RU2798547C1 - Способ получения белковой основы для производства селективной питательной среды с маннитом, желчью и полимиксином для выявления бактерий родов Proteus, Morganella, Providencia - Google Patents
Способ получения белковой основы для производства селективной питательной среды с маннитом, желчью и полимиксином для выявления бактерий родов Proteus, Morganella, Providencia Download PDFInfo
- Publication number
- RU2798547C1 RU2798547C1 RU2022122980A RU2022122980A RU2798547C1 RU 2798547 C1 RU2798547 C1 RU 2798547C1 RU 2022122980 A RU2022122980 A RU 2022122980A RU 2022122980 A RU2022122980 A RU 2022122980A RU 2798547 C1 RU2798547 C1 RU 2798547C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- temperature
- hydrolyzate
- nutrient medium
- morganella
- obtaining
- Prior art date
Links
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано при санитарно-бактериологических исследованиях. Способ получения белковой основы для производства селективной питательной среды с маннитом, желчью и полимиксином для выявления бактерий родов Proteus, Morganella, Providencia характеризуется тем, что в реактор загружается требуемый объем жидкого панкреатического гидролизата рыбной муки и калий фосфорнокислый двузамещенный в количестве на 10 г сухого ПГРМ - 0,8 г калия фосфорнокислого двузамещенного, смесь нагревается до температуры 100°С, выдерживается при этой температуре в течение 15-20 мин, образовавшийся при кипячении комплекс высокомолекулярных белков и пептидов с катионами кальция и магния фильтруют на фильтр-прессе через бельтинг при помощи сжатого воздуха при давлении 0,5-1,0 атм, затем гидролизат высушивают на сушильной установке при следующих параметрах рабочего режима: температура воздуха на входе в сушильную камеру tвх °С – 124-132; температура воздуха на выходе из сушильной камеры tвых °С – 102-108. Изобретение обеспечивает прозрачность жидкой питательной среды и хороший рост микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae. 2 пр.
Description
Изобретение относится к биотехнологии, конкретно, к способу ферментативной переработки муки кормовой из рыбы и получению питательной основы с заданными параметрами, и может быть использовано в составе селективной питательной среды, предназначенной для выявления и дифференциации бактерий родов Proteus, Morganella, Providencia при санитарно-бактериологических исследованиях.
Мука кормовая из рыбы ГОСТ 2116-2000 - это один из ценнейших источников полноценного белка, жирных кислот, витаминов A, D и группы В, кальция, магния, фосфора, йода и селена. Она в среднем содержит: сырого протеина - 60-75%, жира - 6-14%, влаги - 4-12% и золы - 14-19% и отличается от другого белкового сырья более высоким содержанием кальция - до 13% и фосфора - до 5,5%. Вместе с тем аминокислотный состав белка рыбной муки достаточно постоянен и характеризуется высоким содержанием глутаминовой (12,7-14,6%) и аспарагиновой (9,1-11,0%) кислот, а также глицина (6,7-7,2%), аланина (6,3-6,5%), лейцина (7,2-8,3%) и лизина, (7,3-7,5%); содержание других аминокислот составляет 3-5%. Рыбная мука содержит и определенное количество витаминов: пантотеновая кислота - до 3 мг%; рибофлавин - до 0,8 мг%; тиамин - до 13 мг%; холин - до 440 мг%. Таким образом, она является полноценным сырьем для получения белковых гидролизатов
В настоящее время широко используется панкреатический гидролизат рыбной муки (ПГРМ) в качестве белковой основы при производстве питательных сред для клинической и санитарной микробиологии. ПГРМ получают путем гидролиза кормовой рыбной муки с применением поджелудочной железы и последующим осаждением высокомолекулярных белковых молекул в кислой и щелочной зонах рН. При этих операциях удаляются высокомолекулярные белки.
В соответствии с промышленным регламентом муку кормовую из рыбы загружают в реактор, добавляют воду питьевую и нагревают гидролизуемую смесь до температуры (49±1)°С, корректируют величину рН до значения 8,0±0,2 раствором едкого натра с массовой долей 40%, затем при работающей мешалке вносят измельченную поджелудочную железу. Процесс гидролиза составляет 6 ч, в течение которого корректируют рН гидролизуемой смеси до значения 8,0±0,2.
Прогидролизованную смесь осветляют сначала в кислой зоне, откорректированной концентрированной соляной кислотой до рН (3,9±0,3). Гидролизат нагревают до 100°С и выдерживают в течение 15 мин. Затем охлаждают до температуры 20-40°С и оставляют для отстаивания в течение 12-18 ч. Декантируют надосадочную жидкость, фильтруют через бельтинг. Осветление гидролизата в щелочной среде проводят при рН (8,1±0,1), нагревании до 100°С и выдерживании в течение 15 мин. Гидролизат охлаждают до температуры (90±5)°С. Фильтрацию проводят на фильтр-прессе через бельтинг при помощи сжатого воздуха при давлении 0,5-1,0 атм. В результате получают жидкий опалесцирующий гидролизат светло-коричневого цвета с содержанием аминного азот не менее 0,28%, сухого остатка не менее 8,0%.
Средние значения процентного содержания аминокислот панкреатического гидролизата рыбной муки, определенные на жидкостном хроматографе модель L-8800 фирмы «Hitachi» Япония, представлены в таблице 1.
Таким образом, ПГРМ удовлетворяет требованиям по биологической ценности, доступности, относительной стандартности и к тому же не является пищевым сырьем.
Наиболее близким способом получения белковой основы для производства селективной питательной среды с маннитом, желчью и полимиксином для выявления бактерий родов Proteus, Morganella, Providencia сухой является способ получения сухого панкреатического гидролизата рыбной муки по ТУ 20.59.52-017-78095326-2019
Недостатком способа получения панкреатического гидролизата рыбной муки является:
- высокое содержание кальция и магния в гидролизате (при определении комплексонометрическим методом определения, основанном на получении прочного растворимого комплексного соединения с индикатором - мурексидом содержание кальция 0,65%, магния - 0,32%);
- использование гидролизата в многокомпонентных жидких питательных средах, содержащих фосфаты, приводит к ложноположительной интерпретации результатов исследований, ввиду их диффузного помутнения.
Техническим результатом предлагаемого изобретения является создание сухой питательной белковой основы, обеспечивающей прозрачность жидких питательных сред и хороший рост микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae.
Технический результат достигается тем, что предлагается способ получения белковой основы, включающий внесение в реактор требуемого объема гидролизата, полученного по ТУ 20.59.52-017-78095326-2019 с содержанием сухих веществ не менее 8%. Затем в реактор перед этапом высушивания вносят расчетное количество калия фосфорнокислого двузамещенного, (из расчета на каждые 10 г сухого ПГРМ 0,8 г калия фосфорнокислого двузамещенного), смесь нагревают до температуры 100°С, выдерживают при этой температуре в течение 15-20 мин, образовавшийся при кипячении комплекс высокомолекулярных белков и пептидов с катионами кальция и магния, фильтруют на фильтр-прессе через бельтинг при помощи сжатого воздуха при давлении 0,5-1,0 атм, затем гидролизат высушивают на сушильной установке ФМУ-П при следующих параметрах рабочего режима: температура воздуха на входе в сушильную камеру tBX°С - 124-132; температура воздуха на выходе из сушильной камеры tВЫХ°С -102-108.
Отличием предлагаемого способа получения сухого ПГРМ является внесение калия фосфорнокислого двузамещенного (K2HPO4) необходимого для осаждения высокомолекулярных белков и пептидов и уменьшения минерализации катионами магния и кальция не менее чем в 2-4 раза соответственно, и используемого в производстве питательных сред с повышенными требованиями к показателю прозрачности.
Технология процесса состоит из нескольких стадий:
1. Жидкий панкреатический гидролизат рыбной муки загружают в реактор.
2. Рассчитывают необходимое количество калия фосфорнокислого двузамещенного (на каждые 10 г сухого ПГРМ необходимо добавить 0,8 г калия фосфорнокислого двузамещенного). Расчет производят по формулам:
С.О. общ - общее содержание сухих веществ, г;
V - объем жидкого гидролизата рыбной муки (500 л);
СО - содержание сухих веществ в ПГРМ в %, определенное методом высушивания до постоянного веса;
10 - коэффициент пересчета,
где X - количество калия фосфорнокислого двузамещенного, г;
С.О. общ - общее содержание сухих веществ, г;
0,8 и 10 коэффициенты пересчета.
3. Расчетное количество калия фосфорнокислого двузамещенного загружают в реактор с ПГРМ. Смесь нагревают до 100°С и выдерживают 15-20 мин.
4. Деминерализованную от катионов кальция и магния питательную основу фильтруют на фильтр-прессе через бельтинг при помощи сжатого воздуха при давлении 0,5-1,0 атм.
5. Высушивание производят на сушильной установке ФМУ-П при следующих параметрах рабочего режима: температура воздуха на входе в сушильную камеру tВХ°С -124-132; температура воздуха на выходе из сушильной камеры tВЫХ°С - 102-108; потоком восходящего воздуха сухую основу собирают в накопительные емкости и выгружают.
6. Определяют физико-химические показатели ПГРМ K2HPO4 для производства селективной питательной среды с маннитом, желчью и полимиксином для выявления бактерий родов Proteus, Morganella, Providencia: внешний вид - однородный, мелкодисперсный порошок светло-желтого цвета; 2%-ный раствор должен быть прозрачным, светло-желтого цвета; рН 6,4-7,4; аминный азот не менее 3,0%; потеря в массе при высушивании, не более 7,0%; хлориды (в пересчете на натрия хлорид) не менее 14%; содержание кальция и магния не более 0,15% соответственно.
Пример 1. Жидкий панкреатический гидролизат рыбной муки, полученный по ТУ20.59.52-017-78095326-2019 с содержанием сухих веществ не менее 8%, объемом 500 л загружают в реактор. Перед этапом сушки вносят расчетное количество калия фосфорнокислого двузамещенного (из расчета на каждые 10 г сухого ПГРМ 0,8 г калия фосфорнокислого двузамещенного) равное 3,2 кг, смесь нагревают до температуры 100°С, выдерживают при этой температуре в течение 15-20 мин, образовавшийся при кипячении комплекс высокомолекулярных белков и пептидов с катионами кальция и магния, фильтруют на фильтр-прессе через бельтинг при помощи сжатого воздуха при давлении 0,5-1,0 атм, затем гидролизат высушивают на сушильной установке ФМУ-П при следующих параметрах рабочего режима: температура воздуха на входе в сушильную камеру tBX°С - 124-132; температура воздуха на выходе из сушильной камеры tВЫХ°С - 102-108.
7. Определяют физико-химические показатели полученной белковой основы: внешний вид - однородный, мелкодисперсный порошок светло-желтого цвета; 2%-ный раствор должен быть прозрачным, светло-желтого цвета; рН 6,4-7,4; аминный азот не менее 3,0%; потеря в массе при высушивании, не более 7,0%; хлориды (в пересчете на натрия хлорид) не менее 14%; содержание кальция и магния не более 0,15% соответственно.
Пример 2.
Жидкий панкреатический гидролизат рыбной муки, полученный по ТУ20.59.52-017-78095326-2019 с содержанием сухих веществ не менее 8%, объемом 300 л загружают в реактор. Перед этапом сушки вносят расчетное количество калия фосфорнокислого двузамещенного (из расчета на каждые 10 г сухого ПГРМ 0,8 г калия фосфорнокислого двузамещенного) равное 1,92 кг, смесь нагревают до температуры 100°С, выдерживают при этой температуре в течение 15-20 мин, образовавшийся при кипячении комплекс высокомолекулярных белков и пептидов с катионами кальция и магния, фильтруют на фильтр-прессе через бельтинг при помощи сжатого воздуха при давлении 0,5-1,0 атм, затем гидролизат высушивают на сушильной установке ФМУ-П при следующих параметрах рабочего режима: температура воздуха на входе в сушильную камеру tвх°С -124-132; температура воздуха на выходе из сушильной камеры tвых°С - 102-108.
Физико-химические показатели полученной белковой основы идентичны примеру 1.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет получить белковую основу с заданными параметрами, которая может быть использована в составе селективной питательной среды, предназначенной для выявления и дифференциации бактерий родов Proteus, Morganella, Providencia при санитарно-бактериологических исследованиях, что позволит усовершенствовать методы микробиологического анализа при диагностике инфекционных заболеваний.
Claims (1)
- Способ получения белковой основы для производства селективной питательной среды с маннитом, желчью и полимиксином для выявления бактерий родов Proteus, Morganella, Providencia, включающий внесение в реактор требуемого объема панкреатического гидролизата рыбной муки, отличающийся тем, что перед этапом высушивания в жидкий гидролизат вносится на 10 г сухого ПГРМ - 0,8 г калия фосфорнокислого двузамещенного, смесь нагревают до температуры 100°С, выдерживают при этой температуре в течение 15-20 мин, образовавшийся при кипячении комплекс высокомолекулярных белков и пептидов с катионами кальция и магния фильтруют на фильтр-прессе через бельтинг при помощи сжатого воздуха при давлении 0,5-1,0 атм, затем гидролизат высушивают на сушильной установке при следующих параметрах рабочего режима: температура воздуха на входе в сушильную камеру tвх °С – 124-132; температура воздуха на выходе из сушильной камеры tвых °С – 102-108.
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2798547C1 true RU2798547C1 (ru) | 2023-06-23 |
Family
ID=
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1081843A1 (ru) * | 1983-04-21 | 1986-11-07 | Ростовский-На-Дону Государственный Научно-Исследовательский Противочумный Институт | Способ получени белкового гидролизата из подсолнечного шрота |
| UA36224U (ru) * | 2007-10-10 | 2008-10-27 | Татьяна Анатолиевна Рыжкова | Питательная среда для одновременного выявления гемолитической и лецитиназной активностей микроорганизмов |
| RU2399660C2 (ru) * | 2008-08-04 | 2010-09-20 | ГУ Сибирского отделения Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт Эпидемиологии и микробиологии (ГУ НИИ ЭМ СО РАМН) | Питательная среда для культивирования бактерий |
| RU2553224C2 (ru) * | 2013-06-04 | 2015-06-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии (ФБУН ГНЦ ПМБ) | Питательная среда для селективного накопления энтеробактерий, сухая (бульон мосселя), варианты |
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1081843A1 (ru) * | 1983-04-21 | 1986-11-07 | Ростовский-На-Дону Государственный Научно-Исследовательский Противочумный Институт | Способ получени белкового гидролизата из подсолнечного шрота |
| UA36224U (ru) * | 2007-10-10 | 2008-10-27 | Татьяна Анатолиевна Рыжкова | Питательная среда для одновременного выявления гемолитической и лецитиназной активностей микроорганизмов |
| RU2399660C2 (ru) * | 2008-08-04 | 2010-09-20 | ГУ Сибирского отделения Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт Эпидемиологии и микробиологии (ГУ НИИ ЭМ СО РАМН) | Питательная среда для культивирования бактерий |
| RU2553224C2 (ru) * | 2013-06-04 | 2015-06-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии (ФБУН ГНЦ ПМБ) | Питательная среда для селективного накопления энтеробактерий, сухая (бульон мосселя), варианты |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ШЕПЕЛИН А.П. и др. Изучение диагностической ценности высокоселективных питательных сред для выделения бактерий родов Klebsiella spp. и Proteus spp., Проблемы медицинской микологии, 2020, Т.22, N 4, С.72-76. * |
| ШЕПЕЛИН А.П. Разработка технологии производства панкреатического гидролизата рыбной муки и конструирование на его основе бактериологических питательных сред, Автореф. дис. на соиск. уч.ст. д.т.н., Москва, 2013, 46 с. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP4693412B2 (ja) | １以上の蛋白質を含有する生材料からのペプチド／アミノ酸及び油／脂肪の回収方法、その方法により製造される産物、並びにその産物の使用 | |
| CN104745665A (zh) | 具有促进骨骼生长作用的胶原肽及其制备方法和应用 | |
| RU2798547C1 (ru) | Способ получения белковой основы для производства селективной питательной среды с маннитом, желчью и полимиксином для выявления бактерий родов Proteus, Morganella, Providencia | |
| CN110846351A (zh) | 利用菌体蛋白作为原料制备的苏氨酸发酵培养基 | |
| CN110734903B (zh) | 一种生产耐高温中性蛋白酶的方法 | |
| CN104489602A (zh) | 一种利用鱼粉加工废水制取海鲜调味料的方法 | |
| CN111635919A (zh) | 利用枯草芽孢杆菌水解动物皮制备胶原寡肽的方法 | |
| RU2712747C1 (ru) | Способ получения ферментативного гидролизата из отходов переработки морских гидробионтов | |
| RU2457689C2 (ru) | Способ получения смеси аминокислот из отходов переработки сырья животного или растительного происхождения | |
| CN114807288B (zh) | 一种含有特定序列的抗糖化胶原四肽（pgxr）及其制备方法 | |
| RU2754364C2 (ru) | Способ получения белкового гидролизата | |
| RU2160538C1 (ru) | Способ получения белкового гидролизата из мясного и мясокостного сырья | |
| RU2416633C2 (ru) | Способ получения гидролизата из калифорнийских червей | |
| RU2705314C1 (ru) | Способ производства сухих очищенных солей желчных кислот для бактериологии | |
| CN110760466B (zh) | 一株产耐高温中性蛋白酶的枯草芽孢杆菌及其应用 | |
| SU1717072A1 (ru) | Способ получени гидролизата из форменных элементов крови | |
| RU2298940C2 (ru) | Способ производства белкового гидролизата | |
| SU1654335A1 (ru) | Способ выделени ферментных препаратов аминоацилазы, амилазы и протеаз из ASpeRGILLUS oRYZae | |
| RU2684318C1 (ru) | Способ получения функционального пищевого ингредиента на основе гидролизата казеина | |
| RU2063144C1 (ru) | Способ получения белкового продукта из пшеничных отрубей | |
| Ibrahim et al. | Characterization of Halal Protein Hydrolysates Extracted from Bycatch Fish Rastrelliger Kanagurta | |
| JPS6248358A (ja) | 卵白分解物の製法 | |
| CN116694718A (zh) | 一种磷酸盐透明度合格的细菌学蛋白胨及其生产方法 | |
| RU2235770C2 (ru) | Способ получения пептона "каспий" | |
| RU2083664C1 (ru) | Питательная среда для выращивания чумного микроба |