SK285434B6

SK285434B6 - Farmaceutické kompozície na zosvetlenie alebo zníženie pigmentácie kože, inhibíciu tyrosinázy aleboliečenie zápalového ochorenia alebo lupín u človeka a použitie 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanolu na výrobu liečiv

Info

Publication number: SK285434B6
Application number: SK1322-2001A
Authority: SK
Inventors: Eric William Collington
Original assignee: Pfizer Inc.
Priority date: 1999-03-22
Filing date: 2000-03-14
Publication date: 2007-01-04
Also published as: JP2002539234A; PE20001567A1; NZ513453A; HRP20010696A2; EP1165031B1; MA26726A1; PA8492001A1; BG106016A; CN1344152A; CR6452A; ATE297187T1; EA003866B1; ID30272A; PL350905A1; CA2366623C; BG65146B1; OA11840A; AU765209B2; EP1165031A1; CA2366623A1

Abstract

Farmaceutické kompozície na zosvetlenie kože alebo na zníženie pigmentácie kože, inhibíciu tyrosinázy alebo liečenie zápalového ochorenia alebo lupínu človeka obsahujúce 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol alebo jeho farmaceuticky prijateľnú soľ v množstve účinnom na daný účel.

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka farmaceutických kompozícií na zosvetlenie alebo zníženie pigmentácie kože, inhibíciu tyrosinázy alebo liečenie zápalového ochorenia alebo lupín u človeka a použitie rezorcinolového derivátu, 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanolu, na výrobu liečiv.

Doterajší stav techniky

Výrazy „prostriedok na zosvetlenie“ a „prostriedok na depigmentáciu“ používané v tejto prihláške sú navzájom zameniteľné.

Farba kože človeka je určená komplexom postupných bunkových procesov prebiehajúcich vo zvláštnej populácii buniek nazývaných melanocyty. Melanocyty sa vyskytujú v spodnej časti epidermu, a ich funkciou je syntetizovať pigment melanín, ktorý chráni povrch tela pred škodlivými účinkami ultrafialového žiarenia.

Pri vystavení kože ultrafialovému žiareniu, akým je slnečné svetlo, melanocyty zvyšujú svoju produkciu melanínu. Melanín sa ukladá v melanozómoch, čo sú vezikuly, vyskytujúce sa v bunke. Melanozómy prenikajú z bunky a dostávajú sa na povrch kože v keranocytoch, v ktorých sa melanozómy obsahujúce melanín ukladajú. Konečným výsledkom je, že viditeľné vrstvy kože majú hnedé sfarbenie obvykle označované ako „trieslové“. Vizuálne zjavná tmavosť kože je úmerná množstvu melaninu syntetizovaného melanocytmi a prevedeného do keratínocytov. Mechanizmus vzniku pigmentácie kože, t. j. melanogenézie je zvlášť zložitý proces, ktorý schematicky zahŕňa nasledujúce hlavné stupne: tyrosín -» L-Dopa -» dopachinón -» dopachróm =· melaníny. Prvé dve reakcie uvedenej série sú katalyzované enzýmom tyrosinázou. Aktivita tyrosinázy vedúca na tvorbu melaninu záverečne vedúcej na sfarbenie pokožky je podporovaná účinkom hormónu stimulujúceho a-melanocyty alebo UV-žiarením. Je už dobre známe, že k pigmentačnému účinku nejakej substancie dochádza, keď táto substancia pôsobí priamo na vitalitu epidermálnych melanocytov, v ktorých melanogenézia obvykle prebieha a/alebo keď interferuje s jedným zo stupňov bíosyntézy melaninu. Účinné zlúčeniny použité v rôznych spôsoboch a kompozíciách podľa vynálezu inhibujú tyrosinázu a tým inhibujú alebo znižujú biosyntézu melaninu.

Veľmi potrebné sú prostriedky umožňujúce obnovu kože určitých depozitných plôch, ako sú škvrny alebo pehy na normálny vzhľad. Na uvedený účel už bolo vyvinuté a sú známe spôsoby a na trhu je dostupných viac prostriedkov na tento účel. Príklady týchto spôsobov zahŕňajú a) spôsob orálneho podávania vysokých dávok vitamínu C (kyseliny L-askorbovej), ktorý má vysokú schopnosť redukovať: b) spôsob zahŕňajúci parenterálne podávanie glutatiónu; c) spôsob, pri ktorom sa podáva peroxid, ako je peroxid vodíka, peroxid zinku, peroxid sodíka a podobne, kde sa predpokladá bieliaci účinok na melanín; a d) spôsob, kde vitamín C alebo cystein sa podáva topicky vo forme masti, krému alebo umývača alebo v podobnej forme. Pri vitamíne C dochádza k problémom so stabilitou, kde vitamín C je v systémoch obsahujúcich vodu natoľko nestabilný, že dochádza k zmenám farby a k zápachu. Tiólové zlúčeniny ako glutatión a cystein nemajú uspokojivý depigmentačný účinok, pretože na vývoj tohto účinku dochádza veľmi pomaly. V súčasnosti sa ako depigmentačné prostriedky najviac používajú prostriedky obsahujúce hydrochinón a jeho deriváty, najmä étery, ako je hydrochinón (monometyl) éter. Je však známe, že uvedené zlúčeniny, aj keď sú účinné, majú vedľajšie účinky, ktoré môžu byť škodlivé. Hydrochinón, ktorého použitie je obmedzené na koncentráciu 2 %, má účinky tak dráždivé, ako cytotoxické proti melanocytom.

V U.S. patente č. 4,526,179 sú opísané určité estery hydrochinónu s mastnými kyselinami, ktoré majú vhodnú účinnosť a sú menej dráždivé a majú lepšiu stabilitu ako hydrochinón.

V japonskej patentovej prihláške č. 27909/86 sú opísané ďalšie deriváty hydrochinónu, ktoré nemajú nedostatky ktoré má hydrochinón, ale majú relatívne nižšiu účinnosť.

V U.S. patente č. 5,449,518 sú opísané deriváty 2,5-dihydroxyfenylkarboxylovej kyseliny ako prostriedky na depigmentáciu kože.

V európskej patentovej prihláške EP 341664AI sú opísané určité deriváty rezorcinolu ako inhibítory tyrosinázy a prostriedky na depigmentáciu kože.

Použitie topických prostriedkov na depigmentáciu s vhodnou účinnosťou a bez nežiaducich vedľajších účinkov je zvlášť žiaduce v nasledujúcich prípadoch: pri regionálnej hyperpigmentácii vyvolanej hyperaktivitou melanocytov ako je idiopatická melazma objavujúca sa buď v tehotenstve (maskované tehotenstvo alebo chloazma), alebo sekundárne po estrogénprogesterónovej antikoncepcii; pri lokálnej hyperpigmentácii vyvolanej benígnou hyperaktivitou a proliferáciou melanocytov, ako je lentigo senilis alebo pečeňové škvrny; pri vedľajšej hyperpigmentácii po fotosenzibilizácii pri hojení rán a jazvení; a pri určitých formách leukodermy ako je vitiligo, kde pokiaľ nemôže dôjsť na repigmentáciu poškodenej kože, zostatkové zóny normálnej kože sa depigmentujú a celkový povrch kože je potom homogénne biely.

Zlúčenina vzorca (1), t. j. 4-(2,4-dihydroxyfenyl)-cyklohexanol, ajej farmaceutický prijateľné soli, ktoré sa používajú v rôznych spôsoboch podľa vynálezu a v kompozíciách podľa vynálezu, sú vhodné na liečbu opísaných dermatologických stavov a tiež na liečbu ďalších dermatologických stavov, z ktorých niektoré sú opísané ďalej v tomto opise prihlášky vynálezu, pacienta vyžadujúceho liečenie zo zdravotných alebo z kozmetických dôvodov vedúce na zosvetlenie kože alebo na redukciu pigmentácie kože vyvolanej daným stavom.

4-(2,4-Dihydroxyfenyl)cyklohexanol a jeho farmaceutický prijateľné soli sú tiež vhodné na liečenie zápalových chorôb, ako je psoriáza a akné a na liečbu lupín.

Podstata vynálezu

Predmetom vynálezu podľa prvého aspektu je topická farmaceutická kompozícia na zosvetlenie kože alebo na zníženie pigmentácie kože človeka, ktorej podstata spočíva v tom, že obsahuje 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol vzorca (I)

OH alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ v množstve účinnom na zosvetlenie kože alebo na zníženie pigmentácie kože alebo v množstve účinnom na inhibíciu tyrosinázy a farmaceutický prijateľný nosič.

Kompozícia podľa prvého aspektu vynálezu môže ďalej obsahovať slnečný filter; rezveratrol alebo inú účinnú zložku ktorá má antioxidačné účinky; kyselinu retinovú alebo derivát kyseliny retinovej; kyselinu glykolovú, kyselinu trichlóroctovú alebo iný prostriedok na peelíng kože.

Podľa ďalšieho aspektu je predmetom vynálezu topická farmaceutická kompozícia na inhibíciu tyrosinázy u človeka, ktorá obsahuje 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol vzorca (I) alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ v množstve účinnom na inhibíciu tyrosinázy a farmaceutický prijateľný nosič.

Podľa iného aspektu je predmetom vynálezu topická alebo transdermálna farmaceutická kompozícia na liečenie zápalového ochorenia alebo lupín človeka, ktorá obsahuje 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol vzorca (I) alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ v množstve účinnom na určený účel alebo v množstve účinnom na inhibíciu tyrosinázy a farmaceutický prijateľný nosič. Zápalovým ochorením môže byť napríklad psoriáza, dermatitída alebo akné. Kompozície podľa vynálezu sú výhodne vo forme vodno-alkoholického roztoku, emulzie typu olej vo vode, emulzie typu voda- v oleji, emulzného gélu alebo vo forme dvojfázového systému. Samé osebe môžu mať formu lotionu, krému, mlieka, gélu, želé, pasty, masti, balzamu, masky, mikrosfér, nanosfér alebo vezikulámej disperzie.

Predmetom vynálezu je ďalej použitie 4-(2,4-dihydroxy-fenyl) cyklohexanolu vzorca (I) alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli na výrobu liečiv na rozličné účely uvedené v jednotlivých kompozíciách podľa vynálezu.

Zlúčenina vzorca (I), t. j. 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol môže existovať v rôznych diastereomémych formách. Vynález zahŕňa všetky stereoizoméry 4-(2,4-dihydroxyfenyljcyklohexanolu a ich zmesi a všetky farmaceutické kompozície a opísané spôsoby liečenia, ktoré ich obsahujú alebo v ktorých sa používajú.

Vzorec (I) zahŕňa tiež zlúčeniny majúce uvedený vzorec až na skutočnosť, že jeden alebo viac atómov vodíka, uhlíka alebo iných atómov je nahradených ich izotopmi. Tieto zlúčeniny môžu byť vhodné vo výskume a ako diagnostické prostriedky vo farmakokinetických štúdiách metabolizmu a v stanoveniach väzby.

Podrobný opis vynálezu

Zlúčeninu vzorca (I) môžeme pripraviť podľa uvedenej reakčnej schémy a nasledujúceho opisu.

Schtaa

Zlúčeninu vzorca (1) na uvedenej schéme môžeme pripraviť zavedením chrániacich skupín na obchodno dostupný 4-brómrezorcinol. Vhodnú chrániacu skupinu, ako je metoxymetylová skupina (MOM), môžeme zaviesť obvyklými spôsobmi všeobecne známymi pracovníkom v tomto odbore. Alkyláciu 4-brómrezorcinolu môžeme napríklad uskutočniť použitím dvoch ekvivalentov metoxymetylchloridu v prítomnosti diizopropylamínu v halogénovanom rozpúšťadle pri tepote od asi 0 °C do teploty miestnosti. Zlúčenina vzorca (2) je známa a je obchodne dostupná. Zlúčeninu vzorca (3) môžeme pripraviť reakciou zlúčeniny vzorca (1) s butillítiom za prítomnosti Ν,Ν,Ν',Ν'tetrametyletylén-diamínu v éterovom rozpúšťadle s následným prídavkom zlúčeniny (2). Dehydratáciou zlúčeniny vzorca (3) za štandardných podmienok, napríklad zahrievaním zlúčeniny vzorca (3) pri asi 110 °C v Dean-Starkovom destilačnom zariadení za prítomnosti kyseliny gáforsulfónovej vo vhodnom rozpúšťadle (napríklad v toluéne) sa získa zlúčenina vzorca (4) . Hydrogenáciou za štandardných podmienok, napríklad pomocou plynného vodíka a paládia na aktívnom uhlí v etanole sa získa zlúčenina vzorca (5) . Žobraním chrániacich skupín za vhodných podmienok sa získa rezorcinol vzorca (6). Zlúčeninu vzorca (6) môžeme ďalej derivatizovať štandardnými spôsobmi v odbore všeobecne známymi na derivát rezorcinolu vzorca (I). Zlúčeninu vzorca (I) môžeme pripraviť napríklad redukciou zlúčeniny vzorca (6) redukčným prostriedkom, ako je tetrahydroboritan sodný vo vhodnom rozpúšťadle, ako je etanol pri teplote v rozmedzí od 0 °C do teploty miestnosti.

Zlúčenina vzorca (I) je sama osebe málo kyslá a môže tvoriť soli s bázami obsahujúcimi farmaceutický prijateľné katióny. Príklady týchto solí zahŕňajú soli alkalických kovov a soli kovov alkalických zemín a predovšetkým soli sodné a draselné. Uvedené soli sa pripravujú obvyklými spôsobmi. Chemické bázy vhodné ako činidlá na prípravu farmaceutický prijateľných solí zlúčeniny podľa vynálezu s bázami, sú bázy tvoriace so zlúčeninou vzorca (1) netoxické soli. Uvedené netoxické soli zahŕňajú soli obsahujúce farmaceutický prijateľné katióny ako je sodík, draslík, vápnik, horčík atď. Uvedené soli môžeme ľahko pripraviť spracovaním zodpovedajúcej kyslej zlúčeniny s vodným roztokom obsahujúcim požadované farmaceutický prijateľné katióny a odparením získaného roztoku do sucha, výhodne za zníženého tlaku. Alternatívne ich môžeme pripraviť zmiesením roztoku kyslej zlúčeniny v alkanole s roztokom alkoxidu alkalického kovu v alkanole a odparením získaného roztoku do sucha. V obidvoch prípadoch sa výhodnejšie použijú stechiometrické množstvá reaktantov aby sa zaistil kvantitatívny priebeh reakcie a maximálny výťažok požadovaného konečného produktu.

Zlúčenina podľa vynálezu, t. j. 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol a jeho farmaceutický prijateľné soli (ďalej označované ako „účinné zlúčeniny na použitie podľa vynálezu“ sú vhodné na liečenie porúch pigmentácie ľudí zahŕňajúcich solárne lentigo aj lentigo simplex (vrátane stareckých/pečeňových škvŕn), melazma/chloazma s pozápalovou hyperpigmentáciou. Uvedené zlúčeniny redukujú hladiny melanínu v koži inhibíciou tvorby melanínu, a to či je už melanín produkovaný konštitučné alebo odozvou na ožiarenie UV lúčmi (ako pri vystavení slnečným lúčom).

Účinné zlúčeniny na použitie podľa vynálezu môžeme teda použiť na redukciu obsahu melanínu v koži v nepatologických prípadoch s cieľom vyvolať svetlejší odtieň kože podľa priania zákazníka. Uvedené zlúčeniny môžeme tiež použiť v kombinácii s prostriedkami na „peeling“ (zahŕňajúcich prostriedky na použitie na tvár obsahujúce kyselinu glykólovú alebo kyselinu trichlóroctovú) na získanie svetlejšieho odtieňa kože a na prevenciu repigmentácie.

Účinné zlúčeniny na použitie podľa vynálezu môžeme tiež použiť v kombinácii so slnečnými filtrami (s filtrami na žiarenie UVA alebo UVB) na prevenciu repigmentácie, na ochranu pred stmavnutím indukovaným slnečným alebo UV žiarením alebo na zvýšenie ich schopnosti redukovať množstvo melanínu kože a ich bieliaceho účinku. Uvedené zlúčeniny môžeme kombinovať s kyselinou retinoovou alebo s jej derivátmi alebo so všetkými zlúčeninami ktoré interagujú s receptormi kyseliny retinoovej a urýchľujú alebo zvyšujú účinky zlúčenín na použitie podľa vynálezu na zníženie obsahu melanínu v koži alebo bieliaceho účinku na kožu.

Účinné zlúčeniny na použitie podľa vynálezu môžeme tiež použiť v kombinácii s kyselinou askorbovou ajej derivátmi, s ďalšími produktmi na báze kyseliny askorbovej (ako je askorbát horečnatý) alebo s inými produktmi, ktoré majú antioxidačné vlastnosti (ako je resveratrol) na urýchlenie alebo zvýšenie schopnosti zlúčenín vhodných na použitie podľa vynálezu redukovať obsah melanínu v koži alebo zvýšiť ich bieliaci účinok.

Vynález sa vzťahuje tak na spôsoby zosvetľovania kože alebo zníženie pigmentácie kože, kde zlúčeniny vhodné na použitie podľa vynálezu a jedna alebo viac opísaných účinných zložiek sa podávajú spoločne obsiahnuté v jednej farmaceutickej kompozícii, ako na spôsoby, kde sa uvedené zlúčeniny podávajú samostatne vo vhodnom podávacom režime navrhnutom na osožnú kombinačnú terapiu. Vhodný režim podávania liečiv, dávka každého podávaného liečiva a špecifické intervaly medzi dávkami jednotlivých liečiv sú závislé od špecifickej kombinácie účinných prostriedkov, stavu pacienta a podstaty a závažnosti poruchy alebo stavu určeného na liečbu. Uvedené ďalšie účinné zložky sa obvykle podávajú v dávkach menších alebo rovnakých ktoré, sú účinné v jednozložkových prípravkoch určených na topické podanie. Dávky uvedených účinných zložiek, povolené FDA na podanie človeku sú verejne dostupné. Účinné zlúčeniny na použitie podľa vynálezu sa všeobecne podávajú vo forme farmaceutickej kompozície obsahujúcej uvedenú zlúčeninu spoločne s farmaceutický prijateľným vehikulom alebo riedidlom. Uvedená kompozícia sa všeobecne pripraví obvykle používanými spôsobmi s použitím tuhých alebo tekutých vehikúl alebo riedidiel vhodných na dané topické podanie, vo forme roztokov, gélov, krémov, želé, pást, umývačov, masti, balzamov a podobne. Ako vehikulum môžeme napríklad použiť roztok voda-alkohol, emulzie typu olej-voda alebo voda-olej, emulgovaný gél alebo dvojfázový systém. Výhodne sú kompozície podľa vynálezu vo forme umývačov, krémov, pleťových mliek, gélov, masiek, mikrosfér alebo nanosfér, alebo vezikulámych disperzií. V prípade vezikulámych disperzii lipidy tvoriace vezikuly môžu byť tak iónového ako neiónového typu, alebo to môže byť zmes obidvoch typov.

Výraz „množstvo zlúčeniny vzorca (I) umožňujúci zosvetlenie kože alebo zníženie pigmentácie“ použitý v tomto texte a podobné výrazy znamenajú koncentrácie zlúčeniny ktoré umožňujú stanoviteľné zosvetlenie kože alebo redukciu pigmentácie človeka, zistiteľné niektorým zo známych spôsobov stanovenia.

Výraz „účinné množstvo zlúčeniny vzorca (I) na inhibíciu tyrosinázy“ použitý v tomto texte a podobné výrazy znamenajú množstvá alebo koncentrácie zlúčeniny ktoré umožňujú stanoviteľnú inhibíciu aktivity tyrosinázy zistiteľnú niektorým zo známych spôsobov stanovenia.

Výraz „množstvo zlúčeniny vzorca (I) schopné liečiť zápalovú chorobu ako je psoriáza, dermatitída alebo akné alebo na liečbu lupov použitý v tomto texte alebo podobné výrazy, znamenajú množstvo zlúčeniny alebo koncentráciu zlúčeniny umožňujúcu stanoviteľné zmiernenie, redukciu, elimináciu, spomalenie alebo prevenciu niektorého zo symptómov alebo stavu spojeného alebo vyvolaného uvedenou chorobou alebo stavom človeka, ktoré môžeme stanoviť niektorým zo známych spôsobov stanovenia.

V kompozíciách na depigmentáciu podľa vynálezu je koncentrácia účinných zlúčenín vhodných na použitie podľa vynálezu všeobecne v rozmedzí 0,01 až 10 %, výhodne je v rozmedzí 0,1 až 10 % vzhľadom na celkovú hmotnosť kompozície.

Kompozície podľa vynálezu môžu prípadne obsahovať zvlhčovači prostriedok, povrchovo aktívny prostriedok, keratolytikum, protizápalový prostriedok, komplexotvomý prostriedok, antioxidačný prostriedok, konzervačný prostriedok alebo slnečný filter, alebo ich kombinácie.

Schopnosť účinných zlúčenín používaných podľa vynálezu inhibovať tyrosinázu môžeme stanoviť niektorým z uvedených spôsobov.

1. Stanovenie aktivity tyrosinázy (DOPA oxidázy) na bunkovom lyzáte

Pri stanovení a v porovnávacom hodnotení s použitím bunkového lyzátu sa použije bunková línia ľudského melanómu SKMEL 188 (získaná z Memoriál Sloan-Kettering). Pri stanovení sa hodnotené zlúčeniny a L-dihydroxyfenylalanín (L-DOPA) (100 gg/ml) inkubujú s bunkovým lyzátom obsahujúcim ľudskú tyrosinázu a po 8 hodinách sa uskutoční vyhodnotenie pri 405 nm. Účinnosť zlúčenín pri stanovení s DOPA oxidázou veľmi dobre koreluje s účinnosťou stanovenou pomocou tyrosínhydroxylázy s použitím ³H-tyrosínu ako substrátu. 4-(2,4-Dihydroxyfenyl)cyklohexanol má v uvedenom stanovení IC₅₀ 0,2 μΜ

2. Stanovenie melanínu v primárnych ľudských melanocytoch

Hodnotené zlúčeniny sa inkubujú s primárnymi ľudskými melanocytmi v prítomnosti α-melanocyty stimulujúceho hormónu (a-MSH) 2-3 dni. Potom sa bunky rozložia hydroxidom sodným a natrium-dodccylsulfátom (SDS) a vyhodnotia sa signály zodpovedajúce melanínu pri 405 nm. Alternatívne sa k bunkám pridá ^l4C-DOPA s inhibítormi tyrosinázy a ^l4C-melanín nerozpustný v kyseline sa kvanitatívne stanoví scintilačným počítačom. Hodnota IC₅₀ vyjadruje inhibičnú účinnosť zlúčeniny v syntéze nového melanínu stimulovanej a-MSH.

3. Stanovenie s tyrosinkinázou (TK)

TK stanovenie môžeme uskutočniť s použitím prečistenej tyrosinkinázovej domény c-met, erb-B2 alebo IGF-r. Pri stanovení sa použije špecifická protilátka proti fosforylovanému tyrosínovému zvyšku. Kolorimetrické signály sa generujú pomocou chrenovej peroxidázy, ktorá sa konjuguje s protilátkou.

4. Model ekvivalentnej ľudskej kože

Zmes ľudských melanocytov a keratínocytov sa kultivuje v medzifáze vzduch-tekutina. Tkanivová kultúra vytvorí trojrozmernú štruktúru, ktorá sa histologický a mikroskopicky podobá epidermu kože. Na horný povrch buniek sa nanesie hodnotená zlúčenina, čím sa stimuluje topické podanie liečiva. Po trojdennej inkubácii s hodnotenými zlúčeninami (10 μπι) sa bunky intenzívne premyjú a prevedú sa na lyzát na stanovenie DOPA-oxidázy.

5. Stanovenie IL-1 (stanovenie interleukínu-1)

Na hodnotenie vplyvu skúšanej zlúčeniny na sekréciu IL-I na modeli ekvivalentnom ľudskej koži môžeme použiť IL-l-ELISA stanovenie (systém R&D) . IL-laje protizápalový cytokín a má svoju úlohu v zápale kože indukovanom UV žiarením.

6. Štúdia in vivo

V štúdii môžeme použiť čierne alebo tmavohnedé morčence s homogénne sfarbenou kožou. Zvieratám sa podáva dvakrát denne roztok testovanej zlúčeniny (5 % v etanole : propylénglykolu 70 : 30) a vehikula päť dní v týždni počas 4-8 týždňov. V tejto štúdii sa zistilo, žc 4-(2,4-dihydroxyfenyljcyklohexanol pôsobí depigmentáciu kože.

Vynález je ďalej opísaný nasledujúcim príkladom. Vynález však nie je nijako obmedzený špecifickými podrobnosťami uvedenými v tomto príklade. Spektrá protónovej jadrovej magnetickej rezonancie (’H NMR) sú merané v roztokoch d₆-DMSO, CDC1₃ alebo d₄-MeOH a polohy píkov sú vyjadrené v dieloch na milión dielov (ppm) vzhľadom na tetrametylsilan (TMS). Tvary píkov sú označované nasledovne: s, singlet; d, dublet; t, triplet; q, kvartet; m, multiplet; b, široký. Uvedený príklad je určený len na znázornenie vynálezu a rozsah vynálezu nijako neobmedzuje.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Medziprodukt 1 l,3-di(Metoxymetoxy)-4-brombenzén

Do banky s guľovým dnom objemu 250 ml vysušenej v sušiarni a vybavenej magnetickým miešadlom sa vnesie v atmosfére argónu 4-brómrezorcinol (9,45 g, 50 mmol) a CH₂C1₂ (50 ml). Suspenzia sa počas miešania ochladí na 0 °C a naraz sa injekčnou striekačkou pridá diizopropylamín (19,1 ml, 110 mmol). Červený roztok sa mieša ďalších minút a potom sa po kvapkách, injekčnou striekačkou, pridá metyl (chlórmetyl)éter (10,7 ml, 120 mmol), pričom sa zaisti aby vnútorná teplota neprevýšila 10 °C. Získaný žltý roztok sa potom dá cez noc ohriať na teplotu miestnosti. Potom sa do reakčnej banky naleje roztok hydroxidu amónneho (50 ml, 50 %) a reakčná zmes sa mieša 1 hodinu. Potom sa zmes vyleje do deliaceho lievika a fázy sa oddelia. Vodná fáza sa potom extrahuje CH₂C1₂ (3 x 30 ml) a spojené organické podiely sa premyjú soľným roztokom (20 ml), vysušia sa bezvodovým síranom horečnatým, sfiltrujú sa a zahustením vo vákuu sa získa oranžový olej. Prečistením rýchlou chromatografiou na stĺpci (SiO₂, etylacetát/petroléter 1 : 1 obj./obj.) sa vo forme bledožltého oleja získa požadovaný titulný produkt (10,7 g, 77 %). δ_Η(CDClj) 7,42 (IH, d), 6,88 (IH, d), 6,64 (IH, dd) , 5,24 (2H, s), 5,15 (2H, s), 3,53 (3H, s), 3,48 (3H, s).

Medziprodukt 2

-Hydroxy-1 -(2,4-dihydroxyfenylbis(metoxymetyléter))cyklohexan-4-on-etylénketal

Do banky s guľovým dnom objemu 250 ml vysušenej v sušiarni a vybavenej magnetickým miešadlom sa vnesie v atmosfére argónu 4-bróm-rezorcinol-bis-(metoxymetyl)éter (2,00 g, 7,2 mmol) a THF (50 ml). Potom sa injekčnou striekačkou pridá v jednej dávke Ν,Ν,Ν',Ν’-tetrametyléndiamin (2,3 ml, 15,2 mmol) a miešaný roztok sa ochladí na -78 °C. Potom sa injekčnou striekačkou pridá po kvapkách butyllítium (9,5 ml, 15,2 mmol) 1,6 mol/1 v hexáne). Získaný žltý roztok sa mieša 1 hodinu pri -78 °C a potom sa pomaly pridá injekčnou striekačkou 1,4-cyklohexandiónmonoetylénketal (1,35 g, 8,7 mmol) vo forme roztoku v

THF (25 ml). Získaný roztok sa mieša 1 hodinu pri -78 °C a potom sa nechá cez noc ohriať na teplotu miestnosti. Pridá sa kyselina chlorovodíková (20 ml, 2 mol/1) a reakčná zmes sa intenzívne mieša 15 minút. Potom sa pridá etyl-acetát (100 ml) a zmes sa vleje do deliaceho lievika. Fáza sa oddelí a vodná fáza sa extrahuje etyl-acetátom (3 x 20 ml). Spojené organické podiely sa premyjú soľným roztokom (20 ml), vysušia sa bezvodovým síranom horečnatým, sfiltrujú sa a zahustením sa získa oranžový olej, ktorý sa prečistí rýchlou chromatografiou na stĺpci (SiO₂, etyl-acetát/petroléter 45 : 55 obj./obj.). Titulný produkt sa získa vo forme bezfarebného oleja (1,42 g, 56 %); m/z (ES⁺) 337 (M-H2O + H)⁺; δΗ (CDC1₃) 1,61-1,64 (2H, m), 2,00-2,18 (6H, m), 3,44 (3H, s), 3,48 (3H, s), 3,90-3,97 (4H, m), 5,11 (2H, s), 5,24 (2H, s), 6,64 (IH, dd), 6,82 (IH, d), 7,20 (IH, d).

Medziprodukt 3

-(2,4-Dihydroxyfenylbis(metoxymetyléter)-cyklohex-1 -en-4-on-etylénketal

-Hydroxy-1 -(2,4-dihydroxyfenylbis(metoxymetyléter))-cyklohexan-4-on-etylénketal (1,40 g, 3,95 mmol) sa vnesie do banky s guľovým dnom objemu 50 ml vybavenej magnetickým miešadlom a destilačnou aparatúrou podľa Dean-Starka. Pridá sa toluén (30 ml) a potom kyselina gáforsulfónová (10 mg). Roztok sa potom za miešania zahrieva pri teplote spätného toku 1 hodinu. Vodná fáza sa potom extrahuje etyl-acetátom (2 x 15 ml) a spojené organické podiely sa premyjú soľným roztokom (15 ml), vysušia sa bezvodovým síranom horečnatým, sfiltrujú sa a zahustením vo vákuu sa získa oranžový olej ktorého prečistením rýchlou chromatografiou na stĺpci (SiO₂, etyl-acetát/petroléter 45 : 55 obj./obj.) sa vo forme bezfarebného oleja získa požadovaný titulný produkt (0,94 g). δ_Η (CDCI₃) 1,84 (2H, t), 2,41-2,43 (2H, m), 2,56-2,62 (2H, m), 3,47 (6H, s), 3,984,02 (4H, m), 5,13 (4H, s), 5,58-5,63 (IH, m), 6,64 (IH, dd), 6,78 (IH, d), 7,08 (IH, d).

Medziprodukt 4 l-(2,4-Dihydroxyfenylbis(metoxymetyléter))-cyklohexan-4-on-etylénketal l-(2,4-Dihydroxyfenylbis(metoxymetyléter))-cyklohex-l-en-4-on-etylénketal (0,950 g, 2,83 mmol) a paládium (200 mg, 10 % na uhlíku) sa zmiešajú v atmosfére vodíka 15 hodín. Potom sa zmes sfiltruje cez vrstvu Celitu s premytím etyl-acetátom. Filtrát sa odparí do sucha a vo forme bezfarebného oleja sa tak získa titulný produkt (0,955 g, 100 %). δ_Η (CDC1₃) 1,67-1,87 (8H, m), 2,90-2,99 (IH, m), 3,46 (3H, s), 3,48 (3H, s), 3,97 (4H, s), 5,12 (2H, s), 5,18 (2H, s), 6,65 (IH, dd), 6,78 (IH, d), 7,12 (IH, d).

Medziprodukt 5 4-(2,4-Dihydroxyfenyl)cyklohexanon

Do banky s guľovým dnom sa vnesie 1 -(2,4-dihydroxyfenyl-bis(metoxymetyléter)cyklohexan-4-on-etylénketal (1,30 g, 3,9 mmol) a metanol (15 ml). K získanému roztoku sa za miešania pridá v jednej dávke vodná HCI (15 ml 1 mol/1) . Po jednohodinovom miešaní pri teplote miestnosti sa reakčná zmes prevedie do deliaceho lievika, fázy sa oddelia a vodná fáza sa extrahuje etyl-acetátom (3 x 20 ml). Spojené organické podiely sa premyjú soľným roztokom a rozpúšťadlo sa odparí. Mierne vlhký surový produkt sa spoji s metanolom (30 ml) a s kyslou iónomeničovou živicou (4 g). Získaná zmes sa zahrieva za miešania 5 hodín pri teplote spätného toku. Potom sa zmes sfiltruje cez vrstvu Celitu, premyje sa etyl-acetátom a odstránením rozpúšťadla vo vákuu sa získa oranžový olej. Prečistením rýchlou chroma tografiou sa stĺpci (SiO₂, etyl-acetát/petroléter 1:1 obj./obj.) vo forme bieleho prášku získa požadovaný titulný produkt (0,54 g, 68 %); m/z (ES’) 411 (2M-1); oh (CD₃OD) 1,94 (2H, ddd) , 2,16-2,23 (2H, m), 2,41 (2H, dt), 2,62 (1H, t), 2,63 (1H, t), 6,24 (1H, dd), 6,31 (1 H, d), 6, 92 (1H, d).

(anti)-4-(2,4-Dihydroxyfenyl)cyklohexanol.

Do banky s guľovým dnom objemu 25 ml vybavenej magnetickým miešadlom sa vnesie 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol (18 mg). Potom sa pridá etanol (5 ml) a potom tetrahydroboritan sodný (3,3 mg) a reakčná zmes sa mieša 16 hodín. Pridá sa vodná HC1 (20 ml, 1 mol/1) a potom etyl-acetát (20 ml), organická fáza sa oddelí a premyje so soľným roztokom (15 ml), vysuš! sa bezvodovým síranom horečnatým, sfiltruje sa a potom sa zahustí vo vákuu. Prečistením zvyšku rýchlou chromatografiou na stĺpci (SiO₂, etyl-acetát/petroléter 60:40 obj./obj.) sa vo forme bieleho prášku získa požadovaný titulný produkt (14 mg, 78 %); m/z (ES') 267 ((M+60)-l); ô_H (CD₃OD) 1,38-1,56 (4H, m), 1,85-1,88 (2H, m), 2,04-2,07 (2H, m), 2,80 (1H, tt), 3,58-3,65 (1H, m), 6,24-6,29 (2H, m), 6,90 (1H, d).

Všetky citované patenty, patentové prihlášky a publikácie sú úplne včlenené do tohto opisu odkazom.

Musíme uviesť, že vynález nie je obmedzený na opísané špecifické uskutočnenia, ktoré sú určené na jednoduché znázornenie jednotlivých aspektov vynálezu, ale že vynález zahŕňa funkčne ekvivalentné spôsoby a zložky. Pracovníkom v odbore budú na základe uvedeného opisu okrem opísaných spôsobov iste zrejmé aj rôzne modifikácie vynálezu. Rozumie sa, že uvedené modifikácie sú zahrnuté v rámci pripojených patentových nárokov.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

I. Topická farmaceutická kompozícia na zosvetlenie kože alebo na zníženie pigmentácie kože človeka, v y značujúca sa tým, že obsahuje 4-(2,4-dihydroxyfenyljcyklohexanol vzorca (I) alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ v množstve účinnom na zosvetlenie kože alebo na zníženie pigmentácie kože a farmaceutický prijateľný nosič.
2. Kompozícia podľa nároku 1, vyznačujúca sa t ý m, že ďalej obsahuje slnečný filter.
3. Kompozícia podľa nároku 1, vyznačujúca sa t ý m, žc ďalej obsahuje rezveratrol alebo inú účinnú zložku, ktorá má antioxidačné účinky.
4. Kompozícia podľa nároku 1, vyznačujúca sa t ý m, že ďalej obsahuje kyselinu retinovú alebo derivát kyseliny retinovej.
5. Kompozícia podľa nároku 1, vyznačujúca sa t ý m, že ďalej obsahuje kyselinu glykolovú, kyselinu trichlóroctovú alebo iný prostriedok na peeling kože.
6. Kompozícia podľa nároku 1, vyznačujúca sa t ý m, žc jc vo forme vodno-alkoholického roztoku, emulzie typu olej vo vode, emulzie typu voda v oleji, emulzného gélu alebo vo forme dvojfázového systému.
7. Kompozícia podľa nároku 1, vyznačujúca sa t ý m, že je vo forme lotionu, krému, mlieka, gélu, želé, pasty, masti, balzamu, masky, mikrosfér, nanosfér alebo vezikulámej disperzie.
8. Použitie 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanolu vzorca (I) opísaného v nároku 1 alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli na výrobu liečiva na zosvctľovanic kože alebo zníženie pigmentácie kože človeka.
9. Použitie podľa nároku 8, kde 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol vzorca (I) alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ sú spracované do formy vodno-alkoholického roztoku, emulzie typu olej vo vode, emulzie typu voda v oleji, emulzného gélu alebo do formy dvojfázového systému.
10. Použitie podľa nároku 8, kde 4-(2,4-dihydroxyfenyljcyklohexanol vzorca (I) alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ sú spracované do formy lotionu, krému, mlieka, gélu, želé, pasty, masti, balzamu, masky, mikrosfér, nanosfér alebo vezikulámej disperzie.
11. Topická farmaceutická kompozícia na inhibíciu tyrosinázy u človeka, vyznačujúca sa tým, že obsahuje 4-(2,4-dihydroxyfenyI)cyklohexanol vzorca (I) opísaného v nároku 1 alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ v množstve účinnom na inhibíciu tyrosinázy a farmaceutický prijateľný nosič.
12. Kompozícia podľa nároku 11,vyznačujúca sa t ý m , že je vo forme vodno-alkoholického roztoku, emulzie typu olej vo vode, emulzie typu voda v oleji, emulzného gélu alebo vo forme dvojfázového systému.
13. Kompozícia podľa nároku 11, vyznačujúca sa t ý m , že je vo forme lotionu, krému, mlieka, gélu, želé, pasty, masti, balzamu, masky, mikrosfér, nanosfér alebo vezikulámej disperzie.
14. Použitie 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohcxanolu vzorca (I) opísaného v nároku 1 alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli na výrobu liečiva na inhibíciu tyrosinázy u človeka.
15. Použitie podľa nároku 14, kde 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol vzorca (I) alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ sú spracované do formy vodno-alkoholického roztoku, emulzie typu olej vo vode, emulzie typu voda v oleji, emulzného gélu alebo do formy dvojfázového systému.
16. Použitie podľa nároku 14, kde 4-(2,4-dihydroxyfenyljcyklohexanol vzorca (I) alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ sú spracované do formy lotionu, krému, mlieka, gélu, želé, pasty, masti, balzamu, masky, mikrosfér, nanosfér alebo vezikulámej disperzie.
17. Topická farmaceutická kompozícia na zosvetlenie kože alebo na zníženie pigmentácie kože človeka, vyznačujúca sa tým, že obsahuje 4-(2,4-dihydroxyfenyljcyklohcxanol vzorca (I) opísaného v nároku 1 alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ v množstve účinnom na inhibíciu tyrosinázy a farmaceutický prijateľný nosič.
18. Topická alebo transdermálna farmaceutická kompozícia na liečenie zápalového ochorenia alebo lupín človeka, vyznačujúca sa tým, že obsahuje 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanol vzorca (I) opísaného v nároku 1 alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ v množ6 štve účinnom na určený účel a farmaceutický prijateľný nosič.
19. Kompozícia podľa nároku 18, vyznačuj ú ca sa tým, že uvedeným zápalovým ochorením je psoriáza, dermatitída alebo akné.
20. Použitie 4-(2,4-dihydroxyfenyl)cyklohexanolu vzorca (I) opísaného v nároku 1 alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli na výrobu liečiva na liečenie zápalového ochorenia alebo lupín človeka.
21. Použitie podľa nároku 20, kde zápalovým ochorením je psoriáza, dermatitída alebo akné.
22. Topická alebo transdermálna farmaceutická kompozícia na liečenie zápalového ochorenia človeka, vyznačujúca sa tým, že obsahuje 4-(2,4-dihydroxyfenyljcyklohexanol vzorca (I) opísaného v nároku 1 alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ v množstve účinnom na inhibíciu tyrosinázy a farmaceutický prijateľný nosič.