TW200529827A - Processes for the preparation of pyrazolo [1,5-a]-1,3,5-triazines and intermediates thereof - Google Patents

Description

200529827 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係㈣可大規模製備心并[1,5^,3,5-三嘴的 新穎方法。 ^ 【先前技術】 促皮質素釋放因子（CRF)為促皮f素釋放荷爾蒙⑴妨) 的同義詞，是一種可協調身體對壓力之整體反應之Μ個胺 基酸的肽。作為CRF受體（例如CRh和CRW的激動劑， CRF普遍已知為主要之生理學的促泌素，其可控制傳達内 刀/必壓力反應之丘腦下部垂體_腎上腺（HpA)軸的活性。 CRF對於壓力之自主性和行為上的反應也扮演了—個中心 的角色。CRF在生理水平上的改變已經和各種的病症有相 互關連性，包括抑鬱症和焦慮。 已證明CRF受體的拮抗劑可有效改善動物模型中行為壓 力的反應。已充分確認地是，CRFj體拮抗劑的系統性 投藥會導致齧齒動物抗焦慮和抗抑營的效果。動物模型的 證據也顯不’ CI^拮抗劑可有助於緩和藥物脫瘾的症 狀，壓力誘導的病發作和某些發炎症狀。CRF的作用在阿 兹海默氏病，帕金森氏症，哈丁頓氏舞蹈病，進行性核上 癱瘓，以及側索硬化性肌痿縮症之病原學和病理生理學方 面也已被視為當然者，因其與中樞神經系統之CRF神經元 功此異㊆有關。進食障礙，諸如神經性厭食症，亦與高濃 度CRF有關。 CRF受體雖然廣泛地分佈於中樞神經系統令，但其等亦 97372.doc 200529827 發現存在於包括淋巴腺，血管，胃腸和免疫系統組織的末 稍系統中。因此，咸信CRF拮抗劑對於治療各式各樣中樞 神經系統之外的其他病症也具有潛力。一些和末稍系統之 CRF有關的病症包括例如高血壓，心搏快速，充血性的心 臟哀竭’中風’刺激性的腸併發症，手術後的腸阻塞和結 肪過破性。研究顯示’ CRF!拮抗劑也可用來作為頭髮生 長刺激質。 被嗤并[1，54]-1，3,5-三畊衍生物已被確認為一有效的 CRF!拮抗劑，並且目前正致力於用以治療各式各樣和CRF 有關病症（包括許多上文已提及的病症）之醫療用試劑的研 究。各式各樣吡唑并三啡的CRFi拮抗劑已報導於例如美國

專利第 6，124,289 ; 6，191，131 ; 6,313，124 ; 6,060,478 ; 6，136,809 ;和 6,358,950 號，以及 WO 02/72202 和 WO 98/08847中。 外匕吐并[1，54]-1，3,5-三畊化合物的製法通常涉及一多步 驟的流程，包括兩個成環的反應，以製得雙環核心物。各 式各樣吡唑并[l，5-a]-l，3,5-三啩的合成方法已經在上述參 考資料中有所描述，同樣也已描述於WO 01/23388 ;美國 專利第 4,824,834，3,910,907，5，137,887，4,892,576 和 5，484,760號；歐洲專利594149 ; He等人發表於施 C/^m·，2000，M，449 的文章；Senga 等人發表於 Med. CAem.，1982，25，243 的文章；Bruni 等人發表於 j. Heterocycl. Chem·，1995，32，291 的文章；Kobe 等人發表 於丄//此C/^m·，1974，991的文章；Kobe等人發表於j. 97372.doc 200529827 i/ei· C/zem·，1974，199的文章；Novinson等人發表於/. i/以. C/zem·，1974，691的文章；和Albert等人發表於/. //以. C/iem·，1973，885的文章。成環和其他的反應則描述於 Beyer等人發表於5er·，1960，93，2209的文章和Cusmano等 尺發表於 Gazz· Chim·, Ital·，1951, 82, 3Ί3的艾章。 各種活性的吡唑并[l，5-a]-l，3,5-三畊化合物包括連接該 雙環核心物之第八位置的多取代芳基或雜芳基。第八位置 取代基的導入常常涉及使用芳基或雜芳基乙腈的衍生物。 由對應的鹵甲基化合物和氰化物製備芳基或雜芳基乙腈衍 生物的方法描述於日本專利2001302658 ;中國專利 1088574 ;和 Nishida 等人發表於 ί^ζ·ν·，1988，4(2)，145的文章。其他報導可用來製備芳基 或雜芳基乙腈衍生物之反應的參考資料包括例如Nagel等 人發表於J. C/zem·，1977, β，3626的文章和 Stogryn等 人發表於丄Org· CAem·，1972, 37, 673的文章（芳基溴化物 的正-BuLi的金屬取代反應和與DMF的縮合反應以形成 膝）；Li等人發表於Zeii· 2001，1175的文章（节 基醛行氫硼化鈉還原反應為苄基醇）；J. Org. Chem.，1970, 35，3195，J. C/zem·，1971，3(5，3044，Tetrahedron 1971， 27，5979 (苄基醇和甲磺醯氣與鹼的氯化反應）；丄 Chem. Soc., 1951, 735 2239, J. Am. Chem. Soc., 1953, 75? 2053 (苄基氣轉換為氰化物衍生物）；和 of Process Research and Chemical Development in the Pharmaceutical Industry，W\\ey，\99系，％ 3 私互。 97372.doc 200529827 有鑑於㉔并[1，5斗1，3,5.三料生物在治療和CRF有 關病症(曰像是焦慮和抑營症)上的重要性，因此其合成的改 良方法疋有而要的。此等改良可包括例如各別反應步驟之 a力的鏡像異構和/或非鏡像異構的選擇性，化學純度增 力產率支曰加，使用較低成本的起始物，使用毒性較低的 起始物，迠置的消耗量較低（例如避免在 的溫度或壓力下進行反應)，合成的步驟數減少 按比例放大的條件。本文討論的方法和中間物有助於滿足 這些需求和其他的需求。 【發明内容】 本發明特別係提供以下式I之吡唑并三畊的 製法和中間物，該式;[化合物為CRF受體的拮抗劑，其可 用來治療和CRF有關的病症，包括焦慮和抑鬱症。 本發明進一步提供芳基和雜芳基乙腈化合物的製法和中 間物，其可作為製備式I之吡唑并三畊的中間 物。 【貫施方式】 本發明尤其為提供製備式I之吡唑并[1,5-4-:1,3,%三啡的

其中： 97372.doc 200529827

Ar為經〇到5個R3取代的苯基或吡啶基； 每一 R1和R2各別為H，（Cl-C8)烷基或（Cl_C6)烷氧基烷基； 每一R3各別為Η，齒素，CN，硝基，（CVC4)烷基，（Ci C4)烧氧基，（C1-C4)鹵烧基或（C^Cd鹵烧氧基；和 每一 RA*RB各別為（C^-C4)烷基。某些具體實施例中， RA和RB其中之一為甲基或兩者皆為甲基。另一些具體實 施例中，Ar可為2_甲基-4-甲氧基苯基，2_氣·5•氟_4_甲氧 基苯基或2-甲基-6-甲氧基吡啶-3 —基。另外其他的具體實 施例中，R1和R2皆為甲氧基乙基，或Ri為HiR2為戊小 基’或R1為Η且R2為丁-2-基。 根據本發明，製備式I化合物的方法包括以下步驟： (a)胺存在下，在足以製得式„化合物的條件下，令式出化

和POX3接觸一段時間，胺較佳為一立體阻礙胺，選 異丙基乙基胺，二乙基苯基胺， 二異丙基苯胺，二乙基苯

月女，一異丙基二異丁基胺，三苄基胺，三苯基胺，三環己 月女，一乙基異丙基胺，其中χ為鹵素，式IHb合物為： 97372.doc •10- 200529827 以及； (b)在足以製得式Ϊ化合物的條件下’令式II化合物和 NHRiR2接觸一段時間。 步驟（a)的反應涉及用衍生自試劑POX3的鹵素部份置換 式III化合物中間物中的羥基部份。POX3試劑的實例包括 POF3，P0C13，POBr3等等。某些具體實施例中，X為C1。 步驟（a)的胺可作為i化反應用的觸媒。適當的的胺通常 為大的三級胺，例如選自二異丙基乙基胺，二乙基苯基 胺，二異丙基苯胺，二乙基苯胺，二異丙基二異丁基胺， 一卞基胺，二本基胺，二己胺，《—乙基異丙基胺。某些 具體貫加例中’ 一異丙基乙基胺被用來作為胺觸媒。胺觸 媒相對POX3的莫耳比可為約1 : i。 某些具體實施例中，步驟（a)的接觸反應係於可作為相 轉和劑之銨鹽的存在下進行。任何的銨鹽都適合。銨鹽的

用T的實例為低於i當量（相對式m化合物）。 步驟（a)的接觸反應可於任何在反應條件 $劑中進杆。玆Μ几C^

至約70°c。 步驟（b)的反應涉及用胺部份 置換式II中間物令的經基部 97372.doc -11 - 200529827 份。任何的一級或二級胺都是適當的，像是化學式為 NHR R2的胺。胺的量相對式II化合物（或式III化合物）為過 里者。一些化學式為NHRiR2的胺可包括例如，

Η 、CH^ jNHj ，或

可使用任何適當的溶劑以進行步驟（b)的反應。根據一 二/、體貝施例步驟（b)的反應係於一有機溶劑中進行。 有機浴劑的一些實例包括甲基三級丁基醚，乙腈，異丙基 乙酸鹽’甲苯和：U氯丁烧。一些具體實施例中，有機溶劑 包含乙腈和甲基三級丁基醚之一或兩者皆包含，像是乙猜 和甲基二級丁基醚的混合物。乙腈相對甲基三級丁基醚的 體積/體積比的實例可為約丨：4。步驟（]3)的反應可於環境 壓力和溫度下進行。溫度的實例為約〇到約5〇它 一些具體實施例中，式Π中間物可於原處反應，並且在 進行步驟（b)的反應之前不需加以分離。 本發明進一步提供第一閉環方法，其中式m化合物為 (c)在足以製得式ΙΠ化合物的條件下，令式IV化合物

R9 W 和（ra)c(or4)接觸一段時間而製得，其中R4為（Ci_c4)烷 基。（RA)C(OR4)的適當用量可為約1當量或1當量以上（相 對式IV化合物）。 97372.doc -12- 200529827 上述第一閉環方法可在有或無觸媒酸或鹼之下進行。該 反應通常於一有機溶劑甲進行。一些適當的有機溶劑包括 乙腈’ 1-甲基-2-吡咯啶酮或四氫呋喃。沒有酸或鹼的情況 下進行該第一閉環反應的適當溫度通常為高溫（例如大於 室溫像是大於約25。〇。高溫的實例範圍為約30至約 100°C，或 50至約 l〇〇°c，或約 75至約 i〇〇°c。 酸可此適合用來催化該第一閉環反應。酸的實例包括 對-甲苯磺酸（pTSA)甲烷磺酸硫酸和乙酸。一些具體實施 例中，對-甲苯磺酸被用來作為一種酸性觸媒。進行該酸 催化反應的適當溫度為約40至約1〇〇。〇，約40至約7〇°C， 或約40至約60°C。 根據一些具體實施例，該第一閉環反應係於丨_甲基吡 咯啶酮和對-甲苯石黃酸的混合物中進行。其他的具體實施 例中，該反應係於乙腈中進行。 其他具體實施例中，試劑（RA)c(〇R4)可以是原乙酸三甲 酯（此處1^和r4皆為甲基）或原乙酸三乙酯。 本發明進一步提供第二閉環反應，其中式iv化合物為 (d)在足以製得式IV化合物的條件下，令式v化合物

Ar

V 和鹼接觸一段時間而製得。鹼可以任何適當的量提供，像 97372.doc -13- 200529827 疋1备i或少於1當量（相對式V化合物）。 任何的驗皆適合用來進行上述第二閉環反應。驗的較佳 實例包括氫氧化物’胺’ ^二氮雙環[4 3斗壬_5_稀和 。米。坐。比較不好的實例包括烧氧化物。_些具體實施例 中’該驗為1，8-二氮雙環[5.4〇]十一碳_7_稀（dbu)。 上述第二閉環反應可於-有機溶劑中進行。適當的有機 溶劑包括乙腈，1-甲基-2”比洛咬_，四氫咬喃，含水的異 丙醇或其混合物。一些具體實施例中，該溶劑包括“甲 基-2-p比洛唆酮或乙腈。 進行該第二閉環反應的適t溫度包括較低的溫度，像是 低於室溫（例如低於25°〇，以及約〇至約抓的溫度範圍。 溫度的實例範圍為約-20至約2(rc，約_1〇至約1(rc，約〇至 約10°C，約10至約20°c，約20至約3(rc，或約30至約 3 5 °C。環境壓力也適用。 本發明進-步提供形成半卡腺的方法，其中式V化合物 為（e)在足以製得該式VI化合物的條件下令式νι化合 物： °

R®

ΟΥ NC

Ar

VI 和半卡腙或其酸加成鹽接觸一段時間而製得，其中y為鹼 金屬或’其中z1為i素且2：2為_驗土金屬。—些具體 實施例中，該半卡腙係以半卡腙氫氣酸鹽的形式提供。半 卡腙可以大於1當量的量提供（相對式…或式νπ化合物）。 97372.doc -14- 200529827 根據上述形成半卡踪方法的一些具體實施 屬，像是K。其他的具體實施例中，Y為作，像f驗金 MgBr。 像疋例如 其他的具體實施例中，上述形成半卡脖 為約i至糊條件下進行，而較佳為約3至約5。=於PH 驟⑷的接觸反應可在像是乙酸，鹽酸，硫酸 酸之酸的存在下進行。—些具體實施财，㈣為乙^ 又一些的具體實施财，上述形成半卡腙的方法可於 性各劑中進彳τ。另外，該水性溶射包括醇， 醇，甲醇，乙醇，丙gj，了 # ，、丙 一 >、 丙知丁醇，異丁醇，三級、丁醇，乙 -一酵或丙二酵。~此沾Θ胁盘》/丨丄 的例中，該水性溶劑包括異 丙醇。 一 上述形成半卡膽方法的適當反應條件包括環境壓力和温 度。，皿度的貫例範圍為約20至約40°C。 、本發明進一步提供芳基加成的方法，其中式VI化合物 為⑴在足以製得該式VI化合物的條件下，以及（三級_ BuO)Y存在下，令式νπ化合物： NC、

Ar

VII 和下式的加成試劑接觸一段時間而製得： R8 人〇Rc 其中： 每R和R各別為（c^c：4)烷基。某些具體實施例中，γ為 97372.doc -15- 200529827 Y為Z42，像是 鹼金屬，像是κ。其他的具體實施例中 例如MgBr 〇 一些的具體實施例中，試判「一 ;釗（二級-BuO)Y的用量可超過 加成試劑。例如相對於式vii彳卜人 飞σ物的量，（三級-BuO)Y的 用量可為約1到約2當量。 加成試劑可以是乙酸乙酯（例如 根據某些具體實施例 RB為曱基且Rc為乙基）。 上述的芳基加成方法可在環境溫度或高溫下進行，像是 高於25°C的溫度。高溫的實例範圍為約25至約6〇，或約3〇 至約50°C。環境壓力是適當的。

Rb

本發明進一步提供式π或式ΠΙ化合物·· x OH

其中：

Ar為2-甲基-4-甲氧基苯基，2-氯-5_氟-4-甲氧基苯基或 2-甲基-6-甲氧基吡啶-3-基； X為C1 ;且 每個ra* RB各別為甲基。 本發明進一步提供式IV，V或VI化合物·· 97372.doc -16- 200529827

y為鹼金屬或ziz2，其中： z為_素；且 Z2為一驗土金屬；

Ar為經〇到5個R3取代的苯基或吡啶基； 每一 R3各別為Η，鹵素，CN，硝基，（CVCU)烷基，（Cr c4)烧氧基，（Ci_C4)鹵烷基或（Ci_c4)鹵烷氧基；和 每_RA和RB為甲基。某些具體實施例中，式IV，V及VI 化合物為經取代，其中^為2_甲基_4_曱氧基苯基，2_ 氯氟4-甲氧基苯基或2 -甲基-6-甲氧基批咬-3-基。另 外其他的星杳—/丄 /、篮貫知例中，係提供式VI化合物，其中γ為 K。 流程圖I提供根據 方法。 本發明製備吡唑并[1，5_&]-1，3,5_三畊的 97372.doc -17- 200529827 流程圖i

IV A 步驟3 ;鹼

R：8 半卡腙，或其 酸加成鹽

VI ▲ c

HN NC

Ar Ο 人

OR 步驟1 y

bBuOT

NC

Ar 本發明進一步提供製備在製備式I之CRF拮抗劑化合物 方法中4乍為中間物之芳基或雜芳基乙腊衍生物 VII化合物）的方、本。^ 的方法： ， ，本發明涵蓋製備式VIII化合物 97372.doc 18- 200529827

其中每一八1，A2，A3，A4和A5各別為F，C1，Br， C4)烷基，（CVC4)鹵烷基，（CVC4)烷氧基或（Cl-c4)鹵烷氧 基； 包含：（a)於酸存在下，在足以製得該式νίπ化合物的條 件下，讓式IX化合物：

IX 和氰化物接觸一段時間。某些具體實施例中，Αι為C1， A2為Η，A3為甲氧基，A4為F且A5為Η。 根據製備式VIII化合物方法的一些具體實施例，步驟（a) 的接觸反應係於銨鹽的存在下進行。銨鹽的實例包括爷基 二烧基銨鹽，像是氯化苄基三丁基銨，节基三烷基銨或四 烷基銨鹽。銨鹽可以約低於丨當量或低於〇」當量的用量提 供（相對式IX化合物）。 製備式VIII化合物方法的另一些具體實施例巾，步驟⑷ 接觸反應的氰化物可以氰化物鹽的形式提供，像是氰化鈉 或氰化鉀。也可使用丙酮氰醇。氰化物的用量為約1當量 或高於1當量（相對式IX化合物）。某些具體實施例中，需 97372.doc -19- 200529827 準備約3到4當量的氰化物。 製備式VIII化合物方法的又一些具體實施例中，進行爷 步驟⑷接觸反應之前，式ιχ化合物可溶解於有機溶劑 中，亚且該氰化物和銨鹽可溶解於含水溶劑中。因此，接 觸反應的進行為可使得各別試劑得以溶解於非溶混性的 或低/合混性）溶劑中，產生一兩相的反應系統。只要試劑 可充分溶解任何非溶混性溶劑的組合皆屬合宜。可形成一 兩相系統之非溶混性溶劑組合的實例為有機溶劑和水的組 合。不會溶混於水中之有機溶劑的實例包括戊烷，己烷， 苯，甲苯，二乙醚或其混合物。銨鹽觸媒存在下，非溶混 性溶劑的組合構成相轉移催化（PTC)的基礎。嫻熟本技藝 人士所充分瞭解地是，相轉移催化的反應可大幅增加化合 物形成的速率像疋式VIII化合物。某些具體實施例中，該 兩相系統包括甲苯和水。例如，式IX化合物可溶解於甲 苯中，而氰化物和銨鹽可溶解於水中。 製備式VIII化合物方法的另一些具體實施例中，步驟（a) 之接觸反應所用的酸可以是一弱的羧酸，像是丙酸，丁酸 或異丁酸。較佳的實例為乙酸。酸的用量大約為低於1當 i (相對式IX化合物）。例如用量為約〇·3至約〇 4當量。 上述製備式VIII化合物的方法可於環境溫度或高溫下進 行，像是咼於25 C的溫度。例如高溫的範圍為約25至約 40°C或約30至約40°C。環境壓力是合適的。 根據一些具體貫施例，式IX化合物為（b)在足以製得式 IX化合物的條件下，令式X化合物·· 97372.doc -20- 200529827

/OH A\/WAl A4 又 A3

X 和HBr接觸一段時間而製得。HBr的適當用量為大於工當量 (相對式X化合物），大於10當量，或介於約10和20當旦 間。 田里 涉及式X化合物和HBr之步驟（b)的接觸反應可在任何適 當的溫度和壓力下進行。一開始的接觸可在低溫下進行， 像是約0至約2〇。(：或約〇至約15。〇，之後再升高到較高的溫 度，像是約25至約60它或約30至約5yc。環境壓力是適當 的。式X化合物可溶解於任何適當的溶劑系統中。例如， >谷劑可包括有機溶劑，像是那些無法溶混於水中的溶劑。 另一些具體實施例中，式X化合物可在（c)足以製得式χ 化合物的條件下，令式ΧΙ化合物：

XI 和還原劑接觸一段時間而製得。可使用任何適當的還原 劑。還原劑的用量可以是一個還原當量或以上。還原劑的 貝例包括具有適當活化配位子和某些酶的雙（2_甲氧基乙 氧基）氫化鋁（Red-Al)，氫鋁化鋰，氫硼化鋁，甲硼烷， 97372.doc -21 - 200529827 虱化鋁，三乙基氫硼化鋰，硼氫化鈉。某些具體實施例 中’還原劑為雙（2-甲氧基乙氧基）氫鋁化鈉（Red-A1)。 製備式X化合物之步驟（c)的接觸反應中，適當的溶劑系 統可例如為對強還原劑為惰性的有機溶劑。溶劑的實例包 括苯’甲苯’乙喊，四氳呋喃，戊烷，己烷和其混合物等 等。某些具體實施例中，適當的溶劑為甲苯。 涉及式XI化合物之步驟⑷的接觸反應可在任何適當的 服度下進行。一些適當的溫度為低於25它，包括溫度範圍 為力0至約20 c，約1〇至約2〇。〇或約14至約17°c。環境壓 力是適當的。 本發明亦提供式VIII，Ιχ*χ的化合物：

X 其 中Α為Cl’A為Η，α3兔田4 c Α為甲氧基，Α4為F且Α5為Η 製備式VIII化合物的方味垂加植糾， J万去貫例提供如下流程圖Π。 97372.doc -22- 200529827

程圖II

本發明亦提供式XI化合物：

F

C02Me och3 XI 包含在（a)足以製得式XI化合物的條件下，令 物 式XII化合

COCI

氧化物接觸一段時間而製得。曱氧化物 2去旦〆士… 里為大 里目對式化合物）。例如，甲氧化物的用量為 和甲 97372.doc •23. 200529827 3當量。適當的溶劑系統包括甲醇。環境溫度和壓力也是 適當的。 某些具體實施例中，式XII化合物可在（b)足以製得式 XII化合物的條件下，令式XIII化合物： co2h

F XIII 和草醯氣或亞硫醯氯接觸一段時間而製得。草醯氯或亞硫 醯氯的準備量可至少約1當量（相對式XIII化合物）。例如， 草醯氣或亞硫醯氯的用量為約2當量。 某些具體實施例中，製備式XII化合物之步驟（b)的接觸 反應係於DMF存在下進行。DMF的準備量可少於1當量（相 對式XIII化合物）。例如，DMF的用量介於約0.3至約0.6當 量之間。 此外，製備式XII化合物之步驟（b)的接觸反應可於有機 溶劑存在下進行，像是二乙基甲醯胺（DMF)，甲苯或其混 合物，或是對試劑不具反應性的任何其他的溶劑。 製備式XII化合物所用的適當溫度可低於約25°c。一些 具體實施例中，進行步驟（b)之接觸反應的初始溫度為低 於25°C，之後在某一時點將溫度升到高於25°C，像是約40 至約60°C。可根據已知的方法，將過量的草醯氣用蒸餾的 方式移除。 本發明進一步提供式XI化合物： 97372.doc -24- 200529827 COaMe

製備式XI化合物的方法圖解於流程圖m中

流程圖III

步驟1

C02H F

F ΧΙΪΙ

CI 本發明進一步提供製備式XIV化合物的方法：

其中B1 ， B2 ， (Ci-C4)鹵院基 具體實施例中 基。 VW〜4"元丞 (Cl c4)烷氧基或（Ci_c4)鹵烷氧基。一 B1為Η ’ B2為η，B3為甲氧基且B4為 製備式XIV的方法包括在足以製得式χιν化合物的條件 下，令式XV化合物： 97372.doc -25- 200529827

和氰化物接觸-段時間。任何氰化物的來源都是適當的。 某些具體實施例中，提供的氰化物為氰化鈉。氰化:試劑 的準備量，_式XV化合物也可以是約i當量或i當量以 某些具體實施例中，氰化物的準備量為約3至約㈣ Ϊ 0 田 j備式爪化合物之步驟⑷的接觸反應可視情況在峨化 物|的存在下進行。任何的㈣㈣都是適當的，包 如納或鉀鹽。礙化物的準備量可為催化有效量，相對式 ^化合物也可譬如是低於約i當量。某些具體實施例/ 氰化物的準備量為約0.1當量。 絲V化合物的製備方法中，步驟（a)的接觸❹可在任 何適當的溫度或壓力下進行。某些具體實施例中，接觸反 應係於環境溫度和壓力下進行。 某些具體實施例中，式xv化合物可在⑻足以製得式xv 化合物的條件下，令式XVI化合物··

和一氯化劑接觸一段時間而製 ,^ 任何的氯化劑都3、态# 的。某些具體實施例中，氯化劑可 "卩疋適虽 '、甲4醯氣或亞硫酺 97372.doc -26- 200529827 氯。相對式XVI化合物，甲磺醯氯的準備量至少約1當 量。相對式XVI化合物，亞磺醯氯的準備量為至少約0.5當 量。 式XV化合物的製備方法中，步驟（b)的接觸反應可在任 何的溶劑中進行。某些具體實施例中，溶劑包括乙腈。任 何的溫度和壓力都是適當的。某些具體實施例中，接觸反 應係於溫度為約0至約10°C或約0至約5°c的條件下進行。 根據某些具體實施例，式XVI化合物可在足以製得式 XVI化合物的條件下，令式XVII化合物： B1 OHC^X^B2

II B4八N八B3

XVII 和一還原劑接觸一段時間而製得。任何強度足夠的還原劑 都是適當的，並且其相對式XVII化合物的準備量為至少 約1當量。某些具體實施例中，還原劑為NaBH4。NaBH4 可以水性的氫氧化物溶液提供（例如約10至約20 Μ的 NaOH)。 製備式XVI化合物之步驟（c)的接觸反應中，適當的溶劑 包括那些對還原劑為惰性者。一些具體實施例中，溶劑包 括醇，像是曱醇，乙醇，異丙醇等等，和其混合物。 根據一些具體實施例，式XVII化合物可在（d)足以製得 該式XVII化合物的條件下，令式XVIII化合物： 97372.doc -27- 200529827 β1

BriV χνπι 和正-BuLi接觸一段時間接著和甲醯化試劑接觸而製得。 相對式χνπ化合物，正_BuU的準備量為約1當量。式 χνπ化合物&可透過式χν_合物和—可進行金屬-齒素 父換的試劑接觸而製得，像是鎂，鋰或烷基鋰。 適當的甲酿化試劑包括二甲基甲醯胺（DMF)，甲酸乙 酯’ N-甲醯基六氫吡啶，N_甲氧基甲基甲醯胺。根據 某些具體實施例，該甲醯化試劑為DMF。甲醯化試劑的準 備量至少約1當量（相對UV戰合物）…些具體實施例 中’甲醯化試劑的準備量為約2當量。 製備式χνπ化合物之步驟⑷的接觸反應中，適當的溶 劑為對正-BUL1為惰性者，像是例如I，甲苯，己烧，戊 烷等等。㈤氫呋喃也是適合的。—開始接觸的時候，適當 =溫度範圍為-80至約(TC，像是約嘗C。初部接觸之後， 環境溫度和壓力則為合適的。 流程圖IV提供製備式XIV化合物的方法實例。 97372.doc -28- 200529827 流程圖ιν B1

B2 氰化物Cl

3CV B3 步驟 4 步驟3 I氯化劑

OHC、 B1 還原劑 B1 lV B4〆 、B3 步驟2 B4/ XVII XVI

step I n-BuLi

DMF 本發明進一步提供製備式XIX化合物的方法

其中： B4為 F，Cl，Br，（CVC4)烧基，（Ci-CU)鹵烧基，（CrCO 烷氧基或（Ci-CJ鹵烷氧基；和 B5為（CVC4)烷基； 包含： 在足以製得該式XIX化合物的條件下，令式XX化合

B1

97372.doc -29- 200529827 物：

XX

Br 和价接觸-段時間。根據—些具體實施例，85可為甲美 W可為W。另-些具體實施例中，β5〇.是以驗鹽㈣ 式提供，像是納或卸gg。R 5 V十 I B Q —的準備量可為過量，链 如相對式XX化合物為大於1者 s 、田里 乂驟（a)的接觸反應可 於任何適當的溶劑中進行。一此 T 些適當的溶劑包括甲醇， 苯，甲苯等等。步驟_ U)的接觸反應可進行的適當溫度包 括介於約0至120°C之問的⑽r ; 間的/皿度。例如溫度可為約6〇至約 8〇°C或約65至約75t。環境壓力是適當的。 、 另-些具體實施例中，式χχ化合物可在足以製得該式 XX化合物的條件下，令式ΧΧΙ化合物或其酸加成鹽： Q 一

酉文存在下，和亞硝酸鹽與接觸一段時間而製得。某些 ^、_戶、e例中酉夂可為NaN〇2或H〇NQ。其他具體實施例 中，酸可以是HBr。亞硝酸鹽，和酸的每一種的準備量 白可為過量像是例如相對式XXI化合物為大於1當量。步 驟=)的接觸反應可於任何適當的溫度下進行。溫度範圍 的只例為約、10至約20°C，約-5至約10°C或約0至約5°C。 乂驟（b)的接觸反應產生的反應混合物可進一步和鹼接 97372.doc -30- 200529827 觸，以調整pH為大於約7。例如，可添加氫氧化物（像 NaOH或KOH等等），以使溶液的pH值達約8到約14，約1〇 到約14或約13。 某些具體實施例中，式XXI化合物可在足以製得該式 XXI化合物的條件下，令式XXII化合物：

S4 N NHa XXI! 酸存在下’和Br2接觸一段時間而製得。一些具體實施例 中’該酸為乙酸。步驟（c)的接觸反應可在任何適當的溫 度和壓力下進行。一些適當的溫度可為約1〇到約25〇c，約 15至約20 C或約18°C。相對式XXII化合物，酸的準備量可 為過量並且可作為溶劑用。相對式χχπ化合物，溴（Br2) 的準備量為約0.5至約1·5當量，約〇·9至約M或約ι·〇當 本發明進一步提供式XIV或XV化合物：

其中B1為Η， 其中Β為Η，Β2為Η，Β3為甲氧基且Β4為甲基。 流程圖V提供製備式XIX化合物的方法實例。 97372.doc -31 - 200529827

流程圖V

B4八N八Sr

XX “亞硝酸鹽 步驟2 Bt2 酸

本文所述方法可以任何本技藝已知的適當方法監控。例 如產物的形成可以光譜的方法監控，像是核磁共振光譜 (例如4或13C)，紅外線光譜，光譜光度測定法（例如UV-可見光）或質譜儀，或是利用層析法，像是高效液相層析 (HPLC)或薄膜層析。 本文所用’’接觸’’ 一詞意指在足以進行分子轉換，像是鍵 斷裂和鍵形成的距離内，讓試劑聚集在一齊。接觸的試劑 可以是任何的形態，像是氣態，液態，固態或於溶液中。 溶劑或水性溶劑， 者。摘營的冷杰，丨< 其為^悉有機合成技藝人士所易於挑選

特定反應步驟用的溶劑。 本文所述方法的反應可在適當的溶劑中進行，像是有機 徜《的’t、齊’丨和起始物（反應物），中間物或反應 97372.doc -32- 200529827 、 々有機〉谷劑可包括鹵化溶劑，像是四氯化碳，溴二 氯甲烧，一、自产 一 —填氯甲烷，溴仿，氯仿，溴氯甲烷，二溴甲 烷 丁基氯’二氯甲烷，四氯乙烯，三氯乙烯，^^三 氣乙烧，二友 二虱乙烷，1，1-二氯乙烷，2-氯丙烷，六氟 本，三氯苯，鄰-二氯笨，氯苯，氟苯，氟三氯甲 :氯一氟甲烷，溴三氟甲烷，四氟化碳，二氯氟甲烷， 氣尸氟甲烷，二氟甲烷，丨，2-二氯四氟乙烷，六氟乙烷， 1-氣丁烷和1，2_二氯乙烷。 適田的有機溶劑包括醚，像是二甲氧基甲烷，四氫呋 喃，1，3·二吟烷，i，‘二噚烷，呋喃，二乙醚，乙二醇二甲 鱗，乙二醇二乙峻，二乙二醇二甲鱗，二乙二醇二乙鍵， 三乙二醇二甲醚，苯基甲基醚，三級-丁基甲基醚，二正_ 丁基醚，2_甲基四氫呋喃或丨，3-二氧戊環。 、適當的質子性溶劑可包括（係舉例而非限制於）水或有機 >谷劑’像是甲醇，乙醇 9> 一# ^ 哔乙私2·硝基乙醇，2_氟乙醇，2,2,2- 二齓乙酵’乙二醇，1_丙醇’ 2_丙醇，2-曱氧基乙醇，1_ :醇，2-丁醇，異-丁基醇’三級·丁基醇，2_乙氧基乙 醇一乙一醇，1_，2 -或3 -戊醇，雜七# ^ X % 新戊醇，三級戊醇，二乙 二醇單甲基鱗，二乙二醇單 早乙基醚，％己醇，苄基醇， 紛，甘油或1-甲氧基-2-丙醇。 適當的非質子性溶劑包括（伤與 卜 (係牛例而非限制於）有機溶劑 四虱呋喃（THF)，二甲基ψ妒^ 心“ 胺(DMF)，二甲基乙醯胺 (DMAC)，1，3_ 二甲基 _3 ，’， 虱_2(1H)-嘧啶酮 (DMPU)，1,3-二甲基-2-咪唑啶酮⑺ 疋阳（DMI)，N-甲基吡咯烷酮 97372.doc • 33 - 200529827 (NMP)，甲醯胺，N-甲基乙醯胺，N-甲基甲醯胺，乙腈， 二甲基亞颯，丙腈，甲酸乙酯，乙酸甲酯，六氯丙酮，丙 酮’乙基甲基_，乙酸乙酯，環丁颯，N，N-二甲基丙醯 胺’四甲基脲，硝基甲烷，硝基苯，六甲基磷醯胺，乙酸 正-丙酯，乙酸異-丙酯，乙酸正-丁酯，丙酸乙酯，2-戊酮 或甲基異丁酮。 適當的有機溶劑包括煙，像是苯，環己烧，戊烧，己 烷，甲苯，環庚烷，甲基環己烷，庚烷，乙基苯，間-， 鄰-，或對-二甲苯，辛烷，12•二氫化茚，壬烷或萘。 如本文所使用，適當的酸包括但不限於氫氣酸，氫溴 酸，硫酸，鱗酸，>6肖酸和有機酸。 適當的有機酸包括甲酸，乙酸，丙酸，丁酸，甲烷磺 酸，對-甲苯績酸，苯石黃酸，三氟乙酸，丙炔酸，丁酸， 2- 丁炔酸，乙浠基乙酸，戊酸，己酸，庚酸，辛酸，壬酸 和癸酸。 如本文所使用，適當的驗包括但不限於：氫氧化鋰，氫 氧化納，氫氧化卸，碳酸鐘，碳酸納，碳酸钾，氫氧化 鎂，氫氧化#5，碳酸#5，碳酸氫納和碳酸氫卸。 如本文所使用，適當的強鹼包括但不限於烷氧化物，金 屬醯胺，金屬氫化物，金屬二烷基醯胺和芳基醯胺，其中 烷氧化物包括甲基，乙基和三級丁基氧化物的鋰，鈉和鉀 鹽；金屬醯胺包括胺基化鈉，胺基化鉀，胺基化鋰；金屬 氫化物包括氫化鈉，氫化鉀和氫化鋰；金屬二烷基醯胺包 括曱基’乙基’正-丙基’異-丙基，正-丁基，三級丁 97372.doc -34- 200529827 基 一 土矽烷基和環己基取代醯胺的鈉和鉀鹽。 本：所述化合物可具有不對稱中心。除非另有所指，所 的掌性，非鏡像異構和消旋形式者皆包含於本發明中。 Ι1ΓΓ幾何異構物，C=N雙鍵等等也存在於本文所述 亚且所有這類安定的異構物均:¾蓋於本發明 。將可理解地是’包含不對稱取代碳原子之本發明化合 物可以光學活性或消旋的形式被分離出。有關如何由光學 活性起始物製備光學活性形化合物的方法為本技藝所已知 者，像是利用消旋形的解析方法或利用合成的方式。一結 構中所有的旱性，非鏡像異構形，消旋形和所有的幾何里 構形皆為預期者。 -本發明包括中間物或最終化合物中所發生之原子所有的 同位素。同位素包括具有相同原子數但不同質量數的那些 原子。例如，氫的同位素包括氣和氘。 S任何的變量’於任何組份或任何化學式中發生一次以 上時’其每次出現時的定義則和其每次其他次的定義無 關。因此’例如當一基團經0_3似2取代時，該基團則可 視情況經多達三個不同的尺2所取代。 本文所用”經取代詞意指在減原子上任何—個或一 個以上的氫被由指定基團挑出者所置換，條件為該指定原 子的正常價數不會被超過，以及該取代反應可獲致安定的 化合物。 本文所用”炫基詞意指_飽㈣ ， 鍵或環狀⑽基，，)。烧基可為不經取代或經=使二 97372.doc -35- 200529827 其一或一個以上的氫原子被其他的化學基團所置換。烷基 的實例包括甲基（Me)，乙基（Et)，丙基（例如正-丙基和異-丙基），丁基（例如正_ 丁基，異丁基，三級丁基），戊基（例 如正-戊基’異戊基，新戊基），環戊基，環己基，去甲蓓 基等等。蝉基”係指具有一或一個以上碳碳雙鍵的烷基。 烯基的實例包括乙烯基，丙烯基，環己烯基等等。”炔基，， 係指具有一或一個以上碳碳三鍵的烷基。炔基的實例包括 炔基’丙炔基等等。”鹵烷基”係指具有一或一個以上鹵 取代基之支鍵’直鏈，和環狀的烷基。鹵烷基的實例包括 CF; ’ C2F5 ’ CHf2，cci3，CHCl2，c2Cl5等等，，烷氧基，， 一詞意指-Ο-烷基。烷氧基的實例包括甲氧基，乙氧基， 丙氧基（例如正-丙氧基和異丙氧基），三級丁氧基等等。 ώ烷氧基係指被一或多個鹵素取代之烧氧基。"環烷 係指環狀的烷基，包括單_，雙_或聚_環的環狀系統。，， 衣烷基的κ例包括環丙基，環丁基，環戊基，環己基等 等。”i基”或，，南素”包括氟，氣，漠和碘。 芳基係私單環或多環的芳香烴，包括例如苯基，莕 基，：€基，/基，：氫印基，絲等等。芳基的部份為習 知’並且係料於例如Hawley，s c〇ndensed化學字典⑴ 版），作者為RJ· Lewis•，出版社為紐約的J· Wiley & Sons a司（1997) ’其全文併人本文中以兹參考。芳基可為經取 代或未經取代。 ”雜芳基，’係指單環或多環的芳香烴，包括至少一個雜原 子的環成原’像是硫，氧錢。雜芳基包括㈣限於峨咬 97372.doc -36- 200529827 基 基 基 基 基 氫苯2呋喃基，2,3-二氫苯并嘧吩基，2,3_二氫苯并噻吩 土氧化物，2,3·—氫苯并p塞吩基-S-二氧化物，苯并噚唑 林2 S同-基，吲嗓琳基，benzodioxolanyl，苯并二号燒等 等。雜芳基可為經取代或未經取代。 ，嘧啶基，吡畊基，嗒畊基，三畊基，呋喃基，氫醌 異馱基，嘍吩基，咪唑基，嘧唑基，啕哚基，吡咯 可坐基，苯并呋喃基，苯并嘧吩基，異噚唑基，吡唑 ，二唑基，四唑基，峋唑基，丨，2，仁噻二唑基，異噻唑 ，苯并嘍吩基，嘌呤基，咔唑基，苯并咪唑基，2,3_二 雜％基’可為飽和（也就是說不包含任何的雙鍵或三鍵） 或不飽和（也就是說包含一或一個以上的雙鍵或三鍵）的碳 環基，其中該碳環基之一或一個以上的環形成碳原子被一 像是〇, S或N的雜原子所置換。雜環基可為經取代或未經 取代。雜環基的實例包括嗎啉基，硫代嗎啉基，六氫吡畊 基，四氫呋喃基，四氫嘍吩基，六氫吡啶基，吡咯烷基， 兴仿唑烷基，異嘍唑烷基，吡唑烷基，噚唑烷基，噻唑烷 基，咪唑烷基等等。雜環基取代基的實例包括烷 基，c3-c6環烧基，c2-c6烯基，c2_c6快基，齒素， 鹵烷基，CN，OR7，SH，N02，〇CF3，S(0)nR7，C0R7， nr7cor8 , N(COR7)2 , nr7r8 或 c〇NR7R8 ,其中 C02R7 ， 0C(0)R7 ， nr7conr7r8，nr7co2r8 R8係根據本發明之第一層面定義如上者。雜環基可經任何 數目的取代基所取代，像是例如0到7，〇到6，〇到5，〇到 4，0到3，0到2或0到1個取代基。 97372.doc -37- 200529827 依本文所述方法製得的化合物可用來治療嚼乳動物中， 以促皮質素釋放因子（CRF)之不正常含量為特徵的病症。 某些以促皮f素釋放因子之不正常含量為特徵的病症包 括情緒性的病症，像是抑费，包括成年人的抑t，單_事 件:麵症，週期性的抑鬱症，兒童傷害引發的抑鬱症， 季節性因感情引發的病纟，醒後抑鬱，心境惡劣，兩極細 月已的病症和^鬱循壞精神病；焦慮病症包括恐慌性，恐懼 I*生被追妄想症，外傷後的屢力病症，·和屢力引發% 不適症；發炎；疼痛；慢性疲勞徵候群；壓力引發的頭 痛；癌症；人類免疫缺陷病毒（HIV)感染神，·經變性疾 病像疋阿茲海默氏病，帕金森氏症和哈丁頓氏舞蹈病； 胃腸疾病，像是潰瘍，刺激性的腸併發症，克隆氏病，痙 攣性結腸，腹瀉和手術後的腸阻塞，以及和精神病理障礙 或壓力有關的結腸過敏性；飲食的不適症，像是厭食症和 食慾過盛；核上癱瘓；側索硬化性肌痿縮症；免疫抑制 症；出血性應力；壓力導致的精神病發作；具有正常功能 之曱狀腺疾病的徵候群；不適當抗利尿激素（ADH)的徵候 群；肥胖；不育；頭部外傷；脊髓外傷；神經單位的缺血 損吾（例如大腦局部缺血，像是海馬型的大腦局部缺血）； 促有毋神經單位的損害；癇癲；心血管病症，包括高血 壓，心搏快速和充血性心臟衰竭；中風；免疫性機能障 礙，包括壓力導致的免疫性機能障礙（例如壓力導致的發 燒，豬應力徵候群，家畜之出血性敗血病，像馬般的發作 性纖維顫動，和因膽小拘束，膽小壓力或人類-動物交互 97372.doc -38- 200529827 反應有關之應力引私的她 ^的拽此卩羊礙）；肌痙攣；尿 茲海默氏型的老年痴早·夕 不，阿 …广 多發性腦梗塞痴呆；側索硬化性 肌’、’、s症’化學藥品的依賴和上瘾(例如對酒精，古柯 驗，海洛英，苯并二氮雜革或其他的藥物）’·藥物和洒於 脫瘾徵候群；骨疏家$ . _精 H神精社會形侏儒；讀過少.藤 ft掉洛，不正常的晝性節律；與不、 症，像是時區改變徵候Μ P -即律有關的病 規律的睡眠-清:模:，群延 眠相…： 眠相徵候群，後階段睡 =二:广小時睡眠_清醒病 1二，REM睡眠不適症，嗜睡，類睡症，發作性睡病， =症，不安靜腳徵候群，睡眠窒息，心境惡劣和盘慢性 又樂及抗抑鬱劑脫瘾有關的不正常晝性節律。因此 所提供化合物’因為其對CRF受體的拮抗作用 待可用來治療這些和其他的不適症。 被』 ^藥依本發明方法所製得之化合物，以藉由任何適本 =治療上述病症’其為讓化合物和化合物起二 =觸，像是魏動物體的CRF受體。該化合物可以任何 ”:方式投樂，係與作為各別醫療試劑的配藥併用 ==他的醫療試劑併用。化合物可單獨投藥或與一醫藥 二“开投樂’该醫藥載劑的選擇基礎為根 和標的醫藥實務。 k 像是特定化合物的 接雙者的年齡，體 合併治療的種類； 化合物的投予劑量取決於若干因素 藥效特徵，以及投藥的模式和路徑 重和健康狀況；症狀的種類和程度 97372.doc -39- 200529827 治療的頻率；和希望的效果。對於用來治療上述疾病或病 症而言，本發明化合物可為口服者，活性成份（例如式以匕 合物）的日劑量為每公斤體重約0 002至約2〇〇毫克。例 如，每公斤約〇.〇1至約10毫克的劑量可分成若干較少的劑 量，一天投予一到四次。另者，持續的釋出配方對獲得所 希的樂理學效果為有效的。 投藥適合的劑量型（組合物）每劑量單位可包含約丨毫克 至約100毫克的活性成份。這些醫藥組合物中，以組合物 總重為基準，活性成份（例如式〗化合物）的含量可約為 到95重量％。 —該活性成份（例如式〗化合物）可以固態劑型作口服投 藥，像是膠囊，旋劑和粉末，《是以液態劑型投藥，像是 藥液馳漿和/或懸浮液。該化合物也可以無菌液體的 劑型，以非經腸的方式投藥。 可使用膠囊以包含活性成份和—適#的載劑，像是但不 限於乳糖，澱粉，硬脂酸鎂，硬脂酸或纖維素衍生物。可 使用類似的稀釋劑，以製造壓縮錠劑。錠劑和膠囊皆可製 成連續性的釋放產物，以在歷經—段時藥物可持續的 釋出。壓縮錠劑可為糖塗覆或薄膜塗覆者，以遮避任何令 人討厭的味道，或用來保護身處大氣壓下的活性成份，抑 或於胃腸道t讓錠劑得以選擇性的崩解。 口服投藥的液體劑型也可包含色素或調味劑，以增加病 患的可接受度。 基本上，水，藥學上可接受的油，鹽液，含水的葡萄糖 97372.doc -40- 200529827 和相關的糖溶液與乙二#，像是丙二醇或聚乙二醇，對非 經腸溶液而言皆為適當的制。非經腸投藥料溶液可包 ^列如活性成份的水可溶鹽和適當的安定劑。像是亞硫酸 氫鈉，亞硫酸鈉或抗壞血酸的抗氧化劑可單獨或合併 適當的安定劑。也適合作為安定劑的有檸檬酸和其鹽類; 以及EDTA。此外，非經腸的溶液可包含防腐劑，像是例 如氯；烧錄，甲基-或丙基邛araben和氣丁醇。 本文所述方法製備之化合物亦可於神經系統功能、功能 障礙及疾病之生化研究中作為試劑或標準物。 如嫻熟本技藝人士所理解者，可就本發明之較佳具體實 施例作許多的改變和修飾，而不致偏離本發明的精神。所 有的這些改變皆落在有關範圍内。說明書從頭到尾使用了 各式各樣的群集，以方便描述化合物的組成變數和各種相 關部份的基團。這些基團在說明書中從頭到尾每一次的出 現包括該等基團成員每一種可能的副組合，也包括了其各 別的成員。 此專利文件中所述之各專利、申請案及發行刊物皆以引 用方式完全併入本文。 實例 實例1 : 2-(4-甲氧基2-甲基苯基）-3-氧丁腈鉀鹽的製法 !NCY^ok OCHs 97372.doc -41 - 200529827 無水條件下，混合（4-甲氧基2-甲基苯基）乙腈（25〇公 斤，155莫耳，市售）和68·3公斤的乙酸乙酯，獲得一溶 液。加熱所得溶液至35°C，並歷時30到60分鐘的時間，添 加溶於THF(l〇〇公斤，20重量％，178莫耳）的三級丁醇 鉀，將溫度控制在35°C。添加之後，加熱反應物至45。〇， 並維持60分鐘。維持期結束之際，用HPLC分析樣品。然 後將反應混合物冷卻至25°C，並和其他的三批次結合，溶 液的總重為843公斤。 實例2 : 2-(4-甲氧基2-甲基苯基）-3-氧丁腈半卡腙的製法 my Ν〇Υ^ΟΗ3

V och3 結合根據實例1製得四批次的溶液和水（15〇公斤）。145 t米水柱和3 5 C下，從混合物中蒸館出溶劑（5 57公斤）。 接著添加水（1200公斤），乙酸（47·〇公斤），半卡腙鹽酸鹽 (89.0公斤，798莫耳）和ΙΡΑ(475公斤）。加熱所得混合物至 25_35°C，並維持21小時。以肌c監控反應。利用過濾的 方式分離出形成的2-(4_甲氧基2-甲基苯基）_弘氧丁腈半卡 月’τ、並用水（2x25〇公斤）清洗濾餅。分離出的總量為143公 斤。純度為99.3重量％。產率為理論值的931%。 實例3 : 5-胺基-4-(4_甲氧基2-甲基苯基）+甲基峨（I敌 酸醯胺的製法 97372.doc •42- 200529827

Hgfsi Ha

進料2-(4-甲氧基2-甲基苯基）-3-氧丁腈半卡腙（160克， 6 1 5宅莫耳）和N-甲基叶(:哈。定g同（NMP，480毫升），並將所 得懸浮液冷卻至<5°C。添加1，8-二氮雙環[5·4·0]十一-7_烯 (DBU，18·0毫升，120毫莫耳）。將反應物維持在<5〇c歷時 1 ·0到1.5小時。用HPLC監控轉換為5-胺基-4-(4-甲氧基2-甲基苯基）-3-甲基吡唑-1-叛酸醯胺的量（通常大於95%)。 實例4 ·· 8-(4-甲氧基·2_甲基苯基）_2,7_二甲基吡唑丨^^ 幻[1，3,5】三畊_4_醇的製法

將溶於乙腈（10〇毫升）的對·甲苯磺酸（29.2克，154毫莫 耳）加入實例3所述包含5_胺基-4_(4_甲氧基2_甲基苯基）_3_ 曱基吡唑-1 -羧酸醯胺的反應混合物中。加熱所得混合物 至8 5 9 0 C 並於加熱期間添加原乙酸三甲酷（1 6 〇毫升， 1.26莫耳）歷時5分鐘。從熱循環一開始加熱之際起算，歷 經總計丨·5小時所希的時間範圍下，持續該反應約45分 鐘。反應的進展以HPLC監控。添加水（1.50升）歷時5分 鐘’其間的溫度降為約6〇t：。歷時丨小時的時間，冷卻所 97372.doc •43- 200529827 得反應混合物至約20°C，並利用過濾方法分離產物。產率 為 136克（78.0%，純度為 99.5%)。 實例5 : 雙（2_甲氧基乙基）_8-(4_曱氧基_2_甲基苯基）_ 2,7_二甲基吡唑[1，54】[1，3,5】三畊_4-胺苯磺酸鹽的製法

進料實例4的8-(4-甲氧基-2-甲基苯基）_2,7-二甲基吡唑 [1’5-&][1，3,5]三畊_4-醇（6.50公斤，22.5莫耳），苄基三丁 基氣化銨（4.70公斤，15.0莫耳），乙腈（6·5〇升）和甲基三級 丁基醚（26·〇升），並用磷醯氯（3·3〇升，34·9莫耳）和ν，ν_二 異丙基乙基胺（6.00升，34.3莫耳）處理所得漿液。加熱所 付此合物至5〇-55°C，並持續約ι·5小時，期間反應可完 成。冷卻所得溶液至約〇。(：，並用雙（2_甲氧基乙基）胺 (8.50升，57·5莫耳）處理，同時維持批次的溫度為低於 25 c。於此狀態下維持該批次約1〇小時，然後用溶於水 (^8·0升）中的氫氧化鉀（11.4公斤，203莫耳）溶液處理，持 、”貝小時。分離相，並用水（32.5升）清洗有機層的部份。 添加額外的甲基三級·丁基趟（163升），並過濾該批次，以 :多除微粒物質。減壓下，蒸餾該批次，以移除水和甲基三 。基醚，達體積約為47.0升的終點。冷卻溶液至約 〇 C，並加以過濾，以移除微粒物質。 97372.doc •44· 200529827 鹽的製備為一開始先將乙腈（6 · 1 1升）加入該批次中，接 著分好幾部份，以播種的方式添加溶於甲基三級-丁基醚 (6.50升）中的苯磺酸（3.58公斤，22.6莫耳）溶液。在將所得 漿液冷卻至約〇°C之前，讓其成形歷時約2.0小時，在以過 濾方式分離前，於此狀態下維持該批次約30分鐘。乾燥獲 得10.7公斤的產物（理論值的83.8%)。 實例6 : 2-氣_5-氟-4-甲氧基_苯甲酸甲酯的製法

用草醯氣（19.8公斤，156.0莫耳，2.02當量）處理溶於甲 苯（75.9公斤）中之2-氯-4,5-二氟-苯曱酸（15.0公斤，99重量 %的純度，77.1莫耳，1.00當量）和二甲基甲醯胺（〇·2公 斤，2.73莫耳，〇·〇4當量）的溶液，同時維持該溫度為低於 2 5 C歷時2小時。加熱該反應混合物至5 〇 °C，並維持1小 時。此時，HPLC顯示反應已完成。剩下的草醯氣用蒸餘 的方式移除，鍋溫從85升到11 〇°C，反應了移除較低沸點 的草醯氣，直到只有甲苯被蒸餾出為止。將冷卻的反應物 (<25°C)移轉到另一包含溶於甲醇（50.5公斤，233.7莫耳， 3.03當量）之25重量％甲醇鈉的容器中。25°C下隔夜授拌該 混合物，並以HPLC監控。50°C/150毫米汞柱真空下，利 用蒸餾的方式移除甲醇，同時經由添加甲苯（添加的總量 為184.6公斤）維持體積的量。持續蒸餾，直到以gc測得之 曱醇的量為1.16體積/體積％。接著依續用水（150.0公斤）， 97372.doc -45- 200529827 1.6重s%的鹽酸（37.0公斤），水性碳酸氫鈉（185公斤的碳 酸氫鈉溶於33.15公斤的水中）和水（35〇公斤）清洗所得溶 液（每次都先攪拌15分鐘）。透過一 〇.2微米的卡式濾器過濾 清洗過的溶液，50。〇/150毫米汞柱蒸餾下，體積減少了一 半。加熱该混合物至80°C，以再溶解已經又出現的固體 物，亚添加庚烷（68.0公斤），同時維持溫度為7(rc。將漿 液冷部至5 C，並維持此一狀態一整夜。以過濾方式收集 結晶，用庚烷（34.0公斤）清洗，並於5(rc/15〇毫米汞柱下 乾燥，獲得14.4公斤（產率為85%)純的2_氣氟甲氧基_ 苯甲酸甲酯產物。 實例7 : 2-氣-5-氟-4-甲氧基-苯甲酸甲酯轉換為（2-氣-5-氟_ 4_甲氧基-苯基）_乙腈的反應 CO^Me

Aed痛 00¾

ODNb

_CN i*riubisia 甲笑/太

OCH, 冷卻至13_15°C之溶於甲苯（17.0升）之2-氣-5-氟-4-甲氧 基笨甲酸甲酯（2.00公斤，99.04重量％的物質，9.06莫耳， 實例6)的溶液用65重量％的尺以_八1(雙（2-甲氧基乙基）氫鋁 化鈉，2.95升，9·83莫耳，1.08當量）處理，歷時丨小時， 同時維持該溫度在13-17°C。此時，以HPLC取樣，確認所 有的起始物都已反應。 藉添加丙酮（40毫升）驟冷剩餘的Red-A1。將反應物移轉 到先行冷卻到8。〇之48%的氫溴酸（19.0升，168莫耳，18·5 當量）溶液中。<50t下添加歷時40分鐘。加熱該反應混合 97372.doc -46- 200529827 物至50°C，並持續30分鐘，此時HPLC顯示1-溴甲基2-氯- 5-氟-4-甲氧基苯相對（2-氯-5-氟-4-曱氧基苯基）甲醇的比 例為999 : 1 〇 分離層相，並用水連續清洗五次（2·〇升），直到含水洗 液的pH值達5為止。透過--^式濾器過濾溶液，獲得18.1 公斤的溶液，經分析為13 · 1 7重量％的1 -溴甲基氯乃-氟- 4-甲氧基本。混合該中間物和乙酸（195毫升，3 ·4莫耳， 0.36當量）。劇烈攪拌下，添加溶於水（7.85升）中之氰化鈉 (1780克，36·3莫耳，3·84當量）和节基三丁基氯化銨（195 克’ 0·63莫耳，0·07當量）的溶液，歷時1分鐘。用額外的 水（2.0升）清洗該混合物，並調整溫度至35艺。持續攪拌 2.5小柃，並以HPLC取樣，顯示（2-氯-5-氟-4-甲氧基苯 基）-乙腈相對1-溴曱基2-氣-5-氟-4-甲氧基苯基的比例為 1999 : 1 〇 分離層相，並用水（18.5升）清洗有機相。將該批次和其 他以相同規模製得的批次結合。5〇它下，以旋轉蒸發的方 式濃縮溶液，直到含量為約12升為止，此時持續濃縮，但 藉由添加異丙醇維持容量。持續該濃縮程序，直到顯 不總含ΐ為2.09%體積/體積。需要總共18升的異丙醇。用 ΙΡΑ將體積稀釋到16·5升’並以加熱方式溶解固體物。將 溶液冷卻到45t，壓力降到120毫米汞柱，以蒸餾出異丙 醇，同時添加水以維持體積。維持溫度在45巧〇。〇。以' 分析顯示異丙醇的量已降到5·7%之前，先花費5小時的時 間進料水總共約15升。隔夜將聚液冷卻至環境溫度，並： 97372.doc -47- 200529827 過濾、方式收集結晶。用水（5升）清洗遽餅數次，5〇。〇下真 空（25真空度）乾燥結晶物4天，獲得3.5 3 3公斤純度為 99.17重量％(97%的校正產率）的（2-氣-5-氟-4-甲氧基苯基）· 乙腈。 實例8 : 5-溴_2_胺基-6-甲吡啶HBr鹽的製法

2-胺基各甲吼啶 5-漠-2-胺基-6-甲吡啶ΗΒγ鹽 二溴化物不純物 變化1 進料2-胺基-6-甲吡啶（39.8公斤，99.6重量％的純度， 367莫耳，1.00當量）至乙酸（65·〇公斤）中，同時讓溫度上 升達60°C。進料額外的乙酸（17公斤），以清洗最後的甲吡 啶，以及加熱該混合物至3 5 °C，直到溶解開始為止。冷卻 到18°C後，於18土3°C下進料溴（56.2公斤，352莫耳，0.96 當量）歷時2小時。進料更多的乙酸（2·〇公斤），以清洗最後 的溴。維持混合物於此溫度下1小時，然後冷卻至i卜 15°C。再維持〇·5小時。於聚丙烯上，以過濾的方式收集 固體物，並用異丙醇（63.0公斤）清洗，獲得69.6公斤潮溼 的5-溴-2-胺基-6-曱吡啶氫溴酸（產物有76重量％為氫溴 酸）。此相當於54%的產率。乾燥部份的產物，目的為記 錄 13C NMR 光譜：13C NMR (4〇〇 MHz，DMS〇〇 谷 154.1，146.9，112.4，105.2，20.1 〇 變化2 進料2-胺基-6-甲吡啶（16.0公斤，99.6重量％的純度 97372.doc -48- 200529827 〒’同時維持溫度 以清洗最後的甲吡 147莫耳，1.00當量）至乙酸（35·〇公斤）中， 為<50°C。進料額外的乙酸（2公斤），以、、主 的溴。維持

啶，以及加熱該混合物至35。(：，直到溶解開始為止。冷卻 到18°C後，於18 土 3°C下進料溴（23·〇公斤，144莫耳〇 % 當量）歷時2小時 .....—一·一· 升）。用30%的氫氧化鈉（35公斤）調整？11到4〇,並於聚丙 烯袋上，以離心機（從下文所述固體中將產物作附帶的回 收）收集固體物。用水（50升）清洗固體。再過濾所有的濾 液和洗液，以移除剩下的固體（從下文所述固體中將產物 作附帶的回收），並用30%的氫氧化鈉（75公斤）調整ρΗ到 13·3。於聚丙烯袋上，以離心機收集固體物，並用水（5〇 升）清洗。乾燥結合的固體和下文所述經回收者。 利用回收上述第一次過濾的濾液中沉澱出的固體物回收 附帶的產物。將這些固體溶解於水（3〇升）中，並用5〇%的 含水氫氧化鈉（20.0公斤）調整ρΗ到13.5。並於聚丙烯袋 上’以離心機過濾固體物，以及用水（30升）清洗固體。將 所得固體和乾燥前預先分離的5-溴-2-胺基_6·甲吡啶HBr鹽 結合。同時將第一次過濾收集之二溴不純的濾餅泥漿化混 入水（100升）中，並於聚丙烯袋上，以離心機過濾，以及 用水（30升）清洗固體物。濾液/洗液再進料至反應器中， 並用50%的含水氫氧化鈉（125升）和更多的水（150升）調整 pH到12·5。於聚丙烯袋上，以離心機過濾固體物，以及用 水（60升）清洗固體。將所得固體和乾燥前預先分離之5-溴- 97372.doc -49- 200529827 2 -胺基-6-甲p比σ定HBr鹽的固體結合。於4〇。〇下一齊乾燥3 天，獲得16.2公斤的固體（95.6重量％)或是產率為56〇/〇。 實例9 ·· 5-溴-2-胺基-6-甲吡啶HBr鹽轉換為2,5-二溴_6_甲 吡啶

1}NaN02/HBf/Br2 2} NaOH 5-溴-2-胺基-6-甲。比啶ΗΒι:鹽

2,5-二漠-6-甲σ比σ定 變化1 將5-漠-2-胺基- 6-’甲ρ比咬氫漠化物（29·4公斤，76·5重量％ 的純度，84莫耳，1.00當量）溶解於<35。〇之48%的氫溴酸 (162.0公斤，961莫耳，11.44當量）中。冷卻該溶液至 2°C，並以40分鐘的時間添加溴（43 〇公斤，269莫耳，3 2〇 當量）。-1到5°C下，歷時50分鐘，添加4〇重量％的亞硝酸 鈉溶液（28.9公斤，419莫耳，4.99當量）。維持丨小時，並 用50%的含水氫氧化鈉（120.0公斤）調整阳到131。溫熱内 容物到20°C歷時1小時’並添加曱苯（78〇公斤）。攪摔該混 合物30分鐘，並靜置-整晚。以㈣方式淨化有機相，並 用飽和的氯化鈉水溶液（5M公斤）清洗兩次。獲得96〇公 斤的2,5-二漠-6-曱吨。定（17.3重量％)或產率為79%。 變化2 將：>->旲胺暴-6-甲 A邝）和5_溴_2-胺基曱 啶氫溴化物(7.0公斤)(以起始物分析值為基準此相當於 公斤或4丨莫耳的起始物）溶解於〈抑之術。的氣演 97372.doc -50- 200529827 (107.0公斤，635莫耳，15·49當量）中。冷卻該溶液至 2°C，並以45分鐘的時間添加溴（27.3公斤，171莫耳，4 17 當量）。-1到5°C下，歷時1.5小時，添加溶於2〇升水的亞硝 酸鈉溶液（8.1公斤，117莫耳，2.86當量）。維持丨小時，並 用50%的含水氫氧化鈉（70·0公斤）調整？11到125。溫熱内 容物到20°C歷時1小時，並於聚丙烯袋上，以離心機收集 固體物。用水（75升）清洗固體，獲得12·〇公斤潮溼的2,5_ /臭6 -甲ρ比σ疋，經測篁為8 3重ΐ %的產物（產率為$ $ 。 乾燥部份產物，目的為記錄NMR光譜：13C NMR (4〇〇 MHz，CDCl3) δ 158·8，141.9，139.4，126.7，120.6， 24·7 〇 實例10 : 2,5-二溴-6-甲吡啶變為2-甲氧基_5-溴甲吡啶 的轉換反應 N Br _ene/MeOH H3C 八 N 人〇〇七 2,5-二漠各甲吼啶 2-甲氧基如臭-6-甲吼啶 4〇°C/75毫米汞柱下，利用真空蒸餾的方式乾燥溶於甲 苯（154.2公斤）中之2,5-二溴-6-曱吡啶（3〇·6公斤，122莫 耳，1.00當量）的溶液，以移除105.7公斤的蒸餾物，獲得 包含40 ppm水的溶液。將其和溶於甲醇（124」公斤，574 '耳4.71¾里）中25重量％的甲醇鈉混合，並於65-75。〇 :加熱該混合物6小時直到反應完全為止（HpLC的分析顯 二趁始物的剩餘面積為i ·6%)。冷卻混合物至5並將水（98 升）加入該混合物中接著添加第三丁基甲基醚（97公斤）。

97372.dOC -51 - 200529827 分離層相，並用5%的鹽水（139公斤）清洗有機相兩次，用 20%的鹽水（165公斤）清洗一次。以過濾方式淨化有機相， 並於40°C下真空蒸餾移除51公斤的濾出物。獲得2-甲氧 基-5-溴-6-甲吡啶溶液（58.4公斤，40.6重量％的純度）或（產 率為96%)。以蒸餾方式純化部份產物，目的為記錄 NMR光譜：13C NMR (400 MHz，CDC13) δ 162.4，154.4， 142.0，111.8，109.5，53.6，24.6 ο 實例11 : 2-甲氧基-5-溴-6-甲吡啶變為苄基醛衍生物的轉 換反應

將溶於THF( 18 ·3升）中的2-甲氧基-5-溴-6-甲吡啶（甲苯中 73重量％的溶液，3·17公斤，11.45莫耳）溶液冷卻至 -60°C，並用溶於己烧（4.87升，12.2莫耳，1.06當量）中2.5 N的正丁基經處理。0.5小時後，<-50°C下，進料二甲基甲 醯胺（1·76升，22.8莫耳，2·0當量）。溫熱至環境溫度後， 添加氯化銨水溶液（1.6公斤/16.2升的水），並分離層相。 水相用甲基三級-丁基醚（3.3升）再萃取，並用飽和的鹽水 (2.5升）清洗結合的有機萃取物。有機溶液的總量為22.4公 斤（7.0 8重量％)，相當於92%產率的溶液。 實例12:醛衍生物變為醇衍生物的轉換反應

97372.doc -52- 200529827 25-35°C和真空下，將上述實例11製得的苄基醛溶液作 溶劑交換，變為甲醇。重覆該步驟，直到水的分析值為 <0· 1 %。最終溶劑顯示流失7·7°/。的苄基醛。冷卻該溶液至 〇°C，並於0-5°C下添加12重量％的氫硼化鈉溶液（丨4 μ含水 氫氧化納中，12重量％，660毫升，2.9莫耳，1.1〇當量 <3 5 °C下，蒸發揮發性成份。添加甲基三級-丁基醚（3升）， 並持續蒸發。用甲基三級-丁基醚（4.8升）和水（3.9升）稀釋殘 餘物，並分離層相。用甲基三級-丁基醚（0.8升）進一步萃取 水相。結合的有機相由6.238公斤（25.16重量％的AJ2153)所 組成，或是在芩劑交換後，以分析物為基準，獲得97 6% 的溶液。 實例13:醇衍生物變為氣化物衍生物的轉換反應

實例12製得的溶液用乙腈行溶劑交換，直到水含量 <400 ppm為止。用乙腈（8· 6升）稀釋溶液，並冷卻至〇_2。〇。 〇-5C下，添加石頁醯氣（0.78公斤，6.6莫耳，〇·64當量）。25 35 C下，瘵發大部份的揮發性成份，並將殘餘物溶解於甲 基二級-丁基醚（4.7升）和不飽和的碳酸氫鈉溶液（47升）中。 添加碳酸氫鈉（1·41公斤），以完成中和反應。分離層相， 添加更多的水（12升）至水相中，並用甲基三級_丁基醚（24 升）作進一步的萃取。結合的有機層用飽和的鹽水（0·5升）清 洗。有機溶液重達7.8公斤（16·42重量％)，相當於獲得 72.9%的溶液。 & 97372.doc -53- 200529827 實例14:氣化物衍生物變為亞硝酸鹽的轉換反應 _人以人01^ MeW_ 在一半體積上述實例13製得的溶液被蒸餾出之後，剩下 的另一半則用異丙醇（7.4升）稀釋。進料溶於水（4.6升）中 氰化鈉（1·79公斤，36.6莫耳，4·9當量）和碘化鈉（0·;π公 斤，〇_73莫耳，0·1當量）的溶液。攪拌反應，直到LC顯示 不米下 > 基氯相對苄基氰化物的比例為1 : 1 〇 〇。讓 層相沉澱，並用乙酸乙酯（4·2升）再萃取水層。35_4(rc 下，濃縮結合的有機溶液成為棕色的固體。將其溶解於水 (1.5升）和乙酸乙酯（8·2升）中，並分離層相。水層用乙酸 乙酉曰（2.6升）再卒取，並用丨：丨飽和鹽水和水（丨.3升）的混 合物清洗結合的有機層。25_35t：T，有機溶液以硫酸鎮 (26 a斤）乾燥，過濾，和濃縮。蒸餾出的體積以乙酸乙 酉曰置換，直到水含量<4〇〇ppm。有機溶液重2·68公斤（Μ」 重量％)。相當於獲得91.4%的溶液。 實例15 :生物學分析 以本發明方法製得的化合物具有CRF受體拮抗劑活性。 7化合物當其對CRF抑制作用的Ki值為小於約ι〇,〇〇〇 ηΜ 時可視為具有活性。Ki值可以任何適當的生物學分析方法 測知，像是例如下文所述的分析法。 本文提供者為CRFl受體結合分析的實例，其可用來評 估本發明化合物的生物學活性。該實例也包括細胞膜的分 97372.doc -54- 200529827 離’該細胞膜包含結合分析所用之複製人類CRFi的受 以標準方法自人類海馬中分離出信息核糖核酸。該信息 核糖核酸利用募（去氧胸腺核苷）12-18被逆轉錄，並且編 碼區會在開始的時候因PCR而擴大，以終止密碼子。所得 的PCR斷片會被複製到pGEMV之EcoRV的位置，由此利用 Xhol+Xbal回收利用插入物並將其複製於病.pm3ar(其包 含CMV促進劑SV4(m妾合和快速的聚a訊號，一種非洲淋 巴細胞瘤的複製源，和一潮徽素的可挑選標誌）的 Xhol+Xbal的位置。所得稱之為phchCRFR的表現病媒於 293EBNA細胞中被轉移感染並在4〇〇 黴素存在下挑 選保有游離基因的細胞。合併潮黴素中經4星期淘汰倖存 的細胞，其適合在懸浮液中生長，並且被用來製造下文所 述結合分析试驗用的薄膜。然後將包含約1 X 1 〇 8之經懸浮 細胞的各別整份加以離心，以形成小藥丸，並將其作冷来 處理。 就結合分析而言，茲於1 〇毫升冰冷的組織緩衝液（5〇 mM HEPES 緩衝液 pH 7·〇，包含 10 mM 的 MgCl2 , 2 mM 的 EGTA，1微克/升的抗蛋白酶肽，i微克/毫升的leupeptin和 1 4克/耄升的月蛋白酶抑制素）中同質化包含上述以 hCRFRl受體轉移感染之293EBNA的冰凍小藥丸。以 40,000xg的速度離心該均質物歷時12分鐘，並於1〇毫升的 組織緩衝液中再同質化所得的小藥丸。再一次以4〇,〇〇〇Xg 的速度進行離心12分鐘，該小藥丸則會再懸浮於一本分析 97372.doc •55- 200529827 試驗待使用的蛋白質中，其濃度為36〇微克/毫升。 結合分析試驗可於一 96井的盤中進行，每一井的容量為 300微升。於每一井中添加5〇微升的測試藥品稀釋液（藥物 的最終濃度範圍為1〇·10到1〇-5Μ)，1〇〇微升的i25L羊_ CRF(125I-〇-CRF)(最終濃度為15〇 pM)和150微升上述的細 胞均等質。然後使用一適當的細胞收集器，於Gf/f濾器 (預先浸泡有0.3%的聚乙烯亞胺）上過濾培養物之前，讓盤 μ在室溢下先培養2小時。在各別移除濾液和以一加碼計 數器評鑑其放射性之前，先用冰冷的分析試樣沖洗濾液兩 次。 試驗藥物之各種不同的稀釋度下，125I-〇_CrF*細胞膜 結合之抑制作用的曲線可以反覆的曲線模擬程式LIGAND 分析’見Munson等人發表於4似/· ㈣·，1980，707, 220中的文章，其全文併入本文中以茲參考，其可提供抑 制反應的Ki值，屆時可用來評量生物學的活性。 測量本發明化合物之CRF!受體拮抗劑活性之其他活體 内的分析試驗係說明於例如心如以/㈣化幻；，1985，"(5, 1653和ι985, 179中，其全文併入本文中以茲 參考。化合物的受體結合活性也可根據Grig〇riadis等人發 表於 Biochemical, Pharmacological 和 Autoradiographic Methods to Study Corticotropin-Releasing Factor ，第 5卷，1991 中所述 方法作評估，其全文併入本文中以茲參考。 實例16 : CRF-刺激之腺嘌呤核苷酸環化酶活性的抑制作用 97372.doc -56- 200529827 本發明化合物的活性可透過CRF-刺激之腺嘌呤核苷酸 %化酶活性的抑制作用來觀察，其可依人發表 於办1987，1，572,文章中所述的方式進行，其全文 併入本文以茲參考。分析試驗於2〇〇毫升緩衝液中，37。〇 下進行10分鐘，該緩衝液包含1〇〇 mM Tris-HCl(37°C下的 pH值為 7.4)，1〇 mM MgCl2，0.4 mM EGTA，0.1% BSA， 1 mM異丁基甲基黃嘌呤（IBMX)，250單位/毫升的磷酸甘 油脂活化酵素，5 mM的磷酸肌胺酸，100 mM的鳥嘌呤核 苷三磷酸鹽，1〇〇 nM oCRF拮抗劑胜肽（濃度範圍為1〇·9到 1〇 6m)和0·8毫克的原濕重組織（約40-60毫克的蛋白質）。 藉添加1 mM的ATP/32P]ATP(約2-4 mCi/管）讓反應開始， 以及藉添加100毫升之5〇 mM的Tris-HCl，45 mM的ATP和 2%的十二烷基硫酸鈉終止反應。為監控〇αμρ的回收，兹 於分離前於每一管中添加1微升的[3H]cAMP(約4〇,〇〇〇 dpm)。由[32p]ATP 分離出[32p]cAMP 的 反應係於Dowex和 氧化紹管柱上連續溶析完成。 實例17 :活體内的生物學分析 本發明化合物的活體内活性可以本技藝範圍内任何一種 可利用和可接受的生物學分析法評估。測試化合物抗焦慮 /舌f生之’舌體内生物學分析的實例包括，，懲罰性飲水試驗，， (y〇ge\ 専尺發表於 Psychopharmc〇l〇gia, ι9ΊΪ，21，\的文 章，其全文併入本文中以茲參考）；”升高的外加性困惑試 驗（Pellow等人發表於丄⑽cz·· Me如心，1985，149 的文旱’其全文併入本文中以茲參考）；，，壓力誘發之正腎 97372.doc -57- 200529827 上腺皮質的釋出試驗ff(Funk等人發表於1996, 70，220的文章，其全文併入本文中以茲參考）；”明亮黑 暗試驗’’（Misslin等人發表於/Vocew，1989，5，119的 文章，其全文併入本文中以茲參考）；”四盤試驗”（：8〇丨55!61 等人發表於/.P/mrmaco/·，1968，4，145的文章，其全文 併入本文中以茲參考）；和”鼠隻反抗試驗電池"（Griebel等 人發表於以.万Μαν.，1997，23，19的文章，其全文併 入本文中以茲參考）。化合物可針對任何齧齒動物或小型 哺乳類動物的物種進行試驗。 測試化合物類似抗抑鬱活性之活體内生物學分析的實例 包括”強迫性暈眩試驗”（P〇rs〇lt等人發表於仏π，1977, 2(5(5，730的文章，其全文併入本文中以茲參考）以及’’CMS 試驗 ’’（Willner 等人發表於 C7//1· NeuropharmacoL, 1992, 15(補充本1)，550A的文章，其全文併入本文中以茲參考）。 其他可用於測試化合物之解焦慮或抗抑鬱活性的模型係描 述於Berridge等人，Brain Research Reviews，1990，15，71 中，其以引用方式完全併入本文。用於測試化合物之其他 指示活性的模型係技藝界所熟知。 97372.doc 58-

Claims (1)

1. 200529827 十、申請專利範圍： 1· 一種製備式I化合物的方法

   其中： Ar為經〇到5個R3取代的苯基或吡啶基； 每一R1和R2各別為Η，（Cl-C8)烷基或（〇1_〇6)烷氧基燒 基； _ 每一 R3各別為Η，鹵素，CN，硝基，（Ci-CO烷基， (CVC4)烷氧基，（CVC4)鹵烷基或（Ci-C4)i烷氧基；和 每一 RA和RB各別為（CVC4)烷基； 包含： (a)胺存在下，在足以製得式II化合物的條件下，

   Αγ 讓式III化合物與ρ〇χ3接觸一段時間 Η

   97372.doc 200529827 胺係選白_ w π #，# w 自一異丙基乙基胺，二乙基苯基胺，二異丙基笨 月安 9 一 y 〜乙基苯胺，二異丙基二異丁基胺，三苄基胺，三 苯基胺 及； 二環己胺’二乙基異丙基胺，其中X為鹵素 (b)在足以製得式〗化合物的條件下，讓該式η化合物和 NHRlR2接觸一段時間。 2_如睛求項1之方法，其中X為C1。 3·如睛求項1之方法，其中該胺為二異丙基乙基胺。 4_如5月求項1之方法，其中該NHWR2為 Η 、C%

   5·如請求項1之方法，其中Ra為甲基。 6·如請求項1之方法，其中以為甲基。 7.如印求項1之方法，其中步驟（b)的該接觸反應係於銨鹽 存在下進行。 8·如凊求項7之方法，其中該銨鹽選自氯化苄基三乙基 銨，氯化苄基三丁基銨或氣化甲基三烷基（C8-Cig)銨。 9·如睛求項7之方法，其中該銨鹽選自氯化苄基三丁銨。 10·如印求項丨之方法，其中步驟（b)的該接觸反應係於有機 溶劑存在下進行。 11·如請求項10之方法，其中該有機溶劑包含一或一種以上 的曱基二級丁基醚，乙腈，異丙基乙酸鹽，甲苯或丨-氣 丁烷。 97372.doc 200529827 1 2 ·如清求項1 〇之方法 丁基醚的混合物。 其中該有機溶劑為 乙腈和甲基三級 1 3 ·如明求項1之方法’其中步驟（勾的該接觸反應係於約$ 〇 至約7〇。(：的溫度下進行。 14.如請求項！之方法，其中該式η化合物在步驟之該接 觸反應之前不需加以分離。 1 5 ·如睛求項1之方法，其中：

   Ar為2-甲基-4-曱氧基苯基； Rl為甲氧基乙基； R2為甲氧基乙基； !^"為甲基；以及 RB為甲基。 16. 如請求項1之方法，其中： 氣-5-氟-4-甲氧基苯基；

   R1為 Η ; R為戊-3-基； RA*甲基；以及 RB為甲基。 17. 如請求項1之方法，其中： Ar為2-甲基_6•甲氧基吡啶-3-基， R1為 Η ; R2為丁 基； RA為甲基·，以及 ^為甲基。 97372.doc 200529827 18·如請求項1之方法’其中該式111化合物為⑷在足以提供 該式III化合物的條件下，讓式IV化合物： 〇

   彳（R )c(〇r )接觸一段時間而製得，其中R4為烷 基。 19·如睛求項18之方法，其中R4為曱基。 20·如請求項18之方法，其中妒為甲基。 2 1 ·如睛求項1 §之方法，其中rB為甲基。 22·如睛求項18之方法，其中步驟卜）的該接觸反應係於酸或 驗' 存在下進行。 23·如請求項22之方法，其中步驟〇)的該接觸反應係於酸存 在下進行。 24.如請求項23之方法，其中該酸為對-甲苯磺酸。 25·如請求項18之方法，其中步驟（c)的該接觸反應係於有機 溶劑存在下進行。 26·如請求項25之方法，其中該有機溶劑包含卜甲基-2-吡咯 口定酉同。 27。如請求項18之方法，其中步驟（c)的該接觸反應係於約4〇 至約100°C的溫度下進行。 28·如請求項18之方法，其中該式…化合物為（d)在足以提供 該式IV化合物的條件下，讓式v化合物： 97372.doc 200529827 NH2 HN NC

   Ar V 人〇 和鹼接觸一段時間而製得。 29·如請求項28之方法，其中該鹼為1，8·二氮雙環[5·4·〇]十 一碳-7-烯（DBU)。 30·如請求項28之方法，其中步驟（d)的該接觸反應係於有機 溶劑存在下進行。 31·如請求項30之方法，其中該有機溶劑包含丨-甲基-2-吡咯 σ定酉同。 32.如請求項28之方法，其中步驟（d)的該接觸反應係於約〇 至約30°C的溫度下進行。 33·如請求項28之方法，其中該式v化合物為⑷在足以提供 該式vi化合物的條件下，讓式VI化合物： OY nc^~rS Ar VI 和半卡腺或其酸加成鹽接觸一段時間而製得，其中Y為 驗金屬或zlz2，其中Ζ1為鹵素且Ζ2為一鹼土金屬。 34·如請求項33之方法，其中Υ為Κ。 35_如印求項33之方法，其中步驟（d)的該接觸反應係於約3 至約5的pH值下進行。 97372.doc 200529827 其中步驟（e)的該接觸反應係於酸存 36.如請求項4之方法 在下進行。 37·如請求項36之方法 38·如請求項33之方法 溶劑中進行。 其中該酸為乙酸。 其中步驟（e)的該接觸反應係於水性 39·女明求項38之方法，其中該水性溶劑包含醇。 〇·女明求項39之方法，其中該醇為異丙醇。 41 · 士明求項3 3之方法，其中步驟卜）的該接觸反應係於約μ 至約4〇°C的溫度下進行。 42·如响求項33之方法，其中該式yi化合物為⑴在足以提供 該式vii化合物的條件下，讓式¥11化合物：

   和具有如下化學式的加成試劑，於（三級Bu0)Y存在下接 觸一段時間而製得：

   每一 RB和Rc各別為（Cl-C4)烷基。 43·如請求項42之方法，其中γ為κ。 44·如請求項42之方法，其中步驊（f)的該接觸反應係於約30 至約50°C的溫度下進行。 45· —種製備式II化合物的方法： 97372.doc 200529827

   其中： Ar為經0到5個R3取代的苯基或吡啶基； X為鹵素； 每一 R3各別為Η，鹵素，CN，硝基，（CVC4)烷基， (CVC4)烷氧基，（Ci-CJ鹵烷基或（CVC4)鹵烷氧基；且 每一 R^nRB各別為（CVC4)烷基； 包含胺存在下，在足以製得該式II化合物的條件下，讓 式III化合物：

   與POX3接觸一段時間，該胺係選自二異丙基乙基胺，二 乙基苯基胺，二異丙基苯胺，二乙基苯胺，二異丙基二 異丁基胺，三苄基胺，三苯基胺，三環己胺或二乙基異 丙基胺。 46·如請求項45之方法，其中X為C1。 47·如請求項45之方法，其中該胺為二異丙基乙基胺。 48. 如請求項45之方法，其中該接觸反應係於銨鹽存在下進 行。 49. 如請求項48之方法，其中該銨鹽為氣化苄基三乙基銨， 97372.doc 200529827 氣化苄基三丁基銨或氯化甲基三烷基（C8_Cig)銨。 50.如凊求項48之方法，其中該銨鹽為氯化苄基三丁基銨。 5 1·如凊求項45之方法，其中該接觸反應係於有機溶劑中進 5 2.如晴求項5丨之方法，其中該有機溶劑包含一或一種以上 的甲基三級丁基醚，乙腈，異丙基乙酸鹽，甲苯或丨_氣 丁烷。 53·如請求項5丨之方法，其中該有機溶劑為乙腈和甲基三級 丁基醚的混合物。 54·如請求項45之方法，其中該接觸反應係於約5〇至約7〇。〇 的溫度下進行。 55.如請求項45之方法，其中Ar為2-甲基-4-曱氧基苯基，2-氣-5-氣-4-曱氧基苯基或2 -甲基-6-甲氧基p比σ定-3-基。 56· —種製備式m化合物的方法：

   其中： Ar為經〇到5個R3取代的苯基或吡啶基； 每一 R3各別為Η，鹵素，CN，硝基，（CVC4)烷基， (C〗-C4)烷氧基，（Ci-CJ鹵烷基或（CVC4)鹵烷氧基；且 每一 RA*RB各別為（CVC4)烷基； 包含在足以製得該式III化合物的條件下，讓式IV化合 97372.doc 200529827 物： Ο _ 人 Ar IV ”（R )C(0R4)接觸一段時間，其中R4為（C1_C4)烷基。 57. 58. 59. 60. 61. 62. 63. 64. 65. 66. 如請求項56之方法，其中R4為甲基。 女明求項56之方法，其中以八為甲基。 女口月求項56之方法，其中rB為甲基。 如睛求項5 6t、土 -, 、 之万击’其中該接觸反應係於酸或鹼存在下 進行。 如請求j§ +吹*、上 、U之万法，其中該接觸反應係於酸存在下進 行0 其中該酸為對-甲 其中該接觸反應 其中該有機溶劑 苯績酸。 係於有機溶劑存在 包含1-甲基-2-吡咯 如請求項61之方法 如請求項56之方法 下進行。 如請求項63之方法 σ定綱。 士 口晴求^工頁S 6 JU- 、 / ’其中該接觸反應係於約40至約i〇〇°c 的温度下進行。 、 一種製備式IV化合物的方法

   97372.doc IV 200529827 其中： Ar為經0到5個R3取代的苯基或吡啶基； 每一 R3各別為Η，鹵素，CN，硝基，（CVC4)烷基， (C1-C4)烧氧基’（Ci_C4)鹵烧基或（C1-C4)鹵烧氧基；且 RB為（CVC4)烷基； 包含在足以製得該式1¥化合物的條件下，讓式V化合 物： HH2 HN NC

   Rb 人。 ” 1,8-—氮雙環[5.4.〇]十一碳-7-烯（DBU)接觸一段時 間，其中為(Cl_C4)烷基。 6 7.如請求項6 6之古、1 、 <万法’其中該接觸反應係於有機溶劑中進 行。 68.如請求項67 々古’其中該有機溶劑包含1 -甲基-2-吡咯 口定 ig 〇 69·女δ月求項66之方、去 、西危个 成’其中該接觸反應係於約0至約30t的 /皿度下進行。 的方法 7〇· 一種製備式V化合物 97372.doc -10- 200529827

   Rs HN NC

   Ar V Ar為經〇到5個R3取代的苯基或吡啶基； 每一 R3各別為Η，鹵素，CN，硝基，（q-CU)烷基， (C丨-C4)烷氧基，（Ci-C4)鹵烷基或（Ci_c4)鹵烷氧基；且 R為（C1-C4)烧基， 包含在足以製得該式VI化合物的條件下，讓式vi化合 物： OY nc^~r Ar vi 和半卡腙或其酸加成鹽接觸一段時間，其中γ為鹼金屬 或ZlZ2，其中Ζ1為鹵素且Ζ2為一鹼土金屬。 71_如請求項70之方法，其中Υ為Κ。 72·如請求項70之方法，其中RB為甲基。 73·如明求項7〇之方法，其中該接觸反應係於約3至約5的pH 值下進行。 74·如明求項7〇之方法，其中該接觸反應係於酸存在下進 行。 75·如明农項74之方法，其中該酸為乙酸。 97372.doc 200529827 76. 77. 78. 79. 80. 如請求項7〇之方法，其中 r Θ接觸反應係於水性溶劑中進 行。 如明求項76之方法’其中該水性溶劑包含醇。 如:求項77之方法，其中該醇為異丙醇。 θ长員7G之方法’其中該接觸反應係於約別至約4〇。〇 的溫度下進行。 一種製備式VI化合物的方法： OY

   Ar VI 其中： Ar為經〇到5個R3取代的苯基或吡啶基； 每一 R3各別為Η，鹵素，CN，硝基，（CVC4)烷基， (Ci-C4)烷氧基，（Ci-C4)鹵烷基或（CVC4)鹵烷氧基；且 R為（C1-C4)烧基， 包含在足以製得該式VI化合物的條件下，讓式VII化合 物： NC、 Ar VII 和具有如下化學式的加成試劑，於（三級BuO)Y存在下接 觸一段時間： Ο R3 人〇Rc 其中每一RB*RC各別為（Ci-C4)烷基。 97372.doc -12- 200529827 8 1 ·如請求項80之方法，其中該加成試劑為乙酸乙酯。 82·如請求項8〇之方法，其中該接觸反應係於約3〇至約sere 的溫度下進行。 83· —種式卩或见化合物：

   其中： Ar為2-甲基-4-甲氧基苯基，2-氯-5-氟曱氧基苯基 或2 -曱基-6 -甲氧基外bσ定-3 -基， X為C1 ;且 每個RA和rb為甲基。 84· —種式IV，V或VI化合物··

   其中： Y為鹼金屬或Z1/2，其中： z1為鹵素；且 Z2為一驗土金屬； Ar為經0到5個R3取代的苯基或吡啶基； 每一 R3各別為Η，鹵素，CN，硝基，（Cl-C4)烷基， 97372.doc •13- 200529827 (C1-C4)烷氧基，（Cl_c4)_烷基或（C1_C4)鹵烷氧基；且 每—RA和rb為甲基。 85. 86. 87. 如凊求項84之化合物，其中Αι^孓甲基·4_甲氧基笨基 2υϋ甲氧基笨基或2_甲基-6_甲氧基Ρ比咬-3-基。 如5月求項8 4之化合物，其中γ為κ。 種製備式VIII化合物的方法：

   VIII

   其中每一A1，A2，A3，Α4和 Α5 各別為 F，C1，Br，（(V c4)烷基，（Cl-C4)鹵烷基，（Ci_c4)烷氧基或（Ci_c〇_^ 氧基； & 包含：（a)於酸存在下，在足以製得該式vm化合物的條 件下’讓式IX化合物：

   IX 和氰化物接觸一段時間。 88. 89. 90. 如請求項87之方法，其中該接觸反應係於銨鹽存在下進 行。 如請求項88之方法，其中該銨鹽為苄基三烷基銨鹽。 如請求項88之方法，其中該銨鹽為氯化苄基三丁基銨。 97372.doc -14- 200529827 91·如蜎來項87之方法，其中 主 &七、的氣化物為氰化鈉。 92·如明未項87之方法，其 豕接觸反應之前，該式IX化 合物被溶解於有機溶劑中， 亚且忒虱化物和銨鹽係溶解 於水性溶劑中。 93·如請求項92之方法，其令 " ^ 尋反應係於兩相系統中進 4丁0 Α3為甲氧 94. 如請求項87之方法，其中aUci a2^ 基’ A4為ρ^Α5為η。 95. 如請求項87之方法，其中該酸為乙酸。 96·如請求項87之方法， 式-合㈣件下，二=:一)在足以製得

   X 和HBr接觸一段時間而製得。 97.如明求項96之方法，其中該式X化合物 式X化合物的條件下，令式XI化合物： '⑷足以製得

   和還原劑捿觸一段時間而製得。 9 8 ·如請求項9 7之士、4· , 方法，其中該還原劑為雙（夂甲氡基 97372.doc 200529827 基）氫化鋁鈉（Red-A1)。 99.如請求項97之方法，其中兮牛 溶劑中進行。 "/驟（c)的接觸反應係於有機 100·如請求項99之方法，复 有機溶劑為甲苯。 101·如明未項97之方法，其 5 ^20°γλ, 、中驟〇)的接觸反應係於約10 至約2〇C的溫度下進行。 102·—種製偫式χι化合物的方法·· F

   〇CH3 XI 令式XII化合 包含在（a)足以製得式幻化合物的條件下 物： COCI F F 和曱氧化物接觸一段時間而製得。 103·如請求項1〇2之方法，盆中咭甲毚仆队技 Υ β T乳化物係溶解於曱醇 中〇 104·如請求項1〇2之方法，其中該式ΧΙΙ化合物係於足以製 得該式XII化合物的條件下，令式χΙΠ化合物： 97372.doc •16- 200529827

   F Xffl 和草醯氯接觸一段時間而製得。 105. 如請求項104之方法，其中該步驟（b)的接觸反應係於二 甲基甲醯胺（DMF)存在下進行。 106. 如請求項104之方法，其中該步驟卬）的接觸反應係於曱 本存在下進行。 107· —種式VIII，IX或X的化合物：

   其中A1為C卜A2為H，A3為甲氧基，A4為MW為H。 108· —種式XI化合物：

   〇ch3 XI 109· —種製備式XIV化合物的方法 97372.doc -17. 200529827

   其中 B1，B2，B3和 B4各別為 F，Cl，Br，（CrC4)烧基， (Ci-C4)鹵烧基，（C1-C4)烧氧基或（CVC4)鹵院氧基； 包括（a)在足以製得該式XIV化合物的條件下，令式xv化 合物：

   和氰化物接觸一段時間。 110·如請求項109之方法，其中所提供的氰化物為氰化鈉。 111·如請求項109之方法，其中該接觸反應係於碘化物鹽存 在下進行。 112·如請求項109之方法，其中Βι為η，B2為η，B3為甲氧基 且Β4為甲基。 113·如請求項109之方法，其中該式χν化合物係於（b)足以製 得該式xv化合物的條件下，令式χνι化合物： B1

   其中該氯化劑為甲磺醯氣（MsCl)。 和氣化劑接觸一段時間而製得。 114·如請求項113方法， 97372.doc -18- 200529827 β3為甲氧基 115.如請求項113之方法，其中B1為Η，B2為η， 且Β4為曱基。 116.如請求項113之方法，其中式χνι化合物係於（〇足以製得 式XVI化合物的條件下，令式χνπ化合物： gi OHC^

   和一還原劑接觸一段時間而製得。 1Π·如請求項U6之方法，其中該還原劑為NaBH4。 Π8•如請4求項116之方法，其中b、h，b、h，b3wm 且B為曱基。 Β1 Br、Α 分 119.如凊求項116之方法’其中該式χνιι化合物係於⑷足以 製得該式χνπ化合物的條件下，令式xvm化合物：

   B4 Χνπΐ 試劑接觸而製 d 和正BuLi接觸一段時間 + 1 接著和甲酿化 得。 120·如請求項116之方法， 胺（DMF) 〇 121.如請求項119之方法， 且B4為甲基。 122· 一種製備式XIX化合物 其中該甲醯化試劑為二甲基甲 醯 其中B1為Η，B2為H，B3為甲氧基 的方法： 97372.doc '19- 200529827

   OB5 XIX 其中： (c 1 -C4)鹵炫基 (Ci- B 為 F ’ Cl ’ Br，（CrC4)燒基 C4)烧氧基或（Cl_C4)i烷氧基；且 B5為（CVC4)烷基； 包含： ⑷在足以製㈣式XIX化合物的條件下，令式χχ化合 物：

   XX 和B5cr接觸一段時間。 123·如凊求項122之方法，其中b 5為甲基。 124·如請求項122之方法，其中B4為甲基。 125.如請求項122之方法，其中κχχ化合物係於沙）足以製得 該式XX化合物的條件下，令式χχι化合物或其酸加成 鹽：

   XXI 於酸存在下，和亞硝酸鹽與以接觸一段時間而製得。 126. 如請求項125之方法，其中B4為甲基。 127. 如睛求項125之方法，其中所提供之該亞硝酸鹽為 97372.doc -20- 200529827 NaN〇2 〇 128·如請求項125之方法，其中該酸為HBr。 129.如請求項125之方法，其中該式χχι化合物係於（〇足以製 得該式XXI化合物的條件下，令式χχπ化合物··

   XXII 於酸存在下，和Βι*2接觸一段時間而製得。 130. 如請求項129之方法，其中Β4為甲基。 131. 如請求項129之方法，其中該酸為乙酸。 132. —種製備式XX化合物之方法：

   N 'Br XX ，（CVC4)i 烷基，（c「 其中 B4為 F，C卜 Br，基 CO烧氧基或（c^co鹵烧氧基； 包括於足以製得該式XX化合物的條件下，令式χχΙ化合 物或其酸加成鹽

   N nh2 XXI

   133.如請求頊132之方法，：_

   NaNO” 97372.doc 200529827 135.如請求項132之方法，其中該酸為HBr。 136· —種製備式XXI化合物之方法：

   XXI nh2 •C4)鹵烷基，（cv 下，令式XXII化 其中 B4為F，a，Br，（CVC4)烷基，（C C4)烷氧基或（C^CJ鹵烷氧基； 包含於足以製得該式XXI化合物的條件 合物：

   於酸存在下，和Br*2接觸一段時間。 137·如請求項136之方法，其中B4為甲基。 138·如請求項136之方法，其中該酸為乙酸 139· —種式XIV或XV之化合物： B1

   B2

   B1 其中B1為Η，B2為Η，B3為f氧基且 97372.doc -22- 200529827 七、 指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 八、 本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式： R1、汨2

   Αγ I

   97372.doc 4