SU1743356A3 - Способ получени производных трипептидов или их фармацевтически приемлемых солей - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к пептидам, в частности к получению производных три- пептидов общей ф-лы Ri-W-CO-NH- ЦСНДОНа CO-NH-CH(COOH)-(CH2)2-CO-R3, где Ri-C4-Ce - циклоалкильна  группа, группа циклогексил - низший алкил, фенильна  группа, необ зательно замещенна  заместителем , группа фенил - низший С1-С2-ал- кил, где бензольное кольцо необ зательно замещено заместителем мдроксизамеИзобретение относитс  к способу получени  производных трипептидов или их фармацевтически приемлемых солей - новых биологически активных соединений, которые могут найти применение в медицине . Цель изобретени  - получение новых производных пептидов -- малотоксичных соединений , обладающих более высокой про- тивогипертонической активностью. щенна  нафтильна  группа, группа нафтил - низший алкил, пиридильна  группа, необ зательно замещенна  заместителем, пир- ролидинильна  группа, 2-тиенильна  группа, 3-хинолильна  группа, 2-индолиль- на  группа, тианафтен-2-ильна  группа, хи- ноксалин-2-ильна группа, изохинолин-2-ильна  группа, 2-пиразиниль- на  группа, группа пириди  - низший алкил или группа имидазолилвинил, W-одинарна  св зь, -О- или -NH-, при соответствующих значени х Ra, или их фармацевтически приемлемых солей,которые обладают противо- гипертонической активностью. Цель - разработка способа получени  более активных соединений. Получение ведут реакцией соединени  общей ф-лы Ri-W-COOH, где RI имеет указанные значени  или его реакционно способного производного по карбоксильной группе с соединением ф-лы H2N-CH-(CH2)4-NH-Ri -CO-NH-CH(COOR21)- -(CH2)2-CO-Rs, где R2 , RA - Н или группа, защищающа  аминогруппу или с его кислотно-аддитивной солью и при необходимости удал ют защитную гоуппу и целевой продукт выдел ют в свободном виде или в виде соли 1 табл Пример 1.1 {N (4-имидазолил)- пропеноил -1-лизил-гамма- D-глутамил} ин- долин-2(5)-карбоноза  кислота. Формиат аммони  (0,56 г) и 0,4 г 10%- ного паллади  на угле добавл ют к этаноль- ному раствору 2,1 г этил 1-(N -бензилоксикарСонил-N -тоет-бутокс - икарбонил- -лизил-0 - этил-гамма-0-глута- мил) индолин-2(5)-карбоксилата и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Катализатор удасо С -ч Јь CJ OJ ел о со

Description

л ют фильтрацией и маточную жидкость концентрируют при пониженном давлении. К остатку добавл ют этил ацетат и полученную смесь промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натри  и насыщен- ным водным раствором хлористого натри  и .затем сушат над безводным сульфатом натри  с образованием 1,7 г этил 1-(N -грет- бутоксикарбонил-1 -лизил-01- этил-га мма- D-глутамил) индолин-2(5)-карбоксилата (т.пл 114-117°С). К раствору 1,4 г полученного продукта и 0,4 г урокановой кислоты в системе диметилформамид (ДМФ) - метилен хлорид добавл ют 1,17 г водорастворимого карбодиимид гидрохлорида и полученную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Растворитель упаривают при пониженном давлении . Остаток перекристаллизовывают из насыщенного водного раствора бикарбона- та натри , фильтруют. Кристаллы промывают водой, повторно осаждают из смеси эфир : этанол. Получают 1.4 г порошкообразного продукта Чист т колоночной хроматографией на силикагеле. Элюируют смесью метанол : хлороформ 1:9. получают 1,0 г порошкообразного продукта. Аликвоту (0,9 г) полученного порошка раствор ют в 20 мл диоксана, добавл ют 3.8 мл 1н. рас- твор.ч NaOH. Полученную смесь перемеши- вают при комнатной температуре в течение 3 ч, нейтрализуют водным раствором кислого сульфата кали , концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток раствор ют в воде. рН раствора устанавли- вают равным 5 с помощью водного раствора кислого сульфата кали  подвергают хрома- тографической очистке на колонне СНР 20 Р (градиент ацетонитрил - вода 0% - 60%) с образованием 0.65 г порошка. Аликвоту (0,55 г) порошка оставл ют в 20 мл трифто- руксусной кислоты на 30 мин при охлаждении льдом, затем трифторуксусную кислоту упаривают при понижненном давлении, при комнатной температуре. Остаток подверга- ют хроматографической очистке на колонке с СНР 20 Р (градиент ацетонитрил - зода ), полученные фракции концентрируют Остаток лиофилизируют Получают 0,33 i целевого продукта.

- 43,5° (1 н. раствор NaOH)

Вычислено, %: С 52.52. Н 6,44, N 14 13

С2бНз2№07-ЗН20

Найдено, %: С 52,38: Н 6,50; N 14,14.

Пример 2. (2S, 3aS, 7а5)-1-(М2-нико- тиноил- -лизил -гамма-0-глутамил)октагид- ро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

К смеси 20 мл ТГФ и 3 мл воды добавл ют 4.42 г N -бензил-оксикарбонил-N -третбутоксикарбонил- -лизин N-гидрооксисук- цинимидового эфира, 2,89 г (2S, 3aS, 7а5)-1-(гамма-0-глутамил) октагидро-1 Н-ин- дол-2-карбоновой кислоты и 2,6 мл триэти- ламина и полученную смесь перемешивают в течение 5 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток смешивают с водным насыщенным раствором хлористого натри  и промывают эгилацетатом. Водный слой подкисл ют 1 %-ной лимонной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают насыщенным раствором хлорида нагри , сушат над безводным сульфатом натри  и концентрируют досуха при пониженном давлении с образованием 5,19 г остатка. Остаток очищают методом колонной хроматографии (колонка с СНР20Р; градиент ацетонитрил - вода 0% - 60%). Полученные в результате фракции концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток раствор ют в системе ди- оксан - вода лиофил зируют с образованием4 ,7г(2S,3aS, 7а5)-1-(Ы6-бензолоксикарбонил-Ы2-трет-бу токсикрабонил -L-лизил-гамма-О-глутамил) октагидро-1 Н- ндол-2- карбоновой кислоты. Аликвоту (2,27 .) продукта раствор ют в 50 мл трифторуксусной кислоты и выстаивают в течение 15 мин при охлаждении системы льдом,после чего провод т концентрирование досуха при пониженном давлении. Остаток раствор ют в воде, устанавливают рН равным 4 и подвергают хроматографической очистке на колонке с СНР 20 Р (градиент ацетонитрил - вода 0% ), Желаемые фракции концентрируют при пониженном давлении с образованием 1,15 г (2S, 3aS, 7аЗ)-1-(Ы6-бензилоксикарбонил-1 - лизил-гамма-0-глутамил)октагидро-1Н-ин дол-2-карбоновой кислоты в виде стеклообразного вещестоа. Аликвоту (1,0 г) такого стеклообразного вещэства раствор ют в смеси Ч,1М диметилфоэмамида и тетрагид- рофурана и добавл ют 0,5 мл триэтиламина и 0.39 г (никотиноилокси)сукцинимида. после чего полученную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре . В реакционную смесь добавл ют разбавленную хлористоводородную кислоту и полученную смесь экстрагируют этилацетатом . Экстракт сушат над безводным сульфатом натри  и концентрируют досуха при понижением давлении. Полученное в результате стеклообразное вещество раствор ют в 25 мл этанолэ и в систему добавл ют 0,6 г формиата аммони  и 0,3 г 10%-ного паллади  на угле. Смесь перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре . Катализатор удал ют фильтрацией и маточную жидкость концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографической очистке на колонке с СНР20Р (градиент ацетонитрил - вода 0% ). Желаемые фракции концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток лиофилизируют с получением 0,5 г целевого соединени .

- 27,2° (Н20).

Вычислено, %: С 54,58; Н 7,31; N 12,24.

С2бНз №07 2,25 Н20

Найдено, %: С 54,62; Н 7,25: N 12,20.

Следующие вещества (примеры 3-9) синтезируют таким же образом, как и в примере 2.

Пример 3. 1-(N -циклогексилметок- сикзрбонил- -лизил- гамма-О-глутамил) ин- долин-2(3)-крабонова  кислота.

Выход 0,34 г (46%). Исходные соединени ; 1 (N -бензилоксикарбонил-Ьлизил- гамма-0-глутамил)октагидро- 1Н-индол-2(5)-карбонова  кислота (соединение I) и М-(циклогексилметоксикарбони- локси) сукцинимид. Т.пл. 186-191°С

-84,4° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено. %: С 57,23: Н 7,38: N 9.53.

С28Н40М/|08 1.5Н20

Найдено, %: С 57.33; Н 7.67: N 9,64.

Пример 4. 1-(0 пролил-1 -лизил-гам- ма-О-глутамил) индолин-2(5)-крабонова  кислота. Т.пл. 209-216°С (разлагаетс ).

-66,3° (1 и. раствор NaOH).

Выход 0,2.0 г (23%). Исходные соединени : соединение I и (0-промилокси)сукци- нимид.

Вычислено, %: С 51.71: Н 7.29; N 12,06.

C23H35N507 3,5H20

Найдено, %: С 51.58: Н 7.40: N 12,08.

Пример 5. (2S. 3aS. 7аЗ)-1-(№-цикло- бутан карбон и л-L- лизил-гамма-О-глута- мил)октагидро-1 Н-индол-2-карбо нова  кислота.

Выход 0.51 г (67%). Исходные соединени  (2S, 3aS, 7а8)-1-(М6-бензилоксикарбо- нил-1 -лизил-гамма-0-глутамил)октагидро- 1 Н-индол-2-карбонова  кислота (соединение II) и М-(циклобутанкарбонилокси)сукци- нимид.

№23 -46,8° (1 н, раствор NaOH).

Вычислено, %: С 55,11; Н 8,18; N 9,89.

C25H4oN5Ov 2H20 0.25 GiHsOa.

Найдено, %: С 55.16: Н 7.98; N 9.78.

Пример 6. (2S. 3aS. 7aS)(nnpn- дин-2-карбонил) лизил-гамма-0-глута- мил октагидро-|Н-индол-2-кар6инОс5а  кислота.

Выход 0,35 г (23%). Исходные соединени : соединение II и М-(пиридин-2-карбони- локси)сукцинимид.

-19,2° (в воде). Вычислено, %: С 55,45; Н 7,25; N 12,44.

C26H37N50 1.75Н20

Найдено, %: С 55,74; Н 7,05; N 12,42.

Пример 7. (2S, 3aS, (4-Me- токсибензоил) лизил-гамма-0-глута- мил октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

Выход 0,05 г (3,5%). Исходные соединени : соединение I и М-(4-метоксибензои- локси)сукцинимид. -15.2°(вводе).

Вычислено, %: С 53,92; Н 7,60; N 8,98.

C28H4oN40a-3,5 Н20

Найдено, %: С 53,77; Н 7,33; N 9,13.

Примерз. (2S, 3aS, 7а5)-1-(М6-бензил- карбамоил)-,- лизил-гамма-0-глутамил)ок- тагидро-1 Н-индол-2-крабсжова  кислота.

В 5 мл пиридина раствор ют 0,56 г (2S, 3aS, 7aS)-1-(N -бензилоксикарбонил-и-ли- зил-гамма-0-глутамил) октагидро-1 Н-ин- дол-2-карбоновой кислоты и 0,14 г бензилизоцианата. Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Добавл ют раствор бикарбонат натри  и смесь промывают этилацетатом. Водный раствор подкисл ют 10%-ной лимонной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают рассолом, сушат и концентрируют досуха при пониженном давлении, получа  0,66 г по- рошка. Полученный ПОРОШОК (0,65 г) раствор ют в 15 мл метанола и добавл ют 0,3 г формиата аммони  и 0,1 г катализатора - 10%-ного паллади  на угле. Смесь перемешивают при 60е С в течение 40 мин. Катали- затор удал ют и растворитель выпаривают. Остаток очищают на хроматографической колонке СНР20Р (градиент от 0 до 50% ацетонитрил - вода). Фракции, содержащие целевой продукт, концентрируют досуха при пониженном давлении и остаток подвергают лиофильной сушке, получа  0.109 г (выход 20%) указанного соединени .

-32.D° (1 н. раствор NaOH). Вычислено. %: С 55,46; Н 7.61; N 11,76.

C28H41N507-2H20

Найдено, % С56,о9; Н 7,32; N 11,41.

Следующие соединени  (примеры 9 и 10) синтезируют таким же образом, как и в примере 8.

Пример 9. (2S, 3aS, 7аЗ)-1- 6-цикло- гексилкарбамоил-L- лизил-гамма-0-глута- мил)октагидро-1 Н-индо/л-2-карбонова  кислота.

Выход 0,46 г (43%). Исходные соединени : соединение II и циклогексилзоциа- нат.

«Ь29 -31,1°(1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 56,41; Н 8,37; N 11,75.

С27Н45№07.1,25 Н20-0,25 С.4Н802

Найдено. %; 056,23; Н 8,07; N 11,67.

Пример 10. (25. За5. 7а5)-1-(М2-фе- нилкарбамоил- -лизил -гамма-О-глута- мил)октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

Выход 0,65 г (64%). Исходные соединени : соединение II и фенилизоцианат.

«Ь -42° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 56,63; Н 7.39; N 12,23.

C27H39N507-1,5H20

Найдено, %: С 56,80; Н 7,23; N 12,03.

Пример 11. (25. 3aS 7aS)-1-(N2- бензоил-1 -лизил-гамма-D- глутамил)- локтагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

Карбонат натри  (2 0 г) раствор ют в 10 мл воды и добавл ют 4 83 г (25, 3aS. 7а5)-1-(гамма-0-глутамил) октагидро-1 Н-ин- дол-2-карбоновой кислоты. После образова- ни  раствора добавл ют 40 мл тетрагидрофурана. При интенсивном перемешивании постепенно добавл ют 7,46 г №-бензилоксикарбонил-М -трет-бутоксик- арбонил-1.-лизин-№ -i идроксисукцинимид- ного сложного эфира. Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре Реакционную смесь концентрируют до половины объема, подкисл ют 10%-ной лимонной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Органический-слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натри , сушат над безводным сульфатом натри  и концентрируют досуха при пониженном давлении. Получают 9.17 г (2S, 3aS, 7aS)-1-(N -бензилоксикарбонил-N6- трет-бу- токсикарбонил-1 -лизил-гамма-0-глутамил) октагидро-1 Н-индол-2-карбоновой кислоты .

ликвоту (6,2 г) полученной карбоновой кислоты раствор ют в 60 мл этанола и до- бавг ют 1,0 г катализатора 10%-ного паллади  на угле. При перемешивании малыми част ми добавл ют 2.5 гформиата аммони . Смесь перемешивают в течение 4 ч. Катализатор удал ют фильтрацией. Маточный раствор концентрируют досуха и к остатку добавл ютэтилацетат. Образовавшийс  порошок собирают посредством фильтрации, получа  3,9 г (25, 3aS. 7а5)-1-(Ы6-трет-буток- сикарбонил- -лизил-гамма-О-глутамил) ок- тагидро-1Н-индол-2-карбоновой кислоты.

Аликвоту полученной карбоновой кислоты (1,0 г) раствор ют в 7,0 мл воды и добавл ют 0,55 г бикарбоната натри  и 12 мл тетрагидрофурана. При тщательном пере- мешивании добавл ют 0,46 г М-бензоилок- сисукцинимида и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрируют до половины объема, подкисл ют 10%-ной ли- монной кислотой и экстрагируют хлористым метиленом. Органический слой промывают водой, сушат над безводным сульфатом натри  и концентрируют досуха при пониженном давлении.

К остатку добавл ют 20 мл трифторук- сусной кислоты при охлаждении льдом и смесь перемешивают в течение 15 мин. Трифторуксусную кислоту выпаривают при пониженном давлении. Остаток раздел ют хроматографически на колонке СНР20Р, использу  ацетонитрил и воду (градиент от О до 50%). Фракции, содержащие целевой продукт, концентрируют досуха при пони- женном давлении. Остаток подвергают лио- фильной сушке, получа  0,50 г (46%) вещества, указанного в заготовке.

«Ь25-23,1°(вводе).

Вычислено, %: С 56,78; Н 7,50; N 9,81 С27НзвМ407 2,25 Н20

Найдено, %: С 56,91; Н 7,29; N 10,03.

Следующие вещества (примеры 12-31) синтезируют таким же образом, как и в примере 11.

П р и м е р 12. (4-метоксифенилэтокси карбон и л)Ч- лизил-гамма-0-глута- мил индолин-2(5)-карбонова  кислота.

Выход 0,26 г (31 %). Исходные соединени , соединение I и М-(4-метоксифенэтилок- сикарбонилокси)сукцинимид.

Вычислено, %: С 58,83; Н 6.39; N 9,10.

C3oN37N40g - Н20

Найдено, °/,: С 58/3; Н 6,43; N 9,14.

Пример 13. (25, За5, 7а5)-1-(1 2-изо- никотиноил-1 -лизил- гамма-0-глутамил)ок- тагидро-1 Н-индол-2-каобонова  кислота

Выход 0,29 г (47%) Исходные соединени : соединение II и М-(изоникотиноилок- си)сукцинимид. -29,8° (в воде).

Вычислено. %: С 54,16; Н 7,34; N 12.15.

С2бНз7№07 2,5Н20

Найдено, %: С 54,25; Н 7.06; N 12.23.

Пример 14. (25 За5, 7а5)-1-(М2-цик- лопентилоксикар5он 1л-Ь-лизил-гамма-0-гл утамил)октагидро-1 Н-/шдол-2-карбонова  кислота.

«Ь25 -37.1°(вводе).

Выход 0,42 г (39%). Исходный соединени : соединение II и М-(циклопентилокси- карбонилокси)сукцинимид.

Вычислено, %: С 55,21: Н 8,02; N 9.90.

C26H42N408-1.5 Н20

Найдено, %: С 55,05; Н 7,77; N 10.05.

Пример 15. (2S, 3aS, 7aS)-1-(N -цик- логексилоксикарбонил -L-лизил-гамма-О- глутамил)октагидро-1Н-индол-2-карбонов а  кислота.

-31,9°(вводе).

Вычислено, %: 055,51: Н 8,20; N 9,59.

C27H44N408 1,75H20

Найдено, %: С 55,53; Н 8,42: N 9,55.

Выход 0,50 г (56%). Исходные соединени : соединение II и М-(циклогексилокси- карбонилокси)сукцинимид.

Пример 16. (2S. 3aS, 7а5)-1-(1М2-цик- лобутилоксикарбонил -1 -лизил-гамма-0- глутамил)октагидро-1 Н-индол-2-карбоно- ва  кислота.

Выход 0,69 г (56%). Исходные соединени : соединение II и М-(циклобутилоксикэр- бонилокси)сукцинимид.

-40,7° (в воде).

Вычислено, %: С 53.56: Н 7.91: N 9.99.

C25H40N408 2H20

Найдено, %: С 53,57; Н 7,60; N 9,93.

Пример 17.1-(N -циклобутилоксикар- бонил-Ь-лизил-гамма-О- глутамил)-индолин- 2(5)-карбонова  кислота.

Выход 0,50 г (63%). Исходные соединени : соединение I и 1)-(циклобутилоксикра- бонилокси)сукцинимид. Т.пл. 197-204°С.

Г.«Ь27 -84,0° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 54,49: Н 7.12: N 9,78.

С25Н341 1/-08 1.75 НаО

Найдено, %: С 54,67: Н 7.40: N 9,53.

Пример 18.1-(Г Г-циклогексилэтокси- карбонил- -лизил-гамма- D-глутамил) индо- лин-2-(5)-карбонова  кислота.

Выход 0,51 г (62%). Исходные соединени : соединение I и М-(циклогексилэтокси- карбонилокси)сукцинимид.Т.пл.

192-195°С.

-78,8° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено. %. С 57.89: Н 7.54: N9.31.

C29H42N408-1.5H20

Найдено, %: С 57. 7.74: N 9,36.

Пример 19. 1-(-никотиноил-1 -ли- зил-гэмма-О-глутамил) индолин-2-(5)-карбо- нова  кислота.

Б)Ыход 0,58 г (70%). Исходные соединени : соединение I и 1Ч-(никотиноилокси)сук- цинимид. Т.пл. 218-222°С.

-66,5° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено. %: С 55,16 Н 6.32: N 12.37.

С2бНз1№07 2.25Н20

Найдено, %: С 55.24: Н 6.57: N 12,24.

Пример 20. 1-(М2-циклобутанкарбо- нил- -лизил-гамма-0- глутамил)-индолин- 2(3)-карбонова  кислота (пример 36).

Исходные соединени : соединение I и (циклобутанкарбонилокси)сукцинимид. Т.пл.209-215°С.

-96,6° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 56,70; Н 7,04; N 10,58.

C25H34N407«1,5 Н20

Найдено, %: С 56,64; Н 7,06; N 10,46.

Пример 21. 1- 2-циклопентилокси- карбонил-1 -лизил-гамма- 0-глутамил)индо- лин-2(5)-карбонова  кислота.

Выход 0,52 г (63%). Исходные соедине- ни : соединение I и М-(циклопентиловый или карбонилокси)сукцинимид. Т.пл. 198- 203°С.

-79.3 (1 н. раствор NaOH). Вычислено. %: С 54,49; Н 7,12; N 9,78. C26H36N40e 2,25H20

Найдено, %: С 54,67; Н 7,40; N 9,53. Пример 22. (2-nnpnflHH3TOKcn- карбонил)- -лизил-гамма- D-глутамил индо- лин-2(3)-карбонова  кислота. Выход 0,23 г (23%). Исходные соединени : соединение I и (2-пиридинэтоксикар- бонилокси)сукцинимид.

«Ь28 -69 3° (1 н. раствор NaOH). Вычислено, %: С 55,12; Н 6,53: N 11,48. C28H35N40e 2,25H20

Найдено, %: 054,91; Н 6,37; N 11,33.

Пример 23. 1- 2-бензоил-1 -лизил- гамма-0-глутамил)- индолин-2-(5)-карбоно- ва  кислота.

Выход 0,44 г (44%). Исходные соединени : соединение I и (бензоилокси)сукци- нимид. Т.пл. 202-208°С.

-77,2° (1 н. раствор NaOH). Вычислено, %: С 57,85; Н 6,47: N 9,99.

C27H32N407-2 Н20

Найдено, %: С 57,97; Н 6,32; N 10,20. Пример 24. (2S, 3aS, 7aS)(4- хлорбензилоксикарбонил) -L-лизил-гамма- D-глутамил октагидро-1 Н-индол-2-карбоно ва  кислота.

Выход 0,80 г (42%), Исходные соединени : соединение II и (4-хлорбензилокси- карбонилокси)сукцинимид.

Вычислено. %: С 54,06: Н 6.81: N 9,01; CI 5.70.

C28H39CIN408-1.5 Н20

Найдено, %: С 53,)5: Н 6,65; N 8.80: CI 5.56.

Пример 25. (2S, 3aS, 7aS)(4-Me- тилбензилоксикарбонил) -L-лизил-гамма-О- глутамил октагидро-1Н-индол-2-крабонов а  кислота.

30,8° (1 н. раствор NaOH).

Выход 0,13 г (81%). Исходные соединени : соединение II и М-(4-метилбензилокси- карбонилокси)сукцинимид.

-31,9°(1н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 57,46: Н 7.57; N 9,24.

C29H42N408VU5H20

Найдено, %: С 57,37; Н 7/51; N 9,07.

Пример 26. (2S, 3aS, 7aS)(2- хлорбензилоксикарбонил) -L-лизил-гамма- 0-глутамил октагидро-1Н-индол-2-карбоно- ва  кислота.

Выход 0,94 г (59%). Исходные соединени : соединение II и М-(2-хлорбензилокси- карбонилокси)сукцинимид.

- -32,8 (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 54,45; Н 6.77; N 9,07; CI5J4.

C28H39CIN408«1,25 Н20

Найдено, %: С 54,55; Н 6,81; N 8,90; CI 5,60.

Пример 27. (2S, 3aS. 7aS) -(2-ме- тилбензилоксикарбонил) -L-лизил-гамма-О- глутамил октагидро-1 Н-индол-2-карбонов - а  кислота.

Выход 0,82 г (55%). Исходные соединени : соединение II и М-(2-метилбензилокси- карбонилокси)сукцинимид.

-35,8° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 57,46; Н 7,57; N 9,24.

C29H42N4O8-1.75 Н20

Найдено, %: С 57,68; Н 7,63; N 9,01.

Пример 28. (2S, 3aS, 7aS)(2- фторбензилоксикарбонил) -L-лизил-гамма- 0-глутамил октагидро-1Н-индол-2-карбоно ва  кислота.

Выход 0,35 г (28%). Исходные соединени : соединение II и (2-фторбензилокси- карбонилокси)сукцинимид.

«Ь32 -32,5° (1 н, раствор NaOH).

Вычислено, %: С 55,46; Н 7.14: N 8,62; F 2,92.

C28H39FN408 1,5 С4Н802

Найдено, %: С 55,63: Н 7.08; N 8,54; F3.01.

Пример 29. (2S, 3aS, 7аЗ)(аль- фа-нафтилметоксикарбонил)- -лизил-гамм- a-D- глутамил октагидро-1 Н-индол-2-карбо- нова  кислота.

Выход 0,40 г (34%). Исходные соединени : соединение II и Ы-(1-нафтилметокси- карбонилокси)сукцинимид.

«Ь32 -36,30° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 60,08; Н 7,18; N 8,49.

C32H42N408«1,5 ,25 С4Н802

Найдено, %: С 59,78; Н 7,41; N 8,37.

Пример 30. (2S, ЗаЗ, 7аЗ)(аль- фа-нафтилэтоксикарбонил)- -лизил-гамма -D- глутамил октагидро-1 Н-индол-2-крабо- нова  кислота.

Выход 0,37 г (29%). Исходные соединени : соединение II и N-(L- нафтилэтоксикар- бонилокси) сукцинимид.

-38,8° (1 н. раствор NaOH). Вычислено, %: С 59,64; Н 7,44; N 7,95.

C33H44N408 2 ,5 С4Н802

Найдено, %: С 59,87; Н 7,17; N 7,91.

Пример 31. (2S, ЗаЗ, 7аЗ)(4-фе- нилбензилоксикарбонил) -L-лизил-гамма-О- глутамил октагидро-1 Н-индол-2-карбонов- а  кислота.

Выход 0,23 г (13%). Исходные соединени : соединение II и (4-фенилбензилокси- карбонилокси)сукцинимид.

№27 -39,1° (1 н. раствор NaOH). Вычислено, %: С 61,09; Н 7,26; N 7,92.

C34H44N408 О ,5 Н20-0,5 С4Н802

Найдено, %: С 61,23; Н 7,26; N 7,85.

П р и м е р 32. (23, ЗаЗ, 7aS)(4-mflроксибензоил )-1- лизил-гамма-О-глута- мил октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

В 5 мл воды раствор ют 1,30 г (23, ЗаЗ,

7aS)-1-(N -бензилоксикарбонил-Ь-лизил-г- амма-0-глутамил) октагидро-1 Н-индол-2- карбоновой кислоты и 0,25 г карбоната натри  и добавл ют 10 мл тетрагидрофурана. При интенсивном перемешивании добавл ют 0,7 г (4-гидроксибензоилокси)сукцини- мида и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрируют до половины объема, подкисл ют 10%-ной лимонной кислотой и

экстрагируют хлористым метиленом. Органический слой промывают водой, сушат над безводным сульфатом натри  и концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток раздел ют хроматографически на

колонке СНР20Р (диаметр 2,5 см, длина 40 см), использу  в качестве элюента смесь ацетонитрил - вода (градиент от 30 до 70%). Фракции, содержащие целевой продукт, концентрируют досуха при пониженном

давлении, получа  0,6 г остатка. Остаток раствор ют в смеси 25% НВг - уксусна  кислота (10 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем добавл ют 100 мл простого эфира и образовавшийс  белый осадок собирают посредством фильтрации и раздел ют его хроматографически на колонке СНР20Р (диаметр 2,5 см, длина 40 см), использу  смесь ацетонитрил - вода (градиент от 0 до 40%).

Фракции, содержащие целевой продукт, концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток подвергают лиофильной сушке, получа  0,3 г(59%) вещества, указанного в заголовке.

гф27 -17,4°(вводе).

Вычислено, %: С 56,63. Н 7.20: N 9.77.

C27H38N408 1,5H20

Найдено, %: С 56,71; Н 7,09; N 9,95.

Следующие соединени  синтезируют таким же образом, что в примере 32.

Пример 33. (2S, 3aS, 7aS)(2-™- офенкарбонил)-.- лизил-гамма-0-глута- мил октагидро-1 Н-карбонова  кислота.

Выход 0,24 г (19%). Исходные соединени : соединение II и М-(2-тиофенкарбони- локси)сукцинимид.

-23,1° (в воде).

Вычислено, %: С 54,14, Н 6,91; N 10,10; S 5,78.

C25H36N407S-H20

Найдено, %: С 54,09; Н 6,74; N 0,14; S 5,99.

Пример 34. (2S, 3aS, 7aS) 2-(3-хи- нолинкарбонил) лизил-гамма-О-глута- мил октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

Выход 0,30 г (21%). Исходные соединени : соединение И и М-(3-хинолинкарбони- локси)сукцинимид.

MD -25,8° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 58,33: Н 7.02 N 11,34.

СзоНз9№07 2Н20

Найдено, %: С 58,46; Н 7,30; N 11,24.

Пример 35. (2S, 3aS, 7aS)(2- хлорникотиноил) лизил-гамма-0-глута- мил октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

Выход 0,20 г (15%). Исходные соединени : соединение II и М-(2-хлорникотинои- локси)сукцинимид.

«К6 -42,6° (в воде).

Вычислено, %: С 52.66; Н 6.63; N 11,81; CI 5,98.

C26H38CN50 1.5Н20

Найдено, %: С 52.75; Н 6,68: N 11,76; CI 5,89.

Пример 36. (2S, 3aS. 7aS)(4- хлорбензоил)- -лизил - гамма-D-гл ута- мил октагидро-1 Н-индол-2-кар бокова  кислота.

Выход 0,40 г (25%). Исходные соединени : соединение II и (4-хлорбензоилок- си)сукцинимид.

«Ь25 - -25.9° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 54,77: Н 6.81; N 9,46: CI 5,99.

C27H37CIN407 1,5H20

Найдено, %: С 55,07: Н 7,09; N 9,26; CI 5,79.

Пример 37. (2S, 3aS, 7а5)-1-{М2- ин- долин-2-(5)-карбоксил - -лизил-гамма-0- глутамил}октагидро-1 Н-инцол-2-карбонов - а  кислота.

Выход 0,25 г (18%). Исходные соединение: соединение II и Ы- индолин-2 (З)-карбо- никлосиТсукцинимид.

-64,3° (1 н. раствор NaOH). Вычислено, %: С 56,90; Н 7,47; N 11,44.

C29H41N509-1,25H20

Найдено, %: С 56,99; Н 7,61; N 11,15.

Пример 38. (2S, 3aS, 7aS)(2-™- анафтенкарбонил) лизил-гамма-О-глута- 0 мил октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

Выход 0,3 г (31%). Исходные соединени : соединение II и М-(2-тианафтенкарбо- нилокси)сукцинимид. 5 -16,5°(1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 55,93; Н 6,80; N 9,00; S 5,15.

C29h.j8N407.2H20

Найдено, %: С 56.08; Н 6,63; N 8,87; S 0 4,94.

Пример 39. (2S, 3aS, 7aS)(2-xn- наксолинкарбонил) лизил-гамма-0-глута- мил окТагидро-1 Н-индол-2-крабонова  кислота.

5 Выход 0,30 г (21 %). Исходные соединени : соединение II и 1Ч-(2-хиноксалин-крабо- нилокси)сукцинимид.

-15,3°(1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 57,56; Н 6,75; N 13,89. 0С29НзвМб07-1,25Н20

Найдено, %: С 57,48; Н 7,00; N 13,96.

П р и м е р 40. (2S, 3aS, 7aS) (2-изо- хинолинкарбонил) лизил-гамма-О-глута- мил октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  5 кислота.

Выход 0,30 г (22%) Исходные соединени : соединение II и -(2-изохинолинкарбо- нилокси)сукцинимид.

-51,8° (1 н. раствор NaOH). 0Вычислено, %: С 60,09; Н 6,89; N 11,68.

C3oH3gN507 1 H20

Найдено, %: С 59,89; Н 6,66; N 11,61.

Пример 41. (2S, 3aS, 7aS)(6-Me- токсиникотиноил)-.- лизил-гамма-О-глута- 5 мил октагидро-1 Н-индол-2-крабонова  кислота.

Выход 0.24 г (23%). исходные соединени : соединение II и (6-метоксиникотино- илокси)сукцинимид. 0 аЬ27 -18,0°(вводе).

Вычислено, %: С 55,09; Н 7,19; N 11,90.

С27Нзэ№08-1,5Н20

Найдено, %: С 55,09; Н 7,44; N 11,77.

Пример 42. (2S, 3aS, 7aS)(6- 5 этоксиникотиноил) лизил-гамма-О-глута- мил октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

Выход Q/I 5 г (14%). Исходные соединени : соединение II и (6-этоксиникотинои- локси)сукцинимид.

-16,4° (в воде).

Вычислено, %: 054,98; Н 7,42; N 11,45.

С28Н41№(У2 Н20

Найдено, %: С 55,00; Н 7.70: N 11,27.

Пример 43. (2S, 3aS, 7aS)(6- хлорникотиноил)-1- лизил-гамма-0-глута- мил октагидро-1 Н-и ндол-2-карбон о ва  кислота.

Выход 2,0 г (55%). Исходные соединени : соединение II и Ч-(6-хлорникотинои- локси)сукцинимид.

-21,4°(вода).

Вычислено, %: С 51,87: Н 6,70; N 11,63: CI5.89.

С2бНзбС1 и-07 2 Н20

Найдено, %: С 51,78; Н 6,44: N 11,88; CI 6,05,

Пример 44. (2S, 3aS, 7aS) -(6-н- пропоксиникотиноил) лизил-гамма-D- глутамил октагидро-1 Н-индол-2-карбонов - а  кислота.

Выход 0,25 г (23%). Исходные соединени : соединение II и К|-(6-н-пропоксиникоти- ноилокси)сукцинимид.

-25,2° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 56,48: Н 7.52: N 11,36.

C29H43N508-1.5 Н20

Найдено, %: С 56.56; Н 7,22; N 11,36.

П р и м е р 45. (2S, 3aS, 7aS)(2-H30- пропоксиникотиноил)- L-л из ил-га мма-D- глутамил октагидро-1 Н-индол-2-карбонов - а  кислота.

Выход 0,20 г (18%). Исходные соединени : соединение II и М-(2-изопропоксинико- тиноилокси)сукцинимид.

-26,4° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 55,67: Н 7.57: N 11,19.

С2дН43№08-2Н20

Найдено, %: С 55,41; Н 7,80; N 11,05.

П р и м е р 46, (2S, 3aS. 7аЗ)(3-гид- роксибензоил) лизил-гамма-0-глута- мил октагидро-1 Н-и ндол-2-кар бон о ва  кислота.

Выход 0,50 г (49%). Исходные соединени : соединение II и М-(3-гидроксибензои- локси)сукцинимид.

Вычислено, %: С 56,98; Н 7,17; N 9,84.

C27H38N408-1.25 Н20

Найдено, %: С 57.07; Н 7.16: N 9,79.

П р и м е р 47. (2S. 3aS. 7аЗ)(3-гид- рокси-4-метоксибензоил)- -лизил-гамма-0 -глутамил октагидро-1 Н-индол-2-карбоно- ва  кислота.

Выход 0,30 г (27%). Исходные соединени : соединение II и (3-гидрокси-метокси- бензоилокси)сукцинимид.

-40,0° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 52,95; Н 7.38; N 8,82.

C28H4oN40g 3,25 H20

Найдено, %: С 52.86; Н 7.07: N 8,97.

5

П р и м е р 48. (2S, 3aS, 7aS) -(6-гид- рокси-бета-нафтоил)- -лизил-гамма-О-глу- тамил октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

Выход 0,35 г (31 %). Исходные соединени : соединение II и М-(6-гидрокси-/3- нафти- локси) сукцинимид.

-2,8° (1 н. раствор NaOH). Вычислено, %: С 58,02; N 7,07; N 8,73.

C3iH4oN408-2,5H20

Найдено, %: С 57,90; Н 7,09; N 8,58, Пример 49. 1-(N -пиразиноил-Ь-ли- зил-гамма-О-глутамил)- индолин-2(3)-карбо- нова  кислота.

5Раствор ют 0,26 г пиразиновой кислоты

в смеси 3 мл диметилформамида и 20 мл хлористого метилена и добавл ют 1.1 г этилового эфира 1-(N -трет-бутоксикарбонил-L- лизил-0 -этил-гамма-0-глутамил)

0 индолин-2(5)-карбоновой кислоты и 0,84 г 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодии - мид-гидрохлорида. Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь последовательно промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натри  и водой, сушат над безводным сульфатом натри  и концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток очищают хроматографически на колонке с

0 силикагелем, элюируемой смесью (метанол - хлороформ (2%), Получают 0,8 г этилового эфира 1-(N -трет-бутоксикарбо- нил-N -пиразиноил- -лизил- О -этил-гамма- D-глутамил) индолин-2(5)-карбоновой

5 кислоты в виде в зкого масл нистого вещества .

Полученное вещество (0,8 г) раствор ют в диоксане и добавл ют 3,5 мл 1 н. раствора NaOH, Смесь перемешивают при охлажден0 нии льдом в течение 1,5 ч. Реакционную смесь концентрируют, подкисл ют 10%-ной лимонной кислотой и раздел ют на хрома- тографической колонке СНР20Р, использу  в качестве элюента смесь ацетонитрил - во5 да (градиент от 0 до 60%). Фракции, содержащие целевой продукт, концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток повторно осаждают из смеси петролейного эфира и этилацетата. Посредством фильтра0 ции получают 0,55 г 1-(N -трет-бутоксикар- бонил-N -пиразиноил-1 -лизил-гамма-0- глутамил) индоил-2(5)-карбоновой кислоты. Добавл ют 10 мл трифторуксусной кислоты к аликвоте (0,45 г) конечного соедине5 ни  и смесь перемешивают при охлаждении льдом в течение 20 мин. Трифторуксусную кислоту выпаривают и остаток раздел ют хроматографичефски на колонке СНР20Р, использу  в качестве элюента смесь ацетонитрил - вода (градиент от 0 до 30%). Фракции , содержащие целевой продукт, концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток подвергают лиофильной сушке, получа  0,27 г соединени , указанного в заголовке .

Мо25 -74,4 (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 52,53: Н 6.17: N 14,70.

С25НзоМ607 2,5Н20

Найдено, %: С 52,52; Н 6,27; N 14,54.

Пример 50. Мононатриева  соль (2S, 3aS, 7а5)-1-(Ы2-никотиноил-1 -лизил-гамма- 0-глутамил)октагидро-1 Н- индол-2-карбо- новой кислоты.

В 5 мл воды раствор ют 0,57 г (2S, 3aS, 7aS)-1-(N -никотиноил- L-лизил-гамма-О- глутамил)октагидро-1 Н-индол-2-карбонов ой кислоты и добавл ют 1 мл 1 н. раствора NaOH. Образовавшийс  водный раствор раздел ют на хроматографической колонке СНР20Р (градиент от 0 до 20% при исполь- зовании смеси ацетонитрил - вода). Фракции , содержащие целевой продукт, концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток подвергают лиофильной сушке и получают 0,25 г соединени , указан- ного в заготовке.

ЭДо26 -24,6° (в воде).

Пример 51. (2S, 3aS. 7а5)(2-ме- токсибензоил) лизил-гамма-0-глута- мил октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

Раствор ют в 15 мл хлористого метилена 1,0 г орто-анисовой кислоты 0,76 г N-гид- роксисукцинимида и 1,39 г водорастворимого гидрохлорида крабодии- мида и раствор перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Осадок отдел ют посредством фильтрации. Маточный раствор концентрируют при пониженном давлении и остаток подвергают перекристаллизации из изопропанола, получа  1,47 г М-(2-метоксибензо 1локси) сукци- нимида. Т.пл. 180-182°С.

(2S, 3aS, 7а5)-1-(Ы6-бензилокси.фабо- нил-1 -лизил-гамма-0- глутамил)октагидро- 1 Н-индол-2-карбоновуюкислоту

раствор ют в 6 мл воды и добавл ют карбонат натри  и 10 мл тетрагидрофурана. При тщательном перемешивании добавл ют N- (2-метоксибензоилокси) сукцинимид. Эту смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь подкисл ют 10%-ной лимонной кислотой и экстрагируют хлористым метиленом . Органический слой сушат над безводным сульфатом натри  и концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток раздел ют хроматографически на колонке СНР20Р, использу  в качестве элю- ента смесь ацетонитрид - вода (градиент от

30 до 70%). Фракции, содержащие целевой продукт, концентрируют досуха при пониженном давлении, получа  1,0 г (2S, 3aS, 7а5)-1- 1б-бензилоксикарбонил-Ы2-(2-мето ксибензоил)- -лизил- гамма-0-глутамил ок- тагидро-1 Н-индол-2-карбоновой кислоты.

В 10 мл этанола раствор ют 1,0 r(2S, 3aS, 7aS) бензилоксикарбонил-N -(2- метоксибензоил)-1 -лизил-гамма-О- глута- мил октагидро-1 Н-индол-2-карбоновой кислоты и добавл ют 1,18 г циклогексена и 0,2 г катализатора - 10%-ного паллади  ан угле. Смесь перемешивают при 60°С в течение 2 ч. Катализатор удал ют путем фильтрации и маточный раствор концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографическому разделению на колонке СНР20Р (градиент от 0 до 50% при использовании смеси ацетонитрил - вода). Фракции содержащие целевой продукт, концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают лиофильной сушке, получа  0,34 г соединени , указанного в заготовке.

-14,9°(вводе).

Вычислено, %: С 56,36; Н 7,43; N 9,39.

С28Н40М408 2 Н20

Найдено, %: С 56,63 Н 7,1 N 9,33.

Пример 52. 1-(N -циклогексикарбо- нил-1-лизил-гамма-0- глутамил) индолин- 2(5)-карбонова  кислота.

Выход 0,28 г (42%). Исходные соединени , соединение II и М-(циклогексилкарбо- нилокси)сукцинимид. Т. пл. 207-212°С.

«Ь -90,3° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 57,23; Н 7,47; N 9,89.

C27H38N407 2H20

Найдено, %: С 57,42; Н 7,52; N 9,94.

Пример 53. (2S, 3aS, 7аЗ)(4-фе- нилбензоил) лизил-гамма-0-глутамил октагидро-1 Н-индоил-2-карбонова  кислота.

Выход 0.36 г (21%). Исходные соединени : соединение II и М-(4-фенилбензоилок- си)сукцинимид.

-11,6° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 62,02; Н 7,29; N 8,27.

СззН421 и07 1.5 ,5 С4Нз02

Найдено, %: С 61,98; Н 7,15; N 8,35.

Пример 54. (2S, 3aS, 7aS)(4- фторбензоил)- -лизил- гамма-О-глутамил октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

Выход 0,37 г (67%). Исходные соединени : соединение II и (4-фторбензоилокси) сукцинимид.

Вычислено, % С 55,47: Н 7,07; N 9,58; F 3,25.

C27H37N407F.2 Н20

Найдено, %: С 55,59; Н 7,36; N 9,46; F 3,03

Пример 55. -(3,4-метилендиок- сибензилоксикарбонил)- L-лизил-гамма-О- глутамил индолин-2(5)-карбонова  кислота.

Раствор ют в хлористом метилене 2,5 г Ы2-трет-бутокси-карбонил-М6-(3-нитро-2-п- иридинсульфенил)-1 -лизина и 2,2 г этилового эфира 1-(01-этил-гамма-О-глутам ил) ин- долин-2(5)-карбоновой кислоты и добавл ют 2,0 г 1-этил-3-(3-диметиламиноп- ропил)-карбодиимид-гидрохлорида. Эту смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь последовательно промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натри  5%-ным водным раствором бисуль- фата кали  и водным раствором хлорида натри . Сушат над безводным сульфатом натри  и концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток перекристалли- зовывают из этанола, чтобы получить 3,6 г этилового эфира 1- Ы2-трет-бутоксикарбо- нил-1-N -(З-нитро-2- пиридинсульфенил) лизил-0 -этил-гамма-0-глутамил индолин-2-(3)-карбоновой кислоты.

-28,2° (в диметилформамиде).

3,5 г этого сложного эфира перемешивают с 30 мл трифторуксусной кислоты при охлаждении льдом в течение 30 мин. Выпаривают трифторусусную кислоту и к остатку добавл ют этилацетат и 5% карбоната ка- ли . Смесь интенсивно встр хивают. Органический слой промывают водным раствором хлорида натри , сушат над безводным сульфатом натри  и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвер- гают перекристаллизации из смеси простого эфира и этанола, получа  2,6 г этилового эфира (3-нитро-2-пиридинсульфенил) - L-лизил-О -этил-гамма-О-глутамил -индол ин-2(5)-карбоновой кислоты. Т. пл. 95- 102°С.

- -39,6° (в диметилформамиде).

Аликвоту (1,0 г) образовавшегос  сложного эфира раствор ют в 30 мл хлористого метилена и добавл ют 0,21 г N-метил-мор- фолина и 1,07 г М-(3,4-метилендиокси бензи- локсикарбонилокси) сукцинимида и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь последовательно промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натри . 5%-ным водным раствором бисульфата кали  и водой . Сушат над безводным сульфатом натри  и концентрируют досуха при пониженном давлении. Остаток подвергают перекристаллизации из смеси этанола и метанола , получа  1,1 г этилового эфира - (3,4-метилен-диоксибензилоксикарбонил)- N -(3-нитро-2-пиридинсульфенил)- -лизил

-01-этил-гамма-О-глутамил индолин-2(5)- карбоновой кислоты. Т.пл. 130-135°С.

Mo27 -23,2° (в диметилформамиде).

Аликвоту (1,0 г) этого продукта обрабатывают как на второй стадии примера 68, получа  0,8 г -(3,4-метилендиоксибен- зилоксикарбонил)-Ы ХЗ-нитро-2- пиридин- сульфенил)-1 -лизил-гамма-0-глутамил индо- лин-2(5)-карбоновой кислоты. Т. пл. 100- 110°С.

-70,5° (1 н. раствор NaOH).

Аликвоту (0,74 г) продукта раствор ют в 10 мл диоксана и добавл ют 19 мл диоксана и 10 мл 0,5 н. раствора сол ной кислоты. Смесь перемешивают при 45°С в течение 4 ч. Реакционную смесь нейтрализуют и концентрируют , а остаток подкисл ют 1 н. раствором сол ной кислоты и раздел ют хроматографически на колонке СНР20Р (градиент от 0 до 50% при использовании смеси ацетонитрила и воды). Фракции, содержащие целевой продукт, концентрируют , и выпавшие в осадок кристаллы собирают фильтрацией, получа  4 мг (7,7%) указанного в головке соединени . Т.пл. 198- 202°С.

-67.3° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 54,88; Н 6,04; N 8,83.

С2эНЫМ40ю-2 НоО

Найдено, %: С 55.16; Н 6.14; N 8,83.

П р и м е р 56. (2S. 3aS, 7аЗ)(2-гид- рокси-3-метил-бензоил)-1 -лизил-гамма-0-г лутамил октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

Выход 0,16 г (14%). Исходные соединени ; соединение II и М-(2-гидрокси-3-метил бензоилокси) сукцинимид.

+45,2° (в 1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 57,71; Н 7,54; N 9,11.

C2oH4oN40e-3 НгО

Найдено, %: С 54,78; Н 7,46; N 8,82.

П р и м е р 57. (2S. 3aS. 7aS)(2-rnfl- рокси-5-хлорбензоил)- -лизил-гамма-0-глу- тамил октагидро-1 Н-индол-2-карбонова  кислота.

Выход 0,32 г (29%). Исходные соединени : соединение II и (2-гидрокси-5-хлор- бензоилокси)сукцинимид.

«Ь30 +17,2° (1 н. раствор NaOH).

Вычислено, %: С 53,33; Н 6,63; N 9,21; CI 5,83.

C27H37CIN4O8 1,5 НаО

Найдено, %: С. 53,21; Н 6.75; N 9.23; CI 5.65.

Проведены биологические испытани  соединений, полученных в услови х описываемого способа.

Противогипертоническа  активность. Самцам крыс вида Sprague Dawley (возрастом 5 недель) под легкой анестезией с помощью эфира пережимали серебр ным зажимом (внутренний диаметр 0,22 мм) левую почечную артерию. Правую почку и почечную артерию составл ли нетронутой. Через 6-10 недель после зажима отбирали крыс, имеющих давление крови выше 180 мм Нд. Таким крыс называли двухпочечными ре- нально гипертензивными крысами Гольдб- латтовского типа и их рассматривали как типичную модель ренинангиотензинзависи- мой гипертонии.

Кров ное давление измер ли методом хвост - манжета tailcuff с использованием программированного электросфигмомано- метра (РЕ-300, Нарко Биосистем. США) после нагревани  в течение 10 мин при 38°С в нагревательной камере.

Противогипертоническую активность испытуемых соединений оценивали после однократного орального применени  этих соединений на крысах с почечной гипертонией (3-5 крыс / группа).

Полученные результаты представлены в таблице.

In vitro АСЕ - ингибиторан  активность в отношении АСЕ в лабораторных услови х. Среда дл  анализа содержала препарат АСЕ (легкие кролика), синтетический субстрат (гиппурил- -гистидил- -лейцин 5 mM), NaCI (300 тМ) и фосфатный буффер (100 mM, рН 8,3). Компоненты смешивали до конечного объема 0,300 мл и инкубировали в течение 30 мин при 37°С в присутствии или отсутствии используемого соединени . После прекращени  реакции в результате добавлени  300 ч 1 н. раствора fxlaOH образовавшуюс  гиппуровую кислоту экстрагировали 2 объе- мам/i этилацета-ia. После выпаривани  эти- лацетат и добавлени  дистиллированной воды гиппуровую кислоту определ ли по ее поглощению в области 228 нм с использованием спектрофотометра (Хитачи 100-41).

Степень АСЕ - ингибирование. АСЕ рассчитывали из активностей, полученных в присутствии и отсутствии испытуемых соединений . Значение IGso (мол рна  концентраци , требуема  дл  50% ингибировани  активности АСЕ) получали из кривой, построенной в координатах доза - ингибирво- ание.

Токсичность. В опытах использовали самцов мышей штамма ТД-ddy весом 22- 25 г. Было обнаружено, что значение ЛДбо при оральном применении испытуемых соединений (примеры 15 и 51) на мышах составили более 3,000 кг на 1 кг веса тела. Полученные результаты показывают, что испытанные соединени  обладают очень ела бой токсичностью.

м

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

Проведенные испытани  показали, что соединени , полученные в услови х описываемого способа, обладают очень низкой токсичностью (3000 мг/кг), их терапевтический индекс 300 и более, т.е. они относ тс  к соединени м исключительно низкой токсичности .

Из таблицы видно, что структурные аналоги (2 последних соединени ) при введении в организм животного вызывают понижение кров ного давлени  лишь на 3 и 2 мм рт.ст. при дозе 30 мг/кг. Увеличение вводимого количества этих аналогов не ведет к существенному понижению кров ного давлени . Эти сравнительные соединени  не обнаруживают терапевтически эффективного понижени  кров ного давлени .

Таким образом, соединени , полученные по предлагаемому способу, обладают более высокой противогипертонической активностью и относ тс  к- категории практически нетоксичных соединений.

Claims (1)

1. Способ получени  производных три- пептидов общей формулы

(

СН2 СООКг

RrW-CQ-M-CH-CQ-KH-CH-(CH2)rCO-S3 где RI - С4 Сб-Циклоалкильна  группа, группа циклогексил - низший алкил; фенильна  группа, необ зательно замещенна  заместителем , выбранным из галогена, метила, метоксигруппы, фенила и гидроксигруппы; группы фенил - низший Сг-С2-алкил, где бензольное кольцо необ зательно замещено заместителем, выбранным из галогена, метила, метоксигруппы, фенила и 3,4-мети- лендиоксигруппы, ri/дроксизамещенна  нафтильна  группа; группа нафтил - низший алкил, пиридильна  группа, необ зательно замещенна  заместителем, выбранным из галогена и низшей алкокси- группы С-|-С4-группы, пирролидинильна  группа. 2-тиенильна  группа, 3-хинолиль- на  группа; 2-индолильна  группа, тианаф- тен-2-ильна  группа, хиноксалин-2-ильна  группа, изохинолин-2-ильна  группа, 2-пи- разинильна  группа, группа пиридил - низший алкил или группа имидазолилвинил,

W - одинарна  св зь, -О- или -NH-;

R2 - водород;

Рз - 2(5)-карбоксииндолильна  группа или 2-карбокси (2S, 3aS, 7а5)-октагидро- индолильна  группа, при условии, что если W - одинарна  св зь, то RI - цикло-С4 Сб- алкильна  группа, фенильна  группа, необ зательно замещенна  галогеном, метилом, метоксигруппой, фенилом или гид- роксигруппой. гидроксизамещенна  нафтильна  группа, пиридильна  группа, необ зательно замещенна  галогеном и низшей алкокси-Ст-Сз-группой, пирролидинильна  группа, 2-тиенильна  группа; 3-хинолиль- на  группа, 2-индолильна  группа, тианаф- тен-2-ильна  группа, хиноксалин-2-ильна  группа, изохиноилн-2-ильна  группа, 2-пи- разинильна  группа, имидазолилвинильна  группа, либо, если W - -0-, то RI - цикло-С4 Се-алкильна  группа, группа циклогексил - низший алкил, группа фенил-Сч-С -алкил, а бензольное кольцо необ зательно замещено галогеном, метилом, метоксигруппой, фенилом или 3,4-метилендиоксигруппой, группой нафтил - низший алкил, группой пиридил - низший алкил, или. если , то RI - цикло-Сб-алкильна  группа, фениль- на  группа, фенил-Ст-Са-алкильна  группа, или их фармацевтически приемлемых солей, отличающийс  тем. что осуществл ют взаимодействие соединени  общей формулы

Ri -W-COOH,

где FI и W имеют указанные значени , или его реакционноспособного производно- го по крабоксильной группе, такого как га- лоидангидрид кислоты, изоцианат или активированный амид, с соединением об- щей формулы -КН-Иц

СНг № г Щ-ШШО-МИ-ЫсНОг-СО-Хз

где R2 . R4 - водород или группа, защищающа  аминогруппу;35 R2 и R4 имеют указанные значени .

0 5 0

5

0

5

или с его кислотно-аддитивной солью и при необходимости удал ют защитную группу, и целевой продукт выдел ют в свободном виде или в виде соли.

Приоритет по признакам: 09.05.86 при Ri - цикло-Сб-алкильна  группа,

группа циклогексил - низший алкил, группа фенил - низший алкил, в которой бензольное кольцо может быть необ зательно замещено метоксигруппой, пири- дильна  группа, котора  может быть необ зательно замещена заместителем, выбранным из галогена и низшей алкоксигруп- пы, или имидазолилвинильна  группа; R2 - водород; Rз-2(S)-кpaбoкcииндoлильнa  или 2-карбокси(25, 3aS, 7aS)октагидроиндоиль- на  группа; W - одинарна  св зь или -О.

03.07.86при Ri - цикло-С -алкильна  или пирролидинильна  группа; R2 - водород; R3 - 2(5)-карбоксииндолильна  или 2-карбокси (2S, 3aS, 7аЗ)октагидроиндо- лильна  группа: W - одинарна  св зь или -0-.

26.01.87при RI - цикло-Сб-алкильна  группа, фенильна  группа, необ зательно замещенна метокси-или гидроксигруппой, группа фенил - низший алкил, в которой бензольное кольцо необ зательно замещено 3,4-метилендиоксигруппой, 2-тиенильна  группа, 3-хинолильна  группа. 2-пиразинильна  группа либо группа пиридил - низший алкил: R2 - водород; R3 - 2(5)-карбоксииндолильна  либо 2-карбокси (2S, 3aS, 7а5)октагидроиндолильна  группа; W - одинарна  св зь либо -0-.

Продолжение таблицы

27

1743356

28 Продолжение таблицы