CZ198999A3

CZ198999A3 - Nové terapeutické použití derivátu thienycyklohexylaminu

Info

Publication number: CZ198999A3
Application number: CZ19991989A
Authority: CZ
Inventors: Guy Lallement; Pierre D'arbigny; Jean-Marc Kamenka
Original assignee: Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques (S. C. R. A. S.)
Priority date: 1996-12-06
Filing date: 1997-12-05
Publication date: 2000-06-14
Also published as: WO1998024434A1; RU2183456C2; NO992726D0; ATE251907T1; EP0956019B1; ES2206762T3; CZ296245B6; NO992726L; DE69725613D1; JP3859238B2; JP2001505217A; NO323695B1; TW482674B; DK0956019T3; EP0956019A1; SK285208B6; AR008536A1; TR199901237T2; PT956019E; AU734828B2

Description

Oblast techniky

Vynález se týká nového terapeutického použití derivátu thienylcyklohexylaminu.

Dosavadní stav techniky

Přihláška vynálezu se týká použití thienylcyklohexylaminu, samotného nebo společně s jinými produkty s farmaceutickým účinkem, pro přípravu léku určeného pro omezení nebo inhibici účinků neurotoxických nebo neurotoxonických produktů. Předložený vynález se také týká produktu obsahujícího thienylcyklohexylamin a alespoň jednu anticholinergní látku, protikřečovou látku nebo látku reaktivující cholinesterásy a dále se týká farmaceutické kompozice, která ho obsahuje. Tento produkt je také obzvláště zajímavý pro svůj účinek při omezení účinků neurotoxických nebo neurotoxonických produktů.

Skupina neurotoxických nebo neurotoxonických produktů obsahuje produkty jako organofosfátové sloučeniny, které je možné nalézt například v insekticidech nebo pesticidech pro průmyslové nebo domácí použití, ale také v bojových plynech jako je soman, sarin, tabun nebo VX. Mezi doposud existujícími terapiemi v boji proti intoxikaci těmito látkami jako je polymedikace, se žádná úplně nevyhne výskytu neuropatologických následků.

- 2 Β· ·· • · · • · ·· • · · ·» ·» • · · · • · · • · ♦ • · · ·· ···· • 0 ·· • · * · • · · · • · · · · • · · · «· ··

Podstata vynálezu

Vynález se týká použití thienylcyklohexylaminu, který má chemický vzorec 2-methyl-l-(1-piperidinyl)-1-(2thienyl)cyklohexan, pro přípravu léku určeného pro omezení a inhibici účinků neurotoxických nebo neurotoxinických produktů u primátů a konkrétně u člověka. Uvedená látka může být použita sama o sobě nebo společně s jinými látkami s farmaceutickým účinkem, která jsou schopné zmírnění nebo inhibice účinků neurotoxických nebo neurotoxinických produktů.

Thienylcyklohexylamin tak, jak je výše definován, je popsán v patentu EP 396734. Vzhledem k přítomnosti dvou asymetrických atomů uhlíku může být tento thienylcyklohexylamin v racemické formě, jako diastereoizomery nebo enantiomery ve v zásadě čisté formě.

Příprava diastereoizomerů 1-thienylcyklohexylaminu spočívá v reakci 2-bromothienylmagnesia s 2-methylcyklohexanonem, zpracování takto získaného 2-methyl-l-(2thienyl)cyklohexanolu pomocí NaN3 pro získání odpovídajícího azidu, v redukci tohoto azidu na amin a konečně v působení 1,5-halogenpentanem.

Diastereoizomery cis a trans se separují chromatografií na silikagelu, za použití směsi hexanu / etheru (95/5 objemově) : první frakce, odpovídající sloučenině trans, krystalizuje při teplotě 40-41°C; druhá frakce, odpovídající sloučenině cis, krystalizuje při teplotě 80-81 °C. Enantiomery mohou být získány za použití opticky aktivních kyselin jako

- 3 4· ·4 · * · • · 44 » 4 4 · • 4 · · ·»

V w v w ► 44 4 ř · 4 » · *

I 4 4 ·· 4444 · ·

4 4 • 4 4 ·· ·· použití s alesDoň kyselina di-O,O'-4-toluoylvinná.

Předložený vynález se obzvláště týká thienylcyklohexylaminu, tak jak je výše definován, jednou látkou zvolenou ze souboru, zahrnujícího anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivující cholinesterásy.

Předložený vynález se obzvláště týká použití thienylcyklohexyláminu tak, jak je výše definován, s alespoň jednou anticholinergní látkou, alespoň jednou protikřečovou látkou a alespoň jednou látkou reaktivující cholinesterásy.

Použité farmakologické termíny mají obvyklý význam, který je známý odborníkovi. Jako anticholinergní látky je možné uvést následující látky: atropin, scopolamin, N-oxid atropinu, dihexyverin a methylsulfát tiemonia. Jako protikřečové látky je možné uvést následující látky: fenobarbital, primidon, karbamazpin, ethosuximid, fenytoin, valproát sodný, progabid, gabapentin, vigabatrin, loprazolam, benzodiazepiny jako jsou clonazepam, clobazam, diazepam a prodiazepam. Jako látky reaktivující cholinesterásy je možné uvést pralidoxim, obidoxim, HI6.

Předložený vynález se také týká použití thienylcyklohexylaminu tak, jak je výše definován, při kterém je thienylcyklohexylamin asociován s reversibilním inhibitorem cholinesterásy určeným pro podání před exposicí neurotoxickým nebo neurotoxonickým produktům. Jako reversibilní inhibitory cholinesterásy je možné uvést pyridostigmin, fysostigmin.

• ·

- 4 ·· » <

► <

• « • t# · · • 4 · ♦ · « · · · • · · ·

Předložený vynález se také týká produktu ve formě léku, který obsahuje thienylcyklohexylamin tak, jak je výše definován, společně s alespoň jednou látkou s farmaceutickým účinkem, schopnou omezit nebo inhibovat účinky neurotoxických nebo neurotoxonických produktů, jakož i farmaceutických kompozic, které ho obsahují.

Předložený vynález se obzvláště týká produktu ve formě léku, který obsahuje thienylcyklohexylamin tak, jak je výše definován, v racemické formě, jako diastereoizomery nebo enantiomery ve v zásadě čisté formě, společně s alespoň jednou látkou zvolenou ze souboru, zahrnujícího anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivující cholinesterásy. Produkt, tak jak je výše definován, obsahuje s výhodou thienylcyklohexylamin tak, jak je výše definován, asociovaný s alespoň jednou anticholinergní látkou, protikřečovou látkou a látkou reaktivující cholinesterásy.

Předložený vynález se také týká produktu, který obsahuje thienylcyklohexylamin a alespoň jednu látku zvolenou ze souboru, zahrnujícího anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivující cholinesterásy, a představuje kombinaci pro současné použití, oddělené použití nebo použití rozložené v čase, pro omezení nebo inhibici účinků neurotoxických nebo neurotoxonických produktů.

Předložený vynález má také za předmět produkt tak jak je výše definován, vyznačující se tím, že navíc obsahuje inhibitor cholinesterásy, určený pro podání před expozicí • · • * 1 • · <

«ο · ·

- 5 ····

·· ! 1 : · ί i .

neurotoxickým nebo neurotoxinickým produktům.

Thienylcyklohexylamin tak, jak je výše definován, může být podáván v dávce, která je v rozmezí mezi 0,001 a 10 mg/kg, s výhodou mezi 0,01 a 0,1 mg/kg. Látky, které jsou s ním případně asociovány, jako jsou anticholinergní látky, protikřečové látky nebo látky reaktivující cholinesterásy, známé ve farmakologii, jsou podávány v dávkách běžně doporučovaných v patřičných farmakologických oblastech.

intraperitoneálním podáním, vnitrožilním podáním. Mohou odděleně, stejnými nebo Thienylcyklohexylamin je s

Thienylcyklohexylamin tak, jak je výše definován, jakož i látky, které mají farmaceutický účinek a které jsou s ním společně podávané, mohou být podávány klasickými cestami podání, jako podání orální, podání vnitrosvalovou cestou, podáním pod kůži nebo být podávány následovně nebo různými cestami podání, výhodou podáván vnitrožilním podáním a látky s farmaceutickým účinkem, které jsou s ním případně společně podávané, jako jsou anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivující cholinesterásy, jsou podávány vnitrosvalovou cestou nebo vnitrožilním podáním. V případě, že thienylcyklohexylamin je asociován s alespoň jednou látkou s farmaceutickým účinkem tak, jak jsou výše definované, může být podání thienylcyklohexylaminu odlišné od způsobu podání těchto jiných látek.

Podání thienylcyklohexylaminu může být také provedeno počínaje od momentu intoxikace až po několik hodin po intoxikaci. Podání je s výhodou provedeno do dvou hodin po intoxikaci.

• * • i

- 6 « to to · • to to • to to «

to to to · to

to * *·

Toto podání může být provedeno s výhodou mezi 10 minutami a minutami po intoxikaci.

Výsledky, které jsou níže uvedeny v části příkladů provedení vynálezu, ukazují velkou účinnost doplňkového podání cisthienylcyklohexylaminu 10 až 45 minut po intoxikaci.

Předložený vynález má tedy za předmět výše popsané použití, při kterém se 2-methyl-l-(1-piperidinyl)-1-(2thienyl)cyklohexan, v racemické formě, jako diastereoizomery nebo enantiomery ve v zásadě čisté formě, podává s výhodou do dvou hodin po intoxikaci neurotoxickými nebo neurotoxinickými produkty.

Následující příklady jsou určeny pro ilustraci výše uvedených postupů a v žádném případě nejsou považovány za omezení rozsahu vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Příkladová část : farmakologické studie

1) První série pokusů :

Protokol studie :

Devět opicí Cynomolgus bylo ošetřeno 1 hodinu před intoxikaci pyridostigminem (0,2 mg/kg; podáno vnitrosvalovou cestou). Tato dávka pyridostigminu inhibuje 30 %

plasmatických cholinesteras, což odpovídá normám ochrany v zemích NATO. Zvířata byla potom intoxikovaná 5 DL50 somanu, organofosfátové sloučeniny (30 μς/kg; podáno vnitrosvalovou cestou) potom se na ně působí 1 minutu po intoxikaci „terapeutickým koktailem : sulfát atropinu (0,5 mg/kg; podáno vnitrosvalovou cestou) + valium (0,2 mg/kg; podáno vnitrosvalovou vnitrosvalovou terapeutice v cestou) + cestou). urgentních pralidoxim Tato směs případech (30 mg/kg; podáno 3 léků odpovídá zavedené na osobní ochranu ve formě samoinjikujících stříkaček.

Deset minut po intoxikaci dostala zvířata cisthienylcyklohexylamin vnitrožilní cestou (0,01; 0,03 a 0,1 mg/kg, 3 zvířata na dávku).

Zvířata byla potom pozorována, znaky těžké toxicity a zotavení byly pozorovány během 17 okamžiků pozorování jdoucích od 2 minut po intoxikaci až do 3 týdnů. Tři týdny po intoxikaci byla zvířata usmrcena, byl jim odebrán mozek, potom byly po jednoměsíčním ponoření do formolu vytvořeny histologické řezy (10 μπι) barvené Luxol Fast Blue HE za účelem hledání případných neurologických následků.

U zvířat určených pro srovnání, která nedostala cisthienylcyklohexylamin byly provedeny obdobné pokusy. Takto bylo možné pozorovat vliv této sloučeniny na klinické znaky intoxikovaných zvířat a neuropatologické následky.

Výsledky :

Kontrolní zvířata (n=4) :

r

- 8 • 0 0 0 0 0 • « * ·

Í0 ·0

0 * · 0 0 0 · • 0 · *

0 0 0 0 · 0 ♦ r 00 · #00 · 0 0 4 · « 0 04

U těchto zvířat byly pozorovány známky těžké intoxikace (rychlejší svalové záškuby (fascikulace), třes, žmoulání), které se objeví 1 až 2 minuty po podání somanu, zvířata mají potom tonicko-trhavé křeče, spojené s obloukovitým prohnutím těla dozadu při křeči zádového svalstva (opistotonem). Všechna zvířata upadnou potom rychle do bezvědomí, zhruba do pěti minut. Bezvědomí zvířat trvá od 20 do 40 minut. Po této fázi bezvědomí, se během šesti hodin po intoxikaci zotaví, třes postupně ustane. Den po intoxikaci, jsou všechna schopna chůze, úchopení a lezení, ale normální aktivita se u nich neobnoví dříve než do čtyř dnů po intoxikaci. Tři týdny po intoxikaci ukáže histopatologické vyšetření mozkové tkáně zásadní snížení velikosti populace neuronů ve druhé vrstvě frontoparietální kůry u všech primátů.

Zvířata ošetřovaná thienylcyklohexylaminem (n=3 na dávku):

Vnitrožilní podání cis-thienylcyklohcxylaminu se vykoná, jak bylo uvedeno v protokolu studie, během fáze bezvědomí zvířat. Pozorování klinického stavu je shrnuto v následující tabulce :

dávka	známky těžké	prevence	rychlé	ataxie doba d
cis-	toxicity		respirač	ustání	zotavení
thienyl	stejné	sé	nich	třesu	(kontrolní
cyklo-	zvířaty		potíží		zvířata
hexyl	určenými	pro			4 dny)
aminu	srovnání
(mg/kg)

_ 9 * 9 » · t · 9 · ♦ · ·» • · · · · « · · · ·· · 'Λ · • · *

9 * » · · · · « · • 9 ♦ · • « r *

Í* · · • · · • · ♦

4 ··

0,1	X	X	X	X	4 dny
0,03	X	X	X		4 dny

0,01	X	24 hodin, bez opětovného návratu do 48 hodin
Tři týdny po intoxikaci ukázalo	histologické vyšetření
mozkové	tkáně zvířat ošetřovaných	thienylcyklohexylaminem
normální	neuronální hustotu ve druhé	vrstvě frontoparietální
kůry,	při jakékoli dávce	použitého cis-

thienylcyklohexylaminu. Provedená počítání v této části mozku poukazují na významný rozdíl mezi hustotou neuronů pozorovanou u zvířat určených pro srovnání a hustotou neuronů u zvířat ošetřovaných thienylcyklohexylaminem. Neuroprotektivní účinek thienylcyklohexylaminu se tudíž projeví již u nejnižší dávky.

Závěr:

V našich podmínkách pokusu bylo urgentní ošetření podáno 1 minutu po intoxikaci. V těchto podmínkách trvá zhoršený stav vyvolaný Somanem pouze 3 až 5 minut. Nicméně • 4 ·

-104 » »4 · · · ♦· • · 4 * 4 · • * 4 4

4 · 4

4 4 ·

4 4 4 · · ·

4 4 4 »· 4 4 neuropatologické následky přetrvávají do 3 týdnů po intoxikaci. Podání cis-thienylcyklohexylaminu navíc k urgentní polymedikaci umožní při dávce 0,01 mg/kg podané vnitrožilním podáním znatelně zlepšit zotavení intoxikovaných zvířat 48 hodin po podání somanu a předejít početnímu snížení populace neuronů pozorované ve frontoparietální kůře zvířat určených pro srovnání.

2) Druhá série pokusů :

Série pokusů níže popsaná je blíže reálné situaci. Protokol, jež byl převzat je následující :

Zvířata intoxikovaná 8 DL₅₀ dostanou 1 minutu po intoxikaci pouze ekvivalent jediné samoinjikující stříkačky obsahující sulfát atropinu, valium a pralidoxim. Cisthienylcyklohexylamin je potom podán 45 minut poté vnitrožilní cestou; toto zpoždění 45 minut by mělo odpovídat času potřebnému pro sebrání zraněného a času odpovídajícímu dopravě k místu pomoci, kde by byla provedena dekontaminace oblečení týmem specialistů a vnitrožilní injekce provedená lékařským personálem.

Protokol studie :

Měsíc před pokusem bylo operováno 6 opic Cynomolgus za účelem implantace koróvých elektrod pro snímání EEG podle standardního protokolu (Mestries a kol., Sci. Tech. Anim. Lab., 1984, 9, 35-46). Byla provedena upravená pooperační péče (obecná antibiotická terapie během 10 dnů a lokální aplikace antiseptik během 5 dnů).

• · • · · • · « · « · • ·

-11·· ·· • · * · • · · ·

9 4 9 · • · · *

49

Den před pokusem byla u zvířat provedena anestesie (Imalgen, 3 mg/kg, podáno vnitrosvalovou cestou) a jsou umístěna na sedačku s upevněním. Dvacet čtyři hodin potom (doba potřebná pro vyloučení Imalgenu na více než 99 %) jsou primáti napojeni na zařízení pro snímání EEG (ALVAR 16 kanálů). EEG aktivita zvířat je nepřetržitě snímána (během šesti hodin a je provedena analýza rozložení energie ve frekvenčních pásmech po analýzou FFT (pásmo delta 0,5-5 Hz, pásmo theta 5-10 Hz, pásmo alfa 10-16 Hz, pásmo beta 16-48 Hz) za účelem získání indexu EEG výpočtem (% delta + theta / % beta). Zvířata byla ošetřena pyridostigminem (0,2 mg/kg, podáno vnitrosvalovou cestou) 1 hodinu před intoxikací somanem. Tato dávka pyridostigminu inhibuje 30 % plasmatických cholinesterás, což odpovídá normám přijatých v zemích NATO. Zvířata byla potom intoxikována 8 DL₅₀ somanu, organofosfátové sloučeniny (30 μg/kg, podáno vnitrosvalovou cestou) potom se na ně působí 1 minutu po intoxikaci směsí: sulfát atropinu (0,25 mg/kg, podáno vnitrosvalovou cestou) + valium (0,1 mg/kg, podáno vnitrosvalovou cestou) + pralidoxim (15 mg/kg, podáno vnitrosvalovou cestou). Tyto dávky odpovídají u primáta podání jediné samoinjikující stříkačky u člověka. Zvířata byla potom pozorována a přítomnost nebo nepřítomnost pěti znaků těžké toxicity (třes, trhavé pohyby nebo tonicko-trhavé krize, bezvědomí, respirační potíže, hyperreaktivita na zvukové a hmatové podněty) u každého zvířete, jakož i čtyř znaků zotavení u každého zvířete (oční reflex, štípací reflex, uchopení, sledování pohledem) byly zaznamenávány v časech 2, 5, 10, 15, 30, 45 minut po intoxikaci.

-124 · · ♦

I · · »· ♦· • · • ·.

• · ··· · • · · · • 9 ♦ ·

A · · 9 • 9 9 · • · · · « C ··

Tři zvířata byla čtyřicet pět minut po intoxikaci ošetřena cis-thienylcyklohexylaminem, podaným vnitrožilní cestou dávkou 0,1 mg/kg. Ostatní 3 zvířata nebyla ošetřena ničím. Znaky toxicity a zotavení, které byly předtím uvedeny, byly potom zaznamenávány pro každé zvíře v časech 1 hodina, 1 hodina 15, 1 hodina 30, 1 hodina 45, 2 hodiny, 2 hodiny 30, 3 hodiny, 3 hodiny 30, 4 hodiny, 4 hodiny 30, 5 hodin po intoxikaci. Pět hodin po intoxikaci (tedy 6 hodin od začátku pokusu, _r. bere-li se v úvahu čas pro ošetření pyridostigminem),' bylo zastaveno snímání aktivity EEG zvířat, primáti byli uvolněni ze sedačky, potom přeneseni (bez anestesie) do klece o velkých rozměrech. Klinický stav zvířat byl potom hodnocen v časech 5 hodin, 5 hodin 30, 6 hodin potom 24 hodin, 48 hodin, 3 dny, 4 dny, 1 týden, 2 týdny, 3 týdny po intoxikaci na základě těch stejných znaků těžké toxicity a zotavení, které byly předtím uvedeny a ke kterým se přidá přítomnost nebo nepřítomnost vysílení (znak toxicity), jakož i schopnost posadit se, schopnost chůze a lezení a schopnost živit se (znaky zotavení).

Tři týdny po intoxikaci byla zvířata usmrcena vnitrožilní injekcí pentobarbitalu, mozek byl rychle odebrán a umístěn do desetiprocentního roztoku formolu po dobu 1 měsíce (změna lázně každý týden). Potom bylo provedeno histologického vyšetření mozkové tkáně na základě obarvení Hemalun-eosinem / luxol Fast-Blue.

Výsledky :

Prvních čtyřicet pět minut po intoxikaci: (před podáním cisthienylcyklohexylaminu, Perioda Pi) .

Φ a <

» * «

Φ « ΦΦ

-13* Klinické znaky :

U všech zvířat byly zaznamenány těžké znaky intoxikace (rychlejší svalové záškuby (fascikulace), třes, žmoulání), které se objevily 2 až 3 minuty po podání somanu. Všechna zvířata měla potom tonicko-trhavé křeče spojené s obloukovitým prohnutím těla dozadu při křeči zádového svalstva (opistotonem). Latence křečí byla přibližně 3 až 4 minuty. Během této těžké fáze byla zvířata kyanotická. Pět ze šesti intoxikovaných zvířat potom upadlo do bezvědomí na přibližně 5 až 8 minut. Tato fáze bezvědomí trvala přibližně 30 minut. Anarchické respirační pohyby (dyspnoe) byly pozorované u šesti zvířat a byla zaznamenána silná sekrece. Čtyřicet pět minut po intoxikaci bylo jedno zvíře ještě v bezvědomí a jednomu ze šesti se navrátil víčkový reflex a sledování pohledem k normě. V tutéž dobu se u všech zvířat vyskytl přetrvávající třes spojený se závažnými respiračnímui potížemi.

* Aktivita EEG:

Objevení se dříve uvedených tonicko-trhavých krizí bylo doprovázeno zhoršeným stavem (status epilepticus), který je typický pro intoxikaci organofosfáty. Tento zhoršený stav trval přibližně 5 minut a potom ustal během fáze bezvědomí, potom se znovu objevil (to znamená přibližně 30 minut po intoxikaci). Analýza frekvenčních pásem ukazuje zvýšené rozložení EEG energie v pásmu beta, spojené s relativním poklesem energie pásma delta, jak v temporálních odchylkách, tak na parietálních odchylkách. Tento vzestup relativní • · 4 9 • · · · • · · · • · » « ·· 99 φ · · 9 • · ·

Λ · · « · · « · 99 9 9

99

9 9 9

9 9 *

9 9 9 9

9 9 9

9 99 energie ve vysokých frekvencích je zcela typický pro injekci diazepamu zvířatům (Lipp, Arch. Int. Farmacodyn., 1973, 202, 244-251). Výpočet indexu EEG (delta + theta / beta), během prvních 45 minut po intoxikaci poukazuje na velmi významný pokles tohoto indexu, vzhledem k periodě, která předcházela injekci somanu. Toto poukazuje vzhledem k údajům poskytovaných v literatuře na hyperexcitaci mozku (Nagymajtényi a kol., Neurotox. Teratology, 1988, 10, 429434).

Perioda od čtyřicáté páté minuty po intoxikaci až ke konci snímání EEG : (5 hodin po intoxikaci, Perioda P₂) * Klinické znaky :

Tři zvířata, která nedostala cis-thienylcyklohexylamin vykazovala neustávající třes asociovaný s trháním, které trvalo po dobu několika hodin, jakož i potíže respiračního rytmu spojené s anarchickými pohyby břicha. Jejich zotavení bylo velmi pomalé, protože jediné zvíře ze tří vykazovalo štípací reflexy a uchopení, jakož i schopnost sledování pohledem 6 hodin po intoxikaci. Respirační potíže asociované s hypersekrecí byly pozorované během celé Periody P₂. Jedno zvířat zemřelo na respirační selhání 4 hodiny po intoxikaci.

U zvířat, kterým byl podán cis-thienylcyklohexylamin, bylo 5 až 10 minut po vnitřožilní injekci produktu zaznamenáno ustání trhání nebo tonicko-trhavých krizí, jakož i úplné vymizení respiračních potíží. Zvířata ventilovala pravidelně. Po úvodní fázi bezvědomí opět získala 3 zvířata, která byla ošetřena cis-thienylcyklohexylaminem svoji reakci

-15na štípání, svoji schopnost uchopení a schopnost sledování pohledem 2 hodiny až 2 hodiny 30 po intoxikaci. Ani jedno ze tří zvířat ošetřených cis-thienylcyklohexylaminem během prvních pěti hodin po injekci somanu nezemřelo.

• to • to to to * Aktivita EEG:

U zvířat, která nebyla ošetřena cis-thienylcyklohexylaminem bylo zaznamenáno přetrvávání status epilepticus během 2 hodin 30 až 3 'hodin po intoxikaci. EEG aktivita potom postupně klesala s a) - převahou relativní energie u nízkých frekvencí (rytmus delta) asociovanou s b) - poklesem relativní energie u vysokých frekvencí (rytmus beta). Výpočet indexu EEG během periody P₂ ukazuje, vzhledem k periodě, která předchází injekci somanu, silné zvýšení tohoto indexu, souběžně na temporálních odchylkách a parietálních odchylkách. Toto zvýšení indexu předpovídá navýšením relativní části v pásmu delta a poklesem relativní části v pásmu beta neuropatologické následky (Philipens a kol., Pharmacol. Bioehem. Behav., 1992, 42, 711-719).

U zvířat, která byla ošetřena cis-thienylcyklohexylaminem bylo zaznamenáno zastavení status epilepticus 8 až 10 minut po vnitrožilní injekci tohoto produktu. Záznam s vysokou frekvencí / vysokou energií přešla na záznam představovaný pomalými vlnami (2-4 Hz) typickými pro cisthienylcyklohexylamin během přibližně jedné hodiny. Záznam EEG se potom postupně navrátil k navrácení k paroxystické aktivitě.

periody frekvenčním pásmům během energie EEG ekvivalentní normě bez zpětného

Analýza vzhledem k

P₂ ukazuje rozložení rozložení zaznamenanému během

-16• · * · • · · · • 9 9 ·

9 9 · ♦ * · ·

99

9 9 9

9 9 • · 9 9

9 9

9 9999

99 .«· 9 9 9

9 9 « « · · » · t » · · ·♦ ·» periody, která předchází intoxikaci. Index EEG vypočítaný během této periody byl shodný s indexem EEG periody před intoxikací.

* Perioda od pěti hodin po intoxikaci až po usmrcení zvířat : (3 týdny po pokusu)

Dvě zvířata, která přežila a byla určená pro srovnání se po jejich uložení do klece opět velmi pomalu zotavila. Jedno z těchto dvou zvířat zemřelo 48 hodin po pokusu ve stavu úplného vyčerpání (zvíře nebylo schopné samostatného pohybu a samostatného přijímání potravy). Jediné zvíře, které přežilo ze série zvířat určených pro srovnání vykazovalo naprosto uspokojivé zotavení od páté hodiny po intoxikaci, spojené s očním reflexem, uchopením, štípáním, chůzí, lezením a živením.

U tří zvířat ošetřených cis-thienylcyklohexylaminem bylo zaznamenáno úplné klinické zotavení 5 hodin po intoxikaci, kromě schopnosti chůze a lezení, která se vrátila k normě až den po pokusu. Ani jedno ze tří zvířat ošetřených cisthienylcyklohexylaminem nezemřelo během tří týdnů pozorování a jejich klinické zotavení bylo zcela uspokojivé.

Histopatologické vyšetření mozku zvířat, která přežila:

Histopatologické vyšetření mozku jediného zvířete, které přežilo ze skupiny kontrolních zvířat, která nebyla ošetřena cis-thienylcyklohexylaminem, ukazuje neuropatologické následky v hippokampu a ve frontoparietální kůře. V hippokampu byla zaznamenána ložiska se sníženým počtem populace neuronů v pyramidální vrstvě oblasti CAi, jakož i těžké postižení granulární vrstvy v oblasti gyrus dentatus. Ve frontoparietální kůře bylo zaznamenáno ubývání neuronů vrstev II-III.

U zvířat ošetřených cis-thíenylcyklohexylaminem nebyla zaznamenána žádná patologická poškození.

Shrnutí : viz tabulka

/.(.

— 4>

>»

O υ

Ό '>>

□

Cl ε

Λ .X

O

CL

CL cd

CL

	3
	<υ
	Ν
	Ο
	-X
Μ
¢)	Ο
X)	CL

I ε

<D

X >L>

_O *3

O

X c

u >

cd

O

N >

O +·» ><u

CL

O cd ε

o

CL

-cd

J4 ε

<υ

Ό

O <w

O

CL

Ό

O

X

Ό

Λ 'Cd

J4 >

O •o <υ ε

υ <υ

X ο

CL >Ν cd

Ο *3

Ο

CL cd .X

X

Ο

1>

>Ν

Ο

CL »>

Ο «Λ

1_

Ο

X

Ν *Ο >

χ <U

-χ >Ν

XD

4-1 υ

cd

Χ4

X

Ο

CL ><D

CL υ

cd

Λ4

X

Ο ο

CL

Ο

CL cd

X

Ο <υ

Ο

CL

Vi >>

Ό

J4

X

Ο ο

CL >Ν 'Cd υ

•—1 ο

CL

-X <υ

CL >>

X

Ο ε

>>

U.

Ο

CL <υ

X ε

*3

Ο

J4

X

Ο ε .Ξ

-X ο

ο

CL ο

.X

X

Ο

CL

Ο ε

X ο

*3 χυ ε

cd

Ο

-X χυ

Ο

CL >

Ο *3 χυ >

Μ

V χ

Ο

JZ

'1)	Ό		Vi	ο
3	3	3	3	CL
>	<υ	3			ε
Ο	xsí	>Ο	ε	ε	3
	1—.	3	ο	Ο	3
χυ	Ο	Ο	X	•4-»	Ν
CL	X	22	χυ	Ο	'3
ο	Ν	V)	χ»	CL	Ν

<— —>

ο

Λ4 χυ

Ό

Ο

J4 <υ .3

Ο

Ů4 >>

Ο >>

1)

Ό ε

ο ω

ω χ

<υ

Ό

X χυ

X >

ε ο

Ο

-X

4>

ο

CL “7 ¹⁵¹

Ο w «- KJ

Ο >

.X Ν

Ό

Ο ν*

1>

CL, '3

Ο *_» 3

3 £ ε

Cl ν“> 3 rř ε

ο X ' χυ X >>

>

Ό ε

ο

CL ε

ο ο

CL >>

*3

Ο

X '<υ

Ό

1) ε

U.

Ο ε

Ν '3

Ν >>

<υ •X >>

ε >>

X <υ >>

U >>

X

Ο ο

CL

X

9

-199 9 9 9 • 9 9 ·

9 9 9

9 9 ·

9 9 9 * 9 9

9 9

9999

99 • 9 9 9 • 9 9 «

9 9 9

9 99

Závěr :

V této druhé sérii pokusů provedených v podmínkách blízkých realitě bylo možné ukázat, že podání cisthienylcyklohexylaminu doplněné samoinjikující stříkačkou, a) - velmi znatelně zlepší přežití intoxikovaných zvířat b)

- podporuje jejich klinické zotavení

c) - navrátí jejich EEG aktivitu k normě

d) - úplně předejde vzniku neuropatologických následků. Výsledky tedy jasně dokazují terapeutický prospěch spojený s podáním cis-thienylcyklohexylaminu u těžce intoxikovaného jedince, který by si mohl podat pouze jedinou třísložkovou stříkačku a to vše i v případě podání cisthienylcyklohexylaminu s časovým zpožděním 45 minut po urgentním ošetření.

Formulace:

Příprava vstřiknutelného roztoku cis-thienylcyklohexylaminu

- lyofylizát cis-thienylcyklohexylaminu 0,5 mg

- mannitol 25 mg

- chlorid sodný 85,5 mg

- voda pro vstřiknutelné přípravky : qsp 10,0 ml

Látky, které jsou popřípadě podávané společně s thienylcyklohexylaminem, jsou použity ve svých běžných formách v odpovídajících farmakologických oblastech.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

JUDr. Otakar Švorčík - 20 advokát

120 00 Praha 2, Hálkova 2 • 4 · • 4 ·· • «4 • 4 4

44 ··

4 4 4 4 4444

4 4 4 4 4 4 4

4 4 444 44 4 • 44 <444

44 44»4 44 44

1. Použití thienylcyklohexylaminu chemického vzorce 2methyl-1-(1-piperidinyl)-1-(2-thienyl)cyklohexan, v racemické formě, jako diastereoizomery nebo enantiomery ve v zásadě čisté formě, samotného nebo společně s jinými látkami s farmaceutickým účinkem, pro přípravu léku určeného pro omezení a inhibici účinků vyvolaných expozicí exogením neurotoxickým nebo neurotoxinickým produktům.
2. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že thienylcyklohexylamin je asociovaný s jednou nebo více jinými látkami s farmaceutickým účinkem schopnými omezení nebo inhibice účinků neurotóxických nebo neurotoxonických látek.
3. Použití podle nároku 2, vyznačující se tím,· že thienylcyklohexylamin je asociovaný s alespoň jednou látkou zvolenou ze souboru, zahrnujícího anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivující cholinesterásy.
4. Použití podle jednoho z nároků 2 a 3, vyznačující se tím, že thienylcyklohexylamin je asociovaný s alespoň jednou anticholinergní látkou, alespoň jednou protikřečovou látkou a alespoň jednou látkou reaktivující cholinesterásy.

• 4 •4 444·

94 44

4 4 4 ·

4 ·4 4

4 4 4 4 4

4 4 4 4

4 4 94
5. Použití podle jednoho z nároků 3 a 4, vyznačující se tím, že anticholinergní látka je zvolena ze souboru, zahrnujícího atropin, scopolamin, N-oxid atropinu, dihexyverin a methylsulfát tiemonia.
6. Použití podle jednoho z nároků 3 a 4, vyznačující se tím, že protikřečové látka je zvolena ze souboru, zahrnujícího následující látky: fenobarbital, primidon, benzodiazepiny, karbamazepin, ethosuximid, fenytoin, valproát sodný, progabid, gabapentin, vigabatrin a loprazolam.
7. Použití podle nároku 6, vyznačující se tím, že protikřečové látka je benzodiazepin zvolený ze souboru, zahrnujícího clonazepam, clobazam, diazepam a prodiazepam.
8. Použití podle jednoho z nároků 3 á 4, vyznačující se tím, že látka reaktivující cholinesterásy je zvolena ze souboru, zahrnujícího následující látky: pralidoxim, obidoxim a HI6.
9. Použití podle jednoho z nároků 1 až 8, vyznačující se tím, že thienylcyklohexylamin je asociován s reversibilním inhibitorem cholinesterásy určeným pro podání před exposicí neurotoxickým nebo neurotoxonickým produktům.
10. Použití podle jednoho z nároků 1 až 9, vyznačující se • ·

4 4 · ···

4· • · « ·· · • 4 4 4

9 4 4 • 9

4 · · · • 4 · · • · · »

44 44 tím, že reversibilní inhibitor cholinesterásy je zvolen ze souboru, zahrnujícího pyridostigmin, fysostigmin.
11. Použití podle jednoho z libovolných nároků 1 až 10, vyznačující se tím, že 2-methyl-l-(1-piperidinyl)-1-(2thienyl)cyklohexan, v racemické formě, jako diastereoizomery nebo enantiomery ve v zásadě čisté formě, je podán do dvou hodin, s výhodou do jedné hodiny, po intoxikaci neurotoxickými nebo neurotoxinickými produkty.
12. Kompozice obsahující jako účinnou látku produkt obsahující thienylcyklohexylamin chemického vzorce 2-methyl1-(1-piperidinyl)-1-(2-thienyl)cyklohexan, v racemické formě, jako diastereoizomery nebo enantiomery ve v zásadě čisté formě, asociovaný s alespoň jednou látkou s farmaceutickým účinkem schopnou snížit nebo inhibovat účinky exposice neurotoxickým nebo neurotoxonickým produktům.
13. Kompozice podle nároku 12, vyznačující se tím, že thienylcyklohexylamin je asociovaný s alespoň jednou látkou zvoleného ze souboru, zahrnujícího anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivující cholinesterásy.
14. Kompozice podle jednoho z nároků 12 a 13, vyznačující se tím, že thienylcyklohexylamin je asociovaný s alespoň jednou anticholinergní látkou, alespoň jednou protikřečovou látkou a alespoň jednou látkou reaktivující cholinesterásy.

4 ·

4 *· • 44 • · · » » w — • · · · · ·

4 4 · 4 · 4 4

4 4 4 · · »

4 44 4 4 · ·*
15. Kompozice podle jednoho z nároků 13 a 14, vyznačující se tím, že anticholinergní látka je zvolena ze souboru, zahrnujícího atropin, scopolamin, N-oxid atropinu, dihexyverin a methylsulfát tiemonia.
16. Kompozice podle jednoho z nároků 13 a 14, vyznačující se tím, že protikřečová látka je zvolena ze souboru, zahrnujícího následující látky: fenobarbital, primidon, karbamazepin, ethosuximid, fenytoin, valproát sodný, progabid, gabapentin, vigabatrin, loprazolam a benzodiazepiny, jako jsou clonozepam, clobazam, diazepam a prodiazepam.
17. Kompozice podle jednoho z nároků 13 a 14, vyznačující se tím, že látka reaktivující cholinesterásy je zvolena ze souboru, zahrnujícího pralidoxim, obidoxim, HI6.
18. Produkt obsahující thienylcyklohexylamin a alespoň jednu látku zvolenou ze souboru zahrnujícího anticholinergní látky, protikřečové látky a látky reaktivující cholinesterásy jakožto kombinace pro současné použití, oddělené použití nebo použití rozložené v čase, pro omezení nebo inhibici účinků daných exposicí neurotoxickým nebo neurotoxonickým produktům.
19. Produkt podle nároku 18, vyznačující se tím, že navíc obsahuje inhibitor cholinesterásy určený pro podání před

0 0 ·

0 0 0

0 0 ·

0 0 · ·

0 0 0 0 0

0 0 0 0

0 0 0 0 0 0 • *0 expozicí neurotoxickému nebo neurotoxonickému produktu.
20. Produkt podle nároku 19, vyznačující se tím, že reversibilní inhibitor cholinesterásy je zvolen ze souboru, zahrnujícího pyridostigmin, fysostigmin.