SK74495A3 - Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters with bioactive polypeptides and a method of preparation thereof - Google Patents

Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters with bioactive polypeptides and a method of preparation thereof Download PDF

Info

Publication number
SK74495A3
SK74495A3 SK744-95A SK74495A SK74495A3 SK 74495 A3 SK74495 A3 SK 74495A3 SK 74495 A SK74495 A SK 74495A SK 74495 A3 SK74495 A3 SK 74495A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
polyester
acid
polypeptide
composition
ionic
Prior art date
Application number
SK744-95A
Other languages
English (en)
Inventor
Shalaby W Shalaby
Steven A Jackson
Jacques-Pierre Moreau
Original Assignee
Kinerton Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kinerton Ltd filed Critical Kinerton Ltd
Publication of SK74495A3 publication Critical patent/SK74495A3/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/23—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH]; Related peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/593—Polyesters, e.g. PLGA or polylactide-co-glycolide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/655—Somatostatins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Biological Depolymerization Polymers (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Oblasť techniky
Predkladaný vynález sa týka protrahovaného uvoľňovania bioaktívnych polypeptidov.
»
DoteraiSí btav techniky
Existuje už rad liekových dávkových systémov testovaných a využívaných na riadené uvoľňovanie farmaceutických prípravkov in vivo. Napríklad polyestery ako poly(kyselina DL-mliečna), poly(kyselina glykolová), poly(epsilon-kaprolaktón) aj rôzne iné kopolyméry boli používané na uvoľňovanie biologicky aktívnych molekúl ako je progesterón; vo forme mikrokapBuliek, filmov alebo tyčiniek (Pitt CG, Marka TA, Schnidler A, 1980). Po implantácii prípravku polymér/terapeutické činidlo , napr.subkutánnej alebo intramuskulárnej, dochádza po určitom danom obodobí k uvoľňovaniu terapeutického činidla. Takéto biokompaktibilné biodegradabiIné polymérne systémy dovoľujú fixovnanému * terapeutickému činidlu diíundovať z polymérnej matrice.
Počas uvoľňovania teraputického činidla dochádza k in vivo * degradácii polyméru a vďaka tomu nie je nutné implantát odstraňovať chirurgicky. Napriek tomu, že stále eSte nerozumieme dobre faktorom, ktoré prispievajú k degradácii polyméru, dá sa predpokladať, že degradácia polyesterov je ovplyvnená prístupnosťou esterových väzieb pre neenzymatickú autokatalytickú hydrolýzu polymérnych zložiek.
Plánovanie Štruktúry polymérnych častíc a ich vplyvu na rýchlosť a rozsah uvoľňovania terapeutických činidiel in vivo bol venovaný rad publikácií EPO a US Patentov.
Napríklad Deluca (EPO Publikácia 0 467 389 A2/Univ of Kentucky) popisuje fyzikálne .interakcie medzi hydrofóbnym biodegradilným polymérom a proteínom alebo polypeptidom.
Vytvorený prírpavok bola zmes terapeutického činidla a hydrofóbneho polyméru, ktorý vykazoval po aplikácii protrahované difúzne uvoľňovanie účinnej zložky z matrice.
Hutchinson (US Patnet 4 767 628/ICI) riadil uvoľňovanie terapeutického činidla uniformným dispergovaním čindla v polymérnom nosiči. Bolo konštatované, že riadené kontinuálne uvoľňovanie v tomto prípravku má dve fázy: 1) uvoľňovanie liečiva z povrchu prípravku závislé od difúzie; 2) uvoľňovanie cez hydratačné kanáliky vznikajúce pri degradácii polyméru.
Podstata vynálezu
Predkladaný vynález sa týka farmaceutického prípravku s protrahovaným uvoľňovaním, zloženého z polyesteru obsahujúceho jednu alebo viac karboxylových skupín iónovo konjugovaných s biologicky aktívnym polypeptidom majúcim aspoň jednu účinnú iónogénnu aminoskupinu, v ktorom je aspoň 50 % hmôt. polypeptidu prítomného v prípravku iónovo konjugovaného k polyesteru.
Vo výhodnom uskutočnení vynálezu je polyester modifikovaný tak, aby pomer karboxylových ku hydroxylovým koncovým skupinám bol vySäí ako jedna a blížil sa k nekonečnu, tj. aby väetyk hydroxylové skupiny boli substituované karboxylovými. Vhodné polyestery sú napríklad polyestery vycházdajúce z látok ako je kyselina L-mliečna, D-mliečna, DL-mliečna, epsilon-kaprolaktón, p-dioxanón, kyselina epsilon-kaprónová, substituované a nesubstituované trimetyl karbonáty, 1.5-dioxepán-2-ón, glykolid, kyselina glykolová, L-laktid, D-laktid, DL-laktid, mezo-latid.
alkylén oxalát, cykloalkylén oxalát, alkylén sukcinát, (0-hydroxybutyrátä, a opticky aktívne izoméry, racemáty alebo kopolyméry akéhokoľvek z vyššie uvedených zlúčenín. Dajú sa použiť aj iné heteroreťazcové polyméry príbuzné tradičným polyesterom (napr. polyortoestery, polyortokarbonáty a polyacetáty).
Výhodne sa dá polyester so zvýšeným obsahom karboxylových skupín pripraviť reakciou s kyselinou jablčná alebo citrónovou.
Vo výhodnom uskutočnení vynálezu je polyester čiastočne acid-tipped (tj. modifikovaný, aby obsahoval voľné karboxylové Bkupiny) anhydridom kyseliny glutárovej. Podľa iného uskutočnenia je polyester úplne acid-tipped anhydridom kyseliny glutárovej. Je výhodné, ak má polyester priemerne stupeň polymerizácie medzi 1O a 300, výhodnejšie medzi 20 a 50.
Iónové molekulárne konjugáty predkladaného vynálezu sú výhodne pripravované z polykarboxylových acid-tipped polyesterov konjugáciou s monobazickými a polybazickými biologicky aktívnymi polypeptidmi majúcimi aspoň jednu účinnú ionogénnu aminoskupinu. Alternatívne sa dá pre tovrbu molekulárneho konjugátu predkladaného vynálezu použiť ľubovoľný polyester s podmienkou, že dopredu reagoval s vhodnou bázou, napr. NaOH. Ako peptidická zložka sa dá použiť ľubovoľný acidostabilný peptid, ako je napr. peptid uvoľňujúci rastový hormón (GHRP), lutenizačný hormón (LHRP), somatostatín, bombesín, peptid uvoľňujúci gastrín (GRP), kalcitonín, bradykinín, galantín, hornón stimulujúci melanocyty (MSH), faktor uvoľňujúci rastový hormón (GRF), amylín, tachykiníny, sekretín, parathormón (PTH), enkefalín, endotelín, peptid spúšťajúci kalcitoninový gén (DGRP), neuromedíny, proteín príbuzný parathormónu (PTHrP), glukagón, neurotenzín, adrenokortikotropný hornón (ACTH), peptid YY (PYY), peptid uvoľňujúci glukagón (GLP), vazoaktívny intestinálny peptid (VIP), peptid aktivujúci hypofyzárnu adenylátcyklázu (PACAP), motilín, substancia P, neuropeptid Y (NPY), TSH a analóg a fragmenty uvedených látok. Iónové molekulárne konjugáty bú schopné uvoľňovať bioaktívne zložky in vivo dopredu určenou rýchlosťou danou chemickou Štruktúrou, molekulovou hmotnosťou a pKa obidvoch konjugátov. Mechanizmus uvoľňovania liečiva zahrnuje premenu nerozpustnej konjugopvanej formy na zložky rozsputné vo vode čiastočne vplyvom hydrolýzy hydrofóbneho polyeBteru. Takže uvoľňovanie polypeptidu sa nezávisle zvySuje s (a) znižujúcim sa rozdielom medzi pKa bioaktívneho polypeptidu a polyesteru, (b) chemickou reaktivitou polyesterového reťazca, ktorá je odrazom nukleofility karbonylov, (c) znižujúcou sa hustotou polyesteru, ktorá ovplyvňuje teplotu skleného prechodu a minimalizuje schopnosť kryštalizácie, a (d) rastúcou hydrofilitou matrice.
Vo výhodnom uskutočnení vynálezu tvorí polypeptid 1 až 50 X hmôt, celkovej hmotnosti konjugátu, a výhodne viac ako 85 X hmôt., výhodnejšie viac ako 95 X a najvýhodnejšie viac ako 99 X hmôt, polypeptidu prítomného v prípravku je iónovo konjugovaných s polyesterom; polyesterová zložka iónového molekulového konjugátu má viskozitu 0,05 až 0,7 dl/g v chlóroíorme; a priemerná molekulová hmotnosť polyesteru je 1 200 až 40 000.
Z polymérnych predkladaného vynálezu mikrotelieska alebo iónových molekulárnych konjugátov sa dajú ľahko vytvoriť injekovateľné mirkočastice, implantovateľné filmy alebo tyčinky.
bez nutnosti použiť postup vyžadujúci ipultifázové emulzie alebo nevodné dvojfázové systémy. Je výhodné.
ak sa dajú mi kročast i ce vytvoriť (a) rozpustením prípravku v aprotickom rozpúšťadle mieSateľnom s vodou, (b) mixovaním organického rozpúšťadla s vodou a (c) izoláciou mikročastíc z vody. Podľa výhodného uskutočnenia vynálezu sa dá vhodné rozpúšťadlo voliť zo skupiny acetón, acetonitril, tetrahydrofurán, dimety1 formamid a dimetoxyetylénglykol.
Podľa výhodného uskutočnenia vynálezu je iónový molekulárny konjugát polyester/polypeptid schopný uvoľňovať in vivo terapeuticky účinné dávky bioaktívneho polypeptidu počas najmenej 20 dní, výhodnejšie 95 dní ale nie menej ako 7 dní. Podľa výhodného uskutočnenia vynálezu dochádza k uvoľňovaniu z iónového molekulového konjugátu výhradne monoíázovo.
Protrahované uvoľňovanie z prípravku predkladaného vynálezu je spôsobené predovšetkým (a) prítomnosťou voľných karboxylových skupín na polyesteri a prítomnosťou aspoň jednej účinnej iónogénnej aminoskupiny na bioaktívnom polypeptide a (b) iónovou konjugáciou polyesteru s polypeptidom za vzniku iónového molekulárneho konjugátu, v ktorom je najmenej 85 % hmôt. polypeptidu prítomného v konjugáte iónovo konjugovaných s polyesterom. Východiskový polyester má mať dostatočné množstvo voľných karboxylových skupín, alebo ak neobsahuje dostatočné množstvo voľných karboxylových skupín k požadovanému množstvu naviazaného ppolypeptidu, dá sa polyester modifikovať (1) reakciou s napr. kyselinou jablčnou alebo citrónovou pomocou esteriíikácie alebo funkčnej výmeny, alebo (2) tvorbou aicd-tipped polyesteru reakciou s anhydridom kyseliny glutárovej alebo (3) reakciou polyesteru s bázou, napr.
NaOH, vedúcou k uvoľneniu kyslých skupín. Napokon sa dajú z iónového molekulárneho konjugátu polyester/polypeptid vytvoriť implantovateľné filmy alebo tyčinky alebo injekovateľné mikrotelieska schopné uvoľňovať polypeptid in vivo.
Polyester sa dá výhodne syntetizovať pomocou katalytickej alebo autokatalytickej kondenzácie jednej alebo viacerých hydroxykyselín, napr. kyseliny glykolovej a mliečnej, v prostredí dopredu stanovenej koncentrácie polykarboxylovéj hydroxykyseliny, napr. jablčnej alebo citrónovej. Takto pripravené polyestery nesú hydroxylové skupiny, ktoré sú čiastočne alebo úplne acid-tipped, tj. sú na nich naviazané uskúpenia nesúce karboxylové skupiny.
Polyestery sa dajú tiež syntetizovať katalytickou polymerizáciou laktónov prebiehajúcou s otvorením kruhu, alebo polymerizáciou cyklických monomérov ako je epsilon-kaprolaktón, p-dioxanón, trimetylén karbonát, 1.5-dioxepán-2-ón, 1.4-dioxepán-2-ón v prítomnosti iniciátora reťazca, napr. polykarboxylovéj hydroxykyseliny.
Iný postup syntézy spočíva v reakcii hydroxykyseliny s cyklickým dimérom s následnej kondenzácii otvoreného reťazcového systému v prítomnosti polykarboxylovéj kyseliny.
Ďalší možný syntetický postup zahrnuje reakciu organickej polykarboxylovéj kyseliny s dopredu pripraveným polyesterom.
Podľa vyššie uvedeného výhodného uskutočnenia vynálezu je pomer karboxylových skupín k hydroxylovým v acid-tipped polyesteri vyšší ako jedna a blížiaci sa nekonečnu, tj. všetky hydroxylové skupiny sú eliminované, priemerný stupeň polymerizácie sa pohybuje medzi 10 a 300, výhodne 20 a 50.
Alterantívne Ba dá polyester uspôsobiť k väzbe polypeptidu reakciou s bázou, napr. NaOH.
Je výhodné, ak je iónový molekulárny konjugát polyester/polypeptid syntetizovaný priamou interakciou medzi polyesterom, napr. vo voľnej forme, a polypeptidom, napr. vo voľnej forme, vo vhodnom kvapalnom prostredí. Podľa výhodného uskutočnenia vynálezu je vhodným prostredím pre tvorbu konjugátu zmes aprotického rozpúšťadla [napr. acetón, tetrahydrofurán (THF), dimetoxyetylénglykol] s rozpúšťadlom vhodným pre polypeptid (napr. voda) v mieäateľnom pomere. Výhodne je polypeptid vo forme soli monokarboxylovej kyseliny s pKa vyšším alebo rovným 3.5. Výhodne má polypeptid najmenej jednu účinnú iónogennú aminoskupinu.
Vo výhodnom uskutočnení vynálezu tvorí polypeptid 1 až 50 36 hmôt. . výhodne 10 až 20 36 hmôt. , celkovej hmotnosti iónového molekulárneho konjugátu polyester/polypeptid. Vo výhodnom uskutočnení vynálezu sú prístupné karboxylové skupiny čiastočne neutrálizované iónmi alkalických kovov alebo organických báz. V ďalšom vynálezu vedie reakcia s alkáliou polyesteru a tvorbe väzbových miest výhodnom uskutočnení k disociácii reťazcov s nižšou molekulovou hmotnosťou.
Tu používaný výraz polypeptid zahrnuje proteín, peptid, oligopeptid alebo syntetický oligopeptid.
Tu používaný výraz polykarboxylový sa týka zlúčenín nesúcich viac ako jednu karboxylovú skupinu, napr. kyselina jablčná a citrónová.
Tu používaný výraz priemerný stupeň polymerizácie predstavuje počet opakujúcich sa sekvencií monomérov.
Tu používaný výraz účinná iónogénna aminoskupina sa týka polypeptidu, ktorý nesie najmenej jednu aminoskupinu schopnú v podmienkach prostredia vytvoriť ión.
Tu používaný výraz acid-tipped znamená, že zlúčeniny nesú kyslú koncovú skupinu.
Tu používaný výraz čiastočne acid-tipped znamená, že zlúčeniny majú svoje hydroxylové skupiny z 1 až 99 % acid-tipped (tj. sú na ne naviazané uskupenia nesúce karboxylové skupiny.
Tu používaný výraz úplne acid-tipped znamená, že zlúčeniny majú svoje hydroxylové skupiny z viac ako 99.9 36 acid-tipped (tj. sú na ne naviazané uskupenia nesúce karboxylové skupiny).
Tu používaný výraz hydroxykyselina sa vzťahuje na ľubovoľnú zlúčeninu nesúcu súčasne karboxylovú aj hydroxylovú skupinu.
Tu používaný výraz monokarboxylová hydroxykyselina sa vzťahuje na organickú kyselinu s jednou karboxylovou a Λ viacerými hydroxylovými skupinami.
Tu používaný výraz polykarboxylová hydroxykyselina sa vzťahuje na orgnickú kyselinu s viacerými karboxylovými aj hydroxylovými skupinami.
Tu používaný výraz organický entrainer charakterizuje organické kyxeliny, ktoré kodestilujú b vodnou parou.
Tu používaný výraz “bioaktívny charakterizuje molekulu, ktorá vyvoláva alebo ovplyvňuje biologické deje.
Tu používaný výraz acyklizácia charakterizuje chemickú reakciu prebiehajúcu s otvorením kruhu.
Tu používaný výraz polykondenzácia charakterizuje tvorbu polyesteru kondenzáciou dvoch a viacerých molekúl.
Predkladaný vynález poskytuje nový farmaceutický prípravok, ktorý viaže chemickou väzbou bi©kompatibilný biodegradabilnýé polyester s oligopeptidmi, polypeptidmi, peptidmi alebo proteínmi za vzniku homogénej iónovej zlúčeniny. Vďaka chemickému naviazaniu polyesterov s rôznymi molekulovými hmotnosťami k terapeutickým činidlám sa dajú lepéie prispôsobiť chemické charakteristiky prípravkov požiadavkám riadeného uvoľňovania biologicky aktívnej polypeptidovej molekuly in vivo. Prípravky predkladaného vynálezu sa dajú ľahko optimalizovať z hľadiska možnosti naviazania vySSieho množstva terapeuticky účinného polypeptidu.
DalSie črty a prednosti vynálezu sú zrejmé z nasledujúceho podrobného popisu výhodných uskutočnení vynálezu a z patentových nárokov.
Stručný popis obrázkov
Obr. 1 znázorňuje izoméry polykarboxylového acid-tipped kopolyméru laktid/glykolid (jablčného typu).
Obr. 2 znázorňuje chemické interakcie medzi iónovým molekulárnym konjugátom kopolyméru laktid/glykolid (jablčného tpyu) a Somatostatínom (BIM-23014).
Obr. 3 znázorňuje graf priebehu uvoľňovania peptidu (v percentách ) z iónového molekulárneho konjugátu do PBS pufra pri 37 °C počas 28 dní.
Popis výhodných uskutočnení vynálezu
Syntéza
Biodegradabilné alebo absorbovaťeľné polyesterry predkladaného vynálezu boli uspOsobené z hľadiska chemickej reaktivty tak, aby umožňovali riadenú hydrolyzovateľnosť a vykazovali maximum väzbovej kapacity k oligopeptidom, polypeptidom alebo proteínom, ktoré nesú kladný náboj pri fyziologickom pH. Tieto vlastnosti polyesterov boli dosiahnuté pomocou starostlivého výberu monomérov, co-monomérov alebo comérov určených na tvorbu reťazcov s dopredu určeným zložením a molekulovými hmotnosťami (pozri napr. obr. 2).
Syntetický plán prípravy prípravkov predkladného vynálezu je prístrupný odborníkom v tejto oblsti techniky a zahrnuje tri hlavné stupne:
(1) syntéza polykarboxylových acid-tipped polyesterov, (2) syntéza iónového konjugátu polyester/polypeptid iónovou interakciou medzi polykaarboxylovým acid-tipped polyesterom (alebo polyesterom upraveným reakciou s bázou) a biologicky aktívnymi polypeptidmi a (3) tvorba implantátov, tyčiniek, mikroteliesok alebo mikročastíc schopných in vivo uvoľňovať terapeutické činidlo počas najmenej 7 dní z iónových konjugátov.
(1) Syntéza polykarboxylových acid-tipped polyesterov
Polykarboxylové “acid-tipped polyesterové reťazce predkladaného vynálezu sa dajú syntetizovať pomocou postupov priamej kondenzácie 2-hydroxykyseliny a polykarboxylovéj organickej kyseliny, poetupnej polymerizácie acykllizovaných produktov, polymérizcáie laktónov alebo zmesi laktónov prebiehajúcej s otváraním kruhu, alebo funkčnej výmeny polykarboxylovéj organickej kyseliny s vysokomolekulárnymi polyestermi (pozri obr. 1). Nasleduje popis syntézy polykarboxylového acid-tipped polyesteru pomocou vyššie uvedených postupov.
Priama kondenzácia 2-hydroxykyselín v opticky aktívnej a/alebo inaktívenj forme a dopredu určeného množstva polykarboxylovéj organickej kyseliny za prítomnosti alebo neprítomnosti anorganického alebo organokovového katalyzátora; napr. kondenzácia kyseliny glykolovej, kyseliny DL-mliečnej a DL-jablčnej, sa obvykle uskutočňuje zahriatím monokarboxylovej hydroxykyseliny alebo zmesou dvoch aj viacerých monokarboxylových hydroxykyselín v prítomnosti určitého množstva polykarboxylovej hydroxykyseliny pre kontinuálny v sklenenom reaktore vybavenom zariadením prietok suchého dusíka a účinným miešadlom (navrhnutý typ IA Polyester, pozri tabuľka 1). Typicky sa polykondenzácia uskutočňuje pri 150 ať 170 ®C počas 4 až 72 hodín. Miešanie reakčnej zmesi sa dá uskutočňovať magneticky alebo prebublávaním dusíka cez polyesterovou reakčnú zmes.
Polymerizácia prebieha až do plánovanej molekulovej hmotnosti, stanovovanej'viskozitou roztoku a/alebo Číslom kyslosti (stanoveným titráciou koncových skupín).
Analýza polyesteru titráciou koncových skupín: vzorky polyesteru (300-500 mg) boli presne zvážené a rozpustené v minimálnom množstve (10-30 ml) acetónu. Po rozpustení boli vzorky zriedené na 100 ml benzylalkoholom (Mallinckrodt, Analytical Reagent) a titrované do slaboružového zafarbenia (fenolftalínom) roztokom hydroxidu draselného v benzylalkohole (normalizovaný roztok oproti HCI Štandardu). Stanovenie čísla kyslosti polyesteru vychádzalo z porovnania objemu roztoku bázy spotrebovaného na vzorku (delta Vs) a objemu roztoku bázy spotrebovaného na čisté rozpúšťadlo (delta Vo).
hmotnosť vzorky (mg) číbIo kyslosti = {delta Vs(ml) - delta Vo(ml)} x N bázy
Po skončení polymerizácie bol polyester izolovaný a extrahovaný vodou alebo zriedeným vodným roztokom hydroxidu sodného z vhodného organického roztoku, aby sa odstránili nízkomolekulárne reťazce rozpustné alebo rozpustiteľné vo vode.
Analýza polyesteru pomocou GCP: priemerné molekulové hmotnosti (m.h.) polyesteru boli stanovené pomocou GCP na prístroji skladajúcom sa z pumpy dodávajúcej rozpúšťadlá Waters Model 6000 a detektora Dynamax (Rainin) model UV-D. Jednotlivé merania boli uskutočňované v tetrahydrofuráne (Burkick & Jackson UV drade) na kolóne 500 x 10 mm (Jordi Associates) plnenej Joridn Gel DVB 1000 A, pri prietoku 1,2 ml/min a 25 °C. Piky boli detekované pri 220 nm s 1,0 AUFS. Kolóna bola kalibrovaná použitím referenčných polystyrénových štandardov vytvárajúcich úzke pásy (Polyscience Inc.) s m.h. = 4000, 9 200 a 25 000.
Priebeh priamej kondenzácie sa dá ovplyvňovať použitím organického entraineru (tj. organická kvapalina, ktorá kodestiluje s vodnou parou) a katexovanej živice ako katalyzátora kondenzácie (navrhnutý typ IB Polyester, pozri tabuľka 1). Odstránenie katalyzátora a entraineru v tomto postupe vyžaduje filtráciu a odparenie. Konkrétne príklady polyesterov pripravených týmto postupom a príslušné analytické údaje sú uvedené v tabuľke 1.
Tabuľka 1 : Priama kondenzácia polyesterov
Polymér podmienky
Číslo
Číslo navážka polymerizácie kyslosti nmh Te,°C*
Polyestery typu Ift
1 kyselina L- 35,7 g 100 °C/0,7 h 563 0,24 11
-mlieGna (88 9í) (0,349 mol)
kyselina 4, 65 g 165 eC/17,5 h
glykolová (0,612 mol)
kyselina 1,75 g citrónová (0,0091 mol) kyselina L25,6 g 165 -C/22 h 820
0,14 27
-mlieCna (88 9í) (0,25 mol) kyselina glyko- 19,2 g lová (0,25 mol) kyselina
1,5 g jablCná (0,011 mol)
Polyestery typu IB kyselina L25,6 g 132 »C/0,7 h 842
0,11 15
-mliečna (88 %) (0,25 mol) kyselina glykolová kyselina citrónová Amberlyst katalyzátor (beads #15) Toluén
19,2 g (0,25 mol)
2,13 g Dean-Stark (0,011 mol)
Trap, dekant. filtr. v acetóne.
0, g
150 ml Sušené.
Premyté vodou.
Sušené vákuom.
-mliečna (88 (0,25 mol) kyselina glykolová kyselina jablčná Amberlyst
19,2 g (0,25 mol)
1,5 g Dean-Strak (0,011 mol)
Trap, dekant.
0,5 g filtr. v acetóne.
Toluén
100 ml Sušené.
Premy t é vodou.
Sušené vákuom.
* Stanovené na diferenčnom skanovacom kalorimetri (TA 2100 DSC) použitím vzoriek 2-10 mg, rýchlosť ohrievania 10 eC/min v dusíkovej atmosfére.
Postupná polymerizácia acyklizovaných produktov, kde hydroxykyselina reaguje s cyklickými dimérmi a nasleduje kondenzácia výsledného otvoreného reťazcového systému v prítomnosti dopredu daného množstva polykarboxylovej kyseliny v prítomnosti alebo neprítomnosti vhodného katalyzátora kondenzácie, napr. kys. glykolová, L-laktid a kys. DL-jablčná, prebieha v podstate pri rovnakých kondenzačných podmienakach ako bolo popísané vySSie, okrem toho.
že do reakcie vstupuje zmes monokarboxylovej hydroxykyse1iny, cyklický dimér druhej hydroxykyseliny a polykarboxylová hydroxykyseli na.
Konkrétne príklady polyesterov pripravených pomocou tohto postupu a prísluSné analytické údaje sú uvedené v tabuľke 2. Ak cyklický dimér zreaguje s vodou, stáva sa postup jednoduchou postupnou polymerizáciou.
Tabuľka 2 : postupná polymerizácia acyklizovaných produktov
Polymér číslo Polyestery typu podmienky navážka polymerizácie II číslo
kyslosti Πι nh Ts,eC*
1 L-laktid 10,0 g 160 oC/29 h 1200 0,21 20
monomér (0,07 mol)
kyselina 10,07 g
glykolová (0,14 mol)
kyselina 0,79 g
jablčná (0,0061 mol)
2 L-laktid 20,0 g 25-155»C/l,5h 1800 0,13 27
monomér (0,139 mol)
kyselina 7,17 g 155 »C/70 h
glykolová kyselina jablčná (0,093 mol)
1,01 9 (0,0075 mol) rozp. v DCM, prem. vodou sušené vákuom * Stanovené na diferenčnom skanovacom kalorimetri (TA 2100 DSC) použitím vzoriek 2-10 mg, rýchlosť ohrievania 10 °C/min v dusíkovej atmosfére.
Polymerizácia laktónu alebo zmesi laktónov prebiehajúca pri za otvorenia kruhu v prostredí danej koncentrácie polykarboxylovéj hydroxykyseliny ako iniciátora reťazca a katalytického množstva organokovového katalyzátora napr. zmesi L-laktidu, glykolidu a kys. DL-jablčnéj v prítomnosti oktoátu cínatého, vychádza zo suchých cyklických monomérov alebo zmesi cyklických monomérov, polykarboxy1ove j hydroxykyseli ny a stopového množstva oktoátu cínatého (0.33 mol.i-1; roztok v toluéne).
Reakčné zložky sú v atmosfére bez kyslíka prenesené do skleneného reaktora vybaveného magnetickým alebo mechanickým miešadlom. Polymerizácia prebieha v atmosfére dusíka a riadi sa vhodným plánom ohrievania až do dosiahnutia plánovanej molekulovej hmotnosti polymérov (stanovenej viskozitou roztoku). Po skončení polymerizácie teplota reakčnej zmesi klesne a zvyšný monomér sa oddestiluje pri zníženom tlaku. Polyester je ochladený a nízkomolekulárne frakcie rozpustné vo vode sú potom odstránené extrrakciou pri nízkej teplote z vhodného organického rozpúšťadla. Roztok je potom vysušený a rozpúšťadlo odparené. Stanovenie molekulovej hmotnosti vychádza z hodnoty viskozity a číslo kyslosti je stanovené titráciou koncových skupín. Konkrétne príklady polyesterov pripravených týmto postupom a príslušné analytické údaje sú uvedené v tabuľke 3.
Tabuľka 3: Polymerizácia polyesterov prebiehajúca s otvorením kruhu
Polymér Číslo Polyestery typu podmienky navážka polymerizácie III číslo
kyslosti n± nn Te,»C*
1 glykolid 3,22 g 120 »0/0,5 h 2150 0,79** 38
(0,028 mol)
L-laktid 10,7 g 150 »0/6 h
(0,14 mol)
kyselina 0,79 g 120 »0/11 h
jablčná (0,0061 mol)
2 glykolid 2,84 g 120 «0/0,5 h 1206 0,08 26
(0,0245 mol)
D,L-laktid 20,0 g 180 »0/2,5 h
(0,139 mol)
kyselina 0,876 g 130 »0/15 h
jablčná (0,00541 mol)
3 glykolid 2,84 g 155 »0/1 h 937 0,10 27
(0,0245 mol)
D,L-laktid 20,0 g 185 »0/2,5 h
(0,139 mol)
kyselina 1,256 g 190 »0/2,5 h
citrónová (0,00654 mol) 160 »0/13 h
4 glykolid 8.06 g 180 oC/1 h 970 “ 0.26 23
(0.0694 mol)
D,L-laktid 10. 0 g 185 »C/2 h
(0.0694 mol)
kyselina 0.744 g 195 »C/7 h
jablčná (0.00555 mol) 120 »C/9 h
5 glykolid 8.06 g 150 oC/0.5 h 10 378 0.39 30
(0.0694 mol)
D,L-laktid 10.0 g 185 ”C/4 h
(0.0694 mol)
1.6-hexándiol 0.656 g 150 oC/1.5 h
(Ο.00555 mol)
120 »C/39 h * Stanovené na diferenčnom skanovacom kalorimetri (TA 2100 DSC) použitím vzoriek 2-10 mg, rýchlosť ohrievania 10 »C/min v dusíkovej atmosfére.
** V hexafluórizopropanole
Funkčná výmena organickej polykarboxylovej kyseliny alebo hydroxykyseliny vo vysokomolekulárnom polyesteri s pomerom COOH/OH rovným jednej alebo blížiacim sa nule, výhodne v prítomnosti organokovového katalyzátora, napr. tavenie kopolyméru 85/15 laktid/glykolid s molekulovou hmotnosťou presahujúcou 5 000 a pomerom COOH/OH < 1 s kyselinou DL-jablčnou v prítomnosti oktoátu cínatého vedúce k nízkomolekulárnym polyesterom s pomerom COOH/OH > 1, vyžaduje zahrievanie vysokomolekulárneho polyesteru b dopredu daným množstvom polykarboxylovej kyseliny alebo polykarboxylovej hydroxykyseliny v prítomnoti stopového množstva organokovového katalyzátora ako je napr. oktoát cínatý. Reakčná zmes je zahrievaná na 150 »C v atmosfére suchého duBíka pri intenzívnom miešaní až do ukončenia žiadanej funkčnej výmeny (až do vyčerpania nezreagovanej polykarboxylovéj kyseliny). Úplnosť reakcie je monitorovaná meraním molekulovej hmotnosti (meranie viskozity roztoku kapilárnym viskozimetrom pri
-C) vznikajúceho nízkomolekuláneho polyesteru a prítomnej nezreagovanej polykarboxylovej kyseliny. Vzorka polyesteru je extrahovaná vodou a extrakt je analyzovaný pomocou HPLC. Množstvo zvyšného monoméru, diméru a polykarboxylovéj kyseliny je stanovené
HPLC na prístroji zloženom z pumpy na rozpúšťadlá
Waters Model 6000 a detektora Dynamax (Rainin) model UV-D (205 nm, 1,0 AUFS). Jednotllivé merania sú uskutočňované v 0,025 N NazPO4 pufri, pH=3.5 (izokraticky, prietok 1.0 ml/min) na kolóne 25x4,6 mm plnenej Nucleosilom C18, 5 um.
Izolácia a purifikácia žiadaného polyesteru je uskutočňovaná pomocou postupu uvedeného vyššie v časti venovanej polymerizácii prebiehajúcej za otvorenia kruhu. Konrkétne príklady polyesterov pripravených pomocou tohto postupu a príslušné analytické údaje sú uvedené v tabuľke 4.
Tabuľka 4 : Polyestery pripravené funkčnou výmenou
Polymér podmienky číslo číslo navážka polymerizácie kyslosti mnn T»,°C*
PolyeBtery typu IVI
Boehring A001 8,0 g 150 »C/5 h 670
0,26 25 (50/50 DL-Laktid/Glykolid) kyselina citrónová**
0,8 g (0,00417 mol) * Stanovené na diferenčnom skanovacom kalorimetri (TA 2100 DSC) použitím vzoriek 2-10 mg, rýchlosť ohrievania 10 ®C/min v dusíkovej atmosfére.
** Katalytické množstvo oktoátu cínatého (2 kvapky 0.33 mol.I-1 roztoku, približne 0.03 nmol).
Ďalšie monoméry vhodné pre syntézu polyesterov predkladaného vynálezu sú: kyselina L-mliečna, DL-mliečna, epsilon-kaprolaktón, p-dioxanón, kyselinaepsilon-kaprónová, trimeetylén karbonát, 1.5-dioxepán-2-ón, 1.4-dioxepán-2-ón, glykolid a mezo-laktid. Príkladom vhodných polykarboxylových iniciátorov reťazca je kyselina jablčná a citrónová.
(2) Syntéza iónového konjugátu polyester/polypeptid iónovou interakciou medzi polykarboxylovým acid-tipped polyesterom a biologicky aktívnymi polypeptidmi
Vyššie uvedené po1ykarboxy1ové acid-tipped biodegradabiIné polyestery sa používajú na prípravu iónových molekulárnych konjugátov mono- alebo polykarboxylovými oligopeptidmi, polypeptidmi alebo proteínmi, ktoré nesú prístupnú účinnú iónogennú aminoskupinu (pozri obr. 2).
Každý polyester sa dá reakciou s bázou, napr. NaOH, modi f i kovať t ak, aby bol schopný tvoriť iónový molekulárny konjugát s polypeptidom. Reakcia s bázou odkrýva kyslé skupiny polyesteru a k iónovej interakcii s katiónovým polypeptidom môže dochádzať na mnohých miestach.
Uvedené konjugáty vznikajú priamou interakciou molekúl obidvoch zložiek vo vhodnom rozpúšťadle. Polyester môže alebo nemusí dopredu reagovať s bázou kvôli zvýšeniu väzbovej kapacity k bázickému liečivu.- Ako už bolo uvedené, iónová interakcia obidvoch zložiek iónového konjugátu sa zvySuje s rastúcim rozdielom ich hodnôt pKa.
Postupy tvorby konjugátu: Polyester bol rozpustený vo vhodnom aprotickom rozpúšťadle na koncentráciu v rozmedzí 2 až 20 % hmot/objem. Vhodné rozpúšťadlo je také, ktoré rozpúSťa polyestery a súčasne je mieSateľné s vodou. Napríklad tetrahydrofurán, acetón a etylénglykoldimetyléter. K vuzniknutému roztoku bol pridaný vodný roztok bázy, napr. hydroxid alebo uhličitan sodný, draselný alebo amónny kvôli zvýSeniu väzbovej kapacity polyesteru. VSeobecne množstvo pridanej bázy zodpovedá množstvu potrebných kyslých skupín pre vznik párov s bázickým polypeptidom.
Po krátkom premieSaní zmesi polyestei—báza bol pridaný vodný roztok peptidu alebo jeho soli v pomere peptid/polyester 2 až 50 % hmôt. (peptid/polyester). Táto zmes bola mieSaná 3 hodiny, rozpúšťadlá boli odstránené a produkt suSený vákuom. Vzniknutý materiál ea dá ďalej použiť pre výrobu dávkových prípravkov. Pripravené farmaceutické prípravky sú chemicky jednotné, sú tvorené výlučne iónovými molekulárnymi konjugátmi a neobsahujú v biodegradabilnej matrici žiadne mikroskopicky alebo makroskopický dispergované domény účinnej zložky. Konkrétne príklady iónových molekulárnych konjugátov pripravených pomocou tohto postupu a prisluSné analytické údaje sú uvedené v tabuľke 5.
Tabuľka 5 konjugátu
Väzba peptidu do iónového molekulárneho
Polymér Peptid2 Navážka Retencia3
X X
1 50/50 DL-Laktid/Glykolid I 10 47
(komerčný) I 20 25
číslo kyslosti = 22 000 II 20 73
Π1 η h 0/53 III 20 48,5
2 Poly L-Laktid I 10 62
(komerčný) II 20 40
m.h. (priem.) = 2 000
číslo kyslosti = 850
3 Poly L-Laktid I 10 54
(komerčný)
m.h. (priem.) = 50 000
číslo kyslosti = 2100
4 48/48/4 Poly D,l-Laktid I 20 43
Glykolid/1.6-hexándíol
(postup 3)
číslo kyslosti
Πι nh = 0, 39
5 49/49/2 Poly L-mliečna/Gly- I 10 100
kolová/Jablčná kyselina I 20 99
(Typ IB) I 30 95,5
číslo kyslosti = 1 400 I 40 96,0
Πι n h = 0,20 I 50 99,8
II 20 99,8
III 20 77,5
6 83,3/14,7/2 Poly L-mliečna/Glykolová/Citrónová kyselina (Typ IA) číslo kyslosti = 563 Πι nh = 0,24 I 20 96
7 49/49/2 Poly D,1-Laktid/Glykolid/Jablčná kyselina I 20 96
(Typ II) číslo kyslosti = 1 200 ni nh = 0, 21 III 20 73,9
8 49/49/2 Poly D,1-Laktid/Glykolid/Citrónová kyselina (Typ III) 9 I 10 90
číslo kyslosti = 586
Πι n h = 0,22 1Konjugá.ty boli vo všetkých prípadoch pripravované pomocou vyššie uvedeného postupu, ako rozpúšťadlo bol použitý acetón a ako báza hydroxid sodný. Všetky peptidy vstupovali do reakcie vo forme acetátových solí.
zPeptidy:I BIM-21003 D-TrpS-LHRHÍpGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg—Pro-Gly-N2H) pKa = 10,1
II BIM-23014 (HzN-0-D-Val-Cys-Tyr-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NHž ) pKa = 9,8
III BIM-26226 (HzN-D-F5PHe-Gln-Trp-Ala-Val-D-Ala-His-
-Leu-OCa H) pKa = 8,0 retencie: merané množstvo rozpusteného peptidu pomocou HPLC vo vodných (D.I. voda) extraktoch sušeného iónového konjugátu polyester/peptid vých. hmotnosť peptidu - hmotnosť rozp.
* retencie = 100 x peptidu
-------------- % vých. hmotnosť peptidu (3)
Tvorba implantátov.
tyčiniek, mikroteliesok alebo mikročastíc schopných in vivo monofázovo uvoľňovať terapeutické činidlo počas najmenej dní z iónových konj ugátov
Zo solí iónových koknjugátov predkladaného wynálezu sa dajú pripraviť: (A) sterilné injekovateľné mikrotelieska (s alebo bez obsahu 0.1 až 10 % pevného polyhydroxylového alkoholu, ktorý pôsobí ako pomocná výrobná zložka), ktoré obsahujú 1 až 50 % hmôt, polypeptidu, ktorý je uvoľňovaný výlučne monofázovo, čím je zaiBtená protrahovaná farmakologická účinnosť v období 1 až 12 týždňov, (B) sterilné implantovateľné filmy tvorené odlievaním, lisovaním alebo pretláčaním, s alebo bez obsahu farmakologicky neúčinnej pomocnej výrobnej zložky, ktoré majú profil uvoľňovania účinnej zložky analogický ako vyššie uvedené mikrotelieska pod bodom (A) a (C) sterilné injekovateľné tyčinky tvorené pretláčaním alebo lisovaním majúce profil účinnej zložky analogický ako vyššie uvedené mikrotelieska pod bodom (A).
Test uvoľňovania účinnej zložky in vitro:
Vzorky suchého rozomletého iónového konjugátu s hmotnosťou 50 mg boli umiestené do scintilačných skúmaviek s priemerom 25 mm. Do každej vzorky bol pridaný 5 ml aliquot modifikovaného PBS pufra (PBS pufer: 2.87 g NazHPaO, 0.654 g N2aHP4O, 5.9 g NaCl, 0.5 g Na3 N, doplneného na 1 1 deionizovanou vodou; pH = 7.27) a skúmavky boli uložené do trepačky Lab-Line Orbit Environ-Shaker s rýchlosťou otáčania 120 ot./min pri 37 «C. Skúmavky boli periodicky vyberané, dekantované a roztok nahrádzaný čerstvým PBS puírom. V dekantovaných roztokoch bolo stanovované množstvo uvoľneného peptidu v PBS pomocou HPLC.
Extrakcia peptidu z iónových konjugátov:
mg vzorka iónového molekulárneho konjugátu bola zmiešaná s 20 ml dichlórmetánu. Zmes bola postupne extrahovaná 2 N kyselinou octovou po 50 ml, 20 ml a 20 ml. Extrakty boli spojené a obsah peptidu analyzovaný pomocou HPLC. Postup HPLC analýzy peptidu: HPLC meranie bolo uskutočňované na prístroji zloženom z pumpy na rozpúšťadlá Waters model M-45 a UV detektora EM Science MACS 700 pri vlnovej dĺžke 220 nm a 1.0 AUFS. Delenia boli uskutočňované na kolóne 25 x 4.6 mm s náplňou Lichrospher (EM separácia) C18, 100 Ä, 5 um, izokraticky elučným puírom obsahujúcim 30 % acetonitril/0.1 % TFA.
Podrobné údaje o in vitro uvoľňovaní peptidu počas 28 dní (tabuľka 6) pre iónové molekulárne konjugáty: 49:49:2 L-mliečna/glykolová/jablčná kys.\D-Trp®[LHRH] (príklad č. 8); 49:49:2 L-mliečna/glykolová/jablčná kys.XSomatostatínový analóg inhibujúci nádory (príklad č. 9ä a 73.5:24,5:2 poly L-laktid/glykolid/jablčná kys.\D-Trp6[LHRH] (príklad č. 10). Obr. 3 znázorňuje grafické vyjadrenie uvedených údajov.
Tabuľka 6 : Údaje in vitro testu
Deň testu Celkové množstvo uvoľneného peptidu v percentách pr.ä. 8 pr.č.9 pr.č. 10
1 5,5 X 12,5 X 11 !
7 26,9 X 21,3 X 53 X
14 55,2 X 47,3 * 55 X
17 84,4 X 72,2 X 60 X
21 98,6 X 82,5 X 66 X
24 100 X 98,2 X 75 X
28 — 99,6 X —
Stanovenie množstva naviazaného peptidu v iónovom konjugáte:
Stanovenie množstva iónovo naviazaného peptidu v koknjugátových prípravkoch: 10 mg vzorky boli rozpustené v 5,7 ml zmeBi acetón/0,1 mol.l-i vodná TFA (9:1). Roztoky boli miešané 15 až 24 hodín pri 25 »C a preliltrované cez teflónové filtre 0.5 um. Vo filtrátoch bol stanowený obsah peptidov pomocou HPLC. Analýzy boli uskutočňované na prístroji Millipore model 717 Wisp Autosampler vybavenom pumpou model 510 a UV detektorom 486 pri 220 nm. Stanovenia boli uskutočňované na kolóne 25 x 4.6 mm s náplňou Lichrospher (EM separácia) C18, 100 A, 5 um, b prietokom 1,0 ml/min, izokraticky elučnou zmeBou obsahujúcou 35 X acetonitrilu v 0.14 % perchlorátovom pufri. Kvantitatívne stanovenie obsahu peptidov vychádzalo z porovnania plochy piku hľadaného peptidu s plochou piku štandardnej peptidovej vzorky.
Použitie
Ktorýkoľvek z konjugátov (kyslý polyester/peptid) predkladaného vynálezu alebo v kombinácii s
Terapeutické prípravky sa dá podávať pacientom samostatne farmaceutický prijateľným médiom.
sa dajú podávať optimálnou cestou podľa liečebného zámeru, teda subkutánne, intramuskulárne, parenterálne, ako čipky alebo prípravky do nosa. Koncentrácia prípravku predkladaného vynálezu v lieku závisí od počtu dávok, veľkosti podávaných dávok a cesty podania.
Bez ďalSieho pojednávania sa dá predpokladať, že odborník v obore dokáže predkladaný vynález realizovať v plnom rozsahu. Nasledujúce príklady realizácie sú preto len ilustratívne a v žiadnom smerer vynález neobmedzujú.Príklady realizácie vynálezu
Príklad 1 Priama kondenzácia. Príprava 50/50
Poly(D,L-mliečna-co-glykolová) kataiyzovaná
Amberlystom 15
Kyselina D,L-mliečna (85 % vodná zmes, 13,7 g, 0,13 mol) bola zmieSaná s kyselinou glykolovou (10 g, 0,13 mol) v guľatej banke vybevenej magnetickým mieSadlom, zberačom Dean-Stark a vodným chladičom. Do zmesi bol pridaný toluén (100 ml) a Amberlyst 15 (100 mg) a reakčná zmes bola zahrievaná pod spätným chladičom v atomosfére dusíka 72 hodín za odstraňovania vody z reakčnej zmesi. Zmes bola ochladená, toluén dekantovaný z tuhnúceho produktu a produkt bol rozpustený v dichlórmetáne (250 ml). Roztok bol pretrepaný s aktívnym uhlím (Darco, 500 mg), prefiltrovaný a suSený vákuom na rotačnej vákuovej odparke.Polyester bol suSený vákoum pri 13 Pa a 40 °C za vzniku bieleho práSku.
(riinh v CHCls = 0,3, číslo kyslosti = 2439, Τ» = 12»C)
Príklad 2 Priama kondenzácia. Príprava 50/50
Poly(D,L-mliečna-co-glykolová/citrónová) katalyzovaná Amberlystom 15
Podobne ako v predchádzajúcom príklade, kyselina L-mliečna (88 % vodná zesm, 25,6 g, 0,25 mol) bola zmiešaná s kyselinou glykolovou (19,2 g, 0,25 mol), monohydrátom kyseliny citrónovej (2,23 g, 0,011 mol), toluénom (150 ml) a Amberlystom 15 (500 mg) v guľatej banke. Zmes bola pri stálom miešaní zahrievaná až do varu pod spätným chladičom 51 hodín a voda bola odstraňovaná Dean-Starkovým zberačom. Z tuhnúceho produktu bol dekatnovaný toluén, polyester rozpustený v acetóne (300 lm) a sušený na rotačnej vákuovej odparke. Pevný polyester bol opäť rozpustený v dichlórmetáne a dvakrát premytý vodou (2 x 150 tni) na odstránenie rozpustných oligomérov. Organický roztok bol zahustený na rotačnej vákuovej odparke a starostlivo vysušený vákoum za vzniku bieleho prášku (pozri tabuľka 1, Typ IB Polyester, Polymér č. 4) (ninh v CHCI3 = 0,11, číslo kyslosti = 842, T® = 15»C)
Príklad 4 Polymerizácia za otvorenia kruhu . Príprava
75/25 Poly(L-laktid-co-glykolid) iniciovaná kys. jablčnou
Do sklenej ampulky s magnetickým miešadlom boli v atmosfére suchého dusíka dané zložky: L-laktid (12,0 g, 0,0833 mol), glykolid (3,21 g, 0,0277 mol), kys. jablčná (0,3042 g, 0,00227 mol) a katalyzátor oktoát cínatý (0,33 mol roztok v toluéne, 67 μΐ, 0,022 mmol). Systém bol pred zatavením ampulky niekoľkokrát prepláchnutý dusíkom. Reakčné zložky boli potom roztavené pri 140 »C a tavenina zahrievaná na 180 ’C, 190 ’C a 150 <*C v časových úsekoch 1, 4,5, 12 a 2 hodiny. Po ochladení na laboratórnu teplotu bol polyester opäť ohriatý na 110 ’C pri vákuu nižšom ako 13 Pa počas 1 hodiny kvôli odstráneniu monoméru, opäť bol ochladený na laboratórnu teplotu, zriedený kvapalným dusíkom, izolovaný a sušený vo vákuu.
(runh v CHCla = 0,20, číslo kyslosti = 2560, T® = 39«»C)
Príklad 5 Polymerizácia za otvorenia kruhu . Príprava
50/50 Poly(L-laktid-co-glykolid) iniciovaná kyb. c i trónovou
Do sklenej ampulky s magnetickým miešadlom boli v atmosfére suchého dusíka dané zložky: D,L-laktid (10,0 g, 0,0694 mol), glykolid (8,06 g, 0,0694 mol), kys. citrónová (1,07 g, 0,00555 mol) a katalyzátor oktoát cínatý (0,33 mol.I-1 roztok v toluéne, 84 μΐ, 0,0278 mmol) a ampula bola zatavená pod vákuom. Reakčné zložky boli potom roztavené, zahrievané na 180 eC, 185 ’C, 195»C a 150 ’C v časových úsekoch 1, 2, 7 a 9 hodín. Polyester bol ochladený na laboratórnu teplotu, zriedené kvapalným dusíkom, izolovaný a sušený.
(ninh V CHCla = 0,26, číslo kyslosti = 970, T9 = 23»C)
Príklad 6 Polymerizácia za otvorenia kruhu. Príprava
50/50 Poly(D,L-laktid-co-glykolid) iniciovaná 1.6-hexándiolom
Podobne ako v predcházdajúcom príklade boli do sklenenej ampulky s magnetickým miešadlom v atmosfére dusíka dané zložky: D,L-laktid (10,0 g, 0,0694 mol), glykolid (8,06 g, 0,0694 mol), 1,6-hexándiol (0,656 g, 0,00555 mol) a katalyzátor oktoát cínatý (0,33 mol.I-1 roztok v toluéne, 84 ul, 0,0278 mmol) a ampulka bola zatavená pod vákuom, reakčné zložky boli potom zahrievané na 150 »C, 185 °C, 150«>C a 120 °C v časových úsekoch 0,5, 4, 1,5 a 3 hodiny. Polyester bol izolovaný a sušený (pozri tabuľka 3, Typ III Polyester, Polymér č. 5).
(n±nt> v CHClg = 0,39, číslo kyslosti = 10 138, Τ» = 30°C)
Príklad 7 Funkčná výmena. Príprava polykarboxylovaného polyesteru 50/50 Poly(D,L-laktid-co-glykolid)
Do sklenenej ampulky boli v atmosfére suchého dusíka dané zložky: 50/50 poly(D,L-laktid-co-glykolid) Boehringer A001, 8 g), kys. citrónová (0.8 g, 4,16 mmol) a katalyzátor oktoát cínatý (2 kvapky) a ampulka bola zatavená. Reakčné zložky boli potom zahrievané na 150 »C 4 hodiny, reakčná zmes bola ochladená na laboratórnu teplotu, zriedená kvapalným dusíkom a polyester bol izolovaný a sušený (pozri tabuľka 4, Typ IV Polyester, Polymér č. 1).
(ninh v CHCI3 = 0,26, číslo kyslosti = 670, T® = 23°C)
Príklad 8
500 mg
Príprava iónového molekuklárneho konjugátu 49:49:2 L-mliečna/glykolová/jablčná kysel. (pozri tabuľka 1, polymér č. 4)\D-Trp® [LHRH]
49:49:2 L-liečna/glykolová/jablčná kys.
(pripraveného priamou kondenzáciou, m. h.
= 9 500, číslo kyslosti = 1 420) bolo rozpustených v acetóne (10 ml) (Mallinckrodt Analytic Reagent). Bol pridaný 0,1 N hydroxid sodný (1,14 ml a zmes bola mieSaná pri laboratórnej teplote 15 min. Potom bol pridaný 1 ml vodného roztoku obs. 100 mg D-Trp®[LHRH] (BIM-21003 Peptid I, obsah bázy 87 %, obsah acetátov 7 %) a zmes bola mieSaná i hodinu pri laborartórnej teplote. Potom boli rozpúšťadlá odparené, najprv na rotačnej vákuovej odparke Rotavap pri teplote < 40»C a ďalej v exzikátori vo vákuu 13 Pa 1 hodinu pri laboratórnej teplote. Suchá pevná látka bola triturovaná a mieSaná v deionizovanej vode (100 ml) a odfiltrovaná. Vo vodnom filtráte bol pomocou HPLC stanovený obsah rozpustného peptidu < 1 mg. Pevný produkt bol niekoľkokrát dní suSený vo vákuu na konečnú hmotnosť 540 mg bieleho práSku. PráSok bol použitý do testov (pozri tabuľka 6, príklad č. 8).
Príklad 9
Príprava iónového molekulráneho konjugátu 49:49:2 L-mliečna/glykolová/jablčná kys. (pozri tabuľka 1, polymér č. 4)\Somastotatínový analóg inhibujúci nádory
100 mg
49:49:2
L-mliečna/glykolová/jablčná kys.
(pri praveného priamou kondenzáciou.
m. h.
= 9 500, číslo kyslosti = 1420) bolo rozpustených v acetóne (2 ml) (Mallinckrodt Analytic Reagent). Bol pridaný 0,1 N hydroxid sodný (0.32 ml) a zmes bola mieSaná pri laboratórnej teplote minút. Potom boli pridané
1.2 ml vodného roztoku obs. 20 mg Somatostatínového analógu inhibujúceho nádory (BIM-23014
Peptid II, obsah bázy 83 %, obsah acetátov 9.8
=) a zmes boal mieSaná 1 hodinu pri laboratórnej tpelote.
Potom boli rozpúšťadlá odparené, najprv na rotačnej odparke Rotavap pri teplote < 40»C a ďalej v exzikátori vo vákuu 13 Pa 1 hodinu pri laboratórnej teplote. Suchá pevná látka bola triturovaná a mieSaná v deionizovanej vode (20 ml) a odfiltrovaná. Vo vodnom filtráte bol pomocou HPLC stanovený obsah rozpustného peptidu < 0,05 mg. Pevný produkt bol niekoľkokrát dní sušený vo vákuu na konečnú hmotnosť 106 mg bieleho prášku. Prášok bol rozomletý a použitý do testov in vitro uvoľňovania účinnej zložky (pozri tabuľka 6, príklad č. 9).
Príklad 10 Príprava iónového molekulráneho konugátu
73,5:24,5:2 poly L-laktid/glykolová/jablčná kys. (pozri tabuľka 2, polymér č. 2)\D-Trp®[LHRH]
800 mg 73,5:24,5:2 poly L-laktid/glykolová/jablčná kys. (pripraveného postupnou polymerizáciou acyklizovaných produktov, číslo kyslosti = 1800) bolo rozpustených v acetóne (16 ml). Bol pridaný 0,1 N hyddroxid sodný (2.8 ml) a zmes bola miešaná pri laboratórnej teplote 20 minút. Potom boli pridané 2 ml vodného roztoku obs. 200 mg D-Trp6[LHRH] (BIM-23003 Peptid I, obsah bázy 87 *, obsah acetátov 7 %) a zmes bola miešaná 90 minút pri laboratórnej tpelote. Potom boli rozpúšťadlá odparené a suchá pevná látka bola triturovaná v deionizovanej vode. Ako v príklade 8 bolo zistené, že vodný íiltrát obsahuje menej ako 1 % rozpustného peptidu. Izolovaný pevný produkt bol 4 dni sušený vo vákuu na konečnú hmotnosť 839 mg bieleho prášku. Prášok bol rozomletý a použitý do testov in vitro (pozri tabuľka 6, príklad č. 10) .
Príklad 11 Príprava mikročastíc 1,50 iónového molekulárneho konjugátu peptid/polymér z polyesteru L-laktid/glykolid/D,L-jablčná kys. (65:33:2)
Syntéza konjugátu: polyester pripravený polymerizáciou za otvorenia kruhu ako je uvedené v príklade 4 [m.h. = 4 700, polydisperzita = 1,3 Btanovené pomocou GPC na Jorid Gel 50 x 1 cm, lineárne, elúcia THF, detektor dn/cn = 0,05, číslo kyslosti = 1475, titráciou, T9 = 42 »C] bol rozpustený v acetóne (40 ml). Kyslé skupiny boli neutrálizované 2,0 ml 0,5 g BIM-23014 (obsah peptidu 83,7 *, obsah acetátov 11,5
%) v 20 ml Milli-Q vody pomalým pridávaním do miešaného roztoku polyesteru. Počas pridávania peptidu bolo do zmesi pridaných postupne ešte 40 ml acetónu na zabránenie precipitácii. Číry bezfarebný roztok bol miešaný 1 hodinu a odparený do sucha vo vákuu. Vzniknutá pevná biela látka bola opäť rozpustená v zmesi acetón (20 ml) a voda Milli-Q (2 lm) na číry roztok. Tento roztok bol injekovaný cez teflónový filter (0,2 um) do účinne miešanej nádoby s Milli-Q vodou (500 ml) pri «C.
Fáza komplexu polymér/peptid sa pri styku s vodou okamžite rozbila na malé čatice. Suspenzia bola miešaná 30 minút pri 4 eC, zvyšný acetón bol odparený pri zníženom tlaku, pevné častice boli izolované centrifugáciou, resuspendované v 100 ml Milli-Q vody a opäť centrifugované. Izolované pevné častice boli sušené lyofilizáciou na konečnú hmotnosť 1530 mg bieleho voľne tečúceho prášku. Veľkosť častíc sa pohybovala v rozmedzí 2 až 100 um. Ta iónového konjugátu 53 eC. Celkové množstvo (zvyšného) nenaviazaného peptidu vo všetkých vodných supernatantoch bolo 63 mg podľa HPLC analýzy. Celkový východiskový obsah peptidu stanovený elementárnou analýzou dusíka bol 19,9 % hmôt. Podiel extrahovaného peptidu z konjugátu extrakčnou technikou acetón/0,1 mol.l1 TFA bol stanovený na 16,98 % hmôt. Výsledný konjugát si teda uchoval z 84,8 % hmôt, iónový (extrahovateľný) charakter.
Z predchádzajúceho popisu odborník v obore ľahko ocení základné črty predkladaného vynálezu a bez toho aby sa odchýlil od ducha a rámca vynálezu môže uskutočniť rad modifikácií, ktorými prispôsobí predkladaný vynález konkrétnym podmienkam a použitiu.
Iné realizácie spadajú takisto do rámca predkladaného vynálezu.

Claims (27)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje polyester obsahujúci jednu alebo viac COOH skupín iónovo konjúgovaný s bioaktívnym polypeptidom obsahujúcim najmenej jednu účinnú iónogénnu aminoBkupinu, v ktorom je najmenej 50 % hmôt. prítomného polypeptidu iónovo konjugovaných s uvedeným polyesterom.
  2. 2. Prípravok podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že pomer karboxylových skupín k hydroxylovým skupinám uvedeného polyesteru je vySSí ako jedna.
  3. 3.
    Prípravok podľa nároku 1, v y z načujúci sa m, že uvedený polyester je konštruovaný z prvkov vybraných zo skupiny: kyselina
    L-mliečna,
    D-mliečna,
    DL-mliečna, e ps i1on-kaprolaktón, p-dioxanón.
    kyselina epsilon-kaprónová, alkylén oxalát.
    alkylén sukcinát, 0-hydroxybutyrát, cykloalkylén oxalát.
    substituované alebo nesubstituované trimetylén karbonáty, 1.5-dioxepan-2-ón,
    D-laktid, mezo-laktid a opticky aktívne izoméry, racemáty alebo kopolyméry ktorejkoľvek z uvedených zlúčenín.
  4. 4. Prípravok podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že uvedený polyester je čiastočne acid-tipped (tj. modifikovaný tak, aby obsahoval voľné karboxylové skupiny) anhydridom kyseliny glutárovej.
  5. 5. Prípravok podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že uvedený polyester je úplne acid-tipped (tj modifikovaný tak, aby obsahoval voľné karboxylové skupiny) anhydridom kyseliny glutárovej.
    6. Prípravok podľa nároku 1, v y z n a č u j ú c i s a t ý m, že uvedený polyester má priemerný stupeň polymerizáýcie 10 až 300. 7. Prípravok podľa nároku 1, v y z n a č u j ú c i s a t ý m, že uvedený polyester má viskozitu 0,05 až 0,7 dl/g v
    chloroforme a priemernú molekulovú hmotnosť 1 200 až 40 000.
  6. 8. Prípravok podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m, že uvedený bioaktívny polypeptid tvorí 1 až 50 X hmôt, uvedeného iónového molekulárneho konjugátu.
  7. 9. Prípravok podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že uvedený polypeptid prítomný v prípravku je z viac ako 85 X hmôt, konjugovaný s uvedeným polyesterom.
  8. 10. Prípravok podľa nároku 1,vyznačujúci sa tým, že uvedený polypeptid je konštruovaný z prvkov
    vybraných zo skupiny LHRH, somatostat í n, bombes í n/GRP kalcitonín, bradykynín. galanín. MSh, GRF, amylín A tychykiníny, sekretín. PTH, CGRP, neuromedíny, PTHrP glukagón, neurotenzín. ACTH, GHRP, GLP, VIP, PACAP
    » enkeíalín, PYY, motilín, substancia P, NPY, TSH a ich analóg a fragmenty.
  9. 11. Prípravok podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že uvedený iónový konjugát je schopný uvoľňovať in vivo terapeuticky účinné množstvo uvedeného polypeptidu počas najmenej 7 dní.
    s a tým, že zahrnuje (a) prípravu polyeBteru a bioaktívneho polypeptidu obsahujúceho najmenej jednu účinnú iónogénnu aminoskupinu, a (b) iónovou konjugáciou uvedeného polyesteru s uvedeným polypeptidom za vzniku iónového molekulárneho konjugátu,v ktorom je polypeptid iónovo konjugovaný s polyesterom.
  10. 13. Spôsob syntézy podľa nároku 12, vyznačuj úc i satým, že najmenej 50 X hmôt, prítomného polypeptidu je iónovo konjugovaných s polyesterom.
  11. 14. Spôsob syntézy podľa nároku 13, vyznačuj úci s a t ý m, že hydroxylové skupiny uvedeného polyesteru sú acid-tipped (tj. sú na ne naviazané uskupenia nesúce karboxylové skupiny).
  12. 15. Spôsob syntézy podľa nároku 14, vyznačuj úci s a t ý m, že hydroxylové skupiny uvedeného polyesteru sú čiastočne acid-tipped anhydridom kyseliny glutárovej.
  13. 16. Spôsob syntézy podľa nároku 14, vyznačuj úci b a t ý m, že hydroxylové skupiny uvedeného polyesteru sú úplne acid-tipped anhydridom kyseliny glutárovej.
  14. 17. Spôsob syntézy podľa nároku 13, vyznačuj úci satým, že uvedený polyester je pripravený postupom využívajúcim polykarboxylovú kyselinu ako iniciátor reťazca.
  15. 18. Spôsob syntézy podľa nároku 12, vyznačuj úci satým, že koncové hydroxylové skupiny uvedeného polyesteru sú acid-tipped (tj. su na ne naviazané uskupenia nesúce karboxylové skupiny).
  16. 19. Spôsob syntézy podľa nároku 18, vyznačuj úci satým, že koncové hydroxylové skupiny uvedeného polyesteru sú čiastočne acid-tipped anhydridom kyseliny glutárovej.
  17. 20. Spôsob syntézy podľa nároku 18, vyznačuj úci satým, že koncové hydroxylové skupiny uvedeného polyesteru sú úplne acid-tipped anhydridom kyseliny glutárovej.
  18. 21. Spôsob syntézy podľa nároku 31, vyznačuj úci s a t ý m, že výsledkom syntézy je polyester s priemerným stupňom polymerizácie medzi 10 až 300.
  19. 22. Spôsob syntézy podľa nároku 21, vyznačuj úci sa t ý m, že pomer karboxylových skupín k hydroxylovým skupinám uvedeného polyesteru je vyšší ako jedna.
  20. 23. Spôsob podľa nároku 13, vyznačujúci sa t ý m, že príprava uvedeného iónového molekulárneho konjugátu polyester/polypeptid zahrnuje:
    (a) rozpustenie polyesteru tetrahydrof uráne, acetóne alebo etylénglykoldimetyléteri, pridanie bázy a (b) pridanie vodného roztoku polypeptidu alebo jeho soli pomernom množstvo polypeptidu/polyester
    2 až % hmôt.
    (polypeptid/polyester).
  21. 24. Spôsob podľa nároku 23, i sa tým, že uvedený polypeptid je vo forme soli kyseliny s pKa vyšším alebo rovným 3,5.
  22. 25. Spôsob podľa nároku 23, u j ú c i sa tým, že uvedený polypeptid tvorí
    1 až 50 % hmôt, uvedeného iónového molekul-árneho konjugátu.
  23. 26. Spôsob podľa nároku 23,vyznačujúci sa tým, že uvedený polypeptid prítomný v prípravku je z viac ako 85 % hmôt, konjugovaný s uvedeným polyesterom.
  24. 27. Spôsob podľa nároku 23,vyznačujúci sa tým, že výsledkom uvedenej reakcie je tvorba iónovej väzby »
    medzi reakčnými zložkami.
  25. 28. Prípravok, vyznačujúci sa tým, že bol pripravený pomocou postupu uvedeného v nároku 12.
  26. 29. Spôsob prípravy mikročastíc, vyznačujúci satým, že zahrnuje (a) rozpustenie prípravku podľa nároku 1 v aprotickom organickom rozpúšťadle miešateľnom s vodou, (b) miešanie pripraveného roztoku vo vode a (c) izoláciu vzniknutých mikročastíc z vody.
  27. 30. Spôsob prírpavy podľa nárokku 29, vyznačuj ú - c i s a t ý m, že organické rozpúšťadlo je volené zo skupiny acetonitril, tetrahydrofurán, dimetylformamid 1 a dimetoxyetylénglykol.
SK744-95A 1993-01-06 1994-01-05 Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters with bioactive polypeptides and a method of preparation thereof SK74495A3 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IE930005 1993-01-06
PCT/US1994/000148 WO1994015587A2 (en) 1993-01-06 1994-01-05 Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
CNB941085236A CN1163260C (zh) 1993-01-06 1994-07-20 可生物降解聚酯和生物活性多肽的离子性分子轭合物

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK74495A3 true SK74495A3 (en) 1997-01-08

Family

ID=37075859

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK744-95A SK74495A3 (en) 1993-01-06 1994-01-05 Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters with bioactive polypeptides and a method of preparation thereof

Country Status (20)

Country Link
EP (1) EP0678018B1 (sk)
JP (1) JPH08505395A (sk)
CN (1) CN1163260C (sk)
AT (1) ATE236655T1 (sk)
AU (1) AU680650B2 (sk)
CA (1) CA2150574A1 (sk)
CZ (2) CZ293425B6 (sk)
DE (1) DE69432459T2 (sk)
DK (1) DK0678018T3 (sk)
ES (1) ES2196023T3 (sk)
FI (1) FI114898B (sk)
HU (1) HU220137B (sk)
NZ (1) NZ261250A (sk)
PL (1) PL174772B1 (sk)
PT (1) PT678018E (sk)
RU (2) RU2185393C2 (sk)
SG (1) SG47043A1 (sk)
SK (1) SK74495A3 (sk)
WO (1) WO1994015587A2 (sk)
ZA (1) ZA9477B (sk)

Families Citing this family (74)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6221958B1 (en) 1993-01-06 2001-04-24 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, Sas Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
US6413539B1 (en) * 1996-10-31 2002-07-02 Poly-Med, Inc. Hydrogel-forming, self-solvating absorbable polyester copolymers, and methods for use thereof
US6861053B1 (en) 1999-08-11 2005-03-01 Cedars-Sinai Medical Center Methods of diagnosing or treating irritable bowel syndrome and other disorders caused by small intestinal bacterial overgrowth
US7048906B2 (en) 1995-05-17 2006-05-23 Cedars-Sinai Medical Center Methods of diagnosing and treating small intestinal bacterial overgrowth (SIBO) and SIBO-related conditions
US6413536B1 (en) * 1995-06-07 2002-07-02 Southern Biosystems, Inc. High viscosity liquid controlled delivery system and medical or surgical device
US7833543B2 (en) 1995-06-07 2010-11-16 Durect Corporation High viscosity liquid controlled delivery system and medical or surgical device
US5955574A (en) 1995-07-13 1999-09-21 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A. Analogs of parathyroid hormone
IE960308A1 (en) * 1996-04-23 1997-11-05 Kinerton Ltd Sustained release ionic conjugate
AU750739B2 (en) * 1996-04-23 2002-07-25 Ipsen Manufacturing Ireland Limited Methods for preparing biodegradable polyesters and derivatives thereof
EP0895517B1 (en) * 1996-04-23 2004-11-17 Ipsen Manufacturing Ireland Limited Acidic polylactic polymers
US6264970B1 (en) 1996-06-26 2001-07-24 Takeda Chemical Industries, Ltd. Sustained-release preparation
AU779930B2 (en) * 1996-12-11 2005-02-17 Praecis Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical formulations for sustained drug delivery
US5968895A (en) * 1996-12-11 1999-10-19 Praecis Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical formulations for sustained drug delivery
US6126919A (en) * 1997-02-07 2000-10-03 3M Innovative Properties Company Biocompatible compounds for pharmaceutical drug delivery systems
MY118835A (en) * 1997-04-18 2005-01-31 Ipsen Pharma Biotech Sustained release compositions and the process for their preparation
US6867181B1 (en) 1997-06-02 2005-03-15 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
IES990700A2 (en) 1999-08-18 2001-08-22 Kinerton Ltd Process to make a sustained release formulation
US7109166B1 (en) 1999-08-18 2006-09-19 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, Sas Sustained release formulation of a peptide
HUP0203060A3 (en) * 1999-08-18 2003-11-28 Sod Conseils Rech Applic Sustained release complex of a peptide, process for its preparation and pharmaceutical composition containing the same
EP1348444B1 (en) * 1999-08-18 2006-04-12 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. Sustained release formulation of a peptide complexed with a polymer
WO2001074761A1 (en) 2000-03-31 2001-10-11 Trustees Of Tufts College 7-and 9-carbamate, urea, thiourea, thiocarbamate, and heteroaryl-amino substituted tetracycline compounds
KR100452752B1 (ko) * 2000-04-18 2004-10-12 주식회사 펩트론 단백질 함유 서방성 제제를 제조하는 방법 및 그 제제
EP1383376A4 (en) * 2001-03-19 2006-03-08 Praecis Pharm Inc PHARMACEUTICAL FORMULATIONS WITH PROLONGED RELEASE
US20040001889A1 (en) 2002-06-25 2004-01-01 Guohua Chen Short duration depot formulations
JP2006506397A (ja) * 2002-10-31 2006-02-23 ファイザー・プロダクツ・インク 固体及び半固体高分子イオン・コンジュゲート
CN101797221B (zh) 2002-12-13 2013-06-12 杜雷科特公司 包含高粘度液体载体材料的口服递药系统
US7166575B2 (en) 2002-12-17 2007-01-23 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for enhanced mucosal delivery of peptide YY and methods for treating and preventing obesity
US7186692B2 (en) 2002-12-17 2007-03-06 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for enhanced mucosal delivery and non-infused administration of Y2 receptor-binding peptides and methods for treating and preventing obesity
CA2510199A1 (en) 2002-12-17 2004-07-08 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for enhanced mucosal delivery of y2 receptor-binding peptides and methods for treating and preventing obesity
US7229966B2 (en) 2002-12-17 2007-06-12 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for enhanced mucosal delivery of Y2 receptor-binding peptides and methods for treating and preventing obesity
RU2543350C2 (ru) 2003-01-28 2015-02-27 Айронвуд Фармасьютикалз, Инк. Способы и композиции для лечения желудочно-кишечных расстройств
US7772188B2 (en) 2003-01-28 2010-08-10 Ironwood Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for the treatment of gastrointestinal disorders
CN1822851B (zh) 2003-05-15 2011-04-13 塔夫茨大学信托人 肽和多肽药物的稳定类似物
PL1682537T3 (pl) 2003-11-05 2012-09-28 Sarcode Bioscience Inc Modulatory adhezji komórkowej
SI2767292T1 (sl) 2004-09-17 2017-01-31 Durect Corporation Pripravek, ki vsebuje lokalni anestetik SAIB, s podaljšanim sproščanjem
EP1871796A4 (en) 2005-04-20 2009-01-14 Auckland Uniservices Ltd VESICULINE
JP5794721B2 (ja) 2005-05-17 2015-10-14 サーコード バイオサイエンス インコーポレイテッド 眼障害の治療のための組成物および方法
US20070027105A1 (en) 2005-07-26 2007-02-01 Alza Corporation Peroxide removal from drug delivery vehicle
JP2009507844A (ja) 2005-09-08 2009-02-26 トラスティーズ オブ タフツ カレッジ 安定化ｇｌｐ−１類似体
PL1937262T3 (pl) 2005-09-29 2019-10-31 Ipsen Pharma Kompozycja do stosowania w leczeniu zaburzeń motoryki przewodu pokarmowego
WO2007139589A1 (en) 2006-05-26 2007-12-06 Bristol-Myers Squibb Company Sustained release glp-1 receptor modulators
ES2388355T3 (es) 2006-11-03 2012-10-11 Durect Corporation Sistemas de suministro transdémico que comprenden bupivacaína
US8969514B2 (en) 2007-06-04 2015-03-03 Synergy Pharmaceuticals, Inc. Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of hypercholesterolemia, atherosclerosis, coronary heart disease, gallstone, obesity and other cardiovascular diseases
EA020466B1 (ru) 2007-06-04 2014-11-28 Синерджи Фармасьютикалз Инк. Агонисты гуанилатциклазы, пригодные для лечения желудочно-кишечных нарушений, воспаления, рака и других заболеваний
CN101778640A (zh) 2007-06-14 2010-07-14 比奥根艾迪克Ma公司 抗体制剂
TW200916113A (en) 2007-08-08 2009-04-16 Sod Conseils Rech Applic Method for inhibiting inflammation and pro-inflammatory cytokine/chemokine expression using a ghrelin analogue
AU2008317473B2 (en) 2007-10-19 2014-07-17 Bausch + Lomb Ireland Limited Compositions and methods for treatment of diabetic retinopathy
AU2008347158B8 (en) 2007-12-06 2013-08-22 Durect Corporation Oral pharmaceutical dosage forms
WO2009139817A2 (en) 2008-04-15 2009-11-19 Sarcode Corporation Crystalline pharmaceutical and methods of preparation and use thereof
EP2810951B1 (en) 2008-06-04 2017-03-15 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of gastrointestinal disorders, inflammation, cancer and other disorders
ES2624828T3 (es) 2008-07-16 2017-07-17 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonistas de la guanilato ciclasa útiles para el tratamiento de trastornos gastrointestinales, inflamación, cáncer y otros
CN104740631B (zh) 2008-10-29 2019-04-16 阿布林克斯公司 单域抗原结合性分子的制剂
US20100260844A1 (en) 2008-11-03 2010-10-14 Scicinski Jan J Oral pharmaceutical dosage forms
WO2011050175A1 (en) 2009-10-21 2011-04-28 Sarcode Corporation Crystalline pharmaceutical and methods of preparation and use thereof
KR101224004B1 (ko) * 2009-12-29 2013-01-22 주식회사 삼양바이오팜 단백질, 폴리펩타이드 또는 펩타이드 약물 전달용 고분자 및 그 제조방법, 및 단백질, 폴리펩타이드 또는 펩타이드 약물의 서방형 조성물 및 그 제조 방법
CN108314733A (zh) 2010-07-16 2018-07-24 埃博灵克斯股份有限公司 修饰的单结构域抗原结合分子及其应用
WO2012028496A1 (de) * 2010-08-31 2012-03-08 Basf Se Verzweigte polyester auf basis von zitronensäure sowie deren herstellung und verwendung
BRPI1003424A2 (pt) * 2010-09-08 2013-01-08 Univ Rio De Janeiro sistema polimÉtrico de confinamento de amilina humana e anÁlogos agonistas, processo e uso; processo de avaliaÇço funcional de amilina liberada
US9616097B2 (en) 2010-09-15 2017-04-11 Synergy Pharmaceuticals, Inc. Formulations of guanylate cyclase C agonists and methods of use
US20120082647A1 (en) 2010-10-01 2012-04-05 Baker Darren P Interferon-beta for use as monotherapy or in combination with other cancer therapies
ES2579319T3 (es) 2011-05-04 2016-08-09 Balance Therapeutics, Inc. Derivados de pentilenotetrazol
AU2012287577B2 (en) * 2011-07-22 2017-02-16 InnoCore Technologies Holding B.V. Biodegradable, semi-crystalline, phase separated, thermoplastic multi block copolymers for controlled release of biologically active compounds
AU2013295706A1 (en) 2012-07-25 2015-02-19 Sarcode Bioscience Inc. LFA-1 inhibitor and polymorph thereof
EP2958577A2 (en) 2013-02-25 2015-12-30 Synergy Pharmaceuticals Inc. Guanylate cyclase receptor agonists for use in colonic cleansing
CA2905435A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Synergy Pharmaceuticals Inc. Compositions useful for the treatment of gastrointestinal disorders
WO2014144975A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Durect Corporation Compositions with a rheological modifier to reduce dissolution variability
CA2905438A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonists of guanylate cyclase and their uses
AU2014280847B2 (en) 2013-06-13 2019-07-04 Antisense Therapeutics Ltd Combination therapy
EP3054969B1 (en) 2013-10-10 2021-03-10 Bausch Health Ireland Limited Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of opioid induced dysfunctions
US9181427B2 (en) * 2013-12-11 2015-11-10 Ethicon, Inc. Absorbable bimodal polymeric blend compositions, processing methods, and medical devices
CN107075134B (zh) * 2014-11-14 2021-03-09 赢创运营有限公司 制备微粒形式的生物可再吸收聚酯的方法
WO2017123634A1 (en) 2016-01-11 2017-07-20 Synergy Pharmaceuticals, Inc. Formulations and methods for treating ulcerative colitis
TR201702016A2 (tr) 2017-02-10 2018-08-27 Tuerkiye Bilimsel Ve Teknolojik Arastirma Kurumu Tuebitak Düşük mali̇yetli̇ yüksek moleküler ağirlikli ve yüksek çözünürlüğe sahi̇p poli̇gli̇koli̇k asi̇t sentezi̇
CN115666621A (zh) 2020-01-13 2023-01-31 度勒科特公司 具有减少的杂质的持续释放药物递送系统及相关方法

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4356166A (en) * 1978-12-08 1982-10-26 University Of Utah Time-release chemical delivery system
IE52535B1 (en) * 1981-02-16 1987-12-09 Ici Plc Continuous release pharmaceutical compositions
US4609707A (en) * 1983-11-10 1986-09-02 Genetic Systems Corporation Synthesis of polymers containing integral antibodies
US5071909A (en) * 1989-07-26 1991-12-10 Millipore Corporation Immobilization of proteins and peptides on insoluble supports
US5162505A (en) * 1989-09-19 1992-11-10 Centocor Proteins modified with positively charged carriers and compositions prepared therefrom
CA2046830C (en) * 1990-07-19 1999-12-14 Patrick P. Deluca Drug delivery system involving inter-action between protein or polypeptide and hydrophobic biodegradable polymer
GB9310030D0 (en) * 1993-05-15 1993-06-30 Scras Dry processed particles and process for the preparation of the same

Also Published As

Publication number Publication date
HU220137B (hu) 2001-11-28
FI953314A0 (fi) 1995-07-05
RU2185393C2 (ru) 2002-07-20
DE69432459D1 (de) 2003-05-15
WO1994015587A3 (en) 1994-09-01
AU680650B2 (en) 1997-08-07
ES2196023T3 (es) 2003-12-16
PL309776A1 (en) 1995-11-13
AU5992194A (en) 1994-08-15
CN1115252A (zh) 1996-01-24
FI953314A (fi) 1995-07-05
HU9502029D0 (en) 1995-09-28
SG47043A1 (en) 1998-03-20
WO1994015587A2 (en) 1994-07-21
HUT73188A (en) 1996-06-28
CA2150574A1 (en) 1994-07-21
ZA9477B (en) 1994-08-11
PT678018E (pt) 2003-08-29
CZ293425B6 (cs) 2004-04-14
CN1163260C (zh) 2004-08-25
PL174772B1 (pl) 1998-09-30
CZ173495A3 (en) 1996-01-17
JPH08505395A (ja) 1996-06-11
ATE236655T1 (de) 2003-04-15
CZ293378B6 (cs) 2004-04-14
EP0678018B1 (en) 2003-04-09
DE69432459T2 (de) 2003-11-27
DK0678018T3 (da) 2003-04-28
EP0678018A4 (en) 1998-09-09
FI114898B (fi) 2005-01-31
NZ261250A (en) 1997-08-22
RU2146128C1 (ru) 2000-03-10
EP0678018A1 (en) 1995-10-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK74495A3 (en) Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters with bioactive polypeptides and a method of preparation thereof
RU2237681C2 (ru) Ионные молекулярные коньюгаты биодеградируемых сложных полиэфиров и биоактивных полипептидов
US5672659A (en) Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
US5863985A (en) Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
RU2202563C2 (ru) Фосфорилированные полимеры и их конъюгаты
KR100369764B1 (ko) 생분해성폴리에스테르및생활성폴리펩티드의이온성분자결합체
EP1203591B1 (en) biodegradable polyesters for forming ionic molecular conjugates with bioactive polypeptides
KR100405879B1 (ko) 생분해성 폴리에스테르 및 생활성 폴리펩티드의 이온성분자 결합체
US6867181B1 (en) Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
AU2003264305B2 (en) Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
US20060127354A1 (en) Phosphorylated polymers and conjugates thereof
MXPA01007537A (en) Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides
NZ527337A (en) Ionic molecular conjugates of bio degradable polyesters and bioactive polypeptides
CZ2001424A3 (cs) Fosforylované polymery a jejich konjugáty