TH32757B - ฟอสโฟไลเปส a1 ชนิดใหม่ กรรมวิธีการเตรียมและการใช้งานของมัน - Google Patents

Abstract

ฟอสโฟไลเปส A1 (phospholipase A1)11 ที่สามารถไฮโดรไลซ์ฟอสโฟลิปิด (phospholipid) เพื่อสร้าง2-เอซิล ไลโซฟอสโฟลิปิด (2-acyl lysophospholipid)และที่สามารถได้จากสปีชีส์ต่างๆ ของรา Aspergillus

Claims (9)

1.วิธีสำหรับเตรียมฟอสโฟไลเปส A1 (phospholipase A1) ซึ่งประกอบรวมด้วย (a) การเลี้ยงสายพันธุ์ของ (Aspergillus oryzae SANK 11870 FERM BP-3887 ภายใต้สภาวะ ที่สร้างฟอสโฟโลเปส A1 ได้ (b) หลังการเลียงสายพันธ์ ทำการเจือจางสิ่งเพาะเลียงด้วยน้ำหรือสาระลลายบับฟเฟอร์ (c) การกรองสารละลายที่ได้ภายใต้สภาวะความดันเพื่อแยกส่วนที่ไม่สามารถละลายได้ออก และ (d) อาจเลือกทำให้เอนไซด์บริสุทธิ์ 2. วิธีสำหรับเตรียมฟอสโฟไลเฟส A1 ซึ่งประกอบรวมด้วย (a) การเลี้ยงสายพันธุ์ของ (Aspergillus niger American Type Culture Collection สายพันธ์ เลขที่ 9642 ภายใต้สภาวะที่สร้างฟอสโฟไลเฟส A1 ได้ (b) หลังการเลียงสายพันธ์ ทำการเจือจางสิ่งเพาะเลียงด้วยน้ำหรือสาระลลายบับฟเฟอร์ (c) การกรองสารละลายที่ได้ภายใต้สภาวะความดันเพื่อแยกส่วนที่ไม่สามารถละลายได้ออก และ (d) อาจเลือกทำให้เอนไซด์บริสุทธิ์ 3.วิธีของข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่เลี้ยงสายพันธ์ที่อุณหภูมิระหว่าง 18 ํ ถึง 40 ํซ . 4.วิธีของข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่เลี้ยงสายพันธ์ที่อุณหภูมิระหว่าง 18 ํ ถึง 32 ํซ . 5. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่เลี้ยงสายพันธ์เป็นเวลาระหว่าง 3 และ 20 วัน 6. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่เลี้ยงสายพันธ์เป้นเวลาระหว่าง 4 และ 8 วัน 7. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่เลี้ยงสายพันธ์ที่ 30 ํซ เป็นเวลา 15 ชั่วโมง และต่อที่ 19ํซ . เป็นเวลา 5 วัน 8. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่เจือจางสิ่งเพาะเลียงด้วย 1 ถึง 20 เท่าโดยน้ำหนักของอาหาร ในน้ำหรือสารละลายแอคเควียสบัฟเฟอร์ 9. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่ฟอสโฟไลเปส A1 ได้รับการทำให้บริสุทธิ์โดยวิธีใดวิธีหนึ่ง หรือใช้การร่วมกันของวิธีที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย ; การไดแอไลซ์ของสผม คอลัมน์โครมาโต- กราฟี การวอลทิ่ง -เอาท์ (salting- out) และการทำเจลฟิลเตรชัน 1 0. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่ในขั้นตอน (b) เจือจางสิ่งเพาะเล้ยงด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ ที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ของแอวีเตท และสารละลายบับเฟอร์ของฟอสเฟต 1

1.วิธีของข้อถือสิทธิที่ 4 โดยที่เลี้ยงสายพันธ์เป็นเวลา 4 ถึง 8 วัน 1

2.วิธีของข้อถือสิทธิที่ 2 โดยที่เลี้ยงสายพันธ์ที่อุณหภูมิระหว่าง 10 ํ ถึง 40 ํซ . 1

3. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 2 โดยที่เลี้ยงสายพันธ์เป็นเวลาระหว่าง 18 ํ และ 32 ํซ . 1

4. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 2 โดยที่เลี้ยงสายพันธ์เป็นเวลาระหว่าง 3 และ 20 วัน 1

5. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 2 โดยที่เลี้ยงสายพันธ์เป็นเวลาระหว่าง 4 และ 8 วัน 1

6. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 2 โดยที่เลี้ยงสายพันธ์ที่ 30ํ ซ. เป็นเวลา 15 ชั่วโมง และต่อที่ 19 ํซ . เป็นเวลา 5 วัน 1

7. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 2 โดยที่เจือจางสิ่งเพาะเลี้ยงด้วย 1 ถึง 20 เท่าโดยน้ำหนักของอาหาร ในน้ำหรือสารละลายแอคเควียสบัฟเฟอร์ 1

8. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 2 โดยที่ฟอสโฟไลเฟส A1 ได้รับการทำให้บริสุทธิ์โดยวิธีใดวิธีหนึ่ง หรือใช้ร่วมกันของวิธีที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย การไดแอไลซ์ของผสม คอลัมน์โครมาโต- กราฟี การซอลทิ่ง เอาท์-และการทำเจลฟิลเตลชัน 1

9. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 2 โดยที่ในขั้นตอน (b) เจือจางสิ่งเพาะเลี้ยงวด้วยสารละลายบับเฟอร์ ที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยสาระลายบับเฟอร์ของแอซีเตท และสารละลายบับเฟอร์ของฟอสเฟต 20 วิธีของข้อถือสิทธิที่ 13 โดยที่เลี้ยงสายพันธ์เป็นเวลา 4 ถึง 8 วัน