CN110521500A - 一种真姬菇液体菌种生产工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物菌种栽培技术领域，公开一种真姬菇液体菌种生产工艺，包括如下步骤：(1)平皿菌种培养：挑选优质的试管种接种到平皿中，接种完成后放入生化培养箱中培养得到平皿菌种；(2)三角瓶液体菌种培养：配制三角瓶培养基，选取平皿菌种接种到摇瓶内，放培养室中进行动态培养；(3)发酵罐菌种培养：配制发酵罐培养基灭菌冷却，挑选三角瓶液体菌种进行接种，将接种好的发酵罐通入无菌空气进行深层发酵培养；(4)取样检测：灭菌后立刻取样检测得到合格的真姬菇液体菌种。本发明生产工艺提高了菌种质量，缩短了制种周期，提高了生产均一性，获得了较好的经济效益。
Description
技术领域
本发明属于生物菌种栽培技术领域，涉及一种真姬菇液体菌种生产工艺。
背景技术
真姬菇是一种优良的食用菌，它以菌盖滑嫩、柄脆、营养丰富、味美适口而著称于世。姬菇的蛋白质中氨基酸种类齐全，含量非常丰富，尤其是赖氨酸、精氨酸的含量特别高。真姬菇干品中含蛋白质8.87％，碳水化合物60.2％，粗纤维达74％，是一种低热量、低脂肪的保健食品，其味鲜美、性平、甘温，有利尿渗湿，健脾止渴之功能，清热平肝之效，经常食可提高免疫力、预防衰老、延长寿命。
真姬菇的生产菌种包括固体菌种和液体菌种，液体菌种是用液体培养基在生物发酵罐中，通过液体发酵技术生产的液体形态的食用菌菌种。与固体菌种相比，液体菌种具有制种快、活力强、缩短栽培周期、成本降低等优点。液体菌种的制作作为真姬菇生产的重要环节，目前其在国内的制作方法较为单一，并且原料成本较高，使得真姬菇菌种的活力提升受到限制，并造成了大量的可回收资源的浪费。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服上述缺陷，提供一种真姬菇液体菌种生产工艺，相比原有固体菌种生产周期缩短了100天左右；且具有可重复性、稳定性好，培养的真姬菇产品的菇形、颜色、口感、周期都有明显提升。
为了解决上述技术问题，本发明的技术方案为：
一种真姬菇液体菌种生产工艺，包括如下步骤：
(1)平皿菌种培养：将培养基装入干净的三角瓶中，用硅胶塞塞好，包好称量后与平皿一起放入灭菌锅中灭菌；当灭菌结束后，拿出三角瓶、平皿一起摆入超净工作台内灭菌；将三角瓶内培养基分装入平皿中，封口密封，烘干后待用；挑选优质的试管种，用接种针刮去试管前端1cm处的薄弱菌丝及趴壁菌丝，选用前端及后端偏上一段的部分切割成3*3mm大小均匀的小块，勾去一块接入备用的平皿中，接种完成后放入生化培养箱中培养得到平皿菌种；
(2)三角瓶液体菌种培养：配制三角瓶培养基，灭菌冷却，选取步骤(1)得到的平皿菌种，将生长在前端菌丝分隔成大小均匀的正方形小块，用接种铲削取薄薄的正方形小块，转接入摇瓶内，将接种好的摇瓶放培养室中进行动态培养，得到三角瓶液体菌种；
(3)发酵罐菌种培养：配制发酵罐培养基灭菌冷却，挑选步骤(2)得到的三角瓶液体菌种进行接种，将接种好的发酵罐通入无菌空气，设定温度为20～24℃，罐压0.03～0.05MPa，进行深层发酵培养；
(4)取样检测：灭菌后立刻取样，取到空瓶内后转接到PDA培养基上进行检测，30～33℃条件下培养24小时后没有任何异常现象即为合格真姬菇液体菌种。
优选的，步骤(1)所述灭菌锅灭菌为120～123℃灭菌20～40min。
优选的，步骤(1)所述生化培养箱温度为22～23℃。
优选的，步骤(1)所述的试管种具有长相均一、长速均一、外观均一的特点；选取的试管种以接种点为中心向周围均匀辐射生长，形态和长速均匀连贯，边缘整齐；菌丝洁白，爬壁力强，菌丝粗壮、浓密，细胞生命力强。
优选的，步骤(2)所述三角瓶培养基包括如下重量比百分比的原料：豆粉1％，蔗糖3％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.05％，余量为水。
优选的，步骤(2)所述动态培养条件为：前7天转速调到600r/min，最后1天转速调为800r/min，培养温度为22～23℃。
优选的，步骤(3)所述发酵罐培养基包括如下重量比百分比的原料：豆粉1％，蔗糖3％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.1％，消泡剂0.15％，余量为水。
优选的，步骤(3)所述灭菌为110℃保持20min，115℃保持30min，123℃保持90min。
优选的，步骤(3)所述无菌空气在出菌丝前的通入量为发酵罐体积的30-50％；所述无菌空气在出菌丝后的通入量为发酵罐体积的50-80％。
优选的，步骤(4)所述取样工艺流程包括如下步骤：将取样瓶用75％酒精浸湿棉塞，然后用0.25％新洁尔灭溶液在处理一次，20min后两人配合取样，第一人手持火环点燃，第二人在火焰内从新洁尔灭瓶内拔出取样管，在火焰保护下放掉管内的残留菌液，第一人将火环套在待取样的瓶口上，用钳子拔掉棉塞，第二人将取样管插入瓶内打开取样阀放入适量液体菌种，第一人迅速用棉塞封住瓶口，火环移入下一瓶，取完后，把取样管口插入新洁尔灭瓶内，放回原处。
与现有技术相比本发明的有益效果是：
采用本发明生产工艺培养的真姬菇液体菌种的生产周期只需要43～51天，比原有固体菌种生产周期缩短了105天，且本发明生产工艺具有可重复性、稳定性非常好，从接种、培养、出菇都优于固体菌种，培养的真姬菇产品的A品率、菇形、颜色、口感、周期都有明显提升和改善。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
实施例1
一种真姬菇液体菌种生产工艺，包括如下步骤：
1、试管种选取：选取菌丝以接种点为中心向周围均匀辐射生长，形态和长速均匀连贯，菌丝洁白，爬壁力强，菌丝洁白、粗壮，细胞生命力强的试管种；
2、平皿菌种培养：
(1)选购“寒天培地”真姬菇专用培养基，将培养基配料搅拌均匀，取1000ml去离子水，用电磁炉加热煮至沸腾，然后将准备好的配料倒入锅内，煮至微沸至完全溶解，即可分装到干净的500ml三角瓶中，用硅胶塞塞好，包好称量纸后和平皿一起放入灭菌锅中灭菌，在120℃灭菌40min；
(2)灭菌结束后，利用锅内余温烘干物品表面水汽。拿出三角瓶、平皿一起摆入超净工作台内灭菌30min；将三角瓶内培养基分装入平皿中，培养基高度在平皿高度的三分之一以上，重叠放置冷却凝固，待平皿凝固后，用封口膜密封，放入36℃的培养箱内烘干，24h后取出备用；
(3)接种前将超净工作台全面擦拭干净，把接种使用的工具及挑选合格的平皿培养基经75％的酒精消毒后一起放入工作台中，关闭照明灯及风机，打开工作台紫外灯消毒30min；关闭紫外灯，打开风机，5min后开启照明灯，用75％酒精对双手进行消毒，戴上已消毒好的一次性橡胶手套，将酒精棉、打火机、活化后的试管母种经75％的酒精消毒后放入工作台内待用；
(4)点燃酒精灯，灼烧试管口后拧松塞子，在转接平皿种时，将接种针用75％酒精棉全面擦拭后过火灼烧灭菌，刮去试管前端1cm处的薄弱菌丝及趴壁菌丝，选用前端及后端偏上一段的部分切割成3*3mm的小块，勾去一块接入一旁备用的平皿中，将试管塞塞好，放在一旁，依次操作，每只试管母种转接14个平皿；
(5)接种完成后，在转接的平皿上标好批次，放入筐中，用报纸遮好后放入生化培养箱中培养，生化培养箱温度为22℃，培养过程中及时将长势差、生长不均、杂菌感染等不合格的平皿种弃掉；
3、三角瓶液体菌种培养：
(1)配制三角瓶培养基，培养基配方为豆粉1％，蔗糖3％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.05％，余量为水；在120～125℃灭菌20～60min；当灭菌锅里的气压降为0时，打开灭菌锅盖，用余热把锅内物品烘干，拿出三角瓶，放在接种不锈钢平台上冷却备用，等待接种；
(2)接种前进行消毒，与平皿菌种培养的消毒过程相同，选取平皿菌种，将生长在前端菌丝分隔成大小均匀的正方形小块，长度为5-6mm，用接种铲削取薄薄的正方形小块，转接入摇瓶内，每瓶转接6个接种块；
(3)将已经接的摇瓶种用白色胶筐装好，搬到摇瓶培养室中，静置培养一天；将摇瓶放在磁力搅拌器进行培养，前7天转速调到600r/min，最后1天转速调为800r/min，培养温度控制在22℃；
4、发酵罐菌种培养：
(1)配制发酵罐培养基，培养基配方为豆粉1％，蔗糖3％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.1％，消泡剂0.15％，余量为水；将培养基装入发酵罐，装入量为罐体容积的70％；灭菌设定参数：110℃保持20min，115℃保持30min，123℃保持90min；待灭菌锅压力降为0.00Mpa时打开炉门，通水、通气进行冷却，至20-25℃即可接种；
(2)接种需要三人合作，一人协助递喷灯，75％酒精，三角瓶，防火手套，开关洁净空气进气；一人接种，一人开盖和关盖；接种完成后，用湿毛巾扑灭火焰，关闭排气阀，推出无菌罩，将接种好的发酵罐通入无菌空气，无菌空气在出菌丝前的通入量为发酵罐体积的30％；所述无菌空气在出菌丝后的通入量为发酵罐体积的50％；设定温度为20℃，罐压0.05MPa，进行深层发酵培养；
5、取样检测：
(1)将取样瓶用75％酒精浸湿棉塞，然后用0.25％新洁尔灭溶液在处理一次，20min后两人配合取样，第一人手持火环点燃，第二人在火焰内从新洁尔灭瓶内拔出取样管，在火焰保护下放掉管内的残留菌液，第一人将火环套在待取样的瓶口上，用钳子拔掉棉塞，第二人将取样管插入瓶内打开取样阀放入适量液体菌种，第一人迅速用棉塞封住瓶口，火环移入下一瓶，取完后，把取样管口插入新洁尔灭瓶内，放回原处；
(2)将取样瓶转接到PDA培养基上检测；把空瓶内取出的样液在超净工作台内接入空白试管，放在30℃条件下培养24小时后没有任何异常现象及细菌污染即为合格。
实施例2
一种真姬菇液体菌种生产工艺，包括如下步骤：
1、试管种选取：选取菌丝以接种点为中心向周围均匀辐射生长，形态和长速均匀连贯，菌丝洁白，爬壁力强，菌丝洁白、粗壮，细胞生命力强的试管种；
2、平皿菌种培养：
(1)选购“寒天培地”真姬菇专用培养基，将培养基配料搅拌均匀，取1000ml去离子水，用电磁炉加热煮至沸腾，然后将准备好的配料倒入锅内，煮至微沸至完全溶解，即可分装到干净的500ml三角瓶中，用硅胶塞塞好，包好称量纸后和平皿一起放入灭菌锅中灭菌，在121℃灭菌20min；
(2)灭菌结束后，利用锅内余温烘干物品表面水汽。拿出三角瓶、平皿一起摆入超净工作台内灭菌30min；将三角瓶内培养基分装入平皿中，培养基高度在平皿高度的三分之一以上，重叠放置冷却凝固，待平皿凝固后，用封口膜密封，放入36℃的培养箱内烘干，24h后取出备用；
(3)接种前将超净工作台全面擦拭干净，把接种使用的工具及挑选合格的平皿培养基经75％的酒精消毒后一起放入工作台中，关闭照明灯及风机，打开工作台紫外灯消毒30min；关闭紫外灯，打开风机，5min后开启照明灯，用75％酒精对双手进行消毒，戴上已消毒好的一次性橡胶手套，将酒精棉、打火机、活化后的试管母种经75％的酒精消毒后放入工作台内待用；
(4)点燃酒精灯，灼烧试管口后拧松塞子，在转接平皿种时，将接种针用75％酒精棉全面擦拭后过火灼烧灭菌，刮去试管前端1cm处的薄弱菌丝及趴壁菌丝，选用前端及后端偏上一段的部分切割成3*3mm的小块，勾去一块接入一旁备用的平皿中，将试管塞塞好，放在一旁，依次操作，每只试管母种转接14个平皿；
(5)接种完成后，在转接的平皿上标好批次，放入筐中，用报纸遮好后放入生化培养箱中培养，生化培养箱温度为22℃，培养过程中及时将长势差、生长不均、杂菌感染等不合格的平皿种弃掉；
3、三角瓶液体菌种培养：
(1)配制三角瓶培养基，培养基配方为豆粉1％，蔗糖3％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.05％，余量为水；在121℃灭菌20min；当灭菌锅里的气压降为0时，打开灭菌锅盖，用余热把锅内物品烘干，拿出三角瓶，放在接种不锈钢平台上冷却备用，等待接种；
(2)接种前进行消毒，与平皿菌种培养的消毒过程相同，选取平皿菌种，将生长在前端菌丝分隔成大小均匀的正方形小块，长度为6mm，用接种铲削取薄薄的正方形小块，转接入摇瓶内，每瓶转接6个接种块；
(3)将已经接的摇瓶种用白色胶筐装好，搬到摇瓶培养室中，静置培养一天；将摇瓶放在磁力搅拌器进行培养，前7天转速调到600r/min，最后1天转速调为800r/min，培养温度控制在22℃；
4、发酵罐菌种培养：
(1)配制发酵罐培养基，培养基配方为豆粉1％，蔗糖3％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.1％，消泡剂0.15％，余量为水；将培养基装入发酵罐，装入量为罐体容积的75％；灭菌设定参数：110℃保持20min，115℃保持30min，123℃保持90min；待灭菌锅压力降为0.00Mpa时打开炉门，通水、通气进行冷却，至23℃即可接种；
(2)接种需要三人合作，一人协助递喷灯，75％酒精，三角瓶，防火手套，开关洁净空气进气；一人接种，一人开盖和关盖；接种完成后，用湿毛巾扑灭火焰，关闭排气阀，推出无菌罩，将接种好的发酵罐通入无菌空气，无菌空气在出菌丝前的通入量为发酵罐体积的40％；所述无菌空气在出菌丝后的通入量为发酵罐体积的70％；设定温度为20℃，罐压0.05MPa，进行深层发酵培养；
5、取样检测：
(1)将取样瓶用75％酒精浸湿棉塞，然后用0.25％新洁尔灭溶液在处理一次，20min后两人配合取样，第一人手持火环点燃，第二人在火焰内从新洁尔灭瓶内拔出取样管，在火焰保护下放掉管内的残留菌液，第一人将火环套在待取样的瓶口上，用钳子拔掉棉塞，第二人将取样管插入瓶内打开取样阀放入适量液体菌种，第一人迅速用棉塞封住瓶口，火环移入下一瓶，取完后，把取样管口插入新洁尔灭瓶内，放回原处；
(2)将取样瓶转接到PDA培养基上检测；把空瓶内取出的样液在超净工作台内接入空白试管，放在32℃条件下培养24小时后没有任何异常现象及细菌污染即为合格。
实施例3
一种真姬菇液体菌种生产工艺，包括如下步骤：
1、试管种选取：选取菌丝以接种点为中心向周围均匀辐射生长，形态和长速均匀连贯，菌丝洁白，爬壁力强，菌丝洁白、粗壮，细胞生命力强的试管种；
2、平皿菌种培养：
(1)选购“寒天培地”真姬菇专用培养基，将培养基配料搅拌均匀，取1000ml去离子水，用电磁炉加热煮至沸腾，然后将准备好的配料倒入锅内，煮至微沸至完全溶解，即可分装到干净的500ml三角瓶中，用硅胶塞塞好，包好称量纸后和平皿一起放入灭菌锅中灭菌，在125℃灭菌20min；
(2)灭菌结束后，利用锅内余温烘干物品表面水汽。拿出三角瓶、平皿一起摆入超净工作台内灭菌30min；将三角瓶内培养基分装入平皿中，培养基高度在平皿高度的三分之一以上，重叠放置冷却凝固，待平皿凝固后，用封口膜密封，放入36℃的培养箱内烘干，24h后取出备用；
(3)接种前将超净工作台全面擦拭干净，把接种使用的工具及挑选合格的平皿培养基经75％的酒精消毒后一起放入工作台中，关闭照明灯及风机，打开工作台紫外灯消毒30min；关闭紫外灯，打开风机，5min后开启照明灯，用75％酒精对双手进行消毒，戴上已消毒好的一次性橡胶手套，将酒精棉、打火机、活化后的试管母种经75％的酒精消毒后放入工作台内待用；
(4)点燃酒精灯，灼烧试管口后拧松塞子，在转接平皿种时，将接种针用75％酒精棉全面擦拭后过火灼烧灭菌，刮去试管前端1cm处的薄弱菌丝及趴壁菌丝，选用前端及后端偏上一段的部分切割成3*3mm的小块，勾去一块接入一旁备用的平皿中，将试管塞塞好，放在一旁，依次操作，每只试管母种转接14个平皿；
(5)接种完成后，在转接的平皿上标好批次，放入筐中，用报纸遮好后放入生化培养箱中培养，生化培养箱温度为23℃，培养过程中及时将长势差、生长不均、杂菌感染等不合格的平皿种弃掉；
3、三角瓶液体菌种培养：
(1)配制三角瓶培养基，培养基配方为豆粉1％，蔗糖3％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.05％，余量为水；在125℃灭菌20min；当灭菌锅里的气压降为0时，打开灭菌锅盖，用余热把锅内物品烘干，拿出三角瓶，放在接种不锈钢平台上冷却备用，等待接种；
(2)接种前进行消毒，与平皿菌种培养的消毒过程相同，选取平皿菌种，将生长在前端菌丝分隔成大小均匀的正方形小块，长度为6mm，用接种铲削取薄薄的正方形小块，转接入摇瓶内，每瓶转接6个接种块；
(3)将已经接的摇瓶种用白色胶筐装好，搬到摇瓶培养室中，静置培养一天；将摇瓶放在磁力搅拌器进行培养，前7天转速调到600r/min，最后1天转速调为800r/min，培养温度控制在23℃；
4、发酵罐菌种培养：
(1)配制发酵罐培养基，培养基配方为豆粉1％，蔗糖3％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.1％，消泡剂0.15％，余量为水；将培养基装入发酵罐，装入量为罐体容积的80％；灭菌设定参数：110℃保持20min，115℃保持30min，123℃保持90min；待灭菌锅压力降为0.00Mpa时打开炉门，通水、通气进行冷却，至25℃即可接种；
(2)接种需要三人合作，一人协助递喷灯，75％酒精，三角瓶，防火手套，开关洁净空气进气；一人接种，一人开盖和关盖；接种完成后，用湿毛巾扑灭火焰，关闭排气阀，推出无菌罩，将接种好的发酵罐通入无菌空气，无菌空气在出菌丝前的通入量为发酵罐体积的50％；所述无菌空气在出菌丝后的通入量为发酵罐体积的80％；设定温度为24℃，罐压0.03MPa，进行深层发酵培养；
5、取样检测：
(1)将取样瓶用75％酒精浸湿棉塞，然后用0.25％新洁尔灭溶液在处理一次，20min后两人配合取样，第一人手持火环点燃，第二人在火焰内从新洁尔灭瓶内拔出取样管，在火焰保护下放掉管内的残留菌液，第一人将火环套在待取样的瓶口上，用钳子拔掉棉塞，第二人将取样管插入瓶内打开取样阀放入适量液体菌种，第一人迅速用棉塞封住瓶口，火环移入下一瓶，取完后，把取样管口插入新洁尔灭瓶内，放回原处；
(2)将取样瓶转接到PDA培养基上检测；把空瓶内取出的样液在超净工作台内接入空白试管，放在30-33℃条件下培养24小时后没有任何异常现象及细菌污染即为合格。
以上为本发明较佳实施例，只适用于帮助理解本发明实施例的原理；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本实施例，在具体实施方式以及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。
Claims (9)
1.一种真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：包括如下步骤：
(1)平皿菌种培养：将培养基装入干净的三角瓶中，用硅胶塞塞好，包好称量后与平皿一起放入灭菌锅中灭菌；当灭菌结束后，拿出三角瓶、平皿一起摆入超净工作台内灭菌；将三角瓶内培养基分装入平皿中，封口密封，烘干后待用；挑选优质的试管种，用接种针刮去试管前端1cm处的薄弱菌丝及趴壁菌丝，选用前端及后端偏上一段的部分切割成3*3mm大小均匀的小块，勾去一块接入备用的平皿中，接种完成后放入生化培养箱中培养得到平皿菌种；
(2)三角瓶液体菌种培养：配制三角瓶培养基，灭菌冷却，选取步骤(1)得到的平皿菌种，将生长在前端菌丝分隔成大小均匀的正方形小块，用接种铲削取薄薄的正方形小块，转接入摇瓶内，将接种好的摇瓶放培养室中进行动态培养，得到三角瓶液体菌种；
(3)发酵罐菌种培养：配制发酵罐培养基，灭菌冷却，挑选步骤(2)得到的三角瓶液体菌种进行接种，将接种好的发酵罐通入无菌空气，设定温度为20～24℃，罐压0.03～0.05MPa，进行深层发酵培养；
(4)取样检测：灭菌后立刻取样，取到空瓶内后转接到PDA培养基上进行检测，30～33℃条件下培养24小时后没有任何异常现象即为合格真姬菇液体菌种。
2.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(1)所述灭菌锅灭菌为120～123℃灭菌20～40min。
3.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(1)所述生化培养箱温度为22～23℃。
4.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(2)所述三角瓶培养基包括如下重量比百分比的原料：豆粉1％，蔗糖3％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.05％，余量为水。
5.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(2)所述动态培养条件为：前7天转速调到600r/min，最后1天转速调为800r/min，培养温度为22～23℃。
6.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(3)所述发酵罐培养基包括如下重量比百分比的原料：豆粉1％，蔗糖3％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.1％，消泡剂0.15％，余量为水。
7.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(3)所述灭菌为110℃保持20min，115℃保持30min，123℃保持90min。
8.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(3)所述无菌空气在出菌丝前的通入量为发酵罐体积的30-50％；所述无菌空气在出菌丝后的通入量为发酵罐体积的50-80％。
9.根据权利要求1所述的真姬菇液体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(4)所述取样工艺流程包括如下步骤：将取样瓶用75％酒精浸湿棉塞，然后用0.25％新洁尔灭溶液在处理一次，20min后两人配合取样，第一人手持火环点燃，第二人在火焰内从新洁尔灭瓶内拔出取样管，在火焰保护下放掉管内的残留菌液，第一人将火环套在待取样的瓶口上，用钳子拔掉棉塞，第二人将取样管插入瓶内打开取样阀放入适量液体菌种，第一人迅速用棉塞封住瓶口，火环移入下一瓶，取完后，把取样管口插入新洁尔灭瓶内，放回原处。
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2019
- 2019-10-10 CN CN201910956601.2A patent/CN110521500A/zh active Pending
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