SK286984B6

SK286984B6 - Použitie derivátov 3(2H)-pyridazinónu na prípravu liečiva na liečenie funkčnej poruchy erekcie

Info

Publication number: SK286984B6
Application number: SK706-2001A
Authority: SK
Inventors: Keizo Tanikawa; Nobutomo Tsuruzoe; Norimasa Shudo; Toru Yamashita; Norihisa Ishiwata; Hideaki Kido; Hajime Ebisu; Kazutaka Hayashi; Yoshiji Kubo; Norifumi Nakamura
Original assignee: Nissan Chemical Industries, Ltd.
Priority date: 1998-12-07
Filing date: 1999-11-30
Publication date: 2009-08-06
Also published as: ZA200105429B; AU1413100A; CN1329492A; KR20010081067A; NZ512754A; EP1157694A4; RU2229885C2; NO321797B1; NO20012616D0; EP1157694A1; CN1163230C; KR100633869B1; UA73104C2; CA2353956C; WO2000033845A1; NO20012616L; IL143530A; SK7062001A3; CA2353956A1; AU768825B2

Abstract

Tento vynález sa týka použitia derivátov 3(2H)-pyridazinónu všeobecného vzorca (I) na prípravu liečiva na liečbu funkčnej poruchy erekcie. Konkrétne ide o 4-bróm-6-[3- (chlórfenyl)propoxy]-5-(3-pyridyl-metylamino)-3(2H)-pyridazinón alebo 4-bróm-6-[3-(4-chlórfenyl)-3hydroxypropoxy]-5-(3-pyridyl- metylamino)-3(2H)-pyridazinón, alebo ich z farmaceutického hľadiska prijateľnej soli.

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka použitia derivátu 3 (2H) - pyridazinónu s farmaceutickou aktivitou na prípravu liečiva na liečenie funkčnej poruchy erekcie.

Doterajší stav techniky

V japonskom patente č. Sho 63-301870 (US patent č. 4 978 665, európsky patent č. 275997B), v japonskom patente č. Hei 7 - 107055 (US patent č. 5 314 883, európsky patent č. 482208B) a v japonskom patente č. Hei 7 - 252237 (US patent č. 5 750 523, európsky patent č. 74221 IA) ohraničili sa preventívne a terapeutické aplikácie 3 (2H) - pyridazinónu, ako inhibítora agregácie krvných doštičiek, kardiotomického prostriedku, vazodilatátora, alebo anti - SRS-A liečiva na prevenciu, alebo liečbu rôznych trombotických ochorení, ischemických ochorení vysokého krvného tlaku, astmy alebo okamžitých alergických ochorení a pod., ale nie je v nich akákoľvek zmienka o možnosti aplikácie prostriedku pri liečbe funkčnej poruchy erekcie.

Ďalej sa uvádza, že 3 (2H) - pyridazinónový derivát látky, ktorý je predmetom tohto vynálezu má tiež inhibičný účinok proti fosfodiesteráze III (PDE ΙΠ) a fosfodiesteráze V (PDE V) v krvných doštičkách (Jpn. J Pharmacol., zväzok 67, príloha I, s. 274,1995).

Ale neuvádza sa, že prostriedok má inhibičný účinok na enzýmy v dutinkatom telese (corpus cavernosum) penisu.

Publikovali sa už údaje, že špecifické inhibítory PDE III alebo PDE V sú účinné ako liečebné prostriedky pri funkčných poruchách erekcie (Int. J. Impotence Res., zväzok 4, príloha 2, s. 11, 1992, J. Urol., zväzok 152, s. 2159 - 2163, 1998, J. Urol., zväzok 159, str. 1390 - 1393,1994, atď.). Nie je tu však žiadna zmienka, alebo návrh o súčasnom využití špecifických inhibítorov PDE III a špecifických inhibítorov PDE V, alebo liekov, ktoré majú súčasne inhibičný účinok PDE III a PDE V.

Autori tohoto vynálezu neočakávane zistili, že látka, ktorá je predmetom tohto vynálezu, je účinná pri liečení funkčnej poruchy erekcie a jej účinok je lepší ako pri dosiaľ užívaných metódach, čím sa naplnila podstata tohto vynálezu.

Funkčné poruchy erekcie vznikajú dôsledkom veku, stresov alebo takých chorôb, ako sú cukrovka a hyperlipidémia a táto porucha je charakterizovaná tým, že nedochádza k dostatočnej alebo len čiastočnej erekcii pri pohlavnom styku. Prípady tejto poruchy každoročne narastajú a predpokladá sa, že napr. len v USA trpí touto chorobou okolo 20 miliónov mužov.

Existuje viacero metód liečby funkčnej poruchy erekcie, pričom liečba liekmi patrí k zaužívaným spôsobom.

Používa sa napr. metóda, pri ktorej sa prostaglandín E 1 zavádza do kavemy (dutiny) alebo uretry penisu.

V prípade intrakavemóznej injekcie, aj keď je tento spôsob rýchly a účinný, je sprevádzaný bolesťami v penise a pretrvávajúcou rigiditou penisu. Ďalej, hoci intrauretálna aplikácia rieši problémy spojené s intrakavemóznou injekciou, dochádza k zníženiu účinnosti terapie. Pritom ešte, použité metódy majú vážny nedostatok v tom, že sú nákladné a z pacientovho hľadiska aj nepríjemné.

Hoci sa očakáva, že špecifické inhibítory PDE III, obyčajne reprezentované milrinónom, majú liečivý účinok pri liečení funkčnej poruchy erekcie, objavujú sa pri ich aplikácii aj vedľajšie účinky na krvný obeh, a to hlavne na krvné cievy.

Aj keď inhibítory PDE V, obyčajne reprezentované zaprinastom a sildenafilom, sú účinné pri orgánovej funkčnej poruche erekcie, v prípade psychogénnej funkčnej poruchy erekcie bývajú neúčinné. Uvádza sa, že sildenafil vyvinutý na praktickú aplikáciu má aj vedľajšie účinky, akými sú poruchy videnia.

Vzhľadom na uvedené nevýhody existuje reálna požiadavka na prostriedok, ktorý by mal vysoký účinok a bol by súčasne dostatočne bezpečný pri liečbe funkčnej poruchy erekcie. Predmetom tohto vynálezu je príprava prostriedku s vynikajúcimi vlastnosťami pri liečbe funkčnej poruchy erekcie.

Podstata vynálezu

Vynález sa týka použitia derivátov 3(2H)-pyridazinónu všeobecného vzorca (I):

kde R¹ a R² každý nezávisle je vodíkový atóm alebo C₁₄ alkylová skupina;

R³ a R⁴ každý nezávisle je vodíkový atóm, alebo Ci.₃ alkylová skupina;

A reprezentuje jednoduchú väzbu alebo lineárnu, alebo vetvenú Cm alkylénovú skupinu, v ktorej uhlíkový atóm v lineárnom reťazci môže byť nesubstituovaný alebo substituovaný jednou OR² skupinou, pričom R² je vodíkový atóm alebo C μ₄ alkylová skupina;

X je atóm chlóru alebo atóm brómu;

Y je fenylskupina substituovaná s halogénom; a

Ar je pyridylová skupina, na prípravu liečiva na liečenie funkčnej poruchy erekcie.

Podľa jedného uskutočnenia R¹, R², R³ a R⁴ je vodíkový atóm.

Podľa ďalšieho uskutočnenia A je jednoduchá väzba alebo lineárna, alebo rozvetvená Ci.₈ alkylénová skupina, v ktorej uhlíkový atóm v lineárnom reťazci je nesubstituovaný alebo substituovaný s hydroxylovou skupinou (-OH).

Derivátom je 4-bróm-6-[3-(chlórfenyl) propoxy]-5-(3-pyridyl-metylamino)-3(2H)-pyridazinón alebo 4-bróm-6-[3-(4-chlórfenyl)-3-hydroxypropoxy]-5-(3-pyridyl-metylamino)-3(2H)-pyridazinón, alebo ich z farmaceutického hľadiska prijateľné soli.

Pyridazínové látky podľa vynálezu vyvolávajú relaxačný účinok v dutinkatom telese penisu a tiež zvyšuje intrakavemózny tlak, čím ich možno použiť pri liečbe funkčnej poruchy erekcie.

Pyridazínové látky sú účinné pri liečbe funkčnej poruchy erekcie, pretože má PDE III inhibičný účinok a PDE V inhibičný účinok a má vyšší účinok v porovnaní s doterajšími terapeutickými činidlami.

Je vynikajúcim liečebným prípravkom pri liečení funkčnej poruchy erekcie, pretože pri jeho použití sa podstatne znižujú vedľajšie účinky spôsobujúce zníženie krvného tlaku pripisované PDE V inhibítorom a tiež sa redukuje vplyv na srdce, ktorý sa pozoruje pri PDE III inhibítoroch.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Obr. 1 znázorňuje diagram, ktorý ukazuje účinky látky A na intrakavemózny tlak, trvanie a AUC u psov v anestéze.

Obr. 2 znázorňuje diagram, ktorý ukazuje účinky súčasného použitia milrinónu a zaprinastu na intrakavemózny tlak v penise, trvanie a AUC u psov v anestéze.

Stereoizoméry a optické izoméry sú tiež zahrnuté v pyridazínovej látke a tiež jej soli prijateľné z farmakologického hľadiska.

Pyridazínová látka a jej soľ prijateľná z farmakologického hľadiska sú známe látky a tieto látky môžu byť vyrobené podľa postupov uvedených napr. v japonskom patente č. Sho 63-301870 (US patent č. 4 978 665, európsky patent č. 275997B), v japonskom patente č. Hei 7 - 107055 (US patent č. 5 314 883, európsky patent č. 482208B) a v japonskom patente č. Hei 7 - 252237 (US patent č. 5 750 523, európsky patent č. 742211A).

Pyridazínové deriváty a jeho farmakologicky prijateľné soli, ktoré sú predmetom tohto vynálezu, majú vynikajúce liečebné účinky pri funkčnej poruche erekcie u cicavcov, ako sú ľudia, psy, kravy, kone, králiky, myši a potkany.

Dávku pyridazínových derivátov alebo ich solí prijateľných z farmakologického hľadiska, možno vhodne zvoliť na základe veku a telesnej váhy pacienta, stupňa príznakov, pričom jedna dávka pre dospelých je bežne od 0,001 mg až do 5 g na deň, výhodne od 0,005 do 1000 mg na deň, podávaná niekoľkokrát po čiastkach v priebehu dňa.

Príklady dávkovacích foriem pyridazínových derivátov alebo ich farmakologicky prijateľných solí podľa tohto vynálezu zahrnujú parenterálne formy dávkovania, akými sú injekcie (podkožné, do žily, do svalu, do brušnej dutiny), masti, aerosóly a tiež perorálne dávkovanie vo forme tabliet, kapsúl, granúl, piluliek, prášku, pastiliek, žuvateľných prostriedkov, sirupov, kvapalín, emulzií a suspenzií. Ústne podávanie sa uprednostňuje.

Látka podľa vynálezu sa pripravuje na dávkovanie bežnými spôsobmi prípravy.

Tabletky, kapsuly, granuly, pilulky, prášky, pastilky a žuvateľné prostriedky na ústne podávame možno pripraviť bežným spôsobom s použitím napr. sacharózy, laktózy, glukózy, škrobu, alebo manitolu, spojiva (napr. sirupu, arabskej gumy, želatíny, sorbitolu, tragakantu, metylcelulózy, alebo polyvinylpyrolidónu), dezintegračnej zložky (napr. škrobu, karboxy-metylcelulózy alebo jej vápenatej soli, mikrokryštalickej celulózy alebo polyetylénglykolu), maziva (napr. talkum, stearát horečnatý, stearát vápenatý, alebo kremík), zmäkčovadla (napr. laurátu sodného, alebo glycerínu) atď.

Injekcie, aerosóly, sirupy, kvapaliny, emulzie, suspenzie atď. sa pripravujú bežným spôsobom s použitím rozpúšťadla (napr. voda, etanol, izopropanol, propylénglykol, 1,3 butylénglykol, alebo polyetylénglykol) pre aktívnu zložku, povrchovo aktívnej látky (napr. esteru sorbitolu s mastnou kyselinou, esteru polyoxyetylén

SK 286984 Β6 sorbitolu s mastnou kyselinou, polyoxyetyléneteru hydrogenovaného ricínového oleja alebo lecitínu), suspendujúceho činidla (napr. karboxymetyl sodná soľ, deriváty celulózy ako metylcelulóza, alebo prírodné gumy ako tragakant alebo arabská guma), konzervačného činidla (napr. ester kyseliny paraoxybenzoovej, chlorid benzalkónia alebo sorbáty). Prídavné látky sa pripravujú bežnými spôsobmi s použitím napr. kakaového masla, polyetylénglykolu, lanolínu, triglyceridov mastných kyselín, kokosového oleja atď.

Biely parafín, kvapalný parafín, vyššie alkoholy, hydrofilné masti, gély a pod. sa používajú ako masti pri prípravkoch, ktoré sa absorbujú kožou.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Vynález je podrobne opísaný v experimentálnych príkladoch a v príkladoch použitia, pričom vynález nie je žiadnym spôsobom ohraničený týmito príkladmi.

Látka A 4-bróm-6-[3-(4-chlórfenyl)propoxy]-5-(3-pyridylmetylamino)-3(2H)-pyridazmón, alebo látka B 4-bróm-6-[3-(4-chlorofenyl)-3-hydroxypropoxy]-5-(3-pyridylmetylamino)-3 (2H)-pyridazinón hydrochlorid vyrobené podľa bežného postupu sa použili ako reakčné činidlá. Pre ostatné reagencie sa použili komerčné dostupné látky.

Príklad 1

Aktivita vnútorného tlaku penisa po intrakavemóznej dávke psom v anestéze

Psy bígle, s telesnou hmotnosťou okolo 10 kg, sa anesteziovali vnútrožilovo so sodnou soľou pentobarbitalu dávkou 35 mg/kg, imobilizovali v dorzálnej polohe (na chrbte) na vyhrievanej rohoži (SMS - 2000 J, Medical Systém Inc.) a zaviedla sa im kanyla do trachey. Ihla 23G na meranie vnútorného tlaku sa zaviedla do pravej kavemy penisa a jeho vnútorný tlak sa meral zosilňovačom na merame krvného tlaku (AP - 641 G, Nihon Koden) pomocou prenášača tlaku (Statham P-50, Gould Co). Ďalej, 23G ihla na dávkovanie lieku sa zaviedla do pravej kavemy penisa a potom intrakavemózne nitroprusid sodný (SNP, 10'⁴ alebo 10'³ mól/1, 0,5 ml), pričom po dávke lieku sa potvrdil vnútorný tlak penisa. Látka A a milrinón sa aplikovali v roztoku dimetylsulfoxid - etanol - fyziologický roztok v pomere 1:2: 30.

Zaplinast sa použil po rozpustení v 1 mol/1 vodnom roztoku hydroxidu sodného a adjustovaní pH okolo

9,5 s 1 mol/1 kyselinou chlorovodíkovou.

Aktivita látky A sa priamo určila dávkovaním objemu 0,5 ml s počiatočnou najnižšou hladinou pri 0,243, 0,729, 2,43, 7,29, 24,3 a 72,9 /xg/na zviera (10’⁶, 3xl0'^s, 10’⁵, 3x10 , 10‘⁴ a 3xl0'⁴mol/1).

Účinok milrinónu a zaplinastu sa určil súčasnou aplikáciou milrinónu v množstve 106 pg/zviera (10'³ mól/1) a 136 /tg/zviera zaplinastu (10’³ mól/1) pri objemovej dávke 0,5 ml v oboch prípadoch.

Intrakavemózny tlak sa zaznamenával na polygrafe (RM - 6000, Nihon Koden) na termopapieri a ešte externe na hardisku počítača (Macintosh Performa 5260, Apple) s použitím špeciálneho systému analýzy cirkulačnej kinetiky (MP 100 WS, BIOPAC Systém) a príslušného softvéru (MP/VAS 3 Ver. 1.0 beta 4.2, Physio - Tech Co., Ltd.). Maximálna rýchlosť zmeny, trvanie a plocha pod krivkou (AUC) vnútorného tlaku penisa sa vypočítali pomocou softvéru analýzy cirkulačnej kinetiky na základe získaných údajov.

Získané výsledky sa vyjadrili ako stredná ± štandardná odchýlka (S.E.) a podrobili štatistickému spracovaniu, ktoré je uvedené ďalej. Účinok látky A sa testoval Dunettovou metódou s použitím skupiny rozpúšťadla ako kontroly. Súčasný účinok milrinónu a zaplinastu sa analyzoval dvojcestnou analýzou variability. Hladina p<0,05 sa považovala za štatisticky významnú vo všetkých testoch.

Výsledky sú znázornené na obr. 1 a obr. 2.

i) Priamy účinok intrakavemózneho tlaku

Látka A zvyšovala interný tlak penisu približne v závislosti od použitej dávky od 0,243 do 72,9 /zg/zviera (10‘⁶ do 3xl0'⁴ mol/1). Výrazné účinky sa pozorovali vzhľadom na maximálnu rýchlosť zmeny a trvanie pri dávkach 2,43 /xg/z viera (10'⁵ mol/1) a vyššie. Výsledkom toho bolo, že podobné účinky sa pozorovali aj pre AUC (obr. 1).

Treba poznamenať, že označenie (*) na obr. 1 naznačuje významné rozdiely pri p < 0,05, čo je výsledkom toho, že Dunnettov test sa uskutočnil s použitím skupiny rozpúšťadla ako kontroly.

Označenie (**) na obr. 1 naznačuje významné rozdiely pri p < 0,01, čo je výsledkom toho, že Dunnettov test sa uskutočnil s použitím skupiny rozpúšťadla ako kontroly.

ii) Účinok súčasnej aplikácie milrinónu a zaprinastu

Súčasná aplikácia milrinónu v dávke 106 gg/zviera (10‘³ mol/1) a zaprinastu 136 /xg/zviera (10‘³ mol/1) značne zvyšuje intrakavemózny tlak v porovnaní s tým, keď sa oba lieky dávkujú jednotlivo. Zaznamenali sa významné synergické účinky z ohľadom na trvanie a AUC (obr. 2).

Treba poznamenať, že na obr. 2 označenie (**) naznačuje existenciu významného rozdielu pri p < 0,01, čo je výsledkom dávkovania milrinónu alebo zaprinastu buď samostatne alebo súčasne.

Príklad 2

Relaxácia kontrakcie indukovanej norepinefrínom v izolovanom dutinkatom telese králika

Králičí sa usmrtili venesekciou, pričom boli pod anestézou účinkom pentobarbitálu sodného. Penis sa okamžite izoloval a preniesol do roztoku Krebsa - Henseleita (zloženie (mmól/1): NaCl 118,4, KC14,7, CaCl₂2,5, MgSO₄ 1,2, KH₂PO₄1,2, NaHCO₃ 25,0, glukóza 11,1), ktorý sa dôkladne prebublal so zmesou 95 % O₂/5 % CO₂. Po odrezaní spojovacieho tkaniva sa penis pozdĺžne rozdelil na dve časti tak, že polovica uretry bola v každej z nich. Oba preparáty sa upevnili na prísroj TB - 611 T, Nihon Koden pri pokojovom napnutí 0,5 g (okolo 5 mN) na zaťaženie v roztoku živín pozostávajúceho z 20 ml orgánového kúpeľa udržiavaného pri 37 °C. Kontrakcie sa zaznamenávali ako izometrické kontrakcie na zapisovači s termálnym papierom (WT - 685G, Nihon Koden) a zosilnením na prenosnom zosilňovači (AP - 621 G, Nihon Koden). Po výmene živného roztoku dvakrát každých 20 minút a ekvilibrácii sa pri každom preparáte potvrdila reaktivita pozorovaním kontrakcie proti 1 gmol/1 norepinefrinu. Keď sa kontrakcie stabilizovali, prostriedok sa premyl novým živným roztokom, ktorý sa vymieňal dvakrát každých 20 minút a nechal sa ekvilibrovať novým, živným roztokom, ktorý sa vymieňal dvakrát každých 20 minút a nechal sa ekvilibrovať.

Na začiatku, každý preparát sa kontrahoval norepinefrínom (výsledná koncentrácia: 1 gmol/1). Preparát, pri ktorom sa takýmto spôsobom dosiahlo stabilné napnutie, sa použil v pokuse. Každý liek sa dávkoval kumulatívne v 10-násobných pomeroch a sledoval sa účinok. Maximálna reakcia relaxácie sa určila aplikáciou hydrochloridu papaverínu (výsledná koncentrácia: 100 gmol/1).

Pri každej koncentrácii sa rýchlosť inhibície vypočítala z napnutia počas pridávania norepinefrinu, čo reprezentovalo 0 % rýchlosti inhibície a z napnutia počas maximálnej relaxácie spôsobenej prídavkom hydrochloridu papaverínu, čo predstavovalo rýchlosť inhibície 100 %. Potom sa uskutočnil výpočet koncentrácie, pri ktorej bola rýchlosť inhibície 50 % (IC₅₀).

Tieto výsledky sú uvedené v tabuľkách 1 a 2.

i) Priama relaxácia kontrakcie indukovanej norepinefrínom v izolovanom corpus cavemosum králika.

Všetky lieky ukázali, že relaxačný účinok závisel od dávkovania. Hodnoty IC50 pre každú látku sú uvedené v nasledovnej tabuľke:

Tabuľka 1

IC50 (gmol/l)
Látka A	0,33
Látka B	1,59
Milrinón	5,8
Zaprinast	5,5

Účinok látky A bol najväčší.

ii) Relaxácia kontrakcie indukovanej norepinefrínom v izolovanom dutinkatom telese králika za prítomnosti SNP a metylesteru N-omega-nitro-L-arginínu (L - NAME).

Účinok látky A sa znásobil asi dvakrát, ak sa predtým použil SNP (1 nmol/1) a znížil asi o polovicu, ak sa predtým použil L - NAME (1 mmol/1). Na rozdiel od tohto sa účinok zaprinastu zmenšil na 1/18 alebo menej, ak sa predtým použil L - NAME (1 mmol/l).

Tabuľka 2

IC50 (gmol/l)
Látka A	0,33
Látka A + SNP	0,15
Látka A + L - NAME	0,77
Zaprinast	5,5
Zaprinast + L - NAME	>100

Príklad 3

Relaxácia kontrakcie indukovanej norepinefrínom v izolovanej torakálnej aorte králika

Postupovalo sa rovnakým spôsobom, ako je uvedené v príklade 2 s výnimkou toho, že izolovaná torakálna aorta sa pripravila vo forme spinálneho pásika a že pokojové napnutie na zaťaženie bolo 1 g (okolo 10 mN).

Výsledky sú uvedené v tabuľkách 3 a 4.

i) Priama relaxácia kontrakcie indukovanej norepinefrínom v izolovanej torakálnej aorte králika

Látka A mala relaxáciu závislú od dávkovania a jej ICsobolo 2,65 gmol/l. V porovnaní s účinkom na dutinkovom telese uvedenom v príklade 2, bol tento asi 8-krát účinnejší ako v prípade aorty.

Tabuľka 3

IC₅o (gmol/l)
Aorta	2,65
Corpus cavemosum	0,33

ii) Relaxácie kontrakcie indukovanej norepineftínom v izolovanej torakálnej aorte králika v prítomnosti SNP Účinok látky A nebol vôbec ovplyvnený použitím SNP (1 nmol/1 a získané výsledky sa líšili od tých, ktoré sa získali účinkom na dutinkovom telese (corpus cavemosum) v príklade 2.

Tabuľka 4

	Corpus	Aorta
	Cavemosum
Látka A	0,33	2,65
Látka A + SNP	0,15	2,71

Príklad 4

Účinok na izolovaný srdcový sval morčaťa

Po usmrtení samcov morčiat (Hartley) venesekciou sa srdce prenieslo do roztoku Krebs - Henseleit a dôkladne prevzdušnilo s 95 % O₂/CO₂. Po rýchlom rozdelení srdca na predsiene a komory, pripravili sa preparáty z papilámych svalov z pravej komory a pravej predsiene. Preparáty sa napli na FD prístroj (TB - 611T, Nihon Koden) pri pokojovom napätí 0,5 g (okolo 5 mN) na zaťaženie v živnom roztoku, ktorý obsahoval orgánový kúpeľ udržiavaný pri 31 °C.

Automatické kontrakcie pravej komory sa zosilovali prenosným zosilňovačom (AP - 600G, Nihon Koden), zaznamenávalo sa napnutie a počet úderov pomocou počítača rýchlosti srdcových úderov (AT 600G, Nihon Koden). Pri papilámom svale sa použil elektrický impulz pravouhlých vín pochádzajúci z elektrického stimulátora (SEN - 3201, Nihon Koden) zapojeného cez bipoláme platinové elektródy. Vzniknuté napnutie svalu sa zosilovalo prenosným zosilňovačom (AP - 600G, Nihon Koden) a zaznamenávalo na zapisovači.

Preparáty pravej predsiene sa ekvilibrovali výmenou živného roztoku dvakrát každých 20 minút a reaktivita každého preparátu sa zaznamenávala ako počet úderov v prítomnosti 0,1 gmoĽl izoproterenolu. Keď sa počet úderov stabilizoval, prostriedky sa premyli novým živným roztokom a dodatočne ekvilibrovali výmenou živného roztoku dvakrát každých 20 minút. Každý liek sa podával kumulatívne, pričom sa sledoval účinok. Účinok lieku sa vyhodnocoval stanovením rýchlosti zmeny ním spôsobenej, pričom sa hodnotil rozdiel medzi maximálnou reakciou indukovanou izoproterenolom a tou pred podávaním lieku ako 100 % a potom sa vypočítala EC₃₀ hodnota ako koncentrácia, pri ktorej bol účinok lieku 30 % vzhľadom na počet úderov v závislosti od rýchlosti tejto zmeny.

Preparáty z papilámeho svalu sa ekvilibrovali výmenou živného roztoku dvakrát každých 20 minút, po čom nasledovalo kumulatívne dávkovanie izoproterenolu (výsledná koncentrácia: 0,03 gmol/l) a pozorovanie sily kontrakcie na potvrdenie reaktivity každého preparátu. Po opätovnom zopakovaní toho istého postupu sa preparáty dodatočne ekvilibrovali výmenou živného roztoku dvakrát každých 20 minút Každý liek sa dávkoval kumulatívne, pričom sa pozoroval účinok. Účinok lieku sa vyhodnotil stanovením rýchlosti zmeny, ktorú liek spôsobil, pričom sa hodnotil rozdiel medzi maximálnou reakciou indukovanou druhým podávaním izoproterenolu a tou pred podávaním lieku ako 100 % a potom sa vypočítala EC₃₀ hodnota ak koncentrácia, pri ktorej bol účinok lieku 30 % vzhľadom na silu kontrakcie s ohľadom na rýchlosť tejto zmeny.

Tieto výsledky sú uvedené v tabuľke 5.

i) Účinok na izolovaný srdcový sval morčaťa

Látka A nezvýšila tep srdca alebo kontrakcie na 30 % a viac pri koncentráciách do 30 gmol/1. Na druhej strane, hodnoty EC₃₀ vzhľadom na počet tepov a silu kontrakcie milrinónu boli 11,7 gmol/1 a 33,9 gmoVl a pozorovali sa účinky na srdce.

V porovnaní s účinkom na dutinkové teleso (corpus cavemosum) v príklade 2 a v protiklade s účinkom milrinónu na srdce, ktorý bol polovičný v porovnaní s tým na corpus cavemosum, účinok látky A na srdce predstavoval menej než 1/90 z účinku na corpus cavemosum.

Tabuľka 5

EC30 (gmol/l)
	Tep srdca	Sila koronálnej
kontrakcie
Látka	A >30	>30
	11,7	33,9

Nasledovné závery sú založené na uvedených experimentálnych výsledkoch.

Pretože pyridazínová látka (I) podľa vynálezu zvýšila intrakavemózny tlak počas intrakavemóznej injekcie psom v anestézii a spôsobila relaxáciu izolovaného králičieho corpus cavemosum, predpokladá sa, že je účinná pri liečení funkčnej poruchy erekcie.

Synergické účinky spôsobené súčasným použitím milrinónu ako inhibítora PDE III a zaprinastu, ako inhibítora PDE V sa pozorovali u psov v anestézii. Na základe týchto zistení sa predpokladá, že inhibičný účinok na PDE III a PDE V je súčasťou výrazného účinku pyridazínovej látky (I) podľa vynálezu, ktorá spôsobuje zvýšenie intrakavemózneho tlaku. Ďalej sa jasne dokázalo, že súčasná terapia s inhibítorom PDE III a PDE V má za následok podstatné zlepšenie účinnosti.

V dôsledku toho, že na pyridazínovú látku (I) podľa vynálezu menej vplýva účinok inhibítora syntézy oxidu dusného L-NAME ako inhibitor PDE V zaprinast, predpokladá sa, že je tiež účinná pri liečení psychogénnej funkčnej poruchy erekcie, pri ktorej sú minimálne účinné inhibítory PDE V.

Hoci sa účinok pyridazínovej látky (I) podľa vynálezu zvýši v dutinkovom telese (corpus cavemosum) pri súčasnom použití donora oxidu dusného SNP, ktorý aktivuje guanylát cyklázu, tento zvýšený účinok sa nepozoruje v aorte a preto sa predpokladá, že môže spôsobiť vedľajšie nežiadúce účinky, akými sú výrazné zníženie krvného tlaku v súvislosti s inhibítormi PDE V.

Pyridazínová látka (I) podľa vynálezu nemá temer žiadny účinok na srdce, pričom také účinky na srdce, ako je zvýšený tep a kontrakcie srdca pozorované pri inhibítoroch PDE III sú pri tejto látke mierne.

Priemyselná využiteľnosť

Pyridazínová látka (I) podľa vynálezu má inhibičné účinky na PDE ΠΙ a PDE V a možno ju využiť ako účinný liek pri liečbe funkčnej poruchy erekcie a má výhody v lepšom využití v porovnaní s dosiaľ používanými metódami.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Použitie derivátov 3(2H)-pyridazinónu všeobecného vzorca (I):

kde R¹ a R² každý nezávisle je vodíkový atóm alebo C_w alkylová skupina;

R³ a R⁴ každý nezávisle je vodíkový atóm alebo C 1.3 alkylová skupina;

A reprezentuje jednoduchú väzbu alebo lineárnu, alebo vetvenú C_bll alkylénovú skupinu, v ktorej uhlíkový atóm v lineárnom reťazci môže byť nesubstituovaný alebo substituovaný jednou OR² skupinou, pričom R² je vodíkový atóm alebo alkylová skupina;

X je atóm chlóru alebo atóm brómu;

Y je fenylskupina substituovaná s halogénom; a

Ar je pyridylová skupina, na prípravu liečiva na liečenie funkčnej poruchy erekcie.
2. Použitie podľa nároku 1, v y z n a č u j ú c e sa tým, že R¹, R², R³ a R⁴ je vodíkový atóm.
3. Použitie podľa nároku 1, vyznačujúce sa tým, že A je jednoduchá väzba alebo lineárna, alebo rozvetvená C|.g alkylénová skupina, v ktorej uhlíkový atóm v lineárnom reťazci je nesubstituovaný alebo substituovaný s hydroxylovou skupinou (-OH).
5 4. Použitie podľa nároku 1, vyznačujúce sa tým, že derivátom je 4-bróm-6-[3-(chlórfenyl) propoxy]-5-(3-pyridyl-metylamino)-3(2H)-pyridazinón alebo 4-bróm-6-[3-(4-chlórfenyl)-3-hydroxypropoxy]-5-(3-pyridyl-metylamino)-3(2H)-pyridazinón, alebo ich z farmaceutického hľadiska prijateľné soli.

10 2 výkresy