SK4894A3

SK4894A3 - Derivatives of taxol analogues, preparation thereof and compositions containing them

Info

Publication number: SK4894A3
Application number: SK48-94A
Authority: SK
Inventors: Jean-Dominique Bourzat; Alain Commercon; Daniel Guenard; Francoise Gueritte-Voegelein; Pierre Potier
Original assignee: Rhone Poulenc Rorer Sa
Priority date: 1991-07-16
Filing date: 1992-07-16
Publication date: 1994-12-07
Also published as: HU9400113D0; JPH06509107A; CZ9094A3; WO1993002065A1; NO934723D0; HUT66600A; FI940191A; EP0596010A1; FI940191A0; CA2113074A1; FR2679230B1; AU2388092A; NO934723L; EP0524093A1; YU69892A; NZ243548A; TW201740B; IE922305A1; FR2679230A1; ZA925245B

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka nových derivátov ného vzorca I analógov taxolu všeobec-

ich prípravy a kompozícií, ktoré ich obsahujú. Vo všeobecnom vzorci I znamená:

Ar arylovú skupinu,

R skupinu všeobecného vzorca II

R₇0/11/ v ktorom R? znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu, obsahujúcu 1 až 8 atómov uhlíka, alkenylovú skupinu, obsahujúcu 2 až 8 atómov uhlíka, alkinylovú skupinu, obsahujúcu 3 až 8 atómov uhlíka, cykloalkylovú skupinu, obsahujúcu 3 až 6 atómov uhlíka, cykloalkenylovú skupinu, obsahujúcu 4 až 6 atómov uhlíka alebo bicykloalkylovú skupinu, obsahujúcu 7 až 10 atómov uhlíka, pričom tieto skupiny prípadne môžu byť substituované jedným alebo viacerými substituentami, ktoré sú vybrané z atómov halogénov a hydroxylových skupín, alkyloxyskupín, obsahujúcich 1 až 4 atómy uhlíka, d i a 1 k y 1 am i noskupí n, kde každá alkylová skupina obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, zvyškov piperidínu, morfolínu alebo 1-piperazínu, ktorý je prípadne substituovaný v polohe 4 alkylovou skupinou, obsahujúcou 1 až 4 ató2 my uhlíka, alebo fenylalkylovú skupinu, ktorá má v alkylovej súčasti 1 až 4 atómy uhlíka, ďalej z cykloalkylových skupín, obsahujúcich 3 až 6 atómov uhlíka, cykloalkenylových skupín, obsahujúcich 4 až 6 atómov uhlíka, fenylových skupín, k y a n o vých skupín, karboxylových alebo alkyloxykarbonylových skupín, v ktorých alkylová súčasť obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, alebo fenylovú skupinu, prípadne substituovanú jedným alebo viacerými atómami alebo skupinami, ktoré sú vybrané z atómov halogénov a alkylových skupín, obsahujúcich 1 až 4 atómy uhlíka alebo alkoxylových skupín, obsahujúcich 1 až 4 atómy uhlíka, alebo zvyšok dusíkatého heterocyklu, nasýteného alebo nenasýteného, obsahujúceho 4 alebo 6 členov a prípadne substituovaného jednou alebo viacerými alkylovými skupinami, ktoré obsahujú 1 až 4 atómy uhlíka, pričom sa rozumie, že cyk 1 oa1kylové, cyk 1oa1keny1 ové alebo b icyk 1oa1ky1ové skupiny môžu byť prípadne substituované jednou alebo viacerými alkylovými skupinami, ktoré obsahujú 1 až 4 atómy uhlíka, substituenty Ri a R₂, rovnaké alebo rozdielne, znamenajú atóm vodíka alebo skupinu všeobecného vzorcaa III

NCO/111/ v ktorom substituenty Rs a R₄, rovnaké alebo rozdielne, znamenajú atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom, obsahujúcim 1 až 4 atómy uhlíka, ktorý je prípadne substituovaný:

a/ skupinou hydroxy 1 ovou, karboxylovou, alkyloxykarbonylovou, ktorej alkylová súčasť obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka a ktorá je prípadne substituovaná fenylovou skupinou, b/ skupinou všeobecného vzorca IV

Rs ^N- /IV/ v ktorom substituenty Rs a Rs, rovnaké alebo rozdielne, znamenajú atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom, obsahujúcim 1 až 4 atómy uhlíka, alebo substituenty Rs a Re, spolu spojené, tvoria s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, nasýtený alebo nenasýtený, päť- alebo šesťčlenný heterocyklus, ktorý prípadne obsahuje druhý heteroatóm, vybraný z atómov dusíka, ktorý je prípadne substituovaný alkylovou skupinou, obsahujúcou 1 až 4 atómy uhlíka alebo benzylovou skupinou, kyslíka alebo síry, alebo substituenty R₃ a R-., spolu spojené, tvoria s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, nasýtený alebo nenasýtený, päť- alebo šesťčlenný heterocyklus, ktorý prípadne obsahuje druhý heteroatóm, vybraný z atómov dusíka, ktorý je prípadne substituovaný alkylovou skupinou, obsahujúcou 1 až 4 atómy uhlíka alebo benzylovou skupinou, kyslíka alebo síry, pričom sa rozumie, že najmenej jeden zo substituentov Ri a Rc znamená skupinu všeobecného vzorca III.

S výhodou znamená Ar fenylovú skupinu alebo alfa- či beta naftylovú skupinu, prípadne substituovanú jedným alebo viacerými atómami alebo skupinami, vybranými z atómov halogénov /fluóru, chlóru, brómu alebo jódu/ alebo skupín, ako sú alkyl-, alkenyl-, a 1 k i ny 1 -, ary 1-, aralkyl-, alkoxy-, alkyltio-, aryloxy-, aryltio-, hydroxy-, hydroxyalkyl-, merkapto-, formyl-, acyl-, acylamino-, arylamino-, a 1koxykar bony 1 am i no-, amíno-, alkylamino-, dialkylamíno-, karboxy-, a 1koxykar bony 1-, karbamoyl-, d i a 1 ky 1 karbamoy1-, kyan-, nitro- a tri f 1uórmety 1 skupiny, pričom sa rozumie že alkylové skupiny a alkylové súčasti iných skupín obsahujú 1 až 4 atómy uhlíka a že alkenylové a alkinylové skupiny obsahujú 3 až 8 atómov uhlíka a že arylové skupiny sú fenylové či alfa- alebo beta-naftylové skupiny.

Výhodnejšie znamená Ar fenylovú skupinu, pripadne substituovanú jedným alebo viacerými atómami či skupinami, rovnakými alebo rozdielnymi, vybranými z atómov halogénov a alkyl-, a 1 koxy-, amino-, alkylamino-, d i a 1 k y 1 am i no-, acylamino-, alkoxykarbony 1 am i no- a tri f 1 uórmety1 skúpi n.

Ešte výhodnejšie znamená Ar fenylovú skupinu, prípadne substituovanú atómom chlóru alebo fluóru, alebo skupinou alkylovou /metylovou/, alkoxylovou /metoxylovou/, dialkylamínovou /d i mety 1amínovou/, acylamínovou /acetylamí novou/ alebo alkoxykarbonylamí novou /terc.-butoxykarbonylamínovcu/.

Podstata vynálezu

Podľa tohoto vynálezu je možné nové deriváty analógov t axolu všeobecného vzorca I získavať tak, že sa pôsobí am inom všeobecného vzorca V

/V/ v ktorom substituenty Rs a R* majú derivát taxánu všeobecného vzorca VI vyššie uvedený význam, na

v ktorom R a Ar majú vyššie uvedený význam, pri vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca VII '0'

(VII),

R-CONH

Ar

OH ktorom R a Ar majú vyššie uvedený význam, substituenty Gi a Gc znamená každý skupinu všeobecného vzorca II alebo ochrannú skupinu CCI3CH2OCO-, pričom sa rozumie, že najmenej jeden zo substituentov G, a G2 znamená skupinu všeobecného vzorca III, nato nasleduje, pokiaľ je to žiaduce, viacerých ochranných skupín CClsCHcOCOalebo náhrada jednej atómom vodíka.

Všeobecne sa pôsobenie amínu všeobecného vzorca V na derivát taxánu všeobecného vzorca VI uskutočňuje v prostredí nereagujúceho organického rozpúšťadla, ako je halogénovaný alifatický uhľovodík, napríklad metylénchlorid, pri teplote v rozpätí od O °C až k teplote varu reakčnej zmesi. Aby sa predišlo ohrozeniu v polohe 7, je predovšetkým výhodné pracovať v metylénchloride pri teplote nižšej ako 50 ⁰C. Pokiaľ sa pracuje pri vyššej teplote ako 50 °C, prípadne v prítomnosti dostačujúceho prebytku amínu všeobecného vzorca V, tvorí sa zmes produktov všeobecného vzorca VII, v ktorom jeden zo substituentov G, alebo G; znamená skupinu všeobecného vzorca III, alebo v ktorom každý z oboch substituentov Gi alebo G₂ znamená skupinu všeobecného vzorca III.

Náhrada G 1 alebo G 2 , ne octovej, v rozpätí od ochrannej skupiny, predstavovanej substituentami sa zvyčajne uskutočňuje pôsobením zinku v kyseliprí padne v prítomnosti metanolu, pri teplote až do 80 °C.

Produkty všeobecného vzorca I môžu byť izolované zo svojich zmesí preparát ívnou chromatografiou na vhodných nosičoch.

Produkty všeobecného vzorca I, získané spôsobom podľa vynálezu, môžu byť čistené fyzikálnymi metódami, ako je kryšta.6 lizácia alebo chromatografia na vhodnom nosiči.

Produkt všeobecného vzorca I môže byť prípadne prevedený na adičnú soľ s minerálnou kyselinou /chlorovodíkovou, sírovou, dusičnou alebo fosforečnou/ alebo s organickou kyselinou /octovou, šťavelovou, maleinovou alebo fumarovou/.

Produkty všeobecného vzorca VI je možné získať postupmi, ktoré sú opísané v Európskych pat. spisoch č. EP-0 253 738 a EP-0 253 739.

Produkty všeobecného vzorca I, a najmä tie, u ktorých substituent R predstavuje terc.-butoxy1ovú skupinu, vykazujú pozoruhodné biologické vlastnosti.

In vitro sa meranie biologickej aktivity uskutočňuje na izolovanom tabulíne mozgu ošípanej, a to metódou, ktorú opísal M.L. Shelanski so sp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 7 0 . 765 - 768 /1 9 7 3 /. Štúdia depo 1ymerizáci e mikrotubulov v tubulíne sa uskutočňuje metódou, ktorú opísal G. Chauviere so sp., C. R. Acad. Sci., 293. Séria II, 50 1 - 503 /1 98 1 /. V tejto štúdii sa deriváty všeobecného vzorca I ukázali byť prinajmenšom rovnako účinné ako taxol.

In vivo preukázali deriváty všeobecného vzorca I účinnosť u myší naočkovaných melanómom B 16 v dávkach v rozpätí 1 až 10 mg/kg pri intraperitoneá1 nej aplikácii, rovnako tak u. iných solídnych a podobných tumorov.

Okrem toho sú deriváty všeobecného vzorca I lepšie rozpustné vo vode ako deriváty taxolu alebo deriváty taxánu, ktoré sú predmetom Európskeho pat. spisu č. EP-0 253 738.

Nasledujúce príklady vynález ilustrujú.

P r í k 1 a d v uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Do banky, opatrenej magnetickým m i e š a d 1 o m a chladičom, sa umiestni 365 mg 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoylox.y-5beta,20-epoxy-1beta-hydroxy-9-oxo-7beta,10beta-bis-/(2,2,2-trichlóretoxy)karbony 1oxy/-11-taxén-13a1 fa-y1 u, rozpusteného v 10 ml metylénchloridu. Pridá sa 80 μΐ 3-di mety 1 am inopr opy1 am í n u. Reakčná zmes sa zahrieva na 40 °C v atmosfére argónu po dobu 4 hodín. Roztok sa premyje dva razy po 10 ml vody. Po vysušení a odparení rozpúšťadla sa získaný odparok čistí na hrubej vrstve kremeliny elúciou zmesou mety 1énch1 or idu s metanolom /8 : 2 obj./. Získa sa tak 250 mg 3-terc.-butoxykarbony1 am iηο-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1beta-hydroxy-9-oxo-10beta-/3-dimetylaminopropyl/aminokarbonyloxy-7beta-/(2,2,2-trichlóretoxy)karbonyloxy/-11-taxén-13-a1 fa-y1 u, ktorého štruktúru potvrdzuje spektrum NMR, stanovené v deuterovanom chloroforme, kedy sú chemické premeny vyjadrené v ppm a konštanty J v Hertzoch:

1,16 /s, 3H/; 1,25 /s, 3H/; 1,35 /s, 9H/; 1,83 /s, 3H/; 1,93 /S, 3H/; 2,26 /s, 6H/; 2,38 /s, 3H/; 3,25 /m, 2H/; 3,93 /d, J =

7, 1 H/; 4,16 a 4,33 /2d,	J=9, 2H/; 4,62	/s ,	široký,	1 H/;	4,73
a 4,99 /2d, J =12, 2H/;	4,96 /d, J = 9, 1H/;	5,29 /d,	J = 9 ,	1 H/;
5,47 /d, J=1H/; 5,54 /m,	1H/; 5,66 /d, J=	7,	1 H/; 6,19	/t ,	J = 9,
1H/; 6,29 /s , 1H/; 7,37	/5H/; 7,49, 7,62	s 8	,09 /5H/.
K roztoku 137 mg	produktu, ktorý	bol vyššie	získaný,
v zmesi kyseliny octovej s metanolom /1		1 Obj./,	sa	pridá
130 mg zinkového prachu.	Reakčná zmes sa	mieša pri 60	°C	1 ho-

dinu. Po filtrácii a odparení do sucha sa odparok vyberie do vody a extrahuje ety 1 acetátom. Po oddelení a vysušení sa organická fáza odparí do sucha. Získaný odparok sa čistí chromatografiou na hrubej vrstve kremeliny a eluuje zmesou metylénchloridu s metanolom /8 : 2 obj./. Získa sa tak 73 mg 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-beta,7beta-dihydroxy-9-oxo-10beta-/3-dimetylaminopropyl/am inokarbonyloxy-11-taxén3

-I3alfa-y lu, ktorý má tieto charakteristiky:

iJV-spektrum /etanol/: \ max - 230 nm / Σ 1 2 700/ λ max - 275 nm / Σ 1040/;

IČ-spektrum /met y 1énch1 o r i d/: hlavné charakteristické absorpčné pásy pri 3400, 2960 a 1729 cm^-1; protónové spektrum NMR:

1,	18 /s,	3H/;	1,23 /s, 3H/;	1,33' /s ,	9H/;	1 ,	66 /s, 3H/; 1,87
/s	, 3H/;	2 ,28	/s ,	6H/; 2,38	/s, 3H/;	3 ,20	/m ,	2 H/; 3,78 /d, J =
7,	1 H/;	4,17	a 4,	31 /2d, J	-8, 2H/;	4,43	/dd ,	J = 6 a 12, 1 H/;
4j	62 /S,	š i r	oký,	1H/; 4,97	/d, J=9,	1 H/;	5,2	6 /d, J = 9, 1H/;
5,	54 /d,	J = 9 ,	1 H/;	5,66 /d,	J=7, 1H/;	6,21	/m,	2H/; 7,39 /5H/;
7,	51 , 7,	62 a	8,11	/5H/;

hmotové spektrum /FAB/: 936 /ΜΗ'/.

K roztoku produktu, vyššie získaného, v 0,5 ml etanolu, sa pridá 0,780 ml 0,1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej. Reakčná zmes sa odparí do sucha a potom lyofilizuje. Získa sa tak hydrochlorid 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2-alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1beta,7beta-dihydroxy-9-oxo-10beta-/3-dimetylaminopropyl/aminokarbony 1 oxy-11-taxén-1 3a1 fa-y1 u, ktorý má tieto charakteristiky:

optická otáčavosť:	/a/ D²° =	-29° /c	= 0,4; etanol/;
protónové spektrum	NMR /CDC1	s-CDsOD/:
1,16 /s, 3H/; 1,21	/s, 3H/;	1,40 /s,	9H/; 1,66 /s, 3H/; 1,93
/s, 3H/; 2,38 /s, 3	H/; 2,83	/s , 6 H / ;	3,16 /m, 2 H/; 3,81 /d, J =
7, 1 H/; 4,23 a 4,31	/2 d, J = 3	, 2H/; 4,	3 8 /m, 11-}/; 4,5 8 /m, 1H/;
4,99 /d, J=9, 1H/;	5,16 /s	, 1H/; 5,	6 6 /d, J = 7, 1 H/; 6,16 /t,
J=9, 1H/; 6,26 /s,	1H/; 7,37	/5H/; 7,	52 , 7,70 a 3,09 /5H/.
Príklad 2
K roztoku 4,63	g 3-terc	.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-

-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-9-oxo-7beta,10beta-bis-/2,2,2-trichlóretoxy/karbonyloxy-11-taxén-13alfa-ylu v 100 ml acetonitrilu, udržiavanom v atmosfére argónu, sa pridá 0,50 ml 3-dimetylaminoprog pylamínu. Reakčná zmes sa pri miešaní zahrieva 3 hodiny na teplotu okolo 60 °C, potom sa ochladí na teplotu okolo 20 °C a odparí do sucha pri zníženom tlaku /2,7 kPa/ pri 40 °C. Získa sa 5,3 g bielej peny, ktorá sa čistí chromatografiou na s t ľ p c i /priemer 4 cm/ 150 g kremeliny /zrnitosť 0,063 až 0,2 mm/, elúcia zmesi mety 1 énch 1 or idu s metanolom /95 : 5 obj./ a odoberajú sa frakcie po 100 ml. Frakcie 1 až 10 sa odložia, potom sa pokračuje v chromatografi i a eluuje sa zmesou metylénchloridu s metanolom /80 : 20 obj./. Frakcie 17 až 30 sa spoja a odparia k suchu pri zníženom tlaku /2,7 kPa/, pri teplote okolo 40 °C. Získa sa tak 2,57 g zmesi dvoch derivátov, substituovaných v polohe 10 a 7 /(3-di mety 1 am inopropy 1)karbamoy1oxy/-skupinou.

Takto získaná zmes sa rozdeluje vysoko výkonnou kvapalinovou chromatografiou na 400 g nosiča, ktorého príprava je opísaná nižšie, umiestneného v kolóne 25 cm dlhej a 6 cm v priemere, kedy ako mobilná fáza slúži zmes hexánu s etanolom /80 : 20 : 2,5 obj./ v množstve 45 ml/m i n. Postupnou elúciou sa získa:

0,46 g 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-7beta-/(3-dimetylaminopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo-10beta-/2,2,2-trichlóretoxy/karbonyloxy-11-taxén-13alfa-ylu v podobe bielej peny ,

0,81 g 3-terc.-butoxykar bony 1 am ino-2-hydroxy-3-feny1propionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-10beta-/(3-dimetylaminopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo-beta-/2,2,2-trichlóretoxy/karbonyloxy-11-taxén-13alfa-ylu v podobe bielej peny.

Nosič je možné pripraviť týmto spôsobom:

V šesťlitrovej trojhrdlej banke sa suspenduje 600 g aminopropy 1 kreme 1 i ny /100 Á -10 μτη - NH=; Macherey-Nage 1 / v 2 litroch d i mety 1 for mam idu. Pridá sa 95 g anhydridu kyseliny 11-N-terc.-butoxykarbonylaminoundekanovej a reakčná zmes sa mieša 18 hodín pri teplote okolo 20 °C. Kremelina sa odfiltruje a postupne premyje dva razy po 1500 ml metylénchloridu a potom ° C . Takto sa získa

Kremelina BOC-C11-C3 štruktúru potvrdzuje elementárna analýza je:

dva razy po 1500 ml dimetylformamidu. Takto premytá kremelina sa opäť suspenduje v 2 litroch dimetylformamidu a pridá sa 95 g anhydridu kyseliny 11-N-terc.butoxykarbony'laminoundekanovej, potom sa reakčná zmes mieša 18 hodín pri teplote okolo 20 ⁰ C.

Kremelina sa oddelí filtráciou, postupne sa premyje dva razy po 600 ml metylénchloridu, dva razy po 600 ml tetrahydrofuranu, dva razy po 600 ml metanolu a dva razy po 600 ml dietyléteru, potom sa suší pri zníženom tlaku pri teplote okolo 610 g kremeliny, označovanej názvom v podobe bieleho prášku, ktorého infračervené spektrum a ktorého C = 8,8%; H = 1,7%; M = 1,2% /nájdené/.

V šesťlitrovej trojhrdlej banke sa suspenduje 607 g Kremeliny BOC-C11-C3 v 2 litroch mety Iénch1 or idu a 69 ml pyridínu. Prikvapká sa 530 ml d i mety 1okt y 1 ch 1órs i 1anu, potom sa reakčná zmes sa mieša 16 hodín pri teplote okolo 20 °C. Získaná pevná látka sa odfiltruje a premyje postupne dva razy po 1 litri mety 1énch1 or idu, dva razy po 1 litri metanolu, dva razy po 1 litri tetrahydrofuránu, dva razy po 1 litri metylénchloridu a dva razy po 1 litri dietyléteru a potom sa vysuší pri zníženom tlaku pri teplote okolo 20 °C. Získa sa tak 712 g kremeliny, označovanej názvom Kremelina BOC-Cii-Cs-OSi/CH 3/2-/CH2/7 C H 3, v podobe bieleho prášku, ktorého štruktúru potvrdzuje infračervené spektrum a ktorého elementárna analýza je: C = 12,1%; H = 2,4%; N = 1,0% /nájdené/.

V šesťlitrovej trojhrdlej banke sa suspenduje 711 g Kremeliny BOC-C11-C3-0-Si/CH3/a/CH₂/7CH3 v 2200 ml šesťpercentného /obj./ roztoku kyseliny trifluóroctovej v metylénchloride. Reakčná zmes sa mieša 5 hodín pri teplote okolo 20 °C.

Kremelina sa odfiltruje a premyje postupne dva razy po 1 litri metylénchloridu, dva razy po 1 litri zmesi metylénchloridu s d i izopropy1ety1amínom /70 : 30 obj./, 1 litrom metylénchloridu, dva razy po 1 litri tetrahydrofuránu, dva razy po 1 litri metanolu a dva razy po 1 litri dietyléteru, potom sa vysuší pri zníženom tlaku pri teplote okolo 50 °C. Takto premytá a vysušená kremelina sa opäť suspenduje v 2 litroch šesťper1 1 centného /obj./ roztoku kyseliny tri fluór octovej v metylénchloride.

pri teplote okolo 20 °C. premyje dva razy po 1,5

Reakčná zmes sa mieša 16 hodín Kremelina sa odfiltruje a postupne litra metylénchloridu, dva razy po 1 litri zmesi metylénchloridu s d i i zopropy 1 ety 1 amí norn /70 ktorého elemen/nájdené/.

obj./, 1,5 litrom metylénchloridu, dva razy po 2 litroch tetrahydrofuránu, dva razy po 2 litroch metanolu a dva razy po 2 litroch dietyléteru, potom sa vysuší pri zníženom tlaku a pri teplote okolo 50 °C. Získa sa tak 607 g kremeliny, označovanej názvom Kremelina C i i-C3-O-S i/CH 3/2/CH c/7 CH 3, v podobe bieleho prášku, ktorého štruktúru potvrdzuje infračervené spektrum a tárna analýza je: C = 8,8%; H = 1,7%; N = 1,3%

Vo stvorí itrovej trojhrdlej banke sa suspenduje 400 g Kre meliny C 11-Cs-O-Si/CH₃/2/CH2/7CH3 v 1 800 ml dimety1 formämidu. Pridá sa 42 g 3,5-di n itrobenzoy1-D-feny1 g 1ycínu a 30 g 2-etoxy- 1 -etoxykarbony 1 - 1,2-dihydroch i no 1 ínu a reakčná zmes sa mieša 16 hodín pri teplote okolo 20 °C. Kremelina sa odfiltruje a postupne premyje dva razy po 1 litri metylénchloridu, dva razy po 1 litri tetrahydrofuránu, dva razy po 1 litri metanolu a dva razy po 1 litri dietyléteru. Takto premytá kremelina sa opäť suspenduje v 2 litroch d i mety 1 formám i d u, pridá sa 30 g 2-etoxy-1-etoxykarbony 1 - 1,2-dihydroch i no 1 í n u a 42 g 3,5-dinitrobenzoyl-D-fenylglycínu a reakčná zmes sa mieša 5 hodín pri teplote okolo 20 °C. Kremelina sa odfiltruje, postupne premyje dva razy po 1 litri dimety1 formamidu, dva razy po 1 litri metanolu a dva razy po 1 litri dietyléteru a vysuší pri zníženom tlaku pri teplote okolo 140 °C tak 434 g kremeliny, označovanej názvom Kremelina DNS-D-Phg-C 1 i-C 3-0-S i/CH 3/2/CH 2/7 CH 3, v podobe bieleho prášku, ktorého štruktúru potvrdzuje infračervené spektrum a ktorého elementárna analýza je: C = 12,3%; H = 1,8%; N = 2,1% /nájdené/.

Vo štvor1 itrovej trojhrdlej banke sa suspenduje 434 g Kremeliny DNB-D-Phg-C11-Cs-O-Si/CHs/s/CHc/7CH₃ v 1,3 litra metylénchloridu, pridá sa 100 ml d i mety 1okty 1metoxys i 1 anu a reakčná zmes sa mieša 54 hodín pri teplote okolo 20 °C. Krepotom sa Získa sa

2 melina sa odfiltruje a postupne premyje dva razy po 1 litri metylénchloridu, dva razy po 1 litri metanolu dva razy po 1 litri tetrahydrofuránu a dva razy po 1 litri metylénchloridu, potom sa vysuší pri zníženom tlaku pri teplote okolo 140 °C. Získa sa tak 425 g kremeliny, označovanej názvom Kremelina DNB-D-Phg-C i-t - C3-O-S i/CH 3/a/CH 2/7 CH s r eokty l ovaná v podobe bieleho prášku, ktorého štruktúru potvrdzuje infračervené spektrum a ktorého elementárna analýza je: C = 12,7%; H = 1,9%; N = 2,0% /nájdené/.

Vo stvor 1 i trove j trojhrdlej banke sa suspenduje 425 g Kremeliny DNB-D-Phg-Ci1-C3-O-SÍ/CH3/2/CH2/7CH3 reoktylovanej v 1,3 litra metylénchloridu. Prikvapká sa 545 ml trimety1 s i 1 y 1 i m idazo 1 u a reakčná zmes sa mieša 15 hodín pri teplote okolo 20 °C. Získaná pevná látka sa odfiltruje a postupne premyje dva razy po 1 litri tetrahydrofuránu, dva razy po 1 litri metanolu, dva razy po 1 litri acetónu a dva razy po 1 litri metylénchloridu, potom sa vysuší pri zníženom tlaku pri teplote okolo 20 °C. Získa sa tak 431 g kremeliny, označovanej názvom Kremelina DNB-D-Phg-C11-C3-Q-SÍ/CH3/2/CH2/7CH3 v podobe bieleho prášku, ktorého štruktúru potvrdzuje infračervené spektrum a ktorého elementárna analýza je: C - 13,7%; H = 2,2%; N = 2,0% /nájdené/.

Anhydrid kyseliny 11-N-terc.-butoxykarbonylaminoundekanovej je možné pripraviť takto:

K roztoku 30,1 g kyseliny 11-N-terc.-butoxykar bony 1 am inoundekanovej v 480 ml octanu etylnatého, udržiavanom pri teplote okolo 5 ⁰C, sa pridá v priebehu 10 minút roztok 10,63 g Ν,Ν-dicyklohexylkarbodiimidu v 120 ml octanu etylnatého. Reakčná zmes sa mieša 1 hodinu pri teplote okolo 5 °C, potom 16 hodín pri teplote okolo 20 °C. Zrazenina sa odfiltruje a premyje 30 ml octanu etylnatého. Filtrát sa odparí pri zníženom tlaku pri 30 ⁰C. Odparok sa vysuší vo vákuu pri teplote okolo 30 °C. Získa sa 31 g anhydridu kyseliny 11-N-terc.-butoxykarbonyl am i noundekano vej s teplotou topenia 58 °C.

Kyselinu 11-N-terc.-butoxykarbonylaminoundekanovu je možné pripraviť metódou, ktorú opísal J.T. Spar row, J. Org. Chem.

3

41, 1350 /1976/.

Roztok 140 mg 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,2 0-epoxy-1-hydroxy-10beta-/(3-dimetylaminopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo-7beta-/2,2,2-trichlóretoxy/karbonyloxy-11-taxén-13alfa-ylu, vyššie získaného, v zmesi 8 ml metanolu s 8 ml kyseliny octovej sa zahreje pri miešaní a v atmosfére argónu na teplotu okolo 60 °C a pridá sa 1,2 g zinkového prachu. Reakčná zmes sa potom mieša 1,5 hodiny pri teplote 60 °C, ochladí sa na teplotu okolo 20 °C a sfiltruje cez sklenný filter s vrstvou celitu. Filter sa premyje trikrát po 5 metylénchloridu a spojené filtráty sa odparia do sucha pri zníženom tlaku /2,7 kPa/ pri teplote okolo 40 °C.

K odparku sa pridá 5 ml vody a 5 ml octanu etylnatého. Vodná fáza sa oddelí a extrahuje ešte trikrát po 5 ml octanu etylnatého. Organické podiely sa spoja, vysušia nad síranom horečnatým, sfiltrujú a odparia pri zníženom tlaku /2,7 kPa/ pri 40 °C. Získa sa 19 mg 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta, 20-epoxy-1,7beta-dihydroxy-10beta-/(3-dimetylaminopropyl)karbamoy1oxy/-9-oxo-11-taxén-1 3a1 fa-y1 u, v podobe bielej peny, ktorá má tieto charakteristiky spektrum NMR /400 MHz; CDC1₃/:

delta /ppm/	: 1,30 /2 S , 3H	každý : -CHs 16 a 17/;	1,38 /s, 9H :
-C/CHs/a/;	1,70 /s,	3H : -	CHa	18 alebo 19/; 1,90	/s ,	3H : -CHs
18 alebo 19/; 1,90	[ m , 2 H	: -	NHCHíCHcCHsN/CHs/s]	; 2,2 až 2,90
[m, 15H : -	/CH₂/-6 ,	-CHc-	14,	-ch ₌ n/ch₃/=, -m/ch	3 / =	, -COCHs];
3,2 a 3,4	[2m, 2H :	-NHCH	aCH =	CH₂N/CH₃/=]; 3,8 /d,	1H : -H3/;
4,2 a 4,34	/AB, 2H	: -CH = -	20/; 4,45 /d d, 1H	í	J = 1 1 a 7 :
-H7/; 4,66	/bs, 1H	: -H2	'/;	5,0 /b d, 1H, J = 9		-H 5/; 5,3
/b s , 1 H : -	H 3'/; 5,	6 [bd,	1 H	: -NHCH=CH=CHsN/CH₃	/d	; 5,68 /D,
1H, J=7 :	-H 2/; 6,25 /m,	2H :	-H 13 a -H 10/;	6,4	[ b s , 1 H :

-NHCOOC/CH₃/₃]; 7,2 až 7,4 /mt, 5H : -C_eH₅ 3'/; 7,5 [t, 2H, J=7,5 : -0C0CeHs/-H 3 a -H 5/]; 7,64 [t, 1H : -0C0CeHs/-H 4/]; 8,12 [d, 2H : -OCOCeHs/ -H2 a -H6/].

Roztok 59 mg 3-1e r c.-b utoxykarbony1 am i no-2 - h yd r o x y-3-f e1 4

I nylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,2 0-epoxy-1-hydroxy-10beta-/(3-dimetylaminopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo-10beta-/2,2,2-trichlóretoxy/karbamoyloxy-11-taxén-13alfa-ylu, získaného vyššie, v zmesi 6 ml metanolu a 6 ml kyseliny octovej, sa zahreje pri miešaní a v atmosfére argónu na teplotu okolo 60 °0 a pridá sa 1,2 g zinkového prachu. Reakčná zmes sa potom mieša 1,5 hodiny pri teplote 60 °C, ochladí sa na teplotu okolo 20 °C a sfiltruje cez sklenný filter s vrstvou celitu. Filter sa premyje tri razy po 5 ml mety 1énch 1 or idu a spojené filtráty sa odparia k suchu pri zníženom tlaku /2,7 kPa/ pri teplote okolo 40 °C. K odparku sa pridá 5 ml vody a 5 ml octanu etylnatého. Vodná fáza sa oddelí a extrahuje ešte tri razy po 5 ml octanu etylnatého. Organické fázy sa spoja, vysušia nad síranom horečnatým, sfiltrujú a odparia do sucha pri zníženom tlaku /2,7 kPa/ pri 40 °C. Získa sa 9 mg 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta, 20-epoxy-1 , 10beta-dihydroxy--7beta-/(3-dimety1 am inopropy1)karbamoy1oxy/-9-oxo-11-taxén-13a 1 fa-y 1 u v podobe bielej peny, ktorá má tieto charakteristiky:

spektrum	NMR	/4 0 0	MHz ;	CDC 1	3 /:
delta /ppm/ :	1 , 30	/2S ,	3H	každý :	-CH₃ 16 a 17/;	1,36 /s	, 9H
: -C/CH₃	/a /;	1 ,82	/S ,	3H :	-C H ₃ 18 alebo 19/; 1,	9 5 /s ,	3H :
-CH₃ 18	alebo	19/;	1 ,88	[m	, 2H : -	NHCH₂CH=CH=N/CH	3/- ] ; 2,	2 až
2,70 [m	, 15H		-/CH =	/-6,	-CH₌ -	14, -CH2N/CH3/	=, -N/CH	3 /=,
-COCH₃];	3,15	a 3 ,	3 [2m	, 2H	: -NHCH	₂CHcCH₂N/CH₃/₃]	; 4,0 /d, 1H
: -H 3/;	4,2	a 4,38 /AB	, 2H	: -CH = -	20/; 4,68 /bs,	1 H ; - H	2 '/
4,96 /bd	, 1H ,	J = 9	Hz :	-H 5	/; 5,3	/bs, 1H : -H 3'	/; 5,40	/dd,
1H, J= 11 a 7	: -H	7/;	5 , 5	[s + bs,	2H : -H 10 a -	NHCH₃CH=	CH₃-
N/CH₃/₂]	; 5,7	[d	+ bs,	2H	: -H 2	a -NHCOOC/CH3/3	]; 6,22	/bt,
1H : -H	13/;	7,2	až 7	,4 /mt, 5H	: -CeHs 3'/; 7	,53 [t,	2H,
J = 7 , 5 :	-OCOCeHs/	-H 3	a	-H 5/];	7,65 [t, 1 H :	“OCOCeH	s/-H

4/]; 8,12 [d, 2H : -OCOCeHs -H2 a -H6/].

Príklad 3

5

Analogickým postupom ako v príklade 2, avšak s východiskovým množstvom 6,95 g 31 e r c.-butoxykar bony1 am iηο-2-hyd roxy3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta-20epoxy-1-hydroxy-9-oxo-7beta,10beta-bis-/2,2,2-trichlóretoxy/karbony 1oxy-11-taxén-1 3a1 fa-y 1 u a 0,94 g 3-/4-mety1 p iper a z i ny1/propy1amínu, sa po čistení vysoko výkonnou kvapalinovou chromatografiou, pri použití zmesi metano1-etano1-hexán-metylénchlorid /10 : 10 : 80 : 2 ob j./ ako mobilná fáza, získa:

1,37 g 3-terc-butoxykar bony 1 am i no-2-hyd roxy-3-feny1 p ropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-10beta-{/3-(4-metylpiperazinyl)propyl/karbamoyloxy}-9-oxo-7beta-/2,2,2-1r i chlóretoxy/kar bonyloxy-11-taxén-13alfaylu v podobe bielej peny a

2,17 g 3-terc.-butoxykar bony 1 am ino-2-hydroxy-3-feny1propionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-7beta-{/3-(4-metylpiperazinyl)propyl/karbamoyloxy}-9-oxo-10beta-/2,2,2-trichlóretoxy/karbonyloxy-11-taxén-13alfa-ylu v podobe bielej peny.

Získaný 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionát-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-10beta-{/3-(4-mety1piperaziny1)propyl/karbamoyloxy}-9-oxo-7beta-/2,2,2-trichlóretoxy/karbonyloxy-11-taxén-13alfa-ylu sa prevedie pôsobením zinku v zmesi metanolu s kyselinou octovou v 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionát-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1,7beta-dihydroxy-10beta-{/3-(4-metylpiperazinyl)propyl/karbamoyloxy}9-oxo-11taxén-13alfa-ylu tak, ako je to opísané v príklade 2 pre 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionát-/2R, 3S/4-acetoxy-2alfa-benzoy1oxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-10beta-/(3-dimetylaminopropyl)karbamoyloxy-9-oxo-7beta-/2,2,2-trichlóretoxy/karbonyloxy-11-taxén-13alfa-ylu.

Získaný produkt má tieto charakteristiky: spektrum NMR /400 MHz; CDCls/:

delta /ppm/: 1,18 /s, 3H : -CH₃ 16 alebo 17/; 1,27 /s, 3H :

-CHa 16 alebo 17/; 1,33 /s, 9H : -CH3/3/; 1,7 /s, 3H : -CH₃

19/; 1,6 až 1,95 /mt, 3H : -OCONHCHz C H _s CH_εN= a -/CH/-H 6/;

1 , 88	/s ,	3H : -CHs	18/; 2,2	až	2 , 7	/mt, 13H : -CH₂N/CH	₂ch₂	/-
cNCH	3 , -	CH₂- 14 a	-/C H/-H	6/;	2,2	9 /s, 3H : =NCH₃/;	2,4	/s ,
3H :	-COCHs/; 3,2	až 3,45	/mt, 2 H	: -OCONHC H₂CH₂CH s	N=/;	3 , 8
/d,	1H,	J=7 : -H 3/; 4,18	a	4,31	/2 d , 1H každý, J = 8	: -	ch₂-
20/;	4,44 /dd, 1H,	J = 11 a	7 :	-H	7/; 4,36 /mf, 1H :	-H	2'/;
4,97	/d	široký, 1H	, J = 1 0 :	-	H 5/;	5,27 /d široký, 1H, J	= 9,5
: -H	3 '	/-,5,4 /d,	1H, J =	9 , 5		NHCOOC/CHa/s/; 5,67	/d,	1 H ,
J = 7	: -H	2/; 6,20 /s, 1H :	-H	10/;	6,25 /mt, 1H : -H	13/;	7,0
/mf ,	1 H	: -NHCHsCH	₂CH₂N=/;	7 ,	25 až	7,45 /mt, 5H : -C	6 H 5	3 '/;
7,51	/t,	2H, J = 8 :	-OCOCsH	5 /~	H 3	a -H 5//; 7,62 /t,	1 H ,	J = 8
: -OCOCc	Hs/-H 4//;	8,13 /d	2H,	J = 8	: -0C0CsHs/-H 2 a H	6//

K roztoku 5 mg 3-terc.-butoxykarbony1 am iηο-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2-alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1,7beta-dihydroxy-10beta-{/3-(4-metylpiperazinyl)propy1/karbamoy1oxy}-9-oxo-11 -taxén-13a1 fa-y1 u, získaného vyššie, v 0,1 ml 0,1 N roztoku kyseliny chlorovodíkovej, sa pridá 0,2 ml destilovanej vody a roztok sa lyofilizuje. Získa sa 5 mg dihydrochloridu 3-terc.-butoxykarbony!amino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2-alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1,7beta-dihydroxy-10beta-{/3(4-metylpiperazinyl)propyl/karbamoy 1 oxy}-9-oxo-11 -taxén-13a1 fa-y1 u, ktorý má tieto charakteristiky:

spektrum NMR /400 MHz; D₂0 + Σ CDaCOOD/:

delta /ppm/: 0,88 /s, 3H : -CH₃ 16 alebo 17/; 0,93 /s, 3H : -CHs 16 alebo 17/; 1,09 /s, 9H : -C/CH3/3/; 1,4 /s, 3H : -CH₃19/; 1,4 až 1,9 /mt, 5H : -OCONHCH₂CH₂CH₂N=, -CH₂- 14 a -/CH₂/

-H 6/; 1,66 /s, 3H :	-CH₃ 18/;	2,09 /S, 3H : -COCH₃/; 2,32
/mt, 1H : -/CH/- H 6/;	2,81 /s,	3H : -NCHa/; 2,9	až 3,2 a 3,4
až 3,55 /2 mt resp.	4H a 9H :	-OCONHCH₂CH₂CH₂N/CH₂CH₂/₂NCH₃
a -H 3/; 4,01 /mt, 3H	: -CH₂ 20	a -H 7/; 4,36 /d,	1H, J = 6 , 6 HZ
: -H 2'/; 4,6 až 4,8	/-H 3' :	žiadny signál pre	prehlušenie
signálom rozpúšťadla/;	4,84 /d	široký, 1H, J = 9 :	-H 5/; 5,34
/d, 1H, J-7 : -H 2/;	5,82 /t,	1H, J=9 : -H 13/;	6,01 /s, 1H
: -H 10/; 7,03 /t, 1H	, J=8 : -	CeHs 3'/-H 4//; 7	,13 /d, 2H,
J=8 : -CeH_s 3'/-H 2 a	H 6//;	7,2 /t, 2 H, J = 8 :	-C₆H_s 3'/-H
3 a -H 5//; 7,38 /t	2H, J=8 :	-0C0CsHs/-H 3 a	H 5//; 7,51

7 /t, 1H, J=8 : -OCOC₆H₅/-H 4//; 7,8 /d, 2H, J=8 : -OCOC©Hs/-H a -H 6//.

Získaný 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionát-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoy1oxy-5bet.a,20-epoxy-1-hydroxy-7beta-{/3-(4-metylpiperazinyl)propyl/karbamoyloxy}-9-oxo-10beta-/2,2,2-trich1óretoxy/karbonyloxy-11-taxén-13alfa-ylu sa prevedie pôsobením zinku v zmesi metanolu a kyseliny octovej, a to v 3-terc.-butoxykarbony lamíno-2-hydroxy-3-feny1propionát-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1,10beta-dihydroxy-7beta-{/3-(4-metylpiperazinyl)propyl/karbamoyloxy}-9-oxo-11-taxén-13a1 fa-y1 u, ako je to opísané v príklade 2 pre prípravu 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-10beta-/(3-dimetylaminopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo-7beta-/2,2,2-trichlóretoxy/karbony1oxy-11-taxén-13alfa-ylu.

Získaný produkt má tieto charakteristiky: optická otáčavosť: /a/D²° = -14° /c = 0,41; metanol/; spektrum NMR /400 MHz; CDC1₃/:

delta /ppm/ ; 1,13 /s, 3H : -CH₃ 16 alebo 17/; 1,24 /s, 3H :

-CH₃ 16 alebo 17/; 1,37 /s, 9H : -C/CH₃/₃/; 1,6 až 2,0 /mt, 3H : -OCONHCH₂CH₂CH₂N= a -/CH/-H 6; 1,84 /s, 3H : -CH₃ 19/; 1,92 /s, 3H : -CH₃ 18/; 2,3 /d, 2H, J=8,5 : -CH₂- 14/; 2,33 /s, 6H : =NCH₃ a -COCH₃/; 2,3 až 2,8 /mt, 11H : -CH₂N/CH₂ÓH₂/=NCH₃ a

-/CH/- H ô/; 3,14 a 3,3 /2 mt, 1H žiadny : -OCONHCH₂CH₂CH₂N=/; 4,01 /d, 1H, J = 7 : -H 3/; 4,21 a 4,33 /2 d, 1H žiadny, J = 9 :

-CH₂- 20/; 4,63 /s široký, 1H : -H 2'/; 4,94 /d široký, 1H,

J=10 : -H 5/; 5,27 /d široký, 1H, J = 9,5 : -H 3'/; 5,38 /dd, 1H, J=11 a 7 : -H 7/; 5,44 /d, 1H, J=9,5 : -NHCOOC/CH₃/₃/;

5,51 /s, 1H : -H 10/; 5,68 /d, 1H, J=7 : -H 2/; 6,09 /mf , 1H : -NHCH₂CH₂CH₂N=/; 6,21 /t široký, 1H, J=8,5 : -H 13/; 7,25 až

7,45 /mt, 5H : -CeHs 3'/; 7,50 /t, 2H, J=8 : -OCOC₆H₅/-H 3 a -H 5//; 7,62 /t, 1H, J=8 : -0C0C₆Hs/-H 4//; 8,10 /d, 2H, J=8 : -0C0CeHs/-H 2 a -H 6//.

K roztoku 5 mg 3-terc.-butoxykarbon y 1 am i n o-2 - h y d roxy-3 fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1,10beta-dihydroxy-7beta-{/3-(4-metylpiperazinyl)p r o p y 1/1 8 karbamoyloxy}-9-oxo-11-taxén-13alfa-ylu, získaného vyššie, v 0,1 ml 0,1 N roztoku kyseliny chlorovodíkovej, sa pridá 0,3 ml destilovanej vody a roztok sa lyofilizuje. Získa sa 5 mg d i hydrochloridu 3-terc.-butoxykarbonylaniino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1,10beta-dihydroxy-7beta-{/3-(4-metylpiperaz inyl)propyl/karbamoy1oxy}-9-oxo-11-taxén-13a1 fa-y1 u, ktorý má tieto charakteristiky:

spektrum NMR /400 MHz; D=0 + Σ CDsCOOD/:

delta /ppm/ : 0,82 /s, 3H : -CH₃ 16 alebo 17/; 0,92 /s, 3H :

-CH₃ 16 alebo	17/; 1,1 /s, 9H :	-C/CH3/3/; 1,	4 až 1,8 /mt, 5H
: -OCONHCH2CH2	CH2N=, -CH2- 14 a	-/CH/-H 6 ; 1,48 /s , 3H : -CHs
19/; 1,6 /s,	3H : -CHs 18/; 2,	1 /s, COCHs/	2,28 /m t, 1H :
-/CH/-H 6; 2,78 /s, 3H : -NCH3/3	/; 2,8 až 3,1	a 3,42 /mt a mf,
resp. 4H a 8H	: -0CONHCH 2 CH 2 CH 2	N/CH2CH2/2NCH	3/; 3,57 /d, 1H,
J = 7 : -H 3/;	4,01 a 4,1 /2 d,	1H každý , J = 8	: -CH2- 20 a -H
7/; 4,3 až 4,	4 /-H 2' : signál	maskovaný pásom rozpúšťadla/;
4,73 /d, 1H,	J = 7 : -H 3 ' ; 4,85	/d široký,	1H, J=9 : -H 5/;
5,02 /m t, 1H :	-H 7/; 5,24 /s,	1H : -H 10/;	5,32 /d, 1H, J=7
: -H 2/; 5,82	/t , 1 H , J - 9 : - H	13/; 7,02 /t,	1H, J=8 : -CeHs
3'/H 4//; 7,	12 /d, 2H, J=8 :	— CeHs 3'/-H	2 a -H 6//; 7,22
/t, 2H, J=8	: -CeHs 3'/-H 3	a -H 5//; 7,	41 /t, 2H, J=8 :
-0C0CeHs/-H 3	a -H 5//; 7,52 /t	, 1H, J=8 -0C0CeH_s/-H 4//; 7,8
/d, 2H, J=8 :	-0C0CeHs/-H 2 a -H	6//.

Príklad 4

Analogickým postupom ako v príklade 2, ale s použitím 6,95 g 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-9-oxo-7beta,10beta-bis-/2,2,2-trichlóretoxy/karbonyloxy-ll-taxén- 1 3a 1 fa-y1 u a 0,88 ml 3-morfo 1 ínopropy1amínu, sa po čistení vysoko výkonnou kvapalinovou chromatografiou, s použitím zmesi metano1-izopropy1 a 1 koho 1-hexán /20 : 5 : 7 5 obj./ ako mobilná fáza, získa

1,53 g 3-1e r c.-b utoxy k a r bony 1 am i no-2 - h yd roxy-3 - feny 1 pro1 9 pionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2-alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-10beta-/(3-morfolínopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo-7beta-/2,2,2-tri ch 1óretoxy/karbony 1oxy-11-taxén-13a1 fa-y1 u v podobe bielej peny,

1,35 g 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-7beta-/(3-morfolínopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo-10beta-/2,2,2-tri ch 1óretoxy/kar bony 1oxy-11-taxén-13a1 fa-y1 u v podobe bielej peny.

Zlúčenina 3-terc.-butoxykarbonylamino-2--hydroxy-3-fenylpropíonát-/2R,3S/ 4-acetoxy-2-alfa-benzoyloxy-5-beta,20-epoxy-1-hydroxy-10beta-/(3-morfolínopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo7beta-/2,2,2-trichlóretoxy/karbonyloxy-11-taxén-13alfa-yl sa pôsobením zinku v zmesi metanolu s kyselinou octovou prevádza v 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-feriylpropionát-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1,7beta-dihydroxy-10beta-/(3-morfolínopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo-11-taxén-13alfa-ylu tak, ako je to opísané v príklade 2 pre 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionát-/2R,3S/ 4 - a cetoxy-2a^fa-benzoy^oxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-10beta-/(3-d i mety 1 am i nopropy1)karbamoyloxy/-9-oxo-7beta-/2,2,2-tr i ch 1óretoxy/k arbonyloxy-ll-taxén-i3alfa-ylu.

Získaný produkt má tieto charakteristiky: spektrum NMR /400 MHz; CDCla/:

delta /ppm/ : 1,15 /s, 3H : -CH₃ 15 alebo 17/; 1,28 /s, 3H :

-CH₃ 16 alebo 17/; 1,35 /s, 9H : -C/CH₃/₃/; 1,68 /s, 3H : -CH₃ 19/; 1,65 až 1,9 /mt, 2H : -OCONHCH₂CH₂CH₂N=/; 1,88 /s, 3H : -CH₃ 18/; 1,9 /mt, 1H : -/CH/- H 6/; 2,28 /mt, 2H : -CHc- 14/; 2,4 /s, 3H : -COCH₃/; 2,45 až 2,75 /mt, 7H : -CH₂N/CH₂CH₂/₂O a -/CH/- H 6/; 3,28 a 3,42 /2 mt, 1H každý : -OCONHCH₂CH₂CH₂N=/; 3,8 /mt, 5H : -CH₂N/CH₂CH₂/₂0 a -H 3/;

4,18 a 4,31 /2d, 1H každý, J = 8,5 : -CH₂-20/; 4,44 /dd, 1H,

J = 11 a 7	: -H	7/; 4,63 /s	široký, 1H : -H 2'/;	4,98 /d široký,
1 H , J= 10	: -H	5/; 5,27 /d	široký, 1H, J = 9 :	-H 3'/; 5,41	/d,
1H, J=9 :	-NHCOOC/CH₃/₃/;	5,67 /d, 1H, J=7 :	-H 2/; 6,21	/s ,
1H : -H	10/;	6,25 /mt, 1H	: -H 13/; 6,58 /t	široký, 1 H,	J = 5

: -NHC H 2 CH 2 CH 2 N=/; 7,25	až 7,45 /rn t, 5H : -C e	H 5 3	/; 7,52 /t,
2H, J=8 : -OCOCeHs /-H	3 a -H 5//; 7,25 až	7 ,45	/mt , 5H
-CeHs 3'/; 7,52 /t, 2 H,	, J=3 : -OCOCeHs/-H 3	a -H	5//; 7,62
/t, 1H, J=8 : -OCOCsHs	/-H 4//; 8,12 /d, 2H,	Jz8	: -OCOCeHs
/-H 2 a -H 6//.

Zlúčenina 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionát-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-7beta-/(3-morfolínopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo-10-beta-/2,2,2-tri ch 1óretoxy/karbony1oxy-11-taxén-13a1 fa-y1 u sa prevádza v 3-terc.-butoxykar bony 1 am i no-2-hyd roxy-3-feny1propionát-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoy1oxy-5'beta, 20-epoxy-1 , 10betadihydroxy-7beta-/(3-morfolínopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo-11-taxén-13a1 fa-y 1 u pôsobením zinku v zmesi metanolu s kyselinou octovou, ako je opísané v príklade 2 pre 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionát-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-10beta-/(3-dimetylaminopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo-7beta-/2,2,2-trichlóretoxy/karbonyloxy-11-taxén-13alfa-ylu.

Získaný produkt má tieto charakteristiky:
spektrum NMR /400 MHz;	CDCla/:
delta /ppm/ : 1,11 /s	, 3H : -CH₃ 16 alebo 17/; 1 ,	24 /s, 3H :
-CH₃ 16 alebo 17/; 1,37	/s, 9H : -C/CH3/3/; 1 , 6 až	1 , 9 /mt, 2H
: -OCONHCH=CHoCH=N=/; 1	,81 /s, 3H -CH₃ 19/; 1 , 9	3 /s, 3 H :
-CH₃ 18/; 1,93 /mt, 1H	: -/CH/-H 6/; 2,3 /d, 2H,	J=8 : -CH₂-
14/; 2,4 /S, 3H : -COCH	3/; 2,4 až 2,7 /mt, 7H : -CH	-N/CHzCHc/-
= 0 a -/CH/-H 6/; 3,12 a	3,31 /2mt 1H každý: -OCONHCH₂CH_SCH₂N=/;

3,5 /mf, 1H : -OH 2'/; 3,8 /mf, 4H : -C H₂N/CH = CH-0/; 4,0 /d, 1H J=7 : -H 3/; 4,2 a 4,33 /2d, 1H každý, J=8,5 : -CH=- 20/; 4,64 /mf , 1H : -H 2'/; 4,94 /d, široký, 1H, J = 9,5 : -H 5/; 5,28 /d široký, 1H, J=9 : -H 3'/; 5,38 /dd_; 1H, J=10 a 7 : -H 7/; 5,45 /d široký, 1H, J=9 : -NHCOOC/CH₃/₃/; 5,51 /s, 1H : -H 10/; 5,68 /d, 1H, J=7 : -H 2/; 5,8 /t, 1H, J=5 : -NHCH2CHzCHsN:/; 6,21 /t, 1H, J=8 : -H 13/; 7,25 až 7,45 /mt, 5H : -C_eHs 3'/; 7,51 /t, 2H, J=8 : -OCOC_eHs/-H 3 a -H 5//; 7,62 /t, 1H, J=8 : -0C0CeHs/-H 4//; 8,12 /d, 2H, J=S : -0C0CeHs/-H a -H Q//.

1

Príklad 5 zníženom tlaku /2,7 kPa/ pr ny, ktorá sa /0,12 až 0,15 /elučné činidlo raju sa frakcie

K roztoku 0,29 g 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-9-oxo-7beta,10beta-bis-/2,2,2-tri chlóretoxy/karbony 1oxy-11 -taxén-13a1 fa-y1 u v 100 ml acetón itri 1 u , sa v atmosfére argónu pridá 0,31 ml 3-di mety 1 am inopropy1 am í n u . Reakčná zmes sa zahrieva pri miešaní 3 hodiny na teplotu okolo 60 °C, ochladí sa na teplotu okolo 20 °C a odparí do sucha pri 40 ° C. Získa sa 0,32 g bielej p e čistí chromatografiou na 30 mm/, umiestneného v kolóne mety 1 énch1 or id-metano1, 95 po 10 ml. Frakcie 7 až 15 sa spoja a odparia do sucha pri zníženom tlaku /2,7 KPa/ pri teplote okolo 40 °C. Získa sa 0,12 g 3-terc.-butoxykarbony 1 am iηο-2-hydroxy-3-feny 1propionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-7beta,10beta-bis-/(3-dimetylaminopropyl)karbamoylg oxidu hlinitého o pri emere 1,5 cm 5 obj./ a odobeoxy/-9-oxo-11-taxén-13alfa-ylu tieto charakteristiky:

v podobe bielej peny, ktorá má optická otáčavosť: /a/D^=o = -26° /c - 0,75; metanol/; spektrum NMR /400 MHz; CDC1₃/:

delta /ppm/ : 1,17 /s, 3H : -CH₃ 16 alebo 17/; 1,20 /s, 3H :

-CH₃ 16 alebo 17/;	1,36	/s, 9 H :	: C/CHs	/3/;	1,6 až	1 ,	8 /mt,	4H
: -NHCH2CH2	CH2N/CH	3 /2 /;	1,78 /s,	, 3H :	-CH₃	19/; 1 ,	,83	/mt,	1H :
-/CH/-H 6/;	1 , 96	/s , 3H	: -CH₃	13/; 2	,25	/S , 6H		-N/CH3	/=/;
2,36 /s, 3H	: -COCHa/; 2	,2 až 2 .	,6 /m t,	6H	: -CH2-	1 4	a -CH	2N/-
CH3/2/; 2,	66 /mt,	1H :	-/CH/-H	6/; 3	,24	/mt, 4 H		-NHCH2	CHs-
CH2N/CH3/2/	; 3,92	/d, 1H	, J = 7 :	-H 3/;	4,16 a 4,3	/2d, 1H	kaž-

dý, J=8 : -CH₂- 20/; 4,62 /s široký, 1H : -H 2'/; 4,93 /d, 1H, J=9 : -H 5/; 5,27 /mt, 1H : -H 3'; 5,4 /mt, 1H : -H 7/; 5,48 a 5,76 /2 mt, 1H každý : -NHCH2CH2CH2N/CH3/2/; 5,55 /d široký,

1H : NHCOOC/CH3/3/; 5,64 /d, 1H, J=7 : -H 2/; 6,16 /t široký,

1H, J=9 : -H 13/; 6,32 /s, 1H : -H 10; 7,3 až 7,5 /mt, 5H : ’CeHs 3'/; 7,5 /t, 2H, J=7,5 : -OCOCeH₅/-H 3 a H 5//; 7,51 /t, 1H, J=7,5 : -OCOCeH₅/-H 4//; 3,1 /d, 2H, J=7,5 : -OCOCeHs/-Η 2 a -Η 6//.

K roztoku 10,6 mg 3-terc .-butoxykarbony 1 am ino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-7beta,10beta-bis-/(3-dimetylaminopropyl) karbamoy1oxy/-9-oxo-11-taxén-13a1 fa-y1 u , získaného vyššie, v 0,2 ml 0,1 N roztoku kyseliny chlorovodíkovej, sa pridá 0,4 ml destilovanej vody a vzniknutý roztok sa lyofilizuje. Získa sa tak 10 mg dihydrochloridu 3-1e r c.-b utox y k a r bon y 1 am i no-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa--benzoyloxy-5beta,-2Q-epoxy-1-hydroxy-7beta,10beta-bis-/(3-dimetylaminopropyl) karbamoy1oxy/-9-oxo-11-taxén-13a1 fa-y1 u , ktorý má tieto charakteristiky:

spektrum NMR /400 MHz; D2O/CH3COOD, 90 : 10 obj./:

delta /ppm/ : 0,35 /s, 3H : -CH₃ 16 alebo 17/; 0,9 /s, 3H :

-CHs 16 alebo 17/; 1,10 /bs, 9H	: -	C/CHa	/3/;	1,5 /s,	3H : -CHs
19/; 1,6 až 1,8 /m, 10H : -CH₃	18,	-NHCH	2CH2	CH2N/CH3	/3/, -CHc-
14, -/CH/-H 6/; 2,10 /s, 3H ;	-COCH3/;	2,3	/m, 1H :	-/CH/- H
6 /; 2,65 /2s, 6H každý: -N/CH₃	Λ/;	2,8	až 3	,1 /vbm,	8H : -CH2
N/CH₃/2, -NHCH₂CH₂CH₂N/CH₃/₂/;	3 , 6	/bd ,	1H :	-H 3/;	4 a 4,15
/2d, AB, 2H : -CH₂- 20/; 4,40 /bd,	1 H :	-H2 '	/; 4,70	/vbs, 1H :
-H 3'/; 4,90 /bd, 1H : -H 5/;	5,	10 /b d d ,	1H : -H	7/; 5,35
/bd, 1H : -H2'; 4,70 /vbs, 1H		H3 ' ;	4,90	/bd , 1 H	: Ή 5/;
5,10/bdd, 1H : -H 7/; 5,35 /b d,	1H :	-H2/; 5,8	/bt, 1H :
-H 13; 6,05 /s, 1 H : -H 1 Q; 7,0 až	7 ,25	/m t., 5 H :	- C e H 5 3 /;
7,4 /t, 2H, J = 7,5 : -OCOC₆H_S/-H	3	a -H	5//;	7,5 /t,	1H , J = 7 , 5
: -OCOC₆H₅/-H 4//; 7,80 /d,	2H,	J = 7 , 5	: -OCOC	e H s /— H 2 a
H δ//.
Príklad 6
Analogickým postupom ako v	príklade	5,	ale s	použi i t í m

1,18 g 3-1erc.-b utoxy karbony1 am i no-2-h yd roxy-3-feny1propi onátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,-20epoxy-1-hydroxy-9-oxo-7beta, 10beta-bis-/2,2,2-trichlóretoxy/karbonyloxy-11-taxén-13alfa-y1u a 1,6 g 3-/4-metylpiperazí no/-propylamínu sa získa 1,1 g 3-1erc.-butoxykarbony 1 am ino-2-hyd roxy-3-feny123 propionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxv-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-7beta,10beta-bis-{/3-(4-metylpiperazinyl)-propyl/karbamoy1oxy}-9-oxo-1 1-taxén-13a1 fa-y1 u v podobe bielej peny ktorá má tieto charakteristiky:

optická otáčavosť: /a/D²° = -22,9° /c = 0,51; metanol/; spektrum NMR /400 MHz; CDCls/:

delta /ppm/ : 1,24 /s, 3H -CH₃ 16 alebo 17/; 1,4 /s, 9H : -0C0NHCH₂CH2CH₂N=/; 1,83 /s, 3H : -CH

J=15, 11 a 2 : -/CH/-H 6/; 2,01 /s, 3H /mt, 31H

CH2N/CH2CH2/2NCH3,- COCH

-CH₃ 16 alebo 17/; 1,28 /s, 3H

-C/CHa/a/; 1,6 až 1,35 /mt 19/; 1,87 /ddd,

-CH3 18/; 2,3 až : -/CH/-H 6/; /d, 1H, J=7

3,15 a 3,45 /m t -H 3/; 4,21 a 4 , 4H 1H, 2,7 a -CH2- 14; 2,7 /mt, 1H 4H : -OCONHCH2CH 2 C H = N =/; 4,0 32 /2d, 1H každý, J=3 : -CH220/; 4,66 /d, 1H, J=2 : -H 2'/; 4,93 /d široký, 1H, J = 9 : -H

5/; 5,28 /mt, 1H /CH₃/₃/; 5,7 /d,

-H 3'/; 5,4 až 5,5 /mt, 2H : -H 7 a -NHCOOC1H, J=7 : -H 2/; 6,0 a 6,4 /2 mf , 1H každý : -NHCH₂CH₂CH2N=/; 6,21 /t, 1H, J-9

-H 10/; 7,3 až 7,5 /mt, 5H : -CeHs 3 -0C0CeHs/-H 3 a -H 5//; 7,64 : -H 13/; 6,4 /s, 1H :

/; 7,5 1 /t, 2H, J = 7,5 :

/t, 1H, J = 7 , 5 : -OCOC₆Hs/-H 4//;

8,12 /d, 2H, J = 7,5 : -OCOCeHs/-H 2 a -H 6//.

Roztok 0,35 g 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-7beta,10beta,-bis-{/3-(4-metylpiperazinyl. )propyl/karbamoyloxy}-9-oxo-11-taxén-13alfa-ylu, získaného vyššie, v 12 ml 0,1 N roztoku kyseliny chlorovodíkovej sa lyofi 1izuje. Získa sa tak 0,365 g tetrahydrochloridu 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-7beta,10beta-bis-{/3-(4-metylpiperazinyl)-propyl/karbamoyloxy}-9-oxo-11-taxén-13alfa-ylu, ktorý má tieto charakteristiky:

optická otáčavosť: /a/D²° = -22° /c = 0,41; metanol/;

spektrum NMR /400 MHz; D2O/:

delta /ppm/ : 1,1 /s, 3H	: -	CH₃ 16 alebo	17/;	1 , 14	/s , 3H
-CH₃ 16 alebo 17/; 1,36	/s ,	9H : -C/CHa	/3/;	1,72	a 1,92	/2 s
3H každý: CH₃ 18 a	CH3	19/; 1,65	až	2,05	/mt ,	7H
-0C0NHCH2CH2CH2N=,-CH2-	1 4	a -/C H/-H	6/;	2 , 38	/s ,	3H

-COCH	3 /;	2,55	/mt ,	1 H	: -CH/-H ô/;	2 ,92	a 2,94 /2, 6H
-nch₃	/; 3	,0 až	3,7	/m t	24H : -OCONHCH	2CH2C	H ·.? N/CH 2 C H 2 /2 NC H 3	/;
3,79	/d,	1H ,	J = 7 :	-H	3/; 4,23 a 4,4	/2d,	1H každý, J = 9
-CH₃-	20/	; 4,6	7 /d,	1H,	J = 7 : -H 3/;
	4,	23 a	4,4/2	d,	1H každý, J = 9 :	-CH =	- 20/; 4,67 /d,	1 H
J = 7 :	-H	2'/;	4,98	/m f	1H : -H 3'/; 5	, 16	/0 široký, 1H, J	= 9
: -H	5/;	5 , 33	/dd,	1H,	J = 11 a 7 : -H	7/;	5,58 /d, 1H, J	= 7
: -H	2/;	6 ,07	/t, 1H		= 9 : -H 13/; 6,	2 8 /s	, 1H : -H 10; 7 ,	2 7

/t, 1H, J = 7,5 : -CeHs 3' /-H 4//; 7,38 /d, 2H, J=7,5 : -CeHs

3 ' / -H 2	a -H	6//; 7,48 /t,	2H,	J = 7 , 5 :	-CeHs 3'/-H	3 a
-H 5//; 7,67 /t,	2H,	, J	-7,5 : -OCOCeHs	/-H	3 a -H	5//; 7,48 /t,	2H,
J=7,5 :	- C e H 5	3'/ -H 3 a	-H	5//; 7,	67 /t, 2H, J = 7.	,5 :
-OCOCeHs/-	H	3 a	-H 5//; 7,78	/t ,	1H, J=7	,5 : -OCOCeHs	/-H
4//; 8,18	/d, 2 H	, J=7,5 : -OCOCe	Hs	/-H 2 a -	H ô//.

Príklad 7

Analogickým postupom ako v príklade 5, ale s použitím 0,58 g 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R , 3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy9-oxo-7beta,10beta-bis-/2,2,2-1richlóretoxy/karbonyloxy-11 -1axén-13alfa-ylu a 0,73 ml 3-morfolínopropylamínu sa získa 0,4 g 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy--l-hydroxy-7beta,10beta-bis-/(3-morfolínopropyl)karbamoyloxy/-9-oxo-1l-taxén-i3alfa-ylu v podobe bielej peny, ktorá má tieto charakteristiky: optická otáčavosť: /a/D²° - -24,7° /c = 0,52; metanol/; spektrum NMR /400 MHz; CDCls/:

delta /ppm/ : 1,25 /s, 3H : -CH₃ 15 alebo 17/; 1,28 /s, 3H :

-CH₃ 16 alebo 17/; 1,41 /s, 9H : -C/CH₃/₃/; 1,5 až 1,85 /mt,

4H ; -0C0NHCH₃CHc CH - N=/; 1,31 /s, 3H : -CH₃ 19/; 1,89 /ddd,

1H, J=15, 11 a 2 : -/CH/ -H 5/; 2,0 /s, 3H : -CH₃ 18/; 2,36 /mt, 2H : -CH₂- 14/; 2,35 /s, 3H : -COCH₃/; 2,4 až 2,6 /mt, 12H : - C H 2 N/C H ₂/2 O ; 2,7 /mt, 1H : -/CH/-H 6/; 3,15 až 3,45 /mt, 4H : -OCONHCH~CH = CH₃N=/; 3,76 /mt, 8H : - CH = N/CH = CH 2/₂O /;

3,98 /d, 1 H, J	= 7 : -H 3/; 4	, 20	a 4,31	/2d	, 1H každý, J = 8 :
-CH=- 20/; 4,65	/d, 1H, J=2 :	-H	2'/; 4	,98	,/d široký, 1H J = 10
: -H 5/; 5,3 /d š i roký , 1H,	J = 9	: -H 3	'/;	5,4 /d, 1 H, J = 9 :
-NHCOOC/CH₃/₃/;	5,45 /mt, 1H	: -H	7/; 5,	7 /d	, 1H, J = 7 : -H 2/;
5,6 až 5,2 /mf	, 2H : -NHCH2CH2CH	₂N = /;	6 , 22	/t, 1H, J=9 : -H
13/; 6,38 /s,	1H : -H 10/;	7 , 3	až 7,5	/m t	, 5H : —CeHs 3'/;
7,51 /t, 2H,	J=7,5 : -OCOC	e H 5 /	-H 3 a	-H	5//; 7,62 /t, 1H,
J=7,5 : -OCOCe	Hs /-H 4//; 8,	1 1	/d, 2H,	J = 7	,5 : -OCOCeHs /-H
2 a -H 6//.
K roztoku	11,5 mg 3-terc	.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-

-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta,20-epoxy-1-hydroxy-7beta,10beta-bis-/(3-morfolínopropyl) karbamoyl oxy/-9-oxo-11-taxén-13a 1 f a-y 1 u , získaného vyššie, v 0,2 ml 0,1 N roztoku kyseliny chlorovodíkovej, sa pridá 0,4 ml destilovanej vody a získaný roztok sa lyofilizuje. Získa sa tak 12 mg dihydrochloridu 3-terc.-butoxykarbonylamino-2-hydroxy-3-fenylpropionátu-/2R,3S/ 4-acetoxy-2alfa-benzoyloxy-5beta, 20-epoxy-1-hydroxy-7beta,10beta-bis-/(3-morfolínopropyl)karbamoy1oxy/-9-oxo-11-taxén-13a1 fa-y1 u, ktorý má tieto charakter i st i k y:

spektrum NMR /400 MHz; D=0/CH₃COOD, 90 : 10 obj./: delta /ppm/ : 0,85 /s, 3H : -CH₃ 16 alebo 17/; 0,9 /s -CHa 16 alebo 17/; 1 , 1 /Š, 9H : -C/CH₃/₃/; 1,5 /s,

3H C H 3

3H

19/; 1,6 až 1,8 /m, 10 H :

14, -/CH/-H 6/; 2,1 /s, 3H /; 2,8 až 3,10 /vbm, 12H

-CH₃ 18, -OCONHCH₃CH=CH=N=, —CH₃— : -COCHs/; 2,3 /m, 1H : -/CH/- H : -CHaN/CHaCHs/sO/; 3,3 /bm, 4H :

-OCONHCH₃CH₃CH s N = /; 3,6 /bm, 4H

-CH a N/CH c CH 2/20/; 3,85 /bm,

4H

-CHsN/CHsCHs/sO/; 4 a 4,15 /bd, AB , 2H : -CHa- 20/; 4,4 /bd, 1H : -H 2'/; 4,75 /bs, 1H : -H 3'/; 4,9 /bd, 1H : -H 5/ 5,1 /bdd, 1H ; -H 7/; 5,35 /bd, 1H : -H 2/; 5,8 /bt, 1H

-H 13; 6,04 /s, 1H

7,4 /t, 2H, J=7,5 :

J=7,5 : -OCOC₆H_S/-H a -H 6//.

-H 10; 7,0 až 7,25 /m, 5H : -CeHe 3'/

-OCOCeHs /-H 3 a -H 5//; 7,52 /t, 1H,

4//; 7,8 /d, 2H, J = 7, 5 : -0C0CeHs/-H 2

Nové zlúčeniny všeobecného vzorca la vykazujú zaujímavé biologické účinky.

Nové zlúčeniny všeobecného vzorca la prejavujú s i g n i f i kantnú aktivitu pri abnormálnej proliferácii buniek a majú terapeutické vlastnosti, umožňujúce liečbu chorôb s patologickými stavmi, ktoré súvisia s abnormálnou profilácíou buniek. Patologické stavy zahŕňajú abnormálnu proliferáciu buniek malígnych alebo normálnych v rôznych tkanivách a/lebo orgánoch, včítane tkaniva svalov, kostí alebo spojivových tkanív, pokožky, mozgu, pľúc, pohlavných orgánov, lymfatického systému, obličiek, buniek pŕs alebo krvných buniek, pečene, zažívacieho ústrojenstva, pankreasu, štítnej žľazy alebo nadobličiek. Tieto patologické stavy môžu tiež zahŕňať psoriázu, solídne tumory, rakovinu vaječníkov, maternice, mozgu, predstojnice, hrubého čreva, žalúdka, obličiek alebo semenníkov, Kaposiho sarkóm, cho1angiokarc inóm, chór iokarc inóm, neurob 1astom, Wilmsov tumor, Hodgkinovu chorobu, melanómy, mnohopočetné myelómy, chronickú lymfocytárnu leukémiu, akútne alebo chronické granulocytárne lymfómy. Nové zlúčeniny podľa vynálazu sú použiteľné najmä v terapii rakoviny vaječníkov. Zlúčeniny podľa vynálezu sú upotrebiteľné na prevenciu alebo spomalenie prejavov alebo obnovenie patologických stavov alebo na ich terapii.u

Zlúčeniny podľa vynálezu môžu byť aplikované chorým v rôznych formách, prispôsobených zvolenému spôsobu podania, s výhodou je to podanie parenterálne. Tento spôsob podania, zahŕňa intravenózne, íntraperitoneálne, intramuskulárne alebo subkutánne. Najvýhodnejšia je aplikácia intraperitoneá1 na alebo intravenózna.

Tento vynález sa rovnako týka farmaceutických kompozícií, ktoré obsahujú najmenej jednu zlúčeninu všeobecného vzorca la v množstve, ktoré je dostačujúce k použitiu v terapii humánnej alebo veterinárnej. Kompozície môžu byť pripravované obvyklými metódami s použitím jednej alebo viacerých farmaceutický prijateľných pomocných látok, nosičov alebo excipientov. Zvyčajné nosiče zahŕňajú zriedovadlá, sterilné vodné prostredie a rôzne netoxické rozpúšťadlá. S výhodou sú kompozície k dispozícii

7 v podobe vodných roztokov alebo suspenzií, injekčných roztokov, ktoré môžu obsahovať emulgátory, farbivá, konzervačné látky alebo stabilizátory.

Voľba pomocných látok alebo excipientov záleží na r o z pustnosti a chemických vlastnostiach zlúčeniny, na zamýšľanom spôsobe aplikácie a dobrých farmaceutických skúsenostiach.

Pre parenterálnu aplikáciu sa používajú sterilné roztoky vodné alebo bezvodné. Pre prípravu roztok o v alebo suspenzií bezvodných je možné použitie prírodných rastlinných olejov, napríklad oleja olivového, sézamového alebo parafínového alebo injektabilných organických esterov, ako etyloleátu. Sterilné vodné roztoky môžu pozostávať z roztokov farmaceutický prijateľných solí vo vode. Vodné roztoky vyhovujú pre intravenóznu aplikáciu, keď je hodnota pH vhodne nastavená a je zaistená izotónia, napríklad dostatočným množstvom chloridu sodného alebo glukózy. Sterilizáciu je možné zaistiť zahrievaním alebo akýmkoľvek iným spôsobom, ktorý kompozíciu nezmení.

Je samozrejmé, že všetky produkty ako súčasti kompozícií podľa vynálezu, musia byť čisté a v použitých množstvách netoxické.

Kompozície by mali obsahovať aspoň 0,01 % terapeuticky účinnej látky. Množstvo účinnej látky v kompozícii je také. aké by mohlo byť predpísané pri obvyklom dá v kovaní. Účelne sa kompozície pripravujú tak, aby jednotková dávka obsahovala asi od 0,01 až do 1000 mg účinnej látky, keď ide o parenterálnu aplikáciu.

Liečebný zásah môže byť realizovaný zároveň s ďaľšími liečebnými zásahmi, včítane ant i neop 1 ast i ck.ých liečiv, monoklonálnych protilátok, imunologických preparátov alebo rádioterapie alebo modifikátorov biologických odpovedí. Modifikátory odpovedí zahŕňajú, avšak bez obmedzenia iba na uvedené, lymfokíny a cytokíny, ako inter1eukíny, interferóny /alfa, beta alebo delta/ a T N F. Z ďalších chemoterapeutík, použiteľných pri terapii porúch, spôsobených abnormálnou pro1 i feráciou buniek, je možné uviesť, bez obmedzenia iba na ne, alkylačné činidlá, ako dusíkaté yperity, mechlóretamín, cyklofosfamid, melfalan a ch 1 orambuci 1, a 1 ky 1 su1 fonáty, ako busulfan, nitrozomočoviny, ako karmustín, lomuzín, semustín a streptozocín, triazény, ako dekarbazín, antimetabo1 i ty , napríklad analogá kyseliny listovej, ako metotrexát, analogá pyrimidínu, ako fluoruracil a cytarabín, analogá purínov, ako merkaptopurín a tioguanín, prírodné produkty, napríklad alkaloidy vínky, ako vinblastín, vinkristín a vendezín, epipodofylotoxíny, ako etoposid a teniposid, antibiotiká, ako daktinomycín, daunorubic í n, doxorubicín, bleomycín, plikamycín a mitomycín, enzýmy, ako L-asparagináza, rôzne ďalšie látky, ako komplexné zlúčeniny platiny, napríklad cisplatina, substituované močoviny, napríklad hydroxymočovi na, deriváty mety 1hydrazínu, ako prokarbazín, adrenokortikoidné inhibítory, ako mitotan a aminoglutetimid, hormóny a antagonisti, ako adrenokort ikostero idy, napríklad prednizon, progestagény, ako kaproát hydroxyprogesterónu, acetát.metoxyprogesterónu a acetát megestrolu, estrogény, ako d iety1sti 1 bestro 1 a etiny1estrad i o 1, antiestrogény , ako tamoxifén, androgény, ako testosterónpropionát a f 1uoxymesterón.

Dávky používané k realizácii metód podľa vynálezu sú také, ktoré dovoľujú aplikáciu profylaktickú alebo maximálnu odpoveď terapeutickú. Dávky sa obmieňajú podľa spôsobu aplikácie, zvoleného produktu a vlastností liečeného subjektu. Všeobecne sú dávky také, ktoré sú terapeuticky účinné pri terapii porúch, spôsobených abnormálnou pro 1 i fe ráciou buniek. Účinné látky podľa vynálezu sa môžu podávať tak, ako je to potrebné, aby sa dostavil žiadaný terapeutický efekt. Niektoré choroby môžu rýchlo reagovať na dávky vysoké alebo nízke, potom je potrebné postarať sa o nízke udržiavacie dávky alebo aplikáciu ukončiť. Všeobecne sa nízke dávky podávajú na začiatku liečby, a pokiaľ je to potrebné, podávajú sa dávky stále vyššie, až sa dosiahne optimálny účinok. U iných chorôb môže byť prospešné aplikovať dávky jeden až osemkrát denne,s výhodou 1 až 4 krát denne, podľa fyziologických potrieb príslušnej choroby. Rovnako je možné podávať niektorým pacientom i b a jednu, nanajvýš dve dávky denne.

uvažujú dávky v v rozpätí od 0,5 1 až do 10 mg/kg. o dávkach

U človeka sa počíta zvyčajne s dávkami v rozpätí od 0,01 až do 200 mg/kg. Pri intraperitoneá 1 ne j aplikácii sa zvyčajne rozpätí od 0,1 až do iOOmg/kg, s výhodou až do 50 mg/kg, najvýhodnejšie v rozpätí od Pri intravenóznej aplikácii sa uvažuje v rozpätí od 0,1 až do 50 mg/kg, s výhodou v rozpätí od 0,1 až do 5 mg/kg, najvýhodnejšie v rozpätí od 1 až do 2 mg/kg. Je samozrejmé, že pri voľbe najvhodnejšieho dávkovania je potrebné brať do úvahy spôsob aplikácie, hmotnosť pacienta, jeho celkový zdravotný stav, jeho vek a všetky faktory, ktoré by mohli mať vplyv na účinnosť liečby.

Nasledujúci príklad ilustruje jednu kompozíciu podľa vynálezu.

Príklad

V 1 ml Emulporu EL 620 a 1 ml etanolu sa rozpustí 40 mg produktu získaného podľa príkladu 1 a roztok sa potom zriedi prídavkom 18 ml fyziologického séra.

Kompozícia sa aplikuje vo forme infúzie s fyziologickým roztokom v priebehu 1 hodiny.

Priemyselná využiteľnosť

Nové deriváty analógov taxolu podľa vynálezu preukázali použiteľnú účinnosť pri liečení rôznych novotvarov, a to samotné, prípadne v kombinácii s ďalšími účinnými látkami a vo vhodnej aplikačnej forme.

Claims

PATENTOVÉ

NÁROKY v ktorom znamená:

Ar arylovú skupinu,

R skupinu všeobecného vzorca II

RtO- /11/ v ktorom R? znamená priamu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu, obsahujúcu 1 až 8 atómov uhlíka, alkenylovú skupinu, obsahujúcu 2 až 8 atómov uhlíka, alkinylovú skupinu, obsahujúcu 3 až 8 atómov uhlíka, cykloalkylovú skupinu, obsahujúcu 3 až 6 atómov uhlíka, cykloalkenylovú skupinu, obsahujúcu 4 až δ atómov uhlíka alebo bicykloalkylovú skupinu, obsahujúcu 7 až 10 atómov uhlíka, pričom tieto skupiny pripadne môžu byť substituované jedným alebo viacerými substituentami, ktoré sú vybrané z atómov halogénov a hydroxylovýchh skupín, alkyloxyskupín, obsahujúcich 1 až 4 atómy uhlíka, dialkylaminoskupín, kde každá alkylová súčasť obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka, zvyškov p i p e ridínu, morfolínu alebo 1-piperazínu, ktorý je prípadne substituovaný v polohe 4 alkylovou skupinou, obsahujúcou 1 až 4 atómy uhlíka, alebo fenylalkylovou skupinou, ktorá má v alkylovej súčasti 1 až 4 atómy uhlíka, ďalej z cykloalkylových

3 1 skupín, obsahujúcich 3 až 6 atómov uhlíka, cykloalkenylových skupín, obsahujúcich 4 až 6 atómov uhlíka, fenylových skupín, kyanových skupín, karboxylových alebo alkyloxykarbonylových skupín, v ktorých alkylová súčasť obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka , alebo fenylovú skupinu, prípadne substituovanú jedným alebo viacerými atómami alebo skupinami, ktoré sú vybrané z atómov halogénov a alkylových skupín, obsahujúcich 1 až 4 atómy uhlíka alebo alkoxylových skupín, obsahujúcich 1 až 4 atómy uhlíka, o

alebo zvyšok dusíkatého heterocyklu, nasýteného alebo nenasýteného, obsahujúceho 4 alebo 6 členov a prípadne substituovaného jednou alebo viacerými alkylovými skupinami, ktoré obsahujú 1 až 4 atómy uhlíka, pričom sa rozumie, že cykloalkylové, cykloalkenylové alebo bicykloalkylové skupiny môžu byt prípadne substituované jednou alebo viacerými alkylovými skupinami, ktoré obsahujú 1 až 4 atómy uhlíka, substituenty Ri a Ra, rovnaké alebo rozdielne, znamenajú atóm vodíka alebo skupinu všeobecného vzorcaa III

NCO/ΙΠ/ v ktorom substituenty R₃ a R^, rovnaké alebo rozdielne, znamenajú atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom, obsahujúcim 1 až 4 atómy uhlíka, ktorý je prípadne substituovaný:

a/ skupinou hydroxy1ovou, karboxylovou, a 1 ky 1 oxykar bony 1ovou, ktorých alkylová súčasť obsahuje 1 až 4 atómy uhlíka a ktorá je prípadne substituovaná fenylovou skupinou, b/ skupinou všeobecného vzorca IV

N/IV /

Re v ktorom substituenty Rs a Rs, rovnaké alebo rozdielne,· znamenajú atóm vodíka alebo alkylovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom, obsahujúcim 1 až 4 atómy uhlíka, alebo substituenty R_s a Rs, spolu spojené, tvoria s atómom dusíka, na ktorý'sú viazané, nasýtený alebo nenasýtený, päť- alebo šesťčlenný heterocyklus, ktorý prípadne obsahuje druhý heteroatóm, vybraný z atómov dusíka, ktorý je prípadne substituovaný alkylovou skupinou, obsahujúcou 1 až 4 atómy uhlíka, alebo benzylovou skupinou, kyslíka alebo síry, alebo substituenty R₃ a R 4, spolu spojené, tvoria s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, nasýtený alebo nenasýtený, päť- alebo šesťčlenný heterocyklus, ktorý prípadne obsahuje druhý heteroatóm, vybraný z atómov dusíka, ktorý je prípadne substituovaný alkylovou skupinou, obsahujúcou 1 až 4 atómy uhlíka alebo benzylovú skupinu, kyslíka alebo síry, pričom sa rozumie, že najmenej jeden zo substituentov Ri alebo R_c znamená skupinu všeobecného vzorca III, a rovnako, pokiaľ existujú, ich adičné soli s kyselinami.
2. Spôsob prípravy nových derivátov podľa nároku 1, v y z n a č e n ý tým, že sa pôsobí amínom všeobecného vzorca V

Rs ^NH /V/

R.X v ktorom substituenty Rs a R^ majú význam uvedený v nároku 1, na derivát taxánu všeobecného vzorca VI v ktorom z I: ú č e n í n

R a Ar majú význam uvedený všeobecného vzorca VII v nároku 1, pri vzniku (VII) .

v ktorom R a Ar majú vyššie uvedený význam, substituenty Gi a G; znamená každý skupinu všeobecného vzorca II alebo ochrannú skupinu CCI3CH2OCO-, pričom sa rozumie, že najmenej jeden zo substituentov Gi a G; znamená skupinu všeobecného vzorca II, nato nasleduje, pokiaľ je to žiadúce, náhrada jednej alebo viacerých ochranných skupín CCI3CH2OCO- atómom vodíka, oddelenie produktov všeobecného vzorca I z ich zmesi a izolácia získaného produktu prípadne vo forme soli.
3. Spôsob podľa nároku 1, v y z n a č e n ý t ý m, že sa pôsobí am ínom všeobecného vzorca I na derivát taxánu všeobecného vzorca III v prostredí nereagujúceho organického rozpúšťadla, ako je halogénovaný alifatický uhľovodík, napríklad m etylénchlorid, pri teplote v rozpätí od 0 °C až k teplote varu reakčnej zmesi.
4. Spôsob podľa nároku 3, v y z n a č e n ý t ý m, že sa náhrada ochrannej skupiny 2,2,2-tri ch 1óretoxykar bony 1ovej atómom vodíka uskutočňuje pôsobením zinku v kyseline octovej, prípadne v prítomnosti metanolu, pri teplote v rozpätí od 30 až do 80 °C .
5. Farmaceutická kompozícia vyznačená tým, že obsahuje dostatočné množstvo zlúčeniny podľa nároku 1 v kombinácii s jedným alebo viacerými farmaceutický prijateľnými nereagujúcimi alebo farmakologicky účinnými zried’ovadlami alebo pomocným i látkami.