RU2078812C1 - Способ получения азотсодержащего компонента питательной среды - Google Patents
Способ получения азотсодержащего компонента питательной среды Download PDFInfo
- Publication number
- RU2078812C1 RU2078812C1 RU94024619A RU94024619A RU2078812C1 RU 2078812 C1 RU2078812 C1 RU 2078812C1 RU 94024619 A RU94024619 A RU 94024619A RU 94024619 A RU94024619 A RU 94024619A RU 2078812 C1 RU2078812 C1 RU 2078812C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- nitrogen
- preparing
- nutrient medium
- containing component
- medium
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
Использование: в биотехнологии при производстве препаратов и сред для выращивания микроорганизмов. Сущность изобретения: проводят термическую обработку биомассы Bacillus mucilaginosus при 95-105oC, охлаждают и ведут гидролиз 0,1% панкреатином в течение 2-х суток при 43-46oC.3 табл.
Description
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к препаратам и средам для выращивания и диагностирования микроорганизмов.
Известно использование в качестве биостимуляторов для питательных сред различных природных и синтетических препаратов, таких как витамины, полифенилены, добавки растительных вытяжек и т.д.[1]
Недостатком большинства биостимуляторов является их высокая стоимость, видеоспецифичность действия, возможность проявления мутагенных свойств, вызываемая чужеродность стимулятора микроорганизму.
Недостатком большинства биостимуляторов является их высокая стоимость, видеоспецифичность действия, возможность проявления мутагенных свойств, вызываемая чужеродность стимулятора микроорганизму.
Известен препарат неопределенной природы, получаемый из культуральной жидкости бактерий, в частности E. coli, после воздействия на бактериальные клетки стрессовых факторов [2]
Недостатком является высокая специфичность действия.
Недостатком является высокая специфичность действия.
В качестве источников азота для питательных сред чаще всего используют пептоны, в частности пептон Д [3] получаемый экстрагированием кормовых дрожжей, гидролизат кильки и др.[4,5]
Недостатками указанных гидролизатов является низкое содержание аминного и общего азота (2-3 и 7-8% соответственно).
Недостатками указанных гидролизатов является низкое содержание аминного и общего азота (2-3 и 7-8% соответственно).
Прототипом изобретения, связанного с получением компонента питательных сред, является процесс получения источника азота двухстадийным гидролизом Bacillus mucilaginosus. Процесс ведется вначале обработкой HCl в течение 30-40 мин при 120-125oC, а затем обработкой ферментами поджелудочной железы в течение 10-14 дней при pH 7,8-8,0 и температуре 40-42oC [6]
Недостатками прототипа являются длительность процесса, нетехнологичность, недостаточная эффективность для ряда сред.
Недостатками прототипа являются длительность процесса, нетехнологичность, недостаточная эффективность для ряда сред.
Задачей, решаемой изобретением, является создание нового более эффективного и с широким спектром действия биостимулятора с технологией получения, позволяющей использовать его в качестве источника азота в питательных средах.
Задача достигнута использованием в качестве биостимулятора предварительно термостатированных продуктов ферментативного гидролиза биомассы Bacillus mucilaginosus/ФГ Bac. mucilaginosus/
Продукт, который сохраняет оптимальные свойства, получают сочетанием термической обработки при 95-105oC в течение не менее 5 мин с последующей его обработкой панкреатином при 43-46oC в течение по крайней мере двух суток и выделением целевого препарата из смеси центрифугированием.
Продукт, который сохраняет оптимальные свойства, получают сочетанием термической обработки при 95-105oC в течение не менее 5 мин с последующей его обработкой панкреатином при 43-46oC в течение по крайней мере двух суток и выделением целевого препарата из смеси центрифугированием.
При более низких температурах первой стадии обработки не идет достаточная дезинтеграция клеток, использование более жестких режимов, не улучшая результаты процесса, ведет к ухудшению качества продукта вследствие распада компонентов /витаминов, аминокислот и т.п./.
Лучшие результаты на второй стадии обработки достигаются при проведении ферментативного гидролиза 0,1% панкреатином при pH 7,8-8,0.
В научной литературе подобные биостимуляторы не описаны, как и технология их получения.
Преимуществами получаемого таким образом препарата является повышение аминного азота с 2-3 до 7-8% а общего азота с 7-8 до 15-16% и увеличение количества биомассы в 1,5-2,0 раза.
Полученный ферментативный гидролизат культуры Bac. mucilaginosus может быть использован как биостимулятор и компонент питательных сред для выращивания различных микроорганизмов, его применение не только значительно увеличивает выход микроорганизмов при культивировании, но и сокращает количество необходимых компонентов среды, тем самым упрощает и удешевляет ее приготовление.
Промышленная применимость биостимулятора как компонента питательной среды иллюстрируется примерами.
Пример 1. К 500 г концентрата биомассы Bacillus mucilaginosus с содержанием сухих веществ 10% прибавили 500 мл дистиллированной воды. Полученную смесь довели до кипения и прокипятили 10 мин. Затем охладили до 45oC, довели pH до 7,8 25%-ным раствором аммиака, добавили 1г панкреатина, 10 мл хлороформа в качестве консерванта, поместили в термостат при 45oC на 3 суток, 3-4 раза в течение суток смесь перемешивали. По истечение 3 суток смесь центрифугировали 15 мин при 10 тыс. об/мин. Получили 0,8 л прозрачного ферментативного гидролизата, содержащего, как показал анализ, 5% сухих веществ, 350 мг% аминного азота /7% а.с.в./ и 800 мг% общего азота /16% а.с.в./.
Полученный ферментативный гидролизат хранился жидким при 5-8oC до 1 года при добавлении консерванта /например, хлороформа/ 0,1% или высушивался одним из известных способов /распылительно, лиофильно, в псевдоожиженном слое/.
Выращивание культуры E. coli BL-21 проводили в колбах объемом 250 мл на качалке при 120 об/мин. Объем среды в колбах 25 мл, объем посевного материала 1 мл, температура выращивания 37oC, pH среды 7,2, время выращивания 6,5 ч. Для приготовления сред использовали различные белковые гидролизаты /пептоны/ в концентрации 1% /10 г/л а.с.в./. Результаты эксперимента представлены в табл.1.
Пример 2. На основе полученного /по периметру 1/ ФГ Bac. mucilaginosus были приготовлены питательные среды для роста различных микроорганизмов. Так, препарат был успешно использован для замены импортного пептона в составе LB-среды для генетических исследований.
Проводили выращивание культур E. coli BL-21, Bac. micoides, Sacch. cerevisiae. Для приготовления контрольных питательных сред использовали наиболее эффективный пептон фирмы Serva. Среднестатические результаты серий опытов и условия культивирования представлены в табл.2 и 3. В качестве посевной среды использовали контрольные среды.
Claims (1)
- Способ получения азотосодержащего компонента питательной среды, предусматривающий термическую обработку в водной среде биомассы Bacillus mucilaginosus, охлаждение и ферментный гидролиз при pH 7,8 8,0, отличающийся тем, что термическую обработку ведут при 95 105oC не менее 5 мин, а ферментативный гидролиз ведут 0,1% ным панкреатином в течение двух суток при 43 46oC.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU94024619A RU2078812C1 (ru) | 1994-06-30 | 1994-06-30 | Способ получения азотсодержащего компонента питательной среды |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU94024619A RU2078812C1 (ru) | 1994-06-30 | 1994-06-30 | Способ получения азотсодержащего компонента питательной среды |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU94024619A RU94024619A (ru) | 1996-07-20 |
RU2078812C1 true RU2078812C1 (ru) | 1997-05-10 |
Family
ID=20157921
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU94024619A RU2078812C1 (ru) | 1994-06-30 | 1994-06-30 | Способ получения азотсодержащего компонента питательной среды |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2078812C1 (ru) |
-
1994
- 1994-06-30 RU RU94024619A patent/RU2078812C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Авторское свидетельство СССР N 1280007, кл. С 12 N 1/20, С 12 Р 21/00, 1986. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU94024619A (ru) | 1996-07-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN110551661B (zh) | 一株贝莱斯芽孢杆菌LfF-1菌株及其在生产蛋白酶中的应用 | |
US3932671A (en) | Process for producing protein hydrolyzate | |
Koser et al. | Studies on bacterial nutrition: the utilization of nitrogenous compounds of definite chemical composition | |
WO2001005997A9 (en) | Method for production of tetanus toxin using media substantially free of animal products | |
CA1193992A (en) | Preparation of optically pure d- and l- lactic acid | |
DE2313546A1 (de) | Mikrobielle protease und verfahren zu ihrer herstellung | |
RU2078812C1 (ru) | Способ получения азотсодержащего компонента питательной среды | |
JP2006333847A (ja) | L−乳酸生産菌およびl−乳酸液製造方法 | |
SU1514765A1 (ru) | Способ получения питательной среды для выращивания дрожжей | |
SU539538A3 (ru) | Способ получени метаболита "а 27 106 | |
US3345269A (en) | Process for the production of proteolytic enzymes | |
RU2303066C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus licheniformis-продуцент щелочной протеазы | |
JPH0783706B2 (ja) | 酒類の品質改良法 | |
RU2158302C2 (ru) | Питательная среда для роста бифидо- и лактобактерий | |
JPS6391076A (ja) | 3種菌の培養法 | |
JP2003079363A (ja) | 低濁性醤油乳酸菌の分離用培地、同培地を用いる低濁性醤油乳酸菌の分離法及び同乳酸菌を用いる清澄度の高い醤油の製造法 | |
RU2160992C1 (ru) | Сухой биопрепарат и способ его получения | |
US3843445A (en) | Asparaginase production | |
RU2303630C1 (ru) | Питательная среда плотная для культивирования холерного вибриона | |
RU2103349C1 (ru) | Способ обогащения растительного сырья микробным белком | |
KR0155452B1 (ko) | 맥주효모를 이용한 미생물 배양용 배지 제조방법 | |
RU2276188C2 (ru) | Питательная среда для культивирования гетеротрофных бактерий | |
Samoylenko et al. | Development of pilot-scale production of dry bacterial starter cultures for intensive manufacture of high quality meat products | |
DD200432A1 (de) | Verfahren zur herstellung eines proteolytischen enzym-praeparates | |
SU1111723A1 (ru) | Способ получени белкового гидролизата эритроцитарной массы |