SU1206305A1

SU1206305A1 - Способ получени @ -изолейцина

Info

Publication number: SU1206305A1
Application number: SU843788552A
Authority: SU
Inventors: Ольга Алексеевна Решетник; Эдуард Станиславович Вернер; Дмитрий Глебович Победимский; Леонид Афанасьевич Музыченко; Замира Шамиловна Мингалеева; Галина Васильевна Ставинская; Людмила Алексеевна Хабарова; Валерий Александрович Сотников
Original assignee: Казанский Ордена Трудового Красного Знамени Химико-Технологический Институт Им.С.М.Кирова; Фрунзенский Завод Антибиотиков
Priority date: 1984-07-20
Filing date: 1984-07-20
Publication date: 1986-01-23

Description

Изобретение относитс к микробиологической промьшшенности, к производству аминокислот, а именно к способам получени L-изолейцина.

Цель изобретени - повышение выхода L-изолейцина.

Введение в качестве стимул тора роста дезоксирибонуклеазы в концентраци х , близких- к концентрации ферментов, наход щихс в живо клетке , приводит к ускорению синтеза ДНК и св занного с этим процессом делени клеток, что положительным образом сказываетс на росте и развитии клеточной попул ции микроорганизма продуцента и синтезе аминокислоты.

Пример 1. Односуточную культуру штамма Brevibacterium flayum ВНШГенетика 10-89, выращенную на кос ках с агаром Хоттингера, перемещают в колбы Эрленмейера емкостью ;750 мл, содержащие 100 мл питатель- :Ной среды следующего состава, г/л:.

Меласса 30

Кукурузный

экстракт 30 . NH4C14

I Водопроводна

водаОстальное

рН среды довод т 40%-ным раствором NaOH до 7,3-7,5.

Колбы вместе со средой предварительно стерилизуют в автоклаве при 1,0 атм в течение 40 мин.

После засева культуры колбы устанавливают на круговую качалку со скоростью 200-220 об/мин и выра- ш 1вают посевной материал 16-18 ч при 30°С.

Готовьй посевной материал внос т в количестве 6,6% (по объему) в колКонцентраци ДНК-азы, мг/мл

Концентраци

изолейцина

на 72 ч

роста, г/л 14,0 14,8 17,6 18,1

Стимул ци к контролю,

%

5,7 25,7 29,3

0

5

0

5

0

5

0

бы Эрленмейера емкостью 750 мл, со- держащие 30 мл фе1)ментационной среды, содержащей сахар кубинский, (ШЦ) 80, KHyPO HgSQj -lEtO, мел, дестибиотин, тиамин и .водопроводную воду. Ферментационную среду стерилизуют, одновременно с инокул том в ферментационную среду внос т дезокси- рибонуклеазу в концентраци х 1 10 мг/мл. Ферментацию провод т, на круговой качалке со скоростью 200-220 об/мин при 30°С в течение 72 ч. Контролем служат клетки Brevibacterium flavum 10-89, культивируемые в аналогичных услови х без добавлени дезоксирибонуклеазы.

. Содержание L-изолейцина в культу- ральной жидкости определ ют методом тонкослойной хроматографии на пластинах Silufol после разгонки в течение 40 мин в системе растворителей: изопропанол, ацетон,. 28%-ный водный раствор аммиака, вода в соотношении 50:50:12,8, и обработки 1%-ным раст- .вором нингидрина в ацетоне.

Полученные данные приведены в таблице.

Как видно из таблицы, оптимальными вл ютс концентрации дезоксирибонуклеазы 1 10 -1 Ю мг/мл ере- ды. При внесении в ферментационную среду стимул тора в зтих концентраци х наблюдаетс увеличение концентрации L-из олейцина на 25-29% по сравнению с контролем, по сравнению с известным способом наблюдаетс увеличение выхода аминокислоты на 3,9 г/л (по известному-способу получено 14,5 г/л L-изолейцина, по предлагаемому 18,1 г/л).

14,6

14,0

4,3

Концентраци ДНК-азы, мг/мп

0,0856 0,0832 0,0874 0,0922

4,1

1,2

6,3 12,3

16,1 17,6 18,9

5,2 15,7 23,5

Поодолжение таблицы

0,0863 0,0822

6,3 12,3

5,03

16,3

15,3

6,5

Claims

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-ИЗОЛЕЙЦИНА путем культивирования продуцирующих его микроорганизмов Brevibacterium blavum в условиях аэрации на питательной среде, содержащей 7 углеводы, источник азота, минеральные соли и стимулятор роста, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода L-изолейцина, в качестве стимулятора роста используют дезоксирибонуклеазу.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что дезоксирибонуклеазу вносят в питательную среду в » количестве 1 10~ -1-10 мг/мл.

1 1206305