TR201812360T4 - Bi̇leşi̇kler ve bunlarin kullanim metotlari - Google Patents

Abstract

Burada tarif edilenler, farmasötik olarak kabul edilebilir tuzları, solvatları ve hidratları da dahil olmak üzere, hetero halkalardır. Söz konusu bileşikler, örneğin bir hastada glutaminazı inhibe etmek yoluyla, burada tarif edilen bir bozukluğu tedavi etmek üzere kullanılabilir. Gene burada, burada sağlanan bir bileşiği içeren bileşimler (örneğin farmasötik bileşimler) ve bu tip bileşimlerin, örnek olması bakımından, anormal bir glutaminaz fonksiyonu veya artmış glutaminaz aktivitesi ile ilişkili, kanser gibi hastalıkları ve durumları tedavi etme metotlarında kullanımı da sağlanmaktadır.

Description

Tarifnamenin ilerleyen kisimlarinda ortaya koyulan ve sekillerde gösterilen yapilarin detaylarinin ve bilesenlerin düzenleme sekillerinin kisitlayici olmalari amaçlanmamaktadir.

Yapilanmalar çesitli yollarda uygulanabilir veya gerçeklestirilebilir. Ayrica burada kullanilan ifadeler ve terimler, tarif etme amacina hizmet eder ve sinirlayici olarak yorumlanmamalidir. "içerir", "ihtiva eder", "kapsar" veya "sahiptir" terimleri ve bunlarin varyasyonlari, kendilerinden önce sayilan unsurlarin ve bunlarin es degerlerinin ve ayrica ilave unsurlarin kapsanmasini kastetmektedir.

Bilesikler Burada, glutaminazi inhibe eden bilesikler ve bilesimler tarif edilir. Glutaminazi inhibe eden bilesikler, örnegin neoplastik bozukluklar (mesela kanser) gibi bozukluklari tedavi etmek için kullanilabilir.

Burada, bir formül (I) bilesigi veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu, ya da bir formül (I) bilesigini veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzunu içeren bir farmasötik bilesim tarif edilmekte olup: P Formül (I), X; istege göre substitüe edilmis bir Ca-C7 sikloalkilen anlamina gelir; her bir W, Y ve Z; bagimsiz olarak -S-, -CH=, - -, - =, ya da -NH- anlamina gelir, ancak her bir halka için W, Y ve Z degiskenlerinin en az biri, -CH= olamaz; her bir R1 ve R2; bagimsiz olarak -NH2, -N(R3)-C(O)-R4. -C(O)-N(R3)-R4,-N(R3)- C(O)-O-R4, -N(R3)-C(O)-N(R3)-R4 veya -N(R3)-C(O)-SR4 anlamina gelir; her bir R3; bagimsiz olarak hidrojen, 01.6 alkil veya ariI anlamina gelir; her bir R4; bagimsiz olarak 01-6 alkil, aril, heteroaril, aralkil, heteroaralkil, sikloalkil, sikloalkilalkil, heterosiklilalkil, ya da heterosiklil anlamina gelir ve bunlarin her biri 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis durumda bulunur; her bir R5; bagimsiz olarak CH, alkil, 01.6 alkoksi, -O-C1-6 alkilenC1.6 alkoksi, -O- heteroaril, aralkil, heteroaralkil, heterosiklilalkil, heterosiklil, siyano, halo, okso, - burada bahsedilen alkil, C1.0 alkoksi, -O-C1.6alkilenC1_6 alkoksi, -O-heterosiklil, CH, tioalkoksi, CM, haloalkil, C3-7 sikloalkil, 03.7 sikloalkilalkil, aril, heteroaril, aralkil, heteroaralkil, heterosiklilalkil, heterosiklil, -SOz-Cm alkil, -NO2, -N(R7)-C(O)-C1_6 N(R7)2 ise 0-3 adet R8 ile istege göre substitüe edilir; veya iki bitisik R5 grubu, bagli olduklari atomlar ile bir arada bir sikloalkil veya heterosiklil meydana getirir; her bir R6; bagimsiz olarak hidrojen, floro, 01-5 alkil, -OH, -NH2, -NH(CH3), - N(CH3)2, ya da 01.5 alkoksi anlamina gelir; her bir R7; bagimsiz olarak hidrojen veya 01.8 alkil anlamina gelir; her bir R8; bagimsiz olarak halo, CH; alkil, 01-6 haloalkil, -OH, -N(R7)2, ya da 01.6 alkoksi, -O-C1.salkilenC1_(,` alkoksi, CN, N02, -N(R7)-C(O)-C1.6 alkil, - C(O)N(R7)2, - N(R7)S(O)1.2C1.5 alkil, ya da -S(O)2N(R7)2 anlamina gelir; m; 0, 1, ya da 2 olur; n; 0, 1, ya da 2 olur; o; 1, 2 veya 3 olur; ve p; 1, 2 veya 3 olur; ancak (1), X, substitüe edilmemis siklopropil oldugunda, R1 ve R2 degiskenlerinin ikisi birden -NH2 veya -NH-C(O)-fenil olamaz; (2), X, substitüe edilmis siklobütil veya substitüe edilmis siklopentil haricinde bir anlama sahiptir; ve (3), X, substitüe edilmemis siklopropil ve m ile n degiskenlerinin ikisi de 1 oldugunda, bu durumda R1 ve R2 degiskenlerinin ikisi birden -NH-C(O)-benzil Gene burada, bir formül (l) bilesigi veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu, ya da bir formül (I) bilesigini veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzunu içeren bir farmasötik bilesim tarif edilmekte olup: ° Formül (I), X; istege göre substitüe edilmis bir Cg'C7 sikloalkilen anlamina gelir; her bir W, Y ve Z; bagimsiz olarak -S-, -CH=, - -, - =, ya da -NH- anlamina gelir, ancak her bir halka için W, Y ve Z degiskenlerinin en az biri, -CH= olamaz; her bir R1 ve R2; bagimsiz olarak -NHZ, -N(R3)-C(O)-R4, -C(O)-N(R3)-R4,-N(R3)- C(O)-O-R4, -N(R3)-C(O)-N(R3)-R4 veya -N(R3)-C(O)-SR4 anlamina gelir; her bir R3; bagimsiz olarak hidrojen, CH, alkil veya aril anlamina gelir; her bir R4; bagimsiz olarak 01-6 alkil, aril, heteroaril, aralkil, heteroaralkil, sikloalkil, sikloalkilalkil, heterosiklilalkil, ya da heterosiklil anlamina gelir ve bunlarin her biri 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis durumda bulunur; sikloalkil, 03.7 sikloalkilalkil, aril, heteroaril, aralkil, heteroaralkil, heterosiklilalkil, heterosiklil, siyano, halo, okso, -OH, 'OCFg, -OCHF2, -SOz-CH; alkil, -NO2, -N(R7)- C(O)-C1_6 alkil, -N(R7)2 anlamina gelir, ya da iki bitisik R5 grubu, bagli olduklari atomlar ile bir arada bir heterosiklil meydana getirir; her bir R5; bagimsiz olarak hidrojen, floro, 01-5 alkil, -OH, -NH2, -NH(CH3), - N(CH3)2, ya da 01-5 alkoksi anlamina gelir; her bir R7; bagimsiz olarak hidrojen veya CH; alkil anlamina gelir; m; 0, 1, ya da 2 olur; n; 0, 1, ya da 2 olur; o; 1, 2 veya 3'tür; ve p; 1, 2 veya 3 olur; ancak (1), X, substitüe edilmemis siklopropil oldugunda, R1 ve R2 degiskenlerinin ikisi birden -NH2 veya -NH-C(O)-fenil olamaz; (2), X, substitüe edilmis siklobütil veya substitüe edilmis siklopentil haricinde bir anlama sahiptir; ve (3), X, substitüe edilmemis siklopropil ve m ile n degiskenlerinin ikisi de 1 oldugunda, bu durumda R1 ve R2 degiskenlerinin ikisi birden -NH-C(O)-benzil Gene burada, bir formül (l) bilesigi veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu, ya da bir formül (I) bilesigini veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzunu içeren bir farmasötik bilesim tarif edilmekte olup: ° Formül (I), X; C3-C7 sikloalkilen anlamina gelir; her bir W, Y ve Z; bagimsiz olarak -S-, -CH=, -O-, -N=, ya da -NH- anlamina gelir, ancak W, Y ve Z degiskenlerinin en az biri, -CH= olamaz; her bir R1 ve R2; bagimsiz olarak -NH2, -N(R3)-C(O)-R4, -C(O)-N(R3)-R4,-N(R3)- C(O)-O-R4, -N(R3)-C(O)-N(R3)-R4 veya -N(R3)-C(O)-SR4 anlamina gelir; her bir R3; bagimsiz olarak hidrojen, 01.6 alkil veya aril anlamina gelir; her bir R4; bagimsiz olarak CH, alkil, ariI, heteroaril, aralkil, heteroaralkil, sikloalkil, sikloalkilalkil, heterosiklilalkil, ya da heterosiklil anlamina gelir ve bunlarin her biri 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis durumda bulunur; tioalkoksi, 01.6 haloalkil, 03.7 sikloalkil, C3.7 sikloalkilalkil, aril, heteroaril, aralkil, heteroaralkil, heterosiklilalkil, heterosiklil, siyano, halo, okso, -OH, -OCF3, -OCHF2, S(O)2N(R7)2, -N(R7)2, -C1.5alkilen-N(R7)2 anlamina gelir, burada bahsedilen alkil, C3-7 sikloalkilalkil, aril, heteroaril, aralkil, heteroaralkil, heterosiklilalkil, heterosiklil, - substitüe edilir; veya iki bitisik R5 grubu, bagli olduklari atomlar ile bir arada bir sikloalkil veya heterosiklil meydana getirir; her bir R6; bagimsiz olarak hidrojen, floro, C1-6 alkil, -OH, -NH2, -NH(CH3), - N(CH3)2, ya da 01.5 alkoksi anlamina gelir; her bir R7; bagimsiz olarak hidrojen veya 01-5 alkil anlamina gelir; alkoksi, -O-Ci.salkilenC1_5 alkoksi, CN, N02, -N(R7)-C(O)-C1-5 alkil, - C(O)N(R7)2, - N(R7)S(O)1.2C1.5 alkil, ya da -S(O)2N(R7)2 anlamina gelir; m; 0, 1, ya da 2 olur; ri; 0, 1, ya da 2 olur; 0; 1, 2 veya 3 olur; ve p; 1, 2 veya 3'tür; ancak (1) X, substitüe edilmemis siklopropil oldugunda, R1 ve R2 degiskenlerinin ikisi birden NH-fenil olamaz; ve (2) X, substitüe edilmis siklobütil veya substitüe edilmis siklopentil haricinde bir anlama sahip olur.

Gene burada, bir formül (I) bilesigi veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu, ya da bir formül (I) bilesigini veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzunu içeren bir farmasötik bilesim tarif edilmekte olup: /jggm/îkrw (111'sz YQ> X; C3-07 sikloalkilen anlamina gelir; RF Formül (i), ancak W, Y ve Z degiskenlerinin en az biri, -CH= olamaz; her bir R1 ve R2; bagimsiz olarak -NH2, -N(R3)-C(O)-R4, -C(O)-N(R3)-R4,-N(R3)- C(O)-O-R4, -N(R3)-C(O)-N(R3)-R4 veya -N(R3)-C(O)-SR4 anlamina gelir; her bir R3; bagimsiz olarak hidrojen, 01-6 alkil veya aril anlamina gelir; her bir R4; bagimsiz olarak Cm alkil, aril, heteroaril, aralkil, heteroaralkil, sikloalkil, sikloalkilalkil, heterosiklilalkil, ya da heterosiklil anlamina gelir ve bunlarin her biri 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis durumda bulunur; her bir R5; bagimsiz olarak CH; alkil, CH; alkoksi, CH, tioalkoksi, C1.6 haloalkil, C3_7 sikloalkil, C3_7 sikloalkilalkil, aril, heteroaril, aralkil, heteroaralkil, heterosiklilalkil, heterosiklil, siyano, halo, okso, -OH, -OCF3, -OCHFZ, -SOz-CH; alkil, -NOZ, -N(R7)- C(O)-C1-6 alkil, -N(R7)2 anlamina gelir, ya da iki bitisik R5 grubu, bagli olduklari atomlar ile bir arada bir heterosiklil meydana getirir; her bir R6; bagimsiz olarak hidrojen, floro, CM; alkil, -OH, -NH2, -NH(CH3), - N(CH3)2, ya da 01-5 alkoksi anlamina gelir; her bir R7; bagimsiz olarak hidrojen veya 01-5 alkil anlamina gelir; m; 0, 1, ya da 2 olur; n; 0, 1, ya da 2 olur; o; 1, 2 veya 3 olur; ve p; 1, 2 veya 3'tür; ancak (1) X, substitüe edilmemis siklopropil oldugunda, R1 ve R2 degiskenlerinin ikisi birden NH-fenil olamaz; ve (2) X, substitüe edilmis siklobütil veya substitüe edilmis siklopentil haricinde bir anlama sahip olur.

Bazi yapilanmalara göre X, substitüe edilmemis siklopropil anlamina gelir. Bazi yapilanmalara göre X, substitüe edilmemis siklobütil anlamina gelir. Bazi yapilanmalara göre X, substitüe edilmemis siklopentil anlamina gelir. Bazi yapilanmalara göre X, sikloheksil anlamina gelir. Bazi yapilanmalara göre X, sikloheptil anlamina gelir.

Bazi yapilanmalara göre her bir Y, -N= anlamina gelir. Bazi yapilanmalara göre her bir Z, - N- anlamina gelir. Bazi yapilanmalara göre her bir W, -8- anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir W, -S-; her bir Y, -N=; ve her bir 2 ise -N= anlamina gelir.

Bazi yapilanmalara göre o, 1 olur. Bazi yapilanmalara göre p, 1 olur. Bazi yapilanmalara göre o, 1 ve p ise 1 olur.

Bazi yapilanmalara göre m, 0 olur. Bazi yapilanmalara göre n, 0 olur. Bazi yapilanmalara göre m, 0 ve n ise 0 olur. Bazi yapilanmalara göre R1 ve R2, ayni olur. Bazi yapilanmalara göre R1 ve R2, farkli olur.

Bazi yapilanmalara göre m, 1 olur. Bazi yapilanmalara göre n, 1 olur. Bazi yapilanmalara göre n, 1 ve m ise 1 olur. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R6, hidrojen anlamina gelir. Bazi yapilanmalara göre R1 ve R2, ayni olur. Bazi yapilanmalara göre R1 ve R2, farkli olur.

Bazi yapilanmalara göre R1 ve R2 degiskenlerinin her biri -N(R3)-C(O)-R4 anlamina gelir ve burada her bir R3, hidrojen ve her bir R4 ise aralkil veya heteroaralkil olur ve bunlarin her biri, 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis durumda bulunur. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre R1 ve R2, ayni olur.

Bazi yapilanmalara göre R1 ve R2 degiskenlerinin her biri, -N(R3)-C(O)-R4 olur ve burada her bir R3 ise hidrojen anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0- 3 adet R5 ile substitüe edilmis aralkil anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre R1 ve R2, ayni olur.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0 adet R5 ile substitüe edilmis aralkil (örnegin benzil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, bir adet R5 ile substitüe edilmis aralkil (örnegin benzil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska bazi yönlerine göre her bir R5, -N(CH3)2 anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, Cm alkoksi (örnegin metoksi veya izopropoksi) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, -O-heterosiklil (örnegin -0- oksetan) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, halo (örnegin floro veya kloro) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, -NHZ anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, - SOz-CHS anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, - NHC(O)CH3 anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, -N02 anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, siyano anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, 01-6 haloalkoksi (örnegin triflorometoksi) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, Cm haloalkil (örnegin triflorometil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, 01.6 alkil (örnegin metil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, iki adet R5 ile substitüe edilmis aralkil (örnegin benzil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha bazi baska yönlerine göre iki R5, halo (örnegin floro) ve diger iki R5 ise 01.6 alkoksi (örnegin metoksi) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, halo (örnegin floro) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, 01.6 alkoksi (örnegin metoksi) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha farkli yönlerine göre iki bitisik R5 grubu, bagli olduklari atomlar ile bir arada, asagidaki yapiya sahip bir grubu verecek sekilde, bir heterosiklil halkasi meydana getirir: Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4; 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis heteroaralkil (örnegin 2-piridinilmetil, 2-piridiniletil, 3-piridinilmetil, 4-piridinilmetil, 2- pirazinilmetil, 2-ti0fenilmetil, 2-ind0lilmetil, 4-ind0lilmetil, 2-pirimidinilmetil veya 2- tiazolilmetil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4; 0 adet R5 ile substitüe edilmis heteroaralkil (örnegin 2-piridinilmetil, 2-piridiniletil, 3-piridinilmetil, 4- piridinilmetil, 2-pirazinilmetil, 2-ti0fenilmetil, 2-ind0lilmetil, 3-indolilmetil, 4-ind0lilmetil, 2- pirimidinilmetil veya 2-tiazolilmetil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin diger yönlerine göre her bir R4; bir adet R5 ile substitüe edilmis heteroaralkil (örnegin 5-izoksazolil, 2- piridinilmetil veya 3-indolilmetil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska bazi yönlerine göre her bir R5, C1_6 alkil (örnegin metil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, 01.5 alkoksi (örnegin metoksi) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, siyano anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, -N(CH3)2 anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, -NHC(O)CH3 anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, halo (örnegin bromo) anlamina gelir.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis 01-6 alkil (örnegin metil, etil, n-propil veya izopropil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0 adet R5 ile substitüe edilmis CH; alkil (örnegin metil, etil, n- propil veya izopropil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin diger yönlerine göre her bir R4, bir adet R5 ile substitüe edilmis 01-6 alkil (örnegin metil, etil veya tert-bütil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha bazi baska yönlerine göre her bir R5, Cm tioalkoksi (örnegin tiometoksi) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, 01-6 haloalkil (örnegin triflorometil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska yönlerine göre her bir R5, -OH anlamina gelir.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis aril (örnegin fenil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0 adet R5 ile substitüe edilmis aril (örnegin fenil) anlamina gelir.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, bir adet R5 ile substitüe edilmis aril (örnegin fenil) anlamina gelir ve burada R5, heterosiklil (örnegin azetidinil) olur ve R5, iki adet halo (örnegin floro) ile substitüe edilmis durumda bulunur.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis heterosiklil (örnegin 3-tetrahidrofuranil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0 adet R5 ile substitüe edilmis heterosiklil (örnegin 3-tetrahidrofuranil) anlamina gelir.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis heterosiklilalkil (örnegin 2-tetrahidrofuranilmetil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0 adet R5 ile substitüe edilmis heterosiklilalkil (örnegin 2- tetrahidrofuranilmetil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0 adet R5 ile substitüe edilmis heterosiklilalkil anlamina gelir ve asagidaki yapi ile temsil Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis sikloalkil (örnegin siklopentil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0 adet R5 ile substitüe edilmis sikloalkil (örnegin siklopentil) anlamina gelir.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis sikloalkilalkil (örnegin siklopropilmetil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0 adet R5 ile substitüe edilmis sikloalkilalkil (örnegin siklopropilmetil) anlamina gelir.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis C1-6 alkenil (örnegin etenil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, bir adet R5 ile substitüe edilmis Cm alkenil (örnegin etenil) anlamina gelir. Bu yapilanmalarin daha baska bazi yönlerine göre her bir R5, heteroaril (örnegin 2-piridinil) anlamina gelir.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre bir R“, 0 adet R5 ile substitüe edilmis C1.6 alkil (örnegin metil) anlamina gelir ve diger R4 ise bir adet R5 ile substitüe edilmis heteroaralkil (örnegin 3-ind0lilmetil) anlamina gelir ve burada R5, Cm alkil (örnegin metil) olur.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre bir R4, 0 adet R6 ile substitüe edilmis CH; alkil (örnegin metil) olur ve diger R4 ise bir adet R5 ile substitüe edilmis heteroaralkil (örnegin 2- piridil) anlamina gelir, burada R5, heterosiklil (örnegin azetidinil) olur ve R5, iki adet halo (örnegin floro) ile substitüe edilmis durumda bulunur.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre bir R4, 0 adet R5 ile substitüe edilmis C1.6 alkil (örnegin metil) anlamina gelir ve diger R4 ise bir adet R5 ile substitüe edilmis heteroaralkil (örnegin 3-indolilmetil) anlamina gelir ve burada R5, C1_5 alkil (örnegin metil) olur.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre bir R4, CH; alkil (örnegin metil) olur ve diger R4 ise heteroaralkil (örnegin 2-piridinilmetil) anlamina gelir ve bunlarin her biri, 0 adet R5 ile substitüe edilmis durumda bulunur.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre bir R4, 0 adet R5 ile substitüe edilmis heteroaralkil (örnegin 2-piridinilmetil) olur ve diger R4 ise bir adet R5 ile substitüe edilmis aralkil (örnegin benzil) anlamina gelir, burada R5 ise 01-6 alkoksi (örnegin metoksi) olur.

Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre bir R4, 0 adet R5 ile substitüe edilmis C1.6 alkil (örnegin metil) olur ve diger R4 ise bir adet R5 ile substitüe edilmis aralkil (örnegin benzil) anlamina gelir, burada R5 ise 01-6 alkoksi (örnegin metoksi) olur.

Bazi yapilanmalara göre R2, -NH2 olur ve R1 ise -N(R3)-C(O)-R4 anlamina gelir, burada R3 ise hidrojen ve R4, 0 adet R'5 ile substitüe edilmis heteroaralkil (örnegin 2-piridinilmetil) anlamina gelir.

Bazi yapilanmalara göre her bir R6, H olur.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (I) bilesigi, bir Formül (II) ile temsil edilir: burada R1, R2, R3, R4, R5, R6, 0, p, m, n ve X, Formül (I) için tanimlandigi gibi olur.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (I) veya (II) bilesigi, bir Formül (lla) bilesigi ile temsil burada R1, R2, R3, R4, R5, o, p ve X, Formül (I) için tanimlandigi gibi olur.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (I), (II) veya (Ila) bilesigi, bir Formül (III) bilesigi ile IgNÖAXAgysÂ, temsil edilir: burada R4, R5 ve X, Formül (i) için tanimlandigi gibi olur.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (I) bilesigi, bir Formül (IV) bilesigi ile temsil edilir: burada R1, R2, R3, R4 ve R5, Formül (l) için tanimlandigi gibi olur ve q ise 0, 1, 2, 3 veya 4'tür.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (I) veya (IV) bilesigi, bir Formül (IVa) bilesigi ile temsil burada R4. R5 ve q. Formül (lV) için tanimlandigi gibi olur.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (I) veya (IV) bilesigi, bir Formül (IVb) bilesigi ile temsil burada R4, R5 ve q, Formül (IV) için tanimlandigi gibi olur.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (I) veya (IV) bilesigi, bir Formül (IVc) bilesigi ile temsil R4 ki 3 ' burada R4, R5 ve q, Formül (IV) için tanimlandigi gibi olur.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (l) bilesigi, bir Formül (V) bilesigi ile temsil edilir: burada R4, 0, 1 veya 2 adet R5 ile substitüe edilmis 01-5 alkil, aralkil veya heteroaralkil anlamina gelir, burada R5 ise metil, metoksi, -NH2, -N(CHCH3, N02, CN, bromo veya floro arasindan seçilir. Formül (V)'in bazi yapilanmalarina göre her bir R4, ayni olur. Formül (V)'in bazi yapilanmalarina göre her bir R4, farkli olur.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (l) bilesigi, bir Formül (Va) bilesigi ile temsil edilir: 44» : ilk?“ burada R4, 0, 1 veya 2 adet R5 ile substitüe edilmis 01-3 alkil, aralkil veya heteroaralkil anlamina gelir, burada R5 ise metil, metoksi, -NH2, -N(CHCH3, N02, CN, bromo veya floro arasindan seçilir. Formül (Va)'nin bazi yapilanmalarina göre her bir R4, ayni olur. Formül (Va)'nin bazi yapilanmalarina göre her bir R4, farkli olur.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (l) bilesigi, bir Formül (Vb) bilesigi ile temsil edilir. burada R4, 0, 1 veya 2 adet R5 ile substitüe edilmis Cm alkil, aralkil veya heteroaralkil anlamina gelir, burada R5 ise metil, metoksi, -NH2, -N(CHCH3, N02, CN, bromo veya floro arasindan seçilir. Formül (Vb)'nin bazi yapilanmalarina göre her bir R4, ayni olur. Formül (Vb)'nin bazi yapilanmalarina göre her bir R4, farkli olur.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (I) bilesigi, bir Formül (VI) bilesigi ile temsil edilir: burada R4, 1 adet R5 ile substitüe edilmis aralkil olur ve burada R5 ise metoksi anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, ayni olur.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (l) bilesigi, bir Formül (Vla) bilesigi ile temsil edilir: burada R4, 1 adet R5 ile substitüe edilmis aralkil olur ve burada R5 ise metoksi anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, ayni olur.

Bazi yapilanmalara göre bir Formül (i) bilesigi, bir Formül (Vlb) bilesigi ile temsil edilir: Ripli-:WîLNLW (viw burada R4, 1 adet R5 ile substitüe edilmis aralkil olur ve burada R5 ise metoksi anlamina gelir. Bu yapilanmalarin bazi yönlerine göre her bir R4, ayni olur.

Belirli yapilanmalara göre temsili Formül I bilesikleri, Tablo 1 içerisinde ve Örneklerde tarif edilen bilesikleri ihtiva eder. Burada tarif edilen bir bilesik, mesela Örnekler içerisinde tarif edilen bir test ile, glutaminaz inhibe etme becerisi yönünden test edilebilir. Sadelik olmasi bakimindan bu bilesiklerin inhibisyon aktivitesi, Tablo 1 içerisinde Örnek A veya Örnek B testinde test edilen bir ICSO degeri ile temsil edilir. Temsili bilesikler, asagidaki Tablo 1 içerisinde gösterilir. Gösterildigi üzere i'A", ICso < 100 nM degerlerindeki bir glutaminaz inhibitörünü ifade eder. "B", 100 nM ve 500 nM arasi IC50 degerlerindeki glutaminaz inhibitörünü ifade eder. "C", 500 nM ve 1000 nM arasi leo degerlerindeki glutaminaz inhibitörünü ifade eder. "D", 1 pM ve 2 pM nM arasi IC50 degerlerindeki glutaminaz inhibitörünü ifade eder. "E", 2 ;M ve 10 |JM nM arasi IC50 degerlerindeki glutaminaz inhibitörünü ifade eder. "Yok", ICSÜ degeri olmayan bilesikleri ifade eder.

Tablo 1 (* ile referans örnegi belirtilir) Bilesik No Yapi IC50 Bilesik No Yapi leo HN~ HNN~< SJ\ US NFHL Bilesik No Yapi leo 3 "û/w 9 ,w w& ° ` HN~~ m4: S>~Ni~i HN- Bilesik No Yapi leo 71” `NH Bilesik No Yapi leo HA à OASXH Bilesik No Yapi leo »kg/KO MILS>`NH **HSEHOASMH HN~ HN~`NH Bilesik No Yapi leo HN~ .2 ° ~~> HN' HN- HNfÄ/“EI "Fri NH Bilesik No Yapi leo HNvâJN,,_û)N\S>~NH ” 7-? ° IN` HN'- HN4SE\OJ`S>*NH Bilesik No Yapi leo HNIQN SJN 1! NgNH HIV( sJ,_ Nis` NH Bilesik No Yapi leo HN- HN-4:ß,ßi JNI :yy MN4:_JNMI ”[&M HN-4SÄÜH SI :BNNH Bilesik No Yapi IC50 HNÄSLOMÄSFNH 01:? /,\ 0 "h) %02 H~~ grNH **N/«SE NU; NH HN~\{J Bilesik No Yapi leo 02N _4N` ”myo `_N 2 HN «mo-"LS NH 02N HN-«Q ß' i %NH NO; N 9 N` N'N HNIQSKO~$ÄS>`NH2 HN~4SEHHOÄSN>~NH2 ”Halo-Is** Bilesik No Yapi leo HN- HN-x”N sJ_ i N"SxNH (OH HN-(ZEI ;bir-&MH 02/ `02 Bilesik No Yapi leo QjNÄSXO/(skuk/Q HN4é:jîh #1; NH S :40 N N &Q °\ HN*`NH /0 HN'4î;îui N'ISFNH N -5N›4î;üh' NL; NH CN HN4SJ"'«3)L:\S"NH Bilesik No Yapi leo HNý- Bilesik No Yapi leo WMZE_ ”y:>`w HN- F3C /__\ 0 3,05 HN' HN'qSßm 'I sSHMH Bilesik No Yapi leo HN-ÃINS`JÜH 'NI :ý-VH umay," 51,3` NH F F HN" HN 04/ :J @isim Bilesik No Yapi leo N4".:J Bilesik No Yapi leo JSN/(NE NIN ;HL MHsyhûisygf 1» 0 M: avg/,ads NH Huri/;Ikû/'ig-N; ý-gN /N'\ O \_/ NES!` HN'êgEh ` NH Bilesik No Yapi leo OQNQÄNÄ: \ SXHÃS No2 Bilesik No Yapi leo O\ HN4SJWCJL; NH /0 0\ H/ÄSLOMLSÄH /0 Bilesik No Yapi leo HN-(s/[LÖLS NH HN-(ZlNkO/NCgAqH Bilesik No Yapi leo N81."4Nwht g.' CN abi-«SIÄOJLS N” Bilesik No Yapi leo 131 yok /` O IN` ~iii 132 yok 45“` ”FK HN Skû-”LS NH 133 yok 134 yok ' en 11 L/Q NÄSLQÄSÄH 135 yok 1/ "Ask” ”A810 Bilesik No Yapi leo 136 yok HN"« 3,] WE:) IL:>~NH 137 yok <;QLJ?N %Ljî:> 138 yok 139 yok HN-4 140 yok W'«J\E:Tî`\NH 141 yok Bilesik No Yapi leo 142 yok “ \ `N HNPQSEKO"^ES\>`NH 143 yok 144 yok î_4 ~ »N HN-*gsji`[::]mîisî*~NH 145 yok H s`”{>”kyxß 146 yok N 3)`ý:j“ s 147 yok Bilesik No Yapi IC50 148 yok HNg`NH 149 yok MN-égwl : [ISFÄF 150 yok HN~ 151 yok 152 yok LâhH/s ü "`Es>~gj 153 yok 154 yok Bilesik No Yapi leo 155 yok JSN-QR I` :g 156 yok HN~ 157 yok 158 yok HN- 159 yok 160 yok 91,141: ES›M 161 yok Bilesik No Yapi leo 162 yok Inka-ELO L S>~NH 163 yok C' HM4gjLE:]NISFWH C 164 yok HN4 165 yok HN-<îîî ßîgs>`NH 166 yok 02/5 0 . O %02 HNJ 167 yok Bilesik No Yapi leo 168 yok " 0 ` 5 169 yok MN4$ Q Eggû 170 yok Asüwgm::Ä}wH< 171 yok HN~ 172 yok 43) 4;& LC& 173 yok Bilesik No Yapi leo 174 yok HN7 175 yok R Hw4gm : ”ÄSVNH P 176 yok HNJÄSÄONÄ NH 177 yok ”5:2L4? N g 5 ; HN~ 178 yok N04::HCN HN~ 179 yok Bilesik No Yapi leo 180 yok F3CO HN,<, ` E` »WH 0ci=._` 181 yok 182 yok Hor-4:& ..Nigê-NH 183 yok ('24) N HN4$Ib"fIS\ NH /0 184 yok HN~-NH ` 185 yok Bilesik No Yapi leo 186 yok HNr`NH 187 yok HN~4g ü : JJÂÃS*NH 188 yok HNI`NH 189 yok 0 Hw4îq JÄSFSSJ o 190 yok 191 yok Bilesik No Yapi leo 192 yok HN~('S iL _I`üs>-NH 193 yok F HN~êgiI:jýîg NH F 194 yok Pâk4 “EN NH 195 yok HN'GS s`IL _JESNH 196 yok >V° MN~ 197 yok Bilesik No Yapi leo 198 yok 199 yok >'G»4gjiî:jßl;$qêî< 200 yok maç/LP : ”AN'LS>~NH 201 yok HNdgJkI:jfî` NH 202 yok HN4siûNÄS)`NH 203 yok Bilesik No Yapi leo 204 yok 9`N 'N 205 yok HN--('S Ü: `_Jusýwm 206 yok HNr<1s iN "isýqm 207 yok 208 yok 209 yok mzgî »ISKÄ 210 yok Bilesik No Yapi IC50 211 yok N &nggwl »54,51 g) cw 212 yok 213 yok O\ NASLCTASLH /O 214 yok HN-<”SJIOL5>,NH 215 yok HN-Ä/:JN NLg'NH 216 yok Bilesik No Yapi leo 217 yok 4' o C? \ 1) HN-*GSJ disk“ .KM/f( .MI i`g-Ný-NH 1;" xs,,i,. Oks HN4~NH (37 LI?) HM-&ZE !IN NH Bilesik No 34 F` 7.* N/2 Bilesik No Bilesik No 0 7" / \\ `Ö f" ”Ms/"MO/QW > 'f Bilesik No 9'"\ -0 248 AF2( Bilesik No (ÖN ß Nrjd HN-(” y "f”'I' ;“w MMS)`N .(HNI'ÄBJI.. 0/1:ny 0& 5 'J 5 ?0 Bilesik No 1"\N & z” D /3 N "\ 4" 'f .› HL.

HN SJ,, :rs rin-es) _` «"'L L/î/ HIJ, :yu'tjj NVN” WNÄÇÄ o 0., ýh” N !11” Bilesik No Bilesik No Yapi leo }1N/<:`î\d”::>` NF' ”2” 'S S NH; 1Â,_ê) N`N NiN qßgl HN' »:4 J,, o): »HNH 55 o 0 N# HN* Bilesik No N 5 \__j Nvms T NNNJAS N4... N, ,NJAS IANH NH IM N! .NI S Or oiuM H 0 NH NH 0 m k 8 9 0 1 2 3 .S 8 8 9 9 9 9 e 2 2 2 2 2 2 Bilesik No Yapi leo H2N NH2 umay,“ : if S>~NH HN-4SJM t S`>~NH HNÄSJMOÄSFNH Ilk” 2 J” olsn :kw Bilesik No Yapi IC50 HN~~NH 0:8-NH HN` ":0 HN'QSJN,_ : Ji :%NH NH2 H2N (:3 0 N N 0 »3 Bilesik No Yapi IC50 HNI~NH HN-'QSEÜIOJLSWNH HNWSJ,, s NH NH2 NH2 HN-4SE,4_OJLS>`NH Bilesik No Yapi leo F N - 0 O \ N/ Nêîf- HN”'-NH `i“ NiNWNH Bilesik No Yapi leo H2N /_> 0 O \5/ Ni-i2 HN_-NH H0~CN N, 0 oß'ûwH 4“ W»- HNv Bilesik No Yapi leo HN'QSE I N` FâNfCJ \ /N Ag» SEN& &F H2N NH; HN'KsjhiûjLSFNH GüN-(U O/Ls :%Nsîgo Bilesik No Yapi leo a 8 0“ n N ;1 s "OÄS 5 N F n 8 @As H F-»CN /N_\ 0 N N 0 \ N/ Nêqr Bilesik No Yapi leo 2.; 2; F N 4 o 0 3 (339 A Bilesik No Yapi leo HN7 HN4SEQOJLSVNgL/ HN*'~NH Bilesik No Yapi IC50 FÄCNJ 0,4N`N N'Igxo `N Qî: 8)“ 5 H HN*`NH Bilesik No Yapi leo HN-*NH m 17. Ilk 54~N N-N>` HN-{SJ,_ûßS NH HN_ HN-'“NH Bilesik No Yapi leo 7.] &5 ”%sjq"iûîs\>_m F HPV( ve 'M' /N PC HAS)M'C7Ä5)\H HNr`NH HN-'ÄSJMOÄSFNH Bilesik No Yapi IC50 HN SJI"O)\S NH OH C/ 0 N N OLQNÖWW HN* Bilesik No Yapi leo HN4 C2 / \ F HÖ' HN- Hö HCNJ Bilesik No Bilesik No Yapi IC50 HN' N / MMO/4 \ N HNI Bilesik No Yapi IC50 Q 2 4 r: ß &F F3CO o @Nêg HN-<\ SJ,“ i FM F3CO 0 Burada tarif edilen bilesikler, burada saglanan örneklerde tarif edilenler gibi, çesitli sentez teknikleri ile yapilabilir. Ilgili teknikte uzman kisiler tarafindan kabul edilebilecegi üzere, buradaki formüllere sahip bilesiklerin sentezlenmesi metotlari, bu uzman kisilere asikar gelecektir. Dahasi çesitli sentez asamalari, arzu edilen bilesikleri vermek üzere bir alternatif siralamada veya dizide gerçeklestirilebilir. Burada tarif edilen bilesikleri sentezlemede faydali olan sentetik kimya transformasyonlari ve koruma grubu metodolojileri (korumaya alma ve korumadan çikarma), ilgili teknikte bilinmektedir, bkz. örnegin R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W. Greene ve P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. Baski, John Wiley and Sons (1991); L. Fieser ve M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); ve L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) ve bunlarin sonraki baskilari.

Burada saglanan bilesikler, bir veya daha fazla asimetrik merkez içerebilir ve dolayisiyla rasematlar ve rasemik karisimlar, tekli enantiyomerler, münferit diastereomerler ve diastereomerik karisimlar formunda bulunabilir. Bu bilesiklerin tüm bu izomerik formlari, kapsama açik sekilde dahil edilmektedir. Bir bilesik, stereo-kimyasi belirtilmeksizin bir yapi ile adlandirildiginda veya resmedildiginde ve bir veya daha fazla kiral merkeze sahip oldugunda, aksi belirtilmedigi sürece, bilesigin tüm olasi stereoizomerlerini temsil ettigi anlasilacaktir. Burada saglanan bilesikler, bag rotasyonunu kisitlayan baglantilar (örnek olarak karbon-karbon baglari) veya substituentler de içerebilir; örnegin bir halka veya bir ikili bagin varligindan ileri gelen bir kisitlanma söz konusu olabilir. Dolayisiyla tüm cis/trans ve E/Z izomerleri açikça dahil edilmektedir.

Burada saglanan bilesikler (örnegin Formül I bilesikleri), bir veya daha fazla izotopik substitusyon da içerebilir. Örnegin H, herhangi bir izotop formunda, örnegin 1H, 2H (D veya döteryum) ve 3H (T veya trityum) formlarinda bulunabilir; C, herhangi bir izotop formunda, örnegin 120, 13C ve 14C formlarinda bulunabilir; O, herhangi bir izotop formunda, örnegin 160 ve 18O formlarinda bulunabilir vs.. Burada saglanan bilesikler, çoklu tautomerik formlarda da temsil edilebilir ve bu gibi durumlarda, tek bir tautomerik form gösterilmis olsa bile, burada saglanan bilesiklerin tüm tautomerik formlari açikça kapsanir (örnek olarak bir halka sisteminin alkilasyonu, çoklu pozisyonlarda alkilasyonla sonuçlanabilir; tüm bu tip reaksiyon ürünleri açikça kapsanir). Bu tip bilesiklerin tüm böylesi izomerik formlari açikça kapsanir. Burada tarif edilen bilesiklerin tüm kristal formlari açikça kapsanir.

Burada saglanan bilesikler, bilesiklerin kendini ve ayrica mevcut olmalari halinde, bu bilesiklerin tuzlarini da ihtiva eder. Bir tuz, örnegin bir anyon ve burada tarif edilen bir bilesik üzerindeki pozitif yüklü bir substituent (mesela amino) arasinda meydana gelebilir.

Uygun anyonlar; klorür, bromür, iyodür, sülfat, nitrat, fosfat, sitrat, metansülfonat, trifloroasetat ve asetat ihtiva eder. Benzer olarak bir tuz, bir katyon ile burada tarif edilen bir bilesigin üzerinde bulunan negatif yüklü bir substituent (örnek olarak karboksilat) arasinda da meydana gelebilir. Uygun katyonlar; sodyum iyonu, potasyum iyonu, magnezyum iyonu, kalsiyum iyonu ve bir amonyum katyonu, örnegin tetrametilamonyum iyonunu ihtiva eder. Burada tarif edilen ön ilaçlarin örnekleri, bir bireye verilmeleri üzerine, etkin bilesikleri saglayabilen esterleri ve farmasötik olarak kabul edilebilir baska türevleri ihtiva eder.

Burada saglanan bilesikler, örnek olarak özel bir dokunun hedeflenmesi gibi seçilmis biyolojik özellikleri artirmak üzere uygun fonksiyonellikler eklenerek modifiye edilebilir. Bu tip modifikasyonlar ilgili teknikte bilinir ve belirli bir biyolojik kompartimana (örnegin kan, artiran, enjeksiyon uygulamasina imkan vermek üzere çözünürlügü yükselten, metabolizmayi degistiren ve sekresyon hizini degistiren modifikasyonlari içerir.

Alternatif bir yapilanmaya göre burada tarif edilen bilesikler, bilesiklerin türevlerini ve/veya kimyasal kütüphanelerini hazirlamak üzere kombinatoryal kimya tekniklerinde kullanilabilecek platformlar veya omurgalar olarak kullanilabilir. Bilesiklerin bu tip türevleri ve kütüphaneleri, biyolojik aktiviteye sahiptir ve belirli bir aktiviteye sahip bilesikleri belirleyip tasarlamada faydalidir. Burada tarif edilen bilesikleri kullanmak bakimindan uygun olan kombinatoryal teknikler, ilgili alanda bilinmektedir, bkz. örnegin Obrecht, D. ve Villalgrodo, J.M., Solid-Supported Combinatorial ve Parallel Synthesis of Small-Molecular- Weight Coumpound Libraries, Pergamon-Elsevier Science Limited (1998) ve “split ve pool" veya "parallel" sentez teknikleri, kati-faz ve çözelti-faz teknikleri ve kodlama teknikleri gibi teknikleri ihtiva eder (see, örnek olarak, Czarnik, A.W., Curr. Opin. Chem.

Bio., (1997) 1,60. Dolayisiyla burada, türevleri veya kimyasal kütüphaneleri üretmek üzere burada tarif edilen bilesiklerin kullanildigi ve 1) çok sayida göz içeren bir gövdenin saglanmasini; 2) burada tarif edilen metotlar ile her bir gözde saptanan bir veya daha fazla bilesigin saglanmasini; 3) her bir gözde ilaveten bir veya daha fazla kimyasal saglanmasini; 4) meydana gelen bir veya daha fazla ürünün her bir gözden izole edilmesini içeren bir metot tarif edilmektedir. Gene burada, türevleri veya kimyasal kütüphaneleri üretmek üzere burada tarif edilen bilesiklerin kullanildigi ve 1) burada tarif edilen bir veya daha fazla bilesigin bir kati süporta bagli olarak saglanmasini; 2) bir kati süporta bagli bulunan ve burada tarif edilen metotlar ile saptanan bir veya daha fazla bilesigin, bir veya daha fazla ilave kimyasal ile muamele edilmesini; 3) meydana gelen bir veya daha fazla ürünün kati süporttan izole edilmesini içeren bir metot tarif edilmektedir.

Yukarida tarif edilen metotlarda, "isaretler" veya tanitici veya etiketleyici gruplar, arzu edilen ürünlerin veya bunlarin ara ürünlerinin izlenmesi, saptanmasi veya izole edilmesini kolaylastirmak üzere, burada tarif edilen bilesiklere / bilesiklerden veya bunlarin türevlerine / türevlerinden baglanabilir ve/veya ayrilabilir. Bu tip gruplar, ilgili teknikte bilinmektedir. Yukarida bahsedilen metotlarda kullanilan kimyasallar, örnegin solventler, reaktifler, katalizörler, koruyucu gruplar ve korumadan çikarma grubu reaktifleri ve benzerlerini ihtiva edebilir. Bu tip kimyasallarin örnekleri, burada atif yapilan çesitli sentez ve koruma grubu kimyasi kitaplarinda ve incelemelerde görünenlerdir.

Tanimlar olabilen, doymus veya doymamis bir hidrokarbon zincirini ifade eder. Örnegin C1-C12 alkil, ilgili grubun içerisinde 1 ila 12 (dahil) adet karbon atomuna sahip olabildigini belirtir. "Alkil" terimi, alkenil gruplarini içerir. "Haloalkil" terimi, içerisindeki bir veya daha fazla hidrojen atomunun halo ile ikame edildigi bir alkil anlamina gelir ve içerisindeki tüm hidrojenlerin halo ile ikame edildigi alkil gruplarini (örnegin perfloroalkil) kapsar. "Arilalkil" veya "aralkil" terimleri, bir alkil hidrojen atomunun bir aril grubu ile ikame edildigi bir alkil grubunu ifade eder. Aralkil, içerisindeki birden fazla hidrojen atomunun bir aril grubu ile ikame edilmis oldugu gruplari kapsar. “Arilalkil" veya "aralkil" örnekleri benzil, 2-feniletil. 3-fenilpropil, 9- roreniI, benzhidril ve tritil gruplarini içerir. degerlikli bir alkil veya sikloalkil anlamina gelir. düz veya dallanmis bir hidrokarbon zincirini ifade eder. AIkeniI gruplarinin örnekleri, bunlarla sinirli olmamak üzere aIIiI, propenil, 2-bütenil, 3-heksenil ve 3-0ktenil gruplarini içerir. Ikili bagin karbonlarindan biri, alkenil substituentine opsiyonel bir eklenme noktasi olabilir. daha fazla hidrojen atomunun halo ile ikame edildigi bir alkoksi anlamina gelir ve içerisindeki tüm hidrojenlerin halo ile ikame edildigi alkoksi gruplarini (örnegin perfloroalkoksi) kapsar. edilebildigi (örnegin bir veya daha fazla substituent ile), monosiklik, bisiklik, ya da trisiklik aromatik bir hidrokarbon halka sistemini ifade eder. Aril gruplarinin örnekleri, bunlarla sinirli olmamak üzere fenil, naftil ve antrasenil ihtiva eder. Baska türlü belirtilmedigi sürece, bir aril grubunda bulunan her halka atomu, bir ya da daha fazla substituent ile substitüe edilebilir.

Burada kullanildigi haliyle "sikloalkil" terimi, 3 ila 12 adet karbona sahip, siklik, bisiklik, trisiklik, ya da polisiklik, aromatik olmayan hidrokarbon gruplarini ihtiva eder. Substitüe olabilen her halka atomu substitüe edilebilir (örnek olarak bir veya daha fazla substituent ile). Sikloalkil gruplari, kaynasik veya spiro halkalar içerebilir. Kaynasik halkalar, bir ortak karbon atomunu paylasan halkalardir. Sikloalkil gruplarinin örnekleri, bunlarla sinirli olmamak üzere siklopropil, sikloheksil, metilsikloheksil, adamantil ve norbornil ihtiva eder.

Burada kullanildigi haliyle “sikloalkilalkil” terimi, bir sikloalkil grubu ile substitüe edilen bir alkil grubunu ifade eder. bagimsiz olarak seçilen bir ila dört adet hetero atom içeren, 3 ila 14 üyeli, aromatik olmayan halka yapilarini (örnegin 3 ila 14 üyeli halkalar, daha fazla tercih edildigi haliyle 3 ila 7 üyeli halkalari) ifade eder. Heterosiklil veya heterosiklik gruplari, kaynasik veya spiro halkalar içerebilir. Hetero halkalar, her bir grubu, örnegin 5-7 halka üyesine sahip olan poli halkalar da olabilir. "Heterosiklil" veya "heterosiklik grubu", doymus ve kismi olarak doymus heterosiklil yapilarini ihtiva eder. Hetero atom, istege göre heterosiklil substituentin eklenme noktasi olabilir. olmasi halinde 1-6 halka hetero atomuna, trisiklik olmasi halinde 1-9 halka hetero trisiklik) bir aromatik halka sistemini ifade eder ve bahsedilen halka hetero atomlari bagimsiz olarak 0, N ve S arasindan seçilir (örnegin, monosiklik, bisiklik, ya da trisiklik olmasi durumda bu siraya göre 1-3, 1-6, ya da 1-9 adet N, 0, ya da 8 halka hetero atomu söz konusu olur). Substitüe olabilen her halka atomu substitüe edilebilir (örnek olarak bir veya daha fazla substituent ile).

Bir veya daha fazla hetero atom ve hem aromatik olan hem de aromatik olmayan halkalar içeren ve halka sisteminin molekülün geri kalanina baglanma noktasinin, aromatik olmayan bir halka üzerinden gerçeklestigi bisiklik ve trisiklik halka sistemleri, heterosiklil gruplar olarak kabul edilir. Bir aril veya bir heteroaril grubunun bir sikloalkil veya heterosiklil ile kaynasik oldugu ve halka sisteminin molekülün geri kalanina baglanma noktasinin, bir aromatik halka üzerinden gerçeklestigi bisiklik veya trisiklik halka sistemleri, aril veya heteroaril gruplari olarak kabul edilir.

Burada kullanildigi haliyle "heterosiklilalkil" terimi, bir heterosiklil grubu ile substitüe edilen bir alkil grubunu ifade eder.

Burada kullanildigi haliyle "hetaralkil" ve "heteroaralkil" terimleri, bir heteroaril grubu ile substitüe edilen bir alkil grubunu ifade eder. Burada saglanan bilesiklerin halka hetero atomlari; N-O, S(O) ve S(O)2 ihtiva eder.

Aril, heteroaril, sikloalkil ve heterosiklil gruplari, gerek tek baslarina, gerekse bir grubun bir parçasi olarak (örnegin bir aralkil grubunun aril kismi), substitüe edilebilen bir veya daha fazla atomda, baska sekilde belirtilmedigi sürece, asagidakilerin arasindan bagimsiz olarak seçilen substituentler ile istege göre substitüe edilir: halo, -CEN, C1-C4 alkil, =O, - ORb, -ORb', -SRb, -SRb', -(C1-C4 alkiI)-N(Rb)(Rb), -(C1-C4alkiI)-N(Rb)(Rb'), -N(Rb)(Rb), - N(Rb)(Rb'), -O-(C1-C4 alkiI)-N(Rb)(Rb), -O-(C1-C4 alkiI)-N(Rb)(Rb'), -(C1-C4alkiI)-O-(Ci-C4 alkiI)-N(Rb)(Rb), -(C1-C4alkiI)-O-(C1-C4 alkiI)-N(Rb)(Rb'), -C(O)-N(Rb)(Rb), -(C1-C4alkiI)-C(O)- N(Rb)(Rb), _(01-04 alkiI)-C(O)-N(Rb)(Rb'), -ORb', Rh', -C(O)(C1-C4alkil), -C(O)Rb', - N(Rb)SOZ(Rb') ve -802N(Rb)(Rb'), burada alkil substituentleri, -OH, -O-(C1-C4 alkil), halo, - NH2, -NH(C1-C4alkil), ya da -N(C1-C4alkil)2 gruplarinin bir veya daha fazlasi ile ayrica istege göre substitüe edilir; her bir Rb; hidrojen ve -Ci-C4 alkil arasindan bagimsiz olarak seçilir; ya da iki Rb, bagli olduklari azot atomu ile birlikte, N, S ve O arasindan seçilen bir ilave hetero atomu istege göre içeren, 4 ila 8 üyeli bir heterosiklil olusturur; ve her bir Rb'; Cs-C7 karbosilil, fenil, heteroaril ve heterosiklil arasindan bagimsiz olarak seçilir, burada bahsedilen fenil, sikloalkil, heteroaril veya hetero halka substituenti üzerinde substitüe edilebilen bir veya daha fazla pozisyon, -(C1-C4alkil), -(C1-C4 floroalkil), -OH, -O-(C1-C4 alkil), -O-(C1-C4 floroalkil), halo, -NH2, -NH(C1-C4alkil), ya da -N(C1- C4alkil)2 gruplarinin bir veya daha fazlasi ile ayrica istege göre substitüe edilir.

Heterosiklil gruplari, gerek tek basina gerekse bir grubun bir parçasi olarak, substitüe edilebilir bir veya daha fazla azot atomu üzerinde, okso (:0), -C1-C4 alkil, ya da floro- substitüe C1-C4 alkil ile istege göre substitüe edilir. edilmesi anlamina gelir. misli, 4 misli, 5 misli, 6 misli, ya da 10 misli daha fazla inhibisyonu kastedilir.

Burada kullanildigi haliyle "inhibitör" terimi, enzimatik glutaminaz aktivitesini, normal glutaminaz aktivitesi seviyelerinden daha düsük bir seviyeye ölçülebilir sekilde yavaslatan, durduran, azaltan veya etkisizlestiren bir ajani ifade eder. Glutaminaz inhibitörleri, peptitler veya nükleik asitler (örnegin glutamat) olabilir. Bir ajan, kendine maruz tutuldugunda glutaminaz aktivitesi gerek direkt olarak, gerekse indirekt olarak ölçülerek, bir inhibitör olup olmadigini belirlemek üzere degerlendirilebilir. Ajanin aktivitesi, örnegin bir kontrol maddesine karsi ölçülebilir. Bazi durumlarda ajanin ölçülen aktivitesi, glutaminaz inhibisyonuna yönelik aktivitesidir. fiziksel varligin veya degerin gerek "direkt olarak elde edilmesi" gerekse "indirekt olarak elde edilmesi" yoluyla iyeligini elde etme anlamina kullanilir. "Direkt olarak elde etme" terimi, fiziksel varligi veya degeri elde etmek üzere bir islem gerçeklestirilmesi (örnegin bir sentez veya analiz metodu gerçeklestirilmesi) anlamina gelir. "indirekt olarak elde etme“ terimi, fiziksel varligin veya degerin bir baska taraftan veya kaynaktan (örnegin fiziksel varligi veya degeri direkt olarak elde etmis olan bir üçüncü taraf Iaboratuvarindan) alinmasi anlamina gelir. Bir fiziksel varligin direkt olarak elde edilmesi, örnegin bir baslangiç materyali gibi bir fiziksel maddede bir fiziksel degisime yer veren bir islemin gerçeklestirilmesini içerir. Bu degisimin örnekleri, fiziksel varligin iki veya daha fazla baslangiç materyalinden yapilmasini, bir maddenin kesilmesi veya parçalara ayrilmasini, bir maddenin ayrilmasi veya saflastirilmasini, iki veya daha fazla ayri varligin bir karisim halinde birlestirilmesini, bir kovalent bag veya kovalent harici bagin kirilmasi veya olusturulmasina yer veren bir kimyasal reaksiyonun gerçeklestirilmesini içerir. Bir degerin direkt olarak elde edilmesi, bir örnekte veya bir baska maddede bir fiziksel degisime yer veren bir islemin gerçeklestirilmesini, örnegin bir örnek, analit, ya da reaktif gibi bir madde bir fiziksel degisime yer veren bir analitik prosedürün gerçeklestirilmesini (burada bazi durumlarda "fiziksel analiz" de denilir), Örnegin asagida sayilanlarin bir veya daha fazlasini içeren bir metot gibi bir analitik metodun gerçeklestirilmesini içerir: örnegin bir analit, ya da bunun bir fragmani veya bir baska türevi gibi bir maddenin ayrilmasi veya saflastirilmasi; bir analit, ya da bunun bir fragmani veya bir baska türevinin, örnegin bir tampon, solvent veya bir reaktif gibi bir baska madde ile birlestirilmesini; ya da bir analit, ya da bunun bir fragmani veya bir baska türevinin yapisinin, örnegin analitin bir birinci ve bir ikinci atomu arasinda bir kovalent veya kovalent harici bag kirilarak veya olusturularak degistirilmesi; ya da bir reaktif, ya da bunun bir fragmani veya bir baska türevine ait yapinin, örnegin reaktifin bir birinci ve bir ikinci atomu arasinda bir kovalent veya kovalent olmayan bir bag kirilarak veya olusturularak degistirilmesi.

Burada kullanildigi haliyle "bir örnegin elde edilmesi" ifadesiyle kasit, örnegin bir doku örnegi veya bir nükleik asit örnegi gibi bir örnegin, örnegin "direkt olarak elde edilmesi" veya "indirekt olarak elde edilmesi" yoluyla elde edilmesidir. "Bir örnegin direkt olarak elde edilmesi", örnegi elde etmek üzere bir islemin gerçeklestirilmesi (örnegin cerrahi veya ekstraksiyon gibi bir fiziksel metodun tatbik edilmesi) anlamina gelir. "Bir örnegin indirekt olarak elde edilmesi", örnegin bir baska taraftan veya kaynaktan (örnegin örnegi direkt olarak elde etmis olan bir üçüncü taraf Iaboratuvarindan) alinmasi anlamina gelir. Bir örnegin direkt olarak elde edilmesi, mesela bir doku, örnegin bir insan hastanin dokusu veya bir hastadan önceden izole edilmis olan bir doku gibi bir baslangiç materyali olabilen bir fiziksel maddede, bir fiziksel degisime yer veren bir prosedürün gerçeklestirilmesini içerir. Bu degisimin örnekleri, bir baslangiç materyalinden bir fiziksel varligin yapilmasini, bir dokunun kesilmesi veya kazinmasini; bir maddenin (örnegin bir örnek doku veya bir nükleik asit örneginin) ayrilmasi veya saflastirilmasini; iki veya daha fazla ayri varligin bir karisim halinde birlestirilmesini; bir kovalent bag veya kovalent harici bagin kirilmasi veya olusturulmasina yer veren bir kimyasal reaksiyonun gerçeklestirilmesini içerir. Bir örnegin direkt olarak elde edilmesi, örnegin yukarida tarif edildigi üzere bir örnekte veya bir baska maddede, bir fiziksel degisime yer veren bir islemin gerçeklestirilmesini içerir.

Burada kullanildigi haliyle, bir referans standardi ile karsilastirildiginda "düsük" bir E- kadherin ekspresyonu ifadesi, örnegin asagidaki atiflarin herhangi biri gibi ilgili teknikte bilinen metotlar ile karakterize edildigi üzere, bir epitel hücresindeki E-kadherin ekspresyonu seviyesi ile karsilastirildiginda, düsük, azalmis veya mevcut olmayan bir seviye anlamina gelir. (Yauch ve ark., (2005) Clin Cancer Res 11:24; Savagner ve ark., 2(6):442).

Burada kullanildigi haliyle, bir referans standardi ile karsilastirildiginda "yüksek" bir vimentin seviyesi ifadesi, örnegin asagidaki atiflarin herhangi biri gibi ilgili teknikte bilinen metotlar ile karakterize edildigi üzere, bir epitel hücresindeki vimentin ekspresyonu seviyesi ile karsilastirildiginda, yüksek ve artmis bir seviye anlamina gelir: (Yauch ve ark., Thiery ve ark., (2002) Nature Reviews Cancer 2(6):442).

Burada kullanildigi haliyle, bir referans standardi ile karsilastirildiginda "düsük" veya herhangi biri gibi ilgili teknikte bilinen metotlar ile karakterize edildigi üzere, bir epitel hücresindeki E-kadherin ekspresyonu seviyesi ile karsilastirildiginda, düsük, azalmis veya mevcut olmayan bir seviye anlamina gelir: (Yauch ve ark., (2005) Clin Cancer Res 11:24; Reviews Cancer 2(6):442).

Burada kullanildigi haliyle "kanser" ve "tümör", es anlamli terimlerdir. "Kanser“ veya büyüme ve çogal hizi ve belirli karakteristik morfolojik özellikler gibi, kansere sebep olan hücrelere tipik karakteristiklere sahip olan hücrelerin varligini ifade eder. Kanser hücreleri genellikle bir tümör formunda olur, ancak bu tip hücreler bir hayvan içerisinde tek baslarina bulunabilir, ya da bir lösemi hücresi gibi tümörijenik olmayan bir kanser hücresi olabilir. Hücreler, asagidaki atiflarin herhangi birinde karakterize edildigi üzere, bir mezensimal hücreye tipik olan karakteristiklere sahip olabilir: (Yauch ve ark., (2005) Clin (2002) Nature Reviews Cancer 2(6):442).

Me, Et, Ph, Tf, Nf, Ts, Ms kisaltmalari bu siraya göre metil, etil, fenil, triflorometansülfonil, nonaflorobütansülfonil, p-tolüensülfonil ve metansülfonil anlamina gelir. Organik kimyanin siradan uzmanlari tarafindan kullanilan kisaltmalarin daha kapsamli bir listesi, Journal of Organic Chemistry yayinin her bir cildinin ilk sayisinda görünmektedir; bu liste tipik olarak Standard List of Abbreviations adli bir tabloda gösterilir.

Bilesikleri Degerlendirme Metotlari Glutaminaz aktivitesi, reaksiyon ürünleri olarak glutamat veya amonyaktan herhangi birinin üretimi saptanarak izlenebilir. Bazi yapilanmalara göre glutamat üretimi ölçülür, çünkü amonyak, bir dizi biyolojik reaksiyondan herhangi birinin bir ürünü konumunda Glutamat üretimi, örnegin kimyasal veya kromatografik saptama metotlari gibi ve NADH ve glutamat dehidrojenazdan faydalanan bagli enzim testleri gibi ilgili teknikte bilinen bir dizi standart metodun herhangi biri ile ölçülebilir. Ekstraselüler glutamat konsantrasyonlari, ilgili teknikte bilinen mikro diyaliz metotlari kullanilarak in vivo sartlarda da ölçülebilir. Glutamat ölçümünün uygun bir metodu, mikrotitre esasli iki adimli bir testtir ve bu çerçevede baslangiç adiminda olusan glutamat, glutamat dehidrojenaz tarafindan kantitatif olarak deamine edilir ve bu sekilde esdeger miktarda NADH meydana gelir (Godfrey ve ark., 1977; Kvamme ve ark., 1985), ki NADH ise sonrasinda spektrofotometrik olarak saptanabilir.

Tedavi Metotlari Burada, burada tarif edilen bir hastaligin, durumun veya bozuklugun tedavi edilmesine veya önlenmesine yönelik olarak, burada tarif edilen bir bilesigin (örnek olarak bir formül (I) bilesiginin, ya da Tablo 1 içerisindeki bir bilesigin), bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzunun veya burada tarif edilen bir bilesigi içeren bir farmasötik bilesimin uygulanmasini içeren bir metotta kullanilmaya yönelik bir bilesik tarif edilmektedir.

Burada tarif edilen bilesikler ve bilesimler, asagida tarif edilenler de dahil olmak üzere çesitli bozukluklarin tedavi edilmesi, önlenmesi ve/veya tanilanmasi amaciyla, örnegin in vitro veya ex vivo olarak kültürde bulunan hücrelere, ya da mesela in vivo olarak bir bireye uygulanabilir.

Burada kullanildigi haliyle "tedavi etme“ veya "tedavi“ terimi, bozuklugun, bozukluga ait bir veya daha fazla semptomun, ya da bozukluga yatkinligin tedavi edilmesi, iyilestirilmesi, hafifletilmesi, dindirilmesi, degistirilmesi, iyi edilmesi, iyilestirilmesi veya etkilenmesi (örnegin bozuklugun en az bir semptomunun önlenmesi veya bozuklugun en az bir semptomunun baslangicinin geciktirilmesi) amaciyla bir bilesigin tek basina, ya da bir ikinci bilesik ile kombinasyon halinde, bir bozuklugu (örnegin burada tarif edilen bir bozuklugu), bir bozukluk semptomu, ya da bir bozukluga yatkinligi olan bir bireye, örnegin bir hastaya uygulanmasi veya verilmesi, ya da bu bireye, örnegin bu hastaya ait bir izole dokuya veya hücreye, örnegin hücre hattina uygulanmasi veya verilmesi olarak tanimlanir.

Burada kullanildigi haliyle, bir bilesigin bir bozuklugu tedavi etmede etkili bir miktari, ya da üzerine, bir hücreyi tedavi etmede, ya da bir bozuklugu olan bir bireyi, böylesi bir tedavinin olmadigi durumda beklenenden ötesine iyilestirmede, yatistirmada, dindirmede veya tedavi etmede etkili olan bir miktarini ifade eder.

Burada kullanildigi haliyle, bir bilesigin bir bozuklugu önlemede etkili bir miktari, ya da üzerine, bir bozuklugun veya bozuklugun bir semptomunun önlenmesinde veya baslangicinin veya nüks etmesinin geciktirilmesinde etkili olan bir miktarini ifade eder. ve/veya deneyin bir konusu olacak veya olmus olan bir hayvani, tipik olarak bir insani (yani herhangi bir yas grubundan bir erkegi veya bir kadini, mesela bir pediatrik hasta veya eriskin hastayi veya bir baska memeliyi, örnegin primatlar (örnegin sinomolgus maymunu, makak maymunu): ticari olarak önemli memelileri, örnegin büyükbaslar, domuzlar, atlar, küçükbaslar, keçiler, kediler ve / veya köpekler; ve / veya ticari öneme sahip olan kuslar da dahil olmak üzere kuslari, örnegin tavuklar, ördekler, kazlar ve / veya hindileri kapsar. Bu terim bir bilesik veya ilacin uygulanmasi ile baglantili olarak kullanildiginda, ilgili hasta bahsedilen tedavi, gözlem ve/veya bahsedilen bilesik veya ilacin uygulanmasina konu edilmis olur.

Kanseder Burada tarif edilen metotlar, örnegin Ulusal Kanser Enstitüsü tarafindan tarif edilenler gibi, her çesit kanser için kullanilabilir. Bir kanser, burada tarif edilen bir metodun kullanilabilirligini belirlemek üzere degerlendirilebilir. Temsili kanserler, bunlar ile sinirli olmamak üzere, akciger kanseri, örnegin küçük hücreli olmayan akciger kanseri; meme kanseri, örnegin üçlü negatif meme kanseri; veya hepatoselüler karsinoma, osteosarkoma, Iipomalar, kondrosarkoma, ya da mezotelyoma ihtiva edebilir. Bazi yapilanmalara göre kanser; kolon kanseri, renal hücreli karsinom, akut miyeloit lösemi (AML), melanoma ve multipl miyeloma arasindan seçilir.

Söz konusu kanser, bir primer tümör olabilir, yani tümör büyümesinin basladigi anatomik yerde bulunabilir. Söz konusu kanser, metastatik de olabilir, yani tümör büyümesinin basladigi anatomik yerden baska bir ikinci anatomik yerde görünebilir. Söz konusu kanser, bir reküran kanser olabilir, yani tedavi sonrasinda ve kanserin saptanamaz oldugu bir zaman periyodundan sonra geri gelen bir kanser olabilir. Reküran kanser, anatomik olarak orijinal tümörde bulunabilir, örnegin orijinal tümörün anatomik olarak yakininda olabilir; orijinal tümöre göre bölgesel olabilir, örnegin orijinal tümörün yakininda bulunan bir lenf nodunda olabilir; veya orijinal tümörün uzaginda olabilir, örnegin orijinal tümöre anatomik olarak uzak bir bölgede bulunabilir.

Kanser Kombinasyon Terapileri Bazi yapilanmalara göre burada tarif edilen bir bilesik, bir ya da daha fazla ilave kanser tedavisi ile birlikte uygulanir. Temsili kanser tedavileri, örnegin asagida sayilanlari ihtiva eder: kemoterapi, hedefli terapiler, örnegin antikor terapileri ve hormon terapisi. Bu tedavilerden her birinin örnekleri, asagida verilir.

Kemoterapi Bazi yapilanmalara göre burada tarif edilen bir bilesik, bir ya da daha fazla kemoterapi ile birlikte uygulanir. Kemoterapi, kanserin, kanser hücrelerini imha edebilen ilaçlar ile tedavisidir. "Kemoterapi", hedefli terapinin aksine, genellikle hizla bölünen hücreleri etkileyen sitotoksik ilaçlari ifade eder. Kemoterapi ilaçlari hücre bölünmesine çesitli olasi yollarla, örnegin DNA kopyalanmasini engelleyerek veya yeni olusan kromozomlari ayirarak müdahale eder. Çogu kemoterapi formu, hizla bölünen hücrelerin tamamini hedefler ve kanser hücreleri için spesifik degildir, ancak normal hücreler genellikle yapabiliyor iken pek çok kanser hücresinin DNA hasarini onaramamasindan belirli bir derecede spesifisite söz konusu olabilir.

Kanser tedavisinde kullanilan kemoterapötik ajanlarin örnekleri, örnek olmasi bakimindan antimetabolitler (örnegin folik asit, purin ve pirimidin türevleri) ve alkilleyici ajanlar (örnegin azot hardallar, nitrozoüreler, platin, alkil sülfonatlar, hidrazinler, triazenler, aziridinler, ig zehri (spindle poison), sitotoksik ajanlar, topoizomeraz inhibitörleri ve baskalari) ihtiva eder. Temsili ajanlarin arasinda, asagida sayilanlar bulunur: Aclarubicin, Actinomycin, Alitretinoni Altretamine, Aminopterin, Aminolevulinic acid, Amrubicin, Amsacrine, Anagrelide, Arsenic trioxide, Asparaginase, Atrasentan, Belotecan, Bexarotene, endamustine, Bleomycin, Bortezomib, Busulfan, Camptothecin, Capecitabine, Carboplatin, Carboquone, Carmofur, Carmustine, Celecoxib, Chlorambucil, Chlormethine, Cisplatin, Cladribine, Clofarabine, Crisantaspase, Cyclophosphamide, Cytarabine, Dacarbazine, Dactinomycin, Daunorubicin, Decitabine, Demecolcine, Docetaxel, Doxorubicin, Efaproxiral, Elesclomol, Elsamitrucin, Enocitabine, Epirubicin, Estramustine, Etoglucid, Etoposide, Floxuridine, Fludarabine. Fluorouracil (5FU), Fotemustine, Gemcitabine, Gliadel implants, Hydroxycarbamide, Hydroxyurea, Idarubicin, Ifosfamide, lrinotecan, Irofulven, Ixabepilone, Larotaxel, Leucovorin, Liposomal doxorubicin, Liposomal daunorubicin, Lonidamine, Lomustine, Lucanthone, Mannosulfan, Masoprocol, Melphalan. Mercaptopurine, Mesna, Methotrexate, Methyl aminolevulinate, Mitobronitol.

Mitoguazone, Mitotane, Mitomycin, Mitoxantrone, Nedaplatin, Nimustine, Oblimersen, Omacetaxine, Ortataxel, Oxaliplatin, Paclitaxel, Pegaspargase, Pemetrexed, Pentostatin, Pirarubicin, Pixantrone, Plicamycin, Porfimer sodium, Prednimustine, Procarbazine, Raltitrexed, Ranimustine, Rubitecan, Sapacitabine, Semustine, Sitimagene ceradenovec, Satraplatin, Streptozocin, Talaporfin, Tegafur-uracil, Temoporfin, Temozolomide, Teniposide, Tesetaxel, Testolactone, Tetranitrate, Thiotepa, Tiazofurin, Tioguanine, Tipifarnib, Topotecan, Trabectedin, Triaziquone, Triethylenemelamine, Triplatin, Tretinoin, Treosulfan, Trofosfamide, Uramustine, Valrubicin, Verteporfin, Vinblastine, Vincristine, Vindesine, Vinflunine, Vinorelbine, Vorinostat, Zorubicin ve burada tarif edilen baska sitostatik veya sitotoksik ajanlar.

Bazi ilaçlar. birlikte tek baslarina olduktan daha iyi etki gösterdiginden iki veya daha fazla ilaç çogunlukla ayni zamanda verilir. Siklikla karsilasildigi üzere iki veya daha fazla kemoterapi ajani, kombinasyon kemoterapi olarak kullanilir. Bazi yapilanmalara göre kemoterapi ajanlari (kombinasyon kemoterapi de dahil), burada tarif edilen bir bilesik ile birlikte kullanilabilir.

Hedefli terapi Bazi yapilanmalara göre burada tarif edilen bir bilesik, bir ya da daha fazla hedefli terapi ile birlikte uygulanir. Hedefli terapi, kanser hücrelerinin regülasyonu bozulmus proteinlerine spesifik ajanlarin kullanimini teskil eder. Genel itibariyla küçük moleküllü hedefli terapi ilaçlari, kanser hücresi içerisinde mutasyon geçirmis, asiri sekilde ifade edilmis, ya da baska sekilde kritik öneme sahip proteinler üzerindeki enzimatik domenlerin inhibitörleridirler. Bunlarin yaygin örnekleri, tirozin kinaz inhibitörleri, örnegin Axitinib, Bosutinib, Cediranib, dasatinib, erlotinib, imatinib, gefitinib, Iapatinib, Lestaurtinib, Nilotinib, Semaxanib, Sorafenib, Sunitinib ve Vandetanib ve ayrica sikline bagimli kinase inhibitörleri, örnegin Alvocidib ve Seliciclib olmaktadir. Monoklonal antikor terapisi, terapötik ajanin, kanser hücrelerinin yüzeyi üzerinde bulunan bir proteine spesifik olarak baglanan bir antikor oldugu bir baska stratejidir. Bunlarin örnekleri arasinda, tipik olarak meme kanserinde kullanilan anti-HERZ/neu antikoru trastuzumab (HERCEPTIN®) ve tipik olarak çesitli B hücreli malignitede kullanilan anti-CDZO antikoru rituximab ve Tositumomab bulunur. Baska temsili antikorlarin arasinda ise Cetuximab, Panitumumab, Trastuzumab, Alemtuzumab, Bevacizumab, Edrecolomab ve Gemtuzumab bulunur.

Temsili füzyon proteinlerinin arasinda Aflibercept ve Denileukin diftitox bulunur. Bazi yapilanmalara göre hedefli terapi, burada tarif edilen bir bilesik ile birlikte kullanilabilir.

Temsili ilave terapötik ajanlarin arasinda ayrica epidermal büyüme faktörü reseptörü (EGFR) inhibitörleri, örnegin cetuximab, panitumumab, gefitinib, erlotinib, nimotuzamab, matuzamab, zalutumumab, ya da Iapatinib bulunur. Bir hücrenin, bir mezensimal fenotipe veya bir mezensimal fenotipe dönüsmesinin bir sonucu olarak EGFR inhibitörlerine direnç meydana gelebilir ve EGFR mutasyonlarina ve mezensimal fenotipe sahip tümörler, EGFR inhibitörlerine karsi daha az duyarli olabilir (see örnek olarak, Sequist ve ark., ark., (2008) Clin Exp Metastasis 25:843).

Temsili ilave terapötik ajanlarin arasinda glutation tüketici ajanlar, örnegin L-buthionine- (S,R)-sulfoximine (880) da bulunabilir.

Temsili ilave terapötik ajanlar ayrica Phosphoinositide 3-kinase (Pl3K) inhibitörlerini, 80-6946 içerebilir.

Temsili ilave terapötik ajanlar ayrica Heat Shock Protein 90 (HSP90) inhibitörlerini, örnegin geldanamycin, radicicol, 17-N-AIIyIamin.

SNX- de içerebilir.

Hedefli terapi, hücre yüzeyi reseptörlerine veya tümörü çevreleyen etkilenmis ekstraselüler matrise baglanabilen, "homing devices" olarak bilinen küçük peptitlere de yer verebilir. Bu peptitlere baglanan radyonüklidler (örnegin RGD) aslinda nüklidin hücrenin yakininda bozunmasi durumunda kanser hücresini öldürürler. Bu tip terapinin bir örnegi olarak BEXXAR® vermek mümkündür. immün terapi Bazi yapilanmalara göre burada tarif edilen bir bilesik, bir ya da daha fazla immün terapi ile birlikte uygulanabilir. Kanser immün terapisi, hastanin kendi immün sisteminin, tümörle savasmasi için uyarilacagi sekilde tasarlanan terapötik stratejilerin zengin bir kümesidir.

Tümörlere karsi bir immün yanit üretmeye yönelik çagdas metotlarin arasinda, yüzeyel mesane kanserine karsi intraveziküler BCG immün terapisi ve renal hücreli karsinom ve melanoma hastalarinda bir immün yaniti uyarmaya yönelik interferonlar ve baska sitokinlerin kullanimi bulunur.

Allojeneik hematopoietik kök hücre transplantasyonu, bir immün terapi formu olarak kabul edilebilir, çünkü vericinin immün hücreleri, tümöre, genellikle bir greft-versus-tümör etkisiyle saldiracaktir. Bazi yapilanmalara göre immünoterapi ajanlari, burada tarif edilen bir bilesik ile birlikte kullanilabilir.

Hormon terapisi Bazi yapilanmalara göre burada tarif edilen bir bilesik, bir ya da daha fazla hormon terapisi ile birlikte uygulanir. Bazi kanserlerin büyümesi, belirli hormonlar saglanarak veya bloke edilerek inhibe edilebilir. Hormona duyarli tümörlerin yaygin örnekleri arasinda belirli tipte meme ve prostat kanserleri bulunur. Östrojen veya testosteronun uzaklastirilmasi veya bloke edilmesi genellikle önemli bir ek tedavidir. Belirli kanserlerde, örnegin progestogenler gibi hormon agonistlerin uygulanmasi, terapötik olarak faydali olabilir. Bazi yapilanmalara göre hormon terapisi, burada tarif edilen bir bilesik ile birlikte kullanilabilir.

Besin tahditli diyetler Bazi yapilanmalara göre burada tarif edilen bir bilesik, bir ya da daha fazla besin tahditli diyet ile birlikte uygulanir. Kanser hücreleri, hücre enerjisini üretmek üzere glukoza bagimli oldugundan, glukoz kan düzeylerinin karbonhidrat ikamesi ve protein kisitlamasi ile düsürülmesi, bazi kanserlerin büyümesini inhibe edebilir. Belirli kanserlerde, örnegin kalori kisitlamalari, oruç tutma ve ketojenik diyetler gibi besin tahditli diyetler, terapötik olarak faydali olabilir. Bazi yapilanmalara göre besin tahditli diyetler, burada tarif edilen bir bilesik ile birlikte kullanilabilir.

Nöronal Bozukluklar Burada tarif edilen bir bilesik veya bilesim, örnegin bir iskemik veya hipoksik olaya, bir travmaya veya bir kronik nörodejeneratif bozukluga maruz kalan bir sinir dokusu gibi, nöronal dokulardaki bir hasarin sonucu olarak meydana gelen nöronal hücre ölümünü tedavi etmek veya önlemek için kullanilabilir. Bir "nöronal bozukluk", örnegin bir inme veya iskemi olayi gibi bir nörolojik olaydan kaynaklanan serebral iskemi veya hipoksi gibi, glutamat eksitotoksisitesi ile iliskili bir nörolojik hastalik veya bozukluktur. Bilesik ile yapilan tedavi, örnegin nöronal hücre ölümünü önlemek üzere bir nöroprotektif etki saglamada etkili bir miktarda olabilir.

Bilesimler ve ilaç uygulama yollari Burada betimlenen bilesimler; burada betimlenen bilesikleri (örnegin burada tarif edilen bir bilesigi) ve ayrica var olmasi halinde ilave terapötik ajanlari, burada tarif edilenler de dahil olmak üzere hastalikta veya hastaligin semptomlarinda bir modülasyon saglamada etkili olan miktarlarda ihtiva eder. saglanan bir bilesik ile birlikte verilebilen ve bu bilesigin farmakolojik aktivitesine zarar vermeyen ve bilesigin bir terapötik miktarini uygulamada yeterli dozlarda verildigi zaman toksik olmayan bir tasiyici veya adjuvan anlamina gelir.

Burada saglanan farmasötik bilesimlerde kullanilabilen farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyicilar, adjuvanlar ve araçlar, bunlar ile sinirli olmamak üzere asagida sayilanlari ihtiva eder: iyon degistiriciler, alümina, alüminyum stearat, Iesitin, kendiliginden emülsifiye olan ilaç ulastirma sistemleri (SEDDS, self-emulsi'fying drug delivery system), örnegin d-oi- tokoferol polietilenglikol 1000 süksinat, farmasötik dozaj formlarinda kullanilan sürfaktanlar, örnegin Tween ürünleri veya benzeri polimerik ulastirma matrisleri, serum proteinleri, mesela insan serum albümin, tampon maddeleri, mesela fosfatlar, glisin, sorbik asit, potasyum sorbat, doymus bitkisel yag asitlerinin kismi gliserit karisimlari, su, tuzlar veya elektrolitler, mesela protamin sülfat, disodyum hidrojen fosfat, potasyum hidrojen fosfat, sodyum klorür, çinko tuzlari, koloidal silika, magnezyum trisilikat, polivinil pirrolidon, selüloz esasli maddeler, polietilen glikol, sodyum karboksimetilselüloz, poliakrilatlar, mumlar, polietilen-polioksipropilen-blok polimerleri, polietilen glikol ve yün yagi. Örnegin 0:- de dahil olmak üzere hidroksialkilsiklodekstrinler gibi kimyasal olarak degistirilmis türevleri, ya da çözünebilen baska türevleri de burada tarif edilen formüllere sahip bilesiklerin hedefe ulasimini iyilestirmek üzere avantajli olarak kullanilabilir.

Burada saglanan farmasötik bilesimler oral, parenteral, inhalasyon spreyi, topikal, rektal, nazal, bukkal, vajinal sekilde veya implante edilmis rezervuarlar üzerinden, tercihen oral uygulama veya enjeksiyon yoluyla uygulanabilir. Burada saglanan farmasötik bilesimler, toksik olmayan farmasötik olarak kabul edilebilir her konvansiyonel tasiyici, adjuvan veya araci ihtiva edebilir. Bazi durumlarda formülasyonun pH seviyesi, formüle edilen bilesigin stabilitesini artirmak ve ulastirma seklini iyilestirmek için farmasötik olarak kabul edilebilir asitler, bazlar veya tamponlar ile ayarlanabilir. Burada kullanildigi haliyle parenteral terimi; subkütanöz, intrakütanöz, intravenöz, intramusküler, intraartiküler, intraarteryal, intrasinovyal, intrasternal, intratekal, intralezyonel ve intrakraniyal enjeksiyon veya infüzyon tekniklerini içerir.

Söz konusu farmasötik bilesimler, steril enjektabl sulu preparatlar formunda, mesela steril enjektabl sulu veya yagli süspansiyon formunda olabilir. Bu süspansiyon, ilgili alanda bilinen tekniklere uygun olarak formüle edilebilir ve bu amaçla uygun dispersiyon yapici veya islatici ajanlar (örnegin Tween 80) ve süspansiyon yapici ajanlar kullanilir. Steril enjektabl preparat, toksik olmayan parenteral olarak kabul edilebilir bir seyreltici veya solvent içerisinde bir steril enjektabl solüsyon veya süspansiyon, örnegin 1,3-bütandiol içinde bir solüsyon da olabilir. Kullanilabilen kabul edilebilir araçlar ve solventlerin arasinda mannitol, su, Ringer solüsyonu ve izotonik sodyum klorür çözeltisi bulunur.

Ayrica steril, sabit yaglar da solvent veya süspansiyon yapici ortam olarak konvansiyonel sekilde kullanilabilir. Bu amaçla, sentetik mono- veya digliseritler de dahil olmak üzere her uyumlu sabit yag kullanilabilir. Oleik asit veya gliserit türevleri gibi yag asitleri, enjektabl ürünlerin hazirlanmasinda, farmasötik olarak kabul edilebilir dogal yaglar, mesela zeytinyagi veya hintyagi ve özellikle de bu yaglarin polioksietillenmis versiyonlari olarak faydalidir. Bu yag çözeltileri veya süspansiyonlari uzun zincirli alkol içerikli seyrelticiler veya dispersanlar, ya da karboksimetil selüloz veya farmasötik olarak kabul edilebilir dozaj formlarinin formülasyonunda yaygin sekilde kullanilan, örnegin emülsiyonlar ve/veya süspansiyonlar gibi benzer disperse edici ajanlari da içerebilir. Yaygin olarak kullanilan diger sürfaktanlar, mesela Tween veya Span ürünleri ve/veya farmasötik olarak kabul edilebilir kati, sivi veya diger dozaj formlarinin üretilmesinde yaygin olarak kullanilan baska emülsifiye edici ajanlar veya biyoyararlanim artiricilari da formülasyon amaçlari itibariyla kullanilabilir.

Burada saglanan farmasötik bilesimler, bunlar ile sinirli olmamak üzere kapsüller, tabletler, emülsiyonlar ve sulu süspansiyonlar, dispersiyonlar ve solüsyonlar da dahil olacak sekilde oral olarak kabul edilebilir her dozaj formunda oral olarak uygulanabilir.

Oral kullanima yönelik tabletler durumunda yaygin sekilde kullanilan tasiyicilar Iaktoz ve misir nisastasini içerir. Magnezyum stearat gibi Iubrikantlar da tipik olarak eklenir. Kapsül formundaki oral uygulamalar için faydali seyrelticiler Iaktoz ve kurutulmus misir nisastasini içerir. Sulu süspansiyonlar ve/veya emülsiyonlar oral sekilde verildiginde, etkin madde emülsiyon ve süspansiyon yapici maddeler ile birlikte bir yagli fazda süspansiyon veya solüsyon haline getirilebilir. Arzu edildigi takdirde belirli tatlandirici ve/veya aroma katici ve/veya renklendirici maddeler de ilave edilebilir.

Burada saglanan farmasötik bilesimler, rektal uygulama için fitil formunda da uygulanabilir.

Bu bilesimler, burada saglanan bir bilesigin, oda sicakliginda kati olani ancak rektum sicakliginda sivi olan ve dolayisiyla rektumda eriyerek etkin maddeleri salan, uygun ve irite edici olmayan bir eksipiyan ile karistirilmasi yoluyla hazirlanabilir. Bu tip materyaller, bunlar ile sinirli olmamak üzere kakao yagi, balmumu ve polietilen glikolleri ihtiva eder.

Burada saglanan farmasötik bilesimlerin topikal uygulamasi, istenen tedavi, topikal uygulama ile kolaylikla erisilebilir alanlara veya organlara yer verdiginde faydali olur. Cilde yönelik topikal uygulamalar için farmasötik bilesim, etkin maddeyi bir tasiyici içinde süspansiyon formunda veya çözülmüs sekilde içeren uygun bir merhem ile formüle edilmelidir. Burada saglanan bilesiklerin topikal uygulamasina yönelik tasiyicilar, bunlar ile sinirli olmamak üzere mineral yagi, sivi petrolatum, beyaz petrolatum, propilen glikol, polioksietilen polioksipropilen bilesigi, emülsifiye edici mum veya suyu içerir. Alternatif olarak farmasötik bilesim, etkin maddeyi, emülgatör ajani ile uyumlu bir tasiyici içinde süspansiyon formunda veya çözülmüs sekilde içeren uygun bir losyon veya krem ile formüle edilebilir. Amaca uygun tasiyicilar, bunlar ile sinirli olmamak üzere mineral yagi, sorbitan monostearat, polisorbat 60, setil esterler mum, setearil alkol, 2-oktild0dekanol, benzil alkol ve su örneklerini içerir. Burada saglanan farmasötik bilesimler, bir rektal fitil formülasyonu ile veya uygun bir Iavman formülasyonunda alt bagirsak sistemine de topikal olarak uygulanabilir. TopikaI-transdermal yamalar da kapsam dahilindedir.

Burada saglanan farmasötik bilesimler, nazal aerosol veya inhalasyon yoluyla verilebilir.

Bu tip bilesimler, farmasötik formülasyonlar sahasinda iyi bilinen tekniklere uygun olarak hazirlanir ve benzil alkol veya baska uygun koruyucular, biyoyararlanimi artirmak üzere emilim artiricilar, florokarbonlar ve ilgili teknikte bilinen baska çözücü veya dispersiyon ajanlari kullanilarak salin içerisinde solüsyonlar formunda hazirlanabilir.

Burada saglanan bilesimler, burada tarif edilen formüllere sahip bir bilesigin ve bir veya daha fazla sayidaki ilave terapötik veya profilaktik ajanin bir kombinasyonunu içerdigi zaman, hem bilesik, hem de ilave ajanin, bir mono terapi rejiminde normal olarak verilen dozajin yaklasik %1 ila %100'ü ve daha Çok tercih edildigi haliyle yaklasik %5 ila %95'i araligindaki dozaj düzeylerinde bulunmalari gerekir. Ilave ajanlar. bir çok dozlu rejimin bir parçasi olarak, burada saglanan bilesiklerden ayri olarak uygulanabilir. Alternatif olarak bu ajanlar, bir tek dozaj formunun bir parçasi olabilir ve burada saglanan bilesikler ile bir tek bilesimde karistirilmis durumda bulunabilir.

Burada tarif edilen bilesikler, yaklasik 0.5 ile yaklasik 1000 mg/kg beden agirligi arasindaki bir dozajda, alternatif olarak 1 mg ve 1000 mg/doz arasindaki dozajlarda, her 4 ila 120 saatte bir, ya da ilgili ilacin gerekliliklerine uygun olarak örnegin enjeksiyon yoluyla intravenöz, intraarteriyel, subdermal, intraperitoneal, intramusküler, ya da subkütanöz sekilde; veya oral, bukkal, nazal, transmukozal, topikal olarak, bir oftalmik preparat içerisinde, ya da inhalasyon yoluyla uygulanabilir. Burada tarif edilen metotlar, istenen veya belirtilen etkiye ulasmak üzere bilesigin veya bilesige ait bilesimin etkili bir miktarinin uygulanmasini öngörür. Tipik oldugu üzere burada saglanan farmasötik bilesimler, günde yaklasik 1 ila yaklasik 6 kere, ya da alternatif olarak sürekli infüzyon formunda verilecektir.

Bu uygulama sekli, kronik veya akut terapi olarak kullanilabilir. Tekli dozaj formu üretmek üzere tasiyici materyal ile birlestirilebilen etkin maddenin miktari, tedavi edilen konakçiya ve belirli ilaç verme sekline bagli olarak degisecektir. Tipik bir preparat, yaklasik %5 ila yaklasik %95 etken bilesik (ala) içerecektir. Alternatif olarak bu tip preparatlar, yaklasik Yukarida belirtilenlerden daha düsük veya daha yüksek dozlar da gerekebilir. Herhangi belirli bir hastalik için spesifik dozaj ve tedavi rejimleri; kullanilan spesifik bilesigin aktivitesi, yas, beden agirligi, genel saglik durumu, cinsiyet, diyet, ilaç verme süresi, ifrazat orani, ilaç kombinasyonu, hastaligin, durumun veya semptomlarin siddeti ve seyri, hastanin hastaliga, duruma veya semptomlara yatkinligi ve tedavi eden hekimin degerlendirmesi de dahil olmak üzere muhtelif faktörlere bagli olacaktir.

Hastanin durumunun iyilesmesi üzerine ve gerekmesi halinde burada saglanan bir bilesik, bilesim veya kombinasyonun bir idame dozunun verilmesi mümkündür. Akabinde, ilaç verme dozaji veya sikligi, ya da her ikisi birden, semptomlarin bir fonksiyonu olarak ve semptomlarin istenen seviyede iyilestirilmesi halinde, iyilestirilen durumun muhafaza edilecegi bir düzeye azaltilabilir. Ancak hastalar, hastalik semptomlarinin herhangi bir reküransi üzerine uzun dönemli esasta fasilali tedavi gerektirebilir.

Burada tarif edilen bilesikler, glutaminaz inhibe edebilir. Dolayisiyla burada tarif edilen bir bilesik ile tedavi edilecek bir hasta ve/veya birey; ilk olarak hasta ve/veya bireyin glutaminaz inhibisyonu ihtiyacinda olup olmadigini belirlemek üzere degerlendirmek yoluyla seçilebilir ve eger ki bireyin glutaminaz inhibisyonu ihtiyacinda oldugu belirlenir ise, bu durumda burada tarif edilen bir bilesik ilgili bireye verilir.

Bir bireyin, örnegin hastada glutaminaz varligi ve/veya aktivitesi ölçülerek, ilgili teknikte bilinen metotlar ile glutaminaz inhibisyonu ihtiyacinda oldugu degerlendirilebilir. Bazi yapilanmalara göre glutaminaz aktivitesi ve/veya düzeyi, kanser durumunda degerlendirilir.

Burada tarif edilen bir bilesigin verildigi bir hasta, örnek olarak, durumunda ve/veya advers etkilerdeki iyilesme bakimindan izlenebilir. Bir hastanin durumundaki iyilesme, örnegin kanserin (örnegin bir tümörün) büyümesi, büyümemesi veya gerilemesi izlenerek degerlendirilebilir. Bazi yapilanmalara göre hasta, bir radyolojik test kullanilarak veya hemolitik parametreler degerlendirilerek degerlendirilir.

Bir hasta ve/veya birey, burada tarif edilen bir bilesik ile tedavi edilmek bakimindan; istege göre, bireyden bir örnek alinmasi; alinan örnegin, i) bir referans standardi ile karsilastirildiginda düsük seviyede E-kadherin ekspresyonu ile, ii) bir referans standardi ile karsilastirildiginda yüksek seviyede vimentin ekspresyonu ile ve/veya iii) bir referans standardi ile karsilastirildiginda düsük veya azalmis seviyede piruvat karboksilaz ekspresyonu ile karakterize edilip edilmediginin belirlenmesi için degerlendirilmesi yoluyla seçilebilir ve eger ki hastanin, bir referans standardi ile karsilastirildiginda düsük seviyede E-kadherin ekspresyonu, ya da bir referans standardi ile karsilastirildiginda yüksek seviyede vimentin ekspresyonu sergiledigi belirlenir ise, bu durumda hastaya burada tarif edilen bir bilesik uygulanir.

Bazi yapilanmalara göre E-kadherin ekspresyon seviyesi, bir referans standardi ile karsilastirilir ve bahsedilen referans standardi, asagidaki atiflarin herhangi birinde karakterize edildigi üzere, bir epitel hücresindeki E-kadherin ekspresyon seviyesine yapilanmalara göre E-kadherin ekspresyon seviyesi, referans standardi ile karsilastirildiginda düsük veya azalmis durumda bulunur veya hiç yoktur. Bazi yapilanmalara göre E-kadherin ekspresyon seviyesi, E-kadherin kodlayan RNA seviyesi degerlendirilerek ölçülür. Bazi yapilanmalara göre E-kadherin ekspresyon seviyesi, E- kadherin protein ekspresyon seviyesi degerlendirilerek ölçülür. Bazi yapilanmalara göre 100 misli azalmis olur.

Bazi yapilanmalara göre vimentin ekspresyon seviyesi, bir referans standardi ile karsilastirilir ve bahsedilen referans standardi, asagidaki atiflarin herhangi birinde karakterize edildigi üzere, bir epitel hücresindeki vimentin ekspresyon seviyesine karsilik yapilanmalara göre vimentin ekspresyon seviyesi, vimentin kodlayan RNA seviyesi degerlendirilerek ölçülür. Bazi yapilanmalara göre vimentin ekspresyon seviyesi, vimentin protein ekspresyon seviyesi degerlendirilerek ölçülür. Bazi yapilanmalara göre vimentin 80, ya da %90 daha fazla olur. Bazi yapilanmalara göre vimentin ekspresyon seviyesi, artmis olur.

Bazi yapilanmalara göre piruvat karboksilaz ekspresyon seviyesi, bir referans standardi ile karsilastirildiginda düsük veya azalmis olur ve bahsedilen referans standardi, asagidaki atiflarin herhangi birinde karakterize edildigi üzere, bir epitel hücresindeki piruvat karboksilaz ekspresyon seviyesine karsilik gelir: (Yauch ve ark., (2005) Clin (2002) Nature Reviews Cancer 2(6):442). Bazi yapilanmalara göre piruvat karboksilaz ekspresyon seviyesi, referans standardi ile karsilastirildiginda yüksek veya artmis durumda bulunur veya hiç yoktur. Bazi yapilanmalara göre vimentin ekspresyon seviyesi, piruvat karboksilaz kodlayan RNA seviyesi degerlendirilerek ölçülür. Bazi yapilanmalara göre vimentin ekspresyon seviyesi, piruvat karboksilaz protein ekspresyon seviyesi ile degerlendirilir. Bazi yapilanmalara göre piruvat karboksilaz ekspresyon seviyesi, referans Bazi yapilanmalara göre piruvat karboksilaz ekspresyon seviyesi, referans standardi ile Hasta Numunesi / Örnegj dokümanda birbirlerinin yerine kullanilabilmektedir. Hastanin örnegi, bir doku, ya da bir beden sivisi, ya da bedensel bir ürün olabilir. Doku örnekleri, fikse edilmis, parafine gömülmüs, taze, ya da dondurulmus örnekleri ihtiva edebilir. Misal olarak doku örnegi, bir biyopsi, ya da bir yanak svabi ihtiva edebilir. Temsili dokularin arasinda akciger, meme, beyin, sinir dokusu, böbrek, yumurtalik, tiroit, pankreas, kolon, prostat, lenf nodu, cilt, saç folikülü ve tirnaklar bulunur. Temsili örneklerin arasinda, solit tümörlerden türetilen örnekler bulunur. Temsili beden sivilarinin arasinda kan, plazma, idrar, lenf, göz yasi, ter, tükürük, semen ve serebrospinal sivi bulunur. Temsili bedensel ürünlerin arasinda disa verilen nefes bulunur.

Doku, sivi veya ürün, hastadan alinip analiz edilebilir. Degerlendirme, asagida sayilanlarin bir veya daha fazlasini içerebilir: doku, sivi veya üründe analiz gerçeklestirilmesi; doku, sivi veya ürün analizinin istenmesi; doku, sivi veya ürün analizine ait sonuçlarin istenmesi; veya doku, sivi veya ürün analizi sonuçlarinin alinmasi. Örnek doku, sivi veya ürün, örnegin E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir genin ekspresyon seviyesi bakimindan analiz edilebilir. Örnek doku, sivi veya ürün, örnegin E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir proteinin ekspresyon seviyesi bakimindan analiz edilebilir. Örnek doku, sivi veya ürün, örnegin epitelden mezensimale geçis yolagi, E-kadherin yolagi, vimentin yolagi, ya da piruvat karboksilaz yolagi gibi önceden seçilmis bir sinyal iletim yolaginin veya fenotipik yolagin bir geninin veya çok sayidaki geninin gen ekspresyon seviyesi bakimindan analiz edilebilir. Örnek doku, sivi veya ürün, örnegin epitelden mezensimale geçis yolagi, E- kadherin yolagi, vimentin yolagi, ya da piruvat karboksilaz yolagi gibi önceden seçilmis bir sinyal iletim yolaginin veya fenotipik yolagin bir proteininin veya çok sayidaki proteininin protein ekspresyon seviyesi bakimindan analiz edilebilir. Örnekleri Degerlendirme metotlari Örnegin E-kadherin, vimentin ve piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir genin ekspresyon seviyesi, transkripte olan bir molekül, gen, protein, mRNA, genomik DNA, ya da cDNA ekspresyonunu saptamaya yönelik çok çesitli iyi bilinen metotlarin herhangi biri kullanilarak degerlendirilebilir. Gen ekspresyonu, örnegin mRNA gibi bir gen transkripti ölçülerek, translasyon geçirmis bir protein miktari ölçülerek, ya da gen ürün aktivitesi ölçülerek ölçülebilir veya izlenebilir; ve bunlarin tamami ilgili teknikte uzman kisiler tarafindan bilinen standart teknikler kullanilarak ölçülebilir. Bu tip metotlarin sinirlayici olmayan örnekleri arasinda, nükleik asit hibridizasyon metotlari, nükleik asit ters transkripsiyon metotlari, nükleik asit amplifikasyon metotlari, immünolojik protein deteksiyon metotlari, protein saflastirma metotlari, protein fonksiyon veya aktivite testleri E-kadherin E-kadherin geni, insan kromozomu 16'da bulunur. E-kadherin, kadherin üst ailesinden klasik bir kadherindir. Kodlanan E-kadherin proteini, bes adet ekstraselüler kadherin tekrari, bir adet transmembran bölgesi ve yüksek ölçüde konzerve bir sitoplazmik kuyruktan olusan, kalsiyuma bagimli, hücreler arasi bir adhezyon glikoproteinidir. Bu gendeki mutasyonlar, mide, meme, kolorektal, tiroit ve yumurtalik kanserleri gibi kanser tipleri ile iliskilendirilmistir. E-kadherin fonksiyon kaybinin, proliferasyon, invazyon ve/veya metastazi artirarak kanseri ilerlemesine katkida bulundugu öngörülmektedir. Bu proteinin ektodomeni, memeli hücrelerine bakteri adhezyonuna aracilik eder ve internalizasyon için sitoplazmik domen gerekir. Konsensüs splays pozisyonlarinda mutasyondan kaynaklanan E-kadherin transkript varyantlari saptanmistir.

Vimentin Vimentin geni, insan kromozomu 10'da bulunur ve proteinlerin bir ara filament ailesinin bir üyesini kodlar. Ara filamentler; mikro tübüler ve aktin mikro filamentleri ile birlikte, hücre seklinin ve sitoplazma bütünlügünün korunmasinda ve ayrica sitoskeletal etkilesimlerin stabilize edilmesinde yardimci olan hücre iskeletini olusturur. Vimentin, ayrica immün yanitlara aracilik etmede, düsük yogunluklu Iipoproteinden türeyen kolesterolün sinyal iletimi sürecine karisan bir dizi kritik proteininin bir organizatörü olarak islev gösterir.

Piruvat Karboksilei_z (PC) Bu PC geni, insan kromozomu 11'de bulunur ve piruvatin oksaloasetata karboksilasyonunu katalize eden piruvat karboksilaz proteinini kodlar. Aktif enzim, sadece mitokondriyum matrisinde bulunan bir tetrahedron içerisinde tertip olunan bir momo tetramerdir. Piruvat karboksilaz; glukoneogenez, Iipogenez, insülin salimi ve glutamat nörotransmiterin sentezi süreçlerine karisir. Bu gendeki mutasyonlar, piruvat karboksilaz eksikligi ile iliskilendirilmistir. Alternatif olarak farkli 5' UTR'lere sahip olan, ancak ayni proteini kodlayan uçbirlesmesi geçirmis transkript varyantlari saptanmistir.

Nükleik Asit Molekülleri Burada tarif edilen metotlar, örnegin E-kadherin mRNA seviyesi, Vimentin mRNA seviyesi, piruvat karboksilaz mRNA seviyesi gibi, E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir genin ekspresyonu bakimindan bir numunenin, burada tarif edilen gene karsilik gelen izole nükleik asitler tabaninda degerlendirilmesi ile ilgili olabilir. Burada kullanildigi haliyle "nükleik asit" veya "nükleik asit molekülü" terimi ile kastedilen, DNA molekülleri (örnegin cDNA veya genomik DNA) ve RNA molekülleri (örnegin mRNA) ve nükleotit analoglari kullanilarak üretilen DNA veya RNA analoglarini içerir. Nükleik asit molekülü, tek iplikli veya çift iplikli olabilir.

Bir "izole" nükleik asit molekülü, kendi dogal kaynaginda bulunan diger nükleik asit moleküllerinden ayrilmis oldugu nükleik asit molekülüdür. "Izole edilmis" bir nükleik asit molekülü, kendinin türemis oldugu organizmanin genomik DNA'sinda kendini dogal olarak kusatan dizilerden (örnegin protein kodlayan dizilerden) (yani nükleik asidin 5' ve 3' uçlarinda bulunan dizilerden) temiz durumda bulunur. Örnegin mRNA gibi bir "izole" nükleik asit molekülü, kendinin türemis oldugu hücre veya doku kaynagindan gelen baska hücresel materyalden veya baska kirletici proteinlerden büyük ölçüde temiz olabilir.

Burada tarif edilen bir nükleik asit molekülü, standart moleküler biyoloji teknikleri ve ilgili teknikte uzman kisilerce bilinen veri tabani kayitlarinda mevcut dizi bilgileri kullanilarak izole edilebilir. Bu tip nükleik asit dizilerin tamami veya bir kismi kullanilarak, burada tarif edilen nükleik asit molekülleri, standart hibridizasyon ve klonlama teknikleri üzerinden izole edilebilir (örnegin bkz. Sambrook ve ark., ed., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2. Baski, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1989).

Burada tarif edilen bir nükleik asit molekülü, bir sablon olarak cDNA, mRNA, ya da genomik DNA ile ve uygun oligonükleotit primerleri kullanilarak standart PCR amplifikasyon tekniklerine göre amplifiye edilebilir. Bu sekilde amplifiye edilen nükleik asit molekülleri, uygun bir vektör içerisine klonlanip, DNA dizi analizi ile karakterize edilebilir.

Dahasi, bir nükleik asit molekülünün tamamina veya bir kismina karsilik gelen oligonükleotitler, örnegin bir otomatik DNA sentezleyicisi kullanilarak standart sentez teknikleri üzerinden hazirlanabilir.

Bir izole nükleik asit molekülü, burada tarif edilen genin bir nükleik asidinin nükleotit dizisi ile, ya da burada tarif edilen gene karsilik gelen bir proteini kodlayan bir nükleik asidin nükleotit dizisi ile tamamlayici olan bir nükleotit dizisine sahip bir nükleik asit molekülü içerebilir. Belirli bir nükleotit dizisi ile tamamlayici olan bir nükleik asit molekülü, ilgili nükleotit dizisi ile, bununla hibritleserek bir stabil dubleks olusturacagi kadar tamamlayici olan bir nükleik asit molekülüdür.

Burada tarif edilen bir nükleik asit molekülü, bir nükleik asit dizisinin sadece bir kismini ihtiva edebilir. Bu tip nükleik asit molekülleri, örnek olarak, bir prob veya primer olarak kullanilabilir. Prob/primer, büyük ölçüde saflastirilmis bir veya daha fazla oligonükleotit olabilir. Burada tarif edilen bir nükleik asit molekülü dizisine dayali olan problar, burada tarif edilen genlere karsilik gelen transkriptleri veya genomik dizileri saptamak için kullanilabilir. Söz konusu prob, mesela bir radyoizotop, bir flüoresans bilesigi, bir enzim veya bir enzim ko-faktör gibi bir isaret grubu içerebilir. Bu tip problar, örnegin bir hastadan alinan hücrelerin bir örneginde proteini kodlayan bir nükleik asit molekülünün seviyeleri ölçülerek, proteini ifade eden hücreler veya dokulari saptamaya yönelik bir tanisal test kitinin bir parçasi olarak kullanilabilir.

Gen Ekspresyonu Saptama Metotlari Bir gen transkripti, örnegin bundan yapilan bir mRNA veya cDNA'yi saptamaya ve/veya miktarini belirlemeye yönelik metotlar, bunlarla sinirli olmamak üzere Southern Blot analizi, Northern Blot analizi, polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) analizleri ve prob array analizlerini ihtiva edebilir. Bir gen transkripti, örnegin bundan yapilan bir mRNA veya cDNA'yi saptamaya ve/veya miktarini belirlemeye yönelik metotlar, bunlarla sinirli olmamak üzere, örnegin gen transkripti için, örnegin bundan yapilan bir mRNA veya cDNA için spesifik olan bir prob ile hibridizasyon gibi, hibridizasyon tabanli metotlari ihtiva edebilir. Bir gen transkripti, örnegin bundan yapilan bir mRNA veya cDNA'nin seviyesi, numune, ya da bundan yapilan veya amplifiye edilen mRNA veya CDNA, bir nükleik asit mikro array, ya da çip array üzerine uygulanarak analiz edilebilir.

Bir gen transkripti, örnegin bundan yapilan bir mRNA veya cDNA'nin seviyesi, bir polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) tabanli metot ile, örnegin kantitatif PCR, kantitatif gerçek zamanli PCR, gerçek zamanli PCR, ters transkripsiyon PCR, gerçek zamanli ters transkripsiyon PCR ile analiz edilebilir. Bir gen transkripti, örnegin bundan yapilan bir mRNA veya cDNA'nin seviyesi, örnegin kantitatif RNA dizisi belirleme gibi bir sekanslama tabanli metot ile analiz edilebilir.

Bir gen transkripti, örnegin bundan yapilan bir mRNA veya cDNA'nin seviyesi, ilgili teknikte bilinen i'n situ veya in vitro metotlar ile belirlenebilir. In vitro metotlar itibariyla, RNA'nin, mesela bir numunenin hücreleri gibi bir numuneden saflastirilmasi için, mRNA izolasyonuna karsi seçim yapmayan her RNA izolasyon teknigi kullanilabilir (bkz. örnegin Ausubel ve ark., ed., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, New York 1987-1999). Ilaveten, çok sayidaki doku örnekleri, örnegin tek adimli RNA izolasyon iyi bilinen teknikler kullanilarak kolaylikla islenebilir. In situ metotlar bakimindan mRNA'nin deteksiyon çalismasindan önce hücrelerden izole edilmesi gerekmez. Bu tip metotlarda bir hücre veya doku örnegi, bilinen histolojik metotlar kullanilarak hazirlanabilir / islenebilir. Örnek daha sonra bir süport üzerine sabitlenebilir ve daha sonra, ilgi dahilindeki gen transkriptini kodlayan mRNA ile hibridize olabilen bir prob ile temas ettirilir. Örnegin mRNA gibi bir gen transkriptinin tayinleri mutlak ekspresyon seviyesi esasinda, normallestirilmis ekspresyon seviyesi esasinda, ya da göreli ekspresyon seviyesi esasinda olabilir. Ekspresyon seviyeleri, kendi ekspresyon seviyesinin, örnegin yapisal olarak ifade edilen bir "gardiyan" gen gibi stabil olarak ifade edilen bir baska genin ekspresyon seviyesi ile karsilastirilarak, gen transkriptine ait mutlak ekspresyon seviyesi düzeltilerek normalize edilebilir. Normalize etmeye uygun genler, örnegin histon H3 geni veya aktin geni gibi gardiyan genleri ihtiva eder. Bu normalizasyon çalismasi, örnekler arasinda ekspresyon seviyelerinin karsilastirilmasina, örnegin bir hastadan alinan bir birinci örnegin ayni hastadan, örnegin farkli bir dokusundan veya farkli bir zaman noktasinda alinan bir ikinci örnek ile kiyaslanmasina; ya da farkli kaynaklardan alinan örnekler arasinda, örnegin bir hastadan alinan bir örnek ile bir baska hastadan alinan bir örnek arasinda karsilastirma yapilmasina imkan verir.

Ekspresyon seviyesi, bir göreli ekspresyon seviyesi olarak saglanabilir. Göreli ekspresyon seviyesi, örnegin mRNA gibi gen transkripti ekspresyonunun mutlak seviyesi, bir referans standardi ile karsilastirilarak belirlenebilir. Referans standardi, genotipik veya fenotipik olarak tanimli bir örnekte ilgi dahilindeki gen transkriptinin ekspresyon seviyesini ihtiva edebilir. Referans standardi, genotipik veya fenotipik olarak bir epitel hücresi olarak tanimlanan bir hücrede, örnegin E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi ilgi dahilindeki gen transkriptinin ekspresyon seviyesi olabilir. Bir epitel hücresi, asagidaki atiflarin herhangi birine göre karakterize edilebilir: (Yauch ve ark., (2005) Clin Cancer Res Nature Reviews Cancer 2(6):442). Örnegin E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir gen transkriptinin ekspresyon seviyesi, ekspresyon seviyesinde bir degisimin meydana gelmis olup olmadigini belirlemek üzere en az iki zaman noktasinda ölçülebilir. Örnegin ekspresyon seviyesi, burada tarif edilen bir bilesik ile tedaviden önce ve sonra ölçülebilir, ya da burada tarif edilen bir bilesik ile yapilan tedavi sürmekte iken bir veya daha fazla zaman noktasinda ölçülebilir. Ekspresyon seviyesinin azaldigi bulunur ise, örnegin bir referans standardina kiyasla azalmis bir E-kadherin ekspresyonu ve/veya bir referans standardina kiyasla artmis bir vimentin ekspresyonu bulunur ise, bireye burada tarif edilen bir bilesik verilebilir. Referans standardi, tanimlanmis bir epitel hücresinde ilgi dahilindeki gen transkriptinin ekspresyon seviyesi olabilir. Bir epitel hücresi, asagidaki atiflarin herhangi biri gibi, ilgili teknikte bilinen metotlara göre karakterize edilebilir: (Yauch ve ark., Thiery ve ark., (2002) Nature Reviews Cancer 2(6):442).

Proteinler Burada tarif edilen metotlar, örnegin E-kadherin protein seviyesi, vimentin protein seviyesi, piruvat karboksilaz protein seviyesi gibi, E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir genin ekspresyonu bakimindan bir numunenin, burada tarif edilen gene karsilik gelen izole proteinler esasinda degerlendirilmesi ile ilgili olabilir. Bu husus, bunlarin biyolojik olarak aktif kisimlari, varyantlari, izoformlari, ya da splays varyantlarinin degerlendirilmesini de kapsar. Ilgi dahilindeki proteine karsilik gelen dogal polipeptit, numuneden, ilgili teknikte uzmanlar tarafindan bilinen standart protein saflastirma teknikleri kullanilarak uygun bir saflastirma semasi ile izole edilebilir.

Bir i'izole" veya "saflastirilmis" protein veya bu proteinin biyolojik olarak aktif kismi, kendinin türemis oldugu hücre veya doku kaynagindan gelen hücresel materyalden veya baska kirletici proteinlerden büyük ölçüde temizdir. "Hücresel materyalden büyük ölçüde temiz" ifadesi, proteinin, kendinin izole edilmis oldugu hücrelerin hücresel bilesenlerinden ayrildigi preparatlarini içerir. Bir polipeptidin biyolojik olarak aktif kisimlari, proteinin, tam uzunluktaki proteinden daha az sayida amino asitler içeren ve karsilik gelen tam uzunluklu proteinin en az bir aktivitesini sergileyen amino asit dizisi ile yeterli ölçüde özdes olan veya bu amino asit dizisinden türeyen amino asit dizilerini içeren polipeptitleri ihtiva edebilir. Biyolojik olarak aktif kisimlar tipik olarak karsilik gelen proteininin en az bir aktivitesine sahip bir domeni veya motifi içerir.

Protein Ekspresyonunu Saptama Metotlari Bir protein veya polipeptidin ekspresyon seviyesi, ilgili teknikte uzmanlar tarafindan iyi bilinen bir dizi yoldan herhangi biri ile saptanabilir veya kantifiye edilebilir. Örnegin E- kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir protein veya polipeptidi saptamaya ve/veya kantifiye etmeye yönelik metotlar, bunlarla sinirli olmamak üzere, biyokimyasal metotlari, mesela elektroforez, kapiler elektroforez, yüksek performansli sivi kromatografisi (HPLC), ince tabakali kromatografi (TLC), hiperdifüzyon kromatografi ve benzerlerini, ya da çesitli immün testlerini, örnegin sivi veya jel presipitin reaksiyonlari, immün difüzyonu (tek veya ikili), immün elektroforez, radyoimmün testi (RIA), enzime bagli immünosorbent spot testleri (ELISA), immün flüoresans testleri, Western blotlama, immünsitokimya, in situ hibridizasyon, flüoresans aktivasyonlu hücre siniflandirmasi (FACS) ve benzerlerini ihtiva edebilir. Ilgili teknikte uzman kisi, hücrelerin burada tarif edilen proteini veya polipeptidi ifade edip etmedigini belirlemede kullanilmak üzere bilinen protein / antikor deteksiyon metotlarini kolaylikla uyarlayabilir.

Bir protein veya polipeptit, bir immün testi kullanilarak saptanabilir. Burada kullanildigi haliyle, immün testleri, bir proteine veya polipeptide spesifik olarak baglanmak üzere bir antikor kullanilan testleri ihtiva eder. Bir immün testi, polipeptidi izole etmek, hedeflemek ve kantifiye etmek üzere diger fiziksel veya kimyasal özellikler kullanilmasinin aksine, bir proteinin veya polipeptidin bir antikora spesifik olarak baglanmasinin saptanmasi yoluyla karakterize edilebilir. Polipeptit, iyi kabul görmüs olan bir dizi immünolojik baglanma testlerinin herhangi biri kullanilarak saptanabilir veya kantifiye edilebilir (bkz. örnegin U.S. incelemesi için ayrica bkz. Asai (1993) Methods iri Cell Biology Cilt 37: Antibodies In Cell Biology, Academic Press, Inc. New York; Stites & Terr (1991) Basic and Clinical lmmunology 7. Baski. Bir protein veya polipeptidin saptanmasi ve/veya kantifiye edilmesine yönelik immün testleri, ilgili teknikte uzmanlarca iyi bilinen çok çesitli formatlarda olabilir. Örnegin E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir proteine veya polipeptide karsilik gelen, örnegin saptanabilir bir isareti (gerek direkt olarak gerekse indirekt olarak isaretli) bulunan bir antikor gibi, bir proteine veya polipeptide baglanabilen bir antikor, proteini veya polipeptidi saptamak üzere kullanilabilir. Antikorlar, poliklonal ya da monoklonal olabilir. Bir saglam antikor veya bunun bir fragmanini, örnegin Fab veya F(ab')2 kullanilabilir. "Isaretli" terimi, prob veya antikor itibariyla, saptanabilir bir maddenin prob veya antikora dogrudan kenetlenmesi (yani fiziksel baglanti saglanmasi) yoluyla prob veya antikorun dogrudan isaretlenmesini ve ayrica, prob veya antikorun, dogrudan isaretlenmis bir baska reaktif ile reaktivite üzerinden dolayli olarak isaretlenmesini içerecek sekilde kullanilmaktadir. Dolayli isaretlemeye dair örnekler, flüoresan ile isaretlenmis bir sekonder antikorun kullanimi ile bir primer antikorun saptanmasina ve bir DNA probunun biotin ile uçtan isaretlenerek, flüoresan ile isaretli streptavidin ile saptanmasinin saglanmasina yer verir. Antikor ayrica isaretlenmis, örnegin radyoaktif sekilde isaretlenmis, kromofor ile isaretlenmis, florofor ile isaretlenmis, ya da enzim ile isaretlenmis bir antikor olabilir. Örnegin E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir protein ile, örnegin E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir protein veya polipeptidin gen transkriptine karsilik gelen açik okuma çerçevesi tarafindan kodlanan protein ile, ya da kendi normal post-translasyonal modifikasyonunun tamami veya bir kismini geçirmis olan bir protein veya polipeptit ile spesifik olarak baglanan bir antikor türevi, örnek olmasi bakimindan bir substrat ile veya mesela biotin-streptavidin gibi bir protein-Iigant çiftinin proteini veya Iigandi ile konjüge durumdaki bir antikor, ya da bir antikor fragmani, örnegin bir tek zincirli antikor, bir izole antikor hiper degisken domeni vs. kullanilabilir.

Hücrelerin proteinleri, ilgili teknikte uzman kisilerce iyi bilinen teknikler kullanilarak izole edilebilir. Kullanilan protein izolasyon metotlari için bkz., örnegin Harlow ve Lane (Harlow ve Lane, 1988, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Ekspresyon seviyesi, bir göreli ekspresyon seviyesi olarak saglanabilir. Göreli ekspresyon seviyesi, protein ekspresyonunun mutlak seviyesi, bir referans standardi ile karsilastirilarak belirlenebilir. Referans standardi, genotipik veya fenotipik olarak tanimli bir örnekte ilgi dahilindeki proteinin ekspresyon seviyesini ihtiva edebilir. Referans standardi, genotipik veya fenotipik olarak bir epitel hücresi olarak tanimlanan bir hücrede, örnegin E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi ilgi dahilindeki proteinin ekspresyon seviyesi olabilir. Bir epitel hücresi, asagidaki atiflarin herhangi birinde tarif edildigi gibi, ilgili teknikte bilinen metotlara göre karakterize edilebilir: (Yauch ve ark., (2005) Clin (2002) Nature Reviews Cancer 2(6):442). Örnegin E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir protein veya polipeptidin ekspresyon seviyesi, ekspresyon seviyesinde bir degisimin meydana gelmis olup olmadigini belirlemek üzere en az iki zaman noktasinda ölçülebilir. Örnegin ekspresyon seviyesi, burada tarif edilen bir bilesik ile tedaviden önce ve sonra ölçülebilir, ya da burada tarif edilen bir bilesik ile yapilan tedavi sürmekte iken bir veya daha fazla zaman noktasinda ölçülebilir. Ekspresyon seviyesinin azaldigi bulunur ise, örnegin bir referans standardina kiyasla azalmis bir E-kadherin ekspresyonu ve/veya bir referans standardina kiyasla artmis bir vimentin ekspresyonu bulunur ise, bireye burada tarif edilen bir bilesik verilebilir.

Kitler Gene burada, örnegin E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir genin gen ekspresyonunun seviyesini test etmeye yönelik vasitalar içeren kitler tarif edilmektedir. Söz konusu kit, örnegin E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen bir genin gen ekspresyon ürünü ile etkilesime girebilen bir ajani ihtiva edebilir.

Söz konusu kit, örnegin E-kadherin, vimentin, piruvat karboksilaz gibi burada tarif edilen genlerin çok sayisinin gen ekspresyon ürünleri ile etkilesime girebilen çok sayida ajanlari ihtiva edebilir. Söz konusu ajan, bunlarla sinirli olmamak üzere bir antikor, çok sayida antikor, bir oligonükleotit, ya da çok sayida oligonükleotit ihtiva edebilir. Gen ekspresyon ürünü, bunlarla sinirli olmamak üzere, transkripte olmus bir molekül, bir RNA molekülü, bir polipeptit, bir protein, genomik DNA, ya da cDNA ihtiva edebilir.

Söz konusu kit, burada tarif edilen testleri gerçeklestirmeye yönelik opsiyonel reaktifler de içerebilir. Söz konusu kit, örnek olarak, nükleik asitlerin bir hastanin örneginden izole edilmesi, örneklerin mesela qRT-PCR ile amplifiye edilmesi ve örneklerin yukarida tarif edilen ajana uygulanmasi için; ya da proteinlerin bir bireyin örneginden izole edilmesi ve örneklerin yukarida tarif edilen ajana uygulanmasi için; ya da bireyin örneginin yukarida tarif edilen ajana direkt olarak uygulanmasi için gerekli olabilen tamponlari, solventleri, stabilizörleri, koruyucu maddeleri, saflastirma kolonlarini, deteksiyon reaktiflerini ve enzimleri ihtiva edebilir. Bir kit, ayrica pozitif ve negatif kontrol örnekleri, örnegin kontrol nükleik asit örnekleri (örnegin kanser olmayan bir bireyin nükleik asit örnegi, ya da tümör harici bir doku örnegi, ya da bir kanser tedavisi almamis bir birey, ya da bireyin örnekleri ile ayni zamanda test edilecek baska test örnekleri içerebilir. Bir kit, hasta örneklerini almak ve islemden geçirmek, örnekleri gen ekspresyon testi seviyesine uygulamak ve test sonuçlarini yorumlamak için kilavuz bilgiler saglayabilen talimat materyalleri de içerebilir.

Kitin bilesenleri, herhangi bir formda, örnegin sivi, kurutulmus, yari kurutulmus formda, ya da Iiyofilize formda, ya da dondurulmus bir durumda saklanacak bir formda saglanabilir.

Tipik oldugu üzere kitin bilesenleri, steril olan bir formda saglanir. Reaktifler bir sivi çözeltide saglandigi zaman, sivi çözelti genellikle bir sulu çözelti, örnegin bir steril sulu çözelti olur. Reaktifler bir kurutulmus formda saglandigi zaman, uygun bir solvent eklenerek uygulamaya hazir hale getirilir. Solvent, örnegin steril tampon, kit içerisinde Söz konusu kit, gen ekspresyonu testleri seviyesinde kullanilmaya uygun bir konsantrasyondaki kit bilesenleri için bir veya daha fazla kap veya test kullanilmak üzere seyreltme talimatlari içerebilir. Söz konusu kit, test bilesenleri ve bilgi materyali için ayri kaplar, bölücüler veya bölmeler içerebilir. Örnek olarak pozitif ve negatif kontrol örnekleri, bir sise veya viyal içerisinde bulunabilir, klinik olarak uyumlu siniflandirici steril plastik bir ambalaj içerisine kapatilabilir ve bilgi materyali ise bir plastik paket içerisinde saglanabilir.

Söz konusu kit, çok sayida (örnegin paket halinde) ayri kaplar içerebilir ve bunlarin her biri, bir ajanin bir veya daha fazla ünite formunu (örnegin bir testte kullanilmak üzere) içerir. Kitlerin kaplari, hava geçirmez ve/veya su geçirmez olabilir. Kap, kullanima yönelik etiketlere sahip olabilir.

Söz konusu kit, testi gerçeklestirmeye ve yorumlamaya yönelik bilgi materyali içerebilir.

Söz konusu kit, örnegin bir tedavi merkezi veya bir saglik uzmani gibi, test sonuçlarinin nereye bildirilecegine yönelik kilavuz bilgiler de saglayabilir. Söz konusu kit, burada tarif edilen bir gen aktivite testinin sonuçlarini bildirmeye yönelik formlar ve bu formlarin ve diger ilgili bilgilerin nereye gönderilecegi hakkinda adres ve kontakt bilgileri; veya sonuçlarin bir online veri tabanina veya bir online basvuru halinde bildirilmesi için bir URL (Uniform Resource Locator) adresi içerebilir. Bir baska yapilanmaya göre bilgi materyali, testin sonuçlarina bagli olarak bir hastaya, bir anti-kanser kök hücre ajani ile tedavi verilip verilmeyecegi hakkinda kilavuz bilgiler içerebilir.

Kitlerin bilgi materyali, kendi formu bakimindan sinirli degildir. Pek çok durumda, örnegin talimatlar formundaki bilgi materyali, örnegin bir basili tekst çizimler ve/veya fotograf gibi, örnegin bir etiket veya basili sayfa gibi bir matbu formda saglanir. Ancak bilgi materyali, örnegin bilgisayarda okunabilir materyaller, video kayitlari, ya da ses kayitlari gibi baska formatlarda da saglanabilir. Kitin bilgi materyali, örnegin kitin bir kullanicisinin gen aktivite testi hakkinda ve/veya burada tarif edilen metotlarda nasil kullanilacagi hakkinda önemli bilgiler alabilecegi bir fiziksel adres, e-posta adresi, internet sitesi, ya da telefon numarasi gibi temas bilgileri olabilir. Bilgi materyali, formatlarin herhangi bir kombinasyonu halinde de saglanabilir.

Bir bireyin örnegi, misal olarak örnegi bir testte degerlendiren ve bir sonuç çikaran bir test saglayicisina, örnegin bir hizmet saglayiciya (mesela bir üçüncü tarafin tesisine) veya bir saglik uzmanina gönderilebilir. Örnek olmasi bakimindan bir test saglayici, bir bireyin, misal olarak bir doku örnegi, ya da bir plazma, kari veya serum örnegi gibi bir örnegini alabilir ve bu örnegi, burada tarif edilen bir test ile degerlendirebilir ve bireyin, burada tarif edilen bir inhibitör ile tedavi almaya aday olup olmadigini belirleyebilir. Test saglayici, bireyin burada tarif edilen bir inhibitör ile tedavi almaya aday oldugunu saglik uzmanina bildirebilir ve adaya burada tarif edilen inhibitör verilir. Test saglayici, degerlendirmenin sonuçlarini ve istege göre bir veya daha fazla tani, prognoz, ya da uygun tedavi opsiyonlari hakkindaki kararlari, örnegin bir saglik uzmanina, ya da hastaya, ya da bir sigorta sirketine, örnegin mektup veya elektronik olarak, ya da bir online veri tabani üzerinden uygun bir formatta gönderebilir. Test saglayici tarafindan toplanan ve saglanan bilgi, bir veri tabaninda saklanabilir. ÖRNEKLER Örnek A Bu örnekte glutaminaz enzimatik aktivitesi, bir bagli sonlanim noktasi testinde Ölçülür.

Glutamin ve fosfat, GAC içerisine, sirasiyla Km ve AC5U'ye esit bir konsantrasyonda eklenir ve GAC konsantrasyonu, 60 dakika süresince bir lineer reaksiyon verecek sekilde ayarlanir. Üretilen glutamat, glutamat dehirojenazin bir kinetik fazlaligi ile 2-OG'ye dönüstürülür. Ikinci adim, NAD fazlasi inhibitör etki sergilediginden NAD için 2X Km olarak ayarlanir. Ancak üçüncü kenetleyici enzim olarak diaforaz ajaninin kinetik fazlaligi, NAD'yi NADH'den geri kazandirir ve böylece NAD konsantrasyonu testin süresince sabit tutulur.

Kendisi de kinetik fazlalikta saglanan diaforaz, GDH tarafindan üretilen NADH'yi tekrar NAD'ye oksitler ve ayni zamanda rezasurin, yüksek ölçüde flüoresansli resorufin halinde indirgenir. Resorufin, test, SDS ile Ex544/Em590 tarafindan durdurulduktan sonra ölçülür.

Sinyaldeki bir düsüs, bagli enzim sistemine ait bazi bilesenlerde inhibisyon söz konusu oldugunu gösterir. Muhtemel eslesmeler, salt GDH/diaforaza karsi tekrar taranir ve böylece bir ikinci testte bagli enzim sistemindeki eslesmeler elimine edilir. 1. Materyaller BSA Sigma #3294 (proteaz içermez) diaforaz Worthington Enzyme LSOO4330. ddHZO içerisinde 10 mg/ml seviyesinde yeniden süspansiyon haline getirilmis ve -80C'de saklanmis. glutamat Sigma G7882 dehidrojenaz glutamin Sigma G3126 veya esdegeri Sigma H3375 veya esdegeri, NaOH ile pH 8.5 NAD Sigma N7004; not: desikatör disinda saklanir ise güç, inhibitörü bozacaktir. Küçük partiler satin alin ve çözeltide stoklar hazirlayarak - SOC'de saklayin. resazurin Sigma 199303 sodyum dodesil Sigma L4390 veya esdegeri sülfat fosfat(pH8.5) esdegerlerinden hazirlanir; 1M stok final konsantrasyonu, dibazik ve monobazik çözeltilerden her birinin 1 M stoklarindan hazirlanir. 2. Tamponlar 5X Substrat karisimi (1X Tampon son konsantrasyonu, arti 13 mM glutamin, 100 pM resazurin, 50 pg/ml diaforaz) 1.2X Enzim karisimi (1X Tampon son konsantrasyonu, arti 0.875 ug/ml GAC, Stop karisimi (ddHZO içinde %6 SBS) Reaksiyon prosedürü 1. 1 pl bilesik, %100 DMSO içerisine eklenir 2. 40 pl enzim karisimi eklenir ve oda sicakliginda 60 dakika inkübe edilir 3. Reaksiyonu baslatmak için 10 pl substrat karisimi eklenir Örnek B: Bu örnekte bir bilesigin, glutaminaz HTS metodunun glutamat dehidrojenaz ve diaforaz içeren bagli enzim test sistemini inhibe etme potansiyeli, bir bagli sonlanim noktasi testi üzerinden test edilir. Glutamat, GDH içerisine Km kadar eklenir ve daha sonra 20G üretmek üzere bir redüktif deamidasyon gerçeklestirilir. NAD, sisteme 2X Km kadar eklenir ve NADH'ye dönüsümü, diaforaz aktivitesi ile izlenir. GDH'ye büyük kinetik asirilikta eklenen diaforaz, NADH'yi tekrar NAD'ye dönüstürerek, reaksiyondaki NDA düzeylerini sabit tutarken, ayni zamanda, rezasurin ajanini yüksek ölçüde resorufin ajanina indirger.

Resorufin, test, SDS ile Ex544/Em590 tarafindan durdurulduktan sonra ölçülür. Sinyaldeki bir düsüs, bagli enzim sistemine ait bazi bilesenlerde inhibisyon söz konusu oldugunu gösterir. 3. Materyaller BSA Sigma #3294 (proteaz içermez) diaforaz Worthington Enzyme LSOO4330. ddH20 içerisinde 10 mg/ml seviyesinde yeniden süspansiyon haline getirildi ve -8OC'de saklandi. glutamat Sigma G7882 dehidrojenaz glutamik asit Sigma G1251 veya esdegeri HEPES (pH8.5) Sigma H3375 veya esdegeri, NaOH ile pH 8.5 NAD Sigma N7004; not: desikatör disinda saklanir ise güç, inhibitörü bozacaktir. Küçük partiler satin alin ve çözeltide stoklar hazirlayarak - 80C'de saklayin. resazurin Sigma 199303 sodyum dodesil Sigma L4390 veya esdegeri sülfat 4. Tamponlar 2X Substrat karisimi (1X Tampon son konsantrasyonu, 40 uM resazurin, 1.8 mM glutamat, 20 ug/ml diaforaz) 10X NAD karisimi (1X Tampon son konsantrasyonu, 2.5X Enzim karisimi (1X Tampon son konsantrasyonu, GDH enzime uygun bir dogrusallik için belirlenir; örnegin burada tarif edildigi üzere, 0.02 ünite/ml final konsantrasyon elde etmek için 0.05 ünite/ml kullanilir) Reaksiyon prosedürü 1 pl bilesik, %100 DMSO içerisine eklenir ul enzim karisimi eklenir ve oda sicakliginda 60 dakika inkübe edilir pl NAD karisimi eklenir Reaksiyonu baslatmak için 25 ul substrat karisimi eklenir Reaksiyon, 25 pl %6 SBS ile durdurulur ve Ex544 Em 590 okunur 90%., 051 l-AH Era/PPha NacN 0 li: THF/Reflux VA ,/ DCM %3 ,/ ElOH/Rreflux ww/ý 1 \ __... \_< s _i .' \ .

TFA SA& %5 MH? PYBOPIDIPEN 0 "Äsxü . i.5 DMF/RTIOvem'ight 1I 3_ 5, g trans-siklopropan-1,2-diyldimetanol (l-2): Bilesik I-2, bildirilmis olan bir literatür prosedürüne uygun olarak hazirlandi (Org. Synth. süspansiyonunun içerisine (18,28)-dietil siklopropan-1,2-dikarb0ksilat (1 ekivalan) yavas sekilde 0 °C sicaklikta ilave edildi. ReaksiyOn karisimi daha sonra oda sicakligina isitildi ve 2 saat süresince geri sogutucuda kaynatildi. Sogutma yapildiktan sonra, heterojen karisim oda sicakliginda 18 saat süresince karistirildi. Reaksiyon dikkatli sekilde doymus NH4Cl çözeltisi, daha sonra EtOAc ilave edilerek baskilandi. Reaksiyon kütlesinin sonraki 5 saat karistirilmasi sonucunda, açik sari renkli bir kati çökeldi ve bu kati ise bir selit pedinden filtrelendi. Selit fazi ayrica EtOAc ile yikandi. Bir araya getirilen organik fazlar, macunumsu bir kütle vermek üzere buharlastirildi ve bu kütle, baslikta belirtilen bilesigi I-2 vermek üzere kolon kromatografi (eluent olarak %80 EtOAC/heksan as eluent). trans-1,2-bis(bromometil)siklopropan (l-3): Bilesik l-3, bildirilmis olan bir prosedüre uygun olarak hazirlandi (Tetrahedron Lett. 1997, 53, çözeltisinin içerisine 0 °C sicaklikta yavas sekilde brom (2.1 ekivalan) ilave edildi. Reaksiyon karisimi 0.25 saat süresince karistirildi, daha sonra trans-siklopropan-1,2-diyldimetanol l-2 (1 ekivalan) (bir THF çözeltisi formunda) eklendi. Daha sonra oda sicakligina isitildi ve bir saat karistirildi.

Ekstraksiyon çalismasinda uçucu materyallerin tamami buharlastirildi ve ham kütle, baslikta belirtilen bilesigi l-3 vermek üzere kolon kromatografi yoluyla (%30 EtOAc/heksan) saflastirildi. trans-2,2'-(siklopropan-1,2-diyl)diasetonitril (l-4): Bilesik l-4, bildirilmis olan bir prosedüre uygun olarak hazirlandi (Tetrahedron Lett. 1997, karisiminda çözüldü. NaCN (4 ekivalan) ilave edildikten sonra reaksiyon karisimi gece boyu geri sogutucuda kaynatildi. Uçucu materyallerin tamami, bir macunumsu kütle elde etmek üzere buharlastirildi ve bu ürün ise, su içinde çözüldü ve eter ile ekstrakte edildi. 8qu faz ayrica eter ile ekstrakte edildi ve bir araya getirilen organik fazlar, baslikta belirtilen bilesigi I-4 vermek üzere buharlastirildi. Bu materyal baskaca saflastirilmadan sonraki adim için kullanildi. trans-5,5'-(-siklopropan-1,2-diylbis(metilen))bis(1,3,4-tiadiazol-2-amin) (l-5): H2N7-\NH2 trans- içinde çözüldü ve içerisine tiosemikarbazid (2 ekivalan) ilave edildi. Reaksiyon karisimi, geri sogutucuda 100 °C sicaklikta 3 saat kaynatildi, daha sonra dikkatli sekilde doymus NaH003 çözeltisi eklenerek 0 °C sicaklikta baskilandi ve böylece pH Seviyesi yaklasik 8-9'a getirildi. katilar filtrelendi ve Çökelen trans-5,5'-(-sikl0propan-1,2- diylbis(metilen))bis(1,3,4tiadiazol2-amin) I-5 vermek üzere ayrica saflastirildi.

Bilesikler 1, 3, 5 ve 6 sentezi için genel prosedür: DMF içinde bulunan bir trans-5,5'-(-sikl0propan-1,2-diylbis(metilen))bis(1,3,4-tiadiazoI-2- amin (l-5) (1 ekivalan) ve uygun olan asit (3 ekivalan) süspansiyonunun içerisine PYBOP (3 ekivalan) ve DIPEA (6 ekivalan) ilave edildi ve gece boyu karistirildi. Reaksiyon karisimina daha sonra su eklendi ve meydana gelen materyal filtrelendi ve arzu edilen bilesigi vermek üzere saflastirildi. fenil asetamid) (1) (referans örnegi): 1H NMR (, 37-39 (piridin-2-il)asetamid) (3): 1H NMR (, 4.0 (s, 507.05. (piridin-3-il)asetamid) (5): 1H NMR (, Kütle (M*+1): 507.05. (tiofen-2-il)asetamid) (6): 1H NMR (, › ÜRSIlJx/g h I) 8H3.DMSIRTIuvemighl pH TsCi/TEA OTs NaGN ii)LiAIH4/THFIR &açmam-mm ii HO DCM/RTMZ h Tso wpmefiumz n 1-10 M1 !42 mi HsNÄN'NHQ RCHzcozH/ ,4 ,W CN H H2N`<,N`N #INS pvaopioipaq R HN- /_<>"J _',FA Sw 41 ,>-NH2 __“_._" s NI ,) NH R NC ”mi DMF/Rriovemigm `N } , i-1i ms 7.; o (3-metilensiklobütil)metanol (l-11): Bilesik l-10, bir ticari kaynaktan satin alindi ve HD bilesiginin hidrolizi, literatürde bildirilen içinde bulunan bir 3-metilensiklobütankarbonitril MD (1 ekivalan) çözeltisinin içerisine KOH (4 ekivalan) ilave edildi ve homojen karisim, geri sogutucuda 2 saat kaynatildi.

Sogutulduktan sonra uçucu materyallerin tamami buharlastirildi ve kati, su içinde süspansiyon haline getirildi. Çözeltinin pH degeri, 1N HCI eklenerek 2 seviyesine ayarlandi ve arzu edilen bilesik, etil asetat ile ekstrakte edildi. Bir araya getirilen organik fazlar, tuzlu su ile yikandi, susuz MgSO4 üzerinden kurutuldu ve kantitatif verimde 3- metilensiklobütankarboksilik asit vermek üzere buharlastirildi. Bu materyal direkt olarak sonraki adima tasindi.

THF içinde bulunan bir LiAIH4 (1.5 ekivalan) süspansiyonunun içerisine 3- metiIensiklobütankarboksilik asit (THF içinde) (1 ekivalan) yavas sekilde 0 °C sicaklikta ilave edildi. Sogutma banyosu ortadan kaldirildi ve reaksiyon karisimi oda sicakligina isitildi ve 3 saat karistirildi. Fischer tipi ekstraksiyondan sonra arzu edilen bilesik l-11 elde edildi. Bu materyal baskaca saflastirilmadan sonraki adim için kullanildi.

Siklobütan-1,3-diyldimetanol (l-12): (3-Metilensiklobütil)metanol l-11 (1 ekivalan), susuz THF içinde çözüldü ve BH3.DMS (1 ekivalan) damla damla 0 °C sicaklikta ilave edildi. Ilave edildikten sonra reaksiyon karisimi oda sicakligina isitildi ve gece boyu karistirildi. Reaksiyon, 0 °C sicaklikta dikkatli sekilde NaOH (suda SM çözelti) eklenerek, daha sonra H202 ilave edilerek baskilandi.

Karistirmaya oda sicakliginda 3 saat devam edildi, daha sonra su ile seyreltildi ve diol ürünü etil asetat ile ekstrakte edildi. Ham materyal baskaca saflastirilmadan direkt olarak sonraki adima alindi.

Siklobütan-1,3-diylbis(metilen) bis(4-metilbenzensülfonat) (l-13): Diklorometan içinde bulunan bir siklobütan-l,3-diyldimetan0l l-12 (1 ekivalan) ve TEA (3 ekivalan) çözeltisi 0 °C sicakliga sogutuldu ve tosilklorür (2 ekivalan) kisimlar halinde eklendi. Reaksiyon karisimi 12 saat beklemeye birakildi. Ekstraksiyon çalismasinda, reaksiyon karisimi, diklorometan ile seyreltildi ve organik faz, su ile yikandi. Organik faz, arzu edilen ürünü I-13 vermek üzere konsantre edildi. 2,2'-(Siklobütan-1,3-diyl)diasetonitril (I-14): DMF içinde bulunan bir siklobütan-1,3-diylbis(metilen) bis(4-metilbenzensülfonat) I-13 (1 ekivalan) çözeltisinin içerisine NaCN (6 ekivalan) ilave edildi ve 12 saat süresince geri sogutucuda kaynatildi. Ekstraksiyon çalismasinda reaksiyon karisimi, su ile seyreltildi ve arzu edilen bilesik, etil asetat ile ekstrakte edildi. Organik solventin buharlastirilmasi sonucunda l-14 elde edildi.

HZN `li/”k N 71:?, NHzg TFA içinde bulunan bir 2,2'-(siklobütan-1,3-diyl)diasetonitril M4 (1 ekivalan) çözeltisinin içerisine tiosemikarbazid (2 ekivalan) ilave edildi ve çözelti 100 °C sicaklikta 3 saat süresince karistirildi. Reaksiyon oda sicakligina sogutuldu ve doymus NaHCOa çözeltisi ile baskilandi. Bu materyal filtrelendi ve sirasiyla su, etil asetat ve dietil eter ile yikandi.

Bilesikler 7 ve 8 sentezi için genel prosedür: DMF (piridil türevi için NMP) içinde bulunan, karsilik gelen asit (2 ekivalan) ve DIPEA (6 ekivalan) çözeltisinin içerisine PYBOP (3 ekivalan) 0 °C sicaklikta ilave edildi ve 10 dakika oda sicakliginda karistirildi. Bilesik l-15 reaksiyon karisimina eklendi ve karistirmaya gece boyu devam edildi. Daha sonra su eklendi ve arzu edilen ürün, etil asetat ile ekstrakte edildi. Organik faz, susuz sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen ham ürün, saf ürünler vermek üzere standart metotlar ile saflastirildi. fenilasetamid) (8): 1H NMR (, il) asetamid) (7): 1H NMR (, 1.82 - 1.92 (m, (B mnoycuso. OHCû/CHO NaBH. HO nci TSO/`GA NaCN 142 i-zi ”mm“ \ / 4.1519 _ Siklopentan-1,3-dikarbaldehid (l-19): KMnO4 (3.2 ekivalan) ve CuSO4 -5H20 (2 ekivalan); diklorometan içine alindi ve bu süspansiyona distile su eklendi. Norbornen MS (1 ekivalan), diklorometan içinde çözüldü ve oksidan karisimina yavas sekilde eklendi, daha sonra t-bütanol ilave edildi. 3 saat sonra reaksiyon karisimi selit içerisinden filtrelendi ve doymus tuzlu su ile yikandi. Tuzlu su daha sonra yeniden diklorometan ile yikandi. Bir araya getirilen organik fazlar, sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve solvent, arzu edilen ürünü l-19 vermek üzere ortam sicakligi altinda rotatif evaporasyon yoluyla uzaklastirildi.

Siklopentan-1,3-diyldimetanol (l-20): Bir balona alinan 1,3-siklopentandikarbaldehid MS (1 ekivalan) içerisine oksijeni alinmis metanol ilave edildi. Reaksiyon karisimi 0 °C sicakliga sogutuldu ve NaBH4 (2 ekivalan) küçük miktarlarda eklenerek, reaksiyon sicakliginin 10 °C üzerine çikmasi önlenmek istendi. Reaksiyon karisimi oda sicakligina sogumaya birakildi ve azot atmosferi altinda 3 saat daha karistirildi. NaBH4 bakiyesini baskilamak üzere reaksiyon karisimina distile su eklendi ve daha sonra çözeltiden metanol uzaklastirmak üzere rotatif evaporasyon gerçeklestirildi. Geriye kalan karisim, diklorometan (5 kere) ile ekstrakte edildi ve bir araya getirilen organik fraksiyonlar susuz sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve baslikta belirtilen bilesigi I-20 vermek üzere kuruyana kadar buharlastirildi.

Siklopentan-1,3-diylbis(metiIen)bis(4-metilbenzensülfonat) (l-21): Piridin içine alinan siklopentan-1,3-diyldimetan0l l-20 (1 ekivalan) 0 °C sicakliga sogutuldu ve kisim kisim p-tolüen sülfonil klorür (3 ekivalan) ilave edildi ve oda sicakliginda gece boyu karistirildi. Reaksiyonun ilerlemesi TLC ile izlendi. Reaksiyon tamamlandiktan sonra piridin distile edilerek uzaklastirildi. Elde edilen rezidü, dietil eter ile seyreltildi, 1N HCI.

NaHCOa çözeltisi, tuzlu su ile yikandii susuz sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Ham ürün, arzu edilen ürünü l-21 vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. 2,2'-(siklopentan-1,3-diyl)diasetonitril (l-22): Siklopentan-1,3-diylbis(metilen) bis(4-metiIbenzensülfonat) I-21 (1 ekivalan), bir DMF:H2O karisimina (3:1) alindi ve sodyum siyanür (6 ekivalan) ilave edildi ve 150°C sicaklikta 15 saat süresince karistirildi. Reaksiyonun ilerlemesi TLC ile izlendi. Reaksiyon tamamlandiktan sonra reaksiyon karisimi su ile baskilandi, dietil eter ile ekstrakte edildi.

Organik faz, tuzlu su ile yikandi, susuz sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Ham ürün, arzu edilen ürünü l-22 vermek üzere saflastirildi.

HZNIQ l Baslikta belirtilen bilesik, 2,2'-(siklopentan-1,3-diyl)diasetonitril l-22 bilesiginden bilesikler l-15 için tarif edilen prosedüre göre sentezlendi. 2-il) asetamid) (4): Baslikta belirtilen bilesik, 5,5'-(sikl0pentan-1,3-diylbis-(metilen))bis(1,3,4tiadiazol-2-amin) l-15 bilesiginden bilesik 7 ve 8 için tarif edilen genel prosedüre göre sentezlendi. 1H NMR (, cooii 7 i \ ?'NHI ° \ \ NH Hooc. C / 90% HzN'QSvs ile& HN-»Q \ ' s>_ Chirat-HPLC l-36 I-38 fenilasetamid) (19) S 4,,,/ l 1 > 0-4/N`N 1H NMR (,3.70 fenilasetamid) (18) 1H NMR (,2.61- Kütle (M++1): 505.7. (piridin-Z-il) asetamid) (2): Baslikta belirtilen bilesik, 5,5'-((1R,4R)-sikloheksan-1,4-diylbis(metilen))bis(1,3,4tiadiazol- 2-amin) (trans) bilesiginden bilesik 7 ve 8 için tarif edilen genel prosedüre göre sentezlendi. 1H NMR (, Hcocûcoori pocis 2 &S/kû/ÄS 2 RJLOA HN SÄû/Ls Chiml-HPLC RASN ls\>'"'NH 4_ R4 N`N N'N\ S“ R4 N~N N.N Y l-35 ' l`33 IvJd H2N%SJ\û/ÄS>~NH2 Sikloheksan-1,3-dikarboksilik asit (1.0 ekivalan) ve tiosemikarbazid (2.0 ekivalan) karisimi, POCI3 (6.0 ekivalan) içine alindi ve 80 °C sicaklikta 3 saat süresince karistirildi.

Reaksiyon karisimi oda sicakligina sogutuldu ve buz üzerine bosaltildi. Meydana gelen karisim filtrelendi, daha sonra KOH kullanilarak pH 8 seviyesine getirildi. Meydana gelen materyal, su ile yikandi ve arzu edilen ürünü (31) vermek üzere kurutuldu. Bu materyal sonraki adim için bu haliyle kullanildi.

Bilesikler (l-33 ila l-35) sentezi için genel prosedür: R4 `N »R RIS N`N *R HN SÄOÄS + Nf<3/kû""Ls RJGIQSB @Âsik |-33 I-M , t-BuOK karistirildi. Meydana gelen karisim, arzu edilen ürünleri vermek üzere standart metotlar ile saflastirildi. il)asetamid (22): / 3 N" NH / 3 N NH 1H NMR (, 3.88 596.7. il)asetamid) (23): / 8 N NH 1H NMR (, 2.05- il)asetamid) (24): N`N/ `KS>`NSLQSW N , 1 `>`NH 1H NMR (, 2H); Kütle (M*+H): 596.7. il)asetamid) (25): 1H NMR (, il)asetamid) (27): (Hu/(N sjN JN/ SN>`NH 1H NMR (, 3.46(s, il)asetamid) (28): 1H NMR (, 3.44(s.

Kütle (M++H): 521.3. il)asetamid) (29): 1H NMR (, 3.45(s, metiIizoksazol-5-il)asetamid) (30): *SJ/2., i %NH I `N 1H NMR (, 2.30- (dimetilamino)fenil)asetamid) (31): Nîjj ß: i`g>\N)H`/(g/N\ 0 E 1” 5 1H NMR (, 2.85(s, fenilasetamid) (10): 7/3 I \ O NI`Nâ`û/\s)`u 1H NMR (,3.66 fenilasetamid) (11): 1H NMR (,3.46-3.47 N/Nxûwks 1H NMR ( 2. 30 2. 32 il)asetamid) (14): 1H NMR ( 2.28- indoI-3-il)asetamid) (15): 1H NMR (,2.05- indol-3-il)asetamid) (16): 1H NMR (,3.44- il)asetamid) (21): 8/1“ ' >`NH 1H NMR (,2.29- il)asetamid) (20): 1H NMR (,1.90-1.93 521.7. il)asetamid) (17): 1H NMR (, 192-194 fenilasetamid) (9): 1H NMR (,3.46 Hooc WCOOH cis-, transcyclohoiiyl 1.Sdicarboxylic acid 1) NH40H Step A 2) CaCIz. saparmed 3) HCl Trans HsNJLu "Hz HOOC coon anooc. COOBn racamic. .m û Cs;CO,,BnBr,DMF O' POCI NaOH . dîam'ina 3 Step D trans rac-cyclohoxyl SFC separation Enantiopure Iiansdihanzyl 1,3-dicaiboiylic acid 3199 3 cyclohexyl 1,3dicarhoxylate l-fydiogenaiion HçN"< J,,_ I >`NH7 HgN'JLu'NH: HOOC_û,COOH1)SOClg 025 N ß'dN `g ._.___ 2)NaH sullam %3 POCIg. NaOH mynbis(1,3.Lmiadlazoi-2-amin9) dicarboxylic icld X- ray uystallography deierminah'on of uhiraliiy Adim A: trans- sikloheksil 1,3-dikarboksilik asit sicaklikta ilave edildi. Meydana gelen materyal, filtre edildi ve filtreleme ürünü konsantre HCI ile asidik hale getirildi. Meydana gelen materyal filtrelenerek toplandi ve trans- sikloheksil 1,3-dikarboksilik asit vermek üzere vakum altinda kurutuldu. 1H NMR (DMSO- Adim B: (S,S)- dibenzil sikloheksil 1,3-dikarboksilat BnOOCM,, ûCOOBn Karisim oda sicakliginda azot altinda 3 saat karistirildi. Elde edilen rezidü, su ile seyreltildi ve etil asetat ile ekstrakte edildi. Bir araya getirilen organik çözelti, su ile yikandi, Na2804 üzerinden kurutuldu ve vakum altinda konsantre edildi. Ham ürün, 3 g trans-dibenzil sikloheksil 1,3-dikarboksilat vermek üzere flas kromatografi yoluyla Kiral SFC ayirma: 3 g trans-dibenzil sikloheksil 1,3-dikarb0ksilat. kiral SFC yoluyla ayrilarak 1. elde edildi.

Adim C: (S,S)- sikloheksil 1,3-dikarboksilik asit mL MeOH içinde bulunan bir 1 9 (8,8)- dibenzil sikloheksil 1,3-dikarboksilat çözeltisinin içerisine %10 Pd / karbon (0.1 9) ilave edildi. Süspansiyon, hidrojen ile aritildi ve 20 dakika karistirildi. Daha sonra filtrelendi ve arzu edilen bilesigi vermek üzere konsantre HZN %3 J d S>~NH2 mmol) içeren bir karisim, POCI3 (10 ml) içine alindi ve 40 °C sicaklikta 30 dakika, 60°C sicaklikta 30 dakika ve 80 °C sicaklikta 2 saat süresince karistirildi. Reaksiyon karisimi oda sicakligina sogutuldu ve buz üzerine bosaltildi. Meydana gelen karisim daha sonra NaOH ile pH = 8 seviyesine baziklestirildi ve arzu edilen ham bilesigi vermek üzere Racemic-Trans-5,5'-(sikloheksan-1,3-diyl)bis(1,3,4-tiadiazoI-2-amin), benzer bir prosedüre göre sentezlendi.

Adim E: (S,S)- sikloheksil 1,3-dikarboksil bis((2S)-Bornan-10,2-sultamid) ozssN/[”“OÄN çözeltisi 80 °C sicaklikta 1.5 saat süresince karistirildi. SOCIZ fazlasi, düsük basinç altinda uzaklastirildi ve elde edilen rezidü direkt olarak sonraki adim için kullanildi. Tolüen °C sicaklikta kisimlar halinde NaH (yag içinde %60, 465 mg, 11.63 mmol) ilave edildi ve reaksiyon karisimi bu sicaklikta 30 dakika karistirildi. Tolüen (5 ml) içinde bulunan sikloheksan-1,3-dikarbonil diklorür (yukarida elde edilir) damla damla ilave edildi ve reaksiyon oda sicakliginda gece boyu karistirildi. Meydana gelen karisim, EtOAc (50 mi) ve su (10 ml) ile seyreltildi, ayrildi ve sulu faz, EtOAc (50 mLX2) ile ekstrakte edildi. Bir araya getirilen organik fazlar, tuzlu su ile yikandi, Na2804 üzerinden kurutuldu, filtrelendi ve arzu edilen bilesigi vermek üzere flas kromatografi yoluyla saflastirildi.

Bu ürün, EtOAC içinde yeniden kristalize edildi ve bu sekilde tek kristal x-ray kirinimi için bir örnek elde edildi; bunun sonucunda, baslangiç materyali olarak diasit konfigürasyonunun (8,8) oldugu dogrulandi.

HN7` 0.21 mmol) ve N-etil-N-izopropilpropan-Z-amin (29.3 mg, 0.23 mmol) çözeltisi oda sicakliginda gece boyu karistirildi. Karisim, su (10 ml) içerisine bosaltildi ve çökelti, ham ürünü vermek üzere filtrelendi. Ham ürün, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi.

Asagidaki bilesikler benzer sekilde hazirlandi: diyl))bis(tetrahidrofuran-3-karboksamid) (48) 0 %488,” l ?ww 0 Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir triflorobütanamid) (47) i: HN4 Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir siklopropilasetamid) (49) HN~' Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir (metiltio)asetamid) (60) HNvÄsßmn 1 s Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir. (metiltio)propanamid) (46) Su FLN N'N\ MS Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir. (tetrahidrofuran-Z-iI)asetamid) (77) HN-«Sjun 1( SWNH Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir LC-MS : m/z (M+H)= 507.7. oksopirrolidin-1-il)asetamid) (85) N4ZJNOI:>`N>L/ Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir 2H). LC-MS : m/z (M+H)= 533.7 HNJ~NH Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir metilpropanamid) (98) HN~`NH Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir diyl))disiklopentankarboksamid (62) 0/1( N`N N'N 4.9.... s H dimetilpropanamid) (63) 19148 J,, i >` metoksifenil)asetamid) (78) HN"~Ni+ Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir (benzo[d][1,3]dioksoI-5-iI)asetamid) (86) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir florofenil)asetamid) (88) HN4.

Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir diflorofenil)asetamid) (86) R2 0153 HN 3),“ 8 H Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir. metoksifenil)asetamid) (42) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir klorofenil)asetamid) (43) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir metoksifenil)asetamid) (44) ”0143),, >` Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir metoksifenil)asetamid) (52) HN'* Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir klorofenil)asetamid) (51) ci HN#`u ci Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir klorofenil)asetamid) (50) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir (benzo[d][1,3]dioksol-4-iI)asetamid) (218) Hiç-45).,” OjLs>`NH Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir (metilsülfonil)fenil)asetamid) (54) M802SQ 0 O SOZMe .24 N`N NaN 4s)l'”ûÄs>`H Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir (metilsülfonil)fenil)asetamid) (66) Me02S sozMe 8)' û/Ls H Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir metoksifenil)asetamid) (70) 1 0 N N (iL . / 4:) HNrêsjß_ [i 33`” O` Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir metoksifenil)asetamid) (71) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir siyanofenil)asetamid) (72) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir siyanofenil)asetamid) (73) HN_ Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir siyanofenil)asetamid) (74) ÖÃHNÄOÄNHB Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir 2H). LC-MS : m/z (M+H)=569.7. (triflorometoksi)fenil)asetamid) (75) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir (triflorometoksi)fenil)asetamid) (219) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir tolilasetamid) (83) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir (triflorometil)feniI)asetamid) (82) F3Cx HN'QNEN NAN` N CF: Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir (dimetilamino)fenil)asetamid) (35) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir florofenil)asetamid) (87) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir izopropoksifeniI)asetamid) (92) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir izopropoksifeniI)asetamid) (91) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir 635.9 bromofenil)asetamid) (220) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir tolilasetamid) (111) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir metoksipiridin-3-il)asetamid) (221) HN4SJUMOÄSS`NH Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir. il)asetamid) (59) HN4SEM' ' s\>“NH Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir 531.6 il)asetamid) (222) HN4SJ,, I S`>`NH Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir metiIizoksazol-5-il)asetamid) (30) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir 67814 3 h; %NH: SIepA ozw ,ET "PI NO 3. a Cumpound 57 9” @Mo - ” MM 5 Commundss Compound 55 nitrofenil)asetamid) (57) ogNÖÄHHSßNt-ûi ?75 5% Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile benzerdir aminofenil)asetamid) (56) 650%“ J 0* ***W diyl))bis(2-(3-nitrofeniI)asetamid) (30 mg, 0.05 mmol) ve Pd/C (3 mg) çözeltisi oda sicakliginda 3 saat süresince karistirildi. Karisim filtrelendi ve kuruyana kadar vakum altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. asetamidofenil)asetamid) (55) Oý'k'izîiîifg3 118%:) N, N- dimetilformamid (2 ml) içinde bulunan bir asetik asit (.11 5 mg, O. 19 mmol), HATU oda sicakliginda 15 dakika süresince karistirildi, daha sonra, N,N'-(5,5'-((1S,3S)- 0.06 mmol) ilave edildi ve gece boyu karistirmaya devam edildi. Karisim, su (10 ml) içerisine bosaltildi ve çökelti, ham ürünü vermek üzere filtrelendi. Ham ürün, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi.

HQN_`NH2 SMA HN-_<5J" 12`” ` siopa Eri-(Sl. Gym& siepc ma( J 1 84” H2N \ .'.I &MH; WNQ û) Nm nitrofenil)asetamid) (69) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile benzerdir aminofenil)asetamid) (53) Bu prosedür, Bilesik 56 prosedürü ile aynidir asetamidofenil)asetamid) (65) Bu prosedür, Bilesik 55 prosedürü ile aynidir nitrofenil)asetamid) (64) OZN( m4:) EMO/&SFN ?N Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir Bu prosedür, Bilesik 55 prosedürü ile aynidir Hgiuigî` N/NFNH; N 'g/COQH QNJ( (INT »If-N>` y_ / \ / Q slepA S/" S Compound 45 HN4SJ,,_ f› FNH Compound 80 diyl))bis(3-(piridin-2-il)akrilamid) (45) HN/QSJhh_ I syNH Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir Chi i`,- OWÜ HN 45)" `>`NH 50 mg'lik bir Bilesik 45 çözeltisi, 2 mL MeOH içinde çözüldü. 5 mg Pd/C ilave edildi ve süspansiyonun gazi alindi ve 30 dakika hidrojene edildi. Daha sonra filtrelendi ve baslikta belirtilen bilesigi 80 elde etmek üzere konsantre edildi. metoksifenil)asetamid) (291) 0\ HAgûÄS IE( 0\ (dimetilamino)fenil)asetamid) (292) metoksipiridin-3-il)asetamid) (295) w @1515 hidroksi-2-fenilasetamid) (370) hidroksi-2-fenilasetamid) (371) HO HN4SJ,,,,O)LS>LNH %311 fenilpropanamid) (380) OH 8 s HO LC-MS : m/z (M+H)= 579.2 siyanofenil)asetamid) (352) S Compound 84 0,_ step B HN'qun. ll s>`NH Adim A: metil 2-(6-metoksipiridin-2-il)asetat -78 °C sicakliga sogutulmus, THF ( damla damla eklendi ve daha sonra karisim -78 derece sicaklikta 2 saat karistirildi.

Dimetil karbonat (1.2 ml, 14.6 mmol) hizla eklendi ve -78 °C sicaklikta 15 dakika karistirmaya devam edildi. Reaksiyon H20 ile -78 °C sicaklikta baskilandi. Çözelti, etil asetat ile ekstrakte edildi, sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. metoksipiridin-2-il)asetamid) (84) 0% N- -N Opýiyo HN-“QSjNh” h, %NH karbonat (346.1 mg, 1.06 mmol) karisimi azot atmosferi ve mikro dalga isinlari altinda 45 dakika 130 °C sicakliga isitildi. Karisim, kuruyana kadar vakum altinda buharlastirildi.

Elde edilen rezidü, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi.

HIN”<: ,3 O/Ls N`>`NH2 Commund118 0- sms HN4 sJN : i 3)`NH Bu prosedür, Bilesik 84 prosedürü ile aynidir Adim A: metil 2-(6-bromopiridin-2-iI)asetat bromopiridin-2-il)asetamid) (118) 4 ,N~N NÄN 33- 6453.025HH Bilesik 223 Bu prosedür, Bilesik 84 prosedürü ile aynidir Adim A: Metil 2-(4-metoksipiridin-2-il)asetat metoksipiridin-2-il)asetamid) (223) Bilesik 224 Nxý **M-b /O / l _' HN4sJ-i..û/Ls>`NH Bu prosedür, Bilesik 84 prosedürü ile aynidir o _40 o \ / 0 HNIQSJMCJLS>±NH metoksipiridin-2-il)asetamid) (116) Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir metoksipiridin-2-il)asetamid) (225) HN'4S/“m' : J' s`>~NH Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir Bilesik 226 Bu prosedür, Bilesik 84 prosedürü ile aynidir Adim A: metil 2-(5-etoksipiridin-2-il)asetat etoksipiridin-2-il)asetamid) (226) Bilesik 227 750 HO TBSOY` SlepA '5 |\ Q SlepB r\ 0 8r/\/0 N «3% / o \ 1# ` Adim A: metil 2-(5-((tert-bütildimetilsilil)oksi)piridin-2-il)asetat Bu prosedür, Bilesik 84 Adim A prosedürü ile aynidir Adim B: metil 2-(5-hidroksipiridin-2-il)asetat THF içinde karistirilan metil 2-(5-((tert-bütildimetilsiliI)0ksi)piridin-2-il)asetat (1 9, 3.5 mmol) çözeltisinin içine oda sicakliginda TBAF (1 M, 3.5 ml) ilave edildi. Karisimin tamami oda sicakliginda gece boyu karistirildi. Buharlastirildi ve EtOAc ile ekstrakte edildi, organik faz, su ile yikandi, buharlastirildi ve standart bir metot ile saflastirildi.

LC-MS : m/z (M+H)=168.2 Adim C: metil 2-(5-(2-metoksietoksi)piridin-2-il)asetat MeCN içinde karistirilan metil 2-(5-((tert-bütildimetilsilil)oksi)piridin-2-iI)asetat (500 mg, 3 2-met0ksietan (621 mg, 4.5 mmol) ilave edildi. Karisimin tamami gece boyu 80 derece sicakliga isitildi. LC-MS ile arzu edilen ürün görüldü. Ürün filtrelendi, buharlastirildi ve standart bir metot ile saflastirildi. (2-metoksietoksi)piridin-2-il)asetamid) (227) raw-(yy N*N ;L 9 I 5%” Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir LC-MS : m/z (M+H)= 669.2 Bilesik 228 HN Is LO/'LSFNH Adim A: metil 2-(5-(diflorometoksi)piridin-2-il)asetat MeCN içinde karistirilan bilesik 7 (500 mg, 3 mmol) çözeltisinin içine oda sicakliginda mmol) ilave edildi. Karisimin tamami gece boyu 80 derece sicakliga isitildi. LC-MS ile arzu edilen ürün görüldü. Ürün filtrelendi, buharlastirildi ve standart bir metot ile saflastirildi. (diflorometoksi)piridin-2-il)asetamid) (228) »41745 J... ” SVNH Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir Bilesik 229 NCQ MM Nemo“ LPG› WN'«:E ß: *HM Adim A: metil 2-(6-siyanopiridin-2-il) asetat.

THF (20 ml) içinde bulunan bir 6-metilpikolinonitril (2 9, 16.9 mmol) çözeltisinin içerisine yavas sekilde LiHMDS (17 ml, 1M in THF) -78 °C sicaklikta N2 altinda ilave edildi. Daha sonra reaksiyon karisimi 1 saat -78 °C sicaklikta karistirildi ve daha sonra -78 °C sicaklikta karistirildi ve 30 dakika 0 °C sicakliga gelmeye birakildi. Nötrlestirmek ve pH=7- 8'e ayarlamak için doymus amonyum klorür ilave edildi, karisim, etil asetat (100 ml*3) ile ekstrakte edildi, organik faz sodyum sülfat ile kurutuldu, filtrelendi ve rezidüyü vermek üzere vakum altinda konsantre edildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. siyanopiridin-2-il)asetamid) (229) Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir il)asetamid) (230) HN4SJM Bu prosedür, Bilesik 84 prosedürü ile aynidir il)asetamid) (231) Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir iI)asetamid) (76) '--l 5 Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir iI)asetamid) (100) HNIQSÄM . `>`NH 1H NMR (CDClg, , 3.53 (8, aminopiridin-2-il)asetamid) (232) HN~ Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir aminopiridin-2-il)asetamid) (233) Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir siyanopiridin-2-il)asetamid) (113) Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir ivis : m/z (M+H)= 571.7 Bilesik 234 515021 &lens JL HNfQSEMOÄSSENH Adim A: 6-(2-metoksi-2-oksoetiI)nikotinik asit Bu prosedür, Bilesik 84 adim A ile aynidir LC-MS : m/z (M-H)=194.1 Adim B: metil 2-(5-(dimetilkarbamoiI)piridin-2-il)asetat N,N-dimetilformamid (2 ml) içinde bulunan bir 6-(2-met0ksi-2-oksoetil)nikotinik asit (37 mg, ve N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (26.5 mg, 0.20 mmol) çözeltisi oda sicakliginda 15 dakika süresince karistirildi, daha sonra dimetil amin ( ilave edildi ve gece boyu karistirmaya devam edildi. Reaksiyon, su ile baskilandi, EtOAC ile ekstrakte edildi ve arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. il]sikloheksil]-1,3,4-tiadiazol-2-il]karbamoiImetil]-N,N-dimetil-piridin-3-karboksamid (234) HN/«sj'“ S»kim Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir Bilesik 105 H;N-'~i~iH2 m0& SteDA `who _ HJNAN/ ”M0“ Stage N47( 5)" S H /`N / Adim A: etil 2-(6-(dimetilamino)piridin-2-il)asetat ve AcOH (1 damla, kat.) ilave edildi. Karisim oda sicakliginda 12 saat süresince karistirildi. Daha sonra reaksiyon, sulu amonyum klorür ile baskilandi ve DCM ile ekstrakte edildi. Organik faz, tuzlu su ile yikandi, sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen ürün (100 mg) vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. 3H). LC-MS : m/z (M+H)=208.6 (dimetilamino)piridin-2-il)asetamid) Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir Bilesik 115 l\N/ COOMa N//VCOOMS N/ CDOMe N\ HN' Adim A: metil 2-(3-aminopiridin-2-il)asetat Metil 2-(3-nitropiridin-2-il)asetat (1 g, 5 mmol), MeOH içinde çözüldü ve H2 atmosferi altinda oda sicakliginda gece boyu karistirildi. LC-MS ile arzu edilen ürün bulundu. Bir selit pedinden filtrelendi ve arzu edilen ürünü vermek üzere buharlastirildi. Direkt olarak sonraki adim için kullanildi. LC-MS: m/z (M+H)= 167.1 Adim B: metil 2-(3-(dimetilamino)piridin-2-il)asetat ACOH (1 damla, kat.) ilave edildi. Karisim oda sicakliginda 12 saat süresince karistirildi.

Daha sonra reaksiyon, sulu amonyum klorür ile baskilandi ve DCM ile ekstrakte edildi.

Organik faz, tuzlu su ile yikandi, sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. LC-MS: m/z (M+H)= 195.1 (dimetilamino)piridin-2-il)asetamid) (115) Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir Bilesik 235 ve Bilesik 236 N91: ßNA 3-4` - CompouridZJS / \ ,_ J\\ 0. stanA i\ 0 srepB» "Qo ` _ o _ HN .Q Compound 236 LQNH f 0/ ”EPO Hit-(j OÄSRNH Bu prosedür, Bilesik 105 prosedürü ile aynidir Adim A: Metanol (8 ml) içinde bulunan metil 2-(3-aminofenil)asetat (150 mg, 0.83 mmol) ve ACOH (1 damla, kat.) ilave edildi. Karisim oda sicakliginda 12 saat süresince karistirildi. Daha sonra reaksiyon, sulu amonyum klorür ile baskilandi ve DCM ile ekstrakte edildi. Organik faz, tuzlu su ile yikandi, sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, metil 2-(3-(dietilamino)fenil)asetat ve metil 2-(3-(etilamino)fenil)asetat vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. metil 2-(3-(dietilamino)fenil)asetat LC-MS : m/z (M+H)=222.4 metil 2-(3-(etilamino)fenil)asetat LC-MS : m/z (M+H)=194.4 (dietilamino)fenil)asetamid) (235) rin-(s J 'I Sýwu Bu prosedür, Bilesik 105 Adim B prosedürü ile aynidir (etilamino)fenil)asetamid) (236) **N/«Sjlb'dLSyNH Bilesik 237 2 1 "2" 90”” Bu prosedür, Bilesik 105 prosedürü ile aynidir Adim A: etil 2-(4-(dietilamino)feniI)asetat ©3102 Bu prosedür, Bilesik 105 Adim B prosedürü ile aynidir (dietilamino)fenil)asetamid) (237) HN4SJ.,.,(:IJLS`>-NH Bilesik 104 ”2” 3,57.. :A5 31” flv( “â lûvk , __- Hz" N o/\ ArHN N 0 \ Adim A: etil 2-(6-asetamidopiridin-2-il)asetat DCM içinde bulunan etil 2-(6-aminopiridin-2-il)asetat (50 mg, 0.28 mmol) ve N-etiI-N- izopropilpropan-Z-amin (71.0 mg. 0.55 mmol) çözeltisinin içine oda sicakliginda asetil klorür (43.2 mg, 0.55 mmol) damla damla ilave edildi. Karisim 1 saat karistirmaya devam edildi, tuzlu su ile yikandi ve kuruyana kadar vakum altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. LC-MS : asetamidopiridin-2-il)asetamid) (104) Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir Bilesik 384 O step A \ O step B Eli mc H HMEOJHGQd Adim A: metil 2-(3-vinilfenil)asetat Dioksan (40 ml) içinde bulunan bir metil 2-(3-br0mofenil)asetat (3 g, 13 mmol) çözeltisinin içerisine azot atmosferi altinda tribütil(vinil)stannan (4.5 9, 14.3 mmol) ve karisim 2 saat 100° C'de isitildi. Ortam sicakligina sogutma yapildiktan sonra, organik faz düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, etil asetat içine alindi, sirayla yüzde 10'luk sulu potasyum karbonat çözeltisi ve tuzlu su ile yikandi ve sodyum sülfat üzerinden kurutuldu. Konsantre edildikten sonra elde edilen rezidü, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi.

Adim B: metil 2-(3-(hidroksimetil)fenil)asetat CH2CI2 içinde bulunan bir metil 2-(3-vinilfenil)asetat (1.8 9, 10m mol) çözeltisinin içine - 78C sicaklikta 20 dakika 03 kabarciklari uygulandi. Balonun içine MeZS eklendi, karisim yavas sekilde oda sicakligina isitildi. Solvent düsük basinç altinda uzaklastirildi ve elde edilen rezidü, sonraki adim için baskaca saflastirilmadan kullanildi.

MeOH içinde bulunan bir metil 2-(3-f0rmilfenil)asetat çözeltisinin içerisine kisimlar halinde sodyum tetrahidroborat eklendi ve karisim oda sicakliginda 1 saat karistirildi. Karisim, sulu NH4CI içerisine bosaltildi ve etil asetat ile ekstrakte edildi, bir araya getirilen organik faz, susuz Na2SO4 üzerinde kurutuldu. Buharlastirildiktan sonra elde edilen rezidü, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi.

Hit/G :E : Ji S`>`NH sicakliga isitildi. Daha sonra reaksiyon karisimi oda sicakligina sogutuldu ve su içerisine bosaltildi. Karisim, etil asetat (3X10 ml) ile ekstrakte edildi, bir araya getirilen organik faz tuzlu su ile yikandi, sodyum sülfat ile kurutuldu, filtrelendi, bir rezidü vermek üzere konsantre edildi, bu rezidü ise, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. 579.5.

Bilesik 385 metiIasetamido)piridin-2-il)asetamid) Bu prosedür, Bilesik 104 prosedürü ile aynidir Bilesik 238 Adim A: etil 2-(4-(metiIsülfonamido)fenil)asetat trietilamin (0.58 ml, 4.18 mmol) çözeltisine oda sicakliginda damla damla metansülfonil klorür (0.24 ml, 3.07 mmol) eklendi ve gece boyu karistirildi. Karisim, tuzlu su ile yikandi, sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. LC-MS : Adim B: 2-(4-(metilsülfonamido)fenil)asetik asit MeOH/HZO (10 ml, 1:1) içinde bulunan etil 2-(4-(metilsüIfonamido)fenil)asetat (200 mg, saat süresince karistirildi. Reaksiyon karisimi düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü sonraki adim için baskaca saflastirilmadan kullanildi. LC-MS : m/z (M+H) = 230.4 (metilsülfonamido)fenil)asetamid) (238) 9 N N 0 :l HN-'Qsßm ,2 1 Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir Bilesik 239 H2~~~NH2 HI'JW slepA WM : \ 51298 “ -~( "2” NH; Adim A: etil 2-(4-((tert-bütoksikarbonil)amino)fenil)asetat Tolüen (5 ml) içinde bulunan bir di-tert-bütil dikarbonat (387 mg, 1.77 mmol) çözeltisi, etil 2-(4-aminofenil)asetat (288 mg,1.61 mmol) içeren bir behere konuldu, reaksiyon karisimi 85 °C sicaklikta 4 saat süresince isitildi. LCMS ile arzu edilen ürün saptandi, karisim, bir rezidü vermek üzere konsantre edildi, bu rezidü ise arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. LC-MS : m/z (M+H)=280.3 diyI))bis(azanediyl))bis(2-oksoetan-2,1-diyl))bis(4,1-fenilen))dikarbamat tiadiazoI-2-amin) (68 mg, 0.241 mmol), etil 2-(4-(tert-bütoksikarbonilamino)fenil)asetat altinda 45 dakika 130 °C sicakliga isitildi. Daha sonra reaksiyon karisimi oda sicakligina sogutuldu ve su içerisine bosaltildi. Karisim, etil asetat (50 ml*3) ile ekstrakte edildi, organik faz tuzlu su ile yikandi, sodyum sülfat ile kurutuldu, filtrelendi, bir rezidü vermek üzere konsantre edildi; elde edilen rezidü, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. aminofenil)asetamid) (239) C( 40 :Nm/Q fenilen)dikarbamat (20mg) çözeltisinin içerisine TFA (0.5 ml) ilave edildi. Reaksiyon karisimi, 0.5 saat sonra konsantre edilerek arzu edilen ürün elde edildi.

Bilesik 240 H2N'-NH, fso :1%: J JN' :FH / N Bu prosedür, Bilesik 241 prosedürü ile aynidir Adim A: dimetil 2-(5-floropiridin-2-il)malonat sogutma yapildiktan sonra reaksiyon karisimi filtrelendi, H20 ile seyreltildi ve etil asetat ile ekstrakte edildi. Organik faz, tuzlu su ile yikandi, sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. LC-MS : m/z (M+H) = 228.2 Adim B: metil 2-(5-floropiridin-2-il)asetat NaCl ( çözeltisi 130 derece sicaklikta 6 saat karistirildi. Oda sicakligina sogutma yapildiktan sonra reaksiyon karisimi, HZO ile seyreltildi ve etil asetat ile ekstrakte edildi. Organik faz, sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. LC-MS : m/z (M+H) = 170.1 floropiridin-2-iI)asetamid) (240) 4N'N N"`f>` ”7 5)” s H / N Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir Bilesik 101 ve Bilesik 242 2 ' __° _* (IN-'b ° ° G si o (:5) { " Bu prosedür, Bilesik 240 Adimlar A-C prosedürü ile aynidir.

Adim A: dimetil 2-(5-siyanopiridin-2-il)malonat LC-MS : m/z (M+H) = 235.4 Adim B: metil 2-(5-siyanopiridin-2-il)asetat LC-MS : m/z (M+H) = 177.3 siyanopiridin-2-il)asetamid) (101) HN/(SJW f 5\>~NH diyl))bis(azanediyl))bis(2-oksoetan-2,1-diyl))dinikotinamid (242) H,Noc CONH: HN-&Sjh ii s>`NH içerisine sodyum hidroksit çözeltisi (4 M, 0.1 ml) 0 °C sicaklikta ilave edildi. Daha sonra reaksiyon karisimi 2 dakika karistirildi ve akabinde hidrojen peroksit (su içinde %30, 1 ml) ilave edildi. Karisim 10 dakika karistirildi. TLC ile baslangiç materyalinin tükendigi görüldü. Karisim, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi.

Bilesik 243 NC,\ 0 :mm HzN `\ o _sieps ,Bmw i\ lc› stePC 500W? . HN-r( l" i `>`NH o ) D 0 slapD Nü S/..,(Y~\S N Adim A: (6-(2-metoksi-2-oksoetiI)piridin-3-il)metanaminyum klorür çözeltisinin içerisine hidrojen klorür/ metanol (4 M, 20 ml) ilave edildi ve daha sonra Pd/C (200 mg) eklendi. Daha sonra reaksiyon karisimi hidrojen atmosferi altinda gece boyu hidrojene edildi. Reaksiyon karisimi filtrelendi ve filtreleme ürünü. ham ürünü vermek üzere konsantre edildi ve arzu edilen ürünü vermek üzere etil asetat ile yikandi. LC-MS : Adim B: metil 2-(5-((tert-bütoksikarbonilamino)metiI)piridin-2~il)asetat BocxH i \ O CH2CI2 (50 ml) içinde bulunan bir (6-(2-metoksi-2-oksoetiI)piridin-3-iI)metanaminyum edildi ve daha sonra (Boc)20 (726 9, 3.33 mmol) ilave edildi. Reaksiyon karisimi gece boyu karistirildi. LCMS ile arzu edilen ürün saptandi, karisim, bir rezidü vermek üzere konsantre edildi, elde edilen rezidü, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. 1H NMR (KLOROFORM-d) 6: , 7.28 (t, J = 281.5 diyl))bis(azandiyl)bis(2-oksoetan-2,1-diyl))bis(piridin-6,3- diyl))bis(metilen)dikarbamat awHNrx NHaoc Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir LC-MS : m/z (M+H)= 779.5 (aminometil)piridin-2-il)asetamid) (243) diyl))bis(azandiyl)bis(2-oks0etan-2,1-diyl))bis(piridin-6,3-diyl))bis(metilen)dikarbamat (20 mg, 0.026 mmol) çözeltisine, metanol içinde bulunan bir hidrojen klorür çözeltisi (4 M, 10 ml) ilave edildi ve meydana gelen çözelti 1 saat karistirildi. LCMS ile baslangiç materyalinin tükendigi görüldü ve arzu edilen ürün saptandi. Karisim, arzu edilen ürünü Bilesik 244 J SiepA i O Siape f 0 wc' w“V'ko” _` ›H':5i~/`N'//\/1LO/ _' Bac'n 'NL/Lo” .454] 1:). si c B“Ak-(NU O &Q `80° ” \-\"_.i Hayri: steam ”'I _40 N-N ~-N V7“ Bu prosedür, Bilesik 243 prosedürü ile aynidir Adim A - Adim B: metil 2-(6-((tert-bütoksikarbonilamino)metiI)piridin-2-il)asetat 281.5. diyl))bis(2-(6-(aminometil)piridin-2-iI)asetamid) (244) Bilesik 245 N N HC' Hz `suc 5::: 08 o” o/ / 0" OH I 50: _ MH? smpe /° Nm W SlePF \ / ;a b isi/&kizi »N Metanol (20 ml) içinde bulunan bir 2-(3-siyan0fenil) asetik asit (1, 6.2 mmol) çözeltisinin Adim A: metil 2-(3-siyanofenil)asetat içerisine sülfüröz diklorür (5 ml) ve 0.1 ml N,N-dimetilformamid ilave edildi. Daha sonra reaksiyon karisimi 2 saat 80 °C sicakliga isitildi. TLC ile baslangiç materyalinin tükendigi görüldügünde karisim, bir rezidü vermek üzere konsantre edildi. Elde edilen rezidü, su (20 ml) içerisine bosaltildi ve etil asetat (50ml*2) ile ekstrakte edildi. Organik faz, susuz sodyum sülfat ile kurutuldu, filtrelendi, arzu edilen ürünü vermek üzere konsantre edildi.

LC-MS : m/z (M+H)= 176.5 Adim B: (3-(2-metoksi-2-oksoetiI)fenil) metanaminyum klorür Bu prosedür, Bilesik 243 Adim A prosedürü ile aynidir Adim C: metil 2-(3-((tert-bütoksikarbonilamino)metiI)fenil)asetat Bu prosedür, Bilesik 243 Adim B prosedürü ile aynidir tiadiazoI-5,2-diyl))bis(azandiyl)bis(2-oksoetan-2,1-diyl))bis(3,1- fenilen))bis(metilen)dikarbamat CÃI Bos):1 *Imge/:ßu ?SKNLB : Bu prosedür, Bilesik 238 Adim B - Adim C prosedürü ile aynidir LC-MS : m/z (M+H)= 777.5 (aminometil)fenil)asetamid) (245) Bu prosedür, Bilesik 243 Adim D prosedürü ile aynidir 577.5 Bilesik 27 ÇNCI s16pA ÇN stepB @N O ”Mori ONÖ Bu prosedür, Bilesik 245 prosedürü ile aynidir Adim A: dietil 2-(pirimidin-2-il)malonat LC-MS : m/z (M+H) = 239.5 Adim B: metil 2-(pirimidin-2-il)asetat (pirimidin-2-il)asetamid) ini/«SLM f \>\NH Bilesik 241 MV' 07” \ o Dik/s` o o FaN m0/ SIM "ilk-40 73““ 'HL DMI” Adim A: dimetil 2-(5-nitropiridin-2-il)malonat sicaklikta 12 saat karistirildi. Oda sicakligina sogutma yapildiktan sonra reaksiyon karisimi filtrelendi, H20 ile seyreltildi ve etil asetat ile ekstrakte edildi. Organik faz, tuzlu su ile yikandi, sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve ham ürünü vermek üzere düsük basinç altinda buharlastirildi. LC-MS : m/z (M+H) = 255.3 Adim B: metil 2-(5-nitropiridin-2-il)asetat saat karistirildi. Oda sicakligina sogutma yapildiktan sonra reaksiyon karisimi, H20 ile seyreltildi ve etil asetat ile ekstrakte edildi. Organik faz, sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi.

Adim C: metil 2-(5-aminopiridin-2-il)asetat mmol) ve Pd/C (50 mg) çözeltisi oda sicakliginda 3 saat karistirildi. Daha sonra reaksiyon karisimi filtrelendi ve baskaca saflastirilmadan sonraki adim için kullanilan, arzu edilen ürünü vermek üzere düsük basinç altinda buharlastirildi.

Adim D: metil 2-(5-(dimetilamino)piridin-2-il)asetat ve AcOH (1 damla, kat.) ilave edildi. Karisim oda sicakliginda 12 saat süresince karistirildi. Daha sonra reaksiyon, sulu amonyum klorür ile baskilandi ve DCM ile ekstrakte edildi. Organik faz, tuzlu su ile yikandi. sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. 195.2 (dimetilamino)piridin-2-il)asetamid) (241) HNÄQSJW 1' S)`Ni1 Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir Bilesik 246 HJWBOC &C`NH SEDL'QLJSIrIE Ags-::gj _SIÄL_ \ si 04%” NA; :Fçs 8 bir HN / yy" `I \ 4 Bu prosedür, Bilesik 245 Adim B - Adim F prosedürü ile aynidir Adim A: (4-(2-metoksi-2-oksoetiI)fenil)metanaminyum klorür Adim B - Adim C: 2-(4-((tert-bütoksikarbonilamino)metil)fenil)asetik asit diyl))bis(2-(4-(aminometil)fenil)asetamid) (246) Bilesik 247 (î Stop A f`U 512; 13 unksghîfsym Adim A: etil 2-(4-etoksipiridin-2-il)asetat çözeltisi 70 derece sicaklikta 2 saat karistirildi. Karisim vakum altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, sonraki adim için baskaca saflastirilmadan kullanildi. LC-MS : m/z (M+H) = 210.2 etoksipiridin-2-il)asetamid) (247) Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir m/z (M+H) = 609.8 (diflorometoksi)piridin-2-il)asetamid) (356) (diflorometoksi)piridin-2-il)asetamid) (350) 110 of? (diflorometoksi)piridin-2-il)asetamid) (353) HN4SJ,ME))LS>`NH metoksipiridin-2-il)asetamid) (347) NÄsßnh'OÄSÄN Bilesik 248 Adim A: 2-(2-floro-5-metoksifenil)asetik asit Su içinde bulunan 2-(2-floro-5-metoksifenil)aset0nitril (200 mg, 1.0 mmol) ve sodyum hidroksit (81.5 mg, 2.0 mmol) çözeltisi 100 derece sicaklikta 8 saat karistirildi. Reaksiyon karisimi, sonraki adim için baskaca saflastirilmayan, arzu edilen ürünü vermek üzere düsük basinç altinda buharlastirildi. LC-MS : m/z (M-H)=183.2 floro-5-metoksifeniI)asetamid) (248) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir = 615.7 Bilesik 249 m slepA m 1 56998 81' N 0 HDL HO'CNw MN N.N ::L-;Nyllêhou HN› Adim A: metil 2-(6-(3-hidroksiazetidin-1-iI)piridin-2-il)asetat sicaklikta 12 saat karistirildi. Oda sicakligina sogutma yapildiktan sonra reaksiyon karisimi filtrelendi, HZO ile seyreltildi ve etil asetat ile ekstrakte edildi. Organik faz, tuzlu su ile yikandi, sodyum sülfat üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi.

Elde edilen rezidü, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. (3-hidroksiazetidin-1-iI)piridin-2-il)asetamid) (249) **o-C Ml; ~_N OSiIN 3 0” H'V -GSJNMOJLSNNH Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir Bilesik 383 Bu prosedür, Bilesik 249 prosedürü ile aynidir (3-floroazetidin-1-iI)fenil)asetamid) Bilesik 250 44'› @6 Bu prosedür, Bilesik 249 prosedürü ile aynidir.

Adim A: metil 2-(6-(3,3-diflorosiklobütiIamino)piridin-2-il)asetat (3,3-diflorosiklobütilamino)piridin-2-il)asetamid) (250) Bilesik 251 ..Or-(hi o o QM&F Bu prosedür, Bilesik 249 prosedürü ile aynidir Adim A: metil 2-(6-(3-floroazetidin-1-il)piridin-2-il)asetat (3-floroazetidin-1-iI)piridin-2-il)asetamid) (251) W484,. : 49% , 3.91 Bilesik 252 ve Bilesik 253 1: - o \ N 0/ \ r 0/ ' '-OÄSFQ Adim A: metil 2-(5-(3,3-difloroazetidin-1-iI)piridin-2-il)asetat Bu prosedür, Bilesik 254 Adim B prosedürü ile aynidir karbonat (346.1 mg, 1.06 mmol) karisimi azot atmosferi ve mikrodalga altinda 45 dakika 130 °C sicakliga isitildi. Karisim, kuruyana kadar vakum altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, Bilesik 252 ve Bilesik 253 vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi.

Bilesik 252 N ?53” 1H NMR (KLOROFORM-d) Ö: 7.81 (d. J = . 6.87 (dd, J Bilesik 253 Bilesik 254 N 3 p N O Ste B /Qk /Çg/t , ” @i \ o/ S W: Äs/Llîl Adim A: metil 2-(4-bromopiridin-2-iI)asetat mL susuz THF içinde bulunan bir 4-br0mo-2-metilpiridin(1 9,5.8 mmol) karisiminin içerisine -70 derece sicaklikta damla damla LDA (9.2 ml,2M) ilave edildi, 30 dakika karistirildi. Bu çözeltiye damla damla dimetil karbonat (630 mg, 7.0 mmol) eklendi. 1 saat daha karistirildiktan sonra LC-MS ile reaksiyonun tamamlandigi görüldü. Doymus NH4CI çözeltisi ile baskilandi ve EtOAc ile ekstrakte edildi. Organik faz ayrildi ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Ham ürün, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. LC-MS: m/z (M+H) 231.1.

Adim B: metil 2-(4-(azetidin-1-iI)piridin-2-i|)asetat mmol) ve daha sonra azetidin (135 mg,2.4 mmol) ilave edildi ve karisim gece boyu 90 derece sicaklikta isitildi. Ortam sicakligina sogutma yapildiktan sonra, ayrilan organik faz düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, etil asetat içine alindi, sulu potasyum karbonat çözeltisi ve tuzlu su ile yikandi ve sodyum sülfat üzerinden kurutuldu.

Buharlastirildiktan sonra elde edilen rezidü, metil 2-(4-(azetidin-1-iI)piridin-2-il)asetat vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. (azetidin-1-il)piridin-2-il)asetamid) (254) HNÄSJÜHOJSFN Bu prosedür, Bilesik 249 Adim B prosedürü ile aynidir 631.2 Bilesik 255 0 /5 u A _. \N slepB (NK /:) Bu prosedür, Bilesik 254 prosedürü ile aynidir Adim A: metil 2-(4-(3-hidroksiazetidin-1-il)piridin-2-il)asetat 1H NMR (metanoI-d4, , 6.50 (4-(3- hidroksiazetidin-1-il)piridin-2-il)asetamid) (255) HN4 05 “0” o 1H NMR (metanol-d4, , 6.18 Bilesik 256 F HN-4 Ja. I ` NH 28 ° S S ° slepA N stepB N- / N xOJk/LN) Ç!` p Bu prosedür, Bilesik 254 prosedürü ile aynidir Adim A: Metil 2-(4-(3-floroazetidin-1-iI)piridin-2-il)asetat 1H NMR (CDCI3, , 6.26 (dd, J (3- floroazetidin-1-iI)piridin-2-il)asetamid) (256) 4” '74% 8 o* 5: Bilesik 257 HzN- ' ü. mi .. 13 3 o* Bu prosedür, Bilesik 249 prosedürü ile aynidir Adim A: metil 2-(3-(azetidin-1-il)fenil)asetat (azetidin-1-il)fenil)asetamid) (257) Bilesik 258 ..43 ”fm (5% sispA slepa M; &N »JK/w o Ö M 4) Bu prosedür, Bilesik 254 prosedürü ile aynidir Adim A: Metil 2-(4-(3,3-difloroazetidin-1-il)piridin-2-il)asetat (3,3-difloroazetidin-1-iI)piridin-2-il)asetamid) (258) 05 0” #O L; 1: F L' Bilesik 259 m stepA \l 0 / stepB Nu Q.? ,MN N'Nç Wk/N Hill-43).“ ûjks/RN AdimA: metil 2-(3-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)asetat LC-MS : m/z (M+H) = 249.2 4-metilpiperazin-1-il)fenil)asetamid) (259) **N-«SÄI'O/Lsy” amin) (50 mg, 0.19 mmol) çözeltisinin içerisine azot atmosferi altinda metil 2-(3-(4- mg, 0.57 mmol) ilave edildi ve karisim mikrodalga isinlari altinda 100 derece sicaklikta 40 dakika karistirildi. Reaksiyon karisimi, su içerisine bosaltildi ve etil asetat ile ekstrakte edildi. Organik faz, doymus sulu sodyum bikarbonat ve tuzlu su ile yikandi ve sodyum sülfat üzerinden kurutuldu. Solvent, düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. 6.84 (d, J = 7.0 Hz, 2H), , Bilesik 260 57)..;k`îo/'NWA @Mßo/ _M HM' (SJ: "î h ß` J 04-?” Bu prosedür, Bilesik 259 prosedürü ile aynidir Adim A: metil 2-(3-(pirr0lidin-1-iI)fenil)asetat (pirrolidin-1-il)fenil)asetamid) (260) < ,2 o 0 HN'<5),,I_O)LS>`NH Bilesik 261 4? ”V” LGHNJT 11"? 014%” Bu prosedür, Bilesik 259 prosedürü ile aynidir.

Adim A: metil 2-(3-(siklopropilamino)feniI)asetat (siklopropy)amino)fenil)asetamid) (261) ”IQ-«O `N N'N &pm-i Bilesik 262 m m” K“Nûkio/ ““95 .. "NX 97 \ 0/ . _M <\{«0 ?F Bu prosedür, Bilesik 259 prosedürü ile aynidir Adim A: metil 2-(3-morfolinofenil)asetat (11:) (03 SANO/ESWL -~ Bilesik 263 0 #5:14 J, I `>~NH slepc `-/ I` O /üx fenilen))dipiperazin-1-karboksilat Bu prosedür, Bilesik 259 prosedürü ile aynidir 18H). LC-MS : m/z (M+H) 888.1 (piperazin-1-il)fenil)asetamid) (263) Bu prosedür, Bilesik 239 Adim C prosedürü ile aynidir. metilpiperidin-4-iI)fenil)asetamid) (362) Bu prosedür, Bilesik 259 prosedürü ile aynidir Bilesik 264 wc / __z-%0 N (ik/C› ini-(si /\/ß`s$`N \ Bu prosedür, Bilesik 263 yapiminin reaksiyonu ile aynidir. diyl))bis(azandiyl))bis(2-oksoetan-2,1-diyl))bis(3,1-fenilen))bis(metilkarbamat) (metilamino)fenil)asetamid) (264) Bilesik 265 Bu prosedür, Bilesik 249 prosedürü ile aynidir Adim A: etil 2-(4-morfolinofenil)asetat Bilesik 266 B'û/C step A F/îiû 07'“ &202W slep B _Ak/k / 4” 'N N"N\ Bu prosedür, Bilesik 249 prosedürü ile aynidir (3,3-difloroazetidin-1-iI)feniI)asetamid) (266) 1465-45 ji.“ d SWNH Bilesik 267 Bu prosedür, Bilesik 249 prosedürü ile aynidir Adim A: metil 2-(6-(azetidin-1-iI)piridin-2-il)asetat LC-MS : m/Z (M+H)=207.2 (azetidin-1-il)piridin-2-il)asetamid) (267) HN-(sjwi J! SSam Bilesik 268 1 N- -N \ »04453 "1 ;Frm Bu prosedür, Bilesik 249 prosedürü ile aynidir Adim A: metil 2-(6-(3,3-difloroazetidin-1-iI)piridin-2-il)asetat (3,3-difloroazetidin-1-iI)piridin-2-il)asetamid) (268) FÃCNÃNLO og/;XNÖZF HN~ Bilesik 269 Bu prosedür, Bilesik 249 prosedürü ile aynidir Adim A: metil 2-(3-(3,3-difloroazetidin-1-iI)feniI)asetat 1H NMR (KLOROFORM-d) 6: 7.19 - 7.28 (m, 1H), , (3,3-diflorosiklobütil)fenil)asetamid) (269) FSCN`Q4° ° /-\ ”ÖÃF HN4SJBL i S`>`NH Bilesik 270 ar N 0/ \O/C/ sms HN" Bu prosedür, Bilesik 249 prosedürü ile aynidir Adim A: metil 2-(6-(3-metoksiazetidin-1-il)piridin-2-il)asetat LC-MS : m/z (M+H)=237.2 (3-metoksiazetidin-1-il)piridin-2-il)asetamid) (270) Bilesik 271 çözeltisinin içerisine SOCIZ (1.38 9, 117 mmol) ilave edildi. Reaksiyon karisimi, iki saat sonra konsantre edilerek arzu edilen ürün elde edildi. LC-MS : m/z (M+H)= 186.6 Adim B: metil 2-(6-(3,3-difloroazetidin-1-il)piridin-3-il)asetat dioksan ilave edildi. Reaksiyon karisimi, 90 derece sicaklikta 60.0 dakika mikrodalgaya tabi tutuldu. Oda sicakligina sogutuldu ve CH2CI2 (20.0 ml) ile seyreltildi. Süspansiyon filtrelendi, CHZCIZ (3 x 10.0 ml) ile yikandi ve filtreleme ürünü, su ve tuzlu su ile yikandi.

Organik faz. susuz Na2804 üzerinden kurutuldu, filtrelendi. Filtreleme ürünü konsantre edildi. Elde edilen rezidü, baslikta belirtilen bilesigi vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. (3,3-difloroazetidin-1-iI)piridin-3-il)asetamid) (271) 1014/5 J, O/LSVNH Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir LC-MS : m/z (M+H)= 703.8 Bilesik 272 Er 0 o NIN sJ :sk-N& N89: Badi NH HN (3 Q ( `> ” 2_ \ SlepD " ,/ \ Adim A: tert-bütil 4-(3-(2-metoksi-2-oksoetiI)fenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)- karboksilat 90 derece sicaklikta N2 altinda gece boyu karistirildi. Oda sicakligina sogutma yapildiktan sonra karisim, selit ile filtre edildi, EtOAc ile seyreltildi, su ile yikandi. Na2804 üzerinden kurutuldu ve düsük basinç altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. LC-MS : m/z (M+H)=332.4 Adim B: tert-bütil 4-(3-(2-metoksi-2-oksoetiI)fenil)piperidin-1-karboksilat dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (330 mg, 1.0 mmol) ve Pd/C (30 mg) çözeltisi oda sicakliginda 12 saat karistirildi. Daha sonra reaksiyon karisimi filtrelendi ve baskaca saflastirilmadan sonraki adim için kullanilan, arzu edilen ürünü vermek üzere düsük basinç altinda buharlastirildi. LC-MS : m/z (M+H)=334.4 ,2-diyl))bis(azandiyl)bis(2-oksoetan-2,1-diyl))bis(3,1-fenilen))dipiperidin-1- karboksilat /rNsoc BocN HNÄSJW" .ll S>-NH Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir LC-MS : m/z (M+H)=886.1 (piperidin-4-il)fenil)asetamid) (272) fenilen))dipiperidin-1-karboksilat (15 mg, 0.01 mmol) çözeltisi oda sicakliginda 6 saat süresince karistirildi. Karisim, standart bir metot ile saflastirilmak üzere düsük basinç altinda buharlastirildi. 2H), , (piperidin-4-il)fenil)asetamid) (290) rin-45514,_ N %wy Bu prosedür, Bilesik 272 prosedürü ile aynidir Bilesik 273 HN 0 siepA HNj o step B %4 Ne" N-~ \ N OH NJ\/u`o/ HN %S'L" ÜS# Adim A: metil 2-(1H-imidazol-4-il)asetat hidroklorür mmol) çözeltisinin içerisine SOCI2 (145 mg, 1.23 mmol) ilave edildi. Reaksiyon karisimi, iki saat sonra konsantre edilerek arzu edilen ürün elde edildi. LC-MS : m/z (M+H)= 141.1 (1H-imidazoI-4-il)asetamid) (273) dakika 130 °C sicakliga isitildi. Daha sonra reaksiyon karisimi oda sicakligina sogutuldu ve su içerisine bosaltildi. Karisim, etil asetat (50 ml*3) ile ekstrakte edildi, organik faz tuzlu su ile yikandi, sodyum sülfat ile kurutuldu, filtrelendi, bir rezidü vermek üzere konsantre edildi; elde edilen rezidü, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi.

Bilesik 274 st_ep__A S L. >=N O __Lane N _D_ swf* M0/ SV* ÄO / oi-i WNKS N10 \ syNHBoc HINYIÃ o (Eh/”H“ W” 32`i.” Adim A: metil 2-(2-aminotiazoI-4-il)asetat Bu prosedür, Bilesik 273 Adim A prosedürü ile aynidir.

LC-MS : m/z (M+H)= 173.2.

Adim B: metil 2-(2-(tert-bütoksikarbonilamino)tiazol-4-il)asetat Tolüen (3 ml) içinde bulunan bir di-tert-bütil dikarbonat (279 mg, 1.28 mmol) çözeltisi, metil 2-(2-aminotiazoI-4-il)asetat (200 mg, 1.16 mmol) içeren bir balona konuldu, reaksiyon karisimi 85 °C sicaklikta 24 saat süresince isitildi. LCMS ile arzu edilen ürün saptandi, karisim, bir rezidü vermek üzere konsantre edildi, elde edilen rezidü, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi.

LC-MS : m/z (M+H)= 273.3 Adim C: 2-(2-(tert-bütoksikarbonil(metil)amino)tiazol-4-il)asetik asit THF2H20=6mlz3 ml içinde bulunan bir metil 2-(2-(tert-büt0ksikarbonil(metil)amino)tiazoI-4- sicakliginda gece boyu karistirildi. Daha sonra reaksiyon karisimi, arzu edilen ürünü vermek üzere konsantre edildi. LC-MS : m/z (M+H)= 259.3 diyl))bis(azandiyl)bis(2-oksoetan-2,1-diyl))bis(tiazol-4,2-diyl)bis(metilkarbamat) Bocl-N S S Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir aminotiazol-4-il)asetamid) (274) HNÄZSL,.OÄS`>`NH Bu prosedür, Bilesik 239 Adim C prosedürü ile aynidir Bilesik 275 Sayma s`Jwcogm sxýk/cozH /ßî/i ,' `SÜ R? siopE / `(1 o \7n\ mr( J i >~NH HN-4 J.. 3189`,“ Adim A: metil 2-(2-(metilamino)tiazoI-4-il)asetat MeOH (5 ml) içinde bulunan metil 4-kIoro-3-oksobütanoat (1 9, 11.1 mmol) ve 1- etanol buharlastirildi ve doymus sodyum bikarbonat ile seyreltildi ve etil asetat ile ekstrakte edildi. Organik fazlar, magnezyum sülfat üzerinden kurutuldu ve reaksiyon karisimi, metil 2-(2-(metilamino)tiazoI-4-il)asetat vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. LC-MS : m/z (M+H)= 187.2 tiadiazoI-5,2-diyl))bis(azandiyI)bis(2-oksoetan-2,1-diyl))bis(tiazoI-4,2- diyl)bis(metilkarbamat) HN'4SÂ,,LO)LS\›`NH Bu prosedür, Bilesik 274 Adim B - Adim D prosedürü ile aynidir (metilamino)tiazol-4-iI)asetamid) (275) N 4N7N N _ hi› N HN 1 II -NH Bu prosedür, Bilesik 274 Adim E prosedürü ile aynidir Bilesik 276 >=N O stepA 5)** O szepa #N 0 stapC (03 0/1. s 5 no 3: _i_ _ ' NN N“.

Adim A: metil 2-(2-bromotiazol-4-iI)asetat altinda -20 °C sicaklikta ilave edildi. Reaksiyon karisimi yavas sekilde oda sicakligina isitildi ve iki saat karistirildi. Çözelti daha sonra dietil eter ile seyreltildi ve 25 ml yüzde 'luk hidroklorik asit çözeltisi ile yikandi; sulu faz, 20 ml dietil eter ile ekstrakte edildi. Bir araya getirilen organik fazlar kurutuldu ve suyunu kaybedene kadar buharlastirildi. Elde edilen rezidü, baslikta belirtilen bilesigi vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi.

LC-MS : m/z (M+H) = = 235.9 Adim B: metil 2-(2-morfolinotiazoI-4-il)asetat Bu prosedür, Bilesik 249 Adim A prosedürü ile aynidir LC-MS : m/z (M+H): 243.3. diyl))bis(2-(2-morfolinotiazol-4-il)asetamid) MMS› 'sv-Nu Bu prosedür, Bilesik 274 Adim C - Adim D prosedürü ile aynidir difloroazetidin-1-il)pirimidin-4-il)asetamid) (346) FâN/QNz/QO N~N N'N OyýN &L Bu prosedür, Bilesik 249 prosedürü ile aynidir 1H NMR (KLOROFORM-d) d: , 4.61 (t, J = Bilesik 277 Sw( slepA 3:10 0/ seo ... 9.4_ HM 0 F” 0 siepC &JSN `N ;xî Bu prosedür, Bilesik 276 prosedürü ile aynidir Adim A: metil 2-(2-(3,3-difloroazetidin-1-iI)tiazol-4-il)asetat diyl))bis(2-(2-(3,3-difloroazetidin-1-iI)tiazoI-4-il)asetamid) (277) 8% Nys Bilesik 278 o o sleDA 0 51295 \ 5 0 Stepc\ 51! 0 51:90 SAN Nýks I' › /NVAQNÄJLOH `U «hi W 43)... s , Adim A: metil 3-okso-4-tiosiyanatobütanoat NCS\/U\/002Me KSCN (9.6 9, 99 mmol) içeren bir behere eklendi, reaksiyon karisimi oda sicakliginda 24 saat karistirildi. LCMS ile arzu edilen ürün saptandi, karisim, bir rezidü vermek üzere konsantre edildi, elde edilen rezidü, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. LC-MS : m/z (M+H)= 174.3.

Adim B: metil 2-(2-(dimetilamino)tiazoI-4-il)asetat THF (4 ml) içinde bulunan bir metil 3-okso-4-tiosiyanatobütanoat (350 mg, 2.02 mmol) çözeltisi, dimetilamin / THF (2M; içeren bir behere eklendi, reaksiyon karisimi oda sicakliginda 3 saat karistirildi. LCMS ile arzu edilen ürün saptandi, karisim, bir rezidü vermek üzere konsantre edildi, elde edilen rezidü, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi. diyl))bis(2-(2-(dimetilamino)tiazoI-4-il)asetamid) (278) Bu prosedür, Bilesik 268 Adim C - Adim D prosedürü ile aynidir Bilesik 279 Adim A: sodyum 2-(2-metoksitiazol-4-il)asetat MeOH içinde bulunan bir metil 2-(2-bromotiazoI-4-il)asetat (80 mg, 0.34 mmol) ve sodyum metanolat (300 mg) çözeltisi 85 °C sicaklikta gece boyu karistirildi. Daha sonra reaksiyon karisimi, arzu edilen ürünü vermek üzere konsantre edildi. 1H NMR (METANOL-d4) 6: metoksitiazoI-4-il)asetamid) (279) mmol), HATU (83 mg, çözeltisi gece boyu 50 °C sicakliga isitildi. Karisim, su (20 ml) içerisine bosaltildi ve çökelti, arzu edilen ürünü vermek üzere filtre edildi.

Bilesik 79 2-(piridin-2-il)asetamid sicakliga isitildi. Karisim, kuruyana kadar vakum altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. tiadiazoI-2-il)sikloheksil)-1,3,4-tiadiazoI-2-il)asetamid (79) HN-*~NH metoksifenil)asetik asit ( ve N-etiI-N- izopropilpropan-Z-amin (29.0 mg, 0.22 mmol) çözeltisi 50 derece sicaklikta gece boyu karistirildi. Karisim, su (10 ml) içerisine bosaltildi ve çökelti, ham ürünü vermek üzere filtrelendi. Ham ürün, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. iI)sikIoheksil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)asetamid (81) 45)'- s Bu prosedür, Bilesik 279 prosedürü ile aynidir Bilesik 280 HINÄSJÜV [%5 2 *E'LA > HZN'QS/“m, MSWNH HN Bu prosedür, Bilesik 79 prosedürü ile aynidir metoksietoksi)piridin-2-il)asetamido)-1,3,4-tiadiazoI-2-iI)sikloheksil)-1,3,4-tiadiazol- 2-il)asetamid (280) LC-MS : m/z (M+H)=887.0 tiadiazoI-2-il)sikloheksil)-1,3,4-tiadiazoI-2-il)asetamid (364) HN"`NH il)sikloheksil)-1,3,4-tiadiazol-2-iI)asetamid (376) HNI\NH *ÖH New OÄFWNM tiadiazot-Z-il)sikloheksiI)-1,3,4-tiadiazoI-Z-il)asetamid (367) 41145” 0)' :HH tiadiazoI-2-il)sikloheksil)-1,3,4-tiadiazoI-2-il)asetamid (365) F3CO O O HN SJIIII'OÄSFN OH 1H NMR (, tiadiazoI-2-il)sikloheksil)-1,3,4-tiadiazoI-2-il)asetamid (372) HON-' 1H NMR (, tiadiazoI-Z-il)siklopentiI)-1,3,4-tiadiazol-2-il)asetamid (374) 4 J, 1 \ &0012, N 8 l"' N 1H NMR (, 7.37 _7.32 (m Bilesik 281 o MeaßVL/ÃNF H N % 'AO/“:3 H sm“ -fs S)`NH, Empa il)asetamid HN_ N,N-dimetilformamid (10 ml) içinde bulunan bir 5,5'-((1S,3S)-siklopentan-1,3- çözeltisi oda sicakliginda gece boyu karistirildi. Karisim kuruyana kadar vakum altinda buharlastirildi. Elde edilen rezidü, arzu edilen bilesigi vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. LC-MS : m/z (M+H)=325.4 ”HZ“ UI” L/Q” ”34 Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir Bilesik 282 M902C\/Ç^N F HzNgâ: J”, :%012 &ko / HH' SJ'N SH Q( (%59.31 0,45 3 ”4%" I” M; HQ“ Bu prosedür, Bilesik 281 prosedürü ile aynidir il)propionamid LC-MS 2 m/z (M+H)=339.5 tiadiazoI-2-il)sikloheksil)-1,3,4-tiadiazoI-2-il)propionamid (282) 8 J,, l % N Bilesik 283 HzN'`NH2 rsiepA` ' HNr`NHz »49 N N oýßswêq Imi› D »1453. N'S`>~NH Bu prosedür, Bilesik 281 prosedürü ile aynidir iI)siklopropankarboksamid HN_«SjI("'O/L$>`NH2 LC-MS : m/z (M+H)=351.4 DJ› CLQFNSÃF HN~<'SJW_ i s`>`NH metoksifenil)asetamid (90) HN4:EN,M %Nâ& tiadiazoI-2-amin) (50 mg, ve 2-fenilasetik asit ilave edildi. Karisim 50 °C sicaklikta gece boyu isitildi ve daha sonra su (20 ml) içine bosaltildi ve çökelti, ham ürünü vermek üzere filtrelendi. Ham ürün, arzu edilen ürünü vermek üzere standart bir metot yoluyla saflastirildi. metoksifenil)asetamid (94) Bu prosedür, Bilesik 90 prosedürü ile aynidir (piridin-2-il)asetamid (93) Bu prosedür, Bilesik 90 prosedürü ile aynidir SFC separation Step A Siep 8 kangoo# POCI3,Na0H iyi/48)“ OÄSÄNHZ Adim A: (S,S)- dibenzil siklopentil 1,3-dikarboksilat BnOQCm. 0,002& edildi. Karisim oda sicakliginda azot altinda 3 saat karistirildi. Elde edilen rezidü, su ile seyreltildi ve etil asetat ile ekstrakte edildi. Bir araya getirilen organik çözelti, su ile yikandi, Na2804 üzerinden kurutuldu ve vakum altinda konsantre edildi. Ham ürün, trans- dibenzil siklopentil 1,3-dikarboksilat vermek üzere standart bir metot ile saflastirildi.

Kiral SFC ayirma: cis- ve trans- dibenzil siklopentil 1,3-dikarboksilat, kiral SFC yoluyla ayrilarak (S,S)-dibenzil sikloheksil 1,3-dikarboksilat elde edildi. 1H NMR (, 2.99 - 3.06 (m Adim B: (S,S)-siklopentil 1,3-dikarboksilik asit Hozci,.û,cozi-i mL MeOH içinde bulunan bir 0.-dibenzil siklopentil 1,3-dikarboksilat çözeltisinin içerisine %10 Pd /karbon (0.05 9) ilave edildi. Süspansiyon, hidrojen ile aritildi ve 20 dakika karistirildi. Daha sonra filtrelendi ve arzu edilen bilesigi vermek üzere konsantre edildi. Konfigürasyon, ürünün optik rotasyonu standart deger ile karsilastirilarak dogrulandi. bir metot ile sentezlendi. metoksifenil)asetamid) (284) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir (dimetilamino)fenil)asetamid) (285) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir metoksipiridin-3-il)asetamid) (286) Bu prosedür, Bilesik 37 prosedürü ile aynidir metoksipiridiri-2-il)asetamid) (287) N uÂs»`“'ûÄs»` Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir difloroazetidiri-1-il)piridin-2-il)asetamid) (288) Â 3 ' /\`N F F 1. s OÄS H Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir (dimetilamino)piridin-2-il)asetamid) (289) Bu prosedür, Bilesik 84 Adim B prosedürü ile aynidir Bilesik 386 S S StepA S S H StepB QJ? N-N N' »sgk si: 2-(6-(3,3-difloroazetidin-1-il)piridin-2-il)asetamid H2N SJOMOÄS>`ü damla ilave edildi. Çözelti oda sicakliginda 12 saat süresince karistirildi ve doymus NaHCOs çözeltisi ile baskilandi. Meydana gelen ürün, baslikta belirtilen bilesigi vermek üzere standart sartlar altinda saflastirildi.

LC-MS : m/z (M+H)= 493.2. 1 ,3,4-tiadiazol-2-iI)sikloheksil)-1,3,4-tiadiazol-2-iI)-2-hidroksi-Z-fenilasetamid 2 mL CHzclg içinde bulunan R- mendelik asit (, difloroazetidin-1-iI)piridin-2-il)asetamid (50 mg, Hos HN'

Claims (1)

1. ISTEMLER Bir formül (ll) bilesigi veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup: p Formül (ll), X; bir C3-C7 sikloalkilen anlamina gelir her bir R1 ve R2; bagimsiz olarak -NH2, -N(R3)-C(O)-R4, -C(O)-N(R3)-R4,- N(R3)-C(O)-O-R4, -N(R3)-C(O)-N(R3)-R4 veya -N(R3)-C(O)-8R4 anlamina gelir; her bir R3; bagimsiz olarak hidrojen, Ci-e alkil veya aril anlamina gelir; her bir R4; bagimsiz olarak 01-5 alkil, aril, heteroaril, aralkil, heteroaralkil, sikloalkil, sikloalkilalkil, heterosiklilalkil, ya da heterosiklil anlamina gelir ve bunlarin her biri 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis durumda bulunur; her bir R5; bagimsiz olarak 01.6 alkil, 01-6 alkoksi, -O-CH; alkilenC1_6 alkoksi, - heteroaril, aralkil, heteroaralkil, heterosiklilalkil, heterosiklil, siyano, halo, okso, -OH, -OCF3, -OCHFZ, -SOz-Cm alkil, -NOZ, -N(R7)-C(O)-C1-5 alkiI,-C(O)N(R7)2, anlamina gelir, burada bahsedilen alkil, 01.6 alkoksi, -O-C1.ßalkilenC1_e> alkoksi, aril, heteroaril, aralkil, heteroaralkil, heterosiklilalkil. heterosiklil. -802-01-5 alkil, substitüe edilir; veya iki bitisik R5 grubu, bagli olduklari atomlar ile bir arada bir sikloalkil veya heterosiklil meydana getirir; her bir R6; bagimsiz olarak hidrojen, floro, CH; alkil, -OH, -NH2, -NH(CH3), - N(CH3)2, ya da 01-6 alkoksi anlamina gelir; her bir R7; bagimsiz olarak hidrojen veya CH; alkil anlamina gelir; her bir R8; bagimsiz olarak halo, 01.5 alkil, 01-6 haloalkil, -OH, -N(R7)2, ya da m; 0, 1, ya da 2 olur; n; 0, 1, ya da 2 olur; 0; 1 olur p; 1 olur ve burada zincirli olabilen doymus bir hidrokarbon zincirini ifade eder; bisiklik olmasi halinde 1-6 halka hetero atomuna sahip, ya da trisiklik olmasi halinde 1-9 halka hetero atomuna sahip, 5-14 üyeli bir aromatik halka sistemini ifade eder ve bahsedilen halka hetero atomlari ise 0, N ve S arasindan bagimsiz olarak seçilir; alkil grubunu ifade eder; edildigi bir C1-C12 alkil grubunu ifade eder; polisiklik aromatik olmayan hidrokarbon gruplarini ifade eder; C1-C12 alkil grubunu ifade eder; edildigi bir C1-C12 alkil grubunu ifade eder; ila dört adet hetero atom içeren, 3 ila 14 üyeli, aromatik olmayan halka yapilarini ifade eder; ancak (1), X, substitüe edilmemis siklopropil oldugunda, R1 ve R2 degiskenlerinin ikisi birden -NH2 veya -NH-C(O)-fenil olamaz; (2), X, substitüe edilmemis siklopropil ve m ile n degiskenlerinin ikisi de 1 oldugunda, bu durumda R1 ve R2 degiskenlerinin ikisi birden -NH-C(O)-benzil olamaz. 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, burada m, 0 ve n ise 0 olmaktadir. 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, burada n, 1 ve m ise 1 olmaktadir. 3. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, burada her bir R6, hidrojen olmaktadir. 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, burada R1 ve R2, ayni olmaktadir. 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, burada R1 ve R2, farkli olmaktadir. 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, burada R1 ve R2 degiskenlerinin her biri -N(R3)-C(O)-R4 olmakta, burada her bir R3, hidrojen ve her bir R4 ise aralkil veya heteroaralkil olmakta ve bunlarin her biri 0-3 adet R5 ile substitüe edilmis durumda bulunmaktadir. 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bahsedilen bilesik, bir Formül (Ila) bilesigi olmaktadir: 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bahsedilen bilesik, bir Formül (III) bilesigi olmaktadir: Rz~$rw 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bahsedilen bilesik, bir Formül (IV) bilesigi olmakta ve q ise 0, 1, 2, 3, ya da 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir 4 olmaktadir: tuzu olup, bahsedilen bilesik, bir Formül (IVa) bilesigi olmakta ve q ise 0, 1, 2, 3, ya da 4 olmaktadir: R4 s H 4 Tîmiqf 12. 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bahsedilen bilesik, bir Formül (IVb) bilesigi olmakta ve q ise 0, 1, 2, 3, ya da 4 olmaktadir: 13. 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bahsedilen bilesik, bir Formül (IVc) bilesigi olmakta ve q ise 0, 1, 2, 3, ya da 4 olmaktadir: 10 14. 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, asagida gösterilen bilesiklerden olusan gruptan seçilmektedir: 15. 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir 10 tuzu olup, bu bilesik, asagidaki bilesik olmaktadir: 10 19. 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bu bilesik, asagidaki bilesik olmaktadir: 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bu bilesik, asagidaki bilesik olmaktadir: HN4:JNû/l:5\ NH 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bu bilesik, asagidaki bilesik olmaktadir: 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bu bilesik, asagidaki bilesik olmaktadir: HN4':J 1%`NH 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bu bilesik, asagidaki bilesik olmaktadir: 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bu bilesik, asagidaki bilesik olmaktadir: 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bu bilesik, asagidaki bilesik olmaktadir: 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bu bilesik, asagidaki bilesik olmaktadir: Q/SNJINÄO kgfêrýî 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bu bilesik, asagidaki bilesik olmaktadir: 1. Istemde tanimlanan bilesik veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu olup, bu bilesik, asagidaki bilesik olmaktadir: 1 ila 25. Istemlerin herhangi birinde tanimlanan bir Formül (Il) bilesigini veya bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir tuzunu ve farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici içeren bir farmasötik bilesim. Ihtiyaç halindeki bir bireyde kanser tedavisinde kullanilmak üzere, 1 ila 25. Istemlerin herhangi birinde tanimlanan bilesik, ya da bu bilesigin farmasötik olarak kabul edilebilir bir tuzu. 27. Istemde tanimlanan kullanima yönelik bilesik olup, burada bahsedilen kanserin özelligi; i) bir referans standardi ile karsilastirildiginda düsük seviyede E-kadherin ekspresyonu ile, ii) bir referans standardi ile karsilastirildiginda yüksek seviyede vimentin ekspresyonu ile, ya da iii) düsük veya azalmis seviyede piruvat karboksilaz ekspresyonu ile karakterize edilmektedir. 27 veya 28. Istemde tanimlanan kullanima yönelik bilesik olup, burada bahsedilen kanser: küçük hücreli olmayan akciger kanseri, meme kanseri, hepatoselüler karsinoma, 0ste0sarkoma, Iipomalar, kondrosarkoma, mezotelyoma, kolon kanseri, renal hücreli karsinom, akut miyeloit lösemi (AML), melanoma ve multipl miyeloma arasindan seçilmektedir.