，Src抑制作用可用在預防、治療或改善中風 後的二次傷害。 本發明之化合物預防、治療或改善中風，或與中風有 關的徵候。中風的徵候包括突然麻木或虛弱，特別是在身 體的一側’在說話或了解語言方面突然混亂或有困擾；一 或兩眼突然看不到；走路突然有困難、暈眩或失去平衡或 協調性；或突然有不明原因的嚴重頭痛。 中A通¥有一個治療階段：預防，在中風之後立刻的 冶療’以及中風後的復健。預防第_次或再發中風的治療， =以治療潛在的中風危險因子為基礎，像是例如高血壓、 间膽固醇、心房纖維顫動和糖尿病。急性的中風治療嘗試 藉著迅速浴解引起局部缺血中風的血栓，或藉著中止出血 I4生中風的出血，使中風停止。中風後的復健幫助個體克服 起因於中風傷害的失能。醫藥或藥物治療是最常見的中風 治療。用來預防或治療中風的一種最普遍的藥物是抗_血栓 68 200817327 劑（例如抗-血小板劑和抗凝劑），以及血栓溶解劑。在發生 中風之前、期間、之後或其任何組合，將該化合物投與有 罹患中風之風險、正罹患中風或已經中風的患者。單獨、 以鲁樂組成物之形式，或與任何各種已知之治療，像是例 如抗-血小板藥劑（例如阿斯匹靈、氯吡格雷（cl〇pid〇frel)、 潘生丁（dipyridamole))、抗凝劑（例如殺鼠靈），或血栓溶解 藥劑（例如組織血纖維蛋白溶酶原激活劑（卜pA)、瑞替普酶 (reteplase)尿激St、鏈激酶、替尼普酶（tenectaplase)、蘭 替普酶（lan〇teplase)或阿尼普酶（anistreplase))倂用，投與 本發明之化合物。 本發明之化合物可用在治療、預防、改善有罹患動脈 粥樣硬化風險或正患有動脈粥樣硬化的個體之動脈粥樣硬 化或其徵候的方法中。本發明之化合物可用來製造用以在 個體中治療、預防或改善動脈粥樣硬化的藥劑。 動脈粥樣硬化是影響動脈血管壁之疾病，並經常稱為 動脈硬化”。其係由在動脈内形成多個斑塊引起。動脈粥 樣硬化斑，雖然藉著動脈擴大代償，但最後導致斑塊破裂 和動脈狹窄（即變窄），其轉而使它所餵養之器官產生不足 的血液供應。或者，若代償的動脈擴大過度進行，最後的 結果是動脈瘤。這些併發症是慢性的，緩慢地進行並累積。 最常見的是，軟斑塊突然破裂，引起血塊（即血栓）形成， 其迅速減慢或中止血流，再轉而導致該動脈餵養之器官的 死亡。將該災難事件稱為梗塞。例如，冠狀動脈的冠狀血 栓引起心肌梗塞，俗稱為心臟病發作。當動脈粥樣硬化斑 69 200817327 •慢慢地聚集在冠狀動脈内襯，然後突然破裂，完全堵塞動 脈並阻止血流向下游時，發生心肌梗塞。 使用任何各種臨床及/或實驗室測試，如理學檢查、放 射線學或超音波檢查和血液檢查，診斷患者的動脈粥樣硬 化和急性心肌梗塞。例如，醫師或臨床醫師可傾聽個體的 動脈’檢測異常的嘶嘶聲，稱為雜音。可利用聽診器，放 在受影響的動脈上來聽雜音。或者，或另外，臨床醫師或 (' *師可針對異常，如變弱或沒有，檢查例如在腿或腳上的 脈搏。醫師或臨床醫師可進行血液檢查，檢查膽固醇含量 或檢查心臟酵素，如肌酸酐激酶、簡蛋白和乳酸脫氮酶 的含$，來檢測異常。例如，肌舞蛋白次單元ι或τ，對 心肌是非常專-的，在永久傷害發展出之後升高。在胸痛 的n巾帛1'生的肌辦蛋白可精確地預言在+久的將來發 肌梗塞的回可此性。診斷動脈粥樣硬化及/或心肌梗塞 的其他測試，包括例如EGK(心電圖），測量個體心搏的速 ( 率和規律性；胸腔X-光，測量踝/臂指數，其比較足踝的 血壓和手臂的血壓；動脈的超音波分析；CT掃描感興趣的 區域；血管攝影；運動壓力測驗，核醫心臟掃描；和磁振 〜像（MRI) ’以及心臟的正電子發射斷層（ρΕτ)掃描。 可用在這些治療、預防或改善動脈粥樣硬化或其徵候 的，些方法中的化合物，是在有罹患動脈粥樣硬化風險或 正罹患之患者中調節激酶信號級聯的化合物。在某些具體 態樣中，該化合物為激酶抑制劑。例如，該化合物為赂胺 酉义激酶抑制劑。在一具體態樣中，該酪胺酸激酶抑制劑為 200817327
Six抑制冑。較佳的是，用在治療、預防或改善動脈粥樣 硬化或其在本文中描述之徵候的方法中的化合物，是涉及 動脈粥樣硬化之激酶信號級聯的異位抑制劑。較佳的是， 用在治療、預防或改善動脈粥樣硬化或與在本文中描述之 動脈粥樣硬化有關之徵候的方法中的化合物，為涉及動脈 粥樣硬化之激酶信號級聯的非-Ατρ競爭性抑制劑。 咸相信由Src轉導的細胞信號，在增加血管之通透性 上扮演重要的角色，稱為血管通透性（vp)。已經顯示血管 内皮生長因子（VEGF)，其反映局部缺血傷害而產生，包括 例如心肌梗塞，促進血管之通透性。研究已經顯示，Src 激酶的抑制，降低了 VEGF_調解之VP(參見Parang和Sun，
Export 〇pin· Ther. Patents，第 15(9)冊：1 183-1206 (2005)， 全部以引用方式納入本文中）。以Src抑制劑治療老鼠，與 未治療之老鼠相比較，證實在心肌梗塞之後降低了與血管 創傷或傷害有關的組織損傷（參見，例如Cheresh等人的美 國專利公開案第20040214836號和20030130209號，將其 内容全部以引用方式納入本文中）。因此，Src抑制作用可 用來預防、治療或改善在動脈粥樣硬化引起傷害之後的二 -人損傷，像是例如心肌梗塞。 本發明之化合物預防、治療或改善中風或與動脈粥樣 硬化有關之徵候。動脈粥樣硬化通常不產生徵候，直到使 動脈嚴重狹窄並限制血流為止，或直到它引起突然阻塞為 止。徵候視發展出斑塊和變窄之處而定，例如在心臟、腦、 其他維持生命的器官，以及腿或幾乎身體的任何地方。動 71 200817327 脈粥樣硬化的最初徵候為疼痛或抽筋，此時身體需要更多 的氧氣，例如在㈣期間，糾人會覺得胸痛(絞而痛)，= 為心臟缺乏氧氣，或腿抽筋’因為腿缺乏氧氣。供應血液 至腦的動脈變窄，可能引起暈眩或暫時的局部缺血發作 (TIA’s)，在此處中風的徵候和症狀持續不到^小時。通 兩’這些徵候是逐漸發展出的。 、 2肌梗塞的徵候，其特徵在於不同程度的胸痛、不舒 月艮、冒汗、虛弱、反胃…區吐和心律不整，有時引起意識 喪失。胸痛是急性心、肌梗塞最常見的徵候，且經常敛述為 =張、壓迫或擠壓感。疼痛可能散發至下顎、頸部、手臂、 月朴上腹部’最常到左手臂或頸部。當胸痛持續超過％ 分鐘時，較可能是因心肌梗塞引起。尤其是若因梗塞足以 引起左心室衰竭，伴隨有肺鬱血或甚至肺水腫，而降低心 肌收力h ’患有心肌梗塞的患者便可能出現呼吸短促（呼 吸困難）。 可單獨卩4藥組成物之形g，或與任何各種已知的 動脈粥樣硬化之治療，像是例如降膽固醇藥物（例如他；丁類 (statlns))、抗-血小板藥劑或抗凝劑併用，投與本發明之化 合物。 本毛月之化口物可用在治療、預防、改善個體之神經 病性=痛’如慢性神經病性疼痛或其徵候的方法中，該個 體有惟患之風險、正罹患或已經罹患神經病性疼痛。本發 月之化口物可用來製造用以在個體中治療、預防或改善神 經病性疼痛或其徵候的藥劑，該個體有罹患之風險、正羅 72 200817327 患或已經罹患神經病性疼痛。 神經病性疼痛，亦稱為神經痛，與普通感受傷害的疼 痛有性質上的差異。神經病性疼痛經常以持續的燒灼及/或” 釘和針（pins and needles)”及/或，，電擊⑷“^化sh〇ck)”的感 覺來呈現。在《受傷冑疼痛和神經病性疼痛之@的差異， 歸因於”普通(ordinary)’，’感受傷害疼痛僅刺激疼痛神經， 而神經病經常導致在相同地方疼痛和非_疼痛感覺神經兩者 的刺激(例如反映接觸、溫暖、寒冷的神經），藉此產生脊 髓和腦並非正常預期會收到的信號。 〃神經病性疼痛是一複雜、慢性的疼痛狀態，其通常伴 思著、且織傷害。關於神經病性疼痛’神經纖維本身可能已 :創、功能障礙或受傷。這些受傷的神經傳送出不正確的 仏號至其他疼痛中枢。神經纖維受傷的衝擊包括在受傷處 和文傷周圍區域之神經功能的改變。 使用-或多個在技術領域中已知的各種實驗室及/或臨 木技術，來診斷個體或患者的神經病性疼痛，像是例如身 可用在些治療、預防或改善神經病性疼痛，如慢性 2病m或與神經病性疼痛有關之徵候之方法中的 合物’是調節涉及神經病性疼痛之激酶信號級聯的化合 ，。在某些具體態樣中，該化合物是激酶抑制劑。例如， ==物是路胺酸激酶抑制劑。在—具體態樣中，該赂胺 二:抑制劑$ Src抑制劑。較佳的是，用在治療、預防 -。神、、’工病性疼痛或其徵候之方法中的化合物，是涉及 73 200817327 神經病性疼痛之激酶信號級聯的異位抑制劑。較佳的是， 用在冶療、預防或改善神經病性疼痛或其徵候之方法中的 一 疋’步及神經病性疼痛之激酶信號級聯的非_ΑΤΡ競 爭性抑制劑。 已經顯示C-Src調節N_甲基_D_天冬胺酸（nmda)受體 的活性（芩見 Yu 等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA，第 96 冊.7697-7704(1999)，全部以引用方式納入本文中）。研究 已頁PP2，低分子量的Sre激酶抑制劑，降低了麵dA 受體雇2次單元的碟酸化（參見Gu〇等人，j. Neur〇.，第μ 冊.6208-6217(2002)，全部以引用方式納入本文中）。因此， Src抑制作用，其轉而抑制活性nmda受體，可用來預防、 治療或改善神經病性疼痛，如慢性神經病性疼痛。 曰本發明之化合物預防、治療或改善神經病性疼痛，如 ’k性神經病性疼痛，或與神經病性疼痛有關之徵候。神經 病性疼痛之徵候包括射擊和燒灼痛、刺痛和麻木。 可單獨、以醫藥組成物之形式，或與任何各種已知的 ^療’像是例如止痛劑、類鴻片、三環抗抑臀劑、抗瘦攣 藥物和血清素正腎上腺素再吸收抑制劑併用，投與本發明 之化合物。 本發明之化合物可用在治療、預防、改善有風險或正 惟心B型肝炎的個體之B型肝炎或其徵候的方法中。本笋 明之化合物可用來製造用以在有風險或正罹患b型肝炎^ 個體中治療、預防或改善B型肝炎或其徵候的藥劑。 B型肝炎病毒，肝炎職病毒家族的成員，由含有病 74 200817327 毒基因組之蛋白質核心顆粒所組成，該病毒基因組為帶有 單股區之雙股DNA的形式，以及外侧以脂質為基礎的被 膜，有陷入的蛋白質。該被膜蛋白質涉及病毒結合和釋放 到易受感染的細胞内。内部的衣殼搬遷DNa基因組至細 月已的核便在那裡轉錄病毒mRNA。製造三個次基因組轉 錄本，其編碼被膜蛋白質，連同編碼X蛋白質的轉錄本。 ，錄第四個月卜基因組RNA，它被輸出至胞液，並轉譯病 毒聚合酶和核心蛋白。將聚合酶和前-基因組RNA用衣殼 包住’組裝成核心顆粒，在那裡藉著聚合酶蛋白質，使前細 土口、、且RNA逆轉錄成基因組DNA。然後經由正常的分泌 路徑，讓成熟的核心顆粒離開細胞，途中獲得被膜。 B型肝炎是一種鮮為人知的非_逆轉錄病毒之病毒，它 使用疋轉錄作用當作複製過程的—部分。其他使用逆轉錄 作用的病毒包括例如HTLV或HIV。 主在HBV感染期間，宿主的免疫反應負責肝細胞損傷和 :毒清除兩者。雖然先天的免疫反應無法在這些過程中扮 :重要的角色，但繼承免疫反應’特別是病毒_專一的細胞 :性=巴細胞（CTLs)，提供了幾乎全部與HBV感染有關 ^傷害。#著殺死被感染的細豸，並藉著產生抗病毒之 細胞激動素’能夠從可存活的肝細胞中清除丽，Cm 病毒。雖然是由CLTs開始並調解肝損傷，但抗原_ 血、—的炎症細胞可使CLTs_誘導的免疫病理學惡化，且 小板亦可促使CTLs堆積在肝内。 财患者使用任何的各種臨床及/或實驗室測試，來診斷 75 200817327 • B型肝炎，像是理學檢查，以及血液或血清分析。例如， 針對病毒抗原及/或由宿主產生之抗體的存在，來測定血液 或血清。在B型肝炎的普通測試中，使用B型肝炎表面抗 原（HBsAg)的檢測，來篩選感染的存在。它是第一個可檢 測的病毒抗原’並在該病毒感染的期間出現；然而，在感 染早期該抗原可能尚未出現，且其在感染晚期可能是無法 檢測的，因為被宿主清除了。在該，空窗，期，宿主仍被感 〔染，但成功地清除病毒，對B型肝炎核心抗原的ι§μ抗體 (抗HBc IGM)可能是疾病唯一的血清學證據。 在出現HBsAg之後不久，另_個叫做B型肝炎e抗原 (HBeAg)的抗原將會出j見。在傳統上，HBeAg出現在宿主 血清中，與高很多的病毒複製速率有關；然而，有些B型 肝炎病毒的變異株根本不產生”e”抗原。在感染的天然過程 中，可清除HBeAg，且之後對抗” e，，抗原的抗體（抗^以^^會 立刻升高。該轉變通常與病毒複製的意外衰退有關。若宿 主能夠清除感染，HBsAg終將成為無法檢測的，並將藉著 對B型肝乂表面抗原之抗體（抗_HBs)來追縱。一個人對 HBsAg為陰性但對抗_HBs為陽性，是已經清除了感染或之 前曾接種過疫苗。許多對HBsAg為陽性的人，可能有極少 的病毒繁殖，並因此有長期併發症或傳播感染給其他人的 些4鼓風險。 可用在治療、預防或改善B型肝炎或其徵候之方法中 的化合物，是在有風險或正患有B型肝炎之個體中調節激 酶信號級聯的化合物。在某些具體態樣中，該化合物為激 76 200817327 it抑制劑。例如，該 ，π ΛΙΧ㈡又獻哪仰割劑。在一且 體態樣+ ’該酪胺酸激酶抑制劑4 Μ抑制劑。肖佳的，、 用在治療、預防或改善B型肝炎或其在本文中描述之:候 的方法中的化合物，為涉及B型 主耵人之激_ ^ 5虎級聯的里 抑制劑。較佳的是1在治療、預防或改善B型肝炎; 在本文中描述之盥肝或 , ” Β㈣火有關之徵候的方法中的化人 =為涉及Β型肝炎之激酶信號級聯的非·Ατρ競爭性抑制 片’·]。
Src在Β型肝炎病毒的複製中扮演某個角色。在Η" 病毒繁殖所需的步财，財編碼之轉錄因子HB 叫參見，例…η等人，EMB〇J.，…:跡 ⑽⑽9);Klein等人，默⑽心，第17冊6427偏 (1997)，分別全部以引用方式納入本文中）。因此，抑 制作用，其轉而抑制Src_調解之刪病毒的繁殖，可用來 預防、治療或改善B型肝炎或其徵候。 本發明之化合物’治療或改善B型肝炎或與B型肝炎 有關之徵候。B型肝炎之徵候通常在與病毒接觸之後爪⑽ 天：毛展出。然而，兩達-半感染B型肝炎病毒的人並沒 :被候。B型肝炎的徵候通常與流感差不多，並包括例如 食慾不振’·疲倦；嗯心和σ區吐，全身發疼；肝臟上方疼痛（例 如在腹部右側，最低肋骨籠之下)、黃疸和排泄功能改變。 可單獨、以醫藥組成物之形式，或與任何各種已知的 Β型肝炎之治療，像是例如干擾素〇、拉米夫定㈣ (肝安能（Epivi卜B))和貝樂克（baraclude)(恩替卡韋 77 200817327 (entecavir))併用，投與本發明之化合物。 中本文中描述的，本發明之化合物可用來在個體 u即，义糸統活性，藉此防止或預防自體免疫疾病，例 口風濕性關節炎、多發性硬化症、毒血症和狼瘡，以及移 植排斥和過敏性疾病。或者，該化合物可用來治療個體之 自體免疫疾病。例如，該化合物結果可降低個體之自體免 疫疾病之徵候的嚴重性，或阻止其迫近的進行。本發明之 -物可此"及凋節激酶信號級聯，例如激酶抑制劑、非_ ΑΤΡ脱爭性抑制劑、絡胺酸激酶抑制劑，例如^抑制劑、 p59fyn(Fyn)抑制劑或p561ek(Lek)抑制劑。本發明之化合物 係用來製造用以在個體中調節免疫系統活性的藥劑。 自體免疫疾病是因自我_容忍之瓦解所引起的疾病，使 得、’廬承性免疫系統對自我抗原起反應，並調解細胞和組織 傷害。自體免疫疾病可能是器官專一的（例如甲狀腺炎或糖 尿病），或系統性的（例如系統性紅斑性狼瘡）。τ細胞在繼 承性免疫系統中調節細胞_調解之免疫反應。在正常情況 下，Τ細胞表現抗原受體（Τ細胞受體），其認得與自己主要 組織相容性複合分子結合之外來蛋白質的肽片段。在τ細 胞叉體（TCR)刺激之後，最早承認的事件是激活Lck和 Fyn ’結果在免疫受體以酪胺酸為基礎之激活基序内的酪 月女酉夂殘基上’產生TCR礙酸化（Zamoyska等人；2003,
Immunol· Rev·，191，107-118)。路胺酸激酶，如 Lck(其為 蛋白質酷胺酸激酶之Six家族的成員），藉著將肽和蛋白質 之路胺酸殘基磷酸化，在細胞信號和細胞增殖的調節中扮 78 200817327 演不可或缺的角色（Levitzki; 2001，Top. Cun·· Chem.，211 1-15 ; Longati 等人；2001，Curr· Drug Targets，2, 41-55 ; Qian 和 Weiss; 1997, Curr. Opin. Cell Biol” 9, 205-21 1)。因此， 雖然不希望與理論結合，但假設投與調節酪胺酸激酶（例如
Src)活性的本發明之化合物，在治療自體免疫疾病上是有 用的。 酪胺酸激酶lck和fyn兩者都在TCR路徑中被激活； 因此，lck及/或fyn的抑制劑有作為自體免疫劑的潛在用 途（Palacios 和 Weiss; 2004, Oncogene，23, 7990-8000)。Lck 和Fyn主要由T細胞，在其大半生中表現。已經由動物和 細胞株研究，證實Lck和Fyn在Τ細胞發育、體内平衡和 激活作用中的角色（Parang 和 Sun; 2〇〇5, Εχρ〇η 〇pin The
Patents，15, 1 183-1207)。Lck激活涉及自體免疫疾病和移 植排斥（Kamens 等人；2001，Curr· 0pin· Investig Drugs，2, 1 2 13-12 1 9)。結果顯示在反映τ細胞受體刺激時， lck㈠Jurkat細胞株不能增殖，產生細胞激動素，並引起細 胞内鈣、磷酸肌醇和酪胺酸磷酸化的增加（Straus和Weiss; 1992, Cell·，70, 585-593 ; Yamasaki 等人；i996, M〇1 Cell
Biol·，16, 7151-7160)。因此，抑制lck的製劑將有效地阻 斷T細胞功旎，產生免疫抑制劑的作用，並在自體免疫疾 病，如風濕性關節炎、多發性硬化症和狼瘡，以及在移植 排斥和過敏性疾病的領域中有潛在的用途（Hanke和p〇u〇k; 1995, mflammation Hes·’ 44, 357-371)。因此，雖然不希望 與理論結合，但假設投與調節蛋白質酪胺酸激酶之src家 79 200817327 族的一或多個成員（例如lck及/或fyn)的本發明之化合物， 在治療自體免疫疾病上是有用的。 本發明提供蛋白質激酶及/或蛋白質磷酸酶的抑制劑。 在一具體態樣中，蛋白質激酶及/或蛋白質磷酸酶抑制劑為
(式I)，其中X為鹵素，且R" R2、R3、R4、R5和R6是相同或不同的，並選自Η、C(0)Ra、 C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、 0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、 NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、 NRaS(0)0Rb 、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Rc 、 NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、0S03H、 0P03H2、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、鹵素、芳基、O-芳基-Q、 雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環化合物，以及具有從1 到20個碳原子的烷基（分支、環狀或未分支的），可視需要 含有雙或三鍵，並可視需要以雜原子或其他官能基取代， 如羧酸、羧酸酯、醇、烷氧基、硫醚、醯胺、C(0)NH2、 硫代酸胺、脲、尿烧、亞颯、石風、S Ο 3 Η、O S Ο 3 Η、膦酸、 膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、Ρ03Η2、0Ρ03Η2、硼酸、芳 基、雜芳基、聯芳基、雜環、ΝΗ2、烷基和二烷基胺、糖 200817327 苷和雜聯芳基，或R5和R6 —起形成雜環化合物。Ra、Rb 和是相同或不同的，並選自由Η、芳基、雜芳基、聯芳 基、雜聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的），其可視需 要以雜原子或其他官能基取代，如羧酸、羧酸酯、醇、烷 氧基、硫醚、酿胺、c(o)nh2、硫代醯胺、脲、尿烧、亞 砜、砜、S03H、0S03H、膦酸、膦酸酯、次膦酸、次膦酸 酯、Ρ03Η2、0Ρ03Η2、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基、雜 環、NH2、烷基和二烷基胺、糖苷和雜聯芳基。Q為芳基、 OH、c(o)nh2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、
NH2、NHR19、NR19R2G、S02R21、糖苷、烷氧基或 。 應暸解在上述側鏈中的所有開放取代位置，均可含有更多 的取代。在下文表VI中提供適當之R基團的實例。 在一具體態樣中，r5或r6中至少有一個是
V 知 其中R/為附接點，並為（CH2)X，其中X *0、h2、3、4、5、6、7、8、9*10，CH2CHOH、CH(CH3)(R· 異構體）或 CH(CH3)(S_異構體），且 R8、R9、R1()、Ru 和 R12 獨立地為相同或不同的，並選自H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)2ORb 、 NRaP(Q)ORbORc 、 NRaP(0)0RbRc 、 81 200817327 NRaP(0)0Rb0Re、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、0S03H、OP03H2、 P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、鹵素、芳基、O-芳基-Q、雜芳基、 聯芳基、雜聯芳基、雜環化合物，以及最好是具有從1到 20個碳原子的烷基（分支、環狀或未分支的），可視需要含 有雙或三鍵，並可視需要以雜原子或其他官能基取代，如 羧酸、羧酸酯、醇、烷氧基、硫醚、醯胺、C(0)NH2、硫 代酸胺、脲、尿烧、亞諷、石風、S Ο 3 Η、O S Ο 3 Η、膦酸、膦 酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基、 雜環、ΝΗ2、烷基和二烷基胺、糖苷和雜聯芳基。Ra、Rb 和Re是相同或不同的，並選自由Η、芳基、雜芳基、聯芳 基、雜聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的）所組成之群 組，其可視需要以雜原子或其他官能基取代，如羧酸、羧 酸醋、醇、烧氧基、硫醚、醯胺、c(o)nh2、硫代酿胺、 月尿、尿烧、亞石風、石風、S03H、0S03H、膦酸、膦酸S旨、次 膦酸、次膦酸酯、po3h2、0Ρ03Η2、硼酸、芳基、雜芳基、 聯芳基、雜環、nh2、烷基和二烷基胺、糖苷和雜聯芳基。 Q 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、OS03H、Ρ03Η2、 OP03H2、NH2、nhr19、nr19r20、so2r21、糖苷、烧氧基
Nkn ΚΛ 或 。應瞭解在上述側鏈中的所有開放取代位置，均 可含有更多的取代。在一具體態樣中，R8、R9、R1()、Rn 和 R12 分另選自 OCH3、OCH2CH3、Η、CH3、OH、CH2OH、 CF3、OCF3、CFO、C6H5、OC6H5、OCH2C6H5、OCH2CH2CH3、 82 200817327 N〇2和鹵 cho ^ c〇2h . c〇2ch3 ^ ch2co2h ^ ch2co2ch3 > 素。 在另一具體態樣中，I或R6中至少有一
〜· 〇H
其中星號代表與氮的附接 或 點。 在較佳的具體態樣中，非·肽抑制劑抑制pp60…路胺 酸激酶、，絡胺酸激酶或pp5，路胺酸激酶的活性。 在另-較佳的具體態樣中’非·肽抑制劑抑制蛋白質路 胺酸磷酸酶1B(PTP_1B)的活性。 本發明的另一化合物具有下式π ··
且Ri、R2、R3和r是專一卜 例如氟 奎 生70件。當在本文中使用時，
專一性元件或專一性側鏈，A & 為即將與個別蛋白質之獨特結 合凹咼（pocket)結合的側鏈。囡 口此，所使用之側鏈將視欲抑 制的特定蛋白質而定。欲確切 & & ^ ^適當的側鏈，可使用已知的 肽…5側鏈，來確認類似物， L 4後將其用在組合化學技術 上’擴充有可能之側鏈的庫。 在一具體態樣中，心為只，^為 83 200817327
或 。113為11且114為1"1。在另一具 體悲樣中n卜朵環上任何其他的位置處取代該化合物。 本备月之化a物提供對抗路胺酸激酶，如沖6〇c-src的 活I*生亚預期改善化合物在活體内抑制酪胺酸激酶的能 力因為已經移除一個容易代謝的0H基團。特定而言， 利用齒素取代在°引朵環上5-位置處❸OH基團。齒素 疋氯鍵接叉者’對作為氫鍵捐贈者的催化殘基是有用的。 此外’鹵素在第Π期代謝中不會被代謝，並帶負電，導致 在活體内是有益#卩央^ g , 的“見，例如Park等人，2001)。該類的 二些成員亦是相對酵素的抑制劑，即魏路胺酸磷酸酶。 廷些化合物是高轉移前列腺癌細胞生長之PP60-。的抑制 d亚虽以咼劑量急性腹腔内投藥時 :’如同在下文實施例”的描述。在這些化合物二生 …L 了&現有些具有其他的生物學活性 (例如抑制第π型糖尿疝夕胳k丄 生 列凝素人成酿、n 碟解酶、HIV逆轉錄酶或前 此…）。因此’為了治療應用’如癌症，可使用這 二化合物作為赂胺酸激酶 5 卩制蜊。酪胺酸激酶抑制劑3 # 也具有其他潛在的治療應 W另外 么产χ 1列如，在p561ck的案例中主 免疫抑制劑)’且路胺酸磷 ”為
底结TT , 啊的抑制劑可提供、、A 療弗ϋ型糖尿病或肥胖的藥物。 奴仏〜 本發明亦提供確認蛋白暂 1中、+K P t 貝激駟之抑制劑的方法。在圖 中概述發展非_肽PTK抑制 仕圖 將至少一個具有一或多個蛊 丞本上， 〃蛋白貝激酶之催化殘基結合的 84 200817327 t月b基（在較佳的具體態樣中，至少一個官能基為鹵素）的 弟一杈件與至少一個提供非_肽支架的第二模件混合。該至 ^们第柄件的官能基（群），能夠分別與蛋白質激酶的 催化残基共價或非_共價結合。因此，每個第一模件的每個 吕月b基都此夠在將蛋白質激酶與第一模件在對這類結合有 效白^條件下混合時，與蛋白質激酶的催化殘基，以共價或 非-共價之方式形成可逆或不可逆的結合。然後選擇抑制蛋 白貝激酶活性的第一和第二模件之組合。步驟1從業已產 生之蛋白質激酶抑制劑的資訊開始，即已經使用在或 之又貝專一性位置處結合的五肽支架，定位各種合理 =計的官能基（即模件，，M1，，或，，第—模件，，），與保留的催化 殘基MgATP或MgADP產生交互作用。坚 乂立作用選擇目爾已經以此 ^確認的較佳官能基，作為步驟1的起始Ml模件。在 =1中’已經利料些％官能基，確認^抑制劑有希 ::非-肽支架。期望這些裸露的非_肽支架， =，在蛋白質路胺酸激酶（PTKs)中將具有低結合親和力， :，、’、相對上非-選擇性的。將在步驟1層面上的缺乏選擇 = Γ，？著再度-筛選它們，可使在步驟1中確認 將車H肽支*進订再循環’用來對抗額外的PTKs，並 =佳者帶到全都使用新的PTK目標的步驟2和3中。可 ::w:接：或广個起始的專一性元件(SJ，充分增加得自 競爭\生^些裸露支架的效能，允許確認該支架為#_ATP …生的，並使用組合化學，以合理引導之方式，接受進 85 200817327 一步的效力增強。使在步驟又 Μ2(第二模件）支架經歷步驟2， 相對於ΑΤΡ的非_競爭性結合 加0 中確認有希望的Src非-肽 並在對抗Src的效力，以及 上展現出一至二數量級的增
在：事資源密集的組合庫合成，以及步驟3的測試之 驟2的層面上核准支架是很重要的，有三個理由： ^出附接專-性元件（SJ側鏈的化學；2)収這些抑制 ^疋ATP-競爭性的；以及3)判定效力正反映侧鍵^特 ’並預期附接點是以Src:抑制劑複合體的工作模式為基 =(1"提供—些信心’可對個別選擇性S件Sn的範圍進行 5理引導的選擇，以便納人步驟3的集中庫中）。 在步驟3中，期待對特殊ρτκ的高效力和專一性，因 為將經由組合化學和高輸貫量的篩選，以實驗評估Ml官 能基（和接近類似物Μι，）與選擇性元件（SJ的許多組合。若 需要，可藉著附接額外的專一性元件（參見圖丨中的任意 Sn’s)，進一步增加效力和選擇性。 乂驟1-3中’將使用IRTK ••肽：amP-PNP晶體結 構的分子模擬研究、Src ··肽複合體的模型，以及與以特定 支架為基礎之抑制劑的個別家族複合之Src的模型，作為 性質上的指引。這些模擬研究到目前為止，在指引抑制劑 的σ又什努力上是非常有幫助的，如稍後的詳述。以混合結 構為基礎之設計和組合化學技術，以此方式提供協同，其 中藉著另一個的優點來解決這些用於分離之技術的主要個 別缺陷。以結構為基礎之設計的主要缺陷是定量預言配體 86 200817327 '見彳力的困難’這因為溶劑化和熵的複雜效應而特別 具有挑栈性（Ajay & Murck〇, 1995)。以結構為基礎之設計 的主要優點是其預測那個類型的分子可能是良好配體的能 2 °以結構為基礎之設計，可判定分子大小和形狀的粗略 达界(需要考慮蛋白質具有某些彈性），並指出可能發生忌 ^ & H_鍵和離子交互作用的地方。&句話說，組合化學 的主要缺陷是藥物型分子的，，分子空間，，（即分子量大約_ 或更少）是如此之大，以致於可能不希望採樣所有具有在合 大·ί之組合庫中報導之高密度的該分子空間。最近對於 含有高達30個，且(除了 η之外)僅選自碳、氮、氧和硫原 子之可此化合物數目的估計（B〇hacek等人，Μ%)為IN。個 化合物。這在典型藥物分子的分子㈣圍Μ，而且還不包 括由其他原子’例如_素提供的額外多樣性。戶斤以，必須 使用其他的限制來確認特殊藥物候冑者可能位於其中的分 子工間之區域。以結構為基礎的設計’可藉著確認極有可 1為=配體的分子類型’徹底降低欲探究之分子空間的體 積。沒有能力定量預測這些，，集中，，組合庫成員中哪—個事 實^將是最緊密結合的配體（即定量問題），然後藉著使用 有效率的組合合成和庫的高輸貫量測試來解決。 在稍早的以肽為基礎之絲胺酸和酪胺酸激酶抑制气机 計努力中’使用ΡΚΑ作為便利的定性模式，來設計與= 之催化蚁基產生父互作用的蛋白質激酶抑制劑模件Μ 對ΡΚΑ所獲得的結構和動力學資訊，比任何其他的蛋 激都多得多。 87 200817327 已經解答了與MgzATP和假受質（即以H代替〇H)肽抑 制劑（PKI5-24醯胺）複合之PKA的晶體結構（zheng等人， 1993) ’並在圖2中出示接近該抑制劑之p 〇 Aia的活性位 置交互作用。 遠晶體結構顯示在關閉（即兩葉相接觸）和激活狀態 下，Mg,ATP與PKA的小葉結合，且2〇_個殘基之假受質 肽抑制劑利用酵素的整體構形與大葉結合。在圖2中以A 顯不在複合物中，在P〇 Ala側鏈碳和附近重原子之間的距 離。运些距離顯示Ala側鏈是在周圍原子的凡得瓦爾接觸 距離内，並代表有一小空間用來附接巨大的Μι官能基與Ala 側鏈。然而，PKA是有彈性的酵素，具有開放、關閉和中 間構形（Cox等人，1994)，而這些較開放的構形，將導致從 抑制劑Ala中取消ATPr_磷酸，藉此產生附接Μι官能基 的結合空腔。此外，PKA結合Mg2ADP，具有與MgATP相 同的親和力（Whitehouse等人，1983)，且細胞中ATP/ADP 的比例通常為10/1 (Alberts等人，1994)。因此，在平衡時， 大約10%的細胞蛋白質激酶是在MgATP結合狀態，且亦 可利用抑制劑瞄準該形式的酵素，從催化循環中消耗所有 的酵素’成為PKA:MgADP:抑制劑失活複合體。 因為在所有的絲胺酸激酶中完全保留了 PKA催化殘基 Asp-166和Lys-168，且酪胺酸激酶的差異僅在於以Arg取 代Lys-168(Taylor等人，1993)，故選擇這個區域的活性位 置，連同鄰接的MgATP或MgADP，瞄準能夠作為％之 抑制劑官能基的選擇，並被廣泛地用來發展整個蛋白質激 88 200817327 酶家族的抑制劑。藉著冑Μι瞄準與核芽酸相鄰 置的區域’㈣-肽抑制劑提供方位點，其可延伸至狀^ 專一性位置，未必與ATp/ADp結合競爭。 、° σ U確認可用來作$ ^之官能基的選擇，因為雖铁 局度保留了活性位置的該區，或，但預期每個特定的蛋白： 激酶仍將展現-些跨越該選擇的不同偏好，因為在活性: 置構形和鄰近殘基巾仍有少許變異。此外，在該ΜΑ的選 擇中，等級偏好可能多少有變化，像是將％模件附接= 不同的非-肽支架上。該期望是基於每個非_肽支架可能以 略為不同的方位與每個個別的蛋白質激酶，以及每組特殊 的廷擇性疋件（SJ侧鏈結合。_ Μι之官能基的初步薛選， 遙擇五肽支架，因為這些較大肽支架的結合方位，在整個 系列中可能是非常一致且可預知的（即極為類似與藉著X一 射線觀察到的），並可能較有信心地評估每個受試Μ!官能 度打算與保留之催化殘基相鄰的位置。所以，該稍早以肽 為基礎之工作的目的，是確認可應用之％官能基的收集， 不只是非-肽支架的初步筛選（步驟1}，還要作為一組起始 的叫側鏈，其可經由密切類似物進一步擴充，並藉此利 用在最終之非-肽組合庫中的其他側鏈同時最優化（步驟 3)。 為了在PKA活性位置的該保留性催化區中製作候選Μ〗 吕能基的模型，按照在圖3中的指示，在silic〇ne Graphics 工作站使用SYBYL分子模擬套襄軟體（Trip〇s)，在ρκΑ三 元結構中之Ρ0 Ala位置上建造它們。 89 •200817327 無法獲得帶有MgATP之PKA的晶體結構，以及以較，: 開放構形結合的抑制劑，所以藉著簡單刪除ΑΤΡ γ -磷酸， 在知生自圖2中解釋之三元複合體的ρκΑ之MgADp結合 形式上，進行最初的模擬研究。使用最初的模擬研究，提 仏在σ成和測試之前，確認蛋白質激酶家族可能感興趣之 g旎基的定性指導。定量預測結合自由能的最先進電腦 /貝开法，如自由能微擾法（Free Energy ，是一 岔集計算的方法，在此時間點由非·專家例行地使用，並不 切貫際。即使最先進的方法也可能不準確，因為採樣上的 困難、在分子力學力場/參數上的不充分，以及不完全了解 水中的靜電（Ajay & Mrnxko, 1995)。較不嚴格（但較容易使 用）的计异方法，在進行結合親和力之定量預測時有不可靠 的傾向，尤其是在處理多個極性和離子交互作用時，如涉 及結合的那些。 為了允許利用Silicone Graphics工作站，以合理的時 間i進行分子力學計算，從pKA三元結構切出兩層殘基， 其被PKA活性位置包圍，連同肽抑制劑和Mg2ADp。然後 將M! g能基附接在p〇 Aia側鏈上，然後在指派適當的形 式電荷，並使用S YB YL計算Gasteiger Marsili點電荷之後， 使用具有距離依賴性介電常數的Tdp〇S力場，使整個pKA 活性位置：Mg2ADP :經修飾之肽抑制劑複合體接受3〇〇 次重複的分子力學最小化。將重複的最大次數設定在3〇〇， 便足以移除複合體中任何嚴重的應變，且若未達到匯华， 則运不容許全部結構明顯地從最初的射線結構，，漂移 200817327 (drift)’，。然、後以肉眼評估這些最小化的複合體，判定附接 的個別Ml官能基是否能夠參與與保留之催化殘基及/或
Mg^DP有利的交互作用。在1 户用在其他的標準交互作用評估 該目視評估涉及測量原子_历工& ^ 原子原子的距離，衫是^正順利地 形成氫鍵和離子交互作用。 j )’結果可能降低了結合親和力，因&它們是以其經過證 只，將要忍文與保留之催化殘基及MgADp/MgATp相鄰的 能力為基礎，而被特別設計並選出的（同時適當地拴在五肽 支架上）。若特定的官能度不能在步驟1中正確地定位 非-肽支架，則企圖在步驟2中藉著合理附接最初的專一性 兀件來改良效力，就有可能失敗。 在個別M】官能度和保留之催化殘基或μ撕之間 有利的分子間交互作用，不-定意味著會在新抑制劑上觀 察到提高的結合親和力。極性％官能度和極性PM活性 位置殘基兩者的不利去溶劑化作用（還有複合體摘效幻並 沒有被納人該分析中，並可能降低淨結合親和力，可以到 經修飾之抑制劑甚至可能比相對應之⑼尬抑制劑效力更 低的程度，即使附接之Μι官能度正如預定與保留之催化 殘基及/或MgADP(或MgATp)產生交互作用。甚至在該去 冷劑化作用文㉝，結果並沒有結合親和力之淨增加的情況 下，這些官能基仍可用來作為在蛋白質激酶活性位置 中正確定位非·肽抑制劑類似物的定向基團。在活性位置的 其他地方定位這些極性官能基（假定它們被拴住以致於不能 延伸至巨大的溶劑内，同時支架順利地結合在活性位置 91 200817327
’又+有+任何文獻，蛋白質激酶測定程序含有添加的 DP藉著添力° 1 〇%像所使用之ATP濃度那樣多的ADP， 士：在細胞中正常的1/10比例，修改典型的PKA文獻測 序（ass等人，1989)。在後文中，將該蛋白質激酶測 定稱為”文獻模仿，，測定。經將其用在PKA和Src上。檢 查文獻和市售的蛋白質激酶測定，顯示在各個實驗室和公 司之間都不一致，且所有的這些測定都使用與已知存在細 月匕内4的那些條件大不相同的物化條件。目為抑制細胞内 的蛋白質激酶是藥物發現的最終目標，已經發展出新穎的 蛋白質激酶測定，其更為接近地去模仿已知現存於細胞内 的全部胞液物化條件。纟本文中描料些，，細胞模仿，，蛋白 質激酶測定的發展，連同職那—型蛋白質激酶與特定抑 制劑有最佳結合的新穎方法（STAIRe法）。收集數據，使在 、、、田胞模仿/則疋中的新穎非·肽Src抑制劑之活性與在LA25 S r c轉化細胞株中觀察到的（參見下文）發生關連。 當將這兩個測定條件應用在某些以五肽為基礎之PKA 抑制劑上時，按照在圖3中的說明設計它們，獲得在表工 中出示的結果。相同的測定條件亦可應用在類似設計的以 五肽為基礎之Src抑制劑上，並獲得在表n中出示的結果。 92 200817327 表i 初步的Μι篩選結果，同時附接到PKA五肽支架上 lle-NH2
Ac-Arg-Arg-Gly-NH 附接點 K； (uM).0 條件；*、 Κ:(ΊιΜ、]條件 1 Μ, (終產物抑制劑）丨 2 4 Μρ A L=文獻模仿 * L=文獻搬一 〇Y—: \ Ο細胞模仿 5(L)->. )108 X 542 (C〆 1 M,= C=細 〇-fNH2 V 1 1 胞模仿 300 (L)) 2400 (C) 76 (L) °^s—OH 0.16(LK ' / 1 1 1 NT(C) 8 Mj = 1 ^NH 1 1 Λ ,ΟΗ °^P^-〇H I (RorS) 1 1 1 18 (L)«非對映體A 72 (L)·非對映體B NT(C) 9 M,= 1 \严 1 1 250 (LW 2100 (C〆 HCl/0V㈣4(L>非對映體八、 2〇(L>非對映體8>乂 0 j 171 (c)-非對映體 10 = ^nh2 1 1 1 38 (L)-^ )3 115 (C)^ t !510(C)-非對映體B co2h co2h 8Χ 31 X 8¾ 11 Mr 45 (L) NT (C) η Μ]: 1 ςχ_Η 28(L)飞 29Χ 互 X_H 780(C) >
6X=C02H ^5(〇L；c^75X
Mj- 在表I中確認結構為Ac-Arg-Arg-Gly-Ala結合至 Ile-NH2，為 SEQ ID ΝΟ··2。 93 200817327 表π 初步的Μι篩選結果，同時附接到SRC五肽支架上
2mM RR-src填酸化被src抑制的％抑制劑(ImM)文獻模仿細胞模仿 抑制劑(lmM) 測定條件 文獻模仿細胞模仿
在表Π中確認結構為 Ac-Ile-Tyr結合至M^Gly-Glu-Phe-NH2，為 SEQ ID NO:3。 在表I中替大多數PKA抑制劑選擇的標準五肽序列， 是衍生自與PKA結合之肽抑制劑的假受質序列，此時解答 了在圖1中說明之晶體結構。在Nair，Kim等人，1995中描 述了在表Π中供SRC使用的標準五肽序列，Ac-Ile-Xaa- 94 200817327
Gly-Glu-Phe-NH2(SEQ ID NO:3)。在 Nair，Lee & Hangauer 1995中描述了 一些用來製備PKA抑制劑的化學。在Lai等 人，1998中描述了用來發展若干Src抑制劑的合成方法。 在表I和Π中收集的結果，顯示絲胺酸激酶PKA和 PTK Src兩者均可在P0鱗酸化位置容納各種大的極性 官能基。此外，使用STAIRe法（參見Choi等人1996)， 顯示胺基磺酸抑制劑8_和相關抑制劑，實際上結合得最好， 同時亦結合MgATP(不是MgADP或無核苷酸）。這多少是 令人意外的結果，因為這些抑制劑是，，終產物抑制劑”;L和 的類似物，在普遍接受的蛋白質激酶之反應機制中，其必 須在磷酸轉移之後馬上同時與MgADP結合。 這些結果亦證實PKA和Src兩者，對在結構上極為類 似的抑制劑，可能在結合親和力上出現相當大的差異。例 如，胺基磺酸PKA抑制劑沒(表I )，在文獻模仿測定條件（L) 下具有0· 1 6μΜ的Ki，而等排的磺醯胺L的效力卻比它低 1，875倍（ΚΘΟΟμΜ)。胺基磺酸PKA抑制劑亦與終產物 磷酸抑制劑1_一樣是等排的，但它在文獻模仿測定條件（3 1 倍）和細胞模仿（C)測定條件（1〇8倍）兩者之下，結合得緊密 知多。藉著比較膦酸鹽和鱗酸鹽JL，還有醚^__和磷酸鹽 i，解釋氧原子之位置類似在受質Ser中的有利影響。該氧 原子亦可位在像類絲胺酸〇H側鏈之位置，並提高結合（比 較與i和1A) ’其中較接近的絲胺酸模仿物i是較具 活性的。在非對映抑制劑1或B和iA-或B之活性上的 差異，暗示事實上可能發生了與活性位置催化殘基Asp-166 95 200817327 的專一交互作用，如同在Μι設計中預定的（圖3)。
Src抑制結果（表π )顯示當從文獻模仿測定條件進行到 較高離子強度的細胞模仿測定條件時，終產物抑制劑^ 的活性下降，類似PKA終產物抑制劑1。然而，所有帶有 極性官能基的PKA抑制劑在細胞模仿測定條件下均有 較低的活性，三個Src抑制劑jLi、15和17，在這些較高 的離子強度測定條件下保持其活性。再者，羥基膦酸Src 抑制劑1A(R和S非對映體之混合物）類似pKA抑制劑玉灰， 且兩者在文獻模仿測定條件下，皆與其相對應之終產物抑 制劑i和1__有大約相同的活性範圍。縮短膦酸鹽Src抑制 劑11_中的側鏈長度一個碳原子（且不可避免地同時移除附 接的OH)，得到，改善了活性（類似ρκΑ抑制劑比較i ^生）而更重要的疋結果在細胞模仿測定條件下，產生相 等的活性。的Src結果（特別是U，參見猶後將類似 的α-三羰基酸Ml類似物附接在非_肽Src抑制劑上），亦 暗示類似的醯胺可能是有用的Μι官能基，探討非_肽src 抑制劑。 非-肽Six抑制劑對於以肽支架為基礎之化合物是較佳 的，一部分是因為這些抑制劑中，有些對Src具有雙重作 用°例如，膦酸抑制劑I不僅藉著競爭性結合在活性位 置上來抑制SrC，還藉著與SH2位置結合而激活Src，藉此 釋，刀子内的自我抑制機制（Xu等人，1997)。該相反的作 提i、U_不尋¥ # IC5。曲線，其中在低抑制劑濃度下以 平⑺d里-反應幵y式刺激Src(因為最初較緊密的SH2結合）， 96 200817327 ， 接著是在較高抑制劑濃度下的典型icSG抑制曲線（因為結 合位置的較低親和力阻斷）。五肽抑制劑的此種相反激活效 應使它們成為比它們實際上就是的效力更低之活性位置抑 制劑’並使其更不易精確地排列Ml基團，同時附接至該 五肽支架上。然而，利用Src五肽支架確認的較佳Μι基團， 仍必須被納入活性位置的催化區内，並因此是有用的定向 基團，打算用在進行中的非-肽Src抑制劑研究上。因為pKA 沒有SH2功能部位，便不能將該複雜事件解釋為pKA五肽 抑制劑測試數據的因素。 在表I和Π中的結果，亦顯示測定條件可能會對抑制 劑效力和活性等級兩者有多少影響。例如，如在表I中所 示，攸文獻模仿（L)測定條件變換至細胞模仿（c)測定條件， 可旎改變效力，從3-倍那麼少（抑制劑jj_)到1 08-倍那麼多 (抑制劑1)。再者，雖然在文獻模仿條件下抑制劑匕比抑 制劑1_效力更盤_，但在細胞模仿條件下它是較有效的。在 表Π中提交的Six抑制劑數據，顯示許多抑制劑在從文獻 模仿測定條件進行至細胞模仿測定條件時，喪失了它們的 效力。對Six的效力等級亦對測定條件很敏感。在文獻模 仿條件下，抑制劑i比抑制劑1更有效，但在細胞模仿 i卞件下，真的是相反。因為在細胞内的活性才是目標，故 崎擇細胞模仿Src測定作為測試有潛力之非·肽Src抑制劑 的標準測定。在細胞模仿測定中的活性，對於細胞内之活 性為必要但並非充分的條件。如同稍後將描述的，將利用 細胞培養測定來追蹤細胞模仿Src測定，其中細胞穿透、 97 200817327 代謝和與其他細胞組份的結合，亦是測量效力的因素。 下類要权时的S能度是侧酸基團。該官能基為 有吸引力的Mi候選者，是有許多原因的：丨）它可能以非· 離子狀態存在，以致於它應該不妨礙非_肽抑制劑跨越細胞 膜的被動吸收。2)平面三角的硼酸可形成可逆的四面體共 知硼酸鹽複合體（已熟知的硼酸特性，參見L〇〇mis & Durst， 1992)，在其空的2p軌道中，有陰離子出現在蛋白質激酶 活性位置，如催化性Asp羧基基團或ATp/ADp終端磷酸 氧。與活性位置親核體形成硼酸鹽複合體的能力，已經被 廣泛地用來發展絲胺酸蛋白酶的緩慢結合抑制劑（例如，參 見Kettner & Shenvi，1984)，其中親核的絲胺酸〇H與硼酸 中空的2p執道形成共價鍵，結果產生四面體硼酸鹽複合 體（例如，參見Skordalakes等人，1997)。再者，使用硼酸 與脲NH2的分子内複合體，製備二氫乳清酸酶的過渡態類 似抑制劑（Kinder等人，1990)。3)硼酸具有路易氏酸的作 用’並在水中藉著與水或氫氧化物離子形成硼酸鹽複合 體’被轉變為四面體水合物。因此，這些硼酸水合物亦可 能具有磷酸模仿物和Μι模件的功能，如同在圖2中提出 的由Baggio荨人（1997)利用該水合特性，其中水合的棚 酸具有精胺酸酶之過渡態類似抑制劑官能度的功能。這些 研究者藉著X-射線評估抑制化合物，並顯示水合蝴酸官能 度，與活性位置催化Glu-277羧基側鏈形成兩個氫鍵，且 另一個水合硼酸的〇H’s之一與在活性位置中的兩個催化 Mn2 + ’s產生交互作用。這些結合交互作用極為類似在蛋白 98 200817327 ’質激酶位置中提出的那些，即與催化Asp側鏈羥基形成Η-鍵，並與活性位置Mg2 + ’s產生交互作用（參見圖2和4)。 先前未曾探討過為了蛋白質激酶抑制劑使用硼酸。 在以五肽為基礎之PKA抑制劑的領域内，已經預備硼 酸官能度，並使用在表1Π中出示的四個抑制劑11-2A，作 為可能的模件來測試（參見Hsiao & Hangauer，1998，關 於用以製備這些化合物的一些化學）。 表ΠΙ 利用含有硼酸之肽抑制劑的PKA抑制結果
Ac-RRGXI-NH2， x= Ι(：5()μΜ(條件 L， 〇小時前置培養） Ι(：50μΜ(條件 L， 4小時前置培養) IC5+M(條件 c， 0小時前置培養） Κ：50μΜ(條件 C， 4小時前置培養) 20 Ala 278(Κ1=9μΜ) 417 41(Κ,=25μΜ) 50 OH 21 έ 一广、OH HN 人 00 249 *500μΜ 34%inh 764 *2000μΜ 19%sti OH 22 b — 产OH rn^co 81 *65 *1753 *2000μΜ 71%sti HO'r〇H .23 j 一 r HN^CD 398 133 2000μΜ 16%inh *2000μΜ 5%inh OH m入co ΙΟΟΟμΜ 30%inh ΙΟΟΟμΜ 44%inh 2000μΜ 6%sti 1734μΜ *非常扭曲的1C5〇曲線：暗示抑制劑亦為受質。 L=文獻模仿測定條件 inh=抑制 C =細胞模仿測定條件 sti =刺激 99 200817327 在表ΠΙ中確認之結構為Ac_RRGXI-NH2，為SEQ ID NO : 4 〇 在測试這些含有删酸之PKA抑制劑的同時，亦納入相 對應的五肽假受質抑制劑，作為内部對照組，同時如在 表ΠΙ中所示，調查時間-依賴性抑制作用。在文獻模仿測定 條件下，且無前置培養，最初的結果暗示最短鏈的L_胺基 酸2J一以與假受質抑制劑相同的親和力結合（即心約為 9 μΜ)。隨著側鏈的長度增加（到2J.然後2Α)，結合親合力 f 似乎降低。當非自然胺基酸的立體化學從在一中的L翻 轉成在中的D時，結合親和力似乎增加％倍。在結合 上的該項改良，可能是由於在將21_中的硼酸0H配置在與 L-咼絲胺酸相同的鏈長處而發生，但天然的受質絲胺 酸，具有比它短一個碳的侧鏈。以PKA三元結構模擬的結 果，指出藉著使α-碳立體化學從在2J_中的l翻轉成在21 中的D，然後再將側鏈配置在更近似天然受質L•絲胺酸〇H 的位置，其與催化殘基相鄰（Asp_166和Arg_168)，可多少 回復硼酸的OH。該模擬結果隨後得到以下發現的支持： 當將PKA與這些抑制劑一起培養高達4小時，不添加競爭
的肽叉質（肯普他邁（Kemptamide) : LRRASLG-NHdSEQ ID ΝΟ·5)) ’ 2_1_和兩者皆具有受質功能，而D-非對映體22 較快被磷酸化。 這些硼酸抑制劑亦為受質的事實，藉著在有和無前置 培養兩者之細胞模仿條件下獲得極度扭曲的IC5G曲線，而 k侍更為清楚（在細胞模仿條件下ρκΑ和Src兩者都是比 在文獻模仿條件下更具活性的酵素）。在用以獲得這些結果 100 •200817327 、 的測定中，在受質培養期間結束時，藉著經由三個陽離子 基團（兩個Arg’s和N-終端）與磷酸纖維素濾紙結合，分離 P32磷酸化肯普他邁產物（從γ-Ρ32ΑΤΡ產生的^)，然後藉 著液體閃爍計數（cpm’s)，測量在濾紙上分離之磷酸化產物 的含量。硼酸抑制劑UL-l在其序列中亦具有兩個Arg，s， 並因此除了肯普他邁之外，亦與磷酸纖維素濾紙結合（雖然 不是完全一致的，因為一個帶較少的正電）。所以，當以抑 , 制劑來分析時，不僅計算所產生之磷酸化肯普他邁的量， % 還有同時產生之磷酸化抑制劑（例如參見下文的量。淨 結果疋獲彳于扭曲的ICw曲線，其顯示在某些情況下，在較 高抑制劑濃度下的淨”刺激，，。當在細胞模仿條件下與ρκA 前置培養4小時時，D非對映體&得到最大的表面，，刺 激”（7 1 %) ’接著是L非對映體2_L( 19%)，然後是一碳同系 物11(5%) ’表示這三個都是ρκΑ的受質（表m )。這些，，抑 制劑”潛在的受質行為，使得利用目前的測定，不可能精確 測量到它們的抑制效力。然而，從認證硼酸官能度的數據 I 中，似乎只與CH2基團背離（亦可進行硼酸非-肽Src抑制 劑的認證），降低了結合親和力和發揮受質功能的能力。
Ml
與
Ac^R-R-G-NH Υ 26 比較
石粦酸化的肯普他邁 磷酸化的U
石4 ®文化的月普他邁為SEq id nq:6。磷酸化的2_2_為SEQ 101 200817327 ID NO.4。藉著執行相同的測 π 士门 1一不加肯普他邁，並桉 π在圖4中所示在各個時間點停止反 劑I和12_為ΡΚΑ之受質 4不侧酸”抑制 所 失取初的速度動力學（因為受 貝耗盡和終產物抑制)，類似標準W受質，如肯普他邁。 ^父iL·和U，顯示在相同的敎下，以相同的賴受質 浪度’以及相同的細胞模仿測定溶液進行，而得以直接比
較cpm’s。圖式顯示〇異構體仏在一小時内喪失了最初的 速度條件’而L異構體L的線性似乎喪失得略慢一些， 暗示較慢耗盡起始材料。會由PKA將侧酸部分磷酸化是令 如泌是穩定的，足以在pH7.2/37t：測定培養下存活，然 後藉著在以1〇%TCA使反應酸驟冷之後，結合至磷酸纖維 素濾紙上，並以25mM磷酸（3X)沖洗磷酸纖維素濾紙來分 離。在磷酸和硼酸的混合酐上進行STN次結構研究，並發 現關於由硼酸和磷酸形成酐，成為充滿催化劑的固體表 面，以便在823 〇 K下將乙烷部分氧化成乙醛的類似假定（但 未證明），只有三個實驗和理論計算的參考文獻（zhanpeis〇v & Otsuka, 1992，Otsuka 荨人，1992，Murakami 等人，1990)。 人意外的，但更驚人的是所產生之膦酸，酸的混合肝(例 然而’該極為罕見的酐之前未曾在沒有固體表面下被合 成、分離或定出特徵。因此，這是一個新穎的酵素反應和 化學實體’對蛋白質激酶抑制劑設計有令人感興趣的可能 性。 下一類要探討的Μι官能度是自素基團。該官能基是 102 •200817327 極誘人的Μι候選者，有諸多理由：1)它是良好的氫鍵接受 者’且2)它降低代謝的速率，導致在活體内的益處。 已經準備_素官能度，並利用下文出示的抑制劑，作 為了肖b的]VI!模件來測試（參見實施例1，關於用以製傷該 化合物的化學)：叫14>-
使用在實施例1中陳述的測定程序，就Src抑制作用 測試該抑制劑。在表VE中出示所得的結果，其指出上述抑 制劑有4“撾之IC5G(在表狐中之u)。該抑制劑包括非·肽 支架（吲哚），以下述之篩選方法為基礎來選擇它。 上述砰估拴住Μ!的Src和PKA五肽支架，結果確認 各種定向的％基團，其可按照在步驟i中的指示，用來 篩選可能的非-肽支架（圖U。從可能的的選單中選出 硼I (½自22_)、膦酸鹽（得自^和胺基磺酸（得自幻，進行 Src非-肽支架篩選。在這些選擇中，已經證實硼酸％基 團適用於步驟1非-肽支架的篩選。 可用來設計非-肽Src抑制劑的最有用之晶體結構，它 不與ATP競爭’為天，然的Sre結構和IRm :肽：AMp_pNp 三元結構。關於下文討論的所有模擬研究，在呂出⑶⑽ Graphics工作站上使用SYBYL分子模擬套裝軟體。 因為…和IRTK結構僅用來作為設計非-狀支架和組 合庫的定性指引’從天然的Src和IRTK三元結構中切下 活性位置連同兩層周圍的殘基，類 ^ 土 題似先刖的PKA模擬研 究。使用比較同系物模擬技術（夂目 u V 麥見 Hutchins & Greer, 103 200817327 -I"1)，使用1RTK :肽：amp-pnp三元結構活性位置區作 為模板結構，指導Six結構背後之Src殘基序列424_418 的建造。在天然的Src晶體結構中弄亂這些殘基，並因此 不能藉X-射線看見。將它們再導入，因為它們有助於形成 肽受質的P+1和P+3結合位置，這對某些模擬研究很重要。 藉著X-射線看到在IRTK三元結構中的類似殘基，並直接 與已結合的肽受質產生交互作用。事實上，已結合肽受質 ( 的存在或許是在定位該序列時引導順序，使它得以被[射 線看見。然後使Six五肽受質Ac_Ile_Tyr_Gly_Glu_phe_NH2 (SEQ ID NO:1)(Nair等人，1995)進入Src活性位置内再2 度使用IRTK三元結構作為模板。然後以手工進行少許調 整，部分清理該複合體，加入所有的氫原子，加入適當的 幵v式和部分電何（經由Gasteiger Marsili法來計算），然後 使整個複合體接受300次循環的分子力學最小化，使用 Tnpos力場，類似先前的PKA模擬程序。在圖5中提供該 ( 模擬複合物的圖解表現。藉著以實驗評估側鏈範圍，調解 在該Src :肽和Six :抑制劑模型中的任何錯誤，以組合之 方式，配合在Src模型活性位置中其特定結合區之結構的 不確定程度（參見後文），粗略地調整其數目和多樣性。 如同在圖5中所示，將殘基424_418建造回Src内， 經由/5片型氫鍵與受質主鏈的交互作用，分別與p+i至p + 3 受質殘基、Gly-Glu-Phe-NH2產生交互作用（類似irtk肽 受質）。Lys423參與兩個重要的交互作用：丨）在p 〇 Tyr苯 環上方的/?和r CH/s折疊，參與氫鍵之交互作用，以及2) 104 200817327 該侧鏈剩下的CH τντττ + • 2 2-NH3，如指示向遠處延伸與ρ + 2 Giu 側鏈形成鹽橋。由在笨環下方的pr〇 425和在苯環上方的 部分Cys 277側鏈形成剩下的p 〇…忌水性結合凹窩。使 用大型組合肽SlX受質庫，Songyang等人（1995)發現阳 位置最常選用的側鏈為Gly，然後是Glu。本模型指出如 在圖5中所示，P+1Glu侧鏈可與鄰近的Arg 469形成趟橋。 先前，研究者發現P+2位置只能選用Glu，但本模㈣出 (▲側鏈與Lys 423側鏈形成鹽橋。在p + 3位置，最佳的是 心，而本模型指出該側鏈與Phe 424側鏈形成堆疊交互作 用。在P-1位置，S〇ngyang等人發現He是最佳的殘基， 然後是Va卜再來是Leu。模型顯示與ρβ1側鏈結合的忌水 性凹窩，主要是由Trp 428、Ala 390和；Leu 347形成。可 能預期POTyr側主鏈會在有催化資格的複合體中與活性 位置產生強交互作用（經由氫鍵），因為酵素經常在靠近即 將發生反應之區域形成較關鍵性的交互作用。IRTK三元複 :合體並未顯示對P0TyrNH或羰基有良好的氫鍵。在IRTK 結構中最接近該交互作用的候選殘基是Asn 1215，其中側 鍵NH2離TyrM基氧為3·71Α。當IRre三元結構重疊在Src 天然結構上時，使用在發明背景和意義章節中提及的四個 殘基’發現來自Src結構的Asn 468位置非常靠近類似的 IRTK Asn 1215。這暗示該保留殘基正扮演重要的角色，並 可移動一點點（即大约1A)更靠近在催化活性複合體中的受 貝P〇NH和羰基，而形成在圖5中指出的氫鍵交互作用。 袁後’將催化Arg 388和Asp 386正確安置在Src模型中， 105 200817327 催化r -磷酸從ATP轉移到Tyr OH。 現在可使用Src:肽受質複合體，製作可能的非-狀支 架的模型，並判定專一性元件的較佳取代位置，全都利用 適當附接的M1官能度，在選擇新支架之前以實驗評估。 亦使用mTKUMP-PNP三元結構，製作這些可能的 支架和較佳取代位置的模型。藉著在圖j中概述的計畫之 後1用適當的專-十生元件進一步發展它^可廣泛地利 用這些支架來發展選擇性PTK抑制劑。 以該src:肽受質模型評估的第一個非_肽支架是萘支 架。這是雙環芳香族支架首次用於非_肽PTK抑制劑，它 不與ΑΤΡ競爭。藉著發展1RTK和EGF受體ΡΤΚ之非·肽 抑制劑（Sapemein等人，1989)，證實該蔡支架對本目標的 用處接著使用IR_TK二元複合體’使該支架適用於Src 抑制作用（參見Marsilje等人，2000)。藉著先對在肽受質上 的原子a-d進行最小平方擬合，如在圖6中的指示，使萘 支架接靠i Src活性位置内。這樣子藉著在圖6中以箭號 表示的環化作用，使萘支架與肽受質產生關連，並以附接 勺OH取代又貝Tyr NH。這基本上是與如同在Marsilje 2〇〇〇 中“述將該支采接罪至IRTK結構内相同的過程。然後從 活性位置中刪除肽受質，再按照指示將各種％官能基和 專性兀件S2和Ss加至支架上，然後將複合體分別最小 化持績3 〇〇次循環。亦使用相同的過程設計異喹啉和吲 哚支架，在圖7中指出它們的結合模式。 在所有34些製作模型的複合體中，選擇性元件S2由各 106 200817327 種忌水性側鏈組成，其可結合在與受質P-1 Ile側鏈相同的 凹窩，而選擇性元件I由各種分子片段組成，其可結合在 狀受質結合位置的P+uP+3區（圖5)。因為％在那裡結 合的活性位置區，在所有蛋白質激酶中是高度保留的，故 先前使用肽支架確認的官能基之小選單，便可作為最 初的M!基團，在指定位置附接支架。在兩個選擇性元件 結合位置之中’ S2之忌水性結合空腔的結構是已知的，在 Src模型中比S3的P+1到P + 3結合區更令人信賴。這是因 為S3結合位置部分是藉著比較同系物模擬來建造，但^ 位置則與藉著天然Src之χ_射線判定的結構沒有多大改 變。由於對、S2和S3的模擬結合位置有不同程度的信 心’調整組合庫多樣性，使得在組合庫中有最大變化和侧 鏈數目的是S3位置，接著是&位置，然後是Ml。 在表IV中列舉使用Μι官能基，以實驗確認有希望之非 -肽支架的Src結果。 107 200817327
表IV 最初之步驟1的結果 在細胞模仿測定中的SRC抑制％ 抑制劑 2mM RR-src的抑制％ 在抑制劑濃度0下 抑制劑 2mM RR-src的抑制％ 在抑制劑濃度0下
59 (1 mM) 13(100μΜ) IC50=950|iM Kj= 554 μΜ 31(ImM) 1050=1.6 mM Kj-963 μΜ 迎 HO—,卜、 附接鍵 非-ATP競 爭性的 非-ATP競 爭性的 35
36 10(100 μΜ) 12(100μΜ) 14 (1 mM)
13(500μΜ) 38 占 非一ATP 競，62 (500 μΜ) Η〇〆、 .. 爭性的
0(100μΜ)
11 (500 μΜ) 13(100 μΜ) 14(100μΜ) 在表IV中的數據允許獲得若干結論：1)將適當的Μι基 團附接至支架（例如11_和a&)，可獲得低、但可測量的抑 制效力。2) 1 mM抑制劑濃度對於該類型篩選而言，比想要 的更高，但1〇〇μΜ又太低。攜帶Μι基團之支架的篩選最 適合在500μΜ下進行。3)硼酸、胺基磺酸和膦酸官能 108 200817327 基，已經分別使用PKA五肽支架（ϋ，表冚和&，表j )或Src 五肽支架（1A，表Π )確認，當放在萘環的2位置上時（獨立 地為11、l和M)，得到可測量的活性，在模型萘抑制劑： Src複合體中確認較佳的Μι位置（圖6)。移動硼酸或膦酸 基團至1位置（21_或會降低活性。4)相關的Ml磺醯 胺官能度，其在PKA五肽支架上是不良的（2&殳，表j )， 當附接在萘支架的2(21)或1(11)位置時也是不良的。在萘 2位置處的磺酸類似物（2^)，是完全無活性的，甚至在lmM 下。5)可利用苯并呋喃（i£)或苯并噻吩（丛）支架置換萘支 架，當將硼酸Ml基團安置在類似萘上2位置之處時，不 會顯著地降低活性。6)當附接在由模擬結果（圖7)指示之異 喹啉（11)或吲哚（M)支架上的位置時，硼酸Μι基團亦提供 活性化合物。然而，吲哚支架明顯優於異喹啉支架，暗示 Asn 468捐獻氫鍵的能力（參見圖7)對較高活性是很重要的 (這需要質子化了的異喹啉，它不受相鄰電子的歡迎，因而 取消酯基團）。藉著考慮肽受質可將捐贈氫鍵的肽鍵NH安 置在類似位置（圖6)，並藉著發現位在相等位置的酚系 OH(圖6)改善了效力（酚系〇H，s是比接受者好很多的比鍵 捐贈者），亦支持該結論。8)當直接與其他的Μι基團比較 時，棚酸基團是較優秀的（例如&對2^^、1^對过）。9) 將聯苯基支架塑造成Six和IRTK活性位置，並發現該支 架有希望的結合模式。利用聯苯基支架發展組合庫（參見 Pavia等人，1996)，而模擬結果得到鼓勵。因此，以硼酸 基團評估對_和間⑽異構體。兩種聯苯基化合物均 109 200817327 • 、示/、农佳祭删酸（u)相等的效力，並因此提供另一支架 4何學（兩個苯環不是平面的），可進行更多的評估和發展。 因為僅附接Μι基團的裸露支架，經常只有低結合親 和力，故判定2-萘硼酸和胺基磺酸抑制劑的IC5G，s* Ki，s， 以確保獲得典型的劑量/反應IC5Q曲線。該分析提供了在許 夕較有效之抑制劑中看到的典型劑量/反應曲線。這些單純 抑制劑的ICSG’s和Ki，s，亦證實硼酸抑制劑2^比胺基磺酸 ( 頒似物&更有效，並具有大約554μΜ的心。 在加工這些單純的抑制劑使其更精巧之前，下一個要 處理的問題是它們的抑制模式，特別是它們是否為八丁^-競 f性抑制劑。在萘抑制劑&和1的案例中，隨著分三次 支曰加ATP濃度至最高lmM，監視它們的ICw，s。為了作比 車乂，亦監視五肽膦酸Src抑制劑^(表…的IC〜。若有任 何的抑制劑與ATP競爭，它們的IC5Q，s應隨著Ατρ濃度 知比例增加（即虛線）。如同所示，當ΑΤΡ濃度增加時，所 〔 有一種抑制劑的lc^’s基本上仍保持不變，證實它們是非 ATP-競爭性抑制劑。利用吲哚硼酸抑制劑，進行非常類 七乂但便宜终多的分析（市售的Src很貴）。在此情況下， 以在恆定500μΜ抑制劑濃度下的ls一監視抑制％，但增加 ATP辰度至200、500和ΐ，〇〇〇μΜ。再一次，抑制劑效力並 沒有隨著逐漸增加的ΑΤΡ濃度而降低，證實也是非_ATp 競爭性的。 在步驟1中獲得的初步結果，暗示有可能確認有希望 的支架，以便利用該程序進一步加工。步驟丨中最大的不 110 200817327 確疋性是這樣確認出的一些支架，可能並非以先前模擬評 估曰示之方式結合。這基本上是”偽陽性（以1^ p〇sitive)，，的 問題。這些，，偽陽性，，在步驟2中可能會不及格，此時使用 杈型複合體作為指引，就改善結合來評估之。在步驟丨中 可接X —些偽陽性結果，因為容易得到僅附接Μι基團的 裸政支架。為了進一步發展抑制劑，每一次新的支架都需 要完成步驟2和3，才可回到步驟丨。每一次重複步驟i都 可以使用所產生的最佳Μι。現在，已經使用硼酸％基團， 因為匕具有經過證明，給予裸露支架可測量之活性的能 力。再者，硼酸％基團對與保留之催化殘基的共價和非一 4貝又互作用，&供了數個有趣的可能性，因為它可以： 1)水口，2)與s含電子的活性位置原子形成硼酸鹽複合體， 及/或3)被磷酸化，然後與活性位置親核體反應，或參與額 外的非-共價交互作用。關於在步驟2中的首次努力，從在 f IV中的數據’選出萘和吲哚支架作& Μ聯苯基支架也 疋較佳的支架）。值得注意的還有萘丙胺酸和類似物，可順 利地取代在SrC肽受質中的p㈣胺酸（例如，參見Αΐ__
Pez等人，199 8) ’更支持萘和相關支架可結合在p 〇位 置的概念。 在比較奈對叫卜朵支架利用侧酸％基團的結果（即江對 过’表iv)時’ t朵捐贈氫鍵的nh及/或相鄰的醋基團， 似乎是提高效力的理由。所以，步驟2中的首要嘗試之一 疋在萘支架上，在藉著模擬結果暗示的相鄰位置處(圖6)， 加入經基基團和酿胺（利田 (判用\)。至於吲哚支架，優先製備 111 200817327 一些醯胺類似物，看看是否可利用S 2專一性元件增加效力 (圖7)。為了使合成這些起始類似物更容易，暫時用OH取 代硼酸％基團。亦知道OH基團會與催化殘基交互作用， 如同Μι基團所需，因為它是天然受質，藉著與催化殘 基之交互作用，加速它的磷酸化速率。在表V中提供一些 起始類似物所得的結果，連同在細胞模仿Src測定中，對 兩個文獻Src抑制劑1和的並排比較，報告說它們是 非-ATP競爭性的。在Marsilje 2000中描述了這些結果中 ί 的一些，以及額外的類似物。
表V 最初之步驟2的結果
在細胞模仿測定中的SRC抑制％ 抑制劑 2mM RR-src 的抑制％ 抑制劑 2mM RR-src 的抑制％ 在抑制劑濃度0下 在抑制劑濃度0下 _ ΗΟ、 Qi ㈣ 41 47(100 陶 Μ L.OMe 40(500_ 0H 0 f D 112 200817327
(Μ,) (Μύ
非-ATP 鄰: 39(100μΜ) 競爭性的 間 對
對：23(Η)0μΜ) (Μ,)
OH 鄰：43(100μΜ) 30 (100 _ 45( 100 μΜ) (Μ,?)
“ νη Ο Huang 人 OH 鄰丨:24(丨ΟΟμΜ) 74(100μΜ) 54(100μΜ)
鄰:42(Ι00μΜ) 間：在進行中 對：42(100μΜ) 30(Ι0ΟμΜ) 文獻118 ηΜ
抑制劑£0_和類似物（Huang等人，1995)是特別有趣的， 因為亞胺色烯支架是萘支架的近親，並以模型為基礎，預 期其結合模式是非常類似的（圖6)。部分是因為該密切類 似，如在表V中所示，檢查羥基苯胺與萘和吲哚支架的醯 胺。再者，在Src活性位置中利用這些羥基苯胺醯胺衍生 物的模擬研究，指出經基基團可能能夠參與與Src Phe 424-Ala 422主鏈肽鍵的氫鍵交互作用，類似肽受質（參見 圖5)。這些模擬研究亦指出同種的羥基苯曱醯胺應該是有 活性的，而更重要的是提供取代位置（即苄基的碳）來附接 側鏈，以便在P-1側鏈凹窩結合（例如與Arg 469，圖5)。 113 200817327 在表V中的數據容許獲得下列的結論：1)在萘和，味 支架上加入醯胺延伸，可增加效力，如同藉著這些支架結 合在Src活性位置中之模型所預言的（在&對主2__間&47對 1的案例中，約5-倍）。2)在萘支架上與醯胺相鄰處添加 罗里基基團’增加了效力（約5-倍，間對44)，如同藉著Src 模型預言的’並亦暗示Asn 468與該OH產生氫鍵。3)將 Μ! OH基團從在Src模型中預測為最佳的位置移至鄰近的 位置，降低了一個數量級的效力間對^)。句吲哚支架 對羥基苯胺延伸之區域化學的感受性比萘支架更差M8對 4i)。5)萘和吲哚支架接受一個碳，由使用羥基苯甲醯胺提 供認證（41對對姐）。6)萘支架的兩個％羥基區位 異構體均疋非"ATP競爭性的（參見Marsilje 2000)。7)發 現所有的甲基羥基苯胺和羥基苯甲醯胺抑制劑都是活性較 低的，暗示在醯胺延伸中的羥基基團具有氫鍵捐贈者之功 旎。關於适一點，值得注意的是在其他Src肽受質組合庫 研九中確w Ser和Thr*為兩個在p+2位置的最佳殘基 (Alfaro-Lopez等人，1998)，暗示醯胺延伸〇H有藉著模擬 研究暗示之Ph“24-Ala 422肽鍵以外的其他結合機會。8) 先前在文獻中揭示之最有效的非韻競爭性、純& 抑制劑（Μ) ’當在細胞模仿測定條件下測試時，$全不像 所報告的那樣有效（由Huang箄人】土山 ng 寺人，1995 報告 lc5()=118nM， 對在ΙΟΟμΜ下僅有30%抑制 制作用），且比一些現行的抑制 劑（尤其是ϋ-間）效力# #，4 1 更低包括大多數類似抑制劑(50對 H)。在其測定中報告關於紉 之备基區位異構體的結構_活 114 200817327 性-關係（SAR)(Huang等人，1995)，亦不符合對相關萘抑制 劑所獲得的SAR。例如，他們最有效之萘抑制劑11-間的 亞胺色烯類似物，在他們的Src測定中，效力比包L更低230-倍。萘支架勝過亞胺色烯支架的重要優勢是其容許加上極 為想要的S2專一性元件，以便接近P-1忌水性位置（參見 圖6)，而在亞胺色烯支架上的類似位置不能被取代，因為 它被環氧原子佔據。 可針對其他文獻的非-ATP、非-肽Src抑制劑，進一步 校正在Src細胞模仿測定中的抑制劑效力。兩個額外實例 為5i(ST 638，Shiraishi等人，1989)，其為三經異黃酮 (erbstatin)類似物之”酪胺酸激酶抑制劑（tyrphostin)，，家族的 成員（參見Lawrence & Niu，1998)，以及天然產物ρτκ抑 制劑四經反式芪（piceatannol)5i(Thakkar等人，1993)。在 細胞模仿測定中，所有這些已知的抑制劑之效力均比曾經 報告的更低，暗示從達到高效力的觀點來看，該測定是特 別苛求的。使用單一濃度（一式三份）來進行Src抑制劑的 初步測試，因為市售的Src太貴，以致於不能對每個抑制 劑做完全的ICm曲線。然而，應該提到ic5G劑量反應曲線 不是線性的，且在1〇0μΜ大約50%抑制和在1〇〇μΜ大約9〇% 抑制之間的差異，事實上是10的因數，而不是2的因數（例 如ϋ對間）。所以，文獻src抑制劑5X1-5^的活性比現 行最有效之抑制劑4Λ-間更低超過一個級量數。 在這些抑制劑效力的文獻報告中發現了矛盾，較早對 PKA抑制劑描述了對測定條件的敏感性，以及在許多實驗 115 200817327 至彳市售蛋白質激酶測定套組中缺乏一致性，使該被忽 略、但實地很重要的問題突顯出來。雖然由本發明產生的 抑制劑可能在其他的測定條件下是較有效的，但應該使用 細胞模仿測定’其儘可能接近地模仿細胞内物化條件，在 廷擇化合物進行整個細胞或組織測定之前，根據初步效力 和等級指引來評估抑制劑。如同稍後會更詳細討論的，從 細胞模仿測定中，到目前為止最有效的以萘為基礎之抑制 劑（即41間，IC50=18ihM且KflOpM)，在專一地阻斷 pp6(T〜e刺激之細胞增殖中也是有效的，具有大約2祚μ的 欠員似ICw。這暗示不僅細胞模仿Src測定預告，該類以萘 為基礎的抑制劑亦可輕易通過細胞膜並抑制細胞内的 Src 〇 可利用石朋酸或鹵素％基團代替Μι OH及/或以S2忌水 性專一性元件附接，以便在Src pq位置結合，如在圖6 和7中解釋的，製備上述一些萘和吲哚抑制劑的類似物。 然後可按照下述，使萘和吲哚支架進行至步驟3。每一次 以得自步驟1的新支架重複步驟2，利用先前支架發現的 最佳選擇性元件S2及/或S3，將會被用在步驟3之組合庫 中。即使M!、S2和S3的最佳組合，對每個支架也可能是 不同的，發現最適合先前相關支架的那些（例如從萘到吲嗓 支架）’應該也適合用來當作步驟2中新支架的較佳起始專 一性元件。每一次將重覆相同的過程，需要嘗試其他的支 架，直到Src抑制劑，或後續額外的在治療上很重要的pTK，s 之抑制劑達到足夠的效力、選擇性和適當的藥學特性為 116 200817327 止。 在Marsilje 2000中描述了用來製備萘抑制劑的一些化 學。為了在得自表V之Src抑制劑中附接硼酸官能度代替 Μ!羥基基團，使用Pd(0)-催化的交叉-偶聯方法，其中可 將三氟磺酸芳基酯（Ishiyama等人，1997)或芳基鹵化物 (1311丨7311^等人，1995)與市售的二硼頗哪醇酯偶聯。在圖8 中提供最近完成的解釋實例。 當 在圖8中出示的實例，證實有可能將在位置之較 1 不受阻礙的OH選擇性地三氟績酸化，且這已經藉著它移 往Μ，利用後續取代圖案的〗H NMR確認來證明。然後按 照指示’使該單三氟績酸鹽51_帶有想要的硼酸&。亦對 之區位異構體進行相同的反應順序，其相當於得自表V的 抑制劑4^。可依照在圖9中出示的合成計畫，以便將忌水 性S2選擇性元件附接到萘支架上。 為了以96-孔淺盤格式合成該支架的組合庫，可將萘 化學轉換為固相製備。到目前為止，已經對以44代表之低 活性的萘區位異構體進行模擬化學，因為該化合物可根據 在Marsilje 2000中的描述，輕易從市售的3,5_二羥基_2_萘 甲酸獲得。在圖1〇中出示迄今成功的模擬反應。 這些模擬反應證實有可能偶聯萘支架和Wang樹脂 ，然後對三氟磺酸鹽進行化學[在本案例中，Pd(〇)_催 化與硼酸酯44一的交叉_偶聯]，接著在溫和的條件下切開 。亦可將在&中的酯皂化，進行後續的偶聯反應，形 成含有S3選擇性元件的醯胺。 117 200817327 萘支架目前提供三個將在組合庫中探究的不同位置， M,、S2和I。固相組合化學利用孔淺盤反應器，類似 在先前研究令使用的那種（Pavia等人，1996)。以使用最 多數目和多樣化的側鏈’其次是&，然後是％，之前已 討論過原因了。-種可能的全面性合成策略是以上述的 合成模擬研究為基礎，製備在圖u中出示的這些庫。 當然該路徑若出現問題，有許多其他的可能。例如， 若Mitsunobu偶聯得到結果產量太低（因為增加附加之 相鄰丙烯基基團的空間聚積-但對於在圖1〇中獲得92%裝 載或許沒有問題），此時可經由羧基基團，而非〇h，使用 醯基磺醯胺”安全制動（safety catch)”交聯劑，將支架拴在 樹脂上（Backes等人，1996)，而最後形成醯胺（可在藉著通 過酸性樹脂過濾切開之後，移除過量的胺）。同樣的，若想 要在苄系醚的存在下還原烯烴至纽），但發生問題，= 可使用其他交聯劑及/或樹脂。在圖丨丨中提出之化學的首 要用途，是簡單製備96個醯胺的庫，含有硼酸牝基團， 沒有適當的丙烯基側鏈，所以這兩個可能的複雜化不會是 最初的問題，並可能很快地確認最有希望的S3元件。 為了進一步研究，確認出至少14個S2忌水性側鏈（包 括直鏈、分支和環狀的）（若亦探究相對應的烯烴則為Μ 個），以製作在Src模型之P-1位置内的候選側鏈模型為基 礎（圖6)，並在所需鹵化物的商業產品上製備相對應之 Wittig試劑。至少使用96個市售胺類，其將提供可能的& 專一性元件，包括：1)碳氫化合物（4)，2)含有氫鍵接受者 118 200817327 的烧基基® (4) ’ 3)含有氫鍵接受者和捐贈者兩者的燒基基 團^ 9)尸4) 3有氫鍵接受者和捐贈者的烧基，芳基基團（μ)， :)芳基氫鍵接又者和捐贈者（1())，6)雜環的氫鍵接受者和捐 ”（））含有陽離子基團的側鏈（4)，8)含有陰離子基 團的側鍵（9)，以及得自抑制劑仏間的3-胺基酴側鏈，做 為Src活性的内部對照。S3包括各式各樣的胺，並非過度
爲子本文中的庫’而是因為在Src模型中對該結合位置有 較咼程度的不確定性。 以大致幾乎相同的方式，將吲哚支架發展成組合庫。 在此h况下使用,σ朵NH作為附接Wang(或其他）樹脂的 繫鏈點，因為已知類似的Mitsun〇bu反應（Bhagw討& Gude， 1994)。已經發展出大量合成經取代之吲哚的合成方法，並 已經設計出一條納入I忌水性側鏈的路徑（參見圖 7)(Ezquerra 等人，1996)。 可將在反應2中從中間物处形成的三氟磺酸鹽（triflate) 官能度（圖11)，轉變為胺（W〇lfe等人，1997)，然後使一系 列醯胺或其他的胺衍生物依照在圖12中出示的反應順序。 事實上，三氟磺酸鹽是多用途的合成把手，而一樣可以轉 變為其他的官能基。 當可利用胺22„時，可利用該進一步發展的支架評估已 知之M〗’ s(例如得自表V之Src抑制劑1S«的胺基績酸和表 瓜之醯胺酸12)，並評估一些可能成為M^s的新穎胺衍生 物。例如，可經由合成方法（參見Lai等人，1996)，得到在 結構中出示的水合三羰基醯胺Μι基團（及其非-水合前 119 200817327 •驅物），並可與保留之催化殘基形成各種有趣的交互作用。 依據上述的模擬過程，在Src和IRTK活性位置中模 擬在圖13中出示的一系列含羥基之硼酸Μι基團的類似 物，並發現圖解之交互作用/結合模式的一些有趣可能性。 藉著將硼酸磷酸化，獲得額外的有趣可能性（例如自殺型抑 制作用經由所得之混合酐與活性位置親核體的反應）。在 Tyr-模仿苯環中出現額外的羥基基團是必要的，並經常出 現在許多PTK抑制劑中（例如四羥反式芪公，表v)，並顯 示對PKA膦酸鹽抑制劑之側鏈是有益的（例如l對1和主， 表I )。所以，在硼酸抑制劑設計上添加一或多個〇H，s， 如同在圖13中說明的，可能大大地增加了效力。這些〇H 基團亦將延伸棚酸侧鏈，超過催化性Asp和Arg殘基，但 不受以石反氫化合物覆蓋它們的懲罰，這對於PKA硼酸同系 物是可能的事（21和2A，表Π)。羥基硼酸76和77之一可 能路徑是利用Mattrson的手性硼酸酯認證法（例如，參見
Matteson 等人，1987，1988 & 1990)。 因此，在本發明較佳的具體態樣中，藉著將第一模件 附接到肽支架上，產生第一模件。確認一或多個官能基， 其優先與蛋白負激轉之催化殘基結合，其中該一或多個官 能基中至少有一個是_素。此外，將第一模件與第二模件 混合，使該第二模件取代肽支架。 較佳的第一模件具有二或多個官能基，包括_素和一 或多個額外的官能基，如棚酸基團、經基基團、膦酸、胺 基磺酸、胍基團、羧酸、醛、醯胺和羥甲基膦酸。更佳的 120 200817327 額外官能基是硼酸基團、經基基團或酿胺 醯胺基團是鄰位三羰基醯胺。 再更么的 車又<土的弟二模件包括十朵、蔡、聯苯基、里 并呋喃和苯并噻吩。 "土啉本 明的…的弟-核件為十朵或萘。在本發 ―體悲樣中’可將-個以上的第一模件盘 件結合。此外，第一槿杜可目士 —』 什/、弟一核 鏈m奸 杈件了-有包括-到三個碳原子的直 、长^ 、 、牛^弟一杈件。在另類的具體態樣中，
( 以鼠、氧或硫原子取代在直鏈中的一個碳原子。 本發明之方法和化合物可廣泛應用在任何蛋白質激酶 上、。較佳的蛋白質激酶是蛋白質赂胺酸激酶和蛋白質絲胺 “文酶(a_k.a_絲胺酸'蘇胺酸激酶）。較佳的蛋白質酪胺酸 激酶是PP60…、p56w、p55〜、ZAp激酶、血小板衍生 之生長因子叉體酪胺酸激酶、Bcr_Abl、VEGF(血管内皮生 長因子）受體㈣酸激酶、上皮生長因子受㈣胺酸激酶和 類上皮生長因子受體酪胺酸激酶。較佳的絲胺酸蛋白質激 酶包括MAP(有絲分裂激活蛋白質）激酶、蛋白質激酶c和 CDK(週期素依賴性蛋白質激酶）。 本發明之方法可進一步包括將一或多個專一性侧鏈元 件加至第一和第二模件的組合中，如上述。專一性侧鏈可 增加抑制劑的效力和專一性。上文以及在之後的實例中， 描述了適當的專一性側鏈（上文結構的R基團）。 一旦確認有希望的第二模件，便不一定要重複該方法 的所有步驟。可改而修飾第一模件、專一性侧鏈或兩者之 組合，以便改良原始抑制劑，即當與未經修飾之第一個抑 121 200817327 制劑相比較時， 制劑。 -有増加抑㈣白質激酶活性之能力的抑 言受計本方味 激酶結合來=,以便優先提供不會藉抑制ATP與蛋白質 結合而產生作ΪΓ的蛋白質激酶抑制劑。藉著抑制atp 通常缺少專Γ蛋白質激酶抑制劑，可能是有效的，但 此，抑制蛋白質、數^因此經常不是良好的藥物候選者。因 白質激酶結合的蛋=不抑制或僅些微抑制Ατρ與蛋 的蛋白質激酶抑制劑是較佳的。 法二C態樣中，本發明提供抑制蛋白質激酶的方 吏蛋白貝激酶與具有至少一個第一模件，盆 ::::夠二'蛋：質激酶之催化殘基共價或非共價結合的 支芊：第：r:!—或多個官能基包括豳素’以及提供非-肽 :二的化合物接觸。該至少-個第-模件與第 -杈件的組合，抑制了蛋白質激酶活性。 ^發明更提供一種在個體中治療對蛋白質激酶抑制劑 血個;:：的方法。將有效劑量的蛋白質激酶抑制劑投 二=。«白質激酶抑制劑具有至少一個具有一或多個 吕月b基之弟一模件，古女营甘 ^ W 此基V刀別能夠與該蛋白質激酶之 :化殘基共價或非共價結合，其令該一或多個官能基包括 以及提供非·肽支架的第二模件，其中該至少-個第 一模件與第二模件的組合，抑制了蛋白質激酶活性。 本心月另彳面疋-種確認蛋白質磷酸酶之抑制劑的 方：。該方法涉及提供至少—個具有—或多個官能基之第 才果件》亥g此基刀別症夠與該蛋白質填酸酶之催化殘基 122 200817327 共價或非共價結合，將至少一個第一模件與至少一個提供 非-肽支架的第二模件混合’形成—或多個第一和第二模； 的組合，就蛋白質磷酸酶抑制作用_選一或多個第一和第 二模件的組合，並選出抑制蛋白質磷酸酶活性的第一和 二权件之組合。 上文描述了適當的第-和第二模件與官能基。在1 佳的具體態樣中，至少一個第一模件包括齒素，最好是氟。Λ
在下文表Μ中出示了適當之非-肽蛋白質磷酸酶抑制劑的 例。 、 適當的蛋白質磷酸酶包括但不限於ρτρ_1Β。在例如 Zhang，2002 ; McCluskey 等人，2〇〇2a ; zhang 2〇〇1 ;
McCluskey 等人，2001 ; Pestell 等人，2〇〇〇; M〇Uer 等人， 2000 ; Ripka，2000 ; Kennedy，1999 ; Johnson 等人，2002 ;
McCluskey 2002b中描述了其他適當的蛋白質磷酸酶。 如上述，設計該方法優先提供與受質肽結合位置結合 的磷酸酶抑制劑。 本發明亦關於一種抑制蛋白質磷酸酶的方法。使蛋白 質磷酸酶與包括至少一個具有一或多個官能基之第一模 件’該官能基分別能夠與該蛋白質磷酸酶之催化殘基共價 或非共價結合’以及提供非_肽支架之第二模件的化合物接 觸。该至少一個第一模件和第二模件之組合，抑制了蛋白 質磷酸酶活性。 在一具體態樣中，該化合物具有下列的式羾： 123 200817327
(式皿），其中I到r7可能是相同或 不同的，並選自由 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)ORb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Re、NRaP(0)0RbRe、NRaP(0)ORbORe、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)ORaORb、B(OH)2、i 素、芳基、雜芳基、 聯芳基、雜聯芳基、雜環化合物，以及最好具有從1到20 個碳原子的烷基（分支、環狀或未分支的）所組成之群組， 可視需要含有雙或三鍵，並可視需要以雜原子或其他官能 基取代，如羧酸、羧酸酯、醇、醚、硫醚、醯胺、硫代醯 胺、脲、尿烷、亞颯、颯、膦酸、膦酸酯、次膦酸、次膦 酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳基，或R5和 R6 —起形成雜環化合物。Ra、Rb和是相同或不同的， 並選自由Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和烷基（分 支、環狀或未分支的）所組成之群組，其可視需要以雜原子 或其他官能基取代，如羧酸、羧酸酯、醇、醚、硫醚、醯 胺、硫代醯胺、脲、尿烷、亞砜、砜、膦酸、膦酸酯、次 膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳 基。應瞭解任何h到R7和Ra到Re，均可以是經取代或未 經取代的。在較佳的具體態樣中，R3為鹵素，最好是氟。 124 200817327 在另一具體態樣中，r6或r7中至少有一個是 R§ Η·ι§
V R"其中R/為附接點，並為（CH2)X，其中X
為從0到10,0112(：11011、(：11(0：113)(1^異構體）或（：11((：^13)(8-異構體），且每個R9到R13是相同或不同的，並選自由Η、 C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、 〇C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、NRaP(0)0Rb0Rc、 NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)2ORa、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、 B(OH)2、鹵素、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環 化合物，以及最好具有從1到20個碳原子的烷基（分支、 環狀或未分支的）所組成之群組，可視需要含有雙或三鍵， 並可視需要以雜原子或其他官能基取代，如羧酸、羧酸酯、 醇、醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烧、亞颯、礙、 膦酸、膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、 聯芳基和雜聯芳基。Ra、Rb和Re是相同或不同的，並選自 由Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和烷基（分支、環 狀或未分支的）所組成之群組，其可視需要以雜原子或其他 官能基取代，如羧酸、羧酸酯、醇、醚、硫醚、醯胺、硫 代醯胺、脲、尿烷、亞砜、砜、膦酸、膦酸酯、次膦酸、 次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳基。應 125 200817327 瞭解任何R9到R13和1到Re均可以是經取代或未經取代 的。在較佳的具體態樣中，每個R9到R13可分別選自由 OCH3、OCH2CH、H、CH3、OH、CH2OH、CF3、OCF3、CFO、 c6h5、oc6h5、OCH2C6H5、OCH2CH2CH3、CHO、co2h、 C02CH3、CH2C02H、CH2C02CH3、N02 和鹵素所組成之群 組。 在進一步的具體態樣中，至少一個R6或R7為
其中星號代表與氮的附接點。 在更進一步的具體態樣中，該化合物具有式IV :
(式IV)，其中Ri到R7分別是 相同或不同的，並選自由H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)ORb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Rc、NRaP(0)0RbRe、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、_ 素、芳基、雜芳基、 聯芳基、雜聯芳基、雜環化合物，以及最好具有從1到20 個碳原子的烧基（分支、環狀或未分支的）所組成之群組， 126 200817327
可視需要含有雙或三鍵，並可視需要以雜原子或其他官能 基取代，如羧酸、羧酸酯、醇、醚、硫醚、醯胺、硫代= 胺、脲、尿烷、亞颯、颯、膦酸、膦酸酯、次膦酸、次膦 酉欠Ιθ石朋I、务基、雜务基、聯芳基和雜聯芳基。R、R 和Rc可以是相同或不同的，並選自由Η、芳基、雜芳美、 聯芳基、雜聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的）所2成 之群組，其可視需要以雜原子或其他官能基取代，如羧酸、 羧酸酯、醇、醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烷、亞 砜、砜、膦酸、膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、 雜芳基、聯芳基和雜聯芳基。應瞭解在上述侧鏈中的所有 開放取代位置，均可含有更多的取代。 本發明另一方面係關於一種在個體中治療對蛋白質磷 酉文i#抑制劑有反應之狀況的方法。將蛋白質碟酸酶抑制劑 才又與個體。蛋白質磷酸酶抑制劑具有至少一個具有一或多 個官能基之第一模件，該官能基分別能夠與該蛋白質磷酸 酶之催化殘基共價或非共價結合，以及提供非_肽支架的第 二模件。該至少一個第一模件與第二模件的組合，在個體 中抑制了蛋白質磷酸酶活性。 可在各種治療技術中使用蛋白質磷酸酶抑制劑，包括 但不限於第11型糖尿病、肥胖和癌症的治療（Zhang，2002 ;
McCluskey 等人，2002a ; Zhang 2001 ; McCluskey 等人， 2001，Pestell 等人，2000 ; Moller 等人，2000 ; Ripka，2000 ; Kennedy, 1999 ; Johnson 等人，2002 ; McCluskey 2002b)。 其他適合上述方法之化合物的實例包括： 127 200817327 其中任何個別的R’s可以是含有鹵素
r7 的Mi，且剩下的R基團可以是Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Rc 、 NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、 鹵素、芳基、雜芳基、聯芳基和烧基（分支、環狀或未分支 的），可視需要含有雙或三鍵，及/或雜原子或其他官能基， 如羧酸、羧酸酯、醇、醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、 尿烷、亞砜、砜、膦酸、膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼 酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳基。Ra、Rb和R。可以 是相同或不同的，並選自由Η、芳基、雜芳基、聯芳基、 雜聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的）所組成之群組， 其可視需要以雜原子或其他官能基取代，如羧酸、羧酸酯、 醇、醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烧、亞颯、礙、 膦酸、膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、 聯芳基和雜聯芳基。應瞭解在上述側鏈中的所有開放取代 位置，均可含有更多的取代； 200817327
\ ，其中任何個別的R’s可以是Μι，且剩 下的 R 基團可以是 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)ORb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Rc、NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)ORbORc、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、鹵素、芳基、雜芳基、 聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的），可視需要含有雙 或三鍵，及/或雜原子或其他官能基，如羧酸、羧酸酯、醇、 醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烧、亞颯、颯、膦酸、 膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳 基和雜聯芳基。Ra、Rb和Rc可以是相同或不同的，並選自 由Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和烷基（分支、環 狀或未分支的）所組成之群組，其可視需要以雜原子或其他 官能基取代，如羧酸、羧酸酯、醇、醚、硫醚、醯胺、硫 代醯胺、脲、尿烷、亞砜、颯、膦酸、膦酸酯、次膦酸、 次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳基。應 瞭解在上述側鏈中的所有開放取代位置，均可含有更多的
R? 取代； ％ 其中任何個別的R’s可以是Μ!，且 129 200817327
剩下的 R 基團可以是 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、OC(0)Ra、OC(0)ORa、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)ORb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Re、NRaP(0)0RbRe、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、鹵素、芳基、雜芳基、 聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的），可視需要含有雙 或三鍵，及/或雜原子或其他官能基，如羧酸、羧酸酯、醇、 醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烧、亞礙、礙、膦酸、 膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳 基和雜聯芳基。Ra、Rb和Rc可以是相同或不同的，並選自 由Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和烷基（分支、環 狀或未分支的）所組成之群組，其可視需要以雜原子或其他 官能基取代，如羧酸、緩酸酯、醇、醚、硫醚、醯胺、硫 代醯胺、脲、尿烷、亞颯、砜、膦酸、膦酸酯、次膦酸、 次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳基。應 瞭解在上述側鏈中的所有開放取代位置，均可含有更多的 取代；
剩下的 R 基團可以是 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 130 200817327 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Re、NRaP(0)〇RbRe、NRaP(0)ORbORc、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)ORa、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、鹵素、芳基、雜芳基、 聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的），可視需要含有雙 或三鍵，及/或雜原子或其他官能基，如魏酸、魏酸自旨、醇、 醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烷、亞砜、砜、膦酸、 膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳 基和雜聯芳基。Ra、Rb和Re可以是相同或不同的，並選自 由Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和烷基（分支、環 狀或未分支的）所組成之群組，其可視需要以雜原子或其他 官能基取代，如羧酸、羧酸酯、醇、醚、硫醚、醯胺、硫 代醯胺、脲、尿烷、亞颯、砜、膦酸、膦酸酯、次膦酸、 次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳基。應 瞭解在上述側鏈中的所有開放取代位置，均可含有更多的 取代；
，其中任何個別的R’S可以是Ml，且 剩下的 R 基團可以是 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、 131 200817327
NRaP(0)0Rb0Rc、NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)ORbORc、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)2ORa、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)ORaORb、B(OH)2、_ 素、芳基、雜芳基、 聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的），可視需要含有雙 或三鍵，及/或雜原子或其他官能基，如羧酸、羧酸酯、醇、 醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烷、亞砜、颯、膦酸、 膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳 基和雜聯芳基。Ra、Rb和Re可以是相同或不同的，並選自 由Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和烷基（分支、環 狀或未分支的）所組成之群組，其可視需要以雜原子或其他 官能基取代，如羧酸、羧酸酯、醇、醚、硫醚、醯胺、琉 代醯胺、脲、尿烷、亞砜、颯、膦酸、膦酸酯、次膦酸、 次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳基。應 瞭解在上述側鏈中的所有開放取代位置，均可含有更多的 取代；
剩下的 R 基團可以是 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Re、NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 132 200817327 S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、i 素、芳基、雜芳基、 聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的），可視需要含有雙 或三鍵，及/或雜原子或其他官能基，如羧酸、羧酸酯、醇、 醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烷、亞颯、砜、膦酸、 膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳 基和雜聯芳基。Ra、Rb和Rc可以是相同或不同的，並選自 由Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和烷基（分支、環 狀或未分支的）所組成之群組，其可視需要以雜原子或其他 官能基取代，如羧酸、羧酸酯、醇、醚、硫醚、醯胺、硫 代醯胺、脲、尿烷、亞砜、砜、膦酸、膦酸酯、次膦酸、 次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳基。應 瞭解在上述側鏈中的所有開放取代位置，均可含有更多的 取代；
1 % ，其中任何個別的R’s可以是，且剩 下的 R 基團可以是 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)2ORb、 NRaP(0)0Rb0Re、NRaP(0)0RbRe、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)ORaORb、B(OH)2、鹵素、芳基、雜芳基、 聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的），可視需要含有雙 133 200817327
或三鍵，及/或雜原子或其他官能基，如羧酸、羧酸酯、醇、 醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烷、亞砜、砜、膦酸、 膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳 基和雜聯芳基。Ra、Rb和Rc可以是相同或不同的，並選自 由Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和烷基（分支、環 狀或未分支的）所組成之群組，其可視需要以雜原子或其他 官能基取代，如叛酸、緩酸酯、醇、謎、硫_、醯胺、硫 代醯胺、脲、尿烷、亞砜、砜、膦酸、膦酸酯、次膦酸、 次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳基。應 瞭解在上述側鏈中的所有開放取代位置，均可含有更多的 取代；
其中任何個別的R’s可以是，且剩下 的 R 基團可以是 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)ORa、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、OC(0)ORa、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Rc、NRaP(0)0RbRe、NRaP(0)ORbORc、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、-素、芳基、雜芳基、 聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的），可視需要含有雙 或三鍵，及/或雜原子或其他官能基，如叛酸、竣酸S旨、醇、 醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烷、亞颯、砜、膦酸、 134 200817327 膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳 基和雜聯芳基。Ra、Rb和Rc可以是相同或不同的，並選自 由Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和烷基（分支、環 狀或未分支的）所組成之群組，其可視需要以雜原子或其他 官能基取代，如魏酸、魏酸醋、醇、喊、硫、酿胺、硫 代醯胺、脲、尿烷、亞砜、砜、膦酸、膦酸酯、次膦酸、 次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳基。應 瞭解在上述側鏈中的所有開放取代位置，均可含有更多的 取代；
，其中任何個別的R’s可以是， 且剩下的 R 基團可以是 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、OC(0)ORa、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Re、NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Re、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、-素、芳基、雜芳基、 聯芳基和烷基（分支、環狀或未分支的），可視需要含有雙 或三鍵，及/或雜原子或其他官能基，如羧酸、羧酸酯、醇、 醚、硫醚、醯胺、硫代醯胺、脲、尿烷、亞砜、颯、膦酸、 膦酸酯、次膦酸、次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳 基和雜聯芳基。Ra、Rb和Rc可以是相同或不同的，並選自 135 200817327 由Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和烷基（分支、環 狀或未分支的）所組成之群組，其可視需要以雜原子或其他 官能基取代，如羧酸、羧酸酯、醇、醚、硫醚、醯胺、硫 代醯胺、脲、尿烷、亞砜、砜、膦酸、膦酸酯、次膦酸、 次膦酸酯、硼酸、芳基、雜芳基、聯芳基和雜聯芳基。應 瞭解在上述側鏈中的所有開放取代位置，均可含有更多的 取代。 本發明另一方面為根據式V之化合物：
(式V )，或其鹽、溶劑合物、水 合物或前藥。Ri、R2、R3、R4和R5是相同或不同的，並獨 立地為 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、 ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)2ORb、NRaP(0)ORbORc、 NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、 B(OH)2、P、鹵素、芳基、苄基、雜芳基、聯芳基、雜聯 芳基、雜環，和分支、未分支或環狀的烷基。r6和r7是 相同或不同的，並獨立地為 Η、分支或未分支的，或 (CH2)t-Z，其中Ζ為芳基、雜芳基、聯芳基、環烷基或雜 環，或R6和一起形成雜環。t為0、1、2、3、4、5、6、 136 200817327 7、8、9或10。Ra、Rb和Rc是相同或不同的，並獨立地為 Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基或分支、未分支或 環狀的烷基。Ρ 為 S03H、〇S〇3h、〇ρο3η2、〇Ρ03：Η2、〇 低碳數（Ci、C2、C3、C4、c5 或 c6)烷基-Κ、o-c(o)-低碳 數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 c6)烧基 _L、NH-低碳數 d、C2、 c3、C4、C5或C6)烧基·Μ或O-芳基_Q，其中低碳數（Ci、c2、 C3、C4、C5或CJ烧基為直鏈或分支的烧基。κ為c(〇)NH2、 COOH、so3h、oso3h、p〇3h2、〇P〇3H2、NH2、nhr19、 NR19R2。、S〇2R21、糖苷、氏碳數 Ci、c2、c3、c4、c 、c
烷氧基或
。L 為芳基、QJi、C(Q)NH2、COOH、S03H 〇so3h、p〇3h2、opo3h2、nh2、nhr19、nr19r2。、s〇2r2i
糖苷、低碳數q、c2、c3、c4、c5、06烷氧基或 M 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、〇s〇3H、P〇3H2、 0P03H2、NH2、NHR19、nr19r2〇、so2r21、糖苦、低碳數 C!、c2、C3、c4、c5、〇6烷氧基或 W 〇。Q 為芳基、〇H、 C(0)NH2、COOH、so3H、oso3H、p〇3H2、OP〇3H2、随2、 NHR19、NRi9R2〇、S〇2R2i、糠苷、低碳數 Ci、qqq、 k: 34 c5、c6烷氧基或 S ο。r19、R2G和獨立地為Ci、c2、 C3、C4、C5或C6烷基，或Rb和Rm與附接之氮原子一起 形成五員環。任何Ri、R2、R;、、R6和r7，以及R、 Rb和Re為經取代或未經取代的。Ri、R2、R3、、心和心 137 200817327 中至少有一個是p。 在一具體態樣中，P為SO H、nQri ττ υ3Η OS〇3H、〇P〇3H2、OP〇3h、 Ο-低碳數（c^、c2、c、c、 4 C5 或 c6)烷基-K、0-C(0)-低
碳數（c〆 q、C3、c4、c5 或 c、卜 A T C6)烷基_L、NH-低碳數d、 C2 匸3、（!!4、（1；5或（1；6)烧基-]^或〇^：| 4 方基_Q，其中K為so H、 〇so3h、p〇3h2、〇p〇3h2、Nh 1 s 聰2、NHR19、NR19R20、糖苷和 雜裱；且其中L為s〇3H、〇s〇 H ΡΓΛ ττ ㈣ Ub〇3H、Ρ〇3Η2、〇Ρ〇3Η2、νη2、
Rl 9、NR! 9R2〇、糖皆和雜環· 算壤，且其中Μ為S03H、0S03H、
P〇3H2、〇p〇3H2、NH2、NHR MD
Rl9 ' NR19R2G、糖苷和雜環。 在一具體態樣中，R、R、p w 2 R3、R4和R5中至少有一個 廷自鹵素、石朋酸、經基、臚响 *从 •夂、胺基％酸、胍、叛酸、駿、 醯胺和經甲基膦酸。在另一具體態樣中，mi 和R5中至少有一個是-素。在另一具體態樣中，H、4 r3 r4和r5中至少有一個是硼酸。在另一具體態樣中，r丨、 、&和R5中至少有一個早盆 ^ 個疋經基。在另一具體態樣中，
Rl、R2、R3、尺4和r5中至少有一個是醯胺。例如，醯胺為 鄰位二幾基酿胺。在一呈辦能媒由 Τ> ^ '
^ 具體悲樣中，r3為鹵素。例如，R 為氟。在另一具體態樣中，R3為羥基。 3 在-體怨樣中，R6和R7中至少有一個是（CH2)「Z。 另’、體恶樣中’ Z為芳基。在一具體態樣中，該芳基 為未經取代的。在一具體態樣中，該芳基為單取代的。在 ，：具體態樣中’該芳基為二取代的。在另一具體態樣中， ^方基為三取代的。在-具體態樣中，以經基、函素、笨 ^ ( OC#5)、燒氧基、CF3、烷基、羥甲基、芳基、〇cf3、 138 200817327
节氧基（ΙΗΆ)、硝> 基、酸或烧錢基（亦稱為酉旨，例 如-C(〇)OEt)取代該芳基。在一具體態樣中，仰ο是經取 代的’其中以一或多個取代基置換亞曱基基團上的一或多 個氫原子。亞甲基取代基係選自經甲基、炫基（例如甲基广 羥基和芳基。在另一具體態樣中，〜和R?中至少有一個 是分支或未分支的烷基。在一具體態樣中，該分支或未分 支的烷基是未經取代的。在另一具體態樣中，以羥基取代 °亥刀支或未分支的烷基。在另一具體態樣中，z為環烷基。 在一具體態樣中，該環烷基是經取代的。在另一具體態樣 中，以羥基取代該環烷基。在另一具體態樣中，該環烷基 是未經取代的。在一具體態樣中，t為〇。在另一具體態樣 中’t為1。在另一具體態樣中，^為2。 在一具體悲樣中’ R0和R7形成環，其中該環係選自 0比p各咬、六氫σ比σ定和嗎琳。 在一具體態樣中，R6和中至少有一個是
’其中R8為附接點。在一具體態樣中，為 (〔112);(’其中\為〇、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。 在另一具體態樣中，R8為CH2CHOH、CH(CH3)(R-異構體） 或CH(CH3)(S-異構體）。在另一具體態樣中，r9、ri〇、Rh、
Ri2和R13分別是相同或不同的，且R9、r1〇、Rn、r12和r13 獨立地為 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、 〇Ra、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 139 200817327 NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)2ORb、NRaP(0)ORbORc、 NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Re、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、 B(OH)2、鹵素、P，、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、 雜環，或分支、環狀或未分支的烷基，P’為S03H、0S03H、 opo3h2、opo3h2、〇_低碳數、c2、c3、c4、c5 或 c6) 烷基-K’、o-c(o)_ 低碳數、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基- L’、NH-低碳數（Cl、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-M，或 O-芳基-Q’，其中低碳數（Ci、C2、C3、C4、C5或C6)烷基為直 鏈或分支的烷基。K’為 C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、 P03H2、OP03H2、NH2、NHR22、NR22R23、S02R24、糖苷、
低碳數Ci、C2、C3、C4、C5、C6烷氧基或 H 〇 。L，為芳 基、OH、c(o)nh2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、 NH2、NHR22、nr22r23、so2r24、糖普、低碳數 、C2、C3、
COOH、S03H、0S03H、P03H2、0P03H2、NH2、NHR22、 nr22r23、so2r24、糖苷、低碳數 q、c2、c3、c4、c5、c6
烷氧基或 H Q。Q’為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、 0S03H、P03H2、0P03H2、NH2、NHR22、NR22R23、S02R24、
糖苷、低碳數Cl、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或 140 200817327 R24獨 ^為 Cl ' C2' c3' c4' c5 或 貌義 或Rn和Ru與附接之氮原子一起形成五員環。土 是相同或不同的’並獨立地為H、芳基、雜芳基：R=Re 雜聯芳基、分支、環狀或未分支的烷基；其中任何^、 心、^和k是經取代或未經取代的；且其限制9條= 若m、R^R5中之一不是P，則R9、r ;牛為 尺12和R13中至少有一個是p，。 1〇 U、 在另-具體態樣中’ P，為s〇3H、〇s〇3H、〇扣Η 〇Ρ 啊 〇_ 低碳數（Cl、C2、C3、C4、C4C6).K，、〇y 低石厌數（c,、c2、c3、c4、〇5或c6)貌基-L，、顧 〇S03H、P〇3H2、〇P〇 Η x 為 S03H、 雜環。 R 〇 3H2、0P〇3H2、叫、nhr22、 NH22 2馳或雜環。M，為 S〇3H、〇S〇3H、P〇3H2、〇P〇3H2、 NH2、NHR”、NR p 3 2 22R23、糖苷或雜環
141 200817327 水合物或前藥。Ri、R2、R3、R4、R5、R6和R7分別是相同 或不同的，並獨立地為 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)ORb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)ORbORc、NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Re、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)2ORa、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)ORaORb、B(OH)2、P、鹵素、芳基、雜 芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和分支、環狀或未分支 的烷基。Ra、Rb和Re是相同或不同的，並獨立地為Η、芳 基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基，以及分支、環狀或未分 支的烷基。Ρ 為 so3h、oso3h、ορο3η2、ορο3η2、0-低 碳數（c,、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-Κ、O-C(O)-低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基 _L、NH_低碳數（q、C2、C3、C4、 c5或C6)烷基-M或O-芳基-Q，其中低碳數（Cr C2、C3、C4、 c54 c6)烷基為直鏈或分支的烷基。K為c(o)nh2、cooh、 so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、nh2、nhr19、nr19r20、 S02R21、糖苷、低碳數Cl、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或
。L 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、 P03H2、0P03H2、NH2、NHR19、NR19R20、S02R21、糖普、
低碳數Cl、C2、C3、C4、C5、C6烷氧基或 " 。M為 芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、Ρ03Η2、0Ρ03Η2、 NH2、NHR19、nr19r20、so2r21、糖苷、低碳數 q、c2、c3、 142 Ν'
200817327 c4、c5、c6貌氧基或HrV Q為芳基、〇Η、⑽題2、 ⑶OH、S〇3H、〇s〇3H、p〇 H2、〇p〇3H2 簡2、丽心、 NR19R2。、S02R 、糖替 y'o f 低奴數 Cl、c2、C3、c4、c5、c6 烷氧基或 。Rl9、R2G和R21獨立地為q、c2、c3、 4 5或C6烷基，或Rb和Rm與附接之氮原子一起形 五員環。X為 ^ 3 4 、 5 、 6 、 7 、 8 、 9 或 10 。 Rl 、 r2 、 R3、R4、R5、R6和r7中至少有一個是p。 在一具體態樣中，P 為 s〇3h、〇s〇3H、〇ρ〇3ίΐ2、〇ρ〇#2、 ο 低石反數（C!、c2、c3、c4、c5 或 c6)院基-κ、o-c(o)-低 石反數^ c2、c3、c4、c5或c6)院基-L、NH-低碳數（c!、 c2 c3 c4、c5 或 c6)燒基-M 或 O-芳基 _Q。K 為 s〇3H、 oso3h、p〇3h2、〇p〇3h2、顺2、NHR19、NRl9R2。、糖苷或 雜環。L 為 S〇3H、os〇3H、p〇3H2、〇p〇3H2、皿2、醜”、 NR19R20、糖苷或雜環。M 為 s〇3h、〇s〇3H、p〇办、〇p〇3H2、 NH2、NHR19、NR19R2G、糖苷或雜環。 本發明另一方Φ包括一種在個體中預防或治療聽力喪 失的方法，包括投與具有式V之化合物： R4 %
(式V )，或其鹽、溶劑合物、水 合物或4藥。R〗、R2、R3、R4和R5是相同或不同的，並獨 立地為 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、c(〇)〇Ra、c(0)SRa、OH、 143 200817327 ORa、0C(0)Ra、OC(0)ORa、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、NRaP(0)0Rb0Rc、 NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Re、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、 B(OH)2、P、鹵素、芳基、苄基、雜芳基、聯芳基、雜聯 芳基、雜環，和分支、未分支或環狀的烷基。r6和r7是 相同或不同的，並獨立地為 Η、分支或未分支的，或 (CH2)t-Z，其中Ζ為芳基、雜芳基、聯芳基、環烷基或雜 環，或以6和R7—起形成雜環。t為0、1、2、3、4、5、6、 7、8、9或1 0。Ra、Rb和Re是相同或不同的，並獨立地為 Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基或分支、未分支或 環狀的烷基。Ρ 為 so3h、oso3h、ορο3η2、ορο3η2、0-低碳數（Ci、c2、c3、c4、c5 或 c6)烷基-κ、o-c(o)-低碳 數（Cl、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-L、NH_低碳數（Cl、C2、 C3、C4、C5或C6)烷基-M或0·芳基-Q，其中低碳數（C「C2、 03、€4、05或C6)烷基為直鏈或分支的烷基。K為C(0)NH2、 cooh、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、nh2、nhr19、 NR19R20、S02R21、糖苷、低碳數 Ci、c2、c3、c4、c5、c6 烧氧基或
。L 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、 oso3h、P03H2、0P03H2、NH2、NHR19、NR19R20、S02R21、
糖苷、低碳數Ci、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或 。 M 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、Ρ03Η2、 144 200817327 ' SN02R21、糖苷、低碳數 Η ο ^ ° Q為芳基、〇Η、 0Ρ03Η2、NH2、nhr19、nr19r20 C!、C2、c3、c4、c5、〇6烷氧基或 C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、Ρ03Η2、ΟΡ〇3η2、ΝΗ NHR19、NR19R20、so2R21、糖苷、低碳數 c c 、Ν'Π 1 、C4、 C5 c6燒氣基或 。R19、和R21獨立地為（^丨、c；、 C3、C4、c：5或C：6烷基，或R"和Rm與附接之氮原子一起 形成五員環。任何Ri、R2、R3、R4、R5、和 Rb和Re為經取代或未經取代的。Ri、r2、1 和R7中至少有一個是p。
反7，以及Ra、 、R4、r5、r6 在一具體態樣中，P 為 so3h、oso3h、〇ρ〇3Η2、〇Ρ(33Η2、 O山-低碳數（Cl、c2、C3、C4、c5 或 c6)烷基 _κ、〇_c⑼_2低 九數（C, C2、C3、C4、c5或c6)烧基-L、贿_低碳數（Ci、 c2、C3、c4、c5 或 c6)烧基_M 或 0-芳基_Q。K 為 s〇3、 3H P〇3H2 OP〇3H2、腿2、NHR19、NR19R2Q、糖苦或 雜 ％。L 為 S〇3H、〇S〇3H、P〇3H2、〇p〇3H2、聰2、醜”、 料或雜環。M 為 S〇3H、〇s〇3H、p〇3H2、〇p〇3H2、 nh2、NHRl9、NRl9R2〇、糖苷或雜環。 的t:具體態樣中，該化合物抑制蛋白質激酶信號路徑 制或夕個組份。在另—具體態樣中，該化合物為異 :。在另-具體態樣中，該化合物不抑制 破靶的結合。在一具體態 蛋 ^ . 成化合物與肽結合位置結 口。在一具體態樣中，該化合 酶。例如，…族之蛋白質二…之蛋白質激 文岭為pp60c_src酪胺酸激 145 200817327 每。在另一具體態樣中’該Src家族之蛋白質激酶為ργκ2。 在-具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 局部(例如藉著投與滴劑至耳朵内）、動脈内、病灶内、藉 著計量幫浦，或藉著施用在黏膜上，完成該化合物的投率: 在—具體態樣中，將該化合物與引起聽力喪失之藥物，例 如順氯氨！自或胺基㈣抗生素混合投藥。在另一具體態樣 2 ’將該化合物與晦準毛細胞的藥物混合投藥。在一具體 態樣中，將該化合物與在藥學上可接受之載劑一起投與。 在-具體態樣中，在開始喪失聽力之前先投與該化合物。 在另-具體態樣中’在開始喪失聽力之後投與該化合物。 π在-具體態樣中’ Rl、R2、R3、〜和Rs中至少有一個 選自i素、《、縣、膦酸、胺基續酸、胍、叛酸、搭、 醯胺和羥甲基膦酸。在另一具體態樣中，R1、R广R3、R 和R5中至少有-個是齒素。在另一具體態樣中，H ^4和&中至少有-個是卿。在另_具體態樣中， R2、R3、r4和r5中至少有一個是羥基。在另_具體態樣中， mR’h中至少有一個是醯胺。例如，醯胺為 鄰位三叛基醯胺。在一具體態樣中，R3為齒素。例如* 為氟。在一具體態樣中，r3為羥基。 3 在一具體態樣中，汉6和R7中至少有一個是（CH士z。 在另-具體悲樣中，z 4芳基。在―具體態樣中，該芳基 為未經取代的。在一具體態樣中，該芳基為單取代的。在 另-具體態樣中，該芳基為二取代的。在另—具體態樣中， 146 200817327
该芳基為三取代的。在一具體態樣中，以經基、_素、苯 氧基（-OC6H5)、烷氧基、CF3、烧基、羥甲基、芳基、〇CF、 苄氧基（-OCH2C6H5)、硝基、醛或烷氧羧基（亦稱為酯，例 如-C(O)OEt)取代該芳基。在一具體態樣中，（Ch2)是經取 代的，其中以一或多個取代基置換亞甲基基團上的一或多 個氫原子。亞甲基取代基係選自羥甲基、烷基（例如甲基）、 經基和芳基。在另一具體態樣中，R6和R7中至少有一個 是分支或未分支的烷基。在一具體態樣中，該分支或未分 支的烧基是未經取代的。在另一具體態樣中，以經基取代 該分支或未分支的烷基。在另一具體態樣中，z為環烷基。 在一具體態樣中’該環烧基是經取代的。在另一具體雜樣 中’以备基取代遠環烧基。在另一具體態樣中，該環烧基 是未經取代的。在一具體態樣十，t為0。在另一具體態樣 中，t為1。在另一具體態樣中，t為2。 在一具體怨樣中，R6和形成環，其中該環係選自 °比嘻咬、六氫σ比咬和嗎琳。 在一具體您樣中’ R0和中至少有一個是
*RS為附接點，並為（CH2)X，其中x為 2、3、4、5、6、7、8、9 或 10, CH2CH0H、CH(CH3)(R-分別是相同或不同的’並獨立地為Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、0Ra、〇c(〇)Ra、〇c(〇)〇Ra、丽2、 147 200817327
NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Re 、 NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)ORbORc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)ORaORb、B(OH)2、 鹵素、P’、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，或 分支、環狀或未分支的烷基。P’為so3h、oso3h、0Ρ03Η2、 0Ρ03Η2、Ο-低碳數（Cp C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-K’、o-c(o)-低碳數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-L’、NH-低碳數、 C2、C3、C4、C5* C6)烷基-M’或O-芳基-Q’，其中低碳數（Cl、 C2、C3、C4、C5或C6)烷基為直鏈或分支的烷基。K’為 C(0)NH2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、NH2、 NHR22、NR22R23、S02R24、糖苦、低碳數 c!、c2、c3、c4、
C5、C6 烷氧基或 。L’為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、
so3h、oso3h、po3h2、0P03H2、NH2、NHR22、NR22R23、 so2r24、糖苷、低碳數Cl、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或
。M’為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H po3h2、opo3h2、nh2、nhr22、nr22r23、so2r24、糖苷
低碳數Cl、C2、C3、C4、C5、C6烷氧基或 ” —°Q’為芳 基、oh、c(o)nh2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2 nh2、nhr22、nr22r23、so2r24、糖苷、低碳數 q、c2、c3 148 200817327 C4、。5、C6烷氧基或Η。。心、^和蜀立地為〔I、 C2、C3、C4、〇5或&烷基，或I】和I;與附接之氮原子 起形成五員環。、心和R。是相同或不同的，並獨立地 為H、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、分支、環狀或 未分支的烷基。任何I、Rig、Ru、12和R"是經取代或 未經取代的。若R1、R2、R3、1或R5中之一不是P，則r9、 Rio、R"、R12和：r13中至少有一個是P，。 在一具體態樣中，P，為 S03H、OS03H、〇P〇3h2、 〇Ρ〇3Η2、ο-低碳數（Ci、c2、c3' c4、c5 或 c6)烷基 _K，、0-c(〇)_ 低石反數（Ci、c2、c3 ' c4、c5或C6)烷基-L，、NH-低碳數（q、 C2、C3、c4、c5 或 c6)烷基·Μ，或 0-芳基 _Q,。K，為 S03H、 0S03H、P〇3h2、〇p〇3h2、Nh2、nhR22、nr22r23、糖苷或
雜 J哀。L’為 s〇3H、〇S〇3H、P03H2、〇P〇3H2、NH2、NHR22、 NR22R23、糖苷或雜環。M，為 S03H、0S03H、P03H2、0P03H2、 NH2、NHR22、NR22R23、糖苷或雜環。在另一具體態樣中，
本發明另一方面包括一種在個體中預防或治療增殖性 疾病之方法，包括投與具有式V之化合物： 149 200817327
合物或前藥。Ri、R2、R3、化4和R5是相同或不同的’並獨 立地為 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、 ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、NRaP(0)0Rb0Rc、 NRaP(0)0RbRc、NRaP(〇)〇Rb〇Rc、SRa、s(〇)Ra、s(〇)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、s(〇)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、 B(OH)2、P、鹵素、芳基、苄基、雜芳基、聯芳基、雜聯 方基、雜壌，和分支、未分支或環狀的烷基。&和&是 相同或不同的’並獨立地為Η、分支或未分支的，或 (CH2；)t Z 為方基、雜芳基、聯芳基、環烧基或雜 環，或R0和R7 —起形成雜
乂雜嶮。t 為 0、1、2、3、4、5、ό、 7、8、9或10。1^、11和 b ^ 是相同或不同的，並獨立地為 Η、芳基、雜芳基、聯娑龙 土、雜聯芳基或分支、未分支或
環狀的烧基。Ρ為S Q 3打、〇S〇 Η、0Ρ03Η2、0Ρ03Η2、0-低碳數（Ci、C2、c3、c 〇 4、或 c6)烷基-K、o_c(o)_低碳 數（Cl、c2、c3、c4' c 戈 5式烷基-L、NH-低碳數（Ci、C2、 C3、C4、C5 或 C6)燒基 次芳基-Q，其中低碳數（Cp C2、 C3、C4、C5或C6)烷基為直 I鍵或分支的烷基。K為c(o)nh2、
COOH、S03H、〇s〇 H 3 、P〇3H2、〇p〇3H2、nh2、nhr19、 NR19R2〇、S02R21、糖并 低碳數 q、c2、c3、c4、c5、c6 150 200817327 烷氧基或
。L 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、 so2r21
〇S03H、P〇3H2、opo3h2、nh2、NHR19、NR19R2〇、 糖苷、低碳數c!、c2、c3、c4、c5、<：6烷氧基或 M 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、P〇3H2、 0P03H2、NH2、NHR19、NR19R20、SO2R21、糖普、低石炭數
c2、C3、C4、C5、〇：6烷氧基或 H GdQ 為芳基、OH、 C(0)NH2、COOH、so3h、oso3h、P03H2、〇p〇3H2、簡2、 nhr19、nr19r20、so2R21、糖苷、低碳數 q、C2、c,、、 C5、c6烷氧基或H 0 ; R19、R2G和R21獨立地為Ci、c2、 C3、C4、c：5或C6烷基，或Ri9和R2G與附接之氮原子一起 形成五員環；其中任何Ri、R2、R3、R4、R5、和R?， 以及Ra、Rb和Re為經取代或未經取代的。、R3、R4、 R5和R6中至少有一個是P。 在一具體態樣中，P 為 S03H、0S03H、〇P〇3H2、〇P〇3H2、 o-低碳數（Cl、C2、c3、C4、c5 或 c6)烷基_κ、o_c(o)-低 碳數（Ci、c2、c3、c4、c5 或 c6)烷基-L、NH-低碳數（Cl、 c2、c3、C4、C5 或 c6)院基·M 或 〇 芳基 _Q。K 為 s〇3h、 0S03H、P〇3H2、〇p〇3H2、nh2、NHR19、nr19r2〇、糖苷和 雜裱。L 為 S03H、〇s〇3H、P〇3H2、〇p〇3H2、NH2、NHR19、 NR19R2。、糖苦和雜環。M 為 s〇3H、〇s〇3H、p〇办、〇p〇3H2、 NH2、NHR”、NRbR2。、糠苷和雜環。 151 200817327 二具體態樣中，該化合物抑制蛋白質教酶信號路徑 組份。在另一具體態樣中’該化合物為異位抑 ㈤。在另-具體態樣中，該化合物為狀受質抑制劑。在 體態樣中，該化合物不抑制ATP與蛋白質激酶的結 p在另-具體態樣中，該化合物與肽結合位置… 另-具體態樣^該化合物抑制Src家族之蛋白質㈣。 女°亥豕知之蛋白質激酶為PP6〇c.src路胺酸激酶。 另-具體態樣中，該Src家族之蛋白質激酶為Η。。 在-具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内'藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 局部、動脈内、病灶内、Μ荽呌旦封、主 丄 L 精者计里幫浦，或藉著施用在黏 ::，完成該化合物的投藥。在另一具體態樣中，將該化 :物與在藥學上可接受之載劑-起投與。在-具體態樣 …在開始增殖性疾病之前先投與該化合物。在另一具體 怨樣中’在開始增殖性疾病之後投與該化合物。 哪在一具體態樣中，中至少有一個 砥自鹵素、硼酸、羥基、膦酸、胺基磺酸、胍、羧酸、醛、 醯胺和經甲基膦酸。在另一具體態樣中， 和r5中至少有一個是画素。在另一具體態樣中，n 。R4和R5中至少有一個是硼酸。在另_具體態樣中，h、 H3、R4 Μ至少有—個是録。在另—具體態樣中， 2尺3尺4和Rs中至少有一個是醯胺。例如，醯胺為 2三幾基醯胺。在一具體態樣中，&為函素。例如，R3 為氟。在一具體態樣中，R3為羥基。 152 200817327
在具體癌、樣中，R0和R7中至少有一個是（CH2)「Z。 在另-具體態樣中’z為芳基。在—具體態樣中，該芳基 為未經取代的。在一具體態樣中’該芳基為單取代的。： 另：具體態樣中’該芳基為二取代的。在另一具體態樣中， 該芳基為三取代的。在一具體態樣中，以羥基、_素、苯 氧基（-〇^5)、烷氧基、CF3、烷基、羥曱基、芳基、〇CF3、 节氧基（-oc^C6!!5)、硝基、醛或烷氧羧基（亦稱為酯，3例 如-c(〇)〇Et)取代該芳基。在—具體態樣中，（叫）是經取 代的，其中以一或多個取代基置換亞甲基基團上的一或多 個氫原子。亞甲基取代基係選自羥甲基、烷基（例如甲基 羥基和芳基。在另一具體態樣中，1和R7中至少有二個 是分支或未分支的烷基。在一具體態樣中，該分支或未分 支的烧基是未經取代的。在另—具體g樣中，以經基取代 該分支或未分支的烷基。在另一具體態樣中，z為環2基。 在一具體悲樣中，該環烷基是經取代的。在另一具體，能樣 中’以㈣取代該㈣基。在另-㈣g樣巾，該環烧基 是未經取代的。在-具體態樣中，Q G。在另_ 中，t為1。在另一具體態樣中，t為2。 ”心7 在-具體態樣中’尺6和R7形成環，其中該環係選自 吡咯啶、六氫吡啶和嗎啉。
心和R7中至少有一個是 ’並為（CH2)x，其中X為〇、1、 153 200817327 2、3、4、5、6、7、8、9 或 10，CH2CHOH、CH(CH3)(R-異構體）或（：11((：113)(8-異構體）。119、111()、1111、1112和1113 分別是相同或不同的，並獨立地為Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Rc > NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)2ORa、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、 鹵素、P’、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，或 分支、環狀或未分支的烷基。P’為so3h、oso3h、0Ρ03Η2、 0Ρ03Η2、Ο-低碳數（CV C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-K’、o-c(o)-低碳數（C!、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-L’、NH-低碳數、 C2、C3、C4、C5或C6)烷基-M’或O-芳基_Q’，其中低碳數（Cl、 C2、C3、C4、C5或C6)烷基為直鏈或分支的烷基。K’為 C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、Ρ03Η2、OP03H2、NH2、 NHR22、nr22r23、so2r24、糖普、低碳數 c!、c2、c3、C4、
。L’為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、 S03H、0S03H、P03H2、0P03H2、NH2、NHR22、NR22R23、 S02R24、糖苷、低碳數Cl、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或
。M，為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、 P03H2、OP03H2、NH2、NHR22、NR22R23、S02R24、糖苷、 154 200817327 低碳數 q、c2、c]、c4、c5、c 6烷氧基或
Q’為芳
基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、〇S〇3h、p〇3H2、〇p〇3H nh2、nhr22、nr22r23、so2r 糖苷、低碳數c〗、C2、c,、 C4、C5、C6烧氧基或
22、R23和R24獨立地為C〗、 c2、c3、C4、c5或C6烷基，或r22和r23與附接之氮原子 一起形成五員環。Ra、Rb和Rc是相同或不同的，並獨立地 為Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、分支、環狀或 未刀支的烧基。R9、R1〇、和Rl3是經取代或未經 取代的。若R!、R2、R3、R4或R5中之一不是p，則r9、Ri〇、 Ru、R12和R13中至少有一個是P，。 在一具體態樣中，P，為 so3h、〇so3h、opo3h2、 〇P〇3H2、ο-低碳數（Ci、c2、c3、C4、C5 或 C6)烷基-K，、o-c(o)· 低碳數（C1、c2、C3、c4、c5 或 C6)烷基-L，、NH-低碳數（Ci、 C2、c3、c4、C5 或 c6)烷基-M，或 O-芳基-Q，。K，為 so3h、 〇S〇3H、P〇3H2、〇P〇3h2、Nh2、NHr22、nr22r23、糖苷或 雜 ％。L’為 S03H、〇s〇3H、po3h2、opo3h2、nh2、NHR22、 NRuR23、糖苷或雜環。M，為 S03H、0S03H、P〇3H2、0P03H2、 贿2、NHR22、NR22R23、糖苷或雜環。 在一具體態樣中，R6和r7中至少有一個是
155 200817327 本發明另一方面包括一種在個體中預防或治療骨質疏 鬆症之方法，包括投與式νπ之化合物：
(式W )，或其鹽、溶劑合物、 水合物或前藥。R!、R2、R3、R4和R5是相同或不同的，並 獨立地為 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、 ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、NRaP(0)0Rb0Rc、 NRaP(0)0RbRe、NRaP(0)0Rb0Re、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、 B(OH)2、P、鹵素、芳基、苄基、雜芳基、聯芳基、雜聯 芳基、雜環，和分支、未分支或環狀的烷基。R6和R7是 相同或不同的，並獨立地為Η、分支或未分支的，或 (CH2)t-Z，其中Ζ為芳基、雜芳基、聯芳基、環烷基或雜 環，或R6和R7 —起形成雜環。t為0、1、2、3、4、5、6、 7、8、9或1 0。Ra、Rb和Re是相同或不同的，並獨立地為 Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基或分支、未分支或 環狀的烷基。Ρ 為 so3h、oso3h、ορο3η2、0Ρ03Η2、0- 低碳數（Ci、c2、c3、c4、c5 或 c6)烷基-κ、o-c(o)·低碳 數（C〆 C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-L、NH-低碳數（Cl、C2、 C3、C4、C5或C6)烷基-M或O-芳基-Q，其中低碳數（Cr C2、 156 200817327 C3、C：4、C5或C0)燒基為直鏈或分支的烧基。κ為c(〇)NH2、 COOH、S03H、〇s〇3H、P〇3H2、opo3h2、nh2、nhr19、 nr19r20、so2R21、糖苷、低碳數 Ci、c2、c3、c c c
H
烧氧基或 。L 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H oso3h、po3h2、〇p〇3h2、Nh2、NHRi9、nr19r2g、s〇2r2i
糖苷、低碳數q、c2、c3、c4、c5、06烷氧基或
M 為芳基、OH、C(〇)NH2、COOH、S03H、OSOsH、P〇3H2、 〇p〇3H2、nh2、nhr19、NR19R20、S02R21、糖苦、低碳數
Ci、c2、c3、c4、c5、c6 院氧基或
Q為芳基、OH、 C(0)NH2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、〇P〇3H2、nh2、 NHR19、NR19R20、S02R21、糖苷、低碳數 q、c2、c,、c4、 HNi c5、c6烧氧基或H ; r19、R2G和獨立地為C!、C2、 C3、C4、C5或c6烷基，或r19和r2〇與附接之氮原子一起
形成五員環；其中任何Ri、R2、R3、R4、R5、R6和r7， 以及Ra、Rb和Re為經取代或未經取代的。 在一具體態樣中，P 為 so3h、〇S03H、OP〇3H2、〇P〇3H2、 O-低碳數（C〗、C2、c3、C4、c5 或 C6)烷基-K、O-C(O)-低 碳數（c〗、C2、C3、c4、C5或c6)烷基-L、NH-低碳數、 C2、C3、C4、C5 或 C6)烧基-M 或 〇-芳基-Q。K 為 S03H、 0S03H、P〇3H2、〇P〇3H2、nh2、nhr19、nr19r20、糖苷或 雜環。L 為 so3h、0S03H、P〇3H2、opo3h2、nh2、nhr19、 157 200817327 nrI9r2。、糖苷或雜環。M 為 s〇3H、〇s〇3H、p〇#、⑽q h NH2、NHR19、NRl9R2()、糖苷或雜環。 32 在：具體態樣中’該化合物抑制蛋白質激酶信號路徑 的一或多個組份。在另一具體態樣 .r 通化合物為異位抑 另且二二具體態樣中，該化合物為肽受質抑制劑。在 入^體:樣中’該化合物不抑制Ατρ與蛋白質激酶的結 P在一具體態樣中，該化合物與肽結合位置結合。在另 一具體態樣中，該化合物抑制 如 〜 豕麵之蛋白質激酶。例 且二，蛋白質激酶為pp60 一絡胺酸激酶。在另- …悲樣中，該Sre家族之蛋白質激酶為PYK2。 在一具體態樣中，經由口服^ M ^ ^ ^ ^ 服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内 —Μ 月 滴/、猎者腔内或膀胱内滴注、 局部、動脈内、病灶内、 m μ ^ 9者。十里幫浦，或藉著施用在黏 膜上，完成該化合物的投筚。 物_ ”级 在一具體態樣中，將該化合 物與在藥學上可接受 中，/ & ^ t 载蜊一起投與。在另一具體態樣 能^ ^ ^ 則先杈與該化合物。在另一具體 心樣中，在骨質疏鬆症開 開始之後投與該化合物。 在另一具體態樣中，R ^ 個、Μ ώ A I 1、R2、R3、R4和R5中至少有一 個璲自i素、硼酸、羥其 土、％酸、胺基磺酸、胍、羧酸、 酪、醯胺和羥甲基膦酸。 P ^ 在另一具體態樣中，Ri、R2、R3、 R4和R5中至少有一個是 函素。在一具體態樣中，Ri、R2、 、R4和R5中至少右_ ^ 個是硼酸。在另一具體態樣中，Ri、 κ2、r3、r4和r5中至少古 ’—個是羥基。在另一具體態樣中， 1、R2、R3、R4 和 r5 中小 i V有一個是醯胺。例如，醯胺基 158 200817327 ^鄰位：幾基醯胺。在一具體態樣中’ &為齒素。例如， 3為亂。在-具體態樣中，R3為羥基。 在具體恕樣中，R6和I中至少有_個是γ 在另一具體態樣中，ζ盔朴 2 t 。 為未經取代的。在一呈 —Μ甘基 /、體匕、樣中，該方基為單取代的。 另一具體態樣中，与丄 在 ^方基為二取代的。在另一具體態樣中， $方基為三取代的。在一具體態樣中，以經基、齒素、苯 ( ，基（-OC6H5)、院氧基、Cf3、烧基、經甲基、芳基、 卞乳基（-OCHAH5)、確基、酸或烧氧羧基（亦稱為酿，例 如-C(〇)〇Et)取代該芳基。在一具體態樣中，仰ο是經取 代的其中以一或多個取代基置換亞甲基基團上的一或多 個氫原子。亞甲基取代基係選自羥甲基、烷基（例如甲基）、 ^基和芳基。在另一具體態樣中，&和&中至少有i一個 是分支或未分支的烷基。在一具體態樣中，該分支或未分 支的烷基是未經取代的。在另一具體態樣中，以羥基取代 讜分支或未分支的烷基。在另一具體態樣中，Z為環烷基。 在一具體悲樣中’該環烷基是經取代的。在另一具體態樣 中，以羥基取代該環烷基。在另一具體態樣中，該環烷基 是未經取代的。在一具體態樣令，t為〇。在另一具體態樣 中，t為1。在另一具體態樣中，t為2。 在一具體態樣中，心和I形成環，其中該環係選自 吡咯啶、六氫吡啶和嗎啉。 在一具體悲樣中’ R0和中至少有一個是 159 200817327
。*R8為附接點，並為（CH2)X，其中X為ο、 1、2、3、4、5、6、7、8、9 4 10，CH2CHOH、CH(CH3)(R-異構體）或（：11((：113)(8-異構體）。119、；^1()、1111、：^12和1113 分別是相同或不同的，並獨立地為H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、0Ra、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Rc 、 NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、 鹵素、P’、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和 分支、環狀或未分支的烷基，P’為so3h、oso3h、0Ρ03Η2、 0Ρ03Η2、Ο-低碳數（CV C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-K’、o-c(o)-低碳數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-L’、NH-低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C5或C6)烷基-M’或O-芳基-Q’，其中低碳數（Cl、 C2、C3、C4、C5或C6)烷基為直鏈或分支的烷基。K’為 C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、Ρ03Η2、0Ρ03Η2、NH2、 NHR22、NR22R23、S02R24、糖苷、低碳數 Ci、c2、c3、c4、
。:L，為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、 S03H、0S03H、P03H2、0P03H2、NH2、NHR22、NR22R23、 S02R24、糖苷、低碳數Ci、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或 160 200817327
。Μ’為芳基、〇H、c(〇)NH2、c〇〇H、s〇3H、〇s〇 H、 p〇3H2、〇p〇3H2、NH2、nhr22、nr22r23、so2r24、糖苷、 低碳數C!、C2、c3、c4、C5、（：6烷氧基或
Q為芳 基、OH、c(o)nh2、COOH、S03H、〇S〇3H、P〇3H2、OP〇3H2、 NH2、NHR22、NR22R23、s〇2R24、糖苷、低碳數 q、c2、c3、
c4、c5、c6烷氧基或 H G。R22、R23和R24獨立地為c!、 c2、c3、c4、c5或c6烧基，或R22和R23與附接之氮原子 一起形成五員環。Ra、Rb和Rc是相同或不同的，並獨立地 為Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、分支、環狀或 未分支的烷基；且其中任何的R9、R10、Rn、R〗2和R13是 經取代或未經取代的。 在一具體態樣中，P，為 S03H、〇S〇3H、0P03H2、 0Ρ03Η2、ο-低碳數（Ci、c2、c3、c4、c5 或 C6)烷基 _K’、〇-C(〇)-低碳數、c2、c3、c4、C5或c6)烷基-L，、NH-低碳數、 c2、c3、c4、c5 或 c6)烧基-M，或 O-芳基-Q’。K’為 s〇3H、 OS03H、P〇3H2、〇p〇3h2、NH2、NHR22、NR22R23、/糖苷或 雜環。L，為 S03H、〇S〇3H、P〇3H2、〇P〇3H2、NH2、NHR22、 NR22R23、糖苷或雜環；且其中 M，為 S03H、〇s〇3H、p〇3H2、 opo3h2、NH2、nhr22、NR22R23、糖苷或雜環。在一具體 悲樣中’ R6和R7中至少有^一個是 161 200817327
在其他的具體態樣中，該 化合物是
本發明另一方面包括一種在個體中預防或治療聽力喪 失之方法，包括投與式VI化合物：
(式VI)，或其鹽、溶劑合物、 水合物或前藥。Ri、R2、R3、R4、R5、R6和R7分別是相同 或不同的，並獨立地為 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、〇C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)ORb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Re、NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Re、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)ORa、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、P、鹵素、芳基、雜 芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和分支、環狀或未分支 162 200817327 的烷基。Ra、Rb和rc是相同或不同的，並獨立地為Η、芳 基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基，以及分支、環狀或未分 支的烧基； Ρ 為 S03H、0S03H、ΟΡΟ3Η2、〇Ρ〇3Η2、0低碳數（c!、 c2、c3、C4、C5 或 c6)烷基-Κ、O-C(O)·低碳數（c!、C2、c3、 C4、C5 或 C6)烧基-L、碳數（Ci、C2、C3、C4、c5 或 C6)烷基-M或〇-芳基_q，其中低碳數（c!、C2、C3、C4、c5 或c6)烷基為直鏈或分支的烷基。K為C(0)NH2、COOH、
so3h、oso3h、P〇3H2、opo3h2、NH2、NHR19、nr19r20、 S02R21、糖苷、低碳數Ci、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或
L 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H
po3h2、〇p〇3h2、nh2、nhr19、nr19r2G、so,R ’2夂21 糖苷 低礙數Ci、c2、c3、c4、C5、C6烷氧基或η ^。M為芳基、OH、c(0)nh2、COOH、so3H、〇s〇3h、ρ〇3Η2、〇ρ〇3Η2、 NH2、NHR19、NR19R2。、so2r21、糖苷、低碳數 Cl、c2、c3、 1-
N C4、C5、c6 烷氧基或 ^。Q 為芳基、OH、C(0)NH2 cooh、so3h、〇so3H、po3h2、op〇3h2、Nh2、NHRi9、 nr19r20、so2r21、糖苷、低碳婁欠 q、c2、c3、c4、c5、c丨
烷氧基或。r19、r2G和R21獨立地為c〗、C2、C3、 C4、C5或c0烷基，或R^9和R2❹與附接之氮原子一起形成 五貝玉衣。X為1、2、3、4、5、6、 、8 、 9 或 10 。 R】、R，、 163 200817327 r3、r4、r5、r6和R7中至少有一個是p。 在一具體態樣中，P A wa T p 為 so3H、〇s〇3H、〇 〇-低碳數（Ci、r r ^ ^ 3 2 U^U3H2 3 4、C5 或 C6)梡基-K、〇-cr〇WEt 碳數（CrCrq、^、 〇c(〇)-低 ^ A 6)庇基-L、nh-低碳數（c、 C2、C3、C4、C4 c6)燒基-〇 芳基-h oso3H、p〇3h2、〇P〇 H Q 為 s〇3h、 2 ^ru3H2 > NH2 > NHR τντη x, 雜 if。L A M 八 19 NRi9R2G、糖芽或 雜％ L 為 S03H、〇S〇3H、 3H2、NH2、nhrb、 g 甘次雜％°m 為 s〇3h、〇s〇3H、 nh2、nhr19、nr r 祕叶二 3H2 〇P〇3H2、 19尺20、糖苷或雜環。 在一具體態樣中，哕於人仏h Μ ^ ^ , χ Μ 口物抑制蛋白質激酶信號路徑 的一或多個組份。在另一且 ,lf . /、體樣中，該化合物為異 制劑。在一具體態樣中，嗲 评 一且體能；《 Φ外 Λ σ物為肽党質抑制劑。在另 八1:，錢合物不抑制ΑΤΡ與蛋白質激酶的結 口 w/ 樣中’該化合物與狀結合位置結合。在另 如，Src家族之蛋白皙冷絡 且…由 pp6『、胺酸激酶。在另- ，、體悲樣中，m族之蛋白質激酶為PYK2。 在一具體態樣中，經由 ,,θ 、由服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、莫菖咖、 9兀内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 例如藉著投與滴劑至耳朵内)、動脈内、病灶内、藉 :計量幫浦，或藉著施用在點膜上，完成該化合物的投藥。 在一具體態樣中，將钫#人u f δΛ化a物與引起聽力喪失之藥物混合 投樂。在另-具體態樣中’將該化合物與在藥學上可接受 之載劑-起投與。在另一具體態樣中，在開始喪失聽力之 164 200817327 前先投與該化合物。在另一具體態樣中，在開始喪失聽力 之後投與該化合物。 本發明另一方面包括一種在個體中預防或治療骨質疏 鬆症之方法，包括投與式化合物：
(式Μ )，或其鹽、溶劑合 物、水合物或前藥。Ri、R2、R3、R4、R5、R6和R7分別是 相同或不同的，並獨立地為 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、OC(0)Ra、OC(0)ORa、NH2、 NRaRb、NRaC(〇)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)ORbORe 、 NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)ORaORb、B(OH)2、 P、鹵素、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和 分支、環狀或未分支的烷基。Ra、Rb和Re是相同或不同的， 並獨立地為Η、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和分支、 環狀或未分支的烷基。Ρ為so3h、oso3h、ορο3η2、ορο3η2、 Ο-低碳數（Ci、c2、c3、c4、c5 或 c6)烷基 _κ、o-c(o)·低 碳數、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-L、NH-低碳數（q、 C2、C3、C4、C5或C6)烷基-M或O-芳基-Q，其中低碳數、 C2、C3、C4、C5或C6)烷基為直鏈或分支的烷基。K為 165 200817327 C(0)NH2、COOH、so3h、oso3h、p〇3H2、〇p〇3H2、NH2、 NHR19、NR19R2〇、S02R2i、糖普、低石炭數 C!、C2、C3、C4、
C5、C6 烧氧基或 H W。L· 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH s〇3h、oso3h、po3h2、opo3h2、nh2、NHR19、nr19r20、 S02R21、糖苷、低碳數Ci、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或 一 nhr19、nr19r20、so2r21、糖苷 Η 。Μ 為芳基、OH、c(o)nh2、coon、S03H、0S03H、 P03H2、OP〇3H2、NH' 低碳數c〗、c2、c3、c4、c5、匕烷氧基或η -。Q為芳 基、OH、c(o)NH2、COOH、so3H、〇so3H、p〇3H2、〇P〇3H2、 NH2、NHR19、NR19R20、so2r21、糖苷、低碳數 Cl、c2、C、 ΚνΛ C4、C5、c6烧氧基或h 〇。Ri9、％和獨立地為Cl、 c2、c3、C4、c5或c6烷基，或R"和R2G與附接之氮原子 一起形成五員環1為1、2、3、4、5、6、7、8、9或1〇。 在一具體態樣中，P 為 S〇3H、〇s〇3H、〇p〇3H2、〇p〇3H、 石反數（C!、c2、c3、C4、c5 或 c6)烧基 _L、NH-低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C5 或 c6)烧基-M 或 〇_芳基 _Q。K 為 s〇3、 〇S〇3H、P〇3H2、〇p〇3h2、而2、NHRi9、N“ 糖苦或 雜環。L 為 S〇3H、〇s〇3H、p〇3H2、〇p〇办叫醜19、 NR19R20、糖普或雜環。M 為 s〇3H、〇s〇3H、p〇办、〇p〇办、 順2、NHR〗9、NRbR2。、糖苷或雜環。 166 200817327 在一具體態樣中，該化合物抑制蛋白質激酶信號路徑 的一或多個組份。在另一具體態樣中，該化合物為異位抑 制劑。在另一具體態樣中，該化合物為肽受質抑制劑。在 另一具體態樣中，該化合物不抑制ATP與蛋白質激酶的結 合。在一具體態樣中，該化合物與肽結合位置結合。在另 一具體態樣中，該化合物抑制Src家族之蛋白質激酶。例 如，Src家族之蛋白質激酶為pp60e-sl*e酪胺酸激酶。在另一 具體態樣中，該Src家族之蛋白質激酶為PYK2。
在一具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 局部、動脈内、病灶内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏 膜上，完成該化合物的投藥。在一具體態樣中，將該化合 物與在藥學上可接受之載劑一起投與。在一具體態樣中， 在骨質疏鬆症開始之前先投與該化合物。在另一具體態樣 中，在骨質疏鬆症開始之後投與該化合物。 一種在個體中預防或治療增殖性病症的方法，包括投 與式ΥΠΙ化合物：
(式Μ )，或其鹽、溶劑合物、 水合物或前藥。Ri、R2、R3、R4、R5、R6和R7分別是相同 或不同的，並獨立地為 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 NRaRt C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、OC(0)ORa、NH: 167 200817327 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)ORbORc、NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)ORaORb、B(OH)2、P、鹵素、芳基、雜 芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和分支、環狀或未分支 的烷基。Ra、Rb和Rc是相同或不同的，並獨立地為Η、芳 基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和分支、環狀或未分支的 烷基。Ρ 為 so3h、oso3h、ορο3η2、ορο3η2、〇_低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-K、O-C(O)-低碳數（Cl、c2、c3、 C4、C5 或 C6)烧基 _L、NH->fe 碳數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-M或O-芳基-Q，其中低碳數（Ci、C2、C3、C4、C5 或C6)烷基為直鏈或分支的烷基。K為C(0)NH2、COOH、 so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、NH2、NHR19、NR19R20、 S02R21、糖苷、低碳數Cl、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或
。L 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、OS03H、 P03H2、OP03H2、NH2、nhr19、nr19r20、so2r21、糖苷、 低碳數q、c2、c3、c4、c5、c6烷氧基或
。M為 芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、Ρ03Η2、0Ρ03Η2、 NH2、NHR19、NR19R20、S02R21、糖苷、低碳數 c!、c2、c3、 c4、c5、c6烷氧基或
。Q 為芳基、OH、C(Q)NH2、 COOH、S03H、0S03H、Ρ03Η2、0Ρ03Η2、NH2、NHR19、 200817327 NR19R2。、S02R21、糖苷、低碳數 c 中。 ：
C c4 、 C5 、 c, 燒氧基或 λ τ> ‘η ν 心9 R2G和r21獨立地為Ci、c、C、 c4、W c6烷基，或‘和R2。與附接 2 3 五員環。…、2、3、4、5、6、7、8、9或10。 的二=態樣中，該化合物抑制蛋白質激酶信號路徑 的一或多個組份。在另一且驴能 , 在另具體悲樣中，該化合物為異位抑 :二Γ中具體態樣中，該化合物為狀受質抑制劑。在 悲樣中’該化合物不抑制ATP與蛋白質激酶的結 一具體態樣中，該化合物與肽結合位置結合。在另 二體態Λ中，該化合物抑制src家族之蛋白質激酶。例 rc豕私之蛋白質激酶為pp6〇…酪胺酸激 具體態樣中，該Src家族之蛋白質激酶為ργκ2。 在具體悲樣中’經由口服、非錄腺、士 丁々 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴一朴 靜脈内、 ^ 滴，、糟者腔内或膀胱内滴注、 局邛、動脈内、病灶内、藉 ,〜丄 糟耆计里幫浦，或藉著施用在黏 朕上，元成該化合物的投藥。 舲彻+ — Μ 具體悲樣中，將該化合 物與在樂學上可接受之載劑一 起技與。在一具體態樣中， 在$日殖性病症開始之前先於 杈一该化合物。在另一具體態樣 中’在增殖性病症開始之後投與該化合物。 本發明另' 一方面肖.. 種在個體中預防或治療眼科疾 病（例如頁斑變性、視網 周膜病、黃斑水腫等等）的方法，包 括杈與式W或Μ之化合物。 在具體怨樣中，該化合物抑 制蛋白質激酶信號路徑的一 或夕個組伤。在另一具體態樣 Τ ’该化合物為異位拍^法丨卞 抑制劑。在另-具體態樣中，該化合 169 200817327 物為肽受質抑制劑。在另—具體態樣中，該化合物不抑制 ATP與蛋白質激酶的結合。在一具體態樣中，該化合物與 ，結合位置結合。在另-具體態樣中，該化合物抑制… 家族之蛋白質激酶。 後投與該化合物 之 在一具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 局部（例如藉著以眼藥水或乳霜投與眼睛）、動脈内、病灶 内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏膜上，完成該化合物 的投藥。在-具體態樣中，將該化合物與在藥學上可接受 ^載劑-起投與。在另—具體態樣中，在眼科疾病開始之 與該化合物。在另-具體態樣中，在眼科疾病開始 本發明另一方面包括一種在個體中預防或治療糖尿病 匕括技與式νπ或VH[之化合物。在一具體態樣中， :化合，抑制蛋白質激酶信號路徑的-或多個組份。在另 -〜樣中4化合物為異位抑制劑。在另—具體態樣 二該化合物為肽受質抑制劑。在另一具體態樣中，該化 ^不抑制ΑΤΡ與蛋白質激酶的結合。在一具體態樣中， 石亥化合物與肽結合位詈 % 位置、、Ό合。在另一具體態樣尹，該化合 物抑制Src家族之蛋白質激酶。 肌内Γ具體％樣中，經由σ服、非經腸、皮T、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、葬签魯 a μ 猎者鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 膜:、動脈内、病灶内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏 腰上，完成該化合物的妒驢 口物的技樂。在一具體態樣中，將該化合 170 200817327 物與在藥學卜> 可接雙之載劑一起投與。在另一具體態樣 中，在糖'屈、由日a ,, '4始之前先投與該化合物。在另一具體態樣 中在橋屎病開始之後投與該化合物。 本發明另_ 士 面包括一種在個體中預防或治療肥胖之 二I括投與式Yjj或週之化合物。在一具體態樣中，該 =口物抑制蛋白質激酶信號路徑的一或多個組份。在另一 /、體〜樣中，该化合物為異位抑制劑。在另一具體態樣中， r °亥化合物為肽受質抑制劑。在另-具體態樣中，該化合物 不抑制ATP與蛋白質激酶的結合。在一具體態樣中，該化 物一肽〜合位置結合。在另一具體態樣中，該化合物抑 制Src家族之蛋白質激酶。 在一具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 局部、動脈内、病灶内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏 膜上，完成該化合物的投藥。在一具體態樣中，將該化合 ( 物與在藥學上可接受之載劑一起投與。在另一具體態樣 中在肥胖開始之前先投與該化合物。在另一具體態樣中， 在肥胖開始之後投與該化合物。 本發明另一方面包括一種在個體中預防或治療中風之 方法’包括投與式YU或通[之化合物。在一具體態樣中，該 化合物抑制蛋白質激酶信號路徑的一或多個組份。在另一 具體態樣中，該化合物為異位抑制劑。在另_具體態樣中， 該化合物為肽受質抑制劑。在另一具體態樣中，該化合物 不抑制ATP與蛋白質激酶的結合。在一具體態樣中，該化 171 200817327 合物與肽結合位置έ士人 、、'。《 °在另一具體態樣中，該化合物抑 制src家族之蛋白質激酶。 在一具體態樣中，你丄 、、二由口服、非經腸、皮下、靜脈内、
肌肉内、腹腔内、蕻荃E 曰 v内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 局部、動脈内、症、从& # ^ 内、精著計量幫浦，或藉著施用在黏 W 投藥。在-具體態樣中，將該化合 在藥予上可接叉之載劑一起投與。在另一具體態樣 在中風&生之&先投與該化合物。在另—具體態樣中， 在中風發生之後投與該化合物。
本發明另-方面包括—種在個體中預防或治療動脈粥 樣更化之方法包括投與式狐或观之化合物。在一具體態 樣中’該化合物抑制蛋白質激酶信號路径的-或多個I 份。在另一具體態樣中’該化合物為異位抑制劑。在另一 具體態樣中，該化合妨yH各、☆ 勿為肽叉貝抑制劑。在另一具體態樣 中，該化合物不抑制ATP與蛋白質激酶的結合。在一 1體 態樣中，該化合物與肽結合位置結合。在另—具體態樣中， 該化合物抑制Src家族之蛋白質激酶。 在-具體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 局部、動脈内、病灶内、藉著計量幫冑，或藉著施用在黏 膜上，完成該化合物的投藥。在—具體態樣中將該化合 物與在藥學上可接受之載劑一起投與。在另一具體態樣 中’在動脈粥樣硬化開#之前先投與該化合物。在另一且 體態樣中，纟動脈粥樣硬化開始之後投與該化合⑯。〃 172 200817327 本ι月另一方面包括一種調節個體之免疫系統活性的 方法包括投與式V[[或YU[之化合物。在一具體態樣中，該 口物抑制蛋白質激酶信號路徑的一或多個組份。在另一 二體心樣中，该化合物為異位抑制劑。在另一具體態樣中， 该化合物為肽受質抑制劑。在另一具體態樣中，該化合物 不抑制ATP與蛋白質激酶的結合。在一具體態樣中，該化 口物”肽結合位置結合。在另_具體態樣中，該化合物抑 制Src家族之蛋白質激酶。 在具體您樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 暄P :脈内、病灶内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏 私^ ^成该化合物的投藥。在-具體態樣中，將該化合 舁在藥學上可接受之載劑一起投與。 考务日月另 γ 6一 面匕括一種在個體中預防或治療慢性神 、、生病性疼痛的方法，包 匕括杈與式νπ或Μ之化合物。在一具 ft7 ，該化合物抑制蛋白質激酶信號路徑的一或多個 另—具體態樣中，該化合物為異位抑制劑。在另 提中，枯樣中該化合物為肽受質抑制劑。在另-具體態 r能檨：化°物不抑制ATP與蛋白質激酶的結合。在-具 合物與狀結合位置結合。在另-具體態樣 该化合物抑制Src家族之蛋白質激酶。 肌内ΐ二體態樣中，經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 月邱紅鼻内滴注、糟者腔内或膀胱内滴注、 … r、内、病灶内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏 173 200817327 膜上’完成該化合物的投藥。在一具體態樣甲，將該化合 物”在藥予上可接党之載劑一起投與。在一具體態樣中， 在㈣神經病性疼痛開始之前先投與該化合物。在另一具 體態樣:，在慢性神經病性疼痛開始之後投與該化合物。、 *本表明另一方面包括一種在個體中預防或治療B型肝 : 匕括技與式孤或观之化合物。在一具體能樣中， 該化合，抑制蛋白質激酶信號路徑的一或多個組^在另 -具體態樣中，該化合物為異位抑制劑。在另一具體能樣 中，該化合物為肽受質抑制劑。在另一具體態樣中，該化 不抑制ATP與蛋白質激酶的結合。在一具體態樣中， 該化合物與肽結合位置結合。在另一具體態樣中，該化合 物抑制Six家族之蛋白質激酶。 在-具體態樣中’經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、 肌肉内、腹腔内、藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、 ^ p冑脈内、病灶内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏 馭上’完成該化合物的投藥。在一具體態樣中，將該化合 物與在藥學上可接受之載劑一起投與。在一具體態樣中， 在B型肝炎開始之前先投與該化合物。在# 在B型肝炎開始之後投與該化合物。 >本毛月亦提供測4化合物抑制蛋白質激酶或蛋白質碟 酸酶活性之能力的方法。按照上述產生化合物。在與在表 Λ蛋白貝激酶或蛋白質磷酸酶之細胞中發現的相同的溫 度、ΡΗ值、離子強度、渗透性和自由鎮濃度下，在抑制劑 的存在下’測量蛋白質激酶或蛋白質鱗酸酶的活性。將蛋 174 200817327 貝/放酶或蛋白質磷酸酶的活性水準與在無抑制劑下之蛋 貝激酶或蛋白質磷酸酶的活性水準相比較。這類模仿生 —仏件的測定系統，提供最相關的抑制數據。可在自動測 疋系統上進行該測定。此外，可將測定與組合化學法結合， 迅速篩選眾多的候選者。 可改編Plerce 96_孔培養盤非_放射性ELISA PTK測定 法，使其適合細胞模仿測定條件，以便進行96_孔培養盤 -庫的初步Src篩選。該高輸貫量的測定，利用相同的 R SRC肽叉質，除了將其生物素基化，以便將其附接在 八市售的96-孔培養盤中以中性抗生物素蛋白 (NeUtrAvidin)_塗覆的孔上。可藉著將src與預先與孔結合 之RR-SRC受質一起培養，接著加入其抗-磷酸酪胺酸抗體 (PY2〇)_辣根過氧化酶（HRP)共軛物及其HRP受質，進行該 回輸貫量的抑制測定，經由以96-孔培養盤υν讀取器測量 HRP產物的量，定量所產生之磷酸_rr-Src的量。已經使 用標準低輸貫量的P32-ATP放射性測定，但96_孔培養盤 格式較佳，尤其是可能的話還是想要非-放射性的測定。當 發展出非常有效的Src抑制劑時，可利用市售的蛋白質激 酶建立蛋白質激酶測定的名單，使用細胞模仿蛋白質激酶 測疋條件，並測試這些橫跨名單的抑制劑，獲得專一性的 初步β平估。較元整的專一性评估’涉及全部大約2，〇 〇 〇個 蛋白質激酶，將需要在細胞培養和在活體内進行。 可在一組並排且以細胞為基礎的測定中，使用正常大 鼠腎臟（NRK)細胞和該細胞株對溫度敏感的pp6〇v-sre轉化 175 200817327 物（LA25)，研究有活性的Src抑制劑。在激活卯6〇ν·_的 33°C”許可”溫度下，而不是在無法激活pp6〇v-Sre的4〇。〇”非 許可”溫度下，讓LA25轉化物進行不依賴固定_和血清_的 生長（Li等人，1996)。在許可和非許可溫度下，使用這對密 切相關的細胞株來測試Src抑制劑，允許證實一特定 抑制W]阻斷細胞生長，是否因為藉著不同的機制或藉著普 通的細胞毒性效應，專一地阻斷Src信號路徑。在圖Μ中
出示在這對細胞株中，非_肽Src抑制劑間（表v)之初步 測試的結果。 如同在該圖中所示，相對於作為對照組，在非許可之 40C下生長的LA25細胞，LA25細胞在33°C之許可溫度下 的生長，被25μΜ濃度的間抑制了大約5〇%。藉著當其 濃度增加至400μΜ時，NRK未-轉化細胞、在非許可4〇t： 卜的以2)細胞’以及在33°C許可溫度下的LA25細胞（但 pp60 70全被缸-間抑制）的基礎生長不僅沒有降低，實 際上還稍微增加(或許是因為該化合物之非“目關活性) 的事貫，證明11-間沒有細胞毒性。目此為了增溶，以低 濃度DMSO來製備、、交、、右 . 表侑Μ·間浴液，故亦以相同濃度來進行 DMSO對照組。 此外，可在原發性人類腫瘤組織測定中，篩選有希望 的Six抑制劑’特別是尋找與其他已知抗癌藥物的協同作 用。 定義 為了方便，將在說明書、實例和附錄之中請專利範圍 176 200817327 中使用的某些名詞集中於此。 夕蛋白質激酶是一大類的酵素，其催化丫_碟酸從A叮轉 移至蛋白質和肽中Ser/Thrst Tyr之側鏈上的羥基，並鱼 各種重要細胞功能的控制有密切關係，或許最值得注意的 疋^號轉導、分化和增殖。估計在人體中約:t 2，_個 不同的蛋白質激酶’雖然、這些分別磷酸化特定的蛋白質/狀 又貝’但它們都在高度保留的凹窩中結合相同的第二受質 ATP。大肖5〇%的已知致癌基因產物是蛋白f路胺酸激酶 (PTKs)，並已經顯示它們的激酶活性導致細胞轉化。 可將PTKs分成兩類，膜受體pTKs(例如生長因子受 體PTKs)和非-受體PTKs(例如原_致癌基因產㈣“家^ 和焦點黏連激酶（FAK))。已經在許多人類癌症中報告了 Sk 的高度活化，包括結腸、乳房、肺、膀胱和皮膚的那些， 以及在月癌、毛細胞白血病和神經胚細胞瘤中。 “抑制蛋白質激酶信號級聯的一或多個組份，，意指激酶 信號級聯的一或多個組份受到影響，使得細胞的功能改 麦蛋白貝激_ h號級聯的組份包括任何直接或間接涉及 该激酶信號路徑的蛋白質，包括第二信使和上游與下游目 子示0 “治療”包括任何影響，例如減輕、降低、調節或排除， 結果改善了狀況、疾病、病症等等。疾病狀態的，，治療 (treating)”或”治療（treatment)，，包括：（1)預防疾病狀態， I7在可此接觸或易染患該疾病狀癌’但尚未體驗或展現該 疾病狀態之症狀的個體中，不使該疾病狀態之臨床症狀發 177 200817327 展出來；（2)抑制疾病狀態，即阻止該疾病狀態或其臨床 症狀的發展；或（3 )減輕疾病狀態，即使該疾病狀態或其 臨床症狀暫時或永久退行。 “疾病狀態（disease state)，，意指任何疾病、病症、狀 況、症狀或表徵。 當在本文中使用時，，，細胞增殖性病症，，一詞意指細胞 之不受調節及/或異常生長的狀況，可導致不想要的狀況或 疾病的务展’其可能是癌的或非·癌的，例如牛皮癬的狀況。 當在本文中使用時，”牛皮癖的狀況，，或，，牛皮癣，，一詞意指 涉及角化細胞過度增殖、炎症性細胞浸潤和細胞激動素改 變的病症。 在一具體悲樣中，該細胞增殖性病症為癌症。當在本 文中使用時，’’癌症，，一詞包括固體腫瘤，如肺癌、乳癌、 結腸癌、卵巢癌、腦癌、肝癌、胰臟癌、前列腺癌、惡性 二色素瘤、非-黑色素瘤皮膚癌，以及血液學腫瘤及/或惡 性，如兒童白血病和淋巴瘤、多發性骨髓瘤、何杰金氏症、 淋巴細胞和皮膚來源的淋巴瘤、急性和慢性白血病，如急 性淋巴母細胞性、急性骨髓細胞性或慢性骨髓細胞性白血 病、漿細胞腫瘤、淋巴樣腫瘤和與Ams有關的癌症。 除了牛皮癬狀況之外，可使用本發明之組成物治療之 支曰殖1±疾病的類型，為上皮和皮樣囊腫、脂肪瘤、腺瘤、 毛細血管性和皮膚血管瘤、淋巴血管瘤、痣病灶、畸胎瘤、 月瘤肌纖、准瘤病、骨胚細胞腫瘤和其他發育異常的團塊 以及類似物。增殖性疾病可包括發育異f和類似的病症。 178 200817327 特定的病症、投藥的模式、 合物，以及個體的特徵，如 本發明揭示之化合物的，，有效量，，為在將其投與患有疾 病或病症之個料，結果在㈣體巾導致疾病或病症退行 的量n本發明揭示之化合物的有效量，是在將其投 與患有細胞增殖性病症之個體時，結果在該個體中導致細 胞生長退行的量。將所揭示之化合物投與個體的量，將視 若有的話，任何共同投與之化 般健康狀況、其他疾病、年
齡、性別、基因型、體重和對藥物之耐受性而冑。熟諳此 藝者將能夠依據這些及其他因素，決定適當的劑量。 當在本文中使用時，，，有效量，，一詞意指本發明之化合 化合物之組合的量，在單獨或與抗-增殖劑混合投與 守疋有效的例如，有效量意指以調配物之形式或在醫學 衣置上對接受之患者或個體提供的化合物用量，足以誘 發生物活性，例如抗-增殖活性，像是例如抗—癌症活性或 抗-腫瘤活性。化合物之組合可視需要為協同組合。協同作
用例如由 Chou 和 Talalay，Adv. Enzyme Regul·第 22 冊 第27-55頁（1984)描述的，在將化合物混合投與時的化合 物效果比以單一製劑單獨投與化合物的相加效果更大時出 現。通常，在化合物的次—最佳濃度下，最能清楚地證實 協同效應。可從與個別組份比較，該組合的較低細胞毒性， 或增加的抗-增殖效應，或一些其他有利影響的觀點來看 協同作用。 /σ療有效量”意指化合物的量，當投與哺乳動物來治 -疾病日守，足以影響這類疾病的治療。”治療有效量，，將視 179 200817327 化合物、疾病及其嚴重性，和待治療之哺乳動物的年齡、 體重等等而改變。 可利用在藥學上可接受之載劑來調配治療有效量的_ 或多個化合物，以便投與人類或動物。因此，可經由例如 口服、非經腸或局部路徑，投與化合物或調配物，以提供 有效量的化合物。在另類的具體態樣中，根據本發明製備 的化合物，可用來塗覆或浸泡醫學設備，例如支架。 “預防有效量”一詞意指投與有效量的本發明之化合物 或化合物們，以預防或降低不想要之細胞增殖的風險。
當在本文中使用時，，，藥理學影響，，包括在個體中產生 達到想要之治療目的的影響。在一具體態樣中，藥理學影 響意指預防、減輕或減少了待治療之個體的主要指徵。例 如藥理學影響的結果是預防、減輕或減少待治療之個體的 主要指徵。在另一具體態樣t，藥理學影響意指預防、減 輕或減m療之個體的主要指徵之病症或症狀。例如， 条理學影響的結果是預防或減少待治療之個體的主要指 關於在本發明中使用的化學化合物，可應用下列的名 同： 當在本文中使用時，，，經 _ ^ ^ ★以 、、二取代的一詞意指以選自指定 矢鮮的置換在指名原子上的 不初1 们任或多個氫，其限制條件為 不超過該指名之原子的正當 ^ ^ 丁们止貝數，且該取代結果產生穩定 個气^ 虱代（即—0)時，置換在原子上的兩 風。氧代取代基不會出現在 在方香族部分上。環雙鍵，當 180 200817327 在本文中使用時’是在兩個相鄰環原子之間形成的雙鍵 如 C:c、ON 或 N==N)。 1 一本發明企圖包括出現在本發明化合物中之原子的所 ^素兴同位素包括具有相同原子序但不同質量數的那此 '、子。牛例來說但非限制，氫的同位素包括氚和氘， 的同位素包括C-13和C-14。 反 在本文令描述之化合物可具有不對稱中心。可以 活性或消旋形式分離含有不對稱取代原子的本發明之化: 物。在技術領域中已熟知如何製備光學活性的形式，像: ^著消旋形式的分解，或藉著從具光學活性之起始材料^ 合成。在本文描述的化合物中亦可能出現許多埽煙、㈣ 及：似物的幾何異構體’並將所有的這類穩定異構 :::入本發明中。描述本發明之化合物的順和反式幾何 ^冓體’並可能以異構體之混合物，或個別的㈣形式分 。除非特別指定特定的立體化學或異構形式 一結 =的所有手性、非對映異構、消旋和幾何異構形式。亦認 相出示或描述之化合物的所有互變異構物’料本發明 的一部分。 當任何變數（例如Rl)在化合物的任何組成或化學式中 /見㈣一次時，它每次出現時的定義與它在其他次出現 :的關。因此’例如，若顯示以。_2個〜部分取代 某:基團ww該基團可視需要被最多2個&部分取代， 且母次出現的Rl是分別選自Ri之定義代 基及/或變數的組合是許可的，但只有在這類組合產生穩定 181 200817327 的化合物時才行。 :頋不與一取代基之鍵結，跨越連接環中兩個原子的 鍵結時，此時這類取代基可以與環中的任何原子結合。當 列舉取代基，但並沒有指示經由哪一個原子將這類取代基 、、口 口至扣疋化學式之化合物的其餘部分時，此時這類取代 基可經由在這類取代基中的任何原子結合。雖然取代基及/ 或變數的組合是許可的，但只有在這類組合產生穩定的化 合物時才行。 "藉著以氧化劑（例如3-氯過氧苯甲酸（m_cpBA)及/或過 氧化氫）處理，可將含有氮的本發明之化合物轉變為N·氧 化物，產生本發明的其他化合物，，在價數和結構許 可時，可將所有出示和主張的含氮化合物視為包括所示之 化合物及其N-氧化物衍生物兩者（可將其標示為N—Q或 N'O-)。此外’在其他案例中，可將在本發明之化合物中 的氮轉變為N-羥基或N_烷氧基化合物。例如，可藉著以 氧化劑，如m-CPBA氧化親代的胺，來製備N_羥基化:物。 在價數和結構許可時’可將所有出示和主張的含氮化合物 視為涵蓋所示之化合物及其N_羥基（即1〇抝和Μ·烷氧基 (即N-OR，其中R是經取代或未經取代的C"烧基、k 烯基、Cl_6炔基、C^4碳環或3_14員之雜環）衍生物。 本發明之化合物包括水溶性基團，we_h，^
Practice of Medicinai Chemistry 2〇〇3，第 6i7 頁例如 ⑽3h、〇s〇3h、〇P〇3h2、op〇3h2、胺、、四峻等等。 當-原子或化學部分伴隨有下標的數字範圍時（例如 182 200817327 i·6)，在本發明中意味著包括在該範圍内的每個數字，以 及所有的中間範圍。例如，” Cw烷基，，意指包括具有i、2、 3、4、5、6、1-6、1-5、1-4、1-3、1-2、2-6、2-5、2-4、2-3、 、3_5、3-4、4-6、4-5和5-6個碳的烷基基團。 匕當在本文中使用時，”烷基，，企圖包括分支和直鏈的鉋 和脂肪族烴基團，具有特定數目的碳原子。例如〔Μ烷基 企圖包括Ci、C2、C3、C4、C5和q烷基基團。烷基之實 2包括但不限於甲基、乙基、正_丙基、異·丙基、正_丁基、' 第一-丁基、第二-丁基、正_戊基、第二_戊基和正-己基。，， 烷基”更包括具有氧、氮、硫或磷原子置換一或多個烴主鏈 碳原子的烷基基團。在某些具體態樣中，直鏈或支鏈烷基 在其主鏈中具有6或更少個碳原子（例如，直鏈的 c 丄 1 6 鏈的Cs-C6)，且在其他的具體態樣中，直鏈或支鏈烷基 /、有4或更少個碳原子。同樣的，環烷基在其環結構中具 有3到8個碳原子，且在其他的具體態樣中，環烷基在環 結構中具有5或6個竣。 —除非另行指定碳的數目，否則，，低碳數烷基，，如同上文 ，疋義，包括在其主鏈中具有從1到1〇個，或在另一具體 L樣中攸1到6個碳原子的烷基。，，低碳數烯基，，和，，低碳數 炔基”具有例如2 —5個碳原子的鏈長。 、、、二取代之院基”一詞意指具有取代基的烷基部分，該 取代基置換在煙主鏈之一或多個碳上的氫。這類取代基可 =括例如烷基、烯基、炔基、_素、羥基、烷基羰氧基、 芳基叛氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、羧酸鹽、烷 183 200817327 羰基、芳羰基、烷氧羰基、胺羰基、烷胺基羰基、二院胺 基幾基、院硫基幾基、院氧基、碗酸鹽、膦酸根基、次膦 酸根基、氰基、胺基（包括烧胺基、二烧胺基、芳胺基、二 芳胺基和烷芳基胺基）、醯胺基（包括烷羰基胺基、芳羰基 胺基、胺甲醯基和脲基）、甲腓基、亞胺基、硫氫基、烧硫 基、芳硫基、硫代羧酸鹽、硫酸鹽、烷基亞磺醯基、磺酸 根基、胺磺醯基、磺醯胺基、硝基、三氟甲基、氰基、疊 氮基、雜環基、烧芳基或芳香族或雜芳香族部分。可進一 步取代環烷基，例如以上述之取代基。，，烷芳基，，或，，芳烧基” 部分是以芳基取代的烷基（例如苯甲基（苄基））。 “烯基”包括不飽和的脂肪族基團，長度和可能的取代 作用均類似上述的烷基，但其含有至少一個雙鍵。例如，” 烯基”一詞包括直鏈的烯基基團（例如乙烯基、丙烯基、丁 烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基、癸烯 基）、支鏈的烯基基團、環烯基（例如脂環的）基團（例如環丙 烯基、環戊烯基、環己烯基、環庚烯基、環辛烯基）、烷基 或烯基取代的環烯基基團，以及環烷基或環浠基取代的烯 基基團。’’烯基，，一詞更包括含有置換一或多個烴主鏈碳之 氧、氮、硫或磷原子的烯基基團。在某些具體態樣中，直
有2到6個碳原子的烯基基團。” 1，且在一具體態樣中，環 個碳。”c2-c6”一詞包括含 ”C3-C6” 一詞包括含有3到 184 200817327 6個碳原子的烯基基團。 “經取代之烯基，，一詞意指烯基基團有取代基，其置換 在一或多個烴主鏈碳原子上的氫。這類取代基可包括，例 如烷基、炔基、函素、羥基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、 烧氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、羧酸鹽、烷羰基、芳羰基、 烧氧羰基、胺羰基、烷胺基羰基、二烷胺基羰基、烷硫基 幾基、烷氧基、磷酸鹽、膦酸根基、次膦酸根基、氰基、 胺基（包括烷胺基、二烷胺基、芳胺基、二芳胺基和烷芳基 胺基）、醯胺基（包括烷羰基胺基、芳羰基胺基、胺甲醯基 和脲基）、甲脒基、亞胺基、硫氳基、烷硫基、芳硫基、硫 代羧酸鹽、硫酸鹽、烷基亞磺醯基、磺酸根基、胺磺醯基、 石頁胺基、硝基、三氟甲基、氰基、疊氮基、雜環基、烷 芳基或芳香族或雜芳香族部分。 炔基”包括不飽和的脂肪族基團，長度和可能的取代 作用均類似上述的烧基，但其含有至少一個三鍵。例如，，， 块基包括直鏈的炔基基團（例如乙炔基、丙炔基、丁炔基、 戊炔基 '己炔基、庚炔基、辛炔基、壬炔基、癸炔基）、支 鏈的炔基基團，以及環烷基或環烯基取代的炔基基團。，，炔 基碉更包括具有置換一或多個烴主鏈碳之氧、氮、硫或 磷原子的炔基基團。在某些具體態樣中，直鏈或支鏈的炔 基在其主鏈中具有6或更少個碳原子（例如直鏈的C2-C6, 支鏈的CVC6)。，，C2_C6”一詞包括含有2到6個碳原子的炔 基基團’CVC6”一詞包括含有3 @ 6個碳原子的快基基團。 、二取代之炔基”一詞意指炔基部分有取代基，其置換 185 200817327 在一或多個烴主鏈碳原子上的氳。這類取代基可包括，例 如烷基、炔基、齒素、羥基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、 烧氧基羧氧基、芳氧基羰氧基、羧酸鹽、烷羰基、芳羰基、 烷氧羰基、胺羰基、烷胺基羰基、二烷胺基羰基、烷硫基 技基、烷氧基、磷酸鹽、膦酸根基、次膦酸根基、氰基、 胺基（包括烷胺基、二烷胺基、芳胺基、二芳胺基和烷芳基 胺基）、醯胺基（包括烷羰基胺基、芳羰基胺基、胺甲醯基 和脲基）、甲脒基、亞胺基、硫氫基、烷硫基、芳硫基、硫 代羧酸鹽、硫酸鹽、烷基亞磺醯基、磺酸根基、胺磺醯基、 八酉皿胺基硝基、二敗甲基、氰基、疊氮基、雜環基、烧 芳基或芳香族或雜芳香族部分。 異聘β坐、σ比Π定、 ”芳基”一詞包括 例如萘 '苯并聘 苯并π塞吩、亞甲 本开1^喃、σ学 、去氮雜嗓°令或°㈣。亦可將那些在環結構 原子的芳基基團稱為，，芳基雜環，，、，，雜環”、，，雜芳 基，，或:雜芳香〜可將整個化合物稱為，，雜環化合物 了在或夕個％位置上’以諸如上述的取代基取代芳香族 方基”包括具有芳香性的基團，包括5_和6_員，，非共 軛”或單-環的芳香族基團，其可含有從〇到4個雜原子， 以及共軛”或多環的系統，具有至少一個芳香族環。芳基 ，團的實例包括苯、苯基、料"夫喃、吩、嗟嗤、2 叁上米哇、二唾、四σ坐、η比t!坐、聘。坐 比哄σ合啡和噹啶，以及類似物。此外 多裱的芳基基團，例如三環的、雙環的 峻、苯并二聘唾、苯并嗟唾、苯并味唾 二氧基苯基、喹啉、異喹啉、萘啶、吲哚 186 200817327
環，像是例如齒素、羥基、醛、烷氧基、烷基羰氧基、芳 基幾氧基、烧氧基羰氧基、芳氧基幾氧基、0 -节基、叛酸 鹽、烷羰基、烷胺基羰基、芳烷胺基羰基、烯胺基羰基、 烷羰基、芳羰基、芳烷羰基、烯羰基、烷氧羰基、胺羰基、 烷羥基、烷硫基羰基、苯氧基（0-C6H5)、磷酸鹽、膦酸根 基、次膦酸根基、氰基、胺基（包括烷胺基、二烷胺基、.芳 胺基、二芳胺基和娱:芳基胺基）、g盘胺基（包括烧羧基胺基、 芳羰基胺基、胺甲醯基和脲基）、甲脒基、亞胺基、硫氫基、 烧硫基、芳硫基、硫代羧酸鹽、硫酸鹽、烧基亞績醯基、 磺酸根基、胺磺醯基、磺醯胺基、硝基、三氟甲基、_0CF3、 氰基、疊氮基、雜環基、烷芳基或芳香族（例如苯基）或雜 芳香族部分。亦可將芳基與脂環或不是芳香族的雜環融合 或橋連，以便形成多環系統（例如四氫化萘、亞甲二氧基苯 基）。
當在本文中使用時 _”或”鹵素”意指氟、氯、溴和 碘。”全鹵化了的” 子置換的部分。 一同通常意指其巾所有的氫均被鹵素原 的物種，如氯、溴 使用抗衡離子，，來表示小型帶負電 氫氧化物、乙酸鹽和硫酸鹽。 非-限制性 羥基基團、 企圖意指任 目的碳，可 开-虱π叭丞一詞意指氫以外的取1 實例包括烷基基團、烷氧基基團、由素基 芳基基團等等。 當在本文中使用時，，，碳環，，或，，碳環€ 何穩定的單環、雙環或三環的環，具有指 187 200817327 以疋飽和、不飽和或芳香族的。例如碳環企圖意指單 -、、二-或三環的環，具有 3、4、5、67、8、91〇、"、 12、13或14個碳原子。碳環的實例包括，但不限於環丙 基、環丁基、環丁烯基、環戊基、環戊婦基、環己基、環 庚縣、環庚基、環庚歸基、金鋼烧基、環辛基、環辛締 土 —烯基、苐基、苯基、萘基、氫茚基、金鋼烷基 四虱奈基。亦將橋連的環納入碳環的定義中，包括例如 3一 〇]— % 辛烧、[4.3·0]二環壬烧、[4·4·〇]二環癸貌和[2.2.2] :環辛院。當-或多個碳原子連接兩個非-相鄰的碳原子 日:’出現橋連的環。在-具體態樣中，橋連環是—或兩個 '、子'主思到橋總疋將單環的環轉變成三環的環。當環 破橋連日守’對該環列舉的取代基亦可出現在橋上。亦包括 稠合（例如萘和四氫萘基）和螺環。 當在本文中使用時’，，糖苷” _詞意指其中一糖基團經 /、異碩碳與其他基團結合的任何分子。糖苷的實例包 括，例如甲基a:D-吡喃葡糖苷，，和甲基p_D吡 '因為”經由其異頭碳與其他基團 ::，亦稱為非-還原糖(即它不是被攻擊幾基基圈之試劑 攻擊的目標）。 當在本文中使用時，”雜環，，或，，雜環的，，一詞企圖意指 =穩定的單環、二環或三環的環’它是飽和、不飽和或 Ά的’並包括碳原子和-或多個環雜原子，例如i或 -或1-3或“或卜5或i_6個雜原子，分別選自氮、氧 200817327 2硫所組成之群組。二環或三環雜環可具有—或多個雜原 子位在-個環中，或雜原子可位在一個以上的環中。可視 需要將氮和硫雜原子氧化（即N—〇和s(〇)p，其 2)田&中包括鼠原子時’它是N或NH，視其是否盘^ 中之雙鍵附接而定(即若需要維持氮原子的三價便出、現 風）。氮原子可以是經取代或未經取代的（即^仰， R為Η或其他如定 疋義之取代基）。雜環的環可在任何 或碳原子處與盆垂吊其圍糾4立 ”” U书基團附接，結果產生穩定的結構 曰文中描述之雜環的環，可在碳或氮原子上取代， 合物是穩定的即可。可視需要將在雜環中的氮季敍 在二體態樣中’"和0原子在雜環中的總數超過 ㈣1 =些雜原子不彼此相鄰。亦將橋連的環納入雜 =義中。當一或多個原子(即C、0、N或 =目㈣Μ氮原子時便發生橋連。橋包括但不限於 :原子：兩個碳原子、-個氣原子、兩個氣原子和碳-氮基 庄忍到橋總是將單環的環轉變成 連時，對該環，取代基亦可二= 稠合的環。 力巴祜螺和 意指文中使用時，”芳香族的雜環”或，，雜芳基，，企圖 8、9' 、6或7_員單環或雙環的芳香族雜環，或7、 -或多個二1子或Γ員雙環的芳香族雜環，其由礙原子和 個雜原子或1-2或或“或w或w 雙環之雜環-番刀㈣自由H和硫所組成之群組。在 …香族環的案例中，兩環中僅一環必須是芳香 200817327 第的:二2二二氫’嗓)’雖然兩者都可以是(例如㈣)。 弟-個％亦可如上文對雜環之定義⑻ =以是經取代或未經取代的(例如二連二: 或八他如定義之取代基）。可視需要 料: (即Ν—Ο和S⑼p，其中p = 1 ^子乳化 中S和Q原子的總數不超過卜 ^在方香族雜環 f
雜環之實例包括，但不限於Μ基、氮雜環辛四稀美、 苯并㈣基、苯并Μ基、苯并料喃基、苯并嗟吩 苯开，基、苯并，琳基、苯并㈣基、笨并三嗤基、 苯并时基、苯并謂嗤基、苯并異㈣基、苯并^琳 基、咔唑基、4aH-咔唑基、咔啉基、苯並二氫吼喃基 (chromanyl)、克烯基（chromenyi)、唓啉基、十氫喹啉基、 2反6!1-1，5,2-二噻畊基、二氫呋喃并[2,3_15]四氫呋喃、呋喃 基、呋咕基、咪唑啶基、咪唑啉基、咪唑基、1H_吲唑基、 茚基、吲哚啉基、吲啡基、吲哚基、3H-吲哚基、二氫巧 哚二酮基（isatinoyl)、異苯并呋喃基、異苯並二氫吡喃基、 異σ引唾基、異，°朵琳基、異，嗓基、異啥琳基、異售σ坐基、 異_唑基、亞甲二氧基苯基、嗎琳基、萘唆基、八氫異啥 啉基、腭二唑基、I,2,3-聘二唑基、I，2,4-腭二唑基、1，2,5_ 腭二唑基、1，3,4-腭二唑基、1，2,4-腭二唑5(4Η)-酮、聘唑 σ定基、Ρ§σ坐基、, β朵基、嘴σ定基、°非σ定基、啡琳基、啡 畊基、啡噻畊基、啡腭噻基、啡腭畊基、呔畊基、六氫。比 啡基、六氫吡啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、向日葵基、 嗓咬基、σ票吟基、旅喃基、°比啡基、β比唾σ定基、°比峻琳基、 190 200817327 °比唑基、塔啡基、α比咬并聘嗤、吼咬并咪唾、吼α定并嗟嗤、 吡啶基、吡啶基、嘧啶基、吡咯啶基、吡咯啉基、2Η_吡 咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4Η-喹畊基、喹喏啉 基、奎寧基、四氫呋喃基、四氫異喹啉基、四氫喹琳基、 四唑基、6Η-1，2,5_噻二畊基、1，2,3-噻二唑基、ι，2,4-噻二 唑基、1，2,5-噻二唑基、1，3,4-噻二唑基、噻嗯基、噻唑基、 噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并腭唑基、噻吩并咪唑基、 苯硫基、三啡基、I，2,3·三ϋ坐基、ι，2,4_三唾基、丨，2，％三唆 基、1，3,4-三唑基和咕噸基。 “醯基’’包括含有醯基基團（CH3C0-)或羰基基團的化合 物和部为。經取代之醯基”包括有一或多個氫原子被例如 烷基基團、炔基基團、_素、羥基、烷羰基氧基、芳羰基 氧基、烧氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、羧酸鹽、烷羰基、 芳.基、烧氧幾基、胺戴基、烧胺基幾基、二烧胺基羰基、 烷硫基羰基、烷氧基、磷酸鹽、膦酸根基、次膦酸根基、 氰基、胺基（包括烷胺基、二烷胺基、芳胺基、二芳胺基和 烷芳基胺基）、醯胺基（包括烷羰基胺基、芳羰基胺基、胺 甲醯基和脲基）、甲脒基、亞胺基、硫氫基、烷硫基、芳硫 基、硫代羧酸鹽、硫酸鹽、烷基亞磺醯基、磺酸根基、胺 磺醯基、磺醯胺基、硝基、三氟甲基、氰基、疊氮基、雜 裱基、烷芳基或芳香族或雜芳香族部分置換的醯基基團。 “醯胺基”包括其中醯基部分與胺基基團結合的部分。 例如，泫名詞包括烷羰基胺基、芳羰基胺基、胺甲醯基和 脲基基團。 191 200817327 “芳醯基”包括帶有與羰基基團結合之芳基或雜芳香族 部分的化合物和部分。芳醯基基團的實例包括苯羧基、萘 羧基等等。 “烷氧烷基”、”烷胺基烷基”和”硫烷氧基烷基”包括如 上述之烷基基團，其進一步包括氧、氮或硫原子，置換一 或多個烴主鍵碳原子，例如氧、氮或硫原子。 “烷氧基”或”烷氧基”一詞包括與氧原子共價連接的經 取代和未經取代之烷基、烯基和炔基基團。烷氧基基團（或 烷氧基基團）之實例包括甲氧基、乙氧基、異丙氧基、丙氧 基、丁氧基和戊氧基基團。經取代之烷氧基基團的實例包 括鹵化的烷氧基基團。可利用諸如烯基基團、炔基基團、 鹵素、羥基、烷羰基氧基、芳羰基氧基、烷氧基羰氧基、 芳氧基羰氧基、羧酸鹽、烷羰基、芳羰基、烷氧羰基、胺 羰基、烷胺基羰基、二烷胺基羰基、烷硫基羰基、烷氧基、 磷酸鹽、膦酸根基、次膦酸根基、氰基、胺基（包括烷胺基、 二烷胺基、芳胺基、二芳胺基和烷芳基胺基）、醯胺基（包 括烷羰基胺基、芳羰基胺基、胺甲醯基和脲基）、甲脒基、 亞胺基、硫氫基、烷硫基、芳硫基、硫代羧酸鹽、硫酸鹽、 烷基亞磺醯基、磺酸根基、胺磺醯基、磺醯胺基、硝基、 三氟甲基、氰基、疊氮基、雜環基、烷芳基或芳香族或雜 芳香族部分之類的基團取代烧氧基基團。函素取代之烧氧 基基團的實例包括，但不限於氟甲氧基、二氟曱氧基、三 氟曱氧基、氯甲氧基、二氯曱氧基和三氯甲氧基。 “硫羰基”或”硫羧基”一詞包括含有以雙鍵與硫原子連 192 200817327 接之碳的化合物和部分。 醚或烷氧基”一詞包括含有與兩個不同碳原子或雜 原子結合之氧的化合物或部分。例如，該名詞包括，，烷氧烷 基’’，其意指烷基、烯基或炔基基團與氧原子共價結合，該 氧原子又與另一燒基基團共價結合。 酉曰 ^包括含有與氧原子結合之碳或雜原子，該氧 原子又與.基基團之碳結合的化合物和部分。”酯，，一詞包 ( 括烷氧羧基基團，如甲氧羰基、乙氧羰基、丙氧羰基、丁 ' 氧羰基、戊氧羰基等等。該烷基、烯基或炔基基團如上文 之定義。 ；，L ^ 词包括含有與兩個不同碳或雜原子結合之硫 原子的化合物和部分。硫醚的實例包括但不限於烷硫烷 基、烷硫烯基和烷硫炔基。，，烷硫烷基，，一詞包括帶有與硫 原子結合之烷基、烯基或炔基基團，該硫原子又與烷基基 團結合的化合物。同樣的，，，烷硫烯基，，和，，烷硫炔基，，一詞 (：意指其中烷基、稀基或炔基基團與硫原子結合，該硫原子 又與快基基團共價結合的化合物或部分。 羥基”或”羥基” 一詞包括帶有_〇H或_〇_的基團。 多％基”或”多環的基團，，意指二或多個環（例如環烷 基、環烯基、環炔基、芳基及/或雜環基），其中二或多個 碳為兩個鄰接環所共有的。將經由不相鄰原子連接的環稱 為橋連的”環。可利用上述的取代基取代多環的每個環， 像是例如齒素、羥基、烷羰基氧基、芳羰基氧基、烷氧基 羰氧基、芳氧基羰氧基、羧酸鹽、烷羰基、烷氧羰基、烷 193 200817327 胺基羰基、芳烷胺基羰基、烯胺基羰基、烷羰基、芳羰基、 芳烷基羰基、烯羰基、胺羰基、烷硫基羰基、烷氧基、磷 酸鹽、膦酸根基、次膦酸根基、氰基、胺基（包括烷胺基、 一烧胺基、芳胺基、二芳胺基和烧芳基胺基）、醯胺基（包 括烷羰基胺基、芳羰基胺基、胺甲醯基和脲基）、甲脒基、 亞胺基、硫氳基、烷硫基、芳硫基、硫代羧酸鹽、硫酸鹽、 烷基亞磺醯基、磺酸根基、胺磺醯基、磺醯胺基、硝基、 三氟甲基、氰基、疊氮基、雜環基、烷基、烷芳基或芳香 族或雜芳香族部分。 當在本文中使用時，，，陰離子基團，，意指在生理學pH值 下帶負電的基團。陰離子基團包括羧酸鹽、硫酸鹽、績酸 鹽、亞確酸鹽、胺基磺酸鹽、四嗤基、鱗酸鹽、膦酸鹽、 次膦酸鹽或硫代磷酸鹽，或其功能相等物。陰離子之，，功能 相等物”企圖包括生物電子等排體，例如羧酸鹽的生物電子 等排體。生物電子等排體包括典型的生物電子等排相等物 和非-典型的生物電子等排相等物。典型和非-典型的生物 電子等排體為在技術領域中已知的（參見，例如Silverman， R-B·藥物設計和藥物作用的有機化學（The 〇rganic Chemistry of Drug Design and Drug Action), Academic Press,
Inc·: San Diego, Calif·，1992，第 19_23 頁）。在一具體態樣 中’陰離子基團為叛酸鹽。 在本說明書中，為了方便在某些場合以某種異構物代 表化合物之結構式，但本發明包括所有的異構體，如幾何 異構體、以不對稱碳為基礎的光學異構體、立體異構體、 194 200817327 互變異構體，以及在結構上出現的類似物，和異構體的混 合物’且不限於為了方便的化學式說明，而可以是任何的 異構體或混合物。因此’可能有不對稱的碳原子出現在分 子中，而在該化合物中便出現旋光活性的化合物和消旋化 =物’但本發明並不限於此，且包括任_者。此外，也可 能出現晶體多料象，但不限於任何晶形，可能是單一的 ，晶形混合物，或酐或水合物。而且，所謂的代謝產物，
是由該化合物在活體内被降解而產生的，亦包括在本發明 之範圍内。 “異構現象”意指化合物具有相同的分子式，但在性質 或其原子結合順序，或其原子之空間排列上有所不同。將 在其原子之空間排列上有所不同的異構體稱為，，立體異構 體’’。將不是彼此鏡象的立體異構體稱為，，非對映異構體”， 並將非-可豐合鏡象的立體異構體稱為，，對映體，，，或有時叫 做光學異構體。結合四個不相同取代基的碳則稱為，，手性中 心”。 手性異構體”意指具有至少一個手性中心的化合物。 相反手性有兩個對映體形式，並可能以個別對映體或對映 體之混合物存在。含有等量相反手性之個別對映體形式的 混合物稱為，，消旋混合物，，。具有一個以上手性中心的化合 物’則有個對映體對，其中η為手性中心的數目。具 有一個以上手性中心的化合物，可能以個別的非對映體， 或非對映體之混合物，稱為，，非對映體混合物，，的形式存在。 當出現一個手性中心時，可藉著手性中心的絕對構形（R或 195 200817327 s)定出立體異構體的特徵。絕對構形意指附接在手性中心 之取代基的玉間排列。根據Cahn，Ingold和Prelog·的序列 規則（Sequence Rule)(Cahn 等人，Angew· Chem. Inter· Edit· 1966, 5, 385; errata 511 ; Cahn 等人，Angew· Chem· 1966, 78, 413 ; Cahn 和 Ingoid，J· chem. Sic· 1951(London)，612 ; Cahn 等人，Experientia 1956, 12, 81 ; Cahn，J· Chem· Educ. 1964, 4 1，1 1 6) ’排列在考慮中的附接在手性中心之取代基。 幾何異構體”意指非對映異構體，它們的存在歸功於 雙鍵的受阻旋轉。這些構形以其名稱字首的順和反，或z 和E來區別’其代表根據Cahn-Ongold-Prelog規則，基團 在分子中雙鍵的相同或相對側。 此外’在本申請案中討論的結構和其他化合物，包括 其所有的阻轉異構體（atropic isomer)。’’阻轉異構體，，是一 類型其中兩個異構體之原子在空間上以不同方式排列的立 體異構體。阻轉異構體的存在歸功於大基團對中心鍵結之 旋轉阻礙引起的限制旋轉。這類阻轉異構體通常以混合物 存在，然而，最近在層析技術上進步的結果，已經可能在 選擇的情況下分離兩個阻轉異構體的混合物。 “晶體多形性”或”多形性”或”晶形，，一詞意指晶體結 構’其中一化合物（或其鹽或溶劑合物）可以不同的晶體包 裝排列形成結晶，它們全都具有相同的元素組成。不同的 晶形通常具有不同的X-射線衍射圖、紅外光譜、溶點、密 度硬度、晶形、光學和電子特性、穩定性和溶解度。再結 曰曰的〉谷劑、結晶速率、儲存溫度和其他因素都可能使一種 196 200817327 晶形佔優勢。可藉著在不同的條件下形成結晶，製備化合 物的晶體多形性。 口 此外本發明之化合物，例如該化合物之鹽類可以水 合或未水合（無水的）形式，或以與其他溶劑分子之溶劑合 物的开/式存在。水合物的非限制性實例包括單水合物、二 水合物等等。溶劑合物的非限制性實例包括乙醇溶劑： 物、丙酮溶劑合物等等。 “溶劑合物，，意指溶劑加成形式，其含有化學計算或非 :匕學計异量的溶劑。有些化合物在結晶固體狀態有捕捉固 疋莫耳比例之溶劑公不& Μ人 ^ 子的傾向，因此形成溶劑合物。若溶 d疋水Μ形成的溶劑合物是水合物，當溶劑是乙醇時， 則形成的溶劑合物便是乙醇化物。藉著混合一或多個分子 ^與-種物質’形成水合物，其中水保持其分子狀態如 h2〇:這類混合便可能形成—或多個水合物。 互變異構物，，意指化合物的結構在原子排列上有明顯 不同，但以容易和迅速平衡的方式存在。應瞭解可將本發 明之化合物描述為不同的 ^ 的互k異構物。亦應瞭解當化合物 :有互變異構形式時，所有心變異卿柄在本發明之 乾圍内i化合物的命名不排除任何互變異構形式。 亦企圖將一些可以互變異構形式存在的本發明之化合 物納入本發明之範圍内。 :發：之化合物、鹽類和前藥，可以數種互變異構形 :在，包括稀醇和亞胺形式，以及嗣和締胺形式，及並 、何異構體和混合物。將所有的這類互變異構形式均納入 197 200817327 本發明之範圍内。互變異構物在溶液中以互變異構組的混 合物存在。在固體形式_，經常有一種互變異構物佔優勢。 即使可能只描述一種互變異構物，本發明仍包括該化合物 的所有互變異構物。 互變異構物是二或多種結構異構體之一，其以平衡狀 態存在，並可迅速地從一種異構形式轉變為另一種。該反 應、、、σ果產生氫原子的表面移動，伴隨著相鄰共軛雙鍵的轉 變。在可能有互變異構作用的溶液中，將達到互變異構物 的化學平衡。互變異構物的精確比例，視數個因素而定， 包括溫度、溶劑和ρΗ值。將互變異構物可藉著互變異構 作用互換的概念稱為互變異構現象。 在可能的各種類型之互變異構現象中，最常觀察到兩 種。在酮-烯醇互變異構現象中，發生電子和氫原子的同時 轉移。由葡萄糖顯示環-鏈互變異構現象。其起因於在糖鏈 刀子中的醛基團（-CHO)與在相同分子中的羥基基團卜〇Η) 之一反應，而給予它環狀（環_形）形式的結果。 藉著下列催化互變異構作用··鹼··丨·去質子作用；2. 形成非疋域陰離子（例如烯醇酸鹽）；3·在陰離子之不同位 置的質子化作用；酸·· i.質子化作用；2•形成非定域陽離 子；3·在與陽離子鄰接之不同位置的去質子作用。 、k通的互變異構對為··酮-烯醇、醯胺-腈、内醯胺-内 鲶亞胺、醯胺_醯亞胺酸在雜環中的互變異構現象（例如在 核鹼基鳥嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶）、胺_烯胺和烯胺_烯胺。 實例包括： 198 200817327
MSP 注意到本發明有些化合物 。
子。應瞭解除非另行指定，將起因;:=對稱的碳原 如所有的對映納人本 =異構體（例 典型的分離技術，並藉著以立體化 π — 、 予方式控制的合成，獲 侍貫貝上純形式的這類異構體。^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ ^ 〜/丨’在本申請幸中科古会 的結構及其他化合物和部分’亦包括其所有的互變異構 物。烯煙在適當處可包括Ε-和Ζ-幾何。本發明之化合物可 :立體異構形式存在，因此可以個別的立體異構體或混合 物的形式產生。 當在本文中使用時，，，類似物，，一詞意指在結構上與另 —類似但在組成上有些微不同的化學化合物（以不同元素 的原子置換-原子’或出現特定的官能基，或以另一官能 土置換g此基）。因此，類似物為在功能和外觀上類似 或可相比擬，但在結構或起源上與參考化合物不同的化合 物。 如同在本文中的定義，”衍生物，，一詞意指具有共同核 “結構，並按本文中之描述以各種基團取代的化合物。例 如，所有以式I代表的化合物都是吲哚衍生物，並具有作 為共同核心的式I。 199 200817327 “生物電子等排體（bioisostere)”一詞意指起因於原子或 一群原子與另一廣泛類似的原子或一群原子交換的化合 物。生物電子等排體置換的目的是創造一種新的化合物， 具有與親代化合物類似的生物特性。生物電子等排體置換 可能是以物化或拓樸學為基礎的。羧酸生物電子等排體的 實例包括醯基亞磺醯胺、四唑、磺酸鹽和膦酸鹽。參見， 例如 Patani 和 LaVoie，Chem. Rev. 96，3147-3176(1996)。 fc*樂組成物”是含有適合投與個體之形式的揭示化合 物的調配物。在一具體態樣中，醫藥組成物是以散裝或以 單位劑型的形式。單位劑型為任何的各種形式，包括例如 膠囊、ΪΥ袋、錠劑、在氣溶膠吸入器上的單一幫浦，或小 瓶。在組成物之單位劑量中活性成分（例如揭示化合物或其 鹽、水合物、溶劑合物或異構體的調配物）的量是有效量， 亚根據所涉及的特定治療而改變。熟諳此藝者將知曉有時 將視患者的年齡和狀況必須進行劑量的例行變動。劑量亦 將視投藥路徑而定。期待各種路徑，包括口服、肺臟、經 直腸、非經腸、經皮、皮下、靜脈内、肌肉内、腹腔内、 吸入、頰部、舌下、胸膜内、鞘内、鼻内，以及類似者。 本發明化合物之局部或經皮投藥的劑型包括散劑、噴霧 劑、軟膏、糊劑、乳霜、洗劑、凝膠、溶液、貼片和吸入 :。在一具體態樣中，在無菌條件下將活性化合物與在藥 子上可接叉之載劑，並與任何需要的防腐劑、緩衝溶液 推進劑混合。 閃釋劑ϊ (flash dose)”意指為迅速分散之劑型的化合 200 200817327 物調配物。 將立即釋放”一詞定義為在相對較短的時間内，通常 最高大約60分鐘，從劑型中釋放化合物。將，，修飾釋放，，一 。司定義為包括延遲釋放、延長釋放和脈衝釋放。將，，脈衝釋 放”一詞定義為從劑型中連續釋放藥物。將，，持續釋放，，或” 延長釋放詞定義為在延長的期間内持續從劑型中釋放化 合物。 “個體”包括哺乳動物，例如人類、同伴動物（例如狗、 $、鳥以及類似物）、農場動物（例如牛、綿羊、豬、馬、 家禽以及類似物）和實驗動物（例如大鼠、老鼠、天竺鼠、 鳥類以及類似物)。在-具體態樣中’該個體為人類。 此當在本文中使用日寺，片語，，在藥學上可接受的，，意指那 :化合物、材料、組成物、載劑及/或劑型，在合理的醫療 範圍内，適合用來與人類和動物的組織接觸，但沒有 ^的毒性、刺激性、過敏反應或其他_或 盘 合理的利益/風險比例相稱。 x屁… 在藥學上可接受之賦形劑，，音 物_拟％ , ^ 7 d w晶可用以製備醫藥組成 形劑’通常是安全、無-毒性4在生物學或其他方 疋不想要的，並包括在脊椎動八 上可接受的賦形劑。…明：:：用途和人類藥學用途 樂學上可接受之賦形劑，，時，包括一和一中使用在 劑。 上的類賦形 本發明之化合物能夠進 式亦納入本發明之範圍内。 一步形成鹽類 所有的這些形 201 200817327 化合物的”在藥學上可接受之鹽”意指在藥學上可接受 並具有親代化合物想要之藥理活性的鹽。 當在本文中使用時，，，在華學上技 牡罙予上可接欠之鹽類，，意指揭 示化合物的衍生物，其中藉著製造其酸或驗式鹽來修飾親 代化合物。在藥學上可接受之鹽類的實例包括，但不限於 鹼性殘基，如胺的無機或有機酸鹽類，酸性殘基，如羧酸 的鹼金屬或有機鹽類，以及類似物。在藥學上可接受的鹽 類包括親代化合物從例如無毒性無機或有機酸形成的傳統 無毒性鹽類或四級錢鹽類。例如，這類傳統的無毒性鹽類 包括，但不限於衍生自選自2乙醯氧基苯甲酸、2_羥基乙 烧石黃酸、醋酸、抗壞血酸、苯確酸、苯甲酸、二碳酸、碳 酸、摔檬酸、乙二胺四乙酸、乙烧二確酸、1>2.乙院續酸、 反丁烯二酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、穀胺酸、乙醇酸、乙 醇對胺基苯胂酸、己基間苯二酚酸、海拉貝米酸 (hydrabamic)、氫溴酸、氫氯酸、氫碘酸、羥基順丁烯二 酸、羥基萘甲酸、羥乙磺酸、乳酸、乳糖醛酸、十二烷基 磺酸、順丁烯二酸、蘋果酸、杏仁酸、曱烷磺酸、萘磺酸、 确k、草酸、帕馬酸、泛酸、苯基乙酸、磷酸、聚半乳糖 醛酸、丙酸、水揚酸、硬脂酸、鹼式乙酸、琥珀酸、胺基 磺酸、磺胺酸、硫酸、鞣酸、酒石酸、甲苯磺酸和常出現 的胺基酸，例如甘胺酸、丙胺酸、苯丙胺酸、精胺酸等等 之無機和有機酸的那些。 其他貫例包括己酸、環戊烧丙酸、丙酮酸、丙二酸、 3-(4-羥基笨甲醯基）苯甲酸、肉桂酸、4_氯苯石黃酸、萘石黃 202 200817327 酸、4-甲苯續酸、樟腦石黃酸、4_甲基二環_[2 2 2]•辛 羧酸、3-苯基丙酸 '三甲基乙酸、第三_丁基乙酸、黏康酸， 以及類似物。本發明亦包括杳山 . ^彷曰出現在親代化合物中之酸性 質子被金屬離子置換，例如終厶 U如鹼金屬離子、鹼土金屬離子或 銘離子，或與有機驗配位，如 如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇 胺、三羥甲基胺基甲烷、N_甲巧献〜 甲匍糖胺以及類似物時形成的 鹽。 應瞭解所有提到的在筚學μ ，
你糸予上可接受之鹽類，均包括相 同鹽類在本文中定義的溶劑力忐 Μ加成形式（溶劑合物）或晶形（多 形性）。
，可從含有雜或酸性部分的親代化合物，藉著傳統的 化學方法’合成本發明在藥學上可接受之鹽類。通常，可 藉著使這些化合物的自由酸或驗形式與化學計算量的適當 鹼或酸在水中或在有機溶劑中，或在兩者的混合物中反 應；可使用非水介質，像乙醚、乙酸乙醋、乙醇、異丙醇 或乙腈’製備這類鹽類。在雷明頓氏藥理學(—S
Pharmaceutical Sciences)，第 18 版（μ_ 讀㈣叫 Company，1990)中找到適當鹽類的列纟。例如，鹽類可包 括，但不限於含脂肪族胺、含經胺和含亞胺之本發明化合 物的鹽酸鹽和乙酸鹽。 亦可將本發明之化合物製備成酯，例如在藥學上可接 受的酯類。例士"可將在化合物上的羧酸官能基轉變為其 ㈣甲基、乙基或其他酯。再者，亦可將在 化合物上的醇基團轉變為其相對應的醋，例如醋酸、丙酸 203 200817327 _ 或其他酯。 亦可將本發明之化合物製備成前藥，例如在藥學上可 接受之前藥。在本文中可交替使用，，前—藥，，和，，前藥”，並意 指任何在活體内釋放出活性親代藥物的化合物。因為已知 前藥提高了藥物的許多想要性質（例如溶解度、生物利用 欧、製造專等），故可以前藥形式遞送本發明之化合物。因 此本發明企圖涵蓋目前請求之化合物的前藥、遞送其之 方法，以及含有其之組成物。”前藥，，企圖包括任何共價結 ( 合的載劑，當將這類前藥投與個體時，其在活體内釋放本 發明之活性親代藥物。藉著以在例行操作中或在活體内， 從親代化合物上切開該修飾之方式，修飾出現在化合物中 的S月b基’來製備本發明之前藥。前藥包括使其中之經基、 月女基、硫鼠基、羧基或幾基基團與任何基團結合，其可在 活體内被切開，分別形成自由羥基、自由胺基、自由硫氫 基、自由叛基或自由羰基基團的本發明之化合物。 前藥之實例包括，但不限於在式I化合物中之羥基官 能基的酯類（例如乙酸酯、二烷胺基乙酸酯、曱酸酯、璘酸 酯、硫酸酯和苯曱酸酯衍生物）和胺基曱酸酯（例如n，n_: 甲胺基羰基）、羧基官能基的酯基團（例如乙基酯、嗎啉乙 醇酯）、胺基官能基的N-醯基衍生物（例如N-乙醯基）、N-哭尼希（Mannich)驗、席夫（Schiff)驗和烯胺酮類、_和駿 官能基的肟、縮醛、縮酮和烯醇酯類，以及類似物。參見 Bimdegaard，H· “前藥的設計（Design〇fPr〇drugs)，，，第 ^92 頁，Elesevier，New Y〇rk-Oxford(1985)。 204 200817327 “保護基，，意指一群原子，當其附接在分子中的反應性 基團上時，隱藏、降低或阻止了反應性。可在Green和Wuts， 有機化學中的保護基（Protective Groups in Organic Chemistry)(Wiley，第 2 版 1991) ; Harrison 和 Harrison 等 人，合成有機方法的摘要（Compendium of Synthetic Organic Methods)，第 1-8 冊（John Wiley and Sons，1971 -1996);以 及 Kocienski，保護基（Protecting Groups) (Verlag，第 3 版 2003)中找到保護基的實例。 “胺保護基”一詞企圖意指將胺、醯胺或其他含氮部分 轉換成實質上對特定化學反應條件為惰性之不同化學基團 的官能基。最好是在不影響分子之其他官能基的條件下， 以良好產量輕易並選擇性地移除胺保護基。胺保護基的實 例包括，但不限於甲醯基、乙醯基、苄基、第三·丁基二甲 矽烷基、第三-丁基二苯矽烷基、第三-丁氧羰基（B〇c)、對_ 甲氧卞基、甲氧曱基、曱苯續醯基、三氟乙醯基、三曱石夕 烷基（TMS)、苐基-曱氧羰基、2-三甲矽烷基-乙氧羰基、^ 甲基-1-(4-聯苯基）乙氧羰基、烯丙氧基羰基、苄氧羰基 (CBZ)、2-三甲矽烷基-乙烷磺醯基（SES)、三苯甲基和經取 代之三苯甲基基團、9-苐基甲氧羰基（FMOC)、硝基-藜蘆 氧基羰基（NVOC)，以及類似物。由熟諳此藝者簡單地確認 其他適當的胺保護基。 代表性的經基保護基包括其中將經基基團乙醯化或烧 基化的那些，如节基和三苯甲基驗，以及烧基醚、四氫旅 喃醚、三烷基矽烷基醚和烯丙基醚。 205 200817327 “穩定的化合物”和，，穩定的結構，，意味著一化合物堅固 得足以經歷從反應混合物中以有用的純度分離，並調配成 有效治療劑。 在說明書中，單數形式亦包括複數，除非前後文另行 明確地指定。除非另行定義，否則所有在本文中使用的技 術和科學名詞均具有與熟悉本發明所屬之技術人士普遍瞭 解的相同意義。在不一致的情況下，將查驗本說明書。 除非另行指定，所有在本文中使用的百分比和比例均 按重量計。 “組合治療，，（或，，共同-治療”）包括投與本發明之化合 物，和至少一個作為特殊治療攝生法一部分的第二製劑， 打算提供來自這些治療劑之相互作用的有利影響。組合的 有利影響包括，但不限於艇闵於％也為丨一 A .
二或多個這些治療劑的投藥，作為分開單一 可以’但通常不打算包括 為分開單一治療攝生法的 一部分，結果順帶且獨斷地產生本發明之組合
206 200817327 的=’包括但不限於口服路徑、靜脈内路徑 經由黏膜組纖吸收。可藉著相同路徑或藉著不同 二台療劑。例如’可藉著靜脈内注射投與所選擇之 :且合的第-個治療劍，同時藉口服投與該組合的：： ϋχ或者’例如所有的治療劑均可口服投藥，或所有的α :::劑均可藉著靜脈内注射投藥。投與治療 嚴格限制。 热 ‘二合治療，，亦包括進一步以與其他生物活性成分和非_ 卞㈣；：療（例如手術或輻射治療）之組合，投與上述的治療 :間進組：!二更包括非，物治療時，可在任何適當的 ::丁樂物治療’只要從治療劑與非-藥物治療之 、、且&的相互作用中獲得有利影響即可。例如，在適當的情 況下’當從治療劑的投藥中暫時移除非—藥物治療，或呼 數天或甚至數週，仍獲得有利的影響。 t 在=個說明中，當描述組成物具有、包含或包括特定 的财…預期該組成物基本上是由或是由所提及之缸份 組成。同樣的，當描述製程具有、包含或包括特定的製程 :驟時’該製程基本上是由或是由所提及之製程步驟組 成。此外，應瞭解步驟的順序或進行某些動作 重要的’只要本發明仍可操作即可。而且，可同時進行一 或多個步驟或動作。 以口服、經鼻、經皮、肺臟、以吸入、頰部、舌下、 腹腔内、皮下、肌肉内、靜脈内、經直腸、胸膜内、稍内 和非經腸方式投與化合物或其在藥學上可接受之_類。在 207 200817327 熟諳此藝者將承認某些 一具體態樣中，口服投與化合物 投藥路徑的優點。 因素選出的化合物，包括患 、性別和醫學狀況；待治療 ;患者的腎和肝功能；以及 。熟練的臨床醫師或獸醫師 該狀況進行所需的藥物有效 給藥攝生法使用根據各種 者的類型、物種、年齡、體重 之狀況的嚴重性；投藥的路徑 所使用之特定化合物或其鹽類 可迅速判斷預防、對抗或阻止 量，並開立處方。
可在雷明頓：藥理學的科學和實際（Remingt〇n: the
Science and Practice 〇f ph_acy)，第 i9 版，
Publishing Co·，Easton，PA(1995)中找到調配和投與本發明 揭示之化合物的技術。在一具體態樣中，在本文中揭示之 化合物，及其在藥學上可接受之鹽類，可與在藥學上可接 受之載劑或稀釋劑一起用在藥學製劑中。適當的在藥學上 可接受之載劑包括惰性固體填料或稀釋劑，以及無菌的含 水或有機溶液。化合物將以足以提供在本文中描述之想要 劑量範圍内的量，出現在這類醫藥組成物中。 在一具體態樣中，製備口服投藥用的化合物，其中將 揭示之化合物或其鹽類與適當的固體或液體載劑或稀釋劑 混合，形成膠囊、錠劑、藥丸、散劑、糖漿、溶液、懸浮 液以及類似物。 錠劑、藥丸、膠囊以及類似物，含有從大約1到大約 99重量％的活性成分，以及粘合劑，如黃蓍樹膠、阿拉伯 樹膠、玉米澱粉或明膠；賦形劑，如磷酸二鈣；崩解劑， 208 200817327 如玉米殿粉、馬鈐薯澱粉或藻酸；潤滑劑，如硬脂酸鎂； 及/或增甜劑，如蔗糖、乳糖、糖精、木糖醇以及類似物。 當單位劑型是膠囊時，除了以上類型的材料之外，它經常 含有液體載劑，如脂肪油。 在某些具體態樣中，可出現各種其他的材料，作為塗 料或修飾劑量單位的物理形式。例如，在某些具體態樣中， 以紫膠、糖或兩者塗覆錠劑。在某些具體態樣中，糖漿或 ， 酏劑除了活性成分之外還含有作為增甜劑的蔗糖、作為防 腐劑的對羥苯甲酸甲酯和丙酯、染料和香料，如櫻桃或橘 子香料，以及類似物。 在某些與非經腸投藥有關的具體態樣中，可將揭示化 合物，或其鹽類、溶劑合物、互變異構物或多形體，與無 菌的含水或有機介質混合，形成注射用溶液或懸浮液。在 一具體態樣中，注射用的組成物為含水的等張溶液或懸浮 液。可將組成物滅菌，並/或含有佐劑，如防腐劑、穩定劑'、 濕潤劑或乳化劑、溶液促進劑、調節滲透壓的鹽類及/或緩 i衝溶液。此外，其亦可含有其他在治療上有價值的物質、。 分別根據傳統的混合、成粒或塗膜方法來製備組成物，並 含有大約〇.""5%的活性成分，在另一具體態樣中，植 成物含有大約1到50%的活性成分。 、 例如，使用溶齊！，如芝麻油或花生油，<含水丙二醇> 以及化合物水溶性的在藥學上可接受之鹽類的水溶液，產 生注射用溶液。在某些具體態樣中，在甘油、液體聚乙二 醇及其在油中的混合物中製備分散體。在普通的健存和： 209 200817327 用it'件下，這些製劑含有防腐劑以避免微生物生長。當在 本文中使用時’，，非經腸投藥，，和，，以非經腸方式投藥，，一詞 〜才曰、、，％ #局邛投藥以外的另一種投藥方式，通常是藉著 /主射並包括但不限於靜脈内、肌肉内、動脈内、鞘内、 展内眼眶内、心臟内、皮β、腹腔内、、經氣管、皮下、 表皮下、關節内、囊下、蜘蛛膜下、脊椎内和胸骨内注射 和輸液。 為了直腸投藥’適合的醫藥組成物是例如局部製劑、 栓劑或4腸#1。從脂肪乳劑或懸浮液有利地製備栓劑。可 將、且成物滅菌’並/或含有佐劑’如防腐劑、穩定劑、濕潤 劑或礼化劑、溶液促進劑、調節滲透壓的鹽類及/或緩衝溶 液。此外，其亦可含有其他在治療上有價值的物質。分別 根據傳統的混纟、成津立或塗膜方法來製備組成物，並含有 大約〇· 1 @ 75%的活性成分’在其他具體態樣中，組成物 含有大約1到50%的活性成分。 在某些具體態樣中，將組成物調配成藉著肺臟投藥來 遞送活性成分’例如從例如手動幫浦噴霧器、霧化器或加 壓定量-給藥之吸入器，投與含有活性劑的氣溶膠調配物。 在某些具體態樣中，適合這類型的調配物亦包括其他製 劑，如抗靜電齊! ’以便維持揭示化合物為有效的氣溶膠。 遞送氣溶膠的藥物遞送裝置，包括具有計量活門的適 當氣溶膠金麟’其中含有上述的藥學氣溶膠調配物，和 適合裝在金屬罐中的内藏調節器’並容許藥物遞送。在藥 物遞送裝置中的金屬罐具有超過罐子總體積大、約Μ的液 210 200817327 面上空間。通常將打算以肺臟投藥的聚合物溶解'縣浮或 礼化f溶劑、表面活性劑和推進劑的混合物中。在已經利 用5十買活門密封的罐中，將混合物維持在麼力下。 關於經鼻投藥，可使用固體或液體載劑。固體載劑包 括粗粉、，具有範圍從例如大約2G到大約5⑼微米的顆粒 尺1並通過鼻道迅速吸人來投與這類調配物。在某些具 體恶樣中’使用液體載劑，以經鼻噴霧劑或滴劑投與調配 物，並包括活性成分的油或水溶液。 亦期待為迅速分散劑型的調配物，亦稱為，，閃釋劑，，型。 特定而言，將本發明的某些具體態樣調配成在短時間内， 例如通常低於大約5分鐘，在另一具體態樣中低於大約90 心在另具體悲樣中低於大約3 0秒，且在另一具體態 樣中低於大約10或15秒，迅速釋放其活性成分的組成物。 這類調配物適合經由各種路徑投與個體，例如藉著插入體 腔内’或施用在潮濕的體表或開放性傷口。 通常，”閃釋劑（flash dosage)，，為口服的固體劑型，其 迅速地在口中分散，並因此不需要用力呑嚥，而容許化合 物經由口腔粘膜被迅速攝取或吸收。在某些具體態樣中， 適當的迅速分散劑型亦可用在其他應用上，包括治療傷口 及其他的身體損傷和疾病狀態，其中藉著外在提供水分使 藥劑釋放是不可能的。 “閃釋劑”型為在技術領域中已知的；參見，例如在美 國專利第5,5 7 8,3 22號和5,6〇7,697號中的不溶性微粒之起 泡性劑型和快速釋放塗料；在美國專利第4,642,9〇3號和 211 200817327 5,63 1，023號中的冷凍乾燥泡沫和液體；在美國專利第 4,855,326號、5,380,473號和第5,518,73〇號中的劑型之熔 體紡絲；在美國專利第6,471,992號中的固體、自由_形式 製造；在美國專利第5,587，172號、5,616,344號、6,277,4〇6 號和5,622,719號中的以糖為基礎之載劑基質和液體粘合 劑；以及其他在技術領域中已知的形式。
本發明之化合物亦可調配成，，脈衝釋放，，調配物，其中 以連續釋放，從醫藥組成物中釋放化合物（即脈衝）。亦可 將化合物調配成，，延遲釋放，’調配物，其中在延長的期間内 從醫藥組成物中持續釋放出化合物。 ，亦期待調配物，例如液體調配物，包括環狀或無環的 包膠或溶劑化劑，例如環糊精、聚醚或多醣(例如甲基纖維 素）’或在其他具體態樣中，多陰離子之3 _環糊精衍生物， 具^續酸納Μ基團，烧基㈣隔基或多_與親脂性空 腔分開。在一具體態樣中，該劑為甲基纖維素。在另一具 體態樣中’該劑為多陰離子之環糊精衍生物，具有磺酸 鈉鹽，藉著丁基醚間隔基，例如CApTIS〇L@(CyDex， hnd，KS)與親脂性空腔分帛。熟諳此藝者可藉著製備 該劑在水中的溶液’例如4〇重量％的溶液;製備連續稀釋， 例如製造20%、1〇%、5%、2 5%、〇%(對照組）的溶液，以 及：似物；添加過量(與可被該劑溶解的量相比較)的揭示 2物；在適當的條件下混合，例如加熱、授拌、超音波 =以及類似者；離心或過滤所得的混合物，得到澄清的 溶液；並分析溶液中的揭示化合物濃度，來評估適當的該 212 200817327 劑/揭示化合物之調配比例。 在本文中引用的所有公開案和專利文獻，係以引用方 式納入本文中，就如同以特定地及個別地將各個公開案或 文獻以引用方式納入本文中一般。引用的公開案和專利文 獻並非企圖許可任何有關的先前技術，也不是對其内容或 曰期制定任何許可。現在藉著書面說明描述本發明，熟諳 此藝者公認可在各種具體態樣中實行本發明，而先前的說 月和下文的實施例是為了解釋但並非限制以下的申請專利 範圍。 實施例 灵％例1-吲哚衍生之蛋白質激酶及/或蛋白質磷酸酶抑 制劑的合成和活性 下列結果顯示5 -氯m # · J、rfr , ^ L 5丨木卡巴沙邁（carbaxamide)庫的
中間物和試樣試劑的合成： I·*3·苯基吲哚-2-羧酸 間物和試樣試劑的合成： 溶液& a，、 酸酶 例，
(a)甲基酯的製備
在室溫下過夜攪拌 -鼠吲哚-2-羧酸（6克，33·5毫莫耳） 213 200817327 •和新近製備之甲醇HC1( 1 〇〇毫升）的混合物。藉著過滤收集 沉澱的酯，以NaHC〇3飽和溶液、水和MeOH沖洗。以飽 和的NaHC〇3處理濾液，並以Et〇Ac萃取。以鹽水沖洗有 機層，脫水（Mg SO4)，並在真空中蒸發。產物酯（6克）為灰 白色固體’將其用於下一個步驟不需進一步純化：溶點 200-201°C ; iHNMRCCDClh 500 百萬赫茲）5 8.94(br，1H)， 7.33(dd，1H，J=9.2 和 4·3 赫兹），7.30(dd，1H，J=2.2 和 9·2)， ^' 7.15(d，1Η，J=2.1 赫茲），7.07(ddd，1Η，J=：2 5, 8·9 和 91 赫 茲），3.92(s，3Η) (b)3-碘衍生物的製備
N Η 將4.22克（21·8耄莫耳）的甲基酯溶解於DMF(25毫升） 中。在另一個燒瓶中，攪拌在 克，24毫莫耳）和κ〇Η(4·65克，82.9 鐘，並在5分鐘内逐滴加至酯溶液中 分鐘之後，藉著倒入在300毫升水中二 ΜΗ4011(在水中的25%溶液）的溶液中4 該混合物3 0分鐘 並以Η20沖洗：11Η)，7.33(dd，1Η， 2.0 赫茲），7_l2(dt，1H，J=9.0 和 2·〇 献 Ρ，攪拌在DMF(25毫升）中之碘（6〇9 〇Η(4·65克，82.9毫莫耳）的溶液3〇分 逐滴加至酯溶液中。在室溫下攪拌i 0 ”〜丨 你至/皿卜視袢 1 〇 入在300耄升水中之HaNS〇3(2.2克）、 25%溶液）的溶液中使該反應驟冷。 °攪拌
(c)鈐木（Suzuki)偶聯 • 21(dd，1H，J=9.〇 和 0 和 2·〇 赫茲），3.81(s，3H)。 214 200817327
在二聘烧（200毫升）中將碘衍生物與苯硼酸（2·76克，22 宅莫耳）、PdCl2(PPh3)2(〇.7克，1毫莫耳）和
50毫升2M
Na2C03混合。在90°C下攪拌該混合物過夜。在真空下蒸 發溶劑。以EtOAc(3x200毫升）萃取產物。以鹽水沖洗混合 的萃取物，以MgS〇4脫水，並藉著結晶作用（CH2C12-己烷） 和石夕膠層析法（己烧-EtOAc 4:1)純化··溶點189°C ; 4 NMR(CDC13，500 百萬赫茲）3 8 94(br，1H)，7 51(dd，2H， J=1.5 和 7·9 赫茲），7.45(ddd，2H，J=1.8，7.3 和 7.8)，7.39-7.34(複合的，2H)，7.25(dd，J=2.5 和 8_7 赫茲），7.10(ddd，1H， J=2.5, 8·9 和 9·1 赫茲），3.8〇(s，3H)。 (d)甲基酯的皂化作用 將上述的酯（2·5克，9.28毫莫耳）溶解於THF(30毫升） 中。加入在水（20毫升）中之Li〇H(2 4克，1〇〇毫莫耳）的溶 液，並將該混合物加熱至迴流丨小時。將該混合物冷卻至 至溫’並藉著真空蒸發移除THF。以2M HC1處理該混合 物，直到它變成酸性。以Et〇Ac萃取產物。沖洗有機層， 脫水（鹽水、NadCU)，並在真空下濃縮。將粗製的固體產 物再度溶解於NaHC〇3(飽和溶液）中，並以沖洗數 次。以冰和2M HC1將液層酸化，並以Et〇Ae萃取。在沖 洗之後，脫水並旋轉汽化，收集白色固體狀之產物（產量2·3 克，97%):熔點 195-196°C ; 4 NMR(CDC13，500 百萬赫 么么）5 8.94(br，1H)，7.52(dd，2H，J=1.8 和 7.9 赫茲），7.46(ddd， 215 200817327 ’ 一 1 · 8，7 · 4 和 7 · 8 赫茲）， 、25(dd，1H，J=2.5 和 8.7 8.9赫茲）。 2H，J=1.8, 7.3 和 7.6)，7.40(ddd，1H，J=i.8 7.37(dd，1H，J = 9.〇 和 4.2 赫茲），7.25(dd 赫兹），7.12(ddd，1H，J = 2.4, 8.8 和 8.9 赫努 3_苄氧基-5-羥基苯甲腈
將苄基溴（1.438克，8毫莫耳）加至在CH3CN(5〇毫升） 中之3,5-二羥基苯甲腈（1·08克，8毫莫耳）和K2c〇3(ii〇4 克’ 8毫莫耳）的混合物中。將該混合物加熱至迴流2小時。 在真工下療發溶劑。以EtOAc(200宅升）和HC1(200毫 升）處理殘餘物。沖洗有機層，脫水，並在真空中蒸發。層 析殘餘物（梯度，己烷-CH^Cl^MeOH)，得到弘苄氧基羥 基苯甲腈（529毫克，29%)、3，5-二苄氧基苯甲硝醯（7 84毫 克’ 3 1%)和2 56毫克（23.7毫克，24%)的起始材料。產物3-卞氧基經基苯甲腈具有：熔點144-145°C ; 4 NMR5 9.l5(s，1H，QH)，7.47(d，2H，J = 7.0 赫茲，2'和 6、、· 7.40(ddd， 2Η，]-7·0, 7.0, 2.0 赫茲，3'和 5')，7.34(dd，1Η，J = 7.7 和 2.1 赫兹，11)，6.89(dd，1H，J=1.5 赫茲，生)，6.78(d，2H，J=1.8 赫 茲），5.16(s，2H)。 3,5-二苄氧基苯曱硝醯
該化合物具有熔點106°C ; β NMR(CDC13，500百萬 赫兹）(5 7.3 8(複合的，10H)，6.83(d，2H，J = 2.1 赫茲），6.79(d， 216 200817327 1 H，J = 2· 1 赫兹）。 4-^|^基-3-羥基苯甲腈
丫 OH 〆'0
在至/凰下攪拌在丙酮（20毫升）中之3,4-二羥基苯甲腈 (540笔克，4毫莫耳）、Κ/〇3(552毫克，4毫莫耳）和苄基 、（ 宅克4宅莫耳）的混合物3天。在真空下蒸發該混 合物，並經歷閃爍管柱層析法（在甲苯_己烷，2:1中的 /〇MeOH)知到想要的產物（224毫克，25%):炼點1 〇 1 °c ; NMR(丙酮-d6，500 百萬赫兹）占 g.55(s，1H)，7.50(d，2H， 卜7.3 赫兹），7.39(dd，2H，J=7 〇 和 7·3)，7 34(dd，m，J=7 〇 和 7.3)，7.2(m，複合的，3H)，5.25(s，2H)。 3-羥基-4-丙氧苯甲腈
CN ψ〇Η 依據類似用以製備4-苄氧基-3-經基苯甲腈的程序，製 備該化合物，產量27% :熔點99°C ; NMR(丙酮-d6, 500 百萬赫茲）(5 8.33(s，1H)，7.21(dd，1H，J=8.2 和 l8 赫茲）， 7.13(d，1H，J=1.8 赫茲），7.08(d，1H，J = 8.3 赫茲），4.〇7(t，2H， J = 6.4 赫茲），l.80(m，2H)，h〇l(t，3H，J=7.3 赫茲）。 3-苄氧基-5-羥基苄胺 217 200817327
將3-苄氧基-5-羥基苯曱腈（225毫克，1毫莫耳）溶解 於2宅升THF中。逐滴加入2¾升BH3_THF(1.5M在THF 和醚中），然後將該混合物加熱至迴流溫度3小時。在冷卻 之後，將該混合物小心地倒入3M HC1(冰冷的）中，並容許 在室溫下攪拌20小時。以固體NaHC03將該混合物中和， 因此沉澱出白色固體狀之產物。藉著過濾收集產物，以水 沖洗並脫水（140毫克，61%):熔點164-1 66°C (裂解）；4 NMR(DMSO-d65 400 百萬赫茲）5 9.28(br，1H)，7.41(d，2H， J = 6.9 赫茲），7.36(dd，2H，J=7.0 和 7.6 赫茲），7.30(dd，1H， J = 7_0 和 6.6 赫茲），6_43(s，1H)，6.32(s，1H)，6.21(dd，1H， J = 2.2 和 2.0 赫茲），4.99(s，2H)，3.57(s，2H)。 3,5 - —卞氧基节胺
根據用以製備3-苄氧基-5-羥基苄胺的程序製備該化合 物。經由加入MeOH使該反應驟冷，並留下該混合物攪拌 過夜。移除溶劑，並藉著閃爍管柱層析法（CH2C12-己烷， 含有5%MeOH)獲得澄清濃稠油狀的產物（90%): ^NMR(丙 酮-d6，500 百萬赫茲）57.46(d，4H，J=7.6)，7.37(dd，4H， J = 7.3 和 7.6)，7.31(dd，2H，J=7.3 和 7.0)，6.65(d，1H，J=2.1 218 200817327 赫茲），6.64(d，1H，J=2.0 赫茲），6.52(dd，1H，j=2 0 和 2 2 赫 茲），5.07(s，4H)，4.35(s，2H)，1.97(br，1H)，i 85(br 1H)。 4-苄氧基-3-羥基苄胺
f 根據用以製備3,5-二苄氧基苄胺的程序，從4_节氧基 33%。熔點 3-羥基苯甲腈開始，製備該化合物。產量為 122-125°C ; β NMR(DMSO-d6, 400 百萬赫兹）占 8.9(br, m)， 7.44(d，2H，J=7.4 赫兹），7.35(dd，2H，J=7〇 和 77 赫兹）， 7.28(dd，1H，J=7.0 和 7.3)，6.85(d，1H，J=7.6 赫兹），6 77(d， 1H，J-2.1 赫餘），6.61(dd，1H，J=7.4 和 2.2 赫茲），5 〇5(s 2h) 3.55(s，1H)，2.50(br，2H) 〇 羥基-4-丙氧苄胺
根據在3,5-二苄氧基苄胺之製備中描述的程序，藉著 還原3-羥基-4-丙氧苯曱腈來製備該化合物。產量為仏％ · 熔點110-113°C (裂解）；4 NMR(CDC13，400百萬赫兹）占 6.86(s，1H)，6.77(d，1H，J=8.4 赫茲），6.74(d，1H J = 8 1 扯 #、 ，。· i跡餘）， 3.95(t，1H，J=6.6 赫茲），3.74(s，2H)，2.01(br，2H)，i 82(m 2H)，1.02(t，3H，J=7.4 赫兹）。 219 200817327 4·羥甲基苄胺 ΜΗ2
ClrfeOH ί \
根據在3,5-二苄氧基苄胺之製備中描述的程序，藉著 還原4-氰基苯甲醛來製備該化合物。產量為46% :熔點 102-123t： ; WNMR(丙 __d6,5〇〇 百萬赫茲）5 7 27(m，複 合的，4H)，4.58(s，2H)，3.72(s，2H)，3 69(s，1H)，2 77扣， 1H)，2.45(br，1H)。 3 -羥甲基苄胺
^η2οη 根據在3,5-二节氧基节胺之製備中描述的程序，藉著 還原3-氰基苯曱醛來製備該化合物。產量為祕；ΐΗ NMR(丙嗣-d6, 500 百萬赫茲）5732(dd，m，j=76 和 7〇)， 7.19(複合的，2印，4.59(8,2印，4.40(8,211)，4.1〇〇^，11€)， 1.96(br，1H)，1.88(br，1H)。 ’ 2-甲氧基-5-硝基苯曱醛甲基半縮醛 OCH3 將2-經基_5_確基苯甲駿（3 34克，2〇毫莫耳）溶解於丙 酮（70毫升）中；加人Κ/〇3(5·53克，40毫莫耳）和蛾化甲 ^(14.19克，100耄莫耳），並將該溶液加熱至迴流過夜。 在真空中蒸發溶劑，並將殘餘物溶解於Et〇Ac中。以 220 200817327 〇H 水和鹽水沖洗所得的產物，並脫水。移除溶劑， 知到固體產物（2_5克，69%)，2-甲氧基-5-硝基苯甲醛甲基 半細酸·溶點147-148°C (醛的報告為89°c);iHNMR(CDC13, 4〇〇 百萬赫兹）δ 8.43(d，1H，J=2.9 赫兹），8.24(dd，1H，J=2.6 和 9·1 赫茲），7.78(d，1H，16 5 赫茲），6 99(d，m，j=9 i 赫茲）， 6.83(d，1H，J=16.4赫茲）。注意：該NMR在大約10個月 之後取得，半縮醛仍然存在且是純的。 5-石肖基-2 -丙氧基苯甲酸
使用類似在製備2-甲氧基-5-硝基苯甲醛甲基半縮醛時 描述的程序，藉著2 -經基-5-石肖基苯甲駿與1-蛾丙烧的反 應’製備該化合物。產量為72%:熔點（51-52°C ); 4 NMR(500 百萬赫兹，CDC13) 5 l〇.46(s，1H)，8.68(d，1H，J=2.9 赫茲）， 8.39(dd，1H，J=2.7 和 9.1 赫兹），7.08(d，1H，J=9.1 赫兹）， 4.16(t，2H，J=6.2)，1.93(m，2H)，1.98(t，3H，J=7.37)。 2-羥甲基-4-硝基酚
〇2N 將在60毫升1M NaOH和30毫升MeOH之混合物中 的2-經基-5-硝基苯曱醛（5 ·〇ι克，3〇毫莫耳）的溶液冷卻至 0°C。慢慢加入在15毫升1M NaOH和5毫升MeOH中的 NaBH4(l_13克’ 30毫莫耳）溶液。在室溫下攪拌該反應混 合物24小時。將該混合物倒入冰冷的2M HC1中，並以 EtOAc萃取。沖洗有機層，脫水，並在真空中蒸發，得到 221 200817327 黃色固體狀的醇（5.1克，ι00%):熔點（112-114°C ) ; 4 NMR(DMSO-d6，400 百萬赫茲）m〇8(s，1H)，8.18(d，1H, J 一 2·5 赫茲），8.00(dd，1H，J=2.5 和 8·7 赫茲），6.92(d, 1H， J = 8.8 赫茲），5.2〇(br，1H)，4.49(s，2H)。 2-甲氧基-5-硝基苯甲醇
使用類似在製備2-羥甲基-4-硝基酚時描述之方法，藉 著還原2-甲氧基-5-硝基苯甲醛甲基半縮醛，製備該化合 物’產量 76%:熔點 i2l-i22°C ; β NMR(DMSO-d6，500 百萬赫兹）5 8.22(d，1H，J=1.22 赫茲），8.16(dd, 1H，J=2.7 和 9,1)，7.16(d，1H，J=8.9 赫茲），4.50(s，2H)，3.90(s，3H)。 5-硝基丙氧基-苯曱醇
使用類似在製備2-羥甲基-4-硝基酚時描述之方法，藉 著逛原5-硝基-2-丙氧基苯甲醛，製備該化合物，產量93% : 义谷點（沒留試樣進行熔點測定）；lH NMR(400百萬赫茲， DMSO-d6) δ 8.22(d5 1H，J=2.6 赫兹），8.13(dd，1H，J=2_9 和 9·2 赫兹），7.14(d，1H，J=9_2 赫茲），5_41(t，1H，>5·5 赫茲）， (52(d，2H，J=5.8 赫茲），4 〇8(t，2H，J=6 2)，175(叫 2印， 〇·98(ί，3Η，>7·6 赫茲）。 ，，
222 200817327 依據在製備2-曱氧基-5-硝基苯甲醛甲基半縮醛時描述 之方法，藉著2-羥甲基-4_硝基酚與苄基溴的烷基化作用製 備該中間物，產量84% :熔點81-83°C ; eNMWDMSO-do 500 百萬赫茲）5 8.26(d，1H，J=2.9 赫茲 Hdi)，8.15(dd，1H， J=2.9 和 9·1 赫茲，H_4)，7.46(d，2H，J=7.0, 2^6：-Hs), 7.41(dd， 2H，J=7.〇 和 7·7，3\5'-Hs)· 7.34(d，1H，J=7 赫茲，4'·Η): 7.25(d，1H，J=9.1 赫茲，Ιζϋ)，5.4(br，1H，〇K)5 5.29(s，2H， CH2), 4,57(s? 2H? CH^。 3-羥甲基-4-甲氧苯胺
將在EtOH(20毫升）中之2-甲氧基·5-硝基苯甲醇（1.02 克，6.03毫莫耳）和SnCl2.H20(6.8克，30.15毫莫耳）的混 合物加熱至70°C1小時。在冷卻之後，以2M NaOH處理 該混合物，並以醚萃取。以水沖洗有機層，脫水，並在真 空下蒸發，得到2· 1 8克（84%)的苯胺3-羥甲基-4-甲氧苯胺： NMR(DMSO-d6, 500 百萬赫茲）56.66(d，1H，J=2_2 赫兹） 6.61(d，1H，J=8.6 赫茲），6.38(dd，1H，J=2.4 和 8_2 赫茲）， 4.81(t，1H，J=5.5 赫茲），4.54(br，2H)，4.37(d，2H，J=5.8 赫 茲），3.61(s，3H)。 3-經甲基-4-丙氧苯胺
使用在製備3-羥甲基-4-甲氧苯胺時描述之方法，藉著 還原5-硝基-2-丙氧基-苯甲醇，製備該化合物。產量·· 223 200817327 】H NMR(DMSO-d6, 500 百萬赫茲）6 6 66(d，m，j=2.5 赫茲）， 6.60(d，1H，J=8.6 赫茲），6.35(dd，1H，J=2 7 和 8·5 赫茲）， 4.79(t，1H，J=5.8 赫茲），4.54(bi*，2H)，4.37(d，2H，J=6.1 赫 茲），3.74(t，2H，J=6.4 赫茲），i 65(m，2H)，〇 94(t，3H，J=7 4 赫茲）。 4-苄氧基-3-羥甲基苯胺
h2u 使用在製備3-經曱基_4_甲氧苯胺時描述的方法，還原 2-苄氧基-5-硝基苯甲醇，製備該化合物，產量86% ·· ιΗ NMR(DMSO-d6，500 百萬赫茲）57.40((1，2H，J=73 赫茲）， 7.3 6(dd，2H，J = 7.3 和 7.6 赫兹），7.28(dd5 1H，J=7.0 和 7.4)， 6.70(d，1H，J=8.5 赫茲），6.68(d，1H，J=2.4 赫茲），6.3 5(dd，1H， J = 2.8 和 8.3 赫茲），4.92(s，2H)，4.84(t，1H，J=5.8 赫茲）， 4.59(br，2H)，4.44(d，2H，J=6.4 赫茲）。 B.庫的形成 共同結構
R=H，Ph 芳烷基、雜環 R1、R2=H、烷基、芳基、 基
1 ·醯胺偶聯的共同程序 a.方法A 〇°C 下）（0.15 在胺（參見下表VI關於胺）的冷混合物（在 224 200817327 毫升在CH2C12中的1M溶液，0.15毫莫耳）中，加入在 CH2C12(0.5毫升）中的酸（5-氟吲哚-2-羧酸或5-氟-3_苯基巧丨 "朵-2-羧酸）（0.15毫莫耳，為〇·ΐ5毫升在THF中的1M溶液）， 並冷卻至0°C。隨後，加入在CH2C12(0.5毫升）中之K(3_ 二甲胺基丙基）-3-乙基碳化二醯亞胺（EDCI)(0.15毫莫耳）和 Et3N(0.06毫莫耳）的混合物，並在〇°c下，在B〇hdan軌道 晨盈益（Mettler-Toledo Bohdan，Vernon Hills，IL)上震還兮 反應30分鐘，然後在室溫下震盪i8小時。在加入〇_5毫 升CH/l2和0.5毫升MeOH之後，使該混合物通過裝有陽 離子交換樹脂（Dowex 50wX4-200，Aldrich Chemical Coe Milwaukee，WI,以 1M HC1，H20，H20-Me0H，MeOH，
MeOH-CH/l2預先沖洗）的柱體。使洗脫物直接通過含有與 1 0%Na2CO3混合之矽膠的層析柱。以2毫升CH2Cl2-MeOH(2 毫升）、CH2C12(2毫升）和CH2Cl2-MeOH(2毫升）洗脫產物。 藉著TLC(EtOAc-己烷，1:1)確認含有純產物的溶離份（們）。 使用1H NMR定出化合物的特徵，並評估其相對純度。 b.方法Β 將胺（參見下表VI關於胺）（0.1毫莫耳）、酸（5-氟吲哚-2-羧酸或5-氟-3-苯基吲哚-2-羧酸）（0.1毫莫耳，為〇·1毫升 在DMF中的1M溶液）和二異丙基乙胺（〇ΙΕΑ)(〇·〇5毫升， 0.3毫莫耳）的混合物冷卻至〇°c。加入（苯并三唑-1_基氧基） 三吼咯啶-鱗-六氟磷酸鹽（PyBOP)(0.1毫莫耳，為〇·1毫升 在DMF中的1M溶液）。在〇°C下使用軌道震盪器震盪該反 應混合物3 0分鐘，然後在室溫下震盪1 8小時。在該混合 225 200817327 物中加入EtOAc，並以1M HCl(2xl毫升）、鹽水（1毫升）、 NaHC〇3(2xl毫升）和鹽水沖洗有機溶液。使有機層通過含 有上層無水MgS04，並以己烷濕潤的矽膠柱。以己烷（1χ1 毫升）、己烷-EtOAc 2:l(3xl 毫升）、己烷_EtOAc 1:ι(2χ2 毫 升）和己烧-EtOAc 1:2(1x2毫升）洗脫產物醯胺。藉著Tlc(在 5 -氟-3-苯基吲哚-2-叛酸醯胺衍生物的案例中為EtOAc-己 少元1 ·· 1和EtOAc-己烧1:2)確認含有純產物的溶離份（們）。
使用1H NMR定出化合物的特徵，並評估其相對純度。 c.方法C 將在0·4毫升CH2C12_THF(3:1)中之胺（參見下表Vi關 於胺）（〇·1毫莫耳）、酸（5-氟吲哚-2-羧酸或5-氟-3-苯基吲 哚-2-羧酸）（0_1毫莫耳，為〇·!毫升在thF中的1Μ溶液） 和DIEA(0.05毫升，〇·3毫莫耳）的混合物冷卻至ye。加 入PyBrOP(0.1毫莫耳）。在〇°c下使用執道震盪器震盪該 反應混合物30分鐘，然後在室溫下震盪48小時（在24小 時後加入0.1毫升THF和0.2毫升CH2C12)。在混合物中 加入EtOAc，並以1M HCl(2xl毫升）、鹽水（1毫升）、 NaHC03(2xl毫升）和鹽水（1毫升）沖洗有機溶液。使有機層 通過含有上層無水MgS〇4，並以己烷濕潤的矽膠柱。以己 烧（1x1毫升）、己烷-EtOAc 2:l(3xl毫升）、己烷-EtOAc 1:1(2x2毫升）和己烷_Et〇Ac ι··2( Ιχ2毫升）洗脫產物醯胺。 藉著TLC(在5-氟-3-苯基吲哚-2-羧酸醯胺衍生物的案例中 為EtOAc-己烷i:i和EtOAc-己烷1:2)確認含有純產物的 溶離份（們）。藉著1H NMR定出化合物的特徵。 226 200817327
d.方法D 5 -氟吲哚-2-羧酸氣化物的製備 將5-氟叫卜朵-2_魏酸（537毫克，3毫莫耳）溶解於〇ME(8 毫升）中。加入0.6毫升三乙胺，並將該混合物冷卻至。 在10分鐘内’使用添加漏斗小心地加入與4毫升DME混 合的亞硫醯氯（0.44毫升，6毫莫耳），同時加以攪拌。繼 縯攪拌該混合物3 0分鐘。濾掉形成的沉澱物，並在降低 的壓力下蒸發溶劑，得到醯基氯的黃色固體。 胺與5-氟吲哚-2-羧酸氯化物的反應 將在1毫升DCM中之胺（參見下表π關於胺）〇毫莫耳） 與°比咬（0.18毫升）的混合物冷卻至〇°c。加入5_氟0引嗓-2_ 羧酸氣化物（19 · 8毫克，1毫莫耳），然後在室溫下擾拌該 反應1小時。以1M HC1沖洗所得的醯胺（在DCM中），然 後以鹽水沖洗。藉著石夕膠層析法純化粗產物。 e·醯胺偶聯法的代表性實例 化合物1 z的合成
將在15毫升CH2C12中之DIEA(6.98毫升，40毫莫耳） 的溶液加至在DMF(50毫升）中之3_氟苄胺（2〇3克，2〇毫 莫耳）和5-氟吲哚_2_羧酸（3.58克，20毫莫耳）的混合物中。 將该混合物冷卻至〇°C，並分批加入PyB〇P(l〇.41克，20 毫莫耳）。在0 °C下擾拌該反應混合物3 0分鐘，然後在室 狐下攪拌4小時。將EtOAc(400毫升）加至該混合物中，並 227 200817327 以2M HCl(4x200 $升）、鹽水（2〇〇毫升）、心沉〇3(4^細 毫升）和鹽水（2x200毫升）沖洗有機溶液。將有機層脫水 (MgS04) ’並在真空中濃縮，提供灰白色固體狀之粗產物。 k MeOH和CH2C12中再結晶，得到5·36克（93〇/〇)白色結晶 狀之 lz:熔點 239-2411 ; lH NMR(DMS〇_d6, 5〇〇 百萬赫 ^)611.73(8, 1H), 9.12(t, 1H, J=6.1 # || ), 7.39(^.^^, 3H),
1H，J=2.2 和 9.0 赫兹），7.〇3(ddd，m，J=2 4, 9」和 9 2 赫旬， 4.52(d，2H，J=6.1 赫兹）；分析（Ci6Hi2F2N2〇) c，6713 ; h 4.23 ;N，9·79;實驗值；c，66.91;h，4.3i; 8i。， 化合物1 a的合成
O)甲氧基中間物的製備
依據上文提及關於合成lz的相同程序，從2〇毫莫耳 胺和酸開始製備該化合物。以閃燦管柱層析法純化，產生 5.43克（91%)灰白色結晶固體狀的甲氧基中間物：熔點I% (b)脫甲基作用 將甲氧基中間物（5克，ι6·7毫莫耳）和CH2Cl2(8〇毫升） 的混合物放在裝設有滴液漏斗和溫度計的多頸燒瓶中。在 冰/鹽浴中將燒瓶冷卻至〇。〇。逐滴加入在CH2Cl2中之BBq 的浴液（80宅升），同時保持溫度不超過5。在室溫下攪 228 200817327 拌该混合物3小時，在加 八水和3M HC1(200毫升）之後， 繼續攪拌該混合物過夜。驻#、 稽者過濾收集沉澱的固體產物， 以水沖洗，並脫水。從 n2U2和MeOH中形成結晶，提 供4.2克（88%)的化合物1 •熔點 213°C ; β NMR(DMSO- d6，400 百萬赫兹）(5 11 68(b W，1H)，9.31(br，1H)，9.01(t，1H， J=6.0赫茲），7.39(複合的 幻，2H)，7.14(s，1H)，7.09(dd，1H， J=8.0 和 7.7 赫茲）7 ι ’ · (ddd，lH，J=9.2，8.9 和 2.5 赫茲）， 簖餘），6.6l(d，1H，J=8.4 赫茲），4.41(d，2H， J=5.9 赫茲），HRMS(EI): C, H pm a & 、’ Li6H13FN2〇2 需要的 m+，284.0956 ; 實驗值，284.0960;分;)：；wr u h 刀啊…i6H13FN202) C，67.60 ; H，4·61 ; F，N，9.85;實驗值 C，67.5〇; H 4 65; fn 9 76。 f.獲得的其他代表性化合物及相關純度數據 下列的是使用以上方法獲得的化合物之實例，及其相 關純度數據。下文的表VI列舉了所有獲得的化合物。 化合物1 bb
V β NMR(丙酮-d6，400 百萬赫茲）5 1()·85(1)γ，1H)， 8.29(br，1Η)，7_53(dd，1Η，J=9.9 和 4.6 赫茲），7.36(d，1Η， J = 7.4)，7·30(複合的，3H)，7.22(dd，1H，J=7.3 和 7_0 赫茲）， 7.12(s，1H)，7.02(ddd，1H，J=2.6 和 9·2 和 9.1)，4.60(d，2H， 1 = 6.3 赫兹）。 229 200817327 化合物1 cc
1HNMR(丙酮-d6,500 百萬赫兹 W4(br，2H),8〇i(d， 和 2.5 赫兹），7.24 到 7.10(複合的，m，7H)，6 99(ddd，m， J = 9.3, 9.2 和 2.6 赫兹），5.40(dd，m，㈣ 〇 和 6 4 赫兹）， 5.20(dd，1H，J = 6.2 和 4.6 赫兹），4 7l(d，1H，J=4 6 赫兹）； LRMS(EI)，m/z 356·1(Μ+-Η2〇) 〇 化合物ldd
β NMR(丙酮-d6, 500 百萬赫茲）6 i〇 8〇(br，2H)，8.〇4(d， br，1H，J = 8.7 赫茲），7.43(dd，1H，J=9.0 和 4.8 赫茲），7.3 8(dd， 2H，J = 8.0 和 1.4 赫茲），7.34(dd，2H，J=8.0 和 1.4 赫茲）， 7.2 8(dd，1H，J = 9.6 和 2.4 赫兹），7·25 到 7.1 1(複合的，m，7H)， 6.98(ddd，1H，卜9.2, 9·1 和 2,5 赫兹），5.41(dd，1H，J = 8.8 和 6·6 赫兹），5.21(dd，1H，J=6.2 和 4.8 赫茲），4.71(d，1H，J=4.6 赫茲）。 化合物1 bbb
230 200817327 4 NMR(丙酮-d6，500 百萬赫茲）5 10.89(br，1H)， 8.31(br，1H)，7.54(dd，1H，J=9.1 和 4·6 赫茲），7.45(dd，1H， 片7.7和7.7赫茲），7.29(複合的，211)，7.17-7.08(複合的，311)， 7.03(ddd，1H，J=9.2，9·1 和 2.6 赫茲），4.66(d，2H，J=5.8 赫 茲）。 化合物1 yyy
β NMR(丙酮-d6，500 百萬赫茲）5 10.99(br，1H)， 9.57(br，1H)，7.80(s，1H)，7.76(d，1H，J=8.3 赫茲），7.57(dd， 1H，J=9.0 和 4.4 赫茲），7.3 5(dd，1H，9.2 和 2·4 赫茲），3.34(s， 1H)，7.29(dd，1H，J = 7.7 和 7.8 赫茲），7.09(d，1H，J=8.8 赫茲）， 7.06(ddd，1H，J=9.2，8.9 和 2.4 赫茲），4.63(d，2H，J=5.8 赫 茲），4.24(t，1H，J = 5.8 赫茲）；LRMS(EI) m/z 284.1(74%， M+)。 化合物lccc
NMR(丙酮 _d6，500 百萬赫茲）5 10.96(br，1H)， 9.49(br，1H)，7.79(複合的，2H)，7.56(dd，1H，J=8.9 和 4.5 赫茲），7.34(複合的，2H)，7.〇5(ddd，1H，J=9.2，9.1 和 2.4 赫 茲），6.92(d，1H，J二8.6 赫茲），4.65(d，1H，J=7.0 赫茲），4.06(t， 1H，J=5-8)，3.81(s，1H) ; LRMS(EI) m/z 314.12(51%，M+) 〇 231 200817327
4 NMR(丙綱-d6，500 百萬赫兹）d l 〇.94(br，1H)， 8.31(br，1H)，7.52(dd，1H，J=8.9 和 4.6 赫茲），7 33(d，2H， J = 8.9)，7.30(d，2H，J=8.5)，7_29(dd，1H，Ju 和 2 6 赫兹）， 7.13(s，1H)，7.02(ddd，1H，J=9.3, 9.1 和 2.4 赫兹），4 6〇(d，4H， J = 5.8 赫茲），4.15(t，1H，J=5.8 赫兹）；LRMS(EI) m/z 298.12(100%，M+)。 化合物2f
β NMR(丙酮-d6，500 百萬赫茲）（5 ii.i2(br，1H)， 8.07(br，lH)，7.66-7.60(m，複合的，5H)，7.52(m，lH)，7.36(d， 1H，J=2.2 赫茲），7.30(dd，1H，J=8.7 和 2.6)，7.15-7.09(m，複 合的，2H)，6.84(d，1H，J=8.8 赫茲），4.56(d，2H，J=6.1 赫茲）， 4.04(t，1H，J = 5.8 赫茲），3.77(s，3H)。 化合物2 g
β NMR(丙酮-d6，500 百萬赫茲）5 11.02(br，1H)， 7.59(dd，1H，J = 9.7 和 4.6 赫茲），7.53(d，1H，J=9.8 赫茲）， 7.47(dd，2H，J=7.9 和 7.4 赫茲），7-40(m，1H)，7.31(dd，1H， 232 200817327 J-7.0 和 6.5 赫茲），7.08(複合的，2H)，7.03(d，1H，J=7.7 赫 茲），6.99(複合的，2H)，6.91(br，1H)，4.48(d，2H，J=5.8 赫 茲）；LRMS(EI) m/z 362.14(85%，M+)。 化合物2s
4 NMR(丙酮-d6, 500 百萬赫茲）5 U.〇3(bf，1H)，7_57-7.45(複合的，4H)，7.544(m，1H)，7.31-7.24(複合的，2H)， 7·13·7·055(複合的，4H)，6.76(br，1H)，4.50(d，2H，J=5.2 赫 茲）；LRMS(EI) m/z 362.1(95%，M+)。 化合物3 q
4 NMR(丙酮-d6, 500 百萬赫茲）6 i〇.99(br，1H)，8.26(s， 1H)，7.58(dd，1H，J=9.5 和 4.6 赫茲），7.51(dd，2H，J=8.2 和 1·4 赫茲），7.46(dd，2H，J = 7.7 和 7.3 赫茲），7.38(m，1H)， 7.10-7.05(複合的，3H)，6.72(br，1H)，6.67(複合的，2H)， 6.62(d，1H，J = 7.6 赫茲），4.38(d，2H，J=6.2 赫茲）；LRMS(EI) m/z 360.12(100%，M+)。 2.苯甲醇醯胺衍生物氧化成苯甲齡的共同程序··化合 物 3b、3d、3e、3f、3g 和 3h 的製備 將起始的苯甲醇醯胺衍生物溶解於CH2C12和THF的 1:1混合物（5毫升/毫莫耳）中，加入氯鉻酸吡錠（2莫耳當 233 200817327 量），並在室溫下橹姓#、曰人 葬#、…^稅 物3·5 +時。加入Ei0Ac和水。 精者過濾移除棕色的国雜 數次，脫水f β 。以NaHC〇3、鹽水沖洗有機相 日日作用純化產物醛，並藉著1Η 且男I本f g予的亞甲臬、、由 π主土 /为失，並出現醛高峰）。 下表陳述藉著以上方法 无1造的結構：
表VI
234 200817327
li F n-Bu 、 o H 290.38 醯胺偶聯法A ij H 272.25 醯胺偶聯法A lk F^>tKlXX) 346.35 醯胺偶聯法A 11 284.29 醯胺偶聯法A lm 270.26 醯胺偶聯法A In P H OH 270.26 醯胺偶聯法A lo H PCHs H 5gh3 314.31 醯胺偶聯法A ip "XxH'O H 254.26 醯胺偶聯法A iq ΧχΗΦ H 304.32 醯胺偶聯法A lr Γ η m xxH"〇 H bn 286.26 醯胺偶聯法A Is |_J F3C H 322.26 醯胺偶聯法A It r HI ,CH3 xxn^ H CH3 282.31 醯胺偶聯法A 235 200817327
lu H H 321.35 醯胺偶聯法A lv FXJ>iD H 232.25 醯胺偶聯法A lw F·0 H 248.25 醯胺偶聯法A lx Fxxh° _H _ 246.28 醯胺偶聯法A iy P H WTO H OH v 312.34 醯胺偶聯法A lz H ° 286.28 醯胺偶聯法A laa F H H 312.34 醯胺偶聯法A lbb Xx>V 力 H ° 268.29 醯胺偶聯法A lcc P H HO 374.41 醯胺偶聯法A ldd P H HO “ Ό 374.41 醯胺偶聯法A lee FXX>Y^ H 0 298.31 醯胺偶聯法A Iff H 394.18 醯胺偶聯法A 236 200817327
igg H 282.31 醯胺偶聯法A lhh H 328.34 醯胺偶聯法A lii 298.31 醯胺偶聯法A ijj % 0 H 336.28 醯胺偶聯法A lkk ^ 0 H 336.28 醯胺偶聯法A 111 fxxk"-9 ^ ^ 0 CFa H 336.28 醯胺偶聯法A 1mm 298.31 醯胺偶聯法A Inn H 0 274.33 醯胺偶聯法A loo l%^STX〇H 284.29 醯胺偶聯法A lpp \Ah〜S^q 298.31 醯胺偶聯法A lqq U^wjp^ H o a 337.18 醯胺偶聯法A lrr \X\kJ^T H O OMe 358.36 醯胺偶聯法A 237 200817327
lss H 0 Cl 337.18 醯胺偶聯法A ltt 304.27 醯胺偶聯法A luu Me H 0 Me 296.34 醯胺偶聯法A lvv 347.18 醯胺偶聯法A lww H 〇 ci 320.72 醯胺偶聯法A lxx Xx^cp H 〇 L· 316.76 醯胺偶聯法A lyy H O Cl 302.73 醯胺偶聯法A lzz Χ)ςν^) H O OB 312.34 醯胺偶聯法A laaa CF3 H 6 F 354.27 醯胺偶聯法A lbbb FX)^^ H O F 286.28 醯胺偶聯法A lccc OMe f" I |[ H jfSf 358.36 醯胺偶聯法A lddd O^OC H 〇 337.18 醯胺偶聯法A 238 200817327
leee ΧϊςνΧζ H 〇 304.27 醯胺偶聯法A lfff GF3 txv式 H d 404.28 醯胺偶聯法A iggg 337.18 醯胺偶聯法A lhhh 五 H 0 304.27 醯胺偶聯法A liii Xcvua-h 〇 352.28 醯胺偶聯法A ijjj Χςν爲 Η 〇 347.18 醯胺偶聯法A lkkk Η 0 320.72 醯胺偶聯法A 1111 Η 0 302.73 醯胺偶聯法A lmmm CFa 354.27 醯胺偶聯法A lnnn Η ο 282.31 醯胺偶聯法A looo O^yuCX^ 344.38 醯胺偶聯法A ippp Η 0 352.28 醯胺偶聯法A 239 200817327
lqqq H 5 404.43 醯胺偶聯法A lrrr H O 302.73 醯胺偶聯法A lsss O^iUpi H O cf3 354.27 醯胺偶聯法A lttt H 0 354.27 醯胺偶聯法A luuu H 0 286.28 醯胺偶聯法A lvvv XtxjXT H 〇 282.31 醯胺偶聯法A lwww Br 365.17 醯胺偶聯法A lxxx HO—' H >=\ 伽Γ° H 284.29 醯胺偶聯法C lyyy 284.29 醯胺偶聯法B lzzz ΌψγΜ 灯。H 270.26 醯胺偶聯法C laaaa 342.36 醯胺偶聯法C lbbbb ^Vxx°h 0 k^Sr^|^ 390.41 醯胺偶聯法C 240 200817327
lcccc 〇 k^〇〇Hs 314.31 醯胺偶聯法C ldddd OH 390.41 醯胺偶聯法B leeee ㈤h3 Η o cxjh3 328.34 醯胺偶聯法B lffff Χ^Μ) H O ch3 282.31 醯胺偶聯法B igggg υΤ^υΟς H 0 300.28 醯胺偶聯法B lhhhh och3 H o 328.34 醯胺偶聯法B liiii ro L人口 480.53 醯胺偶聯法B ijjjj FXVr^r° H 〇 390.41 醯胺偶聯法B lkkkk H 〇 347.18 醯胺偶聯法B 11111 "O^VUCC H 0 314.31 醯胺偶聯法B lmmmm FTiri η frNQ2 313.28 醯胺偶聯法B 241 200817327
lnnnn H o 342.36 醯胺偶聯法B loooo H O 298.31 醯胺偶聯法B lpppp "XXVjXoh H O 298.31 醯胺偶聯法B iqqqq H 〇 278.32 醯胺偶聯法B 2a p 354.42 醯胺偶聯法B 2b 366.43 醯胺偶聯法B 2c ^ H |NX^qh 360.38 醯胺偶聯法B 2d 418.46 醯胺偶聯法B 2e FrYP H 466.5 醯胺偶聯法B 2f S^CG： 390.41 醯胺偶聯法B 242 200817327
2g Xw5jCxf H » 362.37 醯胺偶聯法B 2h F p xg〇ua, H 〇 470.28 醯胺偶聯法B 2i 412.38 醯胺偶聯法B 2j π 0 icr 412.38 醯胺偶聯法B 2k p 、·κ HO厂 466.5 醯胺偶聯法B 21 p 〇-a 413.27 醯胺偶聯法B 2m p j^Y^jOCH3 och3 434.46 醯胺偶聯法B 243 200817327
244 200817327
2t p 4 j~0CH3 H3cdi3CH3 434.46 醯胺偶聯法B 2u G FTrv<0 Gl 413.27 醯胺偶聯法B 2v 〇 XiR H Η >=χ Q-f F 380.36 醯胺偶聯法B 2w p o^: Η H \=\ F30 480.38 醯胺偶聯法B 2x o ρχχν/ 〇^a a/ 413.27 醯胺偶聯法B 2y p 380.36 醯胺偶聯法B 245 200817327
246 200817327
2ff o M H M OCF3 428.38 醯胺偶聯法B 2gg 9 H Q 378.83 醯胺偶聯法B 2hh Q Vri-f 430.37 醯胺偶聯法B 2ii Q fTyV<p \^CF3 P 431.37 醯胺偶聯法B 2jj p H Q F 362.37 醯胺偶聯法B 2kk 〇 XX^ H Q N〇2 389.38 醯胺偶聯法B 247 200817327
211 p Br 441.27 醯胺偶聯法B 2mm 9 418.46 醯胺偶聯法B 2nn p XiH-x 374.41 醯胺偶聯法B 2oo 〇 FxxR H〇^ 375.41 醯胺偶聯法B 3a "XXVjSu H 0 300.28 使用實施例1 中的BBr3法， 將化合物lhh 脫甲基化 3b 282.27 lyyy的氧化作 用 3c O 269.29 醯胺偶聯法C 248 200817327
3d T jl ll H 入IT N 340.35 laaaa的氧化作 用 3e 1 388.39 lbbbb的氧化作 用 3f «Voi 312.3 lcccc的氧化作 用 3g 0 296.3 lpppp的氧化作 用 3h ^ P 388.39 2f的氧化作用 3i p H H >=v bn 390.41 醯胺偶聯法B 3j hi H 291.31 醯胺偶聯法C 3k \χ 0 N，h 316.28 醯胺偶聯法C 31 323.35 醯胺偶聯法C 249 200817327
3m 262.26 醯胺偶聯法c 3n 245.21 醯胺偶聯法c 3o p ^0¾¾ 450.5 醯胺偶聯法B 3p o txHv_ \3^ogh3 374.41 醯胺偶聯法B 3q 0 FxxHi H H Wx 仏0H 360.38 參見在實施例1 中的la之合成 3r 263.3 醯胺偶聯法D 3s 259.24 醯胺偶聯法D 3t Η 255.25 醯胺偶聯法D 250 200817327 3u b 3v XxjT 3w b FW： ό 3x b Fw: 3y b 6 251 200817327
C.人類癌細胞株H460和經分離之Src的抑制作用 在合成之後，測試數個上述化合物對人類肺癌細胞株 252 200817327 H460的生長抑制，以及經分離之Src的抑制作用。欲測試 對H460的抑制作用，以600個細胞/孔將細胞播種在96孔 培養盤，含有5%FCS、5%NuSerum IV、2mM L-榖胺醯胺 和 10mM HEPES的完全培養基-RPMI-1640中。在過夜培 養之後，將化合物溶解在DMSO中，並以RPMI-1640稀釋， 加至細胞培養盤中。在72小時之後，固定細胞，染色並判 定總蛋白/孔。判定抑制生長50%的化合物濃度（IC5G)，並 在下文中報告。欲測試經分離之Src的抑制作用，使用在 Lai等人，1998中描述的測定程序測試化合物，利用下列的 測定組份、終濃度和條件：50.0mM MOPS、4.02mM MgCl2、 6.00mMK3檸檬酸鹽（用來作為Mg2+緩衝溶液，使自由Mg2+ 保持穩定在〇_5mM)、99.0mM KC1、lO.OmM 2-酼基乙醇、 198μΜ ADP、10單位全長的人類經純化重組 pp60e-src(Upstate Biotechnology，Inc·，Lake Placid，New York)、 2.00mM RR-SRC、4.0%DMSO, pH7.2, 3 7°C。已經顯示這些 整體測定條件，使pH值、溫度、自由Mg2+(0.5mM)、離子 強度、滲透性、ATP/ADT和還原電位的細胞内條件再現。 結果在下文表ΥΠ中。 253 200817327 表vn 人類肺癌細胞株H460的生長抑制和經分離之Src的抑制作用
化合物 H460aIC50〜M)b Src ΙΟ50(μΜ) la 35±0.59 IC,〇=40 lz 15+1.6 NTC lbb 82+3.5 NT ldd 33±0.78 NT lyyy 104±10 NT lcc 30±0.66 NT lcccc >100 NT loooo 74±2.7 NT 2f 13±0.46 NT 2s 26+0.34 NT lbbb >100 NT 2g 13±0.56 NT 3q 30+0.34 NT a H460-NSCLC 細胞 b所有的化合物均溶解於DMSO中，並進一步以含有 5%FCS、5%NuSerum IV、2mM L-穀胺醯胺和 20mM HEPES 的RPMI 1640稀釋 c N T =未測言式 這些結果顯示使用苯基基團附接在吲哚環的3位置 處，可明顯改善抑制劑的活性。 D.上皮生長因子受體酪胺酸激酶（EGFRTK)，p56 lck、 254 200817327 p55 fyn和PTP-1B的抑制作用 測試下文表卿中列舉的 ^ ^ △ σ物，對EGFRTK，穿透膜 受體酪胺酸激酶，p56 lck，非总触 々口 .. . 口 P又體酪胺酸激酶之Six家族 成貝，p55 fyn，另一個非受體 又體路私酸激酶之Src家族成員， 以及PTP-1B，磷酸酪胺酸磷酸 ,酶弟Π型糖尿病及/或肥 胖之相反激酶和目標的抑制作 剌作用。在表中之數據為指定酵 素被派度1 〇微莫耳漢度之彳卜人礼 度之化合物抑制的％。肖定酵素處空 白表示沒發現抑制作用。 表vm EGFRTK > p561ck、p55 fyn 和 PTP-1B 的抑制作用 結構 MW 化合物碼 PTP-1B (%10μΜ EGFRTK @1〇μΜ p56 lck @10μΜ p55 fyn (?ί) \ ΟυΛ/ί FO〇i^ H "OH 264.3 lb 264.3 lc 236.2 Id - H OH ;XX>V 丄。H 一 \ 0 H 252.2 le H ° 192.2 If c _ n-Fr 、0 H 262.3 ig 19 H 234.3 lh 255 200817327 r； fi-Bu 、- 〇 H 290.4 li 272.3 lj ΊΧΟ 346.4 lk 13 284.3 11 "°^χχΗ 270.3 lm H H OH 爾10 H 270.3 In 12 H PCH3 XXH^C? H OCH3 314.3 lo ·* 0 H 254.3 ip N 304.3 iq [ H PH :tXK^ H OH 286.3 lr 11 F H F3f oq^6 H 322.3 Is c H /¾ XrH々 H QH3 282.3 It 11 r： H ,f=^\ Ό>?^τΡ N“0 1 n H 321.4 lu 10 256 200817327 Η 232.3 1ν VvvrU l Η 248.3 lw 10 FO〇i° Η 246.3 lx Η OH 312.3 iy ΧργΆ Η 286.3 lz 26 Η 312.3 laa 12 10 t ο Η 268.3 lbb 19 Γ： Η ΗΟ 'WJO 374.4 lcc 19 Ρ Η ΗΟ Χί>ίΪΌ Η υ 374.4 ldd 41 Η Η 298.3 lee 16 ^ ο Η 394.2 Iff 24 "OchHD Η 282.3 igg 257 200817327 u ^x^〇ch3 328.3 lhh H 298.3 lii H 336.3 ijj 18 FtXh^CFS H 336.3 lkk H 336.3 111 F^^a〇H 298.3 1mm h S 274.3 Inn 284.3 loo 17 298.3 lpp Όςν專 Η 0 Cl 337.2 lqq H O OMa 358.4 lrr 12 H o a 337.2 lss 12 F f、、-^、、· kANV-V H 0 F 304.3 ltt 258 200817327
Me H 〇 L· 296.3 luu H 0 Br 347.2 lvv H O Cl 320.7 lww uC8v^ ^lyNjyl H 0 M8 316.8 lxx 14 H O Ol 302.7 lyy 10 12 H 0 OEf 312.3 lzz DF3 F、、夕'、__ 、，、N 上丫 H 0 F 354.3 laaa 12 H 0 F 286.3 lbbb OMe FYVi h fV〇_ H 〇 358.4 lccc FXXV 篇 H 0 337.2 lddd Χχ^χι: H 0 304.3 leee cf3 H 0 404.3 lfff Cl xxvA H J 337.2 iggg 259 200817327 H 〇 304.3 lhhh H O 352.3 liii Η 1 347.2 ijjj txv篇 H 〇 320.7 lkkk u^V^CX H I 302.7 1111 €F3 Ogv減 H I 354.3 lmmm 14 Fnn 、入 ^人丫 N W、Me· H 〇 282.3 lnnn XXVuCV h I u 344.4 looo Fx)^Yyja0CF3 H 〇 352.3 ippp f^] H 1 404.4 lqqq 11 VVi h fyc』 、入 N，、γ· H 0 302.7 lrrr 15 Οζ^κ^ζτ H O CF3 354.3 lsss ^ !1 1 H f'Y H Q 354.3 lttt 260 200817327 iUNV·^ H li M 〇 286.3 luuu 13 16 H I 282.3 lvvv Xmv^ H 0 F 365.2 lwww |t： 284.3 lxxx 12 K^ |^1 H 284.3 lyyy 11 H 〇 kJ 270.3 lzzz H Ϊ UL〇〜 342.4 laaaa ΎΥπι Η 、入 Ν，丫Ν 八0 Η Η 0 390.4 lbbbb F、_ r ιΐ 1 η 0 ^^^>οη3 314.3 lcccc 20 19 ΟΗ Αγ> η I υ 390.4 ldddd 16 οοη3 Χϊ^λΨ Η 6 och3 328.3 leeee Η 0 ch3 282.3 lffff 12 U^sXC0H Η I 300.3 igggg 25 261 200817327 OCHa H 0 328.3 lhhhh 17 YVl H λΡ 480.5 liiii 12 r^ UA^^oh H o 390.4 ijjjj 15 i h 广j H 0 347.2 lkkkk 30 UnX.sXXOCH3 H 5 314.3 11111 ...................... .^N〇2 ^ΑΝΑγ ㈡ H 〇 313.3 lmmmm 29 κΌςν 篇 Γ H 0 342.4 lnnnn 17 11 U^kjCT" H G 298.3 loooo 33 10 Rf^—…h k人 N，丫 N^^X^0H H O 298.3 ipppp F、*^\·_ ';'N N'，'/V'〇H H 0 278.3 lqqqq 18 Άν .ΑγΊ/、'，Ά〇Η H 〇 354.4 2a F. p- Η Π OH 366.4 2b 19 13 262 200817327 F_ P 360.4 2c ΡγΎΡ 418.5 2d 23 V^P ^Υτχχν 466.5 2e 10 F . 0 f j: f s 〇 Ά〇οη3 390.4 2f 18 11 FOg^XlF H ti M 0 362.4 2g Fxx^a H 6 470.3 2h F p H 0 412.4 2i 〇 、人 X^sjQ H 〇 412.4 2j 20 263 200817327 9 FrtiKo HO 466.5 2k p Cl H H )=^ 4 /H^CI 413.3 21 p FifrVf P f^p^h h3oo—〇 bcHp, 434.5 2m p f'^-yJ> \J €1 413.3 2n p F.tw 〜s F 396.8 2o 12 0 VyW N^vCHa Ci^^ 392.9 2p 264 200817327 Q ww H“b 378.8 2q 〇 VrVf F H H ^ f3c 430.4 2r o L L/Λί F *N N—»4 F Hh'« 362.4 2s 33 10 11 p F、nv/ %y〇〇H^ h3go b〇H3 434.5 2t 〇 F、〇H^ f 1 f ifi&s^siPi\ i^c, Ci 413.3 2u p H ^ V 380.4 2v 265 200817327 ο XrH-. Η Ο-- 480.4 2w 12 9 γγν/ |sj—\ Η Η >= a 413.3 2x Q F 380.4 2y 20 F P M H >=v y^OCH3 H3CO 404.4 2z p H )H \ J>-〇CF3 428.4 2aa p >Λ 〇^ci 378.8 2bb 266 200817327 p Fxx5< f3c 430.4 2cc Q |S|^i5K\ /^ξ% Η H \s\ /—Λ Λ d 556.6 2dd 〇 ¥γγ^4 (,>OH H H 466.5 2ee 〇 hh'^ 00¾ 428.4 2ff Q 、、^、N [SI—i. H f-| \—、 k\ a 378.8 2gg 12 〇 Fxri^0 H Q V 430.4 2hh 12 267 200817327 Ο Η Η Wv V_^CF3 F 430.4 2ii p ρΊΓχν^° Η H /^=\ Q V 362.4 2jj p 『丫 ·Ν % νο2 389.4 2kk 24 Ο FTti^° Vn /y/ aH 441.3 211 10 P |s|：_ Η H Ά· 418.5 2mm p. o^L LOH 374.4 2nn 268 200817327
Ε·老鼠毒性研究 圖1 5顯示兩個吲哚抑制劑之最大容忍劑量（MTD)研究 的結果：
~--^~~I 得自資施例4的2k 在吐溫80 : Et0H中將這些化合物藉腹腔内投藥，投 與SCID老鼠。在圖I?中的結果顯示，化合物ia在老鼠 中的毒性，比得自實施例4之化合物2k的毒性更低，因 為在投與化合物la時，老鼠顯示較少的體重喪失。 貫施例2-7-經取代之吲哚衍生物蛋白質激酶抑制劑的合成 和活性 按照在下文計畫1中的陳述，合成7_經取代之，嗓街 生物蛋白質激酶抑制劑： 269 200817327
Br
P*T's〇H 甲笨’
甲氧苄胺 Κ2€03 PyBOP DMF
6 (2-溴-4-氟-苯基）_肼（2)
Tl y^"NHNH2
Br 將市售之溴—4-氟苯胺1(2.36毫升，20.75毫莫 加至冷卻至-5°C正在攪拌的濃鹽酸溶液（4〇毫升）中。、容 該溶液熟化，同時攪拌1〇分鐘。在15分鐘内加入1^1^〇2的 水溶液。在15分鐘内加入SnCl2/HCl(10· 40克，46· 1毫莫 270 200817327 耳，10毫升HCl)，並熟化額外的3〇分鐘到i小時。過濾 该混合物，並以二氯甲烷沖洗。將所得的固體溶解於1 〇M 鎖中，並以二氣甲院萃取3次。將有機層真空脫水，·得 到3.53克（83%)產量。lH NMR(4〇〇百萬赫茲， CDCl3)57.169(dd，J=8 赫兹，J=2.8 赫兹 1Η)，ά7〇76(Μ = 5.2 赫兹，j=9.2 赫兹，1H)，5 6 982(td，j=8 4 赫兹，赫 兹，1H)，（5 5.540(bs，1H)，5 3.590(bs，1H)。
2-[(2-溴-4-氟-苯基）·亞肼基]_丙酸乙酯
〇 、 J
Η 將市售的對-甲苯磺酸（38·37毫克，〇·217毫莫耳）加至 在圓底燒瓶和磁性攪拌豆中的6〇毫升甲苯中。然後將燒瓶 裝t迪安-斯塔克分水器和迴流冷凝器。容許攪拌該溶液2 小時。在2小時之後，將該溶液冷卻，並加入^(溴-心苯 基）肼（4.135克，20·17毫莫耳）。然後使用相同的裝置，迴 流該溶液另外15小時。在i•“、時之後，將該溶液放在 疋轉式久化器i ’移除曱苯。將暗棕色像焦油的物質留在 k 瓦中。在燒瓶中加入適量的己烷，並迴流以便溶解純的 肼己烷壬現只色，然後趁熱倒入另一個燒瓶中，留下像 焦油的副產物。重複該過程。迴流含有己烷溶液的燒瓶， 將沉澱的肼溶解，並放在冰箱中形成結晶。3.6克（11.9毫 莫耳產 187/〇)的 3。WnMR(丙酮 〇 : 5 i2.369(bs，1H)， 5 7.646(紙 J—9·2 赫兹，J=5.6 赫兹，1H)，5 7.449(dd，J=8.2 赫兹，J=2·8 赫兹，1HU 7.22(td，〜8·6 赫兹，J=2.8 赫兹， 271 200817327 1H)’ 5 4>37(q，J==7.2 赫茲，2H)，5 2.203(s，3H)，5 1.402(t， J=7.2 赫茲，2H)。
臭氟-iH_吲哚_2_羧酸乙酯（句 f %
將市售的對-甲笨磺酸二水合物（2·26克，11.9毫莫耳） 加至120毫升甲苯中，並使用迪安_斯塔克分水器在迴流下 脫水2小k。在冷卻的溶液中加入2_[(2_溴氟-苯基）_亞 肼基]-丙酸乙酯（3·6克，η·9毫莫耳），並另外迴流15小 在1 · 5小時之後’將該溶液冷卻。在減低的壓力下移 除甲笨。然後將固體與己烷一起迴流，分離吲哚酯。迴流 所得的己烷溶液，溶解沉澱的吲哚，並放在冰箱中形成結 曰曰。在移除上清液並將晶體脫水之後，得到3·3〇克，丨丨·543 耄莫耳的4(產量97%)。iH NMR(400百萬赫茲，丙酮_d6): 占 l〇.85(bs，lH)，6 7.45(dd，J=9.2 赫茲，J=：2.4 赫茲，1H)，占 7.39(dd，J = 9.2 赫兹，J = 2.0 赫兹，1H)，5 7.28(d，J=2.0 赫兹， 1H)，5 4.36(q，J = 6_8 赫茲，2H)，占 h345(t，卜6·8 赫兹， 1Η) 〇 7-溴_5_氟-1Η-吲哚-2-羧酸（5)
將四氫呋喃（35·2毫升）、水（23·5毫升）、氫氧化鋰（2.61 克，10.9毫莫耳）和7-溴-5·氟_1Η-吲哚-2_羧酸乙酯（311克， 1 0.9毫莫耳）加至圓底燒瓶中，並以磁性攪拌子混合。迴流 272 200817327 吕亥混合物1小時。煙山#絲j P /»
了、、二由％轉式汽化|g移除THF，並以1MHCL 酉夂化水/合液再以乙酸乙酯萃取。4 NMR (DMSO-d6) : (5 13.206(bs5 1H), 5 1 1.876(s5 1H)? 7.498-7.445(m, 2H), 5 7.19(d，J=2.0 赫茲，1 〇H)。 7_溴-5_氟-1士吲哚_2_羧酸％甲氧基-苯甲醯胺（6)
在已經燒乾、以連續氬氣流沖刷，並裝設有攪拌豆的 圓底燒瓶中，加入DMF(4 8毫升）。在該正在攪拌的溶液 中j將5(600笔克，2 33毫莫耳）與甲氧苄胺（328微升，I% 毫莫耳）和PyB〇P(1.33克，2.56毫莫耳）混合。然後將該溶 液々。卩至〇 C之溫度。在2分鐘後，加入二異丙胺（丨· 7毫 升，9.67毫莫耳），並容許在室溫下攪拌整個溶液過夜。然 後以大約60耄升乙酸乙酯稀釋該反應，並以適當體積的飽 和碳酸氫納萃取3 :欠，以1M HC1萃取3次，移除任何未 反應的起始材料。分離乙酸乙酯層，並覆以硫酸鈉脫水。 使用旋轉式汽化器移除乙酸乙酯，在燒瓶側面產生棕色的 薄膜。在燒瓶中加入己烷，並迴流。然後在燒瓶側面形成 固體，並經由旋轉式汽化器移除己烷，得到7〇9〇毫克的 6(81〇/〇產量）。lHNMR(400 百萬赫茲，DMSO-d6)(Ml.537(bS， 1H)’ 6 9.〇92(t，J=5.6 赫茲，1H)，5 7.49(dd，J=9_4 赫茲， J=2·4 赫茲，1H)，(dd，J=8.8 赫茲，J=2 赫茲，iH)，占 7.268-7.228(m，2H)，5 6.91(d，J=6.8 赫茲，2H)，“ wd， J=8.2 赫茲，m)，6 4 48(d，J=6 赫茲，2H)，6 3 729(s，3h)。 273 200817327 3_羥基-苯甲醯胺（巧 f 在乾冰丙酮浴中將正在攪拌之二氯甲烷溶液（1毫升）冷 卻至-78°C，並以氬氣流吹掃。在該冰冷攪拌中的溶液中加 入6(5。〇毫克，〇·133毫莫耳）。加入7當量的BBf3，並容許 在-78 C下攪拌1小時，然後容許在室溫下攪拌該溶液過 夜。利用過量的水使該反應驟冷，並以飽和的碳酸氫鈉中 和，再以二氯甲烷萃取。將二氯甲烷層覆以硫酸鈉脫水， 並在減低的壓力下移除，產生35〇毫克的2(7〇%產量）。屮 NMR(40〇 百萬赫茲，丙酮-d6)(5l〇.633(bs，1H)， S8.42(d， J=15.6, 2H)，7.48(dd，J=9.2 赫茲，J=2.4 赫茲，2H)，6 7.42(dd， J = 9 赫兹，J=2.4 赫兹，iH)，57 373(d，J=2 4 赫兹，m)，占 7.217(t，J = 7.6 赫兹，1H)，56.932-6.898(% 2H)，56 8〇(dd，
7·溴-5-氟-iH-吲哚-2-羧酸
J = 2 赫兹，J=8 赫茲，1H)，d 4 634(d，J=5 6 赫茲，2H)。在 3.7ppm處獨特的甲氧基高峰消失，代表成功地脫保護。 實施例3-pp6〇e-Sre酪胺酸激酶之非_ATp競爭性羥基萘衍生 物抑制劑的設計、合成和活性 使用自動抑制之人類IRTK催化功能部位的晶體結構 (Hubbard等人，1994)進行定性分子模擬研究（SYBYLTM，6 4, Tripos Inc·，St· Louis)，其中將萘環疊加在 IRTK Tyr 1162 之上。IRTK區含有Tyr 1，162,摺疊回活性位置内，Tyr ι，162 的位置類似在肽受質中的可磷酸化Tyr，藉此自動抑制酪 274 200817327 胺酸激酶。該疊加現象表示醯胺羰基應位在萘環的2_位置 (計晝1)，模仿Tyr 1，162羰基，而羥基基團應 計晝1
位在6-位置，模仿Tyr丨，162羥基基團。這些模擬研究亦 指出在3-位置的羥基基團可模仿Tyr 1，162 NH。 為了以實驗測試這些設計概念，像曱基酯或一系列醯 胺一樣（表IX)，附接2-位置羰基基團。以觀察含有附接經 基N-苯基醯胺側鏈之亞胺色烯類似物（Huang等人，1995)， 在pp60e·^抑制劑效力上的增加為基礎，選擇羥基N_苯基 (X=0)和N-节基（X=l)醯胺。亦製備其中6_羥基基團被刪除 或移動的類似物，判定是否像在模擬研究中預期的一樣出 現效力下降。 分別從市售的（Aldrich)3,5·二羥基-2-萘甲酸和3,7-二 羥基-2-萘曱酸，合成一系列2_羰基_3,5_二羥基萘抑制劑 (la、2a-2d、2i-2卜 2o-2p)和 2-羰基-3,7-二羥基萘抑制劑（1<:、 2t-2ii)。藉著使個別的酸起始材料在預先以HC1氣體飽和 的甲醇中迴流48小時，獲得甲基酯ia和ic。藉著使用兩 種方法之一，使個別的羧酸與市售的（Aldrich或Lancaster) 胺偶聯，合成醯胺（2a-2d、2i_21、2ο·2ρ、2t_2u)。第一個 方法使用Froyen描述的NBS/PPh3方法學（Froyen，1997)。 第二個方法使用IIDQ(Aldrich)作為偶聯試劑。首先在室溫 275 200817327 下使羧馱與1 ·0當罝IIDQ在無水DMF中反應24小時。然 後巧妙地加入各別的胺（2.0當量），並將該反應加熱至8〇 °C 2-6小時。在含水處理之後，藉著矽膠層析法達成純化， 並從CH/l2/己烷中沉澱，接著若需要則是製備c-18 RP-HPLC(CH3CN/H2〇)。节基胺是市售的，僅作為其相對應的 羥基保護之甲基醚。所以，在醢胺形成之後，藉著在_78°C 下以在DCM中的6當量BB1·3處理1分鐘，接著在室溫下 1分鐘，將羥基基團脫保護。 276 200817327
表IX 羥基萘衍生物和選擇之公開抑制劑的pp60e〜e抑制活性a，b，e 腳 _-ld) 化合物 Ri r2 Rs r4 r5 Re r7 Rs 在 ΙΟΟμΜ 下的抑制％ (標準衍生物） IC50_ la OH OH H H N/A N/A N/A N/A 5(+/-2) n.t. lb OH H OH H N/A N/A N/A N/A 47(+/-3) n.t. lc OH H OH OH N/A N/A N/A N/A 19(+/-6) n.t. Id nh2 H H H N/A N/A N/A N/A 無活性 n.t. 2a OH OH H H OH H H 0 12(+/-4) n.t. 2b OH OH H H H OH H 0 51(+/-1) 150 2c OH OH H H H H OH 0 60(+/-7) n.t. 2d OH OH H H OH H OH 0 14(+/-2) n.t. 2e OH H OH H OH H H 0 39(+/-5) n.t. 2f OH H OH H H OH H 0 89(+/-1) n.t. 2g OH H OH H H H OH 0 23(+/-5) n.t. 2h OH H OH H OH H OH 0 56(+/-1) n.t. 2i OH OH H H H OMe H 0 33(+/-5) n.t. 2j OH OH H H H H OMe 0 35(+/-8) n.t. 2k OH OH H H OMe H H 1 13(+/-3) n.t. 21 OH OH H H H H OMe 1 14(+/-2) n.t. 2m OH H OH H OMe H H 1 無活性 n.t. 277 200817327 2n OH H OH H H H OMe 1 4(+/-7) n.t. 2〇 OH OH H H OH H H 1 41(+/-2) n.t. 2p OH OH H H H H OH 1 49(+/-4) n.t. 2q OH H OH H OH H H 1 42(+/-2) n.t. 2r OH H OH H H OH H 1 55(+/-3) n.t. 2s OH H OH H H H OH 1 42(+/-3) n.t. 2t OH H H OH H OH H 0 68(+/-5) n.t. 2u OH H H OH H OH H 1 40(+/-3) n.t. 2v H H OH H H OH H 0 45(+/-5) n.t. 亞胺色烯9TA 30(+/-15) Lit8:0.118 四經反式芪(piceatannol) 41(+/-2) Lit13:66(lck) ST-638 37(+/-5) Lit14:18 大黃素^modin)d 22(+/-3) Lit15:38 酷胺酸激酶抑制劑A47(Tyrophostin A47) 43(+/-3) 表κ註腳： a使用先前描述的測定程序（Lai等人，1998)，利用下列 的測定組份、終濃度和條件：50.0mM MOPS、4.02mM MgCl2、6.00mM K3檸檬酸鹽（用來作為Mg2+緩衝溶液，使 自由 Mg2+維持穩定在 0_5mM)、99.0mM KC1、lO.OmM 2-巯基乙醇、198μΜ ATP、1·98μΜ ADP、10單位全長的人 類經純化重組 pp60c-src(Upstate Biotechnology，Inc.)、 2.00mM RR-SRC、4.0%DMSO，ρΗ7·2，37°C。已經顯示這 些整體測定條件（Choi，1999)，使pH值、溫度、自由 Mg2 + (0.5mM)、離子強度、滲透性、ATP/ADT和還原電位 278 200817327 的細胞内條件再現。 b藉著質子NMR、EI或FAB(+)MS定出所有新化合物 的特徵，並藉著TLC純化。 eN/A=不能利用’ n.t. =未測試 dATP-競爭性的 使用上述的方法，從3,6-二羥基-2-萘甲酸6，合成一 系歹2-羰基-3,6_二羥基萘抑制劑（lb、2e-2h、2m-2n、2q-
2s)。在計晝2中出示從市售的2,7-二羥基萘3(Aldrich)開 始發展的中間物6之合成。 l)NaH(l· 1 當量），-l〇°C，30 分鐘 2)M0M_C1(1.1 當量），
-10°C至室溫，過夜 無水的DMF
TBDMS-CK1.1 l)t-BuLi(l. 3 當量），0°C，90 分鐘：DIEA(1 2)C1-C(0)-0Me(l· 5 當量），0°C，60 分鐘 /If) @JA^(5莫耳%)無水DMF 互室溫，4小時
57°-« 1:_1_無水醚/無水己烷 3) pH=2 轉 4) pH=12 逼袁 MeOH，H2〇，室溫
藉著在室溫下與TMS-二氮雜甲烷在DCM中反應，從 3·胺基-2-萘甲酸（Aldrich)合成化合物Id。使用由Froyen 描述的醯胺化方法（Froyen，1997)，從6-羥基_2-萘甲酸 (Aldrich)合成化合物2v。 已經顯示激酶測定條件會影響測量的抑制活性 (Lawrence等人，1998)。所以，為了精確地判定新設計種 類之pp60e_Sfe抑制劑的相對效力，亦測試四個先前公開的 279 200817327 非_ATP競爭性PTK抑制劑的抑制活性。選出吨反 ST-638和酪胺酸激酶抑制劑A47，因為它 J .、 』疋中。的（Sigma f \ 或Calbiochem)，並代表已知非_ATp競爭性ρτκ抑制气的 範圍。當利用酷胺酸激酶ρ56μ分析時，大黃素(Caibi〇J 是ATP-競爭性的。之前曾報告亞胺色# 9ta是最有效的 非-ΑΤΡ競爭性pp60e·…抑制劑（Huang等人，i 995)。因為亞 胺色烯買不到，故使用新穎的路徑，藉㈣3_胺基齡轉變 為相對應的TBDMS醚來合成它（丨」當量tbdms_ci、工^ 當量mEA、5莫耳％DMAP，DMF，24小時，71%)。使用 2.0 ¥里泉基乙酸偶聯所得的苯胺（I·〗當量edci、1 1告量 TEA，DMF，18小時，75。〇，70%)。使所得之醯胺與^ 當i的2,3- 一經基苯甲酸縮合（催化的六氫0比唆，絕對 EtOH，2小時，60°C)，接著脫保護（1」當量TBAF，THF， 15分鐘，全部43%)，得到亞胺色烯9ta，在藉著閃爍層 析法純化（10:l，DCM:MeOH)之後，具有令人滿意的元素、 FAB( + )MS 和 H NMR 分析。 使用經過純化、全長的人類重組pp6〇^Sre判定在表汉 中出示之化合物la-d和2a-2v的抑制活性。因為測試許多 化合物和相關成本，故先以固定的抑制劑濃度（1 00μΜ)判 定其等級效力。如同由模擬研究預測的，以對IRTK Tyr 1,162羥基基團的類似性為基礎，在酯（lb，47%對la，5% & lc，19%)和醯胺（例如2f，89%對2b，510/〇 & 2t，68%)兩個系列 中，觀察到優先將萘羥基基團定位在碳6對5或7。亦證 實了將羥基基團附接在萘碳3上（模仿Tyr 1，162 NH)會改 280 200817327 善效力（2f，89%對2v，45%)的預告。最後，同樣也證實像醯 胺一樣延伸抑制劑至2位置（模仿肽鍵）可進一步改善效力 的預告（例如2f，89%對lb，47%)。 在表IX中知供的數據證實從最佳的6位置將經基移到 鄰近的萘碳5，結果產生不同的結構活性輪廓，認為是經 基基團（們）在醯胺侧鏈中的最佳一致位置（例如M/2g對 2b/2c)。亦注意到在化合物2i-2n中以相對應的甲氧基基團 置換醯胺側鏈羥基基團。在N-苯基醯胺（2i-2j)的案例中， 其活性相對於對應之羥基醯胺（2b_2c)，不像在队苄基醯胺 的案例中一樣地明顯降低（2k-2n對2o-2q，2s)。這暗示在节 基竹生物中，酸胺側鍵每基基團與酵素產生交互作用，成 為氫鍵捐贈者，或甲氧基基團太大以致於不能吻合結合位 置。 藉著分別比較2ί(16μΜ)對21)(150μΜ)的IC5G，S，提供 將經基定位在碳6對5之選擇性的更多定量分析。這些結 果亦證實抑制％從大約90%降低到大約50%，代表如預期 之效力差異的數量級。同樣的，抑制％從大約5〇%降低至 1 則代表效力差異的另一個數量級。 在表IX中出示之得自該系列的最有效抑制劑，化合物 2f與五個之前報告的ρτκ抑制劑的直接比較，證實在這些 測定條件下，2f更有效一至兩個數量級。有趣的是，先前 報告了亞胺色烯9TA對pp6〇C-SrC有118碰的ICM(Huang 等人，1995)，而且是最有效的已知非·ΑΤΡ競爭性pp6〇e-src 抑制劑’但在目前的測定條件下，觀察在1 〇〇μΜ下僅有3〇% 281 200817327 抑制。這些結果再次強調（Lawrence等人，1998)在相同的 測定條件下比較蛋白質激酶抑制劑的重要性。 這些研究的目的是獲得不與ATP競爭的非-肽pp60e_Sfe 抑制劑。所以，監視在恆定抑制劑濃度下PP6〇^sl*e被2f和 2b抑制的％，作為最高到細胞模仿的ImM含量之漸增[ATP] 的函數。因為[ATP]對抑制％有些微影響，故2f和2b兩者 對ATP均為非-競爭性抑制劑。使用 200、500&1，000μΜ 之ATP濃度測量抑制％，同時保持抑制劑濃度不變。若抑 制劍直接與ATP競爭，此時在[ATP]中的5-倍全面增加， 從對抑制％影響的觀點來看，等於降低抑制劑濃度5-倍。 因此，若出現與ATP的直接競爭，抑制％便應該降至在IC50 劑量-反應曲線（利用200μΜ ATP獲得）中，對在本實驗中 <用之設定抑制劑濃度的1/5所觀察到的值。對於抑制劑 2f(設定在 25μΜ)，分別在 200μΜ、500μΜ 和 Ι,ΟΟΟμΜ ATP 處獲得65%(+/-5)、54%(+/-3)和50%(+/-1)的抑制作用，若 出現與ATP的直接競爭，在1，000μΜ ATP處的抑制程度 便應降至大約20%。同樣的，關於抑制劑2b(設定在 3 00μΜ)，分別在 2〇〇μΜ、500μΜ 和 1，000μΜ ATP 處獲得 84%(+/-1)、和77%(+/-2)的抑制作用。這些激酶 的高價值激勵了其他研究者為了相同目的監視抑制劑效 力，作為漸增[ΑΤΡ]的函數（Saperstein等人，1989 ; Burke 等人，1993 ; Davis 等人，1989 ; Davis 等人，1992 ; Faltynek 等人，1995 ;和 Sawutz 等人，1996)。
總括而言，以結構為基礎之設計已產生一系列不與ATP 282 200817327 競爭的羥基萘pp6〇e'sre非·肽抑制劑。將順次報告來自這個 系列的化合物，在以細胞為基礎之測定中，以及在各種測 定條件下的詳細動力學研究中的結果。在下列的實施例 中，報告將這些設計概念從萘支架延伸至吲哚支架。 實施例4-PP60e·^酪胺酸激酶之非_ATp競爭性羥基吲哚衍 生物抑制劑的設計、合成和活性 , 在先前的實施例中，描述了利用萘支架之一系列 PP60“”抑制劑以結構為基礎的設計。設計這些化合物， 在肽叉質位置結合，因為相對於另一 Ατρ受質位置，在細 胞環境中可能有較大的選擇性和效力。本實施例延伸這些 設計概念，至一系列以吲哚支架為基礎的pp6〇e-Sre抑制劑。 再次使用自動抑制胰島素受體pTK(IRTK)的晶體結構進行 疋14刀子模擬研究，除了在此情況下將吲哚環疊加在IRTK Tyr 1，1 62之上。遠豐加作用指出吲哚可模仿1，i α 〔ΝΗ，應該將幾基放在位置處，並將經基放在$位置，以 便分別模仿Tyr 1，162羰基和〇Η(計畫υ。 計畫1
口在计畫1中解釋了將Tyr 1，162環化成較小的吲哚5-員環之概& ’相對於在萘支架之案例中❸6員環（Kami等 人，1999)，結果將較佳的〇H位置從在萘支架中的碳“移 283 200817327 到在吲哚支架中的碳5。 以在先前的實施例中報告，對類似的以萘為基礎之羥 苯基醯胺觀察到在pp6〇e-Src抑制劑效力上的增加為基礎， 分別選擇含有羥苯基/苄基側鏈的吲哚醯胺衍生物2d_f、 2j•丨（表X)。在合成中，相對應的甲基醚2a-c、g-i、v為前 驅物。製備在表X中出示的額外類似物，開始延伸侧鏈範 圍超過目前已經在吲哚和萘支架兩者中廣泛探究的羥基/甲 氧基基團。 按照說明合成僅含有羥基或甲氧基侧鏈的吲哚醯胺·· 計畫2
將2_吲哚羧酸衍生物，甲氧苯胺（11當量，Aldrich， Lancaster或Fluka)和偶聯試劑PyBOP(苯并三唑_卜基氧基） 二吡咯啶-鱗-六氟磷酸鹽）（1當量，Fluak)溶解於無水DMF 中。在氬氣下將該溶液冷卻至，然後加入二異丙基乙 胺（DIEA，3當量）。在〇°C下攪拌該反應i分鐘，接著在 至/m下攪拌1小時。在處理之後’藉著石夕膠層析法純化殘 餘物。 在想要時以三漠化棚（1Μ在DCM中，Aidrich)切開甲 基醚。將吲哚醯胺曱基醚懸浮於無水DCM中，並在氮氣 下冷部至-7 8 °C。對在起始材料中的每個雜原子加入一當量 284 200817327 BBr3，加上一過量當量。在-78°C下攪拌所得的暗紅色溶液 30分鐘，然後在室溫下攪拌1-2小時。在處理之前，利用 水（1 0分鐘）使該反應驟冷。
表X 羥基吲哚衍生物的pp60e_Sfe抑制活性a，b，e ί la-lb、 ^ 4 化合物 Ri r2 r3 r4 r5 R6 r7 在ΙΟΟμΜ下的抑制％ (標準衍生物） la H OH H CH, N/A N/A N/A 40(+/-5)[在 500μΜ 下] lb H OH OH CH,CH? N/A N/A N/A 28(+/-3) 2a H OH H OCH, H H 3(+M) 2b H OH H H och3 H 21(+/-2) 2c H OH H H H OCH, 39(+/-9) 2d H OH H OH H H 43(+/-1) 2e H OH H H OH H 30(+/-6) 2f H OH H H H OH 45(+/-3) 2g H OH H ch2 OCH, H H 21(+/-5) 2h H OH H ch7 H och3 H 7(+/-6) 2i H OH H ch7 H H OCH, 18(+/-4) 2j H OH H ch7 OH H H 24(+/-3) 2k H OH H CH? H OH H 74(+/-2)[ΙΟ50=38μΜ1 21 H OH H CH? H H OH 54(+/-2) 2m H OH H CH?CH? H H OH 21(+/-7) 285 200817327 2n H OH H ch9 H H CO,H 無活性 2〇 H OH H CH, H H C07CH, 11(+/-4) 2p H OH H 顆· H H CH?C00H 7(+/-6) 2q H OH H •腳 H H CH.COXH, 32(+/-7) 2r H OH H — H F H 21(+/-7) 2s H OH H CH, H F H 57(+/-6) 2t H OH OH CH? H OH H — ---^___/ 26(+/-2) 2u H H OH CH, H OH H ---—_、 y 56(+/-6) 2v H H H CH? H H 〇ch3 4(+/-4) 2w H H H CH? H H OH — _\______ J 36(+/-4) 2x OH H H ch7 H OH H 60(+/-3) 2y H OH H ch(ch3)r H OH H 15(+/-3) 2z H OH H CH(CH3)S H OH H —---V___ f 13(+/-7) 按照在先前實施例中的描述，測試所有的化合物。5 藉著質子NMR、FAB(+)MS定出所有化合物的特徵， 並藉著TLC純化。 eN/A=不能利用 使用該合成路徑，從5 -經基-2 -, π朵缓酸製備一系列$ 羥基吲哚醯胺抑制劑2a-m、y、z。分別從扣甲氧基_2、丨 哚羧酸甲酯和6-曱氧基-2-吲哚羧酸甲酯，合成‘和6声 基叫丨哮酿胺（分別為2x、u)°從5,6-二甲氧基吲哚_2_叛酸 乙醋製備5,6-二經基朵醯胺2t。以超音波震盪在mNa〇H 中的酯1小時，提供相對應的羧酸以便進行偶聯。從吲哚_ 2-羧酸合成脫-羥基吲哚醯胺2v、w。所有的吲哚起妒材料 286 200817327 均為市售的（Aldrich 或 Lancaster)。 同樣地從相對應的氟苯基胺（Aldrich)製備氟抑制劑 2r、s。從相對應的胺基羧酸（Aldrich)製備在醯胺側鏈上含 有酯或羧酸的抑制劑，2n-q。首先以甲基酯保護侧鏈羧酸（無 水MeOH，預先以HC1飽和，迴流，1天），接著是pyBQp 偶聯（如上），然後在想要時皂化回叛酸。 藉著使魏酸的溶液在預先以HC1氣體飽和的無水甲醇 中迴流過夜，製備甲基酯la。藉著如上的5,6-二甲氧吲哚 -2-羧酸乙酯的ΒΒι*3脫保護作用，製備乙基酯lb。藉著矽 膠層析法純化在表X中列舉的所有抑制劑。 如同在Marsilje 2000中的，首先以恆定抑制劑濃度判 疋该系列pp60e Sre抑制劑的等級活性（表X)。對目前的吲 °木系列抑制劑、先前的萘系列抑制劑，和五個非_ATp競爭 性文獻PTK抑制劑（參見前一實施例），使用相同的抑制劑 濃度（ΙΟΟμΜ)。這容許在相同的測定條件下，比較總共59 個化合物的效力等級。 杈擬研究預言羥基基團在吲哚支架的碳$處是最適切 的。比較5-羥基吲哚抑制劑2k(74%)與類似的卜羥基吲哚 抑制劑2u(56%)和4_羥基u引哚抑制劑2χ(6〇%)，證實該預 言，雖然優勢不強。預測經基基團在碳5處會改善活性（相 對於無經基基團），則藉著比較5·經基㈣抑制劑21(54%) 與相對應之脫-羥基抑制劑2w(36%)而得到證實。 在碳2處延伸吲哚抑制劑為芳基醯胺改善了效力，如 同、先A之茗抑制劑為基礎而預期的。例如，間-羥基苯甲 287 200817327
酿胺…，在1〇〇μΜ下提供了 74%抑制 基西旨：^5〇ομΜ處只有40%抑制。有趣的是 X ^至基乙§旨W)與相對應的芳基醯胺2t(26%)，顯又示同 牯：板：出現第一個經基，阻礙了正常由其他較佳之間: (ntr侧鏈提供的效力提升。當僅出'見5·經基基團時 (2k，74/°)，該醯胺侧鏈是本系列中最佳的，而在僅出現6_ 經基基團時（2U，56%)仍有良好的抑制作用。此外，同時 在碳5和6出現兩個經基基團’似乎在缺少酿胺側鍵時仍 可谷忍㈣對13和2e)。該數據暗示因為第二經基基團的 出現，可能發生，朵支架之結合方位的改變，而不同的醯 胺側鏈現在可能是較佳的。在碳4_7處的最佳侧鍵組合（包 括經基基團的官能基置換（Lai等人，1999))和酿胺側鍵，目 前尚在調查中。 通4，藉著在表X中之數據顯示吲哚支架結構-活性_ 關係（SARs )，與在先前關於萘支架之實施例中報告的相 似。在兩種情況下，將羥基基團定位在支架上類似TyrM62 OH的位置，如同藉著模擬研究確認的，提供了最高的效 力。將該羥基基團移到一相鄰的碳上，降低了效力，但在 兩種情形下都不令人意外。在藉著模擬研究確認的位置， 以芳基醯胺延伸兩個支架，以便模仿Tyr 肽結合， 改善了效力。對兩個支架而言，在醯胺側鏈上以羥基基團 取代甲氧基基團通常會降低效力，就像以較長的苯甲醯胺 側鍵做較大的延伸（例如2k，74%對2Ji，7%與2e，3 0°/〇對 2b ’ 21°/。相比較）。這兩種支架在sars上的主要差異是5- 200817327 經基巧味支架喜歡較長的間-羥基苯甲醯胺側鏈（2k，74% 對2e ’ 3 0%)，而類似的3,卜二羥基萘支架卻喜歡衍生自間 -經基苯胺的較短酿胺侧鏈。5_羥基吲哚支架顯示基本上對 經基基團在較短醯胺侧鏈上的位置並無偏好（2d-f)，但觀 祭到杈長的羥基苯甲醯胺側鏈明顯偏愛間-位置（2〗_21)。在 3，6-二羥基萘支架的案例中，則觀察到相反。 進行頟外的分子模擬研究，進一步探究吲哚支架對較
長fe胺側鏈的偏愛。使用得自先前報告的最具活性之萘抑 制A j 3作為模板，在其上疊加類似的叫丨碌抑制劑2 e和經過 認證的吲哚抑制劑2k。以兩個系統抑制劑的合理設計和 SAR為基礎，認為在萘抑制劑3中最重要的三個側鏈官能 基是6-羥基基團（H_鍵捐贈者和接受者）、得自％羥基基團 的氫（H-鍵捐贈者）和侧鏈羥基基團（H—鍵接受者）。在計晝3 中以生號確涊在兩個系列中的這三點藥效團模型。 計晝3
使用在 SYBYLtm(6.4，Tripos，St. Louis)中的，，多重吻 合”能量最小化和，，吻合原子，，設備，按順序疊加“和2让至 3上。利用選出的彈簧常數（多重吻合）和重量（吻合原子）進 打整個吻合過程，使得最高加重是在最佳疊加之支架藥效 團Ο s和H s(lGG)上’接著是側鏈〇，s(1G)，然後是其間的 醯胺鍵（1)。，，多重吻合”過程調整構形以便吻合最大藥效 289 200817327 ‘ 團’隨後的最小化作用產生最接近的局部最小能量構形， 而最後的，，吻合原子，，過程產生這些最小化構形的最佳藥效 團璺加。如同預期的，2e和2k兩者的支架藥效團〇，s和 H’s密切地疊加，並類似在3中的相對應原子（全都在大約 〇·5〇Α内）。然而，2e和2k的側鏈藥效團〇，s，其疊加作 用與其在3之相對應〇上的疊加作用顯然有別，分別為i8A 對僅僅0.08A之置換。在2k和3之間的三個關鍵藥效團 f 位置的密切吻合，僅藉著2·4之因數提供其效力差異的合 理化（IC5G’s分別為38μΜ對16μΜ)。 藉著另一個碳原子延伸醯胺側鏈，降低了活性（2m，2i% 對21，54 /◦)。在2k的苄基碳上以任一立體化學添加甲基基 圑，均大大地降低了活性（2y，15。/。& 2z，13%對2k，740/〇)。 以羧酸鹽陰離子置換側鏈羥基基團（在對位）（2n，〇%對 21，54%和2p，7%對2f，45%)，降低了活性，而相對應的甲基 酉旨（分別為2〇，11% & 2q，32%)顯示較少的效力喪失。重要 I 的是，以氟置換側鏈羥基基團，維持大部分效力（28,57%對 2k574〇/〇^ 2r521〇/〇fi 2e530〇/〇) 〇 ^ α , a ^ ^ 2s ^ T ^ ^ 一個羥基基團，進行效力二期代謝（例如葡萄糖醛酸苦形 成），且該保留羥基是置換的現行目標（Lai等人，1998)。 使用與先前實施例相同的方法（Marsilje，2〇〇〇)，藉著 監視在漸增[ATP]，同時維持抑制劑濃度恆定下的抑制％， 分析得自本吲哚系列之最有效抑制劑（2k)的Ατρ競爭性。 因為[ΑΤΡ]對抑制％有些微影響（在45μΜ 2k和2〇叫％或 i，〇_M [ΑΤΡ]下的抑制％分別是46%和41%)，認為在這 290 200817327 些測定條件下2k對ATP是非-競爭性的。 總括而言，為了發展非·Ατρ競爭性pp6〇e-Sre抑制劑， 已絰，又汁吲哚支架，並進行初步SAR。發現來自本系列最 佳的以吲哚為基礎之抑制劑的效力，接近最佳的以萘為基 楚 17 制』的效力。45μΜ 2k 和 200μΜ 或 1，〇〇〇μΜ [ATP] 的抑制％分別為46%和41 %。 貫施例5 -額外之吲哚衍生物 下列的結果顯示吲哚衍 和測试。提供四個反應計晝 應計畫之個別終產物的製備 之酪胺酸激酶抑制劑的實例 的合成（硼酸，計畫1 ; ΟΗ， 晝3 ;和膦酸，計畫句。 蛋白質激酶抑制劑的合成 生之蛋白質激酶抑制劑的合成 ’接著分別藉實驗詳述這些反 。這些終產物為以吲哚為基礎 ’其中解釋了利用最佳R基團 叶晝2 ;脂肪族醯胺延伸，計 291 200817327 計畫1
4 pp60c-src的抑制作用： ‘ 」 62%@1〇βμ關 5-羥基-2-吲哚羧酸曱酯（1) 將3.50克5-羥基_1_吲哚羧酸溶解於預先以HC1氣體 飽和的無水MeOH中。迴流48小時。在真空中濃縮，並 以AcCNx3濕磨，移除殘餘的酸。通過含有EtOAc的矽膠 塞子過濾，移除基準線污染。回收4.32克（定量產量）TLC Rf=.78(EtOAc) NMR(DMSO-d6) ： 3.82(s? 3H)5 6.78(d? J = 8.8 赫茲，1H)，6.88(s，1H)，6.93(s，1H)，7.23(d，J = 8.8 赫 茲，1H)，8.90(s， 1H)， 11.62(s5 1H)，FAB( + ) MS m/e 191.9(M+1) 5-[(三氟甲基）磺醯氧基]吲哚-2-羧酸甲酯（2) 292 200817327 在〇°C下，將150毫升無水DCM加至3·24克（17毫莫 耳）5-羥基-2-吲哚羧酸甲酯（1)和6.67克（18.7毫莫耳）正-苯 基三氟甲磺醯亞胺中。逐滴加入2.6毫升三乙胺，此時形 成澄清黃色的溶液。在〇°C下攪拌1小時。加溫至室溫， 並攪拌2小時。在真空中濃縮，並經由矽膠管柱（1/1 EtOAc/ 己烷）純化。回收 4·69 克（86%)。TLC Rf=.63(l/1 EtOAc/己 烷）HPLC Rf=20.879 屮 NMR(DMSO-d6): 3.87(s，3H)，7.25(s， 1H)，7.3 l(d，J=9.2 赫兹，lH)，7.55(d，J=9.2 赫茲，lH)，7.80(s, 1H)，12.34(s，1H) FAB(+) MS m/e (M+l) 〇 5 -甲基吲哚-2_羧酸甲酯，4,4,5,5-四甲基-1，3,2-二聘環 戊硼烷甲基（3) 將500耄克ι·55毫莫耳的5-[(三氟甲基）磺醯氧基]吲 哚-2-羧酸甲酯（2)、37·9毫克（〇 〇5毫莫耳）pd2CKdppf)、432 毫克（1·7毫莫耳）二硼雙頗哪醇酯、454·8毫克（4·65毫莫耳） 乙酸鉀和25.7毫克（0·05毫莫耳）dppf加至燒瓶中，並在4〇 C之真空中脫水2小時。加入20毫升無水二聘烷，並加 熱至80°C過夜。當Pd黑沉澱出時，反應變成黑色。濾掉 催化刈，並通過矽膠塞子，移除基準線雜質。TLc心=51(1/4 EtOAc/己烷）下一個反應直接使用粗產物。 5-硼基吲哚-2-羧酸甲酯（4) 字I·2毫克（1.3耄莫耳）的5-甲基吲哚-2-羧酸甲酯， ，，甲基匕3,2·二腭環戊硼烷甲基（3)溶解於EtOAc 中。加入 〇·25 奎扎 升（2·6宅莫耳）二乙醇胺，並在室溫下攪 摔該反應過夜。滿、皆 < /慮所形成的白色沉澱物，並在1N HC1 293 200817327 中以超音波震盪。過濾所得
, 、，各士 的白色沉澱物，溶解於MeOH 中，亚在真空中濃縮。
收 36.6 毫克（13%)。HPLC
Rf=13.912 H NMR(DMSCM、·， 6) · 3.85(s，3H)，7.15(s，1H)， 7.36(d，J=8.4 赫茲，1H) 7 67 • 7(d，Ν8·4 赫茲，1Ii)5 7.87(s，1H)， 8.14(s，1H)，11.91(s，o 計畫2 r
OH ΡνΒΟΡ, DlEA, IW 3-甲氧苄胺
om f \以F置換，然後是 t ’ pp60c-src的抑制作用： 〇H 在 ΙΟΟμΜ 下為 57% 以Β(0Η)2置舞丄卷後 是 I)p60c-src 的甭： 在师下細卯60c二的抑制作用： 在 10_0μΜ 下為 74% IC50=38vM (包括在Manuscript中） (5-羥基吲哚_2_基）_1[(3-甲氧苯基）甲基]甲醯胺（5) 將2.00克（ΐι·3毫莫耳）的^羥基吲哚羧酸、16毫 升（12.4毫莫耳）3-曱氧苄胺和5_87克（11.3毫莫耳）PyBOP 溶解於10毫升無水DMF中。冷卻至〇。〇，並加入5.9毫 升（33.9毫莫耳）DIEA。在0°C下攪拌5分鐘，並容許加溫 至室溫1小時。回收2.83克（產量85%) TLC Rf'34(l/1 EtOAc/己烷）4 NMR(DMSO-d6) : 3.70(s，3H)，4.43(d，J=4.4 赫茲，2H)，6.69(d，J=8.8 赫茲，1H)，6.78(d，J=7.7 赫茲，1H)， 6.83(s，1H)，6.86(s，1H)，6.94(s，1H)，7.20(m，3H)，8.92(t， J = 4.4 赫茲，1H)，11.36(s，1H) FAB(+) MS m/e 297.3(M+1) 294 200817327 (5-羥基吲哚-2-基）-N-[(3-羥苯基）甲基]曱醯胺（6) 將20毫升無水DCM加至200毫克（0.67毫莫耳）的（5· 羥基吲哚-2-基）-N-[(3-甲氧苯基）甲基]甲醯胺（5)中，並在 氬氣下冷卻至-78 °C。加入4.0毫升（4.0毫莫耳，6當 量）BBi*3。保持在-78°C下5分鐘，再加溫至室溫。在室溫 下90分鐘之後，以H20驟冷，並攪拌10分鐘。以Et〇Ae 稀釋該反應混合物，並以NaHC03和鹽水沖洗。將有機層 覆以MgS04脫水，並在真空中濃縮。使其通過矽膠塞子， 移除基準線污染。回收X毫克（產量80%”TLCRf=0.21(l/l EtOAc/己烧）。4 NMR(DMSO-d6) : 4.38(d，J=4.8 赫茲，2H)， 6.59(d，J=8.8 赫茲，1H)，6.71(m，3H)，6.83(d，J=1.8 赫茲， 1H)，6.94(s，1H)，7.08(dd，J=7.7 赫茲，1H)，7.19(d，J=8.8 赫 茲，1H)，8.84(t，J=5.9 赫茲），1 1.2 8(s，1H)。FAB( + ) MS m/e 283.2(M+1) 計畫3
〇 1 pp60c-src的抑制作用： 在ΙΟΟμΜ下為39% N-(l-胺甲醯基-2-甲丁基）（5_羥基吲哚_2_基）羧醯胺（7) 將100毫克（0.56毫莫耳）5-羥基-2-吲哚羧酸、103.4毫 克（〇·62毫莫耳，1」當量）L_異亮醯胺和291毫克（〇·56毫 莫耳，1當量）PyBOP全部溶解於i毫升無水DMF中。將 該溶液冷卻至〇°C，並加入〇·3毫升（1·68毫莫耳，3當 295 200817327 量）diea。在o°c下擾拌該反應混合物1分鐘，並在室溫下 授拌1小時。然後以EtOAc稀釋該反應，並以in HClx3 和飽和的NaHC03x3沖洗。將有機層覆以MgS04脫水，並 在真空中濃縮，得到166.7毫克（產量91%)°TLC Rf=0.08(l/1 EtOAc/己烷）β NMR(DMS0-d6) : 〇.83(m，6H)，1.15(m，2H)， 1.68(m，1H)，1.83(m，1H)，4.29(t，J=8.8 赫茲，1H)，6.69(d， J = 8.5 赫茲，1H)，6.83(s，1H)，7.01 (s，1H)，7.06(s，1H)，7.1 9(d， J = 8.4 赫茲，1H)，7.48(s，1H)，8.00(d，9.2 赫茲，1H)，8.76(s， 1H)，11.3(s，1H)。FAB( + ) MS m/e 290·1(Μ+1) 計畫4
正-苯基三氟甲磺醯亞胺 TEA, DCM
亞鱗酸二节醋 e蚊 AcCW
p c och：3 f?co2s。、/、〆
pp60c-src的抑制作用： 在5〇i〇pM下為11% 5-二节磷醯基吲哚-2-羧酸甲酯（8) 將200毫克（0.62毫莫耳）5-[(三氟曱基）磺醯氧基]吲哚 -2-羧酸甲酯（2)、195.8毫克（0.74毫莫耳，1.2當量）亞磷酸 二苄酯、〇·14毫升（〇·81毫莫耳，ι·3當量）DIEA和35.7毫 296 200817327 克（〇·〇3毫莫耳，5莫耳％)?(1(??113)4全部在氬氣下溶解於 無水AcCN中。將該反應混合物加熱至80艽過夜。在減低 的壓力下移除溶劑，並藉著矽膠管柱層析法分離標題化合 物。130 毫克（產量 5 0%)。TLC Rf=0.28(l/1 EtOAc/己烷）4 NMR(DMSO-d6): 3.85(s，3H)，4·98·5·01(ηι，4H)，7_28-7.32(m， 11Η)，7.53-7.55(m，2Η)，8.17(d，J=14.6 赫茲，1Η)。31Ρ NMR(DMSO_d6) : 23.89。 5-膦吲哚-2-羧酸甲酯
將5-二苄磷醯基吲哚-2_羧酸甲酯（8)(125毫克）溶解於 10毫升MeOH中。加入20毫克Pd-C，並在帕爾裝置中氫 化該混合物過夜。濾掉催化劑，並在減低的壓力下移除溶 劑。獲得72_5毫克（產量73%)。TLC Rf=基準線在EtOAc。 4 NMR(DMSO-d6) : 3.84(s，3H)，7.24(s，1H)，7.44肇7.49(m5 2H)，8.01(d，J=14.3 赫茲，1H)， 12.11(s， 1H)。31P NMR(DMSO-d6) : 17.22。 在本實施例中的酯化合物，可藉著將酯轉變為醯胺及/ 或添加額外的專一性元件，增加效力。 實施例6-更多,咕衍生物蛋白質激酶抑制劑的合成 在下文解釋一些更精細之。朵抑制劑的合成。這些合 成可產生對pp60c-src和其他酪胺酸激酶有更大效力的化 合物。隨後可將甲基酯基團轉變為各種醯胺衍生物，以增 加效力。 297 200817327
迴流
二甲苯 迴流
KOA^ OM1SO
1. 二乙醇胺 2. Her
BBr^ DCM
298 200817327 計畫2 :
Hg* NaBr EtCHAcOH,.迴流
HO OH
Ο DCNj
二甲苯 迴流
NaOMe, MeON, -8 €
PdCI:<:dop”， KOAc, DMSO
1二乙醇胺 2. HCI 計畫3 :
實施例7-Src抑制劑的毒性 有相當近期的文獻支持瞄準pp60e^e(Src)，作為癌症 治療之廣泛有效的方法，但不產生嚴重的毒性。例如，展 現出提高EGF受體PTK信號，或過度表現相關Her-2/neu 299 200817327 受體的腫瘤’已經在組成上激活了 Src並促進廬瘤侵入。 在這些細胞中抑制Src，引起生長受阻、誘發細胞瑪亡， 並逆轉了轉化表現型（Karni等人，1999)。已知異常升高的 Src活性，允許轉化細胞以不依賴_固定的方式生長。這顯 然，由細胞外基質在FAK/Sre路徑中，以與有絲分裂信號 對等的方式’發出升高Src活性之信號，並藉此阻斷正常 已被激活之細胞計機制的事實引起。因& ,在腫瘤細胞 中的FAK/Sre抑制作用可誘導細胞社，因為當誘導脫離 $胞外基質時，細胞祠亡機制會正常變成激活的（Hisan〇 等人，1997)。此外，# Src抑制作用和衍生自這些μ-抑 制之細胞株的腫瘤顯示出降低血管生成的發展時，注意到 VEGF mRNA表現的降低（EUis等人，1998)。 利用極有希望的結果，解決Src抑制之可能毒性的問 題。例如’在老鼠中剔除Src基因，僅導致一種缺陷，即 破骨細胞無法形成皺摺的邊緣，而結果不能吸收骨質。然 而，在些老鼠中可藉著插入激酶缺陷Src基因來補救破 骨細胞的骨吸收功能（Schwartzberg等人，1997)。這暗示可 在活體内抑制Src激酶活性，但不誘發唯一已知的毒性， 因為Src蛋白質的出現似乎足以恢復並激活在破骨細胞基 本信號複合體中的其他PTKs(為維持破骨細胞功能所必要 的）。 已經提出Src為癌症治療的，，萬能，，目標，因為已經發 現它在越來越多的人類腫瘤，除了上文提及的那些中被過 度激活（Levitzki，1996)。Src抑制作用對癌症治療的可能益 300 200817327 , 處，似乎是曾經引用及額外文獻的四倍。該益處為：1)由 自體分/必生長因子環效應引起之不受控制之細胞生長的抑 制’等等。2)因為在脫離細胞基質時誘發細胞凋亡的轉移 抑制。3)經由降低VEGF含量而抑制腫瘤血管新生。句低 毒性。 最初的非-肽Src抑制劑亦已經在四個不同系列的細胞 k養測疋中’顯示出極令人鼓舞的結果。1)在nih 60-腫 r 瘤細胞小組測定中，看到對抗腫瘤細胞株，包括前列腺株 的廣泛活性（如同對Src抑制劑之預期）。例如，三個抑制 劑對NIH前列腺癌細胞株提供了下列的生長抑制π;。、·· 4f_(PC-3, 15μΜ ; DU-145, 3 8μΜ)、11-^(Ρ(：-3，19μΜ)、4^- 間（PC_3, 39μΜ ; DU_145, >1〇〇μΜ)。2)在 v-Src 轉化的正 常大鼠腎臟細胞株（LA25)中，11-間和45專一地阻斷了 v_ Src誘導的細胞生長，但沒有抑制親代非_轉化細胞的正常 生長。該結果顯示抑制劑不影響正常細胞，但在阻斷Src ( 誘導之細胞轉化方面是有效的。3)在得自三個不同患者的 卵巢癌和得自另一患者的腹腔癌中，比較Src抑制劑與癌 症藥物依托泊苷、紫杉醇、阿黴素和順氯氨鉑。在所有的 案例中’ Src抑制劑都至少像已知的癌症藥物一樣有效， 且通常更有效，並在最低測試劑量（3μΜ)下便看到充分的 效力。作為代表性的實例，在圖丨6 Α中出示紫杉醇與阿黴 素（在该特定腫瘤細胞培養物中，它們比依托泊苷&順氯氨 鉑更有效），與二個上文提及之Src抑制劑（在圖丨6E中出 示結構）的比較，使用得自腫瘤N〇15的卵巢腫瘤細胞。4) 301 200817327 亦測試Src抑制劑，對正常人類纖維母細胞生長的抑制， 輕現不會抑制正常的細胞生長（亞群集和群集的；反而觀 祭到-些提局的生長）’表示這些抑制劑對正常細胞沒有毒 性’即使是在更高1G倍的濃度下。在圖刚中提供該數 據的實例。5)亦測試其中兩個Sre抑制劑，對刺激 之LA25細胞生長的抑制。在⑽中出示結果。這些結 果顯示受試化合物抑制了 Src刺激的細胞生長。6)亦測試 其中兩個SrC抑制劑’對正常大鼠腎臟細胞生長的抑制。 在圖16D中出示結果，並解釋該抑制劑對正常細胞是細胞 保護性的。 整體而言’到目前為止獲得的細胞數據顯示可能預期 Src抑制劑，即對抗許多癌細胞株的廣泛活性，但只有报 少或沒有正常細胞毒性。 ,初步的Src抑制劑為前導結構，可能從其設計出更有 效並具選擇性的抑制劑。除了利用酪胺酸激酶晶體結構， 亦可利用天然產物酪胺酸激酶抑制劑丹寧卡 進行分子模擬研究（Faltynek等人，1995)，調查其肽-競爭 性結合模式。這些額外的模擬研究使研究者得以設計更多 的Src抑制劑之類似物，#中將丹寧卡的關鍵性藥效圏元 们并入新的抑制劑中。將瞭解它們的合成’並根據報告進 行經分離之Src測試（Marsilje 2000)。 κ細例8-使用pTK抑制劑預防由噪音_引起之聽力喪失 在噪音fl起之聽力喪失的研究中，使用南美栗鼠 302 200817327 (N=8)。在實驗操作之前，使用標準電生理技術測量動物的 聽力敏感性。特定而言，依據標準實驗室程序，經由從長 期植入下丘之記錄電極中誘發電位，來測量聽閾值。將動 物麻醉，打開鼓泡，並使左右耳蝸得以看見。使用引導至 耳蝸之鼓室階的圓窗，作為藥物施用的進出點。以3〇微 升3mMTOM2-32，以DMSO乳化，對1〇〇〇mM鹽水溶液， 處理四隻動物，將其放在一耳的圓窗上，而對照組溶液為 3mM DMSO對lOOOmM鹽水溶液，將其放在另一耳的圓窗 上。以30微升的3mM化合物la,以dMSO乳化，對1〇〇〇mM 鹽水溶液，處理五隻動物，將其放在一耳的圓窗上，而對 照組溶液為3mM DMSO對l〇〇〇mM鹽水溶液，將其放在 另一耳的圓窗上（在實驗結束前失去一隻動物）。在每個案 例中’容許溶液留在圓窗上30分鐘，然後關閉鼓泡。隨 後，使動物暴露在105dB SPL的4千赫茲頻帶噪音下4小 時。在噪音暴露之後’在第丨、3、7和2〇天測試動物的 聽力，判定誘發電位閾變換。在第20天評估永久閾變換。 在第20天獲得耳蝸，允許進行耳蝸的形態學檢查。在表 X I _X m中出不TOM2_32的數據，並在下文的表中 出示化合物1 a的數據。 303 200817327
304 200817327 第1天 40 60 65 70 80 第1天 45 40 75 75 平均第1天 42.5 50 70 72.5 77.5 第3天 35 60 65 75 80 第3天 10 10 50 55 55 平均第3天 22.5 35 57.5 65 67.5 第20天 0 10 25 35 10 第20天 5 10 40 35 25 平均第20天 2.5 10 32.5 35 17.5 TOM2 5百赫兹 1千赫兹 2千赫兹 4千赫兹 8千赫兹 第0天 55 70 75 85 80 第0天 55 60 65 75 75 平均第0天 55 65 "Ί 70 80 77.5 第1天 35 30 65 75 75 第1天 30 50 60 70 75 平均第1天 32.5 40 62.5 72.5 75 第3天 15 5 40 45 60 第3天 20 25 40 55 45 平均第3天 17.5 15 40 50 52.5 第20天 5 5 25 30 0 第20天 -5 0 10 23 -5 平均第20天 0 2.5 17.5 26.5 -2.5 5百赫茲 1千赫兹 2千赫兹 4千赫茲 8千赫兹 對照組第0天 57.5 72.5 75 77.5 77.5 TOM2第0天 55 65 70 80 77.5 對照組第1天 42.5 50 70 72.5 77.5 TOM2第1天 32.5 40 62.5 72.5 75 對照組第3天 22.5 35 57.5 65 67.5 TOM2第3天 17.5 15 40 50 52.5 對照組第20天 2.5 10 32.5 35 17.5 305 200817327 ΤΟΜ2第20天 0 2.5 17.5 26.5__ 5百赫茲 1千赫兹 2千赫兹 4千赫么么 8千赫茲 對照組第0天 57.5 72.5 75 77.5 對照組第1天 42.5 50 70 72.5 對照組第3天 22.5 35 57.5 65 __67^ 對照組第20天 2.5 10 32.5 35 -—------- ΤΟΜ2第0天 55 65 70 80 * — — ΤΟΜ2第1天 32.5 40 62.5 72.5 __75 ΤΟΜ2第3天 17.5 15 40 50 ΤΟΜ2第20天 0 2.5 17.5 26.5 --~~ _. ~~~~ 5百赫茲 1千赫兹 2千赫兹 4千赫絲 8千赫茲 ΤΟΜ2第20天 0 2.5 17.5 26.5 對照組第20天 2.5 10 32.5 35 17.5 ---—--- 表χ π TOM2 6696 5百赫茲 1千赫兹 2千赫兹 4千赫茲 第0天 38 50 70 75 ^80~~^ 第1天 27 20 70 75 ^65 —-------. 第3天 10 15 55 53 55 —------- 第7天 13 10 45 50」 50 ^ —~—___ 第20天 —-------- 對照組6696 5百赫茲 1千赫兹 2千赫兹 4千赫么么 第0天 35 45 75 80 第1天 30 40 75 80 ~~~— 第3天 7 15 50 6〇ZZj 70^ 第7天 5 15 45 J0_ 第20天 ~----— ^ ----- TOM2 6698 5百赫兹 1千赫兹 2千赫兹 4千赫么么 __'-- 8千赫茲 ---- 第0瓦 30 45 65 70 80 第1天 0 15 1 45 65 ^ 第3天 -5 5 25 40 — 306 200817327 第7天 -5 5 25 25 0 第20天 -5 0 0 0 -5 對照組6698 5百赫茲 1千赫茲 2千赫茲 4千赫茲 8千赫茲 第0天 55 40 65 70 80 第1天 10 15 45 60 70 第3天 15 15 45 40 55 第7天 5 5 25 35 10 第20天 10 10 20 30 5 TOM2 6699 5百赫茲 1千赫茲 2千赫茲 4千赫茲 8千赫茲 第0天 70 65 70 75 85 第1天 60 65 70 75 85 第3天 25 20 70 70 75 第7天 10 5 45 40 45 第20天 10 10 45 40 45 對照組6699 5百赫茲 1千赫茲 2千赫茲 4千赫茲 8千赫茲 第0天 70 70 65 70 85 第1天 60 70 65 70 85 第3天 50 65 60 65 70 第7天 38 55 50 45 65 第20天 28 35 50 45 60 測試前 5百赫茲 1千赫茲 2千赫茲 4千赫茲 8千赫茲 對照組 25 25 30 25 10 25 30 30 25 15 對照組 25 27.5 30 25 12.5 TOM2 35 30 30 25 15 25 30 25 20 10 TOM2 30 30 27.5 22.5 12.5 307 200817327 表χπ 5百赫茲 對照組 ΤΟΜ2 第0天 62.5 50 第1天 35 30 第3天 32.5 10 第7天 21.5 2.5 第20天 19 2.5 1千赫茲 對照組 ΤΟΜ2 第0天 55 55 第1天 42.5 40 第3天 40 12.5 第7天 30 5 第20天 22.5 5 2千赫茲 對照組 ΤΟΜ2 第0天 65 67.5 第1天 55 57.5 第3天 52.5 47.5 第7天 37.5 35 第20天 35 22.5 4千赫茲 對照組 ΤΟΜ2 第0天 70 72.5 第1天 65 70 第3天 52.5 55 第7天 40 32.5 第20天 37.5 20 8千赫茲 對照組 ΤΟΜ2 第0天 82.5 82.5 第1天 77.5 72.5 第3天 62.5 57.5 第7天 37.5 22.5 第20天 32.5 20 308 200817327 表X IV 測試前 5百赫兹 1千赫茲 2千赫茲 4千赫茲 8千赫茲 對照組6821 30 20 25 15 7.5 對照組6845 30 25 20 15 10 對照組6850 27 25 15 10 0 對照組6828 20 15 20 5 5 對照組6829 20 20 20 20 5 對照組 25.4 21 20 13 5.5 CH65 6821 30 22.5 25 20 10 CH65 6845 35 25 25 10 0 CH65 6850 25 25 10 12 0 CH65 6828 20 25 15 5 0 CH65 6829 23 25 25 15 10 CH65 26.6 24.5 20 12.4 4 第1天 5百赫茲 1千赫茲 2千赫茲 4千赫茲 8千赫茲 對照組6821 5 25 50 60 72.5 對照組6845 15 15 40 75 80 對照組6850 8 10 25 65 55 對照組6828 5 20 55 75 80 對照組第1天 8.25 17.5 42.5 68.75 71.875 對照組標準物 4.716991 6.454972 13.22876 7.5 11.79248 CH65 6821 0 2.5 0 10 0 CH65 6845 5 20 25 35 30 CH65 6850 10 0 20 68 35 CH65 6828 0 5 55 55 25 CH65第1天 3.75 6.875 25 42 22.5 4.787136 8.984941 22.7303 25.28504 15.54563 第3天 5百赫茲 1千赫茲 2千赫茲 4千赫茲 8千赫茲 對照組6821 10 25 50 55 67.5 對照組6845 10 15 35 55 45 對照組6850 3 5 15 25 15 對照組6828 5 15 40 65 55 對照組6829 20 20 35 45 45 309 200817327 對照組第3天 9.6 16 35 49 45.5 6.580274 7.416198 12.74755 15.16575 19.39716 CH65 6821 5 7.5 0 10 0 CH65 6845 5 5 0 0 15 CH65 6850 5 2 15 25 15 CH65 6828 0 0 40 55 0 CH65 6829 12 20 35 45 45 CH65第3天 5.4 6.9 18 27 15 4.27785 7.861298 18.90767 23.07596 18.37117 第7天 5百赫兹 1千赫兹 2千赫茲 4千赫茲 8千赫茲 對照組6821 0 10 20 20 45 對照組6845 10 15 25 45 45 對照組6850 6 5 15 30 10 對照組6828 10 20 37 65 60 對照組6829 20 25 45 40 55 對照組第7天 9.2 15 28.4 40 43 7.293833 7.905694 12.36123 16.95582 19.55761 CH65 6821 0 0 0 0 0 CH65 6845 5 15 0 5 20 CH65 6850 8 0 15 15 0 CH65 6828 15 0 40 55 30 CH65 6829 12 15 20 45 40 CH65第7天 8 6 15 24 18 5.87367 8.215838 16.58312 24.59675 17.888854 第20天 5百赫茲 1千赫茲 2千赫茲 4千赫茲 8千赫茲 對照組6821 0 10 25 35 7.5 對照組6845 0 5 25 45 40 對照組6850 8 0 10 20 10 對照組6829 15 20 30 30 18 對照組第20天 5.75 8.75 22.5 32.5 18.875 7.228416 8.539126 8.660254 10.40833 14.77822 CH65 6821 0 0 0 0 -5 CH65 6845 0 0 0 0 5 CH65 6850 5 〇 15 11 0 310 200817327 CH65 6829 7 5 10 25 15 CH65第20天 3 1.25 6.25 9 3.75 3.559026 2.5 7.5 11.80603 8.539126 5百赫茲 1千赫茲 2千赫茲 4千赫茲 8千赫兹 對照組第1天 8.25 17.5 H 42.5 68.75 71.875 對照組第3天 9.6 16 35 1 49 45.5 對照組第7天 9.2 15 28.4 40 43 對照組第20天 5.75 8.75 22.5 32.5 18.875 CH65第1天 3.75 6.875 25 42 22.5 CH65第3天 5.4 6.9 18 27 15 CH65第7天 8 6 15 24 18 CH65第20天 3 1.25 6.25 9 3.75 圖1 6-22顯示以TOM2-32處理之動物的平均閾變換。 特定而言，圖16顯示在實驗操作（即暴露在1〇5dB之4千 赫兹頻帶噪音下4小時）之前，測試暴露在5百赫茲、1千 赫茲、2千赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音下之後的 平均閾變換。圖17顯示在實驗操作之後第〇天、第1天、 第3天和第20天，暴露在5百赫茲頻帶噪音下之後的平 均閾變換。圖18顯示在實驗操作之後第〇天、第1天、 第3天和第20天，暴露在丨千赫茲頻帶噪音下之後的平 均閾變換。圖19顯示在實驗操作之後第〇天、第丨天、 第3天和第20天，暴露在2千赫茲頻帶噪音下之後的平 均閾變換。圖20顯示在實驗操作之後第〇天、第丨天、 第3天和第20天，暴露在4千赫茲頻帶噪音下之後的平 均閾變換。圖21顯示在實驗操作之後第〇天、第丨天、 第3天和第20天，暴露在8千赫茲頻帶噪音卞之後的平 均閾變換。圖22顯示在對照組和經處理耳朵，第2〇天的 311 200817327 平均dB閾變換。如同 J仫圖17-22中所不，經處理耳华的 平均dB閾變換較低 吁木的 ^ 代表較少的聽力喪失。 圖23-28顯示以各人 a物la處理之動物的平均閾變換。 %疋而言，圖23 _ +夬〜 、 ”、、貝不在貫驗操作之前，測試暴露在5 赫兹、1千赫兹、2+杜— 赫錄、4千赫茲和8千赫茲頻帶π率音 下之後的平均閾變拖。同” 只▼木曰 暴露在5百赫茲、i千 交乐i天
益斗首嫌/立丁 +赫錄、2千赫兹、4千赫茲和8千赫 么么頻f σ呆音下之德沾亚 、自閾變換。25顯示在實驗操作 杜— ，*露在5百赫茲、1千赫茲、2千赫茲、4千 赫炫和 8千赫益恶品i 一 員f本曰下之後的平均閾變換。圖26顯 示在實驗操作之後第7丟 呈不―^ — 便弟7天’暴露在5百赫茲、i千赫茲、2 '、茲、4千赫兹和8千赫兹頻帶噪音下之後的平均閾變 換。圖歹顯示在實驗操作之後第2〇天，暴露在5百赫兹、 千赫雔、2千赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音下之後 的平均閾變換。圖28顯示在第U、第3天、第7天和 弟20天’暴露在8千赫兹之後的平均閣變換。如同在圖 2心28中所示，經處理耳㈣平均犯閾變換較低，代表較 少的聽力喪失。 ,同在圖16-28中所示，TOM2_32和〇η·65兩者提供 了對弹音暴露的保護。然而，化合物1 a提供了最大程产的 保護。特定而言，PTK抑制劑處理的耳朵有平均比對=組 耳朵更低15至25dB的聽力喪失，且動物對實驗操作並沒 有顯示有副作用。 312 200817327 實施例9-使用PTKs之抑制劑，抑制在耳蝸毛細胞中 噪音-誘導的細胞凋亡 使南美栗鼠（N=3)暴露在l55dB pSPL的7%對衝擊噪 音下。在嗓音暴露之後5分鐘，將動物犧牲。使用對抗焦 點黏連激酶，其為該複合體之固有成員的抗體，檢查耳虫尚 之焦點黏連複合體的激活作用。 圖29A-F顯示高量衝擊噪音對未利用ρτκ抑制劑處理 之南美栗鼠耳蝸的影響。特定而言，圖29A為電子顯微攝 影，顯示在高量衝擊噪音（155dB)之後的耳蝸損傷。圖29八 顯示網板（S)的裂開。裂開似乎在外側毛細胞的第二和第三 排之間。圖29B敘述在適度高量的八音階頻帶噪音（1〇5dB) 之後，針對焦點黏連激酶（FAK)以免疫組織化學方式來染 色耳蜗。在圖29B中觀察到的染色，為相對較低的程度， 並近似在無噪音下觀察到的。染色似乎主要局限於戴特 (Deiter)細胞的咽隆起處，而不是在毛細胞。當將噪音量升 高至110dB OBN時，出現細胞凋亡的細胞，如在圖29c 中所示。這些細胞凋亡的細胞位在圖之左上象限的兩個區 域中，且核呈現明亮並高度濃縮的，而正常的核則是大且 顏色較分散的。圖29D是以焦點黏連激酶（FAK)抗體染色 之相同細胞的照片（如同在圖29B中；然而，在此處咽隆 起似乎圍繞著細胞消失處的病灶）。這些病灶相當於在圖 29C中細胞經歷細胞凋亡的地方。圖29E顯示相同的區域， 但在較低的垂直平面下，證實病灶完全延伸至膜狀板之 下’並進入細胞體内。圖29F顯示暴露在155dB SPL之衝 313 200817327 擊噪音下的耳蜗。耳蝸在膜狀板處失去其完整性，並八部 被染上濃重的顏色。看見許多深色的區域，茯王 八衣该處的毛 圖30Α顯示以化合物ia預先處理的
一 J 叨圖30B
顯示在暴露於高量噪音（155dB)下之後，未經處理的耳蝸。 在經過處理的耳蝸（圖30A)中，有高量的FAK染色，其°壬 伸至戴特細胞的咽隆起之下，並完全進入膜狀板内。染= 的點狀性質，代表FAK為其固有成員之焦點黏連複合體的 形成。此外，二排毛細胞核（標示為〇Hcl_3)似乎均按順序 並保持完整，沒有發生任何細胞凋亡的跡象。因為已知FAK 在焦點黏連複合體中是有活性的，該數據強烈地暗示在高 度°呆音暴露之後，FAK仍有活性。假設經過化合物la的 處理，防止了激酶功能的抑制，結果導致耳蜗毛細胞的存 活。 與圖30A相反，圖30B證實多少降低的FAK染色程 度，但亦顯示明顯高量的細胞死亡。在本圖中，幾乎一半 的細胞死於細胞凋亡，並以許多濃縮的核表示。與圖3〇a 相反’在處理組並未觀察到細胞凋亡的核。因為化合物工& 可抑制數種FAK受質的磷酸化作用，包括細胞黏附蛋白和 ppl30cas，咸相信在耳蝸中的fAK激酶功能，在反映高量 噪音暴露上扮演了保護性的角色。 如同上述，PTK抑制劑處理的耳朵，顯示有比對照組 更低的外側毛細胞喪失。這代表巢凋亡（an〇ikis)(脫離細胞 基質’結果導致細胞凋亡），可能在噪音-誘導之毛細胞喪 314 200817327 失中扮演重要的角色，且阻斷在細胞基質處產生之細胞凋 亡信號，可預防毛細胞喪失。 更明確地說，使用上述的南美栗鼠動物模式，已經證 貫焦點黏連複合體反映極高量的噪音而形成。在形成這些 複合體時激活了 FAK，並已知開始數個信號級聯，首先經 由一系列的自我磷酸化事件，隨後經由下游肽受質的磷酸 化作用。已經證實在病灶中看到細胞凋亡的細胞，被焦點 f 黏連複合物圍繞。此外，加入Pp6〇e-Sre抑制劑防止細胞调 亡反應，並未阻止焦點黏連複合體的形成。這些數據暗示 經由藉著FAK之酪胺酸磷酸化發送下游信號，在毛細胞的 細胞调亡信號甲可能是早期步驟。因為在其他有機系統中 藉著剪切壓力激活FAK，故這些觀察可代表在耳中確認， 藉著機械壓力激活的第一個信號路徑。 貫施例10 :經分離之激酶的抑制作用 C； 咸相信Src在細胞外對細胞内的構形是明顯不同的， 因為在細胞内部，Six被埋在多蛋白信號複合體中。因此， 因為肽受質結合位置在經分離之Src中並未完全形成（如藉 者Src X-射線結構顯示），故相信肽受質結合抑制劑對經分 離之8“活性是較弱的。與該位置的結合，需要抑：： 在經分離之酵素測定中捕捉極少量百分比的總蛋白 質，其與出現在細胞内部的構形相同。這需要過量很多的 抑制劑，以便排除大量來自測定中之催化循環的酵素。 然而’在細胞内部並不需要過量的抑制劑，因為如& 315 200817327 r SH3功能部位結合蛋白質業已轉變為Src構形，故完全形 成肽文貝結合位置。現在，低濃度的抑制劑便可從催化循 t移除酵素，因為所有的酵素都是緊密結合的構形。 KX2-328是AstraZeneca’s發表的ΑΤΡ·競爭性如抑 7劑（AZ28)，並在本文描述的許多實驗中用來作為陽性對 照組。注意到KX2-391對經分離之激酶具有弱活性，因為 在細胞外部並未完全形成肽結合位置（密切類似物，[Μ· 394對經分離之Src的效力—樣低），但在完整細胞内部則 具有極有效的活性。不希望與理論結合，認為在活性上的 差異可歸因於在細胞中現在完全形成肽結合位置的事實， 因為相對於經分離之激酶敎，在多·蛋白信號複合體中之 結合蛋白質夥伴的異位效應。 表X V解釋了相對# m卩Λ Λ $ 對於對組（未處理）經分離之激酶， 在AstraZeneca ATP_競爭性抑制劑（〖ms，Μ⑼或 ΚΧ2-391存在下之經分離激酶的活性百分比。 316 200817327 表xv 目標 ΑΖ28@10μΜ ΚΧ2-39_0μΜ Abl⑻ 1 120 CHKl(h) NT 105 EGFR(h) 3 134 FGFR2(h) 94 94 Fyn(h) 2 85 IGF-lR(h) 110 101 IR(h) 125 112 Lck⑻ 1 109 Lyn(h) 0 113 MAPK2(h) 105 112 PDGFR/3(h) 98 110 PKCa(h) 111 111 Pyk2(h) 43 97 Yes⑻ 1 92 ZAP-70(h) 97 108 PI3激酶 99 100
AstraZeneca ATP競爭性抑制劑顯示出ATP-競爭性抑 制劑典型的脫靶激酶之抑制活性，藉著 Ab 1、EGFRTK、 Fyn、Lck、Lyn&Yes的強抑制，證明了較差的選擇性。相 反的，在KX2-391中看到這些脫-靶激酶的不良抑制。 然而，按照上述測定，KX2-391是較有效的Src-驅動 之細胞生長的抑制劑。在c-Src/NIH-3T3設計的細胞株中’ 317 200817327 AZ28 的 GI5。為 99nM，對 KX2-391 的 13nM，而在 NCI 人 類結腸癌細胞株HT29中，AZ28的 GI5()為 794nM，對 KX2-391 的 23nM。類似 KX2-391，KX2-394 在 c-Src/NIH-3T3設計之細胞株中的GI5G為13nM，且在NCI人類結腸 癌細胞株 HT29 中，KX2-394 的 GI50 為 794nM 對 33nM。 在分開的實例中，滴定數據指出AZ28是經分離之Src 的有效抑制劑（IC5G = 8pM)。FAK的滴定數據顯示AZ28對 經分離之FAK的效力至少更低大約100倍（IC5G>500nM)。 但是，滴定數據顯示KX2-391和KX2-394對經分離之Src 是較無效的抑制劑（IC5G分別為46μΜ和5μΜ)。FAK的滴 定數據顯示KX2-391和KX2-394對經分離之FAK是同樣 有效的（IC5〇>48pM)。 注意到AZ28對細胞生長比對經分離之Src的效力更 低10-100倍。這是典型的ATP競爭性抑制劑，因為在完 整細胞中的競爭ATP之濃度比在經分離之酵素測定中的高 很多。 實施例11 :化合物對細胞内磷酸化程度的影響 以 KX2-391 或 AstraZeneca’s ATP 競爭性 Src 抑制劑 AZ28 處理 HT29(結腸癌）和 c-Src527F/NIH-3T3(Src 轉化的） 細胞株。AZ28係作為陽性比較者，顯示核准的Src抑制劑 在這些測定中應有怎樣的表現。在以化合物處理之後，將 細胞溶解，接受PAGE，並以一套抗體探測。選擇抗體， 判定化合物是否引起已知Src受質之磷酸化的改變。此外， 318 200817327 亦調查脫-靶蛋白質磷酸化。此外，經由卡斯蛋白酶3切開， 評估細胞亡的誘導。每種化合物測試多個劑量，因為反 映漸增藥物濃度的傾向，是最可靠的活性指示劑。 按IX濃度，分別使用該化合物在兩個細胞株中的Gl5〇 產生KX2-391的劑量反應曲線。除了無藥物對照組”c，，之 外，亦測試三個額外劑量，以⑼的〇2、5和25倍。在這 兩個細胞株中進行AZ28相同倍數範圍的Gl5〇作為比較。 { 如同在圖31中所示，在兩個細胞株中獲得對Src-Y416自 我磷酸化，以及對兩種化合物的預期劑量反應。該數據指 出KX2-391在細胞内是Src抑制劑。 圖32顯示FAK Tyr925，一種已知的細胞内Src轉磷 酸作用受質的磷酸化作用。ΚΧ2_391和AZ28抑制了 Src 轉％ fee作用。该數據指出KX2-3 91在細胞内是Src抑制劑。 圖33顯示Shr Y23 9/240，一種已知的細胞内Src轉構 酸作用受質的磷酸化作用。KX2-391和AZ28抑制了 Src I 轉-鱗酸作用。該數據指出KX2-391在細胞内是Src抑制劑。 圖34顯示細胞黏附蛋白γ_3ΐ，一種已知的細胞内Src 轉鱗酸作用受質的磷酸化作用。KX2-391和AZ28抑制了 Src轉-磷酸作用。該數據指出κχ2-391在細胞内部是Src 抑制劑。注意·在有或無添加藥物的HT29細胞中，並未 檢測到細胞黏附蛋白γ_3 1。 卡斯蛋白酶-3的切開是誘導細胞凋亡的良好測量。已 知 ΑΖ28 在 ΗΤ29(結腸癌）和 c_src527F/NIH-3T3(Src 轉化 的）細胞株中，無法誘導細胞凋亡。相反的，如同在圖35 319 200817327 中所示，KX2-391在誘導細胞凋亡上是非常有效的。 因為Src活性在HT29(結腸癌）和c-Src527F/NIH-3T3 (Src轉化的）細胞株兩者中是非常高的，將可預期當抑制Src 活性時，會看到總磷酸酪胺酸含量的降低。圖3 6指出這 對AZ28和KX2-391兩者均是真的。該數據指出KX2-391 在細胞内是Src抑制劑。 PDGF受體酪胺酸激酶在Y575/574上自我磷酸化。認 為這在細胞中不是直接的Src受質。已知AZ28不是經分 離之PDGF受體酪胺酸激酶的有效抑制劑（參見表X V)。然 而，如同在圖37中所示，利用AZ28在PDGF受體自我磷 酸化上看到劑量反應的減少。暗示這是間接的影響。在 KX2-391上亦看到一些影響，然而它多少是效力較差的。 因此，KX2-391對間接PDGF自我磷酸化的抑制作用，比 AZ28的活性更差。在沒有添加藥物（以及有添加藥物）的 HT29細胞中，未檢測出PDGF受體酪胺酸激酶Y572/574。 FAK Y397主要是FAK自我磷酸化作用位置，而且只 是一不良Src轉磷酸位置。AZ28不是有效的PAK抑制劑（參 見在表XV中的經分離之酵素數據）。不過，在圖38中出 示了 AZ28在c_Src527F/NIH3T3細胞中對FAK自我磷酸 化的一些抑制作用。然而，沒有看到 KX2-391在 c-Src527F/NIH3T3細胞中對FAK自我磷酸化的抑制作用。 該相反事件在NCI人類結腸癌細胞株HT29中也是真的。 在表XV中出示的經分離之酵素數據，證實AZ28是 有效的EGFR酷胺酸激酶抑制劑。與在圖3 9中的該腫瘤細 320 200817327 胞數據-致’顯示AZ28有效抑制了 egfr赂胺酸激酶自 我磷酸化。該位置不是直接的Src磷酸化位置。在圖39中 的腫瘤細胞數據亦顯示ΚΧ2_391對EGFRTK的脫靶自我磷 酸化作用較無活性。 實施例12:使用Ρτκ抑制劑預防噪音引起的聽力喪失 在策音-誘導之聽力喪失的研究中使用南美栗鼠 (Ν-6)。在貫驗操作之前使用標準電生理技術，測量動物的 聽力敏感性。特定而言，依據標準實驗室程序，經由從長 期植入下丘之記錄電極中誘發電位，來測量聽閾值。將動 物麻醉，打開鼓泡，並使左右耳蝸得以看見。使用引導至 耳蜗之鼓室階的圓窗，作為藥物施用的進出點。以在 1000mM 鹽水溶液中，以 DMS〇 乳化的 kX1_〇〇4、kX1_14]L、 KX1-329 或 KX2-328(得自 Astrazeneca 的非-ATP 競爭性抑 制劑）處理動物，將其放在一耳的圓窗上。對照組溶液為在 lOOOmM鹽水溶液中的3mM DMSO，將其放在另一耳的圓 窗上。容許將溶液留在圓窗上30分鐘，然後關閉鼓泡。 隨後，使動物暴露在105dB SPL的4千赫茲頻帶噪音下4 小時。在噪音暴露之後，在第1、第7和第2丨天測量動物 的聽力’判定誘發電位閾變換。在第21天評估永久閾變 換。 圖 40_42 顯示以 KX1-004、KX1-141、KX1-329 或 KX2-328處理之動物的平均閾變換。特定而言，圖4〇顯示 在實驗操作後第丨天，暴露在5百赫茲、1千赫茲、2千 321 200817327 參 赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音下之後的平均閾變換。 :顯示在實驗操作後第7天，暴露在$百赫兹、i千赫 炫、2千赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音下之後的平 均閾、交換。圖42顯不在實驗操作後第2丨天，暴露在5百 赫錄、1千赫茲、2千赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音 下之後的平均閾變換。如在圖4〇_42中所示，在大多數的 If 況下，以 KX1-004、KX1_141、KX1-329 或 KX2-3 28 處 / 理之耳朵的平均dB閾變換是較低的，表示與未經處理之 對知、組動物相比較，該化合物在經處理動物中降低了聽力 喪失的程度。 實施例13 :使用ptk抑制劑預防順氯氨鉑_引起之聽力喪失 高量噪音和耳毒性藥物，如順氣氨鉑或胺基糖苷類的 作用，在内耳中共享一些共有的特徵。首先，噪音及/或藥 物改變了耳蝸（内耳）中自由基/抗氧化劑含量。已經顯示增 ( 加自由基是感覺細胞細胞凋亡死亡的主因。在順氯氨鉑 起之聽力喪失的研究中使用天竺鼠（N=7)。在實驗操作之前 使用標準電生理技術，測量動物的聽力敏感性。特定而古， 依據標準實驗室程序，經由從長期植入下丘之記錄電極中 誘發電位，來測量聽閾值。將動物麻醉，並以順氣氨鉑處 理。卩过後’測量動物的聽力以判定誘發之電位閾變換。 圖43顯示在以順氣氨鉑處理之後，在暴露於2千赫茲、 4千赫茲、8千赫茲、1萬2千赫茲、1萬6千赫茲和2萬 赫茲頻帶噪音後，一些天竺鼠的閾變換。圖44顯示以 322 200817327 KX4-004(CH65)處理之動物的閾變換。在順氣氨鉑_引起聽 力喪失之前，以KX1-004皮下處理動物。圖45顯示在順 氣氨舶-引起之聽力喪失之後，在未經處理之對照組動物和 KX1-004(CH65)·處理之動物兩者的中間 CAP閾值。如在 圖45中所示，KX1-004處理防止了由順氣氨鉑-引起的聽 力喪失。 實施例14 :化合物對破骨細胞形成的影響 欲判定化合物對破骨細胞形成的影響，將該化合物加 至衍生自脾臟細胞的破骨細胞前驅物上。為了產生脾臟-衍 生之破骨細胞，在核因子-κΒ配體之受體活化劑（RANKL) 和巨嗤細胞菌落刺激因子（M-CSF)的存在下，以雷帕黴 素、ΚΧ1-141、KX2-328(Astrazeneca 化合物）或 KX1-329 處理包括破骨細胞前驅物的脾臟細胞5天。以在活體外的 老鼠或人類破骨細胞模式，可溶性RANKL使破骨細胞前 驅物能夠在M-CSF的存在下分化（Quinn等人；1998, Endocrinology，139，4424-4427; Jimi 等人；1999，J. Immunol·， 163，434-442)。在RANKL和M-CSF單獨存在下培養未經 處理的對照組細胞。使用雷帕黴素作為抑制破骨細胞形成 的陽性對照組。圖46顯示在脾臟細胞中加入漸增濃度的 雷帕黴素（〇·〇〇〇 ΙμΜ、0.001 μΜ、0·01 μΜ 或〇.10乂）、〖乂1-141(0·5μΜ、2·5μΜ、12·5μΜ 或 20μΜ)、ΚΧ2-328(0·02μΜ、 Ο.ΙμΜ、0·5μΜ 或 2·5μΜ)或 ΚΧ1-329(0·06μΜ、0·3μΜ、1·5μΜ 或7.5 μΜ)。如在圖46中所示，將細胞染色。所有四種化 323 200817327 合物’包括陽性對照組雷帕黴素，與未經處理之對照組相 比較，均抑制破骨細胞的形成。 為了產生脾臟-衍生之破骨細胞，按照上述處理脾臟細 胞。圖47顯示在脾臟細胞中加入漸增濃度的雷帕黴素 (0·1ηΜ、ΙηΜ、1〇πΜ 或 ΙΟΟηΜ)、ΚΧ1-141(0·5μΜ、2·5μΜ、 12·5μΜ 或 20μΜ)、ΚΧ2-328(0·02μΜ、0·1μΜ、0·5μΜ 或 2·5μΜ) 或 ΚΧ1-329(0·〇6μΜ、0·3μΜ、1·5μΜ 或 7.5μΜ)。然後以破 骨細胞標記，酒石酸-抗酸磷酸酶（TRAP)將細胞染色，使 分化的細胞顯像。計算TRAP-陽性破骨細胞的數目。所有 四種化合物，包括陽性對照組雷帕黴素，與未經處理之對 照組相比較，均降低TRAP-陽性破骨細胞的數目。 實施例1 5 ··化合物對破骨細胞存活的影響 欲判定化合物對破骨細胞存活的影響，在RANKL和 M-CSF的存在下，以雷帕黴素、κχΐ-141、KX2-328或 KX1-329處理破骨細胞48小時。在RANKL和M-CSF的 單獨存在下，培養未經處理的對照組細胞。使用雷帕黴素 作為抑制破骨細胞存活的陽性對照組。圖48顯示在破骨 細胞中加入漸增濃度的雷帕黴素（〇.〇〇1μΜ、〇.〇1μΜ、〇.ΐμΜ 或 ΙμΜ)、ΚΧ1-141(〇·5μΜ、2·5μΜ、12·5μΜ 或 20μΜ)、 ΚΧ2-328(0·02μΜ、〇·1μΜ、0.5μΜ 或 2·5μΜ) 4ΚΧ1-329(0·06μΜ、0·3μΜ、1·5μΜ 或 7·5μΜ)。如在圖 48 中所示， 將細胞染色。所有四種化合物，包括陽性對照組雷帕黴素， 與未經處理之對照組相比較，均抑制破骨細胞的存活。 324 200817327 如上述，在RANKL和Μ-CSF的存在下，以雷帕黴素、 KX1-141、KX2-3 28或KX1-3 29處理破骨細胞48小時。圖 49顯示在破骨細胞中加入漸增濃度的雷帕黴素（〇. lnM、
InM、10nM 或 ΙΟΟηΜ)、ΚΧ1-141(0·5μΜ、2·5μΜ、12·5μΜ 或 20μΜ)、ΚΧ2-328(0·02μΜ、Ο.ΙμΜ、0·5μΜ 或 2·5μΜ)或 ΚΧ1-329(0.06μΜ、0·3μΜ、1.5μΜ 或 7·5μΜ)。然後以 TRAP 染色細胞，並計算TRAP-陽性破骨細胞的數目。所有四種 化合物，包括陽性對照組雷帕黴素，與未經處理之對照組 相比較，均降低TRAP-陽性破骨細胞的數目。 實施例1 6 :化合物對活體外骨吸收的影響 欲判定化合物在骨切片上對破骨細胞形成的影響，以 雷帕黴素、KX1-141、KX2-328或KX1-329處理骨切片。 圖50A顯示在骨切片上加入漸增濃度的雷帕黴素
InM 或 ΙΟηΜ)、ΚΧ1-141(2·5μΜ、12·5μΜ 或 20μΜ)、KX2-328 (Ο.ΙμΜ、〇·5μΜ 或 2·5μΜ)或 ΚΧ1-329(0·3μΜ、1·5μΜ 或7·5μΜ)。計算在骨切片上破骨細胞的數目。所有四種化 合物’包括陽性對照組雷帕黴素，與未經處理之對照組（Ctr) 相比較’均降低骨切片上破骨細胞的數目。 在骨吸收期間，破骨細胞形成吸收凹窩。欲判定化合 物在骨切片上對吸收凹窩形成的影響，如上述以雷帕黴
素、KX1-141、KX2-328 或 KX1-329 處理骨切片。圖 50B 顯示在骨切片上加入漸增濃度的雷帕黴素（〇1nM、lnM或 ΙΟηΜ)、ΚΧ1]41(2·5μΜ、12·5μΜ 或 20μΜ)、ΚΧ2_ 325 200817327 328(0·1μΜ、0.5μΜ 或 2·5μΜ)或 ΚΧ1-329(0.3μΜ、1·5μΜ 或7 · 5 μΜ)。判定在骨切片上吸收凹窩的數目。與未經處理 之對fl?、組（Ctr)相比較’化合物降低了骨切片上吸收凹窩的 數目。 如上指示處理骨切片。圖5 1A顯示在骨切片上加入漸 增丨辰度的雷帕黴素（0·001 μΜ、0.01 μΜ或〇·ΐμΜ)、KX1_ 141(2·5μΜ、12·5μΜ 或 20μΜ)、ΚΧ2-328(0·1μΜ、〇·5μΜ 〔 或 2·5—)或 ΚΧ1-329(〇·3μΜ、1·5μΜ 或 7·5μΜ)。然後以 TRAP染色骨切片。所有四種化合物，包括陽性對照組雷 帕黴素，與未經處理之對照組相比較，均降低了在骨切片 上TRAP-陽性破骨細胞的數目。值得注意的是，與未經處 理之對照組相比較，12·5μΜΚΧ1·141明顯降低了在骨切片 上TRAP·陽性破骨細胞的數目。 如上指示處理骨切片。圖51B顯示在骨切片上加入漸 增濃度的雷帕黴素（0·001μΜ、0.01μΜ或〇 ΐμΜ)、KXh υ Μ1(2·5_、12·5μΜ 或 20μΜ)、ΚΧ2_328(〇 ΐμΜ、〇 5μΜ 或 2.5_)或 ΚΧΐ_329(〇 3μΜ、或 7 5_。以甲苯 胺藍染色骨切片，顯示吸收凹寫’其為破骨細胞調解之骨 吸收的指示劑。所有四種化合物’包括陽性對照組雷帕黴 素，與未經處理之對照組相比較，均降低了在骨切片上吸 收凹窩的數目。 實施例17 ··化合物對成骨細胞的影響 已、二使用酵素鹼性磷酸酶作為成骨細胞活性的指示 326 200817327 劑’因為其涉及製造可供骨鈣化利用的磷酸鹽。欲判定化 合物對成骨細胞活性的影響，以ΚΧ1-141(〇.5μΜ、2.5μΜ、 12.5μΜ 或 20μΜ)、ΚΧ2-328(0·02μΜ、0·1μΜ、0·5μΜ 或 2·5μΜ) 或 ΚΧ1-329(0.06μΜ、〇·3μΜ、1·5μΜ 或 7·5μΜ)處理成骨細 胞，並判定鹼性磷酸酶表現（ηΜ鹼性磷酸酶/微克蛋白質/ 分鐘）（圖52)。僅以培養基、二甲亞砜（DMS⑺或骨形態發 生蛋白-2(BMP2)處理成骨細胞，作為對照組。bmps，因 (將其植入骨骼外位置時有誘導骨生成的能力，而被定義為 具有骨誘導功旎，並認為其調解未分化之間質細胞轉化成 產生-骨的成骨細胞。 欲判定化合物對成骨細胞活性和蛋白質表現的影響， 按照上文指示，以培養基、DMSO、BMP2、KXl-141、KX2_328 或KX1-329處理成骨細胞。判定在細胞溶胞產物中的蛋白 質濃度（微克/10微升）（圖53)。值得注意的是，當以〇5μΜ 和2·5μΜ投與時，ΚΧ1·141增加了蛋白質濃度，但當以 I 12.5^Μ和20μΜ投與時，卻降低了在細胞溶胞產物中的蛋 白質》辰度。此外’當以0 · 06 μΜ和〇 · 3 μΜ投與時，KX 1 _3 29 增加了蛋白質濃度，但當以1·5μΜ和7·5μΜ投與時，卻降 低了蛋白質濃度。 實施例1 8 :化合物對肥胖的影響 下列的實例解釋了本發明化合物可用來治療肥胖。使 用先前描述的方法（Minet-Ringuet等人；2〇〇6
Psychopharmacology，已經線上發表，以引用方式納入本 327 200817327
文中）來測試化合物。將30隻一開始重175_2〇〇克的雄性 Sprague-Dawley大鼠飼養在有人工12:12_小時亮暗週期（在 08:00開始亮），以及24±1。〇的室溫和55±5%之溼度的個別 樹脂玻璃（Plexiglas)籠子中。食物和飲水可隨時自由取用。 所有大鼠均餵食中等脂肪的膳食（可代謝能量175〇千焦耳 /克），其包括140克/公斤全牛奶蛋白、538 1克/公斤玉米 殿粉、87.6克/公斤嚴糖和137克/公斤大豆油，並替該膳 食補充礦物質和維生素（礦物鹽35克/公斤' 維生素1〇克〆 公斤、纖維素5G克/公斤和膽汁素2·3克/公斤）。該食物， "14-L ’類似普通的人類飲食(i 4%蛋白質、3 (%脂質和54% 碳水化合物）’在實驗室中以散劑形式製備。 除了對照組溶液之外，測試數個劑量的本發明化合物： 0·01、ο·1、0·5和2毫克/公斤。將化合物溶解於水中，然 :、内入膳艮中。在適應期間記錄基本食物攝取，並用以判 疋納入食物中之本發明化合物的每曰用量。在實驗室中將 化合物與食物混合。在適應實驗室狀況—週之後，將大鼠 :成相R體重的5組（每組n=6)，並接受在其食物中的本 發明化^物6 錄體重三次。在研究結束時藉著 ，剖測量體組成，並將主要器官和組織秤重。簡言之，藉 2腔内注射過量的麻醉劑（戊巴比妥納Μ冑克/公斤）將 度麻醉，並使血液抗凝（_單位肝素/⑽克體重）。 :者切開腔靜脈和腹部主動脈將牠們放也(避免在組織中 ’然後移出並秤重主要新鮮器官(肝臟、脾臟、腎臟 和騰臟）及組織（腎臟周圍和肩狎骨棕色脂肪組織、副筆的、 328 200817327 腹膜後的、内臟的和皮下的白色脂肪組織（WATs)，以及限 於肌肉和骨骼的屠體）。本發明之化合物可降低動物的體 重，表示該化合物可用在個體中治療肥胖。 貫施例1 9 ·化合物對在3 T3 -L1脂肪細胞中，胰島素·引起 之GLUT4移位的影響 下列的實例解釋了本發明化合物可用來治療糖尿病。 使用先前描述的方法（Nakashima等人；2000, J. Biol. Chem.， 275, 12889-12895)來測試化合物。將對照組IgG或本發明 之化合物注射到在蓋玻片上經過分化之3T3 -L1脂肪細胞 的核内。為了檢測，將榖胱甘肽^轉移酶融合蛋白分別與 5宅克/¾升綿羊lgG共同注射。在染色之前，先容許細胞 恢復1小時。使細胞在不含血清的培養基中挨餓2小時， 以胰島素（0·5ηΜ或17nM)刺激或沒有2〇分鐘，然後固定 之。 使用兔子多株抗-GLUT4(F349)(1微克/毫升）進行免疫 柒色。就漿膜-相關之GLUT4染色的存在，評估每個螢光 素異硫氰酸鹽-陽性的顯微注射細胞。以免疫前的綿羊 注射對照組細胞，然後以與實驗注射之細胞相同的方式處 理。藉著免疫螢光GLUT4染色定量，胰島素導致GLUT4 增加移位至漿膜。將細胞與作為對照組之ρΐ3Κ抑制劑 (wortmannin)—起培養，其阻斷基本和胰島素_引起的 GLUT4移位。本發明之化合物可刺激胰島素_引起的glut4 移位，代表投與本發明之化合物，可抑制激酶活性，例如 329 200817327 PTEN功能，結果增加了細胞内磷脂醯肌醇3,4,5-三磷酸的 含量，其刺激GLUT4移位。 貫施例20 :化合物對視網膜血管新生的影響 下列的實例解釋了本發明之化合物可用來治療眼睛疾 病，例如黃斑變性、視網膜病和黃斑水腫。使用如先前描 述之視網膜血管新生的模式（Aiell〇等人；1995，Pr〇c. N川. 〆 Aead· Sei·’ 92, 10457-10461)，判定化合物對視網膜血管新 生的影響。簡言之，從出生後第7天（p7)到pi2，使C57B1/6j 老鼠連同照顧的母鼠一起暴露在75%〇2下。在pi2，將老 叭达回室内空氣下。在pi2時進行眼内注射，而有時如下 述在P14進行。在P17，藉著心臟灌注在磷酸緩衝之生理 尺中的4/〇仲甲酸，犧牲老鼠，並摘出眼睛，在石蟻包 埋之4，先固定在4°C之4%仲甲醛中過夜。 列在所有的程序中均以三溴乙醇深度麻醉老鼠。打開瞼 (,衣（例如使用11號手術刀片），並使眼睛凸出。藉著先在後 Ethic〇nTG140.8 if it ^ A ^ 〇 使用32_號Hamilton針頭和注射筒，將以Alc〇n平衡鹽溶 稀釋的本發明化合物通過現有的進入位置遞送。然後使 眼睛復位，並使眼險接近覆蓋角膜…天後經由：緣的 先河無操作之切口，進行重複注射。在右眼注射等量的生 理鹽水作為對照組。 勺從視神經頭開始，獲得超過50個連續的6_微米石蠟 包埋之軸向切片。在以過碘酸/Schiff試劑和蘇木素染色 330 200817327 (Pierce 等人；1995，Pr〇c· Natl. Acad· Sci· USA，92，905- 909，Smith 等人；1994, Invest 〇phthal vis，Sci，35，ι〇ι· 111)之後，評估跨距300微米，相等長度，各分開3〇微米 的10個完整切片。從評估中排除顯示有視網膜剝離或眼 内炎的眼睛。藉著完全遮蔽草案，計算每個切片中所有在 内界膜之前的視網膜血管細胞核的數目。所有1 〇個經計 數切片的平均值產生每個眼睛每個6_微米切片的平均新血 管細胞核。在正常、無操作動物中觀察到在内界膜之前沒 有血苔細胞核（Smith 等人；1994，Invest· Ophthal· Vis. Sci·， 3 5，1 0 1 - 1 1 1 )。與在生理鹽水對照組中的眼睛相比較，在以 本發明之化合物處理的眼睛中，觀察到降低的血管新生。 貫施例2 1 ··確認調節與中風有關之激酶信號級聯的化合物 已經發展出許多中風的動物模式，並定出特徵，參見 例如 Andaluz 專人，Neurosurg· Clin. North Am” 第 13 冊：385-393(2002) ; Ashwal，S·和 W.J· Pearce·，Curr· Opin. Pediatr.，第 13 冊：506-516(2001) ; De Lecinana 等人，
Cerebrovasc.Dis·，第 11 冊（附錄 ^:20-30 (20(^): Ginsberg 和 Busto，Stroke，第 20 冊：1627-1642 (1989) ; Lin 等人，J. Neurosci. Methods，第 123 冊：89-97 (2003); Macrae，Ι·Μ·，Br· J· Clin· Pharmacol·，第 34 冊：302-308( 1992); McAuley，M.A” Cerebrovasc. Brain Metab. Rev·，第 7 冊··153_180(1995); Megyesi，等人，Neurosurgery，第 46 冊：448-460(2000);
Stefanovich，V·(編輯），Stroke: animal models. Pergamon 331 200817327
Press，〇xf〇rd(1983);以及 Traystman，R.J·，ILAR J. 44:85. 95 (2003);均全部以引用方式納入本文中。關於集中性（中 風）和全面性（心跳停止）大腦缺血之動物模式的回顧，參見 例如 Traystman，ILAR J” 第 44(2)冊：85-95(2003)和 Carmichael, NeuroRx®： The Journal of the American Society for Expermental NeuroTherapeutics，第 2 冊：3% 409(2005，均全部以引用方式納入本文中）。
使用任何此項技術認可的中風模式，確認調節中風時 細胞死亡的化合物。在本文描述的研究中，使用經由内頸 動脈的中腦動脈（MCA)之動脈内縫線阻塞，稱為MCa〇的 程序，作為+風時細胞死亡的模式。在對照組和試驗組的 大鼠中，橫切外頸動脈，綁住總頸動脈，然後使用外頸動 脈作為使縫線通過内頸動脈的路徑，缝線停留在前和中腦 動脈的接合點。欲降低蜘蛛膜下出血和過早再灌注，最好 以聚石夕氧塗覆該缝線。使用缝線阻塞MCA，持續例如6〇、 90或120分鐘，並永久阻塞mca。
在試驗組中，在以缝線阻塞MCA 的 m心刖、朗間和之後 口種了間’對大氣投與本發明之化合物。將化合物對試 k、且的與在對照組中觀察到的影響相比較，例如， 藉著測量在每個MAC。組中細胞死亡的程度。通常，在對 照組中’細胞死亡的模式跟隨著從在紋狀體巾 塞’到在紋狀體下方背側皮質中之延遲梗塞的進行。:文狀 體大多數壞死，卄说、*欢4 + ^ ^ 、’ 、Χ生。比較在試驗組和對照組中的 、、、田卜死亡模式’確認化合物調節中風時的細胞死亡。 332 200817327 K化例2 2 ·確咸調節與動脈粥樣硬化有關之激酶信號級聯 的化合物 已經發展出許多動脈粥樣硬化的動物模式，並定出特 徵關於動脈粥樣硬化、再狹窄和血管内移植研究的動物 模式，餐見例如Narayanaswamy等人，JVIR，第1 1(1)冊：5-17(2000)，全部以引用方式納入本文中。在適當的動物模 式中’使用高脂質/高膽固醇（HFHC)膳食誘導動脈粥樣硬 化。受試動物為含有膽固醇酯轉移酶的動物，如兔子或豬。 例如，使用補充脂質的市售食物，產生HFHC膳食。膽固 醇攝取是膳食的0·5_2·0%。試驗組的動物，如兔子或豬， 接又本♦明之化合物。將受試化合物的影響與在未經處理 對照組動物中之動脈粥樣硬化的影響作比較。比較的影響 包括，例如斑塊形成的程度、在每組動物中觀察到心肌梗 塞的數目及/或頻率，以及在冠狀組織中顯示繼發於心肌梗 塞之組織傷害的程度。 使用各種動物模式，如大鼠和老鼠，研究心肌梗塞。 大夕數的心肌梗塞起因於先前存在冠狀動脈之動脈粥樣硬 化斑的急性棱向阻塞，在動物模式中藉著結紮在例如大鼠 和老鼠中的左冠狀動脈來模仿它。心肌梗塞引起心室結構 的全面性改變，稱為心室重塑的過程。梗塞的心臟逐漸擴 大，並加速心室功能障礙的惡化，最後導致心衰竭。 在試驗和對照組動物，例如老鼠或大鼠中，藉著結紮 左前降冠狀動脈，誘發心肌梗塞。使受到影響的心臟組織 與本發明之化合物接觸，例如在誘導局部缺血之後藉著腹 333 200817327 1 LP拉射。在手術後24小時判定高解析磁共振造影 (刪)、乾重測量、梗塞大小、心臟體積和風險區。在手 術後各個時間‘點，衫接受注射本發明化合物之大鼠的存 活率和〜電圖。比較受試化合物與對照組大鼠的其他影 響°，如’使用心電圖定出在左心室幾何學和功能上改變 的特铽’以便比較舒張末期内徑、相對的壁厚度和縮窄分 率的百分比。在切下的心臟中，計算梗塞的大小，並以左 心室表面積的百分比來表示。 實施例23 :確認調節與神經病性疼痛有關之激酶信號級聯 的化合物 已經發展出許多神經病性疼痛，如慢性神經病性疼痛 的動物模式，並疋出特徵，參見例如Bennett & xie，？&丨^，第 33 冊，87-107(1988); Seltzer 等人，pain，第 43 冊，205· 18(1990) , Kim & Chung，Pain，第 50 冊，355-63 (1992); Malmberg & Basbaum，Pain，第 76 冊，215-22 (1998) ; Sung 等人，Neurosci Lett·，第 246 冊，1 17-9 (1998) ; Lee 等人， Neuroreport，第 11 冊，657-61(2000) ,· Decosterd & Woolf， Pain，弟 87 冊，149-58(2000) ; Vadakkan 等人，J Pain,第 6冊，747-56(2005)，均全部以引用方式納入本文中。關於 用在神經病性疼痛上之動物模式的回顧，參見例如Eat〇n，j. Rehabilitation Research and Development,第 40 冊（附錄 4) : 41-54(2003)，將其内容全部以引用方式納入本文中。 使用任何神經病性疼痛技術認可的模式，確認調節神 334 200817327 經病性疼痛的化合物。例如，神經病性疼痛的模 及傷害坐骨神經’雖•然使用該方法導致傷害改變。例如了 坐骨神經因部分狹窄、完全橫切、冷束神經，以及對神妹 的代谢、化學或免疫損傷而受傷。已經顯示有這些類型： 經傷害的動物，發展出異常的疼痛錢，類似神經病性疼 1患者所報告的那些。在本文描述的研究中，使試驗和對 照組個體，如老鼠的坐骨神經受傷。在試驗組中，宝 坐骨神經之前、_和之後的各個時間點，投與個體鄉 明之化合物。將化合物對試驗組的影響與在對照組中觀R 到的影響做比較，例如物理觀察和檢查個體。例如，在： 鼠中’使用個體的後腳掌來測試對無害刺丨數，例如觸 激的反應，或測試個體對在自然情況下將是無害的刺激， 例々傳遞至腳单之輪射熱的反應。在受試個體中，異常性 疼痛曰通無痛之刺激會誘發疼痛的情況’或痛覺過敏， 對疼痛過度敏感或敏感性的證據，代表受試化合物在受試 個體中不能有效調節神經病性疼痛。 ^ 確…周即與B型肝炎有關之激酶信號級聯的化 合物 已經發展出許多B型肝炎的動物模式，並定出特徵。 關於b型肝炎之動物模式的回顧，參見例如Guha等人，^ —，第33⑺冊：37，編），全部以引用方式納入本 文中。適當的動物模式包括，例如黑獲猩、樹飽(非_舊齒 類的小動物，在系統發f上接近靈長類，參見w等人 335 200817327
Hepat〇l〇gy，第24(1)冊：1_5(1996)，全部以引用方式納入 本文中），以及代理孕母模式，如土撥鼠、鴨子和花栗鼠（參 見，例如 Tennant 和 Gedn，ILAR Journal，第 42(2)冊：队 102(2001)，全部以引用方式納入本文中）。 例如，從樹鼦物種緬甸樹鼢（tupaiabelangeri)的肝臟中 分離原始的肝細胞，並以HBV感染。在活體外的感染導 致在肝細胞中合成病毒DNA和RNA，並將B型肝炎表面 抗原（HBsAg)和B型肝炎e抗原（HBeAg)分泌到培養基中。 亦可在活體内以HBV感染緬甸樹鼢，結果在樹鼢肝臟中 產生病毒的DNA複製和基因表現。類似在人類中的急性、 自限性B型肝炎，從血清中迅速清除HBsAg，接著血清轉 變為抗-HBe和抗-HBs的。 使用任何技術認可的B型肝炎模式，確認調解B型肝 炎的化合物。在本文描述的研究中，以HBV感染試驗和 對…、、’且動物例如黑彳星猩或樹跑。在試驗組中，在接觸hbv 之丽、期間和之後的各種時間點，投與個體本發明之化合 物。將化合物對試驗組的影響與在對照組中觀察到的影響 做比較，例如經由物理觀察並檢查個體，並經由血液或血 清分析，判定在哪個時間點從個體中清除感染。例如，進 行檢測B型肝炎病毒稱為表面抗原及其片段之存在及/或含 篁的測定。或者或另外，分析個體的肝臟。肝功能試驗分 析某些蛋白質和酵素的含量，像是例如天冬胺酸轉胺酶 (AST ’以W的血清穀胺酸草醯乙酸轉胺酶（GSOT))和丙胺 酸胺基轉移酶（ALT，以前的血清穀胺酸·丙酮酸轉胺酶 336 200817327 (SGPT))。 實施例25 :化合物對酪胺酸激酶抑制的影響 下列的實例解釋了本發明之化合物可用來治療自體免 疫疾病。使用先前描述的方法（Goldberg等人；2003, J. Med. Chem·，46，1 337-1349)測試化合物。使用 DELFIA(解離增 強鑭系元素螢光免疫分析）測量激酶活性，其利用銪螯合物 -標示之抗磷酸酪胺酸抗體，來檢測磷酸轉移至隨機之聚合 物，聚-Glu4-Tyrl(PGTYR)。在以中性抗生物素蛋白塗覆 的96-孔白色培養盤上，在激酶測定緩衝溶液（5 0mMHEPES， ρΗ7·0，25mM MgCl2，5mM MnCl2，50mM KC1，ΙΟΟμΜ Na3V04, 0.2%BSA，0.01%CHAPS)中，進行激酶測定。為了 劑量反應（從1微克/毫升之終濃度開始10個劑量，1-3.5 連續稀釋），以測定緩衝溶液預先稀釋最初以1毫克/毫升 溶解於DMSO中的受試試樣（本發明之化合物）。將每等份 25微升的稀釋試樣和每等份25微升的稀釋酵素（lck)(0.8nM 終濃度）連續加至各孔中。從50微升/孔的受質混合物開始 反應，其在激酶緩衝溶液中含有2μΜ ATP(終ATP濃度為 ΙμΜ)和7.2毫微克/微升PGTYR-生物素。將背景孔與緩衝 溶液和受質單獨培養。在室溫下培養45分鐘之後，以300 微升/孔的DELFIΑ沖洗緩衝溶液沖洗測定培養盤三次。在 各孔中加入以DELFIA測定緩衝溶液稀釋的每等份100微 升/孔的銪標示之抗磷酸酪胺酸（Eu3 + -PT66，InM，Wallac CR04-100)，並在室溫下培養30分鐘。當培養完成時，以 337 200817327 3 00微升/孔的沖洗缓衝溶液和100微升/孔的DELFIA沖洗 緩衝溶液沖洗培養盤四次。在各孔中加入增強溶液 (Wallac)。在I5分鐘之後，在LJL’s分析模組上（在360奈 米處激發，在620奈米處發射，EU400分色鏡），在250微 秒的延遲時間之後，測量時間分辨螢光。本發明之化合物 可抑制lck的激酶活性，表示該化合物可用來治療個體之 自體免疫疾病。
雖然已經在本文中敘述和說明了較佳的具體態樣，但 熟諳相關技藝者應瞭解可進行各種不達背本發明之精神的 修改、添加、取代，以及類似者’ i因此認為其均在以下 列申請專利範圍定義的本發明範圍内。 【圖式簡單說明】
圖！敘述發展非-肽蛋白質激酶抑制劑的模件策略。步 騾1利用一或多個第一模件（‘‘M 加 t 11 s )確涊有希望的非-肽支 木。步驟2藉著添加專一性元 ee电 ^ 几件，提高效力。在該步驟期
拉心 W疋抑制劑是否為非-ATP 双肀性的。在步驟3中，佶 ^ ^ 使用組合庫，使％和專一性元 件攻優化’進一步提高效力和選擇性。 專^ 圖 2 k 供（PKA) ·· Mg2ATf> ·加☆ 構的說明。 · X受質抑制劑之X-射線結 圖3提供一般的模件M # 白質激酶催化區結合。 特徵，以便與保留之蛋 圖4顯不领酸，，抑制劑”^ 受質。 和’已顯示其為PKA之 338 200817327 圖5證實在模型Src活性位置中，src受質Ac-Ile-
Tyr_Gly_Glu-Phe_NH2(SEQ ID ΝΟ··1)的結合交互作用。 圖6顯示以奈為基礎之Src抑制劑支架的設計。 圖7顯示以異喹啉和吲哚為基礎之Src抑制劑支架的 設計。 圖8提供用來製備萘抑制劑之化學的實例，在Marsilje 2000中描述。在得自表v的Src抑制劑中，可放下硼酸官 月匕度代替M〗經基基團，使用pd(〇>催化交叉_偶聯方法學， 其中可將二氟磺酸芳基酯（Ishiyaina等人，1997)或芳基鹵 (Ishiyama等人，1995)與市售之二硼的頗哪醇（pinac〇1)酯偶 聯。 圖9顯示可遵循的合成計畫，以便將忌水性h選擇性 元件附接到萘支架。 圖1 〇顯示利用萘化學的成功模式反應，為了以96-孔 培養盤格式合成該支架之組合庫，可將其轉變為固相製 備。已經在以一代表之活性較低的萘區位異構體 (regioisomer)上進行該化學，因為該化合物可按照在 Marsilje 2000中的描述，迅速地從市售之3,5_二羥基_2_萘 曱酸獲得。 圖11提供在組合庫中修飾萘支架的可能策略。 圖12顯示將在反應2中由中間物处(圖1丨）形成的三 氟磺酸官能度轉變為胺（Wolfe等人，1997)，和之後一系列 的醯胺或其他的胺衍生物。 圖13顯示製作一系列在Src和IRTK(胰島素受體蛋白 339 200817327 質酪胺酸激酶）活性位置中出示之硼酸Μι基團之含經基类員 似物的模型。 圖14顯示在LA25和NRK細胞株中測試非-肽Sre抑 制劑間（表V )的結果。 圖15A顯示利用得自腫瘤N015之卵巢腫瘤細胞，
車乂紫杉醇（taxol)和阿黴素（d〇x〇rubicin)(在該腫瘤細胞拉養 物中它們比依托泊苷（etop〇side)&順氯氨鉑更有效）與三種 上文提及之Src抑制劑。圖15B顯示測試Src抑制劑抑制 正常人類纖維母細胞生長的結果。發現沒有抑制正常細胞 生長（亞群集和群集兩者；有些反而觀察到促進生長），代 表這些抑制劑對正常細胞沒有毒性，即使是在更高1〇_仵 的濃度下。圖15C提供src抑制劑T〇M 2_32、t〇m 和KLM 2-31的結構。 固顯示利用得 ▼ /田…ν 一〜7「禾腥濁細胞，比 較紫杉醇和阿歸（在㈣瘤細胞培養物巾它們比依托 &順氯氨麵更有效）與三種Sre抑制劑（得自表处、仏 :和处間）。® 16B顯示測試Sre抑制劑抑制正 =胞生長的結果。發現沒有抑制正常細二 者；有些反而觀察到促進生長），代表這j = 對正常細胞沒有毒性，即使是在更高1G_倍的濃
顯示測試兩種Src如4丨w + 又下圖1 6C 長的結果。圖16::如刺激之咖^ 腎臟細胞生…果:m兩種Src抑制劑抑制正常大鼠 和㈣的二果。圖16E提〜制劑一 340 200817327 圖16為顯示在實驗操作之前，暴露在5百赫茲、1千
赫兹、2 + A 丁赫餘、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音下之後， 南美栗乳（chinchilla)耳蝸中之平均閾變換（dB)的圖。 圖17為顯示在實驗操作後第0天、第1天、第3天和 2〇 夭 ’暴露在5百赫茲頻帶噪音下之後，在南美栗鼠 耳蝸中之平均閾變換（dB)的圖。 ^圖18為顯不在實驗操作後第〇天、第1天、第3天和 弟2〇天，暴露在i千赫茲頻帶噪音下之後，在南美栗鼠 耳蝸中之平均閾變換（dB)的圖。 ^圖19為顯示在實驗操作後第0天、第1天、第3天和 …〇天，暴路在2千赫茲頻帶噪音下之後，在南美栗鼠 耳蝸中之平均閾變換（dB)的圖。 圖20為顯示在實驗操作後第〇天、第i天、天和
第 2 Q 天，暴露在4千赫茲頻帶噪音下之後，在南美栗鼠 耳蜗中之平均閾變換（dB)的圖。 ^圖21為顯示在實驗操作後第〇天、第1天、第3天和 第20天，暴露在8千赫茲頻帶噪音下之後，在南美栗鼠 耳蜗中之平均閾變換（dB)的圖。 ,圖22為顯示在第20天之對照組和治療耳朵中，在南 吴栗鼠耳蝸中之平均閾變換（dB)的圖。 *圖23為顯示在實驗操作之前，暴露在5百赫兹、i千 赫絲、2千赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音下之後， 在南美栗鼠耳蝸中之平均閾變換（dB)的圖。 圖24為顯示在實驗操作後第！天，暴露在5百赫兹、 341 200817327 1千赫茲、2千赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音下之後， 在南美栗鼠耳蝸中之平均閾變換（dB)的圖。 圖25為顯示在實驗操作後第3天，暴露在5百赫茲、 1千赫茲、2千赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音下之後， 在南美栗鼠耳蝸中之平均閾變換（dB)的圖。 圖26為顯示在實驗操作後第7天，暴露在5百赫茲、 1千赫茲、2千赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音下之後， r， 在南美栗鼠耳蝸中之平均閾變換（dB)的圖。 ϊ 圖27為顯示在實驗操作後第2〇天，暴露在5百赫茲、 1千赫茲、2千赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音下之後， 在南美栗鼠耳蝸中之平均閾變換（dB)的圖。 圖28為顯示在第1天、第3天、第7天和第2〇天， 暴露在8千赫茲下之後，在南美栗鼠耳蝸中之平均閾變換 (dB)的圖。 圖29A-F為南美栗鼠耳蝸的SEM影像。圖29A顯示 ( 在暴露在衝擊噪音下之後，網板的分裂（以S標示）。圖29B 顯示在暴露在集中於4千赫茲（〇BN)在1〇5 dB(spL)的八音 尸白頻V喿曰下之耳蜗中的焦點黏連激酶（F AK)染色。圖29C 顯示得自暴露在OBN在ll〇dB下之耳蜗的小病灶，有數 個細胞凋亡核（以箭號標示）。圖29D顯示在圖29C中出示 之病灶的FAK染色。圖29E顯示共焦掃描層，比在圖29D 中的更低數微米’證實病灶完全延伸到膜狀板的下面，並 進入細胞體内（以箭號標示）。圖29F顯示在暴露在 15 5(1丑（8?1〇之衝擊噪音下之耳蝸中的17八〖染色。在本圖 342 200817327 中，許多外側的毛細胞已經失去其膜狀板的完整性。殘餘 的外側毛細胞在膜狀板中顯示出強FAK螢光。 圖3 0Α-Β為暴露在高量噪音下之南美栗鼠耳蜗的共焦 影像。在圖30A中，預先以CH-65處理南美栗鼠之耳蜗。 在圖30B中，南美栗鼠的耳蜗保持不處理。 圖 31A 為顯示 AZ28 和 KX2-391 在 c-Src/NIH-3T3 細 胞中對Src自我磷酸化之影響的圖；圖31B為顯示AZ28 和KX2-391在HT-29細胞中對Src自我磷酸化之影響的圖。 圖 32A 為顯示 AZ28 和 KX2-391 在 c-Src/NIH_3T3 細 胞中對FAK磷酸化之影響的圖；圖32B為顯示AZ28和 KX2_391在HT-29細胞中對FAK磷酸化之影響的圖。 圖 33Α 為顯示 ΑΖ28 和 ΚΧ2-391 在 C-Src/NIH-3T3 細 胞中對She磷酸化之影響的圖；圖33B為顯示AZ28和 KX2-391在HT-29細胞中對She磷酸化之影響的圖。 圖 34 為顯示 AZ28 和 KX2-391 在 c-Src/NIH_3T3 細胞 中對細胞黏附蛋白（paxillin)磷酸化之影響的圖。 圖 35A 為顯不 AZ28 和 KX2-391 在 c-Src/NIH-3T3 細 胞中對卡斯蛋白酶（caspase)-3切開之影響的圖；圖35B為 顯示AZ28和KX2-391在HT_29細胞中對卡斯蛋白酶-3切 開之影響的圖。 圖 36A 為顯示 AZ28 和 KX2-391 在 ^8ιχ/ΝΙΗ-3Τ3 細 胞中對總磷酸酪胺酸含量之影響的圖；圖36β為顯示ΑΖ28 和ΚΧ2-391在ΗΤ-29細胞中對總磷酸酪胺酸含量之影響的 圖0 343 200817327 圖 37 為顯示 AZ28 和 KX2-391 在 c-Src/NIH_3T3 細胞 中，對PDGFR自我磷酸化之影響的圖。 圖 38A 為顯示 AZ28 和 KX2-391 在 c-Src/NIH-3T3 細 胞中對FAK自我磷酸化之影響的圖；圖38B為顯示AZ28 和KX2-391在HT-29細胞中對FAK自我磷酸化之影響的 圖。 圖 39A 為顯示 AZ28 和 KX2-391 在 c-Src/NIH-3T3 細 胞中對EGFR自我磷酸化之影響的圖；圖39B為顯示AZ28 和KX2_391在HT-29細胞中對EGFR自我磷酸化之影響的 圖。 圖40為顯示在實驗操作後第1天，在暴露在5百赫茲、 1千赫茲、2千赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音下之後， 在南美栗鼠耳蝸中之平均閾變換（dB)的柱狀圖。 圖41為顯示在實驗操作後第7天，在暴露在5百赫茲、 1千赫兹、2千赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶噪音下之後， 在南美栗鼠耳蝸中之平均閾變換（dB)的圖。 圖42為顯示在實驗操作後第21天，在暴露在5百赫 炫、1千赫茲、2千赫茲、4千赫茲和8千赫茲頻帶嗓音下 之後’在南美栗鼠耳蝸中之平均閾變換（dB)的圖。 圖43為顯示在以順氣氨鉑處理之後，在暴露在2千赫 炫千赫茲、8千赫茲、工萬2千赫茲、工萬6千赫茲和 萬赫茲頻V哚音下之後，在天竺鼠耳蝸中之閾變換（dB) 的線圖。 圖44為顯示在以順氯氨鉑處理之後，在暴露在2千赫 344 200817327 茲、4千赫茲、8千赫茲、；！萬2千赫茲、1萬6千赫茲和 2萬赫茲頻帶噪音下之後，在κχ1-〇〇仁處理過的天竺鼠耳 蝸中之閾變換（dB)的線圖。 圖45為顯示在以順氣氨鉑處理之後，在暴露在2千赭 茲、4千赫茲、8千赫茲、1萬2千赫茲、1萬6千赫茲和 2萬赫茲頻帶噪音下之後，在κχι_〇〇4_處理過的天竺鼠荨 蝸和未經處理之對照組天竺鼠耳蝸中之平均閾變換“…的 線圖。 圖46為一系列敘述化合物對破骨細胞形成之影響的說 明。 θ 圖47為證實化合物對破骨細胞形成之影響的柱狀圖。 圖4 8為一系列顯示化合物對破骨細胞存活之影響的說 明。 圖49為敘述化合物對破骨細胞存活之影響的柱狀圖。 圖50Α為證實化合物在活體外對骨吸收之影響的柱狀 圖。 圖50Β為顯示化合物對吸收凹窩形成之影響的柱狀 圖。 圖5 1Α為一系列敘述化合物在骨切片上對破骨細胞形 成之影響的說明。 圖5 1B為一系列證實化合物在骨切片上對吸收凹窩形 成之影響的說明。 圖52為顯示化合物對由成骨細胞表現鹼性磷酸酶之影 響的柱狀圖。 345 200817327 圖53為敘述化合物對由成骨細胞表現蛋白質之影響的 柱狀圖。 【主要元件符號說明】 無 / 346 200817327 引用文獻 此處所引用之下列文獻係整個併入本案說明書中做為參考：
Abram9 C.L., Courtneidge, S.A. (2000) Stc fuinily tyrosine kincises cmdgTowth fetetor signcilifig. Experimental Cell Research 254,1-13.
Ajay, Murcko, M. A. (1995； Computational Methods to Predict Binding Free Energy in Ligand-Receptor Complexes, J. Med. Chem., 38, 4953-4967. ( Alberts, B.? Bray, D.5 Lewis, J.5 Raff； M.5 Roberts, K. & Watson, J. D. (1994) Molecular
Biology Of The Cell, 3rd ed.5 Garland Publishing, Inc., New York, pp. 97, 508 & 667. Alfaro-Lopez, J., Yuan, W.5 Phan, B. C.5 Kamath, J., Lou, Q., Lam, K. S., Hruby, V. J. (1998) Discovery of a Novel Series of Potent and Selective Substrate-Based Inhibitors ofp60c-src
Protein Tyrosine Kinase: Conformational and Topographical Constraints in Peptide Design. J. Med. Chem” 41，2252-2260·
Backes, B. J.5 Virgilo, A. A.? Ellman, J. A. (1996) Activation Method to Prepare a Highly Reactive Acylsulfonamide ζ(Safety-CatchLinker for Solid-Phase Synthesis. J. Am. Chem. Soc., 118, 3055-3056.
Baggio, R·，Elbaum，D·，Kanyo, Z· F·，Carroll，P. J·，Cavalli，C·，Ash, D. E.，Christianson，D· W. (1997) Inhibition of Mn2+-Arginase by Borate Leads to the Design of a Transition State Analog Inhibitor, 2(S)-Amino-6~boronohexanoic Acid. J. Am. Chem. Soc., 119, 8107-8108. ( Barnekow, A.; Paul, E.; Schartl, M. (1987) Expression of the c-src protooncogene in human skin tumors. Cancer Res., 47, 235-240.
Benson, W. H., Birge, W. J.5 Dorough, H. W. (1984) Environ. Toxicol. Chem.3 3, 209. Chem. Abstr. 101:124626g.
Bhagwat, S. S., Gude, C. (1994) N-Alkylation of indole ring using Mitsunobu reaction. Tet.
Lett” 35, 1847-1850.
Biscardi, J.S., Tice, D.A.; Parsons, S.J. (1999) c-Src} Receptor Tyrosine Kinases and Human Cancer. Advances in Cancer Research, 61-119.
Biscardi, K.S., Ishizawar, R.C.; Silva, C.M.; Parsons, S. J. (2000) Tyrosine kinase signaling in breast cancer: Epidermal growth factor receptor and c-Src interactions in breast cancer. Breast Cancer Res. 2,203-210. 347 200817327
Bjorge, J. D.5 OOonnor, T. J., Fujita, D. J. (1996) Activation of human pp6(f"src. Biochemistry & Cell Biology，74, 477-484.
Bjelfman, C.; Hedborg, F.; Johansson, I.; Nordenskjold, M.; Pahlman, S. (1990) Expression of the neuronal for ofpp60c-src in neuroblastoma in relation to clinical stage and prognosis. Cancer Res，50, 6908-6914.
Blume-Jensen, P.; Hunter, T. (2001) Oncogenic kinase signaling. Nature 411, 355-365. Bohacek, R. S.? McMartin, C.5 Guida, W. C. (1996) The Art and Practice of Structure-Based Drug Design: A Molecular Modeling Perspective. Medicinal Research Reviews, 16, 3-50 (see p. 43).
Boyd, M. R., Pauli, K. D. (1995) Some practical considerations and applications fo the National Cancer Institute in vitro anticancer drug discovery screen. Drug Development Research, 34, 91-109.
Bridges, A J. (2001) Chemical Inhibitors of Protein Kinases. Chemical Reviews 101(8), 2541-2572.
Brooks, S. P. J. & Storey, K. B. (1992) Bound and Determined: A Computer Program for Making Buffers of Defined Ion Concentrations. Analytical Biochemistry, 201, 119-126.
Brown, D. (1997) Future Pathways for Combinatorial Chemistry. Molecular Diversity, 2(4), 217-222.
Budde, R. J. A., McMurray, J. S.5 Saya, H., Gallick, G. E. & Levin, V. A. (1995) Discovery,
Development, and Testing of Substrates and Inhibitors ofpp60c"src. International Journal of Pharmacognosy, 33,27-34.
Budde, R. J. A., Ke, S., Levin, V. A. {199^) Activity of pp60c-src in 60 different cell lines derivedfrom human tumors. Cancer Biochem. Biophys·，14, 171-175.
Burger，A· M·，Kaur，G·，Alley，M. C·，Supko, J. G·，Malspeis，L·，Grever，M. R. & Sausville，E· A. (1995) Tyrphostin AG17, [(315-DiAerUbutyl-4-hydroxybenzylidene)-malonitrile]i inhibits cell growth by disrupting mitochondria. Cancer Research, 55, 2794-2799.
Burke, T. R.; Lim, B.; Marquez, V. E.; Li, Z-H.; Bolen, J. B.; Stefanova, I.; Horak, I. D. (1993) J, Med. Chem. 36, 425.
Choi, S. (1999), Ph.D. Thesis SUNY at Buffalo, Buffalo, NY.
Cooper, C. M. (1990) Oncogenes. Jones and Bartlett Publishers, Boston, MA. 348 200817327
Coughlin, J. R. (1996) Inorganic borates-chemistry, human exposure, and health and regulatory guidelines. J. Trace Elements in Experimental Medicine, 9, 137-151.
Courtneidge, S. A. (1994) Protein tyrosine kinases, with emphasis on the Src family. Seminars in Cancer Biology, 5, 239-246.
Cox, S., Radzio-Andzelm, E. & Taylor, S. S. (1994) Domain movements in protein kinases. Current Opinion in Structural Biology, 4(6), 893-901.
Culver, B. D.? Hubbard, S. A. (1996) Inorganic boron health effects in humans- and aid to risk assessment and clinical judgment, J. Trace Elements in Experimental Medicine, 9, 175-184. Davis, P. D.; Hill, C. H.; Keech, E.; Lawton, G.; Nixon, J. S.; Sedgwick, A. D.; Wadsworth, J.; Westmacott, D.; Wilkinson, S. E. (1989) FEBS Lett. 259(1)，61.
Davis, P. D.; Elliott, L. H.; Harris, W.; Hill, C. H.; Hurst, S. A.; Keech, E.; Kumar, Μ. K. H.; Lawton, G.; Nixon, J. S.; Wilkinson, S. E. (1992) J. Med. Chem. 35, 994.
Ellis, L.M., Staley, C.A., Liu, W.? Fleming, R.Y., Parikh, N.U., Bucana, C.D., & Gallick, G.E. (1998) Down-regulation of vascular endothelial growth factor in a human colon carcinoma cell line transfected with an antisense expression vector specific for c-src. Journal of Biological Chemistry 273 (2):1052-1057.
Ezquerra, J., Pedregal, C., Lamas, C.5 Barluenga, J.5 Perez, M., Garcia-Martin, M. A., Gonzalez, J. M. (1996) Efficient reagents for the synthesis of 5-, 7-, and 5,7-substituted indoles starting from aromatic amines: scope and limitations. J. Org. Chem., 61, 5804-5812.
Faltynek, C., et al. (1995) Damnacanthal is a highly potent, selective inhibitor ofp56lck tyrosine kinase activity. Biochemistry 34, 12404-12410.
Faltynek, C. R.; Wang, S.; Miller, D.; Mauvais, P.; Gauvin, B.; Reid, J.; Xie, W.; Hoekstra, S.; Juniewicz, P.; Sarup, J.; Lehr, R.; Sawutz, D. G.; Murphy, D. J. (1995) Enzyme Inhibition 9, 111.
Fanning, P.; Bulovas, K.; Saini, K.S.; Libertino, J.A.; Joyce, A.D.; Summerhayes, I.C. (1992)
Elevated expression of ρρ60°~8νο in low grade human bladder carcinoma. Cancer Research, 52, 1457-1462.
Frame, M.C. (2002) Src in cancer: deregulation and consequences for cell behavior.
Biochemica et Biophysica Acta, 1602, 114-130. 349 200817327
Fredenhagen, A.; Mett, H.; Meyer, T.; Buchdunger, E.; Regenass, U.; Roggo, B. E.; Petersen, F.J. (1995) Antibiotics 48, 1355.
Froyen, P. (1997) Tetrahedron Lett. 38(30), 5359.
Fry, D. W.5 Kraker, A. J.5 McMichael, A., Ambroso, L. A., Nelson, J. M. Leopold, W. R., Connors, R. W. & Bridges, A. J. (1994) A Specific Inhibitor of the Epidermal Growth Factor Receptor Tyrosine Kinase. Science, 265, 1093-1095.
Garcia-Echeverria, C.; Traxler, P.; Evans, D.B. (2000) ATP Site-directed competitive and irreversible inhibitors of protein kinases. Med. Res. Rev. 20(1), 28-57.
Glass, D. B., Cheng, H.-C.? Mende-Mueller, L., Reed. J. & Walsh, D. A. (1989) Primary structure determinants essential for potent inhibition of cAMP-dependent protein kinase by inhibitory peptides corresponding to the active portion of the heat-stable inhibitor protein. J. Biol. Chem.，264, 8802-8810.
Groundwater, P. W., Solomons, K. R. H., Drewe, J. A. & Munawar, M. A. (1996) Protein Tyrosine Kinase Inhibitors. Progress in Medicinal Chemistry, 33, 233-329.
Hanks, S. K. & Hunter, T. (1995) Protein kinases. 6. The eukaryotic protein kinase superfamily: Kinase (catalytic) domain structure and classification, FASEB J., 9, 576-596.
Hanke, J. H.? Gardner, J. P.? Dow, R. L., Changelian, P. S., Brissette, W. H., Weringer, E. J., Pollok, B. A. & Connelly, P. A. (1996) Discovery of a novel, potent, and Src family-selective tyrosine kinase inhibitor, J. Biol. Chem., 271, 695-701.
Haskell, M.D.; Slack, J.K.; Parsons, J.; Parsons, S.J. (2001) c-Src tyrosine phosphorylation of epidermal growth factor receptor, p-190 RhoGAP, andfocal adhesion kinase regulates diverse Chemical Reviews 101 ⑻，2425_2440_
Hisano, C.5 Nakano, S., Fujishima, H., Masumoto, N.? Tatsumoto, T.? & Niho. Y. (1997) src oncogene inhibits detachment-induced apoptosis through constitutive activation of pl25FAK in HAG-1 human epithelial cells. Proc. Annu. Meet. Am. Assoc. Cancer Res. 38:A1925.
Hsiao, G. K.5 Hangauer, D. G. (1998) A Facile Synthesis of tert-Butyl 2-[(Benzyloxycarbonyl)amino]-3-(4,4,5，5-tetramethyl-1，3,2-dioxaborolan-2-yl)propionate: An Orthogonally Protected Boronic Acid Analog of Aspartic Acid. Synthesis, 1043-1046.
Hsu, C-Y.5 J.5 Jacoski, M. V.3 Maguire, Μ. P., Spada, A. P. & Zilberstein, A. (1992) Inhibition Kinetics and Selectivity of the Tyrosine Kinase Inhibitor Erbstatin and a Pyridone-based Analog. Biochemical Pharmacology, 43, 241-2477. 350 200817327
Huang, C-K.5 Wu, F-Y., Ai, Y-X. (1995) Polyhydroxylated 3-(N-phenyl) carbamoyl·!-iminochromene derivatives as potent inhibitors of tyrosine kinase p60c-src. Bioorg. & Med. Chem. Lett., 5, 2423-2428.
Hubbard, S. R., Wei, L, Ellis, L, & Hendrickson, W. A. (1994) Crystal structure of the tyrosine kinase domain of the human insulin receptor, Nature, 372, 746-754.
Hubbard, S. R. (1997) Crystal structure of the activated insulin receptor tyrosine kinase in complex with peptide substrate and ATP analog. The EMBO Journal, 16, 5572-5581.
Hughes, R. L.? Smith, I. C., Lawless, E. W. (1967) Production of the Boranes and Related Rearch, Holtzman R.T., Ed., Academic Press, New York, pp. 291-294.
Hunter, T. (1987)^4 thousand and one protein kinases. Cell, 50, 823-829.
Hunter, T. (1994) 1001 protein kinases redvx-towards 2000. Seminars in Cell Biology, 5, 367-376.
Hunter, T. (1998) The Croonian Lecture 1997. The phosphorylation of proteins on tyrosine: its role in cell growth and disease. Philosophical Transactions of the Royal Society of London -Series B: Biological Sciences 353 (1368):583-605.
Hutchins, C., Greer, J. (1991) Comparative modeling of proteins in the design of novel renin inhibitors. Critical Reviews in Biochemistry & Molecular Biology, 26,11 All.
Irby, R.B.; Yeatman, T.J. (2000) Role ofSrc expression and activation in human cancer. Oncogene 19, 5536-5642.
Ishiyama, T., Murata, M., Miyaura, N. (1995) Palladium(0)-catalyzed cross-coupling reaction of alkoxydboron with haloarenes: A direct procedure for arylboronic esters, J. Org. Chem., 60, 7508-7510.
Ishiyama, T.? Itoh, Y.3 Kitano, T., Miyaura, N. (1997) Synthesis of arylboronates via the palladium(O)-catalyzed cross-coupling reaction of tetrafalkoxo)diborons with aryl inflates. Tet. Lett., 38, 3447-3450.
Johnson, T.O., Ermolieff, J.5 Jirousek, M.R. (2002) Protein tyrosine phosphatase IB inhibitors for diabetes. Nat. Rev. Drug Discov., 1(9), 696-709.
Kami, R., Jove R., & Levitzki A. (1999) Inhibition of pp60c-src reduces BcUXexpression and reverses the transformed phenotype of cells overexpressing EGF and HER-2 receptors.
Oncogene 18(33): 4654-4662. 351 200817327
Kelloff, G. J.5 Fay, J. R, Steele, V. E., Lubet, R. A, Boone, C. W.5 Crowell, J. A. (1996) Epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors as potential cancer chemopreventatives. Cancer Epidemiology, Biomarkers & Prevention, 5, 657-666.
Kennedy, B.P. (1999) Role of protein tyrosine phosphatase-IB in diabetes and obesity. Biomedicine & Pharmacotherapy. 53(10), 466-470.
Kettner, C. A., Shenvi, A. B. (1984) Inhibition of the Serine Proteases Leukocyte Elasiase, Pancreatic Elastase, Cathepsin G, and Chymotrypsin by Peptide Boronic Acids. J. Biol. Chem., 259, 15106-15114.
Kim. M. H.5 Lai, J. H. & Hangauer, D. G. (1994) Tetrapeptide tyrosine kinase inhibitors: Enantioselective synthesis of p-hydroxymethyl-L-phenylalanine, incorporation into a tetrapeptide3 and subsequent elaboration into p-(R}S-hydroxyphosphonomethyl)-L-phenylalanine. Int. J. Peptide Protein Res., 44, 457-465.
Kinder，D. H·，Frank，S. K·，Ames，Μ. M. (1990」Jrarfogwes 々par加e
Inhibitors of Dihydrooratase: Preparation of Boronic Acid Transition-State Analogues and a Zinc Chelator Carbamylhomocysteine. J. Med. Chem., 33, 819-823.
Klein, G. (1990) Multistep emancipation of tumors from growth control: can it be curbed in a single step? BioEssays, 12, 347-350.
Knighton, D. R., Cadena, D. L., Zheng, J., Ten Eyck, L. F., Taylor, S. S. & Sowadski, J. M. (1993) Structural features that specify tyrosine activity deducedfrom homology modeling of the epidermal growth factor receptor. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 90(11), 5001-5.
Kolibaba, K. S. & Druker, B. J. (1997) Protein tyrosine kinases and cancer. Biochimica et Biophysica Acta，1333: F217-F248.
Lai, J. H., Marsilje, T. M., Choi, S., Nair, S. A., Hangauer, D. G. (1998) The design, synthesis and activity of pentapeptide pp60c-src inhibitors containing L-phosphotyrosine mimics. J. Peptide Res., 51,271-281.
Lai, J. H., Pham, H. & Hangauer, D. G. (1996) Synthesis of a Vicinal Tricarbonyl Amide Derivative ofL-Phenylalanine. J. Org. Chem., 61, 1872-1874.
Lam, K. S. (1997) Application of Combinatorial Library Methods in Cancer Research an Drug Discovery. Anti-Cancer Drug Design, 12(3), 145-167.
Lawrence, D.S. & Niu, J. (1998) Protein Kinase Inhibitors: The Tyrosine-Specific Protein Kinases. Pharmacol. Ther., 77(2), 81-114. 352 200817327
Levitzki, A. (1996a) Targeting signal transduction for disease therapy. Current Opinion in Cell Biology, 8, 239-244.
Levitzki, A. (1996b) SRC as a target for anti-cancer drugs. Anti-Cancer Drug Design, 11, 175-182.
Levitzki, A.; Gazit, A. (1995) Tyrosine Kinase Inhibition: An Approach to Drug Development Science, 267, 1782-1788.
Li，H·，Liu，T.F.，Lazrak，A·，Peracchia，C” Goldberg，G. S·，Lampe，P. D·，Johnson，R. G. (1996) Properties and regulation of gap junctional hemichannels in the plasma membranes of cultured cells. J. Cell. Biol, 134, 1019-1030.
Loomis, W. D. & Durst, R. W. (1992) Chemistry and biology of boron. BioFactors, 3, 229-239. Lou, Q., Leftwich, Μ. E., McKay, T.? Salmon, S. E., Rychetsky, L. & Lam, K. S. (1997) Potent
Pseudosubstrate^based Peptide Inhibitors for p60c^src Protein Tyrosine Kinase. Cancer Research, 57(10)，1877-1881.
Lou, Q., Leftwich, Μ. E. & Lam, K. S. (1996) Identification of GIYWHHY as a Novel Peptide Substrate for Human p60c-src Protein Tyrosine Kinase. Biorganic & Medicinal Chemistry, 4, 677-682. (SEQ. ID. No. 7).
Luttrell, D.K.; Lee, A.; Lansing, T.J.; Crosby, R.M.; Jung, K.D.; Willard, D.; Luther, M.; Rodriguez, M.; Berman, J.; Gilmer, T.M. (1994) Involvement ofpp60c'src with two major signaling pathways in human breast cancer. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91, 83-87.
Lynch, S.A.; Brugge, J.S.; Fromowitz, F.; Glantz, L.; Wang, P.; Caruso, R.; Viola, M.V. (1993) Increased expression of the src proto-oncogene in hairy cell leukemia and a subgroup of B-cell lymphomas. Leukemia, 7, 1416-1422.
Madhusudan, Trafny, E. A.,, Xuong, N-H, Adams, J. A., Ten Eyck, L. F.5 Taylor, S. S. & Sowadski, J. M. (1994) cAMP-dependentprotein kinase: Crystallographic insights into substrate recognition andphosphotransfer. Protein Science, 3, 176-187.
Mao, W. G., Irby, R., Coppola, D., Fu, L., Turner, J. (1997^) Activation of c-src by receptor tyrosine kinases in human colon cancer cells with high metastatic potential. Oncogene, 15, 3083-3090. 353 200817327
Marsilje, T.H., Milkiewicz, K.L., & Hangauer, D.L. (2000) The design, synthesis and activity of non-ATP competitive inhibitors ofpp60c-src tyrosine kinase 1. Hydroxynaphthalene Derivatives. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, in press.
Martin, G.S. (2001) TIMELINE: The hunting of the Src. Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 2, 467-475. Marx, J. (1990) Oncogenes evoke new cancer therapies. Science, 249, 1376-1378.
National Cancer Institute (1989) Survey of Compounds which have been tested for carcinogenic activity. NIH Publication No. 49-468, p. 16.
Matteson, D. S.? Kandil, S. A.} Soundararajan, R. (1990) Synthesis of Asymmetrically Deuterated Glycerol and Dibenzylglyceraldehyde via Boronic Esters, J. Am. Chem. Soc., 112, 3964-3969.
Matteson, D. S. (1988) Acc. Chem. Res., 21, 294-300.
Matteson, D. S.? Kandil, A. A. (1987) Conversion of a-halo boronic esters to inverted a-(methylsulfonyl)oxy boronic esters. J. Org. Chem., 52, 5121-5124.
Matteson, D. S.? Soloway, A. H.? Tomlinson, D. W.5 Campbell, J. D., Nixon, G. A. (1964) J. Med. Chem., 7, 640.
Mazurenko, N.N.; Kogen, E.A.; Zborovskaya, I.B.; Kisseljov, F.L. (1992) Expression ofρρ60°" src in human small cell and non-small cell lung carcinomas. European J. of Cancer, 28, 372-377. McCluskey, A.; Sim A.T.R.; Sakoff, J.A. (2002a) Serine-Threonine Protein Phosphatase, Inhibitors: Development of Potential Therapeutic Strategies. J. Medicinal Chem. 45(6), 1151-1175.
McCluskey, A.; Sakoff, J.A. (2001) Small molecule inhibitors of serine/threonineprotein phosphatases. Mini-Reviews in Medicinal Chemistry. 1(1), 43-55.
McCluskey, A.; Sim A.T.R.; Sakoff, J.A. (2002b) Serine-threonine protein phosphatase inhibitors: development ofpotential therapeutic strategies. Journal of Medicinal Chemistry. 45 ⑹，1151-75.
Milkiewicz, K.; Marsilje, T.; Woodward Jr3 R.; Bifulco Jr, N.; Hangauer, M.; Hangauer, D.G. (2000) The design, synthesis and activity of non-ATP competitive inhibitors ofpp60c-src tyrosine kinase 2. Hydroxyindole Derivatives. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, in press. Mohammadi, M., Schlessinger, J., Hubbard, S. R. (1996) Structure of the FGF Receptor Tyrosine Kinase Domain Reveals a Novel Autoinhibitory Mechanism. Cell, 86, 577-587. 354 200817327
Mohammadi，M·，McMahon，G·，Li，S.，Tang，C.，Hirth，P.，Yeh，Β. Κ·, Hubbard，S. R·， Schlessinger, J. (1997) Structures of the Tyrosine Kinase Domain of Fibroblast Growth Factor Receptor in Complex with Inhibitors. Science, 276, 955-960.
Moller, N.P.H.; Inversen, L.F.; Andersen, H.S.; McCormack, J.G. (2000) Protein tyrosine phosphatases (PTPs) as drug targets: inhibitors of PTP-1B for treatment of diabetes. Current Opinion in Drug Discovery & Development. 3(5), 527-540.
Morin, C. (1994) The Chemistry of Boron Analogues of Biomolecules. Tetrahedron, 50, 12521-12569.
Murakami, Y.5 Otsuka, K. Wada, Y.? Morikawa, A. (1990) The partial oxidation of ethane over a Β2Ο3ΆΙ2Ο3 catalyst. Bull. Chem. Soc. Jpn.5 63, 340-346.
Nair，S. A·，Kim，Μ. K·，Warren, S. D.，Choi，S·，Songyang，Z·，Cantley，L. C. & Hangauer，D. G.(1995). Identification of Efficient Pentapeptide Substrates for the Tyrosine Kinase pp60°^src' J. Med. Chem.，38, 4276-4283.
Nair, S. A., Lee, B. & Hangauer, D. G. (1995b). Synthesis of Orthogonally Protected L-Homocysteine and L-2-Amino-4-phosphonobutanoic Acid From L-Homoserine. Synthesis, 7, 810-814.
Nielsen, F. H. (1997) Boron in human and animal nutrition. Plant & Soil, 193, 199-208.
Otsuka, K., Uragami, Y., Hatano, M. (1992) The partial oxidation of ethane to acetaldehyde. Catalysis Today, 13, 667-672.
Park, B.K, Kitteringham, N.R., O^eill, P.M. (2001) Metabolism of Fluorine-Containing Drugs. Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol., 41, 443-470.
Parsons, J. T. & Parsons, S. J. (1997) Src family protein tyrosine kinases: cooperating with growth factor and adhesion signaling pathways. Current Opinion in Cell Biology, 9, 187-192. Patrick, D. R. & Heimbrook, D. C. (1996) Protein Kinase Inhibitors For The Treatment of Cancer, Drug Discovery Today, 1, 325-330.
Pavia, M. R., Cohen, M. P.5 Dilley, G. J.? Dubuc, G. R., Durgin, T. L., Forman, F. W.? Hediger, Μ. E., Milot, G.5 Powers, T. S.5 Sucholeiki, 1., Zhou, S. & Hangauer, D. G. (1996) The Design and Synthesis of Substituted Biphenyl Libraries. Biorganic & Medicinal Chemistry, 4, 659-666. Pestell, K.E.; Ducruet, A.P.; Wipf, P.; Lazo? J.S. (2000) Small molecule inhibitors of dual specificity protein phosphatases. Oncogene, 19(56), 6607-6612. 355 200817327
Posner, 1., Engel, M.5 Gazit, A. & Levitzki, A. (1994) Kinetics of Inhibition by Tyrphostins of the Tyrosine Kinase Activity of the Epidermal Growth Factor Receptor and Analysis by a New Computer Program. Molecular Pharmacology, 45, 673-683.
Powis, G. (1991) Signal targets for anticancer drug development TIPS, 188-194.
Ramdas，L.，Obeyesekere，N. U·，McMurray，J. S·，Gallick，G. E.，Seifert，W. E. Jr. & Budde，R· J. (1995)^4 tyrphostin-derived inhibitor of protein tyrosine kinases: isolation and characterization. Archives of Biochemistry & Biophysics, 323, 237-242.
Ramdas, L., McMurray, J. S. & Budde, R. J. (1994) The degree of inhibition ofprotein tyrosine kinase activity by tyrphostin 23 and 25 is related to their instability. Cancer Research, 54, 867-869.
Rewcastle，G. W·，Palmer，B, D.，Thompson，A. M·，Bridges，A. J·，Cody，D· R·，Zhou，H· Fry, D. W.5 McMichael, A. & Denny, W. A. (1996) Tyrosine Kinase Inhibitors. 10. Isomeric 4-[(3-Bromophenyl) amino]pyrido[d]-pyrimidines Are Potent ATP Binding Site Inhibitors of the Tyrosine Kinase Function of the Epidermal Growth Factor Receptor. J. Med. Chem., 39, 1823-1835.
Ripka, W. C. (2000) Protein tyrosine phosphatase inhibition. Annual Reports in Medicinal Chemistry. 35,231-250.
Rudd，C_ E.; Janssen，0·; Prasad, K.V.S.; Raab，M.; da Silva，A·; Telfer, J.C·; Yamamoto, M. (1993) src-relatedprotein tyrosine kinases and their surface receptors. Biochimica et Biophysica Acta, 1155, 239-266.
Saperstein, R.? Vicario, P. P.5 Strout, Η. V.5 Brady, E., Slater, E. E., Greenlee, W. J.5 Ondeyka, D. L.5 Patchett, A. A. & Hangauer, D. G. (1989) Design of a selective insulin receptor tyrosine kinase inhibitor and its effect on glucose uptake and metabolism in intact cells. Biochemistry, 28, 5694-5701.
Sawyer, T.; Boyce, B.; Daigarno, D.; Iulicci, J. (2001) Src inhibitors: genomics to therapeutics. Expert Opin. Investg. Drugs 10(7), 1327-1344.
Sawutz, D. G.; Bode, D. C.; Briggs, G. M.; Reid, J. R.; Canniff, P.; Caldwell, L.; Faltynek, C. R.; Miller, D.; Dunn, J. A.; Garavilla, L.; Guiles, J. W.; Weigelt, C.; Michne, W.; Treasurywala, A. M.; Silver, P. J. (1996) Biochem. Pharmacol. 51, 1631.
Schlessinger, J. (2000) New roles for Src kinases in control of cell survival and angiogenesis. Cell 100,293-296. 356 200817327
Schwartzberg, P. L., et al. (1997) Rescue of osteoclast function by transgenic expression of kinase-deficient Src in src-Λ mutant mice. Genes & Development 11: 2835-2844.
Sedlacek, H.H. (2000) Kinase inhibitors in cancer therapy. Drug, 59(3), 435-476.
Shiraishi，T.，Owada，Μ. K·，Tatsuka，M” Yamashita，T·，Watanabe，K.，Kakunaga，T. (1989) Specific Inhibitors of Tyrosine-specific Protein Kinases: Properties of 4-hydroxycinnamamide derivatives in vitro. Cancer Research, 49? 2374-2378.
Showalter, Η. H. & Kraker, A. J. (1997) Small molecule inhibitors of the platelet-derived growth factor receptors the fibroblast growth factor receptor, and src family tyrosine kinases. Pharmacology & Therapeutics，76, 55-71.
Sicheri, F., Moarefi, I. & Kuriyan, J. (1997) Crystal structure of the Src family tyrosine kinase Hck Nature, 385, 602-609.
Skordalakes，E·，Tyrell，R., Elgendy, S·，Goodwin，C. A.，Green，D·，Dodson，G·，Scully，M. F·， Freyssinet, J-M. H., Kakkar, V. V.5 Deadman, J. J. (1997) Crystallographic Structures of Human OrThrombin Complexed to Peptide Boronic Acids Lacking a Positive Charge at Pj. Evidence of Novel Interactions. J. Am. Chem. Soc., 119, 9935-9936.
Snyder，H· R., Kuck，J· A” Johnson，J. R. (1938) J. Am. Chem. Soc” 60, 105.
Soloway，A. H·，Whitman，B·，Messer，J. R· (1962) J. Med. Pharm. Chem.，7, 640.
Soloway, A. H.? Whitman, B.? Messer, J. R. (1960) J. Pharmacology and Experimental Therapeutics, 129, 310-314.
Soloway, A. H. (1958) Science, 128, 1572.
Songyang，Z，Blechner，S·，Hoagland，N” Hoekstra，M. F.，Piwnica-Worms，H. & Cantley，L. C. (1994) Use of an oriented peptide library to determine the optimal substrates ofprotein kinases. Current Biology, 4, 973-982.
Songyang, Z.，Carraway III，K. L.，Eck，M. J.，Harrison，S. C” Feldman，R. A.，Mohammadl，M” Schlessinger，J.，Hubbard，S. R.，Smith，D. P.，Eng. C·，Lorenzo, J. J·，Ponder, B. A. J.，Mayer，B. J. & Cantley, L. C. (1995) Protein tyrosine kinases andSH2 domains have overlapping specificities. Nature, 373, 536-539.
Sridhar, R.; Hanson-Painton, 0.; Cooper, D.R. (2000) Protein kinases as therapeutic targets. Pharmaceutical Research 17(11), 1345-1353.
Staley, C. A.; Parikh, N. U.; Gallick, G. E. (1997) Cell Growth & Differentiation 8(3), 269. 357 200817327
Stanwell, C., Burke, T. R. & Yuspa, S. H. (1995) Erbstatin Analogue Methyl 2,5-dihydrocinnamate Cross-links Proteins and is Cytotoxic to Normal and Neoplastic Epithelial Cells by a Mechanism Independent of Tyrosine Kinase Inhibition. Cancer Research, 55, 4950-4956.
Stanwell, C., Ye, B. & Burke, T. R. (1996) Cell Protein Cross-linking by Erbstatin and Related Compounds. Biochemical Pharmacology, 52, 475-480.
Susa, M., Teti, A. (2000) Tyrosine kinase Src inhibitors: Potential Therapeutic Applications. Drug News Perspect. 13(3), 169-175.
Susa, M., Missbach, M.; Green, J. (2000) Src inhibitors: drugs for the treatment of osteoporosis, cancer of both? TIPS 21, 489-495.
Takeshima, E.; Hamaguchi, M.; Watanbe, T.; Akiyama, S.; Kataoka, M.; Ohnishi, Y.; Xiao, H.; Hagai, Y.5 Taka, H. {\99\) Aberrant elevation of tyrosine-specific phosphorylation in human gastric cancer cells. Japan J. Cancer Res., 82, 1428-1435.
Talamonti, M.S.; Roh, M.S.; Curley, S.A.; Gallick, G.E. (1993) Increase in activity and level of pp60c"src in progressive stages of human colorectal cancer. J. of Clinical Investigation, 91, 53-60.
Taniyama, K., Fujiwara, H., Kuno, T., Saito, N., Shuntoh, H., Sakaue, M. (1989) Acute and subacute toxicity of 10B-paraboronophenylalanine. Pigment Cell Research, 2, 291-296.
Taylor, S. J., Shalloway, D. (1996) Src and the control of cell division. Bioessays, 18, 9-11. Taylor, S. S.5 Knighton, D. R.? Zheng, J.5 Sowadski, J. M., Gibbs, C. S. & Zoller, M. J. (1993) A template for the protein kinase family. Trends in Biochemical Sciences, 18(3), 84-9.
Taylor, S.S., Radzio-Andzelm, E. (1994) Three protein kinase structures define a common motif. Structure, 2, 345-355.
Thakkar, K.? Geahlen, R. L.? Cushman, M. (1993) Synthesis andprotein-tyrosine kinase inhibitory activity of polyhydroxylated stilbene analogs of piceatannol. J. Med. Chem., 36, 2950-2955.
Weinberg, R. A. (1989) Oncogenes, antioncogenes, and the molecular basis of multistep carcinogenesis. Cancer Research, 49, 3713-3721. 358 200817327
Wolfe, J. P.3 Ahman, J.5 Sadighi, J. P.5 Singer, R. A., Buchwald, S. L. (1997)^4« ammonia equivalent for the palladium-catalyzed animation of aryl halides and triflates. Tet. Lett., 38, 6367-6370.
Wong, T.W. & Goldberg, A. R. (1984) Kinetics and mechanism of angiotensin phosphorylation by the transforming gene product of Rous Sarcoma Virus. J. Biol. Chem., 259, 3127-3131.
Xu, W.5 Harrison, S. C. & Eck? M. J. (1997) Three-dimensional structure of the tyrosine kinase c-Src. Nature, 385, 595-602.
Yamaguchi, H, & Hendrickson, W.A. (1996) Structural basis for activation of human lymphocyte kinase Lck upon tyrosine phosphorylation. Nature, 384, 484-489.
Yamamoto, T. (1993) Molecular Basis of Cancer: Oncogenes and Tumor Suppresor Genes. Microbiol. Immunol. 37, 11-22.
Zhang, Z.Y. (2002a) Protein tyrosine phosphatases: structure and function, substrate specificity, and inhibitor development. Annual Review of Pharmacology and Toxicology, 42, 209-234.
Zhang, Z.Y. (2002b) Protein tyrosine phosphatases: prospects for therapeutics. Current Opinion in Chemical Biology. 5(4), 416-423.
Zhanpeisov, N.U., Otsuka, K. (1992) Cluster quantum chemical study of the mechanism of selective oxidation of ethane to acetaldehyde on boron-phosphorous mixed oxide catalysts. React. Kinet. Catal. Lett., 48, 301-308.
Zheng, J.，Knighton, D. R” Ten Eyck，L. R·，Karlsson，R_，Xuong，N-H” Taylor，S. S. & Sowadski, J. M. (1993) Crystal structure of the catalytic subunit of cAMP-dependent protein kinase complexed with MgATP and peptide inhibitor. Biochemistry, 32, 2154-61.
Zhong-Yin, Shang (2002) Protein tyrosine phosphatases: structure andfunction, substrate specificity, and inhibitor development. Annual Review of Pharmacology and Toxicology 42, 209-234. 359

Claims (1)

  1. 200817327 十、申請專利範圍： 1. 一種根據式v之化合物， R.
    (式V )，或其鹽、溶劑合 物、水合物或前藥，其中Ri、R2、R3、R4和R5是相同或 不同的，並獨立地為 Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、OC(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Rc、NRaP(0)0RbRe、NRaP(0)0Rb0Re、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、P、鹵素、芳基、苄 基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和分支、未分支 或環狀的烷基； 116和117是相同或不同的，並獨立地為H、分支或未分 支的，或（CH2)rZ，其中Z為芳基、雜芳基、聯芳基、環 烷基或雜環，或R6和R7 —起形成雜環； t 為 0、1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9 或 10; Ra、Rb和Rc是相同或不同的，並獨立地為Η、芳基、 雜芳基、聯芳基、雜聯芳基或分支、未分支或環狀的烷基； Ρ 為 S03H、0S03H、0Ρ03Η2、0Ρ03Η2、0-低碳數（Ci、 360 200817327 c2、c3、c4、（：5或 C6)烷基-K、O-C(O)-低碳數（CV c2、c3、 C4、c5 或 C6)烧基 _L、NHM& 碳數（C^、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-M或〇-芳基-Q，其中低碳數、C2、C3、C4、C5 或c 6)烧基為直鍵或分支的烧基； κ 為 c(o)nh2、cooh、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、 NH2 NHR19、NR19R2。、S02R21、糖苦、低碳數C2、C3、
    C4、c5、〇6烷氧基或 L· 為芳基、oh、c(o)nh2、cooh、so3h、oso3h、po3h2、 20、、糖苷、低碳數
    〇p〇3H2、NH2、nhr19、NR1QR c]、c2、c3、c4、c5、c6 烷氧基或 ， M 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、Ρ03Η2、 20、S02R2:、糖苦、低碳數 〇P〇3H2、NH2、nhr19、nr19r Cl 、 C2 、 c3 、 c4 、 c5 Q為芳基、OH、c< 〇P〇3H2、NH2、NHR 、c5、c6烷氧基或
    OH、C(0)NH2、COOH、S03H、〇S03H、Ρ03Η2、 、nhr19、NR19R2G、s〇2R 糖苷、低碳數 、糖苷、低碳數 匕2、c3、c4、c5、〇6烷氧基或 Ri9、R2G和R21獨立地為（^、c
    基’或R!9和Rm與附接之氮原子一 其中任何 Ri、R2、R3、h 、c3、c4、c5 或 c6 烷 摩千一起形成五員環； 4、R5、R6 和 R7，以及 R ，其限制條件為Ri、R2、 R4、R 和Re為經取代或未經取代的；其 R4、R5和R6中至少有一個是p。 ，以及Ra、R 361 200817327 2·如申請專利範圍第1項之化合物，其中Ri、r2、r3、 R4和Rs中至少有一個選自鹵素、硼酸、羥基、膦酸、胺 基％酸、脈、緩酸、駿、醯胺和經甲基膦酸。 3.如申請專利範圍第1-2項中任一項之化合物，其中 Ri、R2、R3、R4和r5中至少有一個是鹵素。 4·如申請專利範圍第1-2項中任一項之化合物，其中
    R6和R7中至少有一個是 ， 其中*R8為附接點，並為（CH2)X，其中X為〇、1、2、 3、4、5、6、7、8、9或10、CH2CHOH、CH(CH3)(R-異構 體）或 ch(ch3)(s-異構體）；且 r9、R1Q、Rn、r12 和 r13 分 別是相同或不同的，並獨立地為Η、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 ( NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Re 、 NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)〇Rb〇Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(〇)2〇Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、 鹵素、p’、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，或 分支、環狀或未分支的烷基， P’為 S03H、0S03H、0Ρ03Η2、0Ρ03Η2、0-低碳數（Cl、 C2、C3、c4、c5 或 c6)烷基-K’、o-c(o)_低碳數、c2、 c3、c4、c5 或 c6)烷基-L，、NH-低碳數、C2、C3、c4、 362 200817327 C5或C6)烷基-Μ，或0·芳基-Q’，進一步其中低碳數（CV C2、 c3、c4、〇5或c6)烧基為直鏈或分支的烧基； κ，為 c(o)nh2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、 nh2、nhr22、NR22R23、so2R24、糖苷、低碳數 q、c2、c3、 C4、C5、C6燒氧基或 ; [’為芳基、011、（：（0)>^2、(：0011、80311、080311、？03112、 0Ρ03Η2、NH2、NHR22、nr22r23、S02R24、糖苷、低碳數
    Cl 、 C2 、 c3 、 c4 M為芳基、 Ρ03Η2、ΟΡΟ H j x 2 低碳數q、e2、 Q為芳基、 po3h2 ^ 〇p〇3h 、C5、C6烧氧基或 OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、 、nh2、nhr22、NR22R23、s〇2r24、糖芽、 c3、C4、c5、c6 燒氧基或 H G ; 〇H、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、 、NH2、NHR22、NR22R23、S〇2R24、糖普、 低碳數 C1r n ^ r 1 C2、C3、C4、C5、06烷氧基或 H 0 ; R22、R23和R24獨立地為C|、Γ 、r ^ 基，或 R 夺 n 1 C2、C3、C4、05或（：6烷 …23與附接之敗原子一起形成五員環； 芳基’、、雜:基、R ^是相”不同的’並獨立地為Η、 的烷基； 5"方i雜聯方基、分支、環狀或未分支 其中任何R、R Ώ ^ 取 代的；且 9 10 11 12和R13是經取代或未經 363 200817327 其限制條件為若Ri、R2、R3、R4或R5中之一不是P， 則R9、R10、Rn、R12和R13中至少有一個是P’。 5.—種式VI之化合物，
    5 (式VI )，或其鹽、溶劑 合物、水合物或前藥，其中Ri、R2、R3、R4、R5、R6和R7 分別是相同或不同的，並獨立地為H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)2ORb 、 NRaP(0)0Rb0Rc 、 NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、 P、鹵素、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和 分支、環狀或未分支的烷基； Ra、Rb和Re是相同或不同的，並獨立地為Η、芳基、 雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和分支、環狀或未分支的烷基； Ρ 為 S03H、0S03H、0Ρ03Η2、0Ρ03Η2、0-低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-K、O-C(O)-低碳數（Cl、c2、c3、 c4、c5 或 C6)烧基 _L、碳數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 C6)烧基-M或O -芳基-Q，進一步其中低碳數d、C2、C3、 364 200817327 c4、C5或c6)烷基為直鏈或分支的烷基； κ 為 c(o)nh2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、 NH2、NHR19、nr19r2。、S02R21、糠苷、低碳數 c2、c3、 Kx C4、C5、（：6烷氧基或H 〇 ; 二為芳基、〇11、(：（0”112、（：0011、803仏080311、？03112、 '2^2 1
    0P03H2、NH，、NHR19、NR19R2〇、S02R21、糖苷、低碳數 C1、c2、c3、c4、C5、（：6烷氧基或 ， M***、0H、C(0)NH2、C00H、S03H、0S03H、P03H2、 opo3h2、nh2、nhr19、NR19R2。、S02R21、糖苷、低碳數 πχ C1、c2、c3、c4、c5、c6 烷氧基或 Η ο ; 卩為芳基、011、(：(0)>1112、<：0011、80311、080311、？03112、 0Ρ03Η2、ΝΗ2、NHR19、NR19R20、S02R21、糖苷、低碳數 Cl、c2、C3、c4、c5、c6 烷氧基或 ^ ϋ ; R19、R2〇 和 R21 獨立地為 Cl、c2、c3、c4、c5 或 c6 烷 基’或R19和與附接之氮原子一起形成五員環；且 X 為 1、2、3、4、5、6、7、8、9 或 10 ; 其限制條件為Ri、R2、、I和中至少 有一個是P。 6· —種式v化合物的用途，其係用於製造用以在個體 中預防或治療聽力喪失之藥劑： 365 200817327
    (式v )，或其鹽、溶劑合 物、水合物或前藥，其中Ri、R2、R3、R4和R5是相同或 不同的，並獨立地為 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Rc、NRaP(0)0RbRe、NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、P、鹵素、芳基、苄 基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和分支、未分支 或環狀的烧基； R6和R7是相同或不同的，並獨立地為Η、分支或未分 支的，或（CH2)t-Z，其中Ζ為芳基、雜芳基、聯芳基、環 烷基或雜環，或R6和R7 —起形成雜環； t為 0、1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9 或 10; Ra、Rb和Re是相同或不同的，並獨立地為Η、芳基、 雜芳基、聯芳基、雜聯芳基或分支、未分支或環狀的烧基； Ρ 為 S03H、0S03H、0Ρ03Η2、0Ρ03Η2、0-低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基·Κ、O-C(O)-低碳數（Cl、c2、c3、 C4、C5 或 C6)烷基-L、NH-低碳數（Cl、C2、C3、C4、C5 或 366 200817327 c6)烷基-μ或〇-芳基-Q，進一步其中低碳數（q、c2、C3、 c4、C5或c6)烷基為直鏈或分支的烷基； κ 為 c(o)nh2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、 NH2、nhr19、nr19r20、so2R21、糖苷、低碳數 q、c2、c3、 c4、c5、〇6烷氧基或 [為芳基、〇仏（：（〇州112、0：〇〇11、8〇3仏〇8〇311、？〇3112、 〇p〇3H2、nh2、NHRi9、Ν“、s〇2R2i、糖苷、低碳數 κι
    C1、c2、c3、c4、c5、（：6烷氧基或 MS’S、〇H、C(〇)NH2、C〇〇H、S〇3H、〇s〇3H、p〇3H2、 opo3h2、nh2、NHRi9、Ν“、s〇2R2i、糖苷、低碳數 Η rr q、c2、C3、c4、c5、〇6烷氧基或 ， Q 為芳基、OH、c(o)nh2、COOH、S03H' 0S03H、Ρ03Η2、 OP〇3H2 NH2、NHR19、NR19R2。、s〇2R21、糖苦、低碳數 C! c2' C3、c4、c5、c6 烷氧基或 基 r19、R2。和 R21 獨立地為 Ci、c2、c3、c4、ce 6烷 或Rl9和R2。與附接之氮原子一起形成五員環； '、中任何 Rl、R2、R3、R4、R5、R6 和 R7，以及 Ra、Rb 和為經取代或未經取代的；其限制條件為m R4、R5和R6中至少有一個是P。 種式w化合物的用途，其係用於製造用以在個體 中預防或治療骨質疏鬆症之藥劑： 367 200817327
    1 (式vn)，或其鹽、溶劑合物、 水合物或前藥，其中R!、R2、R3、R4和R5是相同或不同 的，並獨立地為 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、C(0)SRa、 OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、NRaC(0)Rb、 f NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)ORb、NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、 NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、NRaP(0)0Rb0Rc、 NRaP(0)0RbRe、NRaP(0)0Rb0Re、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、 S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、 B(OH)2、P、鹵素、芳基、苄基、雜芳基、聯芳基、雜聯 芳基、雜環，和分支、未分支或環狀的烷基； 116和117是相同或不同的，並獨立地為H、分支或未分 支的，或（CH2)t-Z，其中Z為芳基、雜芳基、聯芳基、環 U 烷基或雜環，或r6和r7 —起形成雜環； t為 0、1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9 或 10; Ra、Rb和Re是相同或不同的，並獨立地為Η、芳基、 雜芳基、聯芳基、雜聯芳基或分支、未分支或環狀的烷基； Ρ 為 S03H、0S03H、0Ρ03Η2、0Ρ03Η2、0-低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-K、O-C(O)-低碳數（Cl、c2、c3、 c4、c5 或 c6)烧基-L、NH-4& 碳數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-M或O-芳基-Q，進一步其中低碳數（Ci、C2、C3、 C4、C5或C6)烧基為直鍵或分支的烧基； 368 200817327 κ 為 c(o)nh2、cooh、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2 nh2、nhr19、nr19r2。、so2r21、糖苷、低碳數 Cr c2、c3
    C4、c5、〇6烷氧基或 L&，S、0H、C(0)NH2、C00H、S03H、0S03H、P03H2、 〇p〇3H2、nh2、nhr19、nr19r20、so2r21、糖苷、低碳數
    C!、c2、c3、C4、C5、（：6烷氧基或 9 % ; 1^為芳基、〇11、(：（0)>1112、(：0011、80311、080311、？03112、 〇P〇3H2、NH2、nhr19、nr19r20、so2r21、糖苷、低碳數 q、c2' c3、C4、C5、（：6烷氧基或 1 ; Q 為芳基、oh、c(o)nh2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、 0P03H2、NH2、NHR19、NR19R2()、s〇2R21、糖苷、低碳數 、C2、c3、c4、c5、c6 烷氧基或 Η a ; R19、R2〇 和 R21 獨立地為 Cl、c2、c3、、c5 或 c6 烷 基或R19和R2〇與附接之氮原子一起形成五員環； 其中任何 Rl、R2、R3、R4、R5、R6 和 R7，以及 Ra、Rb 和為經取代或未經取代的。 8·種式ν化合物的用途，其係用於製造用以在個體 預防或治療增殖性病症之藥劑： 369 200817327
    Rl (式v )，或其鹽、溶劑合 物、水合物或前藥，其中I、r2、r3、r4和r5是相同或 不同的，並獨立地為 H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、C(0)0Ra、 C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、NRaRb、 NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、NRaC(0)SRb、 NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、NRaS(0)20Rb、 NRaP(0)0Rb0Rc、NRaP(0)0RbRc、NRaP(0)ORbORc、SRa、 S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、S(0)20Ra、S(0)NRaRb、 S(0)2NRaRb、P(0)ORaORb、B(OH)2、P、鹵素、芳基、苄 基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和分支、未分支 或環狀的烷基； 化6和化7是相同或不同的，並獨立地為H、分支或未分 支的，或（CH2)t_Z，其中Z為芳基、雜芳基、聯芳基、環 烷基或雜環，或R6和R7 —起形成雜環； t 為 0、1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9 或 10; Ra、Rb和Re是相同或不同的，並獨立地為Η、芳基、 雜芳基、聯芳基、雜聯芳基或分支、未分支或環狀的烷基； Ρ 為 S03H、0S03H、0Ρ03Η2、0Ρ03Η2、0-低碳數（Cl、 C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-K、O-C(O)-低碳數（Cl、c2、c3、 c4、c5 或 C6);^ 基 _L、NH_>f 氏碳數（(^、C2、C3、C4、C5 或 370 200817327 C6)烧基-Μ或〇-芳基_q，進一步其中低碳數（Cl、c2、C3、 C4、C5或C6)烷基為直鏈或分支的烷基； κ 為 c(o)nh2、cooh、so3h、oso3h、Ρ03Η2、0Ρ03Η2、 NH2、NHR19、NR19R20、so2R21、糖苷、低碳數 c2、c3、
    C4、C5、c6烷氧基或 L 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、0S03H、Ρ03Η2、 〇p〇3H2、nh2、NHR19、nr19r20、so2R21、糖苷、低碳數
    C!、C2、c3、c4、c5、c6 烷氧基或 ο ; m4*S、〇h、c(o)nh2、cooh、so3h、oso3h、po3h2、 〇p〇3h2、Nh2、NHRi9、NRi9r2。、^R21、糖苷、低碳數 Cl、c2、c3、c4、c5、（：6院氧基或 ' ; y 為芳基、oh、c(o)nh2、cooh、so3h、oso3h、po3h2、 〇p〇3h2、Nh2、NHRi9、NRi9r2。、s〇2r2i、糖普低碳數 c r ΗΝχ c2、C3、c4、c5、〇:6烷氧基或 Η ο ; 基 。19 R2G和R21獨立地為' c2、c3、c4、c5或C6烷 或和RZG與附接之氮原子—起形成五員環； /、中任何 Ri、R2、R3、R4、R5、和 R?，以及 Ra、Rb 和Rc為經取代或未經取代的；其限制條件為m R4、R5和R6中至少有一個是p。 9.-種式VI化合物的用途’其係用於製造用以在個體 中預防或治療聽力喪失之藥劑： 371 200817327 r2
    /NH (〇H2)x ^ (式VI)，或其鹽、溶劑
    合物、水合物或前藥，其中R〗、R2、R3、R4、R5、R6和R7 分別是相同或不同的，並獨立地為H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Rc 、 NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra > S(0)2Ra、S(0)0Ra > S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、 P、鹵素、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和 分支、環狀或未分支的烧基； Ra、Rb和Rc是相同或不同的，並獨立地為Η、芳基、 雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和分支、環狀或未分支的烷基； Ρ 為 S03H、0S03H、0Ρ03Η2、0Ρ03Η2、0-低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-K、O-C(O)-低碳數（Cl、c2、c3、 C4、C5 或 C6)烧基-L、NKM& 碳數（C^、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-M或0_芳基-Q，進一步其中低碳數（Ci、C2、C3、 c4、c5或c6)烷基為直鏈或分支的烷基； K 為 C(0)NH2、COOH、so3h、oso3h、Ρ03Η2、0Ρ03Η2、 NH2、NHR19、nr19r20、so2r21、糖苷、低碳數 q、c2、c3、 372 200817327
    C4、c5、c6烷氧基或 , 1為芳基、011、(：（0)>1112、（：0011、80311、08031^、？03112、 〇P〇3H2、NH2、NHR19、NR19R20、S02R21、糖苷、低碳數
    C!、c2、c3、c4、c5、〇6烷氧基或 ， 1^為芳基、011、（：（0)1<[112、(：0011、80311、080311、？03112、 0Ρ03Η2、NH2、NHR19、nr19r20、so2r21、糖苷、低碳數
    C1、c2、c3、c4、c5、c6 烷氧基或 Q 為芳基、OH、c(o)nh2、COOH、so3h、oso3h、Ρ03Η2、 OP〇3H2、Nh2、NHRi9、NR19R2。、S〇2R2i、糠苷、低碳數 "ft C2、c3、c4、c5、c6^氧基或 基 、R2G 和 R21 獨立地為 c】、C2、C3、c4、c5 或 c6 烷 或Rl9和Rm與附接之氮原子一起形成五員環；且 x 為 1 、 2 、 3 、 4 、 5 、 6 、 7 、 8 、 9 或 10 ; 有 其限制條件為Rl、R2、R3、R4、R5、1和r7中至少 個是p。 10·-種式vin化合物的用途，其係用於製造用以在個體 負防或治療骨質疏鬆症之藥劑： 373 200817327 %
    ^ (式vm)，或其鹽、溶劑 合物、水合物或前藥；其中Ri、r2、r3、r4、r5、r6和r7 是相同或不同的，並獨立地為H、C(0)Ra、C(0)NRaRb、 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、OC(0)ORa、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Rc 、 NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、 P、鹵素、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和 分支、環狀或未分支的烷基； Ra、Rb和Re是相同或不同的，並獨立地為Η、芳基、 雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和分支、環狀或未分支的烷基； Ρ 為 S03H、0S03H、0Ρ03Η2、0Ρ03Η2、0-低碳數（Ci、 C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-K、O-C(O)-低碳數（Cl、c2、c3、 C4、C5 或 C6)烧基-L、NIM 氏碳數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-M或0_芳基-Q，進一步其中低碳數（Ci、C2、C3、 c4、c5或c6)烷基為直鏈或分支的烷基； K 為 C(0)NH2、COOH、so3h、oso3h、po3h2、opo3h2、 NH2、NHR19、nr19r20、so2r21、糖苷、低碳數 q、c2、c3、 374 200817327 C4、C5、C6烷氧基或 ； L 為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、〇S03H、Ρ03Η2、 〇p〇3h2、nh2、NHRi9、NRi9R2。、s〇2R2i、糖 *、低碳數
    C1、C2、C3、c4、c5、c6 烷氧基或 Μ $
    為芳基、OH、C(0)NH2、COOH、S03H、〇S03H、Ρ03Η2、 〇p〇3h2、而2、NHRi9、NRi9R2。、s〇>、糖苦、低碳數 ^、^、^、（^、^、（^燒氧基或^; Q 為芳基、OH、C(0)NH2、CO〇H、S〇3h、〇s〇3h、p〇3h2、 op〇3H2、nh2、nhr19、nr19r2〇、s〇2R2i、糖苦、低碳數 C1 Λ c2、c3、c4、c5、c6 烷氧基或 R19、‘和r2丨獨立地為C丨' c2、c3、c4、c5或匕烷 基，或‘和r2。與附接之氮原子一起形成五員環；且 X 為 1、2、3、4、5、6、7、8、9 或 1〇。 11.一種式Μ化合物的用途，其係用於製造用以在個體 中預防或治療增殖性病症之藥劑：
    Mi s(CH2)x (式Μ)，或其鹽、溶劑 、R3、R4、r5、r6 和 r7 C(〇)Ra、C(0)NRaRb、 合物、水合物或前藥；其中、& 是相同或不同的，並獨立地為Η、 375 200817327 C(0)0Ra、C(0)SRa、OH、ORa、0C(0)Ra、0C(0)0Ra、NH2、 NRaRb、NRaC(0)Rb、NRaC(0)NRbRc、NRaC(0)0Rb、 NRaC(0)SRb、NRaS(0)Rb、NRaS(0)2Rb、NRaS(0)0Rb、 NRaS(0)20Rb 、 NRaP(0)0Rb0Rc 、 NRaP(0)0RbRc 、 NRaP(0)0Rb0Rc、SRa、S(0)Ra、S(0)2Ra、S(0)0Ra、 S(0)20Ra、S(0)NRaRb、S(0)2NRaRb、P(0)0Ra0Rb、B(OH)2、 P、鹵素、芳基、雜芳基、聯芳基、雜聯芳基、雜環，和 分支、環狀或未分支的烧基； Ra、Rb和Re是相同或不同的，並獨立地為Η、芳基、 雜芳基、聯芳基、雜聯芳基和分支、環狀或未分支的烷基； Ρ 為 S03H、0S03H、0Ρ03Η2、0Ρ03Η2、Ο-低碳數（Cl、 C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-K、O-C(O)-低碳數（Cr c2、c3、 C4、C5 或 C6)烧基 _L、NHd 氏碳數（Ci、C2、C3、C4、C5 或 C6)烷基-M或0_芳基_Q，其中低碳數、C2、C3、C4、C5 或C6)烷基為直鏈或分支的烷基； K 為 C(0)NH2、COOH、so3h、oso3h、Ρ03Η2、0Ρ03Η2、 NH2、NHR19、NR19R20、S02R21、糖苷、低碳數 c!、c2、c3、
    c4、c5、。6烷氧基或 ; ls，*、oh、c(o)nh2、cooh、so3h、oso3h、po3h2、 opo3h2、nh2、nhr19、nr19r20、so2r21、糖苷、低碳數
    c】、c2、c3、c4、c5、c6 烷氧基或 ， ]^為芳基、011、(：（0)1^112、(：0011、80311、080311、？03112、 0Ρ03Η2、NH2、NHR19、NR19R20、S02R21、糖苷、低碳數 376 200817327
    q、c2、c3、c4、c5、06烷氧基或 Η ； 卩為芳基、011、(：(0)>1112、（：0011、80311、080311、？03112、 0Ρ03Η2、ΝΗ2、NHR19、NR19R20、S02R21、糖苷、低碳數
    c!、c2、c3、c4、c5、匕烷氧基或 … ， R19、R2G 和 R21 獨立地為 Ci、c2、c3、c4、c5 或 c6 烷 基，或R19和R2G與附接之氮原子一起形成五員環；且 X 為 1、2、3、4、5、6、7、8、9 或 10。 12.如申請專利範圍第6-11項中任一項之用途，其中 該化合物抑制了蛋白質激酶信號路徑的一或多個組份。 1 3 .如申請專利範圍第6-1 1項中任一項之化合物，其 中經由口服、非經腸、皮下、靜脈内、肌肉内、腹腔内、 藉著鼻内滴注、藉著腔内或膀胱内滴注、局部、動脈内、 病灶内、藉著計量幫浦，或藉著施用在黏膜上，實行該化 合物的投藥。 十一、圖式： 如次頁 377
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Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1147214B1 (en) * 1999-01-13 2011-01-05 The Research Foundation Of State University Of New York A novel method for designing protein kinase inhibitors
US7005445B2 (en) * 2001-10-22 2006-02-28 The Research Foundation Of State University Of New York Protein kinase and phosphatase inhibitors and methods for designing them
EP1444204A4 (en) 2001-10-22 2009-11-04 Univ New York State Res Found INHIBITORS OF PROTEIN KINASES AND PROTEINS PHOSPHATASES, METHODS OF IDENTIFICATION AND METHODS OF USE THEREOF
US7838542B2 (en) * 2006-06-29 2010-11-23 Kinex Pharmaceuticals, Llc Bicyclic compositions and methods for modulating a kinase cascade
JO3598B1 (ar) 2006-10-10 2020-07-05 Infinity Discovery Inc الاحماض والاسترات البورونية كمثبطات اميد هيدروليز الحامض الدهني
EP2083073B1 (en) * 2006-10-11 2013-09-04 Oriental Yeast Co., Ltd. Reagent containing fused protein of soluble rankl with epitope tag
CA2721060A1 (en) 2008-04-09 2009-10-15 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of fatty acid amide hydrolase
US9005577B2 (en) * 2008-04-30 2015-04-14 Siemens Medical Solutions Usa, Inc. Substrate based PET imaging agents
WO2010118159A1 (en) 2009-04-07 2010-10-14 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of fatty acid amide hydrolase
EP2416660B1 (en) 2009-04-07 2014-07-02 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of fatty acid amide hydrolase
US20120022078A1 (en) * 2009-04-09 2012-01-26 Msd K.K. Aryl indole derivatives
US20120028990A1 (en) * 2009-04-16 2012-02-02 Msd K.K 3 aryl or heteroaryl-substituted indole derivative
US20120035155A1 (en) * 2009-04-28 2012-02-09 Msd K.K. Indole-2-carboxamide deivative
CA2788587C (en) 2010-02-03 2020-03-10 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Fatty acid amide hydrolase inhibitors
CN103561573A (zh) * 2011-04-26 2014-02-05 印第安纳大学研究与技术公司 酪氨酸磷酸酶及其在调节参与结核分枝杆菌之病理学的酶的活性中的用途
US9428478B2 (en) 2011-06-13 2016-08-30 Emory University Piperazine derivatives, compositions, and uses related thereto
CN103130705B (zh) * 2011-11-23 2016-04-20 中国医学科学院医药生物技术研究所 苯并五元不饱和杂环类化合物或其药用盐及其制备方法、药物组合物及其应用
KR101716099B1 (ko) * 2013-09-12 2017-03-13 에프. 호프만-라 로슈 아게 인돌-카복스아마이드 유도체
US10167257B2 (en) * 2014-04-04 2019-01-01 Iomet Pharma Ltd. Indole derivatives for use in medicine
KR101551313B1 (ko) * 2014-07-28 2015-09-09 충남대학교산학협력단 신규한 인덴 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 망막 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
GB201516411D0 (en) 2015-09-16 2015-10-28 Iomet Pharma Ltd Pharmaceutical compound
WO2017156179A1 (en) * 2016-03-09 2017-09-14 Raze Therapeutics, Inc. 3-phosphoglycerate dehydrogenase inhibitors and uses thereof
ES2965264T3 (es) 2016-03-09 2024-04-11 Raze Therapeutics Inc Inhibidores de la 3-fosfoglicerato deshidrogenasa y sus usos
EP3444031B1 (en) * 2016-04-15 2022-11-30 CE Pharm Co.,Ltd Heterocyclic carboxylic acid amide ligand and applications thereof in copper catalyzed coupling reaction of aryl halogeno substitute
CN109311450A (zh) * 2016-05-19 2019-02-05 电缆塔制造有限公司 挡风玻璃雨刮器连接器
US10858319B2 (en) 2016-10-03 2020-12-08 Iomet Pharma Ltd. Indole derivatives for use in medicine
CN111094568A (zh) 2017-08-14 2020-05-01 Epizyme股份有限公司 通过抑制setd2治疗癌症的方法
JP2021536428A (ja) * 2018-08-14 2021-12-27 エピザイム，インコーポレイティド 置換インドール及びその使用方法
KR20220070491A (ko) * 2019-09-26 2022-05-31 더 글로벌 얼라이언스 포 티비 드러그 디벨롭먼트, 잉크. 미코박테리아 감염의 치료를 위한 아자인돌 카복사미드 화합물

Family Cites Families (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2405622A1 (de) * 1974-02-06 1975-08-14 Boehringer Mannheim Gmbh Neue phenoxyalkylcarbonsaeurederivate und verfahren zur herstellung derselben
CA1261835A (en) 1984-08-20 1989-09-26 Masaaki Toda (fused) benz(thio)amides
JPH01132579A (ja) 1987-11-19 1989-05-25 Ss Pharmaceut Co Ltd インドール誘導体
GB8827189D0 (en) 1988-11-21 1988-12-29 Fujisawa Pharmaceutical Co 2(1h)-quinolinone compounds processes for preparation thereof & pharmaceutical composition comprising same
WO1991009849A1 (en) 1989-12-28 1991-07-11 The Upjohn Company Diaromatic substituted anti-aids compounds
US5552534A (en) * 1991-08-22 1996-09-03 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Non-Peptide peptidomimetics
DE4307883A1 (en) 1992-03-12 1993-09-23 Westarp Martin Egon Dr Med Use of anti-retroviral substances - to treat motor-neuronal diseases
US5705585A (en) * 1993-06-30 1998-01-06 Arqule, Inc. Aminimide-containing molecules and materials as molecular recognition agents
CZ283965B6 (cs) * 1992-08-06 1998-07-15 Warner-Lambert Company 2-thioindolové, 2-indolinthionové a polysulfidové sloučeniny, 2-selenoindolové, 2-indolinselenonové a selenidové sloučeniny a farmaceutické prostředky na jejich bázi
US6011175A (en) * 1993-05-18 2000-01-04 University Of Pittsburgh Inhibition of farnesyltransferase
US5532167A (en) * 1994-01-07 1996-07-02 Beth Israel Hospital Substrate specificity of protein kinases
US5712171A (en) * 1995-01-20 1998-01-27 Arqule, Inc. Method of generating a plurality of chemical compounds in a spatially arranged array
FR2733995B1 (fr) 1995-05-09 1997-07-25 Inst Nat Sante Rech Med Inhibiteurs de l'inactivation de neuropeptides endogenes notamment la cholecystokinine, leurs procedes de preparation leur utilisation comme medicaments et procede de criblage de medicaments
WO1996039385A1 (en) 1995-06-06 1996-12-12 Pfizer Inc. Substituted n-(indole-2-carbonyl-) amides and derivatives as glycogen phosphorylase inhibitors
EP0832065B1 (en) 1995-06-06 2001-10-10 Pfizer Inc. Substituted n-(indole-2-carbonyl)-glycinamides and derivatives as glycogen phosphorylase inhibitors
US5648378A (en) * 1995-06-07 1997-07-15 Research Corporation Technologies, Inc. 2-iminochromene derivatives as inhibitors of protein tyrosine kinase
DE69634900T2 (de) * 1995-09-11 2006-05-18 Osteoarthritis Sciences, Inc., Cambridge Proteintyrosine-kinaseinhibitoren zur behandlung der osteoarthritis
WO1997029091A1 (en) 1996-02-09 1997-08-14 Phytera Symbion Aps Balanol analogues
AU4155697A (en) 1996-08-23 1998-03-06 Sugen, Inc. Indolinone combinatorial libraries and related products and methods for the treatment of disease
WO1998008818A1 (en) 1996-08-26 1998-03-05 Genetics Institute, Inc. Inhibitors of phospholipase enzymes
US5952322A (en) 1996-12-05 1999-09-14 Pfizer Inc. Method of reducing tissue damage associated with non-cardiac ischemia using glycogen phosphorylase inhibitors
AU6229698A (en) 1997-02-21 1998-09-09 Takeda Chemical Industries Ltd. Fused ring compounds, process for producing the same and use thereof
US6420338B1 (en) * 1997-06-13 2002-07-16 New York University Medical Center Inhibition of the Src kinase family pathway as a method of treating HBV infection and hepatocellular carcinoma
GB9718913D0 (en) 1997-09-05 1997-11-12 Glaxo Group Ltd Substituted oxindole derivatives
CN1282319A (zh) * 1997-10-09 2001-01-31 小野药品工业株式会社 氨基丁酸衍生物
WO1999048868A2 (en) 1998-03-26 1999-09-30 Sugen, Inc. Heterocyclic classes of compounds for the modulating tyrosine protein kinase
ATE293102T1 (de) 1998-04-23 2005-04-15 Takeda Pharmaceutical Naphthalene derivate ,ihre herstellung und verwendung
JP2002515488A (ja) 1998-05-15 2002-05-28 ギルフォード ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド カルボキサミド化合物、組成物、及びｐａｒｐ活性の抑制方法
US7070936B1 (en) * 1999-01-13 2006-07-04 The Research Foundation Of State University Of New York Method for designing protein kinase inhibitors
EP1147214B1 (en) 1999-01-13 2011-01-05 The Research Foundation Of State University Of New York A novel method for designing protein kinase inhibitors
AU775625B2 (en) 1999-08-27 2004-08-05 Sugen, Inc. Phosphate mimics and methods of treatment using phosphatase inhibitors
US6921763B2 (en) 1999-09-17 2005-07-26 Abbott Laboratories Pyrazolopyrimidines as therapeutic agents
DE19963178A1 (de) 1999-12-27 2001-07-05 Gruenenthal Gmbh Substituierte Indol-Mannichbasen
HN2001000008A (es) 2000-01-21 2003-12-11 Inc Agouron Pharmaceuticals Compuesto de amida y composiciones farmaceuticas para inhibir proteinquinasas, y su modo de empleo
AU2868601A (en) 2000-01-27 2001-08-07 Ribotargets Ltd Biaryl compounds, their preparation and their use in therapy
CN1329390C (zh) 2000-02-15 2007-08-01 苏根公司 吡咯取代的2－二氢吲哚酮蛋白激酶抑制剂
KR20030024661A (ko) 2000-04-28 2003-03-26 박스터 헬쓰케어 에스.에이. 2-아실 인돌 유도체 및 항종양제로서의 이의 용도
KR100423899B1 (ko) 2000-05-10 2004-03-24 주식회사 엘지생명과학 세포 증식 억제제로 유용한 1,1-디옥소이소티아졸리딘을갖는 인다졸
US6414013B1 (en) 2000-06-19 2002-07-02 Pharmacia & Upjohn S.P.A. Thiophene compounds, process for preparing the same, and pharmaceutical compositions containing the same background of the invention
DZ3359A1 (fr) 2000-06-26 2002-01-03 Pfizer Prod Inc DÉRIVÉS DE PYRROLO [2,3-d] PYRIMIDINE UTILES COMME AGENTS IMMUNOSUPPRESSEURS
WO2002004459A1 (en) 2000-07-07 2002-01-17 Novo Nordisk A/S Modulators of protein tyrosine phosphatases (ptpases)
MXPA03008143A (es) 2001-03-09 2005-08-16 Johnson & Johnson Compuestos heterociclicos.
KR100429841B1 (ko) 2001-07-19 2004-05-04 삼성전자주식회사 Ｇｒｉｎ 렌즈를 구비하는 광 기록헤드
EP1444204A4 (en) 2001-10-22 2009-11-04 Univ New York State Res Found INHIBITORS OF PROTEIN KINASES AND PROTEINS PHOSPHATASES, METHODS OF IDENTIFICATION AND METHODS OF USE THEREOF
US7005445B2 (en) * 2001-10-22 2006-02-28 The Research Foundation Of State University Of New York Protein kinase and phosphatase inhibitors and methods for designing them
KR20050044660A (ko) * 2001-12-04 2005-05-12 에프. 호프만-라 로슈 아게 치환된 2-아미노-사이클로알칸카복스아마이드 및 시스테인프로테아제 저해제로서의 이의 용도
WO2003086385A1 (en) * 2002-04-10 2003-10-23 Smithkline Beecham Corporation Derivatives of 1-(oxoaminoacetyl) pentylcarbamate as cathepsin k inhibitors for the treatment of bone loss
AU2003234464B2 (en) 2002-05-03 2009-06-04 Exelixis, Inc. Protein kinase modulators and methods of use
CN100335208C (zh) * 2002-08-08 2007-09-05 联合工程公司 用于铸件热处理和除砂的方法和装置
AU2003258491A1 (en) * 2002-09-05 2004-03-29 Neurosearch A/S Amide derivatives and their use as chloride channel blockers
MXPA05003632A (es) * 2002-10-11 2005-06-03 Astrazeneca Ab Derivados de piperidina 1, 4-disustituidos y su uso como inhibidores de 11-beta-hidroesteroide deshidrogenasa humana de tipo 1 (11betahsd1).
EP1575918A2 (en) 2002-12-19 2005-09-21 Neurogen Corporation Substituted biaryl-4-carboxylic acid arylamide analogues as capsaicin receptor modulators
US7338950B2 (en) 2003-10-07 2008-03-04 Renovis, Inc. Amide compounds as ion channel ligands and uses thereof
US7141596B2 (en) * 2003-10-08 2006-11-28 Incyte Corporation Inhibitors of proteins that bind phosphorylated molecules
US20060122197A1 (en) * 2004-08-10 2006-06-08 Wenqing Yao Amido compounds and their use as pharmaceuticals
FR2878849B1 (fr) * 2004-12-06 2008-09-12 Aventis Pharma Sa Indoles substitues, compositions les contenant, procede de fabrication et utilisation
CA2620818A1 (en) 2005-09-02 2007-03-08 Astellas Pharma Inc. Amide derivatives as rock inhibitors
MX2008009956A (es) * 2006-02-02 2008-12-12 Syntarga Bv Analogos de cc-1065 solubles en agua y sus conjugados.
US7838542B2 (en) * 2006-06-29 2010-11-23 Kinex Pharmaceuticals, Llc Bicyclic compositions and methods for modulating a kinase cascade

Also Published As

Publication number Publication date
JP2009542679A (ja) 2009-12-03
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CA2656165A1 (en) 2008-01-03

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