SU649754A1 - Способ производства зернового бактероденцида - Google Patents

Description

1.Стерилизаци  и сушка зерна нагретым воздухом (100° С) в течение 30 лшн; остужение зерна воздухом (40° С) в течение 30 мин.

2.Получение посевного материала нз культуры бактерий; рабоча  ферментаци  в течение 14-16 ч при 37° С.

3.Заражение зерна и замачивание с г.акуум-гтерепадом (1 ч с перемешиванием); сушха зерна воздухом (40° С) в течение 1 (; расфасовка готовой продукции.

Благодар  использованию вакуум-переиада процессы заоажени  и замачивани , стерилизации п остужени  зериа, сушк| зараженного зерна дл тс  по , поэтому представ.л етс  возможность обеспечить непрерывность технологического цик ,U: и оборачиваемость оборудовани .

При этом осуществл етс  дозирование

культуральной жг;дкости бактерий, подаваемой каждый час на заражение новой партии зерна в соотношении 0,3 : 1. Разгрузка и расфасовка новой партии готовой иродукци также осуществл ютс  ежечасно .

Таким образом, технологический цикл выработки бактороденцида по предлагаемому способу длитс  1 ч, а наличие необходимого количества культуральпой жидкости бактерий псзвол т обеспечить непрерывный процесс производства препарата.

Данные опытов по определению вли ни  продолжительности вакуумировани  с иоследуюшим перепадом давлени  на интенсивность замочки и бактериального пелетировани  зерна представлены в таблиие . Исходна  влажность зерна 12%, исходный титр суспензии бактерий 1 .

Длительность вакуукк|К31::и: :.

19

Ги;еницы

;без вакуумперепада )

20

Как видно из таблицы, кратковремен1 ый вакууы-перепад в 2-3 раза интенснфицирует процессы, заражени  и замачивани  зерна.

Дл  a3roTOBJ7eH H зернового бактородснцкда по предлагаемому способу примен лись близко родственные культуры бактерий - возбудителей тифа мышевидных грызунов Salmonella enteritidis Var. clssatchenko , Saimonella enleritidis var. Prochorovt (штаммы ЛЬ 5170 и № 5170/28) и Sainionella enteritidis var, cissatchenko штаммы ИХ и Кдп-1. Услови  поддержани  культур бактерий, их вырашиваип  и процессы изготовлени  препарата аналогичны при использовании указанных штаммов .

Пример. Культура бактерий тифа грызунов - штамм ° 5170, - хран ш,а с  в лиофилизированном состо нии в ампуле , оживл етс  после вскрыти  ампулы внесением в нее нескольких капель среды Мережковского (10%-ный отвар белка к риных  иц) и )зысезом на ту же агаризованну-ю среду в проЗирках. После никубаt ,

22

3i

12

ет

22

16

0,3

цин в термостате в течение 1 сут. при 37° С из выросшей культуры делаетс  пересев жидкую среду Мережковского и выдерживаетс  вновь npit этой температуре 1 сут.

Выросша  ка среде Мережковского культура пересеваетс  в пробнркп, кото эые после выдерживани  при той же температуре в течение суток перенос тс  в холодильник при + 8° С и маточной культурой дл  заражени .

Посевной материал готовитс  в колбах на жидкой среде, содержащей, г :

Кормовые дрожжи (белково-витаминпый концентрат, БВК) 20.0

Хлористь5Й натрий 5,0

ВодаДо 1 л.

Изготовленна  п ательна  среда после доведени  ее реакции с помошью 40%-ного раствора едкого натри  до рН 7,2-7,4 разливаетс  по 2 л в круглодонные колбы емкостью 5 л и стерилизуетс  в автоклаве при дополнительном давлении 2 атм в течснпе I ч. Дл  заражени  используют смыв агаровых кос ков суточной культуры бактерий тифа грызунов на физиологическом растворе или в стерильной --дистиллированной воде. Суспензи  бактерий вноситс  в колбы со средой из расчета 5%. Выращивание провод т при 37° С в течение 16-20 ч и после проверки на отсутствие заражени  и фага используют дл  засева ферментера.

Рабоча  ферментаци  проводитс  в ферментаторах емкостью 1 м на среде (рЙ 7,2-7,4), содержащей %:

Кормовые дрожжи (БВ1)2,0

Хлористый натрий0,5

Среда указанного состава стерилизуетс  в течение 1,5 ч подачей острого пара Р 3,0 атм при 130-135° С. Коэффициент заполнени  ферментара 0,5. После стерилизации и остужени  питательной среды в ферментер вноситс  10 л посевного материала . Ферментаци  проводитс  при 35-37° С с посто нной аэрацией 0,5 : 1 об/об воздуха на среду в мин при избыточном давлении 0,3-0,5 атм. Мешалка (200 об/мин) включаетс  каждый час два раза в течение 3 мин.

По истечении 14 час ферментаци  прекрапхаетс , провер етс  титр клеток и отсутствие фаголизиса. Титр культуральной жидкости обычно бывает в пределах 3-5 млрд, бактерий в 1 мл. Поскольку культуральна  жидкость ферментатора используетс  дл  заражени  зерна порционном , то нолачей холодной воды в рубашку ферментатора достигаетс  замедление развити  культуры бактерий.

Перед заражением зерно  чмен  (или нщеницы) предварительно подвергаетс  частичной стерилизации иутем продувки нагретого до 90° С воздуха в течение 30 мин с последующим остужением его стерильным воздухо.м. После этого зерно подаетс  в вакуум-сушильный барабан в количестве около 200 кг, куда через разбрызгиватель вноситс  60-70 л культуральной жидкости бактерий. Браи1а  в течение 20-30 мин барабан, осуществл ют замачивание и заражение зерна. Затем в барабане создаетс  вакуум до 0,8 агл:, который держитс  в течение около получаса. После этого открытием вентил  сбрасываетс  вакуум, благодар  чему достигаетс  интенсификаци  пелетировани.  зерна бактери ми и процесса его замачивани .

Сушка заран-сенного зерна производитс  продуванием теплого воздуха (35- 40° С) в сушильных шкафах на противн х. Сушка завершаетс  после достижени  12-

0 14% влал ности зерна. К концу сушки титр бактерий на зерне находитс  в пределах 1,0 млрд, клеток бактерий на I г зерна. Расфасовка готового препарата зернового

5 бактороденцида производ 1тс  в бумажные мешки с соответствуюш;ей этикетировкой.

При произв одстве зернового препарата бактороденцида по козой технологии достигаетс  значительное снижение себестоимости продукции (ориентировочно на

0 30%) за счет упрощек :  технологической схемы, исключени  по сравнению с существующей технологией трудоемких и энергоемких процессов (стерилизации зерна в автоклаве, наращ {Бак:;е бактерий на зер5 не) н резкого сокращени  отдельных стадий производственного никла.

Фор м у л а 3 с б р е т е н и  

0

Способ ироизводства зернового бактороденцида , включающий ириготовление маточной культуры, замачивание, стерилизацию известными способами и заражение

5 зерна бактери м ;, доращивание клето;; бактерий на зерне и высушиваиие бактороденцнда , о т л и ч а ю щ и и с   тем, что, с целью упрощенп  i удешевлени  производства зернового бактороденцида, после приготовлени  маточной культуры провод т стерилизаиию зерна сухим гор чим возл хом при 100-120° С. а заражение и замачивание зерна Be.iyi под вакуумол; до 0,8 агм 3 течение -1.0 ч при25-30°С. после чего сбрасывают сакуум з течение 5-15 мин.