CN111480516A - 一种真姬菇固体菌种生产工艺 - Google Patents

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熊艳
张建樟
陈利娟
滕磊
刘琦
李迁
卞玲芝
刘巧荣
蒋来松
毕欣
李云
余养朝
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Abstract

一种真姬菇固体菌种生产工艺，包括如下步骤：(1)平皿菌种培养：挑选优质的试管种接种到平皿中，接种后放入培养箱中培养得到平皿菌种；(2)P1三角瓶菌种培养：配制P1三角瓶培养基，选取平皿菌种接种到P1三角瓶中进行生化培养得到P1三角瓶菌种；(3)P2三角瓶菌种培养：配制P2三角瓶培养基，挑选P1三角瓶菌种进行接种后培养得到P2三角瓶菌种；(4)P1塑料瓶菌种培养：配制P1塑料瓶培养基，挑选P2三角瓶菌种进行接种后培养得到P1塑料瓶菌种；(5)P2塑料瓶菌种培养:配制P2塑料瓶培养基，挑选P1塑料瓶菌种进行接种后培养得到P2塑料瓶菌种，通过工艺优化，使菌种传代过程中因木屑沾染造成的污染降低，保证菌种质量稳定，提高空间周转率。

Description

一种真姬菇固体菌种生产工艺
技术领域
本发明属于生物菌种栽培技术领域，涉及一种真姬菇固体菌种生产工艺。
背景技术
真姬菇是一种优良的食用菌，它以菌盖滑嫩、柄脆、营养丰富、味美适口而著称于世。姬菇的蛋白质中氨基酸种类齐全，含量非常丰富，尤其是赖氨酸、精氨酸的含量特别高。真姬菇干品中含蛋白质8.87％，碳水化合物60.2％，粗纤维达74％，是一种低热量、低脂肪的保健食品，其味鲜美、性平、甘温，有利尿渗湿，健脾止渴之功能，清热平肝之效，经常食可提高免疫力、预防衰老、延长寿命。
真姬菇的生产菌种包括固体菌种和液体菌种，现有的固体菌种在生产时传代过程中使用木屑培养基传代，木屑培养基转接过程中容易感染霉菌，菌种质量受木屑质量影响较大且不容易观察，菌丝蔓延周期长。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的上述问题，提供一种真姬菇固体菌种生产工艺，目的在于：加快菌丝的萌发速度，提高出菇品质与产量；
本发明的技术方案包括如下：
(1)平皿菌种培养：将已配好培养基分装入三角瓶中，塞上硅胶塞，用铝箔纸包好待灭菌；灭菌后冷却至55-65℃范围内，在超净工作台中，将三角瓶培养基装入平皿中，待凝固后封口密封好，放于22℃培养箱中培养72h；挑选优质的试管种，用接种针刮去试管近口端菌丝，取2mm*2mm*1mm大小的接种块转接于平皿正中央，接种完成后放入22±0.5℃的生化培养箱中培养14天得到平皿菌种；
(2)P1三角瓶菌种培养：配制三角瓶培养基，将已配好的培养基趁热分装入三角瓶中，塞上硅胶塞，用牛皮纸包好灭菌；将灭菌后冷却至55-65℃范围内的三角瓶培养基放于保温箱中用纱布盖好缓慢降温；冷却至20-23℃后，放于22℃培养箱中培养72h；用接种针刮去平皿菌种菌丝末端刮掉气生菌丝，取2mm*2mm*1mm接种块转接于P1三角瓶菌种正中央，接种完成后放入温度为22±0.5℃的生化培养箱中培养15天得到P1三角瓶菌种；
(3)P2三角瓶菌种培养：配制P2三角瓶培养基并且该培养基设有中心孔，挑选步骤(2)得到的P1三角瓶菌种进行接种，P1三角瓶菌种去除接种点周围1cm不用，均匀切块边长2cm的三角形厚度为1cm的接种块放置于P2三角瓶培养基的中心孔处，接种完成后，瓶间设定温度为22-24℃，湿度为60-65％，二氧化碳≤3000ppm条件下培养35天使用；
(4)P1塑料瓶菌种培养：配制P1塑料瓶培养基，该培养基设有中心孔，挑选步骤(3)得到的P2三角瓶菌种进行接种，P2三角瓶菌种去除表面老菌皮不用，用接种针把三角瓶菌种打碎，打碎后菌种接入P1塑料瓶菌种中心孔内，料面覆盖完全，接种比例1:8，接种完成后，设定温度为22-24℃条件下培养40-45天使用；
(5)P2塑料瓶菌种培养:配制P2塑料瓶培养基，该培养基设有中心孔，挑选步骤(4)得到的P1塑料瓶菌种进行接种，P1塑料瓶菌种去除表面老菌皮不用，接种针把塑料瓶菌种打碎，打碎后菌种接入P2塑料瓶菌种中心孔内，料面覆盖完全，接种比例1:19，接种完成后，设定温度为22-24℃条件下培养40-45天使用。
优选的，步骤(1)的灭菌工具为灭菌锅，灭菌为121℃灭菌30分钟。
优选的，步骤(2)的灭菌条件为121℃灭菌30分钟。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
通过工艺优化，用PDA培养基取代菌种传代过程中部分木屑培养基，使菌种传代过程中因木屑沾染造成的污染降低。
具体实施方式
以下结合技术方案详细叙述本发明的具体实施方式。
一种真姬菇固体菌种生产工艺，包括如下步骤：
1、试管种选取：选取菌丝以接种点为中心向周围均匀辐射生长，形态和长速均匀连贯，菌丝洁白，爬壁力强，菌丝洁白、粗壮，细胞生命力强的试管种；
2、平皿菌种培养：
(1).选取“寒天培地”真姬菇专用培养基39g加琼脂粉7g，将培养基配料搅拌均匀，加入1L蒸馏水充分搅拌，保证PH值6-8，用电磁炉加热煮至沸腾，将已配好培养基分装入300m1三角瓶，每瓶装250m1的液体培养基，塞上硅胶塞，用铝箔纸包好后放入灭菌锅中灭菌，在121℃灭菌30min；
(2).灭菌后冷却至60℃左右的三角瓶培养基，在超净工作台中倒平皿(90mm*15mm)，每皿20±1ml培养基，凝固后用封口膜封好放于22℃培养箱中培养72h，观察无异常方可用于接种；
(3).用接种针刮去试管近口端刮掉气生菌丝，取2mm(长)*2mm(宽)*1mm(厚)接种块转接于平皿正中央，接种完成后放入22±0.5℃的生化培养箱中培养14天得到平皿菌种。
3、P1三角瓶菌种培养：
(1).选取“寒天培地”真姬菇专用培养基39g加琼脂粉7g，将培养基配料搅拌均匀，加入1L蒸馏水充分搅拌，保证PH值6-8，用电磁炉加热煮至沸腾，将已配好的培养基用量筒趁热分装入500ml三角瓶中，每瓶分装60ml，塞上硅胶塞，用铝箔纸包好后放入灭菌锅中灭菌，在121℃灭菌30min；
(2).灭菌后冷却至60℃左右的三角瓶培养基，放于保温箱中用纱布盖好缓慢降温，防止出锅后急速降温产生过多冷凝水，冷却至22℃左右放于22℃培养箱中培养72h，观察无异常方可用于接种；
(3).用接种针刮去平皿菌种菌丝末端刮掉气生菌丝，取2mm(长)*2mm(宽)*1mm(厚)接种块转接于P1三角瓶菌种正中央，接种完成后放入温度为22±0.5℃的生化培养箱中培养15天得到P1三角瓶菌种。
4、P2三角瓶菌种培养：
(1).配置P2三角瓶，配制P2三角瓶培养基并且该培养基设有中心孔，湿料净重240g/瓶，压平至400ml(500ml三角瓶)；
(2).挑选得到的P1三角瓶菌种进行接种，P1三角瓶菌种去除接种点周围1cm不用，均匀切块边长2cm的三角形厚度为1cm的接种块放置于P2三角瓶培养基的中心孔处，瓶间设定温度为22-24℃，湿度为60-65％，二氧化碳≤3000ppm条件下培养35天使用。
5、P1塑料瓶菌种培养：
(1).配制P1塑料瓶培养基；
(2).挑选得到的P2三角瓶菌种进行接种，P2三角瓶菌种去除表面老菌皮不用，用接种针把三角瓶菌种打碎，打碎后菌种接入P1塑料瓶菌种中心孔内，料面覆盖完全，接种比例1:8；
(3).接种完成后，设定温度为22-24℃条件下培养40-45天使用。
6、P2塑料瓶菌种培养：
(1).配制P2塑料瓶培养基；
(2).挑选得到的P1塑料瓶菌种进行接种，P1塑料瓶菌种去除表面老菌皮不用，接种针把塑料瓶菌种打碎，打碎后菌种接入P2塑料瓶菌种中心孔内，料面覆盖完全，接种比例1:19；
(3).接种完成后，设定温度为22-24℃条件下培养40-45天使用。
通过工艺优化，用PDA培养基取代菌种传代过程中部分木屑培养基，使菌种传代过程中因木屑沾染造成的污染降低，提高了真姬菇的整体长势，同时便于保藏。
经过统计，采用本工艺能做到把菌种生产周期从199天缩短至180天，缩短生长周期而且保证菌种质量稳定，进一步节约菌种培养区域空间，提高空间周转率。
为了公开本发明的目的而在本文中选用的实施例，当前认为是适宜的，但是，应了解的是，本发明旨在包括一切属于本构思和发明范围内的实施例的所有变化和改进。

Claims (3)

1.一种真姬菇固体菌种生产工艺，其特征在于：包括如下步骤：
(1)平皿菌种培养：将已配好培养基分装入三角瓶中，塞上硅胶塞，用铝箔纸包好待灭菌；灭菌后冷却至55-65℃范围内，在超净工作台中，将三角瓶培养基装入平皿中，待凝固后封口密封好，放于22℃培养箱中培养72h；挑选优质的试管种，用接种针刮去试管近口端菌丝，取2mm*2mm*1mm大小的接种块转接于平皿正中央，接种完成后放入22±0.5℃的生化培养箱中培养14天得到平皿菌种；
(2)P1三角瓶菌种培养：配制三角瓶培养基，将已配好的培养基趁热分装入三角瓶中，塞上硅胶塞，用牛皮纸包好灭菌；将灭菌后冷却至55-65℃范围内的三角瓶培养基放于保温箱中用纱布盖好缓慢降温；冷却至20-23℃后，放于22℃培养箱中培养72h；用接种针刮去平皿菌种菌丝末端刮掉气生菌丝，取2mm*2mm*1mm接种块转接于P1三角瓶菌种正中央，接种完成后放入温度为22±0.5℃的生化培养箱中培养15天得到P1三角瓶菌种；
(3)P2三角瓶菌种培养：配制P2三角瓶培养基并且该培养基设有中心孔，挑选步骤(2)得到的P1三角瓶菌种进行接种，P1三角瓶菌种去除接种点周围1cm不用，均匀切块边长2cm的三角形厚度为1cm的接种块放置于P2三角瓶培养基的中心孔处，接种完成后，瓶间设定温度为22-24℃，湿度为60-65％，二氧化碳≤3000ppm条件下培养35天使用；
(4)P1塑料瓶菌种培养：配制P1塑料瓶培养基且该培养基设有中心孔，挑选步骤(3)得到的P2三角瓶菌种进行接种，P2三角瓶菌种去除表面老菌皮不用，用接种针把三角瓶菌种打碎，打碎后菌种接入P1塑料瓶菌种中心孔内，料面覆盖完全，接种比例1:8，接种完成后，设定温度为22-24℃条件下培养40-45天使用；
(5)P2塑料瓶菌种培养:配制P2塑料瓶培养基且该培养基设有中心孔，挑选步骤(4)得到的P1塑料瓶菌种进行接种，P1塑料瓶菌种去除表面老菌皮不用，接种针把塑料瓶菌种打碎，打碎后菌种接入P2塑料瓶菌种中心孔内，料面覆盖完全，接种比例1:19，接种完成后，设定温度为22-24℃条件下培养40-45天使用。
2.根据权利要求1所述的一种真姬菇固体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(1)的灭菌工具为灭菌锅，灭菌为121℃灭菌30分钟。
3.根据权利要求1所述的一种真姬菇固体菌种生产工艺，其特征在于：步骤(2)的灭菌条件为121℃灭菌30分钟。
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