SU1514765A1

SU1514765A1 - Способ получения питательной среды для выращивания дрожжей

Info

Publication number: SU1514765A1
Application number: SU874256237A
Authority: SU
Inventors: Stepan S Kostyshin; Feliks S Moshkovich; Polina L Naumchuk; Pavel I Taran; Aleksandr F Batsura; Vadim S Koval
Original assignee: Univ Chernovitskij G
Priority date: 1987-06-02
Filing date: 1987-06-02
Publication date: 1989-10-15

Description

Изобретение относится к промышленной микробиологии и может быть использовано для получения питательной среды для выращивания дрожжей. Целью изобретения является увеличение выхода биомассы дрожжей. Способ заключается в том, что соевую сыворотку предварительно подкисляют до рН 2,02,2, гидролизуют пепсином в течение 1,5-2,0 ч при соотношении пепсина и белка сои, равном 1:100. 1 табл.,

1 ил.

Изобретение относится к промышленной микробиологии и может быть ис-’·' пользовано для получения питательной среды для производства дрожжей.

Цель изобретения - повышение питательной ценности среды и тем самьпи увеличение выхода биомассы дрожжей.

Способ заключается в том, что осуществляют гидролиз соевой сыворотки, являющейся побочный продуктом производства белка из сои и имеющей следующий компонентный сос Сухие вещества Редуцирующие сахара

Олигосахариды

Белки

Небелковый азот Свободные аминокислоты

Общий фосфор Органические кислоты

в, мае.4: 2,0-2,5

0,1-0,2 0,5-0,9 0,3-0,5

(1,5-3,0) Ю'²

(6,5-15,1)10'²0,01-0,03

0,07-0,08

Витамин РР (6-8)10'⁵

Биотин (9-11)10 ^Г

Микроэлементы (2-3)10*⁵

Вода Остальное

Поскольку сыворотку в дальнейшем

подвергают ферментативному гидролиз пепсином, последнюю предварительно подкисляют до рН 2,0-2,2. Низкие значения рН позволяют на этапе ферментации избежать заражение среды посторонними микроорганизмами. Для гидролиза используют пепсин.

Гидролиз проводят в термостатируемой емкости при 30°С, постоянном перемешивании в течение 1,5-2,0 ч. Концентрацию фермента выбирают в соответствии со средним количеством белка в сыворотке в отношении по массе фермент: белок, равном 1:100. Так как интенсивный рост дрожжей происходит при рН 4,2-4,5 гидролизат сыворотки подщелачивают до указанного рН. Состав среды следующий, мас.%:

1514765 А1

3

•1514 765

4

Белок 0, 10-0,15

Небелковый азот 0,06-0,07

(включая азот свободных аминокислот)

Количество всех остальных компонентов сыворотки практически не меняется.

Среду стерилизуют в автоклаве 20 мин и после охлаждения до 30°С вносят стерильно суспензию дрожжей 5ассЬаготусез сегечгзгае (Л_7О,, Л_7О8, Л_тгз, Л_Т2в). Экспоненциальная фаза роста наблюдается в интервале 10 40 ч внесения дрожжей. Выход дрожжей составляет 602. Для сравнения проводят выращивание дрожжей на чистой сыворотке без проведения гидролиза. Скорость роста дрожжей в первые 1040 ч в 6-10 раз меньше.

На чертеже представлен график изменения оптической плотности ϋ (пропорциональна количеству дрожжей), измеренной на фотоколориметре КФК-2 при -540 нм и толщине слоя жидкости в кювете 0,5 см, во времени для различных соотношений концентраций пепсина и белка сыворотки: кривая 1 - соотношение 0} кривая 2 - соотношение. 1: :200; кривая 3 - соотношение 1:100; кривая 4 - соотношение 1:50; кривая 5 - соотношение 1:30} кривая 6 - соотношение 1:20} кривая 7 - соотношение 1:10.

Как видно из приведенных графических данных, наиболее целесообразно использовать соотношение пепсина и белка сои 1:100,

Для определения необходимого времени ферментации при соотношении фермент: белок, равном 1:100, проводят экспериментальное исследование, результаты которого представлены в таблице. Как видно из таблицы оптимальным временем гидролиза является 1,52 ч.

Проводят эксперименты по ферментативному гидролизу сыворотки с помощью трипсина, Б-химитрипсина и папаина, которые не приводят к обогащению сыворотки, достаточному для ис10

15

20

25

40

30

35

45

пользования последней в качестве питательной микробиологической среды.

Пример. Для приготовления питательной среды для культивирования дрожжей соевую сыворотку обрабатывают пепсином при рН 2,и, нагрева/ют до 95—100°С в течение 10 мин, центрифугируют и отделяют денатурированный белок. Затем доводят рН до 4,2 4,4, стерилизуют среду в автоклаве ,20 мин и после охлаждения до 30°С в полученный прозрачный раствор вносят стерильно суспензию дрожжей (^0,7 млн. клеток на 10 мл. среды) ЗассЬагошусез сегечгзгае Л-л»'. Культивирование проводят при непрерывном встряхивании смеси объемом 500 мл в термостате при оптимальной для роста дрожжей температуре 30°С в течение 24 ч.

При культивировании дрожжей по указанному способу на негидролизованной соевой сыворотке выход составляет не более 202 от сухого вещества сыворотки, а при использовании гидролизата, полученного в оптимальных условиях проведения ферментативного гидролиза (рН 2,0, время 2 ч, соотношение 1:100, температура 30 С) - до 602.

Таким образом, предлагаемый способ по сравнению с известным позволяет увеличить выход биомассы на 102.

Claims

Формула изобретения

Способ получения питательной среды для выращивания дрожжей, предусматривающий гидролиз соевой сыворотки, подщелачивание гидролизата и стерилизацию полученной питательной среды, отличающийся тем, что, с целью повышения питательной ценности среды и тем самым увеличения выхода дрожжей, соевую сыворотку подкисляют до рН 2,0-2,2 и гидролизуют пепсином в течение 1,5-2,0 ч при соотношении пепсин:белок сои, равном 1:100.

50

5

1 ^Γ,1ώ /6 5

6

Зависимость свойств гидролизата соевой сыворотки от времени ферментации

Параметр Время гидролиза сыворотки, ч 0 1 1,5 | 2 | 4 1 ’° I - Содержание небелко вого азота, % 0,40 0,052 0,071 0,073 0,075 0.078 0,081 Содержание белка,Я 0,41 0,32 0,21 0,20 0,19 0,17 0,15 Оптическая плот- ность раствора че- рез 24 ч после вне сения дрожжей, ед. 0,08 0,27 0,38 0,42 0,42 0,43 0,43