SU763354A1 - Способ выделени белка из белковых гидролизатов - Google Patents

Description

Изобретение относитс  к способу выделени  белка из белковых гидролиэатов животного и растительного сырь  и может найти применение в лег кой, пищевой, текстильной, фармацевтической промышленности. Известны способы выделени  белка из белковых гидролизатов путем обработки белковых гидрюлизатов активными сорбентами, например активированными угл ми, с последующим осаждением белка из очищенных гидролизатов Однако процесс провод т при нагревании в течение довольно длительного времени, дл  разных гидролизатов и условий гидролиза требуютс  специальные марки активированных углей . Известны также способы выделени  белка из окрашенных гидролизатов, в которых очистку гидролизата, с целью его обесцвечивани , ведут обработкой раствора реагентами-осветител ми, окисл ющими и разрушающими окрашенны примеси. В качестве такого реагента в известных способах используют перекись водорода, обычно обесцвечивающую гидролизаты в щелочной среде 12 Известен способ очистки гидролизатов соевого белка от окрашенных примесей путем обработки соответствующих белковых гидролизатов 30%-ОГМ раствором перекиси водорода при 140°C, рНВ с последующим подкислением и термообработкой гидролизата при 66°С с целью удалени  летучих примесей . Осветленный гидролизат упаривают на половину в вакууме, белок осаждают действием осадител , осадок отдел ют .рованием з . Недостаток зтбго способа состоит в том, что обработку гидролизатов перекисью водорода ведут продолжительное врем  и при высокой температуре, причем очистка эффективна лишь дл  мелочных гидролизатов. Кроме того, в йтом способе, как и в остальных известных , очистку гидролизата и осаждение белка из него осуществл ют как отдельные стадии процесса выделени  белка из гидролиэата. Цель изобретени  - упрощение процесса и повьпиение качества выдел емого белка из белковых гидролизатов. Поставленна  цель достигаетс  путем вьщелени  белка из белоквых гидролизатов , заключакхцимс  в том, что очистку гидролизата и осаждение белка из него ведут путем обработки .гидролиз атов растворами хлораминов до достижени  и-эоэлектрической точки белка.

Предлагаемый способ по сравнению с известными применим к широкому кругу белков, имеющих изоэлектричесг кую точку как в кислой, так и в щелочной средах; очистка гидролизата от окрашенных примесей и осаждение белка осуществл етс  одновременно в одну стадию, в м гких услови х, чтд, обёспечивает ускорение процесса выделени  белка и повышение эффективности его очистки. Сравнение извест него способа с предложенным, проведенное на гидролизатах биомассы дрожжевых микроорганизмов рода Caudida показывает, что в сравнимых услови х в кислой среде (), очистка гидролизата с помощью известного способа практически не происходит, гидролизат получаетс  темноокрашенным и вьщел емый -белок имеет темнобурый цвет, степень чистоты очищенного белка снижаетс  до 70-80% против 9095% , получаемого предлагаемым способом , без дополнительной очистки.

Пример 1. 5 г дрожжей рода Caudida гидролизуют раствором Юг щелочи в 85 г воды при 100-120 С в течение 3-х ч. После охлаждени  гидролизата до комнатной температуры добавл ют к нему раствор, приготовленный из 3 г хлорамина Б в 5 г концентрированной сол ной кислоты и 80-90 г воды, довод  рН гидролизата до 5. Выпавший осадок, имеющий светло-желтый цвет, отдел ют и промывают водой до полного удалени  ионов хлора . Белок обрабатывают смесью гексачэтанол-вода в соотношении 80:15:5, а затем ацетоном в аппарате Сокслета Получают светло-желтый порошок белка , в то врем  как белок вьщел емый подкислением раствора в отсутствии хлорамина темнобурого цвета. Выход 2,0 г.

Пример 2. 1,0г дрожжей род Caudida гидролизуют раствором 25 г щавелевой кислоты в 65 г воды при 10-120 0 в течение 4-х ч. После охлаждени  гидролизат отдел ют от выпавшей в осадок щавелевой кислоты и прибавл ют к нему раствор 3 г хлорамина Б в 100 г воды, довод  рН гидролизата до 5. Выпавший осадок отдел ют и промывают водой до полного удалени  ионов хлора. Далее очистка производитс  как и в примере 1. Гидролизат и выделенный белой после добавлени  хлорамина Б имеет светло-желтый цвет. Выход 3,5 г.

Пример 3. Аналогично примеру 2 из 10 г дрожжей рода Caudida после обработки кислотного гидролизата раствором, изготовленным из 3 г хлорамина Б в 10 г щелочи и 90 г воды , осаждени  белка при и очисгки получают 3,5 г белка светло-желтого цвета.

Пример4. 5г казеина гидролизуют раствором 10 г щелочи в 85 г воды при 100-120°С в течение 5 ч. Далее очистку .гидролизата ведут раствором хлорамина Б ансшогично примеру 1. Получают белок светло-желтого цвета.

Пример 5. Юг казеина гидролизуют раствором 25 г щавелевой кислоты в 65 г воды при 100-120 0. в течение 5-6 ч. Далее очистку гидролизата ведут раствором хлорамина Б аналогично примеру 2. После отделени  осадка и очистки получают белок светло-желтого цвета, выход -7 г

Пример 6. 5г дрожжей pofla Caudida гидролизуют pacтвopo l 10 щелочи в 85 г воды при 100-120°С в течение 3-х ч. После охлаждени  до 30°С добавл ют раствор, приготовленный из 3 г дихлорамина Б в 5 г концентрированной сол ной кислоты и 90 г этанола, к гидролизату, довод  рН .до 6. Выпавший осадок отдел ют и промывают смесью этанол-вода в соотношении 50:50 до полного удалени  ионов хлора. Далее очистка гидролизата и выделение проводитс  так же как в примере 1. Гидролизат и выдел емый белок, после добавлени  дихлорамина Б имеет светло-желтый цвет.

Выход 3 г.

Пример 7. Аналогично примеру 5 из 5 г казеина после обработки кислотного гидролизата раствором,изготовленным из 5 г дихлорамина Б в 10 г концентрированной НС1 и 90 г этанола, осаждени  белка при и очистки получают 3,5 г белка светло-желтого цвета.

Пример 8. Юг дрожжей род Caudida. гидролизуют раствором 25 щавелевой кислоты в 65 г воды при 100-120с в течение 4-х ч. После охл.аждени  гидролиз ат отдел ют от впавшей в осадок щавелевой кислоты и добавл к)т в него раствор 5 г дихлорамина ХБ в 95 г этанола, довод  рН гидролизата до 4. Выпавший осадок отдел ют и промывают смесью этанолвода 2 соотношении 50:50 до полного удалени  ионов хлора. Гидролизат и ввделенный белок после добавлени  дихлорамина ХБ имеет светло-желтый цвет. Выход 3,3 г.

Claims (3)

1. Пример 9. Аналогично примеру 7 из 10 г казеина после обработк кислотного гидролизата раствором, приготовленным из 5 г дихлорамина Х 10 г щелочи и 95 г этанола, доведени  рН гидролизата до 4-х, осаждени белка и его очистки, получгиот 7 г белка светло-желтого цвета. 7 Формула изобретени  способ выделени  белка из белковых гидролиэатов, включающий очистку гидролизатов от окрашенных примесей, осаждение белка из гидролизата действием осадител  и его последующее отделение от гидролизата, отличающийс  тем, что с целью упрощени  процесса повьилени  качества выдел емого белка, гидролиэат обрабатывают растворами хлораминов до достижени  изоэлектрической точки белка. 633546 Источники информации, прин тые во внимание при экспертиз 1- Грандберг И.И. Практические работы по органической химии. М., 5 Высша  школа, 1973, с. 150.
2. 2. Авторское свидетельство СССР 583152, кл. С 09 Н 3/02, опублик. 1977. tO
3. 3. Патент США № 4038437, кл. А 23 J 3/00, опублик. 1977 (прог тотип).