SK61098A3

SK61098A3 - Amidine and isothiourea derivatives as inhibitors of nitric oxide synthase

Info

Publication number: SK61098A3
Application number: SK610-98A
Authority: SK
Inventors: James Macdonald; James Matz; William Shakespeare
Original assignee: Astra Ab
Priority date: 1995-11-07
Filing date: 1996-11-06
Publication date: 1999-01-11
Also published as: EE9800141A; WO1997017344A1; PT861250E; ATE213241T1; TW458978B; HUP9900142A3; DE69619259D1; NZ322227A; EP0861250A1; AU701329B2; DK0861250T3; KR19990067349A; NO982072D0; IL124296A0; JP2000500132A; HUP9900142A2; SI0861250T1; ES2171743T3; CZ139298A3; AU7592796A

Description

Sú poskytnuté zlúčeniny vzorca (I), v ktorých sú X, R², R³, R⁴ a R⁵ definované v opise, a ich optické izoméry, racemáty a farmaceutický prijateľné soli; spoločne so spôsobmi ich prípravy, kompozície, ktoré ich obsahujú, a ich použitie v terapii.

, 71/ βίο

Amidínové a izotiomočovinové deriváty ako inhibítory syntézy oxidu dusičného

Oblasť techniky

Tento vynález sa týka nových amidínových a izotiomočovinových derivátov, spôsobov ich prípravy a farmaceutických kompozícií, ktoré ich obsahujú a ich použitia v terapii.

V súhlase s vynálezom poskytujeme zlúčeniny vzorca (I)

kde:

X predstavuje NR⁶, S, O, CH₂ alebo väzbu;

R¹ predstavuje C1.3 S-alkyl alebo päťčlenný heterocyklický aromatický kruh obsahujúci 1 až 4 heteroätómy vybraté z O, N, a S, ktoré môžu byť na uhlíkovom atóme substituované jednou alebo viacerými skupinami, ktoré môžu byť zvolené z halogénu, trifluórmetylu, C1.6 alkylu, nitro alebo kyano;

R² predstavuje H, alkyl C1-6, -(CH₂)_dOH, -(CH₂)_dOAr alebo -(CH₂)nAr;

R³ predstavuje H, alkyl Ci^, -(CH₂)_bOH, -(CH₂)_bOAr alebo -(CH₂)_nAr;

R⁴ predstavuje H, alkyl Ci-₆, -(CH₂)_cOH, -(CH₂)_cOAr alebo -(CH₂)_hAr;

R⁵ predstavuje H, alkyl C^, -(CH2)qOH, -(CH2)qOAr alebo -(CH2)nAr, -(CH2)tCOOR⁸alebo (CH2)_tCONR⁹R¹⁰;

alebo buď R³ a R⁴ spoločne alebo R⁴ a R⁵ spoločne predstavujú reťazec -(CH₂)_m alebo -(CH₂)_rY(CH₂)_p;

-2Ar predstavuje fenylový kruh, šesťčlenný heterocyklický aromatický kruh obsahujúci jeden alebo dva atómy N alebo päťčlenný aromatický kruh obsahujúci 1 až 4 heteroatómy vybraté z O, N alebo S, pričom fenylový kruh, šesťčlenný heterocyklický aromatický kruh môžu byť substituované jednou alebo viacerými skupinami vybratými z Ci^ alkylu, Ci_₆ alkoxy, halogénu, nitro, kyano, Ci-e perfluóralkylu, fenylu alebo päťčlenného heterocyklického aromatického kruhu obsahujúceho 1 až 4 heteroatómy vybrané z O, N a S;

Y predstavuje O, S alebo NR⁷;

m predstavuje celé číslo 3 až 5;

r a p sú nezávislé celé čísla 1 až 3, tak aby r + p zapadalo do rozsahu 2 až 4

R⁶, R⁷, R⁸, R⁹ a R¹⁰ predstavujú nezávisle H, alebo Ci-₆ alkyl; alebo NR⁹R¹⁰ spoločne s piperidinylom, pyrolidinylom, norfolinylom; tetrahydroizochinolinylom, piperazinylom alebo piperazinylom substituovaným v polohe 4 skupinou R¹⁵;

R¹⁵ predstavuje Ci-₆ alkyl alebo skupinu -(CH₂)_WQ;

Q predstavuje fenyl, ktorý môže byť substituovaný Ci_₆ alkylom, CJ6 alkoxy, halogénom, nitro, kyano a trifluórmetylom;

n, w a d nezávisle predstavujú celé číslo 0 až 6;

h, q a b predstavujú nezávisle celé číslo 1 až 6;

c predstavuje celé číslo 2 až 6;

t predstavuje celé číslo 1 až 5;

za predpokladu, že

a) keď X predstavuje NH, O, CH₂ alebo väzbu a súčasne R², R³ a R⁵ predstavujú H, potom R⁴ nepredstavuje H alebo Ci.₆ alkyl

b) keď X predstavuje NR⁶, O alebo S, potom d predstavuje celé číslo 1 až 6 a ich optické izoméry a racemáty a farmaceutický prijateľné soli.

Výhodná je kombinácia, keď Ŕ¹ predstavuje S-metyí alebo S-etyl, špeciálne S-etyl alebo kruh obsahujúci jeden heteroatóm vybraný z O, N alebo S. Veľmi výhodné je R¹ predstavujúce tienyl, špeciálne 2-tienyl.

Pokiaľ nie je uvedené inak, termín „Ci-6 alkyl“ sa vzťahuje na priamy alebo rozvetvený reťazec majúci 1 až 6 uhlíkových atómov alebo cyklický Ci-6 alkyl. Príklad takýchto skupín zahŕňa metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl, t-butyl, cyklopentyl a cyklohexyl.

Pokiaľ nie je uvedené inak, termín „C1.3 alkyl sa vzťahuje na priamy alebo vetvený reťazec majúci 1 až 3 uhlíkové atómy. Príklady takýchto skupín zahŕňajú metyl, etyl, n-propyl a i-propyl.

Predmetom vynálezu je ďalej spôsob prípravy zlúčenín vzorca (I), ich optických izomérov a racemátov a ich farmaceutický prijateľných solí, čo zahŕňa:

a) prípravu zlúčenín vzorca (I) tým, že sa nechá reagovať príslušná zlúčenina vzorca (II)

II kde X, R², R³, R⁴ a R⁵ majú rovnaký význam, zlúčeninou vzorca (III) ako je definované vyššie, so

III kde R¹ je definované vyššie a L je odštiepiteľná skupina;

b) prípravu zlúčeniny vzorca (I) tým že sa nechá reagovať zlúčenina vzorca (IV)

IV kde X, R², R³, R⁴ a R⁵ sú definované výššié a HA je kyselina, so zlúčeninou vzorca (V) _ i ___

Λ~-kde. R¹ je definované vyššie;

c) prípravu zlúčeniny vzorca (I), kde R¹ je Ci_₃ S-alkyl tým, že sa nechá reagovať zodpovedajúca skupina vzorca (VI)

kde X, R², R³, R⁴ a R⁵ sú definované vyššie, so zlúčeninou vzorca (VII)

R¹⁴---- L (VII) kde R¹⁴ je C1-3 alkyl a L je odštiepiteľná skupina;

d) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorom R⁴ predstavuje Ci.₆ alkyl, -(CH₂)_cOH, (CH₂)_cOAr alebo -(CH₂)nAr tým, že sa nechá reagovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (VIII)

R¹¹ — L (VIII) kde R¹¹ predstavuje alkyl, -(CH₂)_cOH, -(CH₂)_cOAr alebo -(CH₂)_nAr a L je odštiepiteľná skupina;

e) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej X predstavuje NR⁶ a R⁶ predstavuje Ci-₆alkyl tým, že sa nechá reagovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁶predstavuje H, so zlúčeninou vzorca (IX)

R¹²— L (IX) kde R¹² predstavuje alkyl a L je odštiepiteľná skupina

f) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej Ŕ³ a R⁴ alebo R⁴ a R⁵ sú spojené za vzniku reťazca -(CH₂)_rY(CH₂)p, Y predstavuje NR⁷ a R⁷ predstavuje Cve alkyl tým, že sa nechá reagovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁷ predstavuje H, so zlúčeninou vzorca (IX);

g) prípravu zlúčeniny vzorca (I), kde R⁵ predstavuje -(CH₂)_tCOOR⁸ a R⁸ predstavuje Ci_6 alkyl tým, že sa nechá esterifikovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁸ predstavuje H;

h) prípravu zlúčeniny vzorca (I), kde R⁵ predstavuje -(CH2)tCOOR⁸ a R⁸ predstavuje Ci-6 alkyl tým, že sa nechá hydrolyzovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁸ predstavuje Ci.₆ alkyl;

i) prípravu zlúčeniny vzorca (I), kde R⁵ predstavuje -(CH₂)_tCONR⁹R¹⁰ a R⁹ a/alebo R¹⁰ predstavujú C1.6 alkyl tým, že sa nechá alkylovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁹ a/alebo R¹⁰ predstavujú H;

j) prípravu zlúčeniny vzorca (I), kde R⁵ predstavuje -(CH2)tCONR⁹R¹⁰ a R⁹ a R¹⁰predstavujú H alebo R⁵ predstavuje -(CH2)_tCOOR⁸ a R⁸ predstavuje H tým, že sa nechá hydrolyzovať zodpovedajúca kyano zlúčenina;

k) prípravu zlúčeniny vzorca (I), kde R⁵ predstavuje -(CH₂)_tCONR⁹R¹⁰ tým, že sa nechá reagovať zodpovedajúci amín HNR⁹R¹⁰ so zodpovedajúcou kyselinou;

l) prípravu zlúčeniny vzorca (I), kde R⁵ predstavuje -(CH2)dOAr, R³ predstavuje (CH2)_bOAr, R⁴ predstavuje -(CH₂)_qOAr tým, že sa nechá reagovať zodpovedajúca halogénovaná alebo zlúčenina sulfonovaná vzorca (I) s arylhydroxidom;

m) prípravu zlúčeniny vzorca (I), kde R⁴ predstavuje metyl tým, že sa nechá reagovať zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁴ predstavuje H, s formaldehydom a kyselinou mravenčou;

n) prípravu zlúčeniny vzorca (I), kde R⁴ predstavuje -CH₂CH₂OH tým, že sa nechá reagovať zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁴ predstavuje H s oxiranom;

a kde je to žiadané alebo nutné prevedenie výslednej zlúčeniny vzorca (I), alebo jej soli, na farmaceutický prijateľnú soľ alebo naopak.

V postupe (a) bude reakcia prebiehať miešaním zmesi reaktantov vo vhodnom rozpúšťadle, napr. N-metyl-2-pyrolidíne alebo nižšom alkanole, napr. etanole, izopropanole alebo terciálnom butanole, pri teplotách v rozsahu laboratórnej teploty a teploty rozpúšťadla. Reakčný čas závisí od rozpúšťadla a povahy odštiepiteľnej skupiny, môže dosiahnuť až 48 hod, ale zväčša dosahuje 1 až 5 hod. Vhodné odstupujúce skupiny Ľ môžu zahŕňať tioalkyl, sulfonyl, trifluóralkylsulfonyl, halogén alkyl a arylalkohol alebo tosyl; ďalšie sú citované v „Advanced Organic Chemistry“ J. March (1985) 3^rd Edition, str. 315 a inak sú veľmi dobre známe odborníkom v odbore.

V postupe (b) sa reakcia výhodne realizuje refluxovaním zmesi dvoch zlúčenín počas niekoľkých hodín v prítomnosti vhodného rozpúšťadla, čím je reakčná teplota dostatočne vysoká na to, aby nastala ľahko kondenzácia, ale nie tak veľká, aby došlo k rozkladu tvoreného amidu. Reakčná teplota sa pohybuje v rozmedzí od laboratórnej teploty až 250°C, avšak pri výbere reakčnej teploty dávaná prednosť teplotnému rozhraniu 100 až 200°C. Zistili sme, že špeciálne vhodným rozpúšťadlom je o-dichlórbenzén, a že je užitočné pridať 4dimetylaminoparidín ako katalyzátor. Pri ochladení sa vytvoria dve vrstvy, rozpúšťadlo možno dekantovať a reakčnú zmes možno spracovať vo vodnej zásade. V inom prípade, keď sú reaktanty rozpustné v rozpúšťadle, možno rozpúšťadlo odpariť vo vákuu a reakčnú zmes spracovať pridaním vody. Kyselina HA môže byť organická alebo anorganická kyselina, napr. kyselina chlorovodíková, bromovodíková, jódovodíková, sírová, dusičná, fosforečná, octová, mliečna, jantárová, fumarová, jablčná, maleínová, vínna, citrónová, benzoová alebo metansulfánová. Výhodnou je kyselina halogénvodíková.

V postupe (c) reakcia prebieha zlúčením dvoch reaktantov v inertnom rozpúšťadle, napr. v acetóne. Vhodné odstupujúce zlúčeniny L sú zmienené vyššie. Výhodné je použitie jodidov, toluénsulfonátov a metansulfonátov.

V postupoch (d), (e) a (f) reakcia prebieha za štandardných podmienok, napr. reakciou dvoch zlúčenín v inertnom rozpúšťadle v zásaditom prostredí pri laboratórnej teplote počas až 12 hod. Často sme zistili, že je žiadúce spracovať amín pomocou NaH ešte pred reakciou so zlúčeninami vzorca (VIII) alebo (IX).

-7 Vhodné odštiepiteľné skupiny L sú uvedené vyššie. Výhodne je L halogén, špeciálne potom bromid. Alkylačný proces (i) prebieha za podobných podmienok.

Postup (g), esterifikačná reakcia, prebieha za podmienok známych odborníkom v oblasti. Napr. karboxylovú kyselinu možno nechať reagovať s príslušným alkylalkoholom za podmienok kyslej alebo zásaditej katalýzy v polárnom rozpúšťadle pri laboratórnej teplote alebo zvýšenej teplote.

Postupy (h) a (i), hydrolýzy, prebiehajú pôsobením kyseliny a pri zahrievaní. V prípade hydrolýzy kyano zlúčeniny za miernejších podmienok je poskytovaný amín a vo viac razantných podmienkach vzniká karboxylová kyselina. Vhodné podmienky pre .tieto reakcie sú známe odborníkom. Príslušné kyano zlúčeniny možno pripraviť postupmi, ktoré sú zmienené inde alebo sú známe.

Postup (k) prebieha za podmienok, ktoré sú známe na prípravu amidu. Príslušné amíny sú známe zlúčeniny. Príslušné kyseliny možno pripraviť analogickými postupmi tu zverejnenými alebo v spojení s metódami známymi v tomto obore.

Postup (I) prebieha zmiešaním reaktantov v inertnom rozpúšťadle pri obyčajnej alebo zvýšenej teplote. Arylhydroxid možno pripraviť spracovaním arylhydroxy zlúčeniny so silnom zásadou (v protickom rozpúšťadle) alebo s alkalickým kovom (v aprotických rozpúšťadlách).

V postupe (m) reakcia typicky prebieha refluxovaním reakčnej zmesi počas až 4 hod alebo pokiaľ nie je reakcia ukončená.

V postupe (n) reakcia prebieha v polárnom protickom rozpúšťadle akým je napr. etanol v prítomnosti zásady pri teplotnom rozhraní od 0°C až do laboratórnej teploty. Pohodlné je realizovať reakciu v tlakovej nádobe.

Soli zlúčenín vzorca (I) možno vytvoriť reakciou voľnej kyseliny, zásady alebo soli, enantioméru, tautoméru alebo chráneného derivátu s jedným alebo viacerými ekvivalentmi vhodnej zásady alebo kyseliny. Reakciu je možné realizovať v rozpúšťadle alebo médiu, v ktorom nie je soľ rozpustná alebo v rozpúšťadle, v ktorom je soľ rozpustná, napr. voda, dioxan, etanol, tetrahydrofurán alebo dietyléter alebo zmes rozpúšťadiel, ktoré možno odstrániť vo vákuu alebo vymrazovaním. Reakčná zmes môže byť metatetický proces alebo možno realizovať na živicovom iónomeniči.

Zlúčeniny vzorca (VI) možno pripraviť nasledujúcou metódou Rasmussena et al v Synthesis, 1988, 456-459. Zlúčeniny vzorca (VI) možno tak pripraviť reakciou vzorca (II),

kde S, R², R³, R⁴ a R⁵ sú definované vyššie, s benzoylizotiokyanátom v organickom rozúšťadle ako je acetón, tiež v prítomnosti kyseliny (napr. kyselina trifluóroctová), po čo nasleduje vodno-alkalické odštiepenie výsledného derivátu benzoyltiomočoviny. Zlúčeniny vzorca (VI) možno tiež pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca (II) s tiokyanátom sodným vo vode.

Zlúčeniny vzorca (II) možno pripraviť redukciou príslušnej zlúčeniny vzorca (X)

(X) v ktorej X, R², R³, R⁴, R⁵ sú definované vyššie.

Redukčnú reakciu možno uskutočňovať v celom rade podmienok, napr. tých, ktoré sú popísané v J. March „Advanced Organic Chemistry“ str. 1103-1104. Tieto zahŕňajú katalytickú hydrogenáciu, použitie Zn, Sn alebo železa, AIH₃-AICI₃, sulfidov a iných. Výhodnou je reakcia, pri ktorej hydrogenácia prebieha za atmosférického tlaku počas 3 až 6 hod v prítomnosti paládiového a uhlíkového katalyzátora.

Zlúčeniny vzorca (X), v ktorých X predstavuje NR⁶, S a O možno pripraviť cyklizáciou zlúčeniny vzorca (XI),

(XI) kde R², R³, R⁴ a R⁵ a X sú definované vyššie a L je odštiepiteľná skupina.

Zlúčeniny vzorca (XI) možno pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca (XII),

(XII) kde R⁴, R⁵ a L sú definované vyššie so zlúčeninou vzorca (XIII),

(XIII) kde X predstavuje NR⁶, S a O tak ako je definované vyššie a L je odštiepiteľná skupina.

Zlúčeniny vzorca (XI) možno inak pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca (XIV),

(XIV) kde R⁵ a L sú definované vyššie a L¹ je odštiepiteľná skupina, so zlúčeninou vzorca (XV),

(XV) kde X predstavuje NR⁶, S alebo O a R², R³ a R⁴ sú definované vyššie.

- 10Zlúčeniny vzorca (X), v ktorých X predstavuje NR⁶, S a O, možno pripraviť cyklizáciou zlúčeniny vzorca (XV!),

(XVI) kde R², R³, R⁴ a R⁵ a X sú definované vyššie a L je odštiepiteľná skupina.

Zlúčeniny vzorca (XVI) možno pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca (XVII),

(XVII) kde R⁴ a R⁵ sú definované vyššie a X predstavuje NR⁶, S a O so zlúčeninou vzorca (XVIII),

Ύ^?'² _l1^r3 (XVIII) kde R² a R³ sú definované vyššie a L a L¹ sú odštiepiteľné skupiny.

Inak možno zlúčeniny vzorca (XVI) pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca (XIX),

kde X predstavuje NR⁶, S alebo O a L a R⁵ tak ako je definované vyššie so zlúčeninou vzorca (XX), (XX) kde R², R³ a R⁴ sú definované vyššie a L predstavuje odštiepiteľnú skupinu.

- 11 Reakcie zlúčenín vzorcov (XII) a (XIII), (XIV) a (XV), (XVII) a (XVIII) a (XIX) a (XX) možno pripraviť za podmienok dobre známych odborníkom; typicky potom zmiešaním zložiek v inertnom rozpúšťadle. Prechodové zlúčeniny vzorca (X) alebo (XVI) nie je možno pripraviť, t.j. zlúčeniny vzorca (X) možno pripraviť priamo. Vhodné odštiepiteľné skupiny L a Ľ sú zmienené vyššie. Cyklizačné reakcie prebiehajú odštiepením chrániacich skupín. Vo vyššie uvedených reakciách môže byť žiadúce zvýšiť reaktivitu nukleofilných skupín -XH v zlúčeninách vzorca (XI), (XIII), (XV), (XVI), (XVII) a (XIX) spracovaním so zásadou.

Zlúčeniny vzorca (X) možno pripraviť nítráciou zlúčeniny vzorca (XXI),

kde X, R², R³, R⁴ a R⁵ sú definované vyššie.

Nitračné reakcie prebiehajú za podmienok, ktoré sú známe odborníkom, napr. reakciou s kyselinou dusičnou a sírovou alebo dusičnanom sodným a kyselinou sírovou v inertnom organickom rozpúšťadle.

Môže byť užitočné pripravovať zlúčeniny vzorca (X) nitráciou karbonylového alebo dikarbonylového derivátu zlúčeniny vzorca(XXI); nitrovaný karbonylový alebo dikarbonylový derivát možno redukovať na žiadanú zlúčeninu vzorca (X), napr. dibóranom.

Zlúčeniny vzorca (X) a (XXI), práve tak ako práve zmienené karbonylové a dikarbonylové deriváty zlúčenín vzorca (XXI) možno pripraviť jednou z mnohých metód prípravy di- a tricyklickej heterocyklickej zlúčeniny.

Napr. syntéza zlúčenín vzorca (XXI), ktorá je špeciálne uprednostňovaná v prípade, keď X predstavuje väzbu alebo CH₂ sa skladá zcyklizácie zlúčeniny vzorca (XXII),

(XXII)

- 12kde X, R², R³, R⁴ a R⁵ sú definované vyššie.

Túto reakciu možno realizovať za podmienok Bischlera a Napieralskiho popísaných v J. March „Advanced Organic Chemistry“ 3. vydanie, str. 495, v ktorých je amid spracovaný s POCI₃ alebo PCĽ₅ a zahriaty. Alternatíva tohoto postupu je popísaná v Larsen et al v J. Org. Chem., 1991, 56, 6034-6038, v ktorej je amid spracovaný oxalylchloridom, čo je nasledované reakciou s FeCI₃ a potom kyselinou. Redukcia príslušného imínu alebo imínovej soli, napr. s borohydridom sodným, poskytuje zlúčeninu vzorca (XXI).

Zlúčeniny vzorca (XXII) možno pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca (XXIII), (XXIII) kde X, R², R³, R⁴ a R⁵ sú definované vyššie, so zlúčeninou vzorca (XXIV),

L (XXIV) kde R⁵ a L sú vyššie definované, za štandardných podmienok syntézy amidov.

Ďalšou modifikáciou Bischle-Napieralskiho reakcie na prípravu zlúčenín vzorca (I), v ktorých R⁴ a R⁵ predstavujú reťazec -(CH₂)_m- alebo -(CH₂)_rY-(CH₂)_p- je cyklizácia zlúčeniny vzorca (XXV), kde X, R², R³, R⁴ a L sú definované vyššie a K predstavuje reťaze -(CH₂)_m- alebo (CH₂)_rY-(CH₂)_p-.

- 13Vytvorenie oboch kruhov sa typicky odohráva pôsobením fosforylchloridu alebo oxidu fosforečného v inertnom organickom rozpúšťadle pri zvýšenej teplote. Táto reakcia, spoločne s detailnejším popisom reakčných podmienok, je popísaná Akaboshim etalv Chem. Pharm. Bull., 1960, 8, 14-17.

Zlúčeniny vzorca (XXV) možno pripraviť z jednoduchších molekúl známymi metódami.

Alternatívna syntéza zlúčenín vzorca (XXI), v ktorých R⁴ a R⁵ spoločne predstavujú reťazec -(CH2)m alebo -(CH2)fY-(CH2)p-, sa skladá zcyklizácie ahydroxylaktámu, tak ako je popísané Brewerom et al v J. Med. Chem., 1989, 32, 2058-2062. Takto možno zlúčeniny vzorca (XXI), v ktorých R⁴ a R⁵ spoločne predstavujú reťazec -(CH2)_m- alebo -(CH₂)_rY-(CH₂)_p-, pripraviť cyklizáciu vzorca (XXVI).

(XXVI kde X, R² a R³ sú definované vyššie a K¹ predstavuje reťazec -(CH₂)_mr1- alebo (CH₂)m-(CH₂)_p-. Cyklizácia prebieha pôsobením kyseliny a poskytuje laktám, ktorý možno celkom redukovať dibóranom v prítomnosti príslušnej zlúčeniny vzorca (XXI).

Zlúčeniny vzorca (XXVI) možno pripraviť redukciou príslušného cyklického imidu borohydridom sodným alebo kyanoborohydridom sodným. Príslušný cyklický imid možno ľahko pripraviť z príslušného primárneho amínu a dikarboxylovej kyseliny.

Ďalšia syntéza zlúčenín vzorca (XXI), v ktorých R⁴ a R⁵ spoločne predstavujú reťazec (CH₂)_m- alebo -(CH₂)_rY(CH₂)_p- sa skladá z reakcie zlúčeniny vzorca (XXVII),

(XXVII) o—

-14kde sú X, R² a R³ definovaný vyššie, najskôr s t-butyllítiom a potom sa zlúčeninou vzorca (XXVIII),

C1-K-I (XXVIII) kde K predstavuje reťazec -(CH₂)m- alebo -(CH₂)rY(CH₂)p-, tak ako je popísané Advanced Organic Chemistry „ Meyersom a Hutchingsom v Tetrahedron, 1993, 49, 1807-1820. .

Odborníci budú schopní konfrontovať modifikácie štruktúr zlúčenín vzorca (XXVII) a (XXVIII), tak ako je žiadané, za dosiahnutia rovnakého efektu.

Zlúčeniny vzorca (XXVII) možno pripraviť z jednoduchších zlúčenín, ktoré možno pripraviť podľa metód tu popísaných a popísaných v práci Meyera a Hutchinga.

Zlúčeniny vzorca (XXI), v ktorých R⁴ predstavuje H, možno pripraviť reakciu

zlúčenín vzorca (XXIX),	/ ^r2
		(XXIX)
l	F /— ^r3

kde sú X, R² a R³ definované vyššie, s uhlíkovým nukleofilom.

Vhodné uhlíkaté nukleofily zahŕňajú kyanid, karboxylové kyseliny schopné eliminácie oxidu uhličitého (ako napr. kyselina malonová) a alkíny. Ďalšie sú popísané v . Advanced Organic Chemistry 3. vydanie str. 306-307. Metódy modifikovania funkčnosti skupiny R⁵,tak ako môže byť požadované, sú dobré známe odborníkom.

Typická reakcia tohoto typu je popísaná Bohmom a Stockerom v Árch. Pharmazie, 1973, 306, 271-274.

Zlúčeniny vzorca (XXIX) možno pripraviť metódami už popísanými alebo ďalšími známymi metódami.

- 15Zlúčeniny vzorca (XXI), v ktorých X predstavuje väzbu alebo CH₂ a R³ a R⁴spoločne predstavujú reťazec -(CH₂)_m- alebo -(CH₂)rY(CH₂)_p-, možno pripraviť zo zlúčeniny vzorca (XXX)

(XXX) kde R² je definované vyššie, X predstavuje väzbu alebo CH₂ a K predstavuje reťazec -(CH₂)m- alebo -(CH2)rY(CH₂)_p-, redukciou dibóranom alebo ďalšími známymi metódami. Zlúčeniny vzorca (XXI), v ktorých R⁵ predstavuje H, možno pripraviť redukciou príslušnej zlúčeniny vzorca (XXX). Zlúčeniny vzorca (XXI), v ktorých R⁵ nepredstavuje H, možno pripraviť nukleofilnou adíciou na amidový karbonyl zlúčeniny vzorca (XXX).

Zlúčeniny vzorca (XXX) možno pripraviť podľa metódy Edwardsa a Meyera, tak ako je uvedené v Tetrahedron Lett., 1984, 25, 939-942. Týmto spôsobom možno pripraviť zlúčeniny vzorca (XXX) reakciou zlúčeniny vzorca (XXXI),

R² (XXXI) kde X predstavuje väzbu alebo CH₂, R² je definované vyššie a L je odštiepiteľná skupina, prednosť je dávaná halogénu, so zlúčeninou vzorca (XXXII),

(XXXII)

Pr kde K predstavuje reťazec -(CH₂)_m- alebo -(CH₂)_rY(CH₂)_p-.

Zlúčeniny vzorca (XXXII) možno pripraviť podľa metódy popísanej v publikácii Edwardsa a Meyera.

- 16Odbomici budú schopní konfrontovať modifikácie štruktúr zlúčenín vzorca (XXXII), tak ako je žiadané, za dosiahnutia rovnakého účinku.

Zlúčeniny vzorca (XXI), v ktorých R⁴ a R⁵ predstavujú H, možno pripraviť syntézou založenou na expanzii kruhu spojenou s konverziou cyklického ketónu na cyklický amid, tak ako je popísané Grunewaldom a Dahanukarom v J. Heterocyclic. Chem., 1994, 31, 1609-1617.

Takto možno previesť zlúčeninu vzorca (XXXIII),

(XXXIII) kde X, R² a R³ sú definované vyššie, na zlúčeninu vzorca (XXXIV),

kde X, R² a R³ sú definované

(XXXIV) reakciou s azidom sodným v kyseline. Ďalšie detaily reakčných podmienok možno získať z vyššie uvedeného článku Grunewalda a Dahanukara.

Zlúčeniny vzorca (XXXIV) možno previesť na žiadané zlúčeniny vzorca (I) známymi metódami.

Odborníkom bude zrejmé, že môže byť žiadúce pripraviť zlúčeniny vzorca (XXII), (XXIII), (XXV), (XXVI), (XXVII), (XXIX), (XXX), (XXXI), (XXXIII) a (XXXIV) v nitrovanej forme. Nitráciou možno dosiahnuť reakciu nenanitrovaného analógu s kyselinou dusičnou a sírovou alebo dusičnanom draselným a kyselinou sírovou za štandardných podmienok.

Prechodové zlúčeniny možno pripraviť ako také alebo v chránenej forme. Špeciálne možno chrániť amínové skupiny a skupinu XH, kde XH predstavuje OH,

- 17SH alebo NHR⁶ Vhodné chrániace skupiny sú popísané v štandardnom texte Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydanie (1991) Greenea a Wutsa. Chrániace skupiny amínov, ktoré možno uviesť, zahŕňajú C₂-7 alkoxykarbonyl, napr. t-butyloxykarbonyl, Ca-u fenylalkoxykarbonyl, benzyloxykarbonyl alebo trifluoracetát. Odchránenie normálne prebieha pôsobením vodného roztoku zásady alebo kyseliny.

Zlúčeniny vzorca (X). (XI), (XII), (XV), (XVI), (XVII), (XX), (XXI), (XXII), (XXIII) a (XXV), v ktorých R⁴ predstavuje Ci-₆ alkyl, -(CH₂)_cOH, -(CH₂)_cOAr alebo -(CH₂)_hAr, možno pripraviť alkyláciou alebo aryláciou príslušnej zlúčeniny, v ktorej R⁴predstavuje H, ktorá nasleduje po postupe (d) zmienenom vyššie.

Zlúčeniny vzorca (IV) možno pripraviť analogickými postupmi ako ty, ktorými pripraviť zlúčeniny vzorca (II). Zlúčeniny vzorca (IV) možno realizovať na príslušné zlúčeniny vzorca (II) reakciou so zásadou. Zlúčeniny vzorca (II) možno realizovať na príslušné zlúčeniny vzorca (IV) reakciou s protickou kyselinou HA, napr. s jednou z tých, ktoré sú uvedené vyššie.

Zlúčeniny vzorca (III) sú buď známe alebo je možné pripraviť známymi metódami. Napr., zlúčeniny vzorca (III), v ktorých L predstavuje tioalkyl, možno pripraviť spracovaním príslušného tioamidu vzorca (XXXV), s

(XXXV) kde R¹ je definované vyššie, s alkyljodidom za podmienok, ktoré sú odborníkom známe.

Zlúčeniny vzorca (V), (VIII), (IX), (XII), (XIII), (XIV), (XV), (XVII), (XVIII), (XIX), (XX), (XXIII), (XXIV), (XXVIII), (XXXI), (XXXIII) a (XXXV) sú buď známe a alebo sa dajú pripraviť známymi konvenčnými metódami.

Odborníkom bude zrejmé, že môže byťžiadúce ochrániť amino skupinu alebo ďalšiu reaktívnu skupinu v prechodovej zlúčenine použitím ochrannej skupiny tak ako je popísané v štandardnom texte Protective Groups in Organic Synthesis, 2.

- 18vydanie (1991) Greenea a Wutsa. Vhodné ochranné skupiny amínov sú uvedené vyššie.

Zlúčeniny podľa vynálezu a medziprodukty možno izolovať z ich reakčných zmesí štandardnými technikami.

Zlúčeniny vzorca (I) môžu existovať v tautomémych, enanciomérnych alebo diastereomémych formách, všetky z nich sú zahrnuté do tohoto vynálezu. Rozdielne optické izoméry možno izolovať separáciou racemickej zmesi zlúčenín pri použití konvenčných techník, napr. frakčná kryštalizácia alebo HPLC. Inak tiež možno individuálne enancioméry pripraviť reakciou vhodného opticky aktívneho východzieho materiálu za reakčných podmienok, ktoré nespôsobia racemizáciu.

Prechodové zlúčeniny môžu tiež existovať v enanciomérnych formách a môžu byť použité ako čisté enancioméry, diastereoméry, racemáty alebo zmesi.

Predmetom vynálezu sú tiež nové zlúčeniny vzorcov (II), (VI) a (X).

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) vykazujú farmakologickú aktivitu u zvierat Predovšetkým vykazujú užitočnú inhibičnú aktivitu syntézy oxidu dusičného, špeciálne potom vykazujú výbornú selektivitu na inhibíciu neuronálnych izoforiem syntézy oxidu dusičného. Sú preto užitočné pri liečbe alebo profylaxii ľudských ochorení alebo príznakov, v ktorých syntéza alebo zvýšená syntéza oxidu dusičného tvorí sprievodnú časť. Príklady takýchto ochorení zahŕňajú hypoxiu, ako napr. v prípadoch zástavy srdca, záchvatu a neonatálnej hypoxie, neurodegeratívnej príhody vrátane nervovej degenerácie a/alebo nervovej nekrózy v poruchách, akými sú ischémia, hypoxia, hypoglykémia, epilepsia a v externých zraneniach (ako napr. miechy alebo hlavy), ďalej hyperbarické kyslíkové kŕče a toxicitu, demenciu, napr. predsenilnú demenciu, Alzheimerovu chorobu a demencii podobné AIDS, Sydenhamovu chorobu, Parkinsonovu chorobu a Huntingtonovu chorobu, amyotropickú laterálnu sklerózu, Korsakoffovu chorobu, imbecilitu vzťahujúcu sa na poruchy mozgových tepien, poruchy spánku, schizofréniu, úzkosť, depresiu, poruchy spojené s predmenštruačným syndrómom (PMS) a hnisavými ranami. Zlúčeniny vzorca (I), buď samotné, alebo v kombinácii s ďalšími analgetickými činidlami, akými sú opiáty, sú tiež užitočné pri tíšení bolesti, vrátane bolesti

- 19neurogenickej a neuropatickej. Pri zlúčeninách vzorca (I) možno tiež očakávať, že vykazujú aktivitu pri prevencii tolerancie na opiáty a diázepíny, pri liečbe drogovej závislosti, migréne, a ďalších vaskulárnych bolestiach hlavy. Zlúčeniny podľa vynálezu vykazujú tiež užitočnú imunosupresívnu aktivitu, sú užitočné pri liečbe alebo profylaxii zápalov, pri liečbe gastrointestinálnej pohyblivosti a tiež sú dôležité pri liečbe niektorých druhov rakovín spojených s expresiou syntézy oxidu dusičného.

Pri zlúčeninách vzorca (I) sa špeciálne očakáva, že sú užitočné pri liečbe alebo profylaxii hypoxie, záchvatov, ischémie alebo neurodegeneratívnych príznakov či migrén, alebo že vykazujú aktivitu pri prevencii tolerancie na opiáty a diázepíny, pri liečbe drogovej závislosti, migréne, bolestí, špeciálne potom pri liečbe alebo profylaxii hypoxie, záchvatov, ischémie alebo neurodegeneratívnych porúch či bolestí. Špeciálne sa zaujímame o podmienky vybraté zo skupiny hypoxie, ischémie, záchvatov a bolestí a amyotropickej laterálnej sklerózy.

Teda podľa ďalšieho aspektu vynálezu poskytujeme zlúčeniny vzorca (I) alebo ich optické izoméry a racemáty či farmaceutický prijateľné soli, na ich použitie ako liečivá.

Predmetom vynálezu je tiež použitie zlúčenín vzorca (I) alebo ich optických izomérov a racemátov či farmaceutický prijateľných solí, na výrobu liekov na liečbu alebo profylaxiu vyššie uvedených chorôb alebo príznakov; spôsob na liečbu alebo profylaxiu jednej z vyššie uvedených chorôb alebo podmienok, ktorá sa skladá z podávania terapeuticky účinného množstva zlúčeniny vzorca (I) alebo ich optických izomérov a racemátov či farmaceutický prijateľných solí osobe trpiacej alebo ktorá je náchylná na takého ochorenie či príznak.

Množstvo podanej látky pre vyššie uvedené terapeutické indikácie sa bude meniť s podávanou zlúčeninou, s režimom podávania a liečbou, ktorá je žiadaná. Všeobecne však platí, že uspokojivé výsledky sú dosahované, pokiaľ sú zlúčeniny podávané v dennej dávke medzi 1mg až 2000mg (merané ako aktívny ingredient).

Zlúčeniny vzorca (I) alebo ich optické izoméry a racemáty či farmaceutický prijateľné soli možno použiť samostatne alebo formou vhodných liekových foriem.

-20Podávanie môže byť, ale nie je takto limitované, enterálne (vrátane orálneho, sublinguálneho alebo rektálneho), intranasálne, topikálne alebo parenterálne. Konvenčné postupy pre výber a prípravu vhodných farmaceutických formulácií sú napr. popísané v napr. „Pharmaceutical - The Science of Dosage Form Designs“, M.E. Aulton, Churchill Livingstone, 1998.

V súlade s vynálezom je poskytnutá farmaceutická kompozícia obsahujúca výhodne 80 % hmotn., výhodnejšie potom 50 % hmotn. zlúčeniny vzorca (I) alebo jej optického izoméru alebo racemátu či farmaceutický prijateľnej soli, v prímesi s farmaceutický prijateľným riedidlom alebo nosičom.

Tiež je poskytnutý spôsob prípravy takejto farmaceutickej kompozície, ktorý pozostáva z miešania ingredientov.

Príklady takýchto riedidiel a nosičov sú: pre tabletky a dražé: laktóza, škrob, mastenec, kyselina steárová; pre kapsule: kyselina vínna alebo laktóza; pre injekčné roztoky: voda, alkoholy, rastlinné oleje; pre čipky: prírodné alebo tvrdené oleje alebo vosky.

Kompozícia vo forme vhodnej pre orálne, t.j. ezofágové podávanie zahŕňa: tabletky, kapsule a dražé. Kompozície s plynulým uvoľňovaním zahŕňajú tie, v ktorých je aktívny ingredient viazaný na živicový iónomenič, ktorý môže byť pokrytý difúznou prepážkou za účelom modifikovania uvoľňovacích vlastností živice.

Enzým syntáza oxidu dusičného má rad izoforiem a zlúčeniny vzorca (I) a optické izoméry a ich racemáty a farmaceutický prijateľné soli možno triediť vzhľadom na inhibičnú aktivitu syntézy oxidu dusičného podľa postupu Bradta a Snydera v Proc. Natl. Acad. Sci., 1990, 87, 682-685. Syntáza oxidu dusičného premieňa ³H-L-arginín na ³H-L-citrulín, ktoré možno oddeliť katiónovou výmenou chromatografii a kvantifikovať scintilačným čítačom.

Triedenie na inhibičnú aktivitu neurónovej syntézy oxidu dusičného

Enzým bol izolovaný z potkanieho hipokampu alebo malého mozgu. Zo samcov Sprague-Dawleyových potkanov (250 až 275g) je odstránený malý mozog alebo mozgové tkanivo po CO₂ anestézii zvieraťa a dekapitácii. Malomozgový a

-21 hipokampálny supematant je pripravený homogenizáciou v 50mm Tri HCI s 1ml pufrom EDTA (pH 7.2, pri 25°C) a centrifúgovaním počas 15 min pri 20 OOOg. Zvyškový L-arginín je odstránený zo supernatantu chromatografiou cez kolóny s Dowex AG-50W-X8 sodnou formou a vodíkovou formou a potom nasleduje ďalšie centrifugovanie pri 10OOg počas 30s.

Pre test je 25μΙ konečného supernatantu pridané do každej z 96 nádob (96 nádob s doskovým filtrom) obsahujúcej buď 25μΙ testovacieho tlmivého roztoku (50mM HEPES, 1mM EDTA, 1.5mM CaCL, pH 7.4) alebo 25μΙ testovanej zlúčeniny vtlmivom roztoku pri 22°C a 25μΙ úplného testovacieho tlmivého roztoku (50mM HEPES, 1mM EDTA, 1.5mM CaCI₂, 1mM DTT, 100μΙ NADPH, ΙΟμΙ/ml landomulín, pH 7.4). Po 10 minútovej vyrovnávacej perióde je pridané 25I roztoku L-arginínu (s koncentráciou 18μΙ ¹H-L-arginínu, 96nM ³H-L-arginínu) do každej testovacej trubice, aby sa iniciovala reakcia. Reakčná zmes je zastavená po 10 min pridaním 200μΙ riedkej suspenzie terminačného tlmivého roztoku (20mM HEPES, 2mM EDTA, pH

5.5) a Dowexu-AG-50W-X8 s 200 až 400 okami.

Označený L-citrulín je oddelený od označeného L-arginínu filtráciou každého doskového filtra a je pridané 75μΙ každej ukončenej reakčnej zmesi na 3ml scintilačného kokteilu. L-citrulín je potom kvantifikovaný scintilačným čítaním.

V typickom experimente pri použití supernatantu z malého mozgu je bazálna aktivita zvýšená o 20 OOOdpm/ml vzorky nad reakčným slepým pokusom, ktorý má aktivitu 7 OOOdpm/ml. Referenčný štandard, N-nitro-L-arginín, ktorý poskytuje 80% inhibície syntézy oxidu dusičného pri koncentrácii 1μΙ, je testovaný, aby sa verifikoval tento postup.

Pri triedení inhibičnej aktivity syntézy oxidu dusičného je aktivita zlúčeniny vyjadrená ako IC₅₀ (koncentrácia látkovej substancie, ktorá poskytuje v teste 50% inhibície enzýmu). Hodnoty IC₅o pre testované zlúčeniny boli počiatočné odhadnuté z inhibičnej aktivity 1, 10, a 100μΜ roztokov zlúčenín. Zlúčeniny, ktoré inhibovali enzým menej než z 50% pri 10μΜ boli testované znovu pri použití vhodnejších koncentrácií tak, aby mohla byť stanovená hodnota IC₅₀.

-22Vo vyššie popísanom triedení, boli testované zlúčeniny príkladov 1 až 12 uvedených nižšie a poskytli IC₅o menšie než 10μΜ, čo naznačuje, že možno očakávať užitočnú terapeutickú aktivitu.

V porovnaní s ostatnými zlúčeninami, sú zlúčeniny vzorca (I) a ich optické izoméry a racemáty vrátane farmaceutický prijateľných solí menej toxické, viac účinné, pôsobia dlhšie a majú širšie spektrum pôsobnosti, sú silnejšie, viac selektívnejšie pre neurónové izoformy syntézy oxidu dusičného, vykazujú menej vedľajších vplyvov, absorbujú sa ľahšie a ďalšie farmaceutické vlastnosti sú tiež užitočné.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Dihydrochlorid N-(3-metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu (a) 3-metyl-7-nitro-3,4-dihydroizochinolín

3-metyl-3,4-dihydroizochinolín (7.0g, 48.2mmol) bol rozpustený v koncentrovanej kyseline sírovej (150ml) a k tejto zmesi bol pridaný dusičnan draselný (4.9g, 50.0mmol). Zmes sa nechala stáť cez noc, bola vyliata na ľad a neutralizovaná pridaním koncentrovaného hydroxidu amónneho. Vyzrážaná tuhá látka bola zachytená filtráciou, premytá a vysušená na vzduchu: 7.5g (82%), t. t. 110až112°C.

(b) Hydrochlorid 3-metyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu

Do 3-metyl-7-nitro-3,4-dihydroizochinolínu (7.5g, 39.4mmol) v MeOH (150ml) bol po častiach pridávaný borohydrid sodný (1.64g, 43.4mmol). Keď bolo pridávanie dokončené, zmes bola odparená, vliata do vody a extrahovaná etylacetátom (3x100ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a zahustené na olej. Olej bol rozpustený v etanole a spracovaný s izopropanolom-HCI. Pevné látky boli zachytené filtráciou: 7.5g(84%), 1.1. > 265°C.

(c) 3-metyl-7-amino-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín

3-metyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín (3.0g, 13.1 mmol) bol rozpustený v MeOH (100ml) a hydrogenovaný pri 50 psi v prítomnosti katalytického množstva 10% Pd-C. Po 1 hod bola zmes filtrovaná cez sklo a odparená na olej, ktorý bol bezprostredne použitý v nasledujúcej reakcii.

(d) Dihydrochlorid N-(3-metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochimolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

Do 3-metyl-7-amino-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (2.47g, 11.7mmol) v 1metyl-2-pyrolidínu (30ml) bol pridaný hydrogénjodid S-metyl-2-tioféntiokarboximidu (viď WO 95/05363, príklad 1(d), 3.90g, 13.5mmol). Zmes bola miešaná počas 24 hod pri 45°C, vliata do zásaditej vody a extrahovaná etylacetátom (3x100ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a zahustené na pevnú látku, ktoré bola rekryštalizovaná z etylacetátu-hexánu. Pevná látka bola rozpustená v etanole a spracovaná s izopropanolom-HCI. Výsledná soľ bola zachytená filtráciou: 1.5g (37%), 1.1. > 265°C.

Príklad 2

Dihydrochlorid N-(3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu (a) N-(1-benzylpropyl)formamid

Do miešaného roztoku kyseliny mravčej (250ml) a formamidu (500ml) bol pridaný 1-femyI-2-butanon (25g, 0.168mol); reakcia bola potom zahriata na 165 až 170°C počas 4hod. Reakčná zmes bola potom ochladená a vliata do vody (11). Vodná fáza bola potom extrahovaná etylacetátom (3x100ml). Organická fáza bola vymytá nasýteným uhličitanom sodným (2x100ml) a vysušená síranom horečnatým. Odparenie rozpúšťadla poskytlo olej (24.1 g, 80%).

Nasledujúce kroky sledujú postup, ktorý je analogický postupu popísanému Larsenom etalv J. Org. Chem., 1991, 56, 6034-6038.

(b) 4-etyl-5,9b-dihydro-4H-1 -oxa-3a-aza-cyklopenta[a]naftalén-2,3-dión

Do miešaného roztoku N-(benzylpropyl)formamidu (23.8g, 0.13mol) v dichlormetáne (1300mi) bol pridaný oxalylchlorid (2.0M, 73,95ml, 0,147mol) počas desiatich minút. Reakčná zmes bola potom miešaná pri laboratórnej teplote počas 30 min. Potom bola reakčná zmes ochladená na -10°C a bol pridaný FeCI₃ (26g, 0.16mol). Zmes sa nechala ohriať na laboratórnu teplotu a bola miešaná počas 18 hod. Bola pridaná vodná N HCI (1300mi) a reakčná zmes sa miešala počas 1 hod, vrstvy boli oddelené a organická fáza bola premytá solankou (500ml). Odparenie rozpúšťadla poskytlo danú látku (29.4g, 95%).

(c) 3-etyl-3,4-dihydroizochinolín

Do miešaného roztoku 4-etyl-5,9b-dihydro-4H-1-oxa-3a-azacyklopenta[a]naftalén-2,3-diónu (29.4g, 0.12mol) v metanole bola pomaly pridaná koncentrovaná kyselina sírová (60ml). Reakčná zmes bola potom refluxovaná počas 2 hod. Rozpúšťadlo bolo odparené a do zvyšku bola pridaná voda a organická fáza bola potom extrahovaná 2N HCI (2x100ml). Vodné vrstvy boli spojené a pridaním koncentrovaného hydroxodu amónneho sa stali bázickými. Produkt bol potom vyextrahovaný do dichlormetánu a vysušený cez síran horečnatý. Odparenie rozpúšťadla poskytlo 20.5g.

(d) 3-etyl-7-nitro-3,4-dihydroizochinolín

Do koncentrovanej kyseliny sírovej (150ml) bol pridaný pri 0°C 3-etyl-3,4dihydroizochinolín (20.1 g, 0.12mol) a dusičnan draselný (12.13g, 0.12mol). Reakčná zmes sa nechala zahriať na laboratórnu teplotu počas 24 hod. Reakčná zmes bola vliata na ľad (1.51) a vodná fáza sa stala bázickou pridaním koncentrovaného hydroxidu amónneho. Zo zmesi vykryštalizovania pevná látka, ktorá bola zhromaždená filtráciou v prítomnosti vyššie uvedenej zlúčeniny (22.3g, 91%), 1.1. 61 až62°C.

(e) Dihydrochlorid 3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu

Do tlakovej nádoby s 3-etyl-7-nitro-3,4-dihydroizochinolínom (3.6g, 17mmol) rozpustenom v metanole (100ml) a nasýtenom izopropanolom-HCI (20ml) bol pridaný 10% Pd-C (250mg) a reakčná zmes bola hydrogenovaná počas 1 hod.

-25Katalyzátor bol odstránený filtráciou a rozpúšťadlo bolo odparené v prítomnosti Dihydrochlorid 3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu (4.3g).

(f) Dihydrochlorid N-(3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

Do miešaného roztoku Dihydrochlorid 3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7amínu (4.3g, 17mmol) v N-metylpyrolidín (50ml) bol pridaný pyridín (2.05g, 26mmol). Do reakcie bol pridaný hydrogénjodid S-metyl-2-tioféntiokarboximid a zmes sa nechala zahriať počas 18 hod pri 40°C. Reakčná zmes bola potom vliata do 20% hydroxidu sodného (300ml). Vodná vrstva bola potom extrahovaná etylacetátom (3x100ml) a vysušená cez síran horečnatý. Odparenie rozpúšťadla poskytlo surový olej (4.2g). Potom bola pripravená z etylacetátu a nasýteného izopropanol-HCI Dihydrochloridová soľ. Produkt Dihydrochlorid N-(3-etyl-1,2,3,4tetrahydro-izochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid bol vysušený pri 80°C počas 24 hod v prítomnosti 4.09g, 1.1. 181 až 182°C.

Príklad 3

Dihydrochlorid N-(1,3,4,6,7,11b-hexahydro-2H-benzo[a]chinolizín-10-yl)-2-tiofénkarboximidamidu (a) 10-amino-1,3,4,6,7,11 b-2H-benzo[a]chinolizín

Do roztoku 1,3,4,7-tetrahydro-2H-benzo[a]chinolízium chlorid (3.6g, 16mmol) (S. Akaboshi, T. Kutsuma, K. Achiwa, j. Pharm. Bull. 1960, 8, 14) v koncentrovanej kyseline sírovej (25ml) pri 0°C bol pridaný dusičnan sodný (2.20g, 20mmol). Reakčná zmes bola miešaná cez noc a potom bola vliata na ľad (300ml). Bol pridaný oxid platiničitý a roztok bol hydrogenovaný v Parrovom hydrogenátore pri 50 psi počas 24 hod. Roztok bol prefiltrovaný a filtrát bol zalkalizovaný koncentrovaným hydroxidom amónnym a dvakrát extrahovaný dichlór metánom. Suchá (MgSO₄) organická fáza bola potom zahustená v prítomnosti červeného oleja (2.4g, 75%). Chromatografia na silikagéle poskytla vyššie uvedenú zlúčeninu ako tmavočervený olej

-26(1,86 g, 58%), MS 230 (M+H)⁺, 'H NMR (CDC1₃) 6,85 (d, 1H), 6,52 (d, 1H), 6,48 (dd, IH), 3,3-3,7 (široký s, 2H), 2,8-3,1 (m, 4H), 2,1 -.

2,7 (m, 3H), 1,2-2,0 (m, 6H).

(b) Dihydrochlorid N-(1,3,4,6,7,11b-hexahydro-2H-benzo[a]chinolizín-10-yl)-2tiofénkarboximidamidu

Roztok 10-amino-1,3,4,6,7,11 b-hexahydro-2H-benzo[a]chinolizínu (0.463g, 2.29mmol), hydrochlorid pyridínu (0.33g, 2.9mmol) a hydrogénjodid S-metyl-2tioféntiokarboxyimídu (0.92g, 3.2mmol)v N-metyl-pyrolidíne (3.5ml) bol zahrievaný pri 45’C počas 3 hod. Reakčná zmes bola potom vliata do vody, spracovaná s odfarbovacím uhlíkom a roztok bol prefiltrovaný. Filtrát bol zalkalizovaný zriedeným NaOH a dvakrát extrahovaný etylacetátom. Suché organické fázy (MgSO₄) boli zahustené v prítomnosti oleja. Chromatografia na silikagéle, pri použití2% metanolu v chloroforme nasýtenom amoniakom poskytla uvedenú látku formou oleja (0.28g, 35%). Vzorka bola prenesená do etanolu a izopropanolu a okyslená hydrochloridom v izopropanole. Na indukovanie zrážania bol pridaný etylacetát. Po celonočnom miešaní bol produkt zachytený, premytý izopropanolom a éterom v prítomnosti danej zlúčeniny ako bielej tuhej látky (225 mg, 25,5%), MS 312 (M+H)⁺, ’H NMR (d₆-DMSO) 11,6-12,1,

9,7-10,1 a 8,8-9,4 (široký m, 4H vymenitelné s D2O), 8,2 (d, 1H), 8,16 (d, 1H), 7,50 (široký s, 1H), 7,3-7,4 (m, 3H), 4,45 (široký t, 1H), 3,1-

3,9 (m,5H), 3,26 (široký d, 1H), 2,87 (široký d, 1H), 1,6-2,3 (m, 5H).

Príklad 4

N-(1,2,3,5,6,10b-hexyhydropyrolo[2,1-a]izochinolín-9-yl)-2-tiofénkarboximidamid (a) Táto zlúčenina bola pripravená tak, ako je popísané v príklade 3(a). Z 2,3,5,6tetrahydro-1H-pyrolo[2,1-a]izochÍnolínium chloridu (6.28g, 27.7mmol) bola táto zlúčenina izolovaná formou oleja (2.60g, 50%) , MS 189 (M+H)⁺, *HNMR(CDC1₃) 6,88 (d, 1H), 6,47 (dd, IH),

6,39 (d, 1H), 3,4-3,7 (široký s, 2H), 3,3-3,4 (t, 1H), 2,9-3,2 (m, 3H),

2,4-2,8 (m, 3H), 2,2-2,3 (m, IH), 1,6-2,0 (m, 3H).

(b) N-(1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolín-9-yl)-2-tiofénkarboximidamid

Táto zlúčenina bola pripravená tak, ako je popísané v príklade 3(b). Daná látka bola izolovaná z N-(1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolín-9-yl)-2tiofénkarboximidamid (972mg, 5.16mmol), po rozotrení so studeným etylacetátom (5ml), formou žltej tuhej látky (520mg, 34%), 1.1. 193 až 196°C.

Príklad 5

N-(4-hydroxy-2,3,4,5-tetrahydroxy-1H-2-benzazepín-8-yl)-2-tiofénkarboximidamidbis(fumarát) (a) Hydrochlorid 4-hydroxy-2,3,4,5-tetrahydroxy-1 H-2-benzazepín-8-amínu

Suspenzia hydrochlorid 4-hydroxy-8-nitro-2,3,4,5-tetrahydroxy-1 H-2benzazepínu (1.29g, 6.00mmol) a hydrogénjodid S-metyl-2-tioféntiokarboximidu (2.22g, 7.80mmol) v N-metyl-pyrolidíne (6.0ml) bola zahrievaná pri 45°C počas 16 hod. Reakčná zmes bola potom vliata do vody, spracovaná s odfarbovacím uhlím a prefiltrovaná. Filtrát bol zalkalizovaný so zriedeným roztokom NaOH a bol pridaný chlorid sodný, táto zmes bola 4krát extrahovaná etylacetátom. Suchá organická fáza (MgSO₄) bola zahustená v prítomnosti oleja. Chromatografia na silikagéle, pri použitíW až 20% metanolu v chloroforme nasýtenom amoniakom, poskytla danú zlúčeninu formou tuhej látky (1.43g, 83%). Táto tuhá látka bola rozpustená v roztoku metanolu a izopropanolu a bola pridaná kyselina fumarová (1.0g, 9.3mmol) a potom bol roztok zahriaty počas 0.5 hod. Po ochladení bola pevná látka zachytená v prítomnosti danej zlúčeniny formou bielej tuhej látky (1.73g, 55%), t. t. 195 až 196°C.

Príklad 6

Dihydrochlorid N-(1-(2-hydroxyetyl)-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

a) Kyselina 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínoctová

Suspenzia 7-nitro-3,4-dihydroizochinolínu (10.0g, 56.1 mmol) a kyseliny malonovej (11.7g, 112mmol) v kyseline octovej (55ml) bola zahrievaná pri 120°C počas 0.5 hod. Ochladením boio rozpúšťadlo zahustené v prítomnosti červeného oleja, ktorý bol prenesený do vodného etanolu (50ml, 75%). Po kryštalizácií bolo rozpúšťadlo ochladené na 0°C a produkt bol zachytený formou svetlohnedej tuhej látky (10.9g, 81 %). 1.1. 264 až 265°C.

b) Hydrochlorid 1-(2-hydroxyetyl)-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu

Do suspenzie kyseliny 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínoctovej vbezvodom THF (20ml) bol pri 0°C pridaný 1.0M bóran v THF (25ml). Reakčná zmes bola pomaly zahriata na laboratórnu teplotu a počas 4 hod pokračovalo miešanie. Pretože reakčná zmes nejavila známky dokončenia, tak bol pridaný dodatočne bóran (10ml) a rcztok bol zahriaty pod refluxom počas 1 hod. Ochladením na laboratórnu teplotu bola reakčná zmes schladená pridaním metanolu (1ml) a 6M kyseliny chlorovodíkovej (5ml). Roztok bol zahrievaný pod refluxom počas 2 hodín, aby sa rozložili akékoľvek bóranové medziprodukty a rozpúšťadlo bolo zahustené na rotačnej odparke. Výsledný olej bol prenesený do vody, zalkalizovaný zriedeným NaOH a dvakrát extrahovaný dichlórmetánom. Suché organické extrakty (MgSO<) boli zahustené v prítomnosti pevnej látky. Táto pevná látka bola rozpustená v horúcom etanole (75ml) a bola pridaná kyselina chlorovodíková v etanole v prítomnosti kyslého roztoku. Produkt bol izolovaný filtráciou zrazeniny formou svetložltej látky (2.28g, 84%), 1.1. 238 až 240°C.

c) Hydrochlorid 1-(2-hydroxyetyl)-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu

Do roztoku hydrochlorid 1-(2-hydroxyetyl)-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7amínu (2.18g, 8.43mmol) v etanole (100ml) bolo pridané Pd-C (0.4g) a roztok bol hydrogenovaný v Parrovom hydrogenátore počas 2 hod. Reakčná zmes bola prefiltrovaná, aby sa odstránil katalyzátor a objem filtrátu bol zmenšený na 1/3. Roztok bol zahriaty a bol pridaný éter (150ml). Bola zhromaždená zrazenina v prítomnosti žltej tuhej látky (1.81 g, 94%), 11. 199.5 až 200.5°C.

d) Dihydrochlorid N-(1 -(2-hydroxyetyl)-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

Táto zlúčenina bola pripravená tak ako je popísané v príklade 3(b). Z hydrochlorid 1-(2-hydroxyetyl)-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu (1.38g, 6.03mmol) bola izolovaná daná zlúčenina, po vytvorení soli v propanole s chlorovodíkom (1.30g, 58%), 1.1. 234 až 236°C.

Príklad 7

Hydrochlorid N-(11-metoxykarbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2tiofénkarboximidamidu

a) Hydrochlorid metylesteru kyseliny 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-1-octovej

Do suspenzie kyseliny 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-1-octovej (2.75g, 11.5mmol) v metanole (25ml) bol pri 0°C po kvapkách pridaný tionylchlorid (3.6g, 41 mmol). Po skončení pridávania bola reakčná zmes zahrievaná na refluxe počas 0.33 hod. Po ľahkom ochladení bol pridaný ester (50ml) a reakčná zmes bola ochladená na 0°C. Zrazenina bola zachytená v prítomnosti danej zlúčeniny formou svetložltej pevnej látky (3.09g, 93%), 1.1. 211 až 212°C.

b) Dihydrochlorid metylesteru kyseliny 7-amino-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-1octovej

Do roztoku hydrochlorid metylesteru kyseliny 7-nitro-1,2,3,4tetrahydroizochinolín-1-octovej (3.08g, 10.7mmol) v roztoku metanolu (170ml) a nasýtenom chlorovodíku v izopropanole (12ml) bolo pridané 10% Pd-C (0.5g). Reakčná zmes bola hydrogenovaná v Parrovom hydrogenátore počas 2 hod. pri 50psi. Po odstránení katalyzátora filtráciou bolo rozpúšťadlo zahustené na 1/5 pôvodného objemu. Bol pridaný izopropanol (70ml) a bola zachytená zrazenina v podobe danej zlúčeniny ako svetlo žltá pevná látka (3.10g, 98%), t. t. 245 až 246°C.

c) Hydrochlorid N-(1 -metoxykarbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2tiofénkarboximidamidu

Suspenzia Dihydrochlorid metylester kyseliny 7-amino-1,2,3,4tetrahydroizochinolín-1 -octovej (1.62g, 5.52mmol), hydrogénjodidu S-metyl-2

-30tioféntiokarboximidu (2.00g, 7.01 mmol) a pyridínu (0.48g, 6.0mmol) v Nmetylpyrolidíne (6.0ml) bola zahrievaná pri 45°C počas 4 hod. Reakčná zmes bola vliata do vody, zalkalizovaná uhličitanom sodným a dvakrát extrahovaná zriedenou kyselinou chlorovodíkovou, vysušená (MgSO₄) a zahustená v prítomnosti oleja. Stĺpcová chromatografia na silikagéle použitím 5 až 10% metanolu v chloroforme nasýtenom amoniakom poskytla žiadanú zlúčeninu formou oleja (1.29g), ktorý státím stuhol. Analytická vzorka bola získaná rekryštalizáciou z etylacetátu-hexánu, t. t. 245 až 246°C.

Príklad 8

Lítiová soľ N-(1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-1 -kyselina octová-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

N-(1-metoxykarbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid (príklad 7) (729mg, 2.21 mmol) a hydroxid lítný /55mg, 2.3mmol) v roztoku THF (10ml), metanolu (5ml) a vody (3ml) boli zahrievané pod refluxom počas 2 hod. Rozpúšťadlo bolo odparené na rotačnej odparke v prítomnosti pevnej látky. Rozotrenie s etanolom (20ml) poskytlo po sfiltrovaní danú zlúčeninu ako bielu tuhú látku (449mg, 63%), MS 314 (M+H)⁺, ’H NMR (d₆ DMSO), 7,68 (d, 1H), 7,53 (d, 1H), 7,03 (t, 1H), 6,90 (d, 1H), 6,61 (s, 1H), 6,54 (d, 1H), 6,35 (široký s, 2H), 4,08 (široký m, 1H), 3,0-3,2 (m, 1H), 3,0-3,2 (m, 1H), 2,3-2,9 (m, 1H).

Príklad 9

Dihydrochlorid N-(1-aminokarbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2tiofénkarboximidamid

a) 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-1 -acetonitrilu

Suspenzia 7-nitro-3,4-dihydroizochinolínu (13.4g, 76.1 mmol) a kyseliny kyanooctovej (12.5g, 150mmol) v kyseline octovej bola zahriata pri refluxe počas 0.5 hod. Po začiatku úniku oxidu uhličitého a ochladení reakčnej zmesi, bolo rozpúšťadlo odstránené na rotačnej odparke. Zvyšok bol rozotrený izopropanolom (100ml) a bola zachytená pevná látka. Surový produkt bol rozdelený medzi

-31 etylacetát a zriedený roztok uhličitanu draselného. Suchá organická fáza (MgSO₄) bola zahustená v prítomnosti danej zlúčeniny formou oranžovej tuhej látky (12.6g, 76%), MS 218(M+H)⁺. ¹H NMR (CDCI₃)8.03 (dd, 1 H), 7.99 (d,1 H), 7.31 (d, 1H), 4.45 (t, 1H), 3.1 až 3.4 (m, 3H), 2.9 až 3.0 (m, 3H), 2.07 (široký s, 1H).

b) 7-Nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-l-acetamid

Do studenej kyseliny sírovej (100ml) bol naraz pridaný 7-nitro-1,2,3,4tetrahydroizochinolín-1-acetonitril (12.6g, 58.0mmol). Reakčná zmes bola miešaná počas 6 hod pri takej teplote, pri ktorej sa všetok materiál rozpustil. Reakčná zmes bola vliata na. ľad a roztok bol zalkalizovaný koncentrovaným hydroxidom amónnym tak, aby bol exotermický priebeh reakcie pod kontrolou. Bol zachytený vyzrážaný produkt, premytý veľkým množstvom vody a vysušený na vzduchu v prítomnosti žiadanej zlúčeniny v podobe červenej pevnej látky (12.1 g, 89%), 1.1. 246 až 247°G.

c) Dihydrochlorid 7-amino-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-1-acetamidu

Táto zlúčenina bola pripravená tak, ako je popísané v príklade 2(e), okrem toho, že ako rozpúšťadlo bol použitý etanol. Z 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-

1-acetamidu (1.20g) bola izolovaná žiadaná zlúčenina v podobe bielej tuhej látky (1.05g, 85%), 1.1. 168 až 170°C.

d) Dihydrochlorid N-(1-aminokarbonylmetyl-1,2₁3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2tiofénkarboximidamidu

Táto zlúčenina bola pripravená tak, ako je popísané v príklade 5 b). Z Dihydrochlorid 7-amino-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-1-acetamidu (1,05g, 3.58mmol) bola izolovaná žiadaná zlúčenina ako voľná báza (0.66g, 58%). Dihydrochloridová soľ bola pripravená rozpustením voľnej bázy v izopropanole a pridaním hydrochloridu v izopropanole až bol roztok kyslý, MS 315 (M+H)⁺, 'H NMR (d₆DMSO), 11,7-11,8 (Široký s, 1H), 10,1-10,2 (široký s, 1H), 9,7-10,1 (široký s, 1H), 9,4-9,6 (široký s, 1H), 8,8-9,3 (široký s, 1H), 8,1-8,2 (m, 2H), 7,83 (široký s, 1H), 7,3-7,4 (m, 4H), 4,80 (široký m, 1H), 3,0-

3,5 (m, 1H).

-32 Príklad 10

N-(2,3-dimetyl-1₎2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) Hydrochlorid 2,3-dimetyl-7-nitro^1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu

Do hydrochlorid 3-metyl-7-nitro-1,2,3_I4-tetrahydroizochinolínu (2.0g, 8.75mmol) v 37% formaldehyde (7.0ml, 87.5mmol) bola pridaná 96% kyselina mravčia (3.5ml, 87.5mmol) a mravčan sodný (0.60g, 8.75mmol). Zmes bola zahrievaná pod refluxom počas 1 hod, ochladená a vliata do vody so zásaditou reakciou a extrahovaná etylacetátom (3x50ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a zahustené na olej. Olej bol rozpustený v etanole a spracovaný izopropanolom-HCI. Pevné látky boli zachytené filtráciou (2.0g, 95%), 1.1. 242 až 244°C.

b) Hydrochlorid 2,3-dimetyl-7-amino-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu

Do hydrochlorid 2,3-dimetyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (2.0g, 8.24mmol) v metanole (100ml) bolo pridané katalytické množstvo 10% Pd-C. Zmes bola potom hygrogenovaná pri 50 psi počas 1 hod, prefiltrované a zahustená na pevnú látku, ktorá bola bezprostredne použitá v ďalšej reakcii (1.6g, 92%), t. t. 215 až217°C.

c) N-(2,3-dÍmetyl-1,2_I3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

Do hydročhlorid 2,3-dimetyl-7-amino-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (1.6g, 7.60mmol) v 1-metyl-2-pyrolidíne (10ml) bol pridaný hydrogénjodid S-metyl-2tioféntiokarboximid (2.5g, 8.74mmol). Zmes bola miešaná počas 24 hod pri 45 °C, vliata do vody so zásaditou reakciou a extrahovaná etylacetátom (3x50ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a zahustené na olej, ktorý bol prečistený pomocou RPHPLC (acetonitril-voda: 0 až 60%; 50min). Lyofilizácia poskytla bielu tuhú látku (1.45g); MS (M+H)⁺ 286.

Príklad 11

Dihydrochlorid (-)-N-( 10-metyl-2,3,5,10,11,11 a-hexahydro-1 H-pyrolo[2,1 -

c][1,4]benzodiazepírv7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

a) 10-metyl-2,3-dihydro-1 H-pyrolo[2,1 -c][1,4]benzodiazepín-5,11 (1 OH, 11 aH)-dión

Do (S)-(+)-2,3-dihydro-1 H-pyrolo[2,1 -c][1,4]benzodiazepín-5,11 (1 OH, 11 aH)diónu (9.9g, 45.8mmol) v DMF (150ml) pri O°C bol pridaný NaH (2.0g, 50.4mmol). Zmes bola zahriata na laboratórnu teplotu a miešaná, potom bol po kvapkách pridaný metyljodid (8.56ml, 137mmol). Po ďalšej hodine miešania bola zmes vliata do vody (11) a extrahovaná etylacetátom (3x100ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a zahustené na pevnú látku, ktorá bola skryštalizovaná z etylacetátu-hexánu (5.7g, 54%), 1.1. 118 až 120°C.

b) 10-metyl-7-nitro-2,3-dihydro-1H-pyrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepín-5,11(1 OH, 11aH)-diónu -

Do 10-metyl-7-nitro-2,3-dihydro-1H-pyrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepín-5,11 (10H,11aH)-diónu (5.7g, 24.7mmol) v koncentrovanej kyseline sírovej (60ml) pri 0°C bol pridaný dusičnan draselný (2.62g, 25.9mmol). Po miešaní počas 2 hod bola zmes vliata na ľad (500g) a extrahovaná etylacetátom (5x75ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené cez síran horečnatý, prefiltrované a zahustené na pevnú látku, ktorá bola skryštalizovaná z etylacetátu-hexánu (5.2g, 77%), t. t. 160 až162°C.

c) Hydrochlorid 10-metyl-7-nitro-2,3,5₁10,11,11 a-hexahydro-1 H-pyrolo[2,1 -

c] [1,4]benzodiazepínu

Do 1 Ô-metyl-7-nitro-2,3-dihydro-1 H-pyrolo[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazepín-5,11 (10H, 11aH)-diónu (5.2g, 18.9mmol) v THF (30ml) bol pridaný 1M bóran v THF (151 ml, 151 mmol). Zmes bola refluxovaná počas 6 hod, ochladená, schladená 4N HCI (30ml) a refluxovaná počas ďalšej hodiny. THF bol odparený a vodná vrstva bola zalkalizovaná pridaním 50% NaOH. Vodná vrstva bola extrahovaná etylacetátom (5x75ml) a spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a zahustená na olej. Olej bol rozpustený v etanole a spracovaný izopropanolom-HCI. Pevná látka bola zachytená filtráciou (2.6g, 50%),

1.1. 230 až 238°C.

d) Hydrochlorid 7-amino-10-metyl-2,3,5,10,11,11 a-hexahydro-1 H-pyrolo[2,1 -

c] [1,4]benzodiazepínu

Do hydrochlorid 10-metyl-7-nitro-2,3,5,10,11,11 a-hexahydro-1 H-pyrolo[2,1 c][1,4]benzodiazepínu (2.6g, 9.16mmol) v metanole (100ml) bolo pridané 10% PdC. Zmes bola zahrievaná pri 50 psi počas 1 hod, prefiltrovaná a zahustená na olej, ktorý bol bezprostredne použitý v ďalšej reakcii.

e) Dihydrochlorid (-)-N-(10-metyl-2,3,5,10,11,11 a-hexahydro-1 H-pyrolo[2,1 -

c][1,4]benzodiazepín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

Do 7-amino-10-metyl-2,3,5,10,11,11 a-hexahydro-1 H-pyrolo[2,1 -c][1,4]benzodiazepínu (1,6g, 7.60mmol) v 1-metyl-2-pyrolidíne (10ml) bol pridaný hydrogénjodid S-metyl-2-tioféntiokorboxyimid (2.5g, 8.74mmol). Zmes bola miešaná počas 24 hod pri 45°C, vliata do zalkalizovanej vody a extrahovaná etylacetátom (3x50ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a zahustené na pevnú látku, ktorá bola rekryštalizovaná z etylacetátu-hexánu. Pevná látka bola rozpustená v etanole a spracovaná s izopropanolom-HCI. Soľ bola zachytená filtráciou (1.2g, 32%), 1.1. >200°C, [a]_D -84(c0.9899, MeOH).

Príklad 12

Dihydrochlorid N-(3-propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

Do miešaného roztoku Dihydrochlorid 3-propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín7-amínu (3.0g, 11 mmol) (pripravený analogickou metódou, ktorá je uvedená v príkladoch 1 a 2 na prípravu metylových a etylových analógov) v Nmetylpyrolidíne (50ml) bol pridaný pyridín (1.0ml, 12mmol). Do reakčnej zmesi bol pridaný hydrogénjodid S-metyl-2-tioféntiokarboximidu (3.7g, 13mmol) a zmes potom bola zahrievaná počas 18 hod na 40°C. Reakčná zmes bola potom vliata do 20% hydroxidu sodného (300ml) a vysušená cez síran horečnatý. Odparenie rozpúšťadla poskytlo surový olej. Z etylacetátu, etanolu a nasýteného izopropanolu-HCI bola pripravená soľ. Produkt, Dihydrochlorid N-(3-propyl-1,2,3,4

-35tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid bol vysušený pri 80°C počas 24 hod (2.9g), 1.1. 205 až 206°C.

Príklad 13

Hydrochlorid (+)-N-(3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

a) (S) a (R) 3-etyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín

Do roztoku 3-etyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (15.8g, príklad 2 d)) v metanole (100ml) bol pridaný borohydrid sodný (4g). Po skončení penenia bola reakčná zmes · vliala do vody (750ml) a potom bola vodná fáza extrahovaná etylacetátom (3x300ml). Odparenie poskytlo 3-etyl-7-nitro-1,2,3,4tetrahydroizochinolín ako svetlohnedý olej (15.8g). Izoméry boli oddelené selektívnou kryštalizáciou podľa nasledujúceho postupu:

Do miešaného roztoku 3-etyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (15.8g, 76mmol) v etanole (100ml) bola pridaná kyselina dibenzoyl-L-vínna (27.45g, 76mmol) rozpustená v etanole (100ml). Do tohoto roztoku bol pridaný éter (150ml), čím po státí vykryštalizovala tuhá látka. Táto látka bola zachytená a vysušená (20.6g). Vyššie uvedená pevná látka bola rekryštalizovaná z refluxného metanolu (2I). Tento materiál (6.0g) bol z 99.5% jeden izomér podľa kapilárnej elektroforézy. Vyššie uvedená zlúčenina bola rozpustená vo vode (500ml) a vodná fáza bola zalkalizovaná ä zlúčenina bola extrahovaná do etylacetátu (3x200ml). Toto poskytlo 3.5g látky.

b) Dihydrochlorid (+)-3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu

Do tlakovej nádoby naplnenej (+)-3-etyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínom (3.5 g) rozpustenom v metanole (100ml) a nasýtenom izopropanolom-HCI (20ml) bolo pridané 10% Pd-C (250ml) a reakčná zmes bola hydrogenovaná počas 1 hod. Katalyzátor bol odstránený filtráciou a rozpúšťadlo sa odparilo v prítomnosti Dihydrochlorid 3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu (3.4g), 1.1. 199 až200°C, [a]o ; 68.4°(c0.976, metanol)

c) Dihydrochlorid (+)-N-(3-ety 1-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarbox- imidamidu

Do miešaného roztoku dihydrochlorid (+)-3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu (3.0g, 12mmol) v N-metylpyrolidíne (50ml) bol pridaný pyridín (1.4ml, 18mmol). Do reakčnej zmesi bol pridaný hydrogénjodid S-metyl-2tioféntiokarboximidu (4.1 g, 14mmol) a zmes bola zahrievaná počas 18 hod na teplotu 40°C. Reakčná zmes bola potom vliata do 20% hydroxidu sodného (300ml). Vodná fáza bola potom extrahovaná etylacetátom (3x100ml) a vysušená cez síran horečnatý. Odparenie rozpúšťadla poskytlo surový olej. Dihydrochloridová soľ bola pripravená z etanolu a éteru a nasýtená etanolom-HCI. Dihydrochlorid (+)-N-(3-etyl1,2,3₎4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid bol získaný vo výťažku 0.9g, 1.1. 187 až 188°C, [a]_D +52.8°(c 0.996, metanol).

Príklad 14

Hydrochlorid (-)-N-(3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

Táto zlúčenina bola pripravená podľa metódy popísanej v príklade 13.

a) Hydrochlorid (-)-3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu

Vyššie uvedená zlúčenina mala rotáciu [ocJd -69,29°(c 1.104, metanol), t. t. 201 až 202°C.

b) Hydrochlorid (-)-3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

Vyššie uvedená zlúčenina má rotáciu [a]o -57,6°(c 1.156, metanol), t. t. 193 až194°C.

Príklad 15

Dihydrochlorid N-(3-etyl-2-metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

a) 3-etyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín

Do miešaného roztoku 3-etyl-7-nitro-3,4-tetrahydroizochinolínu (5.0g) vmetanole (100ml) bol pridaný borohydrid sodný (3x4.0g) a reakčná zmes bola miešaná počas 2 hod. Do zmesi bola pridaná 4N HCI a týmto okyslením vykryštalizovala tuhá látka, ktorá bola zachytená filtráciou (4.0g).

b) Hydrochlorid 3-etyl-2-metyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu

Do miešaného roztoku hydrochlorid 3-etyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (4.0g, 8mmol) vo formaldehyde (15ml) bola pridaná kyselina mravčia (7.0ml) a reakčná zmes bola potom refluxovaná počas 1.5 hod. Reakčná zmes bola ochladená a zmes bola vliata do vody (300ml) a bola zalkalizovaná 50% NaOH. Vodná fáza bola potom extrahovaná dichlórmetánom (3x100ml) a organická fáza bola vysušená cez síran horečnatý. Odparenie rozpúšťadla poskytlo surový olej. Hydrochloridová soľ bola pripravená z etanolu-HCI (1.8g), 1.1. 240 až 241 °C.

c) Dihydrochlorid 7-amino-3-etyl-2-metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín

Do tlakovej nádoby naplnenej hydrochlorid 3-etyl-2-metyl-7-amino-1,2,3,4tetrahydroizochinolínu (3.6g, 17mmol) rozpustenom vmetanole (100ml) a nasýtenom izopropanolom-HCI (20ml) bolo pridané 10% Pd-C (250mg) a reakčná zmes bola hydrogenovaná počas 1 hod. Katalyzátor bol odstránený filtráciou a rozpúšťadlo odparené v prítomnosti danej zlúčeniny (4.3g)

d) N-(3-etyl-2-metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

Do miešaného roztoku hydrochlorid 7-amino-3-etyl-2-metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (1.7g, 7.1mmol) v N-metylpyrolidíne (50ml) bol pridaný pyridín (0.5g, 7.1 mmol). Do reakcie bol pridaný hydrogénjodid S-metyl-2tioféntiokarboximid (2.2g, 7.8mmol) a zmes bola zahriata na 40°C počas 18 hod. Reakčná zmes bola vliata do 20% hydroxidu sodného (300ml). Vodná fáza bola extrahovaná etylacetátom (3x100ml) a extrakty boli vysušené síranom horečnatým. Odparenie rozpúšťadla poskytlo N-(3-etyl-2-metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7yl)-2-tiofénkarboximidamid (600mg), 1.1.125 až 126°C.

-38Príklad 16

Dihydrochlorid N-(1,3,4,6,11,11a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-8-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

a) 1,3,4,6,11,11 a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-6-ón

Do roztoku 1,3,4,6-tetrahydro2H-benzo[b]chinolizín-6-ónu (4.02g, 20.2mmol) (M.A.Haimova, V.l. Ognyanov, a N.N. Molov, Synthesis, 1980, 845) v etanole (250ml) a 2.5M kyseline chlorovodíkovej (10ml) bolo pridané 10% Pd-C na uhlíku (0.8g) a roztok bol pretrepávaný v Parrovom hydrogenátore počas 72 hod. Katalyzátor bol odfiltrovaný a filtrát bol zahustený na olej, ktorý bol rozdelený medzi etylacetát a zriedenú zásadu. Suchá organická fáza (síran horečnatý) bola zahustená vo vákuu a umiestená do systému s vysokým vákuom v prítomnosti žiadanej zlúčeniny v podobe bielej látky (3.8g, 94%), 1.1. 88 až 92°C.

b) 8-nitro-1,3,4,6,11,11a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-6-ón

1,3,4,6,11,11a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-6-ón (3.78g, 18.7mmol) bol rozpustený v koncentrovanej kyseline sírovej (50ml) pri 0°C, bol pridaná dusičnan draselný (2.02g, 20mmol) a reakčná zmes bola miešaná cez noc. Reakčná zmes bola vliata na ľad (200g) a čiastočne bola zneutralizovaná koncentrovaným hydroxidom amónnym. Zrazenina bola zachytená a vysušená na vzduchu v prítomnosti danej zlúčeniny formou žltej pevnej látky (4.22g, 92%), t. t. 137 až 142°C.

c) Hydrochlorid 8-nitro-1,3,4,6,11,11 a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizínu

Do roztoku 8-n itro-1,3,4,6,11,11 a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-6-ónu (4.18g, 17.0mmol) v bezvodom THF (50ml) bol pridaný 1.0M bóran v THF (50ml). Reakčná zmes bola zahriata pod refluxom počas 18 hod. Po ochladení na laboratórnu teplotu bol prebytočný bóran rýchlo ochladení pridaním metanolu a 6M kyseliny chlorovodíkovej (6ml) a roztok bol zahrievaný počas 2 hod. Rozpúšťadlo bolo odstránené vo vákuu a zvyšok bol prenesený do vody. Výsledný roztok bol zalkalizovaný hydroxidom sodným a dvakrát extrahovaný dichlórmetánom. Suchá

-39organická fáza (síran horečnatý) bola zahustená v prítomnosti oleja, ktorý bol ihneď prenesený do etanolu (60ml). Bola pridávaná kyselina chlorovodíková v etanole dokiaľ nebol roztok zreteľne kyslý a tento bol miešaný niekoľko hodín pri laboratórnej teplote. Zrazenina bola zachytená, premytá etanolom a vysušená na suchu v prítomnosti danej zlúčeniny formou bielej pevnej látky (3.03g, 70%), t. t. 245až247°C.

d) Hydrochlorid 1,3,4,6,11,11 a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-8-amínu

Hydrochlorid 8-n itro-1,3,4,6,11,11 a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizínu (2.93g, 10.9mmol) bol rozpustený v etanole (150ml) a bolo pridané 10% paládium na uhlíku (0.4g) a roztok bol miešaný v Parrovom hydrogenátore počas 2 hod. Katalyzátor bol odfiltrovaný a bol premytý vodou. Filtrát bol zahustený a bol pridaný absolútny etanol a odparený za účelom stiahnutia prebytočnej vody. Výsledná pevná látka bola prenesená do horúceho etanolu (75ml) a pomaly bol pridávaný éter. Bola zachytená vytvorená zrazenina a vysušená na suchu v prítomnosti danej zlúčeniny v podobe nie celkom bielej látky (2.48g, 95%), 1.1. 241 až 243°C.

e) Dihydrochlorid N-(1,3,4,6,11,11 a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-8-yl)-2tiofénkarboximidamidu

Táto zlúčenina bola pripravená analogicky podľa príkladu 5b); voľná báza bola izolovaná z hydrochlorid 1,3,4,6,11,11a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-8amínu (1.1 Og, 4.61 mmol) po rekryštalizácii z etylacetátu-hexánu (0.78g). Táto bola ihneď vnesená do izopropanolu a okyslená kyselinou chlorovodíkovou v izopropanole. Žiadaná zlúčenina bola vyzrážaná pridaním etylacetátu formou nie celkom bielej tuhej látky (0.96g, 54°C, MS 312 (M+H)⁺; NMR (de. DMSO) 11.71212.0 (široký s, 2H), 9.7-10.2 (široký s, 1H), 9.0-9.5 (široký s, 1H), 8,22 (d, 1H), 8,16 (d, 1H), 7,3-7,4 (m, 3H), 7,27 (s, 1H), 4,44 (D, J=17,1H), 4,24 (dd, J=7,l 7,1H), 3,4-3,6 (m, 2H), 3,0-

3,2 (m, 3 H), 1,5-2,2 (m, 6H).

Príklad 17

-40Dihydrochlorid N-(5,7,8,9,10,11,11 a, 12-oktahydroazepino[1,2-b]izochinolίη-3-yI)-2tiofénkarboximidamidu

a) 8,9,10,11-tetrahydro-7H-azepino[1,2-b]izochinolín-5-ón

Anhydrid kyseliny homoftalovej (4.86g, 30mmol) bol po častiach pridávaný počas 10 min do refluxného roztoku 1-aza-2-metoxycyklohepténu (4.20g, 33mmol) v toluéne. Po skončení pridávania bola reakčná zmes zahrievaná ďalšiu 1 hod, potom sa nechala ochladiť na laboratórnu teplotu. Reakčná zmes bola zriedená chloroformom a výsledný roztok bol dvakrát premytý hydroxidom sodným a suchá organická vrstva (síran horečnatý) bola zahustená vo vákuu. Zvyšok bol chromatografovaný na silikagéle pri použití chloroformu, čo nasledovalo pridaním 4% metanolu v chloroforme ako eluentu v prítomnosti žiadanej zlúčeniny. Tá bola rozriedená 20% éterom v hexánoch (40ml) v prítomnosti danej zlúčeniny formou nie celkom bielej tuhej látky (2.21 g, 42%), 1.1. 99 až 101°C.

b) 8,9,10,11,11a,12-hexahydro-7H-azepino[1,2-b]izochinolín-5-ón

Táto zlúčenina bola pripravená analogicky ako v príklade 16a); z 8,9,10,11tetrahydro-7H-azepino[1,2-b]izochinolín-5-ónu (2.60g) bola daná látka izolovaná formou surového bezfarebného oleja (2.53g), MS 216 (M+H)⁺, ktorá bola použitá bez ďalšieho čistenia v ďalšom kroku.

c) 3-nitro-8,9,10,11,11 a, 12-hexahydro-7H-azepino[1,2-b]izochinolín-5-ón

Do roztoku 8,9,10,11,11a,12-hexahydro-7H-azepino[1,2-b]izochinolín-5-ónu (2.50g, 11.6mmol) v koncentrovanej kyseline sírovej (30ml) bol pri 0°C v jednej dávke pridaný dusičnan draselný (1.23g, 12.2mmol). Po celonočnom miešaní bola reakčná zmes vliata na ľad a zalkalizovaná koncentrovaným hydroxidom amónnym. Vodná fáza bola dvakrát extrahovaná tak, aby zostalo asi 15ml rozpúšťadla. Boli pridané hexány (100ml) a roztok bol umiestnený do mrazničky. Vyzrážaný produkt bol zachytený a vysušený v prítomnosti vyššie uvedenej zlúčeniny formou žltej pevnej látky (1.94g, 64%), 1.1. 117.5 až 119°C.

d) Hydrochlorid . 3-nitro-5,7,8,9,10,11,11a,12-oktahydro-7H-azepino[1,2-b]izochinolín-5-ón

Táto zlúčenina bola pripravená analogicky ako v príklade 16c); z 3-nitro8,9,10,11,11a,12-oktahydro-7H-azepino[1,2-b]izochinolín-5-ónu 1.90g, 7.30mmol) bola daná látka izolovaná ako biela tuhá látka (1.92g, 93%), 1.1. 253 až 255°C.

e) Hydrochlorid 5,7,8,9,10,11,11 a, 12-oktahydroazepino[1,2-b]izochinolín-3-amínu

Táto zlúčenina bola pripravená analogicky ako v príklade 16d); z 3-nitro8,9,10,11,11a,12-hexahydroazepino[1,2-b]izochinolínu (1.90g, 6.72mmol) bola daná látka izolovaná ako nie celkom biela tuhá látka (1.64g, 96%), 1.1. >230°C.

f) Dihydrochlorid N-(-5,7,8,9,10,11,11 a, 12-oktahydroazepino[1,2-b]izochinolín-3- yl)-2-tiofénkarboximidamidu

Táto zlúčenina bola analogicky pripravená ako v príklade 5b); z hydrochloridu 5,7,8,9,10,11,11 a, 12-oktahydroazepino[1,2-b]izochinolín-3-amínu (1,50g, 5.73mmol) bola izolovaná voľná báza danej zlúčeniny (1.19g, 62%), 1.1. 127 až 128.5°C.

Dihydrochloridová soľ bola pripravená rozpustením voľnej bázy v izopropanole a okyslením kyselinou chlorovodíkovou v etanole. Soľ bola vyzrážaná pridaním etylacetátu, MS 326 (M+H)⁺; NMR (d_s.

DMSO) 10,1-10,3 (široký 1H), 9,9 -10,1 (široký, 1H), 9,1-9,3 (široký,

1H), 8,21 (d, 1H), 8,16 (d, 1H), 7,3-7,4 (m, 3H), 7,27 (s, 1H), 4,4-4,6 (široký m, 2H), 3,3-3,6 (m, 4H), 3,05 (d, 1H), 1,5-2,3 (m, 8H).

Príklad 18

Dihydrochlorid N-(2-(2-hydroxyetyl)-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

a) Hydrochlorid 2-hydroxyetyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu

Do roztoku hydrochlorid /-nitro-I^.S^-tetrahydroizochinolínu (5.01 g, 23.3mmol) v etanole (200ml) bol pridaný pri 0°C v tlakovej nádobe 2.5M roztok

-42hydroxidu sodného (10ml). Tento roztok bol miešaný počas 0.2 hod, predtým než bol pridaný etylénoxid (4.2ml) a nádoba bola zatvorená a roztok bol miešaný cez noc a tým sa nechal ľahko otepliť na laboratórnu teplotu. Rozpúšťadlo bolo zahustené a vodný roztok bol dvakrát extrahovaný dichlórmetánom. Spojené a vysušené (síran horečnatý) extrakty boli zahustené v prítomnosti oleja. Tento olej bol ihneď rozpustený v etanole (125ml) a potom bola pridaná kyselina chlorovodíková v etanole do tej doby, než bola získaná kyslá reakčná zmes. Po ochladení bola získaná a izolovaná nie celkom biela látka, čo predstavovalo žiadanú látku (3.76g, 62%), 1.1. 213°C.

b) Hydrochlorid 2-hydroxyetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu

Táto zlúčenina bola pripravená podľa analógie popísanej v príklade 16d); z hydrochlorid 2-hydroxyetyl-7-nitro-1,2,3_l4-tetrahydroizochinolínu (2.0g, 7.72mmol) bola izolovaná uvedená zlúčenina formou nie celkom bielej tuhej látky (1.64g, 93%), 1.1. 181.5 až 183.5°C.

c) Dihydrochlorid N-(2-(2-hydroxyetyl)-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

Táto zlúčenina bola pripravená podľa analógie popísanej v príklade 5b). Z hydrochlorid 2-hydroxyetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu (1.29g, 5.64mmol) bola izolovaná žiadaná látka (1.29g, 5.64mmol) po rekryštalizácii z izopropanolu (0.94g, 55%) formou nie celkom bielej tuhej látky, t. t. 160 až 162.5°C. Táto bola rozpustená v izopropanole a okyslená kyselinou chlorovodíkovou v etanole. Daná zlúčenina bola izolovaná ako biela tuhá látka (1.08g,51%), 1.1 241 až243°C.

Príklad 19

Dihydrochlorid N-(6,6a,7,8,9,10-hexahydro-12H-pyrido[2,1-c]benzoxazepín-2-yl)-2tiofénkarboximidamidu

a) Hydrochlorid 1 -(2-fluór-5-nitrofenyl)metyl-2-(hydroxymetyl)piperidínu

-43 Do 2-fluór-5-nitrobenzaldehydu (15g) a 2-(hydroxymetyl)piperidínu (10.2g) rozpustených v metanole (150ml) bol pod dusíkom pridaný 8M bóranový-pyridínový komplex (11,1 ml). Reakčná zmes sa nechala miešať cez noc. Reakčná zmes bola potom odparená vo vákuu a prenesená do okyslenej vody. Roztok bol premytý dichlórmetánom (2x150ml), zalkalizovaný a extrahovaný dichlórmetánom (2x150ml). Dichlórmetánové zásadité extrakty boli spojené, premyté vodou a vysušené v prítomnosti žltého oleja (16.92g). tento olej bol prenesený do etylacetátu a spracovaný nasýteným izopropanolom-HCI, v prítomnosti bielej tuhej látky (14.2g), 1.1. 174 až 180°C. Rekryštalizácia zo zmesi metanolu, izopropanolu a dietyléteru poskytla bielu tuhú látku (4.88g), 1.1. 199 až 201 °C.

b) Hydrochlorid 2-nitro-6,6a,7,8,9,10-hexahydro-12H-pyrido[2,1-c][1,4]benzoxazepínu

Do hydrochloridu 1-(2-fluor-5-nitrofenyl)metyl-2-(hydroxymetyl)piperidínu (4.88g) v DMF (50ml) bol pod dusíkom pridaný 60% hydrid sodný (1.41 g). Výsledná zmes bola zriedená vodou a extrahovaná etylacetátom (3x200ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, odfarbené, vysušené a zahustené na hnedý olej (4.62g). Surový olej bol chromatografovaný na kremeni s etylacetátom-hexánom (1:1) ako elučným činidlom. Výsledné frakcie boli spojené a zahustené v prítomnosti látky (2.94g), ktorá bola vložená do izopropanolu a spracovaná s izopropanolom-HCI do zásaditej reakcie. Výsledná tuhá látka bola zachytená filtráciou v prítomnosti žiadaného produktu (2.46g), 1.1. 250 až 252°C.

c) Hydrochlorid 2-amino-6,6a,7,8,9,10-hexahydro-12H-pyrido[2,1 -c][1,4]benzoxazepínu

Hydrochlorid 2-nitro-6,6a,7,8,9,10-hexahydro-12H-pyrido[2,1-c][1,4]benzoxazepín (2.46g) rozpustený v metanole (50ml) sa nechal reagovať s 10% PdC (0.25g) a potom bol hydrogenovaný v Parrovom hydrogenátore počas 1 hod, prefiltrovaný a odparený v prítomnosti lepiacej pevnej látky (2.28g).

d) Dihydrochlorid N-(6,6a,7,8,9,10-hexahydro-12H-pyrido[2,1-c][1,4]benzoxazepín-2-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

Z produktu príkladu 19c) (2.28g) bola získaná daná zlúčenina pri použití metódy z príkladu 1(d), 0.76g, t. t. 276 až 278°C.

Príklad 20

Dihydrochlorid (+)-N-(1 H,5H-2,3,11,11a-tetrahydropyrolo[2,1-c]benzoxazepín-7-yl)-

2-tiofénkarboximidamidu; 1.1. >220°C.

Táto zlúčenina bola pripravená podľa príkladu 19.

Príklad 21

Dihydrochlorid (-)-N-( 1 H.5H-2.3,11,11 a-tetrahydropyrolo[2,1 -c]benzoxazepín-7-yl)-

2-tiofénkarboximidamidu; 1.1. >220°C

Táto zlúčenina bola pripravená podľa príkladu 19.

Príklad 22

Dihydrochlorid N-(2-etyl-2,3,4,5-tetrahydro-1,4-benzoxazepín-7-yl)-2-tiofén-karboximidamidu

a) Hydrochlorid 2-etyl-2,3,4,5-tetrahydro-1,4-benzoxazepínu

Do 2-etyl-2,3_l4_l5-tetrahydro-1,4-benzoxazepín-3,5-diónu (10g, 48.7mmol) vbezvodom THF (100ml) bol pridaný 1M bóran v THF (390ml, 390mmol). Zmes bola refluxovaná počas 8 hod, ochladená na 0°C a ďalej schladená pridávaním 4N HCI po kvapkách. Zmes bola opäť refluxovaná počas 1 hod, zahustená na rotačnej odparke, zalkalizovaná 50% NaOH a extrahovaná etylacetátom (3x100ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a zahustené na olej. Olej bol rozpustený v izopropanole a spracovaný izopropanolom-HCI. Soľ bola odfiltrovaná a vysušená vo vákuu (8.0g, 77%), t. t. 196až197°C.

b) Hydrochlorid 7-nitro-2-etyl-2,3,4,5-tetrahydro-1,4-benzoxazepín

Hydrochlorid 2-etyl-2,3,4,5-tetrahydro-1,4-benzoxazepín (8.0g, 37.3mmol) bol rozpustený v koncentrovanej kyseline sírovej (100ml) a bol pridaný dusičnan

-45draselný (3.77g, 37.3mmol) pri 0°C. Zmes sa nechala miešať počas 5 min a potom bola vliata na ľad, neutralizovaná 50% NaOH a extrahovaná etylacetátom (3x100ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a zahustené na olej. Olej bol rozpustený v izopropanole a spracovaný izopropanolom-HCI. Soľ bola odfiltrovaná a vysušená vo vákuu (4.4g, 46%), t. t. 238 až 240°C.

c) Hydrochlorid 7-amino-2-etyl-2,3,4,5-tetrahydro-1,4-benzoxazepínu

Hydrochlorid 7-nitro-2-etyl-2,3,4,5-tetrahydro-1,4-benzoxazepín (3.4g, 13.1mmol) bol rozpustený v metanole (100ml) a hydrogenovaný pri 50 psi za prítomnosti katalytického množstva 10% Pd-C. Zmes bola po 1 hod prefiltrovaná cez sklovinu a odparená na olej, ktorý bol bezprostredne použitý v ďalšej reakcii.

d) Dihydrochlorid N-(2,3,4,5-tetrahydro-1,4-benzoxazepín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

Zvyšok z predchádzajúcej reakcie bol rozpustený v 1-metyl-2-pyrolidíne (20ml) a do toho bol pridaný hydrogénjodid S-metyl-2-tioféntiokarboximid (3.81 g, 13.4mmol). Zmes bola miešaná počas 24 hod pri 45°C, naliata do zalkalizovanej vody a extrahovaná etylacetátom (3x100ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené cez síran horečnatý, prefiltrované a zahustené na pevnú látku, ktorá bola skryštalizovaná z etylacetátu-metanolu. Táto pevná látka bola rozpustená v etanole, spracované izopropanolom-HCI a rozotrená éterom. Soľ bola zachytená filtráciou (1,4g, 31%), 1.1. >260°C.

Príklad 23

Dihydrochlorid N-(1 -metyl-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1,4-benzodiazapín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

a) 7-nitro-1-metyl-3,4-dihydro-1 H-1,4-benzodiazapín-2,5-dión

1-metyl-3,4-dihydro-1H-benzo[e][1,4]diazapín-2,5-dión (3.4g, 17.9mmol) bol rozpustený v koncentrovanej kyseline sírovej (30ml) a do tohoto roztoku bol pridaný dusičnan draselný (1,95g, 19.3mmol) pri 0°C. Zmes bola miešaná cez noc, vliata na ľad a pevná látka odfiltrovaná (3.62g, 86%), 1.1. 274 až 276°C.

b) Hydrochlorid 7-nitro-1 -metyl-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1,4-benzodiazypínu

Do 7-nitro-1-metyl-3,4-dihydro-1 H-1,4-benzodiazapín-2,5-diónu (3.9g, 16.6mmol) v bezvodom THF (100ml) bol pridaný 1M bóran vTHF (100ml, lOOmmol). Zmes bola refluxovaná počas 5 hod, zahustená na rotačnej odparke, zalkalizovaná 50% NaOH a extrahovaná etylacetátom (3x100ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené cez síran horečnatý, prefiltrované a zahustené na pevnú látku. Tá bola rozpustená v etanole a spracovaná izopropanolom-HCI. Soľ bola odfiltrovaná a vysušená vo vákuu (3.3g, 85%), 1.1. >260°C.

c) Hydrochlorid 7-amino-1 -metyl-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1,4-benzodiazapínu

Hydrochlorid 7-amino-1 -metyl-3,4-dihydro-1 H-benzo[e][1,4]diazapínu (3.2g,

13.1 mmol) bol rozpustený vmetanole (100ml) a hydrogenovaný pri 50 psi za prítomnosti katalytického množstva 10% Pd-C. Po jednej hodine bola zmes prefiltrovaná cez sklovinu a odparená na olej, ktorý bol bezprostredne použitý v ďalšej reakcii.

d) Dihydrochlorid N-( 1 -metyl-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1,4-benzodiazapín-7-yl)-2tiofénkarboximidamidu

Zvyšok z predchádzajúcej reakcie bol rozpustený v 1-metyl-2-pyrolidíne (10ml) a do tejto zmesi bol pridaný hydrogénjodid S-metyl-2-tioféntiokarboximid (3.60g, 12.6mmol). Zmes bola miešaná počas 18 hod pri 45°C, vliata do zásaditej vody a extrahovaná etylacetátom (3x100ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené cez síran horečnatý, prefiltrované a zahustené na pevnú látku, ktorá bola rekryštalizovaná z etylacetátu. Pevná látka bola rozpustená v etanole, spracovaná izopropanolom-HCI a rozotrená éterom. Kvapalina bola dekantovaná a bolo pridané väčšie množstvo éteru. Soľ bola zachytená filtráciou, rozpustená vo vode a lyofilizovaná (1.1 g, 26%), MS (M+H)* 288.

Príklad 24

-47Dihydrochlorid N-(3-benzyl-1 -metyl-2,3,4_t5-tetrahydro-1 H-1,4-benzodiazapín-7-yl)-

2-tiofénkarboximidamidu; 1.1. >300°C.

Táto látka bola pripravená podľa postupu v príklade 23.

Príklad 25

Fumarát N-(1-(N,N,dietylamino)karbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2tiofénkarboximidamidu

a) Kyselina 2-(fenylmetoxy)karbonyl-7-nitro-1,2,3,4-tetragydroizochinolín-1 -octová

Do roztoku kyseliny 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-1-octovej (5.0g, 21.0mmol) (príklad 6a)) vo vode (250ml) bol pri 0°C bol pridaný 2M roztok hydroxidu sodného (15ml). Do tohoto chladného roztoku bol po častiach pridávaný chlormravčan benzylnatý (5.0m), 35mmol) a reakčné zmes bola miešaná pri 0°C počas 0.5 hod. Roztok bol okyslený zriedenou kyselinou chlorovodíkovou a bola zachytená vytvorená zrazenina. Suchá pevná látka bola rozotrená éterom (200ml) v prítomnosti, po filtrácii, žiadanej látky formou svetlohnedej tuhej zlúčeniny. (4.83g, 62%), 1.1. >159.5 až 162°C.

b) N,N-dietyl-2-(fenylmetoxy)karbonyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-l acetamid

Do miešaného roztoku kyseliny 2-(fenylmetoxy)karbonyl-7-nitro-1,2,3,4tetrahydroizochínolín-1-octovej (5.0g, 13.5mmol), HOBT (1.8g, 13.5mmol) a TBTU (4.3g, 13.5mmol) v DMF (50ml)’bol pridaný dietylamín (13.5mmol). Do tejto zmesi bol pomaly pridávaný diizopropyletylamín (7.0ml) a reakčná zmes bola miešaná počas 48 hod. Reakčná zmes bola potom vliata do nasýteného NaCl a vodná vrstva bola extrahovaná etylacetátom (3x100ml). Rozpúšťadlo bolo odparené v prítomnosti surového oleja, ktorý bol ďalej použitý.

c) Dihydrochlorid N,N-dietyl-7-amino-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-1-acetamidu

Do tlakovej nádoby naplnenej N,N-dietyl-2-(fenylmetoxy)karbonyl-7-nitro-

1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-1-acetamidom (10mmol) vmetanole (150ml) a nasýtenom metanoLe-HCI (20ml) bolo pridaná 10% Pd-C (250mg) a reakčná zmes bola hydrogenovaná počas 1 hod. Katalyzátor bol odstránený filtráciou a rozpúšťadlo bolo odparené v prítomnosti Dihydrochlorid N,N-dietyl-7-amino-1,2,3,4tetrahydroizochinolín-1-acetamidu, ktorý bol použitý v ďalšom kroku.

d) Fumarát N-(1 -(N,N-dietylamino)karbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-

2-tiofénkarboximidamidu

Do miešaného roztoku dihydrochlorid N,N-dietyl-7-amino-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-1-acetamidu (14.7mmol) v N-metylpyrolidíne (50ml) bol pridávaný pyridín (1.27g, 16.0mmol). Do reakčnej zmesi bol pridaný hydrogénjodid S-metyl-2tioféntiokarboximid (3.65g, 17.0mmol) a zmes bola zahriata na 40°C počas 18 hod. Reakčná zmes bola potom vliata do 20% hydroxidu sodného (300ml). Vodná vrstva bola potom extrahovaná etylacetátom (3x100ml) a vysušená síranom horečnatým. Odparenie poskytlo surový olej. Soľ kyseliny fumarovej bola pripravená použitím etanolu a izopropanolu ako rozpúšťadiel. Produkt, fumarát N-(1-(N,Ndietylamino)karbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydro-izochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid, bol vysušený pri 80°C počas 24 hod. (2.0g), 1.1. 189 až 190°C.

Príklad 26

N-(1-pyrolidinylkarbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid 1.1. 163 až 164°C.

Táto zlúčenina bola pripravená podľa príkladu 25.

Príklad 27

Bisfumarát N-(1 -morfolinylkarbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu; 1.1.166 až 167°C.

Táto zlúčenina bola pripravená podľa príkladu 25.

Príklad 28

Bisfumarát N-( 1 -(((etyl)amino)karbonyl)metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2tiofénkarboximidamidu; 1.1. 166 až 167°C.

-49Táto zlúčenina bola pripravená podľa príkladu 25.

Príklad 29

N-(1-piperidinylkarbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid; 1.1. 134.5 až 137.5°C.

Táto zlúčenina bola pripravená podľa príkladu 25.

Príklad 30

Fumarát N-(2-(2-hydroxyetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzazepín-8-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

a) hydrochlorid 2-(2-hydroxyetyl)-8-nitro-2,3,4,5-tetrahydro-1 Η-2-benzazepín

Do suspenzie 8-nitro-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzazepín (5.08g, 22.2mmol) v etanolu (200ml) bol pri 0°C pridaný 2.5M roztok hydroxidu sodného (10.0mi). Do tohoto roztoku v tlakovej fľaši bol pridaný etylénoxid (4.2ml) a fľaša bola zazátkovaná a obsah sa nechal miešať cez noc pri laboratórnej teplote. Rozpúšťadlo bolo zahustené vo vákuu a zvyšok bol rozdelený medzi dichlórmetán a zriedený hydroxid sodný. Organická fáza bola vysušená (síran horečnatý) a zahustená v prítomnosti žltej pevnej látky. Táto bola vnesená do etanolu a okyslená kyselinou chlorovodíkovou v etanole. Pridanie éteru spôsobilo vyzrážanie danej látky formou oranžovej pevnej látky (2.69g, 44%), 1.1.193.5 až 194.5°C.

b) Fumarát N-(2-(2-hydroxyetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzazepín-8-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

Do roztoku hydrochlorid 2-(2-hydroxyetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2benzazepínu (1.51 g, 5.54mmol) v etanole (100ml) bolo pridané 10% Pd-C (0.2g) a roztok bol hydrogenovaný pri 50 psi počas 2 hod. Reakčná zmes bola prefiltrovaná a filtrát bol zahustený na olej. Odparovanie s absolútnym etanolom poskytlo hydrochlorid 2-(2-hydroxyetyl)-2_;3,4,5-tetrahydro-1 H-2-benzazepínu-8-amín formou amorfnej tuhej látky (1.7g, 110%), ktorá bola využitá bez ďalšieho čistenia. Roztok tejto soli (1.64g, opravené na 1.50g, 5.37mmol) a hydrogénjodid S-metyl-2tioféntiokarboximidu (1.91 g, 6.71 mmol) v N-metylpyrolidíne (8.0ml) boli zahrievané

-50pri 45°C počas 6 hod. Reakčná zmes bola vliata do vody, zalkalizovaná a extrahovaná dichlórmetánom. Vysušená organická fáza (síran horečnatý) bola zahustená na olej. Stĺpcová chromatografia na silikagéle, pri použití 2% metanolu v chloroforme nasýtenom amoniakom a 10% metanolu v chloroforme ako eluentov poskytlo žltý olej (1.69g, 100%). Tento olej (1.02g, 3.23mmol) bol rozpustený v etanole a potom bola pridaná kyselina fumarová (0.82g, 7.91 mmol) a roztok bol refluxovaný pod refluxom počas 0.5 hod. Ochladením bol zachytený produkt formou monofumarátovej soli (0.68g), 1.1. 172 až 174°C.

Príklad 31 (+)-N-(1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1 -a]izochinolín-9-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) 1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolín

Do roztoku 2,3,5,6-tetrahydro-1H-pyrolo[2,1-a]izochinolínium chloridu (pripravený podľa metódy S.Akaboshi, T.Kutsuma a K.Achiva, J. Pharm. Bull., 1960, 8, 14 z N-(2-fenyletyl)-4-clorbutyramidu (56.4g, 0.25mol) a extrahovaný do izopropanolu-dichlórmetánu) v metanole (700ml) a kyseline octovej (50ml) bol pri 0°C po častiach pridávaný počas 1 hod kyanoborohydrid sodný (19g). Po celonočnom miešaní bolo rozpúšťadlo vo vákuu zahustené. Zvyšok bol rozpustený v zriedenom hydroxide sodnom a dvakrát extrahovaný dichlórmetánom. Vysušená organická fáza (síran horečnatý) bola zahustená v prítomnosti oleja, ktorý bol destilovaný použitím Kugelrohrovho destilačného prístroja, t.v. 100°C pri 0.25mm, v prítomnosti danej zlúčeniny (30.4g, 70%) formou svetložltého oleja.

b) Hydrochlorid 9-nitro-1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolínu

Do koncentrovanej kyseliny sírovej (200ml) bol pri -10°C pridávaný po častiach 1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolín (20.5g, 118mmol) počas 2 hod. Potom keď bolo pridávanie dokončené, tak bol pridávaný po častiach dusičnan draselný (11.6g, 0.115mol) počas 3 hod. Reakčná zmes bola miešaná počas ďalších 3 hod, bola vliata na ľad a zalkalizovaná koncentrovaným hydroxidom amónnym. Produkt bol dvakrát extrahovaný dichlórmetánom. Vysušená

-51 organická fáza síran horečnatý) bola zahustená v prítomnosti červeného oleja, ktorý bol bezprostredne rozpustený v izopropanole (200ml) a okyslený nasýteným izopropanolom-HCI. Výsledná zrazenina bola zachytená v prítomnosti svetlohnedej pevnej látky (18.9g). Rekryštalizácia z 95% etanolu (100ml) v prítomnosti žiadanej látky ako nie celkom bielej pevnej látky (11.5g, 62%), 1.1. 243 až 245°C. Táto bola prevedená na voľnú bázu rozpustením vo vode a zalkalizovaná zriedenou bázou extrahovaná dichlórmetánom za získania 96% výťažku produktu.

c) Hydrochlorid (+)-9-nitro-1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolínu

Do roztoku hydrochlorid 9-nitro-1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1-

a]izochinolínu (12.2g, 55.9mmol) v metanole (400ml) bola pridaná kyselina dibenzoyl-L-vínna (21.8g) a roztok sa nechal miešať cez noc pri laboratórnej teplote. Pevná látka bola zachytená v prítomnosti daného materiálu (16.0g, 49.7%) s pomerom enanciomérov 63:37, tak ako bolo určené pomocou chirálnej kapilárnej zónovej elektroforézy (CE). Obohatená soľ bola niekoľkokrát skryštalizovaná z metanolu v prítomnosti soli (5.4g) s pomerom enanciomérov 97:3. Táto soľ (5.32g, 9.21 mmol) bola rozpustená vo vode, zalkalizovaná zriedeným NaOH a dvakrát extrahovaná dichlórmetánom. Vysušená organická fáza (síran horečnatý) bola zahustená v prítomnosti oleja (2.09g, 104%). Tento olej bol prenesený do etanolu (30ml) a okyslený etanolom-HCI v prítomnosti bielej tuhej látky (1.99g, 85%), t. t. 251 až 253°C, [a]_D +72,2°(c 1.0, MeOH). Táto soľ predstavovala pomer enanciomérov 97:3, tak ako bolo stanovené chirálnou CE.

d) Hydrochlorid (+)-1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1 -a]izochinolín-9-amínu

Suspenzia hydrochlorid (+)-9-nitro-1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1ajizochinolínu (1.83g, 7.18mmol) a 10%Pd-C (0.2g) v etanole (150ml) bola hydrogenovaná pri 50 psi počas 0.75 hod. Roztok bol prefiltrovaný a filtrát bol zahustený na objem 20ml. Potom bol zahrievaný pod refluxom až do rozpustenia všetkých pevných látok a pri ochladzovaní bol vyzrážaný produkt v podobe bielej tuhej látky (1.37g, 85%), 1.1 239 až 241.5°C; [a]_D +62,5°(c 1.13, MeOH). Táto soľ predstavovala jeden enanciomér, tak ako bolo stanovené chirálnou CE.

e) (+)-N-(1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolín-9-yl)-2-tiofénkarboximidamid

Suspenzia hydrochlorid (+)-1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolín-9amínu (1.25g, 5.56mmol) a hydrogénjodid S-metyl-2-tioféntiokarboximÍdu (1.98g, 6.94mmol) v N-metylpyrolidíne (4.0ml) bola zahrievaná pri 45°C počas 4 hod. Roztok bol vliaty vo vody a dvakrát premytý etylacetátom. Vodná vrstva bola zalkalizovaná uhličitanom draselným a surový produkt bol zachytený v prítomnosti vločkovej tuhej látky (1.55g, 94%). Rekryštalizácia z metanolu-etylacetátu poskytla žiadanú zlúčeninu formou žltej pevnej látky (1.07g, 65%), 1.1. 198.5 až 200°C; [a]_D+64,2°(c 1.01, MeOH). Táto soľ predstavovala jeden enanciomér, tak ako bolo stanovené chirálnou HPCI.

Príklad 32 (-)-N-(1,2,3,5,6,10b-Hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolín-9-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) Hydrochlorid (-)-9-nitro-1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolínu

Filtrát z príkladu 31c) bol zahustený vo vákuu a prenesený na voľnú bázu spracovaním zriedeným hydroxidom sodným. Výsledný olej bol prenesený do metanolu (250ml) a pridaná kyselina dibenzoyl-L-vínna (11.2g) a roztok sa nechal miešať cez noc pri laboratórnej teplote. Pevná látka bola zachytená v prítomnosti daného materiálu (1.23g, 38%) s pomerom enanciomérov 26:74, tak ako bolo určené pomocou chirálnej kapilárnej zónovej elektroforézy (CE). Obohatená soľ bola niekoľkokrát rekryštalizovaná z metanolu v prítomnosti soli (4.9g) s pomerom enanciomérov 2:98. Táto soľ (4.74g, 8.22mmol) bola rozpustená vo vode, zalkalizovaná zriedeným hydroxidom sodným a dvakrát extrahovaná dichlórmetánom. Vysušená organická fáza (síran horečnatý) bola zahustená v prítomnosti oleja (1.88g, 105%). tento olej bol prenesený do izopropanolu (30ml) a okyslený izopropanolom-HCI v prítomnosti bielej tuhej látky (2.01 g, 96%), t. t. 250 až 252°C; [a]o -70,0°(c 1.07, metanol). Táto soľ predstavovala pomer enanciomérov 2:98 tak, ako bolo určené chirálnou CE.

b) Hydrochlorid (-)-1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo-[2,1 -a]izochinolín-9-amínu

-53 Táto zlúčenina bola pripravená podľa príkladu 31 d), (1.36g, 82%), 1.1. 240 až 243°C; [a]_D -63,0°(c 1.05, metanol). Táto soľ predstavovala jeden enanciomér, tak ako bolo určené chirálnou CE.

c) (-(-N-(1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolín-9-yl)-2-tiofénkarboximidamid

Táto zlúčenina bola pripravená podľa príkladu 31 e), (0.97g, 59%), 1.1. 198 až 201 °C; [oc]_D -65,5°(c 0.944, metanol). Táto soľ predstavovala jeden enanciomér, tak ako bolo určené chirálnou CE.

Príklad 33

N-(3,4,5,6,11,11a-hexahydro-1H-[1,4]oxazino[4,3-b]izochinolín-8-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) Metylester kyseliny 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydro-3-izochinolínkarboxylovej

Do koncentrovanej kyseliny sírovej (200ml), ochladenej v ľadovom kúpeli, bol po častiach pridaný hydrochlorid kyseliny 1,2,3,4-tetrahydro-3-izochinolínkarboxylovej (20.4g, 95.5mmol). Zmes bola miešaná počas pokračujúceho ochladzovania, až do začiatku uvoľňovania plynného chlorovodíka. Potom bol pridaný po častiach dusičnan draselný (9.8g, 96.9mmol), pričom bola teplota udržiavaná pod 3°C. Zmes bola miešaná cez noc pri postupnom ochladzovaní na laboratórnu teplotu a potom vliata na ľad. Do výsledného roztoku bol pridaný trihydrát octanu sodného rozpustený vo vode (1.02kg). Bolo pridané dostatočné množstvo vody, aby sa rozpustila soľ; výsledný objem bol 5I. Produkt bol prefiltrovaný, premytý vodou a vysušený na vzduchu, výťažok dosiahol 17.35g. NMR naznačila, že je to zmes 7-nitro izoméru (hlavná zložka) a 6-nitro izoméru (vedľajšia zložka). Zmes bola pridaná do metanolu (210ml) a bola okyslená suchým hydrochloridom, refluxovaná počas 4 hod a pri miešaní sa nechala ochladnúť. Produkt bol odfiltrovaný a premytý metanolom a vysušený na suchu v prítomnosti metylesteru kyseliny 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydro-3-izochinolínkarboxylovej (12.9g), čistého podľa NMR. Hydrochloridová soľ bola rozpustená vo vode a roztok bol zalkalizovaný koncentrovaným hydroxidom amónnym a bol miešaný 0.5 hod. Pevná

-54látka bola odfiltrovaná, premytá vodou a vysušená na vzduchu v prítomnosti metylesteru kyseliny 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydro-3-izochinolínkarboxylovej.

b) 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-3-metanol

Do metylesteru kyseliny 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydro-3-izochinolínkarboxylovej (5.0g, 21.2mmol) v suchom tetrahydrofuráne (18.5ml) bola pridaný 10M bóranmetylsulfidový komplex (2.4ml). Zmes bola zahrievaná pod refluxom počas 1.5 hod pri oddestilovaní vytvoreného metylsulfidu. Reakčná zmes bola ochladená a opatrne, bol pridaný metanol, čo nasledovalo pridávaním 6N kyseliny chlorovodíkovej (5.4ml). Zmes bola refluxovaná počas 2.5 hod a bola zahustená do sucha pri znížení tlaku. Pevný zvyšok bol rozpustený vo vode, roztok bol zalkalizovaný 2.5M roztokom NaOH a produkt bol vyextrahovaný do dichlórmetánu. Surový produkt prečistený chromatografiou na silikagéle a 5% metanolom nasýteným amoniakom v dichlórmetáne v prítomnosti 7-nitro-1,2,3,4tetrahydroizochinolín-3-metanolu (1.71 g).

c) 2-chloro-1-(3-hydroxymetyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-2-yl)etanón

Do zmesi 7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-3-metanolu (1.648g, 7.92mmol), dichlómetánu (60mi) a trietylamínu (1.1 ml), ochladenej v ľadovom kúpeli, bol pridaný chlóracetchlorid (0.651 ml). Výsledný roztok bol premytý kyselinou chlorovodíkovou a potom vodou. Organická fáza bola vysušená bezvodým síranom horečnatým a potom bola zahustená pri zníženom tlaku v prítomnosti 2-chloro-1 -(3-hydroxymetyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-2yl)etanonu (2.08g; MS(M+H)⁺.

d) 8-nitro-3,4,5,6,11,11a-hexahydro-1H-[1,4]oxazino[4,3-b]izochinolín-4-ón

Do 2-chloro-1-(3-hydroxymetyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-2-yl)etanonu (2.0g, 7.03ml) v terc, butanole (12ml) bol pridaný terc, butoxid draselný (0.78g). Zmes bola potom refluxovaná počas 3 hod. TIC naznačila, že reakčná zmes nebola dokončená. Do zmesi bol preto pridaný ďalší terc, butoxid draselný (0.245g) a tá bola zahrievaná počas 0.5 hod. Bol pridaný ďalší butoxid draselný (0.3g) pričom nasledovalo refluxovanie počas 15 min. V tomto štádiu nebol pomocou TIC

-55detekovaný žiaden východiskový materiál. Zmes bola ochladená a bol pridaný dichlórmetán (15ml). Boli odfiltrované nerozpustené zvyšky. Filtrát bol zahustený pri zníženom tlaku v prítomnosti 8-nitro-3,4,5,6,11,11a-hexahydro-1H-[1,4]oxazino[4,3-

b]izochinolín-4-ónu (0.7g); MS 249(M+H)⁺.

e) Hydrochlorid 8-nitro-3,4,5,6,11,11 a-hexahydro-1 H-[1,4]oxazino[4,3-b]izo- chinolínu

Do roztoku 8-n itro-3,4,5,6,11,11 a-hexahydro-1 H-[ 1,4]oxazino[4,3b]izochinolín-4-ónu (0.7g, 2.82ml) v bezvodom tetrahydrofuráne (10ml) bol pridaný 1M bóran v tetrahydrofuráne (8.0ml). Reakčná zmes bola ochladená na laboratórnu teplotu a pevná-časť bola odfiltrovaná a premytá tetrahydrofuránonm v prítomnosti hydrochloridu 8-nitro-3,4,5,6,11,11 a-hexahydro-1 H-[1,4]oxazino-[4,3-b]izochino-línu (0.463g), MS 235 (M+H)⁺.

f) Dihydrochlorid 3,4,5,6,11,11a-hexahydro-1H-[1,4]oxazino[4,3-b]izochinolín-8amínu

Do hydrochlorid 8-nitro-3,4,5,6,11,11 a-hexahydro-1 H-[1,4]oxazino[4,3b]izochinolínu (0.4g) v metanole (50ml) bola pridaná 6N kyselina chlorovodíková (0.3ml) a 5% Pd-C (100mg). Zmes bola spracovaná vodíkom pri 50 psi v Parrovom hydrogenátore. Absorbcia vodíka bola dokončená počas 2 hod. Katalyzátor bol odfiltrovaný a rozpúšťadlo bolo odstránené pri zníženom tlaku v prítomnosti danej zlúčeniny v podobe pevnej látky. (0.4824g).

g) N-(3,4,5,6,11,11 a-hexahydro-1 H-[1,4]oxazino[4,3-b]izochinolín-8-yl)-2-tiofénkarboximidamid

Do miešanej zmesi dihydrochlorid 3,4,5,6,11,11 a-hexahydro-1 H[1,4]oxazino[4,3-b]izochinolín-8-amínu (0.461 g, 1.66mmol) a metylsulfoxidu (5ml) bol pridaný pyridín (0.28ml) nasledovaný hydrogénjodid S-metyl-2tioféntiokarboximidom (0.612g). Zmes bola zahriata na 50°C pri pretrvávajúcom miešaní počas 4 hod. Reakčná zmes bola potom vliata do vody (50ml) a po hodinovom miešaní bola zmes prečistená filtráciou. Filtrát bol zalkalizovaný

-56koncentrovaným roztokom hydroxidu amónneho pri vyzrážaní produktu. Ten bol izolovaný, premytý vodou a vysušený (0.4917g), 1.1. 190 až 194°C; MS 314 (M+H)⁺.

Príklad 34

N-(2,3,4,6,11,11a-hexahydro-1 H-pyrazino[1,2-b]Ízochinolín-8-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) Metylester kyseliny 2-chlóracetyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínkarboxylovej

Do zmesi metylesteru kyseliny 7-nitro--1,2,3,4-tetrahydro-3-izochinolínkarboxylovej (príklad 33a), 4.466g, 18.9mmol), dichlórmetánu (130ml) a trietylamínu (3.0ml) ochladenej v ľadovom kúpeli bol po kvapkách pridávaný chlóacetylchlorid (1.74ml, 21.8mmol). Výsledná zmes bola potom premytá zriedenou kyselinou chlorovodíkovou a potom vodou. Organická fáza bola vysušená bezvodým síranom horečnatým a zahustená pri zníženom tlaku v prítomnosti metylesteru kyseliny 2chlóracetyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydro-3-izochinolínkarboxylovej (6.22g).

b) 8-nitro-3,6,11,11a-tetrahydro-2H-pyrazino[1,2-b]izochinolín-1,4-diónu

Do zmesi metylesteru kyseliny 2-chlóracetyl-7-nitro--1,2,3,4-tetrahydro-3izochinolínkarboxylovej (6.22g) v metanole (375ml) v tlakovej nádobe z nehrdzavejúcej ocele, ochladenej I ľadovom kúpeli, bol pridaný kvapalný amoniak (75ml) Nádoba bola uzavretá a kúpeľ bol odstránený. Obsah sa nechal cez noc zahriať na laboratórnu teplotu pri neustálom miešaní. Produkt, ktorý bol vytvorený, bol prefiltrovaný, premytý metanolom a vysušený v prítomnosti 8-nitro-3,6,11,11 atetrahydro-2H-pyrazino[1,2-b]izochinolín-1,4-diónu (4.5g), MS 262 (M+H)⁺.

c) 8-nitro-2,3, 4,6,11,11 a-tetrahydro-1 H-pyrazino[1,2-b]izochinolín

Do 8-nitro-3, 6,11,11 a-tetrahydro-2H-pyrazino[1,2-b]izochinolín-1,4-diónu (4.5g, 17.2mmol) vbezvodom tetrahydrofuráne (100ml) bol pridaný 1.0M bóran v tetrahydrofuráne (255ml). Reakčná zmes bola pod refluxom zahrievaná počas 6 hod. Po ochladení na laboratórnu teplotu bol nadbytočný bóran ochladený opatrným pridávaním metanolu (71 ml) a potom 2.5N kyseliny chlorovodíkovej

-57(71 ml). Zmes bola potom refluxovaná počas 5 hod. Zmes bola ochladená na laboratórnu teplotu, zahustená za sucha pri zníženom tlaku. Zvyšok bol rozpustený vo vode, roztok bol zalkalizovaný 2.5N hydroxidu sodného a produkt bol extrahovaný do dichlórmetánu. Tmavočervená pevná látka (4.5g) bola vyčistená chromatografiou na silikagéle a = metanolu nasýtenom amoniakom v dichlórmetáne v prítomnosti 8-nitro-2,3,4,6,11,11a-tetrahydro-2H-pyrazino[1,2-b]izochinolínu (2.984g), MS 234 (M+H)⁺.

d) Trihydrochlorid 2,3,4,6,11,11 a-hexahydro-1 H-pyrazino[1,2-b]izochinolín-8-amínu

Do 8-nitro-2,3,4,6,11,11 a-hexahydro-1 H-pyrazino[1,2-b]izochinolínu (2.98g) vmetanole (150ml) a vode (10ml) bola pridaná koncentrovaná kyselina chlorovodíková (3.26ml) a 5%Pd-C (300mg). Zmes sa nechala reagovať pri 50psi s vodíkom v Parrovom hydrogeňátore. Absorbcia vodíka bola ukončená po 1 hod. Katalyzátor bol odfiltrovaný a rozpúšťadlo bolo odstránené pri zníženom tlaku v prítomnosti produktu formou pevnej látky (3.69g).

e) N-(2,3,4,6,11,11 a-hexahydro-1 H-pyrazino[1,2-b]izochinolín-8-yl)-2-tiofénkarboximidamid

Do miešanej zmesi trihydrochlorid 2,3,4,6,11,11 a-hexahydro-1 Hpyrazino[1,2-b]izochinolín-8-amínu (1.8g, 5.76mmol) a metylsulfoxidu (20ml) bol pridaný pyridín (0.94ml) nasledovaný hydrogénjodid S-metyl-2-tioféntiokarboximidom (2.13g). Zmes bola zahriata na 50°C pri pretrvávajúcom miešaní počas 7 hod. Reakčná zmes bola potom vliata do vody (150ml) a po hodinovom miešaní bola zmes vyčistená filtráciou. Filtrát bol zalkalizovaný 2.5N roztokom hydroxidu sodného, ale nevytvorila sa žiadna zrazeniny. Pokús extrahovať do dichlórmetánu spôsobil, že produkt vykryštalizoval zo zmesi. Produkt bol izolovaný, premytý dichlórmetánom a vysušený; výťažok 1.28g. Látka bola vyčistená chromatografiou použitím silikagélu a 7% metanolu nasýteným amoniakom v dichlórmetáne v prítomnosti N-(2,3,4,6,11,11a-hexahydro-1H-pyrazino[1,2-b]izochinolín-8-yl)-2tiofénkarboximidamidu (0.83g), 1.1. 228°C, MS (M+H)⁺.

Príklad 35

-58D i hydrochlorid N-(1 -metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidu

a) 1 -metyl-7-nitro-3,4-dihydroizochinolín

1-metyl-3,4-dihydroizochinolín (425g, 29.3mmol) bol rozpustený v kyseline sírovej ochladenej na ľad (15ml) a do tejto zmesi bol pri ochladení po častiach pridávaný dusičnan draselný (3.25g, 32.2mmol). Zmes bola miešaná cez noc, preliata cez ľad a zalkalizovaná koncentrovaným hydroxidom amónnym, vyzrážaná tuhá látka bola zachytená, premytá a vysušená 4.47g (80%), MS (M+H)⁺191, ^JHNMR (D₂O), 8,30 (d, 1H), 8,22 (dd, 1H), 7,39 (d, 1H), 3,80 -

3,62 (m, 2H), 2,92 - 2,70 (m, 2H), 2,48 (široký s, 3H).

b) Hydrochlorid 1-metyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín

Ďo roztoku 1-metyl-7-nitro-3,4-dihydroizochinolínu (3.97g, 20.9mmol) v metanole bol po častiach pridávaný borohydrid sodný (0.87g, 23.0mmol). Zmes bola miešaná počas 30min, okyslená 6N HCI, rozpúšťadlo bolo odparené a pevná látka bola miešaná v izopropanole, zachytená a premytá éterom: 5.33g (>100%); MS (M+H)⁺193.

c) Hydrochlorid 1-metal-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu

Suspenzia hydrochlorid T-metyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (2.0g, 8.75mmol) v etanole (100ml) a katalytické množstvo 10%Pd-C bola hydrogenovaná počas absorbcie vodíka. Katalyzátor bol odfiltrovaný, rozpúšťadlo bolo zahustené na malý objem, bol pridaný éter a vyzrážaná tuhá látka bola zachytená a vysušená: 1.39g (78%), MS (M+H)⁺163.

d) Dihydrochlorid N-(1 -metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

Roztok hydrochlorid 1-metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu (0.50g, 2.51mmol) a hydrogénjodid S-metyl-2-tiofénkarboximidu (0.89g, 3.14mmol) v Nmetyl-2-pyrolidínone (3ml) bol udržiavaný počas 3 hod pri 60°C. Reakčná zmes

-59bola vliata do vody, premytá dvoma dielmi etylacetátu a zalkalizovaná koncentrovaným hydroxidom amónnym. Produkt bola extrahovaný dvomi dielmi etylacetátu, vysušený (MgSO<) a rozpúšťadlo bolo odstránené v prítomnosti žltého sirupu. Tento materiál bol rozpustený v izopropanole, okyslený 95% zmesou etanol-HCI, zriedený etylacetátom a v mrazničke sa nechal kryštalizovať. Produkt bol zachytený filtráciou a vysušený vo vákuu pri 50°C, čo poskytlo žiadaný produkt ako bielu tuhú látku (0.36g, 42%),; MS (M+H)*; ¹H NMR (D₂O) 8,04 (s, 1H), 7,65 - 7,30 (m, 5H), 4,73 (široký s, H₂O + 1H), 3,75 3,61 (m, 1H), 3,61 - 3,45 (m, 1H), 3,35 - 3,13 (m, 2H), 1,74 (d, 3H).

Príklad 36

N-(1,2-Dimetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) Hydrochlorid 1,2-dimetyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu

Zmes 1-metyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (2.00g, 8.75mmol), formaldehydu (37% roztok vo vode, 5ml) a kyselina mravčia (9ml) bola zahrievaná pod refluxom počas 2 hod. Ochladený roztok bol preliaty cez ľad, zalkalizovaný koncentrovaným hydroxidom amónnym a extrahovaný dvoma dielmi chloroformu.

(

Suchý roztok (MgSO₄) bol zahustený, zvyšok bol rozpustený v izopropanole, okyslený etanolickou HCI a nechal sa kryštalizovať. Produkt bol zachytený a vysušený vo vákuu v prítomnosti bielej tuhej látky (1.4g, 67%); MS (M+H)⁺ 207.

b) Hydrochlorid 1,2-dimetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu

Táto zlúčenina bola pripravená tak, ako je popísané v príklade 35c). Z hydrochlorid 1,2-dimetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (1.30g, 5.36mmol) bola izolovaná žiadaná látka (1.01 g, 89%) ako biela látka; MS (M+H)* 177.

c) N-(1,2-dimetyl-1,2,3₁4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

Táto zlúčenina bola pripravená tak, ako je popísané v príklade 35d). Z hydrochlorid 1,2-dimetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu (0.5g, 2.35mmol)

-60bola po rekryštalizácii z etylacetátu izolovaná daná zlúčenina (0.366g, 55%), t. t. 168až170°C.

Príklad 37

Bismaleát N-[-(3-metyl-1,2,4-oxadiazol-5-ylmetyl)-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7yl]-2-tiofénkarboximidamidu

60% disperzia NaOH (0.122g, 3.04mmol) bola premytá dvoma dielmi hexánu, suspendovaná v THF (70ml) a do zmesi bol pridaný acetamidoxim (0.25g, 3.34mmol) a zmes bola zahrievaná pod refluxom počas 1 hod. Do ochladenej zmesi boli pridané molekulové sitá 3A (2g) spolu s N-(1-metoxykarbonylmetyl-1,2,3,4tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamidom (príklad 7, 0.5g, 1.52mmol) a reakčná zmes bola pod refluxom zahrievaná počas 3 hod. Reakčná zmes bola ochladená, sitá boli odstránené a bola pridaná voda a produkt bol extrahovaný tromi dielmi chloroformu. Po vysušení (MgSO₄ ) bolo odstránené rozpúšťadlo a zvyšok bol znova rozpustený v izopropanole a okyslený kyselinou maleínovou. Zmes bola zľahka zahriata v prítomnosti roztoku, ktorý sa nechal kryštalizovať. Vyzrážaná tuhá látka bola zachytená filtráciou, premytá éterom a vysušená vo vákuu v prítomnosti žiadanej zlúčeniny (0.363g, 41 %) formou bielej tuhej látky, t. t. 151až153°C.

Príklad 38

N-(1,2,3,5,10,10ä-hexahydropyrolo[1,2-b]izochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) 1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[1,2-b]izochinolín

Suspenzia 2,3 dihydropyrolo[1,2-b]izochinolín-5(1H)-ónu (10.8g, 58.3mmol) [G.M. Coppola J. Heterocycl. Chem. 1981, 18, 767] v oxylchloride fosforečnom (100ml) bol zahrievaný pod refluxom počas 1.5 hod. Pri ochladzovaní bolo vo vákuu odstránené rozpúšťadlo v prítomnosti oleja. Ten bol ihneď prenesený do studeného metanolu (275ml) a po častiach bol do tohoto roztoku pridávaný borohydrid sodný (4.0g) pri udržiavaní reakčnej teploty na 0°C. Rozpúšťadlo bolo zahustené a zvyšok bol rozpustený vo vode a dvakrát premytý etylacetátom. Vodný

-61 roztok bol zalkalizovaný roztokom uhličitanu draselného a bol extrahovaný etylacetátom. Organická fáza bola vysušená (MgSO₄) a zahustená na olej. Stĺpcová chromatografia na silikagéle odhalila nezreagovaný východiskový materiál (3.57g, 36%) a žiadanú látku (4.2g, 63% vzhľadom na východiskovú látku) ako ľahký olej; MS 174 (M+H)⁺; NMR (CDC1₃) 7,0 - 7,2 (široký m, 4H), 4,13 (d, 1H, J=15), 3,40 (d, 1H, J=15), 3,27 (dt, 1H), 2,9-3,1 (m, 1H), 2,71 (t, 1H),

1,4-2,4 (m, 6H).

b) Hydrochlorid 7-nitro-1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[1,2-b]izochinolínu

Do roztoku hydrochlorid 1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[1,2-b]izochinolínu (4.12g, 23.8mmol) v koncentrovanej kyseline sírovej (100ml) bol pri -10°C po častiach pridávaný počas 1 hod dusičnan draselný (2.40g, 23.7mmol). Po ukončení pridávania sa zmes nechala 1 hod miešať skôr ako bola vliata na ľad. Vodný roztok bol zalkalizovaný koncentrovaným hydroxidom amónnym a produkt bol dvakrát extrahovaný do dichlórmetánu. Suchá organická fáza (MgSO₄) bola zahustená v prítomnosti červeného oleja, ktorý státím stuhol. Táto pevná látka bola prenesená do izopropanolu (100ml) a bol pridaný chlorovodík v etanole až bola zmes kyslá. Pevná látka bola zachytená , premytá izopropanolom a vysušená v prítomnosti surového produktu (3.39g, 56%). Táto pevná látka bola rekryštalizovaná z etanolu v prítomnosti žiadanej látky (2.16g, 36%) formou nie celkom bielej látky, t. t. 231 až 233°C.

c) Hydrochlorid 1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[1,2-b]izochinolín-7-amín

Do suspenzie hydrochlorid 7-nitro-1,2,3,5,10,10a-hexahydropyroló[1,2bjizochinolín (2.14g, 8.40mmol) v metanole (150ml) bolo pridané 10% Pd-C (0.2g) a reakčná zmes bola hydrogenovaná pri 50 psi počas 2 hod. Roztok bol prefiltrovaný a katalyzátor bol premytý vodou za účelom rozpustenia vyzrážaného produktu. Filtrát bol zahustený a na odparenie nadbytočnej vody bol použitý absolútny etanol. Výsledná pevná látka bola rozpustená v horúcom etanole (50ml) a do zmesi bol pridaný éter, aby sa vyzrážal produkt. Pevná látka bola zachytená

-62ori získaní žiadanej pevnej zlúčeniny (í.90g, 100%) formou amorfnej, nie celkom bielej pevnej látky, MS 189 (M+H)⁺; NMR (DMSO-NaOD) 6,82 (d, 1H), 6,44 (d, 1H), 6,35 (s, 1H), 4,03 (d, 1H), 3,19 (široký s, 1H), 2,84 (d, IH), 2,5-3,0 (m, 3H), 2,11 (široký s 1H),

2,7-2,9 (m, 2H), 1,52 (m, 1H).

d) N-( 1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[1,2-b]izochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

Roztok hydrochlorid 1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[1,2-b]izochinolín-7amínu (0.81g, 3.6mmol) a hydrogénjodid S-metyl-2-tioféntiokarboximidu (1.28g, 4.49mmol) v N-metylpyrolidíne (4.0ml) bol zahrievaný pri 45°C počas 5 hod, Reakčná zmes bola vliata do vody a dvakrát extrahovaná etylacetátom. Reakčná zmes bola zalkalizovaná zriedenou zásadou a trikrát extrahovaná dichlórmetánom. Spojené extrakty boli vysušené ( MgSO₄). Stĺpcová chromatografia na silikagéle použitím 2% metanolu v chloroforme ako eluentu poskytla produkt (0.77g, 72%). Rekryštalizácia z etylacetátu-hexánu poskytla pevnú látku (0.40%) forme svetložltej pevnej látky, 1.1. 171 až 173°C.

Príklad 39

N-(1-propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) Hydrochlorid 7-nitro-1 -propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu

Do roztoku 1-propyl-3,4-dihydroizochinolínu (7.4g, 42mmol) [E. Späth, F. Berger a W. Kuntara, Chem. Ber., 1930, 63B, 134] v koncentrovanej kyseline sírovej (100ml) bol pri 0°C v jednej dávke pridaný dusičnan draselný (4.5g, 45mmol). Roztok sa nechal pomaly zahrievať na laboratórnu teplotu. Reakčná zmes bola vliata na ľad a zalkalizovaná koncentrovaným hydroxidom amónnym. Výslednú pevnú látku, ktorá sa vytvorila v studenom roztoku, nebolo možné uspokojivo odfiltrovať. Preto bola reakčná zmes dvakrát extrahovaná dichlórmetánom a suché organické fázy ( MgSO₄) boli vo vákuu zahustené v prítomnosti intermediátu 7-nitro-1 -propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín vo forme $

-63 oleja (8.78g, 94%). Táto pevná látka bola prenesená do metanolu (200ml), ochladená na 0°C a po častiach bol pridávaný borohydrid sodný (3.0g) počas 0.5hod. Po ďalšom polhodinovom miešaní bola reakčná zmes okyslená na pH=5 použitím 6M kyseliny chlorovodíkovej. Rozpúšťadlo bolo zahustené na rotačnej odparke a zvyšok bol rozdelený medzi dichlórmetán a zriedený roztok hydroxidu sodného. Suchá organická fáza (MgSO₄) bola zahustená v prítomnosti surového produktu ako voľnej zásady. Tá.bola prevedená do etanolu (200ml) a bola pridaná kyselina chlorovodíková v etanole za získania kyslej reakcie. Výsledná tuhá látka, ktorá sa vytvorila, bola zachytená v prítomnosti žiadanej zlúčeniny (5.60g, 52%) vo forme svetložltej pevnej látky, 1.1. 229 až 230.5°C.

b) Hydrochlorid’l-propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu

Do suspenzie hydrochlorid 7-nitro-1-propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (2.51 g, 9.78mmol) v etanole (150ml) bolo pridané 10%Pd-C (0.3g) a reakčná zmes bola hydrogenovaná pri 50 psi počas 3 hod. Roztok bol prefiltrovaný, filtrát bol zahustený a bol pridaný absolútny etanol, aby mohla byť odparená nadbytočná voda. Výsledná tuhá látka bola rozotrená izopropanolom (30ml), v prítomnosti výslednej zlúčeniny (1.42g, 64%) vo forme nie celkom bielej tuhej látky, t. t. 192 až 194°C.

c) N-( 1 -propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl]-2-tiofénkarboximidamid

Roztok hydrochlorid 1-propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu (M+H)⁺1.35g, 5.95mmol] a hydrogénjodid S-metyl-2-tioféntiokarboximidu (2.04g, 7.15mmol) v N-metylpyrolidínone (5.0ml) bol zahrievaný pri 45°C počas 6 hod. Reakčná zmes bola vliata do vody a dvakrát extrahovaná etylacetátom. Reakčná zmes bola potom zalkalizovaná zriedeným uhličitanom draselným a dvakrát extrahovaná etylacetátom. Spojené extrakty boli premyté vodou a vysušené (MgS0₄). Odparenie rozpúšťadla poskytlo olej, ktorý státím stuhol. Rekryštalizácia z etylacetátu poskytlo výslednú zlúčeninu (0.50g, 29%) vo forme svetložltej pevnej látky. 1.1. 127 až 128.5°C

Príklad 40

-64N-(2-metyl-1 -propyl-1 ,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) Hydrochlorid 2-metyl-7-nitro-1 -propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu

Roztok hydrochlorid 7-nitro-1-propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (2.50g, 9.74mmol) v kyseline mravčej (6.0ml) a vodnom formaldehyde (9.0ml) bol zahrievaný pod refluxom počas 1 hod. Ochladený roztok bol vliaty na ľad, zalkalizovaný koncentrovaným hydroxidom amónnym a dvakrát extrahovaný dichlórmetánom. Suché extrakty (MgSO₄) boli zahustené v prítomnosti oleja, ktorý bol prenesený do etanolu a bola pridaná kyselina chlorovodíková v etanole až do dosiahnutia kyslej reakcie. Pretože v pokojnom stave nevznikla žiadna zrazenina, rozpúšťadlo bolo odparené vo vákuu a zvyšok bol prenesený do izopropanolu (35ml) a nechal sa stáť niekoľko hodín. Zrazenina bola zachytená v prítomnosti žiadanej zlúčeniny (1.30g, 49%) vo forme nie celkom bielej tuhej látky, t. t. 198.5 až 200.5°C.

b) Hydrochlorid 2-metyl-1 -propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu

Do suspenzie hydrochlorid 2-metyl-7-nitro-1 -propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (1.30g, 4.80mmol) v etanole (100ml) bolo pridané 10%Pd-C (0.2g) a reakčná zmes bola hydrogenovaná pri 50 psi počas 3hod. Roztok bol prefiltrovaný a filtrát bol zahustený vo vákuu. Zvyšok bol rozpustený v izopropanole (30ml) a nechal sa stáť cez noc v prítomnosti danej zlúčeniny (1.40g, 90%) v podobe svetlohnedej pevnej látky, 1.1. 217 až 219°C.

c) N-(2-metyl-1 -propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

Roztok hydrochlorid 2-metyl-1-propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-amínu (1.01g, 4.19mmol) a hydrogénjodid S-metyl-2-tioféntiokarboximidu (1.43g,

5.03mmol) v N-metylpyrolidinone (4.0ml) bol zahrievaný pri laboratórnej teplote cez noc. Reakčná zmes bola vliata do vody a dvakrát extrahovaná etylacetátom. Reakčná zmes bola potom zalkalizovaná zriedeným uhličitanom draselným a dvakrát extrahovaná etylacetátom. Spojené extrakty boli premyté vodou a vysušené (MgSO₄). Stĺpcová chromatografia na silikagéle použitím 2% metanolu v chloroforme nasýtenom plynným amoniakom (eluent) poskytlo (1.39g, 105 %)

-65produktu. Rozotrenie produktu niekoľkokrát cyklohexánom poskytlo čistú žiadanú zlúčeninu (1.02g, 77 %) ako svetložltú pevnú látku, 1.1. 97 až 98.5 °C.

Príklad 41

N-(1 -etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) N-)2-fenyletyl)-propionamid

Daná zlúčenina bola pripravená reakciou fenyletylamínu (12.1 g, 11 mmol), propionylchloridu (9.25g, lOOmmol) a trietylamínu (20ml) v metylénchloride (200ml). Produkt (10.1 g) bol použitý bez ďalšieho čistenia; MS [M+Hf 178.

b) 1-etyl-3,4-dihydroizochinolín .

Zmes N-(2-fenyletyl)-propionamidu (10g, 56.4mmol) a oxidu fosforečného (80g, 563mmol) vtetralíne (500ml) bola zahrievaná pod refluxom počas 15min, ochladená a bola pridaný ďalší oxid fosforečný (80g) a táto zmes bola znovu zahrievaná pod refluxom počas 15min. Po celonočnom státí bol tetralín dekantovaný, zvyšok bol rozložený ľadovou vodou a suspenzia bola filtrovaná cez celit a premytá dvomi dielmi éteru. Vodný roztok bol zalkalizovaný koncentrovaným hydroxidom amónnym, extrahovaný tromi dielmi éteru, extrakty boli vysušené (MgSO₄) a rozpúšťadlo bolo odparené v prítomnosti červenej pevnej látky (5.0g, 55.7%); MS [M+Hf 160.

c) Hydrochlorid j-etyl-7-nitro-3,4-dihydroizochinolínu

Táto zlúčenina bola pripravená tak, ako je popísané v príklade 41a). Z 1-etyl-

3,4-dihydroizochinolínu (5.0g, 31.4mmol) bola pripravená daná zlúčenina (3.31 g, 51.6%); MS [M+Hf 205.

d) Hydrochlorid 1-etyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu

Táto zlúčenina bola pripravená tak, ako je popísané v príklade 41b). Z hydrochlorid 1-etyl-7-nitro-3,4-dihydroizochinolínu (3.31 g, 16.2mmol) bola pripravená daná zlúčenina (3.25g, 82.7%), 1.1. 260°C; MS [M+Hf 207.

e) Hydrochlorid 1-etyl-7-amino-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu

Táto zlúčenina bola pripravená tak, ako je popísané v príklade 41c); Z hydrochlorid 1-etyl-7-nitro-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (3.25g, 13.4mmol) bola pripravená daná zlúčenina (2.41 g, 84.5%), 1.1. 150°C; MS [M+Hf 177.

f) N-(1 -etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

Táto zlúčenina bola pripravená tak, ako je popísané v príklade 41 d). Z 1-etyl-

7- amino-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu (500mg, 2.94mmol) bola pripravená daná zlúčenina po kryštalizácii zcyklohexánu (189mg, 28%), t. t. 142 až 143.5°C; MS [M+H]⁺ 286.

Príklad 42

Kyselina N-(1,3,4,5,6,11,11a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-8-yl)karbamidotiová, etylester bismaleát

a) 1-(1,-3,4,5,6,11,11a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-8-yl)tiomočovina

Do roztoku hydrochlorid 1,-3,4,5,6,11,11a-hexahydro-2H-benzo[b]-chinolizín -

8- amínu (príklad 16d)), 1.32g, 5.53mmol) vo vode bol pridaný zriedený hydroxid sodný a výsledný roztok bol dvakrát extrahovaný dichlórmetánom Suchá organická fáza (MgSO₄) bola zahustená v prítomnosti voľnej zásady (1.18g, 99%) a bola pridaná kyselina trifluóroctová (0.63g, 5.5mmol). Roztok bol zahrievaný pod refluxom a bol pridaný benzoylizotiokyanát (1.4ml), Reakčná zmes bola zahrievaná pod refluxom počas 2hod a po ochladení na laboratórnu teplotu bol zachytený intermediát (1.97g, 74%) vo forme tuhej látky. Táto tuhá látka bola prenesená do metanolu (25ml), bol pridaný 2.5M hydroxid sodný (10ml) a roztok bol zahrievaný pod refluxom počas 1 hod. Metanol bol odstránený vo vákuu a vodný roztok bol trikrát extrahovaný dichlórmetánom. Suchá organická fáza (MgSO₄) bola zahustená v prítomnosti danej látky vo forme bielej tuhej látky (1.07g, 74%), t. t. 186.5 až 187.5°C.

b) Kyselina 1-(1,3,4,5,6,11,11a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-8-yl) karbamidotiová, etylester bismaleát

-67 Do suspenzie 1 -(1,3,4,5,6,11,11 a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-8-yl) tiomočoviny (1.06g, 4.05mmol) v izopropanole (10ml) bola pridaná kyselina metánsulfónová (0.41 g, 4.3mmol) v izopropanole. Reakčná zmes bola zahrievaná pod refluxom počas 0.5 hod, aby bolo zabezpečené úplné vytvorenie soli. Do tohoto roztoku bol pridaný metánsulfonát (1.4ml a zahrievaný ďalších 20 hod v prítomnosti čistého roztoku. Rozpúšťadlo bolo zahustené a zvyšok bol rozpustený vo vode, zalkalizovaný zriedenou zásadou a extrahovaný do dichlórmetánu. Stĺpcová chromatografia zvyšku na silikagéle, použitím 2% metanolu, v chloroforme nasýtenom amoniakom, ako eluentu, poskytlo bielu tuhú látku (0.96g, 82%). Táto pevná látka bola rozpustená v izopropanole (20ml) a bola pridaná kyselina maleínová (0.85g, 7.32mmol). Roztok bol zahrievaný a po vychladnutí cez noc bola pridaná látka izolovaná ako svetlohnedá pevná látka (1.19g, 56%), t. t. 145 až 147°C.

Príklad 43

Kyselina N-(1,2,3,5,10,10a-hexahydro-1 H-pyrolo[1,2-b]izochinolizín-7-yl) karbamidotiová, etylester

a) 1 -(1,2,3,5,10,10a-hexahydro-1 H-pyrolo[1,2-b]izochinolizín-7-amín)-2tiomočovina

Hydrochlorid 1 -(1,2,3,5,10,10a-hexahydro-1 H-pyrolo[1,2-b]izochinolizín-7amínu (príklad 38c), 1.04g, 4.63mmol) bol rozpustený vo vode, zalkalizovaný zriedeným hydroxidom sodným a dvakrát extrahovaný dichlórmetánom. Roztok bol prefiltrovaný a rozpúšťadlo bolo zahustené v prítomnosti voľnej zásady vo forme pevnej látky (0.86g, 99%). Tá bola prenesená do acetónu (25ml) a bola pridaná kyselina trifluóroctová (0.52g,' 4.6mmol) v acetóne (10mi). Reakčná zmes bola zahrievaná pod refluxom a v jednej dávke bol pridaný benzoylizotiokyanát (1.2ml) a zahrievanie pokračovalo počas 1 hod. Pevná látka bola zachytená vo forme intermediátu ako bielej tuhej látky (1.24g, 57%). Vo filtráte bola preukázaná prítomnosť hlavne žiadaného intermediátu (biela tuhá látka) a zmes bola prenesená do metanolu (30ml) a 2.5M hydroxidu sodného (10ml). Roztok bol zahrievaný pri 95°C počas 1 hod. Odparením metanolu pri zníženom tlaku sa

-68vyzrážal produkt. Táto pevná látka bola zachytená a premytá vodou v prítomnosti, po vysušení na vzduchu, danej zlúčeniny vo forme svetložltej pevnej látky (0.89g, 77%), 1.1. 192 až 193°C.

b) Kyselina 1-(1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[1,2-b]izochinolizín-7-yl) karbamidotiová, etylester

Do suspenzie 1 -(1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[1,2-b]izochinolizín-7-yl)-2tiomo-čoviny (0.86g, 3.5mmol) v izopropanole (8ml) bola pridaná kyselina metánsulfónová (0.34g, 3.6mmol) v izopropanole (8ml). Výsledný roztok bol zahrievaný pod refluxom počas 0.5 hod, aby bolo zabezpečené úplné vytvorenie soli. Do tohoto roztoku bol pridaný etylmetánsulfonát (1.3ml) a zahrievanie pokračovalo cez noc v prítomnosti číreho bezfarebného roztoku. Rozpúšťadlo bolo zahustené a zvyšok bol rozpustená vo vode, zalkalizovaný zriedenou zásadou a extrahovaný etylacetátom. Organická fáza bola premytá vodou, vysušená síranom horečnatým a zahustená vo vákuu. Pevná látka bola prenesená do rovnakých množstiev éteru a cyklohexánu. Roztok bol spracovaný odfarbujúcim uhlíkom, odfiltrovaný a odparený vo vákuu. Rozotrenie tejto pevnej látky s minimálnym množstvom cyklohexámu poskytlo žiadanú zlúčeninu vo forme nie celkom bielej látky (0.60g, 63%), 1.1. 98 až 101°C.

Príklad 44

Kyselina N-(1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolín-9-yl) karbamidotiová, etylester

a) 9-amino-1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[2,1 -ajizochinolín

Do hydrochlorid 9-nitro-1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[2,1 -a]izochinolínu (príklad 31b), 2.0g) v metanole (100ml) bola pridaná koncentrovaná kyselina chlorovodíková (0.67ml) a 5% paládium na uhlíku (200mg). Zmes bola hydrogenovaná pri 50 psi v Parrovom hydrogenátore. Absorbcia vodíka bola úplná po 1 hod. Katalyzátor bol odfiltrovaný a rozpúšťadlo bolo odstránené pri zníženom tlaku. Zvyšok bol rozpustený vo vode, roztok bol zalkalizovaný 2.5M hydroxidom sodným a produkt bol extrahovaný 'do dichlórmetánu. Extrakty boli vysušené

-69síranom horečnatým a rozpúšťadlo bolo odstránené pri zníženom tlaku v prítomnosti danej zlúčeniny ako hustého oleja (1.55g).

b) 1 -(1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[2,1 -a]izochinolizín-9-yl)-2-tiomočovina

Do 9-amino-1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[2,1 -ajizochinolínu (1,48g, 7.85mmol) v acetóne (28ml) bola pridaná kyselina trifluóroctová (0.894g, 7.85mmol) v acetóne (28ml). Zmes bola zahrievaná pod refluxom a bol pridaný benzoylizotiokyanát (1.99ml). Zmes bola zahrievaná pod refluxom počas 3.5 hod a po ochladení na laboratórnu teplotu bola zachytený intermediát vo forme tuhej látky (2.14g). Táto pevná látka bola prenesená do metanolu (25ml), bol pridaný 2.5M hydroxid sodný (10ml) a roztok bol zahrievaný pod refluxom počas 1.5 hod. Reakčná zmes bola ochladená na laboratórnu teplotu, bola zachytená pevná látka, ktorá bola premytá vodou. Z filtrátu bol odstránený metanol a z riedkej vodnej suspenzie bola zachytená pevná látka. Celkový výťažok danej zlúčeniny ako bielej tuhej látky bol 1,04g, 1.1. 185 až 187°C; MS (M + H)⁺ 248.

c) Kyselina N-(1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[2,1 -a]izochinolín-9-yl)karbamidotiová, etylester

Do miešaného roztoku 1-(1,2,3,5,10,10a-hexahydropyrolo[2,1a]izochinolizín-9-yl)-2-tiomočoviny (1.0g, 4.04mmol) a etanolu (20ml) bola pridaná kyselina metánsulfónová (0.262g, 4.04mmol). Vyzrážala sa mesylátová soľ. Po niekoľkominútovom miešaní bol pridaný etylmetánsulfonát (1.3ml). Reakčná zmes bola počas miešania refluxovaná počas 22 hod. Tenko vrstvová chromatografia naznačila, že reakcia bola ukončená nó 50%. Pridaním etylmetánsulfonátu (0.5ml) a refluxovaním počas ďalších 22 hod bola reakcia ukončená. Roztok bol zahustený pri zníženom tlaku. Zvyšok bol rozpustený vo vode, roztok bol zalkalizovaný roztokom uhličitanu sodného a produkt bol izolovaný extrakciou do dichlórmetánu. Surový produkt bol prečistený chromatografiou použitím silikagélu a 5% metanolu nasýtený, amoniakom v dichlórmetáne. Chromatografovaný materiál bol rozpustený v horúcom etylacetáte, roztok bol vyčistený a zahustený do sucha Toto bolo opakované použitím cyklohexánu. Produkt bol potom rozotrený v molom množstve

-70horúceho éteru, zmes bola ochladená a bol izolovaný produkt (0.382g); 1.1. 116 až 117°C; MS (M+H)⁺ 276,

Príklad 45

Kyselina (+)-N -2,3,5,10,10a-hexahydro-1 H,5H-pyrolo[2,1 -c] [ 1,4]benzoxazepín-7yl)karbamidotiová, etylester bismaleát

a) Hydrochlorid 1 -((2-fluor-5-nitrofenyl)metyl)-pyrolidín-2-metanolu

Do 2-fluor-5-nitrobenzaldehydu (20g, 118mmol) v absolútnom etanole (200ml) bol pridaný (R)-(-)2-pyrolidínmetanol (21 g, 118mmol) a 8M bóranpyridínový komplex (15ml, 118mmol). Zmes bola miešaná počas 24 hod, zahustená, rozpustená v okyslenej vode a extrahovaná dichlórmetánom (2x100ml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené síranom horečnatým a zahustené na olej. Olej bol rozpustený v izopropanole a spracovaný izopropanolom-HCI. Soľ bola zachytená filtráciou (15.2g, 46%), 1.1. 147 až 149°C.

b) Hydrochlorid 7-n itro-2,3,4,11,11 a-tetrahydro-1 H,5H-pyrolo[2,1 -c] [ 1,4]benzo- xazepínu

Do 1-((2-fluor-5-nitrofenyl(metyl)-pyrolidín-2-metanolu (1.97g, 6.77mmol) v DMSO (30ml) bol pridaný 25% NaOH (3.25g). Zmes bola miešaná počas 1 hod, vliata vo vody a pevné látky boli odfiltrované. Pevné látky boli premyté vodou a vysušené vo vákuu, rozpustené v izopropanole, spracované izopropanolom-HCI a soľ bola odfiltrovaná (1.41 g, 77%), 1.1. 253 až 255°C.

c) 7-amino-2,3,4,11,11 a-tetrahydro-1 H,5H-pyrolo[2,1-c][1,4]benzoxazepín

7-nitro-2,3,4,11,11 a-tetrahydro-1 H,5H-pyrolo[2,1 -c][ 1,4]benzoxazepín (3.07g, 11 .Ommol) bol rozpustený v metanole (50ml) a hydrogenovaný pri 50 psi v prítomnosti katalytického množstva 10% Pd-C. Po jednej hodine miešania bola zmes prefiltrovaná cez sklovinu a odparená na pevnú látku (2.7g, 100%), 1.1. 64 až 67°C.

d) 1 -benzoyl-3-(2,345,11,11 a-tetrahydro-1 H,5H-pyrolo[2,1 -c] [ 1,4]benzoxazepín-7yl)-tiomočovina

Do 7-amino-2,3,4,11,11 a-tetrahydro-12H,5H-pyrolo[2,1-c][1,4]benzoxazepínu (9.0g, 44.1mmol) v acetóne (150ml) bol pridaný benzoylizotiokyanát (14.4g, 88.2mmol). Zmes sa nechala refluxovať počas 0.5 hod, potom bola ochladená a odparovaná. Olej bol rozpustený v dichlórmetáne a premytý vodou. Organická vrstva bola vysušená síranom horečnatým, prefiltrovaná a zahustená na olej, ktorý bol bezprostredne použití v ďalšej reakcii.

e) (2,3,4,11,11 a-tetrahydro-1 H,5H-pyrolo[2,1 -c][ 1,4]benzoxazepín-7-yl) tiomočovina -

Do surového materiálu z predchádzajúcej reakcie, rozpustenom v metanole (1 OOml), bol pridaný 2N NaOH (40ml) a zmes sa nechala refluxovať počas 1 hod. Metanol bol odparený a vodná fáza bola extrahovaná etylacetátom (3x1 OOml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené síranom horečnatým, prefiltrované, zahustené a chromatografované cez silikagél a elučným činidlom vo forme 5% metanolu v chloroforme v prítomnosti sklovitej tuhej látky (3.31 g, 28%, dva kroky).

f) Kyselina (+)-N-2,3,4,11,11 a-tetrahydro-1 H,5H-pyrolo[2,1-c][1,4]benzoxazepín-7yl)karbamidotiová, etylester bismaleát

Do (2,3,4,11,11 a-tetrahydro-1 H,5H-pyrolo[2,1 -c] [ 1,4]benzoxazepín-7-yl) tiomočoviny (3.31 g, 12.6mmol) v etanole (20ml) bola pridaná kyselina metánsulfónová (0.815g, 12.6mmol) nasledovaná etylmetánsulfonátom (1.74ml, 12.6mmol). Zmes bola zahrievaná pod refluxom počas 10 hod (počas tejto periódy bolo pridané ďalšie množstvo etylmetánsulfonátu), ochladená a odparená. Zvyšujúci olej bol vliaty do vody, zalkalizovaný 2N NaOH a extrahovaný etylacetátom (3x1 OOml). Spojené extrakty boli premyté vodou, vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a zahustené na pevnú látku, ktorá bola rekryštalizovaná z etylacetátu-hexánu. Pevná látka bola rozpustená v etanole a nechala sa reagovať s 2,1 ekvivalentmi kyseliny maleínovej. Po rozmiešaní s éterom sa vytvorila pevná látka (1.17g, 18%), 1.1. 123 až 124°C; [a]_D +29,4°(c 1.162, metanol).

-72Τ’/

Claims

1. Zlúčenina vzorca (I) kde:

X predstavuje NR⁶, S, O, CH₂ alebo väzbu;

R¹ predstavuje C1.3 S-alkyl alebo päťčlenný heterocyklický aromatický kruh obsahujúci 1 až 4 heteroatómy vybraté z O, N, a S, ktoré môžu byť na uhlíkovom atóme substituované jednou alebo viacerými skupinami, ktoré môžu byť zvolené z halogénu, trifluórmetylu, Cvs alkylu, nitro alebo kyano;

R² predstavuje H, alkyl Ci-₆₁ -(CH₂)_dOH, -(CH₂)_dOAr alebo -(CH₂)_nAr;

R³ predstavuje H, alkyl Ci-e, -(CH₂)_bOH, -(CH₂)_bOAr alebo -(CH₂)nAr;

R⁴ predstavuje H, alkyl Ci-₆₁ -(CH₂)_cOH, -(CH₂)_cOAr alebo -(CH₂)hAr;

R⁵ predstavuje H, alkyl C^, -(CH2)qOH, -(CH2)qOAr alebo -(CH2)nAr, -(CH2)tCOOR⁸alebo (CH2)tCONR⁹R¹⁰;

alebo buď R³ a R⁴ spoločne alebo R⁴ a R⁵ spoločne predstavujú reťazec -(CH₂)m alebo -(CH₂)_rY(CH₂)_p;

Ar predstavuje fenylový kruh, šesťčlenný heterocyklický aromatický kruh obsahujúci jeden alebo dva atómy N alebo päťčlenný aromatický kruh obsahujúci 1 až 4 heteroatómy vybraté z O, N alebo S, pričom fenylový kruh, šesťčlenný heterocyklický aromatický kruh môžu byť substituované jednou alebo viacerými skupinami vybratými z Ci_s alkylu, Ci_6 alkoxy, halogénu, nitro, kyano, Ci.₆

-73perfluóralkylu, fenylu alebo päťčlenného heterocyklického aromatického kruhu obsahujúceho 1 až 4 heteroatómy vybrané z O, N a S;

Y predstavuje O, S alebo NR⁷;

m predstavuje celé číslo 3 až 5;

R¹⁵ predstavuje alkyl alebo skupinu -(CH₂)_WQ;

Q predstavuje fenyl, ktorý môže byť substituovaný alkylom, Ci-₆ alkoxy, halogénom, nitro, kyano a trifluórmetylom;

n, w a d nezávisle predstavujú celé číslo 0 až 6;

h, q a b predstavujú nezávisle celé číslo 1 až 6;

c predstavuje celé číslo 2 až 6;

t predstavuje celé číslo 1 až 5;

za predpokladu, že

a) keď X predstavuje NH, O, CH₂ alebo väzbu a súčasne R², R³ a R⁵ predstavujú H, potom R⁴ nepredstavuje H alebo Ci_6 alkyl

b) keď X predstavuje NR⁶, O alebo S, potom d predstavuje celé číslo 1 až 6;

a ich optické izoméry a racemáty a farmaceutický prijateľné soli.

2. Zlúčenina vzorca (I), podľa nároku 1, v ktorom R¹ znamená C1.3 S-alkyl alebo kruh obsahujúci jeden heteroatóm vybratý z O, N a S.

3. Zlúčenina vzorca (I), podľa nároku 2, v ktorom R¹ znamená tienyl.

4. Zlúčenina vzorca (I), podľa nároku 3, v ktorom R¹ znamená 2-tienyl.

5. Zlúčenina vzorca (I), podľa nároku 2, v ktorom R¹ znamená S-etyl.

6. Zlúčenina vzorca (I), ktorou je

N-(3-metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1,3,4,6,7,11 b-hexahydro-2H-benzo[a]chinolizín-10-yl)-2-tiofénkarboximidamid

N-(1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1 -a]izochinolín-9-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(4-hydroxy-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzazepín-8-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1-(2-hydroxyetyl)-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1-metoxykarbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-1 -kyselina octová-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1-aminokarbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(2,3-dimetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

(-)-N-( 10-metyl-2,3,5,10,11,11 a-hexahydro-1 H-pyrolo[2,1 -c] [ 1,4]benzodiazapín-7yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(3-propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

(+)-N-(3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

(-)-N-(3-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(3-etyl-2-metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1,3,4,6,11,11a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-3-yl)-2-tiofénkarboximidamid

-75Ν-(5,7,8,9,10,11,11 a, 12-oktahydroazepino[1,2-b] izoch inol ίη-3-y I )-2-t iof énkarboximidamid;

N-(2-(2-hydroxyetyl)-1_l2_I3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(6,6a,7,8,9,10,-hexahydro-12H-pyrido[2,1 -c][ 1,4]benzoxazepín -2-yI)-2-tiofénkarboximidamid;

(+)-N-(1H,5H-2,3,11,11a-tetrahydropyrolo[2_l1-c]benzoxazepín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

(-)-N-(1 H,5H-2,3,11,11 a-tetrahydropyrolo[2,1 -c]benzoxazepín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(2-etyl-2,3,4,5-tetrahydro-1,4-benzoxazepín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1-metyl-2,3,4,5-tetrahydro-1H-1_l4-benzodiazapín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(3-benzyl-1 -metyl-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1,4-benzodiazapín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1-(N,N-dietylamino)karbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1-pyrolidinylkarbonylmetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1-morfolinylkarbonylmetyl-1,2_l3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1-(((etyl)amino)karbonyl)metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1-piperidinylkarbonylmetyl-1,2,3_l4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

-76N-(2-(2-hydroxyetyl)-2,3,4,5-tetrahydro-1H-2-benzazepín-8-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

(+)-N-( 1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1 -a]izochinolín-9-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

(-)-N-(1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1 -a]izochinolín-9-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(3,4,5,6,11,11 a-hexahydro-1 H-[1,4]oxazino[4,3-b]izochinolín-8-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(2,3,4,6,11,11 a-hexahydro-1 H-pyrazino[1,2-b]izochinolín-8-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1-metyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1,2-dimetyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-[1 -(3-metyl-1,2,4-oxadiazol-5-ylmetyl)-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl]-2tiofénkarboximidamid;

N-(1,2_l3,5,10,10a-hexahydropyrolo[1,2-b]izochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1-propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(2-metyl-1-propyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

N-(1-etyl-1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

Kyselina N-(1,3,4,11,11a-hexahydro-2H-benzo[b]chinolizín-8-yl)karbamidotiová, etylester;

Kyselina N-(1,2,3,5,10,10a-hexahydro-1H-pyrolo[1,2-b]izochinolín-7-yl)karbamidotiová, etylester;

-77 Kyselina N-(1,2,3,5,6,10b-hexahydropyrolo[2,1-a]izochinolín-9-yl)karbamidotiová, etylester;

Kyselina (+)-N-2,3,4,11,11 a-tetrahydro-1 H,5H-pyrolo[2,1 -c][1,4]benzoxazepín-7yl)karbamidotiová, etylester;

alebo optický izomér alebo racemát akejkoľvek vyššie uvedenej zlúčeniny alebo jej farmaceutický prijateľnej soli.

7. Zlúčenina vzorca (I), podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, pre jej použitie ako liek.

8. Farmaceutická -kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje zlúčeninu vzorca (I), podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, alebo jej optický izoméru alebo racemát alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ, voliteľne v prímesi s farmaceutický prijateľným riedidlom alebo nosičom.

9. Spôsob liečby alebo profylaxie ľudských chorôb alebo príznakov, v ktorých je užitočná inhibícia aktivity syntézy oxidu dusičného, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa podávanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny vzorca (I), podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, alebo jej optického izoméru alebo racemátu alebo farmaceutický prijateľnej soli.

10. Spôsob liečby podľa nároku 9, vyznačujúci sa tým, že je to prevažne neuronálna izoforma syntézy oxidu dusičného, ktorá je inhibovaná.

11. Spôsob liečby alebo profylaxie hypoxie alebo záchvatu alebo ischémie alebo neurodegeneratívnych príčin alebo bolesti alebo migrény alebo prevencie a zvrátenia tolerancie na opiáty a diazepíny alebo liečby drogovej závislosti, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa podávanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny vzorca (I), podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, alebo jej opticky aktívneho izoméru alebo racemátu alebo jej farmaceutický prijateľnej soli, pacientom.

12. Spôsob liečby podľa nároku 11, vyznačujúci sa tým, že príznak, ktorý sa má liečiť, je vybraný zo skupiny pozostávajúcej z hypoxie, ischémie, záchvatu, amyotropickej laterálnej sklerózy a bolesti.

13. Spôsob liečby podľa nároku 12, vyznačujúci sa tým, že príznak, ktorý sa má liečiť, je záchvat.

14. Spôsob liečby podľa nároku 12, vyznačujúci sa tým, že príznak, ktorý sa má liečiť, je amyotropická laterálna skleróza.

15. Spôsob liečby podľa nároku 12, vyznačujúci sa tým, že príznak, ktorý sa má liečiť, je bolesť.

16. Použitie zlúčeniny vzorca (I), podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, na výrobu liečiva na liečbu alebo profylaxiu ľudských ochorení alebo príznakov, v ktorých je užitočná inhibícia syntézy oxidu dusičného.

17. Použitie podľa nároku 16, v ktorom je to predominantne inhibovaná neuronálna izoforma syntázy oxidu dusičného.

18. Použitie zlúčeniny vzorca (I),' podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, na výrobu liečiva na liečbu alebo profylaxiu hypoxie alebo záchvatu alebo ischémie alebo neurodegeneratívnych príznakov alebo bolesti alebo migrény alebo na prevenciu tolerancie na opiáty a diazepíny alebo na liečbu drogovej závislosti.

19. Použitie podľa nároku 18, v ktorom je príznak vybraný zo skupiny pozostávajúcej z hypoxie, ischémie, záchvatu, amyotropickej laterálnej sklerózy a bolesti.

20. Použitie podľa nároku 19, v ktorom je príznakom záchvat.

21. Použitie podľa nároku 19, v ktorom je príznakom amyotropická laterálna skleróza.

22. Použitie podľa nároku 19, v ktorom je príznakom bolesť.

23. Spôsob prípravy zlúčeniny vzorca (I), podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6 a optických izomérov a racemátov a ich farmaceutický prijateľných solí, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa:

a) prípravu zlúčeniny vzorca (I) tým, že sa nechá reagovať príslušná zlúčenina vzorca (II)

II kde X, R², R³, R⁴, R⁵ majú rovnaký význam, tak ako je definované vyššie, so zlúčeninou vzorca (III)

NH

III kde R¹ je definované vyššie a L je odštiepiteľná skupina;

b) prípravu zlúčeniny vzorca (I) tým, že sa nechá reagovať zlúčenina vzorca (IV) (IV) kde X, R², R³, R⁴, R⁵ sú definované vyššie a HA je kyselina, so zlúčeninou vzorca (V)

R¹-=N (V) kde R¹ je definované vyššie;

c) prípravu zlúčeniny vzorca (I), kde R¹ je C1.3 S-alkyl, tým že sa nechá reagovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (VI) kde X, R², R³, R⁴, R⁵ sú definované vyššie, so zlúčeninou vzorca (VII) _w R¹----- L (VII) « kde R¹ je C1.3 alkyl a L je odštiepiteľná skupina;

d) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej R⁴ znamená Ci^ alkyl, -(CH₂)_cOH,

-(CH₂)_cOAr alebo -(CH₂)nAr, tým že sa nechá reagovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁴ znamená vodík, so zlúčeninou vzorca (VIII)

R¹¹-----L (VIII) v ktorej R¹¹ znamená alkyl, -(CH₂)_cOH, -(CH₂)_cOAr alebo -(CH₂)nAr a L je t odštiepiteľná skupina;

• e) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej X znamená NR⁶ a R⁶ znamená C1.6 alkyl, tým že sa nechá reagovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁶znamená vodík, so zlúčeninou vzorca (IX)

R¹²— L (IX) v ktorej R¹² znamená alkyl a L je odštiepiteľná skupina;

f) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej R³ a R⁴ alebo R⁴ a R⁵ sú spojené pri vzniku reťazca -(CH2)rY(CH2)p, Y znamená NR⁷ a R⁷ znamená Ci-6 alkyl, tým že sa nechá reagovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁷ znamená vodík, so zlúčeninou vzorca (IX);

g) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej R⁵ znamená -(CH2)tCOOR⁸ a R⁸znamená Ci-6 alkyl, tým že sa nechá esterifikovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁸ znamená vodík;

h) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej R⁵ znamená -(CH2)tCOOR⁸ a R⁸znamená Ci-6 alkyl, tým že sa nechá hydrolyzovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁸ znamená alkyl;

i) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej R⁵ znamená -(CH₂)_tCONR⁹R¹⁰ a R⁹a/alebo R¹⁰ znamenajú alkyl, tým že sa nechá alkylovať zodpovedajúca zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁹ a/alebo R¹⁰ znamenajú vodík;

j) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej R⁵ znamená -(CH2)tCONR⁹R¹⁰ a R⁹ a R¹⁰znamenajú vodík alebo R⁵ znamená -(CH2)_tCOOR⁸ a R⁸ znamená vodík, tým že sa nechá hydrolyzovať zodpovedajúca kyano zlúčenina;

k) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej R⁵ znamená -(CH₂)_tCONR⁹R¹⁰, tým že sa nechá reagovať zodpovedajúci amín HNR⁹R¹⁰ so zodpovedajúcou kyselinou;

l) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej R⁵ znamená -(CH2)dOAr, R³ znamená (CH2)bOAr, R⁴ znamená -(CH₂)_qOAr, tým že sa nechá reagovať zodpovedajúca halogenovaná alebo sulfonovaná zlúčenina vzorca (I) s arylhydroxidom;

m) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej R⁴ znamená metyl, tým že sa nechá reagovať zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁴ znamená vodík, s formaldehydom a kyselinou mravčou;

n) prípravu zlúčeniny vzorca (I), v ktorej R⁴ znamená -CH₂CH₂OH, tým že sa nechá reagovať zlúčenina vzorca (I), v ktorej R⁴ znamená vodík s oxiranom;

a kde je to žiadané alebo nutné, tak prevedenie výslednej zlúčeniny vzorca(l), alebo jej soli, na farmaceutický prijateľnú soľ alebo naopak.

24. Zlúčenina vzorca (II), ako medziprodukt na prípravu zlúčeniny vzorca I podľa nároku 1, v ktorom X, R², R³, R⁴, R⁵ sú definované, tak ako v nároku 1.

ako medziprodukt na prípravu zlúčeniny vzorca I podľa nároku 1, v ktorom X,

R², R³, R⁴, R⁵ sú definované, tak ako v nároku 1.

26. Zlúčenina vzorca (X),