SK35697A3 - Iodinated x-ray contrast media - Google Patents

Description

Jódovaná kontrastná látka

Oblasť techniky

Vynález sa týka zlepšení kontrastných látok a súvisí s kontrastnými látkami, a konkrétne s jódovanými kontrastnými látkami pre rôntgenové žiarenie.

Doterajší stav techniky

Kontrastné látky sa môžu podávať pri zobrazovacích postupoch v medicíne, napríklad na zobrazenie rôntgenom, magnetickou rezonanciou a ultrazvukom, na zvýšenie kontrastu obrazu pri zobrazení predmetov, všeobecne ľudského alebo nie-ľudského živočíšneho tela. Výsledný zvýšený kontrast umožňuje, že sa rôzne orgány, typy tkaniva alebo časti tela, môžu jasnejšie pozorovať alebo identifikovať. Pri rôntgenovom zobrazení kontrastná látka pôsobí zmenou absorpčných charakteristík rôntgenového žiarenia na miestach tela, do ktorých je distribuovaná.

Použiteľnosť materiálu ako kontrastnej látky je však jasne veľmi riadená jeho toxicitou, jeho diagnostickou účinnosťou, inými nepriaznivými účinkami, ktoré môže mať na subjekt, ktorému je podaný, a ľahkosťou jeho skladovania a ľahkosťou podávania.·

Pretože takéto látky sa konvenčné používajú na účely diagnostiky, skôr ako na dosiahnutie priameho terapeutického účinku, pri vývoji novej kontrastnej látky je všeobecná požiadavka vyvinúť látku, ktorá má najmenší možný účinok nä rôzne biologické mechanizmy buniek alebo tela, čo bude všeobecne viesť k menšej toxicite pre živočíchov a nižším nepriaznivým klinickým účinkom.

K toxicite a nepriaznivým biologickým účinkom kontrastnej látky prispievajú zložky látky, napríklad rozpúšťadlo alebo nosič, ako aj kontrastné činidlo a jeho zložky (napríklad ióny, ak je iónová) a metabolity.

Zistili sa nasledujúce hlavné faktory prispievajúce k toxicite a nepriaznivým účinkom kontrastnej latky:

chemotoxicita kontrastného činidla, osmolalita kontrastnej látky, a iónové zloženie (alebo jeho nedostatok) kontrastnej látky,

Napríklad pri koronárnej angiografii sa injekcia kontrastnej látky do cirkulačného systému spája s viacerými vážnymi účinkami na funkciu srdca. Tieto účinky sú dosť silné, čím kladú obmedzenia použitiu určitých kontrastných látok pri angiografii.

V tomto postupe v krátkom časovom úseku bolus kontrastnej látky preteká namiesto krvi cirkulačným systémom a rozdiely v chemickej a fyzikálnochemickej povahe kontrastnej látky a krvi, ktorú dočasne nahrádza, môže spôsobiť vznik nežiadúcich efektov, napríklad arytmiu, QT-predĺženie a zvlášť zníženie sily srdcových kontrakcií a jav ventrikulárnej fibrilácie. Prebehlo mnoho výskumov týchto negatívnych účinkov na funkciu srdca spôsobených zavedením kontrastnej látky do cirkulačného systému, napríklad počas angiografie, a veľmi sa hľadali prostriedky na zníženie alebo odstránenie týchto účinkov.

Prvé injektovateľné iónové kontrastné činidlá pre róntgenové žiarenie založené na trijódfenylkarboxylových soliach sa zvlášť spájali s osmotickými účinkami spôsobenými hypertonicitou injektovanej kontrastnej látky.

Táto hypertonicita spôsobuje osmotické efekty, ako napríklad odvádzanie vody z červených krviniek, endotelových buniek a buniek srdcovo-cievneho svalstva. Strata vody spôsobuje nepohyblivosť červených krviniek, a hypertonicita, chemotoxicita a neoptimálne iónové zloženie, zvlášť alebo spolu, znižujú silu kontrakcie svalových buniek a spôsobujú dilatáciu malých krvných ciev a následne pokles krvného tlaku.

Problém osmotoxicity sa riešil vývojom neiónových trijódfenylových monomérov, ako je napríklad iohexol, ktoré dovoľujú dosiahnutie rovnakých kontrastne účinných koncentrá3 cií jódu pri silne znížených sprievodných osmotoxických účinkoch.

Snaha k zníženiu osmotoxicity viedla v pravý čas k vývoju neiónových bis(trijódfenylových) dimérov, ako je napríklad iodixanol, ktoré znižujú problémy spojené s osmotoxicitou, pričom ďalej ponechávajú možnosť dosiahnutia kontrastne účinných koncentrácií jódu s hypotonickými roztokmi.

Táto schopnosť dosiahnuť kontrastne účinné koncentrácie jódu bez zvýšenia osmolality roztoku do izotonických úrovní (asi 300 mOsm/kg H2O) ďalej umožnila príspevok k tomu, že toxicita spôsobená iónovou nerovnováhou sa rieši včlenením rôznych katiónov plazmy, ako je diskutované napríklad v VO-90/13636 od Nycomed Imaging AS.

Avšak kontrastná látka pre rôntgenové žiarenie s komerčne vysokými koncentráciami jódu asi 300 mgl/ml má relatívne vysoké viskozity, ktoré sú pri laboratórnej teplote v rozsahu od asi 15 do asi 60 mPa.s, pričom dimérna látka je všeobecne viskóznejšia než monomérna látka. Takéto viskozity spôsobujú problémy pre toho, kto podáva kontrastnú látku, pretože sa vyžadujú ihly s relatívne širokým otvorom alebo vysoký aplikačný tlak, a zvlášť sa prejavujú v pediatrických rádiografických technikách, ktoré vyžadujú rýchle podanie bolusu, napríklad pri angiografii.

Podstata vynálezu.

Tento vynález rieši problém viskozity zahrnutý u doteraz známych materiálov, a teda vynález z jedného aspektu poskytuje jódované arylové látky užitočné ako kontrastné činidlá pre rôntgenové žiarenie so vzorcom I (I)

R R R R (kde n je O alebo 1, a ak n je 1 skupiny CgR_s môžu byť rovnaké alebo rôzne; každá skupina R je vodíkový atóm, jódový atóm alebo hydrofilná skupina M alebo M¹, dve alebo tri nie-susedné R skupiny na každej CgRg skupine sú jód a najmenej jedna, a výhodne dve alebo tri, R skupiny v každej CgR^ skupine sú M alebo M¹ skupiny; X označuje väzbu alebo skupinu, ktorá poskytuje 1 až 7, napríklad 1-, 2-, 3- alebo

4-atómový reťazec spájajúci dve CgRg skupiny, alebo ak n je 0, X označuje skupinu R; každá M je nezávisle ne-iónová hydrofilná skupina; a každá nezávisle predstavuje

Ci_4alkylovú skupinu substituovanú najmenej jednou hydroxylovou skupinou a voliteľne naviazanú na fenylový kruh cez karbonylovú, sulfónovú alebo sulfoxidovú skupinu, najmenej jedna R skupina, výhodne najmenej dve R skupiny a zvlášť výhodne najmenej jedna R skupina v každej CgR^ skupine je skupina; s výhradou, že ak n je nula, buď je prítomná najmenej jedna skupina iná ako hydroxymetylová alebo

1,2-dihydroxyetylová skupina (a voliteľne iná ako ktorákoľvek hydroxyetylová skupina) alebo potom, ak je prítomná jedna hydroxymetylová alebo 1,2-dihydroxyetylová skupina (a voliteľne akákoľvek hydroxyetylová skupina), je tiež prítomná najmenej jedna dusíkom pripojená hydroxylovaná alkylová (výhodne Ci_4alkylová) skupina obsahujúca M skupinu), a ich izoméry, zvlášť stereoizoméry a rotaméry.

Zistilo sa, že látky podľa tohto vynálezu vykazujú vo vodnom roztoku výhodne nízku viskozitu; považuje sa to za dôsledok prítomnosti skupín na fenylových skupinách, asymetrie zlúčeniny, a u dimérnych zlúčenín povahy spojovacej skupiny X (zvlášť kde X poskytuje spojenie s menej ako 5 atómovou dĺžkou).

Teda napríklad všetky vo vode rozpustné monomérne látky podľa tohto vynálezu, ktoré sa testovali vykázali viskozity nižšie ako je viskozita iohexolu.

Látky so vzorcom I sú výhodne asymetrické. Pre monomérne látky (kde n = 0) sa to môže dosiahnuť asymetrickou substitúciou fenylového kruhu. Pre diméry sa to môže dosiahnuť použitím asymetrickej 2- alebo viac-atómovej skupiny tvoria5 cej reťazec X a/alebo výberom neidentických CgR^ skupín, t.j. neidentickou substitúciou jódfenylových koncových skupín. Asymetrické molekuly sú výhodné, pretože sa zistilo, že majú lepšiu rozpustnosť vo vode.

Takáto neidentická substitúcia fenylových koncových skupín, skupiny CgRg, sa môže dosiahnuť rôznymi počtami alebo polohami jódových substituentov a/alebo rôznymi počtami, polohami alebo identitami M alebo M¹ substituentov. Aby sa maximalizoval obsah jódu, sú uprednostňované trijódfenylové koncové skupiny, t.j. skupiny so vzorcom

R (

R I a v nich dve R skupiny môžu byť rovnaké alebo rôzne, hoci výhodne obe predstavujú skupiny M alebo M³.

Ak fenylová koncová skupina je disubstituovaná jódom, je to výhodne skupina so vzorcom

Q 1 (kde M môže byť rovnaké alebo rôzne a predstavuje M^x alebo M skupinu, výhodne najmenej jedna na každom kruhu predstavuje M* skupinu).

Všeobecne budú dijódfenyl-dijódfenylové diméry menej výhodné než dijódfenyl-trijódfenylové diméry alebo trijódfenylové-trijódfenylové diméry, primárne v dôsledku zníženého obsahu jódu, t.j. 4 namiesto 5 alebo 6 jódov na molekulu diméru. Trijódfenyl-trijódfenylové diméry sú skutočne všeobecne výhodnejšie pre ich vyšší obsah jódu.

Pri monoméroch sú znova výhodne trijódfenylové zlúčeniny.

Solubilizačnými skupinami M môžu byť akékolvek neionizujúce skupiny konvenčné používané na zvýšenie rozpustnosti vo vode. Vhodné skupiny zahrnujú napríklad C₁_₁Q-alkylové skupiny s priamym alebo rozvetveným reťazcom, výhodne C^j skupiny, voliteľne s jednou alebo viacerými CH₂ alebo CH skupinami nahradenými kyslíkovými alebo dusíkovými atómami a voliteľne substituované jednou alebo viacerými skupinami vybratými z oxoskupiny, hydroxylu, aminoskupiny, karboxylových derivátov, a oxoskupiny substituovanej atómami síry a fosforu. Konkrétne príklady zahrnujú polyhydroxyalkyl, hydroxyalkoxyalkyl a hydroxypolyalkoxyalkyl a takéto skupiny naviazané na fenylovú skupinu prostredníctvom amidovej väzby, ako je napríklad hydroxyalkylaminokarbonylová, N-alkylhydroxyalkylaminokarbonylová a bis-hydroxyalkylaminokarbonylová skupina. Výhodné spomedzi takýchto skupín sú tie, ktoré obsahujú 1, 2, 3, 4, 5 alebo 6, zvlášť 1, 2 alebo 3 hydroxyskupiny, napríklad

-conh-ch₂ch₂oh

-CONH-CH₂CH0HCH₂0H

-conh-ch(ch₂oh)₂

-con(ch₂ch₂oh)₂ ako aj iné skupiny, napríklad

-conh₂

-conhch₃

-ococh₃

-N(COCH₃)H

-N(COCH₃)C₁_₃-alkyl

-N(COCH₃)-mono, bis alebo tris-hydroxyC^_₄-alkyl,

-N(C0CH₂0H)-mono, bis alebo tris-hydroxyC₁_₄-alkyl

-N-(C0CH₂0H)₂

-CON(CH₂CHOHCH₂OH)(ch₂ch₂oh)

-CONH-C(CH₂OH)₃ a

-CONH-CH(CH₂OH)(CHOHCH₂OH).

Vo všeobecnosti každá z M skupín zahrnuje polyhydroxyC-£_₄alkylovú skupinu, ako je napríklad 1,3-dihydroxy-prop-2yl alebo 2,3-dihydroxyprop-l-yl.

Môžu sa tiež použiť iné takéto M skupiny, ktoré sa konvenčné používajú v oblasti trijódfenylových kontrastných činidiel pre rôntgenové žiarenie, a zavedenie M skupín na jódfenylové štruktúry sa môže dosiahnuť konvenčnými technikami.

Vo všeobecnosti skupiny M¹ výhodne zahrnujú C-£_₄alkylové skupiny substituované 1,2, 3 alebo 4 hydroxylovými skupinami (napríklad hydroxymetyl, 2-hydroxyetyl, 2,3-;bishydroxypropyl, 1,3-bishydroxyprop-2-yl, 2,3,4-trihydroxybutyl a

1,2,4-trihydroxybut-2-yl) voliteľne naviazané na fenylový kruh cez CO, SO alebo S0₂ skupinu (napríklad COCH₂OH alebo so₂ch₂oh).

V dimérnych látkach podľa tohto vynálezu je vhodne spojovacou skupinou X väzba alebo 1 až 7, napríklad 1,2, 3 alebo 4 členný reťazec obsahujúci atómy uhlíka, dusíka, kyslíka alebo síry, napríklad väzba,

0, S, N alebo C jednoatómový reťazec,

NN, NC, NS, CC alebo CO dvojatómový reťazec, alebo NCN, OCN, CNC, OCO, NSN, CSN, COC, OCC alebo CCC trojatómový reťazec, napríklad :

jeden kyslíkový atóm alebo skupina NR¹, CO, S02 alebo CR¹2; skupina COCO, CONR¹, COCR¹2, SOCR¹2, SO^R¹, CR¹2CR¹2,

CR¹2NR¹ alebo CR^O;

skupina NR^ONR¹, OCONR¹, CONR¹CO, C0NR¹CR¹2, 0C00, cr¹2ocr¹2, ocr¹2co, cr¹2conr¹, cr¹2cr¹2cr¹2, COCR¹R¹CO, CR¹2NR¹CR¹2, CR¹2S0₂NR¹, CR¹20C0 alebo NR¹SO₂NR¹;

kde R¹ je vodík alebo C-^_galkylová alebo alkoxylová skupina, voliteľne substituovaná hydroxylom, alkoxylom, oxa- alebo oxo- skupinou (napríklad polyhydroxyalkylová, formylová, acetylová, hydroxylová, alkoxylová alebo hydroxyalkoxylová skupina), alebo ak je pripojená na uhlík R¹, môže to tiež byť hydroxylová skupina.

Ak X poskytuje 4 až 7 atómové spojenie, môžu sa použiť konvenčné spojovacie skupiny, ako sú napríklad skupiny navrhnuté v publikácii Justesa VO-93/10078 alebo Bracco

US-A-4348377 a VO/14478.

Všeobecne takéto spojenia budú zahrnovať voliteľne aza alebo oxa substituované alkylénové reťazce, voliteľne nesúce R¹ substituenty, zvlášť takéto skupiny končiace iminovým dusíkom alebo výhodnejšie karbonylovými uhlíkovými atómami, výhodne patriace iminokarbonylovým funkčným jednotkám v reťazci. Hydroxylované reťazce, ako sa napríklad nachádzajú v iodixanole, sú zvlášť výhodné.

Príklady takýchto reťazcov sú NCCN, NCCCN, CNCCCNC a CNCCN, napríklad -NR¹COCONR¹-NR¹COCR¹2CONR^X-NR¹CR¹2CR¹OHCR¹2NR^X-C0NR¹CR¹2C0R¹- a -N(COR¹)CR¹2CR¹OHN(COR¹)ako sa napríklad nachádzajú v iotrolane, iofratole, kyseline ioxageloveej a iodixznole, alebo ako je inak naznačené VO/14478.

Výhodne je v dimérnych látkach X skupina nesymetrická. To sa môže dosiahnuť napríklad asymetrickou substitúciou symetrického reťazca (napríklad N-C-N substituovaný ako NHCONR^X) alebo výberom asymetrického reťazca (napríklad OCN substituovaný ako OCONR^X). Zvlášť by bolo výhodné, keby spojovacia skupina X bola polárna a tiež keby bola hydrofilná.

Príklady výhodných štruktúr podľa tohto vynálezu teda zahrnujú;

I *9 1 kde každá M⁶ skupina je M alebo M, najmenej jedna v každej látke (a výhodne v každom kruhu) je , zvlášť kde najmenej jedna je C^_4alkylová skupina substituovaná 1, 2, 3 alebo 4 hydroxylovými skupinami (napríklad hydroxymetyl, 2-hydroxyetyl, 2,3-bishydroxy-propyl, 1,3-bishydroxyprop-2-yl,

2,3,4-trihydroxybutyl a 1,2,4-trihydroxybut-2-yl) voliteľne naviazaná na fenylový kruh cez CO, SO alebo SO₂ skupinu (napríklad C0CH₂0H alebo S0₂CH₂0H), napríklad hydroxyalkylová alebo hydroxyalkylkarbonylová skupina zvlášť hydroxymetylová, hydroxymetylkarbonylová, 2-hydroxyetylová alebo 2-hydroxyetylkarbonylová skupina, kde R¹ je vodík, hydroxyl, hydroxyalkyl (napríklad 2-hydroxyetyl) , acetyl, alebo hydroxyalkylkarbonyl.

Zvlášť výhodnými sú tieto látky so vzorcom

HO

Látky podľa tohto vynálezu sa všeobecne môžu pripraviť v dvoch alebo troch stupňoch: (a) tvorba diméru (ak je potrebná) , (b) jodácia fenylových skupín a (c) substitúcia fenylových skupín a/alebo voliteľne spojovacích skupín solubilizačnými skupinami.

Hoci teoreticky sa stupne (a), (b) a (c) môžu uskutočňovať v akomkoľvek poradí, všeobecne bude výhodné uskutočňovať krok tvorby diméru pred krokom jodácie a z ekonomických dôvodov bude výhodné uskutočňovať krok jodácie ako posledný stupeň syntézy, ak sa to dá uskutočniť, aby sa znížil odpad jódu. Stupeň tvorby diméru môže samotný byť viackrokovým postupom s vhodne aktivovanou spojovacou skupinou, ktorá sa najprv pripojí na jeden monomér, pred reakciou vzniknutého spojenia spojovacia skupina - monomér s druhým monomérom. Alternatívne môže prebiehať tvorba diméru pomocou reakcie podobne alebo kooperatívne substituovaných monomérov, s konjugáciou monomérov vedúcou k tvorbe diméru.

Ak sa to požaduje, spojovacia skupina X sa môže tvoriť modifikovaním, napríklad substitúciou, oxidáciou alebo redukciou prekurzora spojovacej skupiny, napríklad v prekurzorovom monoméri.

Pre monomérne látky, zvlášť tie látky, kde substitúcia kruhu je asymetrická, sa zavedenie jódu všeobecne bude uskutočňovať pred alebo po čiastočnej substitúcii fenylového kruhu R skupinami.

Vo všetkých prípadoch sa môžu použiť konvenčné syntetické postupy dobre známe z literatúry (napríklad metódy analogické k metódam použitým a opísaným na výrobu látok, ktoré sú uvedené v VO-94/14478) .

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa môžu použiť ako kontrastné činidlá pre rôntgenové žiarenie a pre tento účel sa môžu pripraviť s konvenčnými nosičmi a vehikulami, čím sa vytvorí diagnostická kontrastná látka.

Vynález teda z ďalšieho aspektu poskytuje diagnostickú zmes, ktorá obsahuje látku so vzorcom I (ako je definovaná vyššie) spolu s najmenej jedným fyziologicky tolerovateľným nosičom alebo vehikulom, napríklad vo vodnom roztoku vo vode pre injekcie voliteľne spolu s pridanými iónmi plazmy alebo rozpusteným kyslíkom.

Zmesi kontrastného činidla podľa tohto vynálezu môžu byť pripravené ako hotové zmesi s koncentráciou pre priame použitie alebo sa môžu pripraviť vo forme koncentrátu na zriedenie pred podávaním. Všeobecne majú zmesi v hotovej forme koncentrácie jódu najmenej 100 mgl/ml, výhodne najmenej 150 mgl/ml, s koncentráciami najmenej 300 mgl/ml, napríklad 320 až 400 mgl/ml, ktoré sú všeobecne výhodné. Čím je koncentrácia jódu vyššia, tým je vyššia diagnostická hodnota, ale zároveň je vyššia viskozita a osmolalita roztoku. Normálne bude pre danú látku maximálna koncentrácia jódu určená jej rozpustnosťou a hornými hranicami tolerovateľnosti pre viskozitu a osmolalitu.

Pre kontrastné látky, ktoré sa podávajú injekciou, je požadovaná horná hranica viskozity roztoku pri laboratórnej teplote (20 ’C) 30 mPa.s; avšak viskozity do 50 alebo až do 60 mPa.s sa môžu tolerovať, hoci potom bude všeobecne kontraindikované ich použitie pre pediatrickú rádiografiu. Pre kontrastné látky, ktoré sa majú podávať bolusovou injekciou, napríklad pri angiografických postupoch, sa musia uvažovať osmotoxické účinky a osmolalita by výhodne mala byť pod 1 Osm/kg H2O, zvlášť pod 850 mOsm/kg H2O, konkrétne v dosahu 50 alebo menej, výhodne 10 mOsm od izotonicity (asi 300 mOsm/kg H2O).

S látkami podľa tohto vynálezu sa takéto cieľové viskozity, osmolality a koncentrácie jódu môžu ľahko splniť. Účinné koncentrácie jódu sa naozaj dajú dosiahnuť s hypoto13 nickými roztokmi. Môže byť teda žiadúce, upraviť tonicitu roztoku pridaním katiónov plazmy, čím sa znižuje toxický príspevok, ktorý vyplýva z účinkov iónovej nerovnováhy, ktorá nasleduje po bolusovej injekcii. Bude sa požadovať včlenenie takýchto katiónov v rozsahoch navrhnutých vo VO-90/01194 a VO-91/13636.

Výhodné obsahy plazmových katiónov pre kontrastné látky podľa tohto vynálezu, zvlášť pre kontrastné látky pre angiografiu sú nasledujúce:

sodík 2 až 100, najmä 15 až 75, zvlášť 20 až 70, konkrétnejšie 25 až 35 mmol/1 vápnik do 3,0, výhodne 0,05 až 1,6, zvlášť 0,1 až 1,2, konkrétne 0,15 až 0,7 mmol/1 draslík do 2, výhodne 0,2 až 1,5, zvlášť 0,3 až 1,2, konkrétne 0,4 až 0,9 mmol/1 horčík do 0,8, výhodne 0,05 až 0,6, zvlášť 0,1 až 0,5, konkrétne 0,1 až 0,25 mmol/1

Plazmové katióny môžu celkom alebo čiastočne predstavovať protióny v iónovom kontrastnom činidle. Inak sa budú všeobecne dodávať- vo forme solí s fyziologicky tolerovateľnými protianiónmi, napríklad sa zvlášť výhodne budú s plazmovými katiónmi používať chloridy, sírany, fosforečnany, hydrogénuhličitany, atď.

Okrem plazmových katiónov môže kontrastná látka obsahovať iné protióny, ak dimér je iónový, a takýmito protiónmi budú samozrejme výhodne fyziologicky tolerovateľné protióny. Príklady takýchto iónov zahrnujú ióny alkalických kovov a kovov alkalických zemín, amónium, N-metyl-p-glukamín, etanolamín, dietanolamín, chlorid, fosforečnan a hydrogénuhličitan. Môžu sa použiť tiež iné protióny konvenčné vo farmaceutických prípravkoch. Zmesi naviac môžu obsahovať ďalšie zložky konvenčné v kontrastných látkach pre rontgenové žia14 renie, napríklad pufre, atď.

Publikácie, na ktoré tu boli urobené odkazy, sú včlenené v tomto dokumente odkazom.

Vynález bude teraz ďalej opísaný pomocou nasledujúcich neobmedzujúcich Príkladov.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

1,3,5-trijód-2,4-di(1,2,3-trihydroxy-l-propyl)-6-(3-hydroxy-l-propen-l-yl)benzén

a. 1,3,5-trijód-2,4,6-trimetylbenzén

Jód (19,0 g, 75 mmol) sa rozpustil v chloride uhličitom (75 ml). Pridali sa mezitylén (7 ml, 50 mmol) a bis(trifluóracetoxy)fenyljodid (35,5 g, 82 mmol) a roztok sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 2 hodín. Zrazenina, ktorá sa oddelila filtráciou, sa premyla studeným chloridom uhličitým a vysušila sa. Výťažok: 20,5 g (82 %).

^XH NMR (CDC1₃): 3,31 (s).

b. 1,3,5-trijód-2,4,6-triacetoxymetylbenzén

Trijódmezitylén (19,5 g, 39 mmol) sa pridal do ľadovej kyseliny octovej (200 ml), ktorá obsahovala anhydrid kyseliny octovej (400 ml) a koncentrovanú kyselinu sírovú (40 ml). Potom sa pridal malými podielmi počas doby 3 hodín tuhý manganistan draselný (24,6 g, 156 mmol). Po premiešavaní počas 16 hodín sa rozpúšťadlo odparilo a pridala sa voda (200 ml). Vodná suspenzia sá extrahovala dichlórmetánom (250 ml) a organická fáza sa premyla vodou 3 x 50 ml), vysušila sa (MgS0₄) a odparila sa. Tuhý zvyšok sa suspendoval v acetóne a biely kryštalický produkt sa oddelil filtráciou. Výťažok: 9,3 g (35 %).

^XH NMR (CDC1₃): 5,66 (s, 6H), 2,20 (s, 9H).

c. 1,3,5-trijód-2,4,6-trihydroxymetylbenzén

1.3.5- trijód-2,4,6-triacetoxymetylbenzén (9,3 g, 13,8 mmol) sa suspendoval v metanole (120 ml) a pridal sa K^CO-j (0,32 g, 2,3 mmol). Zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas lž hodín a po neutralizácii roztoku s 2 mol/1 vodným roztokom HC1 sa organické rozpúšťadlo odparilo. Zvyšok sa suspendoval vo vode a biela tuhá látka sa oddelila filtráciou a premyla vodou, metanolom a éterom. Výťažok: 7,1 g (94 %).

¹H NMR (DMSO-dg): 5,08 (s, 6H), 3,35 (široký s, 3H).

d. 1,3,5-trijódbenzén-2,4,6-trialdehyd

1.3.5- trijód-2,4,6-trihydroxymetylbenzén (4,5 g, 8,2 mmol) sa rozpustil v DMSO (80 ml). Pridali sa trietylamín (51,7 ml, 371 mmol) a pyridín.SO^ (11,8 g, 74,2 mmol) a zmes sa premiešavala počas 2 hodín. Oddelili sa dve fázy a nižšia fáza sa ochladila na 0 °C, vyliala sa do vody (150 ml) a premiešavala sa počas 30 minút pri 0 ’C. Biela tuhá látka sa oddelila filtráciou, premyla sa vodou a vysušila sa. Výťažok: 3,0 g (67 %) .

‘H NMR (DMSO-dg) : 9,64 (s).

e. 1,3,5-trijód-2,4,6-tris(2-prop-l-énová kyselina)benzénmetylester

Hydrid sodný (194 mg 80 % hmotnostných v minerálnom oleji, 6,5 mmol) sa rozpustil v DMSO (13 ml) a pridal sa trietylfosfónacetát (1,16 ml, 5,80 mmol). Po premiešavaní roztoku počas 30 minút sa pridal l,3,5-trijódbenzén-2,4,6trialdehyd (700 mg, 1,3 mmol) a reakčná zmes sa premiešavala počas 16 hodín. Potom sa pridala voda (200 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 1 vodným roztokom 2 mol/1 HC1. Kaša sa extrahovala s dichlórmetánom (2 x 200 ml) a spojené organické fázy sa premyli vodou (3 x 50 ml), vysušili sa (MgSO^) a odparili sa. Čistenie kolónovou chromatografiou (silikagél,

CH2Cl2-metanol 99:1) poskytlo čistý produkt ako bielu tuhú látku. Výťažok: 426 mg (44 %).

²H NMR (CDC1₃): 7,48 (d, 3H, J 16,2 Hz), 5,95 (d, 3H,

J 16,2 Hz), 4,30 (q, 6H, J 7,2 Hz), 1,36 (t, 9H, J 7,2 Hz).

f. 1,3,5-trijód-2,4,6-tris(1-hydroxypropén-3-yl)benzén

1,3,5-trijód-2,4,6-tris(2-prop-l-énová kyselina)benzénmetylester (650 mg, 0,87 mmol) sa rozpustil v toluéne (10 ml) a pri 0 ’C sa pridal hydrid diizobutylhlinitý (5,44 ml roztoku 1,2 mol/1 v toluéne). Po premiešavaní počas 40 minút pri 0 ’C sa roztok vylial do metanolu 50 ml) a kaša, ktorá vznikla, sa premiešavala ďalších 45 minút. Tuhé látky sa odfiltrovali a roztok sa odparil, čím poskytol biely tuhý zvyšok, ktorý sa čistil rozotretím s dietyléterom. Výťažok: 510 mg (94 %).

¹H NMR (CD₃OD): 6,44 (d, 3H, J 16,0 Hz), 5,57 (dt, 3H, J_d 16,0 Hz, J_z 5,8 Hz), 4,23 (m, 6H).

g. 1,3,5-trijód-2,4,6-tris(1-acetoxypropen-3-yl)benzén

1,3,5-trijód-2,4,6-tris-(l-hydroxypropén-3-yl)-benzén 560 mg, 0,90 mmol) sa rozpustil v zmesi pyridínu (8 ml) a anhydridu kyseliny octovej (8 ml). Po premiešavaní pri laboratórnej teplote- počas 16 hodín sa rozpúšťadlo odparilo a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC (RP-18, CH₃CN:H₂O 80:20). Výťažok 310 mg (46 %).

²Η NMR (CDC1₃): 6,46 (dt, 3H, J_d 16,2 Hz, J_t 1,6 Hz), 5,68 (dt, 3H, J_d 16,2 Hz, J_t 5,6 Hz), 4,83 (dd, 6H, 5,6 Hz,

J₂ 1.6 Hz), 2,12 (s, 9H).

¹³C NMR (CDC1₃): 170,6, 146,3, 140,9, 131,5, 98,7, 63,5,

20,9.

h. 1,3,5-trijód-2,4-di(1,2,3-trihydroxy-l-propylj-6-(3-hydroxypropen-l-yl)benzén

1,3,5-trijód-2,4,6-tris(1-acetoxypropen-3-yl)-benzén (100 mg, 0,133 mmol) sa rozpustil v kyseline mravčej (5 ml) obsahujúcej peroxid vodíka (0,054 ml). Zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 21 hodín a rozpúšťadlo sa odparilo. Pridal sa metanol (5 ml) nasledovaný tuhým K2CO3 (195 mg) a po premiešavaní počas 1 hodiny sa rozpúšťadlo odparilo. Produkt sa čistil preparatívnou HPLC (CH₃CN:H2O 3:97).

¹H NMR (D₂0): 6,45 (d, 1H, J 16,0 Hz), 5,40 - 5,55 (m, 1H), 4,54 - 4,90 (m, 11H), 4,23 - 4,31 (m, 2H), 3,62 - 3,91 (m, 4H) .

MS (ESP): 692 (M⁺).

Príklad 2

1,3,5-trijód-2,4,6-tri(1,2,3-trihydroxy-l-propyl)benzén

1,3,5-trij ód-2,4,6-tris-(l-acetoxypropen-3-yl)-benzén (100 mg, 0,133 mmol, z Príkladu lg) sa rozpustil v kyseline mravčej (5 ml), ktorá obsahovala peroxid vodíka (0,081 ml). Zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 40 hodín a rozpúšťadlo sa odparilo. Pridal sa metanol (5 ml) nasledovaný tuhým K2CO3 (195 mg) a po premiešavaní počas 1 hodiny sa rozpúšťadlo odparilo. Produkt sa čistil preparatívnou HPLC (CH₃CN:H₂O 3:97).

¹H NMR (CD₃OD): 4,57 - 4,94 (m, 15H), 3,62 - 3,99 (m, 6H) .

MS (ESP): 744 (M+18).

Príklad 3

N-acetyl-3-hydroxymetyl-5- (2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl) -2, 4,6-trijódfenyl]-N-(2,3-dihydroxypropy1)-2,4,6-trij ódanilín

a. Metylester kyseliny l-hydroxymetyl-3-nitro-5-benzoovej

Monometylester kyseliny 1-nitroizoftalovej (22,5 g, 100 mmol) sa rozpustil v suchom THF (675 ml) a pridal sa

BF₃.Et₂° (25,2 ml, 200 mmol). Potom sa v priebehu 1 hodiny po častiach pridal NaBH₄ (5,1 g, 135 mmol). Po premiešavaní počas 2 ďalších hodín, sa pridal etanol (20 ml), pomaly nasledovaný vodou (200 ml) a dietyléterom (400 ml). Fázy sa oddelili a vodná fáza sa extrahovala ešte raz s dietyléterom (100 ml). Spojené organické fázy sa premyli s nasýteným vodným roztokom NaHCO₃, vysušili sa (Na₂S0₄) a odparili sa. Výťažok: 20 g, (96 %). HPLC analýza ukázala >95 % čisťotu produktu.

^TH NMR (CDC1₃): 8,72 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 4,86 (s, 2H), 3,97 (s, 3H) , 2,37 (široký s, 1H).

b. l-hydroxymetyl-3-nitro-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)benzén

Metylester z Príkladu 3a (20,5 g, 97 mmol) sa zmiešal s 2,3-dihydroxypropylamínom (9,6 g, 106 mmol) a zmes sa zahrievala na 90 ’C. Po 45 minútach sa tlak znížil na 26,6 kPa a zahrievanie pokračovalo počas 2 hodín. Surový produkt, ktorý bol podlá HPLC analýzy >95 % čistoty, sa použil bez ďalšieho čistenia v nasledujúcom kroku. Výťažok: 22,8 g (87 %) .

^XH NMR (CD₃OD): 8,57 (s, 1H), 8,38 (s, 1H) , 8,19 (s, 1H), 4,77 (s, 2H), 3,81 - 3,88 (m, 1H), 3,39 - 3,63 (m, 4H).

c. 3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)anilín

1-hydroxymetyl-3-nitro-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)benzén (12,0 g, 44,4 mmol) sa hydrogenoval v metanole (150 ml) pri 414 kPa H₂ za použitia Pd/C (10 % hmotnostných, 100 mg) ako katalyzátora. Katalyzátor sa odstránil filtráciou a zvyšok sa odparil. Prídavok metanolu (10 ml) vyzrážal produkt ako bielu tuhú látku, ktorá sa odfiltrovala a vysušila. Výťažok: 6,6 g (62 %).

¹H NMR (CD₃OD): 7,05 - 7,09 (m, 1H), 6,98 - 7,03 (m, 1H), 6,83 - 6,87 (m, 1H), 4,53 (s, 2H), 3,77 - 3,85 (m, 1H), 3,8 - 3,59 (m, 4H), 3,32 - 3,42 (m, 1H).

MS (ESP, m/e): 241 ([M+l]⁺, 100 %).

d. 3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)2,4,6-trijódanilín

3-hydroxymety1-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbony1)anilín (500 mg, 2,1 mmol) sa rozpustil vo vode (175 ml) a po častiach 0,1 ml sa v priebehu 8 hodín pridal vodný roztok KICI2 (70 % hmotnostných). Celkovo sa pridal 1,0 ml KICI2 roztoku. Po celkovom reakčnom čase 6 hodín sa roztok extrahoval etylacetátom (1000 ml), ktorý sa oddelil a premyl vodným roztokom Na₂S₂0₃ (0,2 mol/l, 100 ml). Odparenie nasledované čistením preparatívnou HPLC poskytlo 432 mg (33 %) čistého produktu.

^XH NMR (CD₃OD): 5,10 (s, 2H), 3,90 - 3,98 (m, 1H), 3,72 (ddd, J₁ = 0,7 Hz, J₂ = 4,2 Hz, J₃ = 11,4 Hz, 1H), 3,60 (dd, = 6,0 Hz, J₂ = 11,4 Hz, 1H), 3,49 (ddd, 1_χ = 1,2 Hz, J₂ = 6,0 Hz, J₃ = 13,5 Hz, 1H), 3,37 (ddd, = 1,2 Hz, J₂ = 6,1 Hz, J₃ = 13,2 Hz, 1H), 2,62 (s, 1H), 2,28 a 2,34 (2s,

2H) .

MS (ESP, m/e): 618 (M⁺, 100 %), 640 ([M+Na]⁺, 55 %).

e. N-acetyl-3-acetoxymetyl-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trij ódanilín

3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)2,4,6-trijódanilín (3,3 g, 5,3 mmol) sa suspendoval v ľadovej kyseline octovej (12 ml) obsahujúcej anhydrid kyseliny octovej (48 ml) a koncentrovanú kyselinu sírovú (0,08 ml). Zmes sa premiešavala pri 60 °C počas 3hodín, nechala sa ochladnúť na laboratórnu teplotu a pridali sa CH₂C1₂ (100 ml) a a voda (100 ml). Organická fáza sa premyla vodou (3 x 50 ml) a nasýteným vodným roztokom NaHC0₃ (2 x 50 ml). Po vysušení (MgSO^ a odparení sa zvyšok rozpustil v zmesi CH₂C1₂ a metanolu (9:1) a prefiltroval sa cez tenkú vrstvu oxidu kremičitého a odparil sa. Výťažok: 3,0 g (71 %).

¹H NMR (CDC1₃): 8,27 - 8,32 (m, IH), 5,51 (s, 2H), 5,18

- 5,22 (m, IH), 4,17 - 4,42 (m, 2H), 3,67 - 3,84 (m, IH), 3,41 - 3,60 (m, IH), 2,56 (s, 3H), 2,04 - 2,14 (8s, 12H).

MS (ESP, m/e): 786 (M⁺, 100 %), 809 ([M+Na]⁺, 81 %).

f. N-acetyl-3-hydroxymetyl-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)-N-(2,3-dihydroxypropyl)-2,4,6-trijódanilín

N-acetyl-3-acetoxymetyl-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódanilín (1,0 g, 1,27 mmol) sa suspendoval v zmesi metanolu (6 ml) a vody (30 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12,0 pomocou vodného roztoku 2 mol/1 NaOH. Po premiešavaní počas 1 hodiny sa pridal l-bróm-2,3-propándiol (0,99 g, 6,4 mmol) a pH sa nastavilo na hodnotu 11,6 pomocou vodného roztoku 2 mol/1 HC1. l-bróm-2,3-propándiol (0,99 g, 6,4 mmol) sa pridal znova po 16 a 18 hodinách a po 24 hodinách sa pH nastavilo na hodnotu 6,5 pomocou vodného roztoku 2 mol/1 HC1. Po odparení sa zvyšok čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 0,373 g (40 %).

¹H NMR (D₂0): 5,20 (s, 2H), 3,23 - 3,99 (m, 12H), 1,79 (2s,

3H) .

MS (ESP, m/e): 734 (M⁺, 60 %), 756 ([M+Na]⁺, 100 %).

Príklad 4

N,N’-bis(hydroxyacetyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol

a. 3,5-diaminobenzylalkohol

Roztok 3,5-dinitrobenzylalkoholu (2,2 g, 11,1 mmol) v metanole (90 ml) a Pd/C katalyzátor (10 % hmotnostných, 100 mg) sa hydrogenoval v Parrovom prístroji pri 414 kPa. Roztok sa prefiltroval a rozpúšťadlo sa odstránilo odparením. Surový produkt sa použil bez čistenia v nasledujúcom kroku.

¹H NMR (CDC1₃): 6,12-6,14 (m, 2H), 5,96 - 5,98 (m, 1H),

4,51 (s, 2H), 3,60 (široký s, 4H).

b. 3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol

Surový produkt z predchádzajúceho príkladu bol rozpustený v zmesi metanolu (310 ml) a vody (60 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 1,5 pomocou vodného roztoku 4 mol/1 HC1. Roztok KICI2 (70 % hmotnostných, 11,2 g) sa pridal po kvapkách takou rýchlosťou, že farba zmizla po každom prídavku. Po premiešavaní počas ďalších 5 minút sa zrazenina odfiltrovala a premyla sa vodou (3 x 50 ml), éterom (3 x 50 ml) a vysušila sa. Výťažok: 4,5 g (80 %).

^ΧΗ NMR (DMSO-dg): 5,20 (s, 4H), 4,81 - 4,94 (m, 3H).

c. 3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát

3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol (4,42 g, 8,56 mmol) sa rozpustil v zmesi pyridínu (50 ml) a anhydridu kyseliny octovej (2,5 ml) a zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 16 hodín. Rozpúšťadlá sa odparili a zvyšok sa premyl éterom (3 x 50 ml), vodou (3 x 50 ml) a vysušil sa. Výťažok 4,52 g (95 %).

^ΧΗ NMR (DMSO-dg): 5,35 (s, 2H), 5,28 (s, 4H), 2,04 (s, 3H). ¹³C NMR (DMSO-dg): 170,5, 148,1, 139,0, 78,0 73,6, 70,0,

20,8.

d. 3,5-bis(acetoxyacetylamino)-2,4,6-trijódbenzylacetát

3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (5,58 g, 10 mmol) sa zmiešal s acetoxyacetylchloridom (3,22 ml, 30 mmol) a dimetylacetamidom (50 ml) a zmes sa premiešavala počas 17 hodín. Pridal sa éter (600 ml) a po 20 minútach sa zrazenina oddelila, premyla sa vodou (3 x 50 ml) a vysušila sa. Rekryštalizácia z acetonitrilu poskytla 3,3 g (44 %) čistého produktu.

¹H NMR (DMSO-dg): 10, 27 a 10,19 (2s, 2:1, 2H), 5,51 (s,

2H), 4,66 (s, 4H), 2,13 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,06 (s, 3H).

e. N,N’-bis(hydroxyacetyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol

3,5-bis(acetoxyacetylamino)-2,4,6-trijódbenzylacetát (152 mg, 0,2 mmol) sa rozpustil v zmesi metanolu (6 ml) a vodného roztoku 1 mol/l NaOH (2 ml) a roztok sa premiešaval počas 2 hodín pri laboratórnej teplote. Po neutralizácii pomocou 1 mol/l HCI sa rozpúšťadlá odstránili odparením a produkt s čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 105 mg (83 %).

MS (ESP, m/e): 655 ([M+Na]⁺, 100 %) .

Príklad 5

N, N’-bis(hydroxyacetyl)-N-(2-hydroxyetyl)-3,5-diamino-2,4,6trij ódbenzylalkohol

a. N,N’-bis(acetoxyacetyl)-N-(2-acetoxyetyl)-3,5-diamino2.4.6- trij ódbenzylacetát

3,5-bis(acetoxyacetylamino)-2,4,6-trijódbenzylacetát (2,15 g, 2,84 mmol) sa-rozpustil v zmesi DMSO (5 ml) a dimetylacetamidu (5 ml), ktorá obsahovala Cs₂C0₃ (1,0 g, 3,07 mmol) a 2-brómetylacetát (0,31 ml, 2,84 mmol). Zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 48 hodín, pridali sa éter (100 ml) a vodný pufor NaH₂PO4 a organická fáza sa premyla vodou a vysušila sa. Čistenie preparatívnou HPLC poskytlo 520 mg (22 %) produktu.

^XH NMR (CDC1₃): 7,86 (s, 1H), 5,66 (s, 2H), 4,80 (s, 2H),

3,81 - 4,44 (m, 6H), 2,13 - 2,27 (m, 12H) .

MS (ESP, m/e): 845 ([M+l] ⁺ , 100 %) , 866 ([M+Na]'*\ 24 %) .

b. N,N’-bis(hydroxyacetyl)-N-(2-hydroxyetyl)-3,5-diamino2.4.6- trijódbenzylalkohol

N,N’-bis(acetoxyacetyl)-N-(2-acetoxyetyl)-3,5-diamino2.4.6- trijódbenzylacetát (0,50 g, 0,59 mmol) sa rozpustil v zmesi metanolu (5 ml) , vody (5 ml) a vodného roztoku 1 mol/1 NaOH (1 ml) . Roztok sa premiešaval počas 2 hodín, pH sa nastavilo na hodnotu 2 použitím vodného roztoku HCI a produkt sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 240 mg (67 %).

^H NMR (DMSO-dg) : 9,85 (široký s, 1H) , 5,77 (široký s, 1H) , 4,79 - 5,26 (m, 3H), 3,20 - 3,71 (m, 6H).

MS (ESP, m/e): 676 (M⁺, 57 %), 698 ([M+Na]⁺, 100 %).

Príklad 6

N,N’ -bis(hydroxyacetyl)-N,N’-bis(2-hydroxyetyl)-3,5-diamino2.4.6- trijódbenzylalkohol

3,5-bis(acetoxyacetylamino)-2,4,6-trijódbenzyl-acetát (190 mg, 0,25 mmol), pripravený podľa Príkladu 4, sa rozpustil v dimetylacetamide (5 ml) pod argónovou atmosférou. Pridali sa 2-brómetylacetát (0,22 ml, 2,0 mmol) a ^CO^ (138 mg, 1,0 mmol). Po 16 hodinách sa pridali DMSO (1,5 ml), 2-brómetylacetát (0,22 ml, 2,0 mmol) a K2CO3 (138 mg, 1,0 mmol) a suspenzia sa premiešavala počas ďalších 24 hodín. Pridal sa vodný roztok NaH2?O4 a výsledný roztok sa extrahoval éterom (3 x 25 ml). Spojené organické fázy sa premyli vodou (4 x 20 ml) a potom sa vysušili (MgSO^). Rozpúšťadlo sa odstránilo odparením a zvyšok, bezfarebný olej, sa rozpustil v zmesi metanolu (3 ml) a vodného roztoku 1 mol/1 NaOH (3 ml). Roztok sa premiešaval počas 1 hodiny, pH sa nastavilo na hodnotu 6 pomocou vodného roztoku HCI a rozpúšťadlá sa odstránili odparením. Čistenie preparatívnou HPLC poskytlo 60 mg (33 %) produktu.

MS (ESP, m/e): 720 (M⁺, 100 %) , 742 ([M+Na] ⁺ , 36 %).

Príklad 7

N, N’ - bis(hydroxyacetyl)-N-(2,3-dihydroxypropyl)-3,5-diamino2,4,6-trijódbenzylalkohol

a. N,N’-bis(acetoxyacetyl)-N-[(2,2-dimetyl-l,3-dioxolan4-yl)-metyl]-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát

3,5-bis(acetoxyacetylamino)-2,4,6-trijódbenzyl-acetát (90 mg, 0,12 mmol), pripravený podľa Príkladu 4, sa rozpustil v zmesi dimetylacetamidu (3 ml) a DMSO (3 ml). Pridali sa 4-brómmetyl-2,2-dimetyl-l,3-dioxolán (0,097 g, 0,5 mmol) a CS2CO3 (0,10 g, 0,3 mmol) a roztok sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 48 hodín. Pridal sa vodný roztok NaH2PO4 a roztok sa extrahoval éterom (3 x 25 ml) . Spojené organické fázy sa premyli vodou (3 x 15 ml) , vysušili sa (MgSO^) a odparili sa. Čistenie preparatívnou HPLC poskytlo 36 mg (35 %) čistého produktu.

¹H NMR (DMSO-dg): 10,30 (široký s, 1H), 5,53 (s, 2H), 3,61 - 4,68 (m, 9H), 2,13 (s, 3H), 2,07 (s, 3H), 2,06 (s, 3H), 1,17 - 1,34 (m, 6H).

MS (ESP, m/e): 894 ([M+Na]⁺, 100 %), 910 ([M+K]⁺, 11 %) .

b. N,N’ - bis(hydroxyacetyl)-N-(2,3-dihydroxypropyl)-3,5-diamino-2,4,6-trij ódbenzylalkohol

N,N’-bis(acetoxyacetyl)-N-[(2,2-dimetyl-l,3-dioxolan-4yl)-metyl]-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (36 mg,

O, 042 mmol) sa rozpustil v zmesi metanolu (3 ml) a vody (4 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12 použitím vodného roztoku 1 mol/1 NaOH. Po premiešavaní počas 2 hodín sa pH nastavilo na hodnotu 1 použitím vodného roztoku 1 mol/1 HC1 a premiešavanie pokračovalo počas 16 hodín. Roztok sa neutralizoval vodným pufrom NaH2PO4> rozpúšťadlá sa odstránili odparením a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC, čím poskytol 24 mg (81 %) čistého produktu.

MS (ESP, m/e): 704 (M⁺, 100 %) , 726 ([M+Na] ⁺ , 34 %).

Príklad 8

N,N’-bis(2-hydroxypropionyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol

a. N,N’-bis(2-acetoxypropionyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát

3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (2,79 g, 5,0 mmol) sa rozpustil v dimetylacetamide (25 ml) a ochladil sa na 0 ’C. Po kvapkách sa pridal 2-acetoxypropionylchlorid (3,73 g, 25 mmol) a zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 17 hodín. Rozpúšťadlá sa odparili a zvyšok sa rozotrel s dietyléterom. Tuhý zvyšok sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli za použitia CH2CI2 a acetonitrilu (5:1) ako eluenta. Výťažok: 2,21 g (56 %) .

¹H NMR (DMSO-dg): 10,20 - 10 23 (m, 2H), 5,52 (s, 2H), 5,21 - 5,24 (m, 2H), 2,06 - 2,13 (m, 9H), 1,51 (d, J = 6,9 Hz, 6H) .

b. N,N’-bis(2-hydroxypropionyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol

N,N’-bis(2-acetoxypropionyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (0,16 g, 0,2 mmol) sa rozpustil v zmesi metanolu (5 ml) a vody (5 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12 použitím vodného roztoku 1 mol/1 NaOH. Po premiešavaní počas 15 hodín sa roztok neutralizoval s 1 mol/1 HC1 a rozpúšťadlá sa odstránili odparením. Čistenie preparatívnou HPLC poskytlo 61 mg (46 %) čistého produktu.

MS (ESP, m/e): 660 (M⁺, 5 %), 682 ([M+Na]⁺, 100 %), 698 ([M+K] ⁺ , 17 %) .

Príklad 9

N,N’-bis(2-hydroxypropionyl)-N-(2-hydroxyetyl)-3,5-diamino2,4,6-trijódbenzylalkohol

a. N,N’-bis(2-acetoxypropionyl)-N-(2-acetoxyetyl)-3,5-diamino-2,4,6-trij ódbenzylacetát

N,N’-bis(2-acetoxypropionyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (393 mg, 0,50 mmol) sa rozpustil v zmesi dimetylacetamidu (4 ml) a DMSO (4 ml), ktorý obsahoval 2-brómetylacetát (0,083 g, 0,50 mmol) a Cs₂CO₃ (240 mg, 0,75 mmol). Roztok sa premiešaval počas 17 hodín, pridala sa voda (20 ml) zmes sa extrahovala éterom (3 x 25 ml). Spojené organické fázy sa premyli vodou (3 x 25 ml), vysušili sa (MgS0₄) a odparili sa. Zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC, čím poskytol 80 mg (18 %) čistého produktu.

¹H NMR (CD₃OD): 5,72-5,82 (m, 2H), 5,20 - 5,42 (m, 2H), 3,55 - 4,48 (m, 4H), 1,93 - 2,24 (m, 12H), 1,66 (d, J = 7,1 Hz, 6H).

MS (ESP, m/e): 1004 ([M+Cs]⁺, 100 %).

b. N,N’-bis(2-hydroxypropionyl)-N-(2-hydroxyetyl)-3,5-diami no-2,4,6-trijódbenzylalkohol

N,N’-bis(2-acetoxypropionyl)-N-(2-acetoxyetyl)-3,5-di amino-2,4,6-trijódbenzylacetát (120 mg, 0,14 mmol) sa roz pustil v zmesi vody (7 ml) a vilo na hodnotu 12 použitím Zmes sa premiešavala počas 2 notu 7 vodným roztokom HC1 i dukt sa čistil preparatívnou ¹H NMR (CD₃OD): 5,27 - 5,34 3,82 - 4,12 (m, 4H), 3,55

3H), 1,23 - 1,32 (m, 3H).

MS (ESP, m/e): 726 ([M+Na]⁺, metanolu (7 ml) a pH sa nastavodného roztoku 1 mol/1 NaOH. hodín, pH sa nastavilo na hodrozpúšťadlá sa odparili. ProHPLC. Výťažok: 70 mg (72 %).

(m, 2H), 4,31 - 4,41 (m, 1H),

3,73 (m, 1H), 1,51 - 1,60 (m,

100 %).

Príklad 10

N,N’-bis(2-hydroxypropionyl)-N,N’-bis(2-hydroxyetyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol

a. N,N’-bis(2-acetoxypropionyl)-N,N’-bis(2-acetoxyetyl)-3,5diamino-2,4,6-trij ódbenzylacetát

N,N’-bis(2-acetoxypropionyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (197 mg, 0,25 mmol) sa rozpustil v zmesi dimetylacetamidu (5 ml) a DMSO (1,5 ml), ktorý obsahoval 2-brómetylacetát (0,11 ml, 1,0 mmol) a Cs2COj (162 mg, 0,50 mmol). Zmes sa premiešavala počas 67 hodín, pridala sa voda (20 ml) zmes sa extrahovala éterom 2 x 75 ml). Spojené organické fázy sa premyli vodou (5 x 75 ml), vysušili sa (^2804) a odparili sa. Zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC, čím poskytol 35 mg (15 %) čistého produktu.

¹H NMR (DMSO-dg): 5,49 - 5,73 (m, 2H), 4,97 - 5,22 (m, 2H), 3,49 - 4,00 (m, 6H), 1,86 - 2,08 (m, 15H), 1,09 - 1,58 (m, 6H) .

b. N,N’-bis(2-hydroxypropionyl)-N,N *-bis(2-hydroxyetyl)-3,5diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol

N,N’-bis(2-acetoxypropionyl)-N,N’-bis(2-acetoxyetyl)3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (170 mg, 0,18 mmol) sa rozpustil v zmesi metanolu (8 ml) a vody (8 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12 použitím vodného roztoku 1 mol/1 NaOH. Po premiešavaní počas 3 hodín sa roztok neutralizoval pomocou vodného roztoku HC1. Čistenie preparatívnou HPLC poskytlo 50 mg (37 %) čistého produktu.

¹H NMR (CD₃OD): 5,26-5,38 (m, 2H), 3,44 - 4,08 (m, 6H),

1,32 - 1,59 (m, 6H).

MS (ESP, m/e): 770 ([M+Na]⁺, 100 %).

Príklad 11

N,N’-bis(hydroxypropionyl)-N-(2,3-dihydroxypropyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol

a. N,N’-bis(acetoxypropionyl)-N-[(2,2-dimetyl-l,3-dioxolan4-yl)-metyl]-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát

N,N’-bis(2-acetoxypropionyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (393 mg, 0,50 mmol) sa rozpustil v zmesi DMSO (4 ml) a dimetylacetamidu (4 ml), ktorá obsahovala Cs₂CO₃ (1,80 g, 5,52 mmol) a 4-brómmetyl-2,2-dimetyl-l,3-dioxolán (1,0 ml). Zmes sa premiešavala 7 dní a potom sa spracovala analogicky k Príkladu 7a. Čistenie preparatívnou HPLC poskytlo 115 mg (26 %) čistého produktu.

^XH NMR (CD₃OD): 5,61-5,75 (m, 2H), 5,03 - 5,44. (m, 2H), 3,47 - 4,55 (m, 6H), 1,98 - 2,23 (m, 9H), 1,30 - 1,71 (m, 12H) .

MS (ESP, m/e): 922 ([M+Na]⁺, 100 %).

b. N,N’-bis(hydroxypropionyl)-N-(2,3-dihydroxypropyl)-3,5diamino-2,4,6-trij ódbenzylalkohol

N,N’-bis(acetoxypropionyl)-N-[(2,2-dimetyl-l,3-dioxolan-4-yl)-metyl]-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (115 mg, 0,13 mmol) sa rozpustil v zmesi metanolu (8 ml) a vody (8 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12 použitím vodného roztoku 1 mol/1 NaOH. Po 2,5 hodine sa pH nastavilo na hodnotu 1 použitím vodného roztoku 2 mol/1 HCI. Po premiešavaní počas 17 hodín sa roztok neutralizoval vodným pufrom NaH^O^ a rozpúšťadlá sa odstránili odparením. Čistenie preparatívnou HPLC poskytlo 65 mg (69 %) čistého produktu.

MS (ESP, m/e): 756 ([M+Na]⁺, 100 %).

Príklad 12

N,N’-bis(hydroxypropionyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol

a. N,N’-bis(2,2-dimetyl-l,3-dioxolán-4-karbonyl)-3,5-diamino-2,4,6-trij ódbenzylacetát

3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (3,54 g, 6,3 mmol) a chlorid kyseliny 2,2-dimetyl-l,3-dioxolán-4-karboxylovej (3,13 g, 19 mmol) sa rozpustili v dimetylacetamide (40 ml) a roztok sa premiešaval počas 3,5 hodiny. Rozpúšťadlo sa odstránilo odparením a zvyšok sa opracoval s vodným roztokom NaHCOg. Kryštalický zvyšok sa odfiltroval, premyl sa vodou a vysušil. Čistenie bleskovou chromatografiou za použitia zmesi CH2CI2 a CH^CN (3:1) ako eluenta poskytlo 1,90 g (37 %) čistého produktu.

¹H NMR (DMSO-dg): 9,93 - 10,02 (m, 2H), 5,30 (s, 2H), 4,58 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 4,29 (t, J = 7,3 Hz, 1H), -4,10 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 2,06 (s, 3H), 1,54 (s, 3H), 1,38 (s, 3H) .

MS (ESP, m/e): 902 ([M+dimetylacetamid] ⁺, 100 %) .

b. N,N’-bis(2,3-dihydroxypropionyl)-3,5-diamino-2,4,6-trij ódbenzylalkohol

N,N’-bis(2,2-dimetyl-l,3-dioxolán-4-karbonyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (1,25 g, 1,55 mmol) sa rozpustil v zmesi vody (50 ml), metanolu (25 ml) koncentrovanej HCI (0,5 ml). Po premiešavaní počas 4 hodín sa roztok neutralizoval vodným roztokom Na^PC^ a rozpúšťadlá sa odstránili odparením. Zvyšok sa rozpustil vo vode (10 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12 použitím vodného roztoku NaOH. Po 30 minútach sa roztok znova neutralizoval a rozpúšťadlo s odparilo. Produkt sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 483 mg (45 %).

^XH NMR 9,65 - 9,83 (m, 2H), 5,77 (s, 2H), 5,20 (s, 1H), 4,95 - 5,03 (m, 2H), 4,81 (s, 2H), 4,00 - 4,08 (m, 2H), 3,72 - 3,82 (m, 2H), 3,50 - 3,63 (m, 2H).

MS (ESP, m/e): 692 (M⁺, 62 %), 714 ([M+Na]⁺, 100 %).

Príklad 13

N,N’-bis(2,3-dihydroxypropionyl)-N-(2-hydroxyetyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol

N,N’-bis(2,2-dimetyl-l,3-dioxolán-4-karbonyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (204 mg, 0,25 mmol) sa rozpustil v zmesi dimetylacetamidu (4 ml) a DMSO (2,5 ml), kto30 rá obsahovala Cs₂C0₃ (650 mg, 2,0 mmol) a 2-brómetylacetát (0,035 ml, 0,31 mmol). Po premiešavaní počas 1 týždňa sa pridal éter (150 ml) a pufer NaH₂PO₄ (100 ml) , organická fáza sa oddelila a vodná fáza sa extrahovala éterom (150 ml). Spojené organické fázy sa potom premyli vodou (6 x 100 ml), vysušili sa (Na₂S0₄) a odparili sa. Zvyšok sa rozpustil v zmesi metanolu (20 ml) a vody (20 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12 pomocou vodného roztoku NaOH. Po premiešavaní počas 1 hodiny sa pH nastavilo na hodnotu 1,5 pomocou koncentrovanej HC1 a premiešavalo sa počas ďalších 16 hodín. Roztok neutralizoval vodným roztokom NaH₂P0₄ a rozpúšťadlá sa odparili. Preparatívna HPLC poskytla 55 mg (30 %) čistého produktu .

MS (ESP, m/e): 736 (M⁺, 28 %), 758 ([M+Na] ⁺ , 100 %).

Príklad 14

N,N’-bis(2,3-dihydroxypropionyl)-N,N’-bis(2-hydroxyetyl)3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol

N,N*-bis(2,2-dimetyl-l,3-dioxolán-4-karbonyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (204 mg, 0,25 mmol) sa rozpustil v zmesi dimetylacetamidu (5 ml) a DMSO (1,5 ml), ktorá obsahovala K₂CO₃ (276 mg, 2,0 mmol) a 2-brómetylacetát (0,44 ml, 4,0 mmol). Po premiešavaní počas 48 hodín sa pridal vodný roztok pufra NaH₂PO₄ a zmes sa extrahovala éterom (2 x 150 ml). Spojené organické fázy sa premyli vodou (6 x 100 ml), vysušili sa (Na₂SO₄) a odparili sa. Tuhý zvyšok sa rozpustil v zmesi metanolu (12 ml) a vody (12 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu. 12 pomocou vodného roztoku NaOH. Po premiešavaní počas 18 hodín sa roztok okyslil pomocou koncentrovanej HC1 (0,70 ml) a premiešavanie pokračovalo počas 3 hodín. Roztok neutralizoval a rozpúšťadlá sa odstránili odparením. Produkt sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 98 mg (50 %) .

MS (ESP, m/e): 802 ([M+Na]⁺, 100%).

Príklad 15

N,N’-bis(2,3-dihydroxypropionyl)-N-(2,3-dihydroxypropyl)3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylalkohol

N,N’-bis(2,2-dimetyl-l,3-dioxolán-4-karbonyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzylacetát (408 mg, 0,50 mmol) sa rozpustil v zmesi dimetylacetamidu (4 ml) a DMSO (4 ml), ktorá obsahovala Cs2CO₃ (1,80 mg, 5,52 mmol) a chlorid kyseliny 2,2-dimetyl-l,3-dioxolán-4-karboxylovej (2,0 ml). Po premiešavaní počas 8 dní sa pridal vodný roztok NaH2P04 (100 ml) a zmes sa extrahovala dietyléterom (2 x 150 ml). Spojené organické fázy sa potom premyli vodou (6 x 100 ml), vysušili sa (^2804) a odparili sa. Zvyšok sa rozpustil v zmesi metanolu (10 ml) a vody (10 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12 pomocou vodného roztoku NaOH. Po premiešavaní počas 2 hodín sa pridala koncentrovaná HC1 (1,0 ml) a premiešavanie pokračovalo počas 16 hodín. Po neutralizácii sa rozpúšťadlá sa odparili a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 149 mg (39 %).

MS (ESP, m/e): 766 (M⁺, 60 %) , 788 ([M+Na]⁺, 100 %).

Príklad 16

Oxalát bis[3-hydroxymety1-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódbenzénamidu]

a. 3-acetoxymetyl-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)2,4,6-trijódanilín

3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)2,4,6-trijódanilín (1,89 g, 3,06 mmol) pripravený podľa Príkladu 3d, sa rozpustil v zmesi anhydridu kyseliny octovej (5 ml) a pyridínu (5 ml). Zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 24 hodín, pridal sa CH2CI2 (100 ml) a roztok sa premyl vodou (3 x 25 ml), nasýteným vodným roztokom NaHC0₃, vysušil sa (^28()4) a odparil sa. Produkt sa čistil bleskovou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi CH₂C1₂ a metanolu (98:2) ako eluenta. Výťažok: 1,30 g (57 %).

NMR (CDC1₃): 6,10 - 6,25 (m, 1H), 5,48 (s, 2H), 5,20

- 5,28 (m, 1H), 4,22 - 4,43 (m, 2H), 3,53 - 3,89 (m, 2H),

2,06 - 2,13 (m, 9H).

MS (ESP, m/e): 744 (M⁺, 100 %).

b. Oxalát bis[3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódbenzénamidu]

3-acetoxymetyl-5-(2,3-diacetoxypropylamino-karbonyl)2,4,6-trijódanilín (100 mg, 0,134 mmol) sa rozpustil v dioxáne (1,0 ml) a roztok sa zahrieval na 90 ’C. Pridal sa oxalylchlorid (0,096 mmol) a zmes sa premiešavala pri 78 ’C počas 17 hodín. Po ochladení na laboratórnu teplotu sa pridala voda (1,0 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12 pomocou vodného roztoku NaOH. Po premiešavaní počas 4 hodín sa roztok neutralizoval, rozpúšťadlá sa odparili a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 14 mg (16 %).

^TH NMR (CD₃OD): 5,24 (s, 2H), 3,38 - 4,03 (m, 10H)

MS (ESP, m/e): 766 (M⁺, 60 %), 788 ([M+Na]⁺, 100 %).

Príklad 17

Malonát bis[3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódbenzénamidu]

3-acetoxymetyl-5-(2,3-diacetoxypropylamino-karbonyl)2,4,6-trijódanilín (100 mg, 0,134 mmol) pripravený podľa Príkladu 16a, sa rozpustil v dioxáne (1,0 ml) a pridal sa malonylchlorid (0,097 mmol). Zmes sa premiešavala pri 90 ’C počas 2 hodín a roztok sa nechal ochladiť na laboratórnu teplotu. Pridala sa voda (1,0 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12 pomocou vodného roztoku NaOH. Po premiešavaní pri 60 ’C počas 18 hodín sa roztok neutralizoval a rozpúšťadlá sa odparili. Produkt sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok:

mg (39 %) .

MS (ESP, m/e): 1304 (M⁺, 68 %) , 1326 ([M+Na]⁺, 100 %).

Príklad 18

N,N’-diacetyl-Ν,Ν’-bis[3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl) -2,4,6-trijódfenyl]-1,3-diamino-2-hydroxypropán

N-acetyl-3-acetoxymetyl-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódanilín (300 mg, 0,38 mmol) pripravený podľa Príkladu 3e, sa rozpustil v zmesi vody (1,2 ml) a metanolu (0,2 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12,0 pomocou vodného roztoku NaOH. Pridal sa epichlórhydrín (0,28 mmol) a zmes sa premiešavala pri laboratórnej teplote počas 65 hodín. Roztok sa neutralizoval a produkt sa izoloval pomocou preparatívnej HPLC. Výťažok: 60 mg (20 %).

MS (ESP, m/e): 1398 ([M+Na]⁺, 100 %) .

Príklad 19

N-[3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)2,4,6-trij ódfenyl]-N’-[3,5-bis(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl) -2,4,6-trij ódfenyl]močovina

a. N-[3-acetoxymetyl-5-(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)2,4,6-trijódfenyl]-N’-[3,5-bis(2,3-diacetoxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódfenyl]močovina

3,5-bis(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódanilín (260 mg, 0,30 mmol) sa rozpustil v dioxáne (1,0 ml) a pridal sa roztok fosgénu v toluéne (1,93 mol/1, 1,8 ml). Banka sa tesne uzavrela a potom sa zahrievala na 60 ’C počas 17 hodín. Po ochladení na teplotu okolia a rozpúšťadlo oddestilovalo za zníženého tlaku. Pridal sa dioxán (3 ml) a znova sa oddestiloval. Tento postup sa opakoval dva krát. Pridal sa dioxán (1 ml) nasledovaný 3-acetoxymetyl-5-(2,334 diacetoxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódanilínom (0,245 g, 0,31 mmol) a Hg(OCOCF₃)₂ (20 mg). Zmes sa premiešavala počas 16 hodín pri laboratórnej teplote, rozpúšťadlo sa odparilo a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 0,192 g (39 %).

MS (ESP, m/e): 1643 (M⁺, 100 %) , 1665 ([M+Na] ⁺ , 34 %).

b. N-[3-hydroxymetyl-5-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)2,4,6-trijódfenyl]-N’-[3,5-bis(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-2,4,6-trijódfenyl]močovina

Produkt z Príkladu 19a sa rozpustil v zmesi metanolu (5 ml) a vody (5 ml) a pH sa nastavilo na hodnotu 12 pomocou vodného roztoku 2 mol/1 NaOH. Po premiešavaní počas 2 hodín sa pH nastavilo na hodnotu 6,5 pomocou vodného roztoku HC1 a rozpúšťadlo sa odparilo. Produkt sa čistil pomocou preparatívnej HPLC. Výťažok: 68 mg (44 %).

MS (ESP, m/e): 1349 (M⁺, 15 %) , 1372 ([M+Na] ⁺ , 100 %).

Príklad 20

N-hydroxyacetyl-3- (1,2-dihydroxyetyl) -5- (2,3-dihydroxypropylaminokarbony1)-2,4,6-trijódanilín

a. Metylester kyseliny 3-nitro-5-(2-trimetylsilylvinyl)benzoovej

Zmes metylesteru kyseliny 3-jód-5-nitrobenzoovej (307 mg, 1,0 mmol), Pd(OAc)₂ (67 mg, 0,30 mmol), trifenylfosfínu (0,032 g, 0,60 mmol),.AgNO₃ (170 mg) 1,0 mmol), trietylamínu (0,167 ml, 1,2 mmol) a vinyltrimetylsilánu (0,309 ml, 2,0 mmol) sa rozpustila v acetonitrile (10 ml) a roztok sa zahrieval na 60 °C v uzavretej nádobe počas 48 hodín. Vyzrážané soli sa odfiltrovali a filtrát sa odparil. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli za pomoci zmesi etylacetátu a heptánu (1:11) ako eluenta. Výťažok: 210 mg (75 %) .

¹H NMR (CDC1₃): 8,70-8,73 (m, 1H), 8,36 - 8,47 (m, 2H),

6,93 (d, J = 19,2 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 19,2 Hz, 1H), 3,99 (s, 3H), 0,20 (s, 9H).

MS (APci, m/e): 279 (M⁺, 100 %).

b. Metylester kyseliny 3-nitro-5-vinylbenzoovej

Metylester kyseliny 3-nitro-5-(2-trimetylsilylvinyl)benzoovej (2,44 g, 8,71 mmol) sa rozpustil v acetonitrile (150 ml) , roztok sa zahrieval na teplotu refluxu a cez rozkým sa podľa HPLC analýzy Roztok sa ponechal ochladodparením. Zvyšok bol >95 tok sa prebublával plynný HCI, nestratil východiskový materiál, núť a rozpúšťadlo sa odstránilo % čistoty podľa HPLC a použil sa bez ďalšieho čistenia. Výťažok: 2,02 g (89 %).

^XH NMR (CD₃CN): 8,64 (s, 1H), 8,54 (s, 1H) , 8,45 (s, 1H) , 6,96 (dd, J₁ = 10,8 Hz, J₂ = 17,4 Hz, 1H), 6,11 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 5,59 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,00 (s, 3H).

c. Metylester kyseliny 3-nitro-5-(1,2-dihydroxyetyl)benzoovej

Metylester kyseliny 3-nitro-5-vinylbenzoovej (2,02 g, 9,76 mmol) sa rozpustil v zmesi acetónu a vody (200 ml, 9:1) a po ochladení na 0 ’C sa pridal 0s0₄ (60 mg, 0,24 mmol), po čom nasledoval N-metylmorfolín-N-oxid (2,34, 20,0 mmol). Po premiešavaní pri laboratórnej teplote počas 46 hodín sa pridal vodný roztok Na₂S₂0₃ (3,7 g) vo vode (150 ml) a roztok sa okyslil zriedeným vodným roztokom HCI. Objem roztoku sa znížil na 150 ml odparením a zvyšok sa extrahoval etylacetátom (3 x 100 ml). Spojené organické fázy sa odparili a zvyšok sa čistil kolónovou chromatografiou na silikagéli za použitia etylacetátu ako eluenta. Výťažok: 1,60 g (60 %).

¹H NMR (CD₃CN): 8,62-8,66 (m, 1H), 8,44 - 8,48 (m, 1H), 8,36 - 8,40 (m, 1H), 4,88 - 4,94 (m, 1H) , 3,98 (s, 3H), 3,60 - 3,79 (m, 4H).

d . 1-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-3-nitro-5-(1,2-dihydroxyetyl)benzén

Metylester kyseliny 3-nitro-5-(1,2-dihydroxyetyl)benzoovej (0,40 g, 1,69 mmol) a 2,3-dihydroxypropylamín (0,17 g, 1,86 mmol) sa rozpustili v metanole (2 ml) a roztok sa premiešaval pri 75 'C počas 1 hodiny. Tlak sa potom znížil na 26,7 kPa a premiešavanie pokračovalo pri 95 C počas 2 hodín. Surová reakčná zmes sa čistila preparatívnou HPLC. výťažok: 0,40 g (78 %).

MS (ESP, m/e): 299 ([M-l]⁺, 100 %).

e . 3-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-5-(1,2-dihydroxyetyl) anilín

1-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-3-nitro-5-(1,2-dihydroxyetyl) benzén (0,40 g, 1,32 mmol) sa rozpustil v zmesi metanolu (40 ml) a vody (20 ml). Roztok sa hydrogenoval pri 414 kPa za použitia Pd/C katalyzátora (10 % hmotnostných, 50 mg). Roztok sa prefiltroval cez Celíte a rozpúšťadlá sa odstránili odparením. Produkt bol >95 % čistoty podľa HPLC analýzy a použil sa bez ďalšieho čistenia.

MS (ESP, m/e): 271 ([M+l]⁺, 100 %), 293 ([M+Na] ⁺ , 45 %) .

f. 3-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-5-(1,2-dihydroxyetyl) -2,4,6-trijódanilín

3-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-5-(1,2-dihydroxyetyl) anilín (0,37 g, 1,35 mmol) sa rozpustil v zmesi metanolu (30 ml) a vody (90 ml). Pridal sa KIC1₂ (1,37 g, 4,05 mmol) a roztok sa premiešaval pri 35 “C počas 24 hodín. Pridal sa ďalší KICI2 (1,0 mmol) a premiešavanie pokračovalo pri 60 “C počas 72 hodín. Pridal sa vodný roztok Na2S₂O5 (1,0 g v 50 ml) a rozpúšťadlá sa odstránili odparením, čistenie preparatívnou HPLC poskytlo 87 mg (10 %) čistého produktu) .

¹H NMR (CD₃OD): 8,60 (m, 1H), 5,38 - 5,47 (m, 1H), 3,96

- 4,26 (m, 3H), 3,30 - 3,84 (m, 10H).

MS (ESP, m/e): 648 (M⁺, 15 %), 670 ([M+Na]⁺, 100 %).

g. N-hydroxyacetyl-3-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-5(1,2-dihydroxyetyl)-2,4,6-trijódanilín

3-(2,3-dihydroxypropylaminokarbonyl)-5-(1,2-dihydroxyetyl) -2 , 4 , 6-trijódanilín (0,059 g, 0,091 mmol) sa zmiešal s acetoxyacetylchloridom (1,0 ml), ktorý obsahoval N,N-dimetylacetamid (0,4 ml) a zmes sa premiešavala pri 60 ’C počas 48 hodín. Zmes sa nechala ochladnúť na laboratórnu teplotu, pridala sa voda a rozpúšťadlá sa odstránili odparením. Zvyšok sa rozpustil v zmesi metanolu (10 ml) a vody (5 ml) a pridal sa vodný roztok NaOH (5 mol/1, 1 ml). Roztok sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 1 hodiny, Roztok sa neutralizoval pomocou vodného roztoku HC1 a rozpúšťadlá sa odparili. Čistenie pomocou HPLC poskytlo čistý produkt.

MS (ESP, m/e): 706 (M⁺, 100 %).

Príklad 21

3,5-di(hydroxyacetylamino)-2,4,6-trijódacetofenón

a. 1,3-diamino-5-(l-hydroxyetyl)benzén

3,5-dinitroacetofenón (2,02 g, 9,5 mmol), ktorý bol pripravený podľa postupu z literatúry (Y. Nagase a spol., Macromol. Chem. Rapid Comm. (1990) 11. 185 - 191), sa rozpustil v metanole (100 ml) a hydrogenoval sa pri 414 kPa za použitia Pd/C katalyzátora (5 % hmotnostných, 100 mg). Katalyzátor sa odfiltroval a rozpúšťadlo sa odstránilo odparením. Produkt sa použil bez čistenia v nasledujúcom kroku. Výťažok: 1,22 g (84 %).

¹H NMR (CDC1₃): 6,20 (d, J = 2,0 Hz, 2H), 6,08 (t, J = 2,0 Hz, 2H), 4,90 (široký s, 4H), 4,62 (q, J = 7,0 Hz, 1H), 3,37 (d, J = 7,0 Hz, 3H).

MS (ESP, m/e): 151 ([M-l]⁺, 100 %).

b. 1,3-diamino-2,4, 6-trijódacetofenón

1.3- diamino-5-(l-hydroxyetyl)benzén (1,18 g, 7,72 mmol) sa rozpustil v zmesi metanolu a vody (5:1, 168 ml) obsahujúcej vodný roztok 1 mol/1 HCI (16 ml). Rýchlo sa pridal vodný roztok KICI2 (7,31 g, 30,9 mmol) a po premiešavaní počas 50 minút sa tuhá látka odfiltrovala, premyla sa vodou a vysušila sa. Produkt bol čistý podľa TLC a ^H NMR analýzy. Výťažok: 3,62 g (89 %).

^XH NMR (CDC1₃): 4,86 (široký s, 4H), 2,62 (s, 3H).

¹³C NMR (CDC1₃): 204,7, 151,1, 146,8, 28,7

MS (APci, m/e): 528 (M⁺, 100 %).

c. 1,3-di(acetoxyacetylamino)-2,4,6-trijódacetofenón

1.3- diamino-2,4,6-trijódacetofenón (1,8 g, 3,41 mmol) sa rozpustil v dimetylacetamide (15 ml) obsahujúcom acetoxyacetylchlorid (1,1 ml, 10,2 mmol) a roztok sa premiešaval počas 65 hodín pri laboratórnej teplote. Rozpúšťadlá sa odstránili odparením a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 21,69 g (68 %).

^XH NMR (DMSO-dg): 10,13 - 10,27 (m, 2H), 4,65 (s, 4H), 2,56 (s, 3H), 2,12 (s, 6H).

MS (ESP, m/e): 750 ([M+Na] ⁺ , 100 %), 766 ([M+K] ⁺ , 26 %) .

d. 1,3-di(hydroxyacetylamino)-2,4,6-trijódacetofenón

1,3-di(acetoxyacetylamino)-2,4,6-trijódacetofenón (0,171 g, 0,23 mmol) sa rozpustil v zmesi metanolu (30 ml) a vody (5 ml), ktorá obsahovala vodný roztok 2 mol/1 NaOH (3 ml) . Roztok sa premiešaval počas 90 minút a potom sa neutralizoval za použitia silne kyslého vymieňača katiónov. Rozpúšťadlá sa odstránili odparením a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 98 mg (54 %) .

MS (ESP, m/e): 644 (M⁺, 100 %), 666 ([M+Na]⁺, 95 %).

Príklad 22

3,5-di(hydroxyacetylamino)-l-hydroxyacetyl-2,4,6-trijódbenzén

a. 3,5-di(hydroxyacetylamino)-l-brómacetyl-2,4,6-trijódbenzén

1,3-di(hydroxyacetylamino)-2,4, 6-trijódacetofenón (0,20 g, 0,279 mmol) sa rozpustil v ľadovej kyseline octovej a pridal sa bróm (0,044 g, 0,28 mmol). Reakčná zmes sa premiešavala počas 2,5 hodiny pri 75 °C a potom sa ponechala ochladnúť. Rozpúšťadlá sa odstránili odparením a zvyšok sa použil priamo v nasledujúcom kroku.

MS (ESP, m/e): 806 (M⁺, 100 %), 808 (M⁺, 98 %).

b. 3,5-di(acetoxyacetylamino)-l-acetoxyacetyl-2,4,6-trijódbenzén

3,5-di(hydroxyacetylamino)-l-brómacetyl-2,4,6-trijódbenzén (10 mg, 0,12 mmol) sa konvertoval na zodpovedajúci acetát zahrievaním na 110 ’C v ľadovej kyseline octovej (5 ml) , ktorá obsahovala octan sodný (1 mmol) a AgOCOCF^ (0,11 g, 0,5 mmol) počas 16 hodín. Produkt sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok nebol určený.

MS (ESP, m/e): 786 (M⁺, 100 %).

c. 3,5-di(hydroxyacetylamino)-l-hydroxyacetyl-2,4,6-trijódbenzén

Hydrolýza 3,5-di(acetoxyacetylamino)-l-acetoxyacetyl2,4,6-trijódbenzénu sa uskutočnila analogicky k Príkladu 4e. Surový produkt sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok nebol určený.

MS (ESP, m/e): 687 ([M+HCOOH]⁺, 100 %).

Príklad 23

3,5-di(hydroxyacetylamino)-1-(1,2-dihydroxyetyl)-2,4,6-trij ódbenzén

a. 3,5-dinitrofenyletanol

3.5- dinitroacetofenón (3,27 g, 0,0156 mol) sa rozpustil v zmesi absolútneho etanolu (75 ml) a THF (37,5 ml) a zmes sa ochladila na -10 ’C. Pridal sa NaBH^ (0,30 g, 7,9 mmol) a zmes sa premiešavala počas 1 hodiny pri -10 ’C. Pridali sa voda (80 ml) a etylacetát, fázy sa oddelili a organická fáza sa premyla vodou (80 ml) a vysušila sa (^28()4) . Rozpúšťadlá sa odstránili odparením a zvyšok sa čistil chromatografiou na neutrálnom oxide hlinitom za použitia zmesi pentánu a etylacetátu (1:1) ako eluenta. Výťažok: 2,52 g (76 %).

^XH NMR (CDC1₃): 8,95 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8,60 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,59 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,15 (q, J = 7,5 Hz, 1H), 1,61 (d, J = 7,5 Hz, 3H).

b. 3,5-dinitrostyrén

3.5- dinitrofenyletanol (1,0 g, 4,7 mmol) sa zmiešal s ?2θ5 (1,0 g, 0,71 mmol) a premiešavaná zmes sa zahrievala na 100 ’C. Po 3 hodinách sa zmes ponechala ochladnúť na laboratórnu teplotu a pridala sa voda (0,4 ml). pH sa nastavilo na hodnotu 9 pomocou vodného roztoku 1 mol/1 NaOH a extrahovalo sa dietyléterom (2 x 25 ml). Spojené organické fázy sa vysušili (Na₂SO4) a odparili sa. Surový produkt sa použil bez ďalšieho čistenia.v nasledujúcom kroku.

^XH NMR (CDC1₃): 8,92 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8,56 (d, J = 2,0 Hz, 1H) , 6,86 (dd, J-_L » 18,4 Hz, J₂ = 10,9 Hz, 1H) , 6,08 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,67 (d, J = 10,9 Hz, 1H).

c. 1-(1,2-dihydroxyetyl)-3,5-dinitrobenzén

3,5-dinitrostyrén (0,50 g, 2,58 mmol) sa rozpustil v zme41 si acetónu a vody (8:1, 70 ml) a roztok sa ochladil na 0 ’C. Pridali sa 0s0₄ (0,046 g, 0,18 mmol) a NMO (0,60 g, 5,15 mmol) a roztok sa premiešaval pri laboratórnej teplote počas 16 hodín. Pridal sa vodný roztok Na₂S₂O₃ (1,5 g) vo vode (120 ml) a organické rozpúšťadlá sa odstránili odparením. Vodná fáza sa extrahovala etylacetátom (2 x 70 ml) a spojené organické fázy sa vysušili (Na₂SO₄) a odparili sa. Produkt sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažokí 0,44 g (75 %).

^ΧΗ NMR (CD₃CN): 8,87 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 8,63 (t, J = 2,0

Hz, 2H), 4,98 (t, J =6,0 Hz, 1H), 3,64 - 3,79 (m, 2H),

2,34 (s, 2H).

MS (ESP, m/e): 227 (M, 50 %), 197 ([M-CH₂O]“, 100 %).

d. 1-(1,2-dihydroxyetyl)-3,5-diaminobenzén

1-(1,2-dihydroxyetyl)-3,5-dinitrobenzén (0,10 g, 0,44 mmol) sa rozpustil v metanole (35 ml) a hydrogenácia sa uskutočnila pri 414 kPa za použitia Pd/C katalyzátora (10 % hmotnostných, 50 mg). Katalyzátor sa odfiltroval a roztok sa odparil. Výťažok: 0,074 g (100 %).

¹H NMR (CD₃OD): 6,14 (d, J = 2,0 Hz, 2H), 6,06 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 4,98 (široký s, 6H), 4,43 - 4,50 (m, 1H), 3,52 - 3,57 (m, 2H).

MS (ESP, m/e): 170 (M⁺, 100 %), 210 ([M+K]⁺, 18 %).

e. 1-(1,2-dihydroxyetyl)-3,5-diamino-2,4,6-trijódbenzén

1-(1,2-dihydroxyetyl)-3,5-diaminobenzén (0,0584 g, 0,242 mmol) sa rozpustil v zmesi metanolu (5 ml) a vodného roztoku 2 mol/ HC1 (1,2 ml) a jedným podielom sa pridal roztok KIC1₂ (70 % hmotnostných vo vode, 0,97 mmol). Po premiešavaní pri laboratórnej teplote počas 20 minút sa pridal vodný roztok 10 % hmotnostných NaHSO₃ (0,2 ml), rozpúšťadlá sa odstránili odparením a zvyšok sa čistil preparatívnou HPLC. Výťažok: 31,4 mg (24 %).

^H NMR (CD₃OD) : 5,56 - 5,63 (m, 1H) , 4,03 - 4,12 (m, 1H) ,

3,79 - 3,87 (m, 1H), 5,06 (široký s, 4H).

f . 1- (1,2-dihydroxyetyl)-3,5-di(hydroxyacetylamino)-2,4,6trijódbenzén

1-(1,2-dihydroxyetyl)-3,5-diamino-2,4, 6-trijódbenzén sa acetyloval acetoxyacetylchloridom napríklad takým postupom, ako je opísané v Príklade 4d. Surový produkt sa potom hydrolyzoval analogicky k Príkladu 4e, čím poskytol konečný produkt. Čistenie surového produktu sa uskutočnilo pomocou preparatívnej HPLC.

Claims (13)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Látky so vzorcom I (I) (kde n je 0 alebo 1, a ak n je 1 skupiny CgR^ môžu byť rovnaké alebo rôzne; každá skupina R je vodíkový atóm, jódový atóm alebo hydrofilná skupina M alebo , dve alebo tri nie-susedné R skupiny na každej CgRg skupine sú jód a najmenej jedna R skupina na každej CgR^ skupine je M alebo skupina; X označuje väzbu alebo skupinu, ktorá poskytuje 1 dve CgRg skupiny, alebo ak R; každá M je nezávisle každá nezávisle predstaaž 7 atómový reťazec spájajúci n je 0, X označuje skupinu ne-iónová hydrofilná skupina; a vuje Ci_4alkylovú skupinu substituovanú najmenej jednou hydroxylovou skupinou a voliteľne naviazanú na fenylový kruh cez karbonylovú, sulfónovú alebo sulfoxidovú skupinu, najmenej jedna R skupina je skupina; s výhradou, že ak n je nula buď je prítomná najmenej jedna skupina iná ako hydroxymetylová alebo 1,2-dihydroxyetylová skupina alebo potom, ak je prítomná jedna hydroxymetylová alebo 1,2-dihydroxyetylová skupina je tiež prítomná najmenej jedna dusíkom pripojená hydroxylovaná alkylová skupina obsahujúca M skupinu) a ich izoméry.
2. 2. Látka podlá nároku 1, kde n je 1.
3. 3. Látka podľa nároku 2, kde najmenej jedna R skupina na každej CgR^ skupine je skupina.

   Látka podľa nároku 2, kde Látka podľa nároku 2, kde Látka podľa nároku 1, kde

   je nesymetricky substituovaný.
4. 7. Látka podľa nároku 2, kde jedna CgR^ skupina má vzorec

   M2 I ^m2—

   M2 i

   9 1 kde každá M nezávisle je skupina M alebo M .
5. 8. Látka podľa nároku 2, kde jedna CgR^ skupina má vzorec kde každá nezávisle je skupina M alebo M^x.
6. 9. Látka podľa nároku 2, kde každá CgR^ skupina má vzorec

   9 -| kde každá M nezávisle je skupina M alebo M^A,
7. 10. Látka podľa nároku 1, v ktorej M skupiny sú C-^qalkylové skupiny s priamym alebo rozvetveným reťazcom, ktoré majú jednu alebo viaceré CH₂ alebo CH skupiny nahradené kyslíkovými alebo dusíkovými atómami alebo ktoré sú substituované jednou alebo viacerými skupinami vybranými z oxoskupiny, hydroxylu, aminoskupiny, karboxylových derivátov, a oxoskupiny substituovanej atómami síry a fosforu.
8. 11. Látka podľa nároku 1, kde M skupiny sú vybrané z

   -conh-ch₂ch₂oh

   -CONH-CH₂CH0HCH₂0H

   -conh-ch(ch₂oh)₂

   -CON(CH₂CH₂OH)₂

   -conh₂

   -conhch₃

   -ococh₃

   -N(COCH₃)H

   -N(COCH₃)C₁_₃-alkyl

   -N(COCH₃)-mono, bis alebo tris-hydroxyC₁_₄-alkyl,

   -N(COCH₂OH)-mono, bis alebo tris-hydroxyCi_₄-alkyl

   -N-(C0CH₂0H)₂

   -con(ch₂chohch₂oh)(ch₂ch₂oh)

   -CONH-C(CH₂OH)₃ a

   -C0NH-CH(CH₂0H)(CH0HCH₂0H).
9. 12. Látka podľa nároku 1, v ktorej M^3- skupiny sú vybrané z C₁_₄alkylových skupín substituovaných 1, 2, 3 alebo 4 hydroxylovými skupinami a voliteľne sú spojené s fenylovým kruhom cez CO, SO alebo S0₂ skupinu.
10. 13. Látka podľa nároku 1, v ktorej M¹ skupiny sú vybrané z hydroxymetylu, 2-hydroxyetylu, 2,3-bishydroxy-propylu, 1,3-bishydroxyprop-2-ylu, 2,3,4-trihydroxybutylu, 1,2,4-trihydroxybut-2-ylu, C0CH₂0H a S0₂CH₂0H).
11. 14. Látka podľa nároku 1, kde X jeden kyslíkový atóm alebo skupina NR¹, CO, S02 alebo CR¹2; skupina COCO, CONR¹,

    C0CR¹2, S0CR¹2, SO2NR¹, CR¹2CR¹2, CR¹2NR¹, CR¹2O; skupina

    NR¹CONR¹, OCONR¹, CONR^O, CONR¹CR¹2, OCOO, CR¹2OCR¹2, OCR¹2CO, CR¹2^C0Nr1’ CR¹2CR¹2CR¹2, COCRVCO, CR¹2NR¹CR¹2, CR¹2SO₂NR¹, CR¹20C0 alebo NR¹SO₂NR¹; kde R¹ je vodík alebo C-^_galkylová alebo alkoxylová skupina, voliteľne substituovaná hydroxylom, alkoxylom, oxa- alebo oxo- skupinou (napríklad polyhydroxyalkylová, formylová, acetylová, hydroxylová, alkoxylová alebo hydroxyalkoxylová skupina), alebo ak je pripojená na uhlík R^, môže to tiež byť hydroxylová skupina.
12. 15. Látka podľa nároku 1, v ktorej n je la X je -NR^-COCONR¹-, -NR¹COCR¹2CONR¹-, -NR¹CR¹2CR¹0HCR¹2NR¹-, -C0NR¹CR¹2C0R¹- alebo -N(C0R¹)CR¹2CR¹0HN(C0R¹) - , kde R¹ je podľa definície v nároku 14.
13. 16. Diagnostická zmes, vyznačujúca sa tým, že obsahuje látku so vzorcom I ako je definovaná v ktoromkoľvek z predchádzajúcich nárokov spolu najmenej s jedným fyziologicky tolerovateľným nosičom alebo vehikulom .