SU1541257A1 - Способ получени L-триптофана - Google Patents
Способ получени L-триптофана Download PDFInfo
- Publication number
- SU1541257A1 SU1541257A1 SU874268147A SU4268147A SU1541257A1 SU 1541257 A1 SU1541257 A1 SU 1541257A1 SU 874268147 A SU874268147 A SU 874268147A SU 4268147 A SU4268147 A SU 4268147A SU 1541257 A1 SU1541257 A1 SU 1541257A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- culture fluid
- tryptophan
- concentration
- amino acids
- aeration
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к микробиологической промышленности и касаетс получени незаменимой аминокислоты L-триптофана, котора может быть использована в питании человека и животных, производстве фармацевтических препаратов, дл приготовлени микробиологических диагностических сред. Целью изобретени вл етс повышение качества целевого продукта за счет снижени концентрации сопутствующих аминокислот в культуральной жидкости. Способ заключаетс в выращивании продуцирующего L-триптофан штамма BACILLUS SUBTILIS ВНИИгенетика-15 в услови х аэрировани в питательной среде, содержащей сахар, кукурузный экстракт, мочевину, минеральные соли и дезоксирибонуклеазу в концентрации 1.10-8-1.10-7 мг белка/мл среды, при этом после окончани процесса выращивани , о котором суд т по понижению величины оптической плотности культуры, культуральную жидкость выдерживают в услови х пониженного аэрировани . Сочетание приемов введени ДНКаза с выдерживанием культуральной жидкости в режиме пониженного аэрировани приводит к понижению количества сопутствующих аминокислот (L-фенилаланина, L-тирозина и L-аланина) на фоне высокого уровн L-триптована. 1 табл.
Description
ел
4 1C
сп
Изобретение относитс к микробиологической промышленности и касаетс получени незаменимой аминокислоты L-триптофана, котора может быть использована в питании человека и животных, производства фармацевтических препаратов дл приготовлени микробиологических диагностических сред.
Цель изобретени - повышение качества целевого продукта за счет снижени концентрации сопутствующих аминокислот в культуральной жидкости.
Способ заключаетс в том, что штамм-продуцент L-триптофана Bacillus subtilis ВНИИгенетика-15 культивируют в услови х аэрировани в питательной среде, содержащей сахар в качестве источника углерода, кукурузный экстракт , мочевину, минеральные соли и дезоксирибонуклеазу (ДНКазу) в кон- центрации мг белка/мл среды. После окончани процесса выращивани , о котором суд т по понижению величины оптической плотности культуры , культуральную жидкость выдерживают в течение 4-6 ч в услови х пониженного аэрировани . Использование ДНКазы в определенной концентрации в сочетании с выдерживанием культу- ральной жидкости в течение 4-6 ч в определенном режиме аэрировани приводит к понижению количества сопут- аминокислот (L-фенилаланина, L-тирозина и L-аланина), которые накапливаютс в культуральной жидкости параллельно с целевой аминокислотой 1,-триптофаном.
Введение ДНКазы в концентрации ниже 1х10 и выше 7 мг белка/мл среды не приводит к понижению концентрации сопутствующих аминокислот в культуральной жидкости при выдерживании . Выдерживание в течение менее 4 ч приводит к недостаточному понижению уровн сопутствующих аминокислот, а выдерживание в течение более 6 ч не мен ет их уровн в культуральной жидкости. Результаты соответствующих экспериментов суммированы в таблице, где показано вли ние различных концентраций ДНКазы и времени выдержки культуральной жидкости на содержание сопутствующих аминокислот и L-трипто- фана.
П р и м е р. Односуточиую культуру ,штамма В. subtilis ВНИИгенетика-15 |выращенную на кос ках с агаром Хот- тингера, пересевают в колбы Эрленме- ера емкостью 750 мл, содержащие 50 мл питательной среды следующего состава, %: сахар 5; кукурузный экстракт 2;
Концентраци ДНКазы, мг/мл среды
Врем культивировани до выдержки, ч Брем выдержки, ч Концентраци L-трнп- тофана, г/л Суммарна концентраци сопутствующих аминокислот, в том числе:
фенилаланина
тирозина
аланина
1,57 0,50 О, 12 0,95
1,0«1СГ
52
1,0 «1048
7,05 7,00 7,00 7,00 7,00 10,00 10,40 10,60 10,70 10,70 7,80
1,50 0,48 0,12 0,90
1,56 0,50 0,11 0,95
1,54 0,52 0,12 0,90
1,54
0,50 0,11 0,93
1,83 0,50 0,13 1,20
1,12
0,40 0,0В 0,64
0,76 0,30 0,06 0,40
0,60 0,20 0,05 0,35
0,62 0,20 0,05 0,37
1,72 0,60 О, 12 1,00
КНгР04 0,06; К7НР04 0,14; вода водо- проводна остальное. рН среды довод т 40%-ным раствором NaOH до 7,4-7,6. Колбы вместе со средой предварительно стерилизуют в автоклаве в течение 40 мин при 120-121°С. После засева колбы устанавливают на круговую качалку (200-220 об/мин) и выращивают посевной материал в течение 20-24 ч при 37°С,
Посевной материал внос т в количестве 8-10% (по объему) в лабораторный ферментер Bio-Flo модель СЗО емкостью 1 л, содержащий 500 мл ферментационной среды следующего состава, %: сахар 10; MgS04-7K50 0,1; NaCl 0,05; KHUP04 0,06; К1НР04 0,14; кукурузный экстракт 2; мочевина 0,5; вода водопроводна остальное. рН среды довод т 40%-ным раствором NaOH до 7,4-7,6. Ферментационную среду без мочевины стерилизуют аналогично описанному . Раствор мочевины готов т отдельно, стерилизуют в течение 40 мин при 110-112°С и задают в ферментер перед посевом,
Режим ферментации: температура культивировани 37tl°C; скорость вращени мешалки 720 об/мин; аэраци 1 л/л мин.
Одновременно с инокул том в ферментационную среду внос т ДНКазу в количестве 1, мг/мл, По окончании процесса ферментации, когда наблюдаетс падение величины оптической плотности микробной суспензии, культуральную жидкость выдерживают в течение 6 ч при 37аС, скорости вра1 ,0 «1048
,54 ,52 ,12 90
1,54
0,50 0,11 0,93
1,83 0,50 0,13 1,20
1,12
0,40 0,0В 0,64
0,76 0,30 0,06 0,40
0,60 0,20 0,05 0,35
0,62 0,20 0,05 0,37
1,72 0,60 О, 12 1,00
щени мешалки 720 об/миц и расходе воздуха О,I л/л-мин. Концентрацию L-триптофана и сопутствующих аминокислот (аланин, фенилаланин, тирозин ) в культуральной жидкости определ ют с помощью аминокислотного анализатора.
Контролем служит процесс без использовани ДНКазы и выдержки в определенном режиме в течение 6 ч.
Добавление в среду культивировани ДНКазы в количестве 1, с последующей выдержкой культуральной жидкости в течение 6 ч в режиме пониженного аэрировани ведет к снижению суммарной концентрации сопутствующих аминокислот с 1,47 г/л в контрольном варианте до 0,6 г/л в опытном. Концентраци фенилаланина в контрольном варианте составл ет 0,43 г/л, а в опыте 0,20 г/л; концентраци тирозина снижена с 0,11 г ( контроль) до 0,05 г/л (опыт); конСпособ получени L-триптофана, предусматривающий культивирование продуцирующего его штамма Bacillus subtilis ВНИИгенетика-15 в услови х аэрировани в питательной среде, содержащей сахар, кукурузный экстракт, мочевину, воду и минеральные соли в
центраци аланина - с и,9J г/л (конт- 25 виде фосфатов кали , сульфата магни , роль) до 0,35 г/л (опыт). Выход целевого продукта - L-триптофана составл ет при этом в опытном варианте 10,7 г/л. .
30
Таким образом, внесение в среду культивировани фермента ДНКазы в концентрации 1, , QvlO 7 мг/мл с последующей выдержкой культуральной жидкости в течение 4-6 ч в режиме пониженного аэрировани способствует
35
хлорида натри , до максимального накоплени биомассы с последующим выделением целевого продукта, отличающийс тем, что, с целью повышени его качества за счет снижени концентрации сопутствующих аминокислот в культуральной жидкости, в питательную среду дополнительно ввод т дезоксирибогуклеазу в количестве -1х10 мг белка/мл среды, при этом после окончани процесса выращивани культуральную жидкость выдерживают в течение 4-6 ч.
уменьшению по сравнению с контролем концентраций сопутствующих аминокислот на 9-59% при высоком выходе L1 ,
-7
i,
|,
50
50 68
52
52
24680246802468
7,90 7,9$ /,95 7,90 7,10 7,15 7,05 7,10 7,00 7,10 7,05 7.00 7,10 7,07
0
5
0
триптофана. При изменении дозы вносимого стимул тора в услови х выдержки как в сторону уменьшени , так и в сторону увеличени не наблюдаетс снижени количества сопутствующих аминокислот в культуральной жидкости по сравнению с контролем. Внесение различных концентраций ДНКазы без последующей выдержки культуральной жидкости в режиме пониженного аэрировани также не приводит к снижению концентраций сопутствующих аминокислот .
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ получени L-триптофана, предусматривающий культивирование продуцирующего его штамма Bacillus subtilis ВНИИгенетика-15 в услови х аэрировани в питательной среде, содержащей сахар, кукурузный экстракт, мочевину, воду и минеральные соли в5 виде фосфатов кали , сульфата магни ,виде фосфатов кали , сульфата магни ,хлорида натри , до максимального накоплени биомассы с последующим выделением целевого продукта, отличающийс тем, что, с целью повышени его качества за счет снижени концентрации сопутствующих аминокислот в культуральной жидкости, в питательную среду дополнительно ввод т дезоксирибогуклеазу в количестве -1х10 мг белка/мл среды, при этом после окончани процесса выращивани культуральную жидкость выдерживают в течение 4-6 ч.О (контроль)52
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU874268147A SU1541257A1 (ru) | 1987-06-24 | 1987-06-24 | Способ получени L-триптофана |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU874268147A SU1541257A1 (ru) | 1987-06-24 | 1987-06-24 | Способ получени L-триптофана |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1541257A1 true SU1541257A1 (ru) | 1990-02-07 |
Family
ID=21313263
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU874268147A SU1541257A1 (ru) | 1987-06-24 | 1987-06-24 | Способ получени L-триптофана |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1541257A1 (ru) |
-
1987
- 1987-06-24 SU SU874268147A patent/SU1541257A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Авторское свидетельство СССР № 1206305, кл. С 12 Р 13/06, 1984. Авторское свидетельство СССР № 990814, кл. С 12 Р 13/22, 1984. . * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SU943282A1 (ru) | Способ получени L-треонина | |
| CN108841758B (zh) | 谷氨酸棒杆菌突变株及其在l-亮氨酸生产中的应用 | |
| JP3008565B2 (ja) | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 | |
| JP2008029272A (ja) | ５−アミノレブリン酸の製造方法 | |
| SU1541257A1 (ru) | Способ получени L-триптофана | |
| SU974817A1 (ru) | Способ получени L-треонина | |
| JP3074781B2 (ja) | 発酵法によるｌ−リジンの製造法 | |
| RU2245362C2 (ru) | Питательная среда для культивирования вакцинного штамма чумного микроба | |
| RU2053294C1 (ru) | Способ культивирования бифидобактерий | |
| RU2085212C1 (ru) | Способ изготовления единого бруцеллезного антигена для ра, рск и рдск | |
| SU904325A1 (ru) | Способ получени L-треонина | |
| SU1206305A1 (ru) | Способ получени @ -изолейцина | |
| CN114437970B (zh) | 高效转化谷氨酸钠的发酵剂、发酵乳及发酵乳的制备方法 | |
| SU1065475A1 (ru) | Питательна среда дл культивировани коринебактерий дифтерии | |
| CA1150654A (en) | Process for the production of citric acid | |
| JPS62289192A (ja) | アミノ酸の連続発酵生産方法 | |
| RU2241036C2 (ru) | Способ получения гамма-аминомасляной кислоты (гамк) | |
| SU515781A1 (ru) | Способ биосинтеза амидаз | |
| SU1638156A1 (ru) | Способ получени аутоактиватора роста дл культивировани ЕSснеRIснIа coLI | |
| SU1092174A1 (ru) | Способ подготовки жидкой питательной среды дл выращивани микроорганизмов | |
| SU1163636A1 (ru) | Штамм ацидофильных метилотрофных бактерий @ @ ВСБ-924-продуцент белка | |
| JPS6137092A (ja) | ユ−グレナ細胞の培養方法 | |
| JPH0347840B2 (ru) | ||
| SU1380212A1 (ru) | Способ получени L - фенилаланина | |
| SU1206306A1 (ru) | Штамм @ @ м 35-продуцент @ -триптофана на этаноле |