SK74399A3

SK74399A3 - Novel therapeutic application of a thienycyclohexylamine derivative

Info

Publication number: SK74399A3
Application number: SK743-99A
Authority: SK
Inventors: Guy Lallement; Arbigny Pierre D; Jean-Marc Kamenka
Original assignee: Sod Conseils Rech Applic
Priority date: 1996-12-06
Filing date: 1997-12-05
Publication date: 2000-05-16
Also published as: PL191567B1; TW482674B; EP0956019B1; JP3859238B2; NO323695B1; US6207685B1; JP2001505217A; IL130209A; DE69725613T2; TR199901237T2; SK285208B6; DK0956019T3; AR008536A1; NO992726L; PT956019E; PL334103A1; CZ296245B6; IL130209A0; EP0956019A1; DE69725613D1

Description

,ΝβΜ» Terapeutické použitie derivátov tienylcyklohexylamínu

Oblasť techniky

Predložený vynález sa týka použitia tienylcyklohexylamínu, samotného alebo v kombinácii s ďalšími látkami s farmaceutickou účinnosťou, na prípravu medikamentu určeného na obmedzenie alebo inhibovanie účinkov spôsobených neurotoxickými produktmi alebo produktmi obsahujúcimi neurotoxín. Vynález sa tiež týka prípravku obsahujúceho tienylcyklohexylamin a najmenej jeden anticholínergný, antikonvulzívny alebo cholínesterázový reaktivátor a farmaceutickej kompozície, ktorá ho obsahuje. Tento prípravok je využiteľný z dôvodu svojej účinnosti obmedzovať alebo inhibovať účinky spôsobené neurotoxickými produktmi alebo produktmi obsahujúcimi neurotoxín.

Doterajší stav techniky

Rodina neurotoxických produktov alebo produktov obsahujúcich neurotoxín zahrňuje produkty ako sú organofosfáty, ktoré sa vyskytujú napríklad v insekticídoch alebo pesticídoch na domáce a priemyselné použitie, ale taktiež jedovatý plyn na použitie v bojových konfliktoch, ako je soman, sarin, tabun alebo VX. Spomedzi jestvujúcich terapií, ako je všestranná liečba na zdolanie intoxikácie takýmito zlúčeninami, žiadna celkom nezabráni prejavom neuropatologických následných účinkov.

Podstata vynálezu

Predmetom vynálezu je použitie tienylcyklohexylamínu, ktorý zodpovedá vzorcu 2-metyl-1-(1-piperidinyl)-1-(2-tienyl)cyklohexán,' na prípravu medikamentu určeného na obmedzenie alebo inhibovanie účinkov spôsobených neurotoxickými produktmi alebo produktmi, ktoré obsahujú neurotoxín, u primátov a predovšetkým u človeka. Môže sa použiť samotný alebo v kombinácii s ďalšími látkami s farmaceutickou účinnosťou, ktoré sú vhodné na obmedzovanie alebo inhibovanie účinkov spôsobených neurotoxickými produktmi alebo produktmi, ktoré obsahujú neurotoxín.

Tienylcyklohexylamín definovaný vyššie, je opísaný v európskom patentovom spise EP 396 734. Ak zoberieme do úvahy existenciu dvoch asymetrických uhlíkov, tento tienylcyklohexylamín sa môže vyskytovať v zásade v čistej racemickej, diastereo-izomérnej alebo enantiomérnej forme.

Príprava diastereoizomérov 1-tienylcyklohexylamínu sa uskutočňuje reakciou

2-brómtienylmagnéziovej zlúčeniny s 2-metylcyklohexanónom a spracovaním takto získaného 2-metyl-1-(2-tienyl)cyklohexanolu s NaN3, čím sa získa zodpovedajúci azid, redukciou tohto azidu na amín a napokon spracovaním s 1,5-halogénpentátom. Cis- a trans-diastereoizoméry sa oddelia preparatívnou chromatografiou na silikagéle, s použitím zmesi hexán/éter (95/5 obj./obj.); prvá frakcia, zodpovedajúca trans-zlúčenine, kryštalizuje pri teplote 40 až 41 °C; druhá frakcia, zodpovedajúca ciszlúčenine, kryštalizuje pri teplote 80 až 81°C. Enantioméry sa môžu získať použitím opticky aktívnych kyselín, ako je kyselina O,O'-4-toluoylvínna.

Predmetom vynálezu je predovšetkým použitie tienylcyklohexylamínu, definovaného vyššie, s najmenej jednou látkou zvolenou z anticholínergných, antikonvulzívnych látok a látok, ktoré reaktivujú cholínesterázy.

Predmetom vynálezu je predovšetkým použitie tienylcyklohexylamínu, definovaného vyššie, s najmenej jednou anticholínergnou látkou, najmenej jednou antikonvulzívnou látkou a najmenej jednou látkou, ktorá reaktivuje cholínesterázy.

Použité farmakologické termíny majú štandardný význam, známy pre odborníkov v odbore. Spomedzi anticholínergných látok sa môžu uviesť nasledujúce látky: atropín, skopolamín, atropín-N-oxid, dihexyverín a tiemóniummetylsulfát. Spomedzi antikonvulzívnych látok sa môžu uviesť nasledujúce látky: fenobarbital, primidon, karbamazepín, etosuximid, fenytoin, valproát sodný, progabid, gabapentín, vigabatrin, loprazolam, benzodiazepíny, ako je clonazepam, clobazam, diazepam a prodiazepam. Spomedzi látok reaktivujúcich cholínesterázy sa môže uviesť pralidoxim, obídoxim, HI6.

Predmetom predloženého vynález je tiež použitie tienylcyklohexylamínu, definovaného vyššie, vyznačujúceho sa tým, že tienylcyklohexylamín sa kombinuje s reverzibilným inhibítorom cholínesterázy, určeným na podávanie pred vystavením neurotoxickým produktom alebo produktom obsahujúcim neurotoxín. Spomedzi reverzibilných inhibítorov cholínesterázy je možné uviesť nasledujúce: pyridostigmín, fyzostigmín.

Predmetom podľa predloženého vynálezu je tiež, ako medikament, prípravok obsahujúci tienylcyklohexylamín, definovaný vyššie, v kombinácii s najmenej jednou látkou s farmaceutickou účinnosťou vhodnou na obmedzenie alebo inhibovanie účinkov spôsobených neurotoxickými produktmi alebo produktmi obsahujúcimi neurotoxín, ako aj farmaceutické kompozície, ktoré ju obsahujú.

Predmetom podľa predloženého vynálezu je ďalej predovšetkým tiež, ako medikament, prípravok obsahujúci tienylcyklohexylamín, definovaný vyššie, v podstate v čistej racemickej, diasteroizomérnej alebo enantiomérnej forme, v kombinácii s najmenej jednou látkou zvolenou z anticholínergných, antikonvulzívnych látok a látok, ktoré reaktivujú cholínesterázy. Vyššie definovaný prípravok výhodne obsahuje tienylcyklohexylamín, ako je definovaný vyššie, v kombinácii s najmenej jednou anticholínergnou látkou, jednou antikonvulzívnou látkou a jednou látkou, ktorá reaktivuje cholínesterázy.

Vynález sa týka tiež prípravku, ktorý obsahuje tienylcyklohexylamín a najmenej jednu látku zvolenú z anticholínergných, antikonvulzívnych látok a látok, ktoré reaktivujú cholínesterázy v kombinovanom prípravku na súčasné použitie, oddelené použitie alebo na použitie v predĺženom časovom období, na obmedzenie alebo inhibovanie účinkov spôsobených neurotoxickými produktmi alebo produktmi, ktoré obsahujú neurotoxín.

Predmetom podľa predloženého vynálezu je tiež prípravok, ako je definovaný · vyššie, ktorý obsahuje inhibítor cholínesterázy určený na podávanie pred vystavením neurotoxickým produktom alebo produktom obsahujúcim neurotoxín.

Tienylcyklohexylamín, ako je definovaný vyššie, sa môže podávať v dávke, ktorá obsahuje medzi 0,001 a 10 mg/kg, výhodne medzi 0,01 a 0,1 mg/kg. Látky, ktoré sa prípadne s ním kombinujú, ako anticholínergné, antikonvulzívne látky alebo látky, ktoré reaktivujú cholínesterázy, ktoré sú známe vo farmakológii, sa podávajú v dávkach, ktoré sa zvyčajne doporučujú v príslušných farmakologických oblastiach.

Tienylcyklohexylamín, ako je definovaný vyššie, ako aj farmaceutický účinné látky, s ktorými sa zvyčajne kombinuje, sa môžu podávať s použitím štandardných spôsobov podávania, ako orálne, intramuskulárne, intraperitoneálne, subkutáne alebo intravenózne. Môžu sa podávať súčasne alebo oddelene, rovnakým alebo rozdielnym spôsobom podávania. Výhodne sa tienylcyklohexylamín podáva intravenóznym spôsobom a farmaceutický účinné látky, s ktorými sa zvyčajne kombinuje, ako sú anticholínergné, antikonvulzívne látky a látky, ktoré reaktivujú cholínesterázy, sa podávajú intramuskulárnym alebo intravenóznym spôsobom. V prípade, ak sa tienylcyklohexylamín kombinuje najmenej s jednou z vyššie uvedených farmaceutický účinných látok, podávanie tienylcyklohexylamínu sa môže posunúť vzhľadom na podávanie týchto ďalších látok.

Podávanie tienylcyklohexylamínu sa môže tiež uskutočňovať od okamihu intoxikácie až do niekoľkých hodín po intoxikácii. Výhodne sa podávanie uskutočňuje v rozpätí do dvoch hodín po intoxikácii. Výhodnejšie sa toto podávanie môže uskutočniť medzi 10 minútami a 45 minútami po intoxikácii.

Výsledky, ktoré sú uvedené ďalej v experimentálnej časti, ilustrujú vysokú účinnosť doplnkového podávania cis-tienylcyklohexylamínu 10 až 45 minút po intoxikácii.

Predmetom vynálezu je teda vyššie opísané použitie, kde 2-metyl-1-(1piperidinyl)-1-(2-tienyl)cyklohexán, v podstate v čistej racemickej, diastereoizomérnej alebo enantiomérnej forme, sa podáva v rozpätí dvoch hodín a výhodne v rozpätí jednej hodiny po intoxikácii neurotoxickými produktmi alebo produktmi obsahujúcimi neurotoxín.

Nasledujúce príklady sú uvedené na ilustrovanie vyššie uvedených postupov a v žiadnom prípade sa nesmú chápať ako obmedzenie rozsahu vynálezu.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Farmakologická štúdia

1) Prvá séria experimentov

Protokol štúdie

Deväť opíc Cynomolgus sa ošetrilo jednu hodinu pred intoxikáciou pyridostigmínom (0,2 mg/kg; intramuskulárne). Táto dávka pyridostigmínu inhibuje 30% plazmatických cholínesteráz, čo zodpovedá ochranným normám prijatým v krajinách NATO. Zvieratá sa potom intoxikovali s 5 LD₅₀ somanu, organofosfátovej zlúčeniny (30 gg/kg; intramuskulárne), potom sa ošetrili 1 minútu po intoxikácii .“terapeutickým koktajlom” obsahujúcim: atropínsufát (0,5 mg/kg; intramuskulárne) + válium (0,2 mg/kg; intramuskulárne) + pralidoxím (30 mg/kg; intramuskulárne). Táto zmes troch liečiv zodpovedá liečbe v stave ohrozenia stanovenej pre osoby formou autoinjektovateľných injekčných striekačiek.

Desať minút po intoxikácii sa zvieratám podal cis-tienylcyklohexylamín intravenóznou cestou (0,001; 0,03 a 0,1 mg/kg, 3 zvieratá na dávku).

Zvieratá (ničím neobmedzované) sa potom pozorovali, pričom sa zaznamenávali príznaky akútnej toxicity a zotavenie v rámci 17 období pozorovania, v rozpätí od 2 minút po intoxikácii až do 3 týždňov. Tri týždne po intoxikácii sa zvieratá utratili, mozog sa potom vybral, udržiaval sa ponorený vo formalíne počas 1 mesiaca, potom sa uskutočnili histologické rezy (10 μΙ), ktoré sa vyfarbili s Luxol Fast Blue HE, aby sa preskúmali možné neuropatologické následné účinky.

Podobné experimenty sa uskutočnili na kontrolných zvieratách, ktoré nedostávali cis-tienylcyklohexylamín. Bolo možné pozorovať vplyv tejto zlúčeniny na klinické príznaky intoxikovaných zvierat a na neuropatologické následné účinky.

Výsledky

Kontrolné zvieratá (n = 4)

Pri týchto zvieratách sa zaznamenali určité príznaky intoxikácie (fascikulácia svalov, trasenie, žuvanie), ktoré sa objavilo v rozpätí 1 až 2 minút po podaní somanu, zvieratá potom mali tonicko-klonické kŕče spojené s opistotonom. Potom všetky zvieratá rýchle upadli do kómy v priebehu približne 5 minút. Kóma zvierat trvala od 20 do 40 minút. Po tejto fáze kómy sa zvieratá pomaly zotavovali v priebehu 6 hodín nasledujúcich po intoxikácii, pri postupnom zastavení trasenia.

Jeden deň po intoxikácii boli všetky zvieratá schopné chodenia, uchopenia a šplhania, avšak ich normálna aktivita sa prinavrátila až o 4 dni po intoxikácii. Tri týždne po intoxikácii histopatologické vyšetrenie mozgových tkanív preukázalo značný neuronálny úbytok v druhej vrstve frontoparietálneho kortexu u všetkých primátov.

Zvieratá ošetrené tienylcyklohexylamínom (n = 3 na dávku)

Intravenózne podanie cis-tienylcyklohexylamínu sa uskutočnilo, ako je uvedené v protokole štúdie, počas fázy kómy zvierat. Pozorovanie klinického stavu je zosumarizované v nasledujúcej tabuľke:

Dávka cistienylcykloh exylamínu (mg/kg)	Príznaky akútnej toxicity rovnaké ako pri kontrole	Prevencia respiračných ochorení	Rýchle ustúpenie trasenia	Porucha koordinácie	Doba zotavenia (kontroly 4 dni)
0,1	X	X	X	X	4 dni
0,003	X	X	X		4 dni
0,01	X				24 hodín, bez recidívy po 48 hodinách

Tri týždne po intoxikácii histologické vyšetrenie mozgových tkanív zvierat ošetrených tienylcyklohexylamínom ukázalo normálnu neuronálnu hustotu vo vrstve II frontoparietálneho kortexu, bez ohľadu na to, aká dávka cis-tienylcyklohexylamínu sa použila. Výpočty, ktoré sa uskutočnili v tejto mozgovej oblasti ukazujú signifikantný rozdiel medzi neuronálnou hustotou pozorovanou pri kontrolných zvieratách a pri zvieratách, ktoré boli ošetrené tienylcyklohexylamínom. Z tohto dôvodu tu jestvuje neutoprotektívny účinok tienylcyklohexylamínu, ktorý sa prejavuje pri najnižšej dávke.

Závery

Pri našich experimentálnych podmienkach núdzové ošetrenie sa podávalo 1 minútu po intoxikácii. Pri týchto podmienkach epileptický stav vyvolaný somanom trval len 3 až 5 minút. Napriek tomu, neuropatologické následné účinky trvali 3 týždne po intoxikácii. Podávanie cis-tienylcyklohexylamínu doplnkovo k núdzovej všestrannej liečbe umožňovalo, pri dávke 0,01 mg/kg intravenózne, pozoruhodne zvýšiť zotavenie intoxikovaných zvierat 48 hodín po podaní somanu a zamedziť neuronálnej rarefakcii pozorovanej vo frontoparietálnom kortexe pri kontrolných zvieratách.

2) Druhá séria experimentov

Séria experimentov opísaných v ďalšom je blízka reálnej situácii. Prijatý protokol je nasledujúci:

Zvieratá intoxikované s 8 LD₅₀ dostávajú iba ekvivalent jednej jednoduchej autoinjektovateľnej striekačky obsahujúcej atropínsulfát, válium a pralidoxím 1 minútu po intoxikácii. Cis-tienylcyklohexylamín sa podáva o 45 minút neskôr intravenóznou cestou; toto oneskorenie o 45 minút sa pokladalo za zodpovedajúce času, ktorý je potrebný na nadobudnutie vedomia zranenej osoby, potom jej transportu na stanicu prvej pomoci, kde by jej šaty boli dekontaminované špecializovaným tímom a podaniu intravenóznej injekcie lekárskym personálom.

Protokol štúdie

Jeden mesiac pred experimentom sa 6 opíc Cynomolgus operovalo, aby sa takto umožnila implantácia kortikálnych elektród na zaznamenávanie EEG v súlade so štandardizovaným protokolom (Mistress a kol., Sci. Tech. Anim. Lab., 1984, 9, 35 - 46). Uskutočnila sa vhodná postoperačná starostlivosť (celková antibiotická terapia počas 10 dní.a lokálna aplikácia počas 5 dni).

Deň pred experimentom sa zvieratá anestetikovali (Imalgen, 3 mg/kg, intramuskuláme), potom sa umiestnili do sedadla obmedzujúceho pohyb. O 24 hodín neskôr (čas potrebný na vylúčenie viac ako 99% Imalgenu) sa primáty pripojili na EEG zapisovač (ALVAR 16 kanálov). EEG aktivita zvierat sa zaznamenávala kontinuálne počas 6 hodín a analýza distribúcie energie sa uskutočňovala po FFT analýzach pomocou frekvenčných pásov (delta pás 0,5 až 5 Hz, theta pás 10 až 16 Hz, beta pás 16 až 48 Hz), aby sa umožnil výpočet EEG indexu (% delta + theta / % beta). Zvieratá sa vopred ošetrili pyridostigmínom (0,2 mg/kg, intramuskulárne) jednu hodinu pred intoxikáciou somanom. Táto dávka pyridostigmínu inhibuje 30% plazmatických cholínesteráz, čo zodpovedá ochranným normám prijatým v krajinách NATO. Zvieratá sa potom intoxikovali s 8 LD50 somanu, organofosfátovej zlúčeniny (30 pg/kg; intramuskulárne) potom sa ošetrili 1 minútu po intoxikácii zmesou pozostávajúcou z: atropínsulfátu (0,25 mg/kg; intramuskulárne) + válium (0,1 mg/kg; intramuskulárne) + pralidoxim (15 mg/kg; intramuskulárne). Tieto dávky, použité u primátov, sú ekvivalentné podaniu jednej jednoduchej autoinjektovateľnej striekačky u človeka. Zvieratá sa potom pozorovali a pre každé zviera sa zaznamenávala prítomnosť alebo neprítomnosť 5 príznakov akútnej toxicity (trasenie, klonus alebo tonicko-klonická kríza, kóma, respiračné ťažkosti, hyperaktivita voči zvukovým a hmatovým podnetom) ako aj 4 príznaky zotavenia (očný reflex, reflex hryzenia, uchopenie, vizuálna schopnosť sledovať pohyb), ktoré sa zaznamenávali po 2, 5,10,15, 30,45 minútach po intoxikácii.

minút po intoxikácii sa 3 zvieratá ošetrili s cis-tienylcyklohexylamínom, podávaným intravenóznou cestou v dávke 0,1 mg/kg. Ďalším 3 zvieratám sa neposkytlo ošetrenie. Príznaky toxicity a zotavenia uvedené vyššie sa potom zaznamenávali pre každé zviera 1 hodinu, 1 hodinu 15 minút, 1 hodinu 30 minút, 1 hodinu 45 minút, 2 hodiny, 2 hodiny 30 minút, 3 hodiny, 3 hodiny 30 minút, 4 hodiny, 4 hodiny 30 minút, 5 hodín po intoxikácii. Päť hodín po intoxikácii (t.j. 6 hodín po začiatku experimentu, pri zohľadnení času predošetrenia pyridostigmínom) sa zaznamenávanie EEG aktivity zvierat zastavilo, primáty sa vybrali zo sedadla obmedzujúceho pohyb a potom sa preniesli (bez anestézy) do klietok s väčšími rozmermi. Klinický stav zvierat sa potom vyhodnotil 5 hodín, 5 hodín 30 minút, 6 hodín, potom 24 hodín, 48 hodín, 3 dni, 4 dni, 1 týždeň, 2 týždne, 3 týždne po intoxikácii na rovnaké príznaky akútnej toxicity a zotavenia ako boli uvedené vyššie, ku ktorým sa pridala prítomnosť alebo neprítomnosť prostrácie (príznak toxicity) ako aj ich schopnosť sadnúť si, chodiť, šplhať sa a stravovať sa (príznaky zotavenia).

Tri týždne po intoxikácii sa zvieratá utratili pomocou intravenóznej injekcie pentobarbitalu, mozog sa rýchle vybral a umiestnil sa do 10% formalinu na 1 mesiac (výmena kúpeľa každý týždeň). Napokon sa uskutočnilo histologické vyšetrenie mozgových tkanív po vyfarbení s Hemalun-eosin/luxol Fast-Blue.

Výsledky

Prvých 45 minút po intoxikácii (pred podaním cis-tienylcyklohexylamínu, obdobie P-i)

Klinické príznaky

Pre všetky zvieratá sa zaznamenali príznaky závažnej intoxikácie (fascikulácia svalov, trasenie, žuvanie), ktoré sa objavilo v rozpätí 2 až 3 minút po podaní somanu. Všetky zvieratá potom mali tonicko-klonické kŕče spojené s opistotonom. Latentné obdobie kŕčov je približne 3 až 4 minúty. Počas tejto akútnej fázy boli zvieratá cyanotické. Päť zo šiestich intoxikovaných zvierat upadlo do kómy v priebehu približne 5 až 8 minút. Táto kóma trvala približne 30 minút. Pri 6 zvieratách sa pozorovala celková nepravidelnosť respiračných pohybov (dýchavičnosť) a zaznamenali sa hojné sekrécie. 45 minút po intoxikácii bolo jedno zviera ešte stále v kóme a iba jedno zo 6 zvierat vykazovalo normálny palpebrálny reflex a schopnosť vizuálne sledovať pohyb. V rovnakom čase všetky zvieratá vykazovali pretrvávajúce chvenie spojené so signifikantnými poruchami respiračného rytmu.

EEG aktivita t ¹

Prejav tonicko-klonických kríz uvedený vyššie je spojený s epileptickým stavom (status epilepticus), ktorý je charakteristický pre intoxikáciu organofosfátmi. Tento stav trvá približne 5 minút, potom ustúpi počas fázy kómy, potom sa znova objaví (t.j. trvá približne počas 30 minút po intoxikácii). Analýza pomocou frekvenčných pásov ukázali zvýšenie distribúcie EEG energie v beta páse, spojené s. poklesom energie vzhľadom na delta pás, v oboch prípadoch pri temporálnej a parietálnej derivácii. Toto zvýšenie relatívnej energie vo vysokých frekvenciách je vynikajúcou charakteristikou injekcie diazemapu podanej zvieratám (Lipp, Árch. Int.

Pharmacodyn., 1987, 202, 244 - 251). Výpočet EEG indexu (delta + theta/beta) v priebehu prvých 45 minút po intoxikácii ukazuje veľmi signifikantné zníženie posledne uvedeného, vzhľadom na obdobie pred injekčným podaním somanu. Toto ukazuje, v súlade s údajmi uvedenými v literatúre, hyperexcitáciu na celebrálnej úrovni (Nagymajtenyi a kol., Neurotox. Teratology, 1988,10, 429-434).

Od 45 minút po intoxikácii po koniec EEG zaznamenávania (5 hodín po intoxikácii, obdobie P₂)

Klinické príznaky

Tri zvieratá, ktoré nedostávali cis-tienylcyklohexylamín vykazovali perzistnentné trasenie spojené s klonusom počas niekoľkých hodín s celkovou nepravidelnosťou abdominálnych pohybov. Ich zotavovanie bolo veľmi pomalé, pričom jedno zviera z troch vykazovalo reflexy hryzenia a uchopenia ako aj vizuálnu schopnosť sledovať pohyb 6 hodín po intoxikácii. Respiračné poruchy spojené s nadmernou sekréciou sa zaznamenali počas celého obdobia P₂. Jedno zo zvierat uhynulo na respiračný distres 4 hodiny po intoxikácii.

Pri zvieratách, ktoré dostali cis-tienylcyklohexylamín sa pozorovalo zastavenie klonusu alebo tonicko-klonických kríz 5 až 10 minút po intravenóznej injekcii prípravku, ako aj celkové zníženie respiračných porúch. Zvieratá mali pravidelné dýchanie. Po počiatočnej fáze kómy sa pri troch zvieratách ošetrených cistienylcyklohexylamínom obnovila ich schopnosť hryzenia, uchopenia a vizuálnej schopnosti sledovať pohyb 2 hodiny až 2 hodiny 30 minút po intoxikácii. Žiadne z troch zvierat ošetrených cis-tienylcyklohexylamínom neuhynulo počas prvých 5 i

hodín nasledujúcich po injekcii somanu.

EEG aktivita

Pri zvieratách, ktoré nedostávali cis-tienylcyklohexylamín sa pozoroval perzistentný epilepticus status v priebehu 2 hodín 30 minút po intoxikácii. Aktivita EEG potom postupne poklesla s a) - prevahou v relatívnej energii v nízkych frekvenciách (delta pásy) spojenou s b) - poklesom v relatívnej energii vo vyšších frekvenciách (beta pásy). Výpočet EEG indexu počas obdobia P₂ ukazuje, vzhľadom na obdobie predchádzajúce injekcii somanu, výrazné zvýšenie posledne uvedeného, a to ako vtemporálnej tak i v parietálnej derivácii. Toto zvýšenie indexu, zvýšením relatívnej časti delta pásu a poklesom relatívnej časti v beta páse, je predikáciou neuropatologických následných účinkov (Philipens a kol., Pharmacol. Biochem. Behav., 1992, 42, 711-719).

U zvierat, ktoré dostávali cis-tienylcyklohexylamín sa pozorovalo, že status epilepticus sa zastavil 8 až 10 minút po intravenóznej injekcii tohto prípravku. Vysoké frekvencie/vysoká energetická stopa poskytuje spôsob na pomalú kmitovú stopovú (2 až 4 Hz) charakteristiku cis-tienylcyklohexylamínu počas približne 1 hodiny. EEG stopa sa potom postupne vracia do normálu bez opakovania paroxyzmálnej aktivity. Analýza pomocou frekvenčného pásu cez obdobie P2 ukázala distribúciu EEG energie, ktorá bola ekvivalentná energii zaznamenanej počas obdobia predchádzajúceho intoxikácii. EEG index vypočítaný počas tohto obdobia je identický s indexom počas obdobia pred intoxikáciou.

Od päť hodín po intoxikácii po utratenie zvierat (3 týždne po experimente)

Dve prežívajúce kontrolné zvieratá sa zotavovali veľmi pomaly po navrátení do svojej klietky. Jedno z dvoch zvierat uhynulo 48 hodín po experimente v stave nadmerného vyčerpania (zviera bolo neschopné pohybu a samokŕmenia). Jediné prežívajúce zviera z kontrolných sérií vykazovalo uspokojivo vyhovujúce zotavenie z päťhodinovej intoxikácie, kombináciou očného reflexu, uchopenia, hryzenia, chodenia, šplhania a kŕmenia.

Pri 3 zvieratách ošetrených cis-tienylcyklohexylamínom sa celkové klinické zotavenie zaznamenalo 5 hodín po intoxikácii, s výnimkou schopnosti chodenia a šplhania, ktoré sa u týchto zvierat nenavrátilo do normálu až do jedného dňa po experimente. Žiadne z 3 zvierat ošetrených cis-tienylcyklohexylamínom neuhynulo v priebehu 3 týždňov pozorovania a ich klinické zotavenie bolo uspokojivo vyhovujúce.

Histopatologické vyšetrenie mozgu prežívajúcich zvierat

Histopatologické vyšetrenie mozgu jediného zvieraťa , ktoré prežilo z kontrolnej skupiny, ktorá nebola ošetrená cis-tienylcyklohexylamínom, ukázalo neuropatologické následné účinky v hippocampe a vo frontoparietálnom kortexe. V hippocampe sa pozorovali neuronálne ohniská úbytku v pyramidálnej vrstve v CAi oblasti, ako aj závažný atak na granulárnej vrstve gyrus dentatus. Vo frontoparietálnom kortexe sa pozorovala neuronálna rarefakcia ll-lll vrstvy.

Pri zvieratách ošetrených cis-tienylcyklohexylamínom sa nezaznamenalo žiadne patologické poškodenie.

Súhrn

Pozri tabuľku na nasledujúcej strane.

Histológia po 3 týždňoch			Poškodenia v hippocampe a vo frontoparietá Inom kortexe	Žiadne poškodenia
Prežitie po 48 hodinách			1/3	3/3 I
Klinické zotavenie	Prakticky nejestvovalo		Znovunadobudnú tie reflexov a vizuálnej schopnosti sledovať pohyb veľmi pomaly >hodín	Znovunadobudnú tie reflexov a vizuálnej schopnosti sledovať pohyb počas 2h až 2h 30 min. po intoxikácii
Kóma	5-8 minút po intoxikácii u 5 zvierat		Až do 30 minút po intoxikácii	Až do 30 minút po intoxikácii
Respiračné ťažkosti	Veľmi signifikantná dýchavičnosť spojená s hojnou sekréciou		Trvalé počas niekoľkých hodín	Ustali po 5 až 10 minútach po injekcii cistienylcyklohexylamí nu
EEG	Epileptický stav 3-4 minúty po intoxikácii delta pási beta pást EEG indexB		Opakovaný epileptický stav po ukončení kómy počas 3 hodín, potom prerušovaná stopa delta pást beta pási EEG indexft	Epileptický stav ustal v priebehu 10 minút. Mierne kmity počas 1 hodiny, potom EEG stopy normálne. EEG index normálny.
Tonickoklonické krízy	Intenzívne 3 až 4 minúty po intoxikácii		Trvalé počas niekoľkých hodín	Zastavenie 5 až 10 minút po injekcii cistlenylcyklo hexylamin u _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________i
	Obdobie Pi Prvých 45 minút po‘ intoxikácii a injekcia zmesi atropín/pralidoxim/diazep am	Obdobie P₂ Viac ako 45 minút po intoxikácii	Kontrolné zvieratá	Zvieratá ošetrené cistienylcyklohexylamínom

Závery

V týchto druhých sériách experimentov uskutočnených pri podmienkach, ktoré sú blízke skutočnej situácii, bolo možné ukázať, že podanie cistienylcyklohexylamínu , spojené s autoinjektovateľnou striekačkou,

a) veľmi výrazne zlepšuje prežitie intoxikovaných zvierat

b) povzbudzuje klinické zotavenie

c) rýchle normalizuje EEG aktivitu

d) celkovo zabraňuje výskytu neuropatologických následných účinkov.

Naše výsledky preto jasne demonštrujú terapeutický úžitok spojený s podávaním cis-tienylcyklohexylamínu u závažne intoxikovaného subjektu, ktorý by bol schopný sám si aplikovať jednoduchú striekačku s troma komorami, dokonca i vtedy, ak by sa podanie cis-tienylcyklohexylamínu uskutočnilo až 45 minút po naliehavom ošetrení.

Formulácia

Prípravok na injektovateľný roztok cis-tienylcyklohexylamínu

- lyofilizát cis-tienylcyklohexylamínu 0,5 mg *

- manitol 25 mg v

- chlorid sodný 85,5 mg r .

- voda pre injekčné prípravky: sqf 10,0 ml

Látky, ktoré sa prípadne kombinujú s tienylcyklohexylamínom sa používajú vo svojich príslušných farmakologických oblastiach.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Použitie tienylcyklohexylamínu, ktorý zodpovedá vzorcu 2-metyl-1 -(1 -piperidinyl)1-(2-tienyl)cyklohexán, v podstate v čistej racemickej, diastereoizomérnej alebo enantiomérnej forme, samotného alebo v kombinácii s ďalšími farmaceutický účinnými látkami, na prípravu medikamentu určeného na obmedzenie alebo inhibovanie účinkov spôsobených neurotoxickými produktmi alebo produktmi obsahujúcimi neurotoxín.
2. Použitie podľa nároku 1, kde tienylcyklohexylamín sa kombinuje s jedným alebo s viacerými ďalšími farmaceutický účinnými látkami schopnými obmedzovať alebo inhibovať účinky spôsobené neurotoxickými produktmi alebo produktmi obsahujúcimi neurotoxín.
3. Použitie podľa nároku 2, kde tienylcyklohexylamín sa kombinuje najmenej s jednou látkou vybranou z anticholínergných, antikonvulzívnych látok a látok, ktoré reaktivujú cholínesterázy.
4. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 2 až 3, kde tienylcyklohexylamín sa kombinuje najmenej s jednou anticholínergnou látkou, najmenej jednou antikonvulzívnou látkou a najmenej jednou látkou, ktorá reaktivuje cholínesterázy.
5. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 4, kde anticholínergná látka je zvolená zo skupiny zahrňujúcej atropín, skopolamín, atropín-N-oxid, dihexyverín a tiemóniummetylsulfát.
6. Použitie podľa 3 až 4, kde antikonvulzívna látka je zvolená zo skupiny zahrňujúcej nasledujúce látky ako je fenobarbital, primidon, benzodiazepíny, karbamazepín, etosuximid, fenytoin, valproát sodný, progabid, gabapentin, vigabatrin a loprazolam.
7. Použitie podľa nároku 6, kde antikonvulzívnou látkou je benzodiazepín vybraný zo skupiny zahrňujúcej clonazepam, clobazam, diazepam a prodiazepam.
8. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 3 až 4, kde látka, ktorá reaktivuje cholínesterázy je zvolená zo skupiny zahrňujúcej nasledujúce látky ako je pralidoxim, obidoxim a HI6.
9. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 8, kde tienylcyklohexylamín sa kombinuje s reverzibilným inhibítorom cholínesterázy určeným na podávanie pred vystavením neurotoxickým produktom alebo produktom obsahujúcim neurotoxín.
10. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 9, kde reverzibilný inhibítor cholínesterázy je zvolený z pyridostigmínu, fyzostigmínu.
11. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 10, kde 2-metyl-1-(1-piperidinyl)-1 (2-tienyl)cyklohexán, v podstate v čistej racemickej, diastereoizomérnej alebo enantiomérnej forme, sa podáva v rozpätí dvoch hodín, a výhodne v rozpätí jednej hodiny, nasledujúcej po intoxikácii neurotoxickými produktmi alebo produktmi obsahujúcimi neurotoxín.
12. Prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje tienylcyklohexylamín, ako medikament, zodpovedajúci vzorcu 2-metyl-1-(1-piperidinyl)-1-(2tíenyljcyklohexán, v podstate v čistej racemickej, diastereoizomérnej alebo enantiomérnej forme, kombinovaný najmenej s jednou farmaceutický účinnou látkou, schopnou obmedzovať alebo inhibovať účinky spôsobené neurotoxickými produktmi alebo produktmi obsahujúcimi neurotoxín.
13. Prípravok podľa nároku 12, ako medikament, vyznačujúci sa tým, že tienylcyklohexylamín sa kombinuje najmenej s jednou látkou zvolenou z anticholínergných, antikonvulzivnych látok a látok, ktoré reaktivujú cholínesterázy.
14. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 12 až 13, ako medikament, vyznačujúci sa tým, že tienylcyklohexylamín sa kombinuje najmenej s jednou anticholínergnou látkou, najmenej s jednou antikonvulzívnou látkou a najmenej s jednou látkou, ktorá reaktivuje cholínesterázy.
15. Prípravok definovaný v ktoromkoľvek z nárokov 13 až 14, ako medikament, vyznačujúci sa tým, že anticholínergná látka je zvolená zo skupiny zahrňujúcej atropín, skopolamín, atropín-N-oxid, dihexyverín a tiemóniummetylsulfát.
16. Prípravok definovaný v ktoromkoľvek z nárokov 13 až 14, ako medikament, vyznačujúci sa tým, že antikonvulzívna látka je zvolená zo skupiny zahrňujúcej nasledujúce látky ako je fenobarbital, primidon, karbamazepín, etosuximid, fenytoin, valproát sodný, progabid, gabapentin, vigabatrin, loprazolam a benzodiazepíny, ako je clonazepam, clobazam, diazepam a prodiazepam.
17. Prípravok definovaný v ktoromkoľvek z nárokov 13 až 14, ako medikament, vyznačujúci sa tým, že látka, ktorá reaktivuje cholínesterázy je zvolená zo skupiny zahrňujúcej pralidoxim, obidoxim, HI6.
18. Prípravok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje tienylcyklohexylamín a najmenej jednu látku zvolenú z anticholínergných, antikonvulzívnych látok a látok, ktoré reaktivujú cholínesterázy, v kombinovanom prípravku na súčasné alebo oddelené použitie alebo použitie v predĺženom časovom období, na obmedzenie alebo inhibovaníe účinkov spôsobených neurotoxickými produktmi alebo produktmi obsahujúcimi neurotoxín.
19. Prípravok podľa nároku 18, vyznačujúci sa tým, že obsahuje inhibítor cholínesterázy určený na podávanie pred vystavením neurotoxickému produktu alebo produktu obsahujúcemu neurotoxín
20. Prípravok podľa nároku 19, vyznačujúci sa tým, že reverzibilný inhibítor cholínesterázy je zvolený z pyridostigmínu, fyzostigmínu.