SU671385A1 - Способ приготовлени сорбента" - Google Patents
Способ приготовлени сорбента" Download PDFInfo
- Publication number
- SU671385A1 SU671385A1 SU772523515A SU2523515A SU671385A1 SU 671385 A1 SU671385 A1 SU 671385A1 SU 772523515 A SU772523515 A SU 772523515A SU 2523515 A SU2523515 A SU 2523515A SU 671385 A1 SU671385 A1 SU 671385A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- procedure
- apply
- sorbent
- need
- solution
- Prior art date
Links
Landscapes
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Description
шем анализируют на содержание вируса и примесей бе,лка.,
Пример 1. К 60 см .макропористого стекла (МПС-1000) прибавл ют 60 мл 1 -10%-кого раствора гамма-аминопропилтриэтоксисилана в ацетоне, хорошо перемешива , высушивают на воздухе, а затем в сушильном шкафу при 110° С в течение 6 ч. Концентрацию аминогрупп на поверхности такого стекла определ ют в пределах 0,1 -1,2 мг зкв/г. К обработанному таким образом стеклу прибавл ют 90 мл 0,25 М фосфатного буфера (рН 7,0) и 10 мл 25%ного водного раствора глутарового альдегида и перемешивают 1 ч при комнатной температуре. К промытому водой стеклу прибавл ют 100 мл 1 М трис-НС буфера {рН 7,0), полученную суспензию перемешивают 2 ч, промывают водой и загружают в хро.матографическую колонку (0,9X14 см). После заполнени сорбентом колонку уравновешивают элюируюш;им буфером. Элюентом может служить 0,05-0,1 М фосфатносолевой буфер с содержанием 0,1-0,2 М хлористого натри .(рН 7,,0) или 0,05- 0,1 М трис-буфер с 0,15 yW хлористого натри (рН 7,5-8,0). Скорость элюции можно измен ть в пределах 0,1-4,0 см/мин. Культуральную жидкость, содержащую вирус клеш,евого энцефалита (шт. «Софьин ИЛ(И «Пан) или суспензию вируса гриппа (шт. МРЦ 11) Объемом 0,2-1,0 мл ввод т в колонку и элюируют буфером, которым колонка уравновешена. В 4-м-5-м мл элюата выходит очищенный вирус. Белковые примеси выход т из колонки- в 8-м- 10-м мл злюата и не содержат практически вирусной активности. Выход вируса из колонки зависит от концентрации групп трис (-оксиметил-)аминометана на поверхности кремнезема. И в оптимальном случае (0,3- 0,4 мг экв/г) выход как вируса клещевого энцефалита, так и вируса гриппа составл л 90-100% от вирусной активности, введенной в колонку.
Пример 2. К 25 мл силох рома С-80, обработанного предварительно растворами гамма-аминотриэтоксисилана и глутарового альдегида, как описано в примере 1, приливают 25 мл I М трис-НС1 буфера (рН 6,85) и перемешивают в качалке 2 ч при комнатной температуре. После отмывки дистиллированной водой полученный .сорбент уравновешивают в элюирующем буфере и загружают в колонку (0,8X12,0 см). В эту колонку ввод т 0,5-1,0 мл суспензии вируса клещевого энцефалита или вируса гр.иппа и провод т элюцию. Элюентом вл ютс буферные растворы, приведенные в примере 1. В 3-м-4-м мл элюата выходит 100% вирусной активности, внесенной в колонку . Примесные белки и низкомолекул рные вещества элюируютс в 7-м и 8-м мл
ci щ/ло-уа
Пример 3. Макропористое стекло (МПС-1000), модифицированное трис(-оксиметил- )а:минометаном с содержанием на поверхности модификатора 0,4 мг экв/г,
подвергают последующему восстановлению, которое провод т следующим образом.
К высушенному модифицированному, как описано в примере 1, стеклу добавл ют 60 мл дистиллированной воды и 60 мл
0,1%-ного раствора NaBH4 и в течение 30 мин интенсивно перемещивают. Затем обработанное таким образом стекло отмывают дистиллированной водой, уравновещивают элюирзющим буфером и загружают в
колонку (0,8X12,0 см). Через колонку пропускают суспензию с активным йли инактивированным формалином вирусов клещевого энцефалита объемом 0,5-1,0мл. Услови элюировани аналогичны услови м, приведенным в вышеописанных примерах. Выход как активного, так и йнактивированного вируса из колонки составл ет 100%.
.Модификаци макропористых кремреземов 7р«с(-оксиметил-) аминометаном делает
возможным их использование дл гельфильтрационной хроматографии вирусных суспейзий . Такой способ приготовлени сорбента устран ет адсорбцию вирусных частиц на поверхности макропористого кремнезема и позвол ет производить без потерь очистку вирусного материала.
Использование в качестве модификатора т;7мс(-оксиметил-) аминометана не вызывает загр знени очищаемых вирусных препаратон биологическ;и активными молекулами, так как он не вл етс биологически активным веществом (он входит,в состав кровезамеНител ).
Данный способ получени сорбента технологически несложен. Полученный сорбент отличаетс посто нством свойств и долговечностью за счет химического св зывани . молекул триса с поверхностью стекла. Модифицированный трис (-оксиметил-)
аминометаном кремнезем не подвержен воздействию различных ферментов, содержащихс в суспензи х вирусов. Это расшир ет возможности применени сорбента, полученного данным способом, в частности, делает его пригодным дл применени в хроматографии различных ферментов.
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ приготовлени сорбента дл очистки вирусных суспензий путем последовательной обработки поверхности макропористого кр емнезема модификаторами с последующим промыванием сорбента и уравновешиванием буфером, отличающийс тем, что, с целью предзпреждёни попадани в вирусный npenaipaT молекул биологически активного модификатора и повышени устойчивости сорбента к фермен5 пористого кремнезема модифицируют последовательной обработкой 1-Ш /о-ньшраствором гамма-аминопропилтриэтоксисилана и 1-5 %-ным раствором глутарового альдегида, затем полученный сорбент про-5 мывают дистилли|рованной водой и влажный сорбент смешивают в равных колнчеб ствах с 0,5-1,5 М раствором грыс(-оксиметил- )аминометана. Источник информации, прин тый во внимание при экспертизе: 1. Сборник трудов ИП и ВЭ, М., 1972, с. 18-19.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU772523515A SU671385A1 (ru) | 1977-08-31 | 1977-08-31 | Способ приготовлени сорбента" |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU772523515A SU671385A1 (ru) | 1977-08-31 | 1977-08-31 | Способ приготовлени сорбента" |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU671385A1 true SU671385A1 (ru) | 1980-04-05 |
Family
ID=20724550
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU772523515A SU671385A1 (ru) | 1977-08-31 | 1977-08-31 | Способ приготовлени сорбента" |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU671385A1 (ru) |
-
1977
- 1977-08-31 SU SU772523515A patent/SU671385A1/ru active
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4138287A (en) | Purifying and isolating method for hepatitis virus to use in preparing vaccine | |
Kaufmann | Unstable proteins: how to subject them to chromatographic separations for purification procedures | |
JPS61275210A (ja) | ウイルス及び発熱原不活性化剤を用いる固相に吸着させた生物医学的生成物及び製薬生成物の処理法 | |
JPS6262153B2 (ru) | ||
Safarik et al. | Magnetic cation exchange isolation of lysozyme from native hen egg white | |
JPH0427504B2 (ru) | ||
JPS5832591B2 (ja) | ウロキナ−ゼの精製法 | |
Yamaura et al. | Purification and some physico-chemical properties of phenoloxidase from the larvae of housefly | |
SU671385A1 (ru) | Способ приготовлени сорбента" | |
JP2007238479A (ja) | ハイドロキシアパタイトに吸着された有機物の溶出方法及び該溶出方法を用いた有機物の精製方法 | |
JP2000262280A (ja) | ウィルスまたはウィルス性抗原の精製方法およびワクチンの製造方法 | |
US4694074A (en) | Process for the purification of HBsAg | |
Planques et al. | Affinity purification of plasminogen by radial-flow affinity chromatography | |
FI116569B (fi) | Menetelmä virusinaktivoidun, tekijä-VIII-pitoisen fraktion valmistamiseksi kromatografisilla menetelmillä | |
SU777041A1 (ru) | Биоспецифический сорбент дл аффинной хроматографии трипсина | |
Turkova et al. | Reversible and irreversible immobilization of car☐ ypeptidase y using biospecific adsorption | |
JPS596883A (ja) | 人尿カリクレインの濃縮精製法 | |
US7365173B2 (en) | Method for the production of pure virally inactivated butyrylcholinesterase | |
JPS62244441A (ja) | 抗体固定化担体 | |
RU1777951C (ru) | Способ получени сорбента дл выделени фибронектина | |
KR830001822B1 (ko) | 유로 키나제의 제조방법 | |
SU979354A1 (ru) | Способ получени сорбента | |
SU942427A1 (ru) | Способ очистки протеолитических ферментов | |
RU2108343C1 (ru) | Способ выделения и очистки эпидермального фактора роста человека (ч-эфр) | |
Bailon et al. | Affinity Purification Methods. V1. A Novel and Rapid Isolation Procedure For Lysozymes |